Меню Рубрики

Как сдается анализ чувствительности к антибиотикам

Бактерии, которые выделяются у больных, подлежат проверке на чувствительность к антибактериальным препаратам.

При этом появляется возможность более рационального проведения терапии антибиотиками. Существуют две основные группы, на которые делятся методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам:

  • Диффузионные методы;
  • Методы разведения.

Также существуют ускоренные методы, позволяющие сократить время на определение чувствительности.

Диффузионный метод дисков, которые насыщаются антибиотиками, получил широкое распространение из-за простоты. При этом способе определение чувствительности осуществляется следующим образом:

Чашка Петри (лабораторный сосуд, имеющий форму плоского цилиндра) частично заполняется питательным веществом – мясопептонным агаром.

Поверх него наносится (засевается) суспензия бактерий, имеющая определенную плотность.

Чашка Петри помещается в термостат, в котором поддерживается температура 37 °C. Флору инкубируют 18 часов.

Результат определяется измерением в миллиметрах диаметра той зоны, которая возникла вокруг диска.

Это исследование выполняется так же, как и диско-диффузионный способ тестирования. При этом вместо диска используется тест в виде полоски, на которую антибиотик наносится с увеличением концентрации в соответствии с градуировкой от минимума к максимуму.

Зона, в которой рост бактерий подавляется, имеет эллипсовидную форму. Место, где происходит соприкосновение этой зоны и полоски, определяется как МПК. Расшифровка аббревиатуры – минимальная подавляющая концентрации, которая считывается количественно согласно цифрам градуировки.

В основе методов разведения лежит алгоритм двойных последовательных разведений. В этом способе каждая последующая концентрация антибиотика в два раза ниже предыдущей. Данные разведения вносятся в бульон или агар, являющиеся питательной средой. Поверх засевают флору.

После выдерживания в термостате и окончания инкубационного периода (18-20 часов) производится определение полученных результатов, выраженных в единицах измерения мкг/мл, в которых измеряется МПК.

Заметный рост микроорганизмов проявляется в виде помутнения питательной среды. Это свидетельствует о недостаточности концентрации антибиотика. МПК – это наименьшее содержание антибиотика в сосуде, при котором зримо не определяется помутнение, свидетельствующее о жизнедеятельности бактерий.

Наименьший промежуток времени, через который может быть получен результат исследования на чувствительность бактерий по вышеописанным методам – около 18 часов. Однако при тяжелом протекании инфекционного заболевания – это длительный период.

В их основе лежат следующие принципы исследования:

  1. Подавление антибиотиком ферментативной (регулируемой как ускорителями, так и замедлителями) активности микробов. При этом тесте индикатор изменяет свой окрас в зависимости от того, в какой степени чувствительна флора, культивированная на глюкозе. При добавлении дрожжевого экстракта к среде время получения результата – около 2,5 часов.
  2. Изменение в количественном выражении окислительно-восстановительного потенциала (Eh) при культивировании микроорганизмов в питательной для них среде. При этом тесте добавляемые в среду специальные индикаторы изменяют свой цвет. Метод прост в техническом исполнении. Результаты исследования могут быть получены уже через два часа.
  3. Обнаружение методом фазово-контрастной микроскопии образовавшихся инволюционных (находящихся в обратном развитии) форм микроорганизмов. При этом фиксируется концентрация антибиотика, вызвавшая такое изменение.

Колониеобразующая
единица (colony-forming unit -CFU) — одна живая микробная клетка, из которой вырастает колония,по другим определениям — видимая колония микроорганизмов, выросшая из одной клетки или из группы клеток.Определение КОЕ теоретически позволяет определить концентрацию(количество) микроорганизмов в единице объема.Если определения количества микроорганизмов например в 1 мл мочи или в 1 мл спермы не вызывает возражений и может приниматься во внимание при определении тактики лечения
заболевания,то количественное определение микроорганизмов в отделяемом из половых органов (влагалища,уретры) вызывает большие сомнения — так в любом случае,независимо от методов подсчета,определяется количество микроорганизмов только во взятой пробе из половых органов,а не во влагалище,цервикальном канале или уретре в целом

Поэтому определение различных «титров», «степеней»,»количества» микроорганизмов в пробах,взятых из отделяемого влагалища и уретры не имеет никакого практического значения ни для диагностики мочеполовых инфекций,ни для назначения лечения,ни для контроля их излеченности.

Подсчет КОЕ проводят
несколькими методами:

Метод серийный разведений

Из транспортной среды,содержащей биоматериал берется 1 мл,который последовательно разбавляется в 10 раз с посевом в пронумерованные пробирки с питательной средой.Та пробирка,в которой прекращается рост микроорганизмов считается максимальной границей количества микроорганизмов в пробе.Для примера количество концентрация микроорганизмов в нижеприведенной таблице составляет 10х 6

Этот же метод серийных разведений
применяется для определения чувствительности к антибиотикам (определяется минимальная ингибирующая концентрация)

Метод подсчета колоний под микроскопом

Метод является ориентировочным и заключается в подсчете колоний под микроскопом под увеличение 10 х в поле зрения с последующей интерпретацией по сравнительной таблице.

Секторный метод (метод Gould)

По существу является вариантом метода серийных разведений.Применяется для микробиологического исследования мочи.Платиновой петлей диаметром 2 мм, емкостью 0,005 мл берут каплю мочи и делают 30-40 штрихов на сектор А чашки Петри. Прожигают петлю и производят 4
штриха через сектор А в сектор I. Аналогичным образом из сектора I засеваютсектор II, а из сектора II — сектор III.Чашки инкубируют при 37 оС24 часа. При отсутствии роста на кровяном агаре инкубацию пролонгируют до 3 суток.Учет результатов проводят по специальнойтаблице.

Уроки антибиотической истории

Превращая, по немецкому выражению, нужду в добродетель, история развития антибиоза как теории сумела из эмпирических наблюдений и взглядов извлечь и отточить до совершенства свое биологическое и диалектическое преимущество.

Микозы – заболевания, причиной которых являются эукариотные микроорганизмы, относящиеся к царству грибов.

Акушерство, гинекология, репродуктивная медицина

Применение препарата Микогал для лечения вульвовагинитов у беременных

Вульвовагиниты у беременных в настоящее время регистрируются достаточно часто – в 12-58% случаев по данным разных авторов.

Антибиотикоассоциированные диареи: современный взгляд на проблему

В связи с широким применением в клинической практике антимикробных препаратов на современном этапе все большее внимание уделяется рациональным подходам к назначению антибактериальной терапии. Читать дальше

Антибактериальная терапия: проблемы и решения

Антибактериальная терапия: проблемы и решения

12-13 февраля 2004 года г. Харьков принимал участников VII Международной конференции «Клиническая микробиология и антибактериальная терапия: проблемы и решения». Выступления ведущих специалистов из России, Белоруссии и Украины..

Эффективность применения препарата Азимед у больных с внебольничной пневмонией

Пневмония относится к числу наиболее распространенных заболеваний человека и все еще остается серьезной медико-социальной проблемой. Так, заболеваемость пневмонией cреди взрослого населения в Украине в 1998–2000 годах составляла 4,3-4,7 на…

Антибиотикотерапия. По материалам I Международного медико-фармацевтического конгресса «Антибиотикотерапия – 2007»

Антибиотики являются наиболее многочисленной группой лекарственных средств. Однако ежегодно в медицинских изданиях появляются сведения о снижении чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам.

Акушерство, гинекология, репродуктивная медицина

Кагоцел в лечении воспалительных заболеваний женских половых органов смешанной этиологии

Воспалительные заболевания женских половых органов продолжают оставаться актуальной проблемой современного акушерства и гинекологии. Несмотря на значительное количество научных исследований и внедрение новых антибактериальных средств, их частота не имеет.

Принципы антибиотикопрофилактики и антибактериальной терапии при панкреонекрозе

Адекватное лечение хирургической инфекции предполагает решение двух диагностических задач: дифференциальной диагностики локальной и генерализованной форм инфекции.

В современной венерологии редко приходится прибегать к бактериологическому методу исследования.По моему мнению в России отмечается некоторое злоупотребление этим методом,связанное с коммерческим интересами лабораторий и нежеланием или незнанием врачами методов синдромной диагностики и лечения половых инфекций.Несомненными
показаниями к проведению бактериологического исследования являются два заболевания : воспалительные заболевания малого таза у женщин и простатит у мужчин.С юридической точки зрения бактериологическое подтверждение диагноза гонококковой инфекции требуется при обнаружении в мазке грамотрицательных диплококков у девочек, пожилых женщин и беременных .В некоторых случаях исследование необходимо
при хроническом,торпидном уретрите у мужчин и рецидивирующем вульвовагините у женщин.

Бак посев слизи из зева и носа позволяет провести качественную и количественную оценку состава микрофлоры и выявить:

  • возбудителей острых и хронических заболеваний (тонзиллиты, фарингиты, риносинуситы и т.д.);
  • клинически-значимое хроническое носительство стафилококков, пневмококков и т.д.

В норме, у здоровых людей определяются сапрофитная или условно-патогенная флора в низких титрах (менее 103 КОЕ/мл). Клинически значимыми считаются значения, превышающие 104КОЕ.

При полном отсутствии роста колоний рекомендуется пересдать анализ, так как подобные результаты могут быть ложноотрицательными (если были нарушены правила подготовки к забору материала).

