Меню Рубрики

Как расшифровать количественный анализ на гепатит

Гепатит В – распространённая вирусная инфекция, передающаяся от человека к человеку. Гепатит разрушает клетки печени, что может стать причиной формирования цирроза. Присутствие в крови гепатита делает носителя потенциально опасным. Данное заболевание передаётся от матери к ребёнку, распространяется половым путём.

Лабораторные исследования крови больного вирусом гепатита имеют следующие цели: подтверждение диагноза, выявление прогресса в лечении, контроль состояния пациента, определение формы болезни.

Количественный анализ на гепатит Б проводится для определения уровня антигенов и подбора правильного курса лечения. Он позволяет диагностировать заболевание во время инкубационного периода и выявить носителя вируса.

О чем я узнаю? Содержание статьи.

Проникая в тело человека, антигены начинают размножение на поверхности печени и попадают в кровь. Количественный анализ – современная разработка в области генной инженерии для точной диагностики инфекции в печени. С его помощью устанавливается количество ДНК гепатита Б в крови пациента. Присутствие невысокого содержания вируса допустимо, но требует контроля. Превышение этого показателя свидетельствует о необходимости врачебного вмешательства.

У ряда заражённых вирус гепатита Б не сопровождается симптомами, поэтому количественные анализы назначаются:

  • женщинам во время беременности;
  • работникам медицинской сферы;
  • ВИЧ-инфицированным;
  • при патологиях печени;
  • перед переливанием крови.

Если в крови обнаружен вирус, состояние пациента необходимо отслеживать. Через установленный временной промежуток потребуется вторичная сдача количественного анализа. Контроль необходим при всех формах заболевания, включая бессимптомный латентный гепатит.

Существуют различные вариации количественного анализа: полимеразная цепная реакция, биохимия, ИФА.

Следить за уровнем инфекции в организме необходимо людям с заболеваниями печени – цирроз, рак. Причиной развития этих патологий может быть долгое время прогрессировавший вирус гепатита В.

Количественный анализ назначается для того, чтобы определить наличие вируса гепатита. У пациентов с диагностированным гепатитом данное исследование выявляет степень поражения организма инфекцией. При хронической форме количественный анализ определяет стадию заболевания.

Проведение количественного анализа назначают людям, находящимся в группе риска, при положительных показателях предыдущих исследований. Поскольку инфекция передаётся от женщины к плоду, во время беременности назначается проведение этой процедуры. Заражение возможно при проведении операций, если использовавшиеся инструменты были нестерильны.

Подготовка пациента к сдаче количественного анализа влияет на результаты исследования. Необходимо воздержаться от употребления спиртных напитков за день до сдачи крови. Проводить забор разрешается не ранее, чем через четыре часа после еды. Следует отказаться от курения.

Перед забором биоматериала врач обязан уточнить у пациента, является ли он донором крови, узнать о перенесённых операциях, выяснить наличие контактов с заражёнными людьми.

Данную процедуру рекомендуется проводить после проведения первичного исследования. Забор крови происходит из вены. Собранный материал хранится в пробирке. Произвести изучение биоматериала требуется за 24 часа после забора.

Количественный анализ на полимеразную цепную реакцию выявляет вирус на инкубационной стадии спустя две недели после инфицирования.

Расшифровкой показателей занимается врач. Мера измерения в заключении – копии вируса на миллилитр крови. В норме этот показатель показывает отметку 105 свидетельствует о необходимости проведения медикаментозного лечения. Отказ от приёма препаратов и проведения терапии может стать причиной развития хронического гепатита.

Если в организме обнаружено >1*108 , данное заключение свидетельствует о том, что существует высокая вероятность перехода заболевания в хроническую форму. Для предотвращения развития болезни требуется многоплановое продолжительное лечение.

На результат исследования влияет проведённая ранее вакцинация или перенесённая острая форма гепатита Б.

Курс препаратов для лечения подбирается врачом-инфекционистом. Исходя из данных количественного анализа, он составляет терапевтический план. При назначении лекарств учитываются показатели биопсии. При низких значениях и незначительных отклонениях от нормы препараты назначаются гепатологом.

В ряде случаев одновременно с гепатитом Б протекают другие типы болезней печени. Это осложняет терапию и увеличивает вероятность возможных последствий. Опасное течение заболевание принимает в редких случаях и при отсутствии многопланового лечения.

Заключение количественного анализа, в котором показатели в норме, не гарантирует отсутствия в крови ДНК вируса. Человек может являться носителем при малом количестве вируса.

Ошибка исследований возможна при несоблюдении подготовительных мер перед забором биоматериала. Также результаты исследований могут быть ложными из-за неправильных условий хранения пробирок с собранным биоматериалом.

Латентный гепатит, не имеющий признаков и не сказывающийся на самочувствии носителя, способен привести к проблемам с печенью и стать причиной развития цирроза. Поэтому людям, входящим в группу риска и имевшим контакты с больными, необходимо отслеживать показатели крови для предотвращения заболеваний печени.

Латентная форма заболевания потребует наблюдения у врача. Для профилактики гепатита рекомендуется провести вакцинацию и соблюдать правила личной гигиены.

источник

Ведущий метод диагностики воспаления печени — количественный анализ на гепатит С. Определение болезни подразумевает проведение количественного, качественного анализа с проверкой генотипа вируса, что дает возможность определить основные параметры течения заболевания. Ввиду способности к мутации требуется точное и своевременное диагностирование с правильно расшифровкой данных для разработки терапевтической схемы.

С 2012 года болезнь гепатита C официально считается полностью излечимым заболеванием. Но для этого важна своевременная диагностика.

Полимеразная цепная реакция или же ПЦР — метод, позволяющий выявить гепатит на начальных стадиях. Чувствительность немного ниже ИФА. Метод определяет ДНК- фрагменты вируса в пробе крови пациента даже в малых количествах. Исходя из этого врач правильно вычисляет именно возбудителя инфекции, а не его продукты жизнедеятельности. По результатам анализа ПЦР есть возможность выявить даже следы вируса и его генотип.

В ПЦР выделяют 3 вида анализа:

  • Качественный. ПЦР гепатита С, который основывается на поиске иммуноглобулинов (антител) типа M и G, характеризующих факт заражения. Анализ может выдать — «не обнаружено», что будет считаться нормой.
  • Количественный. Подтверждает диагноз, позволяет контролировать лечение, указывает на риск заражения других людей. Определяется количество в международной системе единиц — МЕ/мл. Показатель рассчитывается из количества РНК-вируса в 1 мл пробы крови. Высокий результат указывает на повышенный риск инфицирования других людей.
  • Генотипирование. Метод, основывающийся на выявлении генотипов HCV, которых насчитывается 7.

Перед сдачей крови на проверку важно придерживаться правил:

  • За 8 часов до анализов в последний раз покушать.
  • Не пить спиртного за 2 дня, желательно не курить в это время или хотя бы за 1—2 часа до.
  • Сообщить о приеме лекарств.

Вернуться к оглавлению

Для проведения количественного метода исследования нужен ряд показаний, без которых эта диагностика невозможна. К ним относится:

  • выявление качественным анализом антител РНК-вируса;
  • присутствие хронического или острого вида заболевания;
  • планирование тактики лечения;
  • обнаружение микст-гепатитов при диагностировании.

Вернуться к оглавлению

Определение концентрации патогена — суть исследования. Диагностика определяет степень тяжести заболевания, что позволяет полностью увидеть клиническую картину болезни. С помощью это вида ПЦР обнаруживают, какая вирусная нагрузка при гепатите С. После проведения расшифровки полученных данных анализа, врачи назначают лечение, в ходе которого делают забор крови на 4, 12, 16 и 24-й неделях. По завершении 12-й должно быть улучшение, в обратном случае метод лечения стоит заменить.

Найденное в крови количество HCV, влияет на вероятность, с которой вирус гепатита передается окружающим — чем выше, тем больше вероятность. За счет этой процедуры составляется правильный план дальнейшего лечения. Полученные в ходе процедуры результаты измеряются в единицах МЕ/мл и копий/мл. Расшифровать показатели можно только после пересчета полученного количества с учетом коэффициента (КП). Есть 2 метода:

  • HCV Monitor с КП в МЕ — 2,7;
  • LCX HCV RNA с КП — 3,8.

источник

Вирусный гепатит в настоящее время излечим, однако сложности могут возникнуть при диагностике заболевания. В особенности это касается ВГС — «ласкового убийцы», который часто протекает бессимптомно. Нередко выявить наличие вирусной инфекции можно только при комплексной диагностике.

Но как проводится расшифровка анализов на гепатит? Какие методы диагностики проводятся, в зависимости от типа заражения? Какова расшифровка анализа на гепатит С или В? Ответы на эти вопросы вы сможете найти в нашей статье.

Прежде чем говорить о расшифровке анализа на гепатит В или С, следует выяснить, какие методы аналитической диагностики этого заболевания существуют в современной медицинской практике. Способ определения болезни зависит от путей заражения. Так как гепатиты В и С преимущественно передаются через кровь, для определения вирусной нагрузки и подтверждения диагноза проводится анализ этой биологической жидкости. Образец крови берется из вены пациента для дальнейшего изучения в лабораторных условиях.

Также диагноз подтверждается аппаратным способом при помощи ультразвукового обследования и эластометрии печени. Данные методы позволяют определить степень заражения и площадь пораженных вирусом тканей жизненно важного органа. Также для расшифровки анализов на гепатит большое значение имеет определение примерного срока инфицирования.

Исследования образцов биологических жидкостей, проводимые при диагностике гепатовируса, делятся на:

  • Качественные — нацелены на определение наличия патогена;
  • Количественные — определяют вирусную нагрузку и степень инфицирования.

В зависимости от типа вируса, для определения его наличия проводятся разные анализы. Рассмотрим их подробнее.

Вирусный гепатит В является не только опасным, но и чрезвычайно заразным вирусным заболеванием. Кроме того, эта болезнь опасна большим количеством осложнений, среди которых: цирроз, фиброз и онкологические новообразования в печени. Поэтому правильная расшифровка анализа на гепатит В очень важна. Своевременная диагностика может спасти пациенту жизнь.

С целью определения гепатовируса типа В проводятся следующие анализы:

  • На австралийский антиген (HBs) — может быть качественным или количественным тестом. Положительный результат тестирования свидетельствует о хроническом или остром течении болезни. Однако отрицательный результат не является гарантией отсутствия вирусного заболевания;
  • На HBеAg — качественный анализ. Если данный антиген не обнаруживается, то говорить об отсутствии болезни можно только при отсутствии других иммуноглобулинов;
  • На Anti-HBс-total — качественный анализ, позволяющий установить факт заражения, но не помогающий в установлении фазы болезни (хронической или острой);
  • На Anti-HBс IgМ — тест с вариантами результатов «положительно», «отрицательно» и «сомнительно». Если результат сомнителен, следует сдать тест еще раз через 2 недели;
  • На Anti-HBе — количественный анализ, позволяющий выявить уровень вирусной нагрузки;
  • Выявление ДНК возбудителя заболевания — позволяет определить вероятность инфицирования.

Вирусный гепатит С также передается через кровь, однако является менее заразным. Тем не менее, это заболевание довольно распространено как в России, так и за ее пределами. Сдача анализов на обнаружение ВГС необходимо для определения самого заболевания, его стадии и подходящей для терапии схемы лечения оригинальными индийскими препаратами. При диагностике гепатита С проводятся следующие анализы:

  • На анализ на антигены ВГС (аnti-HCV-total ) — качественный тест. Обнаруженные иммуноглобулины являются одними из основных маркеров заболевания;
  • На антитела IgG (recomBlot HCV IgG) — качественное тестирование. Положительный результат говорит о наличии заболевания, отрицательный — о его отсутствии. Исключением является проведение диагностики у пациентов, родившихся с антителами матери либо во время инкубационного периода заболевания;
  • Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — тест на выявление флававируса. Может быть как качественным, так и количественным.

В первую очередь диагностические меры применяются к пациентам, у которых наблюдаются следующие симптомы:

  • Тошнота и рвота;
  • Болевые ощущения в области печени;
  • Осветление (обесцвечивание) фекальных масс и потемнение мочи;
  • Желтушный оттенок склер и кожных покровов;
  • Общее недомогание, имеющее сходство с гриппозными проявлениями;
  • Апатичное или депрессивное состояние.

Однако, ввиду бессимптомного течения хронической формы вирусных гепатитов, сдавать анализы рекомендуется и в ряде профилактических мер.

Регулярно сдавать кровь на мониторинг патогена рекомендуется:

  • Лицам, ухаживающим за инфицированными;
  • Медперсоналу, регулярно контактирующему с зараженной кровью и другими биологическими жидкостями;
  • Пациентам, регулярно проходящим процедуру диализа и переливания крови;
  • Инъекционным наркоманам;
  • Больным, страдающих от ВИЧ-инфекции;
  • Лицам, ведущим беспорядочную половую жизнь.

Важно вовремя определить наличие гепатовируса в крови больного. Чем раньше будет диагностирована болезнь, тем быстрее ее удастся победить при помощи инновационных противовирусных препаратов.

Результаты анализа крови на выявление ВГС могут быть неточными, ложноположительными или ошибочными. Чтобы этого не случилось, нужно учитывать все нормы подготовки и проведения диагностики:

  • В течение дня до сдачи крови на экспертизу нельзя употреблять продукты с большим содержанием сахара и трансжиров. За 8 часов до анализов нельзя есть вообще;
  • Накануне диагностики запрещается употребление алкоголя и курение сигарет. Это создает дополнительную нагрузку на печень, из-за чего анализы могут быть неточными;
  • За день до сдачи крови следует поберечь себя от стрессов и физических перенагрузок. Это также может негативно сказаться на результатах диагностики.

Являться в лабораторию для сдачи образца крови необходимо утром, примерно в 8 часов. Из вены кровь берется при помощи стерильного шприца. В рамках собственной безопасности пациенту важно следить за тем чтобы медицинский работник не применял ранее использованный шприц.

Расшифровка анализов проводится в лабораторных условиях компетентными медработниками. Результаты передаются лечащему врачу или напрямую пациенту в зависимости от особенностей отдельного медицинского учреждения или независимой лаборатории.

Фиксируются результаты диагностики на бумажном носителе. Период готовности расшифровки зависит от типа анализа. Чаще всего результаты готовы в период от нескольких часов до 1 суток после сдачи.

Расшифровка анализа на выявление вирусного гепатита В производится в условиях лаборатории. Ниже представлены ключевые данные, на которые опираются исследователи, изучая предоставленный пациентом образец крови:

  1. При определении австралийского антигена, референсное значение составляет 0,5 МЕ/мл. При меньшей концентрации антигена результат теста можно считать отрицательным. Если же значение выше указанного, это может свидетельствовать о наличии инфекции в острой форме. Также наличие австралийского антигена может свидетельствовать о вирусоносительстве;
  2. Референсное значение антител к HBs-антигену вируса гепатита B (Anti-HBs) — 10 МЕ/мл. Высокий показатель говорит об успешном иммунном ответе на вакцинацию от гепатита В. Низкий показатель свидетельствует о том, что вакцина не оказала ожидаемого действия;
  3. Более 40 МЕ/лпатогенной ДНК в сыворотке крови пациента говорит о заражении гепатовирусом типа В. Если концентрация вирусного ДНК в предоставленном образце крови ниже указанного серединного предела, человек наверняка здоров, либо его болезнь находится на стадии инкубационного периода.

Одним из основных методов диагностики ВГС является определение фрагментов РНК возбудителя в плазме крови пациента. При расшифровке этого анализа на гепатит С важно учитывать, является ли он качественным или количественным. Положительный показатель качественного теста позволяет говорить о наличии заражения.

В свою очередь, при количественном РНК-анализе:

  • Показатель ниже предела15 МЕ/мл — патоген не обнаружен, или его концентрация находится ниже порога чувствительности теста;
  • От 15 до 100 000 000 МЕ/мл — вирусное РНК выявлено. Это говорит об инфицировании организма человека гепатовирусом типа С.

Результаты количественного теста на РНК в сыворотке крови расшифровываются следующим образом:

  • Ниже 60 МЕ/мл — возбудитель вирусного гепатита С не обнаружен;
  • От 60 до 108 МЕ/мл — положительный результат в пределах линейного диапазона;
  • От 108 и выше — повышенная концентрация РНК возбудителя.

Еще одним немаловажным анализом, расшифровка которого требуется при диагностике гепатита С, является ПЦР. Показатели, по которым можно отследить вирусную нагрузку, колеблются в пределах 10 до 500 МЕ/мл. Если результат ниже минимального уровня, гепатит С не обнаруживается. Завышенный показатель говорит о высокой вирусной нагрузке.

источник

Если диагностирован вирус гепатита С, количественный анализ, расшифровка которого влияет на назначение лечебной схемы, строго обязателен. В отличие от генотипирования, подобное исследование выполняется несколько раз: непосредственно на этапе комплексной диагностики заболевания и в ходе терапии. Доктору важно знать количественное содержание вируса в крови пациента, чтобы назначить адекватное лечение.

Уже на стадии терапии анализ крови на уровень HCV предназначен для оценки эффективности принимаемых лекарств. По данным клинических исследований, на фоне подавляющего большинства противовирусных препаратов прямого действия количественный тест демонстрирует отрицательный результат уже на 21–28 день. Однако о полном выздоровлении речь идет в том случае, если негативные данные сохраняются на протяжении двух лет с последнего дня приема таргетных таблеток.

Для установления числового значения генома возбудителя гепатита С в сыворотке крови обычно пользуются молекулярной технологией ПЦР. Только таким образом можно точно посчитать уровень виремии: данный термин обозначает концентрацию копий (частиц генома) возбудителя гепатита С в определенной единице крови. Прочие методы, например, выявление core-антигена иммуноферментным тестом применяются гораздо реже из-за высоких финансовых затрат и сложностей, касающихся технического выполнения исследования.

Полимеразная цепная реакция до недавнего времени была лишь экспериментальным методом анализа и не была широко распространена в клинической практике. Принцип методики основан на так называемой амплификации – способности определенного участка генома патогена к многократному копированию.

Это достигается при помощи обязательных компонентов выполнения ПЦР:

  • праймера, структура которого практически идентична определенным участкам РНК HCV,
  • фермента, обеспечивающего реакцию амплификации.

Сам процесс лабораторного исследования происходит в буферном растворе, в котором содержится фиксированная комбинация катионов и анионов. Таким образом возможно поддержание оптимального для течения ПЦР уровня рН. Набор для проведения ПЦР содержит и протеины, используемые в качестве своего рода «строительного материала» при амплификации.

Структура праймера такова, что он может взаимодействовать только со строго определенным возбудителем. На этом принципе основана специфичность анализа методом ПЦР. Если иммуноферментные серологические исследования зависят от индивидуальных параметров иммунной системы человека, ПЦР направлена исключительно на выявление РНК возбудителя HCV.

Еще одна особенность проведения подобного исследования состоит в том, что расшифровка ПЦР гепатита С возможна как с использованием компьютерных программ (обычно используется, когда необходимо количественно установить содержание вируса в крови) и микроскопических методов. В норме у здорового в плане вирусного поражения печени человека патоген в крови отсутствует. Выявление возбудителя HCV методом ПЦР, будь то качественное либо количественное исследование, однозначно указывает на инфицирование.

При помощи постановки ПЦР можно не только определить виремию, то есть фактический уровень патогена в кровотоке, но и генотип вируса. Все доступные исследования, выполняемые по такой методике, приведены в таблице.

Перечень тестов Краткое описание
Анализ ПЦР на гепатит С качественный Предназначен для подтверждения результатов серологического теста (ИФА). Используемые тест-системы позволяют только выявить РНК патогена без определения его содержания
Анализ ПЦР вирусное содержание возбудителя патологии Чувствительность исследования составляет 5–10 МЕ/мл. Для удобства расшифровки используют универсальный параметр, так как при определении количества копий могут возникать различные погрешности. Исследование проводится в обязательном порядке и не может заменить ни качественный тест методом ПЦР, ни генотипирование
Генотипирование При исследовании определяется последовательность протеинов, что определяет разновидность возбудителя гепатита С. В настоящее время установлено 6 генотипов, и практически каждый требует индивидуального подхода в терапии

При гепатите С проводится все три исследования ПЦР. Алгоритм диагностики состоит в следующем:

  1. Общие клинические исследования («стандартный набор» – кровь, моча, биохимия и печеночные пробы), дополнительно могут назначать ревматоидные тесты и ряд других анализов при подозрении на аутоиммунные процессы;
  2. Серологическое исследование (ИФА) на выявление антител к возбудителю гепатита С. Изначально показан тест Anti-HCV Total.
  3. Качественная ПЦР, предназначена для подтверждения результатов ИФА.
  4. Количественная ПЦР, выполняется при подтвержденном диагнозе HCV-инфекции.
  5. Генотипирование, также проводится при установленном факте заражения.

Если человек желает самостоятельно обследоваться на гепатит С, рекомендуют сдавать ИФА. Дальнейшие обследования проводят в зависимости от полученных результатов. Если ИФА отрицательный и человек не предъявляет никаких жалоб, повторное тестирование проходят через год. Но при наличии симптомов патологии (в том числе и неспецифических, например, сильная слабость, утомляемость, боли в правом подреберье) следует сдать качественную ПЦР.

В целом, техника выполнения ПЦР по большому счету одинакова, как для качественного, так и количественного исследования. Образец биологического материала смешивают с тест-раствором, который содержит специальные соединения. Их роль состоит в стимуляции деления РНК патогена (причем строго специфичного генетического материала возбудителя).

В результате концентрация HCV достигает лабораторно определяемого уровня. На данном этапе возможно проведение качественного анализа. Однако после сложных подсчетов (обычно для этих целей используют компьютерные программы) устанавливают количественный показатель содержания HCV. После этого полученный результат переводят в Международные Единицы и фиксируют в лабораторном бланке.

В некоторых случаях вместо ПЦР используют другие методики – разветвленной ДНК и транскрипционной амплификации. Но из-за сложности выполнения и более низкой чувствительности большинство специалистов предпочитают выявлять количественные нормы гепатита С именно при помощи ПЦР.

Сейчас практически в любой частной лаборатории пациент может пройти обследования без каких-либо бумаг и направлений от терапевта. Количественное определение вируса гепатита С в крови не является исключением. Вопрос в том, когда целесообразна сдача теста?

Гепатологи рекомендуют проведение исследования в таких случаях:

  • позитивный ИФА + положительная ПЦР;
  • негативный ИФА + положительная ПЦР.

Кроме того, количественное определение HCV показано и в ходе противовирусной терапии. Врач сравнивает результаты виремии, полученные до начала курса приема медикаментов, с результатами тестирования, проведенного уже во время лечения. Нормой считается негативная ПЦР к 12 неделе применения препаратов. А предиктором 100% выздоровления считают отсутствие виремии уже через месяц терапии.

Тестирование продолжают и после окончания лечения для исключения риска рецидива. Пациент должен сдавать такой тест на протяжении еще 2 лет. При отрицательном результате говорят о выздоровлении. Больного снимают с учета у гепатолога или инфекциониста и дают общие рекомендации относительно восстановления состояния печени.

Если спустя 2 года количественный тест на HCV вновь положителен, все исследования повторяют заново. В таком случае предполагают повторное инфицирование и, возможно, другой генотип вируса. Но требуется новая схема лечения, а вероятность благополучного исхода существенно ниже.

Сроки выполнения количественного определения вирусной нагрузки при подтвержденной HCV-инфекции указаны в таблице.

Особенности течения заболевания и лечения Этапы сдачи количественной анализа
Этап первичной диагностики Виремия перед началом приема противовирусных средств – важный параметр определения лечения и контроля эффективности терапии
4 неделя Анализ делают вне зависимости от схемы лечения и применяемых препаратов
12 неделя Исследование выполняется также в любом случае
24 неделя Тестирование делают в том случае, если курс терапии продолжается 24 недели
48 неделя Выполняют при 48-недельном курсе лечения (как правило, при применении интерферонов) и как контрольный тест после 12-недельной терапии
После завершения курса терапии С интервалом в 24 недели на протяжении 2 лет

Сама методика постановки ПЦР менее чувствительна к особенностям функционирования внутренних органов, иммунной системы. Однако это не исключает соблюдения правил подготовки к проведению теста. В большинстве случаев количественный тест проводится при уже подтвержденном диагнозе гепатита С.

Это подразумевает как минимум отказ от алкоголя и соблюдение строгой диеты (по столу №5 или №5а в зависимости от тяжести состояния больного). Лечащий врач уже ознакомлен с анамнезом, знает, какие лекарственные средства принимает пациент и от каких патологий страдает. Это облегчает расшифровку анализа ПЦР и снижает вероятность постановки ошибочного диагноза.

Но чтобы получить максимально точный результат необходимо:

  • сдавать кровь натощак (после ужина должно пройти не менее 12 часов, завтрак противопоказан);
  • посещать лабораторию следует в первой половине дня;
  • до сдачи крови нельзя есть и пить что-либо кроме воды;
  • нельзя курить за 8–10 часов до исследования.

Перечисленные правила нужно соблюдать перед каждой проверкой на количественное содержащие патогена. Если исследование проводят после лечения и врач разрешил ослабления в диете, за 7–10 дней до проведения тестирования необходимо вновь вернуться к строгому режиму питания. Что касается спиртного, ограничения сохраняются на протяжении всей жизни.

Ранее отечественные специалисты делили виремию на несколько групп: очень низкую, низкую, умеренную, высокую и очень высокую. Но в настоящее время расшифровка анализа крови на гепатит С проводится в соответствии с международными нормами. Сейчас виремию делят только на 2 группы. В таблице указаны вероятные данные количественного анализа на гепатит С (окончательная расшифровка вне зависимости от показателей должна проводиться врачом).

Результаты анализов Уровень вирусной нагрузки
7,9×105 МЕ/мл и ниже Низкая виремия
7,9×105 МЕ/мл и выше Высокая вирусная нагрузка
HCV не обнаружен Уровень РНК патогена ниже определяемого тест-системой порога (как правило, 5–10 МЕ/мл) либо полностью отсутствует. Виремия отрицательна

Но только специалист может грамотно расшифровать количественное исследование на HCV и отличить показатели нормы от критических, свидетельствующих об отсутствии результата от противовирусной терапии либо о рецидиве инфекции. Все анализы должны быть подшиты в амбулаторную карту, чтобы у доктора была полная информация об активности вирусной инфекции и ответной реакции на прием таргетных медикаментов.

Показатели нормы при расшифровке количественного анализа на гепатит С бывают только тогда, когда результат ПЦР отрицателен, то есть РНК вируса во взятом образце крови отсутствует. В остальных случаях наличие патогена свидетельствует о заражении.

При подтверждении диагноза количественные показатели крови при гепатите С служат основой для оценки степени активности вирусного процесса. Высокая виремия повышает вероятность осложнений и сокращает срок наступления необратимых изменений в печени.

Вирусологическая нагрузка, превышающая 800 000 МЕ/мл служит основанием для проведения ряда инструментальных обследований:

  • эластографии – диагностического метода для определения степени фиброза (разрастания и размеров очагов соединительной ткани);
  • томографии – подробное рентгенологическое исследование, позволяющее исключить либо подтвердить наличие злокачественных или доброкачественных новообразований;
  • биопсии печени, которая дает максимально полную информацию о структурных изменения в органе.

Низкая вирусная нагрузка говорит о медленно развивающейся вирусной инфекции. Такой процесс не исключает прогрессирования поражения печени, но вероятность возникновения тяжелого декомпенсированного цирроза или гепатоцеллюлярной карциномы низка. У такой категории пациентов редко возникают внепеченочные проявления гепатита С (кардиоваскулярные расстройства, аутоиммунные нарушения), что также повышает шансы не только успешной противовирусной терапии, но и быстрого общего восстановления.

При постановке диагноза назначают несколько исследований, таким образом ошибка в проведении тестирования исключается.

Основными маркерами при гепатите С служат:

  1. Положительный результат иммуноферментного анализа. Но ИФА во многом зависит от состояния иммунной системы человека, поэтому на этапе первичной диагностики не исключают ложноположительный либо ложноотрицательный результат.
  2. Коэффициент позитивности при гепатите С выше 1. Рассчитывается по титру антител. Иногда референсные значения могут отличаться в зависимости от используемой тест-системы, но физиологическая норма всегда указывается в бланке с результатами.
  3. Положительный результат качественного теста ПЦР. Обнаружение РНК возбудителя патологии однозначно указывает на инфицирование.
  4. Определяемая виремия методом количественной ПЦР.

Косвенными лабораторными признаками гепатита С служат:

  • повышение уровня печеночных ферментов, билирубина;
  • изменение уровня лимфоцитов, в некоторых случаях, лейкоцитов, ускорение СОЭ.

Но при ответе на вопрос, какие показатели крови указывают на гепатит С, доктора руководствуются результатами ПЦР, так как ИФА может быть непоказательным при наличии определенных заболеваний (ВИЧ, аутоиммунных расстройств). Также неверные результаты вероятны при беременности, приеме некоторых лекарств. Не последнюю роль играет и анамнез.

При гепатите С антитела, как и РНК обнаруживаются при помощи тест-систем не сразу, а спустя как минимум 10–14 дней. ИФА может дать достоверный результат позже – через 4–6 недель после инфицирования. Поэтому если есть серьезные основания предполагать контакт с кровью больного, при негативном результате все анализы имеет смысл повторить через 1–1,5 месяца.

В современных лабораториях тестирование проводят с соблюдением всех норм (в соответствии с требованиями отечественного и зарубежного законодательства), но исключить вероятность ошибок и ложных результатов нельзя.

Если на выполнение ИФА оказывает влияние состояние иммунной системы человека, правильность выполнения ПЦР зависит от:

  • соблюдения стерильности при заборе, транспортировке и работе с образцами крови пациента, чтобы исключить возможный контакт с контаминированными образцами;
  • соблюдения температурного режима и других правил при хранении и перевозке пробирок с кровью;
  • правильности постановки ПЦР (начиная от работы лаборанта и заканчивая функционированием автоматических диагностических систем);
  • качества используемых лабораторных материалов.

Но количественный анализ проводится на основании уже выполненных исследований, которые однозначно указывают на наличие HCV (ИФА и качественная ПЦР). Поэтому при отрицательном результате на фоне подтвержденного диагноза исследование повторяют. Кроме того, обращают внимание, как обозначается гепатит С в анализах.

В некоторых клиниках могут пользоваться устаревшей системой, когда виремия указывается не в международных единицах, а в количестве копий. Иногда путаница возникает с подсчетом нулей в указанных цифрах. Именно поэтому расшифровкой обозначений в бланке результатов должен заниматься врач.

Определение вирусной нагрузки возможно и с использованием других методик, включая серологические. Так, исследование на антиген core считают альтернативой количественной ПЦР.

Но большинство врачей отдают предпочтение ПЦР благодаря:

  • доступности и качеству тест-систем: их производством занимаются ведущие мировые фармацевтические и медикотехнологические корпорации;
  • быстроте и простоте выполнения;
  • высокой чувствительности: современные методики ПЦР позволяют обнаружить РНК патогена в количестве 5 МЕ/мл;
  • универсальности: количественное определение проводится одинаковыми методиками вне зависимости от генотипа HCV;
  • объективности вне зависимости от состояния здоровья пациента (в отличие от ИФА), что позволяет проводить исследования на разных этапах диагностики и лечения;
  • отсутствию влияния на результаты принимаемых лекарств.

Сейчас ПЦР остается основным методом количественного определения виремии. Тест используется повсеместно практически во всех лабораториях и больницах. Но во избежание ошибок, перед сдачей анализа нужно поинтересоваться, по какой технологии будет проводиться исследование, чтобы соотнести результаты дальнейших анализов.

источник

Учитывая бессимптомное течение и высокую вероятность передачи HCV-инфекции, большое значение имеет диагностика на ранних стадиях патологии. Наиболее точной считается постановка полимеразной цепной реакции. В отличие от методов выявления серологических маркеров, ПЦР мало зависит от сопутствующих заболевания и общего состояния организма пациента. Но если подтвержден вирус гепатита С, количественный анализ, расшифровка которого проводится врачом, обязателен.

HCV – тяжелое заболевание, требующее серьезной дорогостоящей и опасной побочными реакциями терапии. Поэтому диагноз никогда не ставят на основании результатов одного исследования. При подозрении на наличие вирусного заболевания пациенту приходится пройти несколько тестов. Но чтобы избежать лишних затрат и потери времени, анализы крови и инструментальные обследования проводят поэтапно.

Основные стадии диагностического процесса приведены в таблице:

Проводимое исследование Цели выполнения
Биохимический анализ крови и печеночные пробы Позволяет оценить функциональную активность печени, уровень билирубина, показатели печеночных трансаминаз. Превышение нормы в 2 раза и более указывает на наличие заболевания
Клинические анализы крови, мочи и кала Данные исследования неспецифичны, но по результатам можно установить наличие воспалительного процесса, оценить общее состояние пациента. Обнаружение билирубина в моче, изменение оттенка кала говорит в пользу поражения печени
Иммуноферментный анализ (ИФА) Позволяет определить как наличие вирусной инфекции в организме, так и ее форму (острую или хроническую). Недостатком исследования является вероятность ложных результатов
Полимеразная цепная реакция Дорогостоящий, сложный в проведении, но вместе с тем наиболее точный метод диагностики HCV. Позволяет подтвердить наличие вируса в организме человека, количественно установить уровень копий РНК, определить генотип HCV
Инструментальные обследования печени Необходимо проведение УЗИ органов брюшной полости, установление стадии фиброза, оценка тяжести цирроза, исключение гепатоцеллюлярной карциномы

Окончательный диагноз доктор ставит только по результатам, указанным во всех исследованиях. Некоторые препараты, например, гепатопротекторы, витамины показаны уже в начале диагностического процесса. Но таргетные противовирусные средства назначают после получения всех данных.

Техника проведения полимеразной цепной реакции известна достаточно давно и успешно используется для диагностирования ряда вирусных заболеваний, и HCV не является исключением.

В настоящее время существует несколько методик постановки ПЦР, но в принципиальном плане этот процесс состоит из нескольких этапов:

  1. Разрушение двойной нити ДНК под воздействием нагревания либо определенных химических веществ.
  2. Присоединение к разделенным основанием ДНК так называемых праймеров – остатков нуклеотидной цепи РНК вируса (в большинстве современных тест-систем используются 5`-NTR-области генома HCV).
  3. Специфический фермент, ДНК-полимераза, распознает праймер, провоцирует присоединение других нуклеотидных остатков.

По окончании третьего этапа полимеразной цепной реакции ДНК между двумя праймерами удваивается, а впоследствии происходит амплификация участка генома в геометрической прогрессии (2–4–8 и т.д.).

Чувствительность современных тест систем составляет 10–50 копий РНК в 1 мл крови.

Расшифровка ПЦР на гепатит С должна проводиться квалифицированным специалистом. В соответствии с Международным стандартом ВОЗ для количественного определения вирусного генома служит образец плазмы крови в лиофилизированном виде, содержащий РНК первого генотипа вируса в концентрации 105 МЕ/мл.

При этом обращают внимание на количественные единицы, в которых выражены результаты исследований. Обычно количество копий РНК HCV указывают в абсолютном или логарифмическом выражении. Затем, в соответствии с международными стандартами, эту цифру пересчитывают при помощи специального коэффициента в международные единицы (МЕ). Таким образом конечные результаты обозначаются в МЕ/мл.

Для проведения количественного исследования применяют различные тест-системы и методики постановки полимеразной цепной реакции. Некоторые предназначены для оценки уровня виремии в плазме или сыворотке. Другие более эффективны и показательны при исследовании цельной крови.

Говорить о норме при интерпретации указанных в лабораторном бланке результатов не совсем корректно. Дело в том, что у здорового человека РНК вируса в организме отсутствует, а наличие частиц HCV вне зависимости от количественного показателя свидетельствует об инфицировании. В дальнейшем при помощи ПЦР оценивают эффективность лечения. При отрицательном результате на 4 неделе приема медикаментов, а затем и после окончания противовирусной терапии (на протяжении 48 недель) говорят о выздоровлении.

Проведение полимеразной цепной реакции предполагает определение не только наличия РНК HCV в крови, но и определение количества копий вируса и анализ структуры генома. Такие возможности делают ПЦР одним из наиболее информативных и точных методов диагностики вирусного гепатита C.

Все применяемые на практике методы постановки полимеразной цепной реакции приведены ниже в порядке проведения (каждый последующий тест назначают при положительном результате предыдущего):

  1. Анализ ПЦР на гепатит С качественный, проводится только для обнаружения РНК вируса в крови.
  2. Количественное исследование ПЦР. Расшифровка проводится согласно общепринятым нормам. В зависимости от результата вирусологическая нагрузка может быть низкой, умеренной или высокой. Данный показатель является одним из предикторов исхода терапии HCV.
  3. Генотипирование (во многих частных лабораториях предлагается в комплексе с количественным анализом, что снижает общую стоимость). Обозначение генотипа HCV осуществляется одной из арабских цифр (с 1 по 6). На территории России чаще выявляют генотип 1 или 3, несколько реже – 2, 4–6 диагностируют в единичных случаях. Ранее при использовании интерфероновых схем лечения разновидность HCV определяла длительность и эффективность терапии. Современные противовирусные средства отличаются широким спектром действия, но некоторые из них прописывают только при 1–4 генотипах HCV.

Генотипирование проводится только один раз, перед началом терапии. По мере приема медикаментов количественные нормы гепатита С необходимы врачу для оценки эффективности противовирусных препаратов. После окончания курса лечения проводят качественное исследование ПЦР.

Количественный анализ методом ПЦР проводится для определения вирусной нагрузки. Под этим термином подразумевают количество копий РНК возбудителя в 1 мл крови.

Благодаря такому исследованию врач сможет оценить ряд факторов, играющих ключевую роль как в самом течении заболевания, так и исходе терапии. Это:

  • вероятность развития осложнений (цирроза и гепатоцеллюлярной карциномы), так как чем активнее патологический процесс, тем выше риск появления патологий печени уже на начальных стадиях гепатита С;
  • эффективность стандартной схемы терапии (в тяжелых случаях требуется дополнительное назначение противовирусных средств);
  • риск для окружающих (особенно если пациент относится к социально благополучным слоям населения, имеет семью, детей);
  • риск внепеченочных осложнений (развитие аутоиммунных заболеваний, поражения нервной, сердечно-сосудистой системы и т.д.).

Количественное определение РНК HCV важно и для контроля эффективности проводимого лечения. По мере продолжения приема противовирусных средств полученные цифры снижаются. Целью терапии является достижение отрицательного результата качественного анализа методом ПЦР.

До появления большого количества частных лабораторий, где пациент может сдать практически любой анализ без документов от врача, направление на выполнение количественной ПЦР давали на определенном этапе диагностики или лечения.

В соответствии с нормами и протоколами ВОЗ, показаниями к проведению такого исследования служат:

  • положительные серологические маркеры HCV (anti-HCV Total, наличие иммуноглобулинов класса G и/или М);
  • положительный результат качественной ПЦР;
  • контроль проводимого лечения.

При желании пациент может самостоятельно обратиться в частную клинику и выполнить подобное исследование. Но при отсутствии гепатита С проведение такого лабораторного теста считают нецелесообразным.

Для определения вирусной нагрузки установлены следующие сроки:

  • до начала терапии (возможно, одновременно с генотипированием);
  • 4 неделя лечения (отрицательные данные свидетельствуют о быстром вирусологическом ответе и служат предикторами благоприятного исхода);
  • последняя неделя терапевтического курса (12 или 24 в зависимости от подобранной схемы), негативный результат подтверждает эффективность терапии, позитивный требует продолжения лечения, но уже с применением других медикаментов;
  • 24 и 48 неделя после окончания лечебного курса (вне зависимости от его продолжительности), отсутствие вирусной нагрузки подтверждает выздоровление.

Дополнительно исследование проводят только по показаниям (например, ухудшение самочувствия, ошибки в приеме таблеток, выявление сопутствующих инфекций и т.д.). Выполнение ПЦР не исключает необходимости в других анализах – клинических исследованиях крови и мочи, печеночных проб, УЗИ и прочих.

Чтобы расшифровка анализа ПЦР не была ошибочной, необходимо соответствующим образом подготовиться к забору крови. За некоторым исключением правила не отличаются от таковых при других исследованиях.

  • сдавать кровь строго натощак (последний прием пищи за 12 часов до посещения лаборатории);
  • процедуру проводить в первой половине дня (как можно раньше);
  • в день анализа после пробуждения пить можно только воду; чай, кофе, газированные и/или сладкие напитки, соки и т.д. противопоказаны;
  • за 3–5 часов до сдачи крови нельзя курить;
  • если невозможно прервать прием каких-либо медикаментов, сообщить названия принимаемых лекарств лаборанту и врачу, который будет интерпретировать полученные данные.

Наличие гепатита С уже подразумевает полный отказ от спиртного и строгую диету (стол №5). Но если анализ проводится на этапе диагностики, за 5–7 дней до забора крови обязателен контроль питания с исключением тяжелых для печени продуктов и алкоголя.

Обычно, когда пациент получает на руки результаты анализов, в бланке приведены показатели нормы, полученные значения и краткая интерпретация. Однако расшифровка анализа крови на гепатит С должна проводиться только врачом. Количественная ПЦР – один из этапов диагностики, поэтому врач сопоставляет приведенные цифры с полученными ранее результатами.

В зависимости от полученных показателей определяется степень вирусной нагрузки или полное отсутствие РНК HCV в организме.

Если проведен количественный анализ на гепатит С, расшифровка проводится в соответствии с таблицей:

Значение показателя Уровень вирусной нагрузки
РНК вирус не обнаружены (либо количество копий меньше чувствительности тест-системы) Норма, человек здоров либо анализ проведен в инкубационный период патологии
1,8×102–7,9×105 МЕ/мл Низкая вирусная нагрузка. Указывает на недавнее инфицирование, латентное течение либо эффективность противовирусных препаратов
8×102–2,3×107 МЕ/мл Умеренная вирусная нагрузка. Обычно отмечается при хронической форме HCV. Прогноз лечения благоприятный при условии соблюдения рекомендаций врача
2,4×107 МЕ/мл и выше Высокая виремия. Очень вероятны тяжелые осложнения (вплоть до рака печени)

Чтобы точно расшифровать анализ и не допустить ошибочных результатов, оценивать данные количественной ПЦР можно только после выявления серологических маркеров качественной ПЦР. При ИФА обязательно указывается коэффициент позитивности. Также принимают во внимание данные ультразвукового обследования, эластографии и биопсии, если исследование проводилось.

Количественный анализ ПЦР проводят только в том случае, если положительны другие показатели крови при гепатите С.

Получение отрицательного результата возможно при:

  • самостоятельном выздоровлении (в медицинской литературе приведена статистика, по которой порядка 15% случаев инфицирования HCV остаются незамеченными, иммунная система человека полностью устраняет вирус);
  • раннем вирусологическом ответе (при оценке результатов в ходе противовирусной терапии);
  • при ошибочных данных предыдущих исследований (маловероятно, так как предварительно обычно назначают ИФА, качественную ПЦР, печеночные пробы).

Когда сдается анализ на гепатит С для оценки вирусологической нагрузки, расшифровка проводится врачом. Считается, что показатели нормы – это полное отсутствие РНК HCV в крови. Но для исключения скрытой инфекции исследование рекомендуют повторить через несколько недель.

Перед началом диагностического обследования необходимо точно знать, какие показатели крови указывают на HCV. С одной стороны это позволит избежать пациенту лишних финансовых трат на ненужные анализы, с другой – сэкономит время.

Так, при гепатите С показательны такие данные:

  • позитивный ИФА вне зависимости от класса обнаруженных антител; но данный параметр оценивают на фоне других результатов, так как некоторые особенности работы иммунной системы могут повлиять на правильность исследования;
  • позитивная качественная ПЦР (чувствительность и специфичность метода достигает 100%);
  • определение количества копий вируса при количественной ПЦР.

Косвенными признаками HCV является превышение норм печеночных трансаминаз, билирубина, лейкоцитоз, ускорение СОЭ, наличие билирубина в моче.

При расшифровке результатов принимают во внимание сокращения, как обозначается гепатит С в анализах. Обычно вирусную нагрузку указывают в МЕ/мл или IU/ml, а РНК вируса английской аббревиатурой RNA HCV.

В отличие от ИФА вероятность ложного результата ПЦР практически нулевая. Ошибки возможны только в результате человеческого фактора, то есть при нарушении правил забора крови, хранения образцов и непосредственно проведении исследования.

Специалисты в области гепатологии подчеркивают, что количественная ПЦР не имеет аналогов и является одним из основных исследований для пациентов с HCV. Механизм проведения анализа сводит к минимуму вероятность ложноположительных или ложноотрицательных результатов.

Для получения результатов требуется несколько дней. Забор крови не требует особой подготовки, возможен практически в любой клинической лаборатории и не сопровождается какими-либо значимыми болевыми ощущениями. Но основным преимуществом такого анализа является высокая точность, достигающая 100%.

источник

Количественная ПЦР – молекулярно-биологический анализ, при котором подсчитывается количество генетического материала возбудителя в крови. Исследование на гепатит С (количественно) выполняется после подтверждения диагноза для определения вирусной нагрузки. Полимеразная цепная реакция характеризуется высокой специфичностью и чувствительностью. Поэтому анализ считается золотым стандартом в диагностике гепатита С.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – анализ, который основан на определении участков РНК или ДНК, специфичных для возбудителя инфекции. В качестве исследуемого материала чаще используется венозная кровь. Тест обладает высокой специфичностью, так как при исследовании плазмы выявляется генетический материал конкретного вируса.

Метод полимеразной цепной реакции впервые был запатентован в 1983 году Кэри Мюллисом. Внедрение в клиническую практику молекулярно-биологического анализа совершило переворот в диагностике бактериальных, грибковых и вирусных болезней.

ПЦР количественный при гепатите С – исследование, при котором подсчитывается количество РНК ВГС (HCV RNA). По результатам определяют вирусную нагрузку, от которой зависят:

  1. дозировка медикаментов;
  2. продолжительность противовирусной терапии (ПВТ);
  3. вероятность осложнений;
  4. успешность лечения.

РНК вируса гепатита С (ВГС) обнаруживается спустя 10-12 суток после заражения, когда до первых симптомов еще далеко. Поэтому исследование применяется для ранней диагностики HCV-инфекции.

Молекулярно-биологический анализ назначается при положительном результате скринингового обследования на гепатит – ИФА и качественной ПЦР. Исследование применяется для:

  • подтверждения диагноза;
  • определения уровня виремии (вирусной нагрузки);
  • прогнозирования течения болезни;
  • оценки результативности лечения;
  • диспансерного обследования после ПВТ.

ПЦР-диагностика рекомендована всем людям с вирусным гепатитом. Точность исследования варьируется в пределах 97-99%, поэтому риск ложных результатов минимален.

  • обнаружение антител к вирусу гепатита С (anti-HCV);
  • признаки воспаления печени;
  • качественное выявление РНК ВГС;
  • острый и вялотекущий гепатит;
  • микст-гепатиты.

Количественный тест выполняется на всех этапах заболевания. Чтобы оценить результативность терапии, вирусную нагрузку определяют перед, во время и после ПВТ. Если уровень виремии высокий, увеличивается риск цирроза и рака печени. Поэтому для профилактики осложнений назначают антивирусные средства в больших дозах.

Количественный анализ ПЦР проводится в лабораторных условиях. Домашних тестов для выявления числа вирусов в крови не существует.

Объективность результатов зависит от правильности подготовки к исследованию. Чтобы снизить вероятность погрешностей, нужно:

  1. сдавать венозную кровь натощак;
  2. выполнять процедуру до 12 часов дня;
  3. не есть за полсуток до визита в лабораторию;
  4. отказаться от газированных напитков и кофе в день обследования.

Забор крови у женщин рекомендуется выполнять за 1-2 дня до менструации. В этот период иммунная защита ослабевает, поэтому сывороточная концентрация возбудителя максимальная.

За 5-7 суток до анализа исключают алкогольные напитки, жирную и острую пищу. Врачи не советуют курить за 2-3 часа до забора крови.

Точность ПЦР-диагностики на гепатит С во многом зависит от правильности сбора и транспортировки биоматериала:

  • забор крови осуществляют в условиях процедурного кабинета;
  • пользуются только одноразовыми стерильными шприцами;
  • для исключения заражения биоматериала соблюдают правила асептики и антисептики.

Контейнер с пробой маркируют в присутствии пациента, после чего отправляют в лабораторию.

Во время количественной ПЦР возбудителя идентифицируют путем обнаружения РНК в плазме крови. Это возможно за счет удвоения участка нуклеиновой кислоты вируса в среде фермента РНК-полимеразы. Во время анализа копируются (амплифицируются) только определенные участки генома.

Подсчет количества РНК вируса гепатита осуществляют в 3 этапа:

  1. Выделение генетического материала. Чтобы очистить вирусную РНК от крови и белковых включений, биоматериал пропускают через сорбенты, отмывают в растворе, центрифугируют, а потом обезвоживают. В результате остается осадок с вирусными частицами, который растворяют в специальной жидкости. На выходе получается РНК вируса гепатита в элюенте.
  2. Амплификация. Анализ выполняется в приборе-термостате, в котором периодически подогревают и охлаждают пробирки. При одном исследовании делают до 35 циклов, состоящих из 3 фаз: денатурация (разрушение) РНК, отжиг и синтез нуклеиновых кислот матричной цепи. За несколько десятков циклов в пробирке образуется множество фрагментов РНК, достаточное для подсчета количества генетического материала.
  3. Электрофорез. Пробирку с копиями вируса гепатита помещают в агарозный гель. Образец подключают к источнику тока, под действием которого фрагменты РНК разделяются. Благодаря электрофорезу копии нуклеиновых кислот становятся различимыми в свете ультрафиолета. Затем с применением специального оборудования подсчитывают количество РНК вируса.

В настоящее время для определения уровня виремии все чаще проводят ПЦР-диагностику в реальном времени (Real-Time PCR). В отличие от стандартного анализа, в образец крови вводят раствор с флуоресцентными метками. Благодаря этому удается подсчитать количество амплифицированной РНК ВГС в реальном времени после каждого цикла.

Количественная оценка позволяет судить об уровне виремии, то есть активности вирусного процесса. С учетом результатов анализа гепатолог подбирает дозу лекарства, определяет продолжительность терапии гепатита С.

Расшифровка количественного анализа на гепатит С:

Данные количественной ПЦР, в МЕ/мл Трактовка
не обнаружено вариант нормы, вируса в крови нет
менее 150 содержание РНК ниже линейного диапазона концентраций, минимальная вирусная нагрузка
150-3*10 4 низкий уровень виремии
от 3*10 4 до 8*10 5 средняя вирусная нагрузка
более 8*10 5 содержание РНК ВГС выше линейного диапазона концентраций

Вирусная нагрузка – важный показатель, который учитывается при разработке схемы терапии. Если уровень виремии минимальный или низкий, прогноз течения гепатита и результативности ПВТ благоприятный. Ситуация ухудшается при средней и высокой вирусной нагрузке. Такие пациенты подвержены осложнениям – фиброзу, жировому гепатозу, циррозу.

Уровень виремии не отражает степень повреждения печеночной паренхимы или тяжесть течения гепатита. Чтобы определить серьезность изменений в печени, прибегают к инструментальному обследованию – фибросканированию, биопсии и гистологическому анализу.

Чтобы провести исследование на гепатит С (качественный и количественный ПЦР-анализ), посетите лабораторное отделение поликлиники, частную клинику или лабораторию. Стоимость диагностики в Москве зависит от:

  1. типа анализируемого биоматериала;
  2. чувствительности применяемой тест-системы;
  3. количества определяемых инфекций.

Примерная стоимость лабораторного анализа

Тип анализа Цена в рублях
забор крови 170-200
качественная ПЦР 750-1000
количественная ПЦР (реал-тайм) 3800-4000
генотипирование 1350-1400

Анализ ПЦР на гепатит С делается не более 3 часов. Забрать окончательные результаты можно уже в течение 1-2 суток.

Генетический материал возбудителя гепатита выявляется в крови спустя 1.5 недели после заражения. До этого периода содержание РНК ВГС в крови так мало, что ее нельзя обнаружить в лабораторных условиях. Для оценки вирусной нагрузки рекомендуется пользоваться высокочувствительными тест-системами: 150-1*10 8 МЕ/мл.

ПЦР-диагностика – исследование, достоверность результатов которого достигает 97-99%. Искажение данных возможно при:

  1. игнорировании правил подготовки к исследованию;
  2. нарушении требований антисептики;
  3. несоблюдении методики анализа крови;
  4. неправильном заборе и хранении биоматериала.

Перед обследованием пациент должен сообщить врачу о приеме медикаментов, так как их компоненты могут влиять на активность возбудителя и результаты исследования.

ПЦР-диагностика – высокоточное исследование, при котором определяют наличие и количество копий возбудителя инфекции. Получение ложноотрицательных результатов почти невозможно. Погрешности выявляются в единичных случаях при диагностике хронического гепатита вне обострения.

источник

Читайте также:  Какие анализы сдавать на иммунитет