Сифилис сопровождается многочисленными симптомами и имеет большое количество клинических форм. Его распознавание основано на комплексном клинико-лабораторном обследовании пациента. Общий анализ крови при сифилисе несет мало информации, поэтому для диагностики болезни не применяется.
Для анализов могут браться следующие материалы:
- кровь из пальца и вены;
- ликвор — спинно-мозговая жидкость;
- отделяемое твердого шанкра (язвы);
- участки регионарных лимфоузлов.
Выбор материала и метода диагностики зависит от стадии болезни. О том, какие анализы сдают на сифилис, мы поговорим в следующей рубрике.
В начальной стадии можно использовать бактериоскопический метод, основанный на определении возбудителя – бледной трепонемы – под микроскопом. В дальнейшем широко используются серологические тесты, основанные на определении микробных антигенов и вырабатываемых организмом антител в биологическом материале.
Бактериологические исследование не проводят, так как возбудитель сифилиса очень плохо растет на питательных средах в искусственных условиях.
Все методы обнаружения трепонемы, то есть виды анализов на сифилис, делятся на две большие группы:
1. Прямые, которые непосредственно обнаруживают сам микроб:
- темнопольная микроскопия (выявление трепонем на темном фоне);
- RIT-тест – заражение исследуемым материалом кроликов;
- полимеразная цепная реакция (ПЦР), обнаруживающая участки генетического материала микроорганизма.
2. Непрямые (серологические), основанные на выявлении антител к микробу, которые вырабатываются организмом в ответ на инфицирование.
Серологические анализы делятся на две группы
- реакция связывания комплемента с кардиолипиновым антигеном (РСКк);
- реакция микропреципитации (РМП);
- тест быстрых плазменных реагинов (RPR);
- проба с толуидиновым красным.
- реакция связывания комплемента с трепонемным антигеном (РСКт);
- реакция иммобилизации трепонем (РИТ или РИБТ);
- реакция иммунофлюоресценции (РИФ);
- реакция пассивной гемагглютинации (РПГА);
- иммуноферментный анализ (ИФА);
- иммуноблоттинг.
Методики этих анализов достаточно сложны, поэтому мы остановимся в основном на том, когда они проводятся и насколько точную информацию дают.
Сразу скажем, что основа диагностики сифилиса – серологические методы. Как называется анализ на сифилис: в каждом случае обследование может включать разные методики. Ниже мы более подробно расскажем о них.
Убедительно доказывает наличие трепонем их обнаружение под микроскопом. Вероятность сифилиса при этом достигает 97%. Вместе с тем микробы можно обнаружить лишь у 8 больных из 10, поэтому отрицательный тест не исключает заболевание.
Диагностика проводится в первичном и вторичном периодах, когда имеются твердый шанкр или кожная сыпь. В отделяемом этих заразных элементов и ищут возбудителей болезни.
Более эффективный, но вместе с тем более дорогой и сложный анализ – обнаружение трепонем после предварительной обработки их флуоресцентными антителами. Это вещества, «прилипающие» к микробам и образующие «свечение» их в поле микроскопа.
Чувствительность методов снижается при большой длительности болезни, обработке язв и сыпи антисептиками, а также после лечения.
Биологический метод диагностики RIT высокоспецифичен, но дорог, а результат получается лишь через долгое время, когда у зараженного животного разовьется заболевание. В настоящее время метод практически не используют, хотя он практически самый точный из всех. Отличный анализ крови на сифилис для обнаружения генетического материала трепонем – ПЦР. Единственное его ограничение – относительная дороговизна диагностики.
Самый известный из этих анализов – реакция Вассермана. Это способ быстрой диагностики (экспресс анализ на сифилис), основанный на сходной реакции антител из крови больного человека на сами трепонемы и на кардиолипин, полученный из бычьего сердца. В результате такого взаимодействия антител и кардиолипина образуются хлопья.
В России данный анализ практически не используется. Его заменила реакция микропреципитации. Недостатком метода является его низкая специфичность. Ложноположительный анализ крови на сифилис встречается при туберкулезе, болезнях крови, системной красной волчанке, при беременности, после рождения ребенка, во время менструального кровотечения и во многих других случаях. Поэтому при положительной RW применяют более точные методы диагностики.
После заражения реакция становится положительной через два месяца. При вторичном сифилисе она положительна практически у всех больных.
Сходный механизм имеет реакция микропреципитации, заменившая реакцию Вассермана. Она недорога, легко исполнима, быстра в оценке, но тоже может давать ложноположительный результат. Эти два теста используют как скрининговые.
РМП становится положительной через месяц после появления твердого шанкра. Для ее проведения используется кровь из пальца.
Может ли анализ на сифилис быть ошибочным? Конечно, да, особенно при использовании нетрепонемных тестов.
Причины острых ложноположительных проб при использовании РМП:
- острые инфекционные заболевания;
- воспаление легких;
- инфаркт миокарда;
- инсульт;
- травмы и отравления.
Хронические ложноположительные результаты часто возникают при следующих болезнях:
- туберкулез;
- бруцеллез;
- лептоспироз;
- саркоидоз;
- ревматические болезни;
- инфекционный мононуклеоз;
- злокачественные опухоли;
- сахарный диабет;
- цирроз печени и другие.
Если возникают спорные анализы – применяют трепонемные серологические тесты для уточнения диагноза.
RPR и проба с толуидиновым красным
Тест быстрых плазменных реагинов (анализ на сифилис rpr) – еще одна разновидность реакции с кардиолипиновым антигеном. Ее используют в следующих случаях:
- скрининг населения;
- подозрение на сифилис;
- обследование доноров.
Упомянем еще и пробу с толуидиновым красным. Все эти способы используются для оценки эффективности лечения. Они являются полуколичественными, то есть уменьшаются при выздоровлении и возрастают при рецидиве инфекции.
Отрицательные результаты нетрепонемных тестов с большой вероятностью свидетельствуют, что сифилиса у обследуемого нет. Поэтому нетрепонемные тесты применяются для оценки излеченности. Первый такой анализ следует сдать через 3 месяца после завершения курса лечения.
Трепонемные тесты основаны на использовании трепонемных антигенов, что значительно повышает их диагностическую ценность. Они применяются в следующих ситуациях:
- положительный скрининг-тест (реакция микропреципитации);
- распознавание ложноположительного результата скрининга;
- подозрение на сифилис;
- диагностика скрытых форм;
- ретроспективная постановка диагноза, когда пациент перенес заболевание ранее.
Самые качественные (высокочувствительные и высокоспецифичные) – РИТ и РИФ. Недостатки этих методов – сложность, длительность, необходимость современного оборудования и обученного персонала. У большинства вылеченных пациентов трепонемные тесты остаются положительными в течение многих лет, и поэтому не могут применяться как критерий излеченности.
РИФ становится положительной через два месяца после заражения. Если она отрицательная – пациент здоров, если положительная – высока вероятность заболевания.
РИТ особенно часто применяется при положительных результатах РМП, чтобы исключить или подтвердить заболевание. Она высокочувствительна и позволяет с большой точностью сказать, есть у пациента сифилис, или нет. Однако анализ становится положительным только через три месяца после инфицирования.
Иммуноблоттинг
Иммуноблоттинг еще более чувствителен, чем РИФ, но менее чувствителен, чем РПГА. Его используют нечасто, в основном для диагностики сифилиса новорожденных.
