Как сдавать анализ на хламидиоз микоплазмоз

• Анализ крови на хламидии
  • Анализы на хламидии: виды
  • Анализ крови на хламидии – расшифровка, норма
  • Как интерпретировать анализы крови на хламидии, если иммуноглобулины положительные, ПЦР отрицательна?
  • Отрицательные анализы крови на хламидии, а ПЦР положительная
  • Когда становятся отрицательными анализы крови на хламидии после лечения?
  • Где сдать анализ крови на хламидии?
• Как берут анализ на хламидии у женщин
  • Виды инфекций хламидиоза
  • Какие анализы позволяют выявить инфекцию
  • Методы исследования ПЦР, РИФ, ИФА
• Анализ крови на хламидии и микоплазму у детей — Про паразитов
  • Пути передачи и диагностика заболевания
  • Лечение микоплазмоза
• Хламидии, уреаплазма и микоплазма — что это за бактерии и чем они опасны?
  • Что такое хламидиоз?
  • Причины, симптомы и опасность хламидиоза
  • Что такое уреаплазма?
  • Признаки и осложнения уреаплазмоза
  • Что такое микоплазма?
  • Все, что нужно знать о микоплазме
  • Лечение патологий
• Как сдавать анализ крови на хламидии, его расшифровка
  • Признаки болезни
  • Лабораторное исследование
  • Правила сдачи анализов
  • Лечебные мероприятия

Анализ крови на хламидии и микоплазму у детей — Про паразитов

Многие годы безуспешно боретесь с ПАРАЗИТАМИ?

Глава Института: «Вы будете поражены, насколько просто можно избавиться от паразитов просто принимая каждый день…

Микоплазма гоминис (m. hominis) — это условно­-патогенный микроорганизм. Отличительной чертой этого рода бактерий, вызывающих заболевание, является отсутствие клеточной стенки.

Микоплазма может быть обнаружена у здоровых людей, заболевание протекает бессимптомно. Носителем микоплазмы хоминис в 50% случаев являются женщины.

Бактерия обнаруживается и у мужчин, но их организм способен к самоизлечению от этого заболевания.

Об особенностях женского и мужского микоплазмоза.

НАШИ ЧИТАТЕЛИ РЕКОМЕНДУЮТ!

Для избавления от паразитов наши читатели успешно используют Intoxic. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.Подробнее здесь…

Пути передачи и диагностика заболевания

Как передаётся микоплазма хоминис?

• Заболевание передаётся при половом контакте;
• возможен вертикальный путь передачи от больной матери ребёнку (трансплацентарно);
• при переливании крови.

Причины возникновения микоплазмоза могут быть связаны со снижением иммунитета, наличия другого заболевания, стресса.

Симптомы микоплазмы хоминис:

• выделения с жёлтым оттенком из половых органов;
• боль, рези, жжение при мочеиспускании;
• боль во время половых актов;
• частое мочеиспускание;
• микоплазма хоминис у мужчин вызывает уретрит воспалительный процесс в мочеиспускательном канале;
• микоплазма хоминис у женщин может вызывать боли внизу живота из-за воспалительного процесса в матке и её придатков.

Заболевание часто характеризуется бессимптомным течением и диагностируется на поздних стадиях. Поэтому оно может перейти в хроническую форму и вызвать хроническое воспаление придатков матки, простатит, цистит. Это затрудняет лечение.

Запущенное заболевание, кроме хронических воспалительных процессов, может вызвать бесплодие.

Микоплазма хоминис у женщин часто сочетается с хламидиозом, уреоплазмозом и гарднереллёзом.

Уреаплазма — это мельчайшие условно-патогенные микроорганизмы. Бывают у здоровых людей, могут встретиться и у ребёнка. Обитают в мочеполовых путях и на слизистых оболочках.

Гарднерелла — это условно­-патогенный обитатель, встречающийся у здоровых мужчин и женщин. Заболевание носит название гарднереллёз или бактериальный вагиноз.

Для установления диагноза микоплазмоз проводят микробиологический посев биоматериала. Далее из него выделяют патогенную микрофлору. Норма титра 10 тыс. ед. на 1 мл. При значениях от 50 тыс. ед. на 1 мл следует обратиться к специалисту. Для подтверждения диагноза проводят иммуноферментный анализ.

Если проводится ПЦР диагностика и обнаружена микоплазма хоминис, то это достоверные данные на 100%, потому что этот метод позволяет обнаружить даже небольшое количество возбудителя.

