Меню Рубрики

Какие инфекции может выявить пцр анализ

ПЦР диагностика — это методика, основанная на применении полимеразной цепной реакции, с помощью которой можно обследовать человека на инфекционные и наследственные заболевания. Анализы ПЦР на 12 инфекций показывают результат, несмотря на то, остро протекает заболевание или хронически. Некоторые специалисты считают ПЦР 12 обязательным анализом и не ставят без него окончательный диагноз. Результаты могут быть положительными даже задолго до появления симптоматики болезни.

В 20 веке Кэри Мюллис из США открыл явление полимеразной цепной реакции. В настоящее время метод ПЦР является золотым стандартом в некоторых сферах медицины. Метод является максимально эффективным для выявления болезни в активной стадии, поскольку бывают случаи, что в активной стадии обычные методы не дают такого точного результата.

Диагностика инфекционных процессов при помощи ПЦР достаточно актуальна в современном мире. Преимуществами данного вида обследований являются следующие моменты:

  1. Обнаружение инфекционного возбудителя в анализах. Анализ предполагает выявление ДНК или РНК инфекционного агента.
  2. Практически исключены ложные и ошибочные реакции.
  3. Методика ПЦР 12 максимально чувствительная. Благодаря данному методу можно обнаружить даже единичные клетки инфекционных агентов.
  4. Результат ПЦР на скрытые возбудители готов уже через 4 часа после проведения процедуры.
  5. Способность обнаружения инфекционных агентов без отсутствия характерной симптоматики для заболевания. Метод достаточно эффективен и по происшествии конкретной болезни.

В современном мире ПЦР диагностика инфекций развивается ускоренными темпами. Методика активно совершенствуется. Появляются новые подвиды обследования ПЦР. Благодаря развитию данного метода обследования он становится максимально доступным широкому кругу людей, а стоимость при этом постепенно изменяется.

Метод ПЦР проводится исключительно в лабораторных условиях. Для его осуществления используются специальные ферменты, которые увеличивают в несколько раз структуру ДНК и РНК больного. Должно образоваться такое число ДНК и РНК, чтобы можно было провести визуальный анализ. Во время обследования происходит копирование того участка РНК или ДНК, который идеально подходит под требуемые условия.

В лаборатории существует соответствующая база данных, в которой указано точное строение различных инфекционных агентов. Благодаря методу ПЦР можно не просто увидеть возбудителя, но и подсчитать его количественное соотношение.

ПЦР-диагностика предполагает и определенные новшества, среди которых можно выделить следующие:

  • введение мутаций;
  • соединение отдельных фрагментов ДНК;
  • определение отцовства и др.

ПЦР диагностика может выявить следующие инфекционные процессы:

  • ВИЧ;
  • гепатиты следующих разновидностей: А, В, С, G;
  • вирус Эпштейн-Барра, возбудитель инфекционного мононуклеоза;
  • цитомегаловирус;
  • микобактерии туберкулеза;
  • герпес 1 и 2 типа;
  • многие инфекции, передающиеся половым путем: уреаплазмоз, гарднереллез, хламидиоз, микоплазмоз, трихомониаз.
  • ВПЧ и его онкогенные подвиды;
  • клещевой энцефалит и боррелиоз;
  • кандидозная инфекция;
  • листериоз;
  • инфекция хеликобактер пилори.

И это лишь часть наиболее распространенных инфекций, которые можно выявить при помощи ПЦР. ПЦР анализ крови активно применяется в гинекологической сфере медицинской практики, а также в таких областях, как:

  • пульмонологическая;
  • фтизиатрическая;
  • гастроэнтерологическая;
  • онкологическая;
  • многие другие разделы медицины.

Чужеродные ДНК и РНК можно выявить, обследовав разнообразные биологические жидкости конкретного человека. Для того чтобы обследовать человека на присутствие определенных инфекций, передаваемых половым путем, необходимо взять на пробу выделения из половых органов (мазок или соскоб) больного и его мочу.

Если возникла необходимость обследовать человека на различного рода инфекции (ВИЧ, герпес, гепатит и другие), то берется ПЦР анализ, для чего используется кровь больного.

Чтобы диагностировать герпетическое поражение, мононуклеоз, нужно взять мазок из полости рта больного. Для подтверждения ЦМВИ для осуществления анализа берется моча больного. Возникают случаи, когда обследуют спинномозговую жидкость для выяснения причин возникших неврологических отклонений.

Врач-пульмонолог при этом обследует методом ПЦР мокроту и жидкость из плевры конкретного больного.

Если у новорожденного ребенка возникло подозрение на внутриутробное инфицирование, врачи берут анализ околоплодных вод у беременной женщины и кусочек тканей плаценты.

Все пациенты, обследуемые по методу ПЦР, получают наиболее достоверный результат. В данном случае возникновение ошибок практически исключено. Результаты данного анализа готовятся достаточно быстро, что облегчает постановку диагноза и обеспечивает своевременное назначение лечебных мероприятий.

Достоверность результата ПЦР напрямую зависит от правильности сдачи материала на обследование. Материал не должен быть загрязнен, иначе результат исследования не будет объективен. К наиболее важным рекомендациям перед сдачей анализа ПЦР относятся следующие требования:

  1. Запрещено проявлять половую активность за сутки до проведения анализа.
  2. Анализ крови на инфекции необходимо сдавать на голодный желудок в утреннее время.
  3. Моча сдается утром в стерильный контейнер.

Результат анализа будет готов через 1,5-2 суток после проведения рассматриваемой процедуры. Встречаются такие ситуации, когда результат может быть подготовлен в тот же день.

Результат данного вида обследования может быть положительным и отрицательным. Отрицательный результат анализа крови говорит о том, что инфекционных элементов в сданном материале нет. Большое количество проведенных анализов ПЦР показывает отрицательный анализ.

Положительный анализ ПЦР подтверждает тот факт, что в сданном материале обнаружены инфекционные агенты и необходимо качественное, максимально эффективное лечение больного.

Результат может быть положительным, но какие-либо проявления заболевания отсутствуют. Это говорит или о начале заболевания, или о его носительстве. Если выявлено носительство болезни, то никакие лечебные мероприятия не требуются. Просто необходимо наблюдаться у специалиста. Примерами таких заболеваний являются:

  • папилломавирусная инфекция;
  • герпес и др.

Обычно их обнаруживают в слюне, соскобе из цервикального канала, уретре. Однако необходимо помнить, что больной человек может заразить абсолютно здоровых, несмотря на то, что его данная болезнь никак не беспокоит. Заболевание может перейти в хроническую форму. Следует отметить, что в тех случаях, когда ПЦР анализ крови показал положительный результат, назначение лечебных мероприятий просто необходимо.

Анализ ПЦР имеет еще и количественную характеристику. Количественный результат оценивает только специалист, он индивидуален для разных инфекций. Основываясь на количественной характеристике, врач способен понять, насколько активен данный патологический процесс, поставить точную стадию развития конкретного заболевания. Благодаря анализированию полученных результатов специалист может выбрать необходимый препарат и, возможно, пересмотреть дозировку препарата.

Специалистам дают ПЦР 3 важнейших характеристики, среди которых выделяют:

Диагностика инфекций методом ПЦР имеет большую вероятность обнаружения инфекционных агентов. ПЦР анализ крови и других жидкостей высокоспецифичен. С его помощью можно легко выявить конкретный инфекционный процесс. Диагностика ПЦР обладает высокой чувствительностью. Если в исследуемом материале содержится минимальное количество инфекционных агентов, метод ПЦР будет всегда положителен.

Наиболее редко бывает ложноположительный результат. Если инфекции нет, то и результат отрицателен.

Если у человека подозревают ИППП, то назначают анализ крови на скрытые инфекции. Половые заболевания можно выявить лишь путем обследования больного. Скрыто могут протекать такие заболевания, как:

Вышеперечисленные половые инфекции достаточно распространены и при этом коварны. На начальной стадии развития заболевания они не дают яркой симптоматики, и больные не обращаются за помощью. ПЦР анализ крови, соскобы со слизистой мочеиспускательного и цервикального канала обязательны при подозрении на эти инфекции.

