Какие анализы нужно сдать на герпетические инфекции

Герпес — вирусное заболевание, проявляющееся высыпаниями на коже. Возбудителем является вирус Herpes Simplexvirus, имеется несколько разновидностей. Чаще поражают 1 и 2 тип. Наличие возбудителя в организме определяется с помощью специального лабораторного исследования. Медицинские клиники проводят инструктаж перед тем, как сдавать анализы на герпес 1 и 2 типа.

Существует 8 видов герпеса, поражающих человеческий организм:

• простой 1 типа известен как «губной» из-за проявлений в виде мелких высыпаний на коже вокруг губ;
• простой 2 типа — генитальный герпес;
• ветряная оспа, сюда же относится лишай всех типов;
• вирус Эпштейна-Барра;
• цитомегаловирус;
• 3 вида возбудителя не изучены до конца, они провоцируют серьезные заболевания, приводят к тяжелым осложнениям.

Вирус проникает в организм через слизистые оболочки воздушно-капельным и контактным путем. Пробирается в кровь и лимфатические ткани, распространяется на внутренние органы. Проявление симптомов провоцируют внешние факторы и другие заболевания: снижение активности иммунитета, переохлаждение, сильный стресс, голодание, наличие острой инфекции.

Наиболее распространенные виды — 1 и 2 тип . Вирус простого герпеса проникает в организм в детском возрасте.

Периодически возникают обострения заболевания, проявляющиеся такими симптомами:

• гиперемия участка кожи;
• мелкие высыпания;
• зуд пораженного участка;
• отечность.

Локализация поражения — кожа вокруг губ. Общее самочувствие ухудшается, появляется слабость, высокая температура , мышечные боли. В активной фазе заболевания больной максимально опасен для окружающих.

Герпес 2 типа передается контактным и половым путем . Локализация сыпи — на внешних половых органах. Данный вид опасен при беременности, так как приводит к патологиям развития плода.

Возбудитель не поддается уничтожению в организме человека, его выявление необходимо для дифференциации с другими заболеваниями, установления типа вируса. Определив точно тип, добиваются уменьшения проявлений заболевания путем назначения соответствующего лечения. Анализ на герпес проводится при жалобах пациента, видимых симптомах. Беременные проходят обязательный тест для исключения осложнений вынашивания плода.

Методы диагностики при первых 2 типах: полимеразная цепная реакция и иммуноферментный анализ. Для исследования необходима кровь из вены, содержимое высыпаний, корки, слюна. Остальные способы диагностирования служат дополнительными тестами при спорных или неточных результатах.

1. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — способ молекулярно-биологического выявления ДНК возбудителя в клетках человека. В лабораторных условиях к биологическому материалу добавляется фермент. Он провоцирует рост молекул ДНК возбудителя, что проявляется на посеве. При герпесе 2 типа возможно установить уровень контагиозности больного для профилактики заражения полового партнера. Для исследования берется венозная кровь, мазок из влагалища у женщин, мазок с полового члена — у мужчин.
2. Иммуноферментный анализ основан на обнаружении иммуноглобулинов, вырабатываемых при инфицировании ВПГ 1 и 2 типа. Активизация возбудителя в организме приводит к выработке специфичных антител IgM и LgG. Они работают на уничтожение чужеродного организма вируса. Этот этап наиболее выражен в остром периоде рецидива болезни. Существует 2 вида ИФА: качественная и количественная реакция. В первом случае выявляют наличие вируса. Второй метод применяют для изучения количества выработанных антител, что позволяет оценить состояние иммунитета больного. Для диагностики генитальной формы герпеса исследуются выделения из половых органов.

Повторное исследование включает серологический анализ, выявляющий антитела класса G (наличие возбудителя, перенесенную активную стадию). Сохраняются в крови человека до конца жизни.

Анализ на вирус простого герпеса 1 и 2 типа проводится в утреннее время. Перед забором материала исключается употребление алкоголя, жареной, соленой пищи, медикаментозных препаратов. Последний прием пищи и воды — за 8 часов до исследования. На результаты теста оказывает влияние физическая нагрузка и психоэмоциональное возбуждение. Из-за всплеска активности нервной системы выделяются антитела, что мешает обнаружить вырабатывающиеся в ответ на появление возбудителя иммуноглобулины.

Определение уровня антител производится врачом-лаборантом. У каждого заведения свои референсные значения данных, считающиеся нормой. Получение максимально низкого порога означает отсутствие вируса. Остальные данные свидетельствуют о различной степени и форме заболевания.

Метод полимеразной цепной реакции определяет наличие возбудителя — положительный результат или отрицательный при отсутствии.

Иммуноферментный анализ разбирает подробно количество антител разного класса:

1. IgM отрицательный/ IgG отрицательный — возбудитель вируса в организме отсутствует. Погрешность возможна, если проникновение герпесвируса произошло не позднее 2 недель. Для уточнения диагноза тест повторяется.
2. IgM отрицательный/ IgG положительный — стадия ремиссии. Угроза будущему ребенку во время беременности отсутствует.
3. IgM положительный/ IgG отрицательный — острая стадия болезни.
4. IgM положительный/ IgG положительный — присутствие возбудителя в организме, начальная стадия. При беременности существует высокий риск поражения плода.

Важно! ВПГ относятся к группе TORCH-инфекций. Это потенциально опасные виды для беременных, влияющие на внутриутробное развитие плода. Высокий риск образования патологий. Для предупреждения подобных проявлений при планировании беременности до зачатия женщина проходит плановое исследование на вирус, наличие возбудителей инфекций данной группы.

Проявления герпеса зависят от его стадии. Общие симптомы: слабость, головная боль, недомогание, повышение температуры . Из-за этих симптомов герпетические проявления принято связывать с простудой .

1. Первая стадия . На месте будущего высыпания ощущается зуд, пощипывание, появляется покраснение кожи. Повышается температура, больные чувствуют слабость. Противовирусные препараты на начальной стадии приостанавливают дальнейшее развитие.
2. Вторая стадия — образование пузырька на месте покраснения.
3. Третья стадия — разрыв пузырька с дальнейшим изъязвлением. Больной максимально заразен для окружающих.
4. Четвертая стадия — превращение пузырька в корочку.

Лечение состоит в приеме противовирусных препаратов Ацикловир , Фамцикловир . Местно пораженный участок кожи обрабатывается антибактериальными и противовирусными мазями. Симптоматическая терапия — жаропонижающие, обезболивающие.

Для профилактики повторных рецидивов стоит избегать переохлаждения, предупреждать обострения хронических заболеваний. При первых симптомах сдать анализ крови на герпес 1 и 2 типа, начинать лечение.

источник

Комплексное обследование состояния здоровья человека, необходимое перед проведением хирургического вмешательства или при планировании ребенка, всегда включает анализ на герпес.

Наиболее распространен вирус простого герпеса (ВПГ), он чаще всего проявляется простудой на губах.

Наиболее распространен вирус простого герпеса (ВПГ), он чаще всего проявляется простудой на губах и имеет хроническое течение у большинства носителей, рецидив заболевания происходит при резком ослаблении иммунитета.

II тип вирусной инфекции локализуется на половых органах. Герпес III типа представляет собой опоясывающий лишай, он возникает преимущественно в области спины или живота. Этот тип инфекции опасен тем, что клетки вируса, переходя в скрытую стадию, остаются на нервных окончаниях. Пациент испытывает болевой синдром, который может сигнализировать о развитии патологий периферической нервной системы.

Внутренний герпес IV и V типа является возбудителем инфекционного мононуклеоза и цитомегаловируса.

Высыпания на коже и слизистой оболочке полости рта, вызванные вирусом простого герпеса, легко определить визуально при осмотре. Таким же способом проводится первичная постановка диагноза, если речь идет о II или III типах.

Генитальный герпес и опоясывающий лишай имеют характерные внешние проявления.

Однако в ряде случаев вирус маскируется под другие инфекции. Кроме того, скрытое течение заболевания требует точного определения типа возбудителя для правильного лечения.

