Анализы пцр на вич у детей

Диагноз ВИЧ-инфекция исключается или устанавливается у детей с перинатальной трансмиссией с помощью серологических и вирусологических методов. Серологические направлены на обнаружение антител к вирусу в сыворотке крови методом ИФА и иммуноблота. Вирусологические методы (выделение вируса, ПЦР, вирусная нагрузка) позволяют выявить вирус и/или его компоненты — белки и нуклеиновые кислоты, в частности, gp24-aHTHreH, находящийся в составе вирусных частиц в значительном количестве. Быстрая и ранняя серологическая диагностика ВИЧ-инфекции у детей затруднена, так как антитела класса IgG передаются от матери трансплацентарно и присутствуют у детей до 18 месяцев. Различить материнские и собственные антитела к ВИЧ не представляется возможным. У неинфицированных детей материнские антитела обычно исчезают к 9-12 мес., это, при отрицательной ПЦР, позволяет говорить об отсутствии инфицирования ребенка. Результаты серологического обследования новорожденных детей учитываются при окончательной постановке диагноза в любом возрасте. Однако в некоторых случаях антитела могут не определяться и у ВИЧ-позитивных детей. Это связано с врожденной гипогаммаглобулинемией, при которой в период, когда уже исчезают материнские антитела (6-18 мес.), не происходит выработки своих антител к антигенам ВИЧ в титрах, достаточных для выявления в ИФА. Таким образом, отрицательный результат серологического тестирования в раннем возрасте оказывается недостаточным для вывода об отсутствии инфекции.

Для установления или полного отрицания ВИЧ-инфекции у новорожденных и детей первого года жизни рекомендуютсявирусологические тесты.

Максимально достоверными являются методы полимеразной цепной реакции (ПЦР) (ДНК и РНК-тест) и культурально-вирусологический. Их использование позволяет установить диагноз у 30-50% ВИЧ- инфицированных детей сразу после рождения и почти у 100% -в возрасте 3-6 мес.. Метод ПЦР основан на выявлении нуклеиновых кислот вируса — свободной РНК или провирусной ДНК в лимфоцитах крови, наличие которых свидетельствует о размножении ВИЧ в организме ребенка. Для диагностики ВИЧ- инфекции у детей можно применять оба вида тестов: показано, что они не различаются по чувствительности, однако ДНК-тест значительно проще в исполнении и дешевле. Важным условием получения достоверных результатов является использование для анализа только венозной крови ребенка. Метод ПЦР является высокочувствительным: несколько копий ДНК или РНК в образце плазмы может оказаться достаточно, чтобы результат тестирования был положительным. Поэтому пуповинная кровь непригодна для молекулярного тестирования. Это связано с возможностью контаминации крови ребенка материнской кровью во время родов; малейшая примесь вирусных частиц или лимфоцитов ВИЧ- инфицированной матери может привести к получению ложноположительного результата ЛЦР-анализа, что осложнит установление правильного диагноза ребенку.

По мнению экспертов, диагностическое ПЦР-тестирование следует проводить трижды в следующие сроки: — от рождения до 48 ч жизни; в возрасте 1-2 мес; -4-6 мес. Большинство специалистов сходятся во мнении, что при заражении in uteri наблюдается положительный результат вирусологического обследования в первые 48 ч жизни. По мере увеличения возраста ребенка возрастает и выявляемость ДНК ВИЧ при ДНК- тестировании. В случае перинатального заражения в первые 7 дней выявляется лишь 24% инфицированных детей, но уже через неделю их доля составляет 93%. Поэтому большинству инфицированных детей диагноз ВИЧ- инфекции может быть установлен в возрасте 1 мес. при повторном ПЦР- анализе.

Дети, у которых отрицательны результаты вирусологического тестирования при рождении и в возрасте 1 мес., обследуются в возрасте 4-6 месяцев. К возрасту 4-6 мес., практически у всех ВИЧ-инфицированных детей наблюдаются положительные результаты ПЦР-теста.

Другим тестом для оценки вирусологического статуса и мониторинга инфекции является определение вирусной нагрузки — концентрации вируса, выраженной в числе копий РНК ВИЧ (пропорциональном количеству вирусных частиц) на 1 мл плазмы. Для детей характерен высокий уровень вирусной нагрузки, который может сохраняться в организме ребенка в течение длительного времени. Показано, что при внутриутробном заражении в момент рождения концентрация вируса относительно мала (

Таким образом, у детей в возрасте от 6 до 18 мес. лишь сочетание двух методов — серологического и вирусологического — позволяет подтвердить или отвергнуть ВИЧ-инфицирование. Сделать вывод о его отсутствии у детей без клинических признаков ВИЧ- инфекции возможно при двух отрицательных результатах серологического и вирусологического тестов. При сочетании положительных вирусологических и серологических результатов инфицирование подтверждается. После 18 мес. единственным подтверждением ВИЧ-инфекции может быть определение антител к ВИЧ в сыворотке ребенка: после этого срока они могут там обнаруживаться только в том случае, если вырабатываются собственной иммунной системой в ответ на контакт с вирусом.

источник

Жизнь человека при ВИЧ напрямую зависит от того когда было диагностировано заболевание. Чтобы выявить патологию, изначально достаточно сдать простой анализ крови. Если у человека присутствует вирус иммунодефицита, то анализ покажет нарушения в функционировании организма.

Общий анализ крови при ВИЧ относится к начальным методам диагностики иммунодефицита. При исследовании крови на ВИЧ стоит цель изучить состояние иммунитета, который значительно ухудшается при наличии патологии.

Анализ имеет целый ряд достоинств:

• Небольшая стоимость исследования;
• Результаты в течение суток;
• Высокая точность.

Если общий анализ крови показал нарушения, пациента отправляют на дальнейшие исследования. Если все показатели в норме, то в медкарте ставится отметка «Здоров».

Сдача анализа на ВИЧ производится в следующих случаях:

• Госпитализация с последующим хирургическим вмешательством. В этом случае кровь сдается для того, чтобы снизить риск заражения медработников. Оперативное вмешательство у ВИЧ-инфицированных проводится с соблюдением особых защитных мер.
• Во время планирования и непосредственно при беременности. Женщины, вынашивающие ребенка, за весь период беременности обязаны трижды сдавать анализ на ВИЧ. Диагностика выполняется для снижения риска заражения малыша внутри утробы, во время родовой деятельности и при лактации.
• Присутствие инфекционных заболеваний, сопутствующих ВИЧ. В их число входит герпес, туберкулез и пневмоцистное воспаление лёгких.
• При незащищённом половом акте с возможно инфицированным партнером. Проводится для профилактики и ранней диагностики инфицирования.

ВИЧ анализы у ребенка проводятся только при наличии ряда симптомов: резкий сброс веса, апатическое состояние, чувство усталости, чрезмерная потливость в ночное время суток, беспричинное увеличение температуры до показателей в 37,5 градусов, диарея.

Наличие возбудителей вируса нельзя выявить в общем анализе крови, но можно обнаружить факторы, напрямую указывающие на присутствие в организме описываемой патологии.

В норме количество лимфоцитов составляет 1,2–3×109/л. На начальных этапах ВИЧ этот показатель повышается, что напрямую указывает на борьбу организма с возбудителями заболевания.

Когда иммунитет уже ослаблен и не в состоянии противостоять вирусу, происходит снижение количества лимфоцитов до критической отметки.

Во время иммунодефицита наблюдается уменьшение числа Т-лимфоцитов.

Нейтрофилы начинают активное действие непосредственно после проникновения в организм вирусов. Эти элементы способствуют поглощению вирусных клеток.

При ВИЧ наблюдается разрушение и значительное уменьшение общего количества нейтрофилов.

Нормальное количество нейтрофилов в крови составляет 1,8–6,5×109/л. Сниженное число этих элементов характерно не только для ВИЧ, но и для других болезней инфекционно-воспалительного типа.

Мононуклеары являются очередной разновидностью лейкоцитов. Образовываются в крови только после проникновения в организм возбудителей инфекций и вирусов. При нормальном состоянии эти элементы вообще не должны содержаться в крови.

Тромбоциты играют одну из основных ролей во время свёртывания крови.Нормальное количество этих элементов в крови, составляет 150–400×109/л.

В случае развития ВИЧ, количество тромбоцитов снижается.

Клинически это состояние подтверждается наличием целого ряда симптомов:

• Внутренние и наружные кровотечения;
• Формирование мелкоточечной сыпи на кожных покровах;
• Кровоизлияния на слизистых оболочках.

Уровени эритроцитов не считается специфичным для рассматриваемой патологии. При ВИЧ количество этих элементов уменьшается из-за воздействия вируса на костный мозг, где происходит кровообразование. Нормальное количество эритроцитов в крови – 3,7–5,1×1012/л.

Изредка в общем анализе крови можно выявить повышенное содержание этих элементов. Такое наблюдается при легочных болезнях, которые сопутствуют ВИЧ. В число таких патологий входит туберкулез и воспаление легких.

Гемоглобин – белок, содержащий железо, локализуется сверху эритроцитов и принимает непосредственное участие в транспортировке кислорода ко всем клеткам организма. В случае снижения количества гемоглобина клетки начинают страдать дефицитом кислорода.

