Анализы на скрытые инфекции методом ифа

Мазок для исследования методами микроскопии, ПИФ и ПЦР берётся из мочеиспускательного канала у мужчин и из мочеиспускательного канала, цервикального канала и влагалища у женщин. Перед сдачей мазков нужно 2-3часа не мочиться, чтобы в уретре была слизь, которая понадобится для исследования. Так как хламидии, уреаплазмы и микоплазмы являются внутриклеточными обитателями, то для исследования необходимо получить соскоб эпителия, что выполняется специальной уретральной щёточкой. В зависимости от локализации инфекции материал может браться из конъюнктивальной полости, а также для исследования методом ПЦР может использоваться первая порция мочи и сперма.

Кровь для исследования на антитела методом ИФА сдаётся из вены на голодный желудок.

Если у пациента половая инфекция находится в неактивной фазе заболевания, то её концентрация на слизистых оболочках небольшая и, следовательно, ни один из методов диагностики может не обнаружить инфекцию.

Поэтому в медицине с давних времён для обнаружения хронических форм половых инфекций, особенно трихомонад и гонококков, использовали провокации. Самыми эффективными являются провокации с использованием внутримышечного введения пирогенала или гоновакцины, а так же местные провокации с использованием нитрата серебра. При провокации инфекция активно выходит на слизистые оболочки и становится обнаружима при исследовании в течение 3 дней. Поэтому через сутки после проведения провокации в течение 3 дней берутся мазки для исследования методами микроскопии и ПИФ. Большое значение имеет увеличение в мазках лейкоцитов при проведении провокации, что может быть косвенным признаком наличия воспалительного процесса.

По ряду причин результаты методов могут не совпадать.

ПЦР и/или ПИФ положительные, а ИФА отрицательный. Такая картина наблюдается, если у пациента имеется половая инфекция, но организмом не формируется иммунный ответ в виде антител. Чаще такое случается при длительных хронических формах инфекции, когда организм свыкся с инфекцией и перестал формировать достаточное для диагностики количество антител.

ПЦР и/или ПИФ отрицательные, а ИФА положительный. Такая картина может наблюдаться, если процесс неактивный, и количество микробных тел в местах взятия мазков не очень велико, но в то же время идёт формирование антител. Возможность формирования антител и уровень титра зависит от вирулентности возбудителя и от особенности иммунной системы пациента. Так же титр антител может сохраняться в крови после лечения в течение определённого срока для каждой инфекции.

Так как все методы в небольшом количестве случаев имеют вероятность ложноположительных результатов, то диагноз является достоверным, если инфекция подтверждена, например, двумя методами. Но не всегда есть возможность подтвердить инфекцию другим методом в силу особенностей вышеперечисленных методов диагностики. Поэтому перед принятием решения о лечении учитываются такие факторы как: лечение этой же инфекции ранее, наличие инфекции у полового партнёра, наличие воспалительного процесса при обнаружении инфекции и т. д.

Необходимо понимать, что медицинские обследования, которые проводятся гинекологами и урологами не включают специальное обследование на половые инфекции. Задача на медицинских осмотрах — выявить по мазкам острые формы гонореи и трихомониаза, опасные в эпидемиологическом плане. Хронические же формы инфекции чаще остаются незамеченными.

Показания для обследования на инфекции, передающиеся половым путём, формируются при наличии воспалительного процесса в половых путях, повышении лейкоцитов в мазках, планировании беременности или беременности.

Часто половые инфекции протекают на фоне совершенно нормальных мазков и их проявление — это развитие хронического простатита, хронического эпидидимита, хронического цистита и т. д. Либо носители половых инфекций вообще не имеют каких-либо отклонений со стороны мочеполовых органов.

Если у пациента с воспалительными заболеваниями малого таза не выявлена половая инфекция, на обследование для взятия анализов на инфекции приглашают полового партнёра. В ряде случаев обнаружение инфекции у партнёра даёт возможность адекватно пролечить семейную пару от половых инфекций и тем самым значительно улучшить эффективность и сократить сроки лечения.

