Меню Рубрики

Как сдать анализ на копропорфирин

Комплексный количественный анализ, позволяющий определить в моче уровень уро- и копропорфиринов: уропорфирин, гептакарбоксипорфирин, гексакарбоксипорфирин, пентакарбоксипорфирин, копропорфирин I, копропорфирин III, общий порфирин. Исследование предназначено для диагностики как врождённых, так и приобретенных порфирий. В основе генетически обусловленной порфирии лежит нарушение биосинтеза гема, приводящее к избыточному накоплению в организме порфиринов и их предшественников. Вторичные порфирии возникают вследствие нарушения функций печени или кроветворных органов как результат воздействия тяжелых металлов, интоксикаций свинцом, фосфором, алкоголем, бензолом, четыреххлористым углеродом, при некоторых злокачественных опухолях и аллергических состояниях, циррозах печени и проч.

Высокоэффективная жидкостная хроматография-масс-спектрометрия (ВЭЖХ-МС).

Нмоль/сут. (наномоль в сутки), мкмоль/сут. (микромоль в сутки).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
  • Исключить (по согласованию с врачом) прием мочегонных препаратов в течение 48 часов до сбора мочи.

Общая информация об исследовании

Порфирины — циклические соединения, образованные четырьмя пиррольными кольцами, связанными между собой метенильными мостиками, синтезируются из глицина и сукцинил-CoA через образование δ-аминолевулиновой кислоты и порфобилиногена. Это промежуточные соединения в синтезе гема, являющегося частью молекулы гемоглобина, осуществляющей перенос кислорода. При нарушении синтеза гема концентрация порфиринов в моче увеличивается.

Порфирины представляют собой оранжево-красные флюоресцирующие соединения, состоящие из 4 колец пиррола, которые образуются в процессе биосинтеза гема. Они обнаруживаются во всех клетках, принимают участие в энергетическом обмене, и экскретируются с мочой в небольших количествах. Повышение в моче уровня порфиринов или порфириногенов свидетельствует о нарушении биосинтеза гема, которое бывает врождённым, например при наследственных ферментопатиях, и приобретенным, например при заболеваниях печени и гемолитической анемии.

Принято различать первичные и вторичные порфинурии. К первым, обычно называемым порфириями, относят группу наследственных заболеваний, для каждого из которых характерен набор экскретируемых с мочой порфиринов и их предшественников. Вторичные порфинурии возникают вследствие нарушения функций печени или кроветворных органов в результате каких-либо первичных заболеваний, например тяжелых гепатитов, интоксикаций свинцом, фосфором, алкоголем, бензолом, четыреххлористым углеродом, при некоторых злокачественных опухолях и аллергических состояниях, циррозах печени и т. п. При вторичных порфинуриях в моче обнаруживаются значительные количества копропорфиринов.

Измеряются семь показателей порфиринов, включая общий порфирин, что позволяет идентифицировать токсический эффект металлов и увидеть, какое лечение необходимо. Также показатели конкретных порфиринов служат функциональными маркерами токсичности ядовитых металлов и органических химических веществ. С помощью порфириновых тестов можно определить уровень биохимического повреждения, вызванного воздействием токсических веществ, ртутное воздействие у пациентов, уровень токсинов у пациентов до и во время хелатирования, токсичность лекарственных препаратов, провести дифференциальную диагностику при отравлениях тяжелыми металлами.

Действие токсинов может вызвать повышенную чувствительность к химическим веществам, поведенческие расстройства и снижение обучаемости, иммунную дисфункцию, синдром хронической усталости, неврологические и психические, эмоциональные расстройства, анемии.

Также целесообразно при определении токсичности исследовать спектр заболеваний, связанных с аутизмом (ASD), и проводить разработку лечебных мероприятий по устранению недостаточной детоксикации и сульфатации, накопления тяжелых металлов. Источниками токсинов могут быть рыба, амальгамы, загрязненный воздух и почва, флуоресцентные лампы, краски, керамика, лечение с помощью методов народной медицины, грунтовые воды, табак. Симптомы интоксикации: усталость, слабость, повышенная химическая чувствительность, раздражительность, беспокойство, потеря памяти, бессонница, онемение и покалывание в руках и ногах, судороги, желудочно-кишечные расстройства, потеря аппетита.

Когда назначается исследование?

  • Диагностика первичных (наследственных) порфирий;
  • при подозрении на интоксикацию свинцом или ртутью, органическими растворителями, лекарственными препаратами (противосудорожные, анальгетики, анестетики, антипсихотики, противовоспалительные и гормональные), а также алкоголем и его суррогатами;
  • болезни гепатобилиарной системы, сопровождающиеся порфиринуриями;
  • гормональные изменения у женщин на фоне менструального цикла с обильными выделениями;
  • анорексия на фоне низкокалорийной, низкоуглеводной диеты;
  • острые атаки в анамнезе, одновременно сочетающие в себе острую боль в животе без симптомов раздражения брюшины с выделением красной или розовой мочи, появлением нарушений сердечного ритма, тошноты и рвоты, повышением артериального давления, повышением температуры тела на фоне различных проявлений полиневропатии.

источник

Комплексное определение порфиринов (7 параметров)

Перечень тестов в составе исследования:

  • гексакарбоксипорфирин;
  • гептакарбоксипорфирин;
  • копропорфирин I;
  • копропорфирин III;
  • пентакарбоксипорфирин;
  • уропорфирин;
  • общий порфирин.

Порфирины мочи
Порфирины мочи — промежуточные соединения в синтезе гема, являющегося частью молекулы гемоглобина, которая осуществляет транспортировку кислорода. При нарушении синтеза гема концентрация порфиринов в моче увеличивается.

Порфирины представляют собой оранжево-красные флюоресцирующие соединения, состоящие из 4 колец пиррола, которые образуются в процессе биосинтеза гема. Они обнаруживаются во всех клетках, принимают участие в энергетическом обмене и экскретируются с мочой в небольших количествах. Повышение в моче уровня порфиринов или порфириногенов свидетельствует о нарушении биосинтеза гема, которое бывает врожденным, например, при наследственных ферментопатиях, и приобретенным, например, при заболеваниях печени и гемолитической анемии.

Определение в моче уровня отдельных порфиринов или порфириногенов позволяет выявить недостаточность отдельных ферментов, участвующих в биосинтезе гема. В некоторых случаях количественному анализу предшествует проведение качественных скрининговых тестов (для этого используют произвольно взятую пробу мочи). В случае положительных результатов исследуют суточную мочу.

Сопоставление уровней порфиринов в моче, плазме крови и кале повышает достоверность диагностики порфирий.

Порфириновые болезни
Порфирии (болезни порфириновые) — наследственные или приобретённые (как результат воздействия химических агентов) дефекты ферментов, участвующих в биосинтезе гема.

Порфирии классифицируют в зависимости от первичной локализации нарушения синтеза порфиринов:

  • эритропоэтическая порфирия обусловлена нарушением синтеза порфиринов эритробластами костного мозга и проявляется главным образом кожной фотосенсибилизацией (вследствие активации УФО повышенного отложения порфиринов в коже);
  • печёночная порфирия обусловлена нарушением синтеза порфиринов в печени и проявляется главным образом острыми неврологическими нарушениями (приступы артериальной гипертензии, колики в животе, психозы и невропатии) без кожной фотосенсибилизации. Во время приступа в плазме и моче повышается концентрация предшественников порфирина — дельта-аминолевулиновой кислоты и порфобилиногена.

Показания:

  • анемия;
  • гепатиты;
  • отравления свинцом.

Подготовка
Накануне сдачи анализа не рекомендуется употреблять в пищу овощи и фрукты, которые могут изменить цвет мочи (свёкла, морковь, клюква и т.п.), принимать диуретики.

Утром опорожнить мочевой пузырь (эта порция мочи выливается в унитаз). Зафиксировать время мочеиспускания, например: «8:00».

Следующие 24 часа собрать всю выделенную мочу в сухую чистую ёмкость вместимостью 2–3 литра.

После завершения сбора мочи, содержимое ёмкости нужно точно измерить. На контейнере нужно указать суточный объём мочи (диурез) в миллилитрах. Например: «Диурез: 1250 мл».

Мочу обязательно тщательно перемешать и сразу же отлить 50–60 мл в стерильный контейнер с крышкой. Всю мочу, собранную за сутки, приносить не надо.

В течение всего времени сбора и до отправки, биоматериал должен храниться в холодильнике при 2–8°С. Материал должен быть доставлен в медицинский офис в день окончания сбора.

Женщинам не рекомендуется сдавать анализ мочи во время менструации.

Интерпретация результатов
В норме экскреция уропорфиринов с мочой составляет от 27 до 52 мкг/ сут (СИ: 32–63 нмоль/сут), а копропорфиринов — от 34 до 230 мкг/сут (СИ: 52–351 нмоль/сут).

Повышение в моче содержания порфиринов и их предшественников — характерный признак порфирий. Кроме того, экскреция порфиринов может возрастать при вирусном гепатите, лимфогранулематозе, поражении ЦНС, циррозе печени, а также отравлениях солями тяжёлых металлов, бензолом и четыреххлористым углеродом.

Факторы, повышающие результат:

  • применение барбитуратов, хлоралгидрата, хлорпропамида, сульфаниламидов, мепробамата, хлордиазепоксида — индуцирует порфирию или порфиринурию; от приема этих препаратов следует по возможности отказаться за 12 дней до проведения исследования;
  • прием пероральных контрацептивов, гризеофульвина (экскреция порфиринов с мочой увеличивается);
  • беременность или менструация (возможно повышение или снижение содержания порфиринов в моче);
  • применение рифампицина повышает содержание уробилиногена в моче;
  • нарушение биосинтеза гема на разных этапах способствует повышению в моче содержания порфиринов и их предшественников и развитию порфирий.

источник

Основная часть синтезируемых порфиринов эритробластов идет на образование Нв, а неиспользованные порфирины и их предшественники выделяются с мочой и калом.

Различные типы порфиринов (уро-копро-прото) образуются в зависимости от того, какими радикалами замещены атомы водорода в порфине. Названы по источнику первоначального выделения.

Порфирины в моче — преимущественно копропорфирины > уропорфирины > порфобилиноген и ДАЛК. Основной источник – печень, меньше эритронормобласты.

Порфирины в кале — копропорфирины и протопорфирины. Часть порфиринов в организме экзогенного происхождения (поступают с пищей в составе мясных продуктов, овощей, фруктов). В печени они превращаются в копропорфирины и выделяются с желчью.

Лабораторная диагностика нарушений порфиринового обмена

Исследование порфиринов в биологическом материале представляет определенные трудности в связи с небольшим содержанием, наличием различных типов и изомеров (различное расположение радикалов), определение которых требует специфических методов. Принцип — соединения, имеющие кольцо порфирина, флуоресцируют и характеризуются интенсивным поглощением на границе видимой и ультрафиолетовой областей спектра. Восстановленные формы порфиринов (порфириногены) бесцветны.

v Определение уровня порфиринов в моче

v Определение содержания порфобилиногена в моче

v Определение ДАЛК в моче

v Определение протопорфирина в эритроцитах

Определение уровня порфиринов в моче

1. Качественные – основаны на способности порфиринов в УФ давать красную флуоресценцию. В норме с мочой выделяется 0-2 мг/л (вне чувствительности метода).