Признаком ВИЧ считается понижение количества гемоглобина, что признается симптомом железодефицитного малокровия.

Симптомами малокровия признаются следующие:

• Чувство слабости;
• Головокружение;
• Бледность кожных покровов;
• Учащенное биение сердца.

Нормальный уровень гемоглобина – 120–160 г/л.

При диагностике вируса иммунодефицита обнаруживается значительное увеличение скорости оседания эритроцитов. Нормальный показатель составляет от 1 до 15 мм/ч. Ускорение оседания не считается специфическим показателем для ВИЧ. Этот симптом характерен для абсолютно любого инфекционно-воспалительного заболевания.

Скорость оседания эритроцитов может продолжительное время не меняться (до нескольких лет), после чего резко увеличивается.

В результате можно сделать вывод, что ОАК не дает возможности на 100% убедиться в наличии ВИЧ или СПИДа. Однако этот метод исследования очень важен для выявления вируса на начальной стадии.

Если ребенку назначают дополнительно сдать ИФА, то к процедуре нужно подготовиться. Для детей подготовка к анализу заключается в соблюдении диетического рациона накануне. Необходимо исключить из меню блюда соленой, острой и жирной пищи.

Забор крови выполняется в утреннее время на голодный желудок. Биоматериал забирается из вены, в количестве 5 мл.

Если больница платная, получить результаты можно уже на следующий день. В государственных клиниках срок ожидания результатов затягивается на несколько недель. В случае отрицательного результата можно быть уверенным в отсутствии у ребенка вируса иммунодефицита.

Если в ходе исследования в биоматериале обнаружили специфические антитела, то ставиться положительный результат, указывающий на наличие ВИЧ.

Если параллельно сдать анализ методом иммуноблота, можно получить однозначно достоверную информацию. Комбинация результатов ИФА и иммуноблота дает результат с достоверностью в 99,9%. Если результаты не совпадают, то это вызвано недостоверностью анализов и их нужно обязательно пересдать.

источник

Сайт предназначен для медицинских и фармацевтических работников 18+

скажите, пожалуйста. моему ребенку 1 год и 8 месяцев. У нас 2 ПЦР на вич отрицательно; ИФА в 1 год и 1,4 года положительно. В 1 год и 7 месяцев ИФА пришел отрицательный, но для снятия с учета сказали сдать еще раз и выписали большое направление ни как обычно. В котором будет 3 печати: методом ИФА, ИБ и еще какой то. возможно ли, что анализ ИФА будет снова положительный или ИФА отрицательный, а ИБ положительный.

Илья Игоревич, знакомые усыновили ребенка ВИЧ+ ему 7 лет, получает АРВТ. Они сдали два раза в двух разных частных лабах ИФА на ВИЧ. Результат отрицательный. Они ничего не могут понять. Как же так, ведь ребенок стоит на учете в СЦ, рожден от матери ВИЧ+ наркоманки. Диагноз многократно подтверждался. И вот два минуса, в двух разных лабах. Вопрос: может ли АРВТ повлиять на исчезновение антител? Если бы был ПЦР, то вопросов не было бы, из-за АРВТ нагрузка неопределяемая. Но почему ИФА не видит?

Серореверсия возможна, но маловероятна. Зависит от терапии, времени начала терапии, у детей свои особенности могут быть. ПЦР ДНК искать, думаю.

То есть ВИЧ никуда не делся, просто на фоне АРВТ и падения ВН могла возникнуть серореверсия?

Приучите себя рассматривать сценарии. Нет одного ответа обычно.
А) если исходить из того, что ПЦР был, ПЦР был без ошибки, забор крови был произведен без ошибки, а некоторые берут пуповинную кровь, например, в ситуации, когда она уже тоже родилась, отдельно от женщины и не целостная, и какая-то ВН там может детектироваться, и это не будет означать инфицирования автоматом, то высокая вероятность наличия ВИЧ-инфекции. Ключевое слово «высокая вероятность». Т.е. не да или нет.
Б) иначе – низкая вероятность.
В целом сетап говорит о средней вероятности менее 1%.
Итак, гадать не над чем. Если АРВ-препаратов не было более 4 недель – ПЦР РНК даст ответ. Если были, то остается ПЦР ДНК из мононуклеаров.

Добрый вечер. Первый анализ сдали в 1мес, второй в 6мес третий в год все было отриц, сейчас сдали нам год и 6 пришли положительные именно врач сказал единственное сказала что отправили имоноболт.
Смотрите, нам с 6 мес разрешены прививки, грудью мы кормили, рожала сама ВН — неопределяемая, в роды капельница, во время берем. Терапия, я сейчас снова берем, принимаю так же лекарства и ,позвонив сегодня чтоб узнаьб когда я подойти за препаратами, она мне ал в пн, и что результатт нка положительный а ифа или пцр не сказала , отправили на имуноболт я сегодня ревела часа 3, все же было отриц, даже привики уже стоят. Неужели ребенок плюс?? Не укладывается в е.

Сейчас сдавали Ифа и Пцр должны были как последние для снятия.

Данные тестов узнайте. Что и как. ПЦР именно.

Итог: Пцр в 1 мес, в 6 мес, в год, сейчас 1.5 отрицательно. Ифа сейчас положительно отправлен а имуноболт и мне сказала врач имоноболт плюс мол ребенок плюс а выше читаю и пишут что орентироваться на пцр что ифа и до 2 лет может плюс остаться.

Ну, все нормально. ВИЧ у ребенка нет. ИФА будет фонить какое-то время, не помню где, но где-то у нас тут был кейс, где до трех лет почти ловило.
имоноболт плюс мол ребенок плюс Ну, ваш доктор не очень понимает, что такое блот и что в нем ловим. Спросите у него, а где РНК ВИЧ? ОК, может они найдут тогда ДНК в мононуклеарах? Ведь при ВИЧ они будут в 100 из 100.

Добрый день! Пришел результат блот отрицательный, сказали через мес еще раз сдадим чтоб 2 отр результата ИФА было и снимут с учета. Я самая счастливая спасибо за консультации))

Добрый вечер!!
1)Пришел ифа снова плюс а иб сомнит. Простя снова пцр повторить. Снова волнуюсь на счет старшего ребенка, хотя врач сказала все нормально.
2) 10 мая, я преждевременно родила дочь. ВН была неопред, клеток 800. Во время родов врачи ждали схваток. И поставили капельницу лишь когда они начались, а они были стремительны те спустя всего час, родилась дочь, соответственно капельница даже 1 не прокапалась. ((((( взяли в
Роддоме пцр качественный и ифа оба +. Я всё расстроена, но детский врач сказала если возьмут количественный пцр и он будет равн нулю то есть вероятность что ребенок здоров.. Так ли это. Какой у шанс.?(

Сейчас ребенок получает профилактику? Если да, то смысла в ПЦР не очень много, если это не ПЦР ДНК.
Шансы есть.

Да малышка на ретровире в больнице до 20 июня. В пн узнаю точнее о пцр.

См. ниже, там вашу ситуацию еще раз затронули.

Спасибо! Буду ждать результата болта уже спокойнее.

Добрый день! Хотелось бы спросить совета — стоит ли начинать принимать терапию или можно позже начать?? Ребенку 7 лет, вирусная нагрузка 54к, иммуный статус 1757 (февраль), до этого в августе вн 233, им 1565 . Один врач говорит,что случай единичный и можно не начинать пока, другая настаивает на начале терапии. Что посоветуете?

Почитайте обзор по началу терапии, как на этот вопрос смотрят сегодня в мире. Дети должны получать терапию в любом случае сразу. Вообще сразу.

Здравствуйте!Первый анализ на вич у ребенка сдали в 3 мес.отрицательный.Второй сдали недавно в 1 год 8 мес.,сказали непонятный. нужно перездать через 2 мес.Спрашиваю у врача анализ положительный? Она отвечает не могу сказать,что положительный. он непонятный. Как понимать?Внесите ясность,пожалуйста! Я и мой муж ВИЧ+. Всю беременность я принимала терапию,ребенок появился путем кесарево сечения.Каковы шансы,что он здоров?

Рискну предположить, что в 3 месяца отрицательным был ПЦР. Т.е. сам вирус не нашли.

А сейчас для снятия с учета нужны отрицательные ИФА. Этот анализ получился положительный — потому что антитела, которые перешли от Вас ещё есть в крови ребёнка.
Говорят о сомнительном — потому что сделали иммуноблот и там обнаружили только часть антител, потому что все-таки частично они уже растаяли.

Если это так, то ВИЧ-инфекции у ребёнка нет. Тем более Вы получали профилактику. ВН была неопределяемая к родам?

Ваша задача — уточнить — какие именно анализы положительные и отрицательные и сомнительные.

Вирусная нагрузка на протяжении беременности была 50 копий.

Опять же — мне кажется — менее 50 копий/мл. А это — прекрасно. И риски получить ВИЧ у ребёнка — практически ноль.
Итак, Ваша задача — провести полноценную разведку ситуации, ибо за 2 месяца можно и с ума сойти.
При разведке лучше просить копии анализов или фоткать их. Т.е. не на словах.