ИППП очень негативно влияют на репродуктивную систему. Они способны вызвать бесплодие или пороки у плода. В связи с этим перед тем, как планировать беременность, нужно сдать анализ ПЦР.

Популярностью пользуется ПЦР на 12 инфекций. Диагностика методом ПЦР 12 проводится благодаря сдаче мазков из половых органов. Забор материала производится через 2 часа после акта мочеиспускания. За 2 дня до исследования нельзя вводить во влагалище суппозитории и проводить спринцевания. Результат анализа будет готов уже через 2 дня.

Стоимость ПЦР колеблется в зависимости от исследуемой инфекции. Цена находится в диапазоне от 200 до 500 рублей за каждую инфекцию. Войти и обследоваться в частной лаборатории можно и самостоятельно, без направления врача.

источник

ПЦР диагностика скрытых инфекций или Полимеразная цепная реакция диагностика — высокоточный метод генной диагностики для выявления у пациента различного рода инфекционные и наследственные заболевания, как в хронической стадии, так и задолго до проявления болезни.

Учитывая весь спектр возбудителей, ПЦР-диагностика в современной медицине используется в урологии, гинекологии,дерматовенерологии, гастроэнтерологии и многих других отраслях медицины.

На данный момент ПЦР диагностика скрытых инфекций позволяет выявить следующие болезни:

2) Вирусные гепатиты А, В, С, G,Е

3) Инфекционный мононуклеоз (ДНК вируса Эпштейн-Барр -ВЭБ)

4) Цитомегаловирусная инфекция

6) ИППП (инфекции, передающиеся половым путем) – уреаплазмоз, гарднереллез, хламидиоз, микоплазмоз, трихомониаз,микоплазмоз,кандидоз(Молочница)

8) Онкогенные вирусы – папилломавирусная инфекция (вирус папилломы человека)

9) Боррелиоз, клещевой энцефалит

12) Хеликобактерная инфекция

Наименование услуги Цена (руб.)
Прием врача-терапевта первичный 1500 руб.
Прием врача-терапевта повторный 1000 руб.
Прием врача акушера-гинеколога первичный (к.м.н.; д.м.н.) 1700 руб.
Прием врача акушера-гинеколога повторный (к.м.н.; д.м.н.) 1200 руб.
Приём акушера- гинеколога первичный 1500 руб.
Приём акушера- гинеколога повторный 1000 руб.
Прием врача уролога-андролога первичный 1500 руб.
Прием врача уролога-андролога повторный 1000 руб.
Забор крови из вены 200 руб.

Код Наименование исследования Биологический материал Результат ****Срок испол. Цена ***CIT Примечание
010001 ДНК Chlamydia trachomatis соскоб из урогенитального тракта; секрет предстательной железы; моча кач. 1 к.д. 300.00р. 0 ₽
010003 ДНК Chlamydia trachomatis соскоб из урогенитального тракта; моча; мазок из влагалища кол. 1-3 к.д. 900.00р. 0 ₽
010005 ДНК Chlamydia trachomatis отделяемое конъюнктивы глаз; мазок из ротоглотки кач. 1-3 к.д. 500.00р. 0 ₽
Код Наименование исследования Биологический материал Результат ****Срок испол. Цена ***CIT Примечание
010101 ДНК Mycoplasma hominis соскоб из урогенитального тракта; секрет предстательной железы; моча кач. 1 к.д. 300.00р. 0 ₽
010104 ДНК Mycoplasma hominis соскоб из урогенитального тракта кол. 1-3 к.д. 600.00р. 0 ₽
010102 ДНК Mycoplasma genitalium соскоб из урогенитального тракта; секрет предстательной железы; моча кач. 1 к.д. 300.00р. 0 ₽
010110 ДНК Mycoplasma genitalium соскоб из урогенитального тракта; моча; мазок из влагалища кол. 1-3 к.д. 900.00р. 0 ₽
010107 ДНК U.urealyticum / U. Parvum соскоб из урогенитального тракта; моча; секрет предстательной железы кач. 1 к.д. 300.00р. 0 ₽
010109 ДНК U.urealyticum / U. Parvum соскоб из урогенитального тракта кол. 1-3 к.д. 600.00р. 0 ₽
Код Наименование исследования Биологический материал Результат ****Срок испол. Цена ***CIT Примечание
010201 ДНК Gardnerella vaginalis соскоб из урогенитального тракта кач. 1 к.д. 300.00р. 0 ₽
Код Наименование исследования Биологический материал Результат ****Срок испол. Цена ***CIT Примечание
010301 ДНК Treponema pallidum соскоб из урогенитального тракта кач. 1 к.д. 300.00р. 0 ₽
Код Наименование исследования Биологический материал Результат ****Срок испол. Цена ***CIT Примечание
010401 ДНК Neisseria gonorrhoeae соскоб из урогенитального тракта; моча; секрет предстательной железы кач. 1 к.д. 300.00р. 0 ₽
010404 ДНК Neisseria gonorrhoeae соскоб из урогенитального тракта; моча; мазок из влагалища кол. 1-3 к.д. 900.00р. 0 ₽