Мазок из зева и носа на флору и чувствительность к антибиотикам позволяет выделить не только возбудителя инфекционно-воспалительного заболевания, но также и определить, какие антибактериальные препараты для него наиболее губительны.

Необходимо помнить, что за два дня до посева слизи запрещено использовать противомикробные спреи, полоскания, мази для носа. Также запрещено обрабатывать миндалины раствором Люголя.

Забор материала должен проводиться утром, натощак. Для получения достоверных результатов не рекомендовано чистить зубы и полоскать рот.

При заборе материала (взятие мазка из зева) необходимо, чтобы стерильный тампон, которым берут пробу, не соприкасался с языком и губами. Для этого, пациента просят широко раскрыть рот и прижимают язык шпателем. Соскоб берется только из глотки, с обеих миндалин. Если на миндалинах присутствуют видимые налеты, то соскоб берется в первую очередь с воспаленной области.

Посев из зева на микрофлору

Расшифровка посева из зева на флору и чувствительность к антибиотикам включает в себя заключение из бактериологической лаборатории с установленным видом возбудителя, его титрами и результатами антибиотикограммы (проводится, если рост бактериальных колоний в посеве был диагностически значимым).

Современная медицина в своем арсенале имеет огромное количество методик, что позволяют своевременно обнаружить самые тяжелые заболевания и своевременно начать их терапию. В гинекологии тоже имеются свои принципы диагностики, одним из самых надежных, считается цитология мазка. Процедура из цервикального канала представляет собой мазок из шейки матки, позволяющий оценить среду влагалища и обнаружить такие бактерии, как:

Забор из цервикального канала делают с помощью специальной стерильной палочки. Врач извлекает слизь, которую продуцируют местные железы и кусочки слущеных клеток слизистой оболочки цервикального канала. После извлечения биоматериала, его помещают в специально для этого подготовленную пробирку с питательной средой для бактерий.

Кишечная палочка и другие представители патогенной микрофлоры, будут поглощать из искусственно созданной среды необходимые для них полезные вещества, и размножаться. Это позволит в точности определить тип колонии и выбрать лекарство, к которому чувствителен тот или и ной штамм микроорганизмов

Важно не создать в пробирке губительные условия, которые приведут к гибели микроорганизмов, в противном случае врач не сможет определить провокатора заболевания, и не вылечит женщину

Слизь, что отправляется на цитологическое исследование после сбора помещается в закрытую пробирку и вставляется в термостат. Далее ее медсестра или же сама пациентка доставляет в лабораторию. В лабораторных условиях пробирку открывают и перемещают биоматериал в другую питательную среду, что находится в чашке Петри. В ней слизь находится 3-5 дней, только спустя это время, можно по отдельности выделить всех представителей патогенной форы, что есть в мазке.

Бактериологический анализ на флору у здорового человека покажет наличие полезных микроорганизмов, выполняющих защитные функции, препятствующих проникновению на слизистые оболочки носоглотки болезнетворных организмов.

При правильно проведенном анализе в зеве у здорового человека определяется незначительная концентрация условно-патогенной микрофлоры. Ее показатели не должны превышать результат от 103 до 104 КОЕ/мл.

Если анализ показывает превышение допустимого количества условно-патогенных микроорганизмов, это говорит о наличии у человека в носоглотке микрофлоры, являющейся причиной развития заболеваний ЛОР-органов.

Стафилококк ауреус, норма которого не должна превышать показатель в 104 КОЕ/мл, представляет собой условно-патогенный микроорганизм. Это означает, что он содержится в минимальном количестве на слизистой носоглотки и не провоцирует развития каких-либо заболеваний ЛОР-системы.

Превышение показателей нормы говорит о заражении стафилококком, который является причиной развития следующих заболеваний:

  • ангина и фарингит;
  • стоматит, тонзиллит;
  • синусит;
  • гингивит.

Активный рост стафилококка связан со снижением защитных функций иммунитета. В группе риска находятся дети, люди пожилого возраста. Лечение проводится препаратами антибактериального спектра действия.

Стрептококк — условно-патогенный микроорганизм. В минимальном количестве находится на слизистых оболочках носоглотки. Является провокатором ангины и скарлатины. Наличие повышенной концентрации патогенной микрофлоры в носу может стать причиной развития синусита бактериального типа.

На развитие инфекционного процесса в носоглотке указывает показатель стрептококка в 105 КОЕ/мл. Диагноз ставится по наличию у человека специфической симптоматической картины.

Определение в зеве концентрации грибка Кандида в 105 КОЕ/мл и более указывает на заражение пациента кандидозом. Заболевание развивается быстро, имеет выраженную и интенсивную симптоматическую картину, может спровоцировать развитие осложнений в органах дыхания. Нормой является полное отсутствие грибка в мазке из зева или максимально допустимое количество не выше 104 КОЕ/мл.

Нейссерия, или кишечная палочка, как и пневмококк, в незначительном количестве содержится в мазке из слизистой носоглотки.

Пневмококк является причиной развития следующих заболеваний:

  • пневмония;
  • бронхит;
  • сепсис органов дыхательной системы;
  • ларингит, фарингит, трахеит;
  • отит среднего уха;
  • остеомиелит.

Вызывает превышенная концентрация нейссерии и пневмококка ряд различных инфекционных и воспалительных заболеваний органов дыхательной системы.

В зависимости от количества патогенной микрофлоры в мазке из носоглотки назначается соответствующее лечение либо профилактические мероприятия, направленные на снижение концентрации патогена и уменьшение рисков развития заболеваний. Терапия заключается в применении препаратов антибактериального спектра действия.

Наиболее простым в проведении и распространённым в клинической практике, является метод диффузии стандартных бумажных дисков, смоченных антибактериальными препаратами, в чашку Петри, заполненную питательной средой. Диски выкладывают по поверхности агара, соблюдая расстояние два сантиметра от края чашки и друг от друга.

После того, как чаша постоит при комнатной температуре, её перемещают в термостат.

Время выдерживания в термостате для каждых представителей флоры разное. Стандартный срок инкубации составляет от трёх до пяти дней.

Далее, оценивается подавление роста тестируемых бактерий:

  • отсутствие задержки роста, указывает на полную устойчивость микроба к применяемому средству;
  • кольцо, вокруг бумажного диска, диаметром до 1.5 см, свидетельствует в пользу слабой реакции. Данный препарат, также не будет эффективен в лечении;
  • зона от 1.5 до 2.5 см, говорит о стандартной чувствительности и умеренной клинической эффективности;
  • сверхчувствительность к препарату, характеризуется зоной более 2.5 см.

Пациентке установлен диагноз: хламидийный цервицит. Для эмпирической терапии, в данном случае, рекомендованы Азитромицин или Доксициклин. Выбор остановлен на первом препарате. Начато лечение. Клинически состояние больной улучшилось.

Лекарство Диаметр кольца вокруг диска, в см Степень чувствительности
Доксициклина моногидрат 1.8 +
Азитромицин 2.9 ++
Эритромицин 2.7 ++
Левофлоксацин 1.3
Офлоксацин 1.4
Джозамицин 2.4 ++
Амоксициллин/клавуланат 1.0
Моксифлоксацин 1.4
Цефтриаксон 0.3

Расшифровка посева на микрофлору и чувствительность к антибиотикам:

Данные результаты показывают, что лечение было подобрано правильно.

  • возбудитель имеет высокую чувствительность в отношении Азитромицина, также для лечения можно было использовать Эритромицин и Джозамицин;
  • умеренная чувствительность к Докициклину допустимо использовать;
  • устойчивость к Левофлоксацину, Офлоксацину, Моксифлоксацину, Амоксициллина/клавуланату;
  • абсолютная резистентность к Цефтриаксону.

Определение восприимчивости к противомикробным средствам проходит аналогично дискодиффузионному методу, однако, вместо смоченных антибактериальными средствами дисков, в агар помещается полоска Е-теста. На ней размечены различные уровни концентрации антибиотика, начиная от максимальной и заканчивая минимальной.

Показатель минимальной концентрации подавления определяют в месте перекреста полоски теста и зоны подавления роста.

Этот метод является простым, но достаточно дорогостоящим, в связи с этим, диффузия дисков применяется чаще.

Всего техник существует несколько. Большинство из них осуществляются с применением следующих инструментов:

  • Микробиологическая петля.
  • Чашка Петри.
  • Специальная петля с пипетками,.
  • Шпатели.
  • Иглы.

Микробиологическая бактериальная петля является универсальной, так как применяется во всех техниках. Для жидких материалов используют петлю с пипетками.

Последние два инструмента применяют при посеве на чашку Петри. Ее считается особенной. Ее применяют специально для посева на плотную среду. Чашка представляет собой специальный лабораторный сосуд плоской формы небольшой высоты. Изготавливают ее из прозрачного полистирола или стекла. В диаметре чашка Петри может равняться 50-100 мл. Высота ее всегда примерно 15 мл. Чашка Петри может быть двух видов: стеклянной и пластмассовой. Первая предназначения для многоразового использования, а вторую можно применять только один раз. Пластмассовая чашка является более стерильной, так ее доставляют в лабораторию в специальной плотно закрытой упаковке. Стеклянную чашку перед проведением бактериологического исследования всегда тщательно стерилизуют.

