Меню Рубрики

Сухая химия для анализа мочи

Количественное определение показателей состава и свойств мочи методом «сухой химии» (принципы метода, аналитические характеристики)

Анализаторы мочи на тест-полосках давно уже стали надежными помощниками врача клинической лабораторной диагностики. Сегодня вряд ли можно найти лабораторию, не оснащенную приборами данного типа, которые позволяют в течение 1–2 минут провести одновременное исследование мочи по 10–13 показателям. Единственным недостатком этих приборов является полуколичественный результат анализа. Таким образом, в большом проценте случаев для уточнения результатов анализа приходится повторять исследование с использованием количественных методов. Сотрудники ООО «Эйлитон» задались вопросом: можно ли создать прибор, работающий по методу «сухой химии» и позволяющий при этом получать количественные результаты анализов. Задача оказалась решаемой. В настоящей статье приведены результаты исследования характеристик аналитической системы «анализатор мочи URiСКАН-strip (ООО «Эйлитон», Россия) + тест-полоски Uriscan 11 strip (YD Diagnostics, Ю. Корея)». На примере тестовой зоны «Белок» показано, что данная аналитическая система позволяет получать результаты, по точности соответствующие требованиям к количественным методам измерения концентрации белка в моче. Применение анализатора URiСКАН-strip в практике лабораторий позволит существенно повысить точность и воспроизводимость исследований мочи, сохранив при этом простоту и удобство работы, характерную для всех экспресс-анализаторов мочи.

Urine analyzers on test strips have long been reliable helpers of a clinical laboratory diagnosis doctor. Today, it is hardly possible to find a laboratory not equipped with such type of instruments, which allows conducing a simultaneous urine study for 10–13 indicators within 1–2 minutes. The only drawback of these devices is the semiquantitative result of the analysis. Thus, in a large percentage of cases, in order to refine the results of the analysis, it is necessary to repeat the study using quantitative methods. Employees of LLC Ailiton set and completed the task of creating a device that operates on the base of «dry chemistry» method and allows receiving quantitative results of analyzes. The research results on characteristics of the analytical system of urine analyzer URiСКАН-strip (Ailiton LLC, Russia) + Uriscan 11 strip test strips (YD Diagnostics, South Korea) are presented in this article. On the example of the test zone «Protein», it is shown that this analytical system allows to obtain results corresponding to the quantitative methods requirements of measuring protein concentration in urine. The use of the URiScan-strip analyzer in the practice of laboratories will significantly improve the accuracy and reproducibility of urine tests, while maintaining the simplicity and convenience of operation characteristic of all urine express analyzers.

В ведение Клинический анализ мочи включает в себя определение ряда показателей молекулярного состава и физико-химических свойств мочи, а также анализ мочевого осадка. К показателям первой группы относят концентрацию белка (альбумина), глюкозы, кетонов, нитритов, билирубина, уробилиногена, рН, удельного веса. Они определяются преимущественно методами «сухой химии». Анализ осадка мочи включает определение эритроцитов, лейкоцитов, клеток эпителия, различных видов цилиндров, органических и неорганических кристаллов и микроорганизмов. Как правило, он проводится методами микроскопии. В то же время для определения некоторых элементов мочевого осадка (эритроцитов и лейкоцитов) широко применяются и методы «сухой химии». В основе метода «сухой химии» лежат цветные реакции, приводящие к изменению окраски тестовой зоны полоски. В зависимости от химических свойств определяемого показателя это либо обычные химические, либо ферментативные реакции, а в ряде случаев определяется собственная ферментативная активность аналита [1]. Например, для определения концентрации гемоглобина (эритроцитов) используется химическая цветная реакция, основанная на пероксидазной активности гемоглобина. Лейкоциты выявляются в моче путем регистрации лейкоцитарной эстеразы. Изменение окраски тестовых зон определяется либо визуально: сравнивается окраска тестовой зоны с цветовой шкалой на пенале либо с помощью специализированного отражательного фотометра — анализатора мочи. Последний метод оценки реакции более предпочтителен, поскольку позволяет получить объективный результат анализа. Визуальная оценка реакций существенно зависит как от характера освещения в помещении, так и от особенностей цветовосприятия лаборанта. К тому же одновременное определение 10–13 показателей в большом количестве проб трудоемко. Применяемые в современных лабораториях анализаторы мочи на основе отражательных фотометров бывают двух типов. В первом типе приборов реализован метод оценки изменения цвета тестовых зон, аналогичный цветовому восприятию глаза человека. Тестовые зоны освещаются белым светом, содержащим все длины волн видимого диапазона спектра. Изменение окраски тестовой зоны в результате реакции с аналитами осуществляется сопоставлением сигналов от трех типов селективных фотоприемников в трех диапазонах длин волн: красном, зеленом и синем (RGB) (рис. 1). Точно так же устроено и цветовое зрение человека.

На этом принципе основана работа подавляющего большинства анализаторов мочи, в том числе и таких широко известных в нашей стране приборов, как URiSCAN-Optima, URiSCAN-Pro (производство YD Diagnostics, Ю. Корея), URiСКАН-про (производство ООО «Эйлитон», Россия). Во втором типе анализаторов применяется метод измерения коэффициента отражения тестовых зон на определенных длинах волн. Для каждой тестовой зоны подбирается оптимальная длина волны света, на которой изменение коэффициента отражения имеет наиболее выраженный характер зависимости от концентрации аналита в моче. В таких анализаторах тестовые зоны освещаются с помощью светодиодов, имеющих узкий спектр излучения, а отраженный сигнал регистрируется неселективным фотоприемником (рис. 2).

Данный принцип реализован в анализаторе мочи URiСКАН-strip (ООО «Эйлитон», Россия). Анализ мочи с использованием классических методов «сухой химии» выполняется на полуколичественном уровне. Полуколичественным результатом анализа является не конкретное число (с определенной погрешностью), а интервал значений, в котором находится измеряемая величина. В качестве примера интервалов значений для полуколичественных результатов определения концентрации белка в моче в табл. 1 приведены диапазоны концентраций для аналитической системы «анализатор мочи URiСКАН-про + тест-полоски Uriscan 11 strip» [5].

Полуколичественные методы анализа мочи вполне адекватно решают задачи скрининга [3, 6]. Однако они малопригодны для мониторинга течения заболевания, в том числе в ходе проводимого лечения, поскольку, как видно из табл. 1, даже 2–3-кратное изменение концентрации белка в процессе динамического наблюдения пациента при исследовании тест-полосками может быть не выявлено [3]. Поэтому для целей мониторинга течения заболевания и оценки эффективности лечения чрезвычайно актуальны повышение точности и обеспечение высокой воспроизводимости результатов анализа, которые позволят надежно оценить динамику патологического процесса.