Спасибо Вам огромное за консультацию!Немного успокоилась,далее последую вашим профессионнальным советам!

Здравствуйте! Ребенку 11 месяцев. В 1 месяц-ПЦР ДНК ВИЧ не обнаружены.
В 6 мес
блот:gp 160,41 сл+,p 160,41,24,17,51,36-не обнаружены.
ПЦР-отрицательная.
В 9 мес.
блот:gp 160,41 следы,
p 160,41,24,17,51,36-не обнаружены.
Подскажите, какова вероятность наличия ВИЧ?

В 1 месяц-ПЦР ДНК ВИЧ не обнаружены
В 6 мес … ПЦР-отрицательная.
= нет ВИЧ. Ноль вероятность. Остальные данные, ИБ, в данном контексте даже и не нужны.

Здравствуйте!
Доче 11 месяцев, 2 пцр отрицательные, я соблюдала все методы предосторожности по рекомендациям врачей. За 11 месяцев ни разу не болели, знаю, что надо было сдавать пцр еще в 6 месяцев и в 9, но наш педиатр в СЦ после второго успокоила и наказала расслабиться. И мы решили поехать сдавать в третий раз в год, живем далеко, у меня еще дочь, ездить проблемно. Доча ни разу не болела ничем за это время, а тут ОРЗ, и местный фельдшер направил нас в местный же стационар сдать анализы. У ребенка насморк и легко сбиваемая температура, на 5й день уже нет, легкие чистые.
Я позвонила нашему врачу в СЦ узнать, должна ли я в нашем стационаре рассказать педиатру о контакте ребенка, карта у меня на руках и показывать нашим медикам ее хотелось бы только в случае необходимости. А наш педиатр в отпуске, ее заменяет другая, которая наговорила мне такого.. что вот пишу сейчас и руки трясутся((((( И что 2 пцр вообще не показатель, и что острая стадия у детей как орз и протекает, и что и в 2 года выявляют.. И что я совсем офигела не возить ребенка по графику на пцр.. Да я понимаю, что пропустили, но я действительно верили нашему педиатру, и учитывая сезон и удаленность, решила поехать в год.
как так то. кому верить. страшно очень(

И что 2 пцр вообще не показатель, и что острая стадия у детей как орз и протекает, и что и в 2 года выявляют.. Не слушайте. Включите голову. Современные ПЦР-системы ловят ВИЧ крайне надежно, ловят с порогом в 20 копий, и даже менее, по факту (параметры вашего теста все же следует уточнять, но если там старенькое с порогом в 200 или 500, то и это ничего не меняет по сути). При ВИЧ в любом возрасте уже через 7-10 дней без терапии такой нагрузки в принципе быть не может никогда, и практически всегда речь будет о тысячах копий, как минимум. ОК, один ПЦР не показатель, мало ли, бывает, метод сложный, есть шанс ошибки (кстати, шанс ложного срабатывания гораздо выше, чем шанс пропустить, но оба эти риска мизерные), но два ПЦР — железно.

Спасибо огромное! Вы уже не первый раз помогаете моей голове «включиться») Бесценно!
Эта моя, как никогда ничем не болеющего человека, привычка всегда слепо во всем доверять врачам сегодня чуть до приступа не довела(((

Врачу нужно распечатать и показать вот такой документ
Там в конце приложение о ПЦР и диагностике ВИЧ.
Я ещё его к первому посту прицепила — можете посмотреть.

Здравствуйте! Помогите разобраться! Во время беременности: терапия с 20 недели, неопред. нагрузка, роды естест. Сироп ретровир 6 недель, отсутствие груд. вскарм. Итак, наши анализы: в 2мес: пцр днк вичl (-) , сд3 68% 3633,сд4 50% 2669,сд8 18% 950; в 4мес: пцр днк вичl (-); в 9 мес: сд3 73% 4383, сд4 55% 3269, сд8 18% 1104, дс-ифа вич аг+ат(задержан); в 1 год: иб(неопределенный) выявл.антитела прописью неразборчиво и цифра 160, снизу на этом же листке- референс-исслед. на вич1 р24-а/г(не обнаружен); в 1год1 мес: вич аг/ат(задержан): 1 год 2 мес: агат-вич-1,2(задержан), иб(+) выявл. ант. к белкам- напечатано тоже неразборчиво env или ehv 100(или 130 или 180, больше похоже на 100) и 41. Все что неразборчиво, постараюсь узнать послезавтра у педиатра в СЦ, но до этого с ума сойду наверно(( Помогите разобраться с анализами пожалуйста! Все врачи твердили что все хорошо, теперь не знаю что и думать! Спасибо большое!

источник

Диагностика ВИЧ-инфекции у детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей, затруднена в связи с тем, что в крови таких детей в течение длительного времени сохраняются материнские АТ к ВИЧ. На сегодняшний день разработаны эффективные методы профилактики вертикальной передачи ВИЧ: антиретровирусная терапия (АРВТ), которая проводится у матери во время беременности и родов и у ребенка в первые недели жизни; акушерские вмешательства, включая плановое кесарево сечение; отказ от грудного вскармливания. Там, где эти методы доступны и применяются, частоту передачи ВИЧ от матери ребенку удается снизить до 1–2%. Поскольку материнские АТ сохраняются в крови новорожденных детей в течение длительного времени, определение АТ позволяет снять диагноз ВИЧ-инфекции детям только в возрасте 15–18 месяцев с последующим подтверждением результата методом ИБ.

Проблема более ранней диагностики ВИЧ-инфекции у новорожденных детей за рубежом была решена несколько лет назад с появлением молекулярно-биологических методов, которые позволяют выявлять фрагменты генома ВИЧ в крови на ранних сроках инфицирования. Было показано, что у большинства инфицированных детей ДНК провируса ВИЧ может быть выявлена к первому месяцу жизни и практически у всех к шестому месяцу.

Показания к применению различных лабораторных исследований и особенности интерпретации результатов. Для ранней диагностики ВИЧ-инфекции у детей, рожденных от ВИЧинфицированных матерей, предпочтительно выявлять ДНК провируса ВИЧ в клетках крови. Не рекомендуется использовать выявление РНК ВИЧ, поскольку профилактическая АРВТ, проводимая во время беременности матери и после рождения ребенку, может существенно снизить репликацию вируса, что приведет к снижению концентрации РНК ВИЧ и повысит вероятность получения ложноотрицательного результата при обследовании ребенка. Для определения ДНК провируса ВИЧ используют методики, основанные на АНК (в подавляющем большинстве случаев – ПЦР).

Обследование ребенка, рожденного от ВИЧ-инфицированной матери, для выявления ДНК провируса ВИЧ желательно проводить в возрасте:

Положительный результат наличия ДНК провируса ВИЧ должен быть подтвержден, для повторного анализа следует использовать дополнительный образец крови, полученный в более поздние сроки по сравнению с предыдущим образцом.

Получение положительных результатов выявления ДНК ВИЧ в двух отдельно взятых образцах крови у ребенка старше одного месяца является лабораторным подтверждением диагноза ВИЧ-инфекции.

Получение двух отрицательных результатов выявления ДНК провируса ВИЧ у ребенка в возрасте старше 4–6 месяцев (при отсутствии грудного вскармливания) свидетельствует против наличия у ребенка ВИЧ-инфекции, однако снятие ребенка с диспансерного учета по поводу интранатального и перинатального контакта по ВИЧ-инфекции может производиться в возрасте старше 1 года при одновременном наличии следующих условий:

• два отрицательных результата исследования обнаружения ДНК провируса ВИЧ методом ПЦР, один из которых выполнен в возрасте 4 месяца или старше;
• два и более отрицательных результата исследования обнаружения антител к ВИЧ методом ИФА, выполненных в возрасте 12 месяцев или старше;
• отсутствие гипогаммаглобулинемии на момент исследования крови на наличие антител к ВИЧ;
• отсутствие клинических проявлений ВИЧ-инфекции.

Показания к обследованию для обнаружения ДНК провируса ВИЧ

• Ранняя лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции у детей, рожденных от ВИЧинфицированных матерей;
• разрешение сомнительных результатов иммунного блота;
• выявление ВИЧ-инфекции у лиц с подозрением на недавнее инфицирование.

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Copyright ФБУН Центральный НИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 1998 — 2019

Центральный офис: 111123, Россия, Москва, ул. Новогиреевская, д.3а, метро «Шоссе Энтузиастов», «Перово»
+7 (495) 788-000-1, info@cmd-online.ru

! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

источник

В настоящее время разработаны клинические и лабораторные тесты для диагностики ВИЧ-инфекции у новорожденных и детей первого года жизни.

Согласно рекомендациям Европейского центра ВОЗ, критериями постановки диагноза ВИЧ-инфекции у рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей являются следующие:

1. Ребенку, у которого в перинатальном периоде был контакт с ВИЧ-инфицированной матерью, диагноз ВИЧ-инфекции может быть поставлен только в том случае, если результаты вирусологических исследований на ВИЧ положительны дважды. При этом результаты исследования пуповинной крови не учиты ваются, так как возможна контаминация исследуемой пробы материнской кровью. Достоверными считаются положительные результаты двукратного выделения штамма ВИЧ при вирусологическом исследовании моноцитов периферической крови или положительные результаты ПЦР на ДНК или РНК в сочетании с однократным выделением штамма ВИЧ из моноцитов. Эти два исследования выполняют с определенным интервалом времени, причем ребенокне должен получать грудное молоко ВИЧ-инфицированной матери.