Бакпосев проверяют в специальных средах, которые могут быть твердыми или жидкими. Если размножается жидкий материал, то лаборанты используют пробирки.

Техника бактериологического исследования состоит в следующем: чашку Петри приоткрывают, затем наносят на плотную среду биологический материал. Далее начинают наблюдать за ростом этого материала. Бактерии начинают равномерно увеличиваться в количестве, превращаясь в густую полноценную культуру. После чего они начинают делиться на колонии. Спустя некоторое число дней лаборант идентифицирует возбудителя. Параллельно с эти проводя проверку на чувствительность к антибиотикам.

Он предназначен для выявления таких элементов, как стафилококк, стрептококк, клебсиелла и других не менее опасных микроорганизмов. Но помимо вредных микроорганизмов, заключает в себе расшифровка и наличие благоприятных бактерий

Читайте также:  Какие анализы нужно принести гастроэнтерологу

Особое внимание уделяется не только их наличию, но и количеству

Бифидобактерии Полезные жители, оптимальное их количество должно состоять минимум из 95%, снижение его количества до 10*9 степени означает наличие дисбактериоза. Предназначение их, это обеспечение полноценной работы кишечника.
Лактобактерии Хорошим показателем является их наличие около 5%. При снижении этого процента, появятся запоры, спровоцированные нехваткой лактозы. Предназначены для выработки молочной кислоты, способствующей нормализации работы кишечника.
Кишечная палочка Занимает 1% микрофлоры. Если показатели ниже или выше нормы, то указывает на дисбактериоз и глисты. Препятствует размножению условно-патогенных микроорганизмов, поглощает кислород, тем самым обеспечивая существование бифидобактериям и лактобактериям.
Кокковые бактерии Оптимальное соотношение доходит до 25%. Увеличение соотношения говорит о нарушении микрофлоры, и возможном развитии инфекции в мочеполовой системе. Они всегда присутствуют в кишечнике.

Гемолитическая кишечная палочка
При норме ее нет в наличии. В случае наличия, указывает на присутствие нарушений в микрофлоре. Провоцирует появление кожных проблем, аллергии.
Является конкурентом бифидо и латкобактерий.
Золотистый стафилококк
Не должны обнаруживаться. Появление даже минимального количества, способно вызвать рвоту, понос.
Могут появиться за счет снижения в микрофлоре хороших микроорганизмов.
Патогенные бактерии
Являются вредными, из-за их появления происходит развитие инфекционного заболевания. При норме могут все же присутствовать, но иметь вялотекущую форму.
При анализе кала на дисбактериоз они являются первыми в списке результата.

Стоит заметить, что именно с помощью УПФ происходит определение точного вида бактерии, провоцирующей развитие инфекции.

Бактериологический посев на флору и антибиотикограмма играют важную роль в выявлении болезнетворных бактерий, их разновидности и чувствительности к противомикробным препаратам. Несмотря на то, что эти исследования дополняют друг друга, они имеют разные принципы и способы расшифровки результатов. Для начала давайте разберемся с тем, как проводят бакпосев.

Посев на флору и АЧ – это две тесно взаимосвязанные процедуры, поэтому за первой, как правило, сразу же следует вторая. Исключением являются только те случаи, когда в исследуемом биологическом материале не было обнаружено патогенных микроорганизмов.

Именно на их обнаружение нацелен бактериальный посев.

Бак посев на флору подразумевает культуральный посев образца биологического материала на питательную среду. При этом учитывается приблизительная группа микроорганизмов, которая, по мнению врача, привела к развитию заболевания у пациента.

Например, если речь идет о герпесвирусной инфекции, соскоб с везикулярной сыпью вживляется в куриный эмбрион. Если на протяжении нескольких суток положительная динамика роста вируса не наблюдается, результат считается отрицательным.

То же самое касается и других патогенных микроорганизмов и грибов. Для каждой группы используется особая среда, которая будет способствовать росту бактерий.

Следующим этапом анализа мочи (или другой биологической жидкости) на микрофлору является помещение питательной среды с проросшей культурой в специальный аппарат – термостат. Там емкость находится на протяжении определенного периода времени.

После окончания положенного отрезка времени емкость извлекается из термостата, затем лаборантом проводится визуальная оценка цвета, количества и плотности прорастания бактериальных колоний. При расшифровке и записи полученных данных используется такое понятие, как колониеобразующая единица, или КОЕ (1 бактериальная клетка). Именно по этому критерию исчисляется количество микроорганизмов в образце биологического материала пациента.

Расшифровка посева на флору и АЧ играет первостепенную роль в диагностике различных заболеваний. Различают 4 степени бактериальной обсемененности в образце биологического материала.

  1. При первой степени рост микрофлоры очень медленный, практически незаметный. Ее произрастание происходит исключительно в условиях жидкой среды.
  2. Вторая степень характеризуется рост микроорганизмов, относящихся только к одному определенному виду. При этом их число не превышает 10 колоний, и растут они только в довольно плотной среде.
  3. При третьей степени патогенная микрофлора произрастает в плотной твердой среде, но их число не превышает 100 колоний.
  4. При четвертой степени число колоний превышает 100 бактериальных клеток, произрастающих на твердой питательной среде.

Как понять эти данные? Первая и вторая степени свидетельствуют о том, что микрофлора несколько загрязнена, но это не является критическим показателем. Третья и четвертая степени указывают на наличие явного воспалительного или инфекционного процесса, протекающего в организме человека. При этом патологию вызвали именно те микроорганизмы, которые проросли в искусственно созданной лаборантами среде.

Расшифровка мазка из зева на микрофлору несколько отличается от той, которая рассчитана под другой биологический материал (сперму, влагалищные выделения, мочу и др.). Чтобы понять данные, записанные на специальном медицинском бланке, необходимо знать, какие показатели считаются самыми оптимальными.

Если лаборант указал на листе, что количество тех или иных бактерий не превышает 10 в 4 степени, это означает, что переживать не о чем. Это допустимая норма для любого пациента.

При превышении количества колоний показателей 10 в 5 степени, то это считается тревожным звонком, извещающим об активном росте условно патогенной микрофлоре в ротовой или носовой полости (в зависимости от того, для подтверждения какого диагноза был взят мазок из зева). Крайне редко лаборант может указать количество микроорганизмов 10 в 1 степени. Это говорит о том, что уровень бактерий слишком мал, чтобы вызвать ту или иную ЛОР патологию.

Это исследование представляет собой лабораторный метод определения лекарственного средства, оказывающего наибольшее воздействие на болезнетворные микроорганизмы, вызвавшие развитие данного конкретного заболевания.

Фармацевтический рынок предлагает огромный выбор лекарственных средств, как в плане эффективного воздействия, так и в плане стоимости. Поэтому, чтобы выбрать наиболее эффективное антибактериальное средство, назначают бактериологический посев.

Помимо этого, определение чувствительности необходимо во избежание развития устойчивости микроорганизмов к антибиотикам. Если пациент перед этим уже принимал антибиотики, а теперь нужно провести повторный курс лечения, то препарат необходимо заменить на другой. Подобный образ действия позволяет применить меньшую дозировку лекарства и предотвратить мутацию возбудителя. В отделениях гнойной хирургии антибиотики заменяют раз в несколько месяцев.

Тест на чувствительность бактерий необходим при возникновении у пациента аллергических реакций на определенную группу препаратов.

Анализ мочи на чувствительность к антибиотикам также проводится очень часто.

На сегодняшний день существует несколько основных методов определения чувствительности микроорганизмов к антибиотику. Самым распространенным и простейшим является диско-диффузионный способ, или метод дисков.

Преимуществом диффузионных методов является доступность для любой бактериологической лаборатории и простота тестирования. Однако стоимость Е-тестов высока, поэтому наиболее часто используют диско-диффузионный способ.

Как именно осуществляются анализ — посев на чувствительность к антибиотикам?

Помутнение бульона (рост бактерий) или поверхности агара говорят о том, что данной концентрации антибиотика недостаточно для подавления жизнеспособности микроорганизмов. Увеличение концентрации антибиотика влечет за собой ухудшение роста бактерий. После серии последовательных разведений антибиотика, первая наименьшая концентрация, где не наблюдается рост бактерий, считается минимальной подавляющей концентрацией (МПК), то есть достаточной для лечения.

Эти величины не являются постоянными и пересматриваются в зависимости от изменений чувствительности бактерий. Пересмотром критериев и их разработкой занимаются микробиологи и химиотерапевты, которые входят в специальные комитеты.

Как сдавать анализ на чувствительность к антибиотикам?

Что же означает это интересное понятие?

Клинически к чувствительным относят микроорганизмы, если во время лечения стандартной дозировкой антибиотика инфекции, вызванной данными бактериями, наблюдается хорошее терапевтическое действие.

Если достоверная клиническая информация отсутствует, то разделение на категории резистентности основывается на совокупности результатов, полученных in vitro, а также на концентрации антибиотика в сыворотке крови.

Какие из них являются резистентными?

Сдать анализ мочи на чувствительность к антибиотикам довольно просто.

Иногда резистентные микроорганизмы и штаммы с промежуточной устойчивостью объединяются в одну категорию устойчивых бактерий.

В определенных ситуациях при недостатке результатов тестирования чувствительности распространенными способами, применяют определение минимальной бактерицидной концентрации.

Расшифровка анализа мочи на чувствительность к антибиотикам интересует многих.