Методы диагностики герпесвируса включают несколько видов специальных исследований. Сдать анализы для выявления возбудителя болезни всех типов можно практически в любом медицинском центре или поликлинике.

Лабораторная диагностика позволяет установить инфицирование вирусом герпеса, определить тип, степень поражения организма и локализацию инфекции. Для получения полной картины заболевания необходимо пройти несколько видов исследований. Биологическим материалом для этого служат кровь, моча, мазки из полости рта, выделения половых органов и содержимое высыпаний.

У ребенка чаще всего диагностируют герпес I типа, поражающий слизистую оболочку рта и вызывающий стоматит. Диагностика герпеса у детей включает визуальный осмотр кожных высыпаний. Врач безошибочно ставит диагноз, если речь идет о простой форме вируса.

Главным методом является анализ крови. В лабораторных условиях проводят несколько тестов, включающих общее и биохимическое исследование материала.

Кроме того, существует несколько видов специфических анализов крови, мазков и содержимого герпесных пузырьков на коже и слизистых оболочках. Тесты позволяют точно определить присутствие вируса, его тип и степень поражения организма.

У ребенка чаще всего диагностируют герпес I типа, поражающий слизистую оболочку рта и вызывающий стоматит.

Назначаются разные виды анализов на вирус герпеса. Наиболее распространен простой способ — серологическое исследование. Этот тест связан с иммунным ответом организма на присутствие вируса в крови человека.

Метод показывает реакцию взаимодействия антигенов с антителами, обнаруженными в биологическом материале. Результат позволяет доказать присутствие возбудителя ВПГ или герпеса II типа в организме пациента. Однако определить тип возбудителя таким способом невозможно.

Для получения более объективной клинической картины заболевания проводят комплекс лабораторных исследований, который включает количественные и качественные анализы различных биоматериалов.

В число обязательных тестов входят иммуноферментный анализ, полимеразная цепная реакция и культуральный метод.

Биохимическое исследование крови пациента выявляет особые антитела, которые вырабатываются при первичном заражении ВПГ или рецидиве вируса. Выделяют 2 вида иммуноглобулинов: IgM и IgG. Их количество в крови говорит о наличии и активности герпеса.

Иммуноферментный метод (ИФА) бывает 2 видов. Качественный позволяет определить наличие антител к вирусу и их взаимосвязь с патологическими клетками. На основе результатов делают выводы о характере и времени рецидивов.

Количественный анализ ИФА предполагает не только обнаружение иммуноглобулинов IgM и IgG, но и их подсчет. Высокий уровень антител в крови пациента говорит об активности вируса или недавней острой фазе болезни.

Количественный анализ ИФА предполагает не только обнаружение иммуноглобулинов IgM и IgG, но и их подсчет.

Реакция иммунофлуоресценции (РИФ) является вспомогательным методом изучения герпесной инфекции. Это простой способ обнаружить вирус, если болезнь находится в стадии развития и в биоматериале присутствует большое число клеток герпеса.

Особенность метода состоит в том, что специально окрашенные антитела наносятся на препарат, приготовленный на основе выделений из половых органов, зева или конъюнктивы. Если в биоматериале присутствует вирус, то антигены связываются с иммуноглобулинами, и специалист увидит через микроскоп характерное свечение.

Анализ, основанный на реакции иммунофлуоресценции, не дает 100%-ного результата, поэтому должен выступать в качестве дополнительного, но не главного исследования.

Молекулярно-биологический метод под названием «полимеразная цепная реакция» (ПЦР) используется при диагностике герпеса только во время обострения болезни или при наличии высыпаний неясной этиологии.

Материалом для анализа служит содержимое патологических образований, слюна, соскоб из очага воспаления, кровь или моча.

В приготовленный для исследования препарат добавляют специальные ферменты и вещества, которые ускоряют рост клеток ДНК возбудителя.

Методом ПЦР определяют наличие и количество вируса в организме. Анализ мочи на герпес и исследование крови проводятся строго натощак. В противном случае результат будет недостоверным.

Материалом для анализа ПЦР служит даже слюна пациента.

Метод, при котором исследуют мазок из половых органов, используется для выявления простого герпеса 2 типа. Обследование является цитологическим способом обнаружения вируса. После проведения соскоба специалист изучает характер перерождения тканей в очаге воспаления.

Дополнительным методом исследования на генитальный герпес является расширенная кольпоскопия. Она не только подтверждает наличие инфекции, но и определяет стадию развития болезни.

Самый точный, но долгий и дорогой вид анализа на герпес выявляет количество вируса в крови. Культуральный метод основан на способности клеток возбудителя размножаться только в особой питательной среде живого организма. Биоматериал помещают в благоприятные для роста вируса условия и анализируют результаты процесса.

Первичное инфицирование герпесом при беременности грозит пороками развития и даже гибелью плода. Вирус проникает через плацентарный барьер, вызывая необратимые изменения в жизненно важных органах будущего ребенка.

На ранних сроках беременности проводится классический скрининг, позволяющий обнаружить и устранить угрозу заражения плода.

Рецидив болезни не менее опасен. Поэтому при планировании беременности и на ранних сроках вынашивания плода проводится классический скрининг, позволяющий обнаружить и устранить угрозу заражения плода.

Комплексное обследование, которое должна пройти беременная женщина, включает метод ПЦР, реакцию иммунофлуоресценции и иммуноферментный анализ.

Антитела IgM и IgG способны вступать во взаимосвязь с клетками вируса и подавлять их. Это свойство иммуноглобулинов называется авидностью.

Для обнаружения инфекции и изучения ее характера в лабораторных условиях анализируют связи между антителами и клетками герпеса.

Высокая авидность IgM говорит об острой фазе заражения, IgG — о хроническом течении болезни.

Правильную трактовку исследований на герпес для назначения адекватного лечения может сделать только врач. Результаты ПЦР лишь подтверждают или опровергают наличие инфекции. Что касается анализов на вирусные антитела, то их показатели создают более объективную клиническую картину.

Отрицательное значение содержания IgM и IgG означает, что иммунитет к герпесу отсутствует. Такой результат всегда требует повторной проверки организма, потому что у большинства людей первичное заражение инфекцией происходит еще в детстве. Норма антител свидетельствует о стойкой иммунной защите.

Правильную трактовку исследований на герпес для назначения адекватного лечения может сделать только врач.

Если обнаруживается в анализе преобладание IgG, это значит, что совсем недавно был рецидив инфекции. Повышенное содержание IgM — сигнал об острой фазе болезни.

Иногда расшифровка анализов на герпес дает ложноположительный результат. Когда есть предположение, что информация о количестве иммуноглобулинов в крови и наличии вируса в организме неверна, анализы дублируют через 14 дней.

Количественный и качественный анализ антител в биоматериале пациента позволяет не только установить факт заражения герпесвирусом, но и определить тип патогена, стадию развития и степень поражения жизненно важных систем внутренних органов.

Применение лишь одного вида исследования не является информативным. Получить полную картину можно только после комплексного обследования.

Анализ назначается повторно после лечения рецидива герпеса. Исследование проводится через 2 недели после приема препаратов.

Сдать анализ на герпес можно почти в любой медицинской лаборатории. В муниципальной поликлинике направление выдает лечащий врач. Однако пациент может самостоятельно пройти обследование в любом медицинском центре. В стоимость анализа входят забор крови, антитела и работа лаборанта. Конечная цена исследования колеблется от 700 до 1000 рублей.