Цель работы C целью решения задачи повышения точности и воспроизводимости исследований специалистами компании «Эйлитон» был сконструирован уникальный анализатор мочи URiСКАН-strip, позволяющий с использованием тест-полосок Uriscan 11 strip получать результаты анализа мочи, удовлетворяющие требованиям, которые предъявляются к количественным методам исследования. Для выявления и минимизации суммарной погрешности исследования был выполнен анализ погрешностей измерений с использованием аналитической системы: URiСКАН-strip + тест-полоски Uriscan 11 strip. При проведении данной работы необходимо было найти связь результатов измерений с концентрацией аналитов, а также количественно оценить погрешности на каждом этапе. Анализ погрешностей измерений анализатора мочи В аналитической системе: анализатор мочи URiСКАН-strip + тест-полоски Uriscan 11 strip (рис. 2) сигнал с фотоприемника U пропорционален интенсивности падающего на него отраженного света от аналитической зоны I1 , таким образом, U = FI1. В свою очередь, интенсивность отраженного света I1 пропорциональна интенсивности падающего на аналитическую зону света от светодиодов I0 и коэффициенту отражения: I1 = I (t) Котр (t, С). Коэффициент отражения изменяется со временем, что обусловлено протекающими в аналитической зоне реакциями, и зависит от концентрации аналита (С). В конечном итоге получаем так называемую измерительную функцию аналитической системы: U = FI (t)Котр(t, С). Вариации измеряемого сигнала δU связаны с вариациями компонентов аналитической системы следующим образом:

Здесь: δF — вариации коэффициента преобразования светового потока в электрический сигнал фотоприемника; δI — вариации интенсивности света от светодиодов; δКотр — вариации коэффициента отражения аналитических зон тест-полоски. Первые два параметра являются характеристиками анализатора, а последний характеризует качество тест-полосок. Для уменьшения вариаций (δF) и (δI ) в созданном специалистами ООО «Эйлитон» анализаторе URiСКАН-strip была применена специальная конструкция фотометрической ячейки, изображенная на рис. 2. Принцип работы отражательного фотометра анализатора мочи URiСКАН-strip заключается в следующем: падающий на тестовую зону свет (I ) от двух одинаковых светодиодов диффузно отражается (I1) и, пройдя через систему диафрагм, попадает на фотоприемник, сигнал от которого (U) регистрируется с помощью электронного блока анализатора. Использование пары светодиодов с одинаковой интенсивностью и спектром излучения для каждой тестовой зоны, а также системы диафрагм позволяет минимизировать влияние (δI ) и (δF). Таким образом, в погрешность измерения аналита основной вклад вносят вариации коэффициента отражения аналитических зон тест-полоски (δКотр).

1. Определение оптимальной длины волны светодиодов

Для выяснения наиболее оптимальной длины волны излучения светодиодов для тестовой зоны «Белок» были сняты спектры отражения тест-полосок во всем видимом диапазоне длин волн для разных концентраций аналита (рис. 3). Изменения коэффициента отражения аналитической зоны «Белок» обусловлены протекающей в этой зоне реакцией образования комплекса «белок — бромфеноловый синий». Из приведенных спектров видно, что при разных концентрациях белка в моче наиболее значительные изменения коэффициента отражения наблюдаются в диапазоне 600–630 нм. Поэтому в анализаторе URiСКАН-strip для аналитической зоны «Белок» применяются светодиоды с длиной волны из указанного спектрального диапазона, а именно 605 нм. В то же время при определении белка в моче с использованием методов «сухой химии» следует учитывать тот факт, что бромфеноловый синий высоко чувствителен к альбуминовой фракции и намного менее чувствителен к другим фракциям белка, что существенно ограничивает применение тест-полосок для диагностики протеинурии, обусловленной глобулиновыми фракциями, мукопротеинами, низкомолекулярными белками, а также протеинурии Бенс-Джонса [2, 3, 7].

2. Зависимость коэффициента отражения аналитической зоны «Белок» от концентрации белка

После определения рабочей длины волны излучения была построена калибровочная зависимость аналитического сигнала от различных концентраций белка.

Для этого были приготовлены аттестованные по альбумину образцы мочи с разными концентрациями и на анализаторе мочи URiСКАН-strip выполнены серии измерений для каждого значения концентрации. Как видно из рис. 4, полученная калибровочная кривая имеет нелинейный характер, что вполне характерно для отражательной фотометрии. Калибровочная зависимость Котр(С) записывается в память приборов URiСКАН-strip и используется для расчета результата измерения концентрации белка в исследуемых образцах мочи. На следующем этапе была оценена результирующая погрешность определения белка в моче с использованием анализатора URiСКАН-strip. На результирующую погрешность измерения влияют вариации фотометра и измерения.

3. Воспроизводимость измерений коэффициента отражения

Для исследований вариаций измерения коэффициента отражения фотометра были изготовлены специальные стандартные цветные тест-полоски, имитирующие по своим спектральным характеристикам реальные мочевые тест-полоски Uriscan 11 strip. Применение для исследования стандартных тест-полосок позволяет исключить химические вариации, связанные с качеством и количеством реагентов тестовой зоны полоски, объемом мочи, нанесенным на тестовую зону, интерферентами, содержащимися в образцах мочи, концентрацией аналита, временем инкубации, и оценить исключительно фотометрические вариации. Вариации коэффициентов отражения для 20 измерений в канале «Белок» представлены в табл. 2. Столь малые вариации измерения коэффициентов отражения на анализаторе URiСКАН-strip обусловлены вышеописанным алгоритмом измерения и специально разработанной конструкцией фотометра, которые позволили устранить вариации всей измерительной системы прибора: δF и δI .

4. Воспроизводимость в серии и правильность результатов измерений

Для исследования воспроизводимости в серии и правильности результатов измерений белка в моче были приготовлены стандартные образцы мочи с аттестованными концентрациями альбумина. Для этого были взяты несколько образцов мочи здоровых людей с концентрацией белка, близкой к нулю. Затем в объединенный пул мочи добавлялись строго заданные количества альбумина. Погрешность приготовления стандартных образцов не превышала 1%. Каждый стандартный образец мочи измеряли 20 раз и вычисляли средние значения SD и CV. Результаты измерений представлены в табл. 3. В верхней строке приведены аттестованные значения концентрации альбумина, строкой ниже — средние значения по 20 измерениям, в нижних строках приведены абсолютные и относительные отклонения средних значений от аттестованных. Из таблицы видно, что полученные относительные отклонения средних значений от референтных (В) не превышают 10,67%, что практически в два раза ниже требований приказа Минздрава РФ N45 от 7.02.2002 «О системе мер по повышению качества клинических лабораторных исследований в учреждениях здравоохранения Российской Федерации» по предельно допустимым значениям смещения (В) для серии из 20 измерений, а именно: ±В20 = 20% [4]. Таким образом, результаты, полученные с использованием аналитической системы: анализатор мочи URiСКАН-strip + тест-полоски Uriscan 11 strip полностью отвечают требованиям к правильности определения концентрации белка в моче количественными методами.