Перечисленные методы не подходят для скрининга, то есть быстрого выявления болезни, потому что становятся положительными позднее, чем реакция микропреципитации.
Современные высокоинформативные стандартизированные методы диагностики сифилиса – ИФА и РПГА. Они недороги, быстро ставятся и проверяются в больших количествах. Эти тесты могут быть применены для подтверждения диагноза.
Анализ РПГА становится положительным при первичном серопозитивном сифилисе, то есть при появлении твердого шанкра (через месяц после заражения). Особенно он ценен при диагностике поздних, скрытых и врожденных форм заболевания. Однако РПГА должна быть дополнена как минимум одним нетрепонемным и одним трепонемным тестом для точности диагностики. Такой тройной тест – самый достоверный анализ на сифилис. Недостаток РПГА – сохранение положительной реакции в течение долгого времени, что не позволяет применять тест как критерий излеченности.
Анализ ИФА на сифилис становится положительным уже через три недели после заболевания. Минусом ИФА является то, что он бывает ложный. Ложноположительная реакция возникает при системных заболеваниях, нарушениях обмена веществ, а также у детей, рожденных больными матерями.
Недостатки серологических методов привели к разработке самых совершенных способов, не дающих ошибок, но пока дорогих и редко применяемых – газовой хроматографии и масс-спектрометрии.
В первичном серонегативном периоде (до 2 месяцев после заражения) проводят поиск трепонемы в темном поле или с использованием флюоресцирующих антител.
При первичном серопозитивном, вторичном и скрытом сифилисе используют РМП и ИФА, а как подтверждающий тест – РПГА.
У пациентов с рецидивами вторичного сифилиса исследуют элементы сыпи, пытаясь выделить из них трепонемы для микроскопического изучения.
В третичном периоде РМП у трети больных отрицательная. ИФА и РПГА положительные, но они могут свидетельствовать не о третичном сифилисе, а о перенесенном ранее заболевании. Слабоположительный анализ скорее говорит о выздоровлении, чем о третичном сифилисе.
При выставлении диагноза «врожденный сифилис» принимают во внимание наличие болезни у матери, разницу в показателях РМП у матери и ребенка, положительные ИФА и РПГА у новорожденного, иммуноблоттинг.
Обязательно обследуются на сифилис беременные женщины, особенно те, у которых уже были роды мертвым плодом, неразвивающаяся беременность, ранние выкидыши. Им проводится РМП, ИФА, РПГА. Обследуют на наличие заболевания и перед прерыванием беременности.
Чтобы получить направление в лабораторию, нужно посетить своего участкового терапевта. Если хочется сдать анализ быстрее, это можно сделать в частной лаборатории без направления (например, лаборатории Инвитро анализ на сифилис делают быстро и анонимно).
Как сдать анализ на сифилис? Кровь сдается с утра, натощак. Можно пить лишь чистую воду.
Подготовка: за два дня до сдачи анализа нужно исключить из питания жирную пищу и особенно алкоголь.
Как берут анализ? обычным способом из пальца или локтевой вены.
Сколько делается анализ на сифилис? Результат пробы обычно бывает готов уже на следующий день. Расшифровка может быть взята у врача или в лаборатории.
Сколько действителен анализ? На срок до трех месяцев.
Если получен положительный результат, рекомендуется обратиться к дерматовенерологу для дообследования. Интерпретация анализов – работа врача, не стоит ломать голову самостоятельно в поисках правильного ответа.
В некоторых случаях для диагностики нейросифилиса берут анализ ликвора.
Это обследование назначается всем пациентам со скрытым сифилисом, если у них существуют признаки патологии нервной системы, а также при скрытом и позднем нейросифилисе.
Кроме того, анализ выполняется всем пациентам после выздоровления при сохранении у них положительных серологических реакций. Мы уже писали в нашей статье, что такое явление случается нередко.
Анализ ликвора при сифилисе назначает и проводит только врач.
Спинно-мозговую жидкость получают путем прокола между двумя позвонками поясничного отдела. Ее собирают по 4 мл в две пробирки. Затем место пункции обрабатывается йодом и накрывается стерильной повязкой. После пункции пациент должен лежать на животе с приподнятым ножным концом кровати не менее 3-4 часов, затем он может лечь на бок. Постельный режим после пункции показан в течение двух суток.
Ликвор из первой пробирки исследуют с помощью общепринятых реакций на содержание белка, клеток, определение признаков менингита (воспаления мозговых оболочек).
Спинно-мозговая жидкость из второй пробирки исследуется на содержание антител к трепонеме с помощью реакции Вассермана, РМП, РИФ и РИБТ, о которых мы говорили выше.
По степени выраженности нарушений различают четыре вида изменений ликвора. Анализируя их, врач может сделать вывод о наличии разных форм поражения нервной системы (сосудистый нейросифилис, сифилитический менингит, менинго-васкулярный сифилис, спинная сухотка, поздний мезенхимальный нейросифилис), а также о выздоровлении больного с положительными серологическими тестами.
источник
Раньше врачи диагностировали сифилис на основании характерной клиники и данных анамнеза. Сейчас существуют гораздо более точные анализы на предмет сифилиса, достоверность которых стремиться к 100%. Но и они не решают полностью проблему диагностики этой инфекции.
Чтоб идентифицировать любой микроорганизм, нужно либо его просто увидеть, либо выявить его следы.
На этом основаны две большие группы диагностических методик:
В первом случае бледную трепонему обнаруживают в окуляре микроскопа. Возбудитель имеет крупные размеры и характерные внешние признаки.
Вторая группа методик не требует визуальной идентификации. Их суть заключается в обнаружении специфических противотрепонемных антител в крови больного.
Обе категории анализов имеют свои преимущества и недостатки. Их применение и интерпретация результатов, должны проводиться квалифицированными специалистами.
Исследование относится к категории прямых. Наиболее давний, наиболее точный и при этом не очень достоверный метод.
Материал для исследования берется из высыпаний, где бы они не располагались:
- кожные поверхности
- ротовая полость
- миндалины
- слизистая оболочка прямой кишки
Если возникают трудности с забором образца, проводится биопсия лимфатического узла. Возбудитель сифилиса назван бледной трепонемой за то, что она очень плохо окрашивается.
Для диагностики приходится пользоваться темнопольной микроскопией. Луч света подается с боку так, что пронизывает предметное стекло с каплей материала, но сам в окуляр микроскопа не попадает. Патогенные спирохеты выглядят как спираль серебристого цвета, иногда они даже движутся.
Но микроскопия дает самый точный анализ на сифилис только, если микробы попадают в поле зрения. Для этого их в образце их должно быть очень много. Микроскопия обладает низкой чувствительностью и может часто давать ложноотрицательные результаты.
Относятся к непрямым методам. При попадании возбудителя инфекции в организм, его пытается уничтожить иммунитет. Интерес представляет гуморальное звено – вырабатываемые B-лимфоцитами антитела (иммуноглобулины) к бледной трепонеме.
Уничтожить ее они не в состоянии, зато служат отличным маркером инфекции. Суть в том, что если заражение произошло, то антитела в крови появляются спустя всего 5-10 дней. Их можно обнаружить, если они отреагируют на заранее приготовленный промышленным способом антиген бледной трепонемы. Эту реакцию уже можно отследить.
Алгоритм такой:
- Берется кровь обследуемого человека и промышленная сыворотка с видовыми антигенами патогенного штамма.
- Их между собой смешивают.