источник

Вирус простого герпеса (ВПГ) – ДНК–содержащий вирус Herpes simplex virus семейства Herpesviridae подсемейства Alphaherpesvirinae. Согласно статистическим данным ВОЗ, инфекции, обусловленные ВПГ, занимают второе место по распространенности среди вирусных заболеваний человека. Различают два серотипа ВПГ – ВПГ-1 и ВПГ-2. Оба типа вируса вызывают инфекционные заболевания человека различной степени тяжести от характерных везикулезных или пустулезных высыпаний на коже и слизистых до поражений ЦНС. ВПГ-1 – причина офтальмогерпеса, протекающего в форме кератита или кератоиридоциклита, реже увеита, в единичных случаях — ретинита, блефароконъюнктивита. Заболевание может привести к помутнению роговицы и вторичной глаукоме. ВПГ-1 — основная причина энцефалита у взрослого населения стран умеренного климата, при этом только у 6–10% больных отмечается одновременное поражение кожи.

В ходе проведения эпидемиологических исследований установлено наличие специфических АТ к ВПГ у 90–95% обследуемых лиц среди взрослого населения, при этом первичная инфекция манифестно протекает лишь у 20–30% инфицированных.

ВПГ характеризуется коротким циклом репродукции в клеточных культурах и оказывает сильное цитопатическое действие. Он способен к репродукции в различных типах клеток, чаще персистирует в ЦНС, преимущественно в ганглиях, поддерживая латентную инфекцию с возможностью периодической реактивации. Наиболее часто вызывает кожно-слизистые формы заболевания, а также поражение ЦНС и глаз. Геном ВПГможет интегрироваться с генами других вирусов (включая ВИЧ), вызывая их активацию, также возможен его переход в активное состояние на фоне развития иных вирусных и бактериальных инфекций.

Пути передачи ВПГ: воздушно-капельный, половой, контактно-бытовой, вертикальный, парентеральный. Факторами передачи ВПГ служат кровь, слюна, моча, везикулярный и вагинальный секрет, сперма. Входными воротами являются поврежденные слизистые оболочки и кожа. По периферическим нервам вирус доходит до ганглиев, где сохраняется пожизненно. При активации ВПГ распространяется по нерву к первоначальному очагу поражения (механизм “замкнутого цикла” – циклическая миграция вируса между ганглием и поверхностью кожи). Может происходить лимфогенная и гематогенная диссеминация возбудителя, что особенно характерно для недоношенных новорожденных и лиц с выраженным иммунодефицитом (в т. ч. при ВИЧ-инфекции). ВПГ обнаруживается на лимфоцитах, эритроцитах, тромбоцитах, при проникновении вируса в ткани и органы возможно их повреждение вследствие его цитопатического действия. Сохраняющиеся в течение всей жизни у человека вируснейтрализующие АТ (даже в высоких титрах), хотя и препятствуют распространению инфекции, но не предупреждают рецидивов.

Выделение ВПГ продолжается значительное время при первичном инфицировании (ДНК выявляется в плазме крови в течение 4–6 недель), при рецидивах – не более 10 дней. Формирование противогерпетического иммунитета происходит как при манифестном, так и при бессимптомном течении инфекции. При первом контакте АГ с клетками иммунной системы в течение 14–28 дней формируется первичный иммунный ответ, который у иммунокомпетентных лиц проявляется образованием интерферонов, выработкой специфических АТ (вначале – IgM, впоследствии – IgA и IgG), повышением активности естественных киллеров – NK-клеток и формированием мощного пула высокоспециализированных киллеров. В случае реактивации или реинфекции возникает повторный контакт клеток иммунной системы с АГ, образуются АТ и Т-киллеры. Реактивация сопровождается продукцией АТ IgM (редко даже при наличии типичных высыпаний), АТ IgА (чаще) и IgG.

ВПГ (преимущественно ВПГ-2) вызывает генитальный герпес – хроническое рецидивирующее заболевание. Клинические проявления первичного эпизода инфекции, вызванной разными типами вируса сходны, однако инфекции, вызванной ВПГ-2, в гораздо большей степени свойственен рецидивирующий характер. Передача вируса происходит при половых контактах, очаг инфекции локализуется на слизистой и коже половых органов и перигенитальной зоны. Размножение вируса в клетках эпителия приводит к образованию очага сгруппированных пузырьков (папул, везикул), в которых содержатся вирусные частицы, сопровождается покраснением, зудом. Первичный эпизод протекает острее (обычно с симптомами интоксикации), чем последующие рецидивы. Часто возникают симптомы дизурии, признаки эрозии шейки матки.

На ранних стадиях ВИЧ-инфекции течение заболеваний, вызванных ВПГ-1 или ВПГ-2, короткое и типичное. Частым признаком углубления иммуносупрессии и перехода латентной стадии ВИЧ-инфекции в стадию вторичных заболеваний служит развитие опоясывающего лишая. Наличие стойких глубоких вирусных поражений кожи, повторный или диссеминированный опоясывающий лишай, локализованная саркома Капоши — одни из клинических критериев стадии вторичных заболеваний ВИЧ-инфекции. У больных с количеством CD4+-клеток менее 50 клеток/мкл отсутствует тенденция к самостоятельному заживлению эрозивно-язвенных дефектов. Частота герпетического энцефалита среди поражений ЦНС при ВИЧ-инфекции — около 1–3%. У больных СПИДом с наличием глубокого иммунодефицита заболевание нередко протекает атипично: болезнь начинается подостро и медленно прогрессирует до тяжелейших проявлений энцефалита.

Герпетическая инфекция даже при бессимптомном течении способна вызвать целый ряд патологий у беременной и новорожденного. Наибольшую угрозу репродуктивной функции представляет генитальный герпес, который в 80% случаев обусловлен ВПГ-2 и в 20% – ВПГ-1. Бессимптомное течение чаще имеет место у женщин и более типично для ВПГ-2, чем для ВПГ-1. Первичное инфицирование или рецидивы во время беременности наиболее опасны для плода, поскольку могут привести к самопроизвольному выкидышу, гибели плода, мертворождению, порокам развития. Заражение плода и новорожденного чаще отмечается при бессимптомном течении генитального герпеса, чем при клинически выраженном типичном течении. Новорожденный может приобрести герпетическую инфекцию внутриутробно, во время родов (в 75–80% случаев), либо постнатально.

ВПГ-2 может проникать в полость матки через цервикальный канал с поражением плода в 20–30% случаев; трансплацентарное инфицирование может происходить в 5–20% случаев, инфицирование во время родов – в 40% случаев. Возможна передача вируса при выполнении медицинских процедур. При типичных клинических проявлениях диагноз герпетической инфекции трудностей не представляет, тогда как при атипичных формах верифицируется на основании результатов лабораторных исследований, при этом приоритетными должны быть исследования, направленные на выявление маркеров текущей (активной) инфекции. Активация инфекционного процесса при герпетической инфекции, даже при наличии клинических проявлений в стадии обострения, редко сопровождается выработкой АТ-ВПГ IgM (чаще – при первичной инфекции либо реинфекции), как правило, при этом отмечают появление АТ-ВПГ IgА.

Целесообразными являются диагностические исследования для обнаружения ВПГ или его маркеров при наличии в анамнезе пациента указаний на рецидивирующую инфекцию либо на дебют герпетической инфекции в период беременности.

Дифференциальная диагностика. При наличии инфекционного синдрома (длительный субфебрилитет, лимфаденопатия, гепато- или гепатоспленомегалия) – токсоплазмоз, цитомегаловирусная инфекция и инфекция, вызванная ВЭБ; контактный дерматит, инфекционные заболевания, сопровождающиеся везикулезными высыпаниями на коже и слизистых оболочках (ветряная оспа, опоясывающий герпес, пиодермия и др.); эрозивно–язвенные поражения гениталий, обусловленные Treponema pallidum, Haemophilus ducreyi; болезнь Крона, синдром Бехчета, фиксированная токсикодермия, менингоэнцефалиты и менингиты неясной этиологии, увеиты и кератоконъюнктивиты неясной этиологии).