ГРИБКОВЫЕ ИНФЕКЦИИ И ПРОСТЕЙШИЕ

Код Наименование исследования Биологический материал Результат ****Срок испол. Цена ***CIT Примечание
020001 ДНК Candida albicans соскоб из урогенитального тракта кач. 1 к.д. 300.00р. 0 ₽
Код Наименование исследования Биологический материал Результат ****Срок испол. Цена ***CIT Примечание
020101 ДНК Toxoplasma gondii спинномозговая жидкость; амниотическая жидкость кач. 1-3 к.д. 500.00р. 0 ₽
020102 ДНК Toxoplasma gondii кровь с ЭДТА кач. 1-3 к.д. 500.00р. 0 ₽
Код Наименование исследования Биологический материал Результат ****Срок испол. Цена ***CIT Примечание
020201 ДНК Trichomonas vaginalis соскоб из урогенитального тракта; секрет предстательной железы; моча кач. 1 к.д. 300.00р. 0 ₽
020202 ДНК Trichomonas vaginalis соскоб из урогенитального тракта; моча; мазок из влагалища кол. 1-3 к.д. 900.00р. 0 ₽
Код Наименование исследования Биологический материал Результат ****Срок испол. Цена ***CIT Примечание
030601 ДНК Cytomegalovirus соскоб из урогенитального тракта; моча кач. 1 к.д. 300.00р. 0 ₽
030603 ДНК Cytomegalovirus кровь с ЭДТА кол. 1-3 к.д. 500.00р. 0 ₽
030604 ДНК Cytomegalovirus кровь с ЭДТА (плазма) кол. 1-5 к.д. 1200.00р. 0 ₽
030605 ДНК Cytomegalovirus мазок из ротоглотки; амниотическая жидкость; спинномозговая жидкость кол. 1-3 к.д. 600.00р.
Код Наименование исследования Биологический материал Результат ****Срок испол. Цена ***CIT Примечание
030701 ДНК Herpes simplex virus I/II типа соскоб из урогенитального тракта кач. 1 к.д. 300.00р. 0 ₽
030702 ДНК Herpes simplex virus I/II типа кровь с ЭДТА кач. 1-3 к.д. 500.00р. 0 ₽
030703 ДНК Herpes simplex virus 1/2 типа мазок из ротоглотки; отделяемое пузырьковых высыпаний и эрозивно-язвенных поражений; спинномозговая жидкость кач. 1-3 к.д. 600.00р. 0 ₽
Код Наименование исследования Биологический материал Результат ****Срок испол. Цена ***CIT Примечание
030801 ДНК Human herpes virus VI типа мазок из ротоглотки; спинномозговая жидкость кач. 1-3 к.д. 500.00р. 0 ₽
030803 ДНК Human herpes virus VI типа кровь с ЭДТА кол. 1-3 к.д. 500.00р. 0 ₽
Код Наименование исследования Биологический материал Результат ****Срок испол. Цена ***CIT Примечание
030901 ДНК Epstein-Barr virus мазок из ротоглотки; спинномозговая жидкость кач. 1-3 к.д. 500.00р. 0 ₽
030903 ДНК Epstein-Barr virus кровь с ЭДТА кол. 1-3 к.д. 500.00р. 0 ₽
Код Наименование исследования Биологический материал Результат ****Срок испол. Цена ***CIT Примечание
031001 ДНК Varicella-Zoster virus мазок из ротоглотки; спинномозговая жидкость; амниотическая жидкость кач. 1-3 к.д. 500.00р. 0 ₽
031002 ДНК Varicella-Zoster virus кровь с ЭДТА кач. 1-3 к.д. 500.00р. 0 ₽
Код Наименование исследования Биологический материал Результат ****Срок испол. Цена ***CIT Примечание
031201 ДНК ВПЧ 16 и 18 типов у мужчин: уретра; крайняя плоть; у женщин: цервикальный канал; шейка матки кач. 1-3 к.д. 300.00р. 0 ₽
031203 ДНК ВПЧ 6 и 11 типов у мужчин: уретра; крайняя плоть; у женщин: цервикальный канал; шейка матки кач. 1 к.д. 300.00р. 0 ₽
031206 ДНК ВПЧ высокого риска (16,18,31,33,35,39,45,51,52,56, 58,59,68 типы) у женщин: цервикальный канал; шейка матки кол. 1-5 к.д. 1000.00р. 0 ₽
031207 ДНК ВПЧ 16 и 18 типов у женщин: цервикальный канал; шейка матки кол. 1-5 к.д. 700.00р. 0 ₽
031208 ДНК ВПЧ высокого риска (16,18,31,33,35,39,45,51,52,56, 58,59,68 типы) у мужчин: уретра; крайняя плоть; у женщин: цервикальный канал; шейка матки кач. 1-3 к.д. 300.00р. 0 ₽
031209 ДНК ВПЧ высокого риска (16,18,31,33,35,39,45,51,52,56, 58,59 типы) у мужчин: уретра; крайняя плоть; у женщин: цервикальный канал; шейка матки ген. 3-7 к.д. 1500.00р. 0 ₽
031210 ВПЧ-тест расширенный (с определением количества и типа вируса) соскоб из цервикального канала комп. 3-7 к.д. 1500.00р. 0 ₽
031211 ВПЧ-ПАП-тест (комплекс тестов ВПЧ расширенный с определением количества и типа вируса и ПАП-тест) соскоб из цервикального канала (стекло + пробирка) комп. 3-7 к.д. 3500.00р. 0 ₽
031212 ВПЧ-ПАП-тест жидкостный (комплекс тестов ВПЧ расширенный с определением количества и типа вируса и ПАП-тест) соскоб из цервикального канала жидкостный комп. 3-7 к.д. 4000.00р. 0 ₽
031213 ВПЧ-тест расширенный жидкостный (с определением количества и типа вируса) соскоб из цервикального канала жидкостный комп. 3-7 к.д. 2000.00р. 0 ₽
031214 ПАП-тест жидкостный соскоб из цервикального канала жидкостный 3-7 к.д. 3000.00р. 0 ₽
Читайте также:  Противозачаточные таблетки какие анализы сдавать
Код Наименование исследования Биологический материал Результат ****Срок испол. Цена ***CIT Примечание
032501 РНК Zika virus кровь с ЭДТА + слюна + моча кач. 1-5 к.д. 4000.00р. 0 ₽
032502 РНК Zika virus эякулят кач. 1-5 к.д. 1500.00р. 0 ₽
032503 РНК Zika virus амниотическая жидкость кач. 1-5 к.д. 1500.00р. 0 ₽
Код Наименование исследования Биологический материал Результат ****Срок испол. Цена ***CIT Примечание
170401 ДНК/РНК TBEV/B.burgdorferi sl/A.phagocytophillum/E.chaffeensis, E.muris иксодовый клещ кач. 1-2 к.д. 2000.00р. 0 ₽

Подготовка к ПЦР диагностике скрытых инфекций является классической для большинства анализов. Для правильного анализа ПЦР диагностики скрытых инфекций нужно придерживаться следующих правил:

  • За 2-4 часа до анализа воздержаться от мочеиспускания.
  • За сутки исключить любые половые контакты
  • Моча и кровь сдается натощак (моча утренняя порция)
  • Анализ следует сдавать до приема лекарственных средств или диагностических лечебных процедур

    Расшифровку итогового анализа проводит ваш лечащий врач. Окончательные результаты будут готовы в течение 1-2 суток, в крайних случаях — в день сдачи анализов.

    В многопрофильном медицинском центре «ДокторСтолет» вы всегда можете сделать ПЦР диагностику скрытых инфекций (ЗППП). Наш медицинский центр расположен между станциями метро «Коньково» и «Беляево». Дорога от каждой из них займет не более 10 минут. Здесь Вас ждет высококвалифицированный персонал и самое современное диагностическое оборудование. Приятно удивят наших клиентов и вполне демократичные цены.

    Главный врач.
    Врач дерматовенеролог, уролог, андролог
    Уролог — андролог первой категории.
    Стаж работы: более 25 лет.

    Ведет прием дерматовенерологических и урологических пациентов с различной патологией. Обследование, диагностика, консультация и лечение ИППП ,простатитов, уретритов ,циститов и т.д. Удаление кожных новообразований различными способами (Сургитрон,лазер,крио).

    источник

    Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

    Кроме простого увеличения числа копий ДНК (этот процесс называется амплификацией), ПЦР позволяет производить множество других манипуляций с генетическим материалом (введение мутаций, сращивание фрагментов ДНК), и широко используется в биологической и медицинской практике, например, для диагностики заболеваний (наследственных, инфекционных), для установления отцовства, для клонирования генов, введения мутаций, выделения новых генов.

    Специфичность и применение

    ПЦР — метод молекулярной диагностики, ставший для ряда инфекций «золотым стандартом», проверен временем и тщательно апробирован клинически. Метод ПЦР позволяет определить наличие возбудителя заболевания, даже если в пробе присутствует всего несколько молекул ДНК возбудителя.

    После соединения (гибридизации) матрицы с праймером (отжиг), последний служит затравкой для ДНК-полимеразы при синтезе комплементарной цепи матрицы.

    Для проведения ПЦР в простейшем случае требуются следующие компоненты:

    • ДНК-матрица, содержащая тот участок ДНК, который требуется амплифицировать;
    • два праймера, комплементарные концам требуемого фрагмента;
    • термостабильная ДНК-полимераза;
    • дезоксинуклеотидтрифосфаты (A, G, C, T);
    • ионы Mg2+, необходимые для работы полимеразы;
    • буферный раствор.

    Обычно при проведении ПЦР выполняется 20 — 35 циклов, каждый из которых состоит из трех стадий. Двухцепочечную ДНК-матрицу нагревают до 94 — 96°C (или до 98°C, если используется особенно термостабильная полимераза) на 0,5 — 2 минуты, чтобы цепи ДНК разошлись. Эта стадия называется денатурацией — разрушаются водородные связи между двумя цепями. Иногда перед первым циклом проводят предварительный прогрев реакционной смеси в течение 2 — 5 минут для полной денатурации матрицы и праймеров.

    Когда цепи разошлись, температуру понижают, чтобы праймеры могли связаться с одноцепочечной матрицей. Эта стадия называется отжигом. Температура отжига зависит от праймеров и обычно выбирается на 4 — 5°С ниже их температуры плавления. Время стадии — 0,5 — 2 минут.

    ДНК-полимераза реплицирует матричную цепь, используя праймер в качестве затравки. Это — стадия элонгации. Температура элонгации зависит от полимеразы. Часто используемые полимеразы наиболее активны при 72°C. Время элонгации зависит как от типа ДНК-полимеразы, так и от длины амплифицируемого фрагмента. Обычно время элонгации принимают равным одной минуте на каждую тысячу пар оснований. После окончания всех циклов часто проводят дополнительную стадию финальной элонгации, чтобы достроить все одноцепочечные фрагменты. Эта стадия длится 10 — 15 мин.

