Как сдавать анализы на половой хроматин

Ключевые слова: аномалии половых хромосом пол половые хромосомы синдром Клайнфелтера синдром Тернера синдром Шершевского-Тернера полисомии

2. Следует предупредить пациента, что для анализа берут соскоб слизистой оболочки щеки, и сообщить ему, кто будет проводить исследование.

3. Следует заверить пациента, что взятие соскоба займет лишь несколько минут, но предупредить о том, что в дальнейшем может понадобиться хромосомный анализ.

4. Следует сообщить пациенту, что для выполнения исследования лаборатории потребуется примерно 4нед.

Оборудование. Деревянный или металлический шпатель, чистое предметное стекло, фиксирующий раствор для клеток.

2. Полученный материал переносят со шпателя на предметное стекло и равномерно распределяют по нему.

3. На препарат разбрызгивают фиксирующую жидкость, высушивают и отправляют в лабораторию, приложив краткий анамнез и показания к исследованию.

У мужчин в норме (XY) обнаруживают только одну глыбку Y-хроматина (количество глыбок Y-хроматина соответствует количеству Y-хромосом в исследуемых клетках).

2. Изменения клеток, обусловленные недостаточной фиксацией.

3. Наличие бактерий, «морщинистость» клеточной мембраны, исследование дегенерирующих клеток или использование некачественной краски.

2. Уточнить характер аномалии развития у младенцев с неясным полом (исследование только Х-хроматина).

3. Определить число Y-хромосому пациента (исследование только Y-хроматина).

Аномалии половых хромосом.

47XXY, 48XXXY, 49XXXXY, 48XXYY

Нерасхождение хромосом или неправильное разделение хроматина в анафазу I или II оогенеза или сперматогенеза приводит к образованию патологических гамет — 1 случай на 1000 рождений мальчиков

Синдром обычно проявляется к периоду полового созревания. Гипоплазия полового члена и яичек. Скудное оволосение на лице и животе ,некоторое увеличение молочных желез (гинекомастия) Половая дисфункция Избыточное отложение на туловище Стерильность Возможно отставание в умственном развитии, которое тем более выражено, чем больше Х-хромосом Полисемия Y 47XYY

Нерасхождение в анафазу II сперматогенеза обусловливает перемещение обеих Y-хромосом к одному и тому же полюсу и появлению YY-сперматозоидов -1 случай на 1000 рождений мальчиков. Рост выше среднего (выше 182,9 см) Часто наблюдается угревая сыпь: Возможно агрессивное или психопатическое поведение, совершение преступных действий. Фертильность не нарушена. Неспособность к обучению. Синдром Тернера 45X0 Мозаика ХО/ХХ или ХО/ХХХ Аберрации Х-хромосом, включая делецию короткого плеча одной Х-хромосомы, наличие кольцевой хромосомы или изохромосомы на длинном плече Х-хромосомы.

Нерасхождение хромосом в анафазу I или II сперматогенеза приводит к образованию сперматозоидов без половых хромосом— 1 случай на 3500 рождений девочек (наиболее частый кариотип при абортах в I триместре беременности)

Низкий рост (ниже 144,8 см). Крыловидная шея. Низкая граница волос на затылке. Широкая грудная клетка с широко расставленными сосками. Недоразвитые молочные железы. Гипоплазия наружных, половых органов. Часто первичная аменорея ИБС (в 30% случаев в сочетании с аортой). Аномалии развития и заболевания почек. Стерильность, обусловленная недоразвитием внутренних половых органов (яичники имеют вид соединительно­тканных тяжей). Умственное развитие нормальное, однако отмечается нарушение пространственного восприятия и ориентировки. Другие полисомии X

Нерасхождение хромосом в анафазу I или П оогенеза

1 случай на 1400 рождений девочек

источник

ПОЛОВОЙ ХРОМАТИН — участок ядра соматической клетки, находящейся в интерфазе, представляющий собой конденсированную половую хромосому; в результате конденсации Х-хромосомы образуется X-хроматин, а конденсации Y-хромосомы — Y-хроматин. У людей с нормальным составом хромосом (см. Кариотип) в соматических клетках женщин содержится X-хроматин, а в соматических клетках мужчин — Y-хроматин. По наличию этих образований может быть определен генетический пол индивида (см. Пол), что находит практическое применение при диагностике разнообразных клин, форм тестикулярной и овариальной дисгенезии (см. Дисгенезия гонад), ориентировочном исследовании индивидов на ложный — псевдогермафродитизм (см.) или истинный гермафродитизм (см.), в суд.-мед. практике и т. п.

X-хроматин (так наз. тельце Барра) как специфический для женского пола цитол, признак впервые был описан Барром (М. Barr) и Бертрамом (E. G. Bertram) в 1949 г.; одна из двух X-хромосом в раннем эмбриогенезе генетически инактивируется (гетерохроматинизируется) и остается конденсированной в течение всего интерфазного периода жизни соматической клетки. Деконденсация гетерохроматинизированной X-хромосомы в соматической клетке не означает ее генетической активации. Вторая Х-хромосома в женской клетке и Х-хромосома в мужской соматической клетке не образуют X-хроматина. Y-хроматин формируется за счет части длинного плеча Y-хромосомы; он состоит из гетерохроматина, конденсируемого в интерфазном ядре и способного интенсивно флюоресцировать после окраски акрихином и другими флюорохромами (см.). Тест с флюорохромами для определения половой принадлежности клеток по Y-хроматину был впервые предложен Касперссоном (Т. Caspersson) в 1970 г.

При определении генетического пола индивида его клетки исследуют как на Х-, так и на Y-хроматин. Для этого получают клеточный материал (источником его могут быть самые разнообразные ткани, хотя предпочтительнее те, для к-рых не требуется предварительного культивирования in vitro; для определения X-хроматина чаще всего используют мазки со слизистой оболочки щеки, реже слизистой оболочки влагалища, а также клетки волосяных фолликулов; для пренатальной диагностики пола плода используют амниотические клетки. Содержание Y-хрома-тина, помимо перечисленных тканей, можно определять также в сперматозоидах. Прекрасным материалом для анализа X- и Y-хроматина являются однослойные культуры клеток, обычно фибробластов. В культивируемых лимфоцитах крови хорошо выявляется Y-хроматин. Фиксацию препаратов проводят до их подсушивания на воздухе, обычно фиксируют метанолом или смесью этанола и уксусной к-ты (в соотношении 3:1) либо только этанолом. Методы окраски для выявления X- и Y-хроматина различны. X-хроматин лучше выявляется при окраске препаратов основными нефлюоресцирующими красителями: основным фуксином, тионином, ацетоорсеином, толуидиновым синим и др. Окрашенные препараты высушивают и изучают с масляной иммерсией в проходящем свете. Y-хроматин выявляют при окраске препаратов флюорохромами — производными акридинового оранжевого: акрихином, акрихин-ипритом, акрихин-пропилом. Препараты заключают в специальный буферный р-р и изучают в ультрафиолетовом свете с помощью люминесцентного микроскопа (см.). Анализ проводят на разъединенных, распластанных клетках. Срезы тканей для определения П. х. используют лишь тогда, когда невозможно получить мазки или препараты-отпечатки среза органа.

