Анализ на гепатит с результат неопределенный

Болезни печени, выявить которые на ранней стадии практически невозможно, представляют особенную опасность. Такие тяжелые недуги, как гепатит С, могут привести к печеночной недостаточности, циррозу, раку. Чтобы этого не произошло, желательно распознать заболевание как можно раньше, пройти диагностику и приступить к лечению. К сожалению, выявить ВГС на начальном этапе болезни удается немногим, большинство носителей вируса узнают об инфицировании, когда «ласковый убийца» уже успел поразить печень. Несмотря на высокий уровень развития современной медицины, диагностика гепатита С не всегда дает точный результат. Распространены случаи, когда гепатолог ставит пациенту ложноположительный диагноз.

Симптомы, появляющиеся по истечении инкубационного периода болезни, не всегда однозначны. Тошнота, утомляемость, бессонница, нарушения в работе ЖКТ, снижение веса могут свидетельствовать и других недугах. Тем не менее все они являются веским поводом обратиться к гепатологу. Если есть подозрение на гепатит С, врач обязательно назначит диагностику.

Отрицательный результат говорит об отсутствии вируса, положительный – об инфицировании. Однако даже выявление антител в крови не всегда говорит о наличии заболевания. Обнаруженные антигены могли быть образованы в результате реакции иммунитета на другую инфекцию. Кроме того, антитела к вирусу гепатита С сохраняются в крови в течение 10 лет, на момент диагностики недуг мог быть побежден.

Причиной ложноположительного диагноза могут быть внешние и внутренние факторы. Анализы дают ошибочный результат в 10-15% случаев. Поэтому большинству пациентов не обойтись без дополнительной диагностики, способной с более высокой точностью подтвердить наличие HCV-инфекции. Эффективным в данном случае считается метод ПЦР. Он позволяет не только подтвердить наличие вируса в крови, но и определить степень его активности и штамм. Эта информация необходима гепатологу для выбора оптимальной методики лечения и назначения лекарственных препаратов.

Ложноположительный результат возможен при аутоиммунных заболеваниях, острых тяжелых инфекциях, злокачественных новообразованиях и других состояниях, которые сопровождаются стимуляцией активности гуморального иммунитета. Анализ обычно оказывается неверным в результате беременности, онкологических процессов, аутоиммунного гепатита. Кроме того, причиной недостоверной диагностики становится прием медикаментов, стимулирующих иммунную систему. Не желательно сдавать анализы сразу после вакцинации против гриппа или столбняка.

Ложноположительный результат может быть спровоцирован и некоторыми внешними причинами. К ним относятся низкое качество проведения исследования, некомпетентность медперсонала, неправильная транспортировка или хранение биоматериала. Данные оказываются неточными из-за воздействия на кровь высоких температур. К сожалению, в медицинской практике бывают случаи подмены пробы. Противоречивые показатели возникают при использовании для диагностики наборов разных производителей.

Вероятность получить ложноположительные данные при диагностике гепатита С достаточно мала, однако ее наличие заставляет пациентов и врачей быть на чеку. Лучше несколько раз перепроверить показатели, чем потратить время и средства на лечение не той болезни. При возникновении малейших сомнений врач должен назначить пациенту серию тестов для дальнейшей диагностики. К наиболее точным и действенным относится ПЦР.

Для выявления инфекции HCV существует два метода – серологический и молекулярный. Первый реализуется с помощью иммуноферментного анализа, в качестве биоматериала используются плазма и сыворотка крови. Молекулярные методы позволяют определить наличие болезни в реальном времени, а также их применяют для оценки эффективности противовирусной терапии. Если вирус в крови выявлен, задача врача – определить его генотип. Сделать это нужно для прогнозирования длительности и эффективности лечения. Риск неправильного установления генотипа вируса гепатита С составляет всего лишь 3%, причинами этого могут быть способность ВГС к мутациям и низкая вирусная нагрузка.

Если в результате дополнительных тестов диагноз был подтвержден, больному следует приступить к лечению. Терапия ВГС сегодня стоит дорого, поэтому многие пациенты стараются найти альтернативный способ борьбы с недугом. Доступным и эффективным является лечение гепатита С дженериками из Индии («Софосбувир», «Даклатасвир»), купить их можно в специализированном интернет-магазине. Препараты практически не имеют побочных эффектов и позволяют справиться с недугом за 3 месяца.

Перед тем как перейти к причинам, которые влияют на ложноположительные результаты анализов, нужно сказать пару слов о самом заболевании.

Гепатит С – одно из самых серьезных инфекционных заболеваний, поражающих печень человека. Всем известно о том, что если существуют проблемы с функциональностью печени, то со временем весь организм будет давать сбои.

Существуют разные причины, когда анализ на антитела может давать слабоположительный результат на гепатит С или ложноположительный (когда инфекция в организме человека отсутствует). Такое бывает нечасто, но непременно должно учитываться во время диагностики заболевания. Для человека такая ошибка может стать причиной серьезных психологических отклонений.

В медицинской практике такой встречается у 15% случаев, из которых большинство – женщины в положении.

Объясняется это тем, что в период беременности в женском организме происходит процесс гестации. Для него являются характерными:

• формирование белков;
• изменение всего гормонального фона;
• изменение состава крови;
• повышение количества цитокинов.

Исходя из этого, несложно объяснить то, что забор крови беременной женщины является сложной задачей для однозначного результата и зачастую анализ неправильно распознает присутствие антител к инфекционным заболеваниям.

Ложноположительный результат возможен и в тех случаях, когда в организме присутствует другой вирус. Это зависит от особенностей иммунитета организма, который должен реагировать на проникновение болезнетворных вирусов. Ситуацию также осложняет прием препаратов иммунодепрессантов. Гепатит С и его дифдиагностика связаны не в последнюю очередь с различными возможностями противовирусной терапии.

Общепризнанными являются следующие причины, способные вызывать ложные результаты:

• наличие в организме человека рибонуклеопротеинов;
• беременность;
• тяжелые формы гриппа,
• инфекция верхних дыхательных путей в острой форме;
• наличие ретровирусов;
• вакцинация БЦЖ, гепатита В или гриппа, сделанная недавно;
• недавно проведенная терапия Альфа-Интерфероном;
• высокий уровень билирубина;
• наличие липемической сыворотки;
• особенности иммунитета организма.

Необходимо знать, что это за слабоположительный результат на гепатит С, и нуждается ли он в перепроверке. Поскольку вирусный гепатит С считается одним из самых тяжелых заболеваний печени, то положительный результат люди всегда воспринимают как окончательный приговор.

Возможность инфицирования гепатитом С определяется путем проведения анализа на антитела к вирусу. Для этого в лабораториях медицинских учреждений изучается венозная кровь пациента, и если в результате такого исследования выявляется присутствие в определенной концентрации антител вируса, то это является основным показателем для диагностирования наличия заболевания в организме.

Стоит отметить, что положительный (с антителами гепатита С) результат анализа не всегда является достоверным подтверждением инфицирования организма, ведь он показывает не наличие вируса, а реакцию, которая возникает после контакта с ним. Наличие антител может наблюдаться и у неинфицированного человека, а их отсутствие вполне возможно у тех, кто болен, но чей организм антитела еще не успел выработать. Поэтому правильными решениями в данной ситуации будут дополнительное обследование, повторная сдача анализов и диагностическая помощь квалифицированных специалистов: инфекциониста и гепатолога.

Если изначально в пробах крови пациента выявлены положительные антитела гепатита С, то следующим шагом будет их качественное определение. Существует 2 класса антител вируса и каждый из них свидетельствует о следующих формах и фазах течения болезни:

• антитела класса Igm проявляются в том случае, если недуг протекает в активной фазе;
• антитела класса IgG. Их наличие говорит о хронической форме гепатита С или о том, что пациент ранее уже был инфицирован вирусом, и к нему было применено соответствующее лечение.

Кроме того, может быть проведен более глубокий к белкам (структурным или неструктурным) гепатита С. Он позволяет точно определить стадию заболевания, генотип вируса и степень поражения организма.

