Анализы на гормоны методом ифа

Иммуноферментный анализ (ИФА) — это лабораторное исследование, основанное на реакции «антиген-антитело». Суть этого лабораторного метода — выявление специфических антител с помощью специальных биохимических реакций, которые помогают определить присутствие или отсутствие антител и их количество.

Методом ИФА можно определить уровень гормонов, иммуноглобулинов, иммунологических комплексов и других биологически активных веществ. Материалом для исследования может служить кровь (ИФА крови), спинномозговая жидкость, содержимое стекловидного тела, околоплодные воды и т.д.

• высокая чувствительность, которая, составляющая 90%;
• стабильность при хранении всех ингредиентов, необходимых для проведения ИФА (год и более);
• быстрота и удобство проведения диагностической реакции;
• возможность использовать минимальные объемы исследуемого материала;
• возможность автоматизации всех этапов проведения реакции;
• небольшая стоимость диагностических наборов;
• возможность ранней диагностики инфекции;
• унифицированность и пригодность для массовых обследований;
• легкость в отслеживании динамики развития процесса инфекционного заболевания.

Недостаток — относясь к непрямым методам диагностики, он позволяет определить иммунный ответ организма на возбудителя, а не самого возбудителя.

Метод иммуноферментного анализа используется для определения наличия антигенов возбудителей различных инфекций и для определения наличия антител классов (IgA, IgM, IgG) к антигенам различных возбудителей (вирусные гепатиты, ВИЧ, сифилис, TORCH, хламидиозы, паразитозы). С помощью ИФА можно определить антитела к любой инфекции, при условии, конечно, что организм их выработал. Этот метод позволяет различать острые и хронические формы заболеваний, выделять стадию заболеваний и выявлять практически здоровых носителей и контролировать вакцинацию. Необходимо заметить, что наличие антител в сыворотке крови или в патологическом материале может свидетельствовать лишь о контакте организма с возбудителем в настоящее время или в прошлом.

Для постановки диагноза, ИФА диагностики, используют лабораторные тесты для идентификации возбудителя, инструментальные методы обследования и клиническую диагностику (клинический опыт врача). Естественно, что только по наличию тех или иных антител не может быть поставлен достоверный диагноз заболевания. Необходимо одновременно выявлять антитела к возбудителю методом ИФА и выявлять возбудителя методом ПЦР (полимеразная цепная реакция) или другими методами.

р.д. — рабочий день, кол. — количественный, кач. — качественный, п.кол — полуколичественный

* Исследование в режиме CITO:

— поступление биологического материала до 14.00 — выдача результатов исследований после 19.00 в тот же день по факсу или электронной почте;

— поступление биологического материала после 14.00 — выдача результатов исследований до 13.00 следующего дня по факсу или электронной почте.

источник

Для проведения комплексной оценки состояния организма применяется ИФА-метод проведения диагностики. Иммуноферментный анализ крови предназначен для диагностирования инфекционных, гематологических, первичных и вторичных иммунодефицитов.

Многие пациенты интересуются методом ИФА: что это, для чего проводится исследование. Иммуноферментный анализ начал использоваться сравнительно недавно. Изначально с его помощью изучались антигенные структуры, и он проводился только в научных целях. Затем ученые пришли к выводу, что при помощи ферментов можно выявить специфические антитела, возникающие в ответ на протекающее заболевание.

На сегодняшний день этот метод имеет широкую сферу применения. Современные лаборатории используют его для диагностирования:

• опухолей;
• гормональных нарушений;
• инфекций;
• хронических или перенесенных ранее инфекционных процессов;
• гельминтов.

Если в организме протекает инфекционный процесс, то этот вид диагностики считается наиболее оптимальным для определения типа заболевания.

Метод ИФА — что это, какова суть этого вида исследования? Этот и многие другие вопросы интересуют пациентов. Основой этого способа диагностики считается связывание иммунных клеток организма с антигенами возбудителей инфекции. Получившийся комплекс определяют при помощи специального фермента.

Реакцию на наличие таких иммунных комплексов проводят в лабораторных условиях, применяя уже готовые соединения, чтобы определить, есть ли в крови подобные им.

Суть метода ИФА достаточно простая, однако из-за того, что анализ крови проводится для выявления многих инфекций и болезней, существует несколько его разновидностей. Каждый отличается схемой проведения и областью применения. Может быть прямой или непрямой ИФА. Прямой метод подразумевает под собой то, что применяются обездвиженные антитела, реагирующие с антигенами. Основным плюсом такого метода является то, что все процессы можно автоматизировать, а значит, диагностика занимает немного времени.

Непрямой метод подразумевает, что применяются антитела вторичного характера. А на твердой фазе обездвиживается антиген. Анализ позволяет определить антитела к различным антигенам. Это помогает достигнуть более точного результата, однако метод отличается сложностью.

Лабораторные исследования методом ИФА имеют множество преимуществ в сравнении с другими способами диагностики. К основным можно отнести такие:

• высокая чувствительность;
• стабильность при хранении ингредиентов;
• скорость проведения диагностики;
• можно применять небольшое количество исследуемого материала;
• есть возможность автоматизации всех процессов;
• можно выявить инфекцию на самых ранних стадиях.

Проведение исследования при помощи метода ИФА могут назначить при подозрении на множество болезней:

• острые и хронические инфекции, венерические болезни;
• наличие паразитов;
• аутоиммунные патологии;
• онкологические заболевания;
• для определения уровня гормонов.

