Меню Рубрики

Как берут анализы пцр у женщин

Среди современных методов диагностики одним из наиболее точных и информативных считается мазок на ПЦР. Преимуществом метода полимеразной цепной реакции является возможность использования любого биологического материала. Чаще всего соскоб для лабораторного исследования берут из половых органов мужчин и женщин с целью обнаружения и профилактики инфекций, передающихся половым путем.

Метод ПЦР применяется не только в медицине. Его используют в археологии, генетике, криминалистике. Разработчиком этого вида диагностики является американский химик Кэри Мюллис – лауреат Нобелевской премии. Кстати, самую престижную международную награду он получил за открытие метода ПЦР.

Благодаря полимеразной цепной реакции у ученых появилась возможность определять сходство ДНК, устанавливать отцовство и родственные связи. И все же основным предназначением мазка методом ПЦР принято считать диагностику инфекционных заболеваний у человека.

Полимеразная цепная реакция представляет собой высокоточный способ молекулярно-генетического исследования, проведение которого позволяет выявлять вирусные, генетические и наследственные патологии. Преимущество данной методики заключается в возможности определения болезнетворных агентов не только на острой или хронической стадии заболевания, но и в инкубационный период, то есть до того, как проявятся первые симптомы патологии.

Мазок на ПЦР никогда не дает ложноположительного ответа. Этим и отличается данный метод диагностики от других. Если инфекции в организме нет, пациент не получит положительный результат – в этом можно не сомневаться. Сегодня анализ на полимеразную цепную реакцию сдают с целью определить тип возбудителя и его количество.

Ни один из методов исследования не способен найти возбудителя непосредственно в гене, содержащемся в исследуемых материалах. ПЦР – это максимально точный и достоверный анализ на венерические заболевания и латентные вирусы в организме. В отличие от иных способов диагностики, анализ полимерной цепной реакции имеет ряд преимуществ:

  • он нацелен на обнаружение возбудителя инфекции;
  • является универсальным, поскольку позволяет выявлять сразу несколько типов инфекционных агентов;
  • при этом достаточно использования только одного биологического образца пациента;
  • обладает сверхчувствительностью, за счет чего вероятность возможных перекрестных реакций равняется нулю.

В сравнении с методом бактериологического посева, мазок на ПЦР считается самым надежным и быстрым диагностическим способом. Сама процедура лабораторной диагностики не занимает более четырех часов. Для получения результата бакпосева требуется не менее семи дней. Суть этого метода состоит в следующем: образец биоматериала помещают в благоприятную среду и наблюдают за активностью возбудителей, если таковые обнаруживаются, на протяжении всего периода исследования.

Анализ мазка на ПЦР способен раскрыть любое количество инфекционных возбудителей в организме, включая «скрытые» вирусы, не проявляющие себя никакой симптоматикой в течение длительного времени. Этот диагностический метод применяют тогда, когда необходимо подтвердить или опровергнуть наличие у пациента:

  • вирусного гепатита;
  • уреаплазмоза;
  • хламидиоза половых путей;
  • вируса папилломы человека;
  • герпеса;
  • злокачественных клеток;
  • микоплазмоза;
  • вагиноза;
  • мононуклеоза;
  • трихомониаза;
  • ВИЧ-инфекции.

В качестве исследуемого материала для анализа на ПЦР используют кровь, слюну, мокроту, мочу. Перед процедурой взятия соскоба пациенту необходимо подготовиться к нему. О том, как подготовиться перед анализом ПЦР-мазка, пациенту сообщит лечащий врач. Как правило, специалисты проводят с больными соответствующую консультацию. Например, кровь сдают натощак, а непосредственно перед соскобом шейки матки нежелательно проводить гигиенические процедуры.

Материалом для ПЦР-анализа могут быть практически любые биологические жидкости человека. Чужеродные ДНК болезнетворных микроорганизмов способны проникать в любую среду. Чаще всего в качестве образца для исследований применяется кровь и ее отдельные компоненты (плазма или сыворотка). В жидкой ткани могут присутствовать РНК вирусного гепатита, простого герпеса, цитомегаловируса, ВИЧ.

Широкие показания к исследованию имеют биологические жидкости. К ним относятся:

  • сок простаты;
  • сперма;
  • вагинальный секрет;
  • спинномозговая (ликвор);
  • амниотическая;
  • бронхоальвеолярный лаваж;
  • суставная жидкость;
  • слюна.

Для диагностики венерических заболеваний типа гонореи, хламидиоза, микоплазмоза, уреаплазмоза, трихомониаза, гарднереллеза, герпетических форм и др., у пациентов берут эпителиальные соскобы со слизистых оболочек. У мужчин берут мазок ПЦР из уретры, а у женщин – из влагалища или шейки матки.

Отдельная категория – биоптаты. Чаще всего биоптаты исследуют с целью определения природы новообразования, подтверждения его злокачественности. Биоптаты желудка и двенадцатиперстной кишки требуются для выявления бактерии Хеликобактер пилори и ее количественной нагрузки.

Моча как биоматериал используется при инфекционных поражениях мочевыделительной системы. У мужчин мазок ПЦР нередко заменяют исследованием мочи, поскольку уретра у представителей сильного пола является универсальным элементом мочеполового тракта.

Для диагностики туберкулеза и обструктивных болезней легких исследуется мокрота. Материал могут собирать в стерильный флакон (15-20 мл) или брать мазок из зева. ПЦР-анализ также используют для выявления осложненных форм микоплазмоза и хламидиоза – при отсутствии лечения и других неблагоприятных факторов данные виды инфекции способны поражать респираторную систему человека.

Способ подготовки зависит от того, какой именно биоматериал необходимо сдать на исследование:

  • Если для анализа требуется образец слюны, то процедуру проводят натощак. За несколько часов до исследования нельзя принимать лекарственные препараты. Кроме того, нежелательно пить много жидкости, тем более горячей, чтобы не нарушить естественный состав микрофлоры ротовой полости.
  • Мочу для ПЦР необходимо собирать с утра. Для этого необходимо подготовить стерильный контейнер и тщательно подмыться. Материал не должен содержать посторонних примесей, поэтому мужчинам во время мочеиспускания необходимо оттянуть крайнюю плоть, а женщинам – закрыть влагалище ватным тампоном.
  • За три дня до сдачи спермы мужчине необходимо отказаться от сексуальных контактов. В период подготовки нежелательно посещать баню, принимать горячую ванну, употреблять алкоголь, острые блюда. Перед сбором биоматериала нельзя мочиться, поэтому за сутки до анализа желательно ограничить потребление жидкости.
  • Кровь, как уже было отмечено, сдавать нужно с утра, натощак. За 2-3 дня до анализа желательно отказаться от жирной пищи, алкоголя и сильнодействующих медикаментов.

При подозрении на то или иное заболевание, передающееся половым путем, врач может назначить женщине мазок на ПЦР. В лабораториях, которые относятся к бюджетным поликлиникам, такие анализы обычно не делают. Прежде чем выбирать место для исследования, необходимо убедиться, что там проводят необходимую диагностику.