Тельце Барра в нормальной диплоидной клетке имеет форму треугольника, круглого или даже палочковидного образования, средний линейный размер к-рого 1 мкм. Очень часто тельце Барра находится на периферии ядра и нередко соприкасается с ядерной оболочкой. Размер, форма, положение в ядре и плотная окраска позволяют отличать X-хроматин от глыбок конденсированного хроматина других хромосом. Частота, с к-рой X-хроматин встречается в клетках, зависит от состояния организма (гормональный статус, физическая нагрузка и др.)* Она низка у новорожденных девочек в первые 2—3 дня жизни. У половозрелой женщины частота встречаемости X-хроматина колеблется в разные периоды менструального цикла, различна в разных тканях и никогда не достигает 100% . В клетках слизистой оболочки щеки X-хроматин обнаруживается в 25—60% клеток, в культивируемых in vitro фибробластах — в 40—80% клеток, в некультивируемых амниотических клетках примерно в 5% клеток. В гранулоцитах X-хроматин имеет вид барабанной палочки; низкая частота выявления (1,5—5%) и трудность дифференцировки этого образования с другими ядерными структурами ограничили практическое распространение этого теста. В полиплоидных клетках число телец Барра кратно числу диплоидных наборов хромосом. У мужчин цитологически сходные с X-хроматином глыбки хроматина обнаруживаются примерно в 1% клеток.

Размеры Y-хроматина в нормальных диплоидных клетках у разных индивидов сильно различаются, что связано с большими колебаниями длины самой Y-хромосомы. При диагностике пола по Y-хроматину следует помнить, что встречаются индивиды или с незначительным количеством гетерохроматина в Y-xpo-мосоме или вовсе лишенные гетерохроматина, и необнаружение Y-хроматина у таких лиц не является фактом, отрицающим их принадлежность к мужскому полу. У большинства мужчин Y-хроматин выглядит сравнительно крупным (0,3—1 мкм), ярко светящимся образованием (тельцем) обычно округлой формы; в отдельных клетках он может иметь двойную структуру или быть несколько диффузным. На периферии клеточного ядра Y-тельце располагается реже, чем тельце Барра. В ядре присутствуют ярко светящиеся глыбки хроматина других хромосом, отличить которые от Y-тель-ца обычно нетрудно. Частота встречаемости Y-хроматина существенно различается в разных тканях. В клетках слизистой оболочки щеки он обнаруживается в 20—80% клеток, в клетках волосяного фолликула в 70—90%, в лимфоцитах периферической крови в 60—87% клеток. Сходные с Y-тельцем флюоресцирующие тельца в клетках женщины (аутосомный гетерохроматин) встречаются примерно в 5% клеток. У женщин, беременных плодом мужского пола, клетки последнего могут проникать в кровяное русло матери. Они обнаруживаются по наличию в них Y-хроматина. Для определения генетического пола по Y-хроматину рекомендуется просмотреть не менее 50 клеток.

Практическое применение теста на П. х. двояко. Этот тест используется для определения пола индивида по его клеткам, когда либо сам индивид недоступен для исследования (пренатальная диагностика пола плода, суд.-мед. экспертиза и т. п.), либо в тех случаях, когда проводится массовая проверка соответствия фенотипического (паспортного) пола генетическому (напр., при обследовании женщин на спортивных соревнованиях). Определение пола плода внутриутробно проводят при подозрении на наследственную болезнь, сцепленную с полом (гемофилия, некоторые формы мышечной дистрофии и др.), с целью предотвращения рождения неизлечимо больного ребенка.

При обследовании пациентов с клин. проявлениями нарушения половой дифференцировки и в других случаях, когда необходимо точное описание состояния половых хромосом, независимо от результатов анализа на П. х. прибегают к хромосомному анализу (см. Хромосомы).

Особенно часто определение П. х. используется для предварительной диагностики отклонений в числе или структуре половых хромосом, когда у исследуемого имеются нарушения полового развития. Простота и быстрота выполнения позволяют применять тест на П. х. при массовом обследовании новорожденных и других детей с целью выявления аномалий половых хромосом. Окончательный диагноз ставят после изучения хромосомного набора (см.). Отклонения в системе половых хромосом в сторону уменьшения,количества их материала, совместимые с жизнеспособностью индивида, происходят за счет гетерохроматинизированной Х-хромосомы и гетерохроматиновой части Y-хромосомы и поэтому могут быть установлены путем анализа полового хроматина. Отсутствие X-хроматина в клетках пациента с женским фенотипом наблюдается при полной агенезии гонад при синдроме Шерешевского — Тернера с формулой кариотипа 45,X (см.Тернера синдром) либо у лиц с кариотипом 46,XY при тестикулярной феминизации (см.) и при хрома-тин-отрицательной форме дисгенезии гонад. При дисгенезии яичников хромосомного генеза частота встречаемости и размеры тельца Барра зависят от характера отклонений в Х-хромосоме и коррелируют с клин. полиморфизмом болезни. Тельце Барра может иметь нормальную величину, но обнаруживаться редко или даже вовсе отсутствовать в отдельных тканях (мозаичная форма синдрома Шерешевского — Тернера, формула кариотипа обычно 46,XХ/45,X); оно может быть уменьшенным по сравнению с нормой (делеция короткого или длинного плеча Х-хромосомы, кольцевая Х-хромосома) или, наоборот, увеличенным (по длинному плечу Х-изохромосомы). Разнообразные клин, формы тестикулярной дисгенезии коррелируют с характером отклонений в Y-хромосоме и имеют разную картину Y-хроматина: от его отсутствия или низкого содержания (мозаицизм с формулой кариотипа 46,XY/45,X) до изменений в величине и форме (делеции длинного плеча изохромосомы, дицентрические хромосомы). Исследования П. х. при разных формах истинного и ложного гермафродитизма проводятся только как ориентировочные, за к-рыми должно следовать тщательное исследование хромосомных наборов.

При нарушениях полового развития, связанных с увеличением числа X-хромосом, в клетках пациенток обнаруживаются дополнительные тельца Барра. Их число определяется формулой n — 1, где n — общее количество X-хромосом у индивида. Так, при кариотипе 47,XXX в клетках женщины обнаруживаются два тельца Барра, при кариотипе 48,ХХХХ — три тельца Барра. Дополнительные Y-хромосомы проявляют себя появлением в клетке дополнительных телец Y (при кариотипе 47,XYY — два Y-тельца, при кариотипе 48,XYYY — три Y-тельца). При синдроме Клайнфелтера (см. Клайнфелтера синдром), когда Кариотип пациента включает две или более Х-хромосомы и одну или более Y-хромосому, в соматических клетках одновременно содержатся X- и Y-хроматин (по одному тельцу каждого при наиболее часто встречающейся форме синдрома с формулой кариотипа 47,XXY).

Исследование П. х. в суд.-мед. практике производится с целью установления половой принадлежности следов крови, слюны и других биол, жидкостей, вырванных волос, следов-отпечатков клеток тканей и органов, кусочков тканей, которые могут быть обнаружены на месте происшествия, на различных предметах, одежде, теле потерпевшего и подозреваемого в совершении преступления, на орудиях травмы, на транспортных средствах, а также при обнаружении обгоревших трупов или частей расчлененных трупов. Реже П. х. исследуют с целью суд.-мед. установления генетического пола у лиц с аномалиями полового развития, используя общепринятые методики.

Для приготовления препаратов из следов крови (см.) и слюны (см.) кусочки предмета-носителя помещают в пробирку и заливают 0,5—40% (следы крови) или 5—10% (следы слюны) уксусной к-той. Экстрагируют при комнатной температуре в течение нескольких часов и, удалив кусочки предмета-носителя, центрифугируют. Осадок переносят на предметное стекло и высушивают на воздухе. С пятен крови на предметах, не впитывающих жидкость (металл, стекло, пластмасса и др.), делают соскобы, которые затем обрабатывают таким же образом.