Подробнее об анализах и диагностике.

Рассмотрим, как лечить микоплазму у взрослых людей правильно, что бы добиться быстрого эффекта. В зависимости от тяжести заболевания длительность лечения занимает от 7 до 20 дней.

В лечении применяют антибиотки тетрациклиновой группы. Перед назначением препарата смотрят на результаты антибиотикограммы. При выборе антибиотика смотрят на его фармакологические показатели и безопасность. Лекарство моногидрат доксициклина отвечает этим требованиям, и в отличие от гидрохлорида доксициклина не создаёт дисбаланса кишечной микрофлоры.

Антибиотики, с помощью которых проводят лечение при наличии противопоказаний к доксициклину:

Дозировку антибиотиков подбирают индивидуально для каждого. При комплексном лечении применяют иммуномодулирующие препараты, витамины и противогрибковые средства. Также назначают физиопроцедуры и мази и свечи для местного лечения.

Если микоплазама hominis обнаружена у ребёнка, то это может привести к развитию сепсиса и менингита и закончиться летальным исходом, если вовремя не начать лечение.

При возникновении первых симптомов заболевания следует обратиться к врачу, но не заниматься самолечением, так как это может только ухудшить ситуацию.

• Микоплазма возбудитель бронхита;
• Описание Mycoplasma genitalium.

Chlamydia Trachomatis — что это?

Хламидия Трахоматис — единственный опасный для человека вид, принадлежащий к обширному классу Хламидий. Все представители этой группы микроорганизмов являются внутриклеточными паразитами, имеющими микроскопические размеры (максимальный диаметр экземпляра Хламидии Трахоматис достигает 350 нанометров). Помимо человеческого организма представители класса Chlamydia успешно размножаются в куриных эмбрионах, разлагаемой (перевариваемой) биокультуре, а также у грызунов, скота и домашних питомцев — кошек, собак.

Для человека представляет опасность только Chlamydia Trachomatis. Этот микроорганизм может вызывать массу патологий у женщин и мужчин. До недавнего времени обнаружить ДНК Хламидии было непросто, однако с открытием новых методов диагностики удалось установить причину множества заболеваний невыясненной этиологии. Оказалось, что причиной длительно протекающих хронических патологий стал хламидиоз трихоматис.

Выглядят хламидии крайне непримечательно, но при этом сочетают в себе признаки бактерий и вирусов. С первыми их роднит строение и способ воспроизводства, со вторыми — способ паразитирования.

Важно знать. Несмотря на то, что в настоящее время ей присвоено «звание» бактерии, ученые на вопрос — «Хламидия Трахоматис — что это такое, бактерия или вирус?» — не могут дать однозначного ответа.

Оболочка Chlamydia Trachomatis бесцветная, а внутри нее находятся типичные для такой формы паразитов признаки:

• ДНК и РНК (типичный признак бактерий, ведь у вирусов есть только ДНК);
• рибосомы и иные внутриклеточные и оболочечные компоненты, идентичные клеточным компонентам грамотрицательных бактерий;
• способ деления клетки на две идентичные, как у бактерий и простейших;
• обитание внутри клеток носителя (характерно для вирусов);
• микроскопические размеры (намного меньше, чем обычные бактерии, но чуть большие, чем вирусы).

Для Хламидии Трахоматис характерно двухступенчатое развитие. На начальном этапе микроорганизмы ведут себя, как типичный вирус, образуя при этом особую форму — элементарные тельца, адсорбирующиеся в цитоплазму клетки-носителя. Далее хламидии постепенно трансформируются в более совершенную, бактериальную внутриклеточную форму. Вместе с тем, происходит активное подавление синтеза свойственных пораженной клетке РНК и ДНК на воне активного поглощения ее энергетических ресурсов, что, опять же, свойственно для вирусных инфекций.

Хламидиоз трахоматис от человека к человеку может передаваться только при непосредственном контакте с носителем или предметами, на которых присутствует микроорганизм. Наиболее часто заражение хламидиями происходит во время полового контакта. При этом не играет роли, каким будет секс — Chlamydia Trachomatis одинаково успешно передается при оральном, генитальном и даже анальном сексе.