• Планирование беременности;
• женщины, имеющие в анамнезе либо на момент обращения типичные герпетические высыпания любой локализации, в т. ч. рецидивирующий генитальный герпес, или наличие пузырьковых и/или эрозивных высыпаний на коже, ягодицах, бедрах, слизисто–гнойные выделения из влагалища;
• наличие полового контакта с партнером, имеющим генитальный герпес;
• атипичная форма заболевания: отсутствие зуда или жжения, отсутствие везикул, веррукозные узелки; обширные кожные поражения (до 10% случаев предполагаемого опоясывающего герпеса обусловлено не ВЗВ, а ВПГ);
• женщины с отягощенным акушерским анамнезом (перинатальные потери, рождение ребенка с врожденными пороками развития);
• беременные женщины (в первую очередь имеющие УЗИ-признаки внутриутробной инфекции, лимфоаденопатии, лихорадку, гепатит и гепатоспленомегалию неясного генеза);
• дети с признаками внутриутробной инфекции, врожденными пороками развития или наличием на коже или слизистых оболочках везикул или корочек;
• дети, рожденные от матерей, перенесших генитальный герпес во время беременности;
• ациенты (в первую очередь новорожденные) с сепсисом, гепатитами, менингоэнцефалитом, пневмонией, поражением глаз (увеит, кератит, ретинит, ретинальный некроз), поражением ЖКТ.

Материал для исследования

• Содержимое пузырьков/везикул со слизистых оболочек и кожи половых органов мужчин и женщин – микроскопические исследования, культуральные исследования, выявление АГ, выявление ДНК;
• мазки (соскобы) со слизистых оболочек цервикального канала, уретры (при отсутствии видимых пузырьковых высыпаний или эрозивно-язвенных поражений) – выявление ДНК;
• сыворотка крови, СМЖ (по показаниям) – выявление АТ.

Этиологическая лабораторная диагностика включает микроскопическое исследование, выделение и идентификация вируса в культуре клеток, выявление АГ или ДНК возбудителя, определение специфических АТ.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики (вирус простого герпеса — анализ). Среди методов лабораторной диагностики “золотым стандартом” долгое время считали выделение ВПГ в культуре клеток из крови, СМЖ, содержимого везикулезных или пустулезных высыпаний и других локусов (носоглотки, конъюнктивы, уретры, влагалища, цервикального канала). Данный метод предполагает изоляцию вируса при заражении биологическим материалом чувствительных культур клеток с его последующей идентификацией. К неоспоримым преимуществам метода относятся: возможность определения активности инфекции при наличии клинических проявлений и проведения типирования вируса, а также установления чувствительности к противовирусным препаратам. Однако длительность анализа (1–8 дней), трудоемкость, высокая стоимость и необходимость определенных условий проведения исследований затрудняет применение данного метода для рутинной лабораторной диагностики заболевания. Чувствительность достигает 70–80%, специфичность – 100%.

Материал с поверхности высыпаний может быть использован для микроскопических (окраска препаратов по Романовскому–Гимзе) или цитологических (окраска препаратов по Тцанку и Папаниколау) исследований. Названные процедуры имеют низкую диагностическую специфичность (не позволяют дифференцировать ВПГ от других герпес-вирусов) и чувствительность (не более 60%), поэтому не могут считаться надежными методами диагностики.

Выявление АГ ВПГ в крови, СМЖ, содержимом везикулезных или пустулезных высыпаний и других локусов (носоглотки, конъюнктивы, уретры, влагалища, цервикального канала) проводят методами РИФ и РНИФ с использованием моноклональных или высокоочищенных поликлональных АТ. При использовании метода ИФА чувствительность исследования возрастает до 95% и более, специфичность при манифестном герпесе варьирует от 62 до 100%. Однако большинство наборов реагентов для выявления антигена ВПГ методом ИФА не позволяют провести дифференцирование серотипов вируса.

Обнаружение ДНК ВПГ-1 и/или ВПГ-2 при использовании ПЦР в различном биологическом материале превосходит чувствительность обнаружения ВПГ при использовании вирусологического исследования. Выявление ВПГ в соскобах со слизистых оболочек полости рта, урогенитального тракта, в отделяемом пузырьковых высыпаний (везикул) и эрозивно–язвенных поражений кожи с помощью ПЦР является методом выбора. Несомненную ценность имеет определение количества ДНК ВПГ методом ПЦР в режиме реального времени, результаты исследования можно использовать как с диагностической целью, так и для оценки эффективности лечения.

Для выявления АТ к ВПГ разных классов IgА, IgG, IgM, суммарных к антигенам ВПГ обоих типов или типоспецифичных, применяют методы РНИФ или ИФА, для определения авидности АТ IgG – метод ИФА. Наибольшее диагностическое значение имеет детекция АТ IgM как показателя активности процесса, их выявление может свидетельствовать об остром заболевании, реинфекции, суперинфекции или реактивации. Однако в клинически выраженных случаях, в т. ч. при типичном течении генитального или неонатального герпеса, специфические АТ IgM выявляются редко (в 3–6% случаев). Определение авидности АТ-ВПГ IgG несет низкую информационную нагрузку: реактивация при клинически выраженных случаях сопровождалась наличием высокоавидных АТ. Тест на выявление АТ-ВПГ IgА является методом выбора наряду с определением ДНК либо АГ ВПГ при определении активности инфекционного процесса.

Показания к применению различных лабораторных исследований. Определение АТ целесообразно проводить для подтверждения первичной инфекции, а также установления диагноза у пациентов с бессимптомным и атипичным течением заболевания.

У беременных женщин (скрининг) целесообразно проведение исследований для выявления АТ-ВПГ IgМ, а также выявление АТ-ВПГ IgА. Для беременных высокого инфекционного риска дополнительно рекомендуется определение ДНК и АГ ВПГ в лейкоцитарной взвеси или в материале из предполагаемого очага.

При подозрении на внутриутробную инфекцию рекомендуется выявление ДНК вируса в пуповинной крови, у новорожденных – детекция ДНК вируса в различных биологических пробах (отделяемое пузырьковых высыпаний (везикул) эрозивно– язвенных поражений кожи и слизистых оболочек, ротоглотки, конъюнктивы; периферическая кровь, СМЖ, моча и др.), а также определение АТ-ВПГ IgМ и IgА в крови. Учитывая высокую диагностическую значимость определения ДНК вируса методом ПЦР и наличие зависимости между летальностью у новорожденных и виремией, вызванной ВПГ, некоторые исследователи рекомендуют использовать этот метод для лабораторного скрининга генерализованной герпетической инфекции детей, относящихся к группе высокого риска.

Выявление АГ-ВПГ в различных биологических пробах предлагается применять в качестве экспресс-тестов для дифференцирования типов вируса при скрининге популяций с высоким уровнем заболеваемости, а также при мониторинге заболевания.

У больных ВИЧ-инфекцией с атипичными клиническими проявлениями кожных поражений в диагностике отдается предпочтение выявлению ДНК ВПГ методом ПЦР как самому чувствительному методу лабораторной диагностики.

Особенности интерпретации результатов. Обнаружение вирусоспецифических АТ IgM может свидетельствовать о первичной инфекции, реже – о реактивации или реинфекции, выявление АТ-ВПГ IgА – об активности инфекционного процесса (затяжное течение при дебюте герпетической инфекции, реинфекции или реактивации). О врожденной инфекции (неонатальный герпес) свидетельствует присутствие АТ-ВПГ IgM и(или) IgА. Выявление АТ IgG отражает латентную инфекцию (инфицирование).

Выявление ДНК ВПГ свидетельствует о наличии активной (репликативной) стадии вирусной инфекции с учетом выраженности клинических проявлений. Выявление ДНК ВПГ-1 и/или ВПГ-2 методом ПЦР позволяет при однократном тестировании установить факт внутриутробного инфицирования плода; при проведении обследования в первые 24–48 ч после рождения лабораторно подтвердить врожденную инфекцию, вызванную ВПГ.

Диагностическое значение (специфичность и чувствительность) обнаружения ДНК ВПГ в СМЖ у больных ВИЧ-инфекцией с поражением ЦНС окончательно не установлены. Возможно, для подтверждения герпетической этиологии энцефалита необходимо определение концентрации ДНК ВПГ в СМЖ. Исследование для обнаружения ДНК ВПГ в крови малоинформативно в связи кратковременным нахождением ВПГ в сосудистом русле, следовательно, возможно получение отрицательного результата несмотря на развитие клинически выраженного заболевания.