- Если в крови пациента были антитела к возбудителю сифилиса, то они связываются с антигенами сыворотки.
- Если антител нет, реакции не происходит.
Первой была всем известная реакция связывания комплемента (Вассермана), но она носит не видовой характер.
Сейчас в клинической практике применяются более совершенные методики:
- Проведение иммуноферментного анализа (ИФА).
- Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) и ее модификации с использованием абсорбентов.
- Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИТ).
- Реакция непрямой гемагглютинации бледных трепонем.
Исследования сильно отличаются друг от друга методикой постановки. Разница в чувствительности и специфичности не столь заметна. Исследовать можно не только кровь, но и спинномозговую жидкость. Это бывает жизненно важно для выявления нейросифилиса и поражений центральной нервной системы.
В практической медицине считается, что самый точный анализ на сифилис такой, какой легко провести и оценить результаты. Под эти критерии подпадают РПГА и РИТ: их специфичность достигает 100%, а чувствительность держится в районе 98%. К тому же эти методики позволяют не только выявить болезнь, но и оценить ее активность. Для этого измеряют концентрацию (титр) антител к интересующему микроорганизму в крови больного. На фоне лечения титр должен уменьшаться и сойти на нет после полной элиминации возбудителя.
Несмотря на широкое внедрение серологических реакций, грамотный врач не станет опираться исключительно на их результаты. Лабораторные анализы необходимы для точной диагностики сифилиса, но клинический диагноз выставляется по совокупности признаков болезни. Обязательно должен быть проведен врачебный опрос и осмотр, только после этого назначены анализы, обычно двукратные и разными методиками.
По их результатам формулируется диагноз и назначается адекватное, патогенетическое лечение сифилиса. Эффективность терапии подтверждается теми же анализами.
При серонегативной, скрытой форме болезни серологические тесты дают отрицательные результаты.
В таких случаях прибегают к гистологическому изучению биопсийного материала, набранного из первичных, вторичных или третичных сифилидов. Это исследование не гарантирует 100% точности при трепонемной инвазии, если его рассматривать в отрыве от клинической картины и данных анамнеза.
Для максимально точной и достоверной диагностики сифилиса, важен комплексный подход. Результаты любых анализов следует рассматривать как ценную, но вспомогательную информацию.
Для постановки точного диагноза и во избежание ложных результатов проходите обследование у грамотный венерологов.
источник
Заболевание распространяется не только половым путем, но и при использовании зубной щетки, кухонной посуды, полотенца и других бытовых предметов вместе с больным человеком. Иногда болезнь может протекать бессимптомно (пассивный вид), при этом остается риск заражения окружающих. Сдать анализ на сифилис можно в районной поликлинике и частном врачебном кабинете анонимно. Как называется анализ и где его можно сдать.
Наиболее часто для анализа на сифилис используется кровь пациента. Иногда в крови содержатся антитела, вызывающие ложноположительную реакцию.
В таких случаях возможный диагноз может быть подтвержден исследованиями другого биологического материала:
- Распространяются по организму и затрагивают спинной мозг. Специальный анализ крови на сифилис Реакция по Вассерману, может подтвердить наличие болезни
- Жидкость, взятая из язвы (твердого шанкра). Исследование вещества имеет высокую достоверность и может быть назначено по клиническим показаниям
- Лимфоузлы в паховой области при развитии болезни воспаляются и увеличиваются. Обследование воспаленных участков может помочь диагностике
- Венозная или артериальная кровь. Кровь на сифилис должна сдаваться натощак из вены или пальца в зависимости от типа анализа
Чтобы узнать, где сдать все анализы на сифилис, нужно обратиться к врачу при первых признаках заболевания. Лабораторные исследования проводятся во многих частных и государственных лабораториях. Сдачу крови на сифилис можно провести в медицинском учреждении или вызвать лаборанта на дом. Должный вид теста определяет врач. Лаборатория проведет тест на сифилис и исследование покажет наличие и отсутствие болезни.
Какие анализы сдают на сифилис, этот вопрос часто можно услышать от пациентов. Сегодня существует несколько видов тестов, которые могут показать наличие инфекции в крови. Анализ крови на сифилис, известный как темнопольная микроскопия, является современным методом диагностики с достаточно высокой достоверностью результатов. Исследуемый материал изучается при большом увеличении и специальном подсвечивании образца.
Исследование выявляет наличие бледных трепонем (возбудителя сифилиса) на более темном фоне.
При простом исследовании образца под микроскопом достоверность метода составляет 97% и позволяет обнаружить болезнь у 8 из 10 зараженных. Если анализ крови при сифилисе показывает отрицательный результат, но у пациента имеются ярко выраженные клинические симптомы сифилиса, назначается дополнительное исследование.
Самые точные исследования называются ПЦР анализы на сифилис или полимеразная цепная реакция. Для проведения исследования требуется современное медицинское оборудование и квалифицированные специалисты. Где же можно сдать анализы на сифилис по данному методу? К сожалению, анализ ПЦР могут предложить только частные лаборатории. Ввиду сложности проведения и высокой стоимости анализа, немногие лаборатории предлагают исследование с помощью полимеразной цепной реакции.
В предоставленном образце крови определяется наличие или отсутствие молекул ДНК возбудителя болезни. Достоверность ПЦР на сифилис приближена к 100% и является основой для подтверждения или опровержения диагноза лечащим врачом. Современное молекулярное исследование позволяет обнаружить в исследуемом образце наличие всего двух молекул заболевания. Получить самый точный результат ПЦРа на сифилис можно только при соблюдении всех правил и норм лабораторных исследований. Тест на сифилис может быть готов уже через 5 часов после забора крови. Стоит отметить, что общий анализ крови не выявляет данную инфекцию.
Серологическая диагностика сифилиса предусматривает анализ крови на наличие антител. Существует несколько видов исследований, кровь на которые можно сдать в лаборатории. При проведении медицинских осмотров и обследовании большого количества пациентов назначаются, как правило, один из нетрепонемных (неспецифических) анализов. Если в крови обнаруживаются антитела к сифилису, результат анализа считается положительным. Какие анализы на сифилис следует сдавать пациенту, зависит от клинической картины. На сифилис анализ должен быть назначен квалифицированным врачом.
Реакция Вассермана широко распространенный тест, который может показать заражение на 6 неделе болезни. Другое название исследования или «RW». Для проведения анализа необходимо сдать кровь из вены или пальца натощак. Обычно лаборатории проводят забор крови сутра и рекомендуют пациентам воздерживаться ночь (8–12 часов) от еды и напитков, кроме минеральной воды. Реакция Вассермана определяет заражение по количеству титров антител. Отрицательный результат помечается математическим знаком «минус» (-).
Слабоположительный результат маркируется одним или двумя плюсами (+, ++), положительный тремя плюсами (+++) и четыре плюса (++++) означают резко положительную реакцию.
Также к нетрепонемным методам исследований относится RPR тест. Это исследование считается более современным и точным по отношению к RW анализу. RPR проводится на венозной крови пациента и выявляет наличие антител к фосфолипидам цитоплазматической мембраны. РПР тест можно сделать в частной клинике.
Похожим способом является реакция микропреципитаци, которую используют в современных лабораториях.
Микрореакция преципитации (МРП или ) проводится спустя 4–5 недель после предполагаемого заражения. Для исследования используется капиллярная кровь. Микрореакция на сифилис не относится к точным методам диагностики. Положительная серологическая реакция на сифилис по МРА должна быть подтверждена одним из специфических тестов. Отрицательный результат теста означает начальную стадию или отсутствие заболевания.