При исследовании волос (см.) корень волоса помещают на предметное стекло и добавляют 10—25% уксусную к-ту. После набухания отделяют и измельчают волосяной фолликул, удаляя остальные части волоса.

Из кусочков тканей п органов, при необходимости предварительно выдержав их до набухания в уксусной к-те соответствующей концентрации или в физиол, р-ре, готовят гистол, препараты, мазки или препараты-отпечатки. Следы-наложения клеток, тканей или органов на орудиях травмы смывают физиол, р-ром, одновременно соскабливая их. Мелкие кусочки тканей, встречающиеся в таких следах, измельчают препаровальными иглами. Смывы-соско-бы помещают в пробирки, центрифугируют, из осадка готовят гистол, препараты. Исследование препаратов целесообразно начинать с выявления Y-хроматина, т. к. при его отсутствии те же препараты могут быть снова использованы для выявления X-хроматина. При исследовании учитывают только достаточно хорошо сохранившиеся неповрежденные ядра клеток. При анализе следов крови Y-хроматин определяют в ядрах лимфоцитов, т. к. в нейтро-филах Y-хроматин в препаратах из следов крови мужчин может не выявляться.

При отсутствии повышенной влажности П. х. может длительно сохраняться в высохших следах, а также в клетках фолликула вырванного волоса. Высокая температура (выше 150°) разрушает ядра клеток и П. х. Значительная влажность в течение нескольких суток также приводит к разрушению клеток, что делает невозможным выявление полового хроматина. Т. к. условия, в к-рых находятся следы, могут последовательно меняться, решающее значение для установления пригодности следов крови, слюны и т. д. для определения П. х. имеет состояние обнаруживаемых в них клеток и их ядер. В клетках высохших кусочков тканей, не подвергающихся действию влаги, П. х. сохраняется длительное время. В целых трупах и в их крупных частях в процессе аутолиза и гниения в течение нескольких суток происходит деструкция клеточных ядер. В обгоревших трупах половой хроматин нек-рое время может сохраняться в клетках глубоко расположенных органов и тканей.

При выявлении небольшого числа клеток, сохранивших ядра, исследуемых на П. х., с целью установления статистической достоверности результатов используют различные математические методы анализа, учитывающие как общее число обнаруженных клеток, так и число клеток. содержащих X- или Y-хроматин.

Библиография: Давиденкова Е. Ф., Берлинская Д. К. и Тысяч-н ю к С. Ф. Клинические синдромы при аномалиях половых хромосом, JI., 1973; Захаров А. Ф. Хромосомы человека, М., 1977; Капустин А. В. Судебно-медицинская диагностика пола по половым различиям в клетках, М., 1969; Лабораторные и специальные методы исследования в судебной медицине, под ред. В. И. Пашковой и В. В. Томилина, с. 157, М., 1975; Любинская С. И. и Антонова С. Н. Исследование Y-хроматина в следах крови, Суд.-мед. экспертиза, т. 18, № 3, с. 17, 1975; Основы цитогенетики человека, под ред. A. А. Прокофьевой-Бельговской, М., 1969; Methods in human cytogenetics, ed. by H. G. Schwarzacher a. U. Wolf, p. 207, B. а. о., 1974; The sex chromatin, ed. by K. L. Moore, Philadelphia — L., 1966.

А. Ф. Захаров; А. В. Капустин (суд.).

источник

Определять содержание полового хроматина наиболее удобно в клетках слизистой оболочки полости рта после одномоментной окраски мазка ацетоорсеином; соскоб берут обычно шпателем со слизистой оболочки щеки. Число обнаруживаемых одиночных телец полового хроматина зависит от техники окраски и метода сосчитывания. Обычно подсчитывают 100 клеток, учитывая только клетки срединного слоя с расположением полового хроматина у ядерной оболочки. Мазки не должны иметь признаков бактериального инфицирования.

Индивидуумы с одиночным тельцем полового хроматина в указанной пропорции в клетках буккального мазка имеют две Х-хромосомы, с 2, 3 и 4 тельцами — соответственно 3, 4 или 5 Х-хромосом. При отсутствии полового хроматина имеется лишь одна Х-хромосома, а наличие большого или, наоборот, маленького тельца полового хроматина может свидетельствовать о нарушениях в Х-хромосоме. Низкое содержание полового хроматина иногда указывает на мозаицизм по половым хромосомам.

Половой хроматин может также обнаруживаться в полиморфно-ядерных лейкоцитах в виде так называемых барабанных палочек. У женщин на каждые 500 полиморфно-ядерных лейкоцитов обнаруживается избыток в виде шести барабанных палочек. У мужчин вообще находят только отдельные барабанные палочки. Как и тельца полового хроматина (тельца Барра), барабанные палочки представляют собой гетеропикнотическую Х-хромосому и обнаруживаются не так легко, как при исследовании буккального мазка, однако технически мазок корви приготовить легче.

Препараты крови готовят обычным способом, окрашивают по Фельгену фуксинсернистой кислотой, по Паппенгейму метиловым зеленым — пиронином или гематоксилином по Грюнвальду — Гимзе. Число барабанных палочек подсчитывают в 500 клетках; достоверным считается, когда половой хроматин обнаруживается в 6 и больше из 500 лейкоцитов.

Dokumov и Spasov описали колебания в содержании полового хроматина в течение менструального цикла. У большинства женщин при нормальном менструальном цикле эти колебания соответствуют изменениям эозинофильного индекса кольпоцитограммы. Наибольшее падение полового хроматина совпадает с периодом овуляции, заметное уменьшение отмечается в фазе роста и созревания фолликула, а также при лечении гормональными препаратами.

По наблюдениям Даутовой Ф. Р. и Сотниковой Л. Г., содержание полового хроматина у здоровых женщин меняется с возрастом. Так, до 45 лет процент хроматинположительных клеток находится в пределах 32—68, а в возрасте 46—62 лет снижается до 28—42.

Исследования, проведенные в нашей клинике Филлипповой В. В., Чибиковой Т. В. и Чилингариди А. П., выявили наличие циклическх колебаний уровня содержания полового хроматина в элементах буккального и влагалищного эпителия у здоровых женщин с нарастанием его в фазе желтого тела, а также более высокое содержание во влагалищном по сравнению с буккальным.

Содержание полового хроматина с интенсивностью гормональных влияний непосредственно не связано. Вместе с тем Л. И. Тычинекий, обнаруживший снижение содержания полового хроматина у больных с синдромом склерокистозных яичников, наблюдал нарастание его спустя 4 мес и больше после операции в противоположность падению уровня экскреции 17-КС. Половой хроматин снижен у больных с первичным бесплодием, при дисфункции яичников, развившейся после родов и абортов [Ф. Р. Даутова, Л. Г. Сотникова].

Приведенные данные показывают, что путем исследования полового хроматина можно достаточно четко отграничить больных с хромосомными аномалиями развития половой системы от больных с первичными эндокринопатиями. По мнению Dew-hurst, Barr и др., показаниями к исследованию полового хроматина в гинекологии являются первичная аменорея, нарушение дифференцировки наружных половых органов, вторичная аменорея в сочетании с клиническими симптомами дисгенезии гонад.