Говоря о минимальной бактерицидной концентрации (МБК), имеют в виду наименьшую концентрацию антибиотика, вызывающую при исследовании in vitro уничтожение 99,9% бактерий от изначального показателя на протяжении определенного временного промежутка.

Тестирование бактерий на чувствительность к антибиотику проводят с применением следующих биологических жидкостей:

Помимо этого, для того чтобы узнать местную чувствительность, проводят забор материала из уретры, верхних дыхательных путей или цервикального канала.

Интерпретация результатов микробиологического
исследования материалов, полученных при обследовании половых органов представляет определенные трудности,и, в значительной мере, зависит от опыта врача-лаборанта и правильности техники проведения исследования.В результате проводимого исследования определяется микроорганизм или микроорганизмы,по наличию которых можно предполагать,что он (они) являются причиной патологических изменений в мочеполовых органах.В большинстве случаев помимо качественного определения (наименования микроорганизма) проводят и количественную
оценку культуры.Наиболее простым методом оценки является определения степени роста:

I Очень скудный рост — рост только
на жидких средах; на плотной питательной среде рост отсутствует. II

На плотной питательной среде рост до 10 колоний микроорганизмов определенного вида.

На плотной питательной среде рост от 10 до 100 колоний.

На плотной питательной среде рост более
100 колоний.

В случае роста условно-патогенных микроорганизмов I и II степени роста чаще всего свидетельствуют о загрязнении, III и IV степени роста — об этиологической роли данного микроорганизма в воспалительном процессе.

Взятие мазка для проведения бактериологического анализа проводится в условиях лаборатории:

  1. Пациент садится на кушетку или стул.
  2. Для непосредственного забора мазка из ротовой полости пациент широко открывает рот.
  3. Медицинский работник с помощью специального шпателя прижимает к нижней челюсти язык. Берет образец микрофлоры ватным тампоном.
  4. Тампон сразу же помещается в стерильную пробирку, которая плотно закрывается крышкой.

Процедура взятия мазка из горла не вызывает болезненных ощущений, но может спровоцировать рвотный рефлекс. Чтобы минимизировать процесс обратной перистальтики, человеку нужно правильно подготовиться к процедуре — ничего не есть и не пить.

Из носа проба биологического материала берется следующим образом: пациент садится на кушетку, запрокидывает голову назад. Кожный покров ноздрей перед процедурой дезинфицируется медицинским спиртом. Сначала лаборант вводит ватный тампон в одну ноздрю, прокручивает его по поверхности слизистых оболочек. Затем процедура повторяется другим стерильным ватным тампоном со следующей ноздрей.

источник

Анализ на чувствительность к антибиотикам является обязательным при возникновении у врача подозрений, что заболевание пациента имеет бактериальную природу. Это связано с тем, что медики пытаются контролировать назначение данных препаратов, чтобы не стимулировать мутации и не вызывать резистентность у микроорганизмов.

Анализ на чувствительность к антибиотикам – это лабораторный способ выявления препарата, который будет оказывать наибольшее действие на патогенную флору в данном конкретном случае болезни.

На данный момент антибактериальная терапия применяется достаточно широко там, где она нужна, а также в тех случаях, когда это совсем не обязательно, для перестраховки от возможных осложнений. Например, после кесарева сечения, лапароскопических операций, удаления конкрементов из почек или мочеточников и т. д.

Фармацевтическая промышленность может предложить широкий выбор препаратов как в плане цены, так и в плане действенности. Для того чтобы не «тыкать пальцем в небо» и назначить эффективный антибиотик, нужно провести посевы на чувствительность.

Перед тем как врач подберет терапию, пациенту необходимо сдать некоторые анализы. Посев на чувствительность к антибиотикам назначается, если необходимо определить лекарство, которое в данном случае будет наиболее уместно. Чаще всего это исследование назначается для лечения заболеваний, передающихся половым путем, или ЗППП. Для детей же необходимость в определении антибиотика – это обязательное условие.

Кроме того, определение чувствительности нужно, чтобы избежать устойчивости бактерий к лечению. Если пациента недавно лечили антибиотиками, и теперь вновь необходим повторный курс, то требуется замена препарата. Это позволит использовать меньшие дозы лекарства и не вызывать мутации у возбудителя. В гнойных хирургических отделениях антибиотики меняют каждые два-три месяца.

Данный анализ необходим еще в том случае, если на основную группу антибиотиков у больного возникает аллергическая реакция.

Анализ мочи на чувствительность к антибиотикам, и не только ее, можно провести несколькими способами. Первый из них – это метод дисков. Проводят его следующим образом. В чашку Петри заливают агар, а когда он застынет, специальным инструментом наносят исследуемый материал. Затем по поверхности агара раскладывают бумажные диски, пропитанные антибиотиками. После чашку закрывают и ставят в термостат. Постепенно диск погружается в желатин, а антибиотик диффундирует в окружающее пространство. Вокруг бумаги образуется зона «подавления роста». Чашки проводят в термостате двенадцать часов, затем их вынимают и измеряют диаметр вышеуказанной зоны.

Второй способ – это метод Е-теста. Он похож на предыдущий, но вместо бумажных дисков используют полоску, которая на своем протяжении в разной степени пропитана антибиотиком. После двенадцати часов экспозиции в термостате чашку Петри достают и смотрят, в каком месте зона подавления роста соприкасается с полоской бумаги. Это будет наименьшая концентрация препарата, которая необходима для лечения заболевания.

Достоинством этих тестов является быстрота и простота их проведения.

Анализ на флору и чувствительность к антибиотикам можно провести и другим способом. Этот метод основан на последовательном уменьшении концентрации антибиотика (от максимальной до минимальной) с целью определить, в какой из пробирок прекратится сдерживание роста бактерий.

Сначала подготавливают растворы препарата. Затем их вносят в жидкую среду с бактериями (бульон или агар). Все пробирки на ночь (то есть 12 часов) помещаются в термостат при температуре 37 градусов, а утром проводят анализ получившихся результатов. Если содержимое пробирки или чашки Петри мутное, это свидетельствует о росте бактерий и, следовательно, неэффективности антибиотика в данной концентрации. Первая пробирка, в которой визуально не будет определяться рост колоний микроорганизмов, будет считаться достаточной концентрацией для лечения.

Это разведение препарата принято называть минимальной подавляющей концентрацией (МПК). Она измеряется в миллиграммах на литр или микрограммах на миллилитр.

Анализ на чувствительность к антибиотикам нужно уметь не только правильно сделать, но и грамотно расшифровать. Основываясь на получаемых результатах, все микроорганизмы делят на чувствительные, умеренно резистентные и резистентные. Для того чтобы различать их между собой, используются условные пограничные концентрации препаратов.

Эти значения не являются постоянными и могут изменяться в зависимости от приспосабливаемости микроорганизмов. Разработкой и пересмотром этих критериев поручено заниматься химиотерапевтам и микробиологам. Одной из официальных структур такого рода является Национальный комитет по клиническим лабораторным стандартам США. Разработанные ими стандарты признаны во всем мире для использования в оценке активности антибиотиков, в том числе для рандоминизированных многоцентровых исследований.

Различают два подхода к оценке результатов анализа на чувствительность к антибиотикам: клинический и микробиологический. Микробиологическая оценка ориентируется на распределение эффективных концентраций антибиотика, а клиническая — на качество антибактериальной терапии.

Анализ — определение чувствительности антибиотикам — назначается с целью выявить чувствительные и устойчивые микроорганизмы.

Чувствительными называются возбудители, которые поддаются лечению антибиотиками в средней терапевтической концентрации. Если достоверная информация о категории чувствительности микроорганизма отсутствует, то учитываются данные, полученные в условиях лаборатории. Они совмещаются со знаниями о фармакокинетике используемого препарата, и после синтеза данной информации делается вывод о восприимчивости бактерий к лекарству.

К резистентным, то есть устойчивым, микроорганизмам относятся те бактерии, которые продолжают вызывать заболевания даже при использовании максимальных концентраций лекарственных веществ.

Промежуточную резистентность устанавливают в том случае, если заболевание в процессе лечения может иметь несколько исходов. Выздоровление пациента возможно в случае использования высоких доз антибиотиков либо в случае прицельного накапливания лекарства в месте инфекции.

Анализ на микрофлору и чувствительность к антибиотикам определяет такой показатель, как минимальная бактерицидная концентрация, или МБК. Это самая низкая концентрация препарата, которая в лабораторных условиях вызывает элиминацию практически всех микроорганизмов в течение двенадцати часов.

Знание этого показателя врачи используют, когда назначают терапию не бактерицидными, а бактериостатическими лекарственными средствами. Или в случаях, когда стандартная антибактериальная терапия оказывается неэффективной. Чаще всего этот анализ заказывают для больных с бактериальным эндокардитом, остеомиелитом, а также при оппортунистических инфекциях.

Анализ на чувствительность к антибиотикам может проводиться с использованием биологических жидкостей:

Кроме того, для определения местной чувствительности производят забор мазков из уретры, цервикального канала и верхних дыхательных путей.

Бак. анализ на чувствительность к антибиотикам не требует от пациентов существенной подготовки, но некоторые ограничения все-таки есть.