Почему нужно сдавать анализ на сифилис повторно? Часто трепонемные исследования используются в качестве контрольного анализа, чтобы подтвердить или опровергнуть диагноз после нетрепонемного теста. Сомнительный результат первого теста означает, что придется сдать анализы на сифилис повторно.
Реакция пассивной агглютинации (РПГА, РНГА). Анализ на сифилис РПГА является быстрым методом исследования, результат можно узнать уже через час. Чтобы проверить кровь на наличие сифилиса по , анализ проводится спустя месяц после контакта с больным. Гемагглютинация может давать ложноположительный результат при мононуклеозе и ряде других заболеваний.
Для диагностики болезни на ранних стадиях применяется Реакция иммунофлюоресценции (). Анализ крови из пальца или вены с помощью РИФ может выявить заболевание спустя 1,5–2 месяца после контакта с больным.
Во время проведения антитела четко выделяются свечением в ультрафиолетовом свете.
При беременности или наличии системных заболеваний соединительной ткани (ревматоидный артрит и пр.) может оказаться ложноположительным. Поэтому очень важно предоставить врачу достоверную информацию о себе и медицинскую карту. Положительная реакция обозначается знаками «+» от одного до четырех.
Реакция иммобилизации бледной трепонемы, также известная как пользуется высокой популярностью. Серодиагностика по методу РИБТ достоверна в 99% случаев. Однако анализы крови могут быть назначены только спустя 12 недель после контакта с носителем болезни.
проводится спустя 3,5–4 месяца после возможного заражения. Заболевание определяется с вероятностью 99%.
Иммуноблотинг способен дать 100% результат и реагирует даже на очень маленькое содержание антител в крови пациента.
Иммуноферментный анализ или ИФА способен выявить болезнь уже спустя 3 недели после возможного заражения. Достоверность положительного результата составляет 98%. Этот анализ называют одним из самых точных. Как же очистить кровь от сифилиса? Как лечат сифилис какие нужны повторные обследования скажет квалифицированный врач. Не занимайтесь самолечением!
Может называться и выглядеть в зависимости от производителя, например, или «Профитест». Тест для самодиагностики не предоставит развернутый анализ, но поможет определить наличие или отсутствие болезни с вероятностью более 98% (при условии, что тест проведен правильно).
Набор РМП на сифилис состоит из пластиковой формы с тестовой полоской, острого инструмента для прокалывания кожи на пальце, одноразовой пластиковой пипетки, бутылочки с раствором для разведения крови и подробной инструкции на русском языке. Перед проведением анализа нужно придерживаться тех же правил, что и в медучреждении, очищать руки и поверхность стола перед работой.
При помощи острого приспособления из набора прокалывают палец, одноразовой пипеткой набирают 1 каплю крови и помещают на обозначенное место . Затем добавляют 2 капли раствора и оставляют на 10 минут. Спустя указанное время, будет готов результат. Какие могут быть варианты? Результата всего два: одна полоса означает отсутствие заболевание, две полосы свидетельствуют о положительной реакции и являются поводом обратиться к врачу.
Подтвердить или опровергнуть результаты домашнего теста может серодиагностика.
Стоит отметить, что тест может показать положительный результат и уже после успешного лечения сифилиса. Все дело в том, что организм помнит о перенесенной инфекции еще несколько лет и продолжает вырабатывать антитела к сифилису. Однако количество этих антител постепенно снижается, и при отсутствии повторного заражения перестают вырабатываться в среднем в течение 2–3 лет после успешного лечения. Однако некоторые факторы могут замедлять этот процесс. К ним относится прием алкоголя и наркотических средств. Поэтому задумываясь, как очистить кровь после сифилиса, в первую очередь откажитесь от вредных привычек.
Как избавиться от сифилиса и какое лечение нужно пройти? Сразу стоит отметить, что лечение должен назначать только опытный врач. Терапия от сифилиса проводится с помощью антибиотиков в течение долгого времени. Чтобы кровь очистилась от антител нужно не менее 2 лет. Кровь очищается медленно и постепенно. То есть после полученного лечения антитела вырабатываются все меньше и в конце концов перестают определяться в крови. Чтобы контролировать этот процесс пациентам приходится сдавить анализы в течение 3 лет.
Исследование крови на сифилис обязательно для людей многих профессий (врачи, военные, повара и пр.) для получения допуска к работе. В таком случае постоянно, при каждом медосмотре, будет назначена серология или другой тип анализа. При беременности также обязательно проводится исследование на сифилис, анализы назначает врач. Некоторые типы анализов, например РИФ, часто бывает ложноположительным. Какие сегодня самые точные анализы на сифилис, вам подскажет врач.
Хотите читать всё самое интересное о красоте и здоровье, подпишитесь на рассылку!
Понравился материал? Будем благодарны за репосты
источник
Сегодня мы разберем, какие анализы сдают на сифилис.
Какой наиболее точный анализ на сифилис, и, какие анализы сдают на ранних и поздних стадиях сифилиса, вы узнаете в данной статье.
Сифилис — это довольно опасное венерическое заболевание, которое передается половым путем и контактно-бытовым путем.
Анализы, которые сдают на сифилис можно отнести к нескольким категориям.
- I. Специфичные анализы, основанные на определении бледных трепонем;
- II. Неспецифичные тесты на сифилис;
- III. Скрининговые исследования.
Проблема в том, что большинство анализов на сифилис неспецифичны.
Это значит, что данные анализы могут показывать положительный результат, при отсутствии заболевания.
Подобные анализы основываются на определении различных элементов в крови пациента.
Наиболее распространенный скрининговый анализ на сифилис, это реакция Вассермана.
Сокращенно реакция Вассермана называется RW.
Реакция Вассермана использовалась повсеместно, для определения положительного результата на сифилис.
На сегодняшний день этот метод считается устаревшим.
Современный замена анализу RW это — RPR-тестирование.
Тест выявляет антитела к кардиолипину, который входит в состав трепонемы.
Так же кардиолипин образуется при разрушении клеток организма человека бледной трепонемой.
Внедрившись в организм возбудитель сифилиса начинает активно размножаясь разрушать клетки хозяина.
В результате в кровь выделяются фосфолипиды, это составные части клеточной стенки.
Одним из них является кардиолипин.
К этим соединениям и вырабатываются антитела, которые и обнаруживает реакция RPR.
Обнаружение сифилиса данным анализом доступно только после начала, массированного разрушения клеток и выработки антител иммунной системой.
Как правило это происходит не ранее чем через 1,5-2 месяца от момента заражения сифилисом.
Поэтому этот анализ не подходит для диагностики первичного сифилиса или свежего вторичного периода заболевания.
Однако, данная реакция может выполняться в количественном выражении (титрах).
Для этого при положительном результате сыворотку крови пациента разводят водой (физиологическим раствором).
Сначала добавляют к 1 части сыворотки 2 части воды, затем 4, 8 и т. д.
Это делают до тех пор, пока реакция РПР не станет отрицательной.
Последний положительный результат и отображают в бланке анализа, где пишут «положительный 1:2».
Этот результат чрезвычайно важен для диагностики после лечения сифилиса.
Когда титры положительной реакции должны постепенно снижаться.
Несомненным минусом данной реакции является так же, и обязательная оценка результата человеком.