Когда в результате проведенных анализов обнаружены положительные антитела гепатита С, и специалистами подтвержден диагноз, самым главным и правильным решением будет свести к минимуму панические настроения и начать бороться с недугом, а высокоэффективные медикаменты станут залогом успешного лечения и скорого выздоровления.

К самым надежным лекарственным средствам относятся препараты Софосбувир и Даклатасвир, купить в Индии их, можно по более приемлемой стоимости, чем продукцию оригинального производства США. Сегодня в Индии производятся аналоги (дженерики) по официально проданной лицензии, что гарантирует их эффективность.

Применяются данные средства в большинстве клиник по всему миру, а высокая результативность лечения ими достигается даже у пациентов, находящихся на самых тяжелых стадиях заболевания. В преимущественном большинстве случаев больным назначается именно комплексное лечение данными препаратами.

«Hepcinat» (Софосбувир) из Индии подавляет репликацию вируса, а его распространению и заражению здоровых клеток препятствует лекарственное средство Даклатасвир.

Из статьи каждый желающий сможет узнать о том, что такое ложноположительный анализ гепатита С и что следует предпринять, если пациентом был получен такой результат.

Гепатит С – острая форма инфекционного поражения печени. Возбудителем его становится вирус HCV, который имеет множество форм и разновидностей. Данная болезнь может поразить любого гражданина. Не обошла она стороной и таких знаменитостей как: Кен Ватанабе, Анита Роддик, Диаманда Галас, Марианна Фейтфул, Дасти Хилл, Анита Палленберг, Памела Андерсон, Энтони Кидис.

Сложность диагностирования вируса состоит в том, что он может быстро мутировать. В связи с этим в современной медицине еще не выявлено лекарства, которое помогло бы полностью избавиться от вируса. Помните, что только около 20% пациентов удается полностью избавиться от данной болезни. Большинство их тех, которым был диагностирован данный вирус, приобретают статус носителя болезни. Инфекция у них не проявляется. Однако они опасны для других людей.

• во время переливания крови и перенесенных хирургических операциях;
• во время нанесения татуировок и посещения косметических салонов;
• при частом посещении стоматолога и наличии постоянных контактов с кровью;
• при наличии положительного результата на гепатит у одного из членов одной семьи.

Медики отмечают, что ранняя стадия болезни не проявляется себя никакими характерными симптомами. В связи с этим ее очень трудно выявить.

Инкубационный период гепатита С составляет от 5 месяцев и более. Далее болезнь переходит в вялотекущую стадию, которая продолжается на протяжении 10 дней. При ней у больного появляется общая слабость в организме и нарушается сон.

Переход болезни в активную стадию характеризуется потемнением у больного мочи и появлением желтых пятен на теле и глазных белках.

Затяжная стадия болезни приводит к появлению у пациента белого кала и чрезмерному увеличению печени. Помимо этого у него резко возрастает уровень билирубина в крови.

Таким образом, типичными симптомами развития у человека гепатита С являются:

• частое появление тошноты;
• наличие болевых ощущений у пациента в пищеварительной системе;
• появление нудных суставных болей;
• нарушение стула;
• появление желтушности на коже у пациента.

Многие пациенты, получая ложноположительный анализ на гепатит С, приходят в отчаяние. Этого делать не следует. Первоначально нужно проверить полученные результаты. Это связано с тем, что болезнь распространяется очень быстро и требует незамедлительного лечения.

Данный диагноз специалисты ставят тогда, когда результаты анализов положительные, но инфицированных клеток найдено не было. Причины развития этого явления могут быть разные. Опровергнуть или подтвердить результат возможно только с помощью дополнительных диагностических методов.

Диагноз могут поставить лишь специализированные врачи: при остром гепатите анализ осуществляется врачом-инфекционистом или врачом-гепатологом.

При развитии хронического гепатита диагностика проделывается врачом-гастроэнтерологом.

Для диагностики ранней стадии используется иммуноферментный метод. Он помогает определить количество антител к вирусу гепатита в организме. Благодаря чему он считается основным диагностическим методом. Примечательно, что результаты исследования человек может получить через 1 день после сдачи анализа.

Медиками все антитела подразделяются на 2 типа:

• IgM. Они обычно появляются при развитии острой формы болезни. Это происходит через 10-14 дней после проникновения инфекции. Продолжительность их жизни составляет от 3 до 5 месяцев.
• IgG. Возникает при переходе болезни в хроническую стадию. Они появляются намного позже первого типа, но продолжительность их жизни составляет от 8 до 10 лет.

Концентрация антител вируса определяется по венозной человеческой крови. Медики отмечают, что наличие в организме пациента повышенного количества антител не может точно свидетельствовать о развитии болезни. Это может быть связано с тем, что вирус был ранее излечен, а наличие антител может быть ответной реакцией организма на развитие иного инфекционного процесса. Также медиками отмечается, что антитела гепатита – очень живучие и могут сохраняться на протяжении 10 лет в организме пациента.

В том случае, если пациентом получен отрицательный результат, то это может свидетельствовать о том, что организм не имел контакта с данной инфекцией.

Положительный результат может свидетельствовать о развитии инфекции. В этом случае человеку нужно обратиться к врачу и выяснить причины развития этого явления.

Помните, что ИФА анализ не определяет наличие антител в организме за 2 недели до диагностики. Это связано с тем, что антитела еще не успели выработаться в полном объеме.

Сомнительный результат подтверждается или опровергается при помощи следующих диагностических процедур:

• Сдачи общего и биохимического анализа крови и мочи.
• При помощи определения полимеразной цепной реакции ПЦР. Он определяет наличие инфекции в организме и ее количественный состав. По полученным данным определяется дальнейшая терапия и успешность ее проведения. Однако, если концентрация вируса небольшая, то анализ будет отрицательным, но неправильным.
• При проведении УЗИ диагностики печени, селезенки, желчного пузыря и поджелудочной железы;
• Тест рекомбинантного иммуноблотинга РИБА. Он помогает не только выявить вирус, но и идентифицировать антитела, направленные против гепатита С;
• Биопсия печени, эластометрия и фибротестирование;
• Оценивается состояние щитовидной железы. По ней определяется уровень тироидных гормонов, присутствие антител к пероксидазе и болезней в соединительной ткани.

Медиками назначается данный тест при наличии следующих показаний:

• для подтверждения результатов, полученных во время ИФА исследования;
• для точного выявления гепатита С и отличия его от иных вирусов;
• для выявления стадии развития болезни;
• в качестве обеспечения контроля над лечебными процедурами, которые были ранее проведены.

Метод ПЦР также может дать ложноположительный анализ гепатита С и это обычно связано с развитием в организме пациента перекрестной инфекции. Для исключения ошибки пациенту проводиться дополнительное исследование с помощью серологических маркеров.

Согласно требованиям ВОЗ для подтверждения диагноза исследование проводиться 3 раза. Так можно получить точную информацию об уровне трансаминазы, концентрации HCV-вируса, генотипе вируса, уровне виремии в крови и развитие гистологических процессов в печени.

Важно помнить, что положительный результат на гепатит С свидетельствуют о развитии его острой вирусной и хронической форм. Также данный показатель может свидетельствовать о ранее вылеченной болезни или же о том, что пациент является переносчиком инфекции.

Медики отмечают, что ложные анализы могут быть получены по следующим причинам:

• при развитии в организме пациента аутоиммунных болезней;
• во время нарушения деятельности иммунной системы и частом употреблении препаратов, влияющих на нее;
• при употреблении иммунодепрессантов;
• во время беременности, онкологии, тяжелых инфекционных заболеваний;
• при наличии опухолевых образований как злокачественного, так и доброкачественного характера;
• во время резкого повышения уровня гепарина и криоглобулина;
• при развитии парапротеинемии и аутоиммуного гепатита;
• во время развития острых инфекций в дыхательных путях;
• при вакцинировании против гриппа, столбняка и прохождении курса альфа-интерфероновой терапии.

Важно помнить, что неверный результат получают до 15% пациентов и самые высокие показатели у беременных женщин.