  1. Для исследования используется средняя порция утренней мочи, которая собирается в стерильную посуду. Перед этим пациент обязательно должен осуществить туалет наружных половых органов и рук.
  2. Грудное молоко собирается перед кормлением ребенка. Первая порция сливается, а затем в стерильный контейнер сцеживается несколько миллилитров с каждой груди.
  3. Перед сдачей мазка из носоглотки стоит воздержаться от приема пищи в течение пяти-шести часов.
  4. В случае взятия мазка из половых путей, рекомендуют воздерживаться от половых контактов в течение пары дней.
Читайте также:  Какие анализы сдать при кровотечение

На сегодняшний день не существует клинических или лабораторных методов, которые бы со стопроцентной вероятностью могли предсказать эффект от антибактериальной терапии. Но в то же время определение чувствительности бактерий к лекарственным веществам может быть ориентиром для врачей в вопросах выбора и коррекции лечения.

источник

Если у лечащего врача возникнут подозрения о наличии бактериальной природы заболевания пациента, то он обязательно попросит сдать анализ на чувствительность к антибиотикам. Данная процедура помогает представителям медицины назначать правильные лекарственные препараты, поскольку микроорганизмы могут мутировать и развить к ним резистентность.

Это исследование представляет собой лабораторный метод определения лекарственного средства, оказывающего наибольшее воздействие на болезнетворные микроорганизмы, вызвавшие развитие данного конкретного заболевания.

Фармацевтический рынок предлагает огромный выбор лекарственных средств, как в плане эффективного воздействия, так и в плане стоимости. Поэтому, чтобы выбрать наиболее эффективное антибактериальное средство, назначают бактериологический посев.

В целях подбора правильной терапии врач рекомендует пациенту пройти обследование. Анализ на чувствительность к антибиотикам назначают для определения самого эффективного и уместного лекарства в данном случае. Наиболее часто это необходимо для лечения инфекций, передающихся половым путём. Также определение самого эффективного антибиотика является обязательным условием при терапии заболеваний у детей.

Помимо этого, определение чувствительности необходимо во избежание развития устойчивости микроорганизмов к антибиотикам. Если пациент перед этим уже принимал антибиотики, а теперь нужно провести повторный курс лечения, то препарат необходимо заменить на другой. Подобный образ действия позволяет применить меньшую дозировку лекарства и предотвратить мутацию возбудителя. В отделениях гнойной хирургии антибиотики заменяют раз в несколько месяцев.

Тест на чувствительность бактерий необходим при возникновении у пациента аллергических реакций на определенную группу препаратов.

Анализ мочи на чувствительность к антибиотикам также проводится очень часто.

На сегодняшний день существует несколько основных методов определения чувствительности микроорганизмов к антибиотику. Самым распространенным и простейшим является диско-диффузионный способ, или метод дисков.

Для определения чувствительности диско-диффузионным способом по поверхности застывшего агара в чашке Петри распределяют исследуемый материал (бактериальную суспензию). После этого туда помещают картонные диски, пропитанные определенными антибиотиками. Затем бакпосев закрывают и размещают в термостате при температуре 35-37°С на 12-18 часов. Диффузия антибиотика влечет за собой формирование зоны подавления роста бактерий вокруг бумажных дисков. По истечении указанного времени результат проверяют путём замера диаметра этой зоны.

Второй анализ на чувствительность к антибиотикам – это Е-тест. Он проводится аналогично предыдущему способу, только вместо картонных дисков применяют полоску Е-теста, которая содержит градиент степени пропитки антибиотиком от минимальной к максимальной. После двенадцатичасовой инкубации в термостате специалист достает чашку и оценивает эффективность каждого вида антибиотика, просматривая конкретное место соприкосновения зоны подавления роста бактерий и шкалу полоски. Такова будет самая минимальная концентрация лекарства, необходимого для лечения заболевания.

Преимуществом диффузионных методов является доступность для любой бактериологической лаборатории и простота тестирования. Однако стоимость Е-тестов высока, поэтому наиболее часто используют диско-диффузионный способ.

Как именно осуществляются анализ — посев на чувствительность к антибиотикам?

Данные методы основываются на применении последовательных двойных разведений антибактериального препарата от максимальной до минимальной концентрации. При этом различную концентрацию антибиотика распределяют по жидкой питательной среде (бульону) или агару. После этого бактериальную суспензию помещают на поверхность агара в чашке или в бульон с антибиотиками. По истечении двенадцатичасовой инкубации в термостате при температуре 35-37°С, специалисты анализируют полученные результаты.

Помутнение бульона (рост бактерий) или поверхности агара говорят о том, что данной концентрации антибиотика недостаточно для подавления жизнеспособности микроорганизмов. Увеличение концентрации антибиотика влечет за собой ухудшение роста бактерий. После серии последовательных разведений антибиотика, первая наименьшая концентрация, где не наблюдается рост бактерий, считается минимальной подавляющей концентрацией (МПК), то есть достаточной для лечения.

На основании полученных данных (значения МПК или диаметра зоны подавления роста) бактерии разделяют на чувствительные, с промежуточной резистентностью и резистентные. Для разделения данных категорий резистентности (или чувствительности) применяют пограничные концентрации антибиотика.

Эти величины не являются постоянными и пересматриваются в зависимости от изменений чувствительности бактерий. Пересмотром критериев и их разработкой занимаются микробиологи и химиотерапевты, которые входят в специальные комитеты.

Всего существует два метода интерпретации полученных результатов анализа чувствительности: клинический и микробиологический. Последний основывается на тестировании значений распределения концентрации антибиотика, подавляющего жизнедеятельность микроорганизмов. Клинический метод интерпретации основывается на оценивании эффективного действия антибактериальной терапии.

Как сдавать анализ на чувствительность к антибиотикам?

Что же означает это интересное понятие?

Клинически к чувствительным относят микроорганизмы, если во время лечения стандартной дозировкой антибиотика инфекции, вызванной данными бактериями, наблюдается хорошее терапевтическое действие.

Если достоверная клиническая информация отсутствует, то разделение на категории резистентности основывается на совокупности результатов, полученных in vitro, а также на концентрации антибиотика в сыворотке крови.

Какие из них являются резистентными?

Микроорганизмы относят к устойчивым, когда во время лечения заболеваний, вызванного данными бактериями, от терапии не наблюдается никакого положительного эффекта, даже при применении максимальной дозировки антибиотика. Данные бактерии обладают механизмом резистентности.

Сдать анализ мочи на чувствительность к антибиотикам довольно просто.

Когда говорят о промежуточной резистентности бактерий, то подразумевают случай, когда заболевание, вызванное этими штаммами, имеет различный терапевтический исход. Терапия может оказаться успешной при применении повышенной дозировки антибиотика, или если инфекция локализуется в месте, где накапливается самая высокая концентрация антибактериального препарата.

Иногда резистентные микроорганизмы и штаммы с промежуточной устойчивостью объединяются в одну категорию устойчивых бактерий.

В определенных ситуациях при недостатке результатов тестирования чувствительности распространенными способами, применяют определение минимальной бактерицидной концентрации.

Расшифровка анализа мочи на чувствительность к антибиотикам интересует многих.

Говоря о минимальной бактерицидной концентрации (МБК), имеют в виду наименьшую концентрацию антибиотика, вызывающую при исследовании in vitro уничтожение 99,9% бактерий от изначального показателя на протяжении определенного временного промежутка.

Показатель МБК применяют во время лечения антибиотиками, способными оказывать бактериостатическое действие, или если у особой категории пациентов отсутствует эффект от антибактериальной терапии. К частным случаям применения МБК относят остеомиелит, бактериальный эндокардит или генерализованные инфекции у больных с ослабленным иммунитетом.

Тестирование бактерий на чувствительность к антибиотику проводят с применением следующих биологических жидкостей:

Помимо этого, для того чтобы узнать местную чувствительность, проводят забор материала из уретры, верхних дыхательных путей или цервикального канала.

В заключении хотелось бы сказать, что в нынешнее время не существует способов, которые с абсолютной достоверностью позволили бы предсказать потенциальный клинический эффект антибиотиков при терапии заболеваний, вызванных проникновением в организм болезнетворных микроорганизмов. Однако результаты определения чувствительности, могут стать отличным ориентиром врача для подбора и корректировки антибактериального лечения.

Мы рассмотрели то, как проводится анализ на чувствительность к антибиотикам.

источник

Сегодня все большую популярность приобретает анализ на чувствительность к антибиотикам. Микрофлора человека довольно разнообразна, представлена большим количеством микроорганизмов, в различных биотопах.

Фармацевтические компании разработали большое количество антибактериальных средств, антибиотиков, которые позволяют поддерживать нормальное соотношение и численность микробных популяций. С началом эры антибиотиков удалось вылечить многие заболевания, которые раньше считались смертельными. Но микроорганизмы также стремятся к выживанию, постепенно адаптируются к действию антибактериальных препаратов. Со временем многие из них обрели устойчивость по отношению ко многим лекарственным средствам, закрепили ее в генотипе и стали передавать из поколения к поколению. Таким образом, новые микроорганизмы, уже изначально не чувствительны к определенным препаратам, и их назначение может быть неэффективно. Фармацевты разрабатывают все новые и новые средства, добавляя в них новые активные компоненты, меняя основную формулу. Но постепенно к ним также вырабатывается устойчивость.