В отношении инфекций, передающихся половым путём, существуют стандарты лечения полового партнёра, причем независимо выявлена или нет у него данная инфекция. Практика показывает, что отсутствие лечения полового партнёра приводит в дальнейшем к рецидиву заболевания.

Относительно уреаплаз и микоплаз в настоящий момент нет рекомендаций по обязательному лечению. Поэтому решение вопроса принимается врачом индивидуально с учётом активности воспалительного процесса, сопутствующей патологии, детородного периода и т. д.

Практика, однако, показывает, что совместное лечение уреаплазмоза и микоплазмоза у обоих половых партнёров ведёт к лучшему результату лечения воспалительных процессов малого таза, несмотря на клинические рекомендации.

Важно отметить, что выявление хламидиоза, уреаплазмоза и микоплазмоза, не является сложной задачей. В то же время выявление трихомониаза, который по статистике встречается в 60-80% случаев при воспалительных заболеваниях малого таза, достаточно сложная задача. Это объясняется тем, что при хронических заболеваниях малого таза мы сталкиваемся с особенным течением трихомониаза: полиморфность простейшей; низкая концентрация микроорганизмов на слизистой уретры и влагалища; недостаточная чувствительность методов существующей диагностики. Трихомонада является резервуаром накопления для хламидий, уреаплазм, микоплазм и гонококков, способствует устойчивости этих внутриклеточных инфекций и увеличивает вероятность их передачи во время полового акта от одного партнёра к другому. Так же трихомонада защищает внутриклеточные инфекции от иммунной системы человека и антибиотиков. Именно с трихомониазом может быть связана неэффективность лечения гонореи, хламидиоза, уреамикоплазмоза, а так же хронизация данных инфекций в организме.

Кроме того, можно столкнуться с первичным выявлением микроорганизмов после лечения трихомониаза, что тоже объясняется накоплением гонококков, хламидий и уреамикоплазм в трихомонадах и высвобождение их после гибели трихомонады.

Диагностику излеченности половых инфекций рекомендуется проводить трёхкратно и желательно с провокацией. Таким образом, уменьшается вероятность того, что половая инфекция осталась в организме в скрытой форме.

Обычно первый анализ на излеченность трихомониаза и гонореи берется через 10 дней после лечения, на хламидии, уреаплазмы, микоплазмы через 1-1,5 месяца. Сроки зависят от особенностей элиминации микроорганизмов и специфических антител из организма. Последующие два обследования проводится раз в 3-4 недели.

Учитывая особенности проводимых методов диагностики и особенность трактования результатов, рекомендовано проводить обследование на половые инфекции под контролем врача, а не самостоятельно. В этом случае, врач берёт на себя ответственность за правильно проведённую диагностику и анализ полученных данных. А так же вы сможете получить подробное разъяснение по поводу полученных результатов. Получив нужную информацию относительно вашего заболевания, вы сможете сформировать правильное отношение к заболеванию. Так же немаловажно провести адекватное лечение современными препаратами с учётом ваших особенностей организма и переносимости лечения.

ПЦР: СВЕРХЧУВСТВИТЕЛЬНАЯ ДИАГНОСТИКА ИНФЕКЦИЙ

ПЦР — это метод лабораторной диагностики, направленный на выявление возбудителей инфекционных заболеваний. Трехбуквенный вариант — это аббревиатура названия «полимеразная цепная реакция». Собственно, в этом названии и отражается суть метода

Метод ПЦР был разработан в 1983 году Кэри Мюллисом, за что он был удостоен Нобелевской премии. Изначально метод использовался в основном для научных целей, но затем, разглядев его перспективность и эффективность, метод стали продвигать в практическую медицину.

За генетическую информацию в живом организме любого размера отвечает ДНК — двухспиральная дезоксирибонуклеиновая кислота, состоящая из последовательности четырех нуклеотидов, которые принято обозначать буквами А (аденин), Г (гуанин), Т (тимидин) и Ц (цитозин). Одно из основных правил генетики – правило комплементарности, то есть нуклеотиды соседних спиралей ДНК соединяются только в определеном порядке: А с Т, Г с Ц, и никак иначе. У каждого живого создания (бактерия, вирус, рыба, зверь) – своя ДНК, причем для выявления конкретного организма достаточно иметь лишь небольшой участок этого хранилища генетической информации. Некоторые виды микроорганизмов, например, вирус иммунодефицита человека, хранят генетическую информацию в другой нуклеиновой кислоте – РНК, но и ее фрагменты можно находить с помощью ПЦР. Именно на обнаружении этого небольшого, но уникального для каждого отдельного организма участка и построен принцип ПЦР.