Беременная женщина сдает огромное количество различных анализов. Одним из них является анализ на гепатит. Его сдают при постановке женщины на учет и на сроке больше 30 недель. Для сдачи анализа у женщины берут венозную кровь. Исследование проводится при помощи иммуноферметного анализа.

Неправильный результат может быть получен, если у беременной женщины:

• имеются нарушения в обмене веществ и инфекционные заболевания;
• развиваются гормональные и аутоиммунные заболевания;
• имеется грипп или простуда.

Для опровержения или подтверждения результата беременной женщине назначаются следующие анализы:

• исследование при помощи ПЦР и РИБА методов;
• сдача анализа на билирубин;
• проводится УЗИ диагностика брюшной полости. Она помогает выявить наличие патологий в печени.

Частый вопрос от женщин к врачу: « Почему во время вынашивания ребенка анализы на гепатит могут быть ложположительными?».

Это происходит по следующим причинам:

• из-за процесса гестации. Он приводит к изменению концентрации цитокинов и состава крови, гормонального фона.
• из-за формирования белков беременности.

Также положительные результаты могут быть получены из-за использования медиками медицинских диагностических предметов от различных производителей.

Если диагностика была проведена вовремя, то риск рождения больного плода, инфицирования медицинского персонала и иных женщин – минимальный.

Нашли ошибку в тексте? Выделите ее и нажмите Ctrl+Enter , и мы все исправим!

Сдача анализов — верный способ узнать о наличии вируса в организме. В случае с гепатитом, это — единственный метод, который поможет идентифицировать заболевание, поскольку его симптоматика напоминает грипп и недомогание.

Этот вирус развивается в двух стадиях: острой и хронической. Первая проявляется после окончания инкубационного периода. Он длится от 2 до 26 недель в зависимости от типа гепатита (A, B, C, D, E, F, G). В случае с гепатитом А первые симптомы: высокая температура, тошнота, слабость, рези в желудке и изменения цвета мочи со светло-желтого на темно-коричневый проявляются через 18-24 дня. Острая стадия гепатита В может протекать бессимптомно, а серьезные изменения в организме у людей, инфицированных гепатитом С, специалисты могут обнаружить, когда вирус перейдет в тяжелую стадию.

Хроническая форма — наиболее опасна. Вирус стремительно разрушает клетки печени и ослабляет иммунную систему. Результат — цирроз и рак печени, летальный исход. Хроническая стадия развивается, если ранее вы уже переболели гепатитом, но не приняли соответствующих профилактических мер — не сдавали кровь на анализ в течение 12-14 месяцев, отказались от УЗИ брюшной полости и биопсии печени. Именно эти анализы помогут предотвратить повторное развитие вируса и появление хронической стадии.

Главные симптомы заболевания в хронической форме: тошнота, рвота, постоянные колики и рези в брюшной полости, боль под правым подреберьем, изменения цвета кала и мочи. В этом случае не стоит откладывать визит к инфекционисту, гепатологу и гастроэнтерологу.

Обратитесь к ним за помощью немедленно и проведите все необходимые анализы. Изучив результаты обследования, врачи составят подробный план лечения. Как правило, курс лечения включает прием традиционных лекарственных препаратов или дженериков от гепатита , которые оказывают особенно благоприятное воздействие на клетки печени и способствуют их быстрому восстановлению.

Пациентам, которые перенесли гепатит, врачи рекомендуют быть предельно внимательными к своему здоровью. Им следует соблюдать диету (отказаться от жирного, жареного, мучного), исключить алкоголь и курение, принимать перед каждым приемом пищи лекарственные препараты и выпивать по 200-300 мл травяного чая. Но главное — необходимо проходить обследование всего организма два раза в год, сдавать биохимический и общий анализ крови, делать УЗИ печени и брюшной полости. Эти превентивные меры помогут предотвратить повторное появление вируса, и исключить развитие хронической формы гепатита — В и С.

Также необходимо исключить вероятность повторного заражения через переливание крови, инъекции и половой акт. Согласно статистике, 0,1% доноров являются носителями гепатита С. Вирус можно обнаружить только после серии анализов. Если вам предстоит переливание крови, проводите эту процедуру в первоклассных клиниках или в донорских центрах. В этих заведениях проверка крови на наличие гепатита С — обязательный тест. Вероятность «подхватить» вирус сводится к нулю. При проведении вакцинации в городских клиниках настаивайте, чтобы укол делали одноразовой иглой, упакованной в стерильную оболочку.

Не пренебрегайте средствами контрацепции. Благодаря им вы защитите свой организм от опасного вируса.

При первых проявлениях заболевания не медлите с визитом к врачу. Своевременное обследование и сдача анализов — гарантия успешного курса лечения, восстановления иммунитета и клеток печени.

В медицинской практике немало случаев, когда результат тестов на гепатит был ложным. Речь идет об анализе крови на антитела — Anti-HCV-total. Его сдают при общем обследовании организма, при подготовке к операциям, беременности. Обычно он назначается тем, кто хочет стать донором крови. Цель анализа — узнать реакцию организма на контакт с вирусом и наличие антител Anti-HCV, которые вырабатывает организм для успешной борьбы с вирусом.

Положительный анализ еще не говорит о том, что у вас гепатит. Это значит, что в крови уже содержатся антитела для противостояния с опасным вирусом. Но вируса в крови нет. Такой результат часто встречается у беременных. У будущих мам активно вырабатываются антитела для борьбы с инфекциями. Для сдачи этого анализа специальная подготовка — диета, голодание, воздержание от употребления воды — не нужны.

Подтвердить наличие вируса в организме поможет ПЦР на гепатит. Его положительный результат — прямое доказательство, что вы являетесь носителем опасного вируса. Для проведения этого анализа необходимо сдать кровь из вены. Никакой подготовки не требуется. Результат вы узнаете пол истечении 7 рабочих дней. Если диагноз подтвердится, приступайте к лечению заболевания.

источник

Может ли анализ на гепатит С быть ошибочным? К большому сожалению, такие случаи иногда бывают. Эта патология опасна тем, что после заражения симптомы часто отсутствуют у человека в течение многих лет. Точность в диагностике гепатита С особенно важна, так как при несвоевременном выявлении и лечении недуг приводит к катастрофическим осложнениям: циррозу или раку печени.

Вирусы гепатита C передаются через кровь, поэтому важен ее анализ. Иммунная система вырабатывает против возбудителей болезни белковые антитела — иммуноглобулины М и G. Они являются маркерами, посредством которых печеночная инфекция диагностируется при применении иммуноферментного анализа (ИФА).

Примерно месяц спустя после инфицирования или при обострении хронического гепатита С формируются антитела класса М. Наличие таких иммуноглобулинов доказывает: организм поражен вирусами и стремительно уничтожает их. В ходе выздоровления пациента численность этих белков неуклонно сокращается.

Антитела G (anti-HCV IgG) формируются значительно позже, в период от 3 месяцев до полугода после вторжения вирусов. Их обнаружение в кровотоке сигнализирует о том, что инфицирование случилось давно, поэтому острота болезни миновала. Если таких антител немного и в повторном анализе становится еще меньше, это свидетельствует о выздоровлении больного. Но у пациентов с хроническим гепатитом С иммуноглобулины G присутствуют в кровеносной системе всегда.

В лабораторных анализах определяют и наличие антител к неструктурным вирусным белкам NS3, NS4 и NS5. Anti-NS3 и Anti-NS5 выявляются на ранней стадии болезни. Чем больше их показатель, тем вероятнее, что она станет хронической. Anti-NS4 помогают установить, давно ли инфицирован организм и как сильно поражена печень.

У здорового человека в анализах крови нет АЛТ (аланинаминотрансферазы) и АСТ (аспартатаминотрансферазы). Каждый из данных печеночных ферментов свидетельствует о ранней стадии острого гепатита. Если же обнаружены оба, то это может сигнализировать о начале некроза клеток печени. А наличие фермента ГГТ (гамма-глутамилтранспептидазы) — один из признаков цирроза органа. Доказательством разрушительной работы вирусов является и присутствие в крови билирубина, фермента ЩФ (щелочной фосфатазы), белковых фракций.