Это вносит субъективный фактор в оценку результата анализа.
Именно поэтому для контроля сифилиса рекомендуют сдавать анализы в одной и той же клинике.
RPR тест, как и реакция Вассермана, может давать ложноположительные результаты.
Чаще всего ложные реакции на сифилис проявляются при наличии системных заболеваний, сахарного диабета или у женщин при беременности.
Так же ложно положительные реакции на сифилис могут быть при любых массивных разрушениях клеточных стенок организма.
Это может быть при травмах, операциях, аутоиммунных заболеваниях (красная волчанка, склеродермия).
источник
Анализ на сифилис делают, применяя множество методик обнаружения возбудителя. При развитии патологии проявляется большое количество специфических признаков, поэтому с целью установления точного диагноза больного человека обследуют комплексно. Общий анализ крови при этом малоинформативен, его не используют при диагностировании данной венерической инфекции.
Для выявления болезни используют различные методики и биоматериалы. На ранних этапах сифилис определяют с помощью бактериоскопического теста. Образцы исследуют под микроскопом. Прибор позволяет обнаружить штаммы возбудителя. Позднее проводят серологические анализы крови. Благодаря им, в пробах выявляют антигены и антитела сифилиса.
Способы определения половой инфекции поделены на 2 категории:
- Прямые, выявляющие патогенный микроорганизм. К ним относят: темнопольная микроскопия, RIT-анализ (инфицирование кроликов биоматериалом для исследования), метод ПЦР – полимеразной цепной реакции (с его помощью находят генетические элементы возбудителя).
- Непрямые (серологические) позволяют обнаружить антитела к патогену. Они продуцируются иммунной системой, как ответная реакция на заражение.
Серологические методики поделены на 2 категории: трепонемные и нетрепонемные.
- Нетрепонемные, включающие: тест с толуидиновым красным, анализ РСК, RPR- тест, исследование крови экспресс-методом РМП.
- Трепонемные, включающие: иммуноблоттинг, РСК-тест, РИТ-анализ, исследование РИФ, РПГА-тест, ИФА-анализ.
Информативность тестов на инфекцию различна. Чаще делают основные виды анализов на сифилис, к которым отнесены серологические методики.
Чтобы выявить бледную трепонему – патогена, который выглядит, как спираль и вызывает сифилис, берут пробы:
- венозной крови;
- ликвора (секрета из спинномозгового канала);
- содержимое лимфатических узлов;
- ткани изъязвлений.
Если необходимо провести тесты на обнаружение сифилиса, кровь сдают не только из локтевой вены, но и из пальца. На выбор биоматериала и способ исследования влияет тяжесть течения инфекции и оснащенность диагностического центра.
Убедительным доказательством сифилиса является выявление возбудителей инфекции под микроскопом. Таким способом находят патоген у 8 обследуемых из 10. Отрицательный результат у 2 оставшихся пациентов не говорит о том, что они не инфицированы.
Исследование делают на первичном и вторичном этапе (стадии) заболевания, для которых характерно появление высыпаний на коже и сифилом (изъязвлений) на эпителиальных тканях или слизистых оболочках. В отделяемом из очагов поражения находят патогены, вызывающие венерическое заболевание.
Точнее с определением трепонем справляется сложный тест, обозначающийся как РИФ – реакция иммунофлуоресценции. Образец для исследования предварительно обрабатывают флуоресцентными антителами. Соединения, способные светиться, склеиваются с бактериями. Рассматривая под микроскопом образцы, в случае заражения лаборант видит сверкающих возбудителей.
Тест используют для раннего диагностирования болезни. Чем дольше длится заболевание, тем ниже чувствительность исследовательских способов. Кроме того, она падает после обрабатывания высыпаний и язв антисептическими средствами и у пациентов, прошедших лечение. Изредка исследование дает ложноотрицательные и ложноположительные результаты.
RIT-анализ – высокоточный способ обнаружения сифилиса. При проведении теста результаты приходится ждать долго. До тех пор, пока у инфицированного кролика не проявятся признаки инфекции. Тест применяют очень редко, несмотря на то, что он сверхточен.
С помощью полимеразной цепной реакции на сифилис определяют генетические элементы патогенов. Единственный недостаток ПЦР – дороговизна.
Такие анализы крови помогают выявить антитела, появляющиеся в ответ на кардиолипин – соединение, относящееся к общему строению мембран патогенов.
Самым известным исследованием на сифилис считается реакция Вассермана. РВ входит в категорию реакций связывания комплемента (РСК). Новые методы РСК обладают существенными отличиями от традиционной RW. Но обозначаются они, как и раньше понятием «реакция Вассермана».
Иммунная система, синтезирует антитела (маркеры) в ответ на вторжение трепонем. Их выявляют при анализе крови на сифилис методом реакции Вассермана. Положительный результат RW подтверждает инфицирование обследуемого.
Реакция гемолиза – индекс РВ анализа. При ней взаимодействуют 2 субстанции: гемолитическая сыворотка и эритроциты барана. Сыворотку делают, иммунизируя кролика эритроцитами барана. Активность биологической жидкости снижают путем прогревания.
Показатели РВ зависят от того, прошел гемолиз или нет. В пробе чистой от маркеров происходит гемолиз. При этом реакция на антигены невозможна. Комплемент тратится на взаимодействие с бараньими эритроцитами. Когда в образце есть маркеры, комплимент вступает в реакцию с антигенами. В этом случает гемолиз не протекает.
источник
Сифилис – одно из самых опасных венерических заболеваний, возбудителем которого является бледная трепонема. Вредоносные микроорганизмы могут проникнуть в организм после незащищенного полового акта и бытовым путем. Сегодня анализ крови на сифилис является базовым, его проводят при медицинском профосмотре, а также требуют при устройстве на работу в некоторые организации.
Кроме того, процедура в обязательном порядке назначается беременным женщинам. Самым эффективным методом диагностики этого заболевания является лабораторное исследование венозной крови. Как называется анализ на сифилис, как к нему подготовиться и насколько достоверно такое исследование?
Условно все анализы на сифилис называются ОРС. Аббревиатура расшифровывается как отборная реакция на сифилис. Под этим термином подразумевается диагностическое лабораторное исследование, в ходе которого можно обнаружить антитела к фосфолипидам, формирующиеся из-за поражения клеток и тканей, вызванного бледной трепонемой.
Проверка на сифилис чаще всего проводится людям с подозрением на наличие заболевания, а также пациентам, которым назначено полноценное медицинское обследование. При этом стоит учитывать, что исследование предполагает проведение дополнительного анализа на ВИЧ и гепатит.
И также тестирование на сифилис назначается в следующих случаях:
- постановка женщины на учет при беременности;
- если пациент выступает как донор;
- при пребывании в местах лишения свободы;
- если предыдущие анализы показали присутствие в крови пациента наркотических веществ;
- длительное увеличение размера региональных лимфатических узлов;
- продолжительная лихорадка неясной этиологии;
- предыдущее тестирование показало присутствие бледной трепонемы;
- если у человека был половой контакт с зараженным сифилисом;
- возникновение сомнительной симптоматики, указывающей на развитие заболевания (первый признак сифилиса – появление высыпаний в области половых органов).
И также сдать биоматериал на исследование необходимо, если человек хочет устроиться на работу в некоторые учреждения:
- воинская часть;
- больницы, поликлиники, лаборатории;
- кафе, рестораны, столовые и другие места общественного питания;
- школы, детские садики.