Общий CV%измерения белка = (CV%фотометра 2 + CV%измерения 2 )1/2 = (0,05 2 +15,63 2 ) 1/2 = 15,63%,

что заметно ниже предельно допустимого коэффициента общей аналитической вариации белка, рассчитанного по результатам 20 измерений для количественного анализа мочи согласно приказу Минздрава РФ N45 от 7.02.2000. В соответствии с данным приказом для белка в моче предельно допустимый СV20 составляет 25 % [4]. При этом видно, что сам фотометр вносит в аналитическую систему пренебрежимо малую погрешность. Если рассмотреть задачу обеспечения точности измерений белка в моче шире, то необходимо также учесть межлотовую вариацию тест-полосок и межприборную вариацию.

5. Межлотовые вариации концентрации белка для тестполосок Uriscan 11 strip

Вариация, обусловленная различиями характеристик тест-полосок разных лотов (серий), является важной характеристикой аналитической системы: анализатор мочи + тест-полоски. Эти отличия, как правило, обусловлены качеством и количеством реагентов, нанесенных на тестовую зону полоски, и являются интегральной характеристикой качества тест-полосок определенного бренда. В табл. 4 и на рис. 5 представлены данные по исследованию межлотовой вариации результатов измерений белка в моче с использованием аналитической системы: URiСКАН-strip + тест-полоски Uriscan 11 strip. Из приведенных данных видно, что значения межлотовой вариации близки значениям вариации в аналитической серии (внутрилотовой вариации) и не превышают 13,7%. Высокая сопоставимость результатов при определении белка в моче на анализаторе URiСКАНstrip с использованием тест-полосок Uriscan 11 strip различных лотов свидетельствует о стабильно высоком качестве тест-полосок Uriscan 11 strip.

6. Межприборная воспроизводимость результатов измерений

Поскольку калибровка прибора вводится в память каждого прибора при его производстве и не предполагает выполнения процедуры калибровки в лабораториях, важной характеристикой таких приборов является межприборная воспроизводимость. Для исследования этой характеристики были взяты 40 приборов, и на каждом из них было выполнено по одному измерению. Результаты представлены в табл. 5. Сравнивая показатели точности в табл. 3, 4 и 5, можно сделать вывод: межприборная вариация меньше по сравнению с вариацией в аналитической серии и сопоставима с межлотовой вариацией. Полученные результаты свидетельствуют о том, что при выполнении анализа мочи в разных лабораториях, оборудованных анализаторами URiСКАН-strip, будут получены сопоставимые результаты и пациенту при мониторинге патологического процесса в динамике не обязательно выполнять исследования мочи в одной и той же лаборатории. Итак, получив данные межлотовой и межприборной вариации, можно оценить суммарную погрешность определения белка в моче в диапазоне 0,1–10,0 г/л при самых крайних условиях:

Читайте также:  Микобактерии туберкулеза в анализе мочи

CV%измерения белка = (CV%фотометра 2 + CV%измерения 2 + CV%межлотовая 2 + CV%межприборная 2 ) 1/2 = (0,052 +15,63 +13,72 + 13,32) 1/2 = 24,7%

Таким образом, даже с учетом всех возможных видов вариаций, суммарная погрешность определения белка не превышает 25%!

Представленные в настоящей работе результаты показали, что аналитическая система: URiСКАН-strip + тест-полоски Uriscan 11 strip обладает следующими характеристиками:

  • вариации измерения коэффициентов отражения не превышают 0,05%, что является уникальной характеристикой для приборов данного класса, позволяющей обеспечить высокую точность исследования показателей мочи на анализаторе URiСКАН-strip;
  • относительные отклонения средних значений от референтных (В) не превышают –10,67 %, что полностью соответствует требованиям приказа Минздрава РФ от 07.02.2000 N 45 «О системе мер по повышению качества клинических лабораторных исследований в учреждениях здравоохранения Российской Федерации» к правильности определения концентрации белка в моче количественными методами;
  • коэффициент вариации в аналитической серии из 20 измерений в диапазоне концентраций белка в моче 0,1–10,0 г/л не превышает 15,63 % и всецело удовлетворяет требованиям приказа Минздрава РФ от 07.02.2000 N 45 к количественному анализу мочи;
  • значения межлотовой вариации близки к значениям вариации в аналитической серии (внутрилотовой вариации) и не превышают 13,7%, что свидетельствует о стабильном качестве тест-полосок Uriscan 11 strip;
  • межприборная вариация меньше по сравнению с вариацией в аналитической серии. Коэффициент вариации результатов определения концентрации белка на 40 приборах варьирует в диапазоне 9,9–13,3 %, что обеспечивает сопоставимость результатов исследования белка в моче в разных лабораториях региона, оснащенных анализаторами URiСКАН-strip. Столь высокие для методов «сухой химии» аналитические характеристики представленной системы были достигнуты благодаря применению российскими учеными уникальных конструкторских и программных решений при создании анализатора мочи URiСКАН-strip и использованию высококачественных тест-полосок Uriscan 11 strip.
  • Волкова И.А. Общий анализ мочи на современном этапе развития клинической лабораторной диагностики. // Лаборатория ЛПУ.— 2014.— Спецвыпуск № 5.— С. 59–63.
  • Иванова В. Н., Первушин Ю. В., Рогова С.Ш., Абасова Т.В. Трактовка результатов исследования мочи. // www.stgmu. ru/userfiles/depts/clinical_lab_diagnosis_ pe/Obschij_analiz_mochi.rtf.
  • Куриляк О.А., Шибанов А.Н. Анализ мочи в лаборатории современной поликлиники. // Поликлиника. Спецвыпуск № 12, 2018. «Лаборатория ЛПУ» С. 24–30.
  • Приказ МЗ РФ № 45 от 07.02.2000 // Управление качеством клинических лабораторных исследований. Нормативные документы. Москва.— Лабпресс, 2000, С. 5–57.
  • Руководство по эксплуатации анализатора мочи URiСКАН-про. Москва, 2017, С. 34.
  • Шибанов А.Н., Куриляк О.А. Лаборатория — клиницисту. Анализ мочи в современной клинике. // Медицинский алфавит.— 2017.— Том 3 (Больница — все для ЛПУ). № 33. С. 54–60.
  • Эмануэль В.Л. Лабораторные технологии оценки мочевого синдрома. // Нефрология.— 2007, Том 11, № 1.— С. 17–27.