    Подготовка материала к исследованию и транспорт его в лабораторию

    Для успешного проведения анализа важно правильно собрать материал у пациента и правильно провести его подготовку. Известно, что в лабораторной диагностике большинство ошибок (до 70%) совершается именно на этапе пробоподготовки. Для взятия крови в лаборатории ИНВИТРО в настоящее время применяются вакуумные системы, которые с одной стороны минимально травмируют пациента, а с другой — позволяют произвести взятие материала таким образом, что он не контактирует ни с персоналом, ни с окружающей средой. Это позволяет избежать контаминации (загрязнения) материала и обеспечивает объективность анализа ПЦР.

    1. Глик Б., Пастернак Дж. Молекулярная биотехнология. Принципы и применение. Пер. с англ. — М.: Мир, 2002. — 589 с., илл. ISBN 5-03-003328-9
    2. Щелкунов С.Н. Генетическая инженерия — Новосибирск: Сиб. унив. изд-во, 2004. — 496 с.; илл. ISBN 5-94087-098-8
    3. Патрушев Л.И. Искусственные генетические системы — М.: Наука, 2005 — В 2 т. — ISBN 5-02-033278-X
    4. http://ru.wikipedia.org/wiki

    Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

    источник

    ПЦР (полимеразная цепная реакция) – достижение молекулярной биологии, одна из главных методик клинической лабораторной диагностики конца 20-го и начала 21-го веков, приносящая огромную пользу в различных областях медицинской науки.

    Многие люди путают ее с ИФА (иммуноферментный анализ), что, в общем-то, понятно. Они в чем-то схожи, поскольку выполняют одну задачу – поиск причины патологических состояний, обусловленных проникновением в организм человека инфекционных агентов. Однако между ними есть и различия. ИФА, например, ищет следы пребывания микроорганизмов, то есть, антитела (АТ), а ПЦР находит «святая святых» возбудителя – ДНК или РНК (нуклеиновые кислоты), дающих жизнь чуждым человеческому телу микроскопическим существам.

    Методам ПЦР доступны нуклеиновые кислоты «врага», находящиеся во всех биологических жидкостях и тканях организма, поэтому данный анализ не обязывает использовать в качестве исследования только венозную кровь, можно взять слюну, выделения из половых путей, мокроту или другую среду, несущую информацию о заболевании. Выбор материала для исследования остается за врачом, который предполагает ту или иную патологию и знает, какая среда в таких случаях более информативна.

    ПЦР-исследование – это достижение и огромная заслуга молекулярной биологии. Это – метод, который, обнаружив микроучастки ДНК или РНК чужеродного генетического материала (генома), способен распознать индивидуальные характеристики, присущие только одному виду микроорганизмов, не спутав его ни с каким другим. Как же работает метод ПЦР и как ему удается восстановить картину поведения инфекционной клетки в живом организме?

    Итак, фрагмент нуклеиновой кислоты найден, но он один и для проведения реакции его явно недостаточно, поэтому он кодируется (копирование). Однако для дальнейшего процесса необходимо большое количество таких микроучастков, что может обеспечить его размножение путем достраивания новых, идентичных найденному фрагменту, участков ДНК (репликация). Размножение является естественным и неотъемлемым свойством нуклеиновой кислоты, которая будет реплицироваться с помощью фермента полимеразы даже вне живого организма (в пробирке с пробой), образуя множество клонов, то есть, пойдет цепная реакция. Клонироваться будут все новые и новые фрагменты, но только те, в которых заинтересован исследователь. Вот почему так важно взять «чистый», без посторонних примесей анализ, а тест проводить очень аккуратно.

    Учитывая перечисленные способности полимеразной цепной реакции, можно догадаться, почему она так легко отличает уреаплазму от микоплазмы, или каждую из них от хламидии.

    Таким образом, даже если среди миллионов клеток человеческого организма затеряется не сам живой вирус, а лишь частица его ДНК, то ПЦР, если ей ничто не помешает, пожалуй, справится с задачей и сообщит о пребывании «чужака» положительным результатом. В этом суть ПЦР и ее основное достоинство.

    К лаборатории, осуществляющей ПЦР-диагностику, предъявляются высочайшие требования в плане оборудования, тест-систем и квалификации медицинского персонала. Это высокотехнологичная лаборатория, располагающая арсеналом высокочувствительных и высокоспецифичных реагентов, поэтому особых недостатков она не имеет. Разве что выдает положительный результат при отсутствии клинических проявлений и тем самым ставит лечебника перед дилеммой: стоит начинать лечение или нет?

    Врач, наблюдающий пациента, начинает сомневаться в достоверности результатов тестирования, поскольку никаких признаков заболевания не видит. Но все же, учитывая высокую чувствительность ПЦР-системы, следует помнить, что она обнаруживает возбудителя даже в доклинической стадии, а положительный результат в таком случае является скорее достоинством, чем недостатком. Исходя из этого, лечащий врач должен сам принять решение о целесообразности терапии, взяв во внимание и другие аргументы «за» и «против».

    Преимущества диагностики с помощью полимеразной цепной реакции очевидны:

    • Высокая специфичность, достигающая 100%, обусловленная присутствием в отобранном образце частиц нуклеиновых кислот, присущих конкретному организму, но чужеродных человеку;
    • Высокая производительность, ведь ПЦР – высокотехнологичная автоматизированная методика, предоставляющая возможность проведения тестирования в день забора материала и избавления, таким образом, пациента от лишних треволнений;
    • ПЦР, работая над одной пробой, способна провести несколько исследований и обнаружить несколько возбудителей, если ей будет такое задание. Например, при диагностике хламидийной инфекции, где ПЦР относится к основным методам, наряду с хламидией, можно обнаружить и нейссерию (гонококк) – возбудитель гонореи. Причем, на достоверности результатов это негативно не отражается;
    • Тестирование методом ПЦР выявляет опасные микроорганизмы в инкубационном периоде, когда они еще не успели нанести ощутимый вред организму, то есть, ранняя диагностика предупреждает о грядущем развитии патологического процесса, что дает возможность подготовиться к нему и принять во всеоружии.

    Кроме этого, во избежание недоразумений, иной раз возникающих при диагностике, ПЦР защищает себя еще и тем, что ее результаты могут зафиксироваться (фотография, компьютер) с целью использования их в экспертных целях, если будет на то необходимость.

    Нормой в ответах ПЦР считают отрицательный результат, указывающий на отсутствие фрагментов чужеродных нуклеиновых кислот, положительный ответ будет свидетельствовать о наличии инфекции в организме, цифровые значения означают состояние вируса и его концентрацию на момент тестирования. Однако полную расшифровку анализа осуществляет врач, прошедший специальную учебу по теме «ПЦР». Пытаться же интерпретировать результаты самостоятельно не имеет никакого смысла, поскольку можно, что скорее всего и произойдет, неправильно понять и начать заранее волноваться.

    Как в любых других исследованиях, иной раз результаты теста оказываются ложноположительными или ложноотрицательными, где ПЦР исключением не является. Подобное может происходить в случаях:

    1. Нарушения технологического процесса на одном из этапов реакции;
    2. Несоблюдения правил забора материала, его хранения или транспортировки;
    3. Присутствие посторонних примесей в материале.

    Это говорит о том, что к ПЦР – диагностике инфекций нужно подходить внимательно, осторожно и аккуратно, иначе образцы материала могут поменять свое структурное строение или вовсе разрушиться.