Показанием к исследованию кариотипа является отсутствие полового хроматина или низкий процент и малый размер телец Барра. Zizka и соавт. рекомендуют параллельно проведению цитогенетических исследований при клиническом обследовании обращать внимание на массу тела и рост обследуемой, возраст родителей при ее рождении, развитие и состояние здоровья братьев и сестер, их плодовитость, проводить изучение родословной. Генные дефекты могут также способствовать возникновению отклонений от правильных гармоничных соотношений между отдельными частями тела, вследствие чего телосложение приобретает иногда диспластические черты.

источник

Хроматин X — это небольшое тельце, которое интенсивно окрашивается основными красителями и выявляется в интерфазньгх ядрах соматических клеток млекопитающих и человека — непосредственно под ядерной оболочкой.

Хроматин X впервые обнаружили в 1949 г. М. Барр и Ч. Бертрам, в ядрах нейронов кошки, причем, только в клетках самок. В дальнейшем было показано наличие хроматина X и у других млекопитающих, в том числе человека Происхождение и значение полового хроматина X получило свое объяснение позднее, в гипотезе М. Лайон (1961).

Хроматин X может быть определен в любых тканях, однако чаще всего используются эпителиальные клетки слизистой полости рта (тест Барра) и клетки периферической крови. Иногда используются клетки волосяной луковицы. В качестве Х-хроматина учитывается самый большой хромоцентр, прилегающий к ядерной мембране. Анализ результатов основан на установлении числа телец хроматина X, которое коррелирует с количеством Х-хромосом.

Тельце Барра представляет собой одну инактивированную хромосому X и выявляется в интерфазном ядре в виде конденсированного и интенсивно окрашенного тельца. Как правило, оно прилегает к внутренней стороне ядерной мембраны и имеет овальную или треугольную форму. Размер тельца Барра составляет в среднем около 1 микрона (± 0,3). Следует отличать тельце Барра от других хорошо окрашиваемых структур интерфазного ядра, например ядрышка или центрально расположенных хромоцентров.

Тест Барра включает в себя следующие этапы:

— получение биологического материала: стерильным шпателем проводится соскоб с внутренней поверхности щеки (у детей — с поверхности нижней губы) и делается мазок на предметном стекле;

— фиксация: с использованием специального фиксатора, в котором препарат выдерживают от 30 минут до 12 часов;

— дегидратация: последовательный перенос из одного раствора в другой с выдержкой в каждом в течение 5 минут: в спирте 70°, в спирте 50°, в дистиллированной воде I, в дистиллированной воде II;

— гидролиз: в НСl (необязательно);

— окрашивание: красителем CARR (основной фуксин);

— анализ препарата под микроскопом с использованием иммерсионного объектива.

Число телец Барра = числу хромосом X -1

В норме тельце Барра представлено в одном экземпляре в клетках женщин и отсутствует у мужчин, так как мужчины имеют в кариотипе только одну хромосому X, которая является активной, в то время как в кариотипе женщин 2 хромосомы X, одна из которых инактивируется путем гетерохроматинизации, образуя тельце Барра.

Хотя теоретическая частота хроматина X в клетках слизистой полости рта составляет 100%, практически можно выявить тельце Барра только в 30-40% клеток. Это обусловлено следующими факторами:

— исключением из подсчета центрально расположенных хромоцентров;

— наложением некоторых клеток друг на друга, что затрудняет точный анализ;

— наличием Барр-отрицательных клеток, как следствие нарушений в конденсации хромосомы X;

— другими причинами: возрастом, овариальным циклом, болезнями, приемом некоторых лекарственных препаратов.

В патологических случаях, связанных с нарушением числа хромосом X (дисгенезия гонад), тельце Барра может: выявляться у мужчин (47ДХУ), отсутствовать у женщин (45,Х) или присутствовать в дополнительных экземплярах у обоих полов (полисомии X).

Величина тельца Барра зависит от размеров инактивированной хромосомы X; она может быть: больше 1 микрона в случае isoXq, дупликации хромосомы X; меньше 1 микрона в случае isoXp, делеции хромосомы X, кольцевой хромосомы X.

Если на одном и том же препарате встречаются клетки с разным числом телец Барра, то учитывется их максимальное количество в клетке (см.частоту телец Барра).

источник

О найденных недочетах пишите support@03.ru.

Статистика
За сутки добавлено 18 вопросов, написано 16 ответов, из них 3 ответа от 4 специалистов в 1 конференции.

С 4 марта 2000-го 375 специалистов написали 511 756 ответов на 2 329 486 вопросов

1. Анализ крови1455
2. Беременность1368
3. Рак786
4. Анализ мочи644
5. Диабет590
6. Печень533
7. Железо529
8. Гастрит481
9. Кортизол474
10. Диабет сахарный446
11. Психиатр445
12. Опухоль432
13. Ферритин418
14. Аллергия403
15. Сахар крови395
16. Беспокойство388
17. Сыпь387
18. Онкология379
19. Гепатит364
20. Слизь350

. 3,5 месяца, вес в норме 6 кг. Заключение от генетиков — муковисцидоз, с мутацие гена F508 в гетерозиготном состоянии. Половой хроматин-24%(норма), фенилаланин крови 0,74нг%(норма), тиреотропный гормон крови 4, . открыть

Добрый день! У меня ребенок 4г. 3м. сейчас она ростом 93см вес 13500 (родилась 50/3100, 6 мес. — 65/5730, 12 мес. — 68/7300). В первый месяц жизни перенесла операцию эндоскопическая тривентрикулоцистерностомия… открыть (еще 21 сообщение)

19 декабря 2014 г. / Наталья

. снижен, СТГ низкий, щитовитка в норме, кариотип нам все-таки сделали в МГЦ(исключили Шершевского-Тернера), половой хроматин тоже в норме. Тут нас отправили на МРТ и выяснилось,что у дочки синдром пустого турецкого седла — . смотреть

Здравствуйте уважаемый доктор!!У меня имеется эррозия.Сдала мазок на цитологию ,результаты следующие:Эндо-Экзо:материал смешанный.Цитограмма воспаления.Элементы… открыть

. не пьет, не курит, здоров, очень активны в половой жизни). Недавно обнаружила молочницу, Гинеколог подтвердила, . из метаплазированных клеток с репаративными изменениями.Ядра округлые , хроматин зернистый,распределен равномерно.Цитоплазма плотная,гомогенная. . смотреть

Здравствуйте!Моему сыну 3,2 года,ему нравиться играть с женскими сумками,косметикой,носить женскую обувь.Уже пробовали купить мужскую сумочку,отвлекать на другие игры,закатывает… открыть

татьяна, Начните с психолога, если не поможет, то к генетику для проведения анализа на половой хроматин. смотреть

здравствуйте.ребенку 1.5 года диагноз двусторонний крипторхизм с подозрением на двустороннюю аплазию яичек. сдали анализ на половой хроматин.результат=0. что это значит? в норме ли показатель. спасибо открыть

Скажите пожалуйста у сына (ему 2 года) анализ на половой хроматин показал 1%, к врачу через неделю, а я очень переживаю что обозначает анализ. Спасибо открыть

. УТУ-окраска,СВУ-окраска. Нужно ли для точной постановки диагноза определять половой хроматин, и для исключения мозаицизма сколько нужно просмотреть клеток и какой лучше метод?Заранее спасибо за ответ! открыть

Половой хроматин уже лет 30, как не определяют. Необходимо провести исследование методом FISH на Х и У хромосомы. Просчитать не менее 100 клеток. При данном методе — это просто. И ещё не плохо сделать FISH на локус sry. смотреть

04.04.2011г.на 38 недели родила мертвого ребенка диагноз ЗВУР маловодие.(роди вторые ребенку уже 12лет абортов и выкидышей не было) Обратилась к генетику здала анализ на половой… открыть (еще 11 сообщений)