А. Н. Шибанов, к. ф.‑м. н.; О. А. Куриляк, к. б. н.; А. В. Цыганова; П. А. Стариков; И. М. Елькина

источник

Общий анализ мочи — это совокупность различных диагностических тестов, направленных на определение общих свойств мочи, а также физико-химического и микроскопического ее исследования. При этом определяются такие показатели, как цвет, запах, прозрачность, реакция (рН), плотность, содержание в моче белка, глюкозы, кетоновых тел, билирубина и продуктов его метаболизма. В осадке мочи определяется наличие клеточных элементов, а также солей и цилиндров.

Клинический анализ мочи, ОАМ.

Метод «сухой химии» + микроскопия.

Клет./мкл (клетка на микролитр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Среднюю порцию утренней мочи, первую порцию утренней мочи, третью порцию утренней мочи.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Исключить прием мочегонных препаратов в течение 48 часов до сбора мочи (по согласованию с врачом).
  • Женщинам рекомендуется сдавать мочу до менструации или через 2-3 дня после ее окончания.

Общая информация об исследовании

Моча – конечный продукт работы почек, который является одним из основных компонентов обмена веществ и отражает состояние крови и метаболизма. Она содержит воду, продукты метаболизма, электролиты, микроэлементы, гормоны, слущенные клетки канальцев и слизистой мочевыводящих путей, лейкоциты, соли, слизь. Совокупность физических и химических параметров мочи, а также анализ содержания в ней различных продуктов метаболизма дает возможность оценить не только функцию почек и мочевыводящих путей, но и состояние некоторых обменных процессов, а также выявить нарушения в работе внутренних органов. Эту информацию помогает получить расшифровка общего анализа мочи.

Микроскопия осадка мочи – это качественное и количественное определение в моче ряда нерастворимых соединений (органических и неорганических). Доступные для изучения показатели позволяют получить дополнительную информацию, касающуюся обмена веществ, а также инфекционных и воспалительных процессов.

В основе метода «сухой химии» лежит эффект изменения окраски реакционной зоны тест-полоски в результате реакции красителя, присутствующего в реакционной зоне с молекулами белка мочи. Реакционная зона представляет собой пористую полоску, пропитанную раствором реагентов и высушенную. В состав реагентов входят вещества, обеспечивающие стабилизацию рН (буфер), и краситель. Когда реакционная зона пропитывается мочой, сухие компоненты растворяются и происходит реакция с компонентами мочи. Если в моче отсутствует белок, то реакционная зона остается бесцветной либо слегка желтоватой, поскольку молекулы красителя поглощают свет в синей области спектра. Если в пробе мочи, которой пропитывается реакционная зона, присутствуют молекулы белка, то молекулы красителя образуют комплексы с последними и их спектр поглощения сдвигается в красную сторону, что позволяет осуществить оценку реакции и составить отчет по анализируемым показателям.

Необходимо помнить, что результаты общего анализа мочи может правильно интерпретировать, оценить их соответствие нормам только лечащий врач с учетом клинических и лабораторных данных, данных объективного осмотра и заключений инструментальных исследований.

Для чего используется исследование?

  • Для комплексного обследования организма.
  • Для диагностики и дифференциальной диагностики заболеваний почек и мочевыводящих путей.
  • Для того чтобы оценить эффективность лечения заболеваний органов мочевыделения.
  • Для диагностики заболеваний обмена веществ, нарушений водно-электролитного баланса.
  • Для диагностики заболеваний желудочно-кишечного тракта.
  • Для диагностики инфекционных и воспалительных заболеваний.
  • Для оценки и мониторинга клинического состояния пациента в период хирургического и/или терапевтического лечения.

Когда назначается исследование?

  • При комплексном обследовании и мониторинге пациентов различного профиля.
  • При профилактическом обследовании.
  • При симптомах заболевания мочевыделительной системы (изменение цвета и запаха мочи, частое или редкое мочеиспускание, увеличение или уменьшение суточного объема мочи, боли в нижней части живота, боли в поясничной области, повышение температуры, отеки).
  • Во время и после курса лечения патологии почек и мочевыводящих путей.
  • На фоне приема нефротоксичных лекарственных препаратов.

Расшифровка общего анализа мочи:

Референсные значения (показатели нормы)

Цвет: от соломенно-желтого до желтого.

Белок: не обнаружено или менее 0,1 г/л.

Уробилиноген: не обнаружено или следы.

Кетоновые тела: не обнаружено.

Реакция на кровь: не обнаружено.

Лейкоциты: не обнаружено или следы.

  • Бактерии: не обнаружены или небольшое количество.
  • Эпителий плоский

Референсные значения

Референсные значения

  • Эритроциты: 0 — 11 клет./мкл.
  • Цилиндры: не обнаружено.
  • Слизь: небольшое количество.
  • Кристаллы (оксалаты): отсутствуют.

Цвет мочи в норме колеблется от соломенного до насыщенного желтого. Он определяется присутствием в ней красящих веществ – урохромов, от концентрации которых в основном и зависит интенсивность окраски. Насыщенный желтый цвет обычно указывает на относительную высокую плотность и концентрированность мочи. Бесцветная или бледная моча имеет низкую плотность и выделяется в большом количестве.

Изменение окраски мочи иногда связано с рядом патологических состояний. Темный цвет может свидетельствовать о присутствии билирубина или высокой концентрации уробилиногена. Различные оттенки красного могут появляться при выделении крови с мочой. Некоторые лекарственные средства и пищевые продукты тоже придают моче различные оттенки красного и желтого. Белесый цвет мочи может быть обусловлен примесью гноя, выпадением в осадок солей, присутствием лейкоцитов, клеток и слизи. Сине-зеленые оттенки мочи могут быть следствием усиления процессов гниения в кишечнике, что сопровождается образованием, всасыванием в кровь и выделением специфических красящих веществ.

Кислотно-щелочная реакция (рН), как и некоторые другие показатели общего анализа мочи, зависит от пищи и некоторых метаболических процессов. Животная пища вызывает закисление мочи (рН менее 5), молочно-растительная – способствует ее защелачиванию (рН более 7). Почки тоже могут влиять на кислотность мочи.

Кроме того, к закислению мочи приводит нарушение солевого баланса крови (гипокалиемия) и некоторые заболевания (сахарный диабет, подагра, лихорадки и др.).

Чрезмерная щелочная реакция мочи может возникать при воспалительных/инфекционных заболеваниях почек и мочевыводящих путей, массивной потере солей (из-за рвоты, поноса), нарушении почечной регуляции кислотности мочи или примеси крови в ней.

Удельный вес мочи (относительная плотность) отражает способность почек к концентрированию и разведению мочи. Он существенно зависит от объема потребляемой жидкости.