2. Количественные — унифицированный метод Соулсби — основан на спектрофотометрии. Производят экстракцию порфиринов из мочи, а затем измерение оптической плотности на 3 длинах волн – 380, 402, 430нм → пересчет по креатинину.

Норма – 30,5-122 н/моль/г креатинина.

Показания: заболевания печени, Порфирии.

Определение содержания порфобилиногена в моче

Материал: свежевыделенная моча (хранение не более 2 часов при комнатной температуре) или в холодильнике при 4 0 С или -20 0 С.

Используется качественная реакция с реактивом Эрлиха (парадиметилбензальдегид в концетрированной соляной кислоте) +бутанол. Смешивают, встряхивают, отстаивают. Происходит разделения на 2 слоя. Верхний – бутанол. Внизу – водная фаза. У здоровых – окрашен бутанольный слой, у больных – водный.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Лучшие изречения: Студент — человек, постоянно откладывающий неизбежность. 10687 — | 7351 — или читать все.

195.133.146.119 © studopedia.ru Не является автором материалов, которые размещены. Но предоставляет возможность бесплатного использования. Есть нарушение авторского права? Напишите нам | Обратная связь.

Отключите adBlock!
и обновите страницу (F5)

очень нужно

источник

Вид анализа, подлежащий приборному оснащению. Определение содержания копропорфиринов в моче. Критерии для выбора анализатора. Метод измерения и первичный преобразователь. Автоматизация процесса измерения флуоресценции раствора копропорфиринов.

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Размещено на http://www.allbest.ru/

Санкт-Петербургский государственный электротехнический университет

«ЛЭТИ» им. В.И. Ульянова (Ленина)

по дисциплине «Медицинские приборы, аппараты, системы и комплексы»

Тема: Определение содержания копропорфиринов в моче

Студент гр. 2081 Глушенко И.В.

Преподаватель Садыкова Е.В.

1. ВИД АНАЛИЗА, ПОДЛЕЖАЩИЙ ПРИБОРНОМУ ОСНАЩЕНИЮ

3. СТРУКТУРНАЯ СХЕМА РАЗРАБОТАННОЙ СИСТЕМЫ С ПОЗИЦИИ БТСЛА

4. КРИТЕРИИ ДЛЯ ВЫБОРА АНАЛИЗАТОРА

5. МЕТОД ИЗМЕРЕНИЯ И ПЕРВИЧНЫЙ ПРЕОБРАЗОВАТЕЛЬ

6. ЦЕПЬ ВТОРИЧНЫХ ПРЕОБРАЗОВАТЕЛЕЙ

7. РЕГИСТРАЦИЯ, ОТОБРАЖЕНИЕ И ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ИНФОРМАЦИИ

8. ПУТИ АВТОМАТИЗАЦИИ ПРОЦЕССА АНАЛИЗА

10. СПОСОБ ПОВЕРКИ АНАЛИЗАТОРА

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ

Порфирины представляют собой циклические соединения, образованные четырьмя пиррольными кольцами, связанными между собой метенильными мостиками [3].

Встречающиеся в природе порфирины являются соединениями, у которых восемь атомов водорода порфиринового ядра замещены боковыми группами, строение и относительное расположение которых, определяют отличие порфиринов друг от друга рис. 1.1 [5].

Рис. 1.1 Молекулярная структура некоторых порфиринов

Изомеров копропорфиринов типа III больше чем типа I так, как биологически важные порфирины, гемоглобин, миоглобин и т.д., являются изомерами типа III.

Самый большой клинический интерес из всех порфиринов представляют копропорфирины и уропорфирины, так как при порфириях наблюдается значительное увеличение экскреции этих соединений. Экскреция копропорфирина также увеличивается при лейкозах, анемиях, заболеваниях печени, ожогах, инфекционных заболеваниях, выраженном дефиците железа, при отравлениях мышьяком, этанолом, свинцом.

Копропорфирины растворимы в смеси эфира и ледяной уксусной кислоты. Уропорфирины в этой смеси нерастворимы, но частично растворимы в этилацетате. Полученные растворы при облучении УФ дают характерное красное флуоресцентное свечение. Эти свойства копропорфиринов можно использовать для количественного определения содержания их в моче.

Максимум поглощения всех порфиринов находится около 400нм. Спектр флуоресценции сильно зависит от величины pH раствора. При pH?6 один из максимумов интенсивности флуоресценции копропорфирина III приходится на 690нм.

1. ВИД АНАЛИЗА, ПОДЛЕЖАЩИЙ ПРИБОРНОМУ ОСНАЩЕНИЮ

моча анализатор флуоресценция копропорфирин

Определение содержания копропорфиринов в моче.

Для измерения флуоресценции раствора копропорфиринов.

Область применения анализатора.

Применяется для определения концентрации компонентов биологических жидкостей и клеток, основанный на измерении интенсивности флуоресцентного излучения при оптическом воздействии на жидкую биологическую пробу с последующей обработкой результатов [1].

Биологическая. Моча человека.

Материалы и реактивы необходимые для определения содержания копропорфиринов в моче представлены в таблице 2.1.

Таблица 2.1 Перечень используемых материалов и реактивов при проведении анализа

источник

Порфирины — это природные химические вещества, которые содержатся в вашем организме. Они являются важной частью многих функций вашего организма.

Обычно ваше тело образует небольшое количество порфиринов, когда он производит гем. Хеме — важный компонент гемоглобина, белка в эритроцитах, который переносит кислород. Производство Heme включает в себя многоступенчатый процесс, и каждый шаг контролирует другой фермент. Если один из этих ферментов неисправен, это может привести к образованию порфиринов в вашем теле и потенциально достигать токсичных уровней. Это вызывает клиническую болезнь порфирии.

Порфирия редка. Большинство типов порфирии передаются человеку через их гены. Если ваш врач подозревает, что у вас есть тип порфирии, они захотят сделать некоторые тесты, чтобы установить уровень порфиринов в вашем теле. Один из способов проверить это — проверить мочу.

Один тип исследования мочи порфирина — это случайный образец с одной мочой, или они могут попросить вас пройти тест на мочу в течение 24-часового периода. Производство и устранение порфиринов может варьироваться в течение дня и между атаками, поэтому случайный образец может пропустить повышенные уровни порфирина. 24-часовой анализ мочи является безболезненным и требует простой сбор мочи, выполненной в три этапа.

Порфирии могут быть сгруппированы в два основных типа: неврологические порфирии и кожные порфирии.

Неврологические порфирии влияют на вашу нервную систему. Они также известны как острые порфирии, потому что они внезапно появляются и вызывают серьезные симптомы на короткое время.

Кожные порфирии приводят к чувствительности к солнцу, что приводит к проблемам кожи, таким как волдыри или зуд.

Врачи могут использовать контроль мочи порфиринов как часть их диагноза следующих типов неврологических порфирий:

  • острая прерывистая порфирия
  • variegate porphyria
  • наследственная копопорфирия
  • Порфирия дефицита дегидратазы ALA

Они могут также используйте его, если они подозревают, что у вас есть порфирия cutanea tarda, тип кожной порфирии.

Родители младенцев, принимающих мочу, могут захотеть приобрести дополнительные сумки для сбора, если активный ребенок вытеснит мешок.

Если вы взрослый, принимающий тест, ваш врач может дать вам указание прекратить принимать наркотики, которые могут помешать точности анализа мочи порфиринов. Обязательно следуйте указаниям и инструкциям вашего врача при остановке лекарств.

Следующие препараты могут мешать точному измерению порфиринов в моче:

  • алкоголь
  • аминосалициловая кислота, аспирин (Bayer Advanced Aspirin, Bufferin)
  • барбитураты
  • таблетки для борьбы с рождаемостью
  • chloral гидрат
  • хлорпропамид
  • griseofulvin (Gris-PEG)
  • морфин
  • phenazopyridine (Pyridium, Uristat)
  • procaine
  • сульфонамиды

РекламаРеклама

Вот как работает процедура сбора для 24-часового исследования мочи:

  1. В первый день вы мочитесь в туалет при повышении утром.Промойте этот первый образец.
  2. В течение оставшейся части дня вы собираете всю свою мочу в специальном контейнере и храните ее в прохладном месте.
  3. Во второй день вы мочитесь в специальный контейнер, поднимаясь утром.
  4. После этого вы вернете контейнер в лабораторию как можно скорее.

Реклама

Если вы являетесь родителем ребенка, принимающего тест на мочу, вам необходимо выполнить следующую процедуру:

  1. В день один, вымойте область вокруг уретры вашего ребенка, затем приложите сумку для сбора в эту область. Для мальчика вы кладете сумку поверх пениса. Для девушки поместите сумку поверх ее половых губ. Затем вы можете положить подгузник вашего ребенка поверх сумки.
  2. В течение оставшейся части 24-часового периода собирайте образцы в соответствии с тем же графиком, что и взрослые.
  3. В течение дня проверяйте сумку. Измените сумку каждый раз, когда ваш ребенок мочится.
  4. Каждый раз, когда ваш ребенок мочится, вылейте образец в контейнер для сбора. Храните этот контейнер в прохладном месте.
  5. На второй день собирайте окончательный образец, когда ваш ребенок сначала просыпается.
  6. Верните контейнер в лабораторию как можно скорее.

РекламаРеклама

Нормальный диапазон для 24-часового теста мочи порфиринов составляет около 50-300 миллиграммов, хотя результаты варьируются в разных лабораториях.

Аномальные результаты теста могут указывать на рак печени, гепатит, отравление свинцом или одну из различных форм порфирии. Ваш врач сможет интерпретировать результаты для диагностики и рекомендовать лучший курс лечения.

источник

Порфирины (от греч означ пурпурный, багряный) – циклические органич соед-я, в основе ктр лежит кольцо порфирина, сост-ее из 4 пирролов, соед-ых метиновыми мостиками (=СН-). Каждый из порфинов представляет собой порфин, у ктр водородные атомы, связанные с С1-С8-углеродами колец пиррола замещены боковыми цепями: метиловыми(СН3), этиловыми, виниловыми (СН=СН2),остатками уксусной(-СН2-СООН),пропионовой(-СН2_СН2-СООН) кислот в зависимости от природы боковых цепей и их расположения в кольце порфина образуются разные изомеры порфирина (уро-,копро- и др). амфотерные соед-ия, облад-ие как кислотными так и основными св-вами. Не раствор-ся в воде, но хорошо раствор-ся в хлороформе, эфире и других органич соед-ях.связаны с клеточным дыханием. В свободных формах не встреч-ся. Гемопротеины:П.+белок+железо – гемоглобин, ткан дыхат ферменты: каталаза, пероксидаза, цитохромы. Выделяются с мочой и калом. Источником П. мочи у Здор людей явл-ся П. печени и (частично) эритронормобластовП. мочи этокопропорфирин, в небольшом количествесод-ся уропорфирины, а также предшественники порфиринов: порфобилиноген и ДАЛК. В кале – копропорфирины и протопорфирины. Часть экзогенного происхождения – они поступают с пищей.