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Copyright ФБУН Центральный НИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 1998 — 2019

Центральный офис: 111123, Россия, Москва, ул. Новогиреевская, д.3а, метро «Шоссе Энтузиастов», «Перово»
+7 (495) 788-000-1, info@cmd-online.ru

! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

источник

Практически каждый человек является носителем вируса герпеса. Существует 8 типов герпесвируса. Пока они находятся в «спящем» состоянии, они не дают о себе знать, не беспокоят носителя. Однако, при снижении иммунитета они активизируются. Анализ на герпес необходимо сдавать не только при наличии явных симптомов, но и в других случаях, в том числе, чтобы быть осведомленным о потенциальной опасности.

Существует восемь типов герпеса. И для определения каждого вида существует отдельный анализ. Но в основе их лежит всего два типа анализов – полимеразная цепная реакция и иммуноферментный анализ. Только они способны выявить присутствие или отсутствие герпесвируса в организме.

Однако часто применяют и более стандартные способы диагностики герпетической инфекции – биохимический и общий анализ крови. Эти исследования только определяют наличие в организме патологического процесса любого рода.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – лабораторное диагностическое исследование, которое помогает выявить ДНК в биологическом материале. Этот метод распространён в медицинской практике для выявления клеток вирусов даже на ранних стадиях их развития. Также его используют для установления родственных связей между людьми, при клонировании и изучении генов в целом.

Для проведения исследования подходят разные биоматериалы, а не только кровь. Можно сдавать мочу, слюну, соскобы из половых органов и уретры, околоплодные воды и другие.

При помощи ПЦР обнаруживают герпес через достаточно короткое время после его попадания в организм и на ранних стадиях его активности.

Лаборатории гарантируют 98% точность результатов при условии соблюдения правил подготовки к сдаче материала, правил забора материала и проведения исследования.

ПЦР анализ на инфекции. Зачем сдавать? Как подготовиться? Как сдать?

Иммуноферментный анализ (ИФА) – иммунологическое лабораторное исследование, которое помогает обнаружить в биоматериале антитела к герпесу и другим вирусам. В его основе лежит специфическая реакция антигенов и антител.

Антигены – молекулы, клетки, микроорганизмы, которые не свойственны человеческому организму. В данном случае – герпесвирусы. При попадании антигенов в организм, иммунная система начинает производить антитела (иммуноглобулины) – клетки, которые не дают антигенам распространяться и размножаться. Антитела соединяются с антигенами, и иммунитет распознаёт и борется с такими «связками».

Во время иммуноферментного анализа эта природная реакция искусственно воспроизводится.

Для проведения реакции ИФА также можно сдавать почти любые материалы. Однако чаще всего для теста используют кровь.

Этот метод определения вируса герпеса даёт максимально точную и детальную информацию про присутствие или отсутствие инфекции, а также помогает получить картину инфекционного процесса.

Что такое ИФА (иммуноферментный анализ)

Анализы на герпес рекомендовано сдавать регулярно. Заражение этим вирусом не всегда даёт о себе знать. Он может находиться в организме в неактивном состоянии в течение длительного времени, при этом человек является его разносчиком.

Однако иногда сдавать анализ необходимо:

• при подготовке к пересадке органов;
• во время планирования беременности и в её процессе;
• при появлении на коже различных проявлений, природа которых непонятна.

Важно правильно подойти к сдаче биоматериала на анализ. Достоверность результата будет во многом зависеть от этого. Подготовка помогает исключить воздействие сторонних факторов на клетки герпеса.

Подготовка к анализу крови на вирус герпеса:

1. Кровь сдают на голодный желудок в утреннее время. Если биоматериал будет сдаваться днём или вечером, то следует не принимать пищу в течение как минимум 7-8 часов до процедуры.
2. За двое суток до процедуры нужно исключить из рациона пищу с повышенной жирностью и алкогольные напитки.
3. Перед анализом крови на определение вирусов герпеса не следует курить минимум 1 час.
4. За двое суток следует прекратить приём антибиотиков.

Подготовка к сдаче мазка из уретры или влагалища:

1. Не вступать в сексуальные контакты в течение 3 суток до процедуры.
2. Не спринцеваться и не вводить различные препараты (таблетки, жидкости, свечи) в течение одних суток до теста.
3. Воздержаться от мочеиспускания за 2-3 часа до мазка (при анализе материала из уретры).

Для анализа на герпес можно также сдавать слюну и мазок из полости рта. Этот анализ следует сдавать в утреннее время до приёма пищи, употребления жидкостей. Перед мазком нельзя также чистить зубы и курить.

На анализ можно также сдавать другие биоматериалы. О подготовке к таким анализам лучше узнать непосредственно в клинике или лаборатории, которая будет производить тест. Требования в разных лабораториях могут варьироваться от более строгих к менее строгим.

Анализ крови при подозрении на герпес делают в государственных и частных клиниках. Стоимость проведения данного вида диагностики в государственной клинике будет намного ниже, чем в частной. Сдать анализ можно только в утреннее время и в строго установленные часы, которые бывают неудобны. Также ожидание результатов может занять несколько дней. В частных клиниках сдать материал для теста можно в любое время (часто зависит от самой клиники и лаборатории), а получить результат на руки уже через 1-2 дня.

Правила подготовки к сдачи анализов

После получения результатов исследования в клинике или лаборатории важно понимать значение всей информации в них. Не всегда есть возможность сразу же получить консультацию терапевта. И, часто, врач не будет детально объяснять значение каждого пункта. Поэтому важно иметь хотя бы общее понимание полученной информации.

Благодаря ПЦР можно выявить наличие или отсутствие ДНК вируса в организме. Однако эта методика не позволяет получить детальную расшифровку относительно давности заражения и степени развития герпеса.

В бланке результата могут быть указаны качественные показатели – обнаружен вирус или нет. Также может приводиться информация о количественном содержании ДНК герпеса на условную единицу забранного биологического материала. Первый показатель необходим для определения наличия в организме пациента возбудителя герпеса. Второй показатель требуется для правильного подбора лечения. При большой концентрации клеток герпесвируса на единицу биоматериала потребуется приём более высоких доз препаратов.

Отрицательная реакция может быть в случае, если концентрация вируса менее 80 частиц на 5 микролитров крови, которая прошла через весь цикл теста.

ИФА показывает не только наличие или отсутствие ДНК герпеса в организме человека. Этот тест позволяет получить более детальную информацию о времени заражения и течении болезни.

В бланке результата будут указаны качественные и количественные показатели антител к вирусу любого герпеса IgM и IgG. Иммуноглобулины класса IgM появляются на ранних стадиях заражения. Присутствие антител IgG говорит о давнем или относительно давнем заражении.

Расшифровка возможных вариантов результатов:

Также в бланке результата могут быть указаны количественные показатели – содержание клеток вируса в одной единице биоматериала. Эти данные помогают определить давность присутствия болезни и являются ориентиром в подборе подходящего лечения.

Несмотря на то, что современные методы лабораторных исследований дают результаты высокой точности, в отдельных случаях имеют место ошибки. Положительный результат анализов крови на герпес не всегда говорит о действительном присутствии этого вируса в организме и его активности.

Ложноположительные результаты встречаются реже, чем ложноотрицательные.

В каких случаях результат анализа может быть ложноположительным:

1. Нарушены правила подготовки к сдаче анализа.
2. Медицинский работник нарушил правила забора биологического материала.
3. Герпесвирус погиб или пребывает в неактивной фазе после проведённого курса лечения, однако ещё не все ещё клетки были выведены из организма.

Если есть основание полагать, что присутствие герпеса невозможно, то нужно провести повторный анализ.