Известны также случаи, когда заболевание передавалось без непосредственного сексуального контакта. Особенно часто опасности бытового заражения хламидиями подвергаются женщины. Инфицирование у них может произойти при использовании полотенца больного человека, предметов его личной гигиены (как ни странно, но подцепить хламидию можно даже с кускового мыла), нижнего белья. Очень часто инфекция передается ребенку от матери во время внутриутробного развития или при родах.

Важно знать. Хламидии могут сохранять жизнеспособность в условиях жилого помещения около двух суток. Все это время микроорганизмы остаются опасными для человека.

Чем опасна Хламидия Трахоматис

Заболевания, которые вызывают Хламидии Трахоматис у женщин и мужчин, зачастую касаются только мочеполовой системы. В перечень заболеваний, спровоцированных этим микроорганизмом, входят:

• циститы, уретриты и цистоуретриты;
• парауретриты;
• эпидидимиты, орхиты и орхиэпидидимиты;
• фуникулиты и везикулиты;
• вульвиты и кольпиты;
• куперит и бартолинит;
• эндоцервицит и цервицит;
• эндометрит и сальпингит.

Хламидия Трихоматис у женщин может провоцировать сложнейшие, не поддающиеся лечению спаечные процессы и рецидивирующее возникновение эрозий шейки матки и эндометрия матки. На фоне активности инфекции наблюдается вялотекущий сальпингоофорит и другие воспалительные процессы. Примерно в половине всех случаев хламидийная инфекция у женщин заканчивается бесплодием.

Хламидия Трихоматис у мужчин может быть причиной затяжного рецидивирующего простатита в хронической форме. Вследствие такой патологии у больных нередко развивается эректильная дисфункция, появляются проблемы с детородными функциями.

Хламидийная инфекция у женщин и мужчин может поражать и другие органы и системы. Так, примерно у четверти всех носителей микроорганизма наблюдается хронические воспаления конъюнктивы, артриты, пневмония. Особенно опасно, если инфекция начнет атаковать сердечно-сосудистую систему. В этом случае у больного наблюдаются сбои сердечного ритма, может развиваться воспаление сердечной сумки (перикардит).

Стоит помнить. Примерно 60% больных хлимидиозом мужчин и женщин вовсе не ощущают, что они больны. Однако даже при скрытом течении инфекции происходит постепенное изменение состояния тканей и органов.

Симптоматическая картина при заражении хламидией у мужчин и женщин не отличаются от большинства инфекций, передающихся половым путем. В 90% случаев признаки инфицирования появляются спустя некоторое время после незащищенного полового контакта. Представлены они такими симптомами, как:

• прозрачные выделения, похожие на жидкое стекло, иногда с желтоватым оттенком;
• слабые рези и жжение при мочеиспускании;
• зуд в уретре.

Спустя 1-1,5 недели у больных появляются признаки интоксикации организма в виде общего ухудшения самочувствия и небольшого повышения температуры тела. Далее хламидии умело приспосабливаются к иммунным атакам, в результате чего симптоматика ослабевает. Обострения происходят после простудных заболеваний, переохлаждения, стрессов.Так как хламидия трахоматис умело маскируется под другие инфекционные и не инфекционные заболевания, при подозрении на ее присутствие необходимо проведение комплекса анализов, включая:

• исследование мазка из уретры с окраской по Романовскому-Гимзе;
• иммунофлюоресценция;
• культуральный посев на питательную среду отделяемого из уретры;
• иммуноферментный анализ крови (ИФА);
• ПЦР-анализ;
• молекулярная амплификация отделяемого из цервикального и уретрального каналов.

Наиболее достоверными и высококачественными считаются методы ПЦР и культуральный посев.

Стоит знать. При бессимптомном течении хламидиоза выявить его случайно практически невозможно. Для постановки верного диагноза требуется целенаправленное обследование на предмет именно этой инфекции.

Устранение хламидийной инфекции — дело долгое и непростое. Так как Хламидия Трахоматис скрывается внутри клеток больного человека, для ее уничтожения нужно использовать комплексную антибактериальную терапию. Обязательным условием эффективности препаратов является способность их активных веществ проникать через клеточную мембрану.

Также больным назначается комплекс лекарственных препаратов, действие которых будет способствовать уменьшению негативного воздействия инфекции на внутренние органы и системы:

• иммуномодуляторы;
• пребиотики;
• гепатопротекторы;
• ферментативные средства;
• протеолитики и прочие.

Схемы терапии, перечень лекарств и дозировка определяются индивидуально. Лечение должны пройти все половые партнеры больного человека. Предварительно им назначается комплексная диагностика.