Самая точная диагностика при правильном ее проведении — методом ПЦР (полимеразной цепной реакции). Основывается она на выявлении не иммунных антител, а структуры РНК (рибонуклеиновой кислоты) и генотипа возбудителя гепатита С. Используют 2 варианта этого метода:

• качественный — есть вирус или нет;
• количественный — какова его концентрация в крови (вирусная нагрузка).

«Анализ на гепатит С — отрицательный». Такой формулировкой подтверждается отсутствие болезни при качественном исследовании методом ПЦР. Аналогичный результат количественного теста ИФА показывает, что в крови нет антигенов вируса. В иммунологических исследованиях иногда указывают их концентрацию ниже нормы — это тоже отрицательный результат. Но если антигенов нет, а антитела к ним есть, данное заключение сигнализирует о том, что пациент или уже переболел гепатитом С или недавно был вакцинирован.

«Анализ на гепатит С — положительный». Такая формулировка требует уточнения. Позитивный результат лаборатория может выдать человеку, который когда-то болел им в острой форме. Эта же формулировка применима и к людям, которые в настоящее время здоровы, но являются вирусоносителями. Наконец, это может быть ложный анализ.

В любом случае необходимо провести исследование повторно. Больному с острым гепатитом С, находящемуся на лечении, врач может назначать тестирование через каждые 3 дня, чтобы отслеживать эффективность терапии и динамику состояния. Пациент с хроническим недугом должен сдавать контрольные анализы через каждые полгода.

Если результат теста на антитела положительный, а заключение исследования методом ПЦР отрицательное, считается, что человек потенциально инфицирован. Чтобы убедиться в наличии или отсутствии антител, проводят диагностику методом RIBA (РИБА — рекомбинантного иммуноблота). Данный метод информативен через 3–4 недели после инфицирования.

Во врачебной практике различают 3 варианта неадекватных результатов диагностического исследования:

• сомнительный;
• ложноположительный;
• ложноотрицательный.

Иммуноферментный метод считается весьма точным, но порой он дает ошибочную информацию. Сомнительный анализ — когда клинические симптомы гепатита С у пациента есть, но маркеров в крови нет. Чаще всего это происходит при слишком ранней диагностике, поскольку антитела не успевают сформироваться. В таком случае делают повторный анализ через 1 месяц, а контрольный — через полгода.

Ложноположительный анализ на гепатит С врач получает, когда методом ИФА обнаруживаются иммуноглобулины класса М, а методом ПЦР РНК вируса не выявляется. Такие результаты нередко бывают у беременных женщин, пациентов с иными типами инфекции, онкобольных. Им тоже нужно делать повторные тесты.

Ложноотрицательные результаты появляются весьма редко, например, в инкубационном периоде болезни, когда человек уже инфицирован вирусом гепатита С, но и иммунитет к нему, и симптомы еще отсутствуют. Такие результаты могут быть у пациентов, которые принимают препараты, подавляющие защитную систему организма.

Гепатит С протекает по-разному в зависимости от генотипа вируса. Поэтому в ходе диагностики важно определить, какой из 11 его вариантов находится в крови пациента. У каждого генотипа есть несколько разновидностей, которым присвоены буквенные обозначения, например 1а, 2в и т. д. Точно подобрать дозировки препаратов, длительность лечения можно, узнав вид вируса.

В России распространены преимущественно генотипы 1, 2 и 3. Из них хуже и дольше всего лечится генотип 1, особенно подтип 1в. У вариантов 2 и 3 более благоприятные прогнозы. Но генотип 3 может приводить к тяжелому осложнению: стеатозу (ожирению печени). Бывает, пациент инфицируется вирусами сразу нескольких генотипов. При этом один из них всегда доминирует над другими.

Диагностика гепатита С показана, если:

• возникли подозрения на нарушения в деятельности печени;
• получены сомнительные данные о ее состоянии при УЗИ органов брюшной полости;
• в анализе крови содержатся трансферазы (АЛТ, АСТ), билирубин;
• планируется беременность;
• предстоит операция.

Ложноположительные анализы, когда инфекции в организме нет, но результаты указывают на ее наличие, составляют до 15% лабораторных исследований.

• минимальная вирусная нагрузка в начальной стадии гепатита;
• прием препаратов-иммунодепрессантов;
• индивидуальные особенности защитной системы;
• высокий уровень криоглобулинов (белков плазмы крови);
• содержание гепарина в крови;
• тяжелые инфекции;
• аутоиммунные заболевания;
• доброкачественные новообразования, раковые опухоли;
• состояние беременности.

Ложноположительные результаты тестов возможны, если у будущей матери:

• нарушается обмен веществ;
• имеются эндокринные, аутоиммунные заболевания, грипп и даже банальная простуда;
• появляются специфические белки беременности;
• резко снижается уровень микроэлементов в кровотоке.

Кроме того, при проведении тестов на гепатит С причины ошибок могут заключаться в человеческом факторе. Нередко сказываются:

• низкая квалификация лаборанта;
• ошибочный анализ чужой крови;
• некачественные химические реактивы;
• устаревшие медицинские приборы;
• загрязнение образцов крови;
• нарушения правил их транспортировки и хранения.

Любая лаборатория может иногда ошибаться. Но это возможно при тестах только ИФА или только ПЦР. Поэтому при проведении диагностики заболевания следует применять оба метода исследования. Тогда оно наиболее достоверно, поскольку сложно допустить ошибку, если в крови нет вируса.

Важно делать анализ на гепатит С, когда нет никаких недомоганий, даже легкой простуды. Не требуется сдавать кровь натощак. Следует только накануне отказаться от жирных, жареных, острых блюд, не употреблять спиртное. И последнее: первоначальный ложноположительный результат о гепатите С — не повод для паники. Вывод нужно делать лишь после дополнительных исследований.

источник

Диагностика любого заболевания сопряжена с возможными ошибками из-за человеческого фактора, особенностей постановки анализа либо индивидуальных черт здоровья самого человека. Особенно это касается исследований, результат которых напрямую зависит от функционирования иммунной системы. Ложноположительный анализ на гепатит С является причиной серьезного беспокойства у пациентов и его родственников. Но данные только одного теста никогда не служат основанием для начала терапии.

Для исключения ошибочного диагноза проводят и другие исследования, которые отличаются высокой специфичностью и точностью. Поэтому на конечном этапе лабораторного осмотра у доктора есть полное представление о тяжести патологии, состоянии печени, наличии сопутствующих инфекций. Этого достаточно для назначения полноценной антивирусной терапии.

Но если принять во внимании данные медицинской статистики, ложноположительная реакция на HCV – не редкость. И в большинстве случаев подобный результат не следствие ошибочно проведенного теста. Причина кроется в особенностях организма человека. Задача врача в таком случае – не только исключить либо подтвердить вирусную инфекцию, но и выяснить, почему получен ложный результат на гепатит С.

Тестирование на гепатит С не входит в перечень обязательных анализов при прохождении медосмотра (за исключением беременности и обследования для работников отдельных профессий). Однако направление на тест можно взять у участкового врача либо выполнить самостоятельно в платной лаборатории, где обычно не требуют никаких документов.

Перечень анализов, необходимых для исключения ошибки при диагностике гепатита С, приведен в таблице.

Обычно определяют концентрации билирубина, аланинаминотрансферазы (сокращенно, АЛТ) и аспартатаминотрансферазы (в лабораторном бланке обозначается как АСТ). Это ферменты, которые высвобождаются и попадают в системный кровоток при повреждении тканей печени. Повышение уровня АЛТ и АСТ (в сочетании с другими клиническими и лабораторными признаками) косвенно свидетельствует в пользу HCV. При подозрении на цирроз и нарушения секреции желчи назначают тесты на алкалин фосфатазу (АЛП) и гамма-глутамилтранспептидазу (ГГТ).

Проводят УЗИ, но оно дает лишь общее представление о состоянии органов брюшной полости. Более показателен фиброскан, предназначенный для определения степени фиброза (очагов соединительной ткани в нормальной паренхиме печени). При необходимости делают биопсию, которая позволяет через микроскоп взглянуть на состояние тканей органа, выявить тенденцию к злокачественной малигнизации.

