Норма анализа пцр на вич

Анализ на ВИЧ определяет наличие в организме этого опасного вируса. Нормы показателей крови откланяются, когда человек болеет приобретенным иммунодефицитом. Это лабораторное исследование назначается людям, перенесшим тяжелые вирусные и бактериальные заболевания, так как их организм ослаблен. Также после незащищенного полового акта с незнакомым человеком, употребление наркотиков и введение внутримышечной или внутривенной инъекции нестерильным шприцом. Расшифровка анализа покажет наличие вируса иммунодефицита, примерное время заражения и степень прогрессирования этой неизлечимой болезни.

Вирус иммунодефицита человека — заразная инфекция, вызываемая несколькими видам ретровирусов, которые встраиваются в форменные клетки крови, постепенно разрушают иммунную систему и убивают организм. ВИЧ передается через кровь, половым путем, вертикальным — во время родов от роженицы к младенцу и во время грудного вскармливания.

СПИД — последняя стадия ВИЧ, расшифровка аббревиатуры — синдром приобретенного иммунодефицита человека. Развивается как осложнение вируса иммунодефицита, при отсутствии лечения начинает прогрессировать через 3 — 5 лет от начала заражения; при адекватном медикаментозном регрессе ретровирусов может не проявиться вообще или только через 30 — 40 лет.

Первые случаи заражения ВИЧ были освещены в медицинских журналах в 1981 году,когда американские врачи предоставили результаты исследований атипичной пневмонии и саркомы Капоши у гомосексуальных мужчин. Эти две болезни имели разные группы риска — злокачественные образования дермы полости рта и носоглотки отмечали у пожилых людей, а пневмонию ослабленного иммунитета у людей, перенесших лучевую или химиотерапию. Такое странное сочетание двух непохожих болезней натолкнуло врачей на мысли об ослабленном иммунитете у контрольной группы. Дальнейшие исследования обогатили данные о наркоманах, людях, практикующих анальный секс, асоциальных слоях граждан. Случайная выборка показала, что у многих людей из этих групп есть ряд похожих симптомов и отклонений в гомеостазе. Далее, обнаружили в их организмах вирионы с конусовидными сердцевинами — вирус иммунодефицита человека.

Общий анализ крови не определяет наличие в организме вируса, поэтому в случае необходимости такой диагностики, пациента направляют на анализ крови на ВИЧ, который обозначается как HIV Ag/Ab Combo (обнаружение 1 и 2 антигена совместно из одной пробирки).

В бланках медицинских лабораторий графа AIDS обозначает СПИД (определение тяжести, формы и длительности болезни); такой анализ не может быть назначен для определения ВИЧ — статуса. В российских клиниках анализ на ВИЧ обозначатся как «забор из вены по форме 50».

Всемирная организация здравоохранения составила группы риска людей, которым необходимо регулярно или в течение какого-либо периода сдавать анализы.

Беременные женщины. Сдают кровь 3 раза за беременность.
Люди, сделавшие татуировки.
Наркоманы.
Гомосексуалисты.
Люди, вступившие в незащищенный половой контакт с незнакомым человеком.
Часто и тяжело болеющие респираторными заболеваниями, перенесшие вирусные, бактериальные инфекции, которые ослабляют иммунитет — мононуклеоз, Эпштейн-Барр, туляремия, пневмония, боррелиоз, бруцеллез, туберкулез.
Пациенты, готовящиеся к полостным и лапароскопическим операциям.
Доноры крови, костного мозга, внутренних органов.

Также всем людям минимум 1 раз в год нужно проходить тестирование, потому что в некоторых случаях заражение происходит таким путем, что человек о нем не догадывается. Например, при оказании первой медицинской помощи человеку с кровотечением, спасающий имеет на коже микротравмы и трещины, через которые проникает кровь реанимируемого, зараженного ВИЧ. Также живя половой жизнью с регулярным партнером нельзя быть полностью уверенным в его верности. Измена на стороне может привести к заражению гуляки, так и ни о чем неподозревающего партнера.

Анализ лучше всего сдавать натощак, чтобы от последнего приема пищи прошло не менее 5 часов. Из рациона нужно исключить продукты, вызывающие гормональный сбой, повышение тромбоцитов, увеличивающие скорость оседания эритроцитов. Если кровь будут забирать утром, то с вечера разрешен легкий ужин. Начиная с 12 часов ночи еда, чай, кофе, сок исключены, разрешается только вода. Также запрещено употреблять алкоголь за 3 суток до анализа, так как наличие этилового спирта ацетальдегидов в крови искажает результат. Подготовка к анализу на СПИД такая же.

От курения также лучше отказаться за 2-3 часа до анализа. В условиях больничных лабораторий, в качестве материала исследования используют кровь. Домашние экспресс-тесты исследуют слюну, поэтому для быстрой диагностики свои требования: запрет на прием пищи, воды, курения, ингаляционных лекарств за 2 часа до изъятия слюны.

У новорожденных результат анализа на ВИЧ готовится ускоренным методом с помощью лакмусовой бумажки, которую прикладывают к крови из пуповины. Результат пишется как «положительный» или «отрицательный», а сама графа исследования имеет обозначение «забор 50 пуповина».

Существует несколько вариантов обнаружения и расшифровки анализа на ВИЧ. К первому поколения относят пересчет лейкоцитарной формулы крови. Такая диагностика не совсем совершенна, требует повторной перепроверки, к тому же у нее большое «окно слепоты» — период, когда сдача анализа неинформативна. То есть, заражение уже произошло, но оно не отображается.

Полимеразная цепная реакция (метод ПЦР) это обнаружение ДНК вируса в крови человека. Такое исследование позволяет получить количественное значение РНК вирусов в организме на ранних стадиях инфицирования — от 7 суток.

ПЦР на СПИД обозначается как ЦР ВИЧ+.

Иммуноферментное исследование крови на ВИЧ методом ферментирования и флуоресцентной подсветки РНК вируса — один из самых современных способов, призванный показывать иммунодефицит. Серологическая проба сыворотки крови обнаруживает антитела к вирусу еще на ранних этапах заражения. ИФА назначают для перепроверки анализов, выполненных по первому и второму варианту, хотя этот анализ хорош сам по себе.

Расшифровка результатов анализа на ВИЧ может выглядеть как качественное или количественное отображение. На ранних сроках к основным референтным нормам прикладывают значение лейкоцитов, так как в начале болезни им свойственно усилено делиться. Лаборант в карте исследований указывает наличие или отсутствие РНК ретровируса, его количество, характер расположения, сгруппированности, морфологическое строение сердцевины. До пациента эта информация доходит в упрощенной форме.