. но его показатели не главенствующие! у меня примерно на момент зачатия половой хроматин показал 4%, меня направили к генетикам, я сдавала дорогущий анализ на кариотипирование, а в это время уже была беременная на . смотреть

Здравствуйте сину 5 лет здали анализ на половой хроматин X-0% Y -68%что означают ети проценты?за что отвечают? открыть

Здравствуйте сину 5 лет здали анализ на половой хроматин X-0% Y -68%что означают ети проценты открыть

ЗДРАВСТВУЙТЕ!У МОЕГО СЫНА КАРИОТИП 47хху ПОЛОВОЙ ХРОМАТИН 19%, НАСКОЛЬКО ЭТО СЕРЬЕЗНО И ЧТО ЗНАЧИТ 19%ПОЛ,ХРОМ, открыть

Добрый день!Подскажите,пожалуйста,результат полового хроматина составил 15%,плохо ли хорошо ли это? открыть

Наталия, половой хроматин уже не исследуется почти 30 лет. Сдайте анализ на кариотип. смотреть

источник

ПОЛОВОЙ ХРОМАТИН — участок ядра соматической клетки, находящейся в интерфазе, представляющий собой конденсированную половую хромосому; в результате конденсации Х-хромосомы образуется X-хроматин, а конденсации Y-хромосомы — Y-хроматин. У людей с нормальным составом хромосом (см. Кариотип) в соматических клетках женщин содержится X-хроматин, а в соматических клетках мужчин — Y-хроматин. По наличию этих образований может быть определен генетический пол индивида (см. Пол), что находит практическое применение при диагностике разнообразных клин, форм тестикулярной и овариальной дисгенезии (см. Дисгенезия гонад), ориентировочном исследовании индивидов на ложный — псевдогермафродитизм (см.) или истинный гермафродитизм (см.), в суд.-мед. практике и т. п.

X-хроматин (так наз. тельце Барра) как специфический для женского пола цитол, признак впервые был описан Барром (М. Barr) и Бертрамом (E. G. Bertram) в 1949 г.; одна из двух X-хромосом в раннем эмбриогенезе генетически инактивируется (гетерохроматинизируется) и остается конденсированной в течение всего интерфазного периода жизни соматической клетки. Деконденсация гетерохроматинизированной X-хромосомы в соматической клетке не означает ее генетической активации. Вторая Х-хромосома в женской клетке и Х-хромосома в мужской соматической клетке не образуют X-хроматина. Y-хроматин формируется за счет части длинного плеча Y-хромосомы; он состоит из гетерохроматина, конденсируемого в интерфазном ядре и способного интенсивно флюоресцировать после окраски акрихином и другими флюорохромами (см.). Тест с флюорохромами для определения половой принадлежности клеток по Y-хроматину был впервые предложен Касперссоном (Т. Caspersson) в 1970 г.

При определении генетического пола индивида его клетки исследуют как на Х-, так и на Y-хроматин. Для этого получают клеточный материал (источником его могут быть самые разнообразные ткани, хотя предпочтительнее те, для к-рых не требуется предварительного культивирования in vitro; для определения X-хроматина чаще всего используют мазки со слизистой оболочки щеки, реже слизистой оболочки влагалища, а также клетки волосяных фолликулов; для пренатальной диагностики пола плода используют амниотические клетки. Содержание Y-хрома-тина, помимо перечисленных тканей, можно определять также в сперматозоидах. Прекрасным материалом для анализа X- и Y-хроматина являются однослойные культуры клеток, обычно фибробластов. В культивируемых лимфоцитах крови хорошо выявляется Y-хроматин. Фиксацию препаратов проводят до их подсушивания на воздухе, обычно фиксируют метанолом или смесью этанола и уксусной к-ты (в соотношении 3:1) либо только этанолом. Методы окраски для выявления X- и Y-хроматина различны. X-хроматин лучше выявляется при окраске препаратов основными нефлюоресцирующими красителями: основным фуксином, тионином, ацетоорсеином, толуидиновым синим и др. Окрашенные препараты высушивают и изучают с масляной иммерсией в проходящем свете. Y-хроматин выявляют при окраске препаратов флюорохромами — производными акридинового оранжевого: акрихином, акрихин-ипритом, акрихин-пропилом. Препараты заключают в специальный буферный р-р и изучают в ультрафиолетовом свете с помощью люминесцентного микроскопа (см.). Анализ проводят на разъединенных, распластанных клетках. Срезы тканей для определения П. х. используют лишь тогда, когда невозможно получить мазки или препараты-отпечатки среза органа.

Тельце Барра в нормальной диплоидной клетке имеет форму треугольника, круглого или даже палочковидного образования, средний линейный размер к-рого 1 мкм. Очень часто тельце Барра находится на периферии ядра и нередко соприкасается с ядерной оболочкой. Размер, форма, положение в ядре и плотная окраска позволяют отличать X-хроматин от глыбок конденсированного хроматина других хромосом. Частота, с к-рой X-хроматин встречается в клетках, зависит от состояния организма (гормональный статус, физическая нагрузка и др.)* Она низка у новорожденных девочек в первые 2—3 дня жизни. У половозрелой женщины частота встречаемости X-хроматина колеблется в разные периоды менструального цикла, различна в разных тканях и никогда не достигает 100% . В клетках слизистой оболочки щеки X-хроматин обнаруживается в 25—60% клеток, в культивируемых in vitro фибробластах — в 40—80% клеток, в некультивируемых амниотических клетках примерно в 5% клеток. В гранулоцитах X-хроматин имеет вид барабанной палочки; низкая частота выявления (1,5—5%) и трудность дифференцировки этого образования с другими ядерными структурами ограничили практическое распространение этого теста. В полиплоидных клетках число телец Барра кратно числу диплоидных наборов хромосом. У мужчин цитологически сходные с X-хроматином глыбки хроматина обнаруживаются примерно в 1% клеток.

Размеры Y-хроматина в нормальных диплоидных клетках у разных индивидов сильно различаются, что связано с большими колебаниями длины самой Y-хромосомы. При диагностике пола по Y-хроматину следует помнить, что встречаются индивиды или с незначительным количеством гетерохроматина в Y-xpo-мосоме или вовсе лишенные гетерохроматина, и необнаружение Y-хроматина у таких лиц не является фактом, отрицающим их принадлежность к мужскому полу. У большинства мужчин Y-хроматин выглядит сравнительно крупным (0,3—1 мкм), ярко светящимся образованием (тельцем) обычно округлой формы; в отдельных клетках он может иметь двойную структуру или быть несколько диффузным. На периферии клеточного ядра Y-тельце располагается реже, чем тельце Барра. В ядре присутствуют ярко светящиеся глыбки хроматина других хромосом, отличить которые от Y-тель-ца обычно нетрудно. Частота встречаемости Y-хроматина существенно различается в разных тканях. В клетках слизистой оболочки щеки он обнаруживается в 20—80% клеток, в клетках волосяного фолликула в 70—90%, в лимфоцитах периферической крови в 60—87% клеток. Сходные с Y-тельцем флюоресцирующие тельца в клетках женщины (аутосомный гетерохроматин) встречаются примерно в 5% клеток. У женщин, беременных плодом мужского пола, клетки последнего могут проникать в кровяное русло матери. Они обнаруживаются по наличию в них Y-хроматина. Для определения генетического пола по Y-хроматину рекомендуется просмотреть не менее 50 клеток.