Иногда ошибочный диагноз может быть следствием самостоятельной интерпретации полученных в ходе лабораторного исследования данных. В лабораториях при больницах и поликлиниках результаты передают лечащему доктору. После сдачи крови в частных клиниках бланк с полученными цифрами отправляют на электронную почту, оставленную пациентом, или выдают на руки с рекомендацией обратиться к врачу.

Особенности расшифровки тестов указаны в таблице.

Но в некоторых случаях в ходе проведенного обследования получают сомнительные результаты. Например, на фоне положительного ИФА ПЦР не обнаруживает следов патогена и наоборот. Поэтому интерпретацией данных тестов должен заниматься только врач. Доктор сможет предположить, что повлияло на проведение исследования, выяснить причину ложного анализа.

Кроме того специалист определяет необходимость в дополнительных анализах. В обязательном порядке делают тест на ВИЧ, венерические заболевания. Обязательно установить уровень сахара, протромбиновое время, общие показатели крови, мочи и кала. Часто показана кардиограмма, иногда – определение эндокринного и липидного профиля.

При получении позитивного результата практически у каждого возникает вопрос, может ли анализ на гепатит С быть ошибочным? Это очень серьезная проблема, так как лечение HCV сопряжено с риском развития побочных реакций, осложнений терапии и большими финансовыми затратами. Такой стресс особенно опасен для беременных женщин (либо планирующих зачатие, в том числе и по протоколу ЭКО), людей, страдающих от поражений сердечно-сосудистой системы.

Поэтому при объяснении вопроса, всегда ли верен анализ на гепатит С, доктора подчеркивают, что не следует исключать вероятность ошибки. Чтобы снизить вероятность ложно проведенного обследования, необходимо соответствующими образом подготовиться, поставить в известность лаборанта и доктора о принимаемых лекарственных препаратах, об известных хронических заболеваниях.

Нельзя исключить и человеческий фактор. Ошибки при диагностике могут быть допущены на любой стадии проведения теста, начиная с забора биологического материала и заканчивая непосредственной постановкой анализа. Кроме того, клинические лаборатории используют не одинаковые тест-системы. Они отличаются по чувствительности, специфичности и качеству.

При наличии сомнений в положительном результате исследования (например, отсутствие клинических признаков болезни, нормальная биохимия крови) анализ следует повторить в другой клинике. И наоборот, негативный тест на фоне повышения печеночных ферментов, сильной слабости, желтухи также служит поводом для проведения нового обследования. Несколько этапов диагностики гарантируют верный диагноз.

Учитывая особенности диагностических исследований ложноположительный тест получают при проведении анализа серологическим методом. Исследование построено на том, что специальные реагенты «улавливают» в крови антитела специфической белковой структуры, характерной только для иммуноглобулинов к HCV. Но несмотря на высокую чувствительность, возможны ошибки.

Ложные положительные результаты могут быть обусловлены тем, что используемые в тест-наборе реактивы распознают в качестве Ig к HCV другие протеины и антитела.

Это может произойти:

• при массивном выбросе иммуноглобулинов при латентно протекающих инфекциях (туберкулез, хронический пиелонефрит, цистит и т.д.);
• в результате изменения соотношения белковых фракций (при беременности, аутоиммунных заболеваниях печени).

Ложноположительный результат на гепатит С – не редкость. Зная о причинах подобной ошибки, специалисты рекомендуют сразу обследоваться методом постановки полимеразной цепной реакции. Это обойдется дороже, но только в таком случае можно минимизировать воздействие иммунных факторов, способных повлиять на конечный результат ИФА.

Наличие антител при отрицательной качественной ПЦР свидетельствует об отсутствии патологии. Но такое расхождение в результатах требует наблюдения у врача, повтора печеночных проб (через 2 недели), ИФА и ПЦР (через 3–4 месяца).

На форумах, посвященных качеству работы различных клинических лабораторий, часто можно встретит негативные отзывы, и многие касаются именно исследования на гепатит С. Пациенты связывают причины ошибок с низкой квалификацией медицинского персонала. Что еще может повлиять на анализ? Человеческий фактор нельзя исключить, но в большинстве случаев неправильный результат является следствием других факторов.

Выделяют следующие причины ложноположительного анализа на гепатит С:

• период вынашивания ребенка (вне зависимости от срока гестации);
• аутоиммунное поражение печени, реже – других органов;
• бактериальные и другие микробные системные инфекции;
• ранее перенесенный гепатит С (по статистике, один из четырех пациентов выздоравливает самостоятельно, но повышенный титр антител сохраняется в течение нескольких лет, а иногда, на протяжении всей жизни);
• недавно сделанные прививки (особенно, живыми вакцинами);
• массивные паразитарные инвазии;
• длительный курс терапии интерферонами;
• неквалифицированный лаборант;
• ошибки при подготовке к исследованию;
• дети до 3–5 лет (при условии, что женщина в период беременности болела гепатитом С).

Таким образом получение позитивного результата ИФА на фоне негативной качественной ПЦР служит показанием к проведению следующих исследований:

• иммунограмма (оценка титра ANA и других специфических параметров, указывающих на аутоиммунный процесс), при подтверждении патологии на основании собранного анамнеза и жалоб больного определяют область поражения и вырабатывают тактику терапии;
• тест на ХГЧ, который позволяет выявить беременность через 1–2 недели после зачатия;
• ПЦР, анализ кала и другие исследования для определения паразитов (иногда подобный тест следует повторить несколько раз).

Выявить скрытую бактериальную инфекцию сложнее. Обязательно показана флюорография, иногда – КТ органов грудной клетки. В сомнительных случаях (или когда рентгенологические исследования противопоказаны) проводят анализ T-Spot для исключения туберкулеза. Выявление других возможных скрытых инфекций проводят аналогичным образом (симптоматика + данные лабораторных и инструментальных обследований).

Ложноположительный анализ на гепатит С при беременности – частая проблема, с которой приходится сталкиваться будущим родителям. К сожалению, далеко не все доктора предупреждают женщину о возможности получения подобных результатов. Установлено, что такая проблема вызвана выработкой особых белков беременности. Это целая группа протеинов, синтез которых начинается вскоре после гестации.

Их концентрация нарастает на протяжении всего периода вынашивания ребенка и постепенно снижается после родов. Эти соединения «распознаются» тест-системами, используемыми для проведения серологических исследований, как антитела к гепатиту С, что и служит причиной частых ложноположительных результатов. Это может произойти как при первом обследовании (на I триместре), так и незадолго до родов.

На основании только позитивного ИФА, полученного при беременности, диагноз HCV-инфекции не ставят. Подтверждение заболевания возможно только на основании качественной и количественной ПЦР.

Однако после родов женщина должна оставаться под медицинским наблюдением. Иммуноферментный анализ повторяют, в норме антитела должны либо отсутствовать, либо отмечаться тенденция к их снижению. Также повторно выполняют качественную полимеразную цепную реакцию для выявления возбудителя гепатита С.

Аналогичному обследованию подлежит и новорожденный. Но ИФА не проводят. Риск трансплацентарной и интранатальной передачи не превышает 7%, но через плаценту проходят антитела инфицированной женщины. Ig в крови ребенка могут обнаруживаться на протяжении 3–5 лет, поэтому для диагностирования вируса необходим тест методом ПЦР.

В некоторых случаях возможно получение ложноотрицательных результатов тестов, проведенных по технологии ИФА. Если позитивный ИФА служит основанием для дальнейшего обследования, то при негативных данных осмотр часто прекращают. Дальнейшее прогрессирование гепатита С чревато циррозом и раком печени.

Ложноотрицательный анализ на гепатит С может быть получен из-за иммуносупрессии, вызванной:

• ВИЧ и СПИД;
• прохождением курса лечения цитостатиками, иммуносупрессорами, стероидами;
• нарушениями кроветворения, вызванные врожденными и приобретенными причинами, в том числе, онкологией;
• неправильная подготовка к выполнению теста;
• аутоиммунными расстройствами.