«Отрицательный» результат подразумевает полное отсутствие признаков пребывания в крови, сыворотке, форменных элементах патогенных антигенов. «Положительный» результат — наличие рибонуклеиновых кислот. «Сомнительный результат» — антигены обнаружены, но их значение предельно мало, чтобы точно установить диагноз. Помимо письменных результатов, врач должен расшифровать обратившемуся в устной форме подтверждение или опровержение диагноза.

Врач, лаборант, медицинское учреждение не имеют право разглашать информацию о ВИЧ-статусе больного, даже если результат отрицательный. Обращение прямых членов семьи — супруга или детей также не является причиной оглашения конфиденциального исследования.

Анализ на ВИЧ имеет только один вариант нормы — «отрицательный» результат. Для исключения ошибок в исследовании необходимо придерживаться правил подготовки перед сдачей: исключить спиртное за 3 суток до забора крови, сдавать анализ утром на тощак с минимальным употреблением воды ночью. Некоторые гормональные препараты (кортикостероиды чаще всего), иммуномодуляторы также могут искажать полученные результаты.

источник

За время, прошедшее со дня открытия вируса иммунодефицита человека, в лечении наметился серьезный прогресс. Но до сих пор инфицированных и их близких интересует вирусная нагрузка при ВИЧ, ее показатели и норма. Эти данные учитываются при подборе терапевтических методов, продлевающих годы. При отсутствии лечения, людям с ВИЧ врачи прогнозируют до 10 лет жизни, при правильно подобранном лечении – до 70. Не последнее место в таком изучении занимают не только антитела к ВИЧ-инфекции, но и количество клеток, отвечающих за иммунитет, Т-лимфоцитов, или CD-4, – именно они могут обезопасить инфицированного от сопутствующих заболеваний, ведущих к смертности, или СПИДу. Прояснить ситуацию помогает общий анализ крови, назначаемый и при ВИЧ.При низком показателе антител к вирусу достаточно проходить обследование дважды в год, при увеличенных, при беременности, приеме сменных групп антиретровирусных препаратах – раз в 2-4 недели – 3 месяца.

Анализы крови при вирусе иммунодефицит человека
Диагностика
- Полимеразная цепная реакция
- Иммуноблоттинг
Нормы
Что такое вирусная нагрузка
Что такое иммунный статус
Иммунный статус и вирус
Результаты и расшифровка анализов
Пути передачи вирусной инфекции

Исследование биологического материала, которым выступает кровь, остается наиболее информативным методом. Перед тем как сдавать анализ ВИЧ, стараются учитывать особенности поведения вируса. Он проявляется в плазме, хотя обнаруживается и в семенной жидкости, и во влагалищной слизи. Анализ на ВИЧ – многокомпонентная диагностика. Кровь берут для различных исследований:

Анализ крови на ВИЧ. Часто впервые обнаруживают вирус именно при сдаче анализа крови на ВИЧ и гепатит.
Общий анализ крови также назначается при ВИЧ. Он покажет специфические показатели лейкоцитов, тромбоцитов, гемоглобина, скорость оседания эритроцитов (СОЭ). Но эти же нюансы иногда указывают на другие вирусные инфекции, в случае отклонения от нормы назначаются другие исследования крови.

Важно! Если вы не знаете, как делаются тесты на ВИЧ, натощак или нет, врачи ответят: забор биологического материала осуществляется на голодный желудок. Это обеспечивает достоверный результат.

Экспресс-анализы на ВИЧ. Они дают результат в течение 30 минут. Проводят изучение не только крови, но и слюны, мочи. Тест информативен в плане диагностики заражения и количества антител. Иногда случается, что тест на ВИЧ положительный, анализ отрицательный. Результат ложноотрицательный, если заражение произошло недавно. Пройти это обследование нужно будет через 6 недель.
Иммуноферментное исследование. Из крови выделяют сыворотку, где и ищут антитела к вирусу иммунодефицита человека. На вопрос пациентов, сколько делается анализ на ВИЧ, врачи отвечают: до 10 дней. Но и здесь вероятность ошибочных результатов сохраняется. На это влияют аутоиммунные заболевания, обострения хронических болезней, раковые опухоли.

Задумываясь, где можно сдать анализ на ВИЧ, вам стоит обратиться в частную лабораторию, в центры профилактики и борьбы со СПИДом и ВИЧ, но проще всего сдать кровь в государственной поликлинике по месту жительства. Положительным аспектом каждого медицинского учреждения остается анонимность.

Узнать, сколько стоит ваш анализ на СПИД, можно заранее. Цена на ВИЧ-анализ колеблется от 300 до 12 000 рублей. Более дорогими по стоимости остаются исследования в частных лабораториях и высокочувствительные тесты.

Условно диагностические исследования делят на 2 вида. Первая группа помогает определить факт инфицирования. Такие тесты могут установить контроль над течением инфекции, указывают на результативность лечения.

Вторая группа определяет антитела к вирусу иммунодефицита человека, антиген р24 (серологические анализы) и РНК вируса, ДНК провируса (молекулярно-генетические тесты).

Детальная диагностика назначается после того, как был проведен общий анализ крови, что при ВИЧ желательно сделать. Инфицирование ВИЧ протекает в разных стадиях: от бессимптомного состояния до острой фазы, как СПИД. Во время него организм страдает от оппортунистических болезней, в то время как иммунитет здоровых людей им может противостоять. Это продемонстрируют общие показатели кровяных телец.

Диагностика помогает определить и количество лейкоцитов. От соотношения их и антител к вирусу тоже зависит будущее лечение и качество жизни. Кроме общих методов используют и специфические приемы.

Это один из эффективнейших методов диагностики инфицирования. Его результаты правдивы на 90 – 99 %: тест выявляет не антитела к вирусу, а его РНК. Этот анализ на ВИЧ отличают короткие сроки готовности – до 3 дней.

Это высокочувствительный и не самый дешевый метод распознавания вирусной инфекции. Он заключается в разделении белков вируса, после чего их перемещают на нитроцеллюлозную мембрану. После процедуры электрофореза его антигены, разные по молекулярному весу, сравнивают с образцами на тест-полоске. Метод показывает, на какой стадии иммунодефицита находится человек.

У здорового человека иммунный показатель CD-4 составляет 400-500 – 1600 клеток/мл. Если цифра уменьшается до 200-500, меняется каждые полгода на 45 единиц – высока вероятность инфицирования. Но учитывается и возможность заболеваний, влияющих на иммунные процессы, беременность и грудное вскармливание у женщин.

Также анализ крови на ВИЧ имеет нормы и для инфицированных людей. Если показатель клеток снизился до 350, пора начинать терапию. Благодаря этому не разовьются опасные для инфицированных людей сопутствующие заболевания.

Если цифра снизилась до 200 единиц, часто назначают высокоактивную антиретровирусную терапию. Страдающим иммунодефицитом советуют сдать анализы на ВИЧ и гепатит. Заболевания печени часто сопутствуют опасному вирусу, усугубляют состояние иммунитета.

Важно! Половина случаев инфицирования диагностируется после того, как был проведен анализ крови на гепатит, rw и ВИЧ: после постановки женщины на учет по беременности, во время профосмотров, перед сдачей донорской крови.

Инфицированных интересует не только значение CD-4. Важно количество частиц опасного вируса в плазме крови. Нагрузка может показывать ошибочный результат из-за нарушения условий прохождения тестов, после вакцинаций, вследствие перенесенных заболеваний. Это касается и здоровых людей. Но если через месяц показатель увеличивается в 3-5 раз, это повод задуматься.

Многое зависит от состояния здоровья инфицированного. Его характеризуют кровяные тельца, в частности – отвечающие за борьбу с чужеродными телами, среди которых и вирусные инфекции.

Совокупность количественных и качественных показателей иммунитета – это иммунный статус. Его измерение лучше проводить в одно и то ж время суток, в одной лаборатории, при помощи одинаковых тестов. Различие в них иногда приводит к ложным результатам.

Состояние инфицированного человека зависит от соотношения главных показателей: количества частиц вируса и клеток CD-4, иммунный статус и вирусная нагрузка – обязательные параметры для диагностики и возможного лечения. Задача врачей – повышать иммунный статус, который борется с вирусом. Однако он способен поражать клетки CD-4, их количество может резко снизиться до критического показателя. Именно поэтому периодически проводится диагностика пациента.

Показатели иммуноферментного анализа могут отличаться. Они определяют разные белковые соединения, присутствующие в оболочках вируса. Наборы белков у тест-систем могут отличаться, но если обнаруживаются 3 основные – тест даст положительный результат.

Ученые выделяют следующие показатели:

До 20 тысяч копий/мл – недостаточная концентрация РНК. Для зараженного человека это хороший результат. У здорового показатель должен быть равен нулю.
От 20 тысяч до 100 тысяч – средняя стадия, характеризуется первичными или вторичными проявлениями иммунодефицита.
От 100 тысяч до 450 тысяч считается смертельно опасным показателем. Чем выше цифра, тем больше вероятность развития СПИДа.

Важно! Можно повторно сдать кровь при ложноотрицательном, ложноположительном и неверном результате. Отрицательный результат правдив, если риск инфицирования отсутствовал в течение 12 недель до забора крови.

Стоимость анализа на ВИЧ делает его доступным для каждого желающего. Актуальность проблемы подтверждают распространенные способы передачи инфекции: это использование нестерильных медицинских инструментов, в частности шприцов, путь от матери к ребенку, при незащищенном половом акте, при переливании крови.

На вопрос, через сколько можно сдавать анализы на ВИЧ после возможного заражения, врачи отвечают: нужно выждать время от 3 недель до 3-5 месяц.

Что делать инфицированным и их близким:

Следить за количеством копий РНК вируса ВИЧ. Это снижает риск инфицирования матерью плода, а также увеличивает продолжительность жизни зараженного.
Своевременно сдавать анализы и ответственно проходить курсы антиретровирусной терапии.
Помнить, что не только определение вирусной нагрузки при ВИЧ –важные показатели, их соотношение с результатами на иммунный статус – главная составляющая лечения. Тесты сдаются регулярно.

Поскольку лекарство от вируса ВИЧ не изобретено, людям с вирусной нагрузкой нужно следить, что показатель вирусных частиц не выходил за пределы нормы. Даже при наличии этого диагноза вы можете продолжать полноценную жизнь.

ВИЧ
Гарднереллез
Кондиломатоз
Молочница
Сифилис
Трихомониаз
Баланопостит
Герпес
Гонорея
Микоплазмоз
Уреаплазмоз
Уретрит
Хламидиоз
ЗППП

источник

Способ лечения болезни, вызванной вирусом иммунодефицита человека, не найден до сих пор. Зато диагностика достигла серьезных успехов. Анализ на ВИЧ, выполненный методом ПЦР, – один из вариантов выявления вируса в организме.

Полимеразная цепная реакция, или ПЦР, – один из современных методов диагностики ВИЧ. В его основе лежит способность нуклеиновых кислот к саморепродукции. Клетка любого живого организма включает белок и нуклеиновые кислоты:

РНК- рибонуклеиновую,
ДНК- дезоксирибонуклеиновую.

Эти макромолекулы хранят генетический код. Если концентрация вирусных клеток в крови низкая, в пробе содержатся не целые цепочки ДНК, а их отдельные «кирпичики» – нуклеотиды. Полимеразная цепная реакция выявляет даже такие «обломки» вирусных клеток. Этот анализ крови на ВИЧ позволяет получить результат на ранних сроках после возможного заражения, когда клинические первые симптомы еще не появились.

Наиболее точный результат можно получить, используя для анализа венозную кровь. Перед тем как пройти обследование, за пару дней следует отказаться от жирной пищи и алкоголя. За 2 недели прекратить прием иммуностимулирующих препаратов.

Пробу биоматериала расщепляют в медицинском лабораторном реакторе. Затем фракции обрабатывают ферментами. Реактивы объединяются с ДНК вирусной молекулы и дублируют ее. Из одной клетки получается 2, из 2-х – 4, далее 8. Число растет в геометрической прогрессии. Цепная реакция позволяет в короткий срок увеличить количество вирусного компонента и сделать его заметным для лаборантов.

Нормой является отрицательный результат анализа, который выглядит так: «ДНК вируса не обнаружено». Это и есть референсное (среднестатистическое) значение.

Диагностика ВИЧ с помощью ПЦР имеет неоспоримые преимущества, но есть и существенные недостатки. К первым относятся:

Высокая точность. Крайне мала вероятность получить ложноотрицательные результаты.
Универсальность. Для исследования подходит не только кровь, но и другие биологические жидкости (влагалищные выделения, сперма). Слюна, моча также используются, но точность результата будет ниже. В этих средах концентрация вирусных клеток незначительна.
Широкий спектр анализа. Один образец биоматериала можно исследовать на несколько заболеваний.
Скорость выполнения. Полимеразная цепная реакция относится к срочным методам диагностики. Ответ можно узнать уже на следующий день.
Достоверность составляет 80 %. С помощью метода ПЦР можно обнаружить вирусные частицы, даже если их концентрация невелика. Это позволяет диагностировать заболевание на ранних стадиях и своевременно начинать терапию.
Ранняя диагностика ВИЧ-инфекции. Время, когда ВИЧ обнаруживают в крови при помощи ПЦР, – 10-14 дней после предполагаемого заражения. Это стандартный отрезок для диагностики вируса иммунодефицита. Антитела на этом этапе еще не обнаруживаются; метод ИФА не работает.
Нет возрастных ограничений. Можно проводить это тестирование ребенку с момента рождения.

Недостатки метода ПЦР при диагностике ВИЧ:

Более высокая стоимость в сравнении с иммуноферментным анализом 3 поколения.
Требуется сложное медицинское оборудование.
Погрешность 20% в связи с высокой чувствительностью реакции. При аутоиммунных заболеваниях, злокачественных опухолях, хронических инфекциях ПЦР может дать ложноположительный результат.

Проведение этого анализа на ВИЧ рекомендовано в следующих случаях:

Нужен ранний ответ для предварительного диагностирования. ПЦР помогает подтвердить или опровергнуть результаты ИФА.
Иммуноблоттинг дал положительный результат. Если первым проводится ПЦР анализ, то обязательно подтверждение результата методом иммунного блоттинга. Исследования дополняют друг друга. Используя сразу 2 метода, медики исключают возможность ошибок.
Когда позитивный ВИЧ-статус подтвержден, ПЦР помогает отследить эффективность проводимой терапии.
Используется для исследования донорской крови на наличие антител к ВИЧ.
Проводить ПЦР можно даже детям до года. Этот метод применяется, чтобы выяснить ВИЧ-статус новорожденных, мамы которых являются носительницами вируса. Тест, проведенный в первые дни жизни, покажет, произошло ли внутриутробное инфицирование. Заражение могло случиться, когда ребенок проходил по родовым путям. Положительный ВИЧ-статус, приобретенный младенцем в процессе родов, удастся выявить через 2 – 3 недели.

Проведение анализа ПЦР на ВИЧ и расшифровка результатов не требуют много времени. Забор крови занимает 5-7 минут. В стандартном случае лаборанту достаточно 24 часов, чтобы подготовить справку. Диагностирование занимает не более 8 часов, остальное время требуется на оформление. Пациент получает отчет на следующий рабочий день. Экспресс-тестирование выполняют в течение 2 часов.

Исследования на ВИЧ указанным способом не проводят по полису ОМС. Получить эту услугу бесплатно в государственной поликлинике нельзя. Зато практически все коммерческие лаборатории обычно имеют необходимое оборудование и реагенты. Проведение анализа ПЦР часто входит в общий скрининг на ВИЧ. Цена комплексной диагностики составляет от 600 до 1000 руб.

Пройти процедуру можно анонимно. В регистратуре пациенту дают индивидуальный номер, по которому он узнает результат. Современные медицинские центры отображают все данные на своем сайте в личном кабинете клиента.

источник

ПЦР (полимеразная цепная реакция) представляет собой метод молекулярной генетики, который позволяет анализировать любую короткую последовательность ДНК (или РНК) даже в образцах, содержащих только мельчайшие количества ДНК или РНК, тем самым определив наличие/отсутствие патогенного возбудителя (определить, например есть ли в человеке вирус ВИЧ или гепатита Б или микобактерии туберкулёза). ПЦР используется для воспроизведения/умножения/клонирования (амплификации) выбранных участков ДНК или РНК для анализа.

Метод ПЦР настолько прост, что его может поставить даже школьник)

Раньше амплификация ДНК включала клонирование сегментов, представляющих интерес, в векторы для экспрессии в бактериях и занимала недели. Но теперь, когда ПЦР делается в пробирках, требуется всего несколько часов. ПЦР является высокоэффективной, так что из ДНК может быть сделано огромное количество копий.

Более того, ПЦР использует те же молекулы, которые природа использует для копирования ДНК:

Два «праймера», коротких одноцепочечных последовательностей ДНК, которые синтезируются так, чтобы соответствовать началу и концу растяжения ДНК, подлежащей копированию.
Фермент, называемый полимеразой, который перемещается вдоль сегмента ДНК, считывает его код и собирает копию.
Куча блоков ДНК, которые необходимо сделать этой полимеразе.

То есть ПЦР — это такая техника при которой частицы ДНК (иногда РНК) умножаются в определенном растворе или на специальной поверхности, где они могут быть депонированы.

ПЦР — это метод, с помощью которого учёные могут находить иглу в стоге сена и затем строить стог из этих игл.

Ключом к пониманию ПЦР является знание о том, что каждый человек, животное, растение, паразит, бактерия или вирус содержит генетический материал — ДНК (или РНК) последовательности (нуклеотидные последовательности или кусочки ДНК (или РНК)), которые уникальны для каждого индивидуума. То есть, если образец содержит сегменты ДНК или РНК,

задача ПЦР как метода — умножить (амплифицировать), сделать как можно больше их копий, чтобы можно было идентифицировать кому они могут принадлежать (определенному человеку, животному или патогенному организму), даже если есть только следы наличия ДНК/РНК.

Однако ПЦР-амплификация является лишь частью диагностического теста. После проведения амплификации амплифицированные сегменты необходимо сравнить с другими нуклеотидными сегментами, но уже из известного источника (например, конкретного человека, животного или патогенного организма). Это сравнение уникальных сегментов часто выполняется путем размещения нуклеотидных последовательностей, сгенерированных ПЦР, рядом с известными нуклеотидными последовательностями от людей, патогенов или других источников в специальном геле.

Когда электрический ток проходит через гель, то различные нуклеотидные последовательности образуют полосы, которые напоминают «лестницу» в соответствии с их электрическим зарядом и молекулярным размером. Это называется гель-электрофорез. Они мигрируют на одни и те же уровни в геле, показывая идентичность нуклеотидных последовательностей. Этот метод является одним из самых популярных последних этапов ПЦР-тестов.

В 1983 году Кари Муллис разработал основные этапы по амплификации ДНК-последовательностей. Он и Майкл Смит были удостоены Нобелевской премии за создание ПЦР в 1993 году.

ПЦР проводится в одной пробирке с соответствующими химическими веществами и при определенной температуре нагревания.

Необходимы следующие реагенты или химикаты:

Образец, содержащий нуклеотидную последовательность (из крови, волос, гноя, кожи и т. д.).
ДНК-праймеры: короткая одноцепочечная ДНК, которая присоединена к нуклеотидным последовательностям, которая способствует синтезу комплементарной цепи нуклеотидов.
ДНК-полимераза: фермент, который, когда ДНК связывается с праймером, спускается по фрагменту ДНК с добавлением структурных блоков ДНК для образования комплементарных пар оснований и, таким образом, синтезирует комплементарную нуклеотидную цепь ДНК (введение термостойкой ДНК-полимеразы, Taq-полимеразы , полученной из термостойких бактерий, заметно улучшает способность к ПЦР).
Большой избыток структурных блоков ДНК, называемых нуклеотидами (аденин, тимидин, цитозин и гуанин, сокращенные как: A, T, C и G соответственно) в растворе. Когда эти блоки соединены вместе, они образуют нуклеотидную последовательность или одну нить ДНК. Когда эти строительные блоки связывают свой комплементарный строительный блок слабыми водородными связями (например, A будет связываться только с T и G только с C) образуется комплементарная нуклеотидная последовательность ДНК, которая связана с исходной одноцепочечной ДНК. Когда связывание завершается, комплементарная ДНК с двойной цепью образуется в определенной последовательности.

Кари Муллис очень интересный, прикольный дядечка, посмотрите как он интересно рассказывает, как он придумал ПЦР:

Он верит в астрологию, но не верит, что ВИЧ вызывает СПИД.)

источник

Существуют различные способы обнаружить вирус иммунодефицита, именно анализ на ВИЧ ПЦР методом заслуживает особого внимания. Он основывается на том, что находит генетический материал возбудителя. Это исключает ошибку практически гарантированно. Исторически методика планировалась как чисто научный способ, но нашла применение.

ПЦР через сколько можно сдать на ВИЧ при подозрении на заражение? Отличие как раз и заключается в оперативности, потому прописать такой анализ могут на самых ранних стадиях развития болезни. Если потенциальный больной пришел к врачу сразу же после возможного инфицирования и признаков жизнедеятельности вируса еще нет, то будет назначен именно ПЦР анализ. Он работает уже с четвертого дня присутствия вирионов в крови. Для точности рекомендуется анализ примерно на 14-й день после опасного взаимодействия.

Какова достоверность ПЦР на ВИЧ через 2 недели? Как установлено, достоверность определения наличия вируса методом полимеразно-цепной реакции очень не вызывает сомнений. С 80-х годов прошлого столетия именно этот тест массово применяется и считается одним из точнейших, его разработчик получил Нобелевскую премию. Лауреат предвидел перспективность полимеризации уже в ту эпоху.

Датой рождения можно назвать 1983 год. Метод основан на том, чтобы вычленить фрагмент нуклеотидной цепи чужака, это может быть как рибонуклеиновая кислота так и дезоксирибонулеиновая, искусственно размножить его и исследовать. Специалист по ПЦР ДНК ВИЧ берет и размножает по принципу комплементарности, выстраивая довольно длинную цепочку, которую удобно рассмотреть и подвергнуть тестированию. ПЦР РНК ВИЧ осуществляется так же, только берется плазма или сыворотка.

Возникновение этого подхода в широкой практике явилось настоящим прорывом и позволило совершить большой шаг в вопросе помощи больным. Таким образом стало реальным помогать людям на самых ранних этапах, обнаруживать недуг еще до появления специфичных антител. С этого дня истории медицины, ВИЧ уже не является приговором.

Для исследования методом полимеразно-цепных реакций надо взять совсем немного инфекционного материала, потому поставить диагноз можно быстро и безотлагательно.

Диагностика ВИЧ ПЦР точна, требует виртуозного уровня квалификации от работников, которые занимаются исследованием. Современные лабораторные помещения много раз проверяют данные, которые получают, прежде чем сообщить итог обратившемуся.

Диагностика ВИЧ инфекции ПЦР методом занимает один день или несколько, все зависит от загруженности персонала.

Есть некоторые желательные условия к сдающему анализ, чтобы получить максимально правдивый ответ:

Не есть 8-10 часов, если к этому нет противопоказаний;
За пару дней отказаться от алкоголя;
Сутки до не практиковать спортивных упражнений.

Это все, что должен сделать испытуемый. Остальное – дело медработников. Стерильность в помещении должна быть 100%, референц-лаборатории ведущих центров регулярно проверяются на предмет чистоты и исправности стерилизаторов. ПЦР применяют и для того чтобы удостовериться в диагнозе, и для подсчета вирусных частиц в крови, то есть вирусной нагрузки.

Многие все же не доверяют результатам, которые получаются в первые дни после контакта с возбудителем. Анализ на ВИЧ ПЦР через какое время считается самым оптимальным? Чем больше времени проходит с момента попадания вируса в тело, тем проще его выявить. Но не следует забывать, что и лечить больного со временем все сложнее. Если достоверно известно, что был контакт с больным человеком, то не следует тянуть больше 14 дней. Если нет информации о контактах с положительными на ВИЧ людьми, то анализ нужно сдать сразу при появлении первых симптомов.

ПЦР ВИЧ на 9 неделе имеет высокую точность, но на этом сроке могут предложить и другое исследование, ИФА. Этот альтернативный анализ более дешевый, также точный, но основан на исследовании антител, которые, к сожалению, появляются не сразу после инфицирования. В идеале, для подтверждения диагноза, проводят оба анализа, сроки устанавливает врач.

Качественный ПЦР на ВИЧ дает понимание, действительно ли вирус иммунодефицита присутствует в организме. Этим же методом можно определить и другие инфекции.

Анализ на ВИЧ методом ПЦР процедура не сложная и начинается с забора венозной крови у пациента. Исследовать могут как ДНК, так и РНК, но сама процедура взятия материала будет одинаковой.

С помощью специальных реагентов, праймеров, в стерильной лаборатории проводится анализ. За единицу времени количество копий вырастает до определенных значений, эти значения оценивает сотрудник лаборатории. Проводится также определение возбудителя, чтобы установить, что речь идет о том самом вирусе. Таким образом, метод дает возможность качественного и количественного исследования биоматериала.

Так как анализ не из дешевых, его проводят не всем и не всегда. Правда, есть ряд случаев, когда он обязателен. Донорам, к примеру, обязательно нужно сдать анализ на ВИЧ ПЦР. Также анализ проводят в случае непредвиденных аварий в медицинских учреждениях и лабораториях, и при этом есть риск контактов здоровых людей с кровью инфицированных.

В большинстве случаев исследование проводится на добровольных началах. Обязать могут только медицинских работников и, иногда, педагогов и других работников сферы образования, которые контактируют с маленькими детьми. Также основанием для принудительного обследования могут послужить признаки резкого снижения иммунитета.

Тест ПЦР на ВИЧ достоверность показывает очень высокую, до 99%. Следует напомнить, что точность зависит и от срока. На пятый день после проникновения вируса в тело, точность составляет примерно 80%. Уже к 14 дню этот показатель повышается до 98%. Далее доходит до 99%.

Практика показывает, что ложноотрицательных результатов практически не бывает, порой случаются ложноположительные. ПЦР на ВИЧ точность 99% дает вполне хорошее представление о состоянии здоровья человека, контактировавшего с ВИЧ-позитивными людьми.

Анализ ПЦР ВИЧ на раннем этапе дает шанс оперативно среагировать на проблему, и своевременно принять меры по продлению активной жизни. Провериться будет не лишним, если есть риск заражения.

ПЦР на ВИЧ отрицательный, как уже было сказано выше, практически не может быть ложным. В таких ситуациях врач ставит диагноз «здоров» и дальнейшее обследование не показано, если, конечно, ос временем не появится клинических симптомов заболевания.

Ситуация совсем иная, когда ПЦР тест на ВИЧ дал положительный результат. В этом случае можно рассчитывать на ошибку, но, чтобы подтвердить эту гипотезу, необходимо продолжить обследование. Повторный тест и дальнейшее исследование другими методами провести нужно обязательно, и врач обязательно назначит анализы. Игнорировать требования врача нельзя.

ПЦР при ВИЧ проводится на ранних стадиях, а также иногда назначается при прохождении пациентом антиретровирусной терапии.

Метод ПЦР в диагностической медицине можно считать перспективным, действенным и точным. Пока что единственным его минусом можно считать высокую стоимость. Исследование генетического материала вирусной частицы дает возможность с высокой точностью подтвердить или опровергнуть наличие инфекции, а также предсказать скорость развития заболевания. ДНК тест на ВИЧ, или же РНК анализ, дает точность до 99%, причем на самых ранних этапах. Раннее диагностирование ВИЧ дает огромные шансы на успешную терапию.

Результат оценивают после 14 дней с предполагаемого момента проникновения вируса, предположительно это может незащищенный половой контакт или инъекции иглой сомнительной чистоты. Отрицательный результат при анализе ПЦР можно считать достоверным, в то время как положительный подлежит дополнительной проверке.

*Если вам не повезло и анализ ПЦР на ВИЧ показывает положительный результат, не стоит отчаиваться. В настоящее время существует целый список эффективных антиретровирусных препаратов, которые способны замедлить развитие болезни и продлить жизнь на 30-40 лет.

источник

Почему так страшен ВИЧ и СПИД, какие существуют методы диагностики. Углубленная информация про ПЦР-исследования.

По статистике, предоставленной Всемирной организацией здоровья совместно с организацией ООН ЮНЭЙДС, за последние сорок лет более 25 миллионов пациентов скончались от заболеваний ВИЧ и СПИД. Не зря эпидемиологи окрестили ВИЧ чумой 20-го века, так как урон, нанесенный этой инфекцией человечеству, имеет колоссальные масштабы. Наиболее сильно заражению подверглись страны африканского континента. Заражение сильно бьет по экономике и без того нестабильных государств, народ нищенствует.

При появившейся симптоматике чрезвычайно важна оперативная диагностика заражения организма ВИЧ-инфекцией, потому как вовремя пройденный курс терапии способен спасти или хотя бы увеличить срок жизни пациента. В нынешнее время технологический прогресс шагнул далеко: изобретены новейшие способы диагностики вируса ВИЧ и СПИДа, лечение доступно для любого человека планеты, достоверность анализов характеризуется малой долей погрешности, а терапия большим процентов эффективности.

В нашей стране выявление присутствия в организме пациента ВИЧ-инфекции представляет собой комплекс анализов:

Иммуноферментный анализ
Иммунный блоттинг
Полимеразная цепная реакция
Экспресс-тесты

Скрининг (тест ИФА) является первоначальной стадией определения заражения в организме. Он базируется на образованных в искусственных условиях белковых соединениях вируса, которые идентифицируют продуцируещиея иммунными клетками антитела как реакцию на заражение. Происходит химическая реакция между реактивами, вследствие чего индикаторный элемент меняет цвет. Значит, результат теста положительный. Информацию по такому способу можно получить через пару недель с момента инфицирования. Таковой способ выявляет не присутствие инфекции у пациента, а определяет вырабатывающиеся к этой инфекции антитела. Бывает, продуцирование антител стартует через 10-15 дней с момента инфицирования, но в подавляющем большинстве случаев позднее – через 1-1,5 месяца.

Информация по такому анализу обрабатывается от двух до десяти дней.

Достоверность диангоза на ВИЧ подкрепляется анализом ИБ. Исключительно положительный тест ИБ на вирус может служить веской причиной для утверждения инфицирования.

В лаборатории берут пробу венозной крови на анализ. Пробу дополнительно подготавливают, белковые соединения, которые в ней присутствуют, электризуются в испытательной камере, далее их распределяют в гелевой субстанции соответственно молекулярной массе. Бумажную полосу с напылением реактива несколько раз помещают в подготовленную пробу. При наличии в пробе антител к вирусу происходит химическая реакция и на тестовой полосе становятся видны черточки. Когда появляются 2 или 3 черточки p24, gp41, и gp120 или gp160, результат теста положительный.

При получении положительного результата по анализу ИБ с погрешностью в один процент можно сделать заключение о наличии инфекции ВИЧ в организме.

Новейшими технологиями для определения вируса иммунодефицита в организме являются экспресс-методы. Информацию по такому анализу можно получить через несколько минут после проведения. Наиболее высокая достоверность у иммунохромаграфических тестов – специальных тест-полос, на поверхности которых напыляется слой реагента. Антитела, содержащиеся в испытуемом материале, контактирует с реагентом, изменяя окраску индикатора. Через несколько минут проявляются две полоски, что указывает на наличие инфекции. Наличие единственной полосы означает отсутствие инфекции.

Такой тест можно использовать как дополнительный, информация по такому тесту обязательно подтверждается другими исследованиями.

Экспресс-тест на ВИЧ в среднем обойдется в 200-1000 рублей.

ПЦР – анализ крови, позволяющий с малым процентом погрешности определить присутствие заражения инфекцией в организме. Практическая суть данного способа тестирования в анализе молекул дезоксирибонуклеиновой и рибонуклеиновой кислоты.

Нередко встречается, что разные инфекции с разной этиологией протекают со схожей симптоматикой. Анализ ПЦР диагностирует инфекцию, причину ее образования, классифицирует степень заражения пациента и количественный состав вредоносных микроорганизмов. С помощью ПЦР специалист способен выявить даже крошечную толику молекул вируса, содержащуюся в организме, а при идеальных условиях одинарные злокачественные бактерии и штаммы вируса. Такая информативность обеспечивает специалисту возможность правильного выбора курса терапии.

Анализ основывается га многочисленном повторении отдельно выбранного отрезка цепи ДНК с добавлением ферментов в лабораторной среде. В ходе процесса копируется тот отрезок, который подходит по нужным параметрам и обязательно, чтобы этот отрезок был частью испытуемой пробы. Маленькие отрезки ДНК копируются в специально созданной среде с добавлением химических веществ, ускоряющих процесс.

Для проведения ПЦР в простейшем случае требуются следующие компоненты:

Матрица дезоксирибонуклеиновой кислоты с присутствием отрезка ДНК, готовящегося к амплификации
Пара праймеров – по одному для каждого из отрезков цепи
Специальное химически активное вещество полимераза, которое ускоряет процесс полимеризации ДНК.
Дезоксирибонуклеозидтрифосфаты
Заряженные частицы магния двухвалентного
Буферный раствор, который создает нужные условия для протекания процесса, а именно кислотность, концентрацию соли и заряженных частиц магния в растворе.

Обычно для защиты образца от перегрева в пробу с реагентами помещают вазелин, так как этот продукт содержит жиры и имеет высокую температуру кипения.

Анализ ПЦР диагностирует РНК инфекции. Характерная особенность такого анализа – большая достоверность, он помогает выявить заражение вирусом ВИЧ через полторы недели с момента инфицирования. Иногда бывает, что анализ дал ложные сведения, потому как его сильная чувствительность вызывает реакцию на антитела к другим вирусам в организме.

Такой способ диагностики не дешевый. Он предполагает наличие новейшей медицинской аппаратуры и определенных знаний в этой области. Поэтому ПЦР-диагностика не используется для групповых анализов.

Анализ на ПЦР можно сдать в специализированных клиниках нашей страны в среднем за 3500 рублей.

ПЦР назначают для:

Диагностики ВИЧ у ребенка, если мать была подвержена заражению инфекцией – вирус мог передаться через плаценту внутриутробно.
Определения вируса, когда иммуноферментный анализ дал размытые сведения
Отслеживания количественного уровня вируса в организме
Тестирования доноров

Результат анализа ПЦР не является достаточным основанием для постановки диагноза. Для этого нужно комплексное обследование наряду с прохождением других тестов. ПЦР скорее используется как вспомогательный метод, позволяющий разобраться в сложных случаях.

Помощь по диагностике вируса иммунодефицита можно получить абсолютно бесплатно в государственных медучреждениях. В частных клиниках диагностика ВИЧ обойдется от 3 до 5 тысяч рублей.

источник

Согласно статистике ВОЗ, за 40 последних лет 25 млн человек умерли от СПИДа. Урон от этой инфекции колоссален. Больше всего зараженных оказалось в странах Африки, откуда и пошла эта инфекция. При ВИЧ становится особо актуальной диагностика заболевания. Правда, средств для лечения ВИЧ еще не создано, но рано начатая терапия может удлинить срок жизни пациента и улучшить ее качество.

ВИЧ-инфекция определяется на разных этапах следующими методами:

ИФА — иммуноферментный анализ.
Вестерн-блот.
ПЦР — полимеразная цепная реакция.
Экспресс-тесты.

Метод ПЦР был разработан американским биохимиком Кэри Муллисом, который получил за это в 1983 году Нобелевскую премию. Сегодня этот метод в медицине при диагностике всех инфекций считается ведущим в силу своей точности и информативности. ВИЧ в этом плане не исключение.

Любая живая клетка содержит РНК и ДНК. Эти нуклеиновые кислоты способны к самокопированию и самовоспроизведению. Для каждой инфекции фрагменты ДНК уникальны. В биологических жидкостях эти обломки нуклеиновых кислот циркулируют. Они улавливаются и распознаются специальной аппаратурой — реактором. Это и есть основа метода. Лаборант ведет подсчет этих фрагментов. У ретровируса ВИЧ отслеживают РНК. Даже при единичных копиях вирусных частиц ПЦР может их обнаружить и посчитать.

В качестве исследуемой жидкости чаще всего используется венозная кровь. Специальные компоненты метода вступают в связь с частицами вируса и делают их определяемыми, потому что происходит многократное увеличение найденных фрагментов.

В случае с ВИЧ результат наличия вируса можно получить задолго до того, как появится клиника. Поэтому в силу своей высокой чувствительности ПЦР имеет такое высокое диагностическое значение. Огромный плюс ПЦР заключается в универсальности метода. Инкубационный период инфекции для ПЦР не преграда.

Метод ПЦР – достаточно дорогой. В этом заключается один из его больших минусов. Для его проведения нужна новейшая аппаратура и высокая квалификация врача-лаборанта. В силу сказанного ПЦР-диагностика не выполняется в небольших населенных пунктах. Сдать анализ можно только в специализированных крупных клиниках.

Стоимость определения ДНК ВИЧ в клиниках Москвы от 2 800 рублей, выяснение с помощью ПЦР вирусной нагрузки (РНК вируса в плазме) – от 8 800 рублей, а резистентности ВИЧ к ингибиторам протеазы – от 16 500 рублей. Как видим, цены достаточно высокие. ПЦР можно провести бесплатно в государственных поликлиниках по полису ОМС. Важно, что процедуру можно сделать анонимно. В регистратуре пациент получает номер, по которому он сможет узнать результат. В современных медцентрах имеются личные кабинеты клиентов, куда эти данные будут внесены.

ПЦР-диагностику на ВИЧ назначают в таких случаях:

Выявление инфекции у ребенка, рожденного от больной матери или носительницы, чтобы определить внутриутробное инфицирование.
Если ИФА дал сомнительные результаты (ПЦР на ВИЧ помогает в этом случае поставить окончательный диагноз).
Для выявления количественного содержания вируса в организме.
При положительном иммуноблотинге – они с ПЦР дополняют друг друга.
Тестирование доноров.
Для ранней диагностики ВИЧ.
Для определения эффективности и резистентности к АРВТ.

Преимущество указанного анализа и в том, что ПЦР на ВИЧ можно проводить даже детям до года.

Исследование чаще выполняют не для первичной диагностики, а уже в процессе лечения. Первичная диагностика – это серологические исследования (при них определяют уровень антител к ВИЧ). При ложноположительном результате его повторяют – это может быть при низкой вирусной нагрузке.

ПЦР диагностирует ВИЧ, когда еще нет к нему антител. Метод ИФА в этом случае не даст ответа.

А ПЦР на ВИЧ будет уже положительным. Но симптомы данного периода ВИЧ неспецифичны. Пациент сначала долго и безуспешно лечится по поводу ОРВИ у терапевта. Следует иметь в виду, что диагноз ВИЧ только на основании ПЦР не ставится, необходимо прохождение и других комплексных тестов. Метод ПЦР служит чаще вспомогательным для сложных случаев.

Перед тем как сдать ПЦР на ВИЧ, за 2 дня до анализа нужно не употреблять жирную пищу, алкоголь. Также лучше психически и физически не напрягаться. Если пациенту назначен курс иммуностимуляции, его прекращают за 2 недели до анализа.

Кровь лучше сдавать в утренние часы. Исследовать можно и другие биологические жидкости организма (сперму, секрет вагины), но лучшим материалом является кровь. Слюну, пот, мочу и слезы не используют, так как содержание вируса в них минимально.

Достоинствами метода являются крайне малая вероятность ложноположительного результата, универсальность реакции для любых биологических жидкостей организма. Анализ имеет широкий спектр:

Один забор крови можно использовать для выявления разных инфекций.
Методика относится к срочным, результат бывает готов уже на следующий день.
Достоверность составляет от 85 до 98%.
Наличие ВИЧ можно определить через 10-14 дней после заражения (антител при этом сроке еще нет).
Нет возрастных ограничений, проводить можно сразу с момента рождения.

Недостатки ПЦР заключаются в следующем:

Дороговизна анализа.
Необходимо сложное медицинское оборудование.
Требуется высокая квалификация лаборанта и врача, берущего анализ.
Реакция высокочувствительна, поэтому погрешность может составить 20%.
Может получиться ложноположительный результат, если у пациента есть аутоиммунные процессы, онкология, хронические инфекции.
Необходима особая чистота помещения лаборатории, потому что вирус может попасть в анализ из воздуха. Тогда результат будет неправильным.

Для лабораторий, в которых проводится ПЦР, для улучшения качества диагностики разработаны специальные жесткие меры по системе СанПиНа на внутренний контроль. Кроме того, должны быть соблюдены все правила работы при такой методике:

Требуется строго следить на информацией на пробирках.
Перед забором крови вновь посмотреть и удостовериться в назначении анализа.
Медсестра должна сделать правильную маркировку пробирок.
Врач-лаборант должен правильно провести все манипуляции с биоматериалом, чтобы не допустить перекрестное загрязнение.
Тест-система должна быть отличного качества.

Только при соблюдении всех этих условий погрешность в ответе может составить всего около 2% эпизодов.

Многие интересуются, через сколько ПЦР на ВИЧ будет готов. Диагностирование длится не больше 8 часов. Ответ пациент может получить уже на следующий день. Экспресс-тестирование выполняют в течение 2 часов.

Несмотря на массу преимуществ, ПЦР не считается идеальным методом диагностирования. К нему обращаются в случае необходимости получения скрининговых тестов на наличие ВИЧ в организме.

Через сколько сдавать ПЦР на ВИЧ? Достоверный результат можно получить уже при взятии крови через 4-4 дней после предполагаемого инфицирования. Через 2 недели достоверность на ВИЧ составит 98%, а при сроке 5 дней – 80%. Наличие при ПЦР на ВИЧ отрицательного результата будет достоверным, но для абсолютно точного результата проводят и ИФА.

Анализ ИФА будет результативным только при наличии антител к вирусу, это время может занимать от 1-3 месяцев до полугода. Так как ИФА дает вероятность выше (98%-99,9%), ПЦР нельзя назвать 100% подтверждающим анализом на наличие ВИЧ-инфекции. Но зато это единственная методика, при которой не нужно ждать появления антител.

При ВИЧ методом ПЦР можно получить сведения об эффективности АРВТ, о стадии заболевания ВИЧ и количестве ВН (количественная оценка нахождения ВИЧ в организме). Это будет говорить о тяжести и степени изменений.

Сдать анализы на ПЦР при ВИЧ нужно и в том случае, если антитела в крови есть, но их наличие не указывает на достоверность ВИЧ-инфицирования клинически.

Сдают анализ не только при заражении и случайной половой связи. Другие поводы:

Планирование беременности.
Предстоящая операция.
Случайная половая связь.
Некоторые профессии требуют сдачи этого анализа для допуска на работу (педагоги, врачи и другой медицинский персонал).
Заключенные.
Больные ТБ.
Работники МЧС и полиции.
Вернувшиеся после отпуска из экзотических стран (при желании удостовериться, что нет инфицирования).
Проститутки.
Иностранные студенты.
Наркоманы.

Также к сдаче анализа на ВИЧ может вынудить определенная симптоматика у пациента:

Резкая потеря веса.
Диарея, длящаяся больше 3 недель.
Беспричинное повышение температуры в течение длительного времени.
Увеличение лимфоузлов.
Невыясненная причина пневмонии, кандидоза и пр.

Расшифровка анализа – прерогатива лечащего врача, а не лаборанта.

При ПЦР-диагностике ВИЧ РНК вируса выявляется и качественно, и количественно. Этот анализ четко идентифицирует конкретный патоген даже при условии наличия нескольких перекрестно реагируемых. Биологический материал можно использовать даже в засохшем виде. Минус же в высокой чувствительности ПЦР, когда ложноположительный результат может дать и присутствие на инструментах или пробирке даже мизерного количества постороннего ДНК.

Задача и возможность ИФА – определение наличия антител к ретровирусу. Хотя его точность 99%, на ранних стадиях он неприменим.

Проведение качественного ПЦР на ВИЧ определяет присутствие вируса в организме. Результаты в этом случае будут выглядеть следующим образом: положительный, ложноположительный, отрицательный. Но данное исследование не даст сведений о количестве ретровируса. Такой качественный анализ нецелесообразен тогда, когда уже выявлена ВИЧ-инфекция в организме другими способами.

Контролировать результативность лечения качественным ПЦР невозможно.

Проводится уже только ВИЧ-инфицированным с целью подсчета количества копий РНК вируса в биопрепарате.

Цель такого исследования — мониторинг проводимого лечения и выявление резистентности вируса к нему. Противовирусная терапия в таких вычислениях не назначается врачом вслепую, поэтому будет являться более эффективной. Количественный ПЦР на ВИЧ-инфекцию делают гораздо чаще. Отображается этот анализ копией/мл крови.

Какие результаты могут быть выданы:

РНК вируса отсутствует или его очень мало (около 20 копий/мл). Нет достоверности диагноза.
От 20 – до 10 в 6 степени копий/мл – диагноз достоверный.
Более чем 10 в 6 степени копий/мл — большая ВН.

Лаборатории могут выполнять анализ ПЦР на ВИЧ в режиме Real-time. Это подразумевает наблюдение и численную оценку накапливания продуктов ПЦР при автоматической фиксации результатов.

источник