1. Ребенка, рожденного ВИЧ-инфицированной матерью, считают не инфицированным ВИЧ, если перечисленные выше исследования стабильно дают отрицательные результаты, причем ребенку должно быть уже не менее 4 мес, и он не должен получать грудное молоко ВИЧ-инфицированной матери.

1. У ребенка, рожденного ВИЧ-инфицированной матерью, серологические реакции на ВИЧ могут оставаться положительными в течение 18 мес из-за сохраняющихся материнских антител, передача которых произошла трансплацентарно. После достижения возраста 18 мес серопозитивность сохраняется только у ВИЧ — инфицированных детей; при этом антитела к ВИЧ-1 могут быть обнаружены с помощью иммуноферментного анализа (ИФА), реакции иммунофлюоресценции (РИФ), иммунного блоттинга (ИВ).
2. Если у ребенка при отсутствии агаммаглобулинемии по достижении 12-месячного возраста произошла негативация серологических реакций, такого ребенка считают не инфицированным ВИЧ.

Таким образом, ребенок до 18 мес. считается инфицированным, если у него в двух или нескольких тестах получена культура ВИЧ, положительная ПЦР или выявлен антиген ВИЧ. Ребенок, рожденный от ВИЧ-инфицированной матери, считается неинфицированным, если получены два и больше негативных анализа на ВИЧ-антитела в ИФА в возрасте от 6 до 18 мес. Или один негативный результат старше 18 мес. и нет других позитивных на ВИЧ лабораторных тестов, и нет СПИД-индикаторных болезней [Sei S. et al, 1995, 2000; Dickover R. et al, 1997; Kuhn I. et al, 1997; Bartlett J., 1998].

Лабораторные тесты и их интерпретация, по данным разных авторов, приведены ниже в таблице.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) позволяет выявить геномные (провирусные) ДНК-последовательности в полиакриламидном геле с помощью радиоактивно меченных ферментных зондов. ПЦР высоко чувствительна, она позволяет выявить ВИЧ-ДНК за 6 мес. до появления антител. Однако из-за ложноположительных результатов требуется стандартизация ПЦР и введение полностью автоматизированной постановки реакции [Рахманова А. Г., 1996].

У новорожденных для разграничения материнских антител от обусловленных инфицированием ВИЧ проводят определение в сыворотке крови ВИЧ-специфических IgA и IgM, которые не проходят через плаценту.

Анти-ВИЧ-антитела класса IgM могут появиться в крови инфицированного ребенка на 2 -3 -м месяце жизни, однако их выработка при незрелой иммунной системе не является закономерной. В связи с этим отсутствие антител класса IgM еще не позволяет сделать заключение о ВИЧ-инфицированности ребенка. Напротив, выявление антител класса IgA — высокочувствительный и специфический метод диагностики перинатальной ВИЧ-инфекции у детей старше трех и особенно шести месяцев жизни.

В первые месяцы жизни у детей выявляется недостаточность В-клеточного иммунитета, которая проявляется нарушением продукции антител к бактериям и снижением резистентности к бактериальным инфекциям на фоне выраженной гипергаммаглобулинемии.

При раннем трансплацентарном инфицировании вирус не распознается незрелой иммунной системой и антитела к ВИЧ у детей не продуцируются.

Тем не менее, в любом случае окончательный диагноз ВИЧ-инфекции у ребенка, который родился от ВИЧ-позитивной матери, в большинстве случаев (из-за отсутствия во многих стационарах современной лабораторной диагностики) устанавливается лишь тогда, когда выявление анти-ВИЧ-антител продолжается более 18 мес после рождения. В связи с возможной задержкой появления у некоторых таких детей собственных анти-ВИЧ-антител стандартные серологические реакции повторяют каждые 3 -6 мес до достижения возрас­та трех лет (по возможности, с использованием результатов выделения культуры ВИЧ).

Анализируя различные диагностические критерии диагноза ВИЧ-инфекции, P. Palumbo и В. Sandra (1998) отмечают, что для ВИЧ-инфекции у новорожденных и детей вирусологические исследования имеют большую ценность, чем серологические. Результаты ПЦР или выявление культуры вируса в периферической крови являются наиболее аргументированными для диагноза ВИЧ-инфекции.

Можно определять антиген р24, однако это менее специфично. Тем не менее, каждый позитивный диагностический тест требует повторного определения, так как возможны ложноположительные результаты [Pachl С. et al, 1994].

Например, на трансплацентарное инфицирование у новорожденных могут указывать снижение массы тела, преждевременные роды, микроцефалия, дискрания.

Выделяют также другие признаки врожденной ВИЧ-инфекции — черепно-лицевой дисморфизм (гипертейлоризм, ш ирокий выступающ ий лоб, западающая спинка носа, выпирающий желобок верхней губы), отставание в психомоторном развитии, рецидивирующая диарея, наличие голубых склер, прогредиентные неврологические симптомы (утрата интеллекта, моторные нарушения, патологические рефлексы, парезы). Последнее наблюдается у 10-30% ВИЧ-инфицированных детей, и обычно выявляется в возрасте 6 мес.

Вместе с тем, клинические критерии не всегда приемлемы для детей первых месяцев жизни. Большое значение имеют различные факторы риска рождения, например, наркомания у родителей, их бисексуальность, гемофилия их половых партнеров [Рахманова А. Г., 1996].

К тому же, у таких детей при наличии неврологической симптоматики необходимо исключить токсоплазмоз, цитомегаловирусную и герпетическую инфекции, лимфому мозга, коревой и другие вирусные энцефалиты, последствия родовой травмы, и лишь потом связывать патологию ЦНС с ВИЧ-инфекцией.

Поделиться «Диагностика ВИЧ-инфекции у детей раннего возраста»

источник

Для большинства женщин и мужчин это венерическое заболевание вызывает наибольшее опасение. По этой причине после случайной интимной связи без барьерной контрацепции, а также при частой смене половых партнеров и после хирургических операций, разумный человек испытывает определенную настороженность. Самый надежный способ внести ясность — это обратиться в клинику и сдать ПЦР анализ на ВИЧ.

Тест по крови можно использовать для определения следующих показателей:

• Опровержение/подтверждение наличия ВИЧ в латентный период (в первые недели после заражения антитела в анализах ИФА не выявляются по причине их отсутствия или слишком низкой концентрации).
• Определение генотипа ВИЧ-1, ВИЧ-2.
• Выявление статуса у детей, которые родились от матерей-носителей (антитела к ВИЧ длительное время выявляются у всех детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных женщин. Определение ДНК вируса у детей желательно проводить в возрасте до 48 часов жизни, 1-2 месяца, 3-6 месяцев).
• Ложноотрицательные, ложноположительные и сомнительные результаты ИФА тестов.
• Диагностика количества ВИЧ и контроль за изменением вирусной нагрузки в динамике (в случае уже установленного диагноза СПИД анализ методом ПЦР используется для прогноза, динамического наблюдения и мониторинга проводимой терапии).

АНАЛИЗ ПЦР НА ВИЧ — КОГДА СДАЮТ, ЗАЧЕМ И В КАКИЕ СРОКИ

1. ДНК ВИЧ. Диагностика ДНК вируса иммунодефицита человека возможно использовать для раннего определения возможного инфицирования после случая повышенного риска (анализы крови сдаются в сроки, начиная через 10-й день после потенциального инфицирования). Однако для полного исключения инфекции, необходимо в последующем проведение повторного исследования и ИФА диагностики в сроки 4 и 12 недель.
   Результаты анализа: ДНК ВИЧ (качественный анализ) — «не обнаружено» или «обнаружено». В последнем случае требуются повторные дополнительные исследования для подтверждения ВИЧ-инфекции. При отрицательном результате, но высоком риске инфицирования, требуется повторное обследование — пересдача крови методом ПЦР или ИФА спустя некоторое время.
2. РНК ВИЧ. Определение РНК ВИЧ методом ПЦР количественный (так называемая «вирусная нагрузка») — один из показателей для оценки прогноза течения ВИЧ-инфекции и самый ранний показатель эффективности противовирусной терапии. Тест показан для мониторинга течения болезни, решения вопроса о начале терапии, оценки её эффективности.
   Исследование РНК ВИЧ методом ПЦР возможно использовать у взрослых при ранней достоверной диагностики возможного инфицирования после эпизода высокого риска (примерно через 7-10 дней после вероятного инфицирования). Присутствие высокого титра РНК ВИЧ в отсутствие антител позволяет диагностировать острую ВИЧ-инфекцию. Однако для уточнения диагноза необходимо проведение повторного исследования и ИФА диагностики в сроки через 1 и 3 месяца.
   Сдача ПЦР РНК ВИЧ у беременных с этой инфекцией за 3-4 недели до предполагаемого срока родов показана для решения вопроса о методе родоразрешения (через естественные родовые пути или путём кесарева сечения).
   Результаты анализа: РНК ВИЧ HIV 1 типа (количественный анализ) — «не обнаружено» (это в норме).
3. Резистентность ВИЧ. Анализ на определение резистентности ВИЧ к ингибиторам протеазы и обратной транскриптазы показан ВИЧ-инфицированным при неэффективности проводимой терапии, а также в период острой инфекции перед началом противовирусного лечения. Исследование позволяет определить резистентность ВИЧ к лекартсвенным препаратам. По результатам проведенного анализа инфекционист узнаёт о наличии мутаций устойчивости к ингибиторам протеазы, нуклеозидным и ненуклеозидным ингибиторам обратной транскриптазы, а также информацию по каждой аминокислотной позиции, ассоциированной с мутацией лекарственной устойчивости.
4. Мультипрайм комплексная диагностика: качественное определение РНК вируса гепатита С / ДНК вируса гепатита В / РНК вируса иммунодефицита человека (ВИЧ) 1 и 2 типа (ультрачувствительный метод). Анализ позволяет проводить диагностику ВИЧ-инфекции, вирусных гепатитов С и В на ранних сроках. Исследование показано для раннего выявления вирусных гепатитов В и С, ВИЧ 1/2 типа у лиц из группы риска. Выявление ДНК или РНК вирусов свидетельствует об инфицировании.