На наличие антител исследуется венозная кровь. Перед проведением анализа из нее выделяют элементы, которые могут осложнять исследование. Может проводиться забор и других биологических жидкостей.

Использование метода ИФА помогает определить наличие многих инфекций в организме, в частности и сифилиса. Для проведения исследования берется кровь из вены натощак. Затем осуществляется исследование, помогающее определить не только наличие болезни в организме, но и точные сроки ее начала, так как в течение болезни одни антитела заменяются другими в строго определенном порядке.

При острой фазе, свидетельствующей о продолжительном течении болезни, или при обострении хронической инфекции в крови будут обнаружены иммуноглобулины типа M. Наличие иммуноглобулинов типа A свидетельствует о том, что инфекция обитает в организме более 4 недель. Иммуноглобулины группы G говорят о разгаре болезни или о ранее проведенной терапии.

ИФА-метод применяется и для проведения анализа на ВИЧ-инфекции. Диагностика в таком случае имеет определенные особенности, которые связаны с протеканием и прогрессированием болезни. Этот метод исследования считается наиболее приемлемым для определения, однако проводить его нужно не ранее чем через месяц после воздействия факторов риска. Это связано с наличием инкубационного периода, протекающего от 45 дней и до 6 месяцев. Именно поэтому анализ нужно повторить через полгода.

Положительным результат считается, если при первичном исследовании были обнаружены антитела. В таком случае анализ повторяется через полгода, если снова результат положительный, то исследование проводится с применением высокоспецифичных тестовых систем.

Достаточно часто доктора назначают проведение иммуноферментного анализа для определения наличия паразитов в организме. При помощи такого метода исследования можно определить:

Несмотря на все преимущества, существуют также недостатки метода ИФА. Основным недостатком считается то, что при проведении исследования доктор должен заранее иметь предположение о заболевании.

При диагностике инфекционных болезней нет возможности случайно найти возбудителя и определить его иммуноферментные свойства. Тест только указывает на наличие антител в крови больного. Кроме того, это достаточно дорогостоящий анализ.

Результатом качественного ИФА будет либо наличие антител, либо их отсутствие в крови. Если проводится количественный анализ, то концентрация антител может выражаться или в цифровом значении, или в определенным количеством знаков +.

Кроме того, анализируются такие показатели, как:

Показатель IgM указывает на протекание острого инфекционного процесса в организме. Полное его отсутствие может говорить об отсутствии возбудителя болезни или переходе ее в хроническую стадию.

Сейчас существуют специальные тесты ИФА, которые можно провести самостоятельно.

источник

Высокоточные методы анализа — неотъемлемая часть современной медицины и, в частности, диагностики. Доступные в наше время методы диагностики дают возможность своевременно выявить не только сам факт наличия, но и количество паразитов в организме пациента.

Сейчас, как правило, пациентам предлагается пройти всего один тест — иммуноферментный анализ.

Иммуноферментный анализ — узкоспециализированный вид анализа, который проводится в условиях лаборатории. Анализ основан на реакции организма, обычно называемой «антиген-антитело».

Метод анализа, основанный на данном показателе, даёт точность в 99%. Это самый точный из известных сейчас методов. В практике почти не было случаев, когда такой анализ выдавал ложные результаты.

Этот метод позволяет выявить:

• значительное количество инфекционных болезней, вызываемых паразитами;
• наличие разных видов онкомаркеров;
• в репродуктивной медицине — наличие белков, гормонов и пептидов, необходимых для оценки фертильности пациента;

Достоверность результатов теста зависит от нескольких факторов:

• конкретная разновидность паразита;
• количество паразитов в организме;
• скорость их размножения.

Иммуноферментный анализ широко используется в диагностике самых разных заболеваний. Главная его ценность в том, что он позволяет с высокой точностью выявлять болезни, протекающие бессимптомно.

Как известно, такие болезни нередко бывает проблематично обнаружить на ранней стадии и, соответственно, вовремя начать лечить.

Какие заболевания диагностируют при помощи иммуноферментного анализа:

• онкологические заболевания;
• инфекции, передающиеся половым путём (ВИЧ, хламидиоз, сифилис, уреаплазмоз, герпес и другие заболевания);
• туберкулёз, корь, токсоплазмоз, гепатиты и так далее;
• гормоны щитовидной железы;
• половые гормоны;
• различные аутоиммунные расстройства;
• аллергические реакции и непереносимость отдельных продуктов питания.

Данная процедура помогает выявить:

• заражение организма бактериями и вирусами;
• белковую основу;
• глистные инвазии;
• инородные тела.

Собственно, процедура ИФА складывается из двух частей:

1. иммунный ответ;
2. ферментативная реакция.

Суть принципа «антиген-антитело» заключается в том, что возбудитель заболевания или инородное тело, то есть антиген, поступает в организм постепенно вместе с источником заражения. Этот процесс вызывает так называемый иммунный ответ, предназначенный для защиты организма от инородных элементов.

Проявления такой защиты зависят от самого антигена и от симптомов вызванной им болезни. Данная схема и получила название «антиген-антитело».

Для большей достоверности диагностики вся процедура иммуноферментного анализа проводится только в лабораториях и медицинских центрах. С пробой крови взаимодействуют различные антигены и антитела.

С целью выявления как вида, так и количества паразитов в организме пациента применяется иммуноглобулин классов «А» и «Е», который реагирует на паразитарные инвазии.