Для каждого возбудителя создан свой специфический генетический детектор, эталонный фрагмент ДНК, который по принципу комплементарности точно обнаруживает «свой» фрагмент ДНК и запускает реакцию создания огромного количества его копий. Один цикл ПЦР длится около трех минут, количество копий растет в геометрической прогрессии. Таким образом, за несколько часов количество фрагментов увеличивается в несколько миллиардов раз.

Понятно, что теперь определить, какой возбудитель у данной конкретной инфекции, достаточно легко.

Какую же практическую выгоду получает человек, когда отправляется на поиски вредоносных микроорганизмов, вооруженный ПЦР?

• Безусловно, одно из главных достоинств — это универсальность метода. ПЦР позволяет обнаруживать любые ДНК и РНК, даже когда бессильны другие методы. Оборудование, используемое для ПЦР, стандартно, оно не зависит от того, что именно и где именно мы ищем.
• Следующий плюс — высокая специфичность. В материале, направленном на исследование, определяется уникальная последовательность нуклеотидов, характерная только для конкретного возбудителя. Таким образом, можно говорить, что специфичность метода достигает 100%. Кроме того, это позволяет одновременно, в одном и том же материале, проводить поиск нескольких возбудителей без какого-либо ущерба для качества ответа.
• Метод ПЦР обладает высочайшей чувствительностью – мы уже говорили о том, что возможно найти всего один фрагмент генетического материала возбудителя.
• Несомненное преимущество метода – оперативность. Постановка реакции занимает несколько часов, таким образом, вся диагностика, от момента сдачи материала на анализ до получения результата, отнимет всего один день.
• При помощи ПЦР определяют возбудителя, а не реакцию на его внедрение со стороны организма. Таким образом, появилась возможность точно диагностировать заболевание еще в инкубационном периоде, когда нет никаких клинических или лабораторных признаков болезни. Когда нужно делать?

Когда следует бежать в лабораторию, чтобы проанализировать итоги вашего летнего отпуска?

Специалисты советуют делать это в следующих случаях: выделения, зуд, чувство жжения в области половых органов, резко изменившийся запах от половых органов, дискомфорт при мочеиспускании, необычный характер выделений (цвет, количество, консистенция), случайный половой контакт без применения презерватива. Безусловно, ПЦР — мощный и эффективный диагностический инструмент, позволяющий быстро и точно найти возбудителей очень многих инфекций. Чаще всего его используют для диагностики именно заболеваний, передающихся половым путем.

В любом случае нельзя ограничиваться только одним методом. Лучше всего комбинировать различные методы исследования – помимо определения самого возбудителя методом ПЦР? необходимо оценивать и иммунный ответ организма, который определяется традиционными серологическими методами, например — ИФА.

ИССЛЕДОВАНИЕ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ МЕТОДОМ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА (ИФА)

В основе иммуноферментного анализа (ИФА) лежит иммунная реакция антигена с антителом.

Для исследования методом ИФА используется кровь из вены, полученная натощак.

Иммуно-ферментный анализ (ИФА) применяется в диагностике урогенитальных инфекций для выявления наличия в сыворотке крови специфических иммуноглобулинов (Ig или антител) — белков, вырабатываемых клетками иммунной системы, направленных на борьбу с внедрившимся в организм инфекционным агентом. Связываясь с микробной клеткой или продуктами ее жизнедеятельности, иммуноглобулины нейтрализуют их и способствуют их элиминации. Таким образом, иммуноглобулины представляют собой суть гуморального иммунитета, то есть иммунитета, обусловленного субстанциями, содержащимися в жидкостях тела, в отличие от клеточного иммунитета, связанного с присутствием специальных клеток иммунной системы.