При подозрении либо профилактической проверке на гепатит C проведение ИФА пациентам с подобными заболеваниями и синдромами не рекомендовано. Чтобы не терять времени, предлагают сразу выполнить ПЦР. Результат влияет на дальнейшую тактику.

Когда пациент интересуется у доктора, могут ли поставить ошибочно диагноз гепатита С, его предупреждают о необходимости соблюдения достаточно строгих правил подготовки к обследованию.

Для снижения риска получения ошибочных результатов тестирования нужно:

1. За 7–10 дней до забора крови полностью исключить потребление спиртных напитков.
2. Как минимум на протяжении двух недель соблюдать строгую диету (по столу №5). Рацион питания подразумевает отказ от жирной, жареной, слишком соленой пищи, консервов, колбасных изделий, фастфуда. Также под запрет попадают и кондитерские изделия, сдоба, содержащие шоколад продукты, жирные соусы (майонез). Необходимо полностью исключить газированные напитки, энергетики, строго ограничить кофе и крепкий чай. Разрешены фрукты, овощи, минеральная вода без газа, молоко и кисломолочные продукты с низким процентом жирности. Блюда должны тушиться, вариться, запекаться без масла либо готовиться на пару. Такие же принципы питания нужно соблюдать и до того момента, как будет поставлен точный диагноз.
3. Сдавать анализ следует утром, как можно быстрее после пробуждения.
4. Перед исследованием разрешено пить только обычную воду. Чай, кофе противопоказаны.
5. Последний прием пищи должен быть не позже, чем за 12 часов до забора крови. При этом ужин должен быть легким, в идеале – свежие либо тушенные овощи, йогурт, каша.
6. За 10–12 часов до анализа категорически запрещается курить.
7. За 2–3 дня до анализа без необходимости не нужно принимать лекарства. А во время консультации врача по вопросу интерпретации результатов анализов необходимо рассказать доктору обо всех принимаемых медикаментах, включая витамины, жаропонижающие, обладающие гепатотоксическим эффектом средства.

Если какое-либо из перечисленных правил было нарушено, об этом следует поставить в известность врача. Но в таких случаях исследование рекомендуют перенести во избежание получения сомнительных результатов и ошибок в дальнейшей диагностике. Но проведение поэтапного обследования гарантируют постановку точного диагноза и своевременное начало терапии.

Ложные тесты требуют обязательной перепроверки и выяснения причины. Именно поэтому нельзя заниматься самодиагностикой, а тем более без консультации с врачом принимать какие-либо лекарства.

источник

Согласно данным Всемирной организации здравоохранения, вирусом гепатита С инфицировано 3,0% населения Земли. Широкое распространение, высокая степень хронизации инфекционного процесса, отсутствие специфической профилактики, высокая стоимость и недостаточная эффективность лечения определяют необходимость ранней диагностики заболевания с последующим диспансерным наблюдением инфицированных лиц.

Согласно данным Всемирной организации здравоохранения, вирусом гепатита С инфицировано 3,0% населения Земли. Широкое распространение, высокая степень хронизации инфекционного процесса, отсутствие специфической профилактики, высокая стоимость и недостаточная эффективность лечения определяют необходимость ранней диагностики заболевания с последующим диспансерным наблюдением инфицированных лиц. При длительном малосимптомном течении с отсутствием характерных клинических признаков особое значение для выявления случаев гепатита С приобретает лабораторная диагностика.

Одним из основных методов выявления антител к антигенам вируса гепатита С (анти-ВГС) является иммуноферментный анализ (ИФА). На сегодняшний день можно обозначить две серьезные проблемы, связанные с интерпретацией результатов, полученных при использовании данного исследования. Первая — получение противоречивых результатов при повторных исследованиях образцов в тестах разных производителей. Основная причина расхождений результатов связана с оригинальными конструкциями антигенов, используемых в диагностикумах, и низкий уровень качества ИФА-исследований в лабораториях.

К искажению результатов могут приводить следующие ошибки: нарушение регламента пробоподготовки и/или проведения реакции (наличие загрязненной, в т. ч. дезинфицирующими и моющими средствами, посуды и наконечников пипеток, неточность работы оборудования), отсутствие системы внутрилабораторного контроля качества.

Вторая проблема, с которой сталкиваются лаборатории, — получение “неопределенных” результатов. Поскольку на территории России применяется большой ассортимент отечественных и импортных наборов реагентов, позволяющих выявить анти-ВГС, производители по-разному интерпретируют результаты анализа. Иногда один и тот же образец, содержащий одни и те же антитела, в тестах разных производителей может расцениваться как положительный,“неопределенный” или отрицательный.

В настоящее время как в нашей стране, так и в мире алгоритм лабораторного исследования, проводимого на станциях переливания крови и в клинико-диагностических лабораториях, включает первичное тестирование сывороток крови для выявления суммарных анти-ВГС с последующим подтверждением положительного результата скрининга путем определения антител к высокоспецифичным антигенам ВГС — структурному (core) и неструктурным (NS3, NS4, NS5).

Как правило, в наборах реагентов, предназначенных для скрининга, — “Бест анти-ВГС” (ЗАО “Вектор-Бест”, Новосибирск), “ВГС-ДСМ” (“Медико-биологический союз”, Новосибирск), “ИФА-АНТИ-HCV” (НПО “Диагностические системы”, Нижний Новгород), “ИФА-ВГС” (ЗАО “Эколаб”, Электрогорск) — результаты интерпретируются только как положительные или отрицательные.

В перечисленных наборах реагентов образцы, оптическая плотность (ОП) которых равна или превышает значение ОПкрит., считаются положительными. Согласно инструкции образец положительно реагирующей сыворотки должен быть исследован повторно в этом же наборе параллельно в двух лунках (для воспроизведения положительного результата или исключения технической ошибки). При повторном получении положительного результата хотя бы в одной лунке образец исследуется с использованием подтверждающего теста, обладающего большей чувствительностью и специфичностью.

Однако существуют скрининговые тест-системы, где особое внимание уделяется образцам, результаты которых ниже уровня ОПкрит. Так, согласно инструкции диагностического набора MONOLISA HCV PLUS V.2 BIO-RAD (Франция) сыворотки, ОП которых ниже уровня ОПкрит. на 10,0%, обязательно следует тестировать повторно в дубле для окончательной интерпретации. Если при использовании наборов Murex anti HCV (Murex Diagnostica, Великобритания) результат оказывается в “серой зоне” (показатель ОП выше ОП (K-)+0,3, но ниже ОПкрит.), образцы рассматриваются как погранично положительные. Согласно инструкции такие сыворотки также должны быть исследованы повторно. Если результат повторяется или если получены противоречивые результаты, необходимо тестировать образцы с использованием тест-системы другого производителя или подтверждающего теста.

Если при использовании тест-системы другого производителя или подтверждающего теста получен положительный результат, то считается, что сыворотка пациента содержит антитела к анти-ВГС.

Если значение ОП образца остается в “серой зоне” или если получены противоречивые результаты, то донор или больной, чья кровь исследовалась, в дальнейшем нуждается в наблюдении врача (инструкция к Murex anti HCV, комплект VK47).

Таким образом, “неопределенный” результат можно получить уже в ходе скрининга. Но, как правило, чаще в практике с понятием “неопределенный” результат врачи сталкиваются при использовании метода имму- ноблота и “подтверждающих” наборов реагентов для выявления спектра антител к каждому из анти-ВГС.

Следует отметить, что большинство производителей дают одинаковую интерпретацию положительных результатов: образец считается положительным (содержащим анти-ВГС), если значение ОП в лунке выше или равно ОПкрит. по двум или более антигенам, или по одному core-антигену.

Согласно критериям, внесенным в инструкции к некоторым тестсистемам, выявление антител к одному из неструктурных белков вируса не дает точного ответа. Поэтому образцы с ОП, большей или равной ОПкрит. только для одного неструктурного антигена (NS3, NS4 или NS5), считаются “неопределенными”. Такая формулировка интерпретации результатов содержится в инструкциях наборов реагентов ЗАО “Вектор- Бест”, “ЭКОлаб”, “Медико-биологический союз”.