Анализ крови на хламидии у женщин, расшифровка результата. Как и откуда берут такой анализ

Урогенитальный хламидиоз – это, в настоящее время, одно из самых распространенных заболеваний из тех, что передаются при помощи половых контактов. Заболевание инфекционное и весьма дискомфортное для женщины.

В 10-15% процентах случаев есть вероятность существования скрытой инфекции, которая протекает неочевидно и женщина может быть не в курсе своего заражения.

В первую очередь, проверка на зараженность хламидиями может потребоваться в следующих случаях:

• в момент выяснения причин бесплодия;
• при образовании внематочной беременности;
• при частых самопроизвольных абортах.

Обязательные анализы назначает врач, но мы постараемся донести до вас, какие именно анализы, как они сдаются и что обозначают.

Откуда берут анализ на хламидии?

Есть несколько путей проведения анализов:

Чтобы провести анализ крови на наличие хламидиоза, кровь берется из вены, причем, с утра и натощак. Анализ венозной крови дает возможность проведения следующих исследований:

1. Иммуноферментный анализ крови (ИФА), при помощи которого определяется титр антител (IgA, IgM, IgG) к хламидиям. Соответственно количеству (титру) того или иного вида антител определяется и фаза, в которой находится инфекция:

Важно знать, что амбулаторный период длится около недели и антитела уже выявляются по ее истечении, от момента заражения.

2. Реакция имунофлуоресценции (РИФ) – способ, который считается одним из максимально (до 80 %) точных анализов для выявления хламидий. Однако, максимально качественный результат исследования пропорционален профессионализму врача-лаборанта.

3. Полиразмерная цепная реакция (ПЦР) считается наиболее точным способом определения заражения хламидиями и суть ее состоит в том, чтобы обнаружить генный материал хламидий.

Что же до проведения исследований через мазок, то речь идет о мазке из шейки матки. Эта процедура в таких случаях служит, преимущественно, для подтверждения результатов предыдущих анализов. Здесь есть два способа исследования:

• при помощи микроскопа (довольно ненадежный способ изучения, помогающий выявить инфекцию, максимум, в 15 % случаев);
• при помощи полиразмерной реакции, которую, как и в случае с кровью, относят к максимально эффективным способам.

Очень редко в таких случаях назначают проведения анализа мочи, так как он не столь эффективен и суть его заключается в определении участков нуклеиновых кислот хламидий в пробе мочи. При этом, пациентке запрещается мочиться и подмываться около двух часов до начала анализа.

Для того, чтобы список был полным, придется упомянуть и наиболее «доступное» средство для определения заражения инфекцией – аптечные экспресс-тесты. Однако, их информативность столь низка, что не стоит рассчитывать на них. При подозрениях, все же, следует консультироваться с врачом.

Анализ крови на хламидии – расшифровка

Чем более новое и качественное оборудование и чем более опытен профессиональный врач-лаборант, работающий с анализами и реактивами, тем больше шансов на качественные результаты тестов. Пациентка же получает на руки справку с результатом (отрицательным или положительным) и, при возможности, предоставленной информацией о титрах антител при иммуноферментном анализе:

• первыми определяются Ig M, сигнализирующие об острой фазе только начавшейся (5 суток) инфекции;
• появление Ig А говорит о прогрессирующем заболевании;
• выявление антител Ig G возможно на третьей неделе, что говорит о переходе болезни в хроническую фазу.

Очень важно, чтобы сдача и расшифровка анализов проходили только по назначению и под наблюдением врача. Все, что может женщина сделать самостоятельно – это выявить характерные симптомы и обратиться к специалисту.

Более подробно о хламидиях трахоматис (Chlamydia trachomatis) и путях заражения можно узнать в этой статье (перейдите по внутренней ссылке). А здесь мы подробнее остановимся на методах диагностики мочеполового хламидиоза и расшифровке возможных результатов анализов.

Самой первой серологической пробой, внедренной для подтверждения диагноза «урогенитальный хламидиоз», была реакция связывания комплемента (сокращенно РСК). Проба быстро утратила свою актуальность из-за высокой частоты ложноположительных результатов.

На протяжении двух десятков лет одним из самых информативных способов диагностики урогенитального хламидиоза считался метод прямой иммунофлюоресценции с использованием моноклональных антител. На фоне вышеперечисленных методов он отличался несколько более высокими показателями специфичности и чувствительности. Вместе с тем, метод требовал обеспечения лаборатории дорогостоящим оборудованием и реагентами.