    Этапы ПЦР-диагностики. Ложные результаты могут дать нарушения на любом из этапов исследования

    ПЦР-диагностика инфекций относится к категории «золотых стандартов» среди других лабораторных методов, поэтому ее можно применить для поиска возбудителей многих заболеваний, на первый взгляд не имеющих ничего общего между собой:

    • Туберкулез различной локализации, пневмония (в том числе и атипичная, вызванная хламидией);
    • Детские инфекции (коревая краснуха, паротит, корь);
    • Дифтерия;
    • Сальмонеллез;
    • Зоонозная инфекционная болезнь – листериоз (заболевание характеризуется многообразием симптомов с поражением лимфоузлов, ЦНС, внутренних органов);
    • Заболевания, обусловленные проникновением вируса Эпштейн-Барра (инфекционный мононуклеоз и др.);
    • Онкологическая патология, спровоцированная папилломовирусной инфекцией (ВПЧ и его типы);
    • Боррелиоз (болезнь Лайма, клещевой энцефалит);
    • Хеликобактерная инфекция, возбудителем которой является проживающий в желудке человека микроб Helicobacter pylori. Доказано, что хеликобактер становится причиной развития рака желудка или 12-перстной кишки;
    • Кандидоз и практически все ЗППП.

    ПЦР-диагностика инфекций, передающихся половым путем, имеет особую значимость, поскольку заболевания, вызванные таким образом, часто длительное время протекают без каких бы то ни было клинических проявлений, зато при беременности начинают активизироваться и, таким образом, угрожать здоровью и даже жизни ребенка. Аналогично себя ведут и TORCH- инфекции. Некоторые из них («торч») относятся одновременно и к ИППП, поэтому последние требуют более подробного рассмотрения. Ознакомиться с самыми популярными методиками читатель сможет в следующих разделах статьи.

    Читайте также:  Простата анализ какие надо сдать

    Сразу заметим, что подготовка к ПЦР довольно простая, никаких особых усилий со стороны пациента не требующая. Нужно лишь выполнить три несложных задания:

    1. Не иметь половых контактов за 24 часа до того, как сдать анализ;
    2. Для забора и анализа крови из вены нужно прийти на голодный желудок, пить, кстати, тоже нельзя;
    3. Сдать мочу следует ночную (утром – в стерильную баночку, приобретенную накануне в аптеке).

    Метод ПЦР не отличается «кровожадностью», поэтому приемлет любую биологическую среду, содержащую предполагаемый инфекционный агент.Обычно выбор – что нужно взять для исследования, остается за врачом.

    Таким образом, в поисках возбудителя, кроме анализа крови (хотя он тоже подходит и в большинстве случаях берется параллельно другому материалу), можно использовать:

    • Мазок (выделения урогенитального тракта);
    • Соскоб слизистых ротовой полости, конъюнктивы, носоглотки, половых путей (у женщин берут из шейки матки и влагалища, у мужчин – из уретры);
    • Слюну;
    • Сперму;
    • Сок предстательной железы;
    • Ткани плаценты и амниотиотическую жидкость (околоплодные воды);
    • Осадок мочи (после центрифугирования), например, для выявления некоторых ИППП и микобактерий туберкулеза;
    • Мокроту и плевральную жидкость с той же целью;
    • Экссудаты;
    • Спинномозговую жидкость при подозрении на инфекционное поражение ЦНС;
    • Биопсийный материал (биоптат), взятый из печени, 12-перстной кишки, желудка и пр.

    К вышеперечисленному хочется добавить, что материала для тестирования во всех случаях, даже в соскобах и выделениях, будет достаточно, так как тестирование методом ПЦР больших объемов не требует, анализу хватает и нескольких микролитров, которые обычно берут в микропробирку типа «эппендорф» и отправляют на исследование.

    Обычно при прохождении анонимного обследования в случае положительных результатов иммуноблотинга, диагностику ВИЧ-инфекции повторяют заново. Если диагноз подтверждается, пациенту назначают дополнительные исследования:

    1. Определение с помощью иммунологических реакций абсолютных значений количества лимфоцитов CD4 (иммунокомпетентные клетки – Т-хелперы или помощники), которые инфекция поражает в первую очередь, после чего они теряют свои основные свойства и не могут отличить «свое» и чужое». Циркулирующую в плазме крови РНК вируса они принимают за нормальные клетки организма и не реагируют на них;
    2. Обнаружение РНК вируса методом ПЦР и расчет концентрации вирусных частиц с целью установления стадии, тяжести патологического процесса и прогноза с учетом этих данных. Разумеется, слово «норма» в этом плане не существует, поскольку реакция всегда положительна, а расшифровка цифровых значений находится в компетенции врача.

    Методом ПЦР можно выявлять возбудителей гепатитов, чаще всего тест используется для диагностики С гепатита, который плохо определяется другими методами.

    Вирус гепатита С (РНК-содержащий) по своему поведению в организме человека напоминает ВИЧ. Вклиниваясь в геном клеток печени (гепатоцитов), он пребывает там в ожидании своего часа, который может наступить хоть через 2 года, хоть через 20 лет, поэтому медики прозвали его «ласковым убийцей». Гепатит С приводит к формированию злокачественного процесса в печеночной паренхиме, который проявляется на поздних стадиях. Все эти события иммунная система не замечает, принимая вирус за гепатоцит. Правда, антитела к вирусу в некоторых количествах вырабатываются, однако они не обеспечивают достойный иммунный ответ. Для диагностики ИФА на гепатит С не очень информативен, поскольку указывает на то, что вирус оставил следы, а ушел ли сам – неизвестно. При ВГС известны случаи самоизлечения, в то время как антитела против вируса остаются и продолжают циркулировать пожизненно (иммунологическая память). ПЦР заметно опережает образование антител и может выявить вирусную частицу уже через 1-1,5 недели, в то время как АТ могут появиться в интервале от 2 месяцев до полугода

    ПЦР-диагностика в случае подозрения на разгул вируса гепатита С в организме человека является наиболее оптимальным методом исследования, ибо только она способна распознать присутствие «ласкового врага» в крови или биоптате печени пациента.

    Однако иной раз имеют место случаи, когда АТ положительны, а результат ПЦР – отрицательный. Такое иногда происходит при очень низком количестве вируса или при его «дремлющем» состоянии в печени без выхода в кровяное русло. Чтобы все-таки найти истину, у пациента берут повторный анализ, а то и не один.

    ВПЧ (вирус папилломы человека), если не произойдет самоизлечение, тоже может, ничем себя не проявляя, долго персистировать в организме хозяина, который об этом даже не подозревает, поскольку ПЦР сделать не доводилось, а симптомы болезни отсутствовали. Однако наличие папилломовирусной инфекции, пусть и латентной, далеко не безразлично для здоровья человека, где особую опасность несут определенные типы вируса, вызывающие онкологические заболевания (типы 16, 18).

    Чаще от ВПЧ страдает женская половина населения, так как вирус больше любит женскую половую сферу, а особенно – шейку матки, где некоторые типы вирусов способствуют развитию диспластических процессов, а затем и рака шейки матки, если не лечить дисплазию и дать волю вирусу. Так вот, полимеразная цепная реакция обнаружит вирусную ДНК, а затем укажет «плохой» или «хороший» (онкогенный или неонкогенный) тип поселился в организме женщины.

    Очевидно, что полимеразная цепная реакция может найти любую чужеродную структуру, состоящую из нуклеиновых кислот, поэтому данный тест подходит для выявления всех ЗППП и TORCH-инфекций, тем не менее, он далеко не всегда используется. Зачем, скажем, проводить такие дорогие исследования для обнаружения трихомонады или гонококка, если есть более доступные и дешевые?

    TORCH-инфекции и ИППП настолько взаимосвязаны, что, порой, трудно определить, к какой группе следует отнести тот или иной возбудитель. В них вообще бывает сложно разобраться, так как это довольно разнообразные группы микроорганизмов, которые могут передаваться половым путем всегда или только при определенных условиях (иммунодефицит), а могут представлять интерес лишь при беременности, ввиду возможного негативного влияния на ее течение и на плод.

    В основе развития клинических проявлений лежат разные возбудители, найти которые бывает под силу только ПЦР, что и является ее основной задачей иногда совместно с ИФА, а иногда в качестве единственного подтверждающего теста, особенно, если симптоматика заболевания отсутствует. Такую непростую ситуацию может создавать полимикробная инфекция, которая, помимо явных возбудителей, включает еще и условно-патогенные.