Большинство из тех заболеваний, которые передаются половым путем, могут не проявлять себя в течение нескольких месяцев, поэтому отсутствие симптомов не является гарантией того, что девушка не заражена. Будучи носителем инфекции и не догадываясь о болезни, женщина может не только заразить партнера, но и упустить время для успешного лечения. Венерические заболевания могут приводить к бесплодию, воспалению органов малого таза и прочим осложнениям.

Мазок ПЦР на инфекцию назначается женщине в том случае, если имел место контакт с малознакомым партнером. Если венерический статус последнего неизвестен, значит, присутствует риск инфицирования. Сдача мазка на ПЦР целесообразна в случае, если:

  • женщина сомневается в «чистоте» своего нового партнера, так как во время полового акта не использовался презерватив;
  • в течение года у женщины было несколько половых партнеров;
  • у пациентки ранее было выявлено венерическое заболевание;
  • наступила беременность.

Обследование на половые инфекции является обязательным для будущих матерей, поскольку некоторые из них, даже если протекают скрыто и не дают о себе знать, могут нести серьезную опасность жизни и здоровью плода.

Соскоб у женщин берет врач-гинеколог. Сама процедура взятия соскоба на полимеразную цепную реакцию ничем не отличается от обычного гинекологического исследования на влагалищную флору. Процедура взятия мазка ПЦР на хламидии, трихомониаз, вирус папилломы человека, гонорею и другие половые инфекции происходит по стандартной схеме:

  1. Пациентка подготавливается к процедуре и занимает место на гинекологическом кресле.
  2. Для сбора материала гинеколог надевает одноразовые стерильные перчатки и производит осмотр наружных половых органов.
  3. Далее во влагалище женщины вводят специальный расширитель, который позволяет с помощью зеркала осмотреть внутренний эпителий.
  4. Для забора биоматериала используется специальная щетка, которая не обладает впитывающими свойствами и не способна повредить слизистые оболочки. С ее помощью берут соскоб с цервикального канала, стенок влагалища. Обыкновенная ватная палочка для этой цели не подходит.
  5. Использованный медицинский прибор, содержащий вагинальный секрет, вставляют в пробирку, закрывают и отправляют в лабораторию.

Процедура взятия соскоба обычно безболезненна, но иногда пациентки испытывают неприятные ощущения из-за контакта чувствительной слизистой с гинекологическими инструментами. Боль в процессе забора биоматериала может свидетельствовать о протекающем воспалительном процессе.

  • Вступать в интимную связь перед процедурой нельзя – после последнего контакта должно пройти не менее двух суток.
  • Если женщина проходит лечение антибиотиками или применяет вагинальные суппозитории, за три недели до взятия мазка ПЦР курс терапии необходимо завершить. В противном случае результат анализа может оказаться ложным.
  • Во время менструации мазок не берут.
  • Непосредственно перед забором биоматериала нельзя спринцеваться или использовать антибактериальное мыло.
  • Перед процедурой нельзя посещать туалет, последний раз помочиться можно за три часа до процедуры.

Как уже было сказано, мазок ПЦР у мужчин берут из мочеиспускательного канала. Чтобы получить необходимый биоматериал, врач-уролог использует специальный тонкий зонд и вводит его на глубину 3-4 см. Процесс взятия мазка ПЦР на уреаплазму, гонорею и другие распространенные возбудители может принести боль и значительный дискомфорт. Но придется потерпеть. Нередко у мужчин мазок на ПЦР вызывает жжение и зуд, поэтому перед введением зонда с целью уменьшить дискомфортные ощущения пациентам рекомендуют массажировать уретру. Поэтапно процедура взятия соскоба выглядит так:

  • Мужчина освобождает половые органы от одежды.
  • Прежде чем вводить зонд в уретру, врач надевает одноразовые перчатки и осуществляет визуальный осмотр кожных покровов, слизистых оболочек на предмет высыпаний.
  • Затем с помощью инструмента уролог берет мазок методом ПЦР из мочеиспускательного канала. Зонд вводится на 3-4 см в глубину уретры и несколько раз прокручивается.
  • После извлечения зонда врач делает мазок на предметном стекле, которое впоследствии и отправит в лабораторию.

Помимо болезненных ощущений, процедура взятия соскоба вызывает у мужчин психологический дискомфорт. У тех, кто посещает уролога регулярно, подобных проблем не возникает. Кроме того, имеет значение правильная подготовка к мазку ПЦР. Она заключается в соблюдении следующих условий:

  • За несколько дней до анализа мужчине нужно отказаться от интимных связей.
  • Мазок берут в утренние часы.
  • Перед процедурой мужчине не нужно проводить гигиену половых органов, лучше всего принять душ с вечера.
  • За три часа до взятия образца биоматериала нельзя посещать туалет.

Так же, как и у женщин, сильнодействующие препараты могут исказить результат анализа на полимеразную цепную реакцию.

В принципе для того, чтобы разобраться в результатах лабораторного исследования на полимеразную цепную реакцию, не нужно обладать медицинским образованием. Расшифровать заключение экспертов достаточно просто. В ответах, которые выдают пациенту на руки, содержится информация о типе инфекции. Если возбудитель обнаружен, в заключении будет отмечен положительный результат. Он свидетельствует о наличии в организме исследуемого человека ДНК или РНК вируса.

Для эффективного лечения некоторых заболеваний необходимо иметь точные данные о количественной нагрузке, которая означает присутствие РНК-копий возбудителя на 1 мл крови. В большей степени определение количественной нагрузки важно при болезнях, спровоцированных условно-патогенной микрофлорой, поскольку инфекционные агенты активизируются и негативно воздействуют на организм человека только в том случае, если их количество превышает установленные пороги. Такой анализ ПЦР имеет особое значение для составления плана лечения и наблюдением за динамикой пациентов, инфицированных вирусным гепатитом или ВИЧ-инфекцией.

Исследования на ПЦР отличаются максимальной точностью, специфичностью и чувствительностью. Мазок на полимеразную цепную реакцию позволяет узнать, есть ли в организме обследуемого конкретный тип инфекции, определить ее штамм и количество РНК-копий. Метод ПЦР позволяет выявлять возбудителя даже при минимальном содержании ДНК вируса в представленных образцах биоматериала.

Сроки выполнения анализа во многом зависят от того, какой из существующих методов полимеразной цепной реакции применяется в конкретной лаборатории. Самым простым способом изучения биологического материала считается микроскопический. Обычно этот метод исследования не занимает много времени. За срочность пациентам приходится платить дополнительно, но если по каким-либо причинам есть необходимость в проведении экстренного исследования, результаты могут выдать пациенту на руки спустя час. Быстрее всего ответы анализов получают те, кто обращается в специализированные медучреждения, оснащенные собственной лабораторией. Иначе необходимо учитывать время, которое будет потрачено на доставку биоматериала.