Такой анализ должен выявить:

Иммунная реакция показывает биологические связи в молекулах клеток микробов, на наличие которых и проводится анализ. Иммунная реакция как таковая — это только один из компонентов комплексной программы ИФА, второй же компонент — это ферментная реакция.

Узнавание антигена происходит в процессе контакта клетки иммунной системы (иммуноцита) с чужеродной клеткой. Индивидуальные особенности антигенов служат для иммунной системы средством распознавания «свой-чужой».

Фактически, антитело:

• Это просто молекула, расположенная на поверхности иммуноцита.
• Эта молекула и используется для распознания чужеродных клеток.

Передача полученной информации об антигене происходит на клеточном уровне. Связь разрушается, если клетка иммунная, если же нет — организм запускает естественную защитную реакцию.

Современной науке известны 5 классов антител, иначе называемых иммуноглобулинами или белковыми структурами.

Для обозначения антител используются латинские буквы: A, D, E, G и M.

В результатах анализов эти обозначения выглядят так:

В первую очередь необходимо подготовить специальные планшеты из полистирола, которые содержат 96 лунок. Перед анализом стенки каждой ячейки обрабатывают адсорбирующим антигеном.

В обработанные ячейки капают сыворотку крови. Гомологичные антитела и антигены реагируют друг с другом, образуя прочные связи. Не прикрепившиеся тельца вымываются. Затем в лунки добавляются антитела иммуноглобулинов вместе с помеченными особым образом ферментными элементами.

Реагенты помечаются для облегчения идентификации антител в анализируемой сыворотке. Хромогенный элемент, который ускоряет реакцию и подкрашивает лунки, добавляется после промывания. Интенсивность окраски по сравнению с изучаемым ферментом показывает примерное процентное содержание антигена в пробе крови.

Затем лаборант использует оптическую жидкость, чтобы:

• замерить концентрацию антител в лунках;
• сравнить полученный результат с контрольной пробой, то есть эталоном;
• подсчитать концентрацию антител при помощи специальной шкалы.

Для анализа на глистные инвазии используется особый вариант системы тестирования, со своим набором показателей нормы и отклонений от неё.

Забор сыворотки крови для иммуноферментного анализа проводится только в условиях лаборатории. Берут кровь из вены, удаляют оттуда элементы, способные повлиять на процесс анализа и точность его результатов. Сдают анализ утром на голодный желудок.

Качество и количество антител говорит о присутствии чужеродных элементов в организме пациента, в том числе болезнетворных микроорганизмов. Эти же признаки указывают на то, что в организме начался воспалительный процесс.

Пример расшифровки результатов ИФА:

Сам по себе количественный анализ, проведённый данным методом, ещё не даёт возможность точно диагностировать болезнь, назначить курс лечения и определить дозировку препаратов.

У всех методик тестирования, даже самых передовых и высокоточных, к сожалению, кроме преимуществ, есть и свои недостатки.

Преимущества иммуноферментного анализа:

• Специализация метода диагностики;
• Повышенная чувствительность этого метода;
• Применение новейших технологий.

Чувствительность метода диагностики — это высокая вероятность обнаружить искомое, даже если его концентрация в исследуемом материале крайне мала.

Специфичность методики означает:

высокую степень достоверности, то есть отсутствие риска получить ложный результат. Если результат положительный, то пациенту гарантировано, что обнаружен именно тот вид паразитов, от которого он страдает;

влияние на результат «человеческого фактора», то есть возможных ошибок лаборанта, сведено к нулю, что также способствует повышению точности.

Возможные недостатки данного метода анализа:

1. Он предполагает определение природы болезни, то есть интуитивно «угадать» правильный диагноз в данном случае невозможно;
2. Высокая стоимость анализа.

В процедуре ИФА напрямую используется способность антител находить антиген, образуя связи с метками. Данный способ анализа считают промышленным, время ожидания результата составляет не более часа.

Особая метка-субстрат проявляется после ферментации. Уровень антител соответствует доле антигенов в исследуемом биоматериале.

Существует также дуоденальный (иначе — непрямой) метод исследования на паразитарные инвазии, который широко применяется, несмотря на высокую точность ИФА.

Дуоденальный (непрямой) иммуноферментный анализ проводится в 2 этапа:

1. Сначала сопоставляют помеченные антитела с искомыми антигенами;
2. Применяют помеченные антитела к непомеченным, обнаруженным на предыдущей стадии.

Таким образом достигается двойной контроль антигенов и антител, увеличивающий достоверность анализа.

При непрямом ИФА в лаборатории антиген фиксируют на поверхности лунки, он образует связи с немеченной частью антител.

Достоинства дуоденального метода:

• Двойной контроль изучаемого биоматериала, что значительно повышает точность;
• Повышенная точность и специфичность самого метода анализа.

Однако, данный способ занимает много времени и предполагает некоторое количество дополнительных действий. Тем не менее, точность исследования настолько высока, что она оправдывает этот недостаток. По этой причине большинство врачей рекомендуют именно дуоденальный метод анализа.

При наличии всего необходимого инструментария и расходных материалов можно будет получить результат уже через 2 дня после сдачи. Если в лаборатории есть услуга экспресс-анализа, то обработать пробу могут всего за 3-5 часов.

Где можно сдать ИФА:

• в государственной поликлинике;
• в частных клиниках.

Расценки на иммуноферментный анализ напрямую зависят от уровня цен в конкретной клинике, в среднем его цена составляет не менее 4000 рублей.