Читайте также:  Географический язык какие анализы сдать

Нарушения в обмене П. возникают при их повышенном синтезе, нарушении выведения из организма, а также при недостаточной активности ферментов синтеза гемма.

В начальной и на поздней стадиях этот процесс совершенствуется только в митохондриях, с участием многих ферментов и ряд процессов активен только в ядросодержащих эритроцитах. В норме основн кол-во синт-ся в костн мозге (образ гемоглобина) и печени (для образов железосодержащих ферментов митохондриальной цепи – цитохромов, каталазы, пероксидазы и др).

Порфирины — это амфотерные соединения, обладающие как кислотными, так и основными свойствами. Они не растворяются в воде, но хорошо растворяются в хлороформе, эфире и других органических соединениях, эти вещества отличаются устойчивостью к воздействию высоких температур, разлагаются при 360С. Порфирины способны избирательно поглощать свет при 400 нм, обладают способностью флюоресцировать ярко-зеленым свечением, спектр флюоресценции зависит от рН среды, это свойство порфиринов используется при их дифференцировке. В организме человека порфирины связаны с основным жизненным процессом — клеточным дыханием. Свободные порфирины почти не встречаются, соединения порфиринов представлены комплексами с белками и металлами (кобальт, магний, железо). Комплексы порфиринов с железом и белками называются гемопорфиринами (гемоглобин крови, тканевые дыхательные ферменты: каталаза, пероксидаза, цитохромы), функция которых связана с обменом кислорода.

Порфирины содержатся во всех клетках организма человека, где осуществляется клеточное дыхание, в том числе в клетках ЦНС. В наибольшем объеме их образование происходит в эритронормобластах костного мозга и гепатоцитах, где они используются для биосинтеза гемма. Для образования 6 г гемоглобина организм синтезирует 500 мг протопорфиринов. Основная часть синтезируемых порфиринов эритробластов идет на образование гемоглобина, а неиспользованные порфирины и их предшественники выделяются с мочой и калодм. Порфирины мочи и кала образуются из разных источников. Источником порфиринов мочи у здоровых людей являются порфирины печени и (частично) эритронормобластов. Основная часть порфиринов мочи представлена копропорфиринами, в небольшом количестве содержатся уропорфирины, а также предшественники порфиринов: порфобилиноген и дельта-аминолевулиновая кислота. В кале содержатся копропорфирины и выделяются с желчью. Небольшое количество порфиринов, неиспользованных при синтезе гемма, обнаруживается в эр здоровых людей, в их числе: протопорфирины, копропорфириногены, уропорфириногены. Их количество служит показателем синтеза порфиринов и степени их использования для построения гемма. Эти процессы тесно связаны с количеством железа в организме и активностью соответсвующих ферментов.

Нарушения в обмене порфиринов возникают при их повышенном синтезе, нарушении выведения из организма, а также при недостаточной активности ферментов синтеза гемма. Заболевания, связанные с нарушением обмена порфиринов, подразделяются на две группы: порфирии и порфиринурии.

Первичные порфирии делятся на эритропоэтические (эритропоэтическая уропорфирия, или болезнь Гюнтера, эритропоэтическая копропорфирия) и печеночные (острая перемежающаяся порфирия, наследственная печеночная копропорфирия, урокопропорфирия, или поздняя кожная порфирия)

Болезнь Гюнтера обусловлена наследственным нарушением синтеза порфиринов в эр. Чаще выявляется у детей первых лет жизни и наследуется по рецессивному типу. Течение зб хроническое, с обострениями в весеннее-летний период, клинич картина характеризуется резко повышенной чувствительностью кожных покровов к солнечному свету, при этом появляется зуд, пузыри с нагноением, язвочки, а затем рубцы. В дальнейшем развивается остеопороз, искривляются фаланги пальцев, зубы приобретают коричневую окраску и при облучении УФ дают ярко-красное свечение.Выявляется анемия гемолитического типа, в крови увеличено количество ретикулоцитов, отмечается гипербилирубинемия. В моче, которая приобретает ярко-красную окраску, увеличивается количество уробилина и в большом количестве уропорфирина-1. Содержание копропорфирина-1 и уропорфирина-1 в эр возрастает в 100-200 раз по сравнению со здоровыми.

Отсутствие фермента гемсинтетазы. В результате содержание протопорфирина-9 увелич в 10-100 раз. Отмечается выраженная чувствительность кожи к свету, даже через оконное стекло. При инсоляции – отеки, гиперемия, образ пузыря, изм функция печени, вследствии развития порфиринового цирроза печени.

Острая перемежающаяся порфирия наследуется по доминантному типу. Отсутствие фермента ….-синтетазы, в результате повышается содержание в органах и тканях крови порфобилиногена и ДАЛК. Течение хронич, с периодами обострения и ремиссии. Зб чаще проявляется в возрасте 20-30 лет, провоцирующими факторами является прием сульфаниламидов, анальгина, барбитуратов, валокордина, беременность и др. Характерным клиническим симптомом явл острые боли в животе, протекающие под маской острого живота. Могут отмечаться псих расстройства, судорожный синдром и даже слепота. Лабораторно в моче увеличено содержание предшественников порфиринов: гамма-аминолвулиновой кислоты, порфобилиногена. Эти соединения бесцветны, поэтому моча больных нормально окрашена. Накопление гамма-аминолевуленовой кислоты в нервных клетках вызывает токсических эффект. Лечение – глюкоза.

Печеночная урокопропорфирия – у женщин старше 40 лет. Характерна большая чувствительность кожи к механическим травмам, воздействию света. Наблюдается истощение кожных покровов, гипертрихоз, могут быть кисты в складках кожи пальцев рук.

Острая перемежающаяся порфирия – насл заб-ие перед по аут-дом типу. Понижение активности УП-1-синтетазы и повышен акт-ти синтетезы ДАЛК, вследствии чего увелич-ся образование и выделение с мочой порфобилиногена и ДАЛК. Эритр не изменены. Моча – ПБГ и ДАЛК значит увелич, не окрашена, розовато-красное окрашивание появляется при значительном увеличении УПГ 3. Кал – КПГ 3, ПП 9 незначительно увеличены. Лечение – глюкоза

Урокопропорфирия (поздняя кожная порфирия)– появл после 40 лет,повышен чувс-ть к легкой механич травме и солн облучению, пигментация кожи, нарушен функции печени, проявляется при опухолях печени. Эритроциты – без изменений. Моча – ДАЛК и ПБГ в пределах нормы, резко увел кол-во УПГ3, незначительно КПГ3, красного цвета. Лечение – делагил.

Порфиринурии – повышен выведен порфиринов из организма. Набл при заб-иях крови (анемия гемолитическая (эритроциты – ПП 9, КПГ3 значит увел, моча – ДАЛК и КПГ3 значит увел, кал – ПП9 увеличен,КПГ3 значит увеличен), лейкоз), острый гепатит, энтерит, аллерг анафил лихор состояниях, авитаминозах (эрит – ПП 9 увеличен, моча – ДАЛК увел, КПГ 3 знач увел), отравлении свинцом, оловом, ртутью, хлором, бензолом(эритр – ПП9 и КПГ3 значит увелич, моча – ДАЛК и КПГ 3 значит увеличены, кал – ПП9 увел, КПГ3 значит увеличен).

Вторичные нарушения обмена порфиринов.

Порфиринурии встрчаются как симптом при многих зб: гипохромные анемии, обусловленные длительными инф (туберкулез, остеомиелит, пиодермии), гемолитические анемии, зб печени (хр гепатиты, циррозы, опухоли), лечении цитостатиками. Наиболее значительные изменения в обмене порфиринов выявляются при сидероахристических анемиях, при которых количество железа в эритробластах достаточное, однако оно не используется для синтеза гемма гемоглобина ввиду отсутствия или снижения активности фермента гемсинтетезы. Сидероахристические анемии могут быть как наследственными, так и приобретенными, связанными с отравлением свинцом или дефицитом витамина В6, который катализирует первые этапы синтеза гемма и освобождение железа из митохондрий. При таких формах порфиринурий содержание протопорфиринов в эритроцитах понижено, а копро- и уропорфиринов – повышено.

Нарушения порфиринового обмена при токсических порфириях наблюдается при воздействии таких ядов, как свинец, ртуть, марганец, хром, фтор, висмут, селен, бензол, хлороформ, амидо- и нитросоединения, окись углерода, бензин, фосфор и др. Наиболее изучены нарушения обмена порфиринов при интоксикации свинцом. Отравление свинцом встречаются на производстве при изготовлении красок, аккумуляторов, в типографиях, в рентгенкабинетах, при использовании глиняной посуды, покрытой свинцовой глазурью. Свинец – тяжелый метал, способный блокировать сульфгидрильный группы многих ферментов синтеза гемма и тем самым нарушать его образование. При этом в эр накапливаются свободные порфирины: копро- и протопорфирины. В моче больных отмечается большое количество копропорфирина 111, значительно увеличивается содержание аминолевуленовой кислоты.

Полуколичественный метод определения копропорфиринов по Резнику и Федорову.

В пробирки вносят 5 мл мочи + неск капель ледяной уксусной кисоты (до кислой реакции по лакмусовой бумажке) и 5 мл диэтилового (медицинского) эфира, смесь встряхивают в течении 3-5 мин. Оставляют для отстаивания и разделения слоев. Отбирают верхрний слой в др пробирку и помещают ее в поток УФ света, реакцию оценивают по характеру свечения (флюоресценции): норм содержание копропорфиринов – голубое свечение, слабое повышение –слабое розовое свечение, повышенное содержание – слабое красное свечение, значительное повышение – отчетливое красное.

Организация стока поверхностных вод: Наибольшее количество влаги на земном шаре испаряется с поверхности морей и океанов (88‰).

источник

Приблизительно 10 мл свежей мочи смешивают с 2 мл растворителя (п. 2), экстрагирующего порфирины, и оставляют для разделения фаз. Красная флуоресценция верхнего слоя в ультрафиолетовом свете указывает на наличие порфиринов.

Фекалии. Кусочек кала размером с горошину смешивают с 2 мл растворителя. Красная флуоресценция в ультрафиолетовом свете указывает на наличие либо порфиринов, либо хлорофилла (имеющего сходную структуру и поступающего с пищей).

Их можно различить, добавляя 1,5 М НС1, которая экстрагирует порфирины, но не хлорофилл.

Интерпретация

Важны следующие моменты:

  1. Существенное значение имеет адекватность тестируемого материала (моча или фекалии) с учетом типа предполагаемой порфирии.
  2. Чувствительность тестов, применяемых для скрининга, слишком низка для диагностики острой перемежающейся порфирии в латентной фазе. При правильном выполнении отрицательный результат тестов на порфирины фекалий почти однозначно исключает диагноз porphyria variegata.
  3. До наступления половой зрелости тесты дают отрицательные результаты даже у детей, которые будут страдать порфирией.
  4. Положительные результаты тестирования должны подтверждаться количественным анализом и путем идентификации порфиринов. Помимо порфирии, существуют другие причины повышения экскреции порфиринов.