Конечная стоимость анализа будет зависеть от того, на какую инфекцию необходимо проверить пациента. В Москве на лабораторные исследования методом ПЦР установлены такие цены:

  • заболевания, передающиеся половым путем – анализ выполняется в среднем за 1-2 дня, стоимость составляет 300-500 руб. (за обнаружение одного возбудителя);
  • такие же сроки и цены установлены на диагностику методом ПЦР вируса Эпштейна-Барра, папилломы человека, герпеса, цитомегаловирусной инфекции;
  • обследование на гепатит A, B, C, D, G обойдется пациенту в 650-800 руб., за уточнение количественной нагрузки придется заплатить еще 2000 руб. (на выполнение исследования потребуется 4-5 дней);
  • подтверждение наличия в желудочном или кишечном биоптате бактерии Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori) – 400-600 руб.;
  • антитела и антигены ВИЧ— 400-500 руб.;
  • количество РНК ВИЧ в образцах крови – более 10 тыс. руб.
Читайте также:  Как правильно сдать анализы на цитологию

С целью экономии врачи рекомендуют выбирать пакеты анализов — такие исследования обходятся дешевле. Услуги со скидками предоставляются в большинстве сетевых клиник, где делают анализы по методу ПЦР («СМ-Клиника», «Инвитро», «ОН-Клиник») и многопрофильных медцентрах.

Если в мазке обнаружились патогенные возбудители, не нужно отчаиваться. Главное – это как можно скорее начать терапию. Сегодня существует немало препаратов, благодаря которым даже пациенты с неизлечимыми болезнями имеют все шансы на высокое качество и нормальную продолжительность жизни. Выбор тактики лечения должен осуществлять врач. Самолечение при инфекционных заболеваниях недопустимо.

источник

ПЦР у женщин–одна из многочисленных методик, которые позволяют диагностировать различные заболевания гинекологического спектра.

Полимеразная цепная реакция – довольно распространенный вид диагностики. При нем с поверхности слизистых берется небольшое количество биологического материала и исследуется особым методом.

Как подготовиться к анализу, есть ли какие-либо особенности, о которых следует знать, прежде чем приступать к процедуре?

Многих представительниц прекрасного пола волнует вопрос о том, на какие инфекции проверяют мазок ПЦР у женщин?

Во-первых, многое зависит от того, с какой целью сдается биологический материал. Сдавать его можно в профилактических целях. Или же ведя поиск какого-то конкретного возбудителя, заболевание которым подозревают у женщины. Во-вторых, многое зависит от цены анализа. В частных клиниках иногда дороже стоят анализы, которые включают в себя большее число возбудителей.

Чаще всего с помощью полимеразной цепной реакции пытаются обнаружить:

  • гепатиты
  • вирус иммунодефицита человека
  • вирус простого герпеса
  • хламидиоз
  • вирус полового герпеса
  • ВПЧ и др

У женщин анализ крови на ВИЧ с ПЦР, а также поиск других возбудителей с помощью этой методики очень информативен, дает вероятность точного результата в 90-95% случаев. Именно поэтому методика пользуется большой популярностью.

Это еще один очень распространенный вопрос, который любая пациентка может задать своему лечащему врачу.

Материалом могут послужить мазки с:

По сути, любая слизистая может стать объектом исследования. Также часто в качестве материала используется кровь.

Как только мазок будет получен, его помещают в специальное устройство, которое называется реактором.

В этом реакторе с помощью ряда ферментов начинается активное копирование полученных ДНК-фрагментов возбудителей. Поскольку реакция носит цепной характер, довольно быстро образуется достаточное количество копий. Их можно без помех исследовать и определить причину всех проблем.

На сегодняшний день ПЦР-реакция позволяет не только установить факт наличия микроба, но и определить его количество. Это особенно важно для условно-патогенных микроорганизмов, которые до определенного порога не представляют для здоровья угрозу. А после его перехода становятся причиной появления тех или иных симптомов.

Сложна ли эта процедура, болезненна ли она? Многое зависит от того, какой конкретно материал берется, и откуда.

Возможны следующие варианты:

  • если необходим мазок из влагалища, то врач берет специальный тампон, который вводится в полость влагалища, а затем помещается в пробирку, которая поможет доставить его в лабораторию
  • если анализ берется из ротовой полости, то используется или специальная палочка, которой производится забор материала, или опять же небольшой тампон
  • если необходим мазок со слизистой ануса, то принцип тот же, что и с влагалищем
  • совершенно стандартным образом берется кровь из вены, помещается в специальную пробирку и направляется на исследование в лабораторию

Многие дамы, которые заподозрили у себя наличие ЗППП или ищут причину, по которой не могут зачать ребенка в течение длительного времени, задаются этим вопросом. Есть ли какие-либо специфические особенности, которые нужно иметь в виду, чтобы сдать анализ без проблем и не получить ложноположительный результат ПЦР у женщин или ложноотрицательный?

Во-первых, женщине, чтобы получить качественные результаты, придется заранее отказаться от использования всех медикаментов, которые могут сказаться на результатах.

Чаще всего в первую очередь врач исключает применение антибиотиков и противовирусных средств. Так как именно они могут исказить конченые данные.

Важно также помнить, что мазок со стенки влагалища лучше всего сдавать непосредственно перед тем, как начнется менструация. В качестве альтернативы биоматериал можно сдать, когда менструация уже закончится. Достаточно будет подождать три или четыре дня.

Все зависит от инкубационного срока возбудителя заболевания. Если речь идет о сложных вирусах, таких как, например, ВИЧ или ВПЧ, сдача может откладываться на несколько месяцев.

Так как им необходимо время, чтобы копироваться в организме. Если же речь о подозрении на заражение бактериальной инфекцией, то можно сдавать анализ через 3-4 дня после контакта с больным человеком.

Что такое ПЦР у женщин и не опасно ли исследование для беременных? С тем, что представляет собой анализ, мы уже разобрались, и пришло время ответить на второй вопрос.

Представительницам прекрасного пола, которые ранее никогда не сталкивались с этим исследованием, во время вынашивания младенца придется хоть раз его пройти.

Это связано с тем, что полимеразная цепная реакция хорошо помогает выявить скрытые проблемы. Ранее они просто не давали о себе знать, но могут повлиять на течение беременности.

Процесс сбора материала не представляет сложностей даже в том случае, если женщина страдает от трудной беременности. Он не способен навредить ни будущему ребенку, ни матери. Гораздо большую угрозу для обоих представляют непролеченные заболевания.

В беременность они могут дать о себе знать еще сильнее, так как иммунитет у женщины значительно снижается. В качестве зоны исследования во время вынашивания плода используется шейка матки и цервикальный канал. По исследованию зон, оказывающихся проблемными, можно сделать информативные выводы.

Какой врач назначает анализ ПЦР у женщин, если есть подозрение на болезнь. Делать это может гинеколог, дерматовенеролог или просто венеролог.Расшифровкой итогов будет заниматься тот медик, который порекомендовал исследование. Самостоятельно делать выводы об итогах нельзя, даже если кажется, что все очевидно.

Во-первых, количественный анализ может свидетельствовать лишь о наличии условно-патогенной микрофлоры, которая не несет угрозы. Во-вторых, исследование может оказаться ложноотрицательным или ложноположительным, из-за чего материалы придется сдавать повторно.