На каждый вид (и даже подвид) возбудителя вырабатываются свои определенные антитела, которые, как правило, не связываются ни с каким другим инфекционным агентом. Благодаря этому определение антител обеспечивает достаточно высокую специфичность анализа. Из пяти классов Ig в диагностике инфекционных заболеваний чаще всего используются Ig трех типов А, M и G. Прежде всего нужно помнить, что существует некоторый промежуток времени с момента внедрения инфекционного агента в организм и до момента появления антител в сыворотке крови — это так называемый серонегативный период. Для различных инфекций и отдельных индивидуумов он может быть неодинаков, в среднем же для возбудителей урогенитальных заболеваний он составляет 1-4 недели.

РАСХОЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИФА И ПЦР

Случается, что результаты ПЦР и ИФА-диагностики могут не совпадать. Обычно это происходит вследствие нескольких причин:

• «Иммунологический след» — «след» от уже перенесенной инфекции. В ответ на внедрение инфекции организм начинает вырабатывать антитела, в частности, антитела класса IgG. Эти антитела «улавливает» ИФА-анализ. Метод ПЦР реагирует только на наличие молекул ДНК инфекции в организме. В такой ситуации ПЦР-анализ дает отрицательный результат, а ИФА — положительный. При чем в связи с индивидуальными особенностями иммунной системы положительный результат ИФА-диагностики, вызванный повышенным содержанием антител, может сохраняться несколько месяцев и даже лет после полного выздоровления.
• Разница в оборудовании для проведения диагностики. Получение положительного результата ИФА и ПЦР — отрицательного, может быть вызвано использованием особых тест-систем в ИФА-анализе, которые выявляют все виды бактерий, в том числе те, которые в определенном количеств в норме содержатся в организме человека. Тест-система, используемая в ПЦР-анализе, может быть основана только на определении особого вида болезнетворных бактерий. Например, тест-система для ИФА-диагностики настроена на выявление всех видов хламидий: С. Pneumonia, C. Pecorum, C. Psittaci, а в проведении ПЦР-анализа может быть использована тест-система, выявляющая только С. Trachomatis. Вот почему ИФА-анализ на С. Pneumonia будет положительным, а ПЦР — отрицательным.
• Разница в используемом материале.

Материал для ПЦР получают из места предполагаемой локализации инфекции. Для ИФА-диагностики разницы в месте нет, поскольку ИФА «реагирует» на антитела, которые вырабатываются при инфекционном процессе любой локализации. Как результат — ПЦР-диагностика дает отрицательный, а ИФА — положительный результат. Например, хламидии могут локализироваться в разных местах организма. Вызвав хронический сальпингит, проведенный в области шейки матки анализ ПЦР хламидии не обнаружит. Но ИФА-диагностика все равно выявит выработку антител, сопровождающую инфекционный процесс.

Хронические инфекционные заболевания могут стать причиной разницы в результатах ИФА и ПЦР-диагностики. При этом зачастую ПЦР дает положительный, а ИФА — отрицательный результат. Уставшая от хронического инфекционного процесса иммунная система может «не показать» повышенный уровень антител к инфекции. Подобное может наблюдать врач-лаборант в том случае, если инфекция «свежая», т. е. даже при наличии определенных симптомов уровень антител класса IgG в крови не превысит норму, поскольку они еще не начали вырабатываться. Для половых инфекций подобный период «молчания» ИФА-диагностики может достигать двух недель.

Положительный результат на хламидии не всегда свидетельствует о диагнозе хламидиоз. Присутствие в организме микроплазмы или уреаплазмы может исказить результат исследований на хламидии. Для исключения ошибки приведем расшифровку показаний, соответствующие норме. Рассмотрим распространенные методы ПЦР и ИФА и особенности каждого из них.

Нередко по результатам анализов ставят неверный диагноз на хламидиоз. Если назначено лечение у женщин при беременности, то необходимо быть уверенным в результате, чтобы он не стал ложноположительным или ложноотрицательным. Важно понимать, как сдавать и учитывать особенности забора биоматериалов у женщин.