«Клиническая химия в диагностике и лечении»,
Дж.Ф.Зилва, П.Р.Пэннелл

С накоплением порфиринов в эритроцитах связаны 2 редких наследственных заболевания, для которых приступы острой порфирии не характерны, а экскреция АЛ и ПБГ в пределах нормы. Врожденная эритропоэтическая порфирия в отличие от всех других порфирии, рассмотренных выше, наследуется как рецессивный признак. Обычно с самого детства и далее на протяжении жизни больного концентрации уропорфирина в эритроцитах и…

Порфирия не является единственной причиной нарушенного метаболизма порфиринов. Положительные результаты используемых при скрининге тестов должны быть подтверждены количественным анализом с идентификацией экскретируемых порфиринов. Следует помнить о трех причинах. Отравление свинцом ингибирует несколько ферментов, участвующих в синтезе гема, и вызывает в конечном счете анемию. Моча содержит повышенные концентрации АЛ (ранний и чувст-вительный тест) и копропорфирина. Некоторые…

Порфирины — побочные продукты синтеза гема; АЛ ж ПБГ — предшественники. Порфириями называют заболевания, связанные обычно с врожденными нарушениями метаболизма порфиринов. Для врожденных печеночных порфирии характерны острые приступы с абдоминальными и пейрологическими симптомами. Потенциально такие приступы опасны для жизни. Многие лекарственные средства могут провоцировать эти приступы. Диагностика порфирии в острой фазе основана на обнаружении АЛ…

Обычно тесты для скрининга на порфирии выполняют в лаборатории.Необходимым условием является наличие: источника ближнего ультрафиолетового света (лампа Вуда); растворителя для экстракции (смесь равных частей этилового эфира, ледяной уксусной кислоты и амилового спирта); реагента Эрлиха (2% п-диметиламинобензальдегид в 5 М НСL); п-бутанола. Тест на порфобилииоген Смешивают равные части свежей мочи и реагента Эрлиха. Если в пробе…

Гем синтезируется в большинстве тканей нашего организма. В костном мозге гем включается в гемоглобин. В других клетках гем используется при синтезе цитохромов и родственных им соединений. Цитохромы — это компоненты цепи переноса электронов, которая необходима для адекватного использования энергии, генерируемой в процессах обмена веществ. Поэтому нарушение синтеза цитохромов может иметь важные последствия. Количественно печень —…

источник

Порфирины мочи — порфирины промежуточные соединения в синтезе гема, являющегося частью молекулы гемоглобина, осуществляющей перенос кислорода. При нарушении синтеза гема концентрация порфиринов в моче увеличивается. Основные показания к назначении.: анемия, гепатиты, отравления свинцом.

Анализ является количественным и позволяет определить в моче уровень порфиринов, в частности уро- и копропорфиринов, и их предшественников порфириногенов, таких, как порфобилиноген и дельта-аминолевулиновая кислота. Порфирины представляют собой оранжево-красные флюоресцирующие соединения, состоящие из 4 колец пиррола, которые образуются в процессе биосинтеза гема. Они обнаруживаются во всех клетках, принимают участие в энергетическом обмене и экскретируются с мочой в небольших количествах. Повышение в моче уровня порфиринов или порфириногенов свидетельствует о нарушении биосинтеза гема, которое бывает врожденным, например, при наследственных ферментопатиях, и приобретенным, например, при заболеваниях печени и гемолитической анемии.

Определение в моче уровня отдельных порфиринов или порфириногенов позволяет выявить недостаточность отдельных ферментов, участвующих в биосинтезе гема. В некоторых случаях количественному анализу предшествует проведение качественных скрининговых тестов (для этого используют произвольно взятую пробу мочи). При получении положительных результатов исследуют суточную мочу.

Сопоставление уровней порфиринов в моче, плазме крови и кале повышает достоверность диагностики порфирий.

Болезни порфириновые — наследственные или приобретённые (как результат воздействия химических агентов) дефекты ферментов, участвующих в биосинтезе гема. Порфирии классифицируют в зависимости от первичной локализации нарушения синтеза порфиринов:

  • Эритропоэтическая порфирия обусловлена нарушением синтеза порфиринов эритробластами костного мозга и проявляется главным образом кожной фотосенсибилизацией (вследствие активации УФО повышенного отложения порфиринов в коже).
  • Печёночная порфирия обусловлена нарушением синтеза порфиринов в печени и проявляется главным образом острыми неврологическими нарушениями (приступы артериальной гипертензии, колики в животе, психозы и невропатии) без кожной фотосенсибилизации. Во время приступа в плазме и моче повышается концентрация предшественников порфирина — дельта-аминолевулиновой кислоты и порфобилиногена.
  • Смешанные варианты.

Комплексное определение порфиринов (7 параметров)

Перечень тестов в составе исследования:

  • гексакарбоксипорфирин;
  • гептакарбоксипорфирин;
  • копропорфирин I;
  • копропорфирин III;
  • пентакарбоксипорфирин;
  • уропорфирин;
  • общий порфирин.

Порфирины мочи
Порфирины мочи — промежуточные соединения в синтезе гема, являющегося частью молекулы гемоглобина, которая осуществляет транспортировку кислорода. При нарушении синтеза гема концентрация порфиринов в моче увеличивается.

Порфирины представляют собой оранжево-красные флюоресцирующие соединения, состоящие из 4 колец пиррола, которые образуются в процессе биосинтеза гема. Они обнаруживаются во всех клетках, принимают участие в энергетическом обмене и экскретируются с мочой в небольших количествах. Повышение в моче уровня порфиринов или порфириногенов свидетельствует о нарушении биосинтеза гема, которое бывает врожденным, например, при наследственных ферментопатиях, и приобретенным, например, при заболеваниях печени и гемолитической анемии.

Определение в моче уровня отдельных порфиринов или порфириногенов позволяет выявить недостаточность отдельных ферментов, участвующих в биосинтезе гема. В некоторых случаях количественному анализу предшествует проведение качественных скрининговых тестов (для этого используют произвольно взятую пробу мочи). В случае положительных результатов исследуют суточную мочу.

Сопоставление уровней порфиринов в моче, плазме крови и кале повышает достоверность диагностики порфирий.

Порфириновые болезни
Порфирии (болезни порфириновые) — наследственные или приобретённые (как результат воздействия химических агентов) дефекты ферментов, участвующих в биосинтезе гема.

Порфирии классифицируют в зависимости от первичной локализации нарушения синтеза порфиринов:

  • эритропоэтическая порфирия обусловлена нарушением синтеза порфиринов эритробластами костного мозга и проявляется главным образом кожной фотосенсибилизацией (вследствие активации УФО повышенного отложения порфиринов в коже);
  • печёночная порфирия обусловлена нарушением синтеза порфиринов в печени и проявляется главным образом острыми неврологическими нарушениями (приступы артериальной гипертензии, колики в животе, психозы и невропатии) без кожной фотосенсибилизации. Во время приступа в плазме и моче повышается концентрация предшественников порфирина — дельта-аминолевулиновой кислоты и порфобилиногена.

Подготовка
Накануне сдачи анализа не рекомендуется употреблять в пищу овощи и фрукты, которые могут изменить цвет мочи (свёкла, морковь, клюква и т.п.), принимать диуретики.

Утром опорожнить мочевой пузырь (эта порция мочи выливается в унитаз). Зафиксировать время мочеиспускания, например: «8:00».

Следующие 24 часа собрать всю выделенную мочу в сухую чистую ёмкость вместимостью 2–3 литра.

После завершения сбора мочи, содержимое ёмкости нужно точно измерить. На контейнере нужно указать суточный объём мочи (диурез) в миллилитрах. Например: «Диурез: 1250 мл».

Мочу обязательно тщательно перемешать и сразу же отлить 50–60 мл в стерильный контейнер с крышкой. Всю мочу, собранную за сутки, приносить не надо.

В течение всего времени сбора и до отправки, биоматериал должен храниться в холодильнике при 2–8°С. Материал должен быть доставлен в медицинский офис в день окончания сбора.

Женщинам не рекомендуется сдавать анализ мочи во время менструации.

Интерпретация результатов
В норме экскреция уропорфиринов с мочой составляет от 27 до 52 мкг/ сут (СИ: 32–63 нмоль/сут), а копропорфиринов — от 34 до 230 мкг/сут (СИ: 52–351 нмоль/сут).

Повышение в моче содержания порфиринов и их предшественников — характерный признак порфирий. Кроме того, экскреция порфиринов может возрастать при вирусном гепатите, лимфогранулематозе, поражении ЦНС, циррозе печени, а также отравлениях солями тяжёлых металлов, бензолом и четыреххлористым углеродом.

Факторы, повышающие результат:

  • применение барбитуратов, хлоралгидрата, хлорпропамида, сульфаниламидов, мепробамата, хлордиазепоксида — индуцирует порфирию или порфиринурию; от приема этих препаратов следует по возможности отказаться за 12 дней до проведения исследования;
  • прием пероральных контрацептивов, гризеофульвина (экскреция порфиринов с мочой увеличивается);
  • беременность или менструация (возможно повышение или снижение содержания порфиринов в моче);
  • применение рифампицина повышает содержание уробилиногена в моче;
  • нарушение биосинтеза гема на разных этапах способствует повышению в моче содержания порфиринов и их предшественников и развитию порфирий.

Порфирины (от греч. porphiresпурпурный, багряный) – сложные органические соединения, промежуточные продукты синтеза гема. Порфии — наследственные и приобретенные нарушения синтеза гема, сопровождающиеся повышением содержания порфиринов, а также продуктов их окисления в тканях и крови и появлением их в моче.

Порфирии могут возникать вследствие генетического дефекта (первичные) или приобретенного заболевания (вторичные). Тяжесть заболевания может варьировать от бессимптомного до тяжелого течения. Вторичные нарушения обмена порфиринов развиваются как следствие ряда заболеваний, интоксикаций и связаны с поражением печени, нарушение обмена порфиринов при этом являются чаще всего результатом ингибирования фермента (лекарственным препаратом или токсином), но не его врожденной недостаточности. Наиболее частыми причинами этого являются отравления свинцом, гиповитаминозы (особенно РР, пантотеновой и фолиевой кислот), циррозы печени.

Копропорфирины – наиболее часто экскретируемый порфирин при вторичных нарушениях обмена порфиринов. Их образование может быть инициировано гексахлорбензолом, этиловым спиртом, морфином, хлоралгидратом, эфиром, закисью азота, тяжелыми металлами.

Утром после тщательного туалета половых органов собрать в контейнер первую порцию мочи, доставить на исследование лабораторию. Контейнер для мочи должен быть из темного стекла или пластика, не допускается воздействие света.

Читайте также:  Какие анализы сдавать для уролога

Биоматериал: разовая порция мочи.