Практическое применение теста на П. х. двояко. Этот тест используется для определения пола индивида по его клеткам, когда либо сам индивид недоступен для исследования (пренатальная диагностика пола плода, суд.-мед. экспертиза и т. п.), либо в тех случаях, когда проводится массовая проверка соответствия фенотипического (паспортного) пола генетическому (напр., при обследовании женщин на спортивных соревнованиях). Определение пола плода внутриутробно проводят при подозрении на наследственную болезнь, сцепленную с полом (гемофилия, некоторые формы мышечной дистрофии и др.), с целью предотвращения рождения неизлечимо больного ребенка.

При обследовании пациентов с клин. проявлениями нарушения половой дифференцировки и в других случаях, когда необходимо точное описание состояния половых хромосом, независимо от результатов анализа на П. х. прибегают к хромосомному анализу (см. Хромосомы).

Особенно часто определение П. х. используется для предварительной диагностики отклонений в числе или структуре половых хромосом, когда у исследуемого имеются нарушения полового развития. Простота и быстрота выполнения позволяют применять тест на П. х. при массовом обследовании новорожденных и других детей с целью выявления аномалий половых хромосом. Окончательный диагноз ставят после изучения хромосомного набора (см.). Отклонения в системе половых хромосом в сторону уменьшения,количества их материала, совместимые с жизнеспособностью индивида, происходят за счет гетерохроматинизированной Х-хромосомы и гетерохроматиновой части Y-хромосомы и поэтому могут быть установлены путем анализа полового хроматина. Отсутствие X-хроматина в клетках пациента с женским фенотипом наблюдается при полной агенезии гонад при синдроме Шерешевского — Тернера с формулой кариотипа 45,X (см.Тернера синдром) либо у лиц с кариотипом 46,XY при тестикулярной феминизации (см.) и при хрома-тин-отрицательной форме дисгенезии гонад. При дисгенезии яичников хромосомного генеза частота встречаемости и размеры тельца Барра зависят от характера отклонений в Х-хромосоме и коррелируют с клин. полиморфизмом болезни. Тельце Барра может иметь нормальную величину, но обнаруживаться редко или даже вовсе отсутствовать в отдельных тканях (мозаичная форма синдрома Шерешевского — Тернера, формула кариотипа обычно 46,XХ/45,X); оно может быть уменьшенным по сравнению с нормой (делеция короткого или длинного плеча Х-хромосомы, кольцевая Х-хромосома) или, наоборот, увеличенным (по длинному плечу Х-изохромосомы). Разнообразные клин, формы тестикулярной дисгенезии коррелируют с характером отклонений в Y-хромосоме и имеют разную картину Y-хроматина: от его отсутствия или низкого содержания (мозаицизм с формулой кариотипа 46,XY/45,X) до изменений в величине и форме (делеции длинного плеча изохромосомы, дицентрические хромосомы). Исследования П. х. при разных формах истинного и ложного гермафродитизма проводятся только как ориентировочные, за к-рыми должно следовать тщательное исследование хромосомных наборов.

При нарушениях полового развития, связанных с увеличением числа X-хромосом, в клетках пациенток обнаруживаются дополнительные тельца Барра. Их число определяется формулой n — 1, где n — общее количество X-хромосом у индивида. Так, при кариотипе 47,XXX в клетках женщины обнаруживаются два тельца Барра, при кариотипе 48,ХХХХ — три тельца Барра. Дополнительные Y-хромосомы проявляют себя появлением в клетке дополнительных телец Y (при кариотипе 47,XYY — два Y-тельца, при кариотипе 48,XYYY — три Y-тельца). При синдроме Клайнфелтера (см. Клайнфелтера синдром), когда Кариотип пациента включает две или более Х-хромосомы и одну или более Y-хромосому, в соматических клетках одновременно содержатся X- и Y-хроматин (по одному тельцу каждого при наиболее часто встречающейся форме синдрома с формулой кариотипа 47,XXY).

Исследование П. х. в суд.-мед. практике производится с целью установления половой принадлежности следов крови, слюны и других биол, жидкостей, вырванных волос, следов-отпечатков клеток тканей и органов, кусочков тканей, которые могут быть обнаружены на месте происшествия, на различных предметах, одежде, теле потерпевшего и подозреваемого в совершении преступления, на орудиях травмы, на транспортных средствах, а также при обнаружении обгоревших трупов или частей расчлененных трупов. Реже П. х. исследуют с целью суд.-мед. установления генетического пола у лиц с аномалиями полового развития, используя общепринятые методики.

Для приготовления препаратов из следов крови (см.) и слюны (см.) кусочки предмета-носителя помещают в пробирку и заливают 0,5—40% (следы крови) или 5—10% (следы слюны) уксусной к-той. Экстрагируют при комнатной температуре в течение нескольких часов и, удалив кусочки предмета-носителя, центрифугируют. Осадок переносят на предметное стекло и высушивают на воздухе. С пятен крови на предметах, не впитывающих жидкость (металл, стекло, пластмасса и др.), делают соскобы, которые затем обрабатывают таким же образом.

При исследовании волос (см.) корень волоса помещают на предметное стекло и добавляют 10—25% уксусную к-ту. После набухания отделяют и измельчают волосяной фолликул, удаляя остальные части волоса.

Из кусочков тканей п органов, при необходимости предварительно выдержав их до набухания в уксусной к-те соответствующей концентрации или в физиол, р-ре, готовят гистол, препараты, мазки или препараты-отпечатки. Следы-наложения клеток, тканей или органов на орудиях травмы смывают физиол, р-ром, одновременно соскабливая их. Мелкие кусочки тканей, встречающиеся в таких следах, измельчают препаровальными иглами. Смывы-соско-бы помещают в пробирки, центрифугируют, из осадка готовят гистол, препараты. Исследование препаратов целесообразно начинать с выявления Y-хроматина, т. к. при его отсутствии те же препараты могут быть снова использованы для выявления X-хроматина. При исследовании учитывают только достаточно хорошо сохранившиеся неповрежденные ядра клеток. При анализе следов крови Y-хроматин определяют в ядрах лимфоцитов, т. к. в нейтро-филах Y-хроматин в препаратах из следов крови мужчин может не выявляться.

При отсутствии повышенной влажности П. х. может длительно сохраняться в высохших следах, а также в клетках фолликула вырванного волоса. Высокая температура (выше 150°) разрушает ядра клеток и П. х. Значительная влажность в течение нескольких суток также приводит к разрушению клеток, что делает невозможным выявление полового хроматина. Т. к. условия, в к-рых находятся следы, могут последовательно меняться, решающее значение для установления пригодности следов крови, слюны и т. д. для определения П. х. имеет состояние обнаруживаемых в них клеток и их ядер. В клетках высохших кусочков тканей, не подвергающихся действию влаги, П. х. сохраняется длительное время. В целых трупах и в их крупных частях в процессе аутолиза и гниения в течение нескольких суток происходит деструкция клеточных ядер. В обгоревших трупах половой хроматин нек-рое время может сохраняться в клетках глубоко расположенных органов и тканей.

При выявлении небольшого числа клеток, сохранивших ядра, исследуемых на П. х., с целью установления статистической достоверности результатов используют различные математические методы анализа, учитывающие как общее число обнаруженных клеток, так и число клеток. содержащих X- или Y-хроматин.