Регулярное тестирование нужно проводить пациентам, у которых уже диагностировано данное заболевание. В этом случае анализ назначается для оценки эффективности выбранной схемы лечения.
Для выявления сифилиса или подтверждения его отсутствия используются разные методы диагностики и типы анализов. Наиболее информативным и точным методом исследования является изучение венозной крови пациента. Забор биоматериала может осуществляться как из вены, так и из пальца (в зависимости от типа лаборатории и методики).
В некоторых случаях обнаружение бледной трепонемы может осуществляться при помощи других образцов:
- ликвор (секрет, продуцирующийся в спинномозговом канале);
- содержимое лимфоузлов;
- ткани изъязвлений.
Каждое из существующих тестирований отличается информативность, имеет определенные преимущества и недостатки. Решать, каким именно способом сдавать анализ на сифилис, должен только лечащий врач, учитывая индивидуальные особенности пациента.
Самый распространенный способ диагностирования сифилиса – проведение общего анализа крови. Данная иммунологическая процедура называется реакцией Вассермана. Тестирование относится к классу РСК (реакция связывания комплемента) и впервые было проведено в 1906 году.
Оно базируется на способности венозной крови сворачиваться и образовывать комплекс при взаимодействии с антигенами. Современные методы РСК в выявлении сифилитической инфекции существенно отличаются от классической RW. По сути, эти процедуры имеют только одинаковое название.
Постановка диагноза осуществляется с учетом того, присутствуют ли в исследуемом образце антитела, свидетельствующие о наличии заболевания. Несмотря на то что тестирование является максимально информативным и достоверным, нельзя исключать вероятности проявления ложноположительной реакции.
Ложноположительный ответ связан с тем, что в человеческом организме изначально присутствует кардиолипин, однако обычно иммунная система не создает антитела против родного антигена. Но медицинская практика показывает, что исключения случаются. Чаще всего это происходит, если человек недавно перенес вирусное заболевание тяжелой формы или столкнулся со следующими заболеваниями:
- воспаление легких;
- дисфункция почек;
- гематологические заболевания.
И также ложноположительная реакция нередко проявляется во время беременности, что сопровождается сильным ослаблением иммунной системы. Если специалист подозревает, что тестирование показало ложноположительный результат, пациенту назначаются дополнительные расширенные анализы.
Сегодня этот метод обнаружения сифилиса в крови постепенно вытесняет все остальные способы диагностики заболевания. Реакция микропреципитации – исследование, которое по механизму проведения схоже с реакцией Вассермана. Но в то же время процедура отличается простотой и большей информативностью – если образец заражен, в нем обязательно появятся белые хлопья.
Еще одно преимущество РМП – кровь на анализ берется не из вены, а из пальца. Если с момента заражения прошло более 30 дней, методика гарантированно покажет положительный результат. Риск получения ложноположительных сведений при таком тестировании сведен к минимуму и может проявиться только на фоне таких нарушений:
- обострившиеся инфекции;
- недавно перенесенный инфаркт;
- кровоизлияние в мозг;
- сильная интоксикация организма.
Еще один распространенный метод диагностирования сифилиса, осуществляемый при помощи венозной крови. Чтобы РИБТ дала правильный результат, за несколько дней до сдачи биоматериала необходимо исключить прием антибактериальных препаратов.
Это связано с тем, что большая часть антибиотиков при попадании в организм блокируют и подавляют деятельность бледных трепонем. Положительный ответ РИЮТ проявляется примерно с середины второй стадии заражения и может сохраняться даже после окончания лечения.
Многие пациенты сталкиваются с такой проблемой, что даже после окончания лечения сифилиса анализ показывает положительный результат. Выявить и оценить достоверную клиническую картину можно при помощи сверхчувствительных тестов РИФ (реакция иммунофлюоресценции) и РИТ (реакция иммобилизации трепонем).
РИФ анализ при сифилисе показывает положительную реакцию спустя 2 месяца после инфицирования. Если же тестирование показало отрицательный результат, значит, пациент здоров. Чаще всего РИФ и РИТ анализы делаются при положительной реакции микропреципитации для подтверждения достоверности результата.
К наиболее информативным и самым точным методам диагностики сифилиса относят тесты ИФА (иммуноферментный анализ) и РПГА (реакция пассивной гемагглютинации). Основное преимущество этих исследований – они готовятся в течение короткого периода времени.
РПГА дает положительный ответ уже через месяц после инфицирования и чаще всего проводится одновременно с нетрепонемными и трепонемными тестами. Обычно при помощи РПГА диагностируется первичная форма заболевания, сопровождающаяся возникновением язв и сыпи. Поскольку РПГА длительное время показывает положительную реакцию, методику редко применяют для оценки эффективности назначенной схемы лечения.
Иммуноферментный анализ может показать присутствие вредоносных микроорганизмов уже через 3 недели после инфицирования. Ложноположительный результат проявляется редко и чаще всего связан с системными патологиями или дисфункцией обменных процессов.
Провести тестирование на сифилис можно в любой лаборатории Москвы и других крупных городах. Чаще всего назначение на исследование выписывается врачом-венерологом. При желании тестирование можно провести и анонимно, без направления.
Чтобы результаты анализа были достоверными, перед процедурой необходимо придерживаться правил подготовки:
- поскольку забор биоматериала осуществляется натощак, перед процедурой запрещено есть. Единственное, что допускается – пить воду;
- за 3 суток до анализа рекомендуется отказаться от потребления жирной пищи и алкогольной продукции;
- если пациент принимал антибиотики, анализ можно проводить только спустя неделю после окончания лечения.
Откуда берут кровь на сифилис, зависит от типа назначенной процедуры, но в большинстве случаев забор биоматериала осуществляется из вены. Время расшифровки результата зависит от типа лаборатории, обычно лаборанты предоставляют результаты уже через 1–2 дня. И также в некоторых клиниках предоставляется услуга экстренной проверки, когда результаты выдаются на руки уже через несколько часов после сдачи крови.
Большинство клинических лабораторий выдает бланк с результатами на руки пациенту. Полученный бланк необходимо отнести врачу, назначившему исследование, который, отталкиваясь от полученных сведений, оценит общую клиническую картину. Может ли пациент самостоятельно прочесть результаты тестирования?
Изучая описанные сведения, можно сделать только предположительный вывод, но окончательный диагноз ставится исключительно квалифицированным специалистом. При профилактическом осмотре или экспресс-диагностике чаще всего назначаются нетрепонемные тесты. Результат тестирования обозначается таким образом:
- «-» – отрицательный результат;
- «+», «++», «1+» «2+» – слабоположительный результат;
- «+++», «++++», «3+», «4+» – положительный анализ на сифилис.
При этом стоит учитывать, что полученный результат может быть как ложноположительным, так и ложноотрицательным. Если следы сифилиса у пациента отсутствуют, и у человека не было незащищенных половых актов с новыми партнерами, врач может истолковать ложный результат как верный.
Сифилис – опаснейшее заболевание, которое медленно и бессимптомно развивается и ведет к тяжелым осложнениям вплоть до гибели пациента. Именно поэтому проводить тестирование на присутствие заболевание время от времени рекомендуется каждому человеку. При своевременном обнаружении болезни терапия будет более эффективной и сведет к минимуму риск развития плачевных последствий.