  • Лабораторная диагностика порфирии;
  • Профилактическое обследований лиц, связанных с производственными процессами, на которых могут наблюдаться свинцовые интоксикации (добыча свинцовых руд, выплавка свинца, аккумуляторное производство, кабельное производство, полиграфическое производство, малярные работы с применением свинцовых красок, применение свинцовых матриц в авиационной промышленности).

Интерпретация результатов содержит аналитическую информацию для лечащего врача. Лабораторные данные входят в комплекс всестороннего обследования пациента, проводимого врачом и не могут быть использованы для самодиагностики и самолечения.

Результаты исследования представляются в качественном выражении:при наличии копропорфиринов в пробе выдается ответ «обнаружено»; при отсутствии в пробе копропорфиринов выдается ответ «не обнаружено».

источник

Порфирины — циклические соединения, образованные четырьмя пиррольными кольцами, связанными между собой метенильными мостиками, синтезируются из глицина и сукцинил-CoA через образование δ-аминолевулиновой кислоты и порфобилиногена.

Порфирины способны образовывать комплексы с ионами металлов, связывающихся с атомами азота пиррольных колец. Примерами служат железопорфирины, в частности гем, входящий в состав гемоглобина, и магнийсодержащий порфирин — хлорофилл — пигмент растений, участвующий в фотосинтезе.

Превращение порфобилиногена в порфирин может происходить просто при нагревании в кислой среде (например, в кислой моче), в тканях это превращение катализируется специфическими ферментами. Все порфириногены бесцветны, тогда как все порфирины окрашены.

Копропорфирины I и III растворимы в смесях эфира и ледяной уксусной кислоты, из которых их можно экстрагировать соляной кислотой. Уропорфирины, напротив, в этих смесях нерастворимы, но частично растворимы в этилацетате, и их также можно экстрагировать соляной кислотой. Полученные солянокислые растворы при облучении ультрафиолетовым светом дают красное флюоресцентное окрашивание. Характерные полосы поглощения могут быть зарегистрированы с помощью спектрофотометра.

Последовательно образующиеся в процессе синтеза гема из δ-аминолевулиновой кислоты интермедиаты становятся все более гидрофобными. Это повышение гидрофобности отражается на распределении интермедиатов синтеза гема в составе мочи и кала. Более полярный уропорфири-ноген экскретируется преимущественно с мочой, а более гидрофобные копропорфириноген и протопорфириноген оказываются преимущественно в желчи и удаляются с калом.

Принцип метода . При реакции порфобилиногена с пара-диметиламинобензальдегидом образуется соединение красного цвета. Повышение специфичности реакции достигается добавлением ацетата натрия. Уробилиноген, производные индола, скатола и другие соединения, дающие аналогичную реакцию с пара-диметиламинобензальдегидом, удаляют экстракцией бутанолом и хлороформом, в которых порфобилиноген нерастворим.

Реактивы . 1) пара-диметиламинобензальдегид; 2) концентрированная соляная кислота; 3) реактив Эрлиха: 0,7 г пара-диметиламинобензальдегида растворяют в 150 мл концентрированной соляной кислоты, приливают 100 мл дистиллированной воды и смешивают. Раствор должен быть бесцветным или слегка желтым. Хранят в посуде из темного стекла, стабилен; 4) насыщенный раствор ацетата натрия: 375 г CH3COONa × ЗН2O или 226 г CH3COONa растворяют в 250 мл теплой дистиллированной воды. Раствор должен быть бесцветным и прозрачным, хранят его при температуре 20 °С; 5) хлороформ; 6) бутиловый спирт; 7) индикаторная бумага для измерения pH в интервале 4,0–5,0.

Постановка пробы . Исследуют мочу в первые 2–3 ч после мочеиспускания. В пробирке смешивают по 2,5 мл мочи и реактива Эрлиха, добавляют 5 мл насыщенного раствора CH3COONa, перемешивают. Измеряют pH, который должен быть в пределах 4,0–5,0. При pH меньше 4,0 пробу подщелачивают раствором ацетата натрия.

Оценка результатов . При отсутствии развития окраски результат считается отрицательным. Если проба окрашивается в розовый или красный цвет, в пробирку добавляют 5 мл хлороформа и встряхивают. Окрашивание хлороформа при бесцветном или слегка желтоватом верхнем слое также позволяет считать пробу отрицательной. Если окрашенным остается слой над хлороформом, то 6–8 мл из него переносят в другую пробирку, добавляют бутанол в соотношении 1 : 2 и встряхивают. При плохом разделении слоев жидкостей пробу центрифугируют. Окрашивание бутанола свидетельствует о низком содержании порфобилиногена — проба также отрицательна. Если окрашенным остается исследуемый слой, то в моче концентрация порфобилиногена выше нормальной. В норме концентрация порфобилиногена в моче — до 2 мг/л. Данным методом порфобилиноген определяется при концентрации более 6 мг/л.

Примечание : при хранении мочи более 3 ч при комнатной температуре положительная реакция может стать отрицательной, что связано с превращением порфобилиногена в порфирин в кислой среде и образованием ингибиторов реакций. При невозможности исследования мочи в первые 2 ч хранить ее необходимо в холодильнике при 4‘°С, доведя pH до 6,0–7,0. В этих условиях порфобилиноген стабилен в течение длительного времени.

Принято различать первичные и вторичные порфинурии. К первым, обычно называемым порфириями, относят группу наследственных заболеваний, для каждого из которых характерен набор экскретируемых с мочой порфиринов и их предшественников. Вторичные порфинурии возникают вследствие нарушения функций печени или кроветворных органов в результате каких-либо первичных заболеваний, например тяжелых гепатитов, интоксикаций свинцом, фосфором, алкоголем, бензолом, четыреххлористым углеродом, некоторых злокачественных опухолях и аллергических состояниях, циррозах печени и т. п. При вторичных порфинуриях в моче обнаруживаются значительные количества копропорфиринов.

У здоровых людей с мочой за сутки в норме выводится в среднем около 67 мкг копропорфиринов; на изомер I типа приходится в среднем 14 мкг/сут, на изомер III типа — 53 мкг/сут. Отклонения в этом соотношении могут служить диагностическим признаком при некоторых заболеваниях печени.

источник

Работа 76. Количественное определение содержания копропорфирина в моче по методу Соулсби в модификации Римингтона

Реактивы. Уксусная кислота ледяная; эфир медицинский; соляная кислота 1,4 моль/л; йод, спиртовой раствор 0,039 моль/л; раствор йода в соляной кислоте (200 объемов соляной кислоты и 1 объем спиртового раствора йода).

Оборудование. Штатив с пробирками; пипетки вместимостью 0,2; 2,0 и 5,0; делительные воронки, спектрофотометр.

Материал. Свежевыделенная моча (срок хранения не более 3-х часов).

Метод основан на способности йода переводить копропорфириноген в копропорфирин, который определяется спектрофотометрически по разнице оптической плотности при трех длинах волн.

Ход определения. В делительную воронку вносят 2 мл мочи, 0,2 мл ледяной уксусной кислоты, 5 мл эфира и встряхивают в течение 1 минуты. После разделения фаз нижний водный слой отбрасывают. К эфирному слою, содержащему копропорфирин и копропорфириноген, добавляют 5 мл раствора йода в соляной кислоте для перевода копропорфириногена в копропорфирин, встряхивают в течение 1 минуты. После разделения фаз нижний слой переносят в пробирку, термостатируют при 37˚С, в течение 5 минут. Затем содержимое пробирки встряхивают и измеряют оптическую плотность раствора в кюветах с толщиной слоя 1 см при трех длинах волн: 380, 402 и 430 нм против 1,41 моль/л раствора соляной кислоты.

Расчет проводят по формуле:

[2·E402 – (E430 + E380)] ∙ 2,093·1,52 нмоль/г креатинина

где Е402, Е430, Е380 – оптическая плотность раствора при соответствующих длинах волн;

А – содержание креатинина в пробе (г);

1,52 – коэффициент пересчета микрограмм КП в наномоль;

2,093 – коэффициент для расчета содержания КП, предложенный Римингтоном.

Оформление работы. По полученным результатам сделать расчет содержания копропорфирина и сделать вывод о причине возможных изменений.

Практическое значение работы. В норме содержание копропорфирина в моче 30,5-122 нмоль/г креатинина (20-80 мкг/г креатинина). Повышение содержания копропорфириа в моче наблюдается при наследственной копропорфирии, острой перемежающейся порфирии, эритропоэтической уропорфирии, а также при циррозе, гепатите, свинцовой интоксикации.

К регуляторам метаболизма можно отнести витамины, гормоны, гормоноподобные вещества и медиаторы. Свою функцию они осуществляют посредством модификации активности ферментов или влияния на их количество в клетках. Поэтому при исследовании данной группы биологических соединений применяют как методы качественного и количественного анализа этих веществ и продуктов их обмена, так и оценку состояния системы регуляторов организма по их действию на соответствующие звенья метаболизма.

Реактивы. Хлороформ; серная кислота, конц.; сульфаниловая кислота, 1%-ный раствор; нитрит натрия, 5%-ный раствор, свежеприготовленный; карбонат натрия, 10%-ный раствор; азотная кислота, конц.; диэтилдитиокарбамат натрия, 2%-ный спиртовой раствор; гидроксид натрия, 4%-ный спиртовой раствор; гидросульфит натрия, порошок; хлорид железа (III), кристаллический; тиомочевина, кристаллическая.

Оборудование. Штатив с пробирками; скальпель; весы аптечные с разновесами; беззольные фильтры; флуороскоп.

Токоферол, 0,1%-ный спиртовой раствор.

Витамин К, насыщенный раствор в 70%-ном этаноле.

Рибофлавин, 0,002%-ный раствор.

Рибофлавинмононуклеотид, 0,1%-ный раствор в ампулах, из которого готовят 0,002%-ный раствор.

Флавинат, лекарственный препарат в ампулах, содержащий ФАД, 0,002%-ный раствор.

Витамин В12, раствор в ампулах.

а. Проба Друммонда на ретинол (витамин А). Метод основан на способности концентрированной серной кислоты отнимать воду от ретинола с образованием окрашенных продуктов.

Ход определения. В пробирку вносят 2 капли рыбьего жира, 5 капель хлороформа и 1-2 капли концентрированной серной кислоты. Появляется голубое окрашивание, переходящее в буро-красное.

б. Обнаружение кальциферола (витамин Д). Метод основан на взаимодействии кальциферола с гидрохлоридом анилина с образованием окрашенных продуктов.

Ход определения. В сухую пробирку помещают 10 капель анилинового реактива и прибавляют 5 капель рыбьего жира. Содержимое пробирки осторожно при постоянном перемешивании нагревают до кипения и кипятят в течение 30 с. В присутствии витамина Д желтая эмульсия приобретает вначале грязно-зеленое, а затем буро-красное или красное окрашивание.

в. Качественная реакция на токоферол (витамин Е). Метод основан на образовании соединений хиноидной структуры, окрашивающихся в красный цвет, при действии сильных окислителей (концентрированной азотной кислоты) на токоферол.