Библиография: Давиденкова Е. Ф., Берлинская Д. К. и Тысяч-н ю к С. Ф. Клинические синдромы при аномалиях половых хромосом, JI., 1973; Захаров А. Ф. Хромосомы человека, М., 1977; Капустин А. В. Судебно-медицинская диагностика пола по половым различиям в клетках, М., 1969; Лабораторные и специальные методы исследования в судебной медицине, под ред. В. И. Пашковой и В. В. Томилина, с. 157, М., 1975; Любинская С. И. и Антонова С. Н. Исследование Y-хроматина в следах крови, Суд.-мед. экспертиза, т. 18, № 3, с. 17, 1975; Основы цитогенетики человека, под ред. A. А. Прокофьевой-Бельговской, М., 1969; Methods in human cytogenetics, ed. by H. G. Schwarzacher a. U. Wolf, p. 207, B. а. о., 1974; The sex chromatin, ed. by K. L. Moore, Philadelphia — L., 1966.

А. Ф. Захаров; А. В. Капустин (суд.).

источник

Генетическое обследование играет важную роль в педиатрической андрологии и гинекологии. Его результаты могут иметь решающее значение в установлении причины заболевания, определении прогноза, а также в выработке лечебной тактики.

В 1949 г. J. Barr, R. Bertram впервые обнаружили стабильное хроматиновое образование на периферии ядра в нервных клетках кошки. Эту особенность соматических клеток особей женского пола, выявленную у большинства млекопитающих, с 1953 г. стали использовать в цитологическом определении количества Х-хромосом у человека при нарушениях полового формирования или созревания.

Данное образование в клетках лиц женского пола представляет собой темную массу, расположенную у внутренней поверхности ядерной мембраны. Эта ядерная масса, или так называемое тельце Барра, по сути дела есть неактивная Х-хромосома, Х-хроматиновое тельце имеет диаметр около 1 мк. При обнаружении телец Барра не менее чем в 10—12% исследуемых клеток говорят о положительном половом хроматине. Соответственно отрицательный половой хроматин устанавливается у лиц с тельцами Барра менее чем в 5% клеток.

При выявлении полового хроматина в 6—9% клеток рекомендуется повторить исследование. При повторном получении аналогичного результата необходимо кариотипирование. Для определения полового хроматина обычно исследуют клетки слизистой оболочки внутренней поверхности щеки (буккальный эпителий). Приготовление препарата для исследования занимает 15—20 мин, и в этом состоит преимущество метода перед определением кариотипа.

Однако цитогенетическая оценка менее точна, и ее диагностическое значение уменьшается при подозрении на мозаицизм (клоны клеток с разным хромосомным набором у одного и того же индивидуума). В клетках буккального эпителия по сравнению с другими соматическими клетками лиц женского пола хроматинположительных ядер меньше, но при хорошо сохраненных ядрах этот показатель не менее 20%. Если в клетках больше 2 Х-хромосом, то максимальное число хроматиновых телец в любом диплоидном ядре будет равно количеству Х-хромосом минус единица.

Например, у женщин с хромосомным набором 47ХХХ или у мужчин с набором 48XXXY выявляется по 2 тельца Барра. У индивидов с кариотипом 46XY (здоровые мужчины) или 45X0 (девочки с синдромом Шерешевского — Тернера) половой хроматин практически не определяется.

Необходимо помнить, что половой хроматин — динамичная структура, изменяющаяся в зависимости от метаболизма клетки и общего состояния организма. Не рекомендуется исследовать половой хроматин в первые сутки после рождения, во время приема гормональных препаратов, антибиотиков и некоторых других сильнодействующих лекарственных средств.

Исследование полового хроматина необходимо при диагностике аномалий строения наружных гениталий и полового развития, при первичной аменорее, особенно в сочетании с низким ростом (у девочек), и при евнухоидном высоком росте в сочетании с гипогонадизмом (у мальчиков).

«Нарушения полового развития», М.А.Жуковский

В последнее время в гинекологической практике все более широкое распространение получает эхография, особенно у детей и подростков, в связи с безболезненностью, безопасностью и необременительностью. В СНГ ультразвук с диагностической целью впервые применила Н. Д. Селезнева в 1962 г. Безопасность и высокая разрешающая способность означают большие потенциальные возможности эхографии в эндокринологии. Исследование затрудняют малые размеры матки…

У девочек от 2 до 8 лет матка растет очень медленно, преимущественно а длину, и имеет цилиндрическую форму, ее шейка не дифференцируется. Яичники располагаются высоко у стенок малого таза, у нижнего края поперечного среза m. iliopsoas. Эти эхографические данные, коррелируя с отсутствием вторичных половых признаков у девочек указанного возраста, свидетельствуют о низкой эстрогенной насыщенности организма….

Эхографическое исследование позволяет проследить четкую зависимость между созреванием всего организма и развитием внутренних половых органов у детей и подростков. С эхографии необходимо начинать обследование больных с подозрением на дисгенезию гонад, и при визуализации матки и гонад в виде тяжей сопоставлять эти данные с результатами гормональных, генетических и клинических методов исследования. При ультразвуковом исследовании у больных…

Термин предложен Г. А. Левицким в 1924 г. N. Tijo, M. Levari (1956) впервые показали, что соматические клетки человека содержат 46 хромосом. Кариотип представляет собой морфологическую характеристику ядер клеток на стадии их деления (в метафазе) и дает представление о хромосомном наборе клеток организма. Для определения хромосомного набора клеток берут венозную кровь и выращивают культуру лимфоцитов….

Кольпоцитология Метод основан на способности клеток влагалищного эпителия под воздействием эстрогенов пролиферировать с последующим созреванием вплоть до ороговения. Чем выраженнее влияние эстрогенов, тем больше «созревающих» и «созревших» (ороговевших) клеток. Данный метод может дать косвенные сведения о эффективности лечения у девочек-подростков. Соотношение клеток разного вида во влагалищном мазке определяется, как правило, по двум основным индексам. Кариопикнотический…

источник

Нередко в гинекологии и педиатрической андрологии возникает необходимость провести генетическое обследование пациента. Этот способ позволяет более достоверно установить причины возникшего недуга, подобрать необходимый курс лечения и определить прогнозы в развитии заболевания.

Половой хроматин – важный показатель нормального полового развития на клеточном уровне. Его диагностика необходима в тех случаях, когда речь идет об аномалиях в строении наружных гениталий. Исследование проводится также при выявлении заболеваний, вызванных хромосомными патологиями и при наличии признаков нарушения полового развития. Поводом к этому может послужить отсутствие менструации у девочек и недоразвитие яичников или снижение их функции у мальчиков.

Половой хроматин впервые был обнаружен ученым Дж. Баром в 1949 году. Проводя исследование нервных клеток кошки, он заметил на периферии ядра хроматиновое образование. Впоследствии эта важная особенность женских соматических клеток была выявлена у большей части представительниц отряда млекопитающих. В клетках самца такие тельца не были обнаружены. Тельце Барра является компонентом всех соматических клеток женщин. А в некоторых случаях оно имеет своеобразные придатки («барабанные палочки»). Соматические клетки – это неотъемлемые составляющие человеческого организма. К ним относятся все клеточки тела, кроме гамет. Данное открытие позволило расширить представления о методах определения пола у людей и млекопитающих.

Наличие в женском организме телец Барра объясняется присутствием в соматических клетках двух Х-хромосом. Причем активностью обладает только одна из них. Именно поэтому в женских клетках всегда имеется тельце Барра. Данная теория в дальнейшем позволила выявлять аномалии в развития организма. Так, клетка с тремя хромосомами будет иметь два тельца, с четырьмя – три и т.д. Диагностика аномального развития клеток может применяться как для мужчин, так и для женщин. С 1953 года данное открытие стало активно использоваться для определения точного количества Х-хромосом у людей с нарушениями развития.