Сведения, полученные в результате этого исследования, могут стать полезным вкладом в медицинскую науку, однако, пациенту следует помнить, что, поскольку стоимость иммуноферментного анализа так высока, разумнее будет доверить эту процедуру надёжной проверенной временем клинике.

К сожалению, государственные медицинские учреждения не всегда бывают оборудованы по последнему слову науки. Необходимых приспособлений для качественного забора биоматериала и его обработки в районной поликлинике может и не быть.

Итак, чем полезен для пациента иммуноферментный анализ крови:

• позволяет обнаружить глистную инвазию ещё на ранней стадии;
• как следствие этого, позволяет своевременно начать лечение;
• устойчивость методов даёт возможность проводить анализ с равной точностью у детей и у взрослых.

Иммуноферментный анализ демонстрирует не только качественный, но и количественный фактор, то есть не только указывает на сам факт наличия гельминтов в организме пациента, но и даёт возможность оценить их число.

источник

Современная диагностика не обходится без лабораторных высокочувствительных анализов. Раньше для установления причины заболевания и обнаружения возбудителя инфекции врачи проводили разные микроскопические многоступенчатые исследования. Сегодня, чтобы опровергнуть или подтвердить первоначальный диагноз, надо сделать единственный тест – иммуноферментный анализ (ИФА). Данное лабораторное исследование помогает оценить состояние здоровья человека и диагностировать гематологические, онкологические, аутоиммунные, инфекционные патологии.

Метод иммуноферментного анализа – это современное лабораторное исследование крови на присутствие в ней антигенов, антител к возбудителям и вирусам болезни. Метод ИФА помогает врачу выявлять этиологию заболевания, определять ее фазу, давность происхождения, уровень опасности для человека и вносить в лечение необходимые корректировки. Чаще других при иммуноферментном анализе исследуют наличие антител групп M и G. Что они из себя представляют?

При попадании патогенного микроорганизма в кровоток, иммунная система включает защитную реакцию в виде выделения антител (иммуноглобулинов). Эти вещества связываются с клеткой и выявляют, является ли она частью организма или пришла извне. Если система установила, что микроорганизм чужеродный, то число антител возрастает с целью борьбы с болезнетворным вирусом. Иммуноглобулины (Ig) бывают нескольких видов: одни появляются в период инфицирования, другие остаются на протяжении всей жизни, вырабатывая стойкий иммунитет. Антитела в медицине обозначаются: A, D, E, M, G.

Методом ИФА исследуют кровь, хотя существует и другие виды иммуноферментного анализа. Как правило, они различаются типом взятой жидкости, на основании которой далее проводится изучение состава и определение наличия антигенов. При этом для исследования берется как кровь человека, так и другие жидкости:

• содержимое стекловидного тела;
• слизь из цервикального канала и уретры;
• околоплодные воды;
• мазки;
• спинномозговая жидкость.

Иммуноферментное исследование крови помогает выявить онкомаркеры (факторы раково-эмбрионального антигена, некроза опухоли, аденомы простаты и других). Также анализ определяет недуги щитовидной железы, исследуя гормональные включения в сыворотке крови (пролактина, прогестерона, тиреотропного гормона (ТТГ), тестостерона). ИФА помогает выявить наличие поражения организма кишечными паразитами и гельминтами. Кроме того, исследование назначают пациентам, у которых необходимо определить наличие следующих заболеваний:

• аллергических реакций;
• иммунодефицита;
• недугов вирусного происхождения (гепатит, герпес, вирус Эпштейна-Барр, цитомегаловирус);
• венерических болезней, передающихся половым путем ЗППП (уреаплазма, сифилис, трихомонада, хламидиоз, микоплазма);
• болезней печени;
• нейросифилиса (инфекционное поражение ЦНС (центральной нервной системы)).

Анализ крови на ИФА часто проводится во время предоперационного комплексного обследования для определения уровня гормонов и оценки качества проводимого лечения. Высокая точность полученных данных помогает врачу иметь представление о развернутой картине состояния здоровья. При этом получение результатов происходит за короткий временной промежуток, что позволяет отслеживать динамику развития заболевания.

Бесспорными плюсами метода ИФА крови является высокая чувствительность, т.е. возможность определить искомое вещество, даже при малой его концентрации; и специфичность, подразумевающая безошибочность диагностики. Кроме того, исследование сыворотки крови методом ИФА имеет следующие преимущества:

• возможность проведения процедуры во время беременности;
• расшифровка результатов помогает выявить стадию и развитие заболевания;
• точное определение концентрации ТТГ для установления патологии или нормы;
• возможность проведения полноценной диагностики на раннем сроке болезни;
• раннее обнаружение ЗППП;
• проведение ИФА возможно даже при температурных колебаниях окружающей среды;
• быстрый срок предоставления результата;
• удобство и простота проведения анализа;
• высокая чувствительность;
• реагенты для проведения исследования могут храниться около года;
• возможность проведения массового обследования в очагах инфекции;
• раннее выявление паразитов;
• отслеживание динамики прогрессирования инфекционного заболевания;
• минимальное влияние человеческого фактора;
• для анализа нужен небольшой объем биоматериала.

Главным недостатком иммуноферментного анализа крови считается то, что при проведении исследования врач заранее должен иметь предположение о природе болезни. При диагностике инфекционных заболеваний нельзя случайно найти возбудителя и установить его иммуноферментные свойства. Тест лишь способен указать на наличие антител в крови пациента, косвенно свидетельствующих о присутствии вредоносного микроорганизма.