Ход определения. В сухую пробирку вносят 5 капель спиртового раствора токоферола и добавляют 10 капель концентрированной азотной кислоты. Встряхивают. Наблюдают за развитием красного окрашивания.

г. Качественная реакция на нафтохинон (витамин К).Метод основан на взаимодействии диэтилдитиокарбамата с витамином К в щелочной среде с образованием комплекса голубого цвета.

Ход определения. В пробирку вносят 4 капли спиртового раствора диэтилдитиокарбамата натрия и 4 капли раствора гидроксида натрия. Встряхивают и наблюдают за развитием окраски.

д. Обнаружение тиамина (витамин В1). Метод основан на способности тиамина образовывать с диазофенилсульфоновой кислотой комплекс оранжево-красного цвета в щелочной среде.

Ход определения. В пробирку вносят 5 капель раствора сульфаниловой кислоты и прибавляют 5 капель раствора нитрита натрия. К полученному диазореактиву добавляют на кончике скальпеля порошок тиамина и 5 капель раствора карбоната натрия. Встряхивают. Появляется оранжево-красное окрашивание.

е. Обнаружение рибофлавина (витамин В2 и флавиновых коферментов. Метод основан на способности окисленных форм рибофлавина и флавиновых коферментов (ФМН и ФАД) давать в ультрафиолетовом свете желто-зеленую флуоресценцию, интенсивность которой зависит от их концентрации. Восстановленные формы флавинов не флуоресцируют.

Ход определения. В одну пробирку вносят 10 капель раствора рибофлавина, в другую – рибофлавинмононуклеотида, в третью – флавината, приливают в каждую из них по 5 мл воды и перемешивают встряхиванием. Ставят пробирки в штатив флуороскопа и сравнивают интенсивность флуоресценции трех проб.

Прибавляют в каждую пробирку на кончике скальпеля порошок гидросульфита натрия (восстановитель) и наблюдают за гашением флуоресценции.

ж. Качественная реакция на рутин (витамин Р). Метод основан на взаимодействии рутина с хлоридом железа (III) с образованием комплексного соединения зеленого цвета.

Ход определения. На аптечных весах берут навеску 100 мг чая, добавляют 15 мл дистиллированной воды и кипятят в течение 3 мин. Дают остыть, отбирают в пробирку 1 мл жидкости и добавляют несколько кристалликов хлорида железа (III). Перемешивают и разводят в 2-3 раза дистиллированной водой. Развивается зеленое окрашивание.

з. Качественная реакция на цианкобаламин. Метод основан на способности кобальта, входящего в состав витамина В12, при высокой температуре взаимодействовать с тиомочевиной с образованием комплекса зеленого цвета.

Ход определения. На беззольный фильтр наносят 2-3 капли 10%-ного раствора тиомочевины, высушивают на газовой горелке, после чего наносят 1-2 капли раствора витамина В12 и снова высушивают. Образуется зеленое кольцо.

Оформление работы. Все результаты качественных реакций на витамины оформить в виде таблицы.

Практическое значение работы. Качественные реакции на витамины позволяют обнаружить их наличие в лекарственных препаратах и после экстракции в пищевых продуктах и лекарственных растениях. Принцип, положенный в основу качественных реакций на витамины, используется при разработке количественного определения их в различных природных объектах и лекарствах.

источник

Порфирия — группа врожденных расстройств, обусловленных дефектом синтеза гема — железосодержащей части . — приобретенная.

  1. характерные симптомы и лабораторные данные
  2. идентификация порфирина и метаболитов синтеза гема в стуле, плазме ,
  3. измерение активности ферментов
  4. генетическое тестирование

У бо­лее 80% гетерозиготных пациентов порфирия протекает бессимптомно.

По клиническому течению заболевания часто порфирии делят на острые формы порфирии и формы, протекающие преимущественно с поражением кожных покровов.

Острые приступы порфирии могут включать абдоминальные боли и нарушение психики, парестезии, лихорадку, реже — судороги, нейромышечную слабость, . Острые приступы порфирии характерны для острой интермиттирующей порфирии, копропорфирии. Возникновение приступа провоцируются лекарствами (особенно барбитураты, алкоголь и сульфаниламиды; также дифенилгидантоин, хлордиазепоксид, эргометрин, некоторые стероиды и др.), инфекцией, голоданием.

Единственным сипмтомом острого приступа порфирии может быть резкое повышение в крови уровня порфобилиногена.

У пациентов с бессимптомным носительством может быть всего несколько острых приступов порфирии за всю жизнь, причем уровни аминолевулиновой кислоты, порфобилиногена и порфирина в моче, кале, крови могут оставатся в норме.

Для подтверждения диагноза острой порфирии лабораторные данные должны включать:

  • суточное количество в моче 5-аминолевулиновой кислоты,
  • порфобилиноген в моче,
  • уропорфирин в моче,
  • копропорфирин в моче; моча должна быть заморожена, так как порфирин быстро разрушается, особенно при комнатной температуре.,
  • порфирин плазмы,
  • свободный протопорфирин эритроцитов,
  • кал для количественного определения копропорфирина и протопорфирина,
  • тест Уотсона-Шварца показывает количество порфирина в моче (в мочу добавляют реактив Эрлиха или ацетат натрия; положительным считается, если при добавлении хлороформа произошло окрашивание в вишнево-красный цвет), является количественным, но низкочувствительным.
  • Доказательством порфирии служит гемолитическая анемия или за­болевание печени; флуоресценция в соответствующих тканях и определение активности фермен­тов в эритроцитах ткани печени и культуре фибробластов. Читайте о диагностике анемии в статье « ».
  • Уровня аминолевулиновой кислоты и порфобилиногена измеряют во время острых приступов порфирии.
  • Некоторые лекарства могут провоцировать приступы порфирии (стимулиру­ют синтез гема, воздействуя на аминолевулиновую кислоту), например, алкоголь, антипиретики, барбитураты, эстро­гены, фенилгидразин, фенитоин и сульфаниламиды.
  • Измерение активности ферментов и анализ ДНК способствуют определению типа порфирии.
  • Тесты на порфирин в моче (флуорометрический метод) — некоторые препараты тоже провоцируют флуоресценцию, например, акрифлавин, этоксазин, сульфаметоксазол, тетрациклин, фенозопиридин.

1. Эритропоэтические формы

3. Гепатоэритропоэтические формы

дегидратаза аминолевулиновой кислоты,

описано лишь несколько случаев

дезаминаза порфобилиногена, 50% нормы

Лапландия: 1:1000; везде 1,5:100000

менее 200 описан­ных случаев

менее 20 описанных случаев

копропорфирино-геноксидаза, 50% нормы

менее 50 описанных случаев

Южная Африка 3:1000; в других регио­нах редко

менее 50 описанных случаев

Пофирия was last modified: Ноябрь 10th, 2017 by Мария Салецкая

Комплексный количественный анализ, позволяющий определить в моче уровень уро- и копропорфиринов: уропорфирин, гептакарбоксипорфирин, гексакарбоксипорфирин, пентакарбоксипорфирин, копропорфирин I, копропорфирин III, общий порфирин. Исследование предназначено для диагностики как врождённых, так и приобретенных порфирий. В основе генетически обусловленной порфирии лежит нарушение биосинтеза гема, приводящее к избыточному накоплению в организме порфиринов и их предшественников. Вторичные порфирии возникают вследствие нарушения функций печени или кроветворных органов как результат воздействия тяжелых металлов, интоксикаций свинцом, фосфором, алкоголем, бензолом, четыреххлористым углеродом, при некоторых злокачественных опухолях и аллергических состояниях, циррозах печени и проч.

Высокоэффективная жидкостная хроматография-масс-спектрометрия (ВЭЖХ-МС).

Нмоль/сут. (наномоль в сутки), мкмоль/сут. (микромоль в сутки).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
  • Исключить (по согласованию с врачом) прием мочегонных препаратов в течение 48 часов до сбора мочи.

Общая информация об исследовании

Порфирины — циклические соединения, образованные четырьмя пиррольными кольцами, связанными между собой метенильными мостиками, синтезируются из глицина и сукцинил-CoA через образование δ-аминолевулиновой кислоты и порфобилиногена. Это промежуточные соединения в синтезе гема, являющегося частью молекулы гемоглобина, осуществляющей перенос кислорода. При нарушении синтеза гема концентрация порфиринов в моче увеличивается.

Порфирины представляют собой оранжево-красные флюоресцирующие соединения, состоящие из 4 колец пиррола, которые образуются в процессе биосинтеза гема. Они обнаруживаются во всех клетках, принимают участие в энергетическом обмене, и экскретируются с мочой в небольших количествах. Повышение в моче уровня порфиринов или порфириногенов свидетельствует о нарушении биосинтеза гема, которое бывает врождённым, например при наследственных ферментопатиях, и приобретенным, например при заболеваниях печени и гемолитической анемии.

Принято различать первичные и вторичные порфинурии. К первым, обычно называемым порфириями, относят группу наследственных заболеваний, для каждого из которых характерен набор экскретируемых с мочой порфиринов и их предшественников. Вторичные порфинурии возникают вследствие нарушения функций печени или кроветворных органов в результате каких-либо первичных заболеваний, например тяжелых гепатитов, интоксикаций свинцом, фосфором, алкоголем, бензолом, четыреххлористым углеродом, при некоторых злокачественных опухолях и аллергических состояниях, циррозах печени и т. п. При вторичных порфинуриях в моче обнаруживаются значительные количества копропорфиринов.

Измеряются семь показателей порфиринов, включая общий порфирин, что позволяет идентифицировать токсический эффект металлов и увидеть, какое лечение необходимо. Также показатели конкретных порфиринов служат функциональными маркерами токсичности ядовитых металлов и органических химических веществ. С помощью порфириновых тестов можно определить уровень биохимического повреждения, вызванного воздействием токсических веществ, ртутное воздействие у пациентов, уровень токсинов у пациентов до и во время хелатирования, токсичность лекарственных препаратов, провести дифференциальную диагностику при отравлениях тяжелыми металлами.

Действие токсинов может вызвать повышенную чувствительность к химическим веществам, поведенческие расстройства и снижение обучаемости, иммунную дисфункцию, синдром хронической усталости, неврологические и психические, эмоциональные расстройства, анемии.

Также целесообразно при определении токсичности исследовать спектр заболеваний, связанных с аутизмом (ASD), и проводить разработку лечебных мероприятий по устранению недостаточной детоксикации и сульфатации, накопления тяжелых металлов. Источниками токсинов могут быть рыба, амальгамы, загрязненный воздух и почва, флуоресцентные лампы, краски, керамика, лечение с помощью методов народной медицины, грунтовые воды, табак. Симптомы интоксикации: усталость, слабость, повышенная химическая чувствительность, раздражительность, беспокойство, потеря памяти, бессонница, онемение и покалывание в руках и ногах, судороги, желудочно-кишечные расстройства, потеря аппетита.

Читайте также:  Как делать анализ на английском

Когда назначается исследование?