Удельный вес мочи превышает норму, например, при ухудшении фильтрации крови через почки (заболевания почек, ослабление работы сердца), больших потерях жидкости (понос, рвота) и накоплении в моче растворимых примесей (глюкозы, белка, лекарств, а также их метаболитов). Снижаться он может из-за некоторых заболеваний почек и нарушений гормональной регуляции процесса концентрации мочи.

В норме моча должна быть прозрачной. Мутнеть она может из-за примеси эритроцитов, лейкоцитов, клеток эпителия мочевыводящих путей, жировых капель, кислотности и выпадения в осадок солей (уратов, фосфатов, оксалатов). При длительном хранении моча иногда становится мутной в результате размножения бактерий. В норме небольшая мутность обусловлена присутствием эпителия и слизи.

Цвет мочи в норме колеблется от соломенного до насыщенного желтого и зависит от содержания урохромов. Насыщенный желтый цвет обычно указывает на относительно высокую плотность и концентрированность мочи. Бесцветная или бледная моча имеет низкую плотность и выделяется в большом количестве. Темный цвет может свидетельствовать о присутствии билирубина или высокой концентрации уробилиногена. Различные оттенки красного появляются при выделении крови с мочой. Некоторые лекарственные средства и пищевые продукты тоже придают моче различные оттенки красного и желтого. Белесый цвет мочи бывает обусловлен примесью гноя, выпадением в осадок солей, присутствием лейкоцитов, клеток и слизи. Сине-зеленые оттенки бывают следствием усиления процессов гниения в кишечнике, что сопровождается образованием специфических красящих веществ, их всасыванием в кровь и выделением.

  • Нарушение фильтрационного барьера – потеря альбуминов (гломерулонефрит, нефротический синдром, амилоидоз, злокачественная гипертензия, люпус-нефрит, сахарный диабет, поликистоз почек)
  • Уменьшение реабсорбции – потеря глобулинов (острый интерстициальный нефрит, острый почечный некроз, синдром Фанкони)
  • Увеличение продукции способных к фильтрации белков (множественная миелома, миоглобинурия)
  • Изолированная протеинурия без нарушения функции почек (на фоне лихорадки, физических упражнений, длительного пребывания в вертикальном положении, застойной сердечной недостаточности или идиопатических причин)

Билирубин появляется в моче при патологии печени, нарушении проходимости желчевыводящих путей.

Уробилиноген окрашивает мочу в желтый цвет.

  • гемолитические анемии,
  • энтериты,
  • нарушение функции печени.
  • снижение печеночной функции (уменьшение продукции желчи),
  • механическая желтуха,
  • кишечный дисбиоз.

Причины повышения: присутствие бактерий в моче.

  • Сахарный диабет, гестационный диабет
  • Другие эндокринные нарушения (тиреотоксикоз, синдром Кушинга, акромегалия)
  • Нарушение канальцевой реабсорбции в почках (синдром Фанкони)

Кетоновые тела в норме отсутствуют в моче. Повышаются при сахарном диабете и указывают на ухудшение состояния больного. Могут появляться в моче при голодании, резком ограничении употребления углеводов, продолжительных подъемах температуры (лихорадке).

Реакция на кровь. В норме моча не содержит кровь или продукты ее распада (гемоглобин). Форменные элементы крови (эритроциты, лейкоциты и др.) могут попадать в нее из сосудистого русла через почечный фильтр (например, при заболеваниях крови или токсических состояниях, сопровождающихся гемолизом) и при фильтрации эритроцитов из крови (при заболевании почек или при кровотечениях из органов мочевыделения).

Плоский эпителий в норме встречается в виде единичных клеток. Увеличение их числа указывает на воспалительный процесс мочевыводящих путей.

Эритроциты в норме присутствуют в моче в незначительном количестве.

  • Подострый инфекционный эндокардит
  • Застойная сердечная недостаточность
  • Доброкачественная семейная гематурия, доброкачественная рецидивирующая гематурия
  • Туберкулез почки
  • Травма, повреждение уретры мочевым катетером
  • Тромбоз вен почки
  • Васкулиты
  • Инфаркт почки
  • Поликистоз почек
  • Инфекция (цистит, уретрит, простатит)
  • Новообразования (рак почек, рак простаты, рак мочевого пузыря)
  • Мочекаменная болезнь, или кристаллурия
  • Системная красная волчанка, люпус-нефрит
  • Гломерулонефрит

Лейкоциты в моче здорового человека встречаются в незначительном количестве.

  • Лихорадка
  • Туберкулез почки
  • Гломерулонефрит
  • Интерстициальный нефрит, пиелонефрит
  • Инфекция мочевыделительного тракта

Цилиндры (указывают на нарушения функции клубочка и канальцев). Высокочувствительный метод, применяемый при общем анализе мочи, может выявить минимальное количество цилиндров в моче здорового человека.

Причины появления появления цилиндров в моче:

  • Инфаркт почки
  • Гломерулонефрит
  • Нефротический синдром и протеинурия
  • Тубуло-интерстициальный нефрит, пиелонефрит
  • Хроническая почечная недостаточность
  • Застойная сердечная недостаточность
  • Диабетическая нефропатия
  • Злокачественная гипертензия
  • Лихорадка с обезвоживанием, перегрев
  • Интенсивные физические нагрузки, эмоциональный стресс
  • Отравление тяжелыми металлами
  • Амилоидоз почек
  • Туберкулез почки
  • Отторжение трансплантата почки
  • Липоидный нефроз
  • Парапротеинурия при миеломной болезни

Слизь выделяется клетками, выстилающими внутреннюю поверхность мочевыводящих путей, и выполняет защитную функцию, предотвращая химическое или механическое повреждение эпителия. В норме ее концентрация в моче незначительная, однако при воспалительных процессах она повышается.

Кристаллы появляются в зависимости от коллоидного состава мочи, рН и других свойств, могут указывать на нарушения минерального обмена, наличие камней или повышенный риск развития мочекаменной болезни, нефролитиаза.

Бактерии указывают на бактериальную инфекцию мочевыделительного тракта.

Что может влиять на результат?

Несоблюдение правил сдачи материала (например, невыполнение гигиенических процедур, сдача анализа в период менструации).

  • Парентеральное введение солевых растворов, растворов глюкозы, контрастных веществ незадолго до исследования.
  • Травма уретры мочевым катетером.
  • 

    Кто назначает исследование?

    Врач общей практики, терапевт, педиатр, уролог, нефролог, гастроэнтеролог, кардиолог, невропатолог, хирург, акушер-гинеколог, эндокринолог, инфекционист.

    источник

    А.Н. Шибанов, к.ф.-м.н., Генеральный секретарь РАМЛД

    Определение концентрации белка в моче является одним из наиболее часто выполняемых видов исследований в клинических лабораториях. Ежедневно в каждой лаборатории исследуется от нескольких десятков до нескольких сотен проб мочи.