Сроки готовности данных анализов крови — от 3 до 7 календарных дней. Сдать качественный и количественный анализ ПЦР для диагностики ВИЧ инфекции в Москве можно в нашем медицинском центре. Взятие крови ежедневно, с 10-00, в том числе на анонимные анализы на СПИД.

• ЧТО БЕСПОКОИТ
  • Идут выделения
  • Зуд и жжение
  • Боли внизу живота
  • Интимные боли
  • Задержка месячных
  • Боль при мочеиспускании
  • Запах из влагалища
  • Боли при месячных
  • Как не забеременеть
• ПОСЕТИТЬ ВРАЧА
  • Пройти гинеколога
  • Проверить инфекции
  • Профосмотр гинеколога
  • Получить справку
  • Выбрать контрацепцию
  • Гинеколог в праздники
• ОБСЛЕДОВАНИЕ
  • ОБСЛЕДОВАНИЕ У ГИНЕКОЛОГА:
    • Осмотр
    • Кольпоскопия
    • Анализы
    • Биопсия шейки матки
    • Пайпель эндометрия
    • УЗИ малого таза
    • УЗИ проходимости труб
    • Определение беременности
• СДАЧА АНАЛИЗОВ
  • СДАТЬ АНАЛИЗЫ:
    • Мазок на флору
    • ПЦР мазок
    • Бакпосев
    • Флороценоз
    • Онкоцитология
    • Анализ на ВПЧ
    • Гарднерелла
    • Общий и клинический
    • Биохимия крови
    • Анализы на витамины
    • Кровь на ПЦР
    • Кровь на ХГЧ
    • Анализы на ВИЧ
    • Кровь на гепатит
    • Витамин Д
    • Анализы на гормоны
    • Генетический анализ
    • Онкомаркеры
    • Кишечные инфекции
    • Квантифероновый тест
    • Гемостаз
    • Иммунный статус
    • Интерфероновый статус
    • Аллергия
    • Анонимные анализы ✔
    • Экспресс анализы (быстрые тесты) ✔
    • Анализы на ИППП ✔
• ЛЕЧЕНИЕ
  • ЛЕЧЕНИЕ У ГИНЕКОЛОГА:
    • Воспаление придатков
    • Женское бесплодие
    • Выделения из влагалища
    • Кольпит и вагинит
    • Лечение цистита
    • Эрозия шейки матки
    • Удаление кист на шейке
    • Прижигание кондилом
    • Лечение спаек
    • Загиб матки
    • Застой крови в тазу
    • Лечение после аборта, операций по гинекологии
  • Медикаментозный аборт
• ЛЕЧЕБНЫЕ ПРОЦЕДУРЫ
  • МЕТОДЫ ЛЕЧЕНИЯ В НАШЕЙ ГИНЕКОЛОГИИ:
    • Физиотерапия
    • Гинекологический массаж
    • Массаж при цистите
    • Грязелечение
    • Лечение пиявками
    • Плацентарная терапия
    • Аутоплазменная терапия
    • Санация влагалища
• ВАКЦИНАЦИЯ
  • Гардасил
  • Гиперроу СД
  • Камроу
  • Иммуноро Кедрион
  • Солкотриховак
  • Гинатрен
• ЭСТЕТИЧЕСКАЯ ГИНЕКОЛОГИЯ
  • ИНТИМНАЯ ЭСТЕТИКА:
    • Интимная пластика
    • Уколы в интимную зону
    • Эпиляция бикини
  • Пластика половых губ
  • Гименопластика
  • Операции на клиторе
  • Хирургическая дефлорация
  • Сужение влагалища
  • Увеличение точки G
  • Гель в половые губы
• ЗАПИСЬ НА ПРИЕМ
  • Запись к гинекологу
• ПУБЛИКАЦИИ
  • ВПЧ у женщин
  • Мазок у девственниц
  • Фото УЗИ молочных желез
  • Народное лечение придатков
  • Как лечить цистит народными средствами
  • Хронический аднексит
  • Народная медицина при бесплодии
  • Что полезно яичникам
  • Здоровая матка

источник

Способ лечения болезни, вызванной вирусом иммунодефицита человека, не найден до сих пор. Зато диагностика достигла серьезных успехов. Анализ на ВИЧ, выполненный методом ПЦР, – один из вариантов выявления вируса в организме.

Полимеразная цепная реакция, или ПЦР, – один из современных методов диагностики ВИЧ. В его основе лежит способность нуклеиновых кислот к саморепродукции. Клетка любого живого организма включает белок и нуклеиновые кислоты:

• РНК- рибонуклеиновую,
• ДНК- дезоксирибонуклеиновую.

Эти макромолекулы хранят генетический код. Если концентрация вирусных клеток в крови низкая, в пробе содержатся не целые цепочки ДНК, а их отдельные «кирпичики» – нуклеотиды. Полимеразная цепная реакция выявляет даже такие «обломки» вирусных клеток. Этот анализ крови на ВИЧ позволяет получить результат на ранних сроках после возможного заражения, когда клинические первые симптомы еще не появились.

Наиболее точный результат можно получить, используя для анализа венозную кровь. Перед тем как пройти обследование, за пару дней следует отказаться от жирной пищи и алкоголя. За 2 недели прекратить прием иммуностимулирующих препаратов.

Пробу биоматериала расщепляют в медицинском лабораторном реакторе. Затем фракции обрабатывают ферментами. Реактивы объединяются с ДНК вирусной молекулы и дублируют ее. Из одной клетки получается 2, из 2-х – 4, далее 8. Число растет в геометрической прогрессии. Цепная реакция позволяет в короткий срок увеличить количество вирусного компонента и сделать его заметным для лаборантов.

Нормой является отрицательный результат анализа, который выглядит так: «ДНК вируса не обнаружено». Это и есть референсное (среднестатистическое) значение.

Диагностика ВИЧ с помощью ПЦР имеет неоспоримые преимущества, но есть и существенные недостатки. К первым относятся:

• Высокая точность. Крайне мала вероятность получить ложноотрицательные результаты.
• Универсальность. Для исследования подходит не только кровь, но и другие биологические жидкости (влагалищные выделения, сперма). Слюна, моча также используются, но точность результата будет ниже. В этих средах концентрация вирусных клеток незначительна.
• Широкий спектр анализа. Один образец биоматериала можно исследовать на несколько заболеваний.
• Скорость выполнения. Полимеразная цепная реакция относится к срочным методам диагностики. Ответ можно узнать уже на следующий день.
• Достоверность составляет 80 %. С помощью метода ПЦР можно обнаружить вирусные частицы, даже если их концентрация невелика. Это позволяет диагностировать заболевание на ранних стадиях и своевременно начинать терапию.
• Ранняя диагностика ВИЧ-инфекции. Время, когда ВИЧ обнаруживают в крови при помощи ПЦР, – 10-14 дней после предполагаемого заражения. Это стандартный отрезок для диагностики вируса иммунодефицита. Антитела на этом этапе еще не обнаруживаются; метод ИФА не работает.
• Нет возрастных ограничений. Можно проводить это тестирование ребенку с момента рождения.

Недостатки метода ПЦР при диагностике ВИЧ:

• Более высокая стоимость в сравнении с иммуноферментным анализом 3 поколения.
• Требуется сложное медицинское оборудование.
• Погрешность 20% в связи с высокой чувствительностью реакции. При аутоиммунных заболеваниях, злокачественных опухолях, хронических инфекциях ПЦР может дать ложноположительный результат.