    У мужчин, страдающих воспалительными заболеваниями половой сферы, например, уретритом, часто выявляют хламидию, уреаплазму и микоплазму. Эти же виды несут опасность и женскому организму. Те, кто знает коварство хламидии и сталкивался с ней, наверняка помнят, как тяжело бывает ее найти и распознать, поэтому анализу, произведенному методом ПЦР на хламидии, особенно доверяют, ведь спрятавшийся в клетке очень маленьких размеров паразит ведет себя осторожно, а вред наносит всегда исподтишка.

    Уреаплазма зачастую рассматривается в паре с микоплазмой. И это неспроста. Данные виды, как и хламидию, не относят ни к вирусам, ни к бактериям, они проживают внутри клеток и относятся к ИППП, хотя их присутствие в здоровом организме тоже далеко не редкость. Так вот, чтобы отличить здорового носителя от больного человека, нужны особые методы, где ПЦР считается наиболее надежным, поскольку, ввиду особенностей строения и поведения этих микроорганизмов, другие исследования оказываются неэффективными.

    Что касается вируса герпеса (тип 1, 2) и цитомегаловируса, который тоже относится к герпесвирусам (тип 5), то здесь тоже ситуация неоднозначная. Инфицированность населения земного шара приближается к 100%, поэтому в данном случае очень важна идентификация вируса и его доза, что особенно играет роль при беременности, ведь взрослому человеку, вирус, прижившийся в его организме, часто не доставляет никаких хлопот и признаков заболевания не дает.

    Поэтому не следует игнорировать назначенное врачом подобное обследование, ведь в некоторых случаях полимеразная цепная реакция является обязательным и необходимым методом лабораторной диагностики, способным защитить от серьезных осложнений не только женщину, но и маленького, еще не родившегося, человечка.

    В заключение хочется отметить, что такой замечательный метод, как ПЦР, вот уже более 30 лет служит человечеству. При этом, задачи теста не ограничиваются поиском возбудителей инфекционных заболеваний. Полимеразная цепная реакция, рожденная на почве молекулярной биологии, неразрывно связана с генетикой, она успешно применяется в криминалистике для идентификации личности, в судебной медицине для установления отцовства, в ветеринарии, если клиника для животных имеет возможности приобретать дорогое оборудование, а также в других сферах (промышленность, сельское хозяйство и пр.).

    источник

    Полимеразная цепная реакция известна уже 30 лет. Ее широко используют во многих областях, начиная с археологии и заканчивая генетикой.

    Именно метод пцр помогает установить отцовство, но наиболее часто его используют для выявления различных инфекционных болезней в организме человека.

    Как проводят анализ методом пцр, и что это такое? На эти вопросы мы постараемся детально ответить.

    Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – высокоточный метод молекулярно-генетической диагностики, который позволяет выявить у человека различные инфекционные и наследственные заболевания, как в острой и хронической стадии, так и задолго до того, как заболевание может себя проявить.

    Метод ПЦР — абсолютно специфичен и выполненный правильно не может дать ложноположительный результат. То есть, если инфекции нет, то анализ никогда не покажет, что она есть. Поэтому сейчас очень часто для утверждения диагноза дополнительно сдают анализ ПЦР, чтобы определить возбудителя и его природу.

    Полимеразную цепную реакцию (ПЦР) в 1983 году разработал Кэри Мюллис (США), за что в 1993 году он удостоен Нобелевской премии в области химии.

    Диагностика этим методом позволяет найти возбудителя непосредственно в гене, который содержится в исследуемых материалах. Это самый точный анализ на половые инфекции, скрытые инфекции, различные венерические заболевания.

    Отличия ПЦР-диагностики от других методов лабораторного исследования заключаются в следующем:

    • метод нацелен на выявление самого возбудителя;
    • диагностика методом ПЦР отличается универсальностью: для обнаружения возбудителей нескольких;
    • заболеваний достаточно только одного биологического образца больного;
    • метод обладает высокой чувствительностью и не сопровождается другими перекрестными реакциями.

    Кроме этого, преимуществом ПЦР-диагностики является то, что для анализа пригоден любой биологический материал пациента: кровь, выделения из половых органов, моча, сперма.

    В организме может присутствовать большое количество возбудителей инфекций, сюда относятся и «скрытые», которые длительное время никак себя не проявляют.

    Анализ мазка на ПЦР позволяет выявить такие инфекции:

    • гепатит;
    • уреплазмоз половых органов;
    • кандидоз (молочница);
    • хламидиоз половых путей;
    • папиллома вирусная инфекция;
    • герпес;
    • наличие раковых клеток;
    • микоплазмоз;
    • бактериальный вагиноз;
    • инфекционный мононуклеоз;
    • трихомониаз;
    • оценить гормональное состояние;
    • СПИД (ВИЧ).

    Исследуемым материалом для ПЦР обычно являются мокрота, слюна, моча, кровь. Перед проведением анализа необходимо тщательно подготовиться к нему, получив предварительную консультацию у врача.

    Кровь для ПЦР обычно сдается натощак. Хорошие результаты показывает проведение анализа, когда материал для исследования взят из цервикального канала или уретры. В этом случае лучше всего провести ПЦР-диагностику не позже, чем через сутки после полового акта.

    ПЦР используется во многих областях для проведения анализов и в научных экспериментах. Существуют разные методики проведения анализа:

    1. ПЦР с обратной транскрипцией (Reverse Transcription PCR, RT-PCR (англ.)) — используется для амплификации, выделения или идентификации известной последовательности из библиотеки РНК.
    2. Инвертированная ПЦР (Inverse PCR (англ.)) — используется в том случае, если известен лишь небольшой участок внутри нужной последовательности. Этот метод особенно полезен, когда нужно определить соседние последовательности после вставки ДНК в геном.
    3. Вложенная ПЦР (Nested PCR (англ.)) — применяется для уменьшения числа побочных продуктов реакции. Используют две пары праймеров и проводят две последовательные реакции.
    4. Асимметричная ПЦР (англ. Asymmetric PCR) — проводится тогда, когда нужно амплифицировать преимущественно одну из цепей исходной ДНК. Используется в некоторых методиках секвенирования и гибридизационного анализа.
    5. Количественная ПЦР (Quantitative PCR, Q-PCR (англ.)) или ПЦР в реальном времени — используется для непосредственного наблюдения за измерением количества конкретного ПЦР продукта в каждом цикле реакции.
    6. Ступенчатая ПЦР (Touchdown PCR (англ.)) — с помощью этого подхода уменьшают влияние неспецифического связывания праймеров.
    7. Групп-специфическая ПЦР (англ. group-specific PCR) — ПЦР для родственных последовательностях внутри одного или между разными видами, используя консервативные праймеры к этим последовательностям.

    Если нуклеотидная последовательность матрицы известна частично или неизвестна вовсе, можно использовать вырожденные праймеры, последовательность которых содержит вырожденные позиции, в которых могут располагаться любые основания. Например, последовательность праймера может быть такой: …ATH…, где Н — А, Т или С.