Гораздо более опасны случаи ложноотрицательного результата. Если при этом присутствуют явные признаки заражения, то будет назначено повторное проведение исследования. Однако, если признаков нет, то ложноотрицательный результат становится причиной отсутствия своевременного или назначения неподходящего лечения.

Причины ложноотрицательного результата:

1. Нарушение правил подготовки к сдаче анализа.
2. Медицинский работник нарушил правила забора или исследования материала.
3. Клетки герпеса находятся глубоко, и отсутствуют в выделениях (касается мазка из уретры или влагалища).

Чтобы избежать ситуации, когда необходимое лечение не назначено из-за ложноположительных или ложноотрицательных результатов, нужно сдавать материал на сразу несколько различных типов анализов на герпес.

Антигены и антитела: как организм распознает болезнь

Существует восемь типов герпеса. И для выявления каждого из них необходимо сдавать биоматериал на соответствующий анализ. Самые точные результаты дают ПЦР и ИФА. Благодаря этим тестам можно получить самую достоверную информацию и вовремя начать правильное лечение. Чтобы диагноз был поставлен верно и врач мог подобрать схему терапии, нужно ответственно подходить к самой сдаче материалов на исследование. В таком случае болезнь будет вылечена быстро и не будет риска осложнений.

источник

Вирус простого герпеса (ВПГ) находится в организме у 90% населения земного шара, но проявляется он не у всех, находясь в латентном состоянии. Бывают случаи заражения герпес вирусом даже грудных детей. Гораздо проще пройти своевременную диагностику тем пациентам, у кого ВПГ имеет внешние проявления – в виде так называемой «простуды» на губах. Здесь у врача не возникает особых проблем с диагностированием. Тяжелее обстоит дело с заболеванием генитальный герпес. Болезнь может длительное время развиваться в организме, протекая практически бессимптомно, при этом человек является не только носителем, но и распространителем ВПГ. Для установки точного диагноза и назначения полноценной терапии, проводится анализ крови на герпес.

В первую очередь, диагностика ВПГ необходима женщинам в период вынашивания ребенка, и процесс сдачи анализа на этот вирус является обязательным условием при постановке на учет в женскую консультацию. Почему врачами проявляется столь серьезное отношение к данному возбудителю?

Дело в том, что женщина, являющаяся носительницей ВПГ, может просто не знать об этом, по причине отсутствия внешних признаков заболевания. А тем временем, активно развивающийся вирус в организме матери, может привести к серьезным последствиям для плода – врожденным порокам развития, хромоносмым патологиям и даже к его гибели. Если плод не погибает, его нервная система абсолютно не защищена от атаки вируса. Клетки мозга и внутренних органов плода подвергаются необратимым изменениям, что может привести к развитию синдрома Дауна и патологии ЦНС – детскому церебральному параличу.

Рецидивирующий генитальный герпес опасен заражением ребенка во время прохождения по родовым путям. Наличие подозрительных высыпаний в интимной зоне должно сразу насторожить будущую мать и стать поводом для обследования, ведь беременная женщина обязана заботиться не только о своем самочувствии, но и о здоровье малыша.

Также, анализ крови на герпес сдают все люди с внешними проявлениями заболевания. Казалось бы, симптомы говорят сами за себя, но исследование крови на вирус герпеса необходимо для определения его типа, постановки точного диагноза и назначения наиболее эффективных методов терапии.

Диагностирование заболевания основывается в большинстве случаев на визуальном осмотре, но в некоторых ситуациях требует более тщательного обследования. Основными методами диагностирования можно назвать:

• осмотр пациента;
• изучение эпидемиологической ситуации, для установления возможных контактов с заражением ВПГ;
• выяснение жалоб;
• лабораторные исследования крови на наличие вируса в организме и определение его типа.

Для выявления сопутствующих заболеваний дополнительно могут быть назначены процедуры прохождения УЗИ внутренних органов, в частности желудочно-кишечного тракта и малого таза, ЭКГ, ФГДС, а также лабораторные исследования крови и мочи.

Считается, что даже своевременно выявленный вирус герпеса не подлежит окончательному излечению. Его клетки остаются в организме, проникают в нейроны центральной нервной системы и активизируются при благоприятных для атаки ВПГ условиях – ослаблении иммунитета, стрессовых ситуациях и обострении хронических заболеваний.

Методы лабораторного диагностирования ВПГ в крови разделяются на несколько разновидностей. Необходимо рассмотреть каждый из них в отдельности.

Несмотря на то, что носителями вируса герпеса является подавляющее большинство жителей планеты, у большинства из них ВПГ просто не проявляется, долгие годы, находясь в латентном состоянии. Каким образом происходит заражение:

• во время прямого контакта с носителем;
• половым путем;
• внутриутробно;
• во время родов;
• воздушно-капельным путем.

Своевременная диагностика наличия активного вируса герпеса в организме очень важна, особенно для женщин, которые только планируют беременность. Заблаговременное выявление ВПГ в крови позволит избежать серьезных последствий и устранить его, не причинив вреда здоровью ни матери, ни будущего ребенка.

Основными методами исследования крови на герпес являются ИФА (иммуноферментный анализ) и ПЦР-диагностика.

Этот метод анализа крови на ВПГ проводится в лабораторных условиях, с целью выявления наличия антител и их количества (иммуноглобулинов). Чтобы понять значимость этой процедуры, нужно подробнее узнать о том, что такое антитела и как они действуют.

Антитела (иммуноглобулины) – белки, образующиеся в кровяных клетках. При первом проникновении вируса герпеса в организм, иммуноглобулины вступают в прямое взаимодействие с вирусом и образуют комплекс для последующего устранения инфекции. Антитела существуют нескольких разновидностей, и различные вирусы нейтрализуются индивидуально. Перемещаясь по кровеносной системе организма, иммуноглобулины могут спокойно достигнуть любого участка организма и там уничтожить возбудителя.

Разновидности антител, в зависимости от стадии развития инфицирования и активности вируса:

1. Иммуноглобулины типа M (Ig M) образуются в тот момент, когда вирус только попадает в человеческий организм. Первое появление их в крови обнаруживается в течение 14 дней с момента заражения. Этот показатель говорит о том, что заражение произошло впервые, однако у 30% людей формирование антител типа М свидетельствует об активизации вируса, который находился в организме долгое время в латентной форме.
2. Иммуноглобулины типа g (Ig G) формируются во время повторной активизации ВПГ в организме, либо говорят о переходе заболевания в хроническую стадию. Если количество иммуноглобулинов G в крови сильно повышается, это свидетельствует о том, что давно находящийся в организме ВПГ атакует клетки крови по причине ослабления иммунитета.
3. Иммуноглобулины типа Ig G к предранным белкам ВПГ 1 и 2 типа. Эти антитела появляются в крови позже, чем антитела типа М, что говорит о присутствии острой формы ВПГ хронического характера или об активации вирусных клеток.
4. Авидность иммуноглобулинов типа Ig G – это оценка способности антител вступать во взаимодействие с вирусом, чтобы впоследствии его нейтрализовать. На начальных этапах развития болезни уровень активности G иммуноглобулинов в отношении деактивации ВПГ еще не высок. По мере сигнализирования иммунной системы на заражение, антитела становятся все более активными к нейтрализации вирусной инфекции.

Специфичность этого лабораторного исследования на наличие ВПГ, делает его практически 100% результативным и достоверным.

У каждой медицинской лаборатории, занимающейся проведением анализов крови методом ИФА, имеются свои нормативные показатели норм иммуноглобулинов в крови. И результат анализа, обозначенный на бланке, не всегда сможет расшифровать обычный пациент.