    Проблема разработки корректных методов определения концентрации белка в моче имеет длительную историю. Сложность проблемы состоит в том, что метод должен иметь большой диапазон определения концентрации белка: от сотых долей грамма на литр до нескольких грамм на литр. В тоже время, учитывая массовый характер данного исследования, он должен быть простым по технологии и дешевым.

    Все многообразие применяемых сегодня в различных лабораториях методов определения концентрации белка в моче можно разделить на три группы:

    • турбидиметрические методы,
    • метод сухой химии,
    • фотометрические методы.

    Турбидиметрические методы основаны на изменении светопропускания реакционной смесью вследствие мутности раствора белка в присутствии сульфосалициловой или других кислот. В настоящее время в российских лабораториях наиболее часто применяются три модификации метода:

    • метод Брандберга-Робертса-Стольникова (азотная кислота) – полуколичественный;
    • метод сульфосалициловой кислоты – количественный;
    • метод трихлоруксусной кислоты – количественный.
    Читайте также:  Межпозвоночная грыжа и анализы мочи

    В сыворотке крови или водном растворе с рН>7 молекулы белка имеют компактную глобулярную форму с размерами значительно меньше длины волны видимого света и практически его не рассеивают (рис. 1). Такой раствор даже при больших концентрациях белка прозрачный. В кислой среде молекулы белка денатурируют и объединяются в крупные конгломераты (реакция преципитации), размеры которых сопоставимы или больше длины волны, на которой производиться фотометрирование реакционной смеси. В результате реакции преципитации реакционная смесь становится мутной.

    Визуальное наблюдение появления мутности при смешивании пробы мочи с раствором сульфосалициловой кислоты или наблюдение появления кольца мутности при наслаивании пробы мочи на азотную кислоту позволяет определять присутствие белка в моче на качественном уровне. Количественно определение концентрации белка в моче осуществляется путем фотометрирования реакционной смеси. В этом случае используется зависимость изменения пропускания света от характера мутности раствора. Чем больше образуется частиц преципитата, тем больше рассеяние света и тем меньше его пройдет через оптическую кювету фотометра.

    Рис. 1. Процесс денатурации белков и реакция преципитации в кислой среде

    Основными недостатками турбидиметрических методов являются:

    • Большая вероятность ложноотрицательных результатов. На реакцию денатурации и последующей преципитации белков сильное влияние оказывает состав мочи: рН, концентрация солей. Для некоторых проб мочи мутность может не образовываться даже при присутствии в ней белка с концентраций более 1 г/л.
    • Величина изменения светопропускания имеет нелинейную зависимость от концентрации белка в пробе мочи. Требуется выполнение многоточечной калибровки.
    • Помимо белков мутность могут образовывать некоторые лекарственные вещества, выводимые с мочой, что приводит к ложноположительным результатам анализа.
    • Размеры преципитатов могут зависеть от характера перемешивания пробы, что приводит к низкой воспроизводимости результатов анализов.
    • При больших концентрациях белка в моче преципитаты могут выпадать в осадок крупными хлопьями.

    Из-за вышеперечисленных недостатков турбидиметрический метод определения белка в моче в лабораториях развитых стран сегодня практически не применяется.

    В основе метода лежит эффект изменения окраски реакционной зоны тест-полоски в результате реакции красителя, присутствующего в реакционной зоне с молекулами белка мочи (рис. 2 и 3). Реакционная зона представляет собой пористую полоску, пропитанную раствором реагентов и высушенную. В состав реагентов входят вещества, обеспечивающие стабилизацию рН (буфер) и краситель тетрабромфеноловый синий. Когда реакционная зона пропитывается мочой, сухие компоненты растворяются, и происходит реакция с компонентами мочи. Если в моче отсутствует белок, то реакционная зона остается бесцветной, либо слегка желтоватой, поскольку молекулы красителя поглощают свет в синей области спектра. Если в пробе мочи, которой пропитывается реакционная зона, присутствуют молекулы белка, то молекулы красителя образуют комплексы с последними, и их спектр поглощения сдвигается в красную сторону. На рис. 3 видно, что в присутствии белка в образце отражение реакционной зоны резко уменьшается в области 620 нм. Визуально реакционная зона приобретает зеленый цвет.

    Рис. 2. Принцип метода сухой химии с отражательной фотометрией

    Рис. 3. Спектр отражения реакционной зоны тест-полоски Урискан в зависимости от концентрации альбумина в растворе

    Оценку реакции осуществляют либо с помощью анализатора мочи (отражательного фотометра, регистрирующего изменение коэффициента отражения света на определенных длинах волн), либо визуально, соотнося изменение окраски реакционной зоны с цветовой шкалой, размещаемой обычно прямо на пенале с тест-полосками. Простота метода сделала его исключительно популярным во всем мире. Сегодня большое число фирм производят диагностические тест-полоски как для определения белка в моче, так и для ряда других показателей мочи. Одно из наиболее важных достоинств диагностических тест-полосок состоит в том, что за одну минуту можно определить до 11 показателей состава и свойств мочи.

    Метод «сухой химии» является полуколичественным из-за довольно большой погрешности определения концентрации белка в моче. Поскольку реакция протекает в неразведенной моче, которой пропитывается реакционная зона тест-полоски, влияние интерферентов, содержащихся в моче, максимально. Визуальная оценка реакции привносит дополнительную ошибку из-за субъективного восприятия изменения цвета полоски. Но даже при использовании анализатора мочи – отражательного фотометра, результат измерения остается полуколичественным. При выполнении исследования с помощью тест-полосок следует также учитывать, что окраска реакционной зоны не стабильна. Это может быть обусловлено постепенным высыханием реакционной зоны и, соответственно, изменением концентрации реагентов. Поэтому регистрация реакции должна проводиться в строго заданный промежуток времени. Обычно стандартное время оценки реакции для тест-полосок примерно 60 секунд после смачивания.

    Другой важной особенностью, которую следует учитывать при применении тест-полосок для определения белка в моче, является неодинаковая чувствительность метода к разным типам белков. На рис. 4 приведены зависимости коэффициента отражения тестовой зоны на белок от концентрации альбумина (кривая 1) и глобулина (кривая 2).

    Рис. 4. Зависимость коэффициента отражения света реакционной зоной для разных концентраций альбумина (1) и глобулина (2).

    Если в случае раствора альбумина надежно регистрируется изменение окраски тестовой зоны при концентрации 0,1 г/л, то в случае раствора глобулина окраска не изменяется даже при концентрации 1 г/л. Этот эффект обусловлен различной способностью бромфенолового синего образовывать комплексы белок-краситель с разными типами белков. Об этом обстоятельстве лаборатория должна информировать лечащих врачей, которым передаются результаты исследований проб мочи на белок.