Проведение этого анализа на ВИЧ рекомендовано в следующих случаях:

• Нужен ранний ответ для предварительного диагностирования. ПЦР помогает подтвердить или опровергнуть результаты ИФА.
• Иммуноблоттинг дал положительный результат. Если первым проводится ПЦР анализ, то обязательно подтверждение результата методом иммунного блоттинга. Исследования дополняют друг друга. Используя сразу 2 метода, медики исключают возможность ошибок.
• Когда позитивный ВИЧ-статус подтвержден, ПЦР помогает отследить эффективность проводимой терапии.
• Используется для исследования донорской крови на наличие антител к ВИЧ.
• Проводить ПЦР можно даже детям до года. Этот метод применяется, чтобы выяснить ВИЧ-статус новорожденных, мамы которых являются носительницами вируса. Тест, проведенный в первые дни жизни, покажет, произошло ли внутриутробное инфицирование. Заражение могло случиться, когда ребенок проходил по родовым путям. Положительный ВИЧ-статус, приобретенный младенцем в процессе родов, удастся выявить через 2 – 3 недели.

Проведение анализа ПЦР на ВИЧ и расшифровка результатов не требуют много времени. Забор крови занимает 5-7 минут. В стандартном случае лаборанту достаточно 24 часов, чтобы подготовить справку. Диагностирование занимает не более 8 часов, остальное время требуется на оформление. Пациент получает отчет на следующий рабочий день. Экспресс-тестирование выполняют в течение 2 часов.

Исследования на ВИЧ указанным способом не проводят по полису ОМС. Получить эту услугу бесплатно в государственной поликлинике нельзя. Зато практически все коммерческие лаборатории обычно имеют необходимое оборудование и реагенты. Проведение анализа ПЦР часто входит в общий скрининг на ВИЧ. Цена комплексной диагностики составляет от 600 до 1000 руб.

Пройти процедуру можно анонимно. В регистратуре пациенту дают индивидуальный номер, по которому он узнает результат. Современные медицинские центры отображают все данные на своем сайте в личном кабинете клиента.

источник

Согласно статистике ВОЗ, за 40 последних лет 25 млн человек умерли от СПИДа. Урон от этой инфекции колоссален. Больше всего зараженных оказалось в странах Африки, откуда и пошла эта инфекция. При ВИЧ становится особо актуальной диагностика заболевания. Правда, средств для лечения ВИЧ еще не создано, но рано начатая терапия может удлинить срок жизни пациента и улучшить ее качество.

ВИЧ-инфекция определяется на разных этапах следующими методами:

• ИФА — иммуноферментный анализ.
• Вестерн-блот.
• ПЦР — полимеразная цепная реакция.
• Экспресс-тесты.

Метод ПЦР был разработан американским биохимиком Кэри Муллисом, который получил за это в 1983 году Нобелевскую премию. Сегодня этот метод в медицине при диагностике всех инфекций считается ведущим в силу своей точности и информативности. ВИЧ в этом плане не исключение.

Любая живая клетка содержит РНК и ДНК. Эти нуклеиновые кислоты способны к самокопированию и самовоспроизведению. Для каждой инфекции фрагменты ДНК уникальны. В биологических жидкостях эти обломки нуклеиновых кислот циркулируют. Они улавливаются и распознаются специальной аппаратурой — реактором. Это и есть основа метода. Лаборант ведет подсчет этих фрагментов. У ретровируса ВИЧ отслеживают РНК. Даже при единичных копиях вирусных частиц ПЦР может их обнаружить и посчитать.

В качестве исследуемой жидкости чаще всего используется венозная кровь. Специальные компоненты метода вступают в связь с частицами вируса и делают их определяемыми, потому что происходит многократное увеличение найденных фрагментов.

В случае с ВИЧ результат наличия вируса можно получить задолго до того, как появится клиника. Поэтому в силу своей высокой чувствительности ПЦР имеет такое высокое диагностическое значение. Огромный плюс ПЦР заключается в универсальности метода. Инкубационный период инфекции для ПЦР не преграда.

Метод ПЦР – достаточно дорогой. В этом заключается один из его больших минусов. Для его проведения нужна новейшая аппаратура и высокая квалификация врача-лаборанта. В силу сказанного ПЦР-диагностика не выполняется в небольших населенных пунктах. Сдать анализ можно только в специализированных крупных клиниках.

Стоимость определения ДНК ВИЧ в клиниках Москвы от 2 800 рублей, выяснение с помощью ПЦР вирусной нагрузки (РНК вируса в плазме) – от 8 800 рублей, а резистентности ВИЧ к ингибиторам протеазы – от 16 500 рублей. Как видим, цены достаточно высокие. ПЦР можно провести бесплатно в государственных поликлиниках по полису ОМС. Важно, что процедуру можно сделать анонимно. В регистратуре пациент получает номер, по которому он сможет узнать результат. В современных медцентрах имеются личные кабинеты клиентов, куда эти данные будут внесены.

ПЦР-диагностику на ВИЧ назначают в таких случаях:

• Выявление инфекции у ребенка, рожденного от больной матери или носительницы, чтобы определить внутриутробное инфицирование.
• Если ИФА дал сомнительные результаты (ПЦР на ВИЧ помогает в этом случае поставить окончательный диагноз).
• Для выявления количественного содержания вируса в организме.
• При положительном иммуноблотинге – они с ПЦР дополняют друг друга.
• Тестирование доноров.
• Для ранней диагностики ВИЧ.
• Для определения эффективности и резистентности к АРВТ.

Преимущество указанного анализа и в том, что ПЦР на ВИЧ можно проводить даже детям до года.

Исследование чаще выполняют не для первичной диагностики, а уже в процессе лечения. Первичная диагностика – это серологические исследования (при них определяют уровень антител к ВИЧ). При ложноположительном результате его повторяют – это может быть при низкой вирусной нагрузке.

ПЦР диагностирует ВИЧ, когда еще нет к нему антител. Метод ИФА в этом случае не даст ответа.

А ПЦР на ВИЧ будет уже положительным. Но симптомы данного периода ВИЧ неспецифичны. Пациент сначала долго и безуспешно лечится по поводу ОРВИ у терапевта. Следует иметь в виду, что диагноз ВИЧ только на основании ПЦР не ставится, необходимо прохождение и других комплексных тестов. Метод ПЦР служит чаще вспомогательным для сложных случаев.

Перед тем как сдать ПЦР на ВИЧ, за 2 дня до анализа нужно не употреблять жирную пищу, алкоголь. Также лучше психически и физически не напрягаться. Если пациенту назначен курс иммуностимуляции, его прекращают за 2 недели до анализа.

Кровь лучше сдавать в утренние часы. Исследовать можно и другие биологические жидкости организма (сперму, секрет вагины), но лучшим материалом является кровь. Слюну, пот, мочу и слезы не используют, так как содержание вируса в них минимально.

Достоинствами метода являются крайне малая вероятность ложноположительного результата, универсальность реакции для любых биологических жидкостей организма. Анализ имеет широкий спектр:

• Один забор крови можно использовать для выявления разных инфекций.
• Методика относится к срочным, результат бывает готов уже на следующий день.
• Достоверность составляет от 85 до 98%.
• Наличие ВИЧ можно определить через 10-14 дней после заражения (антител при этом сроке еще нет).
• Нет возрастных ограничений, проводить можно сразу с момента рождения.

Недостатки ПЦР заключаются в следующем:

• Дороговизна анализа.
• Необходимо сложное медицинское оборудование.
• Требуется высокая квалификация лаборанта и врача, берущего анализ.
• Реакция высокочувствительна, поэтому погрешность может составить 20%.
• Может получиться ложноположительный результат, если у пациента есть аутоиммунные процессы, онкология, хронические инфекции.
• Необходима особая чистота помещения лаборатории, потому что вирус может попасть в анализ из воздуха. Тогда результат будет неправильным.

Для лабораторий, в которых проводится ПЦР, для улучшения качества диагностики разработаны специальные жесткие меры по системе СанПиНа на внутренний контроль. Кроме того, должны быть соблюдены все правила работы при такой методике:

• Требуется строго следить на информацией на пробирках.
• Перед забором крови вновь посмотреть и удостовериться в назначении анализа.
• Медсестра должна сделать правильную маркировку пробирок.
• Врач-лаборант должен правильно провести все манипуляции с биоматериалом, чтобы не допустить перекрестное загрязнение.
• Тест-система должна быть отличного качества.

Только при соблюдении всех этих условий погрешность в ответе может составить всего около 2% эпизодов.

Многие интересуются, через сколько ПЦР на ВИЧ будет готов. Диагностирование длится не больше 8 часов. Ответ пациент может получить уже на следующий день. Экспресс-тестирование выполняют в течение 2 часов.

Несмотря на массу преимуществ, ПЦР не считается идеальным методом диагностирования. К нему обращаются в случае необходимости получения скрининговых тестов на наличие ВИЧ в организме.

Через сколько сдавать ПЦР на ВИЧ? Достоверный результат можно получить уже при взятии крови через 4-4 дней после предполагаемого инфицирования. Через 2 недели достоверность на ВИЧ составит 98%, а при сроке 5 дней – 80%. Наличие при ПЦР на ВИЧ отрицательного результата будет достоверным, но для абсолютно точного результата проводят и ИФА.