Оценить все нюансы и сделать выводы о достоверности результатов можно, только оценив картину в целом, учитывая общее состояние женщины, наличие жалоб и другие особенности. Сделать это может только компетентный медицинский работник.

Полимеразная цепная реакция – технологичный и безопасный способ диагностики, который рекомендуется выполнять во всех сложных диагностических ситуациях. Анализ может стоить недешево. Но достоверность его итогов вызывает сомнения очень редко. Иногда легче один раз сдать мазок или кровь из вены, чем проходить энное количество других диагностических исследований, стараясь выяснить свой диагноз.

При необходимости сдать ПЦР анализ обращайтесь к грамотным венерологам и гинекологам.

источник

ПЦР мазок позволяет определить наличие возбудителя инфекции в организме человека. Чаще всего исследуют выделения человека на предмет хламидий и иных возбудителей венерических заболеваний, передающихся через половые контакты. Точность диагностики довольно высокая, однако, иногда бывают погрешности в определении ДНК возбудителя. С чем это связано, рассмотрим в статье.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) считается одним из надежных способов определения наличия бактерий и вирусов в организме человека. Исследование проводят с помощью биоматериалов — слюны, выделений, крови, мокроты и иных субстанций организма. Взятые на анализ материалы смешивают с реактором, который выявляет наличие чужеродных ДНК в составе выделений человека.

Специальные ферменты провоцируют цепную реакцию роста молекул ДНК микроорганизмов, с помощью которой появляется возможность их обнаружения. Помимо выявления присутствия возбудителя в тканях организма, мазок позволяет установить вид и количество находящихся бактерий.

Преимущество данного метода исследования заключается в возможности обнаружить вирус даже по частичным фрагментам его ДНК в выделениях человека — цепная реакция выстраивает молекулы ДНК полностью. Другими преимуществами ПЦР метода являются:

  • быстрый результат, в сравнении с бактериальным посевом и иными методами, — ответ готов в тот же день после сдачи анализов;
  • возможность исследования любого биоматериала — крови, слюны, выделений из матки и т.д;
  • возможность определения вида вируса, точность диагностики.

Помимо преимуществ, метод имеет и свои недочеты. К ним относится:

  • вероятность неточного результата после курса антибиотиков — анализ обнаружит мертвые структуры бактерий и покажет их наличие в организме;
  • невозможность выявления гарднереллеза — небольшое количество бактерий постоянно присутствует во влагалище;
  • метод не в состоянии определить мутацию вирусов, способность видоизменяться.

Чтобы исследование биоматериала было максимально точным, выполняйте данные правила:

  • кровь сдают с утра натощак, за сутки до забора плазмы нельзя кушать сладкое, соленое и пить спиртное;
  • урину сдают рано утром, первую порцию;
  • мазок эпителия слизистых половых органов берут после воздержания от интимных контактов в течение трое суток;
  • мазки не сдают во время критических дней, только на третьи сутки после менструации.

Обычно для исследования микроорганизмов берут биоматериал соответствующих болезни слизистых оболочек и выделений:

  • при заболевании мочеполовой системы — забор урины;
  • при заболевании легких/бронхов — мокроту;
  • ИППП заболевания — исследуют эпителий соответствующих слизистых оболочек;
  • при подозрении на гепатит — исследуют кровь пациента;
  • при диагностике хеликобактерной инфекции — используют биоптаты.

Исследование туберкулеза внутренних органов проводят с помощью полимеразной цепной реакции. Палочки Коха могут поражать не только ткань легких, но и кишечник, кожу, почки и другие внутренние органы.

Заболевания ЖКТ имеют разнообразный характер, но общие симптомы. Эффективность терапии напрямую зависит от точного определения возбудителя. Чтобы выявить наличие инфекции, применяют диагностику полимеразной цепной реакции.

В некоторых случаях проводят ПЦР диагностику каловых масс. Для точности анализа материала необходимо учесть следующие рекомендации:

  • прекратить использование слабительных средств за трое суток до сдачи биоматериала;
  • прекратить прием медикаментов, которые могут повлиять на характеристики каловых масс.

Не следует специально омывать анус перед взятием материала, в том числе, использовать душистые моющие средства. Массу нужно взять стерильной ватной палочкой и положить в контейнер. Недопустимо попадание урины в контейнер, также недопустимо использование клизмы для опорожнения.

Преимущество полимеразной цепной реакции в определении диагноза заболеваний ЖКТ:

  • выявление ДНК гельминта;
  • выявление типа возбудителя;
  • определение наличия вируса даже по одной молекуле ДНК.

Точность диагноза заболевания позволяет назначить эффективный курс терапии для устранения болезни.

Как правильно сдать мазок на ИППП (хламидии, микоплазмы, уреаплазмы)? Возбудители половых инфекций относятся к скрытым — они не проявляют себя при других анализах, обнаружить их очень тяжело. Как берут выделения для лабораторной диагностики?

Чтобы получить точность анализа при исследовании, необходимо сдать мазок правильно:

  • ПЦР мазок из уретры берут у мужчин;
  • у женщин мазок на ИППП берут из выделений влагалища, мочевого канальчика или шейки матки;
  • нельзя брать мазок во время критических женских дней;
  • после интенсивного курса антибиотиков следует подождать 3 недели, потом сдавать анализы;
  • перед забором слизи из половых органов нельзя мочиться (после последнего опорожнения должно пройти не менее трех часов);
  • недопустимо использовать душистые моющие средства для подмывания половых органов перед сдачей анализов;
  • более достоверный результат можно получить при заборе выделений перед критическими днями либо сразу после их завершения;
  • недопустимо применять вагинальные свечи или спринцевание в день забора выделений.

Является ли процедура забора болезненной? Не следует опасаться мазка на диагностику — биоматериал берут медицинским зондом в малом объеме без повреждения поверхности слизистой оболочки. После забора выделения помещают в транспортировочную жидкость для хранения.

Важно! Забор слизи из уретры может спровоцировать дискомфорт в течение некоторого времени — жжение при выделении урины.

Заболевания, передаваемые при интимных сношениях, держат лидирующее положение среди вирусных инфекций. Опасность бактериально-вирусного поражения половой сферы заключается в осложнениях и возникновении тяжелых форм патологии данных органов.

Хламидиоз проявляется у мужчин и женщин по-разному. Зараженный мужчина испытывает болезненность при опорожнении, зараженные женщины страдают обильными выделениями и прорывными кровотечениями.

Уреаплазмоз никак не проявляется, находится в «спящей» форме. При отсутствии терапии способен спровоцировать выкидыш у беременных и воспаление уретры у мужчин.

Микоплазмоз — женское заболевание, мужчины лишь переносят инфекцию в момент полового сношения. Микоплазмоз может спровоцировать осложнения в течении беременности, отзывается паховыми болями, вызывает жжение при отходе урины.

Молочница у женщин (кандидоз) проявляет себя обильными выделениями, напоминающими творог. Также характерным признаком кандидоза является зуд и жжение. Молочница может появиться и у мужчин, но чаще — это женское заболевание.