Для упрощения понимания итогов, полученных в ходе исследования, нужно привести объяснение результатов:

• Анти HSV IG G – результат свидетельствует о наличии необходимого количества антител к вирусу, болезнь уже перенесена, а наличие иммуноглобулинов в крови может наблюдаться в течение всей жизни;
• Анти HSV Ig М – тип антител, обнаруженный в крови, говорит о наличии заболевания в остром периоде, после проведенных терапевтических методов наличие этих антител будет определяться исследованиями еще 2-3 месяца;
• Анти HSV Ig M-/ Анти HSV Ig G- – говорит об отсутствии инфицирования, женщинам в период беременности рекомендуется проведение обследования каждый триместр;
• Анти HSV Ig M+/ Анти HSV Ig G+ – заболевание находится в начальной стадии, такие показатели говорят о риске заражения плода, находящегося в утробе матери, у женщин вне беременности свидетельствует о заболевании в вяло протекающей форме, либо обострении болезни;
• Анти HSV Ig M-/ Анти HSV Ig G+ – вирусная инфекция находится в стойкой ремиссии, если такой результат обнаружен у беременной женщины, то заболевание необходимо лечить, но отрицательного воздействия вируса на плод оказано не будет.

Расшифровка анализа, полученного в ходе исследования крови на ИФА, проводится врачом, и дальнейшие терапевтические меры предпринимаются исходя из показаний результатов и общей клинической картины пациента.

Исследование крови методом ПЦР является методом молекулярной биологии. С его помощью есть возможность увеличить концентрацию в биопробе фрагментов ДНК. Для выявления герпес вируса необходимый ген клонируют несколько раз соответствующими праймерами (короткими молекулами ДНК, состоящими из одной цепочки). Копирование возможно только в случае наличия нужного гена в образце крови.

На следующем этапе исследования фрагмент цепной реакции подвергается определению в его составе аминокислотных или нуклеидных последовательностей, на выявление возможных мутаций на генном уровне. Индуцированный мутагенез применяют для того, чтобы изменить свойства вируса и лишить его возможности дальнейшего размножения.

Процесс исследования сложен, а описание его еще более мало понятно. Но значимость методики ПЦР исследования крови на наличие вируса герпеса очень велика. Благодаря этому анализу, наличие вирусной инфекции обнаруживается сразу же после заражения, то есть до проявления самых первых симптомов заболевания, что очень повышает шанс своевременной диагностики, и принятия быстрых терапевтических мер. При помощи ПЦР диагностирования можно также определить тип ВПГ.

Расшифровка анализа заключается в выдаче положительного, либо отрицательного результата (присутствует или отсутствует возбудитель в крови пациента).

В ходе проведения культурального метода исследования на ВПГ, делается посев биологического материала на питательные среды, а выросшие в процессе микроорганизмы подлежат исследованию. В соответствии с предполагаемым типом возбудителя, подбирается среда и условия выращивания микроорганизмов.

Чтобы культивировать ВПГ, идеальным материалом являются куриные эмбрионы. При герпесе происходит выявление определенных изменений, что подтверждает наличие именно этого возбудителя в культуре.

В действительности процесс исследования выглядит следующим образом: содержимое пузырьков и высыпаний на кожных покровах человека собирается путем соскоба, и этим материалом заражается куриный эмбрион.

Чтобы изучить полученные результаты, нужный участок яйца помещается в стерильную воду, затем можно анализировать характер патологических изменений, рассматривая культуру на темном фоне.

Анализ крови на герпес требуется проводить на голодный желудок. На протяжении 8-9 часов перед сдачей крови нужно воздержаться от приема пищи полностью, а в течение 24 часов нельзя употреблять соленую, копченую и жареную еду. В большинстве случаев, назначение забора крови для анализа приходится на утреннее время.

Полученные результаты анализов могут розниться между собой, по причине использования различных реактивов и тестов для диагностики. В таких случаях, когда результаты показывают значительное различие между собой, рекомендуется провести еще один анализ в той же клинической лаборатории.

Важно! Накануне сдачи крови на исследование, нужно исключить всяческие эмоциональные нагрузки и стрессовые ситуации, так как они могут существенно повлиять на результат анализа. Перед забором крови пациенту рекомендуется отдохнуть 15-20 минут в приемном кабинете.

Герпес является коварным (по причине бессимптомного протекания) и опасным заболеванием. Лечение вирусной инфекции не предполагает полного избавления от болезни. Терапия приводит только к переходу вирусной инфекции в состояние стойкой ремиссии.

Для профилактики заражения рекомендуются следующие меры:

• укрепление иммунной системы;
• своевременное выявление и лечение хронических заболеваний;
• отказ от употребления табака и алкоголя;
• верность в супружеской жизни и отказ от беспорядочных половых связей.

Данные профилактические меры помогут избежать заражения герпетической инфекцией, а впоследствии, длительного и дорогостоящего лечения. Беременным женщинам особенно важно следить за своим здоровьем, ведь они несут ответственность не только за себя, но и за будущее потомство.

источник

Инфекция генитального герпеса (ВПГ, HSV) распространена во всем мире, и эпидемиологические исследования демонстрируют рост уровня инфицирования повсеместно. Генитальный герпес – одна из причин язвенных поражений половых органов. Герпетическую инфекцию провоцируют типы ВПГ 1 или ВПГ- 2. Большинство случаев генитального герпеса связано с ВПГ-2, но также рассматривается инфицирование и ВПГ-1.Клиническая картина первого эпизода генитального герпеса среди пациентов с инфекциями ВПГ-1 и ВПГ-2 схожа, частота и тяжесть рецидивов меньше с ВПГ-1, чем с ВПГ-2. Кроме того, тяжесть первого эпизода и реактивация при инфекции ВПГ-2 ниже у пациентов с предшествующим ВПГ-1. Необходимо отметить, что большинство герпинфекций являются бессимптомными или недиагностированными. Герпетическая инфекция может проявляться атипично, что затрудняет постановку диагноза. Большинство случаев передачи вируса партнеру или от матери к новорожденному происходит в отсутствие клинических симптомов. Проводились исследования, которые показали, что ВПГ повышает риск ВИЧ-инфицирования. Антивирусная терапия уменьшает клиническое проявления ВПГ, что значительно снижает риск передачи.

Диагностика герпеса важна для определения тактики ведения, но анализы на герпес не входят в скрининговые исследования.

Есть множество способов для выявления ВПГ, и клинический диагноз генитального герпеса всегда должен подтверждаться лабораторными исследованиями, включая серотипирование, поскольку серотип влияет как на прогноз, так и на схему терапии. Окончательный диагноз генитального герпеса устанавливается на основании визуализации специфических признаков в области гениталий, с выделением вируса, либо с обнаружением антигена. В некоторых лабораториях обнаружение ДНК ВПГ с использованием методов молекулярной диагностики заменяет выделение вирусной культуры и ИФА-диагностику. Серологические анализы проводят у пациентов с симптомами герпетической инфекции, когда прямые методы демонстрируют отрицательные результаты, при отсутствии симптоматики и для определения прошлой или настоящей инфекции.

На результаты лабораторной диагностики ВПГ влияют следующие аспекты:

• тип теста;
• качество полученного образца,
• возможности лаборатории;
• интерпретация результатов.

Образцы, полученные из пузырьковых поражений в течение первых 72 часов с момента появления, имеют большую диагностическую ценность. Другие биоматериалы из более раннего очага или исследование мазков генитального отделяемого выполняется, если есть высокий риск ВПГ. Если появились корочки на фоне заживления, вероятность обнаружить ВПГ значительно уменьшается. Использование агрессивных средств для дезинфекции поражений может инактивировать вирус. Обработка альгинатом кальция губительна для ВПГ, и поэтому не применима.

Прямые тесты подтверждают присутствие ВПГ в подозрительном очаге или в выделениях из половых органов. В идеальном варианте анализируют образец из везикулы, которая появилась менее 24 часов назад.

Если есть множество пузырьков, аспирируют содержимое из нескольких. По данным исследований, чувствительность анализа ниже у пациентов с рецидивирующими поражениями, чем у пациентов с первыми эпизодами.

В некоторых случаях электронная микроскопия жидкого биоматериала может дать положительный результат. Эта процедура, хотя и является быстрой, относительно нечувствительна, и положительные результаты появляются только при внешних поражениях (высыпания на ягодицах или бедрах, реже на слизистых оболочках). Жидкость для анализа предпочтительнее взять из целого везикула, используя туберкулиновый шприц, при этом достаточно аспирации содержимого в иглу.