  • Диагностика первичных (наследственных) порфирий;
  • при подозрении на интоксикацию свинцом или ртутью, органическими растворителями, лекарственными препаратами (противосудорожные, анальгетики, анестетики, антипсихотики, противовоспалительные и гормональные), а также алкоголем и его суррогатами;
  • болезни гепатобилиарной системы, сопровождающиеся порфиринуриями;
  • гормональные изменения у женщин на фоне менструального цикла с обильными выделениями;
  • анорексия на фоне низкокалорийной, низкоуглеводной диеты;
  • острые атаки в анамнезе, одновременно сочетающие в себе острую боль в животе без симптомов раздражения брюшины с выделением красной или розовой мочи, появлением нарушений сердечного ритма, тошноты и рвоты, повышением артериального давления, повышением температуры тела на фоне различных проявлений полиневропатии.

Экскреция порфиринов с мочой может возрастать при:

  • вирусном гепатите;
  • лимфогранулематозе;
  • поражении ЦНС;
  • циррозе печени;
  • отравлениях солями тяжелых металлов, бензолом и четыреххлористым углеродом.



Аминолевулиновая кислота/порфобилиноген мочи

Лабораторное обследование функции печени

Кто назначает исследование?

Педиатр, терапевт, дерматолог, эндокринолог, токсиколог, кардиолог, невропатолог, психиатр.

Порфирины — циклические соединения, образованные четырьмя пиррольными кольцами, связанными между собой метенильными мостиками, синтезируются из глицина и сукцинил-CoA через образование δ-аминолевулиновой кислоты и порфобилиногена.

Порфирины способны образовывать комплексы с ионами металлов, связывающихся с атомами азота пиррольных колец. Примерами служат железопорфирины, в частности гем, входящий в состав гемоглобина, и магнийсодержащий порфирин — хлорофилл — пигмент растений, участвующий в фотосинтезе.

Превращение порфобилиногена в порфирин может происходить просто при нагревании в кислой среде (например, в кислой моче), в тканях это превращение катализируется специфическими ферментами. Все порфириногены бесцветны, тогда как все порфирины окрашены.

Копропорфирины I и III растворимы в смесях эфира и ледяной уксусной кислоты, из которых их можно экстрагировать соляной кислотой. Уропорфирины, напротив, в этих смесях нерастворимы, но частично растворимы в этилацетате, и их также можно экстрагировать соляной кислотой. Полученные солянокислые растворы при облучении ультрафиолетовым светом дают красное флюоресцентное окрашивание. Характерные полосы поглощения могут быть зарегистрированы с помощью спектрофотометра.

Последовательно образующиеся в процессе синтеза гема из δ-аминолевулиновой кислоты интермедиаты становятся все более гидрофобными. Это повышение гидрофобности отражается на распределении интермедиатов синтеза гема в составе мочи и кала. Более полярный уропорфири-ноген экскретируется преимущественно с мочой, а более гидрофобные копропорфириноген и протопорфириноген оказываются преимущественно в желчи и удаляются с калом.

Принцип метода . При реакции порфобилиногена с пара-диметиламинобензальдегидом образуется соединение красного цвета. Повышение специфичности реакции достигается добавлением ацетата натрия. Уробилиноген, производные индола, скатола и другие соединения, дающие аналогичную реакцию с пара-диметиламинобензальдегидом, удаляют экстракцией бутанолом и хлороформом, в которых порфобилиноген нерастворим.

Реактивы . 1) пара-диметиламинобензальдегид; 2) концентрированная соляная кислота; 3) реактив Эрлиха: 0,7 г пара-диметиламинобензальдегида растворяют в 150 мл концентрированной соляной кислоты, приливают 100 мл дистиллированной воды и смешивают. Раствор должен быть бесцветным или слегка желтым. Хранят в посуде из темного стекла, стабилен; 4) насыщенный раствор ацетата натрия: 375 г CH 3 COONa × ЗН 2 O или 226 г CH 3 COONa растворяют в 250 мл теплой дистиллированной воды. Раствор должен быть бесцветным и прозрачным, хранят его при температуре 20 °С; 5) хлороформ; 6) бутиловый спирт; 7) индикаторная бумага для измерения pH в интервале 4,0–5,0.

Постановка пробы . Исследуют мочу в первые 2–3 ч после мочеиспускания. В пробирке смешивают по 2,5 мл мочи и реактива Эрлиха, добавляют 5 мл насыщенного раствора CH 3 COONa, перемешивают. Измеряют pH, который должен быть в пределах 4,0–5,0. При pH меньше 4,0 пробу подщелачивают раствором ацетата натрия.

Оценка результатов . При отсутствии развития окраски результат считается отрицательным. Если проба окрашивается в розовый или красный цвет, в пробирку добавляют 5 мл хлороформа и встряхивают. Окрашивание хлороформа при бесцветном или слегка желтоватом верхнем слое также позволяет считать пробу отрицательной. Если окрашенным остается слой над хлороформом, то 6–8 мл из него переносят в другую пробирку, добавляют бутанол в соотношении 1: 2 и встряхивают. При плохом разделении слоев жидкостей пробу центрифугируют. Окрашивание бутанола свидетельствует о низком содержании порфобилиногена — проба также отрицательна. Если окрашенным остается исследуемый слой, то в моче концентрация порфобилиногена выше нормальной. В норме концентрация порфобилиногена в моче — до 2 мг/л. Данным методом порфобилиноген определяется при концентрации более 6 мг/л.

Примечание : при хранении мочи более 3 ч при комнатной температуре положительная реакция может стать отрицательной, что связано с превращением порфобилиногена в порфирин в кислой среде и образованием ингибиторов реакций. При невозможности исследования мочи в первые 2 ч хранить ее необходимо в холодильнике при 4‘°С, доведя pH до 6,0–7,0. В этих условиях порфобилиноген стабилен в течение длительного времени.

Принято различать первичные и вторичные порфинурии. К первым, обычно называемым порфириями, относят группу наследственных заболеваний, для каждого из которых характерен набор экскретируемых с мочой порфиринов и их предшественников. Вторичные порфинурии возникают вследствие нарушения функций печени или кроветворных органов в результате каких-либо первичных заболеваний, например тяжелых гепатитов, интоксикаций свинцом, фосфором, алкоголем, бензолом, четыреххлористым углеродом, некоторых злокачественных опухолях и аллергических состояниях, циррозах печени и т. п. При вторичных порфинуриях в моче обнаруживаются значительные количества копропорфиринов.

У здоровых людей с мочой за сутки в норме выводится в среднем около 67 мкг копропорфиринов; на изомер I типа приходится в среднем 14 мкг/сут, на изомер III типа — 53 мкг/сут. Отклонения в этом соотношении могут служить диагностическим признаком при некоторых заболеваниях печени.

Острая перемежающаяся порфирия (ОПП) — это наследственное заболевание, относящееся к группе порфирий, в основе которых лежит нарушение биосинтеза гема, что ведет к накоплению в органах и тканях порфобилиногена (ПБГ) и δ-аминолевулиновой кислоты (АЛК), оказывающих токсическое воздействие на организм и обуславливающих типичную клиническую симптоматику. Заболевание обычно манифестируется в молодом и зрелом возрасте, и из всех видов порфирий именно ОПП выделяется неблагоприятным прогнозом. Примерно один человек из 20 тысяч является бессимптомным носителем патологического гена, а каждый из 100 тысяч страдает ОПП. Трудность диагностики ОПП заключается в том, что она протекает под маской неврологических и психических заболеваний.

ОПП передается по аутосомно-доминантному типу, связанному с мутацией генов 11 хромосомы и генетическим дефектм уропорфириногенсинтетазы, что приводит к резкому увеличению ПБГ, АЛК и дисфункции периферической нервной системы и ЖКТ. У большинства носителей патологического гена, болезнь на протяжении жизни может так и не проявиться, однако различные неблагоприятные факторы способствуют ее манифестации. К ним относятся:

  • различные лекарственные препараты;
  • ядохимикаты;
  • алкогольная интоксикация;
  • предменструальный период;
  • беременность;
  • ограничение потребления пищевых продуктов;
  • инфекционные заболевания;
  • стрессы.

Под воздействием этих факторов болезнь принимает острое течение, которое делает возможным ее верификацию. Следует отметить, что при несвоевременной диагностике и неадекватном лечении этого недуга, умирает 60 человек из каждых ста заболевших. В то же самое время, своевременная диагностика и адекватная терапия позволяют спасти подавляющее большинство больных, сохранив им приемлемое качество жизни.

  • длительные, приступообразные боли в брюшной полости;
  • тошнота;
  • рвота;
  • задержка стула;
  • увеличение частоты сердечных сокращений;
  • повышение артериального давления;
  • снижение тонуса мышц;
  • боли в конечностях;
  • снижение кожной чувствительности;
  • дисфагия;
  • потеря голоса;
  • параличи и парезы;
  • паралич дыхания;
  • инсомния;
  • эмоциональная нестабильность;
  • склонность к депрессии;
  • истероидный тип личности;
  • спутанность сознания;
  • зрительные и слуховые галлюцинации;
  • судорожные припадки;
  • фотосенсибилизация;
  • гиперпигментация кожи;
  • окраска мочи во все оттенки красного цвета.

Особенно тяжело СПП протекает во время беременности и часто заканчивается летально.

При наличии характерной клинической симптоматики проводятся следующие подтверждающие исследования:

  • Реакция мочи с реактивом Эрлиха положительная.
  • Определение общих порфиринов, ПБГ и АЛК в моче: уровень повышен.
  • Определение общих порфиринов в кале: уровень повышен.
  • Молекулярно-генетическое исследование: выявление носительства мутантного гена.

В период реконвалесценции и ремиссии все показатели нормализуются, что в большинстве случаев не позволяет верифицировать заболевание.

Начинается с устранения провоцирующих факторов, ограничением в рационе жиров и увеличением количества углеводов. При амбулаторном лечении больные обычно принимают сухой порошок глюкозы. Патогенетическая медикаментозная терапия проводится препаратом Нормосанг в/в в дозе 3-4 мг/кг в сутки в течение от 4 до 8 суток подряд, что приводит к купированию приступа ОПП. В острой фазе ОПП применяется циметидин в дозе 800 мг в день, продолжительность терапии которым определяется индивидуально. Назначаются гемодиализ, плазмаферез, гемоперфузия. Женщинам купируют наступление менструаций. Симптоматическая терапия направлена на коррекцию неврологической, психотической симптоматики, купирование болевого синдрома, снижение артериального давления, купирование тахикардии. Обязательны: соблюдение личной гигиены, массаж, ЛФК. Чем в более молодом возрасте началось заболевание, тем серьезней прогноз. Всем больным и их ближайшим родственникам рекомендуется носить с собой памятку о наличии у них порфирии, для предотвращения введения провокативных лекарственных препаратов в случае оказания ургентной медицинской помощи.

Метод определения См. описание.