Кроме того, при нарушении техники выполнения или неправильной подготовке, анализ может показать ложноположительный или ложноотрицательный результат. Исследование сыворотки крови ИФА – точный, но при этом дорогой метод, поэтому к нему следует обращаться в крайних случаях. Интерпретацию результатов надо доверять лишь квалифицированному специалисту.

Иммуноферментный анализ необходимо проводить, придерживаясь рекомендаций врача, т.к. на результаты исследования часто влияют разные внешние факторы. Основные правила подготовки к ИФА:

• венозную кровь надо сдавать строго натощак (в норме, последний прием пищи должен быть за 12 часов до исследования);
• необходимо накануне проведения анализа исключить прием любых лекарственных препаратов (если пациент принимает антигистаминные (противоаллергические) средства, следует проконсультироваться с доктором о том, за сколько до начала ИФА надо их отменить);
• нельзя перед обследованием курить и пить алкогольные напитки, т.к. это негативно повлияет на результат;
• следует обязательно выспаться перед анализом;
• надо исключить любые физические нагрузки, стрессовые факторы;
• диагностика большинства гормонов женской репродуктивной системы потребует взятия крови в определенные дни менструального цикла.

Для проведения иммуноферментного анализа у пациента берется кровь из локтевой вены строго натощак. Больной заранее должен сообщить врачу о наличии болезней и принимаемых препаратах, чтобы результаты исследования не были искажены. Как правило, все лекарства надо прекратить пить за 16 дней до ИФА. Ощущения при проведении процедуры похожи на взятие крови во время биохимического анализа.

Материал отправляют в лабораторию, где из крови выделяют сыворотку, в которой находятся антитела. Полученный состав помещают в пробирку с антигенами. Это могут быть самые разные аллергены (молоко, шерсть, пыльца, цитрусовые), возбудители вирусных и инфекционных болезней и другие. После получения реакции все остатки сыворотки сливают. При помощи специальных индикаторов специалисты определяют количество антител. Срок выполнения ИФА зависит от лаборатории. Как правило, результаты исследования могут предоставить в срок от двух дней до недели.

Иммуноферментный анализ крови помогает определить наличие в организме антител. Существуют несколько классов иммуноглобулинов:

1. IgM. Появляются самые первые после заражения. Наличие данных антител указывает на появление болезни в любом случае, т.к. у здорового человека этот класс отсутствует. Как правило, иммуноглобулины IgM присутствуют в крови примерно 6 недель.
2. IgA. Антитела содержатся в большом количестве в слизистых оболочках, защищая организм от проникновения патогенных микробов. Если у пациента присутствует данный класс, необходимо интенсивнее бороться с болезнью. Ведь иммуноглобулины А возникают лишь при хроническом заболевании. Исчезновение IgA свидетельствует об уничтожении инфекции.
3. IgG. Иммуноглобулины данного класса свидетельствуют о том, что человек либо является носителем инфекции, либо уже перенес заболевание. Данные антитела вырабатываются после IgM через месяц после заражения. Иммуноглобулины класса G могут присутствовать в организме на протяжении 5-6 лет, защищая его от рецидива заболевания, а при сифилисе такие антитела находятся пожизненно.

При проведении анализа ИФА в детском возрасте (до 1,5 лет) следует учитывать, что кровь ребенка содержит антитела IgG матери к инфекциям. Хотя это не означает, что малыш болен, скорее данный факт – норма. Наличие класса M свидетельствует о внутриутробной или приобретенной после рождения инфекции, т.к. антитела IgM матери не способны проникать в детский организм через плаценту. Расшифровка возможных комбинаций наличия или отсутствия антител 3 классов представлена в таблице:

источник

Методика иммуноферментного анализа применяется в различных отраслях медицины. Но в большинстве случаев данным методом диагностируют широкий круг инфекционных заболеваний, таких как вирус иммунодефицита человека, гепатит, герпес и прочих инфекций половых органов. Также иммуноферментный анализ применяют для выявления онкомаркеров различного происхождения, определения гормонов и при диагностике репродуктивной функции организма. Материалом для иммуноферментного исследования является кровь человека.

Иммуноферментный анализ крови – это лабораторное иммунологическое исследование крови, при котором происходят качественные и количественные измерения антител (антигенов), а также гормонов. Этот метод предоставляет до 90% точности при установлении диагноза заболевания.

Медицинские лаборатории используют несколько вариантов его проведения, что влияет на срок готовности результатов. Но в среднем выдача результатов исследования происходит в период 1-10 дней после сдачи крови.

При данном виде анализа крови устанавливаются антитела разных видов – это иммуноглобулины класса M, A, G (JgM, JgA, JgG). Их накопление происходит в различные временные промежутки. Первыми начинают проявляться иммуноглобулины класса М (пятый день после начала болезни). Такие иммуноглобулины задерживаются в организме пять-шесть недель, после чего начинают исчезать из крови организма. Именно в данный период времени выявляются антитела класса М.

Вторыми проявляются иммуноглобулины класса G (через три-четыре недели). Они задерживаются в организме несколько месяцев или лет. Во время проведения иммуноферментного анализа крови и расшифровки его результата можно обнаружить возрастание антител класса G. Это свидетельствует о наличии инфекции или реинфекции.