Причина повышенной устойчивости микрофлоры ко многим препаратам, и даже их аналогам зачастую кроется в неправильном и бесконтрольном приеме антибиотиков. Врачи назначают антибиотики и их комбинации при различных бактериальных заболеваниях. При этом не проводится предварительная оценка того, насколько эффективными они окажутся, не подбирается оптимальная дозировка, что очень важно как для лечения, так и для предотвращения механизмов развития дальнейшей устойчивости. Многие ошибочно назначают антибактериальную терапию даже при вирусных заболеваниях, что неэффективно, поскольку антибиотик не действует против вирусов.

Терапия зачастую назначается без предварительной проверки чувствительности, подбор действующего средства и требуемой его дозировки по отношению к каждому конкретному заболеванию и биотопу не производится. Поскольку антибиотики назначаются «в слепую», часто наблюдаются случаи, когда они не проявляют никакой активности по отношению к тем микроорганизмам, которые вызвали заболевание и численность которых нужно снизить. Вместо этого они оказывают воздействие на других представителей микрофлоры, в результате чего развивается дисбактериоз, который является также довольно опасной патологией и может привести к серьезным последствиям. Особенно опасны случаи, когда антибиотик уничтожает нормальную микрофлору, которая призвана защищать организм и поддерживать его нормальное функционирование. Также бывают случаи, когда назначается слишком большая или слишком маленькая дозировка препарата.

Пациенты также безответственно относятся к лечению. Зачастую лечение прекращают после того, как симптомы заболевания перестали беспокоить. При этом полный курс до конца многие предпочитают не заканчивать. Это является одним из факторов, которые способствуют развитию устойчивости у бактерий. Полный курс рассчитан на то, чтобы полностью патогенную микрофлору. Если курс не закончен, она убита не полностью. Те микроорганизмы, которые выжили, подвергаются мутациям, вырабатывают механизмы, которые обеспечивают им защиту от данного средства, и передают ее следующим поколениям. Опасность состоит в том, что устойчивость вырабатывается не только по отношению к данному конкретному препарату, но и ко всей группе препаратов.

Поэтому на сегодня одним из наиболее эффективных средств рациональной терапии и профилактики устойчивости, является предварительное определение чувствительности к назначаемому средству и подбор его оптимальной дозировки.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9]

В норме такой анализ должен проводить во всех случаях, когда требуется антибактериальная терапия. Исходя из основных законов антибиотикотерапии, любой антибиотик может быть назначен только после того, как проведена предварительная оценка чувствительности микрофлоры к данному средству, в лабораторных условиях определена оптимальная концентрация действующего вещества. На практике, в силу различных причин и обстоятельств, такое исследование перед началом лечения не проводится, и врач вынужден подбирать лекарственное средство «наугад».

Сегодня проверка чувствительности проводится только в тех случаях, когда у врача возникают большие сомнения в отношении того, будет ли назначенное средство эффективно, в случаях длительного отсутствия эффекта от препарата, а также при повторном использовании одного и того же средства в ограниченный промежуток времени. Часто чувствительность определяют при лечении заболеваний, передающихся половым путем. Многие специалисты обращаются к анализу в случае возникновения побочных эффектов, аллергических реакций, и когда нужно заменить один препарат на другой.

Также часто к анализу обращаются для подбора лекарственных средств при антибактериальной терапии в восстановительный период после операций, лапароскопических вмешательств, удаления органов. В отдлениях хирургии, гнойной хирургии такое исследование просто необходимо, поскольку здесь достаточно быстро развивается устойчивость.кроме того, развиваются сверхустойчивые «внутрибольничные»Многие платные клиники подходят к назначению лекарственных препаратов со всей ответственностью – только после проверки чувствительности. Во многих случаях бюджет государственных учреждений просто не позволяет проводить подобные исследования для каждого пациента, которому требуется антибактериальная терапия.

[10], [11], [12], [13], [14], [15]

Подготовка к исследованию не требует никаких специальных мер. Она такая же, как и при проведении любых анализов. За несколько дней до исследования нужно воздержаться от приема алкоголя. Утром, в день забора материала, в большинстве случаев кушать и пить нельзя. Но все зависит от типа анализа. Материал для исследования может быть различным, в зависимости от заболевания.

При заболеваниях горла, дыхательных путей, берут мазок из горла, носа. В венерологии, гинекологии, урологии, берут на анализ мазки из половых органов, кровь. При заболеваниях почек, часто требуется моча. При заболеваниях ЖКТ, некоторых инфекционных заболеваниях, исследуют испражнения, рвотные массы. Иногда может исследоваться грудное молоко, выделения из носа, глазной секрет, слюна, мокрота. При тяжелых патологиях и подозрении на инфекционный процесс, исследуется даже спинномозговая жидкость. Спектр достаточно широк.

Особенности забора материала определяются его биологической принадлежностью. Так, моча, кал, собирается утром в чистую емкость или в специальный контейнер для биологического материала. Забор грудного молока осуществляют до кормления. На исследование берется средняя порция. Мазок забирается при помощи специального тампона, которым проводят по слизистым, затем опускают в пробирку с подготовленной средой. Кровь забирается в пробирку, из пальца или вены. При заборе мазки из уретры или влагалища, рекомендуется в течение нескольких дней воздержаться от половых контактов.

При заборе биологического материала на исследование необходимо в первую очередь обеспечить правильность забора и стерильность. Но это в большинстве случаев является заботой медицинского персонала, пациенту по этому поводу беспокоиться не стоит. Чаще всего к подобным исследованиям обращаются гинекологи и урологи, на втором месте – отоларингологи при лечении заболеваний носоглотки и глотки, верхних дыхательных путей.

[16], [17], [18], [19], [20]

Собранный биологический материал в стерильных условиях доставляется в лабораторию, где и проводятся дальнейшие исследования. В первую очередь производится его первичный посев на универсальные питательные среды. Также берется часть материала для микроскопического исследования. Готовится мазок для микроскопии, проводится исследование, с помощью которого можно определить примерную картину, предполагать какие микроорганизмы присутствуют в образце. Это дает возможность подобать наиболее оптимальные среды для дальнейшего исследования и идентификации микроорганизмов. Также на микроскопии могут быть заметны признаки, указывающие на воспаление, онкологический процесс.

В течение нескольких дней в чашке Петри вырастают колонии микроорганизмов. Затем берут несколько колоний, пересеивают их на селективные питательные среды, которые дают возможность определить примерную группу микроорганизмов. Инкубируют в течение нескольких суток в условиях термостата, затем приступают к идентификации (определению вида микроорганизмов). Идентификацию проводят при помощи специальных биохимических и генетических тестов, определителей. Дополнительно могут проводиться иммунологические следования.

После того, как основной возбудитель выделен, проводя т оценку его чувствительности к антибиотикам. Для этого существует несколько методов. Чаще всего пользуются методом серийных разведений, или диско-диффузионным методом. Методики подробно прописаны в микробиологических справочниках, методических указаниях и стандартах лабораторий.

Суть диско-диффузионного метода состоит в том, что производится засев микроорганизмов, которые были идентифицированы на питательную среду, сверху накладываются специальные диски, пропитанные антибиотиками. В течение нескольких суток посев инкубируют в термостате, затем измеряют результаты. Оценивают степень задержки роста бактерий каждым антибиотиком. Если бактерия чувствительна к антибиотику, вокруг диска образуется «зона лизиса», в котором бактерии не размножаются. Их рост замедленный, или вовсе отсутствует. По диаметру зоны задержки роста определяют степень чувствительности микроорганизма к антибиотику и формулируют дальнейшие рекомендации.

Метод серийных разведений является наиболее точным. Для этого микроорганизмы высеивают на жидкие питательные среды, добавляют антибиотик, разбавленный по системе десятичных разведений. После этого пробирки ставят на несколько суток в термостат для инкубирования. Чувствительность к антибиотикам определяют по степени роста бактерий в питательном бульоне с добавлением антибиотиком. Регистрируют минимальную концентрацию, при которой еще происходит рост микроорганизмов. Это и есть минимальная дозировка препарата (необходим пересчет из микробиологических единиц на действующее вещество).

Это стандартные микробиологические методики, лежащие в основе любого исследования. Они подразумевают ручное выполнение всех манипуляций. Сегодня многие лаборатории оснащены специальным оборудованием, которое выполняет все эти процедуры в автоматическом режиме. Специалисту, работающему с таким оборудованием, необходимо только умение работать с оборудованием, соблюдение правил безопасности и стерильности.

Необходимо учитывать, что показатели чувствительности в условиях лаборатории и в условиях живого организма резко отличаются. Поэтому человеку назначается большая дозировка, чем определилась в ходе исследования. Это связано с тем, что в организме нет столь оптимальных условий для роста бактерий. В лаборатории создаются «идеальные условия». Часть препарата может быть нейтрализовано действием слюны, желудочного сока. Часть нейтрализуется в крови антителами и антитоксинами, которые вырабатываются иммунной системой.

Для начала производят забор биологического материала. Для этого нужно собрать среднюю порцию утренней мочи и доставить ее в лабораторию. Важно соблюдать стерильность и за несколько дней до анализа не принимать антибиотиков, иначе можно получить ложноотрицательный результат. После этого производится стандартный посев, суть которого состоит в выделении чистой культуры возбудителя и подборе антибиотика, который будет оказывать на него оптимальное бактерицидное воздействие. Определяется необходимая концентрация антибиотика.