Исследуемый материал Моча (средняя порция утренней мочи, собранная в специальный контейнер)

Исследование разовой утренней порции мочи, включающее в себя определение физических (цвет, прозрачность, удельный вес), химических (pH, содержание белка, глюкозы, кетонов, уробилиногена, билирубина, гемоглобина, нитритов и лейкоцитарной эстеразы), а также оценку качественного и количественного состава элементов мочевого осадка (эпителий, лейкоциты, эритроциты, соли, слизь и т.д.).

Параметры, определяемые в составе общего анализа мочи перечислены в таблице ниже:

Параметр Анализатор Способ определения Форма выдачи
Цвет, прозрачность iChem Velocity Метод измерения интенсивности светорассеяния, при необходимости — визуальный контроль Качественно (описание цвета, прозрачности)
Удельный вес iChem Velocity Метод измерения коэффициента преломления Количественно
Белок iChem Velocity, Architect 8000 «Сухая химия», турбидиметрия Результаты с концентрацией белка в пределах референсных значений – качественно (ОТРИЦАТ), выше референсных значений — количественно
рН, Глюкоза, кетоновые тела, уробилиноген, гемоглобин, нитриты, лейкоцитарная эстераза iChem Velocity «Сухая химия» Полуколичественно
Эпителий плоский, эпителий переходный, эпителий почечный, лейкоциты, эритроциты, цилиндры, соли, слизь, бактерии, грибы Iris IQ200 Аппаратная микроскопия, при необходимости – световая микроскопия

Для исследования предпочтительно использовать среднюю порцию утренней мочи, которая в течение ночи собирается в мочевом пузыре (если лечащим врачом не рекомендовано иное).

Порядок действий при сборе мочи для проведения исследования:

Провести гигиенические процедуры наружных половых органов;

При первом утреннем мочеиспускании небольшое количество мочи (первые 1-2 секунды) выпустить в унитаз, не прерывая мочеиспускания, подставить контейнер и собрать в него 50 мл. мочи;

Плотно закрыть контейнер завинчивающейся крышкой;

Насадить пробирку вниз резиновой пробкой в углубление на крышке контейнера, при этом пробирка начнет наполняться мочой;

После того как моча прекратит поступать в пробирку, снять пробирку с пробойника (рис. 1 и 2);

Несколько раз перевернуть пробирку для лучшего смешивания мочи с консервантом (рис. 3).

До отправки биоматериал должен храниться в холодильнике при +2… +8С. Материал должен быть доставлен в медицинский офис в день сбора.

  • дифференциальная диагностика заболеваний почек и мочевыводящих путей;
  • скрининговое и диспансерное обследование;
  • оценка течения заболеваний почек и мочевыводящих путей, контроль развития осложнений и эффективности проводимого лечения;
  • через 1-2 недели после выздоровления от стрептококковой инфекции (ангина, скарлатина).

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

При интерпретации результатов общего анализа мочи следует учитывать то, что все показатели должны анализироваться в комплексе друг с другом, а не изолированно.

В норме моча может быть различных оттенков желтого цвета (светло-желтая, соломенно-желтая, желтая) и бесцветной (преимущественно у детей). Изменение окраски может иметь как физиологические, так и патологические причины.

Физиологические причины изменения цвета мочи:

Цвет Причина
темно-желтый, лимонно-желтый, оранжевый Обезвоживание, прием витаминов и препаратов нитрафуранового ряда
красный, светло-красный, розовый Присутствие красящих веществ в пище (свекла, черника), прием таких лекарственных препаратов, как антипирин, аспирин, сульфазол.
темно-коричневый прием метронидазола, сульфаниламидов, препаратов на основе толокнянки
голубой прием метиленового синего
бесцветный (у взрослых людей) употребление большого количества жидкости, прием мочегонных препаратов

Патологические причины изменения цвета мочи:

Цвет Причина
янтарно-желтый, лимонно-желтый, оранжевый уробилиногенурия
янтарно-желтый, лимонно-желтый, оранжевый, светло-коричневый, зеленый билирубинурия
красный, светло-красный, розовый, коричневый, бурый, темно-коричневый присутствие в моче большого количества эритроцитов или гемоглобина/миоглобина, порфиринурия
темно-коричневый отравление фенолами
коричневый меланурия
молочный хилурия (примесь лимфатической жидкости), пиурия (большое количество лейкоцитов)
Бесцветный (у взрослых людей) сахарный и несахарный диабет, нефросклероз

В норме моча должна быть прозрачной. Мутность мочи может быть обусловлена присутствием большого количества элементов мочевого осадка.

В норме удельный вес колеблется от 1003 до 1035. Повышение значений наблюдается при обезвоживании, глюкозурии, большом количестве элементов мочевого осадка.

Возраст Значения
до 1 месяца 5,0 — 7,0
старше 1 месяца 5,0 – 8,0

Причины повышения значений:

Инфекции мочевыводящих путей;

Алиментарные причины (погрешности в диете).

Причины понижения значений:

Алиментарные причины (погрешности в диете, голодание);

Мочекислый диатез, подагра;

В норме концентрация белка в разовой порции мочи не должна превышать 0,140 г/литр.

Причины повышения концентрации белка:

В норме концентрация глюкозы в разовой порции мочи не должна превышать 2,8 ммоль/л.

Причины повышения концентрации глюкозы:

Физиологические Алиментарные (погрешности в диете), длительное голодание, стресс, 2-3 триместр беременности, передозировка или длительное употребление кортикостероидов
Патологические лихорадочные состояния, панкреатит, панкреанекроз, сахарный диабет; нарушение реабсорбции глюкозы в проксимальном отделе нефрона (ренальный диабет), гипертиреоз, органическое поражение почек (хронический гломерулонефрит, липоидный нефроз); феохромоцитома, синдром Иценко-Кушинга, менингиты, энцефалиты, травмы и опухоли мозга, отравление солями тяжелых металлов (ртуть, свинец, кадмий), токсическими веществами (этиленгликоль, четыреххлористый углерод) и нефротоксическими препаратами (аминогликозиды, фенацитин).
Вещества, присутствие которых может искажать результат Аскорбиновая кислота, хлорсодержащие окислители (дезинфицирующие средства)

В норме концентрация кетоновых тел в разовой порции мочи не превышает 1 ммоль/л.

Причины повышения концентрации кетоновых тел:

В норме концентрация уробилиногена в разовой порции мочи не превышает 34 ммоль/л.

Причины повышения концентрации уробилиногена:

В норме билирубин в моче не обнаруживается.

Причины повышения концентрации билирубина:

В норме гемоглобин в моче не обнаруживается.

Причины повышения концентрации гемоглобина::

В норме лейкоцитарная эстераза в моче не обнаруживается.

В норме нитриты в моче не обнаруживаются.

В норме присутствуют в моче в количестве до 5 в поле зрения. Большее количество клеток говорит о погрешностях при сборе материала для проведения исследования.

Клетки переходного эпителия:

  • мочекаменная болезнь;
  • интоксикация, в том числе и вызванная лекарственными препаратами;
  • лихорадочные состояния;
  • послеоперационные состояния;

Клетки почечного эпителия:

В норме в мочевом осадке не встречаются.

Появляются в следующих случаях:

  • хроническая и острая почечная недостаточность;
  • интоксикация (прием салицилатов, кортизона, фенацетина, препаратов висмута, отравление солями тяжелых металлов, этиленгликолем);
  • новообразования в почках.

В норме встречаются в количестве не более 5 клеток в поле зрения. Повышение количества лейкоцитов наблюдается в следующих случаях:

  • воспалительные заболевания почек и мочевыводящих путей инфекционного и неинфекционного генеза (гломерулонефрит, пиелонефрит, нефрит, цистит, простатит, урогенитальный туберкулез);
  • мочекаменная болезнь;
  • лихорадочные состояния;
  • отторжение почечного трансплантата;
  • системные воспалительные заболевания неинфекционного генеза (например, люпус-нефрит).

В норме встречаются в количестве не более 2 клеток в поле зрения. Повышение количества эритроцитов наблюдается в следующих случаях:

  • воспалительные заболевания почек и мочевыводящих путей инфекционного и неинфекционного генеза (гломерулонефрит, пиелонефрит, нефрит, цистит, простатит, урогенитальный туберкулез);
  • мочекаменная болезнь;
  • травматическое поражение почек и мочевыводящих путей, в том числе и после инструментальных исследований;
  • лихорадочные состояния;
  • артериальная гипертензия с вовлечением почечных сосудов;
  • авитаминоз С;
  • геморрагические диатезы (нарушения свертывания крови: гемофилии, тромбоцитопении, тромбоцитопатии и т.д.);
  • отравления производными бензола, анилина, змеиным ядом, ядовитыми грибами, при непереносимости антикоагулянтной терапии;
  • новообразования мочеполовой системы;
  • системные воспалительные заболевания неинфекционного генеза.

В норме в мочевом осадке не встречаются.

Появляются в следующих случаях:

  • состояние после значительной физической нагрузки;
  • обезвоживание;
  • лихорадочные состояния;
  • артериальная гипертензия;
  • воспалительные заболевания почек;
  • застойная сердечная недостаточность;
  • острая реакция отторжения трансплантата.
  • обезвоживание;
  • мочекислый криз у новорожденных (физиологическое состояние);
  • мочекислый диатез, подагра;
  • усиление процессов катаболизма белка, в том числе и при тяжелых воспалительно-некротических поражениях, онкологических заболеваниях, цитостатической терапии и отравлении солями тяжелых металлов.

В норме могут встречаться в моче в небольшом количестве. Повышение количества уратов характерно для следующих состояний:

  • обезвоживание;
  • употребление большого количества животной пищи;
  • мочекислый диатез, подагра;
  • усиление процессов катаболизма белка, в том числе и при тяжелых воспалительно-некротических поражениях, онкологических заболеваниях, цитостатической терапии и отравлении солями тяжелых металлов.

Кислый мочекислый аммоний:

В норме в мочевом осадке не встречаются.

Появляются в следующих случаях:

  • мочекислый диатез у детей;
  • инфаркт почки у новорожденного (цилиндры из кислого мочекислого аммония);
  • в нормальной моче при ее длительном стоянии при комнатной температуре (аммиачное брожение) в сочетании с кристаллами трипельфосфатов.

В норме могут встречаться в моче в небольшом количестве. Повышение количества оксалатов характерно для следующих состояний:

  • употребление пищи с высоким содержанием щавелевой кислоты (щавель, шпинат, картофель, помидоры, яблоки и другие фрукты и овощи), а также крепких бульонов, какао, крепкого чая и чрезмерного употребления сахара, минеральных вод с высоким содержанием углекислоты и солей органических кислот;
  • щавелевокислый диатез;
  • сахарный диабет;

В норме в мочевом осадке не обнаруживаются. Наличие бактерий может быть связано как с присутствием бактерий в почках и/или мочевыводящих путях, так и с погрешностями, допущенными при сборе биоматериала для исследования.

В норме в мочевом осадке не обнаруживаются. Наличие грибов может быть связано как с грибковой инфекцией мочевыводящих путей, так и с погрешностями, допущенными при сборе биоматериала для исследования.

источник