Антитела класса А проявляются в крови на протяжении двух-четырех недель. Но всего лишь 20% из них присутствуют в сыворотке крови. Остальные же входят в состав секрета слизистых оболочек. Иммуноглобулины класса А начинают исчезать в промежутке времени от двух недель до двух месяцев. Данный процесс является свидетельством уничтожения инфекции в организме. Если после выздоровления человека проводился повторный иммуноферментный анализ крови и расшифровка результата показала наличие антител класса А – это свидетельство хронической инфекции.

Расшифровка результатов анализа может принимать такие значения:

• JgM (-), JgG (-), JgA (-) – отсутствие иммунитета к инфекции;
• JgM (-), JgG (+), JgA (-) – наличие поствакционного или постинфекционного иммунитета;
• JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) – наличие острой инфекции;
• JgM (+), JgG (+), JgA (+) – наличие обострения хронической инфекции;
• JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) – наличие хронической инфекции;
• JgM (-) – выздоровление.

В расшифровке (+) является положительным результатом, а (–) – отрицательным результатом.

Помимо уточнения классов антител в расшифровке встречаются количественные их показатели. Но обширное их объяснение может предоставить только лечащий врач.

Сыворотка крови – это прозрачная жидкость с желтым оттенком. После свертывания крови она отделяется от кровяного сгустка. Не содержит фибрина и форменных элементов.

Иммуноферментный анализ сыворотки крови основан на взаимодействии антигена с антителом, причем один из них содержит в своей структуре фермент. При взаимодействии двух компонентов содержимое пробирки должно менять свой цвет. Результаты сравниваются со стандартной цветовой шкалой, и далее устанавливается антиген, который присутствует в материале. Другими словами принцип иммуноферментного анализа сыворотки крови можно объяснить так:

1. подготавливаются наборы антигенов (например, возбудители инфекционных заболеваний, аллергены или гормоны);
2. пациент сдает кровь на анализ, из которой в лаборатории выделяется сыворотка;
3. материал для исследования добавляется в лунки готовых наборов, после чего возникает реакция антиген-антитело;
4. оставшаяся сыворотка крови убирается, а обнаруженные антитела распознаются при помощи индикаторов.

Иммуноферментный анализ сыворотки крови считается достоверным. Но в тех случаях, когда произошло неправильное взятие крови для анализа, или была нарушена техника проведения исследования, или же имеются у человека скрытые системные заболевания, результаты иммуноферментного анализа сыворотки крови могут оказаться ложными.

Иммуноферментный анализ сыворотки крови исследует практически все гормоны щитовидной железы, онкомаркеры и различные виды инфекций.

К гормонам щитовидной железы относятся тиреоглобулин (ТГ), тироксин (Т4), трийодтиронин (Т3), свободный тироксин (Т4), свободный трийодтиронин (Т3).

Иммуноферментный анализ крови в норме считается, если присущи такие допустимые нормы гормонов щитовидной железы:

• тиреоглобулин (ТГ) – допустимые границы 70 МЕ/мл;
• тироксин (Т4) – 64-146 нмоль/л (50-113 нг/мл);
• трийодтиронин (Т3) – 1,8-2,8 нмоль/л (0,8-2,0 нг/мл);
• свободный тироксин (Т4) – 11-25 пмоль/л (10-27 пг/мл);
• свободный трийодтиронин (Т3) – 4,49-9,3 пмоль/л (2,5-5,8 пг/мл).

В случае исследования половых гормонов иммуноферментный анализ крови в нормедля женщин считается, если в организме выделяется лютеинизирующий гормон (ЛГ) в таких пределах:

• фолликулярная фаза цикла (с первого дня месячных до двенадцатого-четырнадцатого) – 2-14 мЕд/л;
• овуляционная фаза цикла (с двенадцатого дня по четырнадцатый день) – 24-150 мЕд/л;
• лютеиновая фаза цикла (с пятнадцатого-шестнадцатого дня и до начала следующих месячных) – 2-17 мЕд/л.

В норме для мужчин принимается, если половой гормон вырабатывается в пределах 0,5-10 мЕд/л.

При исследовании хронического гонадотропина (ХГ) референсные значения зависят от пола человека.

• У взрослых мужчин и небеременных женщин нормой считается уровень ХГ ниже 5мЕд/мл.
• У беременных женщин результат зависит от срока беременности и может колебаться в пределах 25-49000 мЕд/мл.

Иммуноферментный анализ крови исследует множество онкологических показателей. К ним можно отнести наличие пролактина, эстрадиола, прогестерона, тестостерона, стероид связывающего глобулина (ССГ) и других маркеров. Но интерпретация результата анализа и норм этих показателей должна проводиться только лечащим врачом.

Кроме того, данный метод диагностирует инфекционные (например, краснуха, корь, туберкулез, герпес, сифилис, гепатит, псевдотуберкулез) и аутоиммунные заболевания разного вида, а также устанавливает иммунный статус человека. Но все показатели и полученные результаты должны расшифровываться квалифицированным специалистом.

источник

ИФА анализ — что это такое, расшифровка иммуноферментного анализа крови на паразитов, сифилис, ВИЧ, туберкулез. Норма в таблице, результаты

Благодаря развитию современной медицины, врачу при постановке диагноза больше не нужно ориентироваться на косвенные проявления заболеваний или проводить многоступенчатые лабораторные исследования. Достаточно провести один анализ, который подтвердит или опровергнет предполагаемый первоначальный диагноз.

Таким методом является иммуноферментный анализ (ИФА) — это исследование позволяет обнаружить специфические антитела и антигенны свойственные при разнообразных патологиях, что во многом ускоряет установку диагноза.