Каждый тест имеет свои плюсы и недостатки для определения заболевания. Они подходят для определения как хламидии, так и уреаплазмы. А также имеются общие требования для прохождения тестов. Когда необходимо проходить лабораторные исследования биоматериалов? Можно указать рядовые случаи, которые приводят к врачу и требуют сдавать анализы:

• Если пара планирует беременность или имеет неудачные её попытки. При внезапных выкидышах у беременных. Бесплодие у женщин. Исследуют на хламидии и уреаплазму.
• Снижение потенции у мужчин, специфические выделения из уретры, воспаление мочеполовой системы, простатит.
• Воспаления во влагалище у женщин, матки, яичников. Выделения, зуд и жжение, цистит и боли внизу живота, уретрит.
• Незащищенные половые контакты.
• Недомогания у детей, если родители уже болели хламидиозом в основном это касается женщин.
• Наличие крови в моче или сперме.
• Недомогания в лёгких: непрекращающийся кашель. При контактах с заболевшими пневмонией.

Распространенными методами диагностики заболеваний, передающихся через половые контакты стали мазок, метод ПЦР, ИФА и РИФ.

Исследование ПЦР (полимеразная цепная реакция) в отличие от ИФА (имунноферментный анализ) является самым точным методом определения инфекций в организме не требующий специальной подготовки. Достоинство заключается в возможности диагностировать увеличенный участок ДНК возбудителей до нескольких сотен раз. Точность, предоставляемая этим методом, позволяет обнаружить в исследуемом биоматериале одиночную ДНК.

При проведении процесса исследования по необходимым правилам позволит избежать ошибок и ложноположительных показаний. Если какой-нибудь анализ на хламидии даст положительный результат, то необходим второй способ исследования для подтверждения показаний и определения вида инфекции. Отрицательный тест будет свидетельством отсутствия инфекции.

Распространённая область проведения ПЦР приходится на выявление возбудителей заболеваний, передающихся при половых контактах. Проведение диагностики по симптомам может быть рационально только при продолжительном присутствии хламидий в организме человека. В первые месяцы заражения болезнь проходит бессимптомно. Методом цепной реакции можно выявить болезнь в первый же день и вовремя пройти лечение. Многие люди не обращаются за помощью, приняв решение бороться с проблемами в одиночку.

Заболевание прогрессирует, потому как не определен главный виновник недомогания. Используемые препараты лишь приглушают симптомы на время, которые спустя несколько лет приводят к серьёзным заболеваниям. Прогрессирует хламидиоз в периоды ослабления организма: простуды, при стрессах, отравлениях и др. На без того нелёгкое положение, вызванное такой ситуацией, накладывается ещё и хламидиоз. Организм ослабляется вдвойне и вырастает шанс получить неизлечимое заболевание.

Для диагностики этим методом берут анализ крови пациента, мочи или мокроты. Для проведения исследований половых инфекций хламидии и уреаплазмы берут анализ соскобов уретры как у женщин, так и у мужчин. Мазок берут иногда из цервикального канала. Эти анализы проводят по истечении суток после полового контакта. Преимущество способа ПЦР заключается в возможности выявления скрытых инфекций с большой точность 90–95%. Он проводится в качестве подтверждения уже сданных анализов.

Методом ПЦР пользуются для установления вида возбудителя не только хламидиоза, но и других микроорганизмов: ВИЧ, гепатита, туберкулёза и желудочно-кишечных инфекций, папилломы, герпеса. При проведении анализа ПЦР подготовка организма аналогична взятию крови из вены. В расшифровке анализа указывают два варианта отрицательно или положительно:

• Отрицательный результат показывает, что в биоматериале антител к возбудителю не обнаружено и можно с уверенностью сказать: «заражения не произошло». Но если не прошли ещё сутки после появления хламидий антитела могут не успеть выработаться и отрицательный анализ будет ошибочным. Поэтому проводят дополнительный способ исследований.
• Положительный указывает на присутствие инфекции. Показывает какой именно тип обнаружен.

Метод ПЦР позволяет с высокой точностью определить наличие инфекций и вид микроорганизма. Позволяет избежать ложноположительных и ложноотрицательных результатов. И если способом ИФА микроорганизмов может быть не обнаружен, то полимеразной цепной реакцией будет выявлено.