Читайте также:  Как правильно сдать анализы на вич

Трихомониаз вызывает отек половых органов и покраснение эпителиального слоя, сильные вагинальные выделения с резким запахом рыбы и крошечные изъязвления на половых губах. У мужчин данный вирус вызывает неприятные ощущения и жжение при выделении урины.

Вирус папилломы человека отличается образованием папиллом небольшого размера на наружных половых органах. Опасность состоит в том, что вирус остается внутри организма даже после курса терапии. В некоторых случаях папилломы могут спровоцировать рак шейки матки.

Генитальный герпес имеет две формы проявления — острую и «спящую». Опасность данного заболевания состоит в том, что лечению оно не поддается. При помощи медикаментов вирус переходит в спящую фазу и продолжает находиться в теле человека.

ПЦР мазок на герпес делают следующим образом:

  • мужчинам в уретру вводят ватный тампончик на палочке и круговым движением собирают выделения;
  • у женщин берется эпителий с влагалища, шейки матки или мочеиспускательного канальчика.

Своевременно выявленная инфекция поддается быстрому искоренению. Запущенная инфекция может серьезно подорвать здоровье.

Анализы на скрытые вирусные инфекции помогают выявить заболевание и предотвратить патологии развития плода. ПЦР мазок при беременности может выявить скрытую инфекцию гепатита, причем, другие методы диагностики не способны справиться с задачей. Анализ выделений организма беременной позволяет выявить наличие скрытых паразитирующих микроорганизмов, которые внешне себя не проявляют.

Данный вирус, раз попав в тело человека, остается там навсегда. Во время снижения иммунной защиты, вирус переходит из спящей фазы в активную. Во время беременности защита иммунитета снижается, поэтому вероятность агрессии герпеса увеличивается.

Чем опасен герпес для беременных? Крайней степенью агрессии вируса является поражение внутренних органов тела. Причем, опасна любая форма герпеса — оральная и генитальная. Анализ крови берут у всех беременных женщин.

Герпес способен проникать через плаценту и поражать плод. Известны случаи самопроизвольного выкидыша, гибели младенца после рождения и преждевременных родов, вызванные активностью герпеса. Малыш может заразиться во время прохождения по родовым путям матери.

Анализ полимеразной цепной реакции способен обнаружить вирус герпеса даже в малых количествах в слизистых оболочках органов, а также установить его вид — оральный/генитальный.

Диагностику на наличие герпеса необходимо проводить в следующих случаях:

  • перед планированием оплодотворения;
  • при предшествующих новому зачатию выкидышах;
  • при наличии высыпаний на наружных половых органах;
  • при определении причин бесплодия.

В случае хронического течения инфекции анализ позволит установить степень опасности заражения вирусом полового партнера.

Особенно опасной считается цитомегаловирусная инфекция, попавшая в тело матери в первые 10 недель формирования плода. Нередко цитомегаловирус приводит к прерыванию беременности и выкидышу.

Инфицирование в срок от трех месяцев до полугода приводит к различным отклонениям в развитии плода, замедлению роста и дисплазии внутренних органов. Заражение на последних месяцах вынашивания приводит к поражению органов ребенка, которое можно увидеть уже после рождения.

Устранить цитомегаловирусную инфекцию невозможно, однако, сдержать ее активную форму удается с помощью курса терапии. Беременным назначают медикаменты, способствующие укреплению иммунной системы: в этом случае организм сам борется против агрессии вируса.

Передается вирус разными способами:

  • в организм матери вирус попадает при общении с зараженным человеком и во время полового контакта;
  • от матери плоду бактерии передаются через плаценту, в процессе родов и при грудном вскармливании.

Цитомегаловирус может проявить себя через два месяца после проникновения в тело женщины, симптомы похожи за простудное заболевание:

  • гипертермия и озноб;
  • головные боли;
  • бронхит и кашель;
  • боли в мышцах и костях.

Нельзя приписывать расстройство здоровья беременной ее особому состоянию. Нельзя назначать лечение самостоятельно без консультаций с гинекологом. Проявления заболеваний могут носить одинаковый характер, но различную этимологи.

К мерам защиты от цитомегаловируса относится:

  • защищенный секс с постоянным партнером;
  • использование индивидуальной посуды;
  • использование индивидуальных предметов личной гигиены;
  • дозированная физическая нагрузка на организм;
  • сбалансированная диета, прием витаминов;
  • позитивный настрой и прогулки на улице.

ПЦР мазок на цитомегаловирус способен защитить мать и плод от тяжелых последствий развития недуга.

С помощью ПЦР диагностики стали доступными исследования внутриутробного развития ребенка. Особую опасность здоровью плода представляет микоплазма и хламидии.

Перед планированием беременности женщина обязана сдать анализы и на другие виды инфекций — краснуха, токсоплазма, гепатит, вирус герпеса. После выявления наличия перечисленных вирусов, необходимо пройти терапевтическое лечение.

Мазок беременной способен дать информацию о наличии урогенитальной инфекции в родовых путях, своевременное устранение которой защитит малыша от заражения.

Забор выделений на мазок производят в любое удобное время при посещении женщиной гинеколога, специальной подготовки для этого не требуется.

После рождения у младенца тоже берут мазок на предмет выявления инфекции. У малышей берут соскоб с задней стенки гортани и слизь с конъюнктивы, мочу или слюну.

Показания к диагностике в первых триместрах беременности:

  • различные виды патологи беременности;
  • подозрение на хроническую форму инфекции;
  • обострение половых инфекций;
  • выявление чувствительности организма к некоторым медикаментам;
  • наличие инфекционного заболевания крови.

Важно! Не следует опасаться сдавать мазок на анализ во время беременности. Процедура забора материала не вредит развитию плода.

Большую опасность представляет не сдача анализов, а не выявленная инфекция, которая может причинить вред здоровью плода. Полимеразная цепная реакция сможет определить наличие скрытой инфекции, которая легко передается плоду через плаценту.

Часто скрытое протекание инфекционного заболевания принимают за общее недомогание беременной, ввязанное с особенностью положения. Важно в первые 12 недель пройти обследование и выявить скрытые патологии. Повторную диагностику проводят уже после назначенного курса терапии.

Что нужно для обследования беременной:

  • не использовать спринцевание и вагинальные суппозитории за три дня до диагностики;
  • не иметь половых контактов за три дня до забора биоматериалов;
  • последнее посещение туалета должно быть не позднее трех часов до забора мазка с шейки матки.

Если на анализ сдается кровь, нельзя употреблять сладкое накануне диагностики. Также запрещен прием любых медицинских препаратов внутрь и снаружи. Однако чаще для исследования проводят забор мазка из шейки матки.

источник

Высокоинформативный метод ПЦР (полимеразная цепная реакция) дает возможность раннего выявления различных генетических и инфекционных болезней, протекающих остро или хронически. Причем выявить их можно еще на том этапе, когда они не проявляют себя никакими симптомами. Чаще всего к анализу ПЦР прибегают для обнаружения инфекций передающихся половым путем (ЗППП, ИППП).

Анализ ПЦР относится к молекулярному методу диагностики, который основан на многократном увеличения малых концентраций определенных фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) возбудителя в любом биологическом материале (мазке из шейки матки, влагалища, уретры, крови, слюны, мокроте и т. д.) и сопоставление его ДНК или РНК с базой данных известных видов возбудителей инфекций.