Анализ ИФА будет результативным только при наличии антител к вирусу, это время может занимать от 1-3 месяцев до полугода. Так как ИФА дает вероятность выше (98%-99,9%), ПЦР нельзя назвать 100% подтверждающим анализом на наличие ВИЧ-инфекции. Но зато это единственная методика, при которой не нужно ждать появления антител.

При ВИЧ методом ПЦР можно получить сведения об эффективности АРВТ, о стадии заболевания ВИЧ и количестве ВН (количественная оценка нахождения ВИЧ в организме). Это будет говорить о тяжести и степени изменений.

Сдать анализы на ПЦР при ВИЧ нужно и в том случае, если антитела в крови есть, но их наличие не указывает на достоверность ВИЧ-инфицирования клинически.

Сдают анализ не только при заражении и случайной половой связи. Другие поводы:

• Планирование беременности.
• Предстоящая операция.
• Случайная половая связь.
• Некоторые профессии требуют сдачи этого анализа для допуска на работу (педагоги, врачи и другой медицинский персонал).
• Заключенные.
• Больные ТБ.
• Работники МЧС и полиции.
• Вернувшиеся после отпуска из экзотических стран (при желании удостовериться, что нет инфицирования).
• Проститутки.
• Иностранные студенты.
• Наркоманы.

Также к сдаче анализа на ВИЧ может вынудить определенная симптоматика у пациента:

• Резкая потеря веса.
• Диарея, длящаяся больше 3 недель.
• Беспричинное повышение температуры в течение длительного времени.
• Увеличение лимфоузлов.
• Невыясненная причина пневмонии, кандидоза и пр.

Расшифровка анализа – прерогатива лечащего врача, а не лаборанта.

При ПЦР-диагностике ВИЧ РНК вируса выявляется и качественно, и количественно. Этот анализ четко идентифицирует конкретный патоген даже при условии наличия нескольких перекрестно реагируемых. Биологический материал можно использовать даже в засохшем виде. Минус же в высокой чувствительности ПЦР, когда ложноположительный результат может дать и присутствие на инструментах или пробирке даже мизерного количества постороннего ДНК.

Задача и возможность ИФА – определение наличия антител к ретровирусу. Хотя его точность 99%, на ранних стадиях он неприменим.

Проведение качественного ПЦР на ВИЧ определяет присутствие вируса в организме. Результаты в этом случае будут выглядеть следующим образом: положительный, ложноположительный, отрицательный. Но данное исследование не даст сведений о количестве ретровируса. Такой качественный анализ нецелесообразен тогда, когда уже выявлена ВИЧ-инфекция в организме другими способами.

Контролировать результативность лечения качественным ПЦР невозможно.

Проводится уже только ВИЧ-инфицированным с целью подсчета количества копий РНК вируса в биопрепарате.

Цель такого исследования — мониторинг проводимого лечения и выявление резистентности вируса к нему. Противовирусная терапия в таких вычислениях не назначается врачом вслепую, поэтому будет являться более эффективной. Количественный ПЦР на ВИЧ-инфекцию делают гораздо чаще. Отображается этот анализ копией/мл крови.

Какие результаты могут быть выданы:

• РНК вируса отсутствует или его очень мало (около 20 копий/мл). Нет достоверности диагноза.
• От 20 – до 10 в 6 степени копий/мл – диагноз достоверный.
• Более чем 10 в 6 степени копий/мл — большая ВН.

Лаборатории могут выполнять анализ ПЦР на ВИЧ в режиме Real-time. Это подразумевает наблюдение и численную оценку накапливания продуктов ПЦР при автоматической фиксации результатов.

источник

Диагностика ВИЧ-инфекции у детей затруднена из-за присутст­вия пассивно приобретенных антител матери, которые могут пер-систировать до 18 месяцев жизни. Ранняя диагностика возможна при помощи культуры вируса, полимеразной цепной реакции (ПЦР), определения антигена р24. Культура ВИЧ является точ­ным методом диагностики, который занимает много времени, является дорогим и требует наличия специализированных лабора­торий. Использование ELISA с целью определения антигена р24 является наиболее распространенным антигенным тестом. Поли-меразная цепная реакция (ПЦР) является методом амплификации последовательности ДНК к неклеточной системе. Техника чувстви­тельна и играет особое значение при исследовании детей, рожден­ных от ВИЧ-сероположительных матерей, при неинформативности серологической диагностики в определении статуса инфекции. Чувствительность ПЦР в первые дни жизни составляет около 40% с дальнейшим быстрым возрастанием до 100% к первому месяцу жизни.

Сразу после рождения ребенка набирается пуповинная кровь для выявления антител к ВИЧ.

Антитела к ВИЧ определяются как у больных, так и у здоровых детей, рожденных ВИЧ-инфицированными матерями, поскольку материнские антитела циркулируют в организме ребенка до 18 ме­сяцев, в редких случаях — до 3-х лет.

Положительные серологические тесты у ребенка до 18 месяцев не подтверждают наличие у него ВИЧ-инфекции.

Два изолированных отрицательных серологических анализа в возрасте 6-18 месяцев или один отрицательный в возрасте старше 18 месяцев позволяют считать ребенка неинфицированным.

Согласно Закону Украины о СПИДе, все дети, имеющие антите­ла к ВИЧ, выявленные методом ИФА через 18 месяцев после рож­дения, считаются ВИЧ-инфицированными.

Обнаружение антигена р24 обозначает присутствие ВИЧ в кро­ви. Если у ребенка при рождении выявляется антиген р24, то раз­витие раннего СПИДа в четыре раза более вероятно.

У детей первых недель жизни при исследовании ДНК ВИЧ ме­тодом ПЦРнаблюдается большое число ложноположительных ре-

зультатов в связи с контаминацией материнской кровью, поэтому исследовать пуповинную кровь нецелесообразно.

Исследование в возрасте 48 часов позволяет выявить около 40% инфицированных младенцев. Если ребенок был инфицирован внут­риутробно, то уже через 48 часов после рождения определяются по­ложительные результаты. Если ребенок был инфицирован в родах, то в возрасте 48 часов результаты будут отрицательными, но станут положительными через одну неделю.

Наиболее оптимально первый раз определять наличие ДНК ВИЧ методом ПЦР у новорожденных детей на 14-й день жизни (чувствительность — 93%).

В возрасте 1-2 месяца детям от ВИЧ-инфицированных матерей, у которых первый анализ был отрицательным, следует повторить определение ВИЧ методом ПЦР (чувствительность — 96%).

Повторное тестирование в возрасте 3-6 месяцев (чувствитель­ность — 100%) для детей, у которых получены отрицательные ре­зультаты теста при рождении и в 1-2месяца.

Дети от ВИЧ-инфицированных матерей находятся на диспан­серном учете в СПИД-центре, где проводятся динамическое обсле­дование с целью уточнения инфекционного статуса, наблюдение, направленное на максимально раннее выявление признаков ВИЧ-инфекции.

Профилактика вертикальной трансмиссии ВИЧ-инфекции

У ВИЧ-инфицированной женщины планировать беременность, вынашивать и рожать ребенка целесообразно, если уровень CD4+ лимфоцитов не менее 600 в 1 мкл крови.

Чем ниже уровень CD4+ лимфоцитов к началу беременности, тем хуже прогноз как для вертикальной трансмиссии ВИЧ, так и для прогрессирования ВИЧ-болезни. Если уровень CD4+ лимфоци­тов ниже 200 в 1 мкл, т. е. болезнь перешла в стадию СПИДа, такую беременность целесообразно прервать, потому что ее вынашивание и последующие роды могут привести к смертельному исходу.

Для планирования беременности, ее вынашивания и рождения ребенка наиболее благоприятным является уровень «вирусной на­грузки» менее 10 000 копий при условии проведения антиретрови-русной терапии.

Антивирусное лечение снижает материнскую вирусную на­грузку и/или подавляет вирусную репликацию, что приводит к

снижению риска трансмиссии. Существует несколько схем анти-ретровирусной терапии (APT) с применением одного, двух, трех и более антиретровирусных препаратов. С целью профилактики вертикальной трансмиссии ВИЧ в нашей стране используется ко­роткий курс APT.

Зидовудин (ретровир, азидотимедин) назначается перорально, начиная с 28 недель беременности, по 300 мг 2 раза в день; во вре­мя родов — по 300 мг каждые 3 часа до окончания родов.

Для профилактики перинатальной трансмиссии ВИЧ в родах используется также невирапин (вирамун) — с началом родовой деятельности 200 мг однократно или за 4-6 часов до предполагае­мой операции кесарева сечения. Если у женщины в течение одного часа после приема невирапина возникла рвота, то препарат дают повторно.

Новорожденные получают зидовудин (ретровир) внутрь в виде сиропа — 4 мг/кг веса каждые 12 часов на протяжении 7 суток и однократно одну дозу вирамуна на 2 мг/кг массы тела между 48 и 72 часами жизни. Если мать получила препарат менее чем за один час до рождения ребенка, новорожденному необходимо назначить вирамун дважды в дозе 2 мг/кг как можно раньше после рождения и в сроки между 48 и 72 часами, а также сироп ретровира в дозе 4 мг/кг веса каждые 12 часов на протяжении 4-х недель.