Другой подход к интерпретации результатов предлагает НПО “Диагностические системы” в подтверждающем наборе “ДС-ИФА-АНТИ- HCV-СПЕКТР-GM”. Результаты анализа считаются “неопределенными”, если значение ОП образца хотя бы с одним из сорбированных антигенов равно или превышает ОПкрит. менее чем на 20,0%, независимо от вида антигена (структурный или неструктурный). Соответственно в данном наборе результаты анализа считаются положительными, если значение ОП образца хотя бы с одним из сорбированных антигенов превышает ОПкрит. на 20,0% и более. Таким образом, сыворотка, содержащая антитела только к одному неструктурному анти-ВГС, в данной системе уже будет считаться положительной.

Технология подтверждающих тестов при применении метода им- муноблота использует синтетические пептиды и рекомбинантные белки ВГС. Эти пептиды и белки нанесены и фиксированы в виде отдельных линий, расположенных в строго определенном порядке для удобства считывания результата на полосках нитроцеллюлозы (стрипах), что позволяет осуществлять многопараметровое тестирование для выявления специфических антител к анти-ВГС. При использовании наборов CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA (США) результат считается “неопределенным” (сомнительным), если на стрипе появляется полоса, соответствующая анти-ВГС (независимо, к шге или неструктурным антигенам), с интенсивностью окрашивания “1+” или выше. Похожая интерпретация предлагается в наборах реагентов других производителей: “ВГС-блот- БЕСТ” (ЗАО “Вектор-Бест”), INNO-LIA HCV Score (INNOGENETICS), Deciscan HCV PLUS (BIO-RAD). Соответственно образец, содержащий антитела к одному core-антигену, для которого получен положительный результат при выявлении антител методом ИФА, может считаться “неопределенным” в иммуноблоте.

В инструкции набора реагентов с использованием иммуноблота INNO-LIA HCV Score присутствует уточнение: если антигенная линия для NS3 окрашена “+/-” или выше, а все другие не окрашены, то такой образец также считается “неопределенным”. Особое внимание уделяется этому неструктурному антигену, поскольку при инфицировании ВГС одними из первых могут появиться антитела именно к NS3. Примером могут служить сероконверсионные панели — специальные наборы образцов сывороток крови одного и того же инфицированного человека, полученные в динамике в период сероконверсии. Так, в панели № 6212 (ZeptoMetrix Corporation) все образцы содержат РНК ВГС. С помощью иммуноблотов INNO-LIA HCV Score, CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA антитела в данной панели определяются исключительно к NS3 антигену, начиная со второго образца с реактивностью “+/-” и заканчивая “4+” (образец № 9). Результаты интерпретируются как “неопределенные”. Таким образом, уже на ранней стадии можно выявить инфицированные образцы.

Mikrogen Diagnostik в наборе реагентов для иммуноблота recomBlot HCV IgG 2.0 предлагает интерпретировать результаты на основе балльной системы. Значения линий анти-ВГС RecomBlot HCV IgG соответствуют определенным баллам: если антигенная линия для тоге окрашена на “+/-”, то это соответствует 5 баллам, если на “1+” или “2+”, то 8 баллам; неструктурным антигенам с интенсивностью окрашивания “1+” или выше присваивается следующее количество баллов: для NS3 — 3 балла, Helicase — 3 балла, NS4 — 4 балла, NS5 — 2 балла. Количество баллов суммируется, и результат исследования интерпретируется как отрицательный при сумме баллов 0-5, как пограничный (“неопределенный”) — 6-9 баллов, положительный — свыше 9 баллов. Соответственно если образец содержит антитела только к одному неструктурному антигену, то результат будет интерпретироваться как отрицательный. Таким образом, производитель “решает” проблему сывороток, содержащих антитела только к одному из неструктурных антигенов.

Получается, что если выполнить тестирование одного и того же образца с использованием разных наборов для выявления антител методом ИФА или иммуноблота, то результат может оказаться положительным, “неопределенным” или отрицательным.

Клинико-диагностические лаборатории и лаборатории службы переливания крови для выявления лабораторных маркеров ВГС применяют в работе разнообразные наборы отечественных и зарубежных производителей. Отсюда возникают проблемы, с которыми сталкивается врач-клиницист или пациент, когда получают из разных лабораторий противоречивые результаты одного и того же анализа. Безусловно, каждый производитель реагентов допускает возможность получения ложноположительных результатов, обусловленных неспецифическим реагированием рекомбинантных антигенов и синтетических пептидов, входящих в состав наборов, с белками сыворотки крови. Поэтому в инструкции для каждого набора реагентов дополнительно делается акцент на то, что неопределенные образцы необходимо исследовать повторно через 3-6 месяцев (некоторые производители указывают интервал от 2-3 недель (“Медико-биологический союз”) до 6-12 месяцев (CHIRON RIBA)) с момента первого исследования, чтобы определить, изменилась ли реактивность. Желательно, чтобы повторно взятый образец анализировался одновременно с предыдущим (“парные” образцы). При длительном наблюдении пациента с целью получения результатов, адекватно отражающих изменение содержания маркера в крови, необходимо использовать наборы реагентов одного наименования (одного предприятия-изготовителя). Некоторые производители предлагают также исследовать и “неопределенные” образцы с использованием подтверждающих тестов, выявляющих другие маркеры ВГС (иммуно- блотинг, ПЦР).

Ряд производителей берет на себя ответственность, заявляя в инструкции, что если при повторном (через 2-3 недели) исследовании образец дает положительную реакцию с антителами только к одному из NS-антигенов, то в этом случае реакцию следует считать отрицательной (инструкция “ВГС-ДСМ-подтверждающий тест” (комплект 2, “Медикобиологический союз”)). Другие, как recomBlot HCV IgG 2.0 (Mikrogen Diagnostik), интерпретирует подобные сыворотки как отрицательные. Но, интерпретируя таким образом результаты, не стоит забывать, что, по имеющимся в литературе данным, вирус гепатита С способен индуцировать различный по интенсивности гуморальный ответ — от полного отсутствия специфических антител до полного спектра антител к структурным и неструктурным белкам.

На сегодняшний день существует ряд статей, в которых отражены разные исследования сывороток крови с “неопределенными” результатами, когда в образце содержатся антитела только к одному неструктурному антигену ВГС. Опубликованные в литературе данные исследований по этой проблеме весьма противоречивы.

Так, Pawlotsky J.M. с соавт. проводили исследование 588 положительных образцов с помощью иммуноблота RIBA HCV 3.0. Распространенность образцов с “неопределенными” результатами составила около 10,0% (59/588). Причем, в 53,0% (31/59) “неопределенных” образцов была обнаружена РНК ВГС. Изолированные антитела к core-антигену определялись в 25 образцах (64,0% из них содержали РНК ВГС), анти-№3 — в 30 случаях (43,0% образцов содержали РНК), изолированные анти-№4 — в 3 случаях (в 67,0% образцов присутствовала РНК), и анти-№5 — в 1 случае (РНК не определялась). При этом авторы приходят к выводу, что образцы, содержащие антитела только к NS5, следует относить к ложноположительным.

С другой стороны, в работе Cavazza S. c соавт. было показано, что в 5,0% образцов с “неопределенным” результатом в иммуноблоте Riba-3, в которых присутствуют антитела только к NS5, определяется РНК ВГС. К тому же выявление антител к NS5 в более ранние сроки инфекции позволяет улучшить качество лабораторной диагностики острого гепатита С.

Данные, полученные Евпловой И.А. при изучении клинико-эпидемиологических характеристик детей с “неопределенными” результатами выявления анти-ВГС, свидетельствуют о скрытом течении инфекции и имеющемся иммунном дисбалансе в организме детей с изолированным выявлением антител к неструктурным NS3- или №4-антигенам вируса. Частота и характер желудочно-кишечных заболеваний, результаты УЗИ- сканирования у детей с “неопределенными” результатами — признаки поражения печени (60,0%), спленомегалия (25,0%), патологические изменения поджелудочной железы (45,0%) — сопоставимы с таковыми у детей, страдающих хроническим гепатитом С, с различной репликацией вируса.