ИФА анализ — это такое лабораторное исследование (метод), которое помогает определить присутствие или отсутствие определённых антител в организме для борьбы с вирусом и их количество.

Основой исследования является естественная реакция антиген (вредоносный организму объект) – антитело (белок уничтожающий вредоносные объекты), позволяющая выявить присутствие разнообразных вирусов, бактерий.

ИФА представляет собой естественный иммунный ответ организма – взаимодействие антитела с соответствующим антигеном. Так во время ИФА в пробирку с материалом добавляются поочередно антигены или антитела, после чего происходит выявление концентрации получившихся комплексов антиген-антитело.

Если совпадения образовались, то возникают иммунные комплексы, далее происходит ферментная реакция красящего вещества с объединённой молекулой. Именно благодаря изменению цвета в ходе ферментативной индикации происходит идентификация заболевания после исследования уровня определяемого соединения.

Иммуноглобулины человека дифференцируются на несколько классов, отличающихся друг от друга свойствами, структурой и антигенными особенностями тяжелых цепей (Н-цепи). У всех млекопитающих, в том числе и человека, выделяют пять Н-цепей, которые и определяют принадлежность иммуноглобулинов к соответствующему классу: G, М, A, D, Е.

Каждый класс отличается друг от друга биологическими свойствами, и способностями связывать антигены, и скоростью и прочностью связи с молекулой.

Функции каждых иммуноглобулинов (lg) различны:

Возникновение иммуноглобулинов происходит по своеобразной «цепочке» — lgM lgG, именно так реагирует организм на появление в организме антигена. Во время лабораторной диагностики проводится оценка концентрации трех основных иммуноглобулинов – G, M, A.

ИФА-анализ с каждым годом становится все более популярным.

Такое исследование ускоряет постановку диагноза, а это очень важно для терапии таких патологий как:

• вирусный гепатит;
• ВИЧ-инфекция;
• цитомегаловирус,
• вирус Эпштейна-Барр,
• вирус герпеса,
• корь
• краснуха,
• туберкулез,
• сальмонеллёз,
• дизентерия,
• клещевой энцефалит,
• бактерии хеликобактер,
• боррелиоз,
• столбняк,
• сифилис,
• дифтерия,
• лептоспироз,
• хламидиоза,
• уреаплазмоз,
• микоплазмоз,
• коклюш.

Так же анализ позволяет определить инфицирование паразитами:

• плоскими червями
• аскаридами
• гистолическими амебами,
• печеночными тремадами,
• лямблиями,
• токсоплазмами,
• трихинеллами,
• двуусткой,
• цестодозами.

ИФА является своеобразным маркером аутоиммунных патологий и злокачественных новообразований.

При подготовке к исследованию следует придерживаться таких правил:

• за сутки до забора крови нельзя курить и употреблять алкоголь,
• не заниматься спортом или другими физическими нагрузками,
• стараться не допускать стрессов,

Перед тем как сдать ИФА анализ, нужно избегать стрессов.

прекратить употребление лекарственных средств не позже чем за 10 дней до манипуляции.

Так же врачи рекомендуют придерживаться специальной диеты – исключить жирную и жареную пищу, а если исследование проводится на гепатиты, то необходимо не употреблять любые оранжевые овощи и особенно цитрусовые. Сдавать кровь следует с утра на голодный желудок.

Ложноположительным анализ бывает из-за невыполненных рекомендаций, особенно употребления жирной пищи, что приводит к слишком большой концентрации триглицеридов в плазме, из-за чего проводимость ИФА снижается.

В качестве исследуемого материала может использоваться цельная кровь, сыворотка или плазма венозной крови. Забор материала, обычно проводится из локтевой вены, для этого применяется одноразовая игла и вакуумная пробирка, необходимо 5-10 мл крови.

Для точности результата важно придерживаться правильной техники взятия пробы – прокол самого сосуда и окружающих тканей должен быть произведен одной манипуляцией, поэтому используется короткая игла с большим диаметром, благодаря чему не травмируется противоположная стенка вены и не повреждаются эритроциты.

Так же для сохранения целостности эритроцитов, нужно чтобы кровь стекала по стенкам пробирки.

Во время хранения материала следует избегать возможной его ионизации, кроме того материал не должен контактировать с остатками дезинфицирующих средств, поэтому используется только одноразовая пластиковая пробирка, с маркировкой ФИО пациента, датой и временем сдачи материала.

Если необходимо непродолжительное хранение исследуемого материала, то используется холодильная камера с температурой 2-4 о С, если необходимо более продолжительное хранение, то материал замораживается при температуре -20 о С.

После подготовки исследуемого материала врач-лаборант приступает к необходимым манипуляциям. Для этого используются ряд специальных наборов антигенов, обдающих свойством спровоцировать ответные реакции организма на раздражитель, это разнообразные инфекции, гормоны, аллергены.

Схема ожидаемой реакции «антиген-антитело» выглядит приблизительно так:

• Первичная реакция — определяемый Ig (Ab) и очищенный антиген возбудителя (Ag).
• Для обнаружения получившихся иммунных комплексов далее следует новая иммунологическая реакция, где антигеном выступает связанный специфический Ig, а антителом для него выступает коньюгат- Ig (Ab).
• Последний этап — ферментативная реакция, вместе с катализатором молекулой коньюгата. Субстратом выступает хромоген (не окрашенный), который в процессе протекания реакции окрашивается, и интенсивность цвета и определяется количественный показатель иммуноглобулина в пробе.