Половой хроматин, или тельце Барра, с виду напоминает темную массу округлой, треугольной или палочковидной формы, которая располагается около внутренней поверхности мембраны ядра. Это неактивная Х-хромосома, которая по своему диаметру не превышает 1 мк. Обнаружение телец Барра в 10-12 % исследуемых клетках свидетельствует о положительном половом хроматине. Материалом исследования обычно служит эпителий слизистой оболочки щеки (внутренняя поверхность), влагалища, волосяные фолликулы и околоплодные воды. Если показатель не превысил 5 %, это свидетельствует об отрицательном половом хроматине.

Половой хроматин обуславливает различия интерфазных ядер у мужчин и женщин. Он связан с особенностями функционирования половых систем и их структурой. Тельце Барра бывает двух видов: Y и X. Первый вариант является структурным компонентом Y-хромосомы и выявляется главным образом у мужчин. Для этих целей используют флюорохром с применением ультрафиолетового света. Х-хроматин (тельце Барра) – это инактивированная Х-хромосома. Ее дезактивация происходит еще в первые недели внутриутробного развития и сохраняется при митотическом делении длительное время.

Следует отметить, что половой хроматин – это структура динамичная. Она может изменяться в зависимости от общего состояния организма и метаболизма клеток. Именно по этой причине проводить обследование не рекомендуется во время использования гормональных препаратов, в первые дни после рождения, после приема антибиотиков и других лекарственных средств.

Сегодня по наличию полового хроматина медики определяют генетический пол будущего ребенка, диагностируют разнообразные клинические формы дисгенезии гонад и гермафродитизма. Анализы на выявление этого компонента широко используются в судебно-медицинской практике.

источник

Диагностика готовности будущих экономистов к работе на валютном рынке на основе компьютерных технологий

Анализ результатов экспериментальной работы по подготовке будущих экономистов к работе на валютном рынке на основе компьютерных технологий

Определение половой принадлежности, а также своевременное выявление аномалий полового развития, наследования болезней, сцепленных с полом, представляет важный вопрос не только в медицине, но и в практике спорте. Открытие в 1949 г. Баром и Бертрамом (1) особых образований глыбок хроматина в интерфазных ядрах соматических клеток (телец Барра) позволило в дальнейшем использовать половой хроматин для решения вопросов медицинской генетики. Тельце Барра соответствует одной из двух Х-хромосом клеток особей женского пола. В клетках у мужчин половой хроматин практически отсутствует, хотя некоторые авторы указывают на обнаружение 2-3% подобных глыбок (2).

Использование метода определения полового хроматина в слизистой оболочки полости рта нашло применение в спорте для прохождения полового контроля женщин — спортсменок. Контрольное тестирование на половую принадлежность предписано Медицинской комиссией Международного Олимпийского Комитета и должно проводиться в обязательном порядке. Несмотря на то, что сведения о результатах тестирования не подлежат публичному оглашению, процедура установления половой принадлежности является для спортсменок серьезным психологическим препятствием. Некоторые из них, всю жизнь осознававшие себя женщинами, потратив годы на достижение высот спортивного мастерства, дойдя до вершины спортивной карьеры, после прохождения генетического контроля вынуждены покинуть профессиональный спорт. По данным Международного Олимпийского Комитета, на четыреста спортсменов приходится один гермафродит. По данным других спортивных организаций, число лиц с генетическими отклонениями, признающимися недопустимыми для соревнований, значительно выше.

Гермафродиты, чей генетический пол не соответствует женскому кариотипу, обладают мужскими психофизиологическими качествами и имеют преимущество перед женщинами-спортсменками. Вместе с тем, многие спортсменки с нормальным женским кариотипом имеют морфологическими признаки, характерные для мужского соматотипа: широкие плечи, хорошо развитую мускулатуру, незначительне жироотложения. Эти признаки могут являться внешними маркерами нарушений половой дифференцировки женского организма.

Учитывая важность проблемы, мы предприняли настоящее исследование, целью которого явилось изучение генетического пола спортсменок, обучающихся в СПбГУФК им П.Ф. Лесгафта, а также его влияние на формирование типа телосложения.

В исследовании приняли участие 173 студентки в возрасте 17-22 лет, представительницы 10 видов спорта, имеющие спортивный стаж не менее 7 лет и спортивную квалификацию от 1 взрослого разряда до мастера спорта международного класса. Контрольная группа в количестве 40 женщин такого же возраста состояла из лиц, не имеющих отношение к спорту.

Для определения генетического пола у всех спортсменок утром натощак производили соскоб с внутренней поверхности щеки. Сначала шпателем снимали поверхностный слой эпителия, а затем другим краем шпателя получали клетки из слизистой оболочки ротовой полости. Материал окрашивали галлоцианином с хромовыми квасцами по Эйнарсону. Учитывали глыбки телец, прилежащие к внутренней поверхности ядерной оболочки из расчета на 100 ядер, с последующим определением телец Барра в процентах. Соматотипирование проводили по морфограмме Е.А. Богдановой и Р.Г. Саркисян (3).

В результате цитологического исследования у всех спортсменок в соскобах слизистой оболочки ротовой полости обнаружено достоверное уменьшение полового хроматина, по сравнению со сверстницами, не занимающимися спортом (табл. 1). Наименьшее количество телец Барра было зафиксировано у представительниц легкой атлетики, фехтования и спортивного единоборства, а наибольшее – у фигуристок и лыжниц.

Содержание полового хроматина в эпителиальных клетках слизистой ротовой полости у женщин-спортсменок

По данным литературы, в норме у женщин в мазках слизистой оболочки полости рта обнаруживается 20-70% хроматинположительных клеток (4). Снижение содержания полового хроматина до 10-20% часто сочетается с отсутствием одной Х-хромосомы в половине клеток.

Наше исследование показало, что у 79,6 % из числа обследуемых спортсменок содержание полового хроматина составило от 20 до 52 % . У остальных (20,4 %) спортсменок в мазках определялось от 10 до 20 %. хроматинположительных клеток. Среди не спортсменок относительное количество полового хроматина оказалось ниже нормы у 2,5% женщин.

Одно из объяснений низкого показателя полового хроматина — изменения физиологического состояния клеток организма в эмбриогенезе. Нарушения, как правило, сопровождаются длительными расстройствами регуляторных систем (например, надпочечников), нарушением репродуктивной функции, а также соматическими аномалиями (4,5,6).

Проведенное у спортсменок с низким уровнем полового хроматина выявило у них в 82% случаев атлетическое или интерсексуальное телосложение. Это наглядно показывает влияние гормонального нарушения на формирование фигуры спортсменок. В женской популяции в норме такой тип телосложения встречается в 10,8% случаев (7), а у спортсменок, по данным Т.С. Соболевой (8) – в 70-90% случаев. Отличительной особенностью такого соматотипа является нарушение пропорций между размерами таза и грудной клетки (грудная клетка больше возрастной нормы, а размеры таза меньше), что указывает на изменение половой дифференцировки (табл. 2).

Антропометрические показатели женщин-спортсменок с низким содержанием полового хроматина

Наше исследование показало, что индекс маскулинизации (отношение акромиального диаметра к межвертельному) у всех спортсменок оказался достоверно выше, чем у женщин контрольной группы (см. табл. 2).

Таким образом, результаты исследования позволили сделать следующие выводы:

источник