Еще один метод, актуальный и по сей день, – выявление хламидий в культуре клеток. Этот метод будет описан ниже.

Так или иначе, сейчас повсеместно распространен другой анализ на хламидии — исследование отделяемого или соскоба из уретры, влагалища или цервикального канала методом ПЦР.

Согласно Федеральным клиническим рекомендациям, для диагностики мочеполового хламидиоза могут использоваться:

1. ПЦР-диагностика. Федеральными и Европейскими клиническими протоколами для диагностики урогенитального хламидиоза рекомендован метод амплификации ДНК. В отношении первичного выявления инфекции его специфичность равна 100%, чувствительность 98-100% (уровень доказательности А, уровень обоснованности I).
2. NASBA (метод амплификации РНК).
3. Выделение хламидий в культуре клеток.
4. Цитологический метод. Этот метод исследования мазка малоинформативен при диагностике мочеполового хламидиоза (специфичность 10-12%): есть небольшая вероятность обнаружения внутриклеточных включений – так называемых телец Гальбершетдера-Провачека. Помимо этого, при микроскопии проводится подсчет числа лейкоцитов (увеличение их количества — доказательство воспалительного процесса), а также исследование флоры и обнаружение дрожжеподобных грибков.
5. Серологические тесты.
6. Последние три метода (3,4,5) могут применяться только в определенных ситуациях, когда недоступны методы амплификации ДНК и РНК (ПЦР и NASBA).

Анализы на хламидии назначаются:

1. Скрининг половых инфекций при беременности и предгравидарная подготовка.
2. Желательно ежегодно сдавать анализы женщинам и мужчинам в возрасте до 25 -30 лет, а также лицам, не имеющим постоянных партнеров на протяжении последнего года или недавно сменившим партнера.
3. Лицам, имеющим симптомы уретрита, вагинита, цервицита.
4. Женщинам с ВЗОМТ (сальпингоофорит, эндометрит и так далее).
5. При обнаружении у пациента любой другой половой инфекции.
6. Мужчинам молодого возраста с воспалением придатков яичка и орхитом.
7. При подготовке к внутриматочному вмешательству.
8. При пневмонии и гнойном конъюнктивите у новорожденного.

ПЦР на Chlamydia trachomatis

Суть метода ПЦР — обнаружение генетического материала (ДНК) в исследуемом образце и его достраивание путем добавления «строительного» материала (дезоксинуклеорибофосфатов). В результате цепь ДНК удлиняется, ее обнаружение становится возможным с помощью электрофореза и/или флюоресценции.

Все манипуляции выполняются в специальном приборе – амплификаторе, который самостоятельно контролирует смену температур и протекающих фаз соответственно числу необходимых циклов амплификации.

ПЦР позволяет обнаружить хламидии уже через 3 дня после заражения, при высоком риске исследование повторяют через 2 недели после предполагаемого инфицирования.

В настоящее время набирает большую популярность ПЦР-диагностика в режиме реального времени (у женщин этот тест называется Фемофлор). С его помощью исследуется и качественная, и количественная характеристика влагалищной микрофлоры.

ПЦР в режиме реального времени характеризуется короткими сроками выполнения, высокой специфичностью и чувствительностью (порядка 88-90%).

Но для подтверждения урогенитального хламидиоза ряд авторов рекомендуют использовать монокомпонентные наборы для ПЦР из-за более высокой их чувствительности (100%) в отношении хламидий трахоматис.

Совет этот актуален в ситуации, когда врач подозревает наличие хламидийной инфекции у пациентки, и исследование проводится для верификации диагноза. При отсутствии специфических симптомов у женщины более целесообразно проведение комплексной ПЦР (уровень обоснованности II).

Амплификация РНК хламидий (NASBA)

Это относительно новый для России, но более информативный молекулярно-биологический метод. Суть его заключается в обнаружении в материале (мазке, соскобе, моче и так далее) цепей РНК, наличие которых сопровождает процесс построения и жизнедеятельности клетки хламидии.

РНК является транспортировщиком генетической информации от ДНК и строителем клеточных структур возбудителя путем синтеза белка.

Именно по наличию РНК в положительных результатах NASBA можно судить об эффективности проводимой антибактериальной терапии: оценивается жизнеспособность хламидий. ПЦР, основанная на обнаружении только ДНК, такой возможности не имеет.