Этот способ исследования основан на количественном подсчете антител возбудителей в биоматериале и сравнение результата с нормой. Не требует сложной аппаратуры и радиоактивных соединений, поэтому метод относят к экономичным. Безопасность и простота ИФА послужила наибольшим распространением при исследовании биоматериалов на хламидии.

Преимуществом метода является возможность определения стадии заболевания, которую определяют виды антител IgM, IgA и IgG. Полученные отрицательные значения одного вида хламидий и положительных других определяют 4 стадии болезни: острую IgM, прогрессирующая IgA, хроническая IgG и этап выздоровления IgG+IgM.

Рассмотрим количественные соотношения антител IgA, IgM и IgG при разных стадиях заболевания:

Повторный анализ проводят на определение класса IgG. При выявлении IgG и отсутствии IgM_IgA — делают вывод о наличии иммунитета к хламидиям. Обнаружено IgM, а IgG_IgA отрицательно — наблюдается обострение заболевания. Положительные значения всех трех классов IgM_IgA_IgG — говорит о хроническом протекании инфекции. Антитела IgG могут оставаться в организме в течение нескольких лет. Рассмотрели возможную расшифровку результата метода ИФА крови на хламидии.

Применяют ИФА для определения не только хламидиоза, но и следующих видов:

• определение аллергий различного вида;
• диагностирование иммунодефицита;
• определение всех видов инфекций;
• для обнаружения вирусов.

Отличительные черты ПЦР и ИФА:

• Первый способ дорогостоящий и требует сложной аппаратуры.
• Второй требует навыков проведения исследования.
• ИФА дает количественную оценку результата и сравнение его с нормой.
• ПЦР самый точный метод.
• Первый требует длительного ожидания результата анализа.
• ИФА имеет возможность ложноотрицательных или ложноположительных показаний, а ПЦР этого недостатка лишён.

Длительное присутствие хламидий в организме существенно подрывает здоровье человека:

• Возможны проявления иммунных осложнений.
• Возрастает вероятность приобрести аллергические реакции на обычные вещи.
• Распространены случаи заболеваний склерозом или болезнью Крона.
• Возможен переход полового хламидиоза в бытовое заражение. При таком исходе близкие люди могут заразиться воздушно-капельным путём. Он переходит на глаза и легкие и результат его действия приводит к бронхиальной астме и конъюнктивиту.
• Недомогание охватывает весь организм. Снижается общий тонус, появляется повышенная потливость, наблюдаются высыпания на коже в различных частях тела. Человек пытается лечить видимые проблемы, а необходимо лечение хламидиоза.
• Постоянный насморк и температура служат признаком снижения иммунитета. Провериться на хламидии просто необходимо.
• Наблюдается через несколько недель хламидиоза развитие синдрома Рейтера. Симптомы этого недуга заключаются в раздражении глаз, боли при мочеиспускании и болевые ощущения в суставах.

Хламидиоз особо опасен у женщин при беременности. Самолечение в таком состоянии преступно, ведь снижение иммунных возможностей организма грозит прерыванием беременности. Плод развивается с отклонениями и ребёнок может родиться недоразвитым или раньше срока. Лечение антибиотиками не проводят в начальные месяцы, когда плод ещё формируется. В это время женщина испытывает дополнительные нагрузки и ребёнок недополучает полезные вещества.

Поэтому рекомендуется перед планированием беременности пройти полное обследование на инфекции обоим партнёрам и при необходимости пройти лечение. Заражение плода возможно только через кровь и происходит во время родов. Для лечения во время беременности назначают препараты в составе которых имеется азитромицин. К таким относятся Сумамед или российский аналог Азитрокс и Азитромицин.