Наряду с применением антиретровирусной терапии необходимо соблюдать следующие принципы рационального ведения родов у ВИЧ-инфицированных женщин:

— не проводить амниотомии, если роды протекают без осложне­ний;

— избегать длительного безводного периода (более 4-х часов);

— избегать любой процедуры, повышающей возможность кон­такта плода с кровью матери (инвазивный мониторинг, эпизиото-мия, наложение акушерских щипцов);

— нежелательно проводить родовозбуждение и родостимуля-
цию;

— проводить санацию родовых путей (2% -ный раствор хлоргек-сидина каждые два часа);

— тщательно аспирировать содержимое полости рта, носа, же­лудка новорожденного, чтобы снизить риск заглатывания и всасы­вания ВИЧ-инфицированных материнских жидкостей;

— новорожденного желательно вымыть в дезинфицирующем
или мыльном растворе, избегать повреждения кожи и слизистых;

— ребенка не выкладывают на грудь матери и не кормят мате­ринским молоком. Необходимо объяснить матери о риске зараже­ния ребенка ВИЧ при грудном вскармливании.

Рекомендуется проводить кесарево сечение у ВИЧ-инфициро­ванных при наличии акушерских показаний, а не с целью сниже­ния риска интранатальной трансмиссии, учитывая наличие иммунодефицита, высокого риска послеродовых гнойно-септичес­ких заболеваний.

Согласно данным некоторых авторов, плановое кесарево сечение снижает риск трансмиссии от матери к ребенку (вследствие умень­шения взаимодействия с зараженной кровью или выделениями шейки матки) более чем на 50% после введения антиретровирус-ной терапии, учета ожидаемого веса ребенка и статуса материн­ской инфекции. Как следует из данных рандомизированного исследования и метанализа, не существует достаточных подтверж­дений для рекомендации планового кесарева сечения для ВИЧ-инфицированных женщин в случаях, когда это является небезо­пасным.

Совместное пребывание матери и новорожденного после родов не противопоказано, мать может и должна ухаживать за своим ре­бенком, однако грудное вскармливание категорически противопо­казано!

1.Современную ситуацию с ВИЧ-инфекцией в мире можно оха­рактеризовать как пандемическую и поставить в один ряд с двумя мировыми войнами как по числу унесенных жизней, так и по тому ущербу, который эта инфекция наносит обществу.

2. В последние годы изменился механизм передачи ВИЧ-ин­фекции. Если в начале эпидемии преобладал парентеральный (в 1987 году — 85,0%), то в 2004 году на первое место вышел половой (53,0%).

3. Наблюдается увеличение темпов роста распространения ВИЧ-инфекции среди беременных женщин и детей раннего возраста, что вызывает особую тревогу у врачей акушеров-гинекологов и педиат­ров и требует принятия неотложных мер для профилактики верти­кальной трансмиссии ВИЧ-инфекции.

4. У ВИЧ-инфицированной женщины планировать беремен­
ность, вынашивать и рожать ребенка целесообразно, если уровень
CD4+ лимфоцитов не менее 600 в 1 мкл крови.

5. Если уровень CD4+ лимфоцитов ниже 200 в 1 мкл (т. е. бо­лезнь перешла в стадию СПИДа) такую беременность целесообраз­но прервать, поскольку ее вынашивание и последующие роды могут привести к смертельному исходу.

6. Установлено, что внутриутробное инфицирование ВИЧ мо­жет произойти в любом триместре беременности, в родах и в после­родовом периоде.

7. Применение антиретровирусной терапии значительно снижа­ет риск инфицирования детей ВИЧ. Так, по данным Донецкого об­ластного центра по профилактике и борьбе со СПИДом, в Донецкой области на фоне проведения антиретровирусной терапии верти­кальная транссмиссия ВИЧ снизилась с 25,6% в 2000 году до 8,4% в 2004 году.

8. Так как роды рассматриваются как период высокого риска вертикальной трансмиссии ВИЧ от матери ребенку, большое вни­мание уделяется акушерской тактике.

9. Частота передачи ребенку вируса при грудном вскармлива­нии составляет 12-20%, поэтому грудное вскармливание катего­рически противопоказано!

Энтеровирусы широко распространены и обычно вызывают бес­симптомные инфекции. Различают около 70 различных сероваров энтеровирусов. Многие из них вызывают всевозможные заболева­ния у людей: от тяжелых и длительных параличей до неспецифи­ческих незначительных лихорадок. Но общим проявлением для всех серотипов является субклиническая инфекция. Энтеровирусы могут поражать разные органы-мишени, а симптомы и признаки инфекции варьируют в зависимости от того, какой именно орган поражен. Так, полиовирусы поражают клетки головного мозга, многие другие энтеровирусы — мозговые оболочки, а вирусы Кок-саки группы В воздействуют на сердечную мышцу.

В странах с умеренным климатом энтеровирусные инфекции чаще являются причиной заболеваний летом и осенью; в тропичес­ких и субтропических районах они распространены в течение всего года.

Вспышки, вызываемые вирусами определенного типа, имеют циклический характер распространения. У одних — цикл длится 3-4 года, у других — 8 лет и более, причем ежегодно преобладают три или четыре типа энтеровирусов. Частота вторичных инфекций

для лиц, проживающих в одном доме, может составлять 40-70%. В 2/3 случаев вирус выделяется в культуре у детей моложе 9 лет.

Риск заражения беременной зависит от предшествующего со­стояния иммунитета, времени года и массивности контакта с детьми младшего возраста. При беременности возможно транспла­центарное инфицирование плода, но значительно чаще инфициро­вание происходит при рождении или вскоре после него. Следует отметить, что источником заражения для новорожденного может быть не только мать, но и другие инфицированные младенцы. Пе­редача энтеровирусных инфекций может осуществляться через ру­ки сестринского или другого персонала, ухаживающего за детьми.

Частота развития энтеровирусной инфекции у новорожденных варьирует в зависимости от популяции, времени года и риска воз­действия инфекции у матери и лиц, ухаживающих за ребенком. Результат зависит от вирулентности конкретного циркулирующе­го серотипа, способа передачи инфекции и наличия или отсутствия пассивно передаваемых материнских антител.

Энтеровирусы — это небольшие двадцатигранные однонитчатые РНК-вирусы без оболочки, которые относятся к группе Picorno-viruses. В настоящее время энтеровирусы разделены на 4 класса:

4 — энтеровирусы типов 68-71.

Энтеровирусы погибают при высушивании и при нагревании до 50 °С или выше, при воздействии химических соединений, таких как формальдегид и гипохлорид и при ультрафиолетовом облуче­нии. При комнатной температуре эти микроорганизмы выживают в течение нескольких дней, при охлаждении — на протяжении нескольких недель, а при температуре 70 °С — в течение несколь­ких лет.

Вирус распространяется фекально-оральным и капельным пу­тем при кашле и чиханье. Инкубационный период обычно состав­ляет от 2 до 10 дней.

Вирус реплицируется в лимфоидной ткани верхних дыхатель­ных путей и ЖКТ с последующей «малой виремией». Большинство случаев заканчивается субклинической инфекцией и прекращени­ем репликации вируса. Однако у меньшинства инфицированных людей продолжается дальнейшая репликация вируса и развивает-

ся «большая виремия». Затем инфицируются органы-мишени (го­ловной и спинной мозг, мозговые оболочки, сердце, эндотелий сосудов, печень, поджелудочная железа, половые железы, легкие, кожа).

У пациента может развиться неспецифическая лихорадка или один из клинических синдромов, связанных с энтеровирусным по­ражением. Симптоматика зависит от прямого литического дейст­вия вируса, вторичные последствия инфекции иммунологически обусловлены.

Клинические проявления

Энтеровирусные инфекции в 50-80% случаев протекают бес­симптомно, в остальных случаях — в виде слабовыраженного ли­хорадочного состояния в сочетании с сыпью или респираторными симптомами. У некоторых пациентов наблюдаются кратковремен­ные жалобы на лихорадку и абдоминальные боли, которые локали­зуются в околопупковой зоне и носят схваткообразный характер. В небольшом проценте случаев развиваются более тяжелые заболева­ния, такие как асептический менингит, миокардит, перикардит или боли в межреберных мышцах.

Для большинства энтеровирусных инфекций у беременных женщин клиническая картина сходна с таковой, наблюдаемой у других категорий взрослых, с возможным развитием менингоэнце-фалита, миокардита или полиомиелита.

Врожденная инфекция

Внастоящее время нет точных данных о формировании врож­денных пороков развития плода в результате материнской энтеро-вирусной инфекции, но этот вопрос все еще вызывает споры. Трансплацентарная передача вируса плоду наблюдается редко и возможна только при наличии у беременной женщины стадии «большой виремии».

Внутриутробное инфицирование вирусами Коксаки А и В может быть причиной аборта, рождения маловесных детей и мерт-ворождения. Инфицирование ЕСНО-вирусом во время беременнос­ти не связано с самопроизвольными абортами, врожденными пороками или преждевременными родами, тем не менее они могут быть причиной антенатальной гибели плода в поздние сроки бере­менности.

Последнее изменение этой страницы: 2016-04-26; Нарушение авторского права страницы

источник