NASBA может применяться для контроля излеченности в более ранние сроки по сравнению с ПЦР. Для контроля эффективности лечения данный метод актуален по прошествии всего 14 дней после последнего приема антибиотиков.

Как правильно сдавать анализ на хламидии женщинам?

Женщины анализ на хламидии методами ПЦР или NASBA могут сдать у врача-гинеколога, дерматовенеролога.

Материалами для исследования у женщин обычно служат:

• Соскоб из уретры, влагалища, цервикального канала вне менструации. Условием является наличие в забранном материале клеток эпителия. При взятии обычного мазка, слизистого отделяемого, гноя и тому подобного, результат может быть не информативным.

Соскоб на анализ у женщин берут из наружного отверстия уретры, цервикального канала и заднего свода влагалища.

1. При использовании универсального зонда: после взятия материала рабочая часть зонда отламывается и погружается в пробирку «Эппендорф» с консервирующим раствором.
2. При использовании ложечки Фолькмана: ее ополаскивают в пробирке с консервирующим раствором. После этого емкость плотно закрывают, а инструмент дезинфицируют и стерилизуют.

• Первая порция свободно выпущенной мочи. Именно в первой порции мочи сосредоточено максимальное количество слущенных эпителиальных клеток урогенитального тракта. У женщин первая порция свободно выпущенной мочи менее информативна (чувствительность 80-90%), поэтому применяется намного реже, чем соскоб. При этом нет доказательств, что утренняя моча более диагностически значима, чем, например, дневная (уровень обоснованности II).

Моча собирается пациенткой самостоятельно в чистый стерильный сухой контейнер. Для исследования достаточно порядка 10 мл мочи. Рекомендуемый период хранения — 24 часа при соблюдении необходимого уровня температур (+2С…+8С).

Особенности забора материала у мужчин

Мужчины сдать анализы на хламидии могут у врача-уролога, врача-дерматовенеролога, врача-репродуктолога, андролога.

Материалами для исследования у мужчин обычно служат:

• Отделяемое из уретры, соскоб из уретры. Подготовка пациента: перед забором материала не мочиться 2-3 часа, при обильных выделениях — 15-30 минут. При наличии обильных патологических выделений (например, гноя) рекомендуется удалить их ватным тампоном.

Процедура взятия соскоба для мужчин достаточно неприятна, порой болезненна. Соскоб забирается универсальным зондом из наружного отверстия уретры. После забора рабочая часть зонда отламывается и погружается в пробирку «Эппендорф» с консервирующей жидкостью.

• Первая порция свободно выпущенной мочи (чувствительность выше, чем у женщин — 85-95%).
• По показаниям для анализа на хламидии у мужчин может забираться секрет предстательной железы (при бесплодии, простатите и др. заболеваниях). Подготовка включает половое воздержание в течение 2 дней. Секрет простаты берет квалифицированный специалист после массажа предстательной железы. Головку полового члена необходимо очистить стерильным ватным тампоном.

После завершения массажа выделившийся сок предстательной железы в количестве 0,5-1 мл собирают в сухую пробирку «Эппендорф» и плотно закрывают. При отсутствии секрета — собирают первую порцию мочи (в ней и будет содержаться весь секрет) по аналогии с обычной вышеописанной техникой.

Максимальный срок хранения всех вышеперечисленных материалов – 24 часа при строгом соблюдении температурного режима в диапазоне +2С…+8С.

Доставляется материал в специальном термоконтейнере с охлаждающими элементами. Для долгосрочного хранения взятый материал необходимо заморозить на срок не более 1 месяца при температуре -20С. Допускается только однократное размораживание материала.

Расшифровка результатов ПЦР и NASBA

1. Как правило, результаты ПЦР и NASBA доступны уже через 24-36 часов, в частных лабораториях сроки готовности результатов удлинены.
2. Результат может быть «положительный» (хламидии обнаружены, то есть у пациента хламидиоз) и «отрицательный» (хламидии не обнаружены, то есть у пациента мочеполового хламидиоза нет или получен ложноотрицательный результат).