Перед проведением лабораторных исследований необходимо исключить влияние на результат некоторых факторов:

• Приём алкоголя необходимо прекратить минимум за сутки до анализа. Он является сильным провокатором и если ранее было пройдено лечение, то результат придется пересдавать.
• Лекарственные препараты исказят количественные показатели методов. Антибиотики могут скрыть проявления одиночных возбудителей некоторыми методами.
• Если перед анализом было воздействие медицинских аппаратов на организм, то сдавать на следующий день. Исключить физиолечение и различные обследования: УЗИ, МРТ и др.
• Проходить обследование рекомендуют натощак после сна в определенное время с 8 до 14 часов.
• После прохождения лечения пересдавайте тем же методом в той лаборатории, в которой обнаружили хламидии.

По одному виду из рассматриваемых методов судить о хламидиозе невозможно. Один установит стадию заболевания, а второй послужит подтверждением присутствия инфекции и установит вид микроорганизма. При диагностике симптомов у женщин при беременности необходимы точные подтверждения заражения. Цена ошибки в анализах может стоить жизни будущего ребёнка. Рекомендуется сдавать несколько видов анализов если есть симптомы или имелись контакты с человеком,ранее имевшим хламидии.

источник

ИФА и ПЦР — два диагностических метода, относящихся к молекулярной биологии. Данные виды исследований биологического материала принадлежат к самым достоверным и быстрым анализам. А поэтому пользуются наибольшей популярностью, как у сотрудников лаборатории, так и у пациентов. Для выяснения отличительных особенностей методов ИФА и ПЦР понадобится изучить суть каждого исследования. Благодаря чему станет очевидным, какой диагностический метод предпочесть ПЦР или ИФА, что лучше для выявления того или иного заболевания.

Исследование при помощи полимеразной цепной реакции относится к количественным анализам. Достоинством диагностики посредством ПЦР является тот факт, что лаборант может выявить и распознать даже одиночную ДНК возбудителя. А также возможность исследовать увеличенный ДНК участок до нескольких десятков или даже сотен раз.

Преимущества диагностики с использованием полимеразных цепных реакций:

• Высочайшая специфичность.
• Высокая чувствительность.
• Определение численности возбудителей инфекции.
• Установление типа агрессивного антигена.
• Обнаружение одновременно нескольких видов патогенов.
• Отслеживание результативности медикаментозной терапии.
• Скорость получения результатов исследования с применением ПЦР (от нескольких часов до суток).

Исследования путем полимеразных цепных реакций эффективно в отношении всех без исключения возбудителей инфекции. Но есть некоторые разделы медицины, где без ПЦР не обходится постановка практически ни одного заключения. Речь идет о диагностировании инфекций, полученных половым путем.

Исследование посредством ПЦР особенно эффективно для постановки диагноза следующих заболеваний:

• Урогенитальные инфекционные процессы.
• Гепатиты различных типов.
• ВИЧ-инфекции и стадии СПИД.
• Папилломы вируса человека.
• Туберкулез.
• Сальмонеллез.
• Дифтерия.
• Хеликобактериоз и другие инфекции.

Благодаря полимеразной цепной реакции, появилась возможность выявлять инфекции, находящиеся в латентной или хронической форме. ПЦР анализ обнаруживает возбудителя инфекционного процесса на стадии, когда еще нет симптомов. Достоверность ПЦР метода самая высокая — от 99 до 100%.

Иммуноферментное исследование является, прежде всего, качественным анализом. Но с течением времени и усовершенствованием технологий, благодаря иммуноферментному анализу, стало возможным определять, кроме наличия или отсутствия патологических изменений в организме, вызванных конкретным возбудителем, вдобавок количество инфекционных агентов. Исследование при помощи ИФА применяется еще для выявления разнообразных онкомаркеров и стадий онкологического процесса.

А также к иммуноферментному исследованию прибегают для диагностирования заболеваний эндокринной системы и установления уровня гормонов, отвечающих за то или иное заболевание.

Иммуноферментный анализ представляет собой одно из интенсивно развивающихся течений синтетической энзимологии. ИФА сформирован на избирательном отклике специфических иммунологических взаимодействий между антигеном и антителом. Установление образовавшегося комплекса антиген-антитело выполняют с использованием особого фермента, который служит в качестве метки, регистрирующей сигнал взаимодействия.