В настоящий момент разработано множество разнообразных вариантов ИФА, четкая классификация их отсутствует. Обычно, методы рассматриваются исходя из разделения её на гетеро- и гомогенные — все фазы анализа происходят с применением твердой фазы или с использованием только раствора.

Современные клинико-диагностические лаборатории обычно используют гетерогенный (твердофазный) ИФА, в нем под твердой фазой подразумевается абсорбция антигенов или антител на твердой поверхности специальных лунок, расположенных на полистироловом микропланшете, метод подразделяется на прямой и непрямой ИФА.

При прямом ИФА, вносимый антиген закрепляет в период инкубационного процесса на поверхности пустых лунок, для этого исследуемые пробы материал помещают в чистые лунки на 20-25 минут, это нужно для прикрепления антигена к их поверхности. После этого происходит добавление необходимого антитела. Далее материал остается на определенное время для образования связей.

Антитела всегда добавляют в избытке, поэтому даже при их наличии в пробе остаются не связанные антигены, а если антигенов нет совсем, то связей не будет. Чтобы удалить«лишние» антитела проводится декантация, после чего остаются только те антитела, которые создали связь с антигеном.

После этого следует ферментативная реакции – добавление в лунки раствора с ферментом, после чего происходит окрашивание полученных связей.

При непрямом методе ИФА используемые антитела, заранее соединенные с субстратом ферментативной реакции; в этом случае связь антител с антигеном происходит в период инкубационного процесса, после чего происходит мобилизация связей на поверхности лунок, а вносимый после конъюгат и субстратно-хромогенный реагент окрашивают реакцию.

Таким образом, главным отличием непрямого от прямого метода является не приклеивание материала к поверхности чистых лунок, а связывание с антигеном, иммобилизованным на планшете.

Останавливается протекание реакции с применением специализированных устройств, далее каждая лунка подвергается процессу фотометрирования, за которым следует сравнительная характеристика полученного результата с проведенными ранее контрольными пробами.

Если обнаруживается повышение оптической плотности в пробе, то завышена и концентрация специфических антител в исследуемом результате.

Проведение исследования не занимает много времени, от забора крови до получения результата проходит от 1 до 10 дней, в зависимости от диагностических мероприятий.

На полученном пациентом бланке-результате диагностики указывается отрицательный либо положительный результат на определенные классы иммуноглобулинов, так же указывается количественный показатель различных классов антител.

Возможны различные интерпретации результатов:

1. IgM (+) (IgA, IgG не определялись) – процесс выздоровления;
2. IgM (-) ;IgG (+), IgA (+) – хроническая инфекционная патология;
3. IgM, IgG, IgA (все с – значением) – отсутствие защитных механизмов к инфекциям;
4. IgG (+/-) и IgA (+/-), IgM (+) – острый процесс;
5. IgM (-), IgA(-),IgG(+) – постинфекционный иммунитет;
6. IgM, IgG, IgA (+) – хроническая патология в стадии обострения.

Так, например, если были обнаружены IgG и IgM, то возможно у пациента одно из таких заболеваний:

• вирусный гепатит;
• цитомегаловирус;
• герпес;
• ветряная оспа;
• хламидиозом;
• стафилококковая или стрептококковая инфекция.

Иммуноферментный анализ часто назначается при гормональных исследованиях, нормы показаны в таблице:

ИФА анализ — это такое диагностическое исследование, которое позволяет оценить вероятность образования онкологических патологий. Однако интерпретация результатов проводится только лечащим врачом.

ИФА подходит для выявления разнообразных форм половых инфекций, в том числе сифилиса, часто используется и для скрининга беременных.

Благодаря этому исследованию можно узнать, как давно произошло заражение и стадия заболевания на момент исследования:

• иммуноглобулины М говорят о длительности заболевания;
• IgA — пациент заразился более 30 дней назад;
• IgG обнаруживается на «пике» заболеваний, или же в тот момент, когда терапия окончилось недавно.

В процессе исследования лунки на планшете с отрицательным показателем остаются бесцветные, а положительные окрашиваются в ярко-желтый цвет. Если цвет положительных лунок не совпадает с цветом контроля, то результат считается сомнительным и необходимо повторное исследование.

Иммуноферментный анализ — это первая ступень в диагностике ВИЧ. Проводить анализ нельзя сразу же после предполагаемого заражения необходимо дождаться окончания инкубационного периода (от 14 дней до 6 месяцев).

В ходе анализа определяются антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, происходит поиск АТ класса G, который обычно появляется на более поздних сроках и АТ класса А и М, они могут быть определены на ранних стадиях (во время инкубационного периода).

При получении положительных проб далее следует:

• если первый тест дал положительный результат, то кровь вновь перепроверяется другим лаборантом;
• повторный положительный результат предполагает пересдачу материала,
• при повторении результата, пациенту назначается иммуноблотинг.

Окончательный вывод о наличии ВИЧ-инфекции выдается только после результата иммуноблотинга.

ИФА также применяется в качестве диагностического исследования туберкулеза, но если у пациента даже и были выявлены антитела к данной патологии, то это не всегда подтверждает наличие у него туберкулеза, поэтому ИФА часто применяется качестве уточняющей методики, либо же для диагностики скрытой внелегочной формы.

ИФА анализ — это такое исследование, позволяющее обнаружить у пациента заражения паразитами и простейшими, в ходе диагностики можно определить даже время заражения.