В работе Потаповой А.А. приводятся данные исследования образцов с “неопределенным” результатом при выявлении анти-ВГС у молодых и пожилых людей. Интересно отметить, что такие образцы преимущественно содержали только анти-№4 ВГС. Причем анти-№4 у пожилых пациентов были как высоко-, так и низкоавидными, а при обнаружении в пробе молодого пациента только анти-№4 авидность антител не определялась. Однако по концентрации а-фетопротеина (биохимического маркера повреждения клеток печени) группа молодых людей с “неопределенными” результатами выявления анти-ВГС была близка к группе анти-ВГС-позитивных образцов, что подтверждает вывод Rios M. об эпидемиологической близости групп с анти-ВГС-положительными и “неопределенными” результатами.

Особое значение уделяется изучению “неопределенных” результатов выявления анти-ВГС, полученных в группе доноров крови.

По данным Lemaire J.M., из 758 образцов от доноров, интерпретирующихся как “неопределенные” при использовании иммуноблота RIBA-3, 10 образцов (1,3%) содержали РНК ВГС: 3,3% (6/180) и 1,3% (4/317) проб с антителами только к core и только к NS3 соответственно. В образцах, содержащих только анти-№4 и только анти-№5, в 52 и 209 пробах соответственно, РНК ВГС обнаружена не была. У 2 из 6 доноров с антителами к core была выявлена хроническая форма гепатита. Острый гепатит был диагностирован у 3 из 4 чел., в сыворотке крови которых определялись только антитела к NS3. Однако в литературе также имеются данные, свидетельствующие о том, что при наличии в сыворотке крови донора изолированных антител к неструктурным белкам вируса гепатита С, РНК ВГС, как правило, не выявляется.

В своем исследовании Melve G.K. с соавт. проанализировали в динамике кровь 92 чел., отстраненных от донорства крови из-за “неопределенных” результатов при выявлении анти-ВГС. Спустя 75 месяцев образцы крови 66 (71,0%) из 92 чел. по-прежнему демонстрировали “неопределенный” результат при исследовании методом иммуноблота (RIBA). Наиболее часто встречались образцы, в которых определялись антитела только к NS5. Более того, в исследовании была выявлена связь между такими образцами и обнаружением антител к аденовирусу в пробах, особенно в осенне-зимний период. Авторы предполагают, что вирусная инфекция и кросс-реактивность могут быть этиологическими факторами получения неопределенных результатов при определении анти-ВГС.

Другая подобная работа была посвящена наблюдению за донорами с “неопределенными” результатами, полученными при использовании иммуноблота (RIBA). В течение 5 лет было обследовано 102 979 доноров. Среди них для 271 образца получен положительный результат при выявлении антител методом ИФА (наборы Abbott Axsym System HCV version 3.0 assay (USA) или Ortho Vitros ECi anti-HCV assay (USA)). Для подтверждения данные пробы тестировали методом иммуноблота CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA: 178 сывороток (65,7%) показали отрицательный результат, 28 (10,3%) — положительный, а 65 (24,0%) — “неопределенный”. Значительное количество ложноположительных результатов при выявлении антител методом ИФА (65,7%) авторы объясняют факторами, не связанными с инфекцией. Ложноположительные результаты выявления анти-ВГС описаны после вакцинации против гриппа. За 24 донорами (из 65) с “неопределенными” результатами наблюдение велось 25 месяцев. За этот период у 8 чел. (33,0%) результат обнаружения анти-ВГС изменился на отрицательный, а у 16 доноров (67,0%) по-прежнему сохранился “неопределенный” результат.

В работе Rios M. изучались характеристики группы доноров, при тестировании крови которых методом иммуноблота (RIBA) выявлены положительные и “неопределенные” результаты. РНК ВГС наиболее часто (в 71,0% случаев) присутствовала в образцах с положительным результатом в иммуноблоте, по сравнению с сыворотками с “неопределенным” результатом (в 10,0% случаев). Увеличение активности трансаминаз сыворотки крови в течение 3 лет наблюдения регистрировалось соответственно в 54,0% случаев у доноров с положительным результатом и в 13,0% случаев — с “неопределенным” результатом. У 46,0% пациентов с “неопределенным” результатом данные биопсии печени были в норме (диагностировались лишь незначительные изменения), однако 33,0% из них имели хронический персистирующий гепатит, а 21,0% пациентов — хронический активный гепатит. Гистологическое исследование показало, что у 50,0% пациентов отсутствовал фиброз, у 46,0% наблюдался фиброз 1-й степени, у 4,0% — фиброз 2-й степени тяжести. Авторы приходят к заключению, что группа пациентов с “неопределенными” результатами, вероятно, имеет доброкачественное течение заболевания без вирусной репликации.

Кадровые доноры — обычные люди, которые в реальной жизни также сталкиваются с факторами риска заражения ВГС-инфекцией (инъекции, посещения стоматолога и гинеколога, зондовые обследования, оперативные вмешательства и др.). Поэтому данные Makuria A.T. согласуются с данными других исследователей и в работе делается вывод, что “неопределенные” результаты также могут быть у доноров, которые перенесли ВГС-инфекцию. Доказательством является то, что у доноров с “неопределенными” результатами отмечался сильный иммунный ответ, схожий с таковым у больных, которые спонтанно выздоровели от ВГС-инфекции, и отличающийся от контрольной группы и группы хронических больных ВГС.

Безусловно, перед сотрудником лаборатории стоит сложная задача — как разграничить ложноположительный результат и истинное присутствие анти-ВГС. Ложноположительные результаты являются одной из наиболее важных проблем при проведении исследований. Их появление может быть обусловлено неспецифическим взаимодействием компонентов реакции, возможными перекрестными реакциями с другими вирусными антигенами и многими другими факторами. Повышенная частота таких результатов отмечена среди больных онкологическими и аутоиммунными заболеваниями, лиц с иммунодефицитными состояниями и больных сифилисом. Обнаружение в образце сыворотки крови РНК ВГС является хорошим подтверждающим маркером инфекции гепатита С. Однако и здесь можно рассуждать о ложноотрицательных и ложноположительных результатах ПЦР. Вместе с тем отсутствие РНК ВГС не позволяет говорить о наличии ложноположительного результата выявления анти- ВГС. Возможным объяснением отсутствия РНК ВГС в образцах с “неопределенным” результатом выявления анти-ВГС могут быть экспрессия генома вируса ниже порога чувствительности используемых вариантов ПЦР, сохранение вируса в иммунологически привилегированных зонах. Необходимо учитывать, что анти-ВГС могут циркулировать в крови пациента, который выздоровел после острого гепатита С (10,0-15,0%) или у которого произошла элиминация РНК ВГС в результате проводимой терапии. В исследовании Seeff L.B. показано, что в 23,0% случаев РНК ВГС может исчезать у пациентов, изначально инфицированных.

Таким образом, исходя из вышеизложенного, для служб крови одним из вариантов решения проблемы “неопределенных” результатов может стать использование таких скрининговых и подтверждающих тестов (например, двухлуночных, где core нанесен отдельно от неструктурных антигенов), в которых результаты интерпретируются исключительно как положительные или отрицательные.

Когда речь идет о пациенте, то требуется более тщательное обследование. В этом случае для подтверждения положительного результата лучше использовать определение антител к отдельным анти-ВГС с использованием метода иммуноблота или ИФА, отслеживая в динамике, как со временем меняется спектр и титр антител у данного пациента. Трактовка “неопределенный результат” на сегодняшний день необходима в случае отсутствия четких показаний, позволяющих определенно судить о наличии или отсутствии анти-ВГС в исследуемом образце. Правомочность ответа — “неопределенный результат выявления анти-ВГС”, выдаваемого специалистом лаборатории клиницисту, очевидна не только при проведении подтверждающего теста, но и при рутинном исследовании для обнаружения анти-ВГС. Необходимость такой трактовки полученных результатов является отражением современного состояния лабораторной диагностики гепатита С. В лабораторной диагностике гепатита С необходима комплексная оценка маркеров ВГС-инфекции, основанная на динамическом наблюдении за пациентом.

источник