При использовании методов амплификации нуклеиновых кислот (МАНК) для грамотной интерпретации результатов необходимо соблюдать некоторые условия:

1. Контрольное исследование для оценки эффективности терапии назначается не ранее, чем через 1-1,5 месяцев после окончания приема препаратов (для ПЦР), и не ранее, чем через 14 дней для NASBA. Метод ПЦР не подразумевает определение жизнеспособности обнаруженных микроорганизмов, поэтому необходимо выждать полный цикл смены эпителия.
2. При сборе первой порции мочи после последнего акта мочеиспускания необходим перерыв не менее 3 часов. При обильных патологических выделениях из уретры мочу собирают через 15-20 минут после последнего акта мочеиспускания.
3. Существует мнение, что изменения гормонального фона приводят к появлению в исследуемом материале ингибиторов амплификации (слизь, кровь, гной и другие компоненты). Данная ситуация наиболее актуальна в период беременности, у женщин.

Предлагалось множество способов устранения данной проблемы, но пока ни один из них не является общепризнанным:

1. Ситуация с ингибиторами амплификации актуальна для небеременных женщин на 3 неделе после менструации.
2. При заборе материала в первые дни после менструации есть вероятность ложноотрицательного результата за счет недостаточного накопления возбудителя в эпителии. Таким образом, оптимальный период для взятия соскоба – 4 неделя после менструации.
3. Нет никакой необходимости в специальной подготовке пациентки (например, введения каких-либо препаратов, соблюдения определенной диеты) перед исследованием. На результат это не повлияет.
4. Существует проблема так называемого конкурентного ингибирования. Подобная ситуация возникает при использовании лабораторией наборов для ПЦР-диагностики нескольких видов микроорганизмов. При значительном преобладании в образце какого-либо одного вида возбудителя последний может «замаскировать» наличие других видов микроорганизмов. Результат будет ложноотрицательный.
5. При подозрении на ложноположительный результат возникает необходимость повторного исследования. Эта ситуация актуальна при бессимптомном течении инфекции с низкой бактериальной нагрузкой. В этом случае возможно исследование того же образца, либо забор нового, а также применение другого теста или даже метода исследования (класс рекомендаций В, уровень обоснованности II). При выявлении большого количества хламидий в исходном материале повторное исследование будет лишним и экономически необоснованным.

Согласно последним Федеральным рекомендациям, иммуноферментный анализ (ИФА) не применяется для диагностики неосложненного урогенитального хламидиоза (цервицитов, уретритов и др.). Такое «недоверие» обусловлено тем, что ИФА больше актуален для тяжелых, глубоких поражений хламидиями C. Trachomatis.

Метод ИФА основан на обнаружении в крови специфических антител, вырабатываемых в ответ на антигены хламидий. По сочетанию трех классов иммуноглобулинов в крови пациента можно судить о тяжести и длительности инфекционного процесса.

Как уже было сказано, данный метод при выявлении урогенитального хламидиоза имеет ряд недостатков:

1. Не информативен в диагностике восходящей инфекции, цервицита и уретрита.
2. Высокая частота перекрестных реакций.
3. Высока частота ложноположительных реакций.
4. Не подходит для контроля излеченности после проведенной антибактериальной терапии, так как неизвестно время существования в крови специфических антител;
5. Позволяет диагностировать преимущественно глубокие поражения, например, врожденный хламидиоз у новорожденных (класс рекомендаций А, уровень обоснованности I).

Для проведения ИФА используется венозная кровь пациента, взятая натощак. В защиту данного метода можно отметить:

1. Его более низкую стоимость, по сравнению с ПЦР.
2. Удовлетворительная специфичность порядка 90%.
3. Быстрота выполнения.
4. Простота забора и хранения материала.

Выявление хламидий в культуре клеток (на среде McCoy)

Этот метод уникален тем, что позволяет оценить не только качество проведенной терапии, но и определить чувствительность хламидий к различным группам антибактериальных препаратов.

Суть метода состоит в заражении обработанной культуры клеток забранным материалом с последующим посевом на питательную среду и инкубированием в течение двух суток. Наличие хламидий в полученных клетках определяется методом ПЦР.

Для определения чувствительности к антибиотикам в обработанную культуру клеток вносят ростовую среду с содержанием определенного антибактериального средства и инкубируют в течение 5 суток.

Эффективность препарата определяют по отсутствию или замедлению роста в определенных группах. Наличие роста свидетельствует о резистентности к добавленному в питательную среду антибиотику.

Недостатки этого метода диагностики — длительность (7 дней) и дороговизна, поэтому в клинической практике он используется в крайне редко. Обычно показанием для его назначения служит длительная неэффективная антибактериальная терапия.