источник
Анализ на сифилис является одним из самых распространенных среди лабораторных исследований. Широко используются анализы на сифилис при проведении профилактических обследований. При помощи микроскопии выявляется возбудитель сифилиса — бледная трепонема. При помощи серологических реакций подтверждается диагноз сифилиса, устанавливается диагноз скрытого сифилиса, проводится контроль эффективности лечения, определяется излеченность больных.
Диагноз сифилиса устанавливается на основании клинических данных, обнаружении возбудителей сифилиса в образцах материала и подтверждении диагноза серологическими методами исследования. Проявления сифилиса многочисленны и многообразны, ввиду чего болезнь выявляется врачами разных специальностей. Дифференциальная диагностика первичного сифилиса проводится с целым рядом заболеваний.
Рис. 1. На фото первичное проявление сифилиса — твердый шанкр.
При заражении сифилисом в организме больного образуются антитела. Серологическая диагностика помогает врачу изучать динамику образования антител в организме больного сифилисом в начальных стадиях заболевания, в период лечения и после его окончания, решить вопрос рецидив заболевания у больного или повторное заражение (реинфекция), поставить диагноз сифилиса при массовых медицинских условиях.
Первыми после заражения начинают вырабатываться антитела IgM. Они начинают выявляться при помощи серологических реакций уже со второй недели после заражения. На 6 — 9 неделях заболевания их количество становится максимальным. Если больной не лечился, то антитела исчезают через полгода. Антитела IgM исчезают через 1 — 2 мес. после лечения раннего сифилиса, через 3 — 6 мес. — после лечения позднего сифилиса. Если регистрируется их рост, то это служит признаком рецидива сифилиса или говорит о повторном заражении. Молекулы IgM крупные и через плаценту к плоду не переходят.
Антитела иммуноглобулины IgG появляются в конце первого месяца (на 4-й неделе) от момента заражения. Их титр выше, чем титр IgM. IgG сохраняются после излечения достаточно длительное время.
Существует множество серологических реакций. Это объясняется антигенной множественностью бледных трепонем. В сыворотке крови больного человека на разных стадиях сифилиса кроме специфических образуются те или иные неспецифические антитела — агглютинины, комплементсвязывающие, иммобилизины, антитела, вызывающие иммунную флюоресценцию, преципитины и др. Серологические реакции по выявлению неспецифических антител обладают относительной специфичностью поэтому, чтобы избежать диагностических ошибок, следует пользоваться не одним, а комплексом серологических реакций (КСР).
Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций. Антитела-реагины, которые вырабатываются в крови человека против кардиолипинового антигена, регистрируются не только при сифилисе, но и при других заболеваниях: коллагенозах, гепатитах, заболеваниях почек, тиреотоксикозе, онкозаболеваниях, при инфекционных заболеваниях (лепра, туберкулез, бруцеллез, малярия, сыпной тиф, скарлатина), при беременности и месячных циклах, при приеме жирной пищи и алкоголя. Отмечено, что с возрастом количество ложноположительных реакций возрастает.
Рис. 2. На фото первичный сифилис у женщин.
Серологические тесты на сифилис подразделяются на трепонемные и нетрепонемные.
В качестве антигена в этой группе тестов используется кардиолипиновый антиген. Липидные антигены возбудителей сифилиса самые многочисленные. Они составляют 1/3 сухой массы клетки. С помощью нетрепонемных тестов выявляются антитела-реагины, которые вырабатываются против кардиолипинового антигена. В эту группу входит реакция связывания комплемента (РСКкард), реакция микропреципитации (РМП), реакция быстрого определения реагинов плазмы (RPR) и др. С помощью нетрепонемных тестов проводится первичный скрининг на сифилис (обследование групп населения), а возможность получения результатов в количественном варианте позволяет использовать эти тесты с целью контроля эффективности лечения. Положительные результаты нетрепонемных тестов должны подтверждаться трепонемными тестами. Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций.
В трепонемных тестах используются антигены трепонемного происхождения, выделенные из культуры бледных трепонем. С их помощью подтверждаются положительные результаты нетрепонемных тестов. В группу входят: РСКтреп — реакция связывания комплемента, РИФ — реакция иммунофлюоресценции и ее модификации, РИТ, РИБТ — реакция иммобилизации бледных трепонем, РПГА — реакция пассивной гемагглютинации, ИФА — иммуноферментный анализ.
Антигены для данной группы тестов получают генно-инженерным путем и используют в реакциях — РПГА и ИФА, в анализах иммуноблоттинга (ИБ) и иммунохроматографическом анализе.
Рис. 3. Для диагностики сифилиса используется комплекс серологических тестов.
Для выявления сифилиса используются нетрепонемные тесты или комплекс серологических реакций (КСР). Серологическая диагностика применятся с 5-й недели от момента заражения или с 2-3 недели после появления твердого шанкра. Антитела выявляются практически у всех больных со свежим первичным, вторичным и рецидивным сифилисом. Серологические реакции положительные у 70 — 80% больных с третичным активным сифилисом, в 50 — 60% случаев у больных третичным скрытым сифилисом.
Серологические реакции с применением нетрепонемных тестов могут давать ложноположительные результаты.
Рис. 4. Забор крови для проведения анализа на сифилис.
Реакция Вассермана (RW, РВ), изобретенная А. Вассерманом более 100 лет назад, сегодня претерпела множество изменений, однако, как дань традиции, сохранила свое название по настоящее время. Реакция связывания комплемента с применением кардиолипинового антигена предназначена не только для выявления антител, но и выполняется в количественном варианте — с разными разведениями сыворотки, что позволяет использовать ее для контроля эффективности лечения. Низкая чувствительность и специфичность, получение ложноположительных результатов — отрицательные стороны данного вида исследования.
Суть реакции Вассермана заключается в следующем: антигены, которые применяются при постановке реакции Вассермана, в случае наличия антител к возбудителям сифилиса в крови человека посредством комплимента связываются с ними и выпадают в осадок. Интенсивность реакции обозначают знаком (+). Реакция может быть отрицательной (-) — отсутствие осадка, сомнительной (небольшой осадок или +), слабоположительной (++), положительной (+++) и резко положительной (++++).
Более чувствительной является видоизмененная реакция Вассермана — реакция Колмера. С ее помощью выявляются антитела в сыворотках, где реакция Вассермана дала отрицательный результат.
При резко положительных реакциях проводится количественное определение реагинов, для чего используется сыворотка в разведениях от 1:10 до 1: 320, что позволяет использовать данный вид исследования для контроля эффективности лечения. Например, снижение титра антител и последующая их серонегативация (получение отрицательных результатов), говорит об успешном излечении заболевания.
Рис. 5. Анализ крови на сифилис — реакция Вассермана.
Микрореакция преципитации применяется для массовых обследований отдельных групп населения, диагностики сифилиса и контроля над эффективностью лечения. Для проведения данного вида исследования необходимо небольшого количества исследуемого материала. В основе микрореакции преципитации лежит иммунологическая реакция антиген-антитело. В случае наличия антител в сыворотке крови обследуемого комплекс антиген-антитело выпадает в осадок с образованием хлопьев. Реакция проводится в лунках специальной стеклянной пластины. Оценивается по интенсивности выпавшего осадка и величине хлопьев в (+) как реакция Вассермана. При обследовании беременных, доноров и для контроля эффективности лечения не применяется. VDRL и RPR являются разновидностями микрореакций.
Рис. 6. Вид реакции преципитации в капле на стекле.
Рис. 7. Анализ крови на сифилис — реакция микропреципитации.
Рис. 8. Набор для проведения реакции быстрого определения реагинов плазмы (Тест на сифилис RPR).
Все положительные тесты, полученные при проведении неспецифических серологических реакций, требуют подтверждения специфическими реакциями — трепонемными тестами.
При проведении трепонемных тестов используются антигены трепонемного происхождения. Их отрицательной стороной является невозможность использования для контроля эффективности проводимого лечения, получение положительных результатов при спирохетозах и невенерических трепонематозах и получение ложноположительных результатов при онкологических заболеваниях, лепре, некоторой эндокринной патологии. Такие тесты, как РПГА, ИФА и РИФ остаются положительными многие годы после излечения сифилиса, а в некоторых случаях и пожизненно.
РИБТ и РИФ являются более специфическими из всех серологических реакций, применяемых для диагностики сифилиса. Они позволяют различать ложноположительные реакции, выявлять поздние формы сифилиса, протекающие с отрицательными реакциями. При помощи РИБТ распознаются ложноположительные реакции у беременных, когда необходимо решить вопрос об инфицированности ребенка.
Суть реакции заключается в том, что антитела, находящиеся в сыворотке крови больного, обездвиживают бледные трепонемы. Отрицательной считается реакция при иммобилизации до 20% возбудителей, слабоположительная — 21 — 50%, положительная — 50 — 100%. РИБТ иногда дает ложноположительные результаты. Тест сложный и трудоемкий, однако, является незаменимым при проведении дифференциальной диагностики скрытых форм заболевания и ложноположительных результатов серологических реакций, в том числе у беременных. РИБТ дает 100% положительный результат при вторичном, раннем и позднем сифилисе, в 94 — 100% случаев — при других формах сифилиса.
Суть реакции заключается в том, что бледные трепонемы (антигены), соединенные с антителами, меченными флюорохромами, издают в люминесцентном микроскопе желто-зеленое свечение. Результат оценивается знаком (+). С помощью РИФ выявляются иммуноглобулины класса А. Реакция иммунофлюоресценции становится положительной раньше, чем реакция Вассермана. Она всегда положительная при вторичном и латентном сифилисе, в 95 — 100% случаев положительная при третичном и врожденном сифилисе. Техника проведения данного вида исследования проще, чем у РИБТ, но заменить РИФ на РИБТ невозможно, так данная реакция уступает РИБТ по специфичности. РИФ-10 (модификация РИФ) более чувствительна, РИФ-200 и РИФ-абс более специфичны.
Рис. 9. Анализ крови на сифилис — реакция иммунофлюоресценции (РИФ).
Суть реакции заключается в том, что сенсибилизированные сывороткой больного бледные трепонемы в присутствии комплемента прилипают к поверхности эритроцитов. Полученные комплексы при цетрофугировании выпадают в осадок. Чувствительность данного теста и специфичность близки к РИФ и РИБТ.
С помощью ИФА определяются иммуноглобулины класса М и G. Методика IgM – ИФА может быть использована в качестве скринингового и подтверждающего теста. Чувствительность ИФА и его специфичность аналогичны РИФ. При сифилисе ИФА дает положительные результаты с третьего месяца инфицирования и довольно долго (иногда всю жизнь) остается положительным.
Рис. 10. Иммуноферментный анализатор.
РПГА основана на способности эритроцитов, на которых адсорбированы антигены бледной трепонемы, в присутствии сыворотки больного склеиваться (гемагглютинация). РПГА применяется для диагностики всех форм сифилиса, в том числе скрытого. При применении высокого качества антигена данный вид серологической реакции превышает все остальные тесты по специфичности и чувствительности.
Рис. 11. РПГА применяется для диагностики всех форм сифилиса.
Рис. 12. Анализ на сифилис — реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации (схема).
Рис. 13. Вид перевернутого зонтика, занимающего все дно пробирки, свидетельствует о положительной реакции. В случае, когда эритроциты оседают столбиком («пуговка») в центре дна пробирки говорят об отрицательной реакции.
Рис. 14. Тест РПГА в лабораторных условиях.
Наряду с серологической диагностикой методика обнаружения бледных трепонем (микробиологическая диагностика) играет важную роль, особенно в период серонегативного сифилиса, когда еще в крови отсутствуют антитела, но уже есть первые проявления свежего первичного сифилиса (твердый шанкр).
Биологическим материалом для исследования служит отделяемое с поверхности твердых язв (шанкров), содержимое пустулезных сифилидов, мокнущих и эрозивных папул, пунктаты инфицированных лимфатических узлов, ликвор и амниотическая жидкость, для проведения ПЦР — кровь.
Наилучшей методикой обнаружения возбудителей сифилиса является исследование биологического материала в темном поле микроскопа. Данная методика позволяет увидеть бледные трепонемы в живом состоянии изучить ее особенности строения и движения, отличить патогенные возбудители от сапрофитов.
Рис. 15. Анализ на сифилис — темнопольная микроскопия.
Рис. 16. При изучении сухих мазков используется окраска по Романовскому-Гимзе. Бледные трепонемы окрашиваются при этом в розовый цвет, все остальные виды спирохет — в фиолетовый.
Обнаружение бледных трепонем при микроскопии в темном поле — абсолютный критерий окончательной диагностики сифилиса.
Рис. 17. Для выявления бактерий применяется реакция иммунофлюоресценции (РИФ) — трепонемный тест. Специфический комплекс антиген- антитело при соединении со специфической сывороткой, меченной флюорохромом, в свете люминесцентного микроскопа дает свечение бактерий зеленоватым цветом.
Рис. 18. Возбудители сифилиса хорошо просматриваются в мазках, приготовленных по методике Левадити (импрегнация серебром). Бледные трепонемы темного цвета на фоне желтой окраски клеток инфицированных тканей.
Рис. 19. Возбудитель сифилиса при многократном увеличении.
Рис. 20. На фото колонии бледных трепонем. Получить культуру бактерий тяжело. Они практически не растут на искусственных питательных средах. На средах, содержащих лошадиную и кроличью сыворотки, колонии появляются на 3 — 9 сутки.
Эффективным и перспективным сегодня является методика проведения полимеразной цепной реакции. ПЦР на сифилис позволяет получить результат в течение нескольких часов, а в собранном для диагностики материале может присутствовать хотя бы несколько возбудителей заболевания.
Рис. 21. ПЦР на сифилис позволяет обнаружить ДНК или ее фрагменты бледных трепонем.
Чувствительность данного метода исследования зависит от наличия в биологическом материале бледных трепонем и достигает 98,6%. Специфичность данного теста во многом зависит от правильного выбора мишени для амплификации при проведении диагностики и достигает 100%.
Вместе с тем, в связи с недостаточно изученной сравнительной характеристики чувствительности и специфичности прямых методов диагностики сифилиса и ПЦР, данный метод обследования в РФ для диагностики заболевания пока не разрешен.
ПЦР на сифилис разрешено проводить лишь в некоторых случаях, как дополнительный метод диагностики врожденного сифилиса, нейросифилиса, при затруднениях проведения диагностики сифилиса с использованием серологических методов исследования у ВИЧ-больных.
Рис. 22. Выявление ДНК бледной трепонемы с применением ПЦР говорит либо о наличии жизнеспособных бактерий, либо об остатках погибших, но содержащих способных к образованию дополнительных копий отдельных участков хромосомной ДНК.
источник