Анализ мочи чаще всего назначают при подозрении на инфекционно-воспалительный процесс в мочеполовой системе, при иммунодефицитах и нарушении обмена веществ. В норме моча является стерильной жидкостью. Продолжительность такого исследования составляет 1-10 суток и определяется скоростью роста микроорганизма.

Читайте также:  Географический язык какие анализы сдать

Исследование подразумевает выделение микроорганизма, который является возбудителем в чистую культуру. Иногда таких микроорганизмов может быть несколько (микст-инфекция). Некоторые микроорганизмы способны формировать биопленки, которые являются своеобразными «микробными сообществами». Выживаемость биопленок намного выше, чем одиночных микроорганизмов, или ассоциаций. Кроме того, не все антибиотики способны оказывать воздействие на биопленку, и проникать внутрь нее.

Для определения возбудителя, его выделения в чистую культуру, производится посев. В ходе исследования производится несколько посевов, в различные питательные среды. Затем выделяется чистая культура, определяется е биологическая принадлежность, и определяется чувствительность к антибактериальным препаратам. Производится подбор оптимальной концентрации.

Для исследования может использоваться любой биологический материал, в зависимости от заболевания, локализации инфекционного процесса. Продолжительность определяется скоростью роста микроорганизмов.

[21], [22], [23], [24], [25], [26]

Кал исследуют при различных желудочных и кишечных заболеваниях, при подозрении на инфекционный процесс, бактериальной интоксикации, пищевых отравлениях. Целью исследования является выделение возбудителя и подбор к нему оптимальных антибактериальных препаратов, которые будут оказывать высокую активность. Важность этого типа исследования состоит в том, что можно подобрать препарат, который будет оказывать воздействие только на возбудителя заболевания, и не будет воздействовать на представителей нормальной микрофлоры.

Первым и весьма значимым этапом является сбор кала. Его нужно собрать в специальный стерильный контейнер, в утренние часы. Хранить следует не более 1-2 часов. Женщинам при наличии менструальных выделений, следует отложить анализ до окончания, поскольку точность результатов изменится. Материал доставляется на исследование в лабораторию. Анализ проводится с применением стандартной микробиологической техники посева и выделения чистой культуры. Дополнительно проводится антибиотикограмма. По заключению производится разработка рекомендаций, определяется дальнейшая схема исследования.

[27], [28], [29], [30]

Материалом для исследования служит кал, взятый непосредственно после акта дефекации. Нормальная микрофлора ЖКТ состоит из представителей нормальной флоры и нескольких представителей патогенной флоры. Их видовой состав, количество и соотношение строго обозначены и держатся в пределах допустимой нормы. Если такое соотношение нарушается, развивается дисбактериоз. Он может проявляться по-разному. Могут развиваться инфекционные заболевания, если резко увеличивается количество патогенной микрофлоры. Если количество какого-либо микроорганизма резко снижается, свободное место занимают другие представители, которые не свойственны ЖКТ, или же патогенные. Часто свободное место занимает грибок, тогда развиваются различные грибковые поражения, кандидозы.

Для того чтобы определить количественный и качественный состав микрофлоры кишечника, проводят анализ кала на дисбактериоз. Условно всех представителей, обитающих в кишечнике, разделяют на три группы: патогенные, условно-патогенные и непатогенные. Соответственно, анализ состоит из трех частей. Каждая группа микроорганизмов имеет свои потребности в источнике питания, энергии. Для каждой группы нужны отдельные питательные среды и селективные добавки.

Сначала проводят микроскопию и первичный посев. Затем после посева отбирают наиболее крупные колонии, по морфологическим признакам похожие на представителей каждой группы. Производят пересев на селективные среды. После того, как микроорганизмы выросли, производят их идентификацию и сразу же проводят тест на чувствительность к антибиотиком. Применяются стандартные микробиологические методы.

Исследование группы патогенных микроорганизмов, кроме стандартных исследований, подразумевает определение бактерий тифа, паратифа и дизентерии. Также определяется, является ли человек носителем этих микроорганизмов. Комплексное исследование на дисбактериоз включает также исследование представителей группы бифидобактерий и лактобактерий. Исследование занимает порядка недели и зависит от скорости роста микроорганизмов.

[31], [32], [33], [34], [35], [36], [37], [38], [39]

При кишечной инфекции для лечения часто применяют бактериофаги вместо антибиотиков. Бактериофаги представляют собой вирусы бактерий, которые восприимчивы только к ним. Они находят бактерию, с которой комплементарны, проникают в нее и постепенно разрушают бактериальную клетку. В результате инфекционный процесс прекращается. Но не все бактерии чувствительны к бактериофагам. Для того чтобы проверить, будет ли проявлять данный бактериофаг активность по отношению к представителям микрофлоры, нужно провести анализ.

Материалом исследования служит кал. Анализ следует доставить в лабораторию в течение часа, иначе его проведение будет невозможным. Необходимо проводить анализ в нескольких повторностях. Изначальная методика сходна с таковой при определении чувствительности к антибиотикам. Сначала проводится предварительная микроскопия образца, затем – первичный посев на универсальные питательные среды. Затем на селективных питательных средах производят выделение чистой культуры.

Основная работа ведется с чистой культурой. Их обрабатывают различными видами бактериофагов. Если колония растворяется (лизируется), это указывает на высокую активность бактериофага. Если же лизис происходит частичный – бактериофаг функционирует умеренно. При отсутствии лизиса можно говорить об устойчивости к бактериофагу.

Приеимущество фаговой терапии состоит в том, что бактериофаги не оказывают воздействие на организм человека, не вызывают побочного эффекта. Они прикрепляются к определенным видам бактерий и лизируют их. Недостатком является то, что они очень специфичны и оказывают избирательное действие, и не всегда могут прикрепиться к бактериям.

[40], [41], [42], [43], [44], [45], [46], [47], [48]

Анализ представляет собой исследование отделяемого нижних дыхательных путей. Целью является определение вида микроорганизмов, которые выступают в качестве возбудителя заболевания. Также проводится антибиотикограмма. При этом определяют чувствительность возбудителя к антибиотикам, подбирают оптимальную концентрацию. Применяется при заболеваниях дыхательных путей.

Исследование мокроты и другого содержимого легких и бронхов необходимо для выбора схемы терапии, для дифференциации различных диагнозов. Применяется для того, чтобы подтвердить или опровергнуть наличие туберкулеза.

Для начала необходимо получить биологический материал. Он может быть получен при кашле, путем отхаркивания, или путем забора из трахеи при бронхоскопии. Существуют специальные аэрозоли, которые способствуют отхаркиванию. Перед взятием мокроты рот следует прополоскать водой, что позволит снизить степень бактериальной контаминации ротовой полости. Сначала рекомендуется сделать 3 глубоких вдоха, произвести продуктивный кашель. Мокрота также может быть взята методом аспирации из трахеи. При этом в трахею вводится специальный катетер. При бронхоскопии вводится в полость бронхов бронхоскоп. При этом слизистая смазывается анестетиком.

Затем материал поставляют в лабораторию на исследование. Производят посев по стандартной схеме, микроскопия. Затем выделяют чистую культуру, и дальнейшие манипуляции проводят с ней. Ставится антибиотикограмма, которая дает возможность выявить спектр бактериальной чувствительности и подобрать оптимальную дозировку.

При подозрении на туберкулез исследуются утреннюю мокроту в течение трех дней. При исследовании на туберкулез результат будет готов через 3-4 недели. Поскольку микобактерии туберкулеза, которые являются возбудителем заболевания, растут очень медленно.

В норме должны быть обнаружены представители нормальной микрофлоры дыхательных путей. Также необходимо учитывать, что при сниженном иммунитете показатели нормальной микрофлоры могут отличаться.

Представляет собой бактериологическое исследование эякулята спермы с дальнейшим подбором чувствительных антибиотиков и их концентраций. Чаще всего проводится при лечении бесплодия, и других заболеваний мужской половой системы. В том случае, если заболевание сопровождается инфекционным процессом. Основной причиной мужского бесплодия является в большинстве случаев именно инфекция. Обычно изначально проводят спермограмму. По результатам устанавливают оплодотворяющую способность спермы. Если в этом анализе обнаружено большое количество лейкоцитов, можно говорить о воспалительном процессе. При этом обычно сразу же назначают микробиологический анализ, поскольку воспаление почти всегда сопровождается инфекцией. Уже на основании полученных результатов подбирают соответствующую терапию. Исследование обычно назначает андролог.

Также поводом для проведения анализа служит простатит, венерические заболевания. Назначают и в том случае, если у партнерши обнаружено венерическое заболевание.

В основе правильного анализа лежит, прежде всего, правильный забор биологического материала. Забирают материал в специальные сосуды с широким горлом. Температура хранения должна соответствовать температуре тела человека. В таком случае материал может храниться не более часа. В замороженном виде может храниться не более суток. Во время приема антибиотиков посев сдавать нецелесообразно, это меняет клиническую картину. Обычно посев сдают до того, как начат курс антибиотикотерапии. Либо прием лекарств прекратить за 2-3 дня до анализа.

Затем производят его посев на питательную среду. Инкубируют в термостате в течение 1-2 суток. После выделяют чистую культуру, затем проводят идентификацию, определяют чувствительность, а также тип и скорость роста каждой колонии. Чувствительность к антибиотикам определяется в случае выявления патогенных микроорганизмов. В среднем анализ делается 5-7 дней.

[49], [50], [51], [52], [53], [54], [55], [56], [57]

Существует множество тестов, при помощи которых можно определить иммунологическую чувствительность к различным веществам или патогенам. Раньше основным методом было проведение анализов, основанных на реакции агглютинации антител и антигенов. Сегодня эти анализы применяются все меньше, поскольку их чувствительность намного ниже, чем многие современные методики, например глютеновые тесты. Чаще всего в практике прибегают к слюнному тесту на глютен и анализу кала.

Тест на чувствительность к глютену применяется для диагностики различных расстройств кишечника. Основан на реакции иммунной системы. Если в кал добавить глютен, реакция происходит, либо отсутствует. Это расценивается как ложноположительный или ложноотрицательный результат. Положительный указывает на предрасположенность к колитам, высокую вероятность его развития. Также подтверждает целиакию.

Также можно проводить анализ на глютен с использованием слюны в качестве биологического материала. Можно измерять количество антител к глиадину. Положительный результат указывает на чувствительность к глютену. Это может указывать на высокую вероятность диабета. Если в обоих тестах результат положительный, можно подтвердить иабет или целиакию.

[58], [59], [60]

Анализ проводят при лечении инфекционных и воспалительных заболеваний урогенитального тракта, при подозрении на хламидиоз. Материалом для исследования служит соскоб из слизистой влагалища – у женщин, мазок из уретры – у мужчин. Забор производится в процедурном кабинете с использованием одноразового оборудования. Важно соблюдать стерильность. Перед забором материала следует воздержаться от интимной близости в течение 1-2 дней до начала исследования. Если у женщины менструация, забор материала производится спустя 3 дня после ее полного окончания.

Материал доставляют в лабораторию. Полный анализ включает предварительную микроскопию мазка. Это дает возможность визуально определить микрофлору по морфологическим признакам, правильно подобрать питательные среды. Содержание слизи, гноя, частичек эпителия, может прямо или косвенно указывать на развитие воспалительного процесса или злокачественное перерождение клеток.

Затем производят первичный посев. Культуру инкубируют в течение нескольких дней в условиях термостата, производят идентификацию по культуральным признакам. Затем производят пересев на селективные питательные среды, предназначенные для культивирования хламидий. Полученные колонии идентифицируют с использованием биохимических тестов. После определяют чувствительность к антибиотикам стандартными методами. Подбирают наиболее чувствительный антибиотик, его концентрацию. Для культивирования хламидий нужны специальные среды, разработанные именно для этого типа микроорганизмов, которые содержат все необходимые вещества и факторы роста.

Также можно проводить исследование биологическим методом. Для этого заражают возбудителем крыс. В некоторых лабораториях используется вместо крыс специально выращенная культура тканей. Это связано с тем, что хламидии являются внутриклеточными паразитами, и для их культивирования нужны специальные условия. Затем определяют микроорганизмы методом ПЦР. Для определения чувствительности производят пересадку на селективную питательную среду для хламидий, через несколько суток производят учет результатов. О резистентности или чувствительности судят по подавлению инфекционного процесса в клетках.

[61], [62], [63], [64], [65], [66], [67], [68], [69]

В среднем анализ делается в течение 5-7 дней. Некоторые анализы делаются и дольше. Например, при диагностике туберкулеза результатов приходится ждать от 3 недель до месяца. Все зависит от скорости роста микроорганизмов. Часто сотрудникам лаборатории приходится сталкиваться со случаями, когда, пациенты просят сделать анализ быстрее. И даже предлагают «доплату» за срочность. Однако здесь нужно понимать, что от действий лаборанта в данном случае ничего не зависит. А зависит только от того, насколько быстро растет микроорганизм. Каждый вид имеет свою, строго определенную скорость роста.

Показателей абсолютной универсальной нормы для всех анализов не существует. Во-первых, для каждого биотопа эти показатели могут отличаться. Во-вторых, они индивидуальны для каждого микроорганизма. То есть показатели нормы одного и того же микроорганизма, скажем, для горла и кишечника отличается. Так, если в горле преобладает стафилококк как представитель нормальной микрофлоры, то в кишечнике преобладает кишечная палочка, бифидо- и лактобактерии. Также могут существенно отличаться показатели для одного и того же микроорганизма в разных биотопах. Например, кандиды в норме могут содержаться в определенном количестве в урогенительной микрофлоре. В ротовой же полости в норме они не содержатся. Попадание кандид в ротовую полость может указывать на их искусственный занос их из естественной среды обитания.

Моча, кровь, спинномозговая жидкость – это биологические среды, которые в норме должны быть стерильными, то есть не должны содержать никакой микрофлоры. Попадание в эти жидкости микрофлоры указывает на сильный воспалительный, инфекционный процесс, а также указывает на риск развития бактериемии и сепсиса.

В целом, есть примерная классификация. Единицей измерения в микробиологии служит КОЭ/мл, то есть количество колониеобразующих единиц в 1 миллилитре биологической жидкости. Степень обсеменения определяется числом КОЭ и варьирует в широком диапазоне от 10 1 до 10 9 . Соответственно, 10 1 – минимальное количество микроорганизмов, 10 9 – тяжелая степень инфицирования. При этом показателями нормы считается диапазон до 10 3 , все показатели свыше этого числа указывают на патологическое размножение бактерий.

Что касается чувствительности к антибиотикам, все микроорганизмы подразделяют на устойчивые, умеренно чувствительные, чувствительные. Часто этот результат выражают в виде качественной характеристики с указанием МИГ – минимальной ингибирующей дозы антибиотика, которая еще угнетает рост микроорганизма. Для каждого человека, как и для каждого микроорганизма, эти показатели строго индивидуальны.

[70], [71], [72], [73], [74], [75], [76], [77]

При проведении бактериологических исследований, тем более с определением чувствительности к антибиотикам, одного аппарата будет недостаточно. Необходимо полное, комплексное оснащение бактериологической лаборатории. Необходимо тщательно спланировать и подобрать оборудование, которое будет соответствовать каждому этапу исследований. На этапе забора биологического материала необходимы стерильные инструменты, боксы, биксы, контейнеры, камеры для хранения и транспортировочное оборудование для доставки материала в лабораторию.

В лаборатории в первую очередь понадобится качественный микроскоп для микроскопии мазков. Сегодня существует большое количество микроскопов, которые обладают самыми различными свойствами – от традиционного светового до фазово-контрастного и атомно-силового микроскопа. Современное оборудование позволяет сканировать изображение в трехмерном пространстве и рассматривать на большом увеличении с высокой точностью.

На этапе посева и инкубации микроорганизмов могут потребоваться автоклавы, сухожаровые шкафы, эксикаторы, паровые бани, центрифуга. Обязательно необходим термостат, в котором происходит основная инкубация биологического материала.

На этапе идентификации микроорганизмов и проведения антибиотикограммы, могут потребоваться микроманипуляторы, масс-спектрометры, спектрофотометры, колориметры для различных подсчетов и оценки биохимических свойств культур.

Кроме этого, современные лаборатории могут быть оборудованы высокотехнологичной аппаратурой, которая выполняет все перечисленные основные этапы исследования, вплоть до подсчетов результатов в автоматическом режиме. К числу таких приборов относят, к примеру, комплексное устройство бактериологической лаборатории на базе времяпролетного масс-спектрометра. Эта линия приборов дает возможность разделить всю территорию лаборатории на три зоны. Первая зона – грязная, в которой производится прием анализов, регистрация. Вторая зона – рабочая, в которой собственно и производят основные микробиологические исследования. И третья зона – стерилизационная и автоклавная, где производится подготовка и утилизация рабочего материала.

Модели дают возможность производить инкубирование при широком диапазоне температур и условий. Содержится встроенный анализатор крови и других биологических образцов, который выдает результаты с высокой точностью и достоверностью. В комплектацию включены электронные весы, бидистилляторы, центрифуги, автоклавы и стерилизационные шкафы, автоматическая средоварка, водяная баня со встроенной мешалкой, рН-метры, термометры и микроскопы.

Также применяют микробиологический анализатор, в который закладываются исследуемые образцы, питательные среды, наборы тестов для определения чувствительности. Аппарат выполняет необходимые исследования и выдает готовое заключение.

Расшифровку анализа может сделать только врач. Но зачастую пациенты, получив результат на руки, впадают в панику, заметив большое количество непонятных обозначений и цифр. Для того чтобы не теряться, целесообразно иметь хотя бы общее представление о том, как расшифровать анализ на чувствительность к антибиотикам. Обычно в результатах первым пунктом указывают название микроорганизма, который является возбудителем заболевания. Название приводится на латинском языке. Также здесь может быть указан представитель нормальной микрофлоры, который преобладает в организме, поэтому паниковать не стоит. Вторым пунктом указывается степень обсеменения, то есть количество микроорганизма. Обычно это число колеблется в пределах от 10 1 до 10 9 . Третьим пунктом указывается форма патогенности, и четвертым – названия антибактериальных препаратов, к которым этот микроорганизм чувствителен. Рядом указывается минимальная ингибирующая концентрация, при которой происходит подавление роста микроорганизма.

[78], [79], [80], [81], [82], [83], [84]

Антибиотики – одно из величайших достижений медицинской науки, ежегодно спасающее жизни десятков и сотен тысяч человек. Однако, как говорит народная мудрость, и на старуху бывает проруха.

источник