Методика разработана американцем Кэрри Мюллисом в 80-х годах прошлого столетия. В 1993 ученый стал лауреатом Нобелевской премией в области химии. Сегодня исследование ПЦР считается своего рода «золотым стандартом» для диагностирования подавляющего большинства инфекций. Анализ ПЦР повсеместно применяется в медицинской практике для уточнения характера болезни и постановки точного диагноза. Очень часто бывают случаи, когда все известные иммунологические, вирусологические и бактериологические методы не действуют. Тогда ПЦР становится единственным способом, с помощью которого можно выявить активную стадию заболевания.

Методика ПЦР нашла широкое применение в современной медицине благодаря ряду бесспорных преимуществ. Расскажем о них более подробно.

Многие из традиционных диагностических методик основаны на определении маркеров – белков, которые являются продуктами жизнедеятельности возбудителя болезни. Такой принцип диагностики может дать только опосредованное подтверждение патологии. Метод ПЦР обеспечивает прямое определение возбудителя, поскольку выявляет специфические участки ДНК патогенных организмов.

Методика ПЦР отличается высокой специфичностью благодаря тому, что позволяет выявлять фрагменты ДНК, характерные только для конкретного инфекционного агента. При использовании иммунологических методов остается вероятность получить ложный результат (ошибки в диагностике связаны с перекрестно-реагирующими антигенами). Что касается ПЦР, то здесь ошибки исключены, поскольку специфичность в данном случае задается нуклеотидной последовательностью праймеров.

Посредством этого метода определяются даже единичные болезнетворные микроорганизмы. Возбудители инфекций выявляются в организме человека даже тогда, когда другие методы диагностики не проясняют ситуацию (речь идет о различных иммунологических микроскопических и бактериологических способах исследования).

Приведем данные для сравнения. Чувствительность микроскопических и иммунологических методов составляет 103-105 клеток, а чувствительность ПЦР – 10-100 клеток в пробе.

Методика ПЦР основана на исследовании ДНК патогенных организмов. В процессе исследования определяются фрагменты РНК или ДНК, которые являются специфичными для конкретных возбудителей инфекций. Поскольку все нуклеиновые кислоты имеют сходный химический состав, при лабораторном анализе можно применять унифицированные методики. А это значит, что исследование одной пробы дает возможность выявлять сразу несколько возбудителей.

Данная методика не требует выращивания культур возбудителей, на которое уходит довольно много времени. Благодаря применению унифицированной технологии обработки материала и выявления продуктов реакции, а также автоматизированному процессу амплификации вся процедура исследования занимает лишь несколько часов.

Методика ПЦР дает возможность эффективно выполнить доклиническую диагностику (выявление возбудителей до появления симптоматики) и ретроспективную диагностику (определение патогенов после перенесенной болезни). Так, доклиническая диагностика имеет большое значение при обследовании пациента в инкубационном периоде возможного заболевания – после предполагаемого заражения до возникновения первых признаков.

Одним из важных преимуществ ПЦР является возможность использования для анализа биологических остатков или архивных материалов. Это дает возможность идентифицировать отцовство и личность.

На сегодняшний день методы ПЦР-диагностики продолжают развиваться. Усовершенствуется сама технология проведения анализа, а также появляются новые виды ПЦР. В медицинскую практику внедряются инновационные тест-системы для этой реакции. Благодаря такому быстрому развитию науки стоимость процедуры уменьшается, и теперь обследование ПЦР может применяться для многих категорий пациентов.

В основе этого метода диагностики лежит многократное удвоение данного участка РНК или ДНК. Этот процесс реализуется в лаборатории с использованием особых ферментов. В итоге формируется столько участков ДНК (РНК), сколько нужно для визуального исследования. Во время процедуры копируется лишь участок, соответствующий заданным условиям (если он присутствует в изучаемом образце).

Биологический материал, которые необходимо исследовать на наличие ДНК или РНК возбудителей помещают в амплификатор. (В зависимости от конкретной ситуации для анализа берут кровь, мочу, слюну, отделяемое из половых органов). Затем к образцам добавляют особые ферменты. Они связываются с РНК или ДНК патогенных микробов, и начинается синтез копий. Копирование представляет собой многоэтапный процесс, протекающий по типу цепной реакции. В результате возможно появление сотен или даже тысяч копий.

На следующем этапе диагностики результаты анализируются и сопоставляются с базой данных возбудителей инфекций.

Методика ПЦР не просто дает возможность определить вид патогенного организма, но и позволяет сделать выводы о количестве возбудителей инфекции в человеческом организме.
Сегодня применение подобных технологий открывает широкие возможности при исследовании мутаций, сращивания участков ДНК. В современной медицине метод начал применяться для определения отцовства, выявления новых генов и многого другого.

Благодаря своей универсальности метод ПЦР нашел широкое применение в урологии, гинекологии, пульмонологии, онкологии, гематологии, фтизиатрии, практике инфекциониста и других областях медицины.

Для ПЦР диагностики применяются различные биологические среды и жидкости, взятые из организма человека: мокрота, слизь, слюна, моча, кровь, соскоб эпителиальных клеток, ткани плаценты, плевральная жидкость, околоплодная жидкость, сок простаты и др.

При диагностике ЗППП (ИППП) анализу подвергаются выделения из мужских и женских половых органов. Для этого выполняют мазок или соскоб из уретры или шейки матки. Также для исследования используют мочу.

Для выявления инфекций (герпес, мононуклеоз, ЦМВИ, токсоплазмоз, ВИЧ, гепатиты В и С) на анализ берут кровь. При подозрениях на поражения нервной системы производят забор спинномозговой жидкости.

Для пульмонологических исследований используют плевральную жидкость и мокроту.

Для выявления внутриутробных инфекций анализу подвергают ткани плаценты и околоплодную жидкость.

— ВИЧ-инфекция (можно выявить вирус иммунодефицита человека ВИЧ-1).

— Вирусные гепатиты А, В, С, G ( РНК-HAV, ДНК-HBV, РНК-HCV, РНК-HGV).

— ИППП (инфекции, передающиеся половым путем) – уреаплазмоз, гарднереллез, хламидиоз, микоплазмоз, трихомониаз.

— Инфекционный мононуклеоз (ДНК вируса Эпштейн-Барр -ВЭБ).

— Цитомегаловирусная инфекция (ДНК-CMV).

— Герпетическая инфекция (ДНК- вируса простого герпеса ВПГ 1 и 2 типа).

— Туберкулез (микобактерия туберкулеза).

— Онкогенные вирусы – папилломавирусная инфекция (вирус папилломы человека (в том числе его онкогенные виды 16, 18, 31, 33, 45, 51, 52, 56, 58, и 59).

— Боррелиоз, клещевой энцефалит.

— Кандидоз (грибы рода Candida).

— Хеликобактерная инфекция (Helicobacter pylori)
и другие.

Пациенты, сдавшие материал для проведения ПЦР диагностики, рассчитывают на получение быстрого и точного результата. При этом нужно учесть один важный момент – достоверность диагностики зависит не только от профессионализма специалистов и возможностей медицинской лаборатории. Чтобы исследование было информативным, должен приложить усилия и сам больной. Так, необходимо строго придерживаться всех рекомендаций доктора и тщательно соблюдать правила подготовки к сбору материала. Очень важно не допустить загрязнения биологических образцов, иначе результаты обследования будут искажены.

Читайте также:  Как правильно сдать анализы на цитомегаловирус

Подготовка к процедуре не связана особыми сложностями. Достаточно запомнить несколько правил:

— Кровь на анализ ПЦР сдается натощак. Кровь берут из вены обычно с утра стерильной иголкой в специальный контейнер.

— В течение суток до забора материала показано половое воздержание при взятие мазка ПЦР на ИППП.

— Для анализа мочи на ПЦР берется первая порция, емкость должна быть стерильной.

Анализ ПЦР берут у мужчин и женщин в прививочном кабинете, это кровь из вены, слюну, мазки из глотки, миндалин, смывы из носоглотки и т.д. Метод забора не отличается.

ПЦР на ИППП сдают в женской консультации при гинекологическом осмотре у женщин, это мазки из влагалища, шейки матки, уретры. У мужчин во время посещения андролога или венеролога, это мазок из уретры.


Схема забора материала на ПЦР из носа


Схема забора материала на ПЦР с миндалин


Схема забора материала на ПЦР со слизистой глаз


Схема забора материала на ПЦР со слизистой щеки


Схема забора материала на ПЦР у женщин


Схема забора материала на ПЦР у мужчин

Пациентам не приходится долго ждать результатов ПЦР-обследования. На всю процедуру анализа обычно уходит от нескольких часов (ПЦР в реальном времени) до 2-10 суток. Как правило, результаты анализа на руки пациент получает через 2-5 дней, максимально до 10 дней, это зависит от вида анализа. Дольше всего делается ПЦР-диагностика крови на ВИЧ и гепатиты, а меньше всего мазки и соскобы — 2-3 дня.

Отрицательный результат говорит о том, что на данный момент в биологическом материале не выявляются следы возбудителей инфекции. То есть инфекция, по поводу которой проводилось обследование, отсутствует.

Положительный результат говорит об обнаружении следов возбудителя в биологических образцах. Это значит, что в данное время в организме человека присутствует инфекция.
Возможны случаи, когда ПЦР дает положительный результат, но активного инфекционного процесса не наблюдается. Речь идет о явлении, которое называют «здоровым носительством». Лечение таким пациентом не требуется, но они должны находиться под постоянным динамическим наблюдением. Такие ситуации характерны для вирусных инфекций: вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ), гинитальный герпес, цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ), вирус папилломы человека(ВПЧ), при которых для исследования берутся образцы из местных очагов (соскоб уретры, цервикального канала, слюна). При этом нельзя забывать, что здоровый носитель может передать инфекцию другим людям. Кроме того, не исключена активация инфекционного процесса. В случаях, когда ПЦР дает положительный результат при исследовании крови, это уже нельзя считать носительством. Таким пациентам необходимо специфическое лечение заболевания вызванного обнаруженным возбудителем.

Количественные показатели не имеют общих градаций. Их оценивает врач индивидуально для каждой конкретной инфекции. Количественный результат дает возможность определить насколько активна инфекция и выявить стадию процесса.

Для оценки эффективности методики есть три критерия:

— Точность – выявление инфекции (или ее отсутствия) с высокой степенью вероятности.

— Специфичность – точность определения конкретного возбудителя.

— Чувствительность – возможность идентификации возбудителя даже при малом количестве генетического материала в биологических образцах.

При использовании метода ПЦР получение ложноположительных результатов практически невозможно (то есть, если возбудитель отсутствует, то положительной проба не будет).

Ложноотрицательный результат возможен, но такое происходит довольно редко. Подобные ситуации возникают, если инфекция на момент исследования неактивна. К примеру, хроническая инфекция вне активности или же латентная инфекция.

источник

ПЦР – полимеразная цепная реакция. Это генетический тест. Позволяет в собранном у пациента материале обнаружить ДНК(РНК) или части ДНК(РНК) инфекционного агента или дезоксирибонуклеазу (рибонуклеазу) самого пациента.

Амплификация – копирование коротких фрагментов ДНК микроорганизма. Осуществляется несколько раз в пределах одного температурного цикла в условиях специализированной лаборатории.

Свойства метода ПЦР:

  • высокая точность и чувствительность метода
  • специфичность (выделяют ДНК инфекционного агента, ДНК пациента и других микроорганизмов)
  • универсальность выполнения лабораторного этапа исследования
  • скорость выполнения ПЦР выше, чем при использовании столь же точного культурального метода (от 5 часов до суток)

ПЦР является достаточно точным анализом, используемым при постановке диагноза при любом инфекционном заболевании.

Когда результат трактуется как ложноотрицательный?

Если в крови, моче, мокроте или мазках нет следов возбудителя, так как микроорганизмов в принципе мало, или материал забран с нарушением требований к технике манипуляции. Ложноположительных результатов при выполнении полимеразной цепной реакции не бывает.

ПЦР не зависит от пола пациента, сдававшего данный материал. Соответственно, по сути, ПЦР у женщин ничем не отличается от ПЦР у мужчин.

  • Что нужно сдавать на ПЦР
  • Применение ПЦР
  • На какие инфекции проверяет мазок на ПЦР
  • Когда назначается ПЦР
  • Технология забора мазка на ПЦР
  • Как берут кровь на ПЦР
  • Хранение и транспортировка ПЦР анализов
  • Аналитический этап ПЦР диагностики
  • Интерпретация результатов ПЦР анализа
  • из мочеиспускательного канала
  • из прямой кишки
  • со слизистой глаза и нижнего века
  • из цервикального канала
  • из влагалища
  • из зева
  • с поверхности кожных высыпаний и язв

Кровь, секрет предстательной железы, вода, почва, смывы с поверхностей и даже продукты.

  • диагностика заразных заболеваний, в том числе венерических
  • определение генетических заболеваний
  • генотипирование, создание генотипического паспорта
  • анализ ГМО продуктов и качества продуктов питания
  • определение личности
  • установление отцовства

ПЦР чувствительна к любым известным микроорганизмам.

То есть способна выделить ДНК любого возбудителя: бактерии, вирусы, простейшие, грибы.

Список возбудителей, которые выявляются методом ПЦР, совпадает со списком инфекционных агентов, способных вызывать ИППП.

  • сифилис
  • трихомониаз
  • хламидиоз
  • микоплазма и уреаплазма
  • гонорея
  • ВПЧ
  • мягкий шанкр
  • гарднереллез
  • генитальный или иной герпес
  • донованоз
  • цитомегаловирусная инфекция
  • ВИЧ
  • вирусные гепатиты
  • контагиозный моллюск
  • саркома Капоши
  • кандидоз
  • фтириаз
  • чесотка

Имеет значение срок забора материала. Анализ будет информативен уже в продромальном периоде заболевания. В разгар инфекционного процесса результат достигается практически с гарантированной точностью.

Для определения эффективности лечения ПЦР назначают не ранее чем через 30-60 дней по завершении курса антибиотиков.

Для женщин необходима некоторая подготовка к забору мазка, в том числе на ПЦР.

Подготовка к забору мазков:

  • в день забора материала не мыться, не спринцеваться
  • не мочиться минимум за 2 часа до забора
  • мазки не собирают в период менструации и в течение 2 дней после нее
  • накануне не применять антисептические и антибактериальные средства, в том числе местно (свечи, орошение, таблетки, инъекции)
  • антибиотики должны быть приняты курсом, но первое исследование назначают через месяц после последнего приема

Рассмотрим, как именно берут мазок на ПЦР у женщин. Процедура выполняется врачом-гинекологом, урологом, венерологом или акушеркой при помощи стерильного тампона.

Им проводят по местам забора материала, по кругу, без нажатия:

  • ​мочеиспускательный канал
  • цервикальный канал
  • стенка влагалища
  • ​ампула прямой кишки
  • слизистая глаза и нижнее веко
  • задняя стенка глотки и миндалины

Тампон помещается в стерильную пробирку или им проводится по предметному стеклу с фиксатором. После чего материал доставляется в лабораторию.

Соскоб проводится тем же стерильным тампоном. Только вращательными движениями и с приложением некоторого усилия или специальной «щеткой». Далее щетка или тампон также помещается в стерильную пробирку или ими проводится по предметному стеклу.

Забор мочи на ПЦР осуществляется стерильный контейнер, первые 50 мл, не выделяя средней порции. Далее контейнер закрывается и доставляется в лабораторию.

Забор мокроты на ПЦР проводится в стерильный контейнер. Предварительно пациенту предлагают выпить побольше жидкости.

С утра пациенту предлагают откашляться и отделить мокроту в стерильную посуду. Данное исследование используют для диагностики туберкулеза, хламидиоза и микоплазмоза.

Для сдачи крови в процедурную надо явиться натощак, накануне допустим только легкий ужин. При анализе методом ПЦР используется кровь из вены, для чего специальной иглой на вакутейнере производят прокол.

После присоединяют стерильную пробирку с пробкой к другому концу иглы. Под действием градиента давления (вакутейнер создает вакуум между иглой и пробиркой) кровь легко поступает в пробирку.

ПЦР крови на ВИЧ и гепатиты выполняется в реальном времени с определением концентрации ДНК (РНК) в плазме. Это исследование требуется для решения о назначении противовирусной терапии и прогноза степени риска передачи вируса от беременной к плоду.

Какой материал брать на исследование, решает врач исходя из клинической ситуации. Обычно мазки и моча используются для проведения ПЦР при определении возбудителей ЗППП.

Кровь на ПЦР забирается при постановке диагноза герпеса, цитомегаловируса, ВИЧ и гепатитов, а также токсоплазмоза.

Мазок на ПЦР из зева или, проще говоря, изо рта – при диагностике мононуклеоза и ЗППП: цитомегаловирус, ВПЧ, сифилис.

Мазок из ануса на ПЦР применяется при определении подавляющего большинства ЗППП.

Какие именно возбудители будут разыскиваться при помощи ПЦР – определяет врач- венеролог после осмотра.

Стерильные емкости и предметные стекла категорически нельзя замораживать. Хранить в помещении не более двух часов, и только в крайних случаях – в холодильнике еще 20 часов.

Необходимость обеспечивать температурный режим транспортировке в специальную генетическую лабораторию обуславливает использование термоконтейнеров. В них поддерживается температура от 4 до 8 градусов Цельсия.Поэтому очевидным плюсом медицинской организации является собственная лаборатория, способная выполнить полимеразную цепную реакцию.

В лаборатории сперва выделяется ДНК из предоставленного образца.

Далее материал помещается в термостат в микроцентрифужных пробирках с добавлением амплификационной смеси на несколько часов.

Для сравнения выполняется контроль с известными ДНК определенных микроорганизмов. Выполняется электрофорез со смесью бромистого этидия и ДНК, что вызывает свечение в ультрафиолетовых лучах.

Электрофорез позволяет разделить продукты амплификации. При положительном результате теста они дают оранжевое свечение в коротком участке светового спектра.

При определении наличия ДНК (РНК) полимеразная цепная реакция считается положительной, и это точно демонстрирует наличие возбудителя.

Для диагностики вируса иммунодефицита человека и гепатитов В и С используют ПЦР с определением концентрации ДНК (РНК).

Для ДНК высокой считается концентрация 1,0 x 105 копи на такие инфекции как герпес, цитомегаловирус, ВИЧ и гепатиты, а также токсоплазмоз.

Количественная оценка ПЦР или количественный анализ экспрессии генов говорит об их активности. В результате экспрессии генов образуются определенные белки. которые и считаются в рамках количественной ПЦР в реальном времени. По результату этого исследования врач судит об инфекционной нагрузке и активности возбудителей.

При диагностике ИППП используют несколько диагностических исследований. ПЦР позволяет довольно точно определить наличие определённого возбудителя уже в продромальный период развития инфекции.

Когда симптомы больше напоминают простуду, чем конкретное заболевание. Интересно также оценить напряженность иммунного ответа макроорганизма. Для этого назначаются серологические исследования ИФА, РПГА, РИФ и прочие.

Серология показывает, сколько антител и к какому именно антигену сформировалось, какая стадия заболевания наблюдается. Существует понятие «титр антител». То есть их количество, характеризующее напряженность, то есть выраженность иммунитета. Случается, что ответы разных исследований противоречат друг другу.

ПЦР является реакцией проверки, то есть именно по её положительному результату судят о наличии возбудителя. Например, если ПЦР положительна, а мазок на флору отрицательный.

Мы считаем, что в последнем случае в материал просто не попало нужного количества микроорганизмов. Или они не окрасились по разным причинам. Если ПЦР положительна, а серологические пробы отрицательны, то организм человека не вырабатывает иммунного ответа на возбудителя.

Наблюдается состояние иммуносупрессии, что бывает:

  • при ВИЧ
  • при приёме специальных лекарственных препаратов после трансплантации
  • при лечении аутоиммунных заболеваний
  • в период выздоровления после тяжёлой болезни
  • при истощении или тяжелой хронической усталости

Если ПЦР отрицательна, а серологические пробы положительны, то нужно смотреть на фракцию иммуноглобулинов. IgM характерен для острой фазы течения заболевания при первичном заражении.

В такой ситуации врач может повторить забор материала. Или ориентироваться по точному, но длительно выполняемому культуральному методу (посев культуры возбудителя на питательные среды).

Высокий титр Ig A или IgG могут свидетельствовать о хронической инфекции в стадии обострения. А их низкие титры – просто о том, что пациент перенёс данное заболевание. Именно поэтому серологические пробы не используют для контроля эффективности лечения. В частности, проводить ПЦР нужно после определенного промежутка.

Цена анализа зависит от материала, использованного для ПЦР, и колеблется от 350 до 1200 рублей.

При необходимости сдать ПЦР анализы обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

источник