    Фотометрический метод определения концентрации различных соединений в сыворотке хорошо известен и широко применяется в клинической биохимии. Фотометрический метод определения белка в моче относится к этому же классу. Суть метода состоит в том, что в результате взаимодействия молекулы красителя с молекулой белка в образовавшемся комплексе длинноволновая полоса поглощения молекулы красителя смещается в красную сторону на 50 – 100 нм. В результате чего появляется заметное поглощение света в той области спектра, где свободные молекулы красителя поглощают слабо (рис. 5.). При низких концентрациях белка в моче количество молекул, образовавших комплекс белок-краситель пропорционально концентрации молекул белка. К группе фотометрических методов относится метод Бредфорд, предложенный в 1976 г., в котором используется раствор красителя кумасси G-250. В 1986 г. N. Watanabe описал метод, основанный на применении комплекса красителя пирогаллоловый красный и молибдата натрия (ПГК). Спектры поглощения пирогаллолового реактива и реакции в присутствии белка показаны на рис. 5. Как видно из приведенных спектров, раствор красителя пирогаллоловый красный Юни-Тест-БМ имеет максимум поглощения в области 470 нм. При увеличении длины волны света поглощение плавно уменьшается так, что на длине волны 600 нм оно в 7 раз меньше, чем в максимуме полосы поглощения.

    Если в пробе присутствуют молекулы белка, то они образуют комплекс с молекулами красителя и спектр поглощения последних сдвигается в область 600 нм, что мы и наблюдаем на рис. 5. Чем больше концентрация молекул белка, тем больше увеличение оптической плотности реакции на длине волны 600 нм. Поскольку реактив имеет заметное поглощение на длине волны 600 нм, то, очевидно, что в качестве холостой пробы следует брать реактив.

    Рис. 5. Спектры поглощения реагента Юни-Тест-БМ (набор для определения белка в моче на основе красителя пирогаллоловый красный) при добавлении в него 20 мкл дистиллированной воды (1) и 20 мкл раствора альбумина 0,6 г/л (2).

    Рис. 6. Зависимость оптической плотности реакции (600 нм) от соотношения содержания альбумина и глобулина в пробе при суммарной постоянной концентрации 1 г/л. Пунктирная линия – реагент Юни-Тест-БМ, сплошная линия – реагент зарубежной компании.

    Спектр поглощения комплекса краситель–молибдат натрия–белок имеет резкий спад в сторону увеличения длины волны. Это позволяет использовать бихроматический метод фотометрирования: основная длина волны — 600 нм, вспомогательная — 650 – 680 нм. В этом случае устраняются все ахроматические интерференты: мутность реакции, царапины на фотометрической кювете. Бихроматический метод фотометрирования позволяет проводить измерение в круглых пробирках.

    Большая эффективность поглощения света комплексами молекул красителя с белком позволяет проводить реакцию при довольно большом разведении пробы мочи реагентом и при этом иметь высокую чувствительность. Так, например, при использовании реагента «ЮНИ-ТЕСТ-БМ», при соотношении объемов мочи и реагента 100 мкл: 1 мл чувствительность метода составляет 0,01 г/л белка в моче. Большая степень разведения пробы мочи и буферные свойства реагента практически полностью устраняют влияние состава мочи на результат измерения концентрации белка.

    Исследования взаимодействия красителя пирогаллоловый красный с альбумином и глобулином показали, что в отличие от бромфенолового синего ПГК имеет примерно одинаковое сродство к этим типам белков. В силу этого, результат измерения концентрации белков в моче методом ПГК слабо зависит от качественного состава белков в пробе мочи (рис. 6). Более того, в реагенте Юни-Тест-БМ удалось создать такие условия, когда эта зависимость полностью отсутствует.

    Материал, представленный в настоящей статье, а также в целом ряде публикаций, которые появились за последние несколько лет, убедительно доказывает, что:

    • Турбидиметрические методы, основанные на реакции преципитации молекул белков в кислой среде, обладают очень плохими аналитическими характеристиками и из практики лабораторной службы должны быть исключены.
    • При определении белка в моче методами «сухой химии» следует иметь в виду и информировать об этом клиницистов, что этим методом определяется преимущественно альбумин.
    • Наилучшие результаты для диагностики протеинурии дает метод, основанный на применении растворов красителя пирогаллоловый красный (ПГК).

    Поскольку в большинстве лабораторий определение концентрации белка в моче выполняется в больших количествах, очень важным является рациональная организация аналитического процесса. В отношении этого можно дать несколько рекомендаций, которые помогут руководителю лаборатории наилучшим образом обеспечить выполнение этого анализа.

    При выборе конкретной реализации метода следует отдавать предпочтение бихроматическому методу с фотометрированием в пробирках, как это реализовано в приборе Микролаб 600. Фотометрирование проводится непосредственно в реакционных пробирках, т.о. исключается процедура переливания реакционной смеси в фотометрическую кювету, что повышает производительность работы лаборанта.

    Необходимо следить за чистотой фотометрических пробирок (фотометрической кюветы). Даже небольшой налет белка на внутренней поверхности пробирки может дать ложноположительный результат. Поэтому, сразу после проведения фотометрирования реакционную смесь следует слить, а пробирку замочить в растворе моющего средства (детергента). Нельзя допускать высыхания следов реагента в фотометрических пробирках.

    При дозировании проб мочи категорически запрещается пользоваться одним и тем же наконечником. Эффект переноса после дозирования мочи с высоким содержанием белка может служить причиной ложноположительных результатов для последующих проб.

    Ряд фирм, выпускающих набор реагентов для определения белка в моче, в описании метода применения дают два режима, которые отличаются разным соотношением объема пробы мочи и реагента. Так для Юни-Тест-БМ это режимы со следующими соотношениями моча/реагент: 1) 100 мкл мочи на 1 мл реагента и 2) 20 мкл мочи на 1 мл реагента. Выбор режима зависит от обследуемого контингента пациентов. Если проводится скрининг на протеинурию (преобладают нулевые и низкие уровни протеинурии), то сначала все пробы мочи анализируются в режиме 100 мкл мочи на 1 мл реагента. Такой подход гарантирует, что не будут пропущены случаи относительно низкие уровни протеинурии. При выявлении положительного результата, измерение следует повторить в режиме 20 мкл мочи на 1 мл реагента.

    Если в общей массе исследуемых проб мочи преобладают патологические пробы (например, отделение нефрологии), то начинать надо с режима для высоких концентраций белка (20 мкл мочи на 1 мл реагента). А для того небольшого количества проб, для которых будет получен результат близкий к нулевой концентрации, измерение повторить в режиме 100 мкл мочи на 1 мл реагента. Это позволит для каждой пробы мочи получить максимально точное значение концентрации белка и сэкономит время лаборанта.