Преимущества ИФА при диагностике патологических процессов:

• Специфичность иммуноферментного анализа на высоком уровне.
• Достаточная простота и чувствительность метода ИФА.
• Высокая каталитическая активность, способствующая выявлению метки во время реакции антиген-антитело при минимальной концентрации возбудителя.
• Стабильность при образовании комплексов антиген-антитело.

Процесс «узнавания» анализируемого комплекса чувствительным к нему иммуноглобулином осуществляется в количественном соответствии. Используется два подхода для количественной оценки анализируемых иммунных комплексов. Первая — это определение концентрации образовавшихся иммунных комплексов. А вторая — измерение концентрации не вступивших в реакцию антител.

Иммунологический метод диагностики нацелен на обнаружение иммуноглобулинов трех классов:

1. Антитела (ИГ) М.
2. Антитела (ИГ) А.
3. Антитела (ИГ) G.

Сначала в организме человека в течение первых 10–15 суток появляются иммуноглобулины типа М. Далее, в ходе инфекционного процесса, к первым присоединяются антитела типа А. В более запущенных стадиях заболевания, вырабатываются иммуноглобулины G. Обнаружение при помощи иммуноферментной реакции иммуноглобулинов конкретного типа, позволяет определить, на какой стадии находится патология.

После рассмотрения особенностей каждого из анализов становится ясно, что ИФА и ПЦР диагностики уникальны и эффективны каждая по-своему. Исследования ПЦР и ИФА не могут составлять конкуренцию друг другу, но способны отлично дополнять одно другое. Особенно в случаях получения сомнительных результатов, когда симптомы свидетельствуют об одном, а лабораторное исследование о противоположном.

Бывают иногда случаи, когда анализы ИФА или ПЦР срабатывают ложно отрицательно либо ложно положительно. Постановить окончательный диагноз могут помочь дополнительные исследования, такие как иммуноблотинг для иммуноферментного анализа. Что касается полимеразной цепной реакции, то этот метод более точный, ― вот и главная разница между ПЦР и ИФА. Но это не единственное свойство, которым отличается ПЦР и ИФА.

Отличия ИФА и ПЦР диагностических методов:

1. Иммуноферментный анализ позволяет установить лишь факт контакта организма с возбудителем инфекции. В то время как при помощи полимеразной цепной реакции возможно определить какой именно возбудитель проник в организм.
2. Благодаря ИФА, реально подтвердить или опровергнуть факт распространенности инфекционного процесса в любом участке организма. Метод ПЦР же предназначен для обнаружения возбудителя только в исследуемом образце, то есть биологических жидкостях, фрагментах органов и тканей, которые были предоставлены для исследования.
3. Для проведения иммуноферментного анализа пригоден абсолютно любой материал для исследования (кровь, моча, слюна, частички органов и тканей). Потому как иммуноглобулины при ответе организма на проникновение возбудителя могут находиться где угодно. Для исследования путем полимеразной цепной реакции берется тот биологический материал, где предположительно может присутствовать возбудитель.

Как видно из перечисленных особенностей каждого лабораторного исследования различия между ИФА и методом ПЦР существенные. Если коротко сформулировать, то ИФА направлен на обнаружение продуктов жизнедеятельности белков-маркеров. А ПЦР нацелен на установление конкретного возбудителя, который может относиться к группе бактерий, вирусов или грибков. Поэтому не редки случаи, когда лечащий врач может назначить одновременно оба вида диагностики как ИФА, так и ПЦР. С той лишь целью, чтобы сразу получить полномасштабную клиническую картину о происходящих патологических процессах внутри организма пациента. Чаще, чем с другими патологиями, проводится одновременное исследование методом ПЦР, а также ИФА, при инфекциях, полученных половым путем (ИППП).

Теперь, если когда-нибудь станет выбор, какой вид диагностики предпочесть ПЦР либо ИФА, у человека, ознакомившегося с предложенной информацией, вопросов не возникнет. Когда речь идет о здоровье, дабы не допустить развития инфекционного процесса до неизлечимой стадии. Лучше сделать полное обследование, чтобы обнаружить инфекцию как можно раньше и провести своевременное лечение. Либо полностью опровергнуть присутствие какого-либо возбудителя и, что называется, «спать спокойно».

источник