    Материалом для ПЦР-исследования, в котором можно выявить чужеродную ДНК бактерии или ДНК или РНК вируса могут служить различные биологические среды и жидкости человека:

    1. Моча. Может использоваться при инфекционном поражении мочеполового тракта у мужчин и мочевыделительных органов у женщин (у мужчин использование в качестве материала мочи заменяет эпителиальный соскоб).
    2. Мокрота. Применяется для диагностики туберкулеза и реже для диагностики респираторных форм хламидиоза и микоплазмоза. Мокроту в количестве 15-20 мл собирают в стерильный (одноразовый) флакон.
    3. Биологические жидкости. Сок простаты, плевральная, спинномозговая, околоплодная, суставная жидкость, бронхоальвеолярный лаваж, слюна забираются по показаниям.
    4. Эпителиальные соскобы со слизистых оболочек. Обычно используются для диагностики заболеваний, передающихся половым путем (ЗППП), таких как гонорея, хламидиоз, микоплазмоз, уреаплазмоз, трихомониаз, гарднереллез, герпетическая и другие инфекции, поражающие слизистые оболочки.
    5. Биоптаты. Чаще всего используют биоптаты желудка и двенадцатиперстной кишки для выявления хеликобактерной инфекции.
    6. Кровь, плазма, сыворотка. Используются для ПЦР анализа вирусов гепатитов B, C, D, G, герпеса, ЦМВ, ВИЧ, исследования генов человека.
    Читайте также:  Виды экономического анализа какой прогноз

    Достоверность результата ПЦР напрямую зависит от правильности сдачи материала на обследование. Материал не должен быть загрязнен, иначе результат исследования не будет объективен. К наиболее важным рекомендациям перед сдачей анализа ПЦР относятся следующие требования:

    1. Моча сдается утром в стерильный контейнер.
    2. Анализ крови на инфекции необходимо сдавать на голодный желудок в утреннее время.
    3. Не стоит проявлять половую активность за сутки до проведения анализа.

    Результат анализа будет готов через 1,5-2 суток после проведения рассматриваемой процедуры. Встречаются такие ситуации, когда результат может быть подготовлен в тот же день.

    Процесс интерпретации представленного исследования отличается своей простотой. Результаты пцр анализа можно получить через 1,5-2х суток после сдачи материала. В некоторых случаях результат готов в первый же день, и вот что они могут означать:

    • Отрицательный результат показывает, что в диагностируемом материале отсутствует искомый инфекционный возбудитель.
    • Пцр положительный обозначает, что в организме человека присутствует ДНК или РНК возбудителя.

    В некоторых случаях производят количественное определение микроорганизмов. Это особенно актуально при заболеваниях, вызванных условно-патогенными микроорганизмами. Так как данные бактерии проявляют свое негативное воздействие лишь при избыточном количестве.

    Также количественный анализ ПЦР важен для выбора терапевтической тактики и с целью контроля над лечением таких вирусных инфекций, как ВИЧ и вирусы гепатита.

    Метод ПЦР отличается высокой точностью, специфичностью и чувствительностью. Это означает, что данный анализ способен:

    • точно определить наличие или отсутствие инфекции;
    • точно указать, что именно это за инфекция (специфичность);
    • обнаружить инфекцию даже при очень низком содержании ДНК микробов в биологическом материале,
    • который был подвергнут исследованию (чувствительность).

    Цена конкретного анализа будет зависеть от того, на какую инфекцию вы будете проверяться. Примерные цены и сроки:

    1. ИППП: 300-500 руб, сроки – 1 день;
    2. Вирус Эпштейна-Барра, вирус папилломы человека, герпеса, цитомегаловирус: 300-500 руб, сроки – 1 день;
    3. Гепатит A, B, C, D, G: качественный анализ 650 руб, количественный анализ 2000 руб. Сроки – до 5 дней;
    4. Антитела к вирусу гепатита С, суммарные ( Anti-HCV ) – 420 руб;
    5. Антитела к вирусу гепатита C, IgM ( Anti-HCV IgM ) – 420 руб;
    6. Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori): 300-400 руб, сроки – 1 день;
    7. ВИЧ (антитела и антигены) – 380 руб;
    8. РНК ВИЧ, качественно – 3 500 руб;
    9. РНК ВИЧ, количественно – 11 000 руб.

    Чтобы сэкономить средства, можно выбирать фиксированный пакет анализов. Такую услугу предоставляет большинство клиник где можно сдать анализ методом ПРЦ (инвитро, онклиник и т.д).

    источник

    Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это современный инструмент диагностики разнообразных инфекций, отличающийся высокой точностью. Анализ ПЦР позволяет определять возбудителей инфекционных заболеваний, опираясь на их генетический материал (РНК или ДНК). Биологическим материалом для исследования может служить кровь, мазок из половых органов, слюна и прочее.

    Метод ПЦР был открыт в 1983. Его создатель Кэри Мюллис (США), за это открытие получил Нобелевскую премию в области химии. Уже за первые десять лет методика стала обязательным лабораторным исследованием во всем мире, получив признание ученых и врачей.

    Анализ ПЦР в клинике ДИАНА

    Медицинский центр Диана предлагает провести исследование по методике полимеразной цепной реакции в кратчайшие сроки и с высочайшим уровнем точности. Наша диагностическая база соответствует всем международным стандартам и требованиям.

    На диагностику отправляют гинеколог, уролог или дерматолог. Анализ ПЦР дает возможность диагностировать большое число разнообразных инфекций. В эту группу попадают и скрытые, бессимптомные заболевания, находящиеся в инкубационном периоде:

    С помощью метода ПЦР можно обнаружить:

    • гепатит C, B;
    • уреаплазмоз половых органов;
    • ИППП – уреаплазмоз, трихомониаз, гарднереллез,;
    • хламидиоз половых органов и дыхательных путей;
    • микоплазмоз половых органов и дыхательных путей;
    • бактериальный вагиноз;
    • кандидоз половых органов;
    • инфекционный мононуклеоз;
    • туберкулез;
    • сальмонеллез;
    • туберкулез (легочные и внелегочные формы);
    • листериоз, клещевые энцефалиты, болезнь Лайма;
    • цитомегаловирусную, папилломавирусную, герпесную инфекцию;
    • детские заразные болезни, выявляемые при беременности и до зачатия — краснуху, паротит, дифтерию, корь;
    • ВИЧ.

    При каждом из вышеперечисленных заболеваний, обнаруженным другим методом, желательно делать и ПЦР — исследование. Возбудители многих инфекций имеют несколько типов (штаммов), а более точная диагностика делает лечение эффективнее. Поскольку разные типы возбудителей обладают своими способами передачи инфекции, точное определение возбудителя помогает уберечь от заражения окружающих. Например, гепатитом А можно заразиться через общие предметы и посуду (болезнь грязных рук), а гепатитом С — только через кровь, медицинские инструменты и половые контакты. Это важно для тех, кто находится рядом с больным.

    Метод основан на выявлении возбудителя по участкам ДНК или РНК. ПЦР напоминает криминалистику, когда преступника находят по частичкам кожи или волосам, оставленным на месте преступления. Поскольку каждый живой организм имеет уникальную структуру ДНК или РНК. Метод позволяет безошибочно идентифицировать микроорганизм, даже если он присутствует в исследуемом материале в минимальных количествах.

    ПРЦ подходит для выявления скрытого носительства, нетипичных, стертых и прочих форм заразных заболеваний. Диагностика отличается высокой точностью, поэтому практически не дает ошибок и ложных результатов. Анализ часто назначается, как дополнительное обследование, чтобы выявить конкретный тип вируса или микроба.

    Анализ ПЦР – результативный диагностический инструмент, позволяющий врачу не только правильно определить тип инфекционного возбудителя в организме больного, но также и количество микробов. Эта особенность позволяет методу ПЦР эффективно обнаруживать и хронические инфекции, к примеру, вирусный гепатит.

    Преимущества методики заключаются в следующих особенностях:

    • Универсальность . Метод дает возможность определить все известные на сегодняшний день микроорганизмы, вне зависимости от вида исследуемого материала.
    • Специфичность . ПЦР позволяет определить ДНК вируса или бактерии со 100% точностью, что не дает ни один другой способ диагностики.
    • Чувствительность – даже один мельчайший «обломок» ДНК или РНК может быть обнаружен и идентифицирован, благодаря быстрой реакции образования копий.
    • Оперативность – поставить диагноз на основании полимеразной цепной реакции можно уже через несколько часов после забора биологического материала, что дает возможность своевременно приступить к лечению заболевания.
    • Возможность проведения количественного анализа . Эта особенность важна при выявлении болезней, вызванных условно-патогенной флорой (например, молочницы). Повышенное содержание грибков кандида в организме вызывает заболевание, а нормальное количество до 10 3 — 104 КОЕ/тамп. – нет.