    Применение современного метода, современных приборов и рациональная организация работы лаборанта позволят вашей лаборатории выполнять определение концентрации белка в моче с высокой точность, высокой производительностью и обеспечить ваших врачей надежной диагностической информацией.

    источник

    Материал: утренняя порция мочи

    Метод исследования: cухая химия

    Является частью общего анализа мочи, обычно выполняется в комплексе с 61203 Исследование мочевого осадка.

    Подготовка: прием контейнеров с мочой для анализа проводит фельдшер-лаборант в кабинете лаборатории, указанном в талоне. Накануне сдачи анализа исключить прием диуретиков, не употреблять овощи и фрукты, изменяющие окраску мочи (свекла, морковь и др.). Не рекомендуется сдавать анализ во время менструации. Перед сбором мочи произвести тщательный гигиенический туалет половых органов. При первом утреннем мочеиспускании необходимо выпустить в унитаз небольшой объем мочи. Затем, не прерывая мочеиспускания, собрать приблизительно 50 мл мочи в специальный контейнер. После сбора следует плотно закрыть контейнер завинчивающейся крышкой и доставить в лабораторию.

    Описание: определение параметров мочи с помощью тест-полосок на автоматическом анализаторе (цвет, прозрачность, удельный вес, рН, белок, глюкоза, билирубин, уробилиноген, кетоновые тела, нитриты, гемоглобин)

    Исследование мочи методом сухой химии включает оценку физико-химических характеристик мочи без микроскопического исследования осадка. Больным с заболеваниями почек и мочевыделительной системы исследование выполняют в динамике для оценки состояния и контроля терапии. Лицам, перенёсшим стрептококковую инфекцию (ангина, скарлатина) рекомендуется сдать анализ мочи через 1 — 2 недели после выздоровления. В профилактических целях рекомендуется выполнять анализ 1 — 2 раза в год.

    Цвет мочи обусловлен наличием в моче пигмента урохрома. В зависимости от степени насыщения пигмента моча принимает жёлтую окраску различных оттенков. Иногда может изменяться только цвет осадка: например, при избытке уратов осадок имеет коричневатый цвет, мочевой кислоты — жёлтый, фосфатов — белесоватый.

    Прозрачность мочи – помутнение может быть результатом наличия в моче форменных элементов крови, бактерий, жировых капель, солей, зависит от рН и температуры хранения мочи. При длительном хранении моча может стать мутной в результате размножения бактерий. В норме небольшая мутность может быть обусловлена эпителием и слизью.

    Относительная плотность (удельный вес) мочи зависит от количества выделенных органических соединений (мочевины, мочевой кислоты, солей) и электролитов — Cl, Na и К. На плотность оказывает влияние количество выделяемой мочи. Чем выше диурез, тем меньше относительная плотность мочи. Наличие белка и глюкозы вызывает повышение удельного веса мочи. Снижение концентрационной функции почек при почечной недостаточности приводит к снижению удельного веса (гипостенурия). Полная потеря концентрационной функции приводит к выравниванию осмотического давления плазмы и мочи, это состояние называется изостенурией.

    pH мочи — свежая моча здоровых людей может иметь реакцию рН от 4,5 до 8,0, обычно реакция мочи слабокислая (рН от 5,0 до 6,0). Колебания рН мочи зависит от состава питания. Изменения рН мочи отражают кислотно-основное состояние крови.

    Белок в моче — один из наиболее важных лабораторных показателей функции почек. У здоровых людей может выявляться небольшое количество белка в моче (физиологическая протеинурия), не превышая 0,080 г/сут в покое и 0,250 г/сут при интенсивных физических нагрузках (маршевая протеинурия). Белок в моче может обнаруживаться при стрессе, переохлаждении. Протеинурия (появление в моче белка в повышенном количестве) может быть преренальной (связанной с усиленным распадом тканей или появлением в плазме патологических белков), ренальной (обусловленной патологией почек) и постренальной (связанной с патологией мочевыводящих путей). Появление в моче белка является частым неспецифическим симптомом патологии почек. При ренальной протеинурии белок обнаруживается как в дневной, так и ночной моче. По механизмам возникновения ренальной протеинурии различают клубочковую и канальцевую протеинурию. Клубочковая протеинурия связана с патологическим изменением барьерной функции мембран почечных клубочков. Массивная потеря белка с мочой (> 3 г/л) всегда связана с клубочковой протеинурией. Канальцевая протеинурия обусловлена нарушением реабсорбции белка при патологии проксимальных канальцев.

    Читайте также:  Микробиологический анализ мочи что показывает

    Глюкоза в моче в норме отсутствует или обнаруживается в минимальных количествах (до 0,8 ммоль/л). После фильтрации через мембрану почечных клубочков глюкоза полностью реабсорбируется. Появление глюкозы в моче (глюкозурия) возникает при повышении концентрации глюкозы в крови более 10 ммоль/л, т.е. превышении почечного порога — максимальной способности почек к обратному всасыванию глюкозы. Снижение почечного порога (например, вследствие поражения почечных канальцев) также сопровождается глюкозурией. Исследование уровня глюкозы в моче имеет большое значение при диагностике сахарного диабета, а также мониторинге (самоконтроля) антидиабетической терапии.

    Билирубин — основной конечный метаболит порфиринов, выделяемый из организма. Моча здоровых людей содержит минимальные, неопределяемые количества билирубина. Билирубинурия наблюдается главным образом при поражении паренхимы печени или механическом затруднении оттока желчи. При гемолитической желтухе реакция мочи на билирубин бывает отрицательной.

    Уробилиноген в моче. Уробилиноген и стеркобилиноген образуются в кишечнике из выделившегося с желчью билирубина. В норме в моче здорового человека уробилиноген определяется в следовых количествах — выделение его с мочой за сутки не превышает 10 мкмоль (6 мг). При стоянии мочи уробилиноген переходит в уробилин.

    Кетоновые тела в моче. Кетоновые тела (ацетон, ацетоуксусная и бета-оксимасляная кислоты) образуются в результате усиленного катаболизма жирных кислот. Определение кетоновых тел важно в распознавании метаболической декомпенсации при сахарном диабете.

    Нитриты в нормальной моче отсутствуют. Обнаружение нитритов в моче свидетельствует о наличии инфекции мочевого тракта.

    Гемоглобин в нормальной моче отсутствует. Положительный результат теста отражает присутствие свободного гемоглобина или миоглобина в моче (гемолитическая анемия, тяжелые отравления).

    Показания для проведения исследования:

    заболевания мочевыделительной системы

    оценка течения заболевания, контроль развития осложнений и эффективности проводимого лечения

    источник

    Моча – продукт обмена веществ, образующийся в почках в результате фильтрации жидкой части крови, а также процессов реабсорбции и секреции разных аналитов. Состоит на 96