Капля высушивается на воздухе и рассматривается с помощью микроскопа.

В некоторых лабораториях применяют молекулярные методы для обнаружения и типирования ВПГ. Образцы, взятые для выделения или обнаружения антигена, также подходят для методов детектирования ДНК. Повышенная чувствительность ПЦР-диагностики, основанная на амплификации нуклеиновых кислот, по сравнению с другими прямыми методами (обнаружение культуры или антигена), позволяет анализировать материал с минимальным количеством патогенных частиц.

Посев на питательную среду – золотой стандарт для обнаружения ВПГ, специфичность 100% для ВПГ-1 и ВПГ-2, чувствительность зависит от стадии герпетической инфекции и времени получения образца.

Чувствительность варьируется от 75% для первых эпизодов до 50% для рецидивов.

Выявление антигена ВПГ путем окрашивания DFA мазков (флюоресценция) может обеспечить быстрое определение культуры клеток. Важно, чтобы для этого анализа был получен высококачественный образец; в этом режиме чувствительность теста может достигать 90%, особенно при начальной инфекции.

Окрашивание материала производится специальным флюоресцентным веществом, с последующим микроскопированием.

Обнаружение вирусного антигена – альтернатива культурального метода диагностики, способ может помочь, когда при неправильной обработке и транспортировке образцов может инактивироваться любой присутствующий вирус.

Для подтверждения ВПГ чувствительность анализа аналогична или выше, чем у культуральных способов.

Обнаружение антигенов ВПГ возможно с помощью тестов DFA или иммунопероксидазных анализов на фиксированных и обработанных образцах клеток.

Герпетическая инфекция вызывает типичные цитопатические изменения в генитальных эпителиальных клетках). Они увеличиваются в размерах, появляются внутриядерные включения, часто визуализируются многоядерные клетки. После специальной окраски образцы исследуют с помощью светового микроскопа.

Недостатки: этот метод имеет низкую чувствительность и не отличает ВПГ-1 от ВПГ-2. Кроме того, аналогичная картина может быть, например, при ветряной оспе.

Для подтверждения диагноза необходимы более чувствительные анализы.

Прямое исследование везикулярной жидкости или другого клинического материала с помощью электронной микроскопии для диагностики ВПГ ограничено тем, что морфология вируса также не позволяет отличать ВПГ от других вирусов герпеса (например, вирус ветряной оспы). Этот традиционный метод был в значительной степени заменен флюоресцентным окрашиванием мазков, что обеспечило специфичную для конкретного типа дифференцировку HSV-1 и HSV-2.

Вирусная ДНК может быть обнаружена методами гибридизации с использованием радиоактивно меченых или биотинилированных образцов. Эти методы в значительной степени были заменены более чувствительными и менее трудоемкими исследованиями, которые используют амплификацию целевой ДНК ВПГ с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Специфичность метода амплификации обеспечивается либо проведением повторной ПЦР-диагностики с целевыми специфическими праймерами, либо с помощью ВПГ-специфической гибридизации с амплифицированными продуктами.

В случае возможного генитального герпеса ПЦР обнаруживает вирусную ДНК в течение нескольких дней после того, как поражения не содержат демонстративного инфекционного вируса. Это значит, что способ диагностики, основанный на амплификации нуклеиновой кислоты, может выдать положительный результат даже в том случае, когда наступило симптоматическое выздоровление, и лечение уже не требуется.

Отрицательные результаты посева обычно подтверждаются ПЦР-диагностикой. Чувствительность ПЦР выше, чем стандартный посев культуры. Появление ПЦР в режиме реального времени минимизировало риск ложноположительных результатов.

Около 8-10 мл крови собирают в пробирку без антикоагулянта или консервантов. После ее свертывания при комнатной температуре сыворотку центрифугируют и помещают в другую пробирку. Если необходимо хранение в течение нескольких недель, сыворотку охлаждают при 4 ° C или замораживают при температуре ниже -20 ° C. Цельную кровь замораживать не рекомендовано из-за гемолиза, что делает образец непригодным для серологического тестирования.

Анализ для обнаружения антител к ВПГ назначают, когда другие вирусологические исследования не могут быть выполнены или дают отрицательные результаты). Это особенно актуально при бессимптомном носительстве инфекции.

Серологические тесты для ВПГ могут применяться в следующих случаях:

• исследование передачи герпетической инфекции партнеру;
• первый эпизод инфекции, особенно у беременных;
• рецидивирующее течение ВПГ;
• обследование дискордантных пар,
• планирование беременности (мужчина позитивен, женщина отрицательна);
• отягощенный акушерско-гинекологический анамнез с подозрением на герпетическую инфекцию;
• скрининг на ИППП;
• обследование у ВИЧ-инфицированных пациентов для выявления ВПГ-2.

Хотя многие серологические анализы выявляют антитела к ВПГ, установить конкретный тип (1 или 2) не представляется возможным.

Между ВПГ-1 и ВПГ-2 существует тесная серологическая связь, каждый из них кодирует серологически отличный гликопротеин G (gG-1 и gG-2). Эта разница была использована при разработке серологических тестов, специфичных для конкретного типа.

Иммуноблоттинг (WB) – стандарт для обнаружения антител к ВПГ. Анализы имеют высокую чувствительность и способность различать антитела к ВПГ-1 и ВПГ-2. Происходит реакция с выделением фиксированных белковых матриц («блоттов») из лизатов клеток ВПГ-1 или ВПГ-2.

Наибольшую диагностическую ценность представляет определение IgM-антител, которые появляются примерно через 2 недели с момента инфицирования, либо присутствуют в крови при хронической инфекции или ее активации.

IgG определяются при длительном существовании инфекции в организме или при ее активации.

ИФА-метод может быть количественным (определение титра антител, чем выше, тем острее процесс) и качественным (присутствие вируса, тип, антитела, предшествующие рецидивы).

Определение антител к предранним белкам вируса помогает судить о длительности процесса.

Расшифровка анализа ИФА на герпес:

• IgM «-» , IgG к предранним белкам «+», IgG поздние «+» / первичная острая инфекция или ее рецидив.
• IgM «-», IgG к предранним белкам «-», IgG поздние «+» / есть иммунный ответ к вирусу герпеса (носительство).
• IgM «+», IgG к предранним белкам «+», IgG поздние «-» / первичная острая инфекция.
• IgM «+», IgG к предранним белкам «+», IgG поздние «+» / первичная острая инфекция.
• IgM «-» , IgG к предранним белкам «-», IgG поздние «-» / норма, свидетельствующая об отсутствии патологического процесса.

Существует ряд противовирусных препаратов для лечения инфекций ВПГ; из них чаще назначают Ацикловир. Устойчивость ВПГ к Ацикловиру растет, причем почти все клинически значимые штаммы, устойчивые к Ацикловиру, диагностируются у пациентов с ослабленным иммунитетом, особенно у ВИЧ-инфицированных. Развитие резистентности обычно возникает в результате мутаций в вирусном геноме, а наличие избирательного действия препарата приводит к появлению устойчивой популяции вирусов. Выделение ВПГ из сохраняющихся поражений, несмотря на адекватные дозы, подозрительно на резистентность к Ацикловиру.

Дифференциальная диагностика проводится со следующими патологиями:

• синдром Бехтеча (неинфекционный васкулит, характеризующийся орогенитальными афтозными язвами, поражением кожи и глаз и вовлечением ЦНС, желудочно-кишечного тракта и суставов);
• кандидоз;
• мягкий шанкр;
• вирус Коксаки;
• опоясывающий герпес;
• сифилис;
• болезнь Крона;
• некоторые дерматозы;
• паховая гранулема и пр.

Мишина Виктория, уролог, медицинский обозреватель

6,366 просмотров всего, 1 просмотров сегодня

источник