За рубежом в качестве рутинных, недорогих методов выявления хламидийной инфекции используются модифицированные серологические тесты.

Тест-система Chlamidia-antigen ELISA medac

Тест-система работает по принципу твердофазного ИФА-анализа. Готовая тест-система покрыта полученными путем генной инженерии, готовыми специфическими антителами. Данные антитела связаны со специальным ферментным комплексом.

При связывании антигенов с антителами ферменты высвобождаются, появляется желто-зеленое свечение, интенсивность которого и учитывает спектрофотометр.

В отличие от распространенного ИФА, где материалом для исследования служит кровь, при использовании данной тест-системы субстратом служат мазок или соскоб, взятые у женщины, мужчины. Чувствительность этого метода — около 65-70%, а специфичность 90-100%.

В основе реакции иммунофлюоресценции (РИФ) лежит прямое связывание антигенов с мечеными антителами, дающими зеленое свечение. Хламидийные тельца подсвечиваются внутри клетки. Результат оценивается при люминисцентной микроскопии.

Чувствительность данного метода — около 50%, что связано с высокой частотой ложных результатов. Это обусловлено и субъективным восприятием результата (исследование проводит лаборант), и высокой вероятностью перекрестных реакций, и нарушением техники забора биологического материала. С помощью данного метода невозможно оценить эффективность проведенного лечения.

На фоне всех недостатков главными плюсами РИФ остаются низкая стоимость, простота выполнения и короткие сроки получения результата. Именно поэтому РИФ еще используют в некоторых странах в качестве рутинного исследования на мочеполовой хламидиоз.

В чем заключается ПЦР анализ на инфекции?

ПЦР (полимеразная цепная реакция) — это высокоточный метод диагностики различных инфекций.

ПЦР способен идентифицировать возбудителей инфекционных болезней на основе выявления их генетического материала (ДНК или РНК) в пробах, полученных от обследуемого человека.

Принцип работы ПЦР очень прост: в специальный реактор помещается небольшое количество биологического материала, в котором могут быть фрагменты ДНК микроба (например, кровь, слюна, выделения из половых органов и пр.).

Далее к этому материалу добавляют специальные ферменты, которые связываются с ДНК микроба и синтезируют ее копию. Реакция копирования ДНК идет в несколько этапов, по принципу цепной реакции: на первом этапе реакции из 1 молекулы ДНК образуются 2 новые молекулы, на втором этапе из имеющихся 2 молекул – образуются 4 новые и тд. После нескольких циклов вместо 1 копии ДНК появляется несколько сотен или тысяч копий. Такое количество копий микробной ДНК может быть легко проанализировано и сравнено с базой данных, которая содержит информацию о строении ДНК различных микробов.

ПЦР анализ дает возможность не только определить какой тип инфекции есть в организме, но и дает количественную оценку инфекции: то есть как много микробов есть в организме человека.

Количественный анализ ПЦР является очень важным в диагностике и в оценке эффективности лечения многих хронических инфекций (например, вирусного гепатита C).

Какие инфекции могут быть выявлены методом ПЦР?

В настоящее время ПЦР анализ позволяет выявлять самые разнообразные инфекции, в том числе и «скрытые» инфекции половых путей, которые не проявляются никакими симптомами.

Особое внимание стоит уделить ИФА. Хотя это и достаточно эффективный метод, но у него сложная расшифровка. Поэтому для желающих разобраться поясняем самое основное.

Структурная схема Anti-Сhlamydia trachomatis IgM

При подозрении на хламидиоз ИФА чаще используют как уточняющий анализ, а не как самостоятельный. По тому, какие типы антител выявит ИФА, можно судить о давности заражения и стадии хламидиоза:

Anti-Сhlamydia trachomatis IgM — появляются спустя неделю после заражения, и исчезают — спустя 2-3 месяца; положительные IgM — это самый ранний признак заражения хламидиозом;

Anti-Сhlamydia trachomatis IgA — появляются в крови через две недели после заражения и исчезают — спустя два-четыре месяца после успешного лечения. Положительные IgA — это признак активной инфекции (например, острой начальной формы или рецидива хронической болезни);

Anti-Сhlamydia trachomatis IgG — появляются спустя три—четыре недели после заражения и сохраняются положительными в течение нескольких лет. Они могут быть как признаком хронического хламидиоза, так и признаком инфекции, которую уже успешно пролечили.

Расшифровка анализа крови ИФА на хламидии: