Анализ игх при раке легких

Поставить точно диагноз «онкология» без проведения специальных исследований практически невозможно. В настоящее время медицина обладает такими возможностями. Поэтому если имеется подозрение на рак, то проводится иммуногистохимическое исследование. Рассмотрим, что собой представляет данный анализ, в каких случаях назначается и что позволяет выявить.

Под данным исследованием подразумевается изучение образца тканей под микроскопом. Их получают при помощи биопсии и предварительно обрабатывают специфическими антителами.

Онкологические заболевания давно находятся в поле зрения врачей и ученых. В ходе многочисленных исследований было установлено, что злокачественные клетки в процессе жизнедеятельности продуцируют специфические белки, которые называют антигенами. Они связываются с антителами, именно на этом основано иммуногистохимическое исследование, когда ткань пациента, взятая для изучения, после обработки тщательно изучается при помощи микроскопии.

Когда антитела взаимодействуют с раковыми клетками, то можно наблюдать явление флуоресценции. Это дает основания практически на 100 % быть уверенным, что имеет место онкология.

Сейчас уже разработаны и активно внедрены в медицинскую практику антитела практически ко всем новообразованиям.

Иммуногистохимическое исследование при раке позволяет:

Распознать новообразование и определить его разновидность.
Выяснить распространенность первичного очага по организму.
При взятии биологического материала из вторичных очагов можно определить источник распространения метастазов.
Исследование позволяет оценить эффективность терапии.
При помощи анализа можно выяснить, на какой стадии развития находится раковая опухоль.
Иммуногистохимическое исследование позволяет также выяснить скорость роста новообразований.

Данный метод исследования считается более информативным по сравнению с обычным гистологическим. Если использовать оба метода исследования, то можно получить полнейшую картину, поэтому на практике чаще всего врачи так и поступают.

Исследовать при помощи этого метода можно практически все ткани человеческого организма, но чаще всего такой анализ назначают при подозрении на онкологию.

Для определения первичных новообразований.
Для выявления метастазов.
Данный анализ помогает определить прогноз развития и протекания патологии.
Анализ служит одним из методов исследования рецепторов к ряду гормонов.
ИГХ-исследование позволяет обнаружить микроорганизмы.
Метод исследования применяют для выяснения чувствительности раковых клеток к химиотерапии и радиотерапии.

Иммуногистохимическое исследование проводится в несколько этапов, первым из них является сбор биологического материала. Его получают путем биопсии или изъятия материала во время проведения операции.

Кусочек ткани помещают в формалин и направляют в лабораторию, где его подвергают изменениям:

Материал обезжиривают специальными составами и заливают парафином. В таком состоянии он может храниться практически вечно, поэтому при необходимости исследование можно повторять.
На следующем этапе получают тончайшие срезы — проводят микротомирование. Их размещают на специальных стеклах.
Приготовленные срезы обрабатывают растворами антител определенной концентрации. Использовать для обработки могут составы, содержащие разное количество антител. Какие из них вступят во взаимодействие с раковыми клетками, будет зависеть от разновидности опухоли.

Такой анализ просто незаменим, если есть подозрение на наличие раковых клеток в груди. Обязательно определение количества рецепторов эстрогена и прогестерона. При их повышении активизируется процесс роста злокачественных клеток.

ИГХ-исследование позволяет не только распознать онкологическое заболевание, но и определить его стадию. При помощи исследования врачи выясняют, показана ли гормональная терапия.

Опухоли, имеющие большую концентрацию гормонов, чаще всего вполне эффективно лечатся антигормональными препаратами.

Во время проведения анализа обязательно определяют показатель Ki-67, он помогает определить злокачественность процесса. Если иммуногистохимическое исследование молочной железы показывает Ki-67 до 15 %, то исход заболевания считается благоприятным. Если показатель доходит до 30 %, то без химиотерапии не обойтись, потому что опухоль растет довольно быстро. Отметка в 90 % чаще всего свидетельствует о неизбежности летального исхода.

Данный анализ назначается не только при подозрении на онкологию груди, но еще он оказывается довольно информативным, если:

Имеется бесплодие.
Обнаружены злокачественные образования матки.
Наблюдаются патологические изменения в репродуктивной системе.

Такой анализ проводится, если:

Часто наблюдаются выкидыши.
У женщины было несколько неудачных попыток ЭКО.
Диагностирована хроническая форма эндометрита.

Данное исследование помогает выяснить, имеются ли клетки, мешающие зачатию естественным путем.

ИГХ-исследование тканей эндометрия назначается женщинам, у которых уже было несколько неудачных попыток искусственного оплодотворения.

Взятие тканей эндометрия проводится в разные дни цикла, которые назначает врач.

Необходимо иметь в виду, что исследовать подготовленные образцы тканей имеет право только врач, имеющий сертификат, подтверждающий специальную подготовку по проведению анализов по методу ИГХ.

В заключении должно быть указано:

Показатели антител, к которым определена тропность исследуемой ткани.
Указывается разновидность раковых клеток и их количество.
Указываются выявленные антигены, которые помогают установить вид онкологии.

По результатам исследования нельзя ставить окончательный диагноз. Врач-онколог имеет право это сделать только после получения интерпретации всех диагностических процедур.

Таким образом, можно сделать вывод, что эффективно иммуногистохимическое исследование при раке молочной или других желез и других видах онкологии. Анализ дает исчерпывающую информацию и позволяет распознать начинающийся патологический процесс на клеточном уровне.

источник

Иммуногистохимия рака легкого

Иммуногистохимия представляет собой инновационный метод морфологической диагностики раковых заболеваний. Суть исследования заключается в лабораторном изучении образцов опухолевой ткани, полученной во время биопсии, после их предварительной обработки специальными антителами. Данный метод НЕ ИМЕЕТ противопоказаний, поэтому не может быть выполнен только при невозможности проведения биопсии.
Патогенные клетки продуцируют характерные определенной раковой опухоли специфические белки, называемые антигенами, которые способны взаимодействовать с некоторыми антителами. При проведении иммуногистохимии рака легкого полученный образец опухолевой ткани подвергается обработке определенными антителами, а затем изучается в лаборатории. В результате обработки вещества, связывающиеся с бластными клетками, начинают светиться, что позволяет выявить наличие аномальных клеток.

Метод исследования позволяет исследовать любые ткани, поэтому часто выполняется при подозрении опухолевого процесса.
Исследование может быть выполнено с различными целями:

Определить тип и подтип злокачественной опухоли,
Выявить источник метастазов,
Определить распространенность опухолевого очага,
Оценить эффективность терапии рака,
Определить степень онкологии,
Оценить скорость роста новообразования,
Определить прогноз болезни.

Результаты исследования позволяют осуществлять высокоэффективное лечение с помощью современных противоопухолевых препаратов, подавляющих пролиферацию раковых клеток.

Обследование включает четыре основные этапы.
Первый этап предполагает взятие образца опухолевой ткани во время биопсии либо во время оперативного вмешательства. Выбор метода забора биоптата (опухолевой ткани) зависит от места нахождения злокачественного новообразования. После взятия материала его помещают в раствор формалина (как правило, 10%-й) и передают в лабораторию.
На следующем этапе проводится обработка материала исследования, при которой лаборант делает тончайшие срезы биоптата и помещает их на гистологические стекла.
Третий этап иммуногистохимии предполагает окрашивание полученных срезов специальными препаратами – растворами специфических антител. После каждого этапа окрашивания материалы изучаются врачом, принимающим решение о необходимости продолжения поиска опухолевых маркеров либо о постановке диагноза. Окрашивание срезов выполняется вручную лаборантом, либо автоматически с помощью медицинского оборудования. Второй способ является более достоверным и исключает ошибки.
Количество используемых маркеров может отличаться в зависимости от конкретного клинического случая и, как правило, зависит от предварительного диагноза. Исследование предполагает использование малой панели (до 5 антител) либо большой (от 6 единиц до десятков антител). Результаты исследования при стандартной «малой панели» пациент получает через неделю, в случае использования «большой панели» ждать приходится около двух недель.

Изучение полученных данных проводит патологоанатом. В заключение процедуры специалист нашего Специализированного Онкоцентра отмечает реагенты, с которыми было определено сродство ткани, также описывается морфологическая картина биоптата: выявленный тип бластных клеток и их количество. Сродство биопсийного материала и используемых опухолевых антител указывает на конкретный тип раковой опухоли.
Иммуногистохимия рака легкого считается наиболее достоверным и точным методом исследования онкологии, позволяющим почти со 100% точностью поставить диагноз, определить тип новообразования и выявить место локализации опухоли.

Характерным отличием данного исследования от других диагностических процедур, в основе которых также заложена реакция антиген-антител, считается структурная специфика проведения обследования. В процессе диагностики врач изучает наличие реакции, а также ее интенсивность и распространение сигнала в биоптате.

источник

Иммуногистохимическое исследование в онкологии – это разновидность исследования ткани с помощью специальных реактивов по принципу антиген-антитело.

При иммуногистохимическом исследовании используются реактивы, которые содержат антитела, отмеченные специальными веществами.

Антитело – это белок, который связывается в тканях с определенными молекулами — антигенами, после чего возникает реакция. Если же таких молекул нет, то и реакции не будет.

По этому признаку можно судить, присутствует в ткани интересная нам молекула или нет. Это похоже на то, если нанести на белый стол бесцветный клей. Невооруженным глазом на белом фоне он практически незаметен, но стоит насыпать на стол мелкого песка, как клей становится виден за счет прилипших песчинок.

По правилам иммуногистохимическое исследование при раке всегда проводится в специализированной лаборатории. Для его проведения необходима опухолевая ткань, полученная в результате биопсии или операции.

Иммуногистохимическое исследование проводится для определения наличия в опухолевых клетках различных точек приложения, например, наличие рецепторов эстрогенов (ER) и прогестеронов (PR). Также иммуногистохимия выполняется для определения показателя Ki-67 (индекс пролиферативной активности опухолевых клеток), гиперэкспрессии белка Her2neu, VEGF (сосудистый фактор роста), р53.

Иммуногистохимическое исследование при раке выполняется для того, чтобы понять, какими препаратами можно лечить злокачественную опухоль, и к каким видам препаратов она чувствительна.

Самый распространённый анализ, определяемый при иммуногистохимическом исследовании, это наличие рецепторной чувствительности к гормонам у опухоли.

ER и PR — протеиновые рецепторы на поверхности опухолевых клеток.

В организме человека постоянно вырабатываются гормоны — эстроген и прогестерон. Эти гормоны воздействуют на ER и PR рецепторы, что приводит к стимуляции роста опухолевых клеток.

Определение Эстрогеновых и Прогетестероновых рецепторов является одним из важнейших моментов, определяющих чувствительность опухоли к терапии гормональными препаратами.

Чаще всего наличие рецепторов ER/PR определяют при раке молочной железы. Их наличие дает возможность, помимо стандартных методов лечения, применить гормональную терапию.

При гормон позитивном раке молочной железы, назначаются препараты: Тамосксифен, Экземестан (Аромазин), Летрозол (Фемара), Анастразол (Аримидекс), Гексэстрол (Синестрол) и другие.Также, считается, что гормонально-зависимый рак молочной железы отличается спокойным течением и редким метастазированием.

Чувствительность опухолевых клеток к гормональной терапии выражается в баллах от до 10. Опухоль считается гормонозависимой, начиная с 2-х баллов. и требует добавления к лечению гормональной терапии.

Her2Neu — это рецептор эпидермального фактора роста раковой клетки. Это — ген, который воздействует на мембранные рецепторы клетки, и стимулирует её к усиленному делению.

В некоторых опухолях (чаще всего рак молочной железы, рак пищевода, рак желудка) присутствует гиперэкспрессия (повышенная активность) Her2Neu, что вызывает быстрое деление опухолевой клетки и её повышенную активность.

Также снижается эффективность химиотерапии, лучевой терапии, гормональной терапии. Из-за этого опухоли с Her2neu позитивным статусом отличаются агрессивным течением.

Существует две методики определения наличия у опухоли гена Her2neu:

Результаты иммуногистохимического исследования выражаются в баллах:

0-1 означает, что опухоль без гиперэкспрессии Her2neu.
3 означает, что опухоль с гиперэкспрессией Her2neu.

2. Метод FISH (Флуоресцентная гибридизация in situ)

В отличие от иммуногистохимического исследования, при котором определяются белки, при методе FISH определяется наличие генов, кодирующих протеины Her2neu. В зависимости от их наличия, определяется гиперэкспрессия Her2neu.

Определение гиперэкспрессии рецептора Her2neu в опухоли молочной железы является очень важным для дальнейшего назначения лечения.

В современной онкологии гиперэкспрессию Her2neu определяют, чтобы понять, необходимо ли добавление к лечению ингибиторов Her2neu. Для лечения опухолей с гиперэкспрессией рецептора Her2Neu активно и успешно используются таргетные препараты Трастузумаб (Герцептин), Пертузумаб (Перьета), Трастузумаб-эмтанзин (Кадсила), Бейодайм (Трастузумаб+Пертузумаб). Эти препараты прицельно блокируют рецепторы Her2neu, тем самым останавливая активный рост опухолевых клеток и повышая их чувствительность к химиопрепаратам. Добавление таргетной терапии к стандартной химиотерапии при лечении Her2neu позитивных опухолей, серьезно увеличивает общую выживаемость и результат противоопухолевого лечения.

Ki-67 — это маркер пролиферативной активности опухолевой клетки. Данный параметр оценивается в процентах и показывает, сколько процентов опухолевых клеток активно делятся.

Если Ki-67 меньше 15%, опухоль считается слабоагрессивной, при показателе Ki-67 от 30 до 50% опухоль считается агрессивной, а при показателе Ki-67 выше 50% опухоль является высокоагрессивной.

Также Ki-67 является фактором прогноза течения опухолевого заболевания и ответа опухоли на химиотерапевтическое лечение. Определяется это простым способом: чем ниже показатель Ki-67, тем хуже опухоль реагирует на химиотерапевтическое лечение. И наоборот — чем выше показатель Ki-67, тем лучше опухоль будет отвечать на химиотерапию.

Белок p53 — это транскрипционный фактор, регулирующий клеточный цикл. В быстро делящихся клетках обнаружено увеличение концентрации белка р53 по сравнению с клетками, делящимися медленно, что обусловлено высоким риском их онкогенности.

Белок p53 предотвращает образование злокачественных опухолей в нашем организме. В норме, антионкоген р53 находится в неактивном состоянии, а при появлении повреждений ДНК в здоровой клетке — активируется.

Функция белка р53 состоит в удалении тех клеток, которые являются потенциально онкогенными. Это называется — индуцированный апоптоз, уничтожение потенциально опасной клетки.

При иммуногистохимическом исследовании, повышенное содержание белка p53 обнаруживается в 50% злокачественных клеток, что позволяет им беспрепятственно делиться и избегать апоптоза (уничтожения).

Количество белка p53, определяют в дополнение к показателю Кi67, для того, чтобы понять насколько агрессивна опухоль и определить дальнейшее течение болезни. Если уровень белка p53 высокий, значит опухоль не агрессивная и не склонна к метастазированию и быстрому росту. Если же, показатель белка p53 низкий, то значит опухоль агрессивна и склонна к быстрому росту в окружающие ткани и метастазированию.

VEGF – это сигнальный белок, вырабатываемый клетками для активного роста новых сосудов в уже существующей сосудистой системе.

Есть несколько видов белка VEGF, и каждый воздействует на определенный рецептор VEGFR (Vascular endothelial growth factor receptor). Для того чтобы активно делиться, опухоли нужно питание, а для этого нужны сосуды, по которым это питание будет поступать. Именно по этой причине в опухолевых клетках содержится повышенное содержание белка VEGF — для того, чтобы в короткие сроки строить сосудистые сети.

Наличие белка VEGF в опухоли говорит о возможности применения таргетной терапии такими препаратами, как Бевацизумаб (Авастин), Рамуцирумаб (Цирамза), Афлиберцепт (Залтрап). Они перестраивают сосудистую сеть опухоли, тем самым лишая её питания.

Иммунотерапия в онкологии появилась сравнительно недавно, но уже успела показать удивительные результаты в лечении опухолей. Механизм иммунотерапии рака заключается в том, что препарат позволяет иммунитету увидеть опухоль и уничтожить её. Ответственные за «видимость» опухоли белки PD-1, PDL-1 и PDL-2 в достаточном количестве присутствуют не во всех опухолях. Именно поэтому одним пациентам иммунотерапия помогает, а другим нет.

Чаще всего определение гиперэкспрессии белка PD-1 и его лиганд PDL-1 и PDL-2 необходимо при меланоме, немелкоклеточном раке легкого, раке желудка и раке почки.

Для того чтобы отобрать пациентов, которым показана иммунотерапия, проводится определение наличия экспрессии PD-1 и его лиганд PDL-1 и PDL-2, при помощи флюоресцентной гибридизации in situ (FISH). При наличии экспрессии PD-1 и его лиганд PDL-1 и PDL-2, показано применение иммунотерапии препаратами Пембролизумаб (Кейтруда), Ниволумаб (Опдиво), Атезолизумаб (Тецентрик).

В современной онкологии иммуногистохимическое исследование играет очень важную роль, так как при помощи этого исследования онкологи определяют наличие тех или иных факторов в опухоли, которые позволяют грамотно и адекватно составить дальнейшее лечение пациента и говорить о прогнозах заболевания.

источник

Регистрация: 16.06.2009 Сообщений: 9 Поблагодарил(а): 0 раз Поблагодарили: 0 раз —>

ИГХ-исследование ткани легкого

Подскажите,пожалуйста, что означает следующее заключение ИГК-исследования:
С целью верификации гистологического диагноза в легком — картина воспалительной миофибробластической опухоли, проведено ИГК-исследование.
Клетки опухоли позитивны по экспрессии виментина +++, a-SMA++, ALK-1++ и СД 68++
Клетки опухоли не экспрессируют SMMS-1, десмин, AE1/AE3

Таким образом,морфо-ИГХ картина опухоли соответствует воспалительной миофибробластической опухоли

Регистрация: 15.01.2006 Сообщений: 236 Поблагодарил(а): 0 раз Поблагодарили: 0 раз —>

По результату ИГХ я вижу что в опухоли есть миофибробласты или гладкие мышечные клетки с макрофагами. такая комбинация может быть в реактивной ткани любого воспалительного процесса (не обязательно но включая инфекционные) или «воспалительной опухоли». Признаков карциномы похоже нет. Результат зависит от места ткани потомучто реактивная ткань может на периферии другой опухоли, инфаркта. Биопсии могут «промазать». Ваш материал биопсия или резекция?

Регистрация: 27.02.2009 Сообщений: 23 Поблагодарил(а): 0 раз Поблагодарили: 0 раз —>

Соглашусь в В.В. Яковлев, с той лишь оговоркой, что без рутинного гистологического исследования такая ИГХ-картина мало что означает. Пожалуй можно сказать лишь, что в исследованном материале нет эпителиальной опухоли. В остальном вполне может быть и воспалительная миофибробластическая псевдоопухоль.

Регистрация: 16.06.2009 Сообщений: 9 Поблагодарил(а): 0 раз Поблагодарили: 0 раз —>

Спасибо больше за ответы.
Материал — биопсия, исследован дважды,в Москве и в Кишиневе:результат один и тот же. При биопсии был взят довольно крупный кусок ткани. В Кишиневе исследовали 6 стеклышек,в Москве сделали ещё 9 стеклышек, которые потом тоже исследовали. В итоге пришли к одному и тому же результату. Насчет «промазали с биопсией» — когда делали надрез,чтобы взять кусок ткани на анализ, пришлось увеличить надрез, чтоб взять самый крупный пораженный участок (кусочек ткани на анализ).
Сейчас стоит вопрос лечения данного заболевания. Здесь в Кишиневе врачи не сталкивались с таким диагнозом и не знают как это лечится.
Мне 22 года.
Очень надеюсь на вашу помощь.

Регистрация: 15.01.2006 Сообщений: 236 Поблагодарил(а): 0 раз Поблагодарили: 0 раз —>

В 22 года дифференциальный диагноз немного другой. Можете ли вы скопировать полное гистологическое описание, а так же немного истории (рентгенологическое описание, симптомы, другие заболевания или анализы отклоняюшиеся от нормы).

Регистрация: 16.06.2009 Сообщений: 9 Поблагодарил(а): 0 раз Поблагодарили: 0 раз —>

Добрый день.
Начнем с самого начала болезни: Выпил очень холодную воду с холодильника. На второй день почувствовал недомогание и поднялась температура. Выпил ампиокс так как и горло тоже как бы чувствовал. Обратился в санчасть, сделали рентген и поставили диагноз подозрение на пневмонию. Неделю принимал парацетамол и трикаксон и витамины. Изменений ни каких не было даже хуже температура до 38-40. Взяли в больницу , опять рентген и томографию там написали что видят десимилированный процес неясной этиологии. Тем не менее лечили от пневмонии около месяца. Результат не дало Решили что наверное туберкулез. В другой больнице институт пульмонологии начали пробный курс 10 дней от туберкулеза еще хуже стало. Решили делать операцию и брать гистологию на обследовании. В Кишиневе такой результат после лаборатории:
внутри сосудистая бронхо-альвиолярная склерозирующая опухоль. Хронический воспалительный процесс с очагами некроза , периваскулярный пневмосклероз с очагами отека легких и фиброноидного некроза в гранулематозных образованиях.
В Москве провели исследование материала ИГХ:
Микроскопическое описание:
С целью верификации гистологического диагноза (Б. 168559/09) в легком- картина воспалительной миофибробластической опухоли, проведено иммуногистохимическое иследование.
Клетки опухоли позитивны по экспрессии виментина+++, а-SMA++,ALK-1++ и СД 68++. Клетки опухоли не экспрессируют SMMS-1,AE1/AE3.
Таким образом, морфо-иммуногистологическая картина опухоли соответствует воспалительной миофибробластической опухоли.
Вот это то что дало исследование. Наши врачи не знают как лечить это.
Анализы крови все хорошие кроме лейкоцитов сейчас 20 и СОИ 56, гемоглобин 120.
Как таково врачи нам описали рентген не ода опухоль а разбросанно по всем легким и не опухоль а гранулезного типа. Это длится 4 месяца, Самое главное температура каждый день. до 38 обычно после обеда поднимается. Принимаю сейчас капли Psorinoheel и Lymphomyosot и от температуры МИГ-400. Не кашляю, месяц назад кашлял была одышка когда поднимался по лестнице сейчас лучше не чувствую. Вот это все.
С уважением,
Алексей.

Регистрация: 15.01.2006 Сообщений: 236 Поблагодарил(а): 0 раз Поблагодарили: 0 раз —>

Судя по описанию, не опухоль. Была ли сделана бактериальная культура? Антибиотики?
По биопсии, мне нужно посмотреть хоть бы на фотографии стекол сделанных в микроскопе. Ни диагноз, ни выбор ИГХ пока не сходятся с клинической картиной. Я бы в первую очередь думал бы об инфекции (нужны окраски на ТБ, грипковые организмы и по Граму) и о воспалительных неинфекционных (саркоидоз, пневмониты. ). Можете ли вы попросить сфотографировать стекла в микроскопе и отсканировать рентген легких.
iakovlev.v@gmail.com

Добавлено через 2 минуты 59 секунд
Есть ли симптомы в носу и носоглотке? Кем вы работете? Контакт с сеном, землей, животными?

Добавлено через 5 минут 43 секунды
функция почек (креатинин?)

Регистрация: 16.06.2009 Сообщений: 9 Поблагодарил(а): 0 раз Поблагодарили: 0 раз —>

добрый день .
Пишет мама Леши так как его дома нет.
Сегодня проверили почки и мы в ужасе, сделали узи и томографию с контрастом (в вену). Поставили диагноз непроходимость почки левой , хотя 2 месяца назад делали томографию и ничего не было. До этого неоднократно было сделано узи и ничего не было обнаружено.
Вот сейчас вы наверное поймете что у нас, Даже не знаем что делать. Завтра идем к онкологу урологу.
До свидания. Мы еще напишем.

Регистрация: 15.01.2006 Сообщений: 236 Поблагодарил(а): 0 раз Поблагодарили: 0 раз —>

Пока все равно не понятно с определенностью. Оптимально было бы выслать стекла и гистологические блоки мне (укажите как документы, не говорите что в посылке ткань или стекла):
Dr. Vladimir Iakovlev
Division of Pathology
St. Michael’s Hospital
30 Bond St., Cardinal Carter 2-093
Toronto Ontario M5B1W8
Canada
Tel: 1-416-864-6060#3176
Я их верну за свой счет. В худшем случае сфотографировать стекла в микроскопе с разным увеличением. Мне в основном нужны снимки обычных гематоксили-еозин, фотографировать ИГХ пока не надо (но для пересылки нужно все).

Добавлено через 2 минуты 48 секунд
Кровь в моче? Уровень креатинина в крови?

Регистрация: 16.06.2009 Сообщений: 9 Поблагодарил(а): 0 раз Поблагодарили: 0 раз —>

здравствуйте.
Это опять мама Леши. Вы знаете наши блоки и стекла остались в Москве. Если у Вас кто то там есть мы бы дали адрес даже выслали денек на отправку чтобы от туда вам их отправить. Мы Вам позвоним . Это Ваш телефон? Объясните как звонить.
Почки только сегодня идем к врачу, но дома смотрим нет никакой крови в мочи.
Пишите. Спасибо.

Регистрация: 15.01.2006 Сообщений: 236 Поблагодарил(а): 0 раз Поблагодарили: 0 раз —>

У меня к сожалению контактов в Москве нет, только очень далекие и я связь не держу. Я переехал в Канаду много лет назад из Сибири.

Можете ли вы попросить саму лабораторию отправить материал? Сложности могут возникнуть если в таможенной декларации указан биологический материал. К сожалению Российская таможня (как и многие бюрократические машины) немного квадратноголовая и не до конца понимают что материал фиксирован и безвреден. Посылку легче всего отправить указав содержание как «документы».

Другой вариант поросить их (лаборатотию) сфотографировать стекла.

Третий вариант, самый крайний, обьяснить ситуацию что диагноз не совпадает с клиническои картиной и потребовать пересмотра стекол в другом учреждении. Где сейчас стекла и блоки?

Звонить можно, я только не всегда в оффисе(1-416-864-6060 потом после ответа машины 3176). Мои сотовый: 1-647-6801500 (от вас набор наверно ?8-001-647-68-1500) сотовый в госпитале иногда попадает в зону без связи.

Регистрация: 16.06.2009 Сообщений: 9 Поблагодарил(а): 0 раз Поблагодарили: 0 раз —>

Доброго Вам времени суток. Уважаемый Владимир В.(извиняюсь, -не знаю как Вас по отчеству)Вас опять беспокоят из Кишинёва. это отец Алексея. Долго не выходили на связь-измотались немного. Я хотел Вас поблагодарить за понимание, неравнодушие и поддержку.
В Кишинёве в архиве оставалось одно стекло и кусочек биоматериала, но Алексея попросили взять с собой в Германию. Он там уже почти две недели.Рак, Слава Богу, исключили. 17-го числа сдал дополнительные анализы, завтра-послезавтра (21-22-го), дай Бог, будут результаты и, может быть, назначат лечение.А пока подозревают саркоидоз или туберкулёз костей.Сделали сканирование скелета и пункцию (опухоли?) на позвонке-ждём результатов.
С уважением, Иван

Регистрация: 15.01.2006 Сообщений: 236 Поблагодарил(а): 0 раз Поблагодарили: 0 раз —>

Рад что события развиваются таким образом. Сейчас и диагностика и лечение похоже идут в комплексе и грамотные.

Регистрация: 16.06.2009 Сообщений: 9 Поблагодарил(а): 0 раз Поблагодарили: 0 раз —>

Добрый день, Владимир!Вы оказались правы по поводу «биопсии промазали». Действительно пришлось ещё раз делать биопсию, а до этого исследовали и на туберкулёз костей , и на бактерии. Сначала поставили диагноз » Саркома Юинга» и получил дважды по три дня химиотерапию по этому диагнозу, (но продолжали исследования) После чего исключили и этот диагноз и поставили » Анопластическая Т-крупноклеточная лимфома стадия IVB(CD30+:CD4+;CD43+CD56-/+;EMA+; GranzymeB+:monoklonalek TCR-gamma: ALK1+/- .По этому диагнозу получил ещё шесть химиотерапии по три дня. Закончил 13.01.10. Провели проверку (анализы, сканирование, томографию. )-Всё хорошо.Только рубцы остались на лёгких. Медики очень довольны результатами, но очень боятся ремиссии и предлагают сделать пересадку стволовых клеток, для большей гарантии. Мы вроде согласны, но некоторые родственники наши опасаются, чтоб обратной реакции не было. Вы, как специалист-медик, что нам можете посоветовать?Как нам поступить? С огромным уважением , Иван

Регистрация: 16.06.2009 Сообщений: 9 Поблагодарил(а): 0 раз Поблагодарили: 0 раз —>

[QUOTE=xorovod]Добрый день, Владимир!Вы оказались правы по поводу «биопсии промазали». Действительно пришлось ещё раз делать биопсию, а до этого исследовали и на туберкулёз костей , и на бактерии. Сначала поставили диагноз » Саркома Юинга» и получил дважды по три дня химиотерапию по этому диагнозу, (но продолжали исследования) После чего исключили и этот диагноз и поставили » Анопластическая Т-крупноклеточная лимфома стадия IVB(CD30+:CD4+;CD43+CD56-/+;EMA+; GranzymeB+:monoklonalek TCR-gamma: ALK1+/- .По этому диагнозу получил ещё шесть химиотерапии по три дня. Закончил 13.01.10. Провели проверку (анализы, сканирование, томографию. )-Всё хорошо.Только рубцы остались на лёгких. Медики очень довольны результатами, но очень боятся рецидива и предлагают сделать пересадку стволовых клеток, для большей гарантии. Мы вроде согласны, но некоторые родственники наши опасаются, чтоб обратной реакции не было. Вы, как специалист-медик, что нам можете посоветовать?Как нам поступить? С огромным уважением , Иван.

Регистрация: 16.06.2009 Сообщений: 9 Поблагодарил(а): 0 раз Поблагодарили: 0 раз —>

не ремиссии а рецидива, я извиняюсь там ошибся

источник

Иммуногистохимия, или иммуногистохимический анализ — исследование, во время которого в образцах ткани с помощью антител выявляют определенные молекулы. Этот метод диагностики нашел широкое применение в онкологии.

Немного теории и истории. Для того чтобы обнаруживать и уничтожать чужеродные вещества, иммунная система использует особые молекулы — антитела. Они отличаются специфичностью: каждое антитело может связываться строго с определенным антигеном.

В 1941 году американский иммунолог Альберт Кунс впервые решил использовать антитела в лаборатории, чтобы «распознавать» с помощью них белки бактерий. В 1984 году биохимик из Аргентины Сезар Мильштейн получил Нобелевскую премию за то, что создал гибрид опухолевой клетки с лимфоцитом, которая могла синтезировать моноклональные антитела. После этого началось производство моноклональных антител для диагностических и лечебных целей.

В 1994 г. С. Тэйлор применил иммуногистохимический анализ, чтобы проверить 20 000 опухолей, и обнаружил, что диагнозы в половине случаев были ошибочными. Иммуногистохимия зарекомендовала себя как эффективный метод диагностики.

Иммуногистохимический анализ помогает врачам-онкологам:

Отнести злокачественную опухоль к тому или иному типу.
Выяснить, в каких генах опухолевых клеток произошли мутации, какие белки способствуют прогрессированию рака.
Выявить первичную опухоль и ее метастазы.
Определить, произошла ли злокачественная трансформация клеток.
Определить прогноз для пациента.
Разобраться, поможет ли в данном случае таргетная терапия.
Определить, чувствительны ли опухолевые клетки к химиотерапии, лучевой терапии.

Иммуногистохимия бывает прямой и непрямой. В первом случае используют один вид антител, которые должны вступить в связь с определенной молекулой-мишенью. Если молекула-мишень присутствует в ткани, и реакция произошла, опухолевая ткань окрашивается:

Чаще всего к антителу присоединяют фермент, например, пероксидазу. Этот фермент катализирует химическую реакцию, которая приводит к изменению цвета.
Иногда к антителу присоединяют флюоресцин или родамин, при этом окрашивание выявляют с помощью флюоресцентной микроскопии.
всего применяют непрямую иммуногистохимию. При этом используют два антитела. Одно соединяется с антигеном, второе — с полученным комплексом антиген-антитело. Маркер, который вызовет изменение цвета, связывают со вторым антителом.

Непрямой метод имеет некоторые преимущества:

Он обладает более высокой чувствительностью, потому что с одним первичным антителом (тем, которое связывается с белком-мишенью) может связаться несколько вторичных антител.
Исследование занимает немного времени: для того, чтобы произошла реакция, нужно примерно 3 часа.
Непрямая иммуногистохимия требует небольшого количества антител. Например, вторичное антитело, направленное на иммуноглобулины кролика, будет реагировать на любое первичное антитело «кроличьего» происхождения. Не нужно создавать много разных видов вторичных антител с окрашивающей или флуоресцентной меткой.

Для того чтобы выполнить иммуногистохимический анализ, нужно получить опухолевую ткань, то есть провести биопсию. В качестве материала можно использовать столбик ткани, полученный во время трепан-биопсии, фрагмент тканей или даже целый орган, удаленный во время операции.

Образец ткани фиксируют с помощью формальдегида (иногда используют метанол, ацетон и другие фиксаторы — это зависит от того, какой антиген нужно выявить, и реагирует ли он с теми или иными фиксаторами) и погружают в парафин. Парафинизация помогает законсервировать ткань, сохранить ее структуру на длительное время.

Затем ткань, помещенную в парафин, нарезают с помощью специального инструмента — микротома — на слои толщиной 3–5 мкм. Эти тонкие срезы помещают на стекло, покрытое, специальным клеем.

Некоторые образцы слишком чувствительны к реагентам, которые применяют во время вышеописанной процедуры. Их нельзя помещать в парафин. Такие ткани замораживают жидким азотом. Этим альтернативным методом пользуются редко, только в случае необходимости, так как у заморозки есть некоторые недостатки: она делает изображение под микроскопом не таким четким, требует специальных условий хранения образцов. Фиксацию ткани в таких случаях проводят уже после нанесения на стекло и размораживания, ацетоном или формальдегидом.

После того как срезы нанесены на стекло, из них нужно удалить весь парафин, иначе антитела не прореагируют с антигеном. Эта процедура называется депарафинизацией. Ее проводят с помощью ксилола. Затем выполняют еще некоторые подготовительные процедуры, чтобы антитела могли успешно прореагировать с нужными антигенами, и, наконец, проводят непосредственно иммуногистохимический анализ. Обработанную антителами ткань рассматривают под микроскопом, чтобы проверить, окрасилась ли она.

Количество возможных мишеней измеряется сотнями. Перед исследованием врач должен понимать, что он ищет, и использовать соответствующие антитела. В онкологии мишенями являются опухолевые маркеры — вещества, которые в здоровых клетках отсутствуют вообще или присутствуют в значительно меньшем количестве. Вот некоторые примеры:

Рецепторы к эстрогенам и прогестерону помогают идентифицировать гормонально-позитивный рак молочной железы и разобраться, помогут ли женщине гормональные препараты.
Простатспецифический антиген (ПСА) имеет значение в диагностике рака простаты.
Альфа-фетопротеин — присутствует в гепатоцеллюлярной карциноме (рак печени).
Цитокератины помогают в диагностике рака и некоторых сарком (злокачественных опухолей соединительной ткани).
Фермент CD10 (CALLA) связан с карциномой почек, лимфобластным лейкозом.

Иммуногистохимический анализ помогает изучить характеристики злокачественной опухоли, которые не могут выявить другие методы диагностики. Зачастую это играет важную роль в уточнении диагноза и назначении правильного лечения. Врач может определить, какие комбинации препаратов будут наиболее эффективны для конкретного больного, иными словами, реализуется принцип персонализированного лечения. Зачастую это помогает улучшить результаты, подобрать эффективное лечение для пациентов, которым не помогает стандартная терапия.

источник

Симптомы рака легкого отличаются вследствие различного положения и размеров опухоли у различных пациентов. Более выражены симптомы при его «центральном» расположении, то есть в тех случаях, когда рак растет вблизи крупных бронхов. В этих случаях на первое место будут выходить симптомы, связанные с полным или частичным перекрытием просвета бронха опухолью. Может появляться кашель, кровохарканье (примесь крови в мокроте), одышка. Помимо этого, могут быть симптомы, связанные с воспалением и интоксикацией, в том числе – частые и рецидивирующие воспалительные заболевания легких (например, затяжная или рецидивирующая пневмония).

В противоположность этому «периферический» рак легкого (растущий на периферии легочной ткани из конечных отделов бронхов) в течение длительного времени остается бессимптомным, некоторых пациентов беспокоят боль в грудной клетке и одышка. Эти симптомы часто встречаются и при других болезнях, которые не связаны с процессами роста опухоли, что затрудняет диагностику.

У многих пациентов рак легкого выявляется случайно, например, в ходе диагностического обследования при прохождении профилактического осмотра или диспансеризации. Окончательно подтвердить или опровергнуть наличие рака легкого может биопсия выявленного очага. Биопсия – получение материала опухоли или здоровой ткани для последующего микроскопического или молекулярно-генетического изучения.

В зависимости от расположения и размеров опухоли для выполнения биопсии могут быть использованы различные техники:

чрескожная биопсия, при которой игла вводится в опухоль снаружи (через кожу);
трансбронхиальная биопсия, при которой забор опухолевой ткани производится в ходе проведения бронхоскопии (эндоскопическое исследование дыхательных путей);
различные торакоскопические и открытые хирургические операции.

В последнее время появился еще один диагностический метод, так называемая «жидкостная» биопсия, в ходе которой проводится анализ наличия раковых клеток в обычном образце крови, получаемой из вены пациента. Этот метод имеет множество преимуществ, однако в настоящее время, наиболее часто, используется для уточняющей диагностики заболевания и, зачастую, не отменяет необходимость выполнения традиционной биопсии.

Лечение рака легкого зависит от ряда факторов, включая стадию заболевания, особенности её гистологического строения и молекулярно-генетический «портрет». Также принимается во внимание возраст пациента, его состояние здоровья, наличие сопутствующих хронических заболеваний, а также ряд других факторов.

В зависимости от выраженности распространенности опухолевого процесса рак легкого делится по стадиям. Для стадирования рака легкого используется международная классификация TNM. Для определения стадии заболевания в системе TNM врач оценивает следующие параметры опухоли:

T (tumor, опухоль) – оценка распространенности первичной опухоли.
N (nodule, узел) – оценка вовлечения в опухолевый процесс расположенных близко к опухоли лимфатических узлов. N0 означает, что при обследовании не было выявлено вовлечения близлежащих лимфатических узлов, N1-3 – обнаружено вовлечение в опухолевый процесс лимфатических узлов. Большая цифра означает большую степень распространенности опухолевого процесса;
M (metastasis, метастазы) – оценка наличия отдаленных метастазов опухоли, например, метастатического поражения печени, костей, головного мозга или других органов. M0 означает, что при обследовании не было выявлено наличия отдаленных метастазов, M1 – выявлено вовлечение других органов.

На основании «комбинации» вышеуказанных параметров определяется «группировочная» клиническая стадия заболевания, которая обозначается римскими цифрами от I до IV, где I – самая ранняя, а IV – наиболее распространенная стадия. О IV стадии рака легкого говорят, когда появляются отдаленные метастазы.

Важно! Стадия заболевания устанавливается один раз – в момент первичной диагностики заболевания и не изменяется в последующем. Это означает, что если у пациента со стадией заболевания T1aN0M0 (IA) через несколько лет после лечения появились метастазы в печени, стадия не изменится на IV, а останется прежней.

Для уточнения стадии заболевания и распространенности опухолевого процесса при раке легкого могут быть использованы различные диагностические методы, включая КТ, ПЭТ-КТ, магнитно-резонансную томографию, сцинтиграфию и другие инструментальные обследования. Это необходимо для определения наилучшей тактики дальнейшего лечения.

Перед началом лечения в обязательном порядке должно проводиться гистологическое и молекулярно-генетическое исследование образца опухолевой ткани.

Гистологическое изучение образца ткани: врач-патологоанатом (патолог, патоморфолог) при помощи микроскопа изучает строение срезов опухолевой ткани, которая была получена в ходе биопсии или после проведения хирургического лечения, и определяет её микроскопическое (гистологическое) строение. На этом этапе происходит «разделение» рака легкого на различные варианты: патолог уточняет, имеет опухоль мелкоклеточное или немелкоклеточное строение? Последний вариант, в свою очередь, разделяется на плоскоклеточный подтип, аденокарциному и другие варианты.

При оценке послеоперационного материала патолог также изучает как сильно опухоль успела распространиться – имеется ли вовлечение таких анатомических структур, как кровеносные и лимфатические сосуды, поражены ли лимфатические узлы и т.д. В случае необходимости для более точного определения строения опухолевой ткани и происхождения опухоли может быть назначено иммуногистохимическое исследование.

Молекулярно-генетическое тестирование: за последнее время в лечении рака легкого были достигнуты значительные успехи, связанные с углубленным изучением процессов роста и выживания опухолевых клеток в организме. Был обнаружен ряд «мишеней» (биомаркеров), которые могут быть использованы для так называемой целенаправленной или «таргетной» терапии (подробно обсуждено ниже). При лечении больных раком легкого в настоящее время рекомендуется определять наличие следующих молекулярно-генетических особенностей опухоли:

Активирующие мутации в гене EGFR;
Структурные перестройки (реарранжировки) в генах ALK и ROS1;
Наличие и выраженность выработки (экспрессии) белка PD-L1.
Реже используется определение наличия мутаций в генах BRAF, MET, RET, а также HER2.

Проведение дополнительных исследований может потребовать дополнительное время, но неправильное назначение таргетных препаратов может привести к ухудшению результатов лечения и навредить здоровью пациента.

источник

Анализ ИГХ при раке молочной железы означает иммуногистохимическое исследование биоптатов пораженного участка груди. Этот метод исследования представляет собой сложные взаимодействия раковых антигенов с антителами. Необходимость выполнения обследования объясняется высокой информативностью и возможностью подобрать правильный метод терапии. Врачи рассказывают, как выполняется анализ и какие данные можно узнать.

Иммуногистохимический анализ выполняется с использованием специфических маркеров для определения раковых очагов, их агрессивности, деятельности и типа клеток. Это лабораторный микроскопический метод исследования, требующий применения антител к раковым антигенам, концентрация которых повышается в случае активного злокачественного процесса.

Выявляют следующие факторы, выявляющиеся ИГХ анализом:

Her-2-neu — в нормальных клетках этот белок контролирует процесс деления, поэтому при карциноме его концентрация значительно возрастает.
Ki 67 при раке молочной железы является главным веществом, отображающие процессы пролиферации в клетках. Опухолевая ткань развивается неконтролируемо, что можно увидеть по концентрации КИ 67.
VEGF — фактор, отвечающий за развитие кровеносной сети. Злокачественное перерождение характеризуется формированием новых капилляров, что отображается на изменении этого показателя.
Определение чувствительности клеток к женским половым гормонам — имеет важное значение в лечении карциномы молочной железы.

В журнале «Современная онкология» 2017 года опубликованы сведения о полном излечении рака груди антиэстрогенными препаратами при наличии на поверхности атипических тканей специфических рецепторов к гормонам.

Иммуногистохимический анализ показан в следующих случаях:

подозрение на рак молочной железы;
определение стадии злокачественного процесса;
выявление локализации карциномы;
постановка степени распространения опухолевых очагов;
определение разновидности патологического образования;
установление глубины атипии и уровень дифференциации;
выбор метода лечения;
мониторинг эффективности противораковой терапии.

Вернуться к оглавлению

Иммуногистохимическое обследование не имеет особенных ограничений перед проведением. Необходимый материал для анализа — частичка патологической ткани. Ее берут во время тонкоигольной биопсии из предполагаемого места опухоли. При невозможности это сделать, забор осуществляют непосредственно при выполнении операции по резекции молочной железы или карциномы в границах здоровых тканей. Ткань помещают в стерильную емкость.

Иммуногистохимия выполняется с придерживанием четких шагов, чтобы свести к минимуму вероятность ошибочных результатов. Главное, что должен сделать врач-лаборант — выделить ту ткань, где есть раковые компоненты. Анализ состоит из следующих этапов:

При проведении исследования необходимо отделить часть ткани с раковыми клетками, которые и будут подвергаться анализу.

При попадании материала в лабораторию, его помещают в раствор формалина для обезжиривания.
Далее обрабатывают жидким парафином, что дает возможность оценить изменения каждого участка и выбрать те, к которым будут применены специфические маркеры.
Выборку разделяют на одинаковые участки в зависимости от количества применяемых реактивов.
Делают срезы толщиной 1 мм и фиксируют на стекле.
Проводят окрашивание материала.
В каждый участок добавляют необходимые реактивы.

Длительность проведения иммуногистохимического исследования составляет 10—14 дней. Чем больше факторов необходимо, тем дольше выполняется анализ. Ki67 при раке молочной железы очень чувствительный, поэтому требует аккуратного и тщательного подхода. Определение этого показателя имеет наиболее важное значение для дальнейшего лечения и прогноза, потому рекомендуется его делать несколько раз на протяжении применения противораковой терапии.

Фактор Her-2-neu в иммуногистохимическом обследовании здорового пациента определяется, как «отрицательный». Это значит, что в тканях молочной железы отсутствует патологическое неконтролируемое деление. Такой результат имеет благоприятный прогноз, поскольку если он определяется впервые — раковый процесс отсутствует. Определение «отрицательного» Her-2 в процессе лечения обозначает прекращение размножения опухолевых тканей и остановку прогрессирования карциномы.

Показатели Ki 67 в нормальных условиях равны нулю, при отклонении от нормы необходимо назначить дополнительное обследование.

Расшифровка нормы Ki 67 включает его полное отсутствие. Появление его в молочной железе даже в незначительной концентрации требует дополнительного обследования для подтверждения или опровержения диагноза рака. VEGF в норме составляет до 200 нмоль/л. Определение чувствительности к эстрогенам выполняется в случае подтверждения рака молочной железы.

Доктор-онколог Н. А. Савелов в своем докладе описывает основные проблемы диагностики при ИГХ рака молочной железы и предлагает методы их устранения (https://www.youtube.com/watch?time_continue=1188&v=zrxNYaQquMI)

Индекс изменения фактора Ki 67 определяется следующим:

«Положительный» Her-2-neu иммуногистохимического обследования определяется в «+». 3 плюса означает подтверждение наличия опухоли в молочной железе, 2 — требует применения дополнительных методов диагностики для постановки диагноза. Показатель VEGF от 220 до 1060 нмоль/л говорит об активном кровоснабжении опухоли, сильно развитой капиллярной сети. Если рак не имеет рецепторов к эстрогену, это свидетельствует о значительной атипичности тканей и требует применения агрессивных методов терапии.

источник

Важнейшим пунктом при диагностике раковых заболеваний является иммуногистохимическое исследование. Ежедневно в организм человека проникают микроорганизмы, способные запустить развитие патологического процесса. Защитные силы противостоят этому, образуя антитела. Эта реакция и легла в основу создания ИГХ-исследования.

Данный способ диагностики раковых заболеваний является наиболее современным и достоверным. В процессе развития опухолевого процесса образуются чужеродные организму белки – антигены. В это же время иммунная система вырабатывает антитела, главная цель которых – предотвращение размножения патогенных микроорганизмов.

Задачей иммуногистохимического исследования является своевременное выявление раковых клеток. Для этого биологический материал пациента обрабатывается множеством антител, после чего тщательно изучается под микроскопом. Если данные белковые соединения свяжутся с опухолевыми клетками, будет визуализироваться их свечение. Возникновение эффекта флюоресценции и свидетельствует о наличии в организме раковых клеток.

На сегодняшний день в распоряжении специалистов, осуществляющих ИГХ-исследование, имеются практически все антитела к различным видам опухолей, что служит залогом получения достоверных результатов.

Современный вид диагностики позволяет определить:

распространение опухолевого процесса;
скорость роста злокачественных новообразований;
вид опухоли;
источник метастазов;
уровень злокачественности.

Кроме того, с помощью иммуногистохимического исследования может оцениваться степень эффективности лечения раковых заболеваний.

С помощью данного способа существует возможность изучения любых тканей человеческого организма. Главным основанием для назначения иммуногистохимического исследования является подозрение о наличии злокачественного образования.

В этом случае метод используется для:

определения вида опухоли и области её локализации;
обнаружения метастазов;
оценки активности опухолевого процесса;
выявления патологических микроорганизмов.

Также анализ эффективен при проблемах с зачатием.

Иммуногистохимическое исследование эндометрия показано при:

бесплодии;
заболеваниях матки;
наличии патологий в органах репродуктивной системы;
невынашивании беременности;
хронических заболеваниях эндометрия.

Кроме того, ИГХ-исследование назначается пациенткам, у которых не наступает беременность даже после нескольких попыток экстракорпорального оплодотворения. Метод позволяет определить, имеются ли в организме клетки, снижающие вероятность зачатия.

Противопоказаний к ИГХ-исследованию не существует. Единственным фактором, из-за которого невозможно провести анализ, является непреодолимая сложность при заборе биоматериала пациента.

В первую очередь методом биопсии получают образец ткани больного. Реже забор материала осуществляется в процессе эндоскопического обследования или хирургического вмешательства. Способ получения образца зависит от вида опухоли и её локализации.

Важным нюансом является то, что забор материала при первичном обследовании должен осуществляться до начала лечения. В противном случае результаты исследования могут быть искажены.

После забора биоматериала его помещают в формалин и отправляют в лабораторию, где он подвергается следующей обработке:

Образец ткани обезжиривается и заливается парафином. В данном виде биологический материал может храниться очень долго, за счёт чего ИГХ-исследование может быть проведено повторно.
С образца собирают несколько тонких срезов и перемещают их на специальные стёкла.
На них биоматериал окрашивается растворами различных антител. На данном этапе может применяться как малая панель, так и большая. В первом случае изучаются реакции после использования 5 видов антител, во втором – до нескольких десятков.
В процессе иммуногистохимического исследования при раке любого органа появляется эффект флюоресценции, что даёт возможность специалисту определить вид злокачественных клеток.

Как правило, заключение готово через 7–15 дней. Срок зависит от вида используемой панели (малой или большой). Расширенный способ занимает больше времени.

Изучением срезов биоматериала занимается патологоанатом, имеющий знания и навыки (подтверждённые официальным документом), необходимые для проведения анализа.

При интерпретации результатов особое внимание обращается на показатель Ki-67. Именно он предоставляет информацию о степени злокачественности процесса. Например, если результат показателя после проведения иммуногистохимического исследования при раке молочной железы составляет не более 15%, считается, что прогноз более чем благоприятный. Уровень в 30% свидетельствует об активности опухолевого процесса, т.е. о быстрой скорости его развития. Как правило, она останавливается после курса химиотерапии.

По некоторым статистическим данным, если Ki-67 составляет менее 10%, итог заболевания будет благоприятным (в 95% случаев). Отметка в 90% и выше означает почти 100%-ный летальный исход.

Кроме показателя злокачественности, в заключении указываются:

антитела, к которым выявлено сходство (тропность);
вид раковых клеток, их количественное значение.

Важно понимать, что точный диагноз ставится после получения и изучения информации, собранной посредством всех проведённых диагностических процедур. Несмотря на то, что ИГХ-анализ считается наиболее информативным методом по сравнению с гистологией, иногда необходимо использовать оба способа. Расшифровкой иммуногистохимического исследования занимается исключительно онколог.

В современной медицине особое внимание уделяется диагностике раковых заболеваний. Наиболее современным и информативным методом считается иммуногистохимическое исследование. С его помощью выявляется не только наличие раковых клеток, но и определяется их вид и скорость развития злокачественного процесса. Кроме того, на основании результатов производится оценка эффективности назначенного лечения.

источник

Определение перестройки гена ALK при раке легкого методом ИГХ – исследование гистологических препаратов биопсийного материала рака легкого, проводимое с использованием меченных флюоресцирующими веществами антител, которое позволяет выявить наличие в опухолевых клетках продукта экспрессии мутированного гена, ответственного за злокачественную трансформацию.

Определение транслокации гена ALK (иммуногистохимический анализ).

ALK Mutation (Gene Rearrangement), EML4-ALK Fusion Protein, ALK (Anaplastic Lymphoma Receptor Tyrosine Kinase) Gene Rearrangement, ALK Gene Fusion.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Образец ткани, образец ткани в парафиновом блоке.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Специальной подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

Современные успехи в лечении онкологических заболеваний во многом связаны с обнаружением молекулярных механизмов возникновения и развития злокачественных новообразований, отличающих их от клеток нормальных тканей, и появлением лекарственных препаратов, способных воздействовать на них. Такие лекарства называются таргетными, то есть действующими на определенную «цель» в опухолевой клетке. Они обладают хорошим профилем безопасности, так как в отличие от стандартной химиотерапии практически не действуют на нормальные ткани, а также характеризуются большей эффективностью. Однако назначение таргетных препаратов возможно лишь при обнаружении в опухолевых клетках специфической мишени для их действия. Сравнительно часто патологическим механизмом злокачественной трансформации клеток является нарушение в так называемых сигнальных путях. Сигнальный путь представляет собой цепь, по которой активирующий сигнал от рецептора, располагающегося на поверхности клетки, через несколько внутриклеточных белков передается в ядро. Такие внутриклеточные белки называются тирозинкиназами, их основная роль – передача сигнала от активированного рецептора путем биохимических реакций.

При немелкоклеточном раке легкого в некоторых случаях причиной злокачественной трансформации клеток может быть перестройка в гене, кодирующем одну из рецепторных тирозинкиназ – ALK (anaplastic lymphoma receptor tyrosine kinase – киназа анапластической лимфомы). В норме активация рецептора сигнального пути, в котором участвует ALK, приводит к пролиферации клеток. В гене ALK зашифрована аминокислотная последовательность как активной части фермента, так и белка-регулятора, который контролирует активность тирозинкиназы. Перестройка в гене приводит к тому, что шифр белка регулятора заменяется на другой – чаще всего кодирующий белок EML4. В результате образуется химерный – сливной – ген EML4-ALK. Белок EML4 способен облегчать белковые взаимодействия, поэтому вследствие генной перестройки ALK попадает под регулирующее влияние EML4, становится независимой от возбуждения своих рецепторов и постоянно посылает пролиферативные сигналы, что приводит к неконтролируемому делению клеток.

Транслокации EML4-ALK в клетках рака легкого были впервые выявлены в 2007 году, а через три года появился таргетный препарат, способный ингибировать активность тирозинкиназы ALK – кризотиниб (ксалкори). Встречаемость перестройки EML4-ALK при раке легкого, по разным данным, колеблется от 3 до 13 %.

Наличие в опухолевых клетках химерной тирозинкиназы может быть выявлено при иммуногистохимическом исследовании биоптата или операционного материала опухоли. Для анализа из готового парафинового блока с помощью специального микроножа нарезают тончайшие срезы, которые затем прикрепляют к предметным стеклам и красят рутинными красителями, чтобы было возможно отличить клетки друг от друга и от межклеточного вещества. Затем срезы на стеклах окрашиваются раствором антител, меченных флюоресцирующими метками, специфичными к мутированной ALK. Если в опухолевой клетке присутствует искомый фермент, антитела связываются с ним и при просмотре стекла под специальным микроскопом можно увидеть флюоресценцию, что будет свидетельствовать о положительном результате теста.

Для чего используется исследование?

Для выявления показаний к терапии ингибитором ALK кризотинибом.

Когда назначается исследование?

У пациентов с метастатическим или местнораспространенным немелкоклеточным раком легкого с отсутствием мутации гена EGFR.

Результат выдается с заключением врача.

Положительный результат – обнаружение флюоресценции, свидетельствующее о наличии в клетках продукта экспрессии мутированного гена;

отрицательный результат – отсутствие флюоресценции.

Что может влиять на результат?

Качество предоставленных парафиновых блоков, опыт и квалификация врача-патоморфолога, так как иммуногистохимический метод не в полной мере стандартизирован и оценка его результатов в некоторой степени субъективна.

Несмотря на отсутствие транслокации ALK, пациентам может быть показана терапия кризотинибом – при выявлении транслокации гена ROS1, в ходе которой образуется тирозинкиназа, родственная ALK. Исследование проводится у пациентов с немелкоклеточным раком легкого с отрицательным статусом мутаций EGFR и ALK.

Позитивный и сомнительные результаты иммуногистохимического теста на транслокацию гена ALK обязательно должны быть проверены с помощью молекулярной диагностики – FISH-исследования. При этом кризотиниб может назначаться пациентам с положительным результатом иммуногистохимического исследования без ожидания результатов подтверждающего теста.

Цитологическое исследование материала, полученного при оперативном вмешательстве
Цитологическое исследование материала, полученного при эндоскопии (бронхоскопия)
Гистологическое исследование биопсийного материала
Гистологическое исследование биоптата лимфатического узла (1 узел) с использованием рутинных методик окраски
Определение мутации гена EGFR в тканях опухолей
Определение мутации гена BRAF в тканях опухолей
Определение перестройки гена ALK при раке легкого методом FISH
Определение транслокации гена ROS1 при раке легкого

источник