    Недостатки ПЦР-диагностики – это необходимость в высокотехнологичном оборудовании и высококвалифицированных специалистах. Для анализа нужен специальный бокс-ламинар, где поддерживается необходимая температура и обеспечивается чистота эксперимента.

    Чтобы понять, как именно следует подготовиться к предстоящему анализу ПЦР, пациент должен обязательно уточнить у своего врача, какой именно биологический материал планируется взять. От этого непосредственно зависит подготовка.

    • Выделения из половых органов, мазок из шейки матки или мочеиспускательного канала, моча – посредством исследования данных вариантов материала методом ПЦР эффективно диагностируются инфекции половых органов.
    • Вирусный гепатит C, ВИЧ инфекция требуют взятие крови на анализ ПЦР.
    • С помощью мазка из зева можно подтвердить или опровергнуть факт наличия инфекционного мононуклеоза.

    Для диагностики половых инфекций методом ПЦР у женщин, как правило, берут мазок из влагалища . При беременности действуют стандартные правила подготовки к анализу ПЦР.

    • За пару дней до проведения ПЦР нужно отказаться от спринцеваний, средств интимной гигиены.
    • За неделю до анализа на инфекции стоит перестать применять любые виды лекарственных препаратов, разумеется, если они не входят в программу подготовки к анализу ПЦР, прописанную врачом.
    • За пару дней до обследования нужно начать воздерживаться от полового акта.
    • Подмывание в день анализа ПЦР не нужно, гигиена половых органов проводится накануне вечером, используется только теплая вода.
    • За пару часов до сдачи анализа мочиться нельзя.

    Подготовиться к забору мазка из мочеиспускательного канала для проведения ПЦР несложно. Достаточно соблюдать изложенные ниже правила.

    • За 2 суток до ПЦР обследования нужно начать воздерживаться от сексуальных отношений.
    • Прием лекарств прекращается приблизительно за 7 дней до проведения анализа, если, конечно же, они не были специально назначены врачом.
    • Гигиена половых органов должна проводиться накануне вечером, в день анализа ПЦР это делать не стоит.
    • Рекомендуется не мочиться примерно 2-3 часа перед сдачей анализа.

    Если в процессе ПЦР анализа объектом изучения станет кровь пациента, правила подготовки к нему следующие.

    • Оптимальное время для сдачи крови – утро, анализ нужно обязательно сдавать натощак (минимум 8 часов отсутствия пищи). Воду можно пить свободно.
    • Отказ от алкоголя за сутки до ПЦР анализа, отказ от курения за час до него.
    • Если здоровье допускает такой вариант, от приема лекарственных средств рекомендуется на время отказаться.
    • Перед сдачей проб крови в обязательном порядке следует отдохнуть около 20 минут.
    • Накануне ПЦР исследования совершенно исключены эмоциональные и физические перегрузки, они могут сказаться на результатах анализа.

    Для исследования берется любая среда, в которой может находиться возбудитель, но чаще всего используются:

    • Кровь сыворотка или плазма – для выявления множества возбудителей – вирусов гепатита B, C, D, G, герпеса, ВИЧ, цитомегаловируса;
    • Моча и сок простаты – при диагностике ЗППП;
    • Мокрота, плевральная жидкость, бронхоальвеолярный лаваж – для диагностики легочных и внелёгочных форм туберкулеза;
    • Спинномозговая жидкость – для диагностики инфекций нервной системы;
    • Околоплодная жидкость – для определения внутриутробных заражений;
    • Мазок из зева – для выявления возбудителей инфекционного мононуклеоза и дифтерии;
      соскобы и мазки со слизистых для диагностики ЗППП;
      клетки слизистой желудка и желудочный сок — для выявления бактерии хеликобактер, вызывающей гастрит и язву.

    При одном взятии материала можно обнаружить сразу нескольких возбудителей, попавших в организм. Такая универсальность избавляет пациента от дополнительных обследований и лишних трат.

    Обнаружить и идентифицировать участки генетической информации удается при помощи специальных эталонных маркеров ДНК (праймеров) созданных для каждого известного возбудителя. Эталон позволяет найти «свой» фрагмент среди миллионов других. Если это происходит, запускается реакция полимеразной цепи.

    » data-medium-file=»https://i1.wp.com/medcentr-diana-spb.ru/wp-content/uploads/2017/01/ptsr-analiz.jpg?fit=422%2C300&ssl=1?v=1572898832″ data-large-file=»https://i1.wp.com/medcentr-diana-spb.ru/wp-content/uploads/2017/01/ptsr-analiz.jpg?fit=662%2C471&ssl=1?v=1572898832″ />
    ПЦР—реакция делает огромное число копий выявленного участка генной информации (репликацию). Важно, что реплицируются только участки ДНК и РНК, необходимые для проведения анализа. Поэтому так важны чистота эксперимента и умение персонала обращаться с аппаратурой и образцами.

    Цепная реакция протекает очень быстро, уже через два часа участок ДНК увеличивается в миллионы раз, что позволяет обнаружить и точно идентифицировать инфекцию. Для работы с эталонами пробирки помещают в специальный прибор. При помощи программы задается алгоритм, несколько раз меняющий температуру среды и влияющий на протекание реакции. Результат ПЦР виден сразу после окончания исследования.

    Проведение ПЦР исследования позволяет не просто установить тип инфекции, присутствующий в организме больного, но и оценить его с количественной точки зрения (количество микробов). Расшифровка результатов количественного анализа ПЦР играет важную роль в обнаружении и проверке эффективности лечения большого числа хронических заболеваний, скажем гепатита C.

    Результатом анализа ПЦР могут стать положительный и отрицательный ответы.

    • Отрицательный результат. Следы инфекции не были выявлены в биологическом материале, который являлся объектом исследования в процессе анализа ПЦР. Как правило, на основании отрицательного результата можно полагать, что в организме действительно отсутствует инфекция.
    • Положительный результат. Такой результат анализа ПЦР свидетельствует о том, что следы инфекционного заболевания присутствуют в биологическом материале пациента. Положительный результат анализа ПЦР характеризуется большой степенью точности.

    Иногда инфицирование выявляется на фоне полного здоровья и отсутствия признаков заболевания. Некоторые больные считают, что анализ сделан неправильно, но реальная ситуация другая. Если ПЦР показала, что возбудитель в организме есть, значит, он там действительно находится. Просто инфекционные болезни никогда не начинаются сразу после заражения, имея инкубационный период различной продолжительности.

    Скрытый период может продолжаться очень долго, например, при СПИДе – несколько лет, пока какие-то механизмы не подтолкнут вирусы к размножению. Возбудитель определяется в организме носителей и тех, кто не долечился. Очень часто переходят в скрытую (латентную) форму различные ЗППП. В этом случае может понадобиться дополнительная лабораторная диагностика.

    Метод ПЦР, позволяющий выявлять достаточно большое число инфекций, характеризуется повышенной точностью, чувствительностью и специфичностью. Эти характеристики говорят о том, что с помощью исследования ПЦР можно:

    • Максимально точно установить отсутствие или присутствие инфекционного возбудителя.
    • Максимально точно определить конкретную разновидность инфекционного возбудителя (специфичность).
    • Выявить инфекцию даже в том случае, когда она имеет скрытый характер. Речь идет о низком уровне присутствия в подвергаемом исследованию биологическом материале пациента ДНК микробов (чувствительность).

    Преимущества метода ПЦР над иммуноферментным анализом и прочими иммунологическими инструментами выявления инфекции заключается в том, что он реже дает ошибочные результаты. То есть расшифровка анализа ПЦР значительно реже показывает отсутствие инфекционных микробов, если они есть в организме больного.

    Кроме того, почти не бывает, чтобы расшифровка анализа выявляла наличие в организме несуществующей инфекции, то есть давала ложноположительные результаты.Разумеется, стопроцентно правильными результаты ПЦР назвать все же нельзя, поэтому необходимо обязательно дополнять это исследование другими методиками.

    Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter

    источник