Как прочесть анализ чувствительность к антибиотикам

Бактерии, которые выделяются у больных, подлежат проверке на чувствительность к антибактериальным препаратам.

При этом появляется возможность более рационального проведения терапии антибиотиками. Существуют две основные группы, на которые делятся методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам:

Диффузионные методы;
Методы разведения.

Также существуют ускоренные методы, позволяющие сократить время на определение чувствительности.

Диффузионный метод дисков, которые насыщаются антибиотиками, получил широкое распространение из-за простоты. При этом способе определение чувствительности осуществляется следующим образом:

Чашка Петри (лабораторный сосуд, имеющий форму плоского цилиндра) частично заполняется питательным веществом – мясопептонным агаром.

Поверх него наносится (засевается) суспензия бактерий, имеющая определенную плотность.

Чашка Петри помещается в термостат, в котором поддерживается температура 37 °C. Флору инкубируют 18 часов.

Результат определяется измерением в миллиметрах диаметра той зоны, которая возникла вокруг диска.

Это исследование выполняется так же, как и диско-диффузионный способ тестирования. При этом вместо диска используется тест в виде полоски, на которую антибиотик наносится с увеличением концентрации в соответствии с градуировкой от минимума к максимуму.

Зона, в которой рост бактерий подавляется, имеет эллипсовидную форму. Место, где происходит соприкосновение этой зоны и полоски, определяется как МПК. Расшифровка аббревиатуры – минимальная подавляющая концентрации, которая считывается количественно согласно цифрам градуировки.

В основе методов разведения лежит алгоритм двойных последовательных разведений. В этом способе каждая последующая концентрация антибиотика в два раза ниже предыдущей. Данные разведения вносятся в бульон или агар, являющиеся питательной средой. Поверх засевают флору.

После выдерживания в термостате и окончания инкубационного периода (18-20 часов) производится определение полученных результатов, выраженных в единицах измерения мкг/мл, в которых измеряется МПК.

Заметный рост микроорганизмов проявляется в виде помутнения питательной среды. Это свидетельствует о недостаточности концентрации антибиотика. МПК – это наименьшее содержание антибиотика в сосуде, при котором зримо не определяется помутнение, свидетельствующее о жизнедеятельности бактерий.

Наименьший промежуток времени, через который может быть получен результат исследования на чувствительность бактерий по вышеописанным методам – около 18 часов. Однако при тяжелом протекании инфекционного заболевания – это длительный период.

В их основе лежат следующие принципы исследования:

Подавление антибиотиком ферментативной (регулируемой как ускорителями, так и замедлителями) активности микробов. При этом тесте индикатор изменяет свой окрас в зависимости от того, в какой степени чувствительна флора, культивированная на глюкозе. При добавлении дрожжевого экстракта к среде время получения результата – около 2,5 часов.
Изменение в количественном выражении окислительно-восстановительного потенциала (Eh) при культивировании микроорганизмов в питательной для них среде. При этом тесте добавляемые в среду специальные индикаторы изменяют свой цвет. Метод прост в техническом исполнении. Результаты исследования могут быть получены уже через два часа.
Обнаружение методом фазово-контрастной микроскопии образовавшихся инволюционных (находящихся в обратном развитии) форм микроорганизмов. При этом фиксируется концентрация антибиотика, вызвавшая такое изменение.

Колониеобразующая
единица (colony-forming unit -CFU) — одна живая микробная клетка, из которой вырастает колония,по другим определениям — видимая колония микроорганизмов, выросшая из одной клетки или из группы клеток.Определение КОЕ теоретически позволяет определить концентрацию(количество) микроорганизмов в единице объема.Если определения количества микроорганизмов например в 1 мл мочи или в 1 мл спермы не вызывает возражений и может приниматься во внимание при определении тактики лечения
заболевания,то количественное определение микроорганизмов в отделяемом из половых органов (влагалища,уретры) вызывает большие сомнения — так в любом случае,независимо от методов подсчета,определяется количество микроорганизмов только во взятой пробе из половых органов,а не во влагалище,цервикальном канале или уретре в целом

Поэтому определение различных «титров», «степеней»,»количества» микроорганизмов в пробах,взятых из отделяемого влагалища и уретры не имеет никакого практического значения ни для диагностики мочеполовых инфекций,ни для назначения лечения,ни для контроля их излеченности.

Подсчет КОЕ проводят
несколькими методами:

Метод серийный разведений

Из транспортной среды,содержащей биоматериал берется 1 мл,который последовательно разбавляется в 10 раз с посевом в пронумерованные пробирки с питательной средой.Та пробирка,в которой прекращается рост микроорганизмов считается максимальной границей количества микроорганизмов в пробе.Для примера количество концентрация микроорганизмов в нижеприведенной таблице составляет 10х 6

Этот же метод серийных разведений
применяется для определения чувствительности к антибиотикам (определяется минимальная ингибирующая концентрация)

Метод подсчета колоний под микроскопом

Метод является ориентировочным и заключается в подсчете колоний под микроскопом под увеличение 10 х в поле зрения с последующей интерпретацией по сравнительной таблице.

Секторный метод (метод Gould)

По существу является вариантом метода серийных разведений.Применяется для микробиологического исследования мочи.Платиновой петлей диаметром 2 мм, емкостью 0,005 мл берут каплю мочи и делают 30-40 штрихов на сектор А чашки Петри. Прожигают петлю и производят 4
штриха через сектор А в сектор I. Аналогичным образом из сектора I засеваютсектор II, а из сектора II — сектор III.Чашки инкубируют при 37 оС24 часа. При отсутствии роста на кровяном агаре инкубацию пролонгируют до 3 суток.Учет результатов проводят по специальнойтаблице.

Уроки антибиотической истории

Превращая, по немецкому выражению, нужду в добродетель, история развития антибиоза как теории сумела из эмпирических наблюдений и взглядов извлечь и отточить до совершенства свое биологическое и диалектическое преимущество.

Микозы – заболевания, причиной которых являются эукариотные микроорганизмы, относящиеся к царству грибов.

Акушерство, гинекология, репродуктивная медицина

Применение препарата Микогал для лечения вульвовагинитов у беременных

Вульвовагиниты у беременных в настоящее время регистрируются достаточно часто – в 12-58% случаев по данным разных авторов.

Антибиотикоассоциированные диареи: современный взгляд на проблему

В связи с широким применением в клинической практике антимикробных препаратов на современном этапе все большее внимание уделяется рациональным подходам к назначению антибактериальной терапии. Читать дальше

Антибактериальная терапия: проблемы и решения

Антибактериальная терапия: проблемы и решения

12-13 февраля 2004 года г. Харьков принимал участников VII Международной конференции «Клиническая микробиология и антибактериальная терапия: проблемы и решения». Выступления ведущих специалистов из России, Белоруссии и Украины..

Эффективность применения препарата Азимед у больных с внебольничной пневмонией

Пневмония относится к числу наиболее распространенных заболеваний человека и все еще остается серьезной медико-социальной проблемой. Так, заболеваемость пневмонией cреди взрослого населения в Украине в 1998–2000 годах составляла 4,3-4,7 на…

Антибиотикотерапия. По материалам I Международного медико-фармацевтического конгресса «Антибиотикотерапия – 2007»

Антибиотики являются наиболее многочисленной группой лекарственных средств. Однако ежегодно в медицинских изданиях появляются сведения о снижении чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам.

Акушерство, гинекология, репродуктивная медицина

Кагоцел в лечении воспалительных заболеваний женских половых органов смешанной этиологии

Воспалительные заболевания женских половых органов продолжают оставаться актуальной проблемой современного акушерства и гинекологии. Несмотря на значительное количество научных исследований и внедрение новых антибактериальных средств, их частота не имеет.

Принципы антибиотикопрофилактики и антибактериальной терапии при панкреонекрозе

Адекватное лечение хирургической инфекции предполагает решение двух диагностических задач: дифференциальной диагностики локальной и генерализованной форм инфекции.

В современной венерологии редко приходится прибегать к бактериологическому методу исследования.По моему мнению в России отмечается некоторое злоупотребление этим методом,связанное с коммерческим интересами лабораторий и нежеланием или незнанием врачами методов синдромной диагностики и лечения половых инфекций.Несомненными
показаниями к проведению бактериологического исследования являются два заболевания : воспалительные заболевания малого таза у женщин и простатит у мужчин.С юридической точки зрения бактериологическое подтверждение диагноза гонококковой инфекции требуется при обнаружении в мазке грамотрицательных диплококков у девочек, пожилых женщин и беременных .В некоторых случаях исследование необходимо
при хроническом,торпидном уретрите у мужчин и рецидивирующем вульвовагините у женщин.

Бак посев слизи из зева и носа позволяет провести качественную и количественную оценку состава микрофлоры и выявить:

возбудителей острых и хронических заболеваний (тонзиллиты, фарингиты, риносинуситы и т.д.);
клинически-значимое хроническое носительство стафилококков, пневмококков и т.д.

В норме, у здоровых людей определяются сапрофитная или условно-патогенная флора в низких титрах (менее 103 КОЕ/мл). Клинически значимыми считаются значения, превышающие 104КОЕ.

При полном отсутствии роста колоний рекомендуется пересдать анализ, так как подобные результаты могут быть ложноотрицательными (если были нарушены правила подготовки к забору материала).

Мазок из зева и носа на флору и чувствительность к антибиотикам позволяет выделить не только возбудителя инфекционно-воспалительного заболевания, но также и определить, какие антибактериальные препараты для него наиболее губительны.

Необходимо помнить, что за два дня до посева слизи запрещено использовать противомикробные спреи, полоскания, мази для носа. Также запрещено обрабатывать миндалины раствором Люголя.

Забор материала должен проводиться утром, натощак. Для получения достоверных результатов не рекомендовано чистить зубы и полоскать рот.

При заборе материала (взятие мазка из зева) необходимо, чтобы стерильный тампон, которым берут пробу, не соприкасался с языком и губами. Для этого, пациента просят широко раскрыть рот и прижимают язык шпателем. Соскоб берется только из глотки, с обеих миндалин. Если на миндалинах присутствуют видимые налеты, то соскоб берется в первую очередь с воспаленной области.

Посев из зева на микрофлору

Расшифровка посева из зева на флору и чувствительность к антибиотикам включает в себя заключение из бактериологической лаборатории с установленным видом возбудителя, его титрами и результатами антибиотикограммы (проводится, если рост бактериальных колоний в посеве был диагностически значимым).

Современная медицина в своем арсенале имеет огромное количество методик, что позволяют своевременно обнаружить самые тяжелые заболевания и своевременно начать их терапию. В гинекологии тоже имеются свои принципы диагностики, одним из самых надежных, считается цитология мазка. Процедура из цервикального канала представляет собой мазок из шейки матки, позволяющий оценить среду влагалища и обнаружить такие бактерии, как:

Забор из цервикального канала делают с помощью специальной стерильной палочки. Врач извлекает слизь, которую продуцируют местные железы и кусочки слущеных клеток слизистой оболочки цервикального канала. После извлечения биоматериала, его помещают в специально для этого подготовленную пробирку с питательной средой для бактерий.

Кишечная палочка и другие представители патогенной микрофлоры, будут поглощать из искусственно созданной среды необходимые для них полезные вещества, и размножаться. Это позволит в точности определить тип колонии и выбрать лекарство, к которому чувствителен тот или и ной штамм микроорганизмов

Важно не создать в пробирке губительные условия, которые приведут к гибели микроорганизмов, в противном случае врач не сможет определить провокатора заболевания, и не вылечит женщину

Слизь, что отправляется на цитологическое исследование после сбора помещается в закрытую пробирку и вставляется в термостат. Далее ее медсестра или же сама пациентка доставляет в лабораторию. В лабораторных условиях пробирку открывают и перемещают биоматериал в другую питательную среду, что находится в чашке Петри. В ней слизь находится 3-5 дней, только спустя это время, можно по отдельности выделить всех представителей патогенной форы, что есть в мазке.

Бактериологический анализ на флору у здорового человека покажет наличие полезных микроорганизмов, выполняющих защитные функции, препятствующих проникновению на слизистые оболочки носоглотки болезнетворных организмов.

При правильно проведенном анализе в зеве у здорового человека определяется незначительная концентрация условно-патогенной микрофлоры. Ее показатели не должны превышать результат от 103 до 104 КОЕ/мл.

Если анализ показывает превышение допустимого количества условно-патогенных микроорганизмов, это говорит о наличии у человека в носоглотке микрофлоры, являющейся причиной развития заболеваний ЛОР-органов.

Стафилококк ауреус, норма которого не должна превышать показатель в 104 КОЕ/мл, представляет собой условно-патогенный микроорганизм. Это означает, что он содержится в минимальном количестве на слизистой носоглотки и не провоцирует развития каких-либо заболеваний ЛОР-системы.

Превышение показателей нормы говорит о заражении стафилококком, который является причиной развития следующих заболеваний:

ангина и фарингит;
стоматит, тонзиллит;
синусит;
гингивит.

Активный рост стафилококка связан со снижением защитных функций иммунитета. В группе риска находятся дети, люди пожилого возраста. Лечение проводится препаратами антибактериального спектра действия.

Стрептококк — условно-патогенный микроорганизм. В минимальном количестве находится на слизистых оболочках носоглотки. Является провокатором ангины и скарлатины. Наличие повышенной концентрации патогенной микрофлоры в носу может стать причиной развития синусита бактериального типа.

На развитие инфекционного процесса в носоглотке указывает показатель стрептококка в 105 КОЕ/мл. Диагноз ставится по наличию у человека специфической симптоматической картины.

Определение в зеве концентрации грибка Кандида в 105 КОЕ/мл и более указывает на заражение пациента кандидозом. Заболевание развивается быстро, имеет выраженную и интенсивную симптоматическую картину, может спровоцировать развитие осложнений в органах дыхания. Нормой является полное отсутствие грибка в мазке из зева или максимально допустимое количество не выше 104 КОЕ/мл.

Нейссерия, или кишечная палочка, как и пневмококк, в незначительном количестве содержится в мазке из слизистой носоглотки.

Пневмококк является причиной развития следующих заболеваний:

пневмония;
бронхит;
сепсис органов дыхательной системы;
ларингит, фарингит, трахеит;
отит среднего уха;
остеомиелит.

Вызывает превышенная концентрация нейссерии и пневмококка ряд различных инфекционных и воспалительных заболеваний органов дыхательной системы.

В зависимости от количества патогенной микрофлоры в мазке из носоглотки назначается соответствующее лечение либо профилактические мероприятия, направленные на снижение концентрации патогена и уменьшение рисков развития заболеваний. Терапия заключается в применении препаратов антибактериального спектра действия.

Наиболее простым в проведении и распространённым в клинической практике, является метод диффузии стандартных бумажных дисков, смоченных антибактериальными препаратами, в чашку Петри, заполненную питательной средой. Диски выкладывают по поверхности агара, соблюдая расстояние два сантиметра от края чашки и друг от друга.

После того, как чаша постоит при комнатной температуре, её перемещают в термостат.

Время выдерживания в термостате для каждых представителей флоры разное. Стандартный срок инкубации составляет от трёх до пяти дней.

Далее, оценивается подавление роста тестируемых бактерий:

отсутствие задержки роста, указывает на полную устойчивость микроба к применяемому средству;
кольцо, вокруг бумажного диска, диаметром до 1.5 см, свидетельствует в пользу слабой реакции. Данный препарат, также не будет эффективен в лечении;
зона от 1.5 до 2.5 см, говорит о стандартной чувствительности и умеренной клинической эффективности;
сверхчувствительность к препарату, характеризуется зоной более 2.5 см.

Пациентке установлен диагноз: хламидийный цервицит. Для эмпирической терапии, в данном случае, рекомендованы Азитромицин или Доксициклин. Выбор остановлен на первом препарате. Начато лечение. Клинически состояние больной улучшилось.

Лекарство	Диаметр кольца вокруг диска, в см	Степень чувствительности
Доксициклина моногидрат	1.8	+
Азитромицин	2.9	++
Эритромицин	2.7	++
Левофлоксацин	1.3	—
Офлоксацин	1.4	—
Джозамицин	2.4	++
Амоксициллин/клавуланат	1.0	—
Моксифлоксацин	1.4	—
Цефтриаксон	0.3	—

Расшифровка посева на микрофлору и чувствительность к антибиотикам:

Данные результаты показывают, что лечение было подобрано правильно.

возбудитель имеет высокую чувствительность в отношении Азитромицина, также для лечения можно было использовать Эритромицин и Джозамицин;
умеренная чувствительность к Докициклину допустимо использовать;
устойчивость к Левофлоксацину, Офлоксацину, Моксифлоксацину, Амоксициллина/клавуланату;
абсолютная резистентность к Цефтриаксону.

Определение восприимчивости к противомикробным средствам проходит аналогично дискодиффузионному методу, однако, вместо смоченных антибактериальными средствами дисков, в агар помещается полоска Е-теста. На ней размечены различные уровни концентрации антибиотика, начиная от максимальной и заканчивая минимальной.

Показатель минимальной концентрации подавления определяют в месте перекреста полоски теста и зоны подавления роста.

Этот метод является простым, но достаточно дорогостоящим, в связи с этим, диффузия дисков применяется чаще.

Всего техник существует несколько. Большинство из них осуществляются с применением следующих инструментов:

Микробиологическая петля.
Чашка Петри.
Специальная петля с пипетками,.
Шпатели.
Иглы.

Микробиологическая бактериальная петля является универсальной, так как применяется во всех техниках. Для жидких материалов используют петлю с пипетками.

Последние два инструмента применяют при посеве на чашку Петри. Ее считается особенной. Ее применяют специально для посева на плотную среду. Чашка представляет собой специальный лабораторный сосуд плоской формы небольшой высоты. Изготавливают ее из прозрачного полистирола или стекла. В диаметре чашка Петри может равняться 50-100 мл. Высота ее всегда примерно 15 мл. Чашка Петри может быть двух видов: стеклянной и пластмассовой. Первая предназначения для многоразового использования, а вторую можно применять только один раз. Пластмассовая чашка является более стерильной, так ее доставляют в лабораторию в специальной плотно закрытой упаковке. Стеклянную чашку перед проведением бактериологического исследования всегда тщательно стерилизуют.

Бакпосев проверяют в специальных средах, которые могут быть твердыми или жидкими. Если размножается жидкий материал, то лаборанты используют пробирки.

Техника бактериологического исследования состоит в следующем: чашку Петри приоткрывают, затем наносят на плотную среду биологический материал. Далее начинают наблюдать за ростом этого материала. Бактерии начинают равномерно увеличиваться в количестве, превращаясь в густую полноценную культуру. После чего они начинают делиться на колонии. Спустя некоторое число дней лаборант идентифицирует возбудителя. Параллельно с эти проводя проверку на чувствительность к антибиотикам.

Он предназначен для выявления таких элементов, как стафилококк, стрептококк, клебсиелла и других не менее опасных микроорганизмов. Но помимо вредных микроорганизмов, заключает в себе расшифровка и наличие благоприятных бактерий

Особое внимание уделяется не только их наличию, но и количеству

Бифидобактерии	Полезные жители, оптимальное их количество должно состоять минимум из 95%, снижение его количества до 10*9 степени означает наличие дисбактериоза.	Предназначение их, это обеспечение полноценной работы кишечника.
Лактобактерии	Хорошим показателем является их наличие около 5%. При снижении этого процента, появятся запоры, спровоцированные нехваткой лактозы.	Предназначены для выработки молочной кислоты, способствующей нормализации работы кишечника.
Кишечная палочка	Занимает 1% микрофлоры. Если показатели ниже или выше нормы, то указывает на дисбактериоз и глисты.	Препятствует размножению условно-патогенных микроорганизмов, поглощает кислород, тем самым обеспечивая существование бифидобактериям и лактобактериям.
Кокковые бактерии	Оптимальное соотношение доходит до 25%. Увеличение соотношения говорит о нарушении микрофлоры, и возможном развитии инфекции в мочеполовой системе.	Они всегда присутствуют в кишечнике.

Гемолитическая кишечная палочка
При норме ее нет в наличии. В случае наличия, указывает на присутствие нарушений в микрофлоре. Провоцирует появление кожных проблем, аллергии.
Является конкурентом бифидо и латкобактерий.
Золотистый стафилококк
Не должны обнаруживаться. Появление даже минимального количества, способно вызвать рвоту, понос.
Могут появиться за счет снижения в микрофлоре хороших микроорганизмов.
Патогенные бактерии
Являются вредными, из-за их появления происходит развитие инфекционного заболевания. При норме могут все же присутствовать, но иметь вялотекущую форму.
При анализе кала на дисбактериоз они являются первыми в списке результата.

Стоит заметить, что именно с помощью УПФ происходит определение точного вида бактерии, провоцирующей развитие инфекции.

Бактериологический посев на флору и антибиотикограмма играют важную роль в выявлении болезнетворных бактерий, их разновидности и чувствительности к противомикробным препаратам. Несмотря на то, что эти исследования дополняют друг друга, они имеют разные принципы и способы расшифровки результатов. Для начала давайте разберемся с тем, как проводят бакпосев.

Посев на флору и АЧ – это две тесно взаимосвязанные процедуры, поэтому за первой, как правило, сразу же следует вторая. Исключением являются только те случаи, когда в исследуемом биологическом материале не было обнаружено патогенных микроорганизмов.

Именно на их обнаружение нацелен бактериальный посев.

Бак посев на флору подразумевает культуральный посев образца биологического материала на питательную среду. При этом учитывается приблизительная группа микроорганизмов, которая, по мнению врача, привела к развитию заболевания у пациента.

Например, если речь идет о герпесвирусной инфекции, соскоб с везикулярной сыпью вживляется в куриный эмбрион. Если на протяжении нескольких суток положительная динамика роста вируса не наблюдается, результат считается отрицательным.

То же самое касается и других патогенных микроорганизмов и грибов. Для каждой группы используется особая среда, которая будет способствовать росту бактерий.

Следующим этапом анализа мочи (или другой биологической жидкости) на микрофлору является помещение питательной среды с проросшей культурой в специальный аппарат – термостат. Там емкость находится на протяжении определенного периода времени.

После окончания положенного отрезка времени емкость извлекается из термостата, затем лаборантом проводится визуальная оценка цвета, количества и плотности прорастания бактериальных колоний. При расшифровке и записи полученных данных используется такое понятие, как колониеобразующая единица, или КОЕ (1 бактериальная клетка). Именно по этому критерию исчисляется количество микроорганизмов в образце биологического материала пациента.

Расшифровка посева на флору и АЧ играет первостепенную роль в диагностике различных заболеваний. Различают 4 степени бактериальной обсемененности в образце биологического материала.

При первой степени рост микрофлоры очень медленный, практически незаметный. Ее произрастание происходит исключительно в условиях жидкой среды.
Вторая степень характеризуется рост микроорганизмов, относящихся только к одному определенному виду. При этом их число не превышает 10 колоний, и растут они только в довольно плотной среде.
При третьей степени патогенная микрофлора произрастает в плотной твердой среде, но их число не превышает 100 колоний.
При четвертой степени число колоний превышает 100 бактериальных клеток, произрастающих на твердой питательной среде.

Как понять эти данные? Первая и вторая степени свидетельствуют о том, что микрофлора несколько загрязнена, но это не является критическим показателем. Третья и четвертая степени указывают на наличие явного воспалительного или инфекционного процесса, протекающего в организме человека. При этом патологию вызвали именно те микроорганизмы, которые проросли в искусственно созданной лаборантами среде.

Расшифровка мазка из зева на микрофлору несколько отличается от той, которая рассчитана под другой биологический материал (сперму, влагалищные выделения, мочу и др.). Чтобы понять данные, записанные на специальном медицинском бланке, необходимо знать, какие показатели считаются самыми оптимальными.

Если лаборант указал на листе, что количество тех или иных бактерий не превышает 10 в 4 степени, это означает, что переживать не о чем. Это допустимая норма для любого пациента.

При превышении количества колоний показателей 10 в 5 степени, то это считается тревожным звонком, извещающим об активном росте условно патогенной микрофлоре в ротовой или носовой полости (в зависимости от того, для подтверждения какого диагноза был взят мазок из зева). Крайне редко лаборант может указать количество микроорганизмов 10 в 1 степени. Это говорит о том, что уровень бактерий слишком мал, чтобы вызвать ту или иную ЛОР патологию.

Это исследование представляет собой лабораторный метод определения лекарственного средства, оказывающего наибольшее воздействие на болезнетворные микроорганизмы, вызвавшие развитие данного конкретного заболевания.

Фармацевтический рынок предлагает огромный выбор лекарственных средств, как в плане эффективного воздействия, так и в плане стоимости. Поэтому, чтобы выбрать наиболее эффективное антибактериальное средство, назначают бактериологический посев.

Помимо этого, определение чувствительности необходимо во избежание развития устойчивости микроорганизмов к антибиотикам. Если пациент перед этим уже принимал антибиотики, а теперь нужно провести повторный курс лечения, то препарат необходимо заменить на другой. Подобный образ действия позволяет применить меньшую дозировку лекарства и предотвратить мутацию возбудителя. В отделениях гнойной хирургии антибиотики заменяют раз в несколько месяцев.

Тест на чувствительность бактерий необходим при возникновении у пациента аллергических реакций на определенную группу препаратов.

Анализ мочи на чувствительность к антибиотикам также проводится очень часто.

На сегодняшний день существует несколько основных методов определения чувствительности микроорганизмов к антибиотику. Самым распространенным и простейшим является диско-диффузионный способ, или метод дисков.

Преимуществом диффузионных методов является доступность для любой бактериологической лаборатории и простота тестирования. Однако стоимость Е-тестов высока, поэтому наиболее часто используют диско-диффузионный способ.

Как именно осуществляются анализ — посев на чувствительность к антибиотикам?

Помутнение бульона (рост бактерий) или поверхности агара говорят о том, что данной концентрации антибиотика недостаточно для подавления жизнеспособности микроорганизмов. Увеличение концентрации антибиотика влечет за собой ухудшение роста бактерий. После серии последовательных разведений антибиотика, первая наименьшая концентрация, где не наблюдается рост бактерий, считается минимальной подавляющей концентрацией (МПК), то есть достаточной для лечения.

Эти величины не являются постоянными и пересматриваются в зависимости от изменений чувствительности бактерий. Пересмотром критериев и их разработкой занимаются микробиологи и химиотерапевты, которые входят в специальные комитеты.

Как сдавать анализ на чувствительность к антибиотикам?

Что же означает это интересное понятие?

Клинически к чувствительным относят микроорганизмы, если во время лечения стандартной дозировкой антибиотика инфекции, вызванной данными бактериями, наблюдается хорошее терапевтическое действие.

Если достоверная клиническая информация отсутствует, то разделение на категории резистентности основывается на совокупности результатов, полученных in vitro, а также на концентрации антибиотика в сыворотке крови.

Какие из них являются резистентными?

Сдать анализ мочи на чувствительность к антибиотикам довольно просто.

Иногда резистентные микроорганизмы и штаммы с промежуточной устойчивостью объединяются в одну категорию устойчивых бактерий.

В определенных ситуациях при недостатке результатов тестирования чувствительности распространенными способами, применяют определение минимальной бактерицидной концентрации.

Расшифровка анализа мочи на чувствительность к антибиотикам интересует многих.

Говоря о минимальной бактерицидной концентрации (МБК), имеют в виду наименьшую концентрацию антибиотика, вызывающую при исследовании in vitro уничтожение 99,9% бактерий от изначального показателя на протяжении определенного временного промежутка.

Тестирование бактерий на чувствительность к антибиотику проводят с применением следующих биологических жидкостей:

Помимо этого, для того чтобы узнать местную чувствительность, проводят забор материала из уретры, верхних дыхательных путей или цервикального канала.

Интерпретация результатов микробиологического
исследования материалов, полученных при обследовании половых органов представляет определенные трудности,и, в значительной мере, зависит от опыта врача-лаборанта и правильности техники проведения исследования.В результате проводимого исследования определяется микроорганизм или микроорганизмы,по наличию которых можно предполагать,что он (они) являются причиной патологических изменений в мочеполовых органах.В большинстве случаев помимо качественного определения (наименования микроорганизма) проводят и количественную
оценку культуры.Наиболее простым методом оценки является определения степени роста:

I Очень скудный рост — рост только
на жидких средах; на плотной питательной среде рост отсутствует. II

На плотной питательной среде рост до 10 колоний микроорганизмов определенного вида.

На плотной питательной среде рост от 10 до 100 колоний.

На плотной питательной среде рост более
100 колоний.

В случае роста условно-патогенных микроорганизмов I и II степени роста чаще всего свидетельствуют о загрязнении, III и IV степени роста — об этиологической роли данного микроорганизма в воспалительном процессе.

Взятие мазка для проведения бактериологического анализа проводится в условиях лаборатории:

Пациент садится на кушетку или стул.
Для непосредственного забора мазка из ротовой полости пациент широко открывает рот.
Медицинский работник с помощью специального шпателя прижимает к нижней челюсти язык. Берет образец микрофлоры ватным тампоном.
Тампон сразу же помещается в стерильную пробирку, которая плотно закрывается крышкой.

Процедура взятия мазка из горла не вызывает болезненных ощущений, но может спровоцировать рвотный рефлекс. Чтобы минимизировать процесс обратной перистальтики, человеку нужно правильно подготовиться к процедуре — ничего не есть и не пить.

Из носа проба биологического материала берется следующим образом: пациент садится на кушетку, запрокидывает голову назад. Кожный покров ноздрей перед процедурой дезинфицируется медицинским спиртом. Сначала лаборант вводит ватный тампон в одну ноздрю, прокручивает его по поверхности слизистых оболочек. Затем процедура повторяется другим стерильным ватным тампоном со следующей ноздрей.

источник

Если у лечащего врача возникнут подозрения о наличии бактериальной природы заболевания пациента, то он обязательно попросит сдать анализ на чувствительность к антибиотикам. Данная процедура помогает представителям медицины назначать правильные лекарственные препараты, поскольку микроорганизмы могут мутировать и развить к ним резистентность.

В целях подбора правильной терапии врач рекомендует пациенту пройти обследование. Анализ на чувствительность к антибиотикам назначают для определения самого эффективного и уместного лекарства в данном случае. Наиболее часто это необходимо для лечения инфекций, передающихся половым путём. Также определение самого эффективного антибиотика является обязательным условием при терапии заболеваний у детей.

Анализ мочи на чувствительность к антибиотикам также проводится очень часто.

Для определения чувствительности диско-диффузионным способом по поверхности застывшего агара в чашке Петри распределяют исследуемый материал (бактериальную суспензию). После этого туда помещают картонные диски, пропитанные определенными антибиотиками. Затем бакпосев закрывают и размещают в термостате при температуре 35-37°С на 12-18 часов. Диффузия антибиотика влечет за собой формирование зоны подавления роста бактерий вокруг бумажных дисков. По истечении указанного времени результат проверяют путём замера диаметра этой зоны.

Второй анализ на чувствительность к антибиотикам – это Е-тест. Он проводится аналогично предыдущему способу, только вместо картонных дисков применяют полоску Е-теста, которая содержит градиент степени пропитки антибиотиком от минимальной к максимальной. После двенадцатичасовой инкубации в термостате специалист достает чашку и оценивает эффективность каждого вида антибиотика, просматривая конкретное место соприкосновения зоны подавления роста бактерий и шкалу полоски. Такова будет самая минимальная концентрация лекарства, необходимого для лечения заболевания.

Как именно осуществляются анализ — посев на чувствительность к антибиотикам?

Данные методы основываются на применении последовательных двойных разведений антибактериального препарата от максимальной до минимальной концентрации. При этом различную концентрацию антибиотика распределяют по жидкой питательной среде (бульону) или агару. После этого бактериальную суспензию помещают на поверхность агара в чашке или в бульон с антибиотиками. По истечении двенадцатичасовой инкубации в термостате при температуре 35-37°С, специалисты анализируют полученные результаты.

На основании полученных данных (значения МПК или диаметра зоны подавления роста) бактерии разделяют на чувствительные, с промежуточной резистентностью и резистентные. Для разделения данных категорий резистентности (или чувствительности) применяют пограничные концентрации антибиотика.

Всего существует два метода интерпретации полученных результатов анализа чувствительности: клинический и микробиологический. Последний основывается на тестировании значений распределения концентрации антибиотика, подавляющего жизнедеятельность микроорганизмов. Клинический метод интерпретации основывается на оценивании эффективного действия антибактериальной терапии.

Как сдавать анализ на чувствительность к антибиотикам?

Что же означает это интересное понятие?

Какие из них являются резистентными?

Микроорганизмы относят к устойчивым, когда во время лечения заболеваний, вызванного данными бактериями, от терапии не наблюдается никакого положительного эффекта, даже при применении максимальной дозировки антибиотика. Данные бактерии обладают механизмом резистентности.

Сдать анализ мочи на чувствительность к антибиотикам довольно просто.

Когда говорят о промежуточной резистентности бактерий, то подразумевают случай, когда заболевание, вызванное этими штаммами, имеет различный терапевтический исход. Терапия может оказаться успешной при применении повышенной дозировки антибиотика, или если инфекция локализуется в месте, где накапливается самая высокая концентрация антибактериального препарата.

Расшифровка анализа мочи на чувствительность к антибиотикам интересует многих.

Показатель МБК применяют во время лечения антибиотиками, способными оказывать бактериостатическое действие, или если у особой категории пациентов отсутствует эффект от антибактериальной терапии. К частным случаям применения МБК относят остеомиелит, бактериальный эндокардит или генерализованные инфекции у больных с ослабленным иммунитетом.

В заключении хотелось бы сказать, что в нынешнее время не существует способов, которые с абсолютной достоверностью позволили бы предсказать потенциальный клинический эффект антибиотиков при терапии заболеваний, вызванных проникновением в организм болезнетворных микроорганизмов. Однако результаты определения чувствительности, могут стать отличным ориентиром врача для подбора и корректировки антибактериального лечения.

Мы рассмотрели то, как проводится анализ на чувствительность к антибиотикам.

источник

Анализ на чувствительность к антибиотикам является обязательным при возникновении у врача подозрений, что заболевание пациента имеет бактериальную природу. Это связано с тем, что медики пытаются контролировать назначение данных препаратов, чтобы не стимулировать мутации и не вызывать резистентность у микроорганизмов.

Анализ на чувствительность к антибиотикам – это лабораторный способ выявления препарата, который будет оказывать наибольшее действие на патогенную флору в данном конкретном случае болезни.

На данный момент антибактериальная терапия применяется достаточно широко там, где она нужна, а также в тех случаях, когда это совсем не обязательно, для перестраховки от возможных осложнений. Например, после кесарева сечения, лапароскопических операций, удаления конкрементов из почек или мочеточников и т. д.

Фармацевтическая промышленность может предложить широкий выбор препаратов как в плане цены, так и в плане действенности. Для того чтобы не «тыкать пальцем в небо» и назначить эффективный антибиотик, нужно провести посевы на чувствительность.

Перед тем как врач подберет терапию, пациенту необходимо сдать некоторые анализы. Посев на чувствительность к антибиотикам назначается, если необходимо определить лекарство, которое в данном случае будет наиболее уместно. Чаще всего это исследование назначается для лечения заболеваний, передающихся половым путем, или ЗППП. Для детей же необходимость в определении антибиотика – это обязательное условие.

Кроме того, определение чувствительности нужно, чтобы избежать устойчивости бактерий к лечению. Если пациента недавно лечили антибиотиками, и теперь вновь необходим повторный курс, то требуется замена препарата. Это позволит использовать меньшие дозы лекарства и не вызывать мутации у возбудителя. В гнойных хирургических отделениях антибиотики меняют каждые два-три месяца.

Данный анализ необходим еще в том случае, если на основную группу антибиотиков у больного возникает аллергическая реакция.

Анализ мочи на чувствительность к антибиотикам, и не только ее, можно провести несколькими способами. Первый из них – это метод дисков. Проводят его следующим образом. В чашку Петри заливают агар, а когда он застынет, специальным инструментом наносят исследуемый материал. Затем по поверхности агара раскладывают бумажные диски, пропитанные антибиотиками. После чашку закрывают и ставят в термостат. Постепенно диск погружается в желатин, а антибиотик диффундирует в окружающее пространство. Вокруг бумаги образуется зона «подавления роста». Чашки проводят в термостате двенадцать часов, затем их вынимают и измеряют диаметр вышеуказанной зоны.

Второй способ – это метод Е-теста. Он похож на предыдущий, но вместо бумажных дисков используют полоску, которая на своем протяжении в разной степени пропитана антибиотиком. После двенадцати часов экспозиции в термостате чашку Петри достают и смотрят, в каком месте зона подавления роста соприкасается с полоской бумаги. Это будет наименьшая концентрация препарата, которая необходима для лечения заболевания.

Достоинством этих тестов является быстрота и простота их проведения.

Анализ на флору и чувствительность к антибиотикам можно провести и другим способом. Этот метод основан на последовательном уменьшении концентрации антибиотика (от максимальной до минимальной) с целью определить, в какой из пробирок прекратится сдерживание роста бактерий.

Сначала подготавливают растворы препарата. Затем их вносят в жидкую среду с бактериями (бульон или агар). Все пробирки на ночь (то есть 12 часов) помещаются в термостат при температуре 37 градусов, а утром проводят анализ получившихся результатов. Если содержимое пробирки или чашки Петри мутное, это свидетельствует о росте бактерий и, следовательно, неэффективности антибиотика в данной концентрации. Первая пробирка, в которой визуально не будет определяться рост колоний микроорганизмов, будет считаться достаточной концентрацией для лечения.

Это разведение препарата принято называть минимальной подавляющей концентрацией (МПК). Она измеряется в миллиграммах на литр или микрограммах на миллилитр.

Анализ на чувствительность к антибиотикам нужно уметь не только правильно сделать, но и грамотно расшифровать. Основываясь на получаемых результатах, все микроорганизмы делят на чувствительные, умеренно резистентные и резистентные. Для того чтобы различать их между собой, используются условные пограничные концентрации препаратов.

Эти значения не являются постоянными и могут изменяться в зависимости от приспосабливаемости микроорганизмов. Разработкой и пересмотром этих критериев поручено заниматься химиотерапевтам и микробиологам. Одной из официальных структур такого рода является Национальный комитет по клиническим лабораторным стандартам США. Разработанные ими стандарты признаны во всем мире для использования в оценке активности антибиотиков, в том числе для рандоминизированных многоцентровых исследований.

Различают два подхода к оценке результатов анализа на чувствительность к антибиотикам: клинический и микробиологический. Микробиологическая оценка ориентируется на распределение эффективных концентраций антибиотика, а клиническая — на качество антибактериальной терапии.

Анализ — определение чувствительности антибиотикам — назначается с целью выявить чувствительные и устойчивые микроорганизмы.

Чувствительными называются возбудители, которые поддаются лечению антибиотиками в средней терапевтической концентрации. Если достоверная информация о категории чувствительности микроорганизма отсутствует, то учитываются данные, полученные в условиях лаборатории. Они совмещаются со знаниями о фармакокинетике используемого препарата, и после синтеза данной информации делается вывод о восприимчивости бактерий к лекарству.

К резистентным, то есть устойчивым, микроорганизмам относятся те бактерии, которые продолжают вызывать заболевания даже при использовании максимальных концентраций лекарственных веществ.

Промежуточную резистентность устанавливают в том случае, если заболевание в процессе лечения может иметь несколько исходов. Выздоровление пациента возможно в случае использования высоких доз антибиотиков либо в случае прицельного накапливания лекарства в месте инфекции.

Анализ на микрофлору и чувствительность к антибиотикам определяет такой показатель, как минимальная бактерицидная концентрация, или МБК. Это самая низкая концентрация препарата, которая в лабораторных условиях вызывает элиминацию практически всех микроорганизмов в течение двенадцати часов.

Знание этого показателя врачи используют, когда назначают терапию не бактерицидными, а бактериостатическими лекарственными средствами. Или в случаях, когда стандартная антибактериальная терапия оказывается неэффективной. Чаще всего этот анализ заказывают для больных с бактериальным эндокардитом, остеомиелитом, а также при оппортунистических инфекциях.

Анализ на чувствительность к антибиотикам может проводиться с использованием биологических жидкостей:

Кроме того, для определения местной чувствительности производят забор мазков из уретры, цервикального канала и верхних дыхательных путей.

Бак. анализ на чувствительность к антибиотикам не требует от пациентов существенной подготовки, но некоторые ограничения все-таки есть.

Для исследования используется средняя порция утренней мочи, которая собирается в стерильную посуду. Перед этим пациент обязательно должен осуществить туалет наружных половых органов и рук.
Грудное молоко собирается перед кормлением ребенка. Первая порция сливается, а затем в стерильный контейнер сцеживается несколько миллилитров с каждой груди.
Перед сдачей мазка из носоглотки стоит воздержаться от приема пищи в течение пяти-шести часов.
В случае взятия мазка из половых путей, рекомендуют воздерживаться от половых контактов в течение пары дней.

На сегодняшний день не существует клинических или лабораторных методов, которые бы со стопроцентной вероятностью могли предсказать эффект от антибактериальной терапии. Но в то же время определение чувствительности бактерий к лекарственным веществам может быть ориентиром для врачей в вопросах выбора и коррекции лечения.

источник

Известно, что микроорганизмы, невзирая на свой «малый рост», тоже имеют пищевые «пристрастия», температурный оптимум, в общем, среду, которая им идеально подходит, где они чувствуют себя комфортно и хорошо, а поэтому начинают интенсивно размножаться и расти.

Бактериологический посев или, как принято называть короче – бак посев, применяется для получения большого количества микробов одного вида (чистая культура) с целью изучения их физико-химических и биологических свойств, чтобы затем полученные данные использовать для диагностики инфекционных заболеваний.

К сожалению, даже популярные нынче иммуноферментный анализ (ИФА), полимеразная цепная реакция (ПЦР) и другие методы, основным недостатком которых являются ложноположительные или ложноотрицательные результаты, не всегда могут идентифицировать возбудителя. Кроме того, они не способны подобрать антибактериальные препараты направленного действия. Подобную задачу решает бак посев, который часто не спешат назначать, ссылаясь на то, что, например, уреа- микоплазмы медленно культивируется, а стоимость анализа немалая. Однако ведь и здоровье того стоит!

Микробиологи нынче знают, что каждому возбудителю нужна своя «родная» среда с учетом ее рН, окислительно-восстановительных потенциалов, вязкости, влажности и осмотических свойств. Среды могут быть мягкими и твердыми, простыми и сложными, универсальными и не очень, однако во всех случаях они должны обеспечивать питание, дыхание, размножение и рост бактериальной клетки.

пример роста микроорганизмов после бак-посева в питательную среду

Некоторые среды (тиогликолевая, Сабуро) подходят для широкого круга микроорганизмов и называются универсальными. Другие же предназначены только для определенных видов, например, пневмококк и золотистый стафилококк, продуцирующие гемолизины, растут на кровяном агаре, который служит для выделения особо «капризных» и, вместе с тем, опасных штаммов. Таким образом, разновидностей сред множество, где каждая из них выращивает свой круг микроорганизмов.

Кроме воды, воздуха, почвы, содержащие в тех или иных концентрациях различные микроорганизмы, в том числе и приносящие болезнь (патогенные), многие отрасли медицинской науки интересуют микробы, живущие на коже и слизистых человеческого организма, которые могут быть представлены:

Постоянными обитателями, не несущими никакой опасности человеку, то есть, нормальной микрофлорой организма, без которой мы просто жить не можем. Например, исчезновение бактерий, живущих в кишечнике и участвующих в процессе пищеварения, приводит к дисбактериозу, лечить который – дело непростое. Так же происходит и с исчезновением вагинальной микрофлоры. Ее тут же заселяют условно-патогенные микроорганизмы, гарднереллы, например, которые вызывают бактериальный вагиноз (гарднереллез);
Условно-патогенной флорой, которая приносит вред лишь в больших количествах при определенных условиях (иммунодефицит). Вышеназванная гарднерелла – представитель такого типа микроорганизмов;
Наличием патогенных микробов, которые в здоровом теле не присутствуют. Они чужды человеческому организму, куда попадают случайно при контакте с другим (больным) человеком и вызывают развитие инфекционного процесса, порой, довольно тяжелого или даже смертельного. Например, встреча с возбудителями сифилиса – еще куда ни шло, на первых порах лечится, а вот (упаси Бог!) выпустит на волю холеру, чуму, черную оспу и др.

К счастью, многие из них побеждены и в настоящее время находятся «за семью печатями» в специальных лабораториях, однако человечество в любой момент должно быть готово к нашествию невидимого врага, способного уничтожить целые народы. Бактериологический посев в подобных случаях играет, пожалуй, главную роль в идентификации микроорганизма, то есть, определении рода, вида, типа и т.д. (токсономическое положение), что очень важно для диагностики инфекционных процессов, в том числе и заболеваний, передающихся половым путем.

Таким образом, методы посева, как и питательные среды, бывают разными, тем не менее, цель у них одна: получить чистую культуру без посторонних примесей в виде микробов других классов, которые обитают повсеместно: в воде, в воздухе, на поверхностях, на человеке и внутри его.

Бактериологический анализ пациенты сами себе не назначают, это делает врач, если у него есть подозрения, что проблемы больного, предъявляющего различные жалобы, связаны с проникновением в организм патогенного возбудителя или с усиленным размножением микроорганизмов, постоянно живущих с человеком, но проявляющих патогенные свойства только в определенных условиях. Сдав анализ и через некоторое время получив на руки ответ, человек теряется, а порой и пугается, увидев непонятные слова и обозначения, поэтому, чтобы этого не произошло, хочется дать краткое разъяснение по данному вопросу:

Первым пунктом заключения, как правило, стоит название возбудителя на латинском языке, например, Escherichiacoli. Это – кишечная палочка, она является естественным обитателем кишечника и в допустимых количествах никакого вреда не приносит;
Следующий пункт – концентрация микроорганизма. Е.coli– обильный рост (1х10^ 6 и более) норма – менее 1x10^ 4 ;
Далее – патогенность: флора условно-патогенная.

При исследовании биологического материала на присутствие патогенных микроорганизмов ответ может быть отрицательным или положительным («плохой бак посев»), поскольку организм человека является для них лишь временным пристанищем, а не естественной средой обитания.

Иной раз, в зависимости от того, какой материал подлежит посеву, можно увидеть количество микроорганизмов, выраженное в колониеобразующих единицах на мл (одна живая клетка даст рост целой колонии) – КОЕ/мл. Например, посев мочи для бактериологического исследования при норме дает до 10 3 КОЕ/мл всех выявленных бактериальных клеток, в сомнительных случаях (анализ повторить!) – 10 3 – 10 4 КОЕ/мл, при воспалительном процессе инфекционного происхождения – 10 5 и выше КОЕ/мл. О двух последних вариантах в разговорной речи, порой, выражаются просто: «Плохой бак посев».

Одновременно с посевом материала в таких ситуациях производится посев микрофлоры на чувствительность к антибиотикам, который даст четкий ответ врачу – какие антибактериальные препараты и в каких дозах «испугают» «незваного гостя». Здесь тоже есть своя расшифровка, например:

Вид микроорганизма, допустим, та же Е.coli в количестве 1х10^ 6 ;
Название антибиотика с обозначением (S) указывает на чувствительность возбудителя к этому препарату;
Вид антибиотиков, не действующих на микроорганизм, обозначается символом (R).

Бактериологический анализ представляет особую ценность в определении чувствительности к антибиотикам, поскольку основной проблемой в борьбе с хламидией, микоплазмой, уреаплазмой и др. остается подбор действенного лечения, не приносящего вред организму и не ударяющего по карману пациента.

Бактериологическому анализу может подвергаться любой биологический материал, взятый у человека (кожа, кровь, сперма, слизистые ротовой полости, дыхательных и мочеполовых путей, желудочно-кишечного тракта, органов зрения, слуха и обоняния и др.). Чаще всего бак посев назначают гинекологи и урологи, поэтому на нем следует несколько остановиться.

Правильная подготовка к бактериологическому посеву будет залогом правильного результата, потому что в противном случае, анализ придется сдавать заново и ждать назначенное время. Как сдать кровь на стерильность из вены – это задача медработников. От больного здесь, как правило, ничего не зависит, он просто предоставляет локтевой сгиб, а медсестра производит забор в стерильную пробирку с соблюдением всех правил асептики и антисептики.

Другое дело – моча или мазок из половых путей. Здесь пациент должен обеспечить первый этап (забор), соблюдая предписанные правила. Следует заметить, что моча женщин и мужчин несколько отличается, хотя в мочевом пузыре у обоих полов она стерильна:

У женщин при прохождении через мочеиспускательный канал может захватить небольшое количество непатогенных кокков, хотя в целом, часто остается стерильной;
У мужчин все несколько по-другому. Передняя часть уретры может снабдить проходящую мочу находящимися там:
1. дифтероидами;
2. стафилококками;
3. некоторыми непатогенными грамотрицательными бактериями, что и покажет впоследствии бактериологический анализ.

Однако, если они находятся в допустимой концентрации (до 10 3 КОЕ/мл), то пугаться нечего, это вариант нормы.

Чтобы избежать присутствия других микроорганизмов и максимально обеспечить стерильность взятого материала, перед сдачей анализа производится тщательный туалет половых органов (вход во влагалище у женщин закрывается ватным тампоном – защита от попадания отделяемого половых органов). Для анализа берется средняя порция мочи (начало мочеиспускания в унитаз, приблизительно 10 мл средней порции в стерильную баночку, окончание в унитаз). Пациентам необходимо знать: моча, взятая на посев, должна быть обработана не позднее, чем через два часа при хранении не выше 20°С, поэтому следует рассчитывать время на транспортировку.

Кроме этого материал на бак посев при необходимости берут из уретры и прямой кишки у мужчин, из уретры, прямой кишки, влагалища, шейки матки и цервикального канала – у женщин, но это происходит в медицинском учреждении, куда пациент должен прибыть. Подмывание, спринцевание и использование антисептических средств в таких случаях запрещено.

Многие пациенты интересуются, сколько дней делается анализ. Однозначно на этот вопрос ответить нельзя, все зависит от того, какой материал подвергается исследованию и какой возбудитель нужно искать. Иногда ответ готов через 3 дня, иногда через неделю или даже дней 10 – 14, поскольку некоторые образцы требуют пересева на другую среду.

Не обходят стороной люди, направляющиеся на бак посев и вопрос о цене анализа. Примерная стоимость в Москве составляет порядка 800 – 1500 рублей. Разумеется, она может быть выше и зависит от широты спектра бактериологического поиска. Бесплатно анализ, наверное, можно сдать при беременности в женской консультации, или в поликлинике по особым медицинским показаниям.

Для беременных бак посев является обязательным, сдается 2 раза (при постановке на учет и в 36 недель), при этом, мазок берется не только из половых путей, но и со слизистых носа и зева. Объектом поиска в данном случае, кроме урогенитальных инфекций, будет золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus), который в послеродовом периоде может натворить много бед (гнойный мастит и др). Кроме этого, беременным в обязательном порядке делается посев мочи, соскоба влагалищного эпителия и мазки из шейки матки и цервикального канала.

Многие женщины, перед тем как отправиться на процедуру очень боятся таких страшных слов и начинают раздумывать: «А нужно ли это? Может, не пойти». Спешим заверить, что анализы абсолютно безболезненны. Мазок из шейки матки и цервикального канала берется стерильной цитощеткой, не причиняя женщине абсолютно никакой боли, зато впоследствии бак посев из ш/м и ц/к защитит и будущую мать, и плод от возможных осложнений. Объектом поиска при беременности являются возбудители хламидиоза, уреа- и микоплазмы, дрожжеподобный грибок рода Candida (обычно это Candida albicans), трихомонады и другие условно-патогенные и патогенные микроорганизмы.

Попав в половые пути патогенные микроорганизмы, через самое короткое время осваиваются и начинают свою вредную деятельность. Например, всегда патогенные гонококки (Neisseria), являющиеся виновниками довольно неприятной болезни, называемой гонореей и относящейся к ЗППП, чувствуют себя «как дома» буквально на 3 день. Они начинают активно размножаться и смело двигаться по половым путям вверх, захватывая все новые территории. Всем известно, что гонорея нынче неплохо лечится и ее уже почти никто не боится. Но для начала ее нужно найти. Основным методом поиска этой инфекции считается бак посев, культивирование, идентификация с помощью окрашивания по Граму, микроскопия.

Найденные в мазке, взятом «на флору» из половых путей, попарно лежащие «кофейные зерна» (диплококки), не указывают на наличие венерического заболевания. Такая микрофлора влагалища часто появляется в постменопаузе и ни о чем плохом не говорит. Отобранный в нестерильных условиях на предметное стекло и окрашенный метиленовым синим или по Романовскому (цитология) мазок, не может дифференцировать микроорганизм. Он может только предположить и направить пациентку на дополнительное исследование (получение изолированной культуры).

Следует заметить, что, если соскоб со слизистых мочеполовых путей, взятый для посева на уреаплазму, является не таким уж редким явлением, то посева мочи сами врачи часто избегают, поскольку с ней работать сложнее.

Трудности в диагностике создает хламидийная инфекция, приносящая большой вред не только при беременности. Кроме этого, хламидия вызывает множество заболеваний, свойственных не только женщинам, но и мужскому населению тоже, поэтому ее сеют, культивируют, изучают, определяют чувствительность к антибактериальной терапии и, таким образом, борются с ней.

При беременности вообще без бактериологического посева трудно обойтись, поскольку многие микроорганизмы, маскируясь в цитологическом мазке, могут быть пропущены. Между тем, влияние некоторых возбудителей ЗППП на плод бывает губительным. К тому же лечить беременную женщину значительно сложнее, а назначать антибиотики «на глаз» просто недопустимо.

Для выделения чистых культур возбудителей на первом этапе прибегают к их посеву на соответствующие среды, который проводится в специальных (стерильных!) условиях. В основном, перенос материала на среду осуществляется с помощью приспособлений, применяемых еще в 19 века великим Луи Пастером:

Бактериальной петлей;
Пастеровской пипеткой;
Стеклянной палочкой.

Конечно, многие инструменты за 2 столетия претерпели изменения, на смену пришли пластиковые стерильные и одноразовые, однако и старые не остались в прошлом, продолжая и поныне служить микробиологической науке.

Первый этап получения колоний требует соблюдения определенных правил:

Посев осуществляется над спиртовкой в боксе, предварительно обработанном дезинфектантами и кварцеванием, или в ламинарном шкафу, обеспечивающем стерильность в рабочей зоне;
Одежда медработника, перчатки и среда также должны быть стерильными, поскольку обратное мешает выделению изолированных штаммов;
Работать в боксе нужно быстро, но аккуратно, нельзя разговаривать и отвлекаться, при этом – необходимо помнить о личной безопасности, ведь материал может быть заразным.

Выделение штаммов не всегда одинаково, поскольку некоторые биологические среды, находящиеся в человеческом организме требуют индивидуального подхода, например, гемокультуру (кровь) сначала в жидкой среде (соотношение 1 : 10) немного «подращивают», поскольку кровь (неразведенная) может убить микроорганизмы, а затем, через сутки или больше, пересевают на чашки Петри.

Посев мочи, промывных желудочных вод и других жидких материалов тоже имеет свои особенности, где для получения чистой культуры, жидкость сначала следует центрифугировать (условия – асептические!), а уж затем сеять, причем не саму жидкость, а ее осадок.

Культивирование и выращивание колоний осуществляют на чашках Петри или помещают сначала в жидкую среду, разлитую в стерильные флакончики, а затем изолированные колонии еще раз высевают, но уже на скошенный агар и помещают материал на сутки в термостат. Убедившись в чистоте полученной культуры, штаммы переносят на предметное стекло, делают мазок и окрашивают по Граму (чаще всего), Цилю-Нильсену и др. и для дифференцировки изучают морфологию микроба под микроскопом:

Размер и форму бактериальной клетки;
Наличие капсул, жгутиков, спор;
Тинкториальные свойства (отношение микроорганизма к окрашиванию)*.

*Читатель, вероятно, слышал о таком возбудителе, как бледная трепонема? Это – возбудитель сифилиса, а ее название (бледная) поэтому и появилось, что она плохо воспринимает краски и остается слегка розоватой при окрашивании по Романовскому. Микроорганизмы, невоспринимающие анилиновые красители называются грамотрицательными, а воспринимающие – грамположительные. Грамотрицательным бактериям придают розовый или красный цвет при окраске по Граму дополнительные красители (фуксин, сафранин).

Бак посев можно назвать древним анализом, однако его популярность от этого отнюдь не падает, хотя современная бактериология имеет возможности выделения не только штаммов, но и отдельной клетки из него, которая называется клоном. Однако для получения клона необходим специальный прибор – микроманипулятор, который в обычных лабораториях отсутствует, поскольку применяется, в основном, в научно-исследовательских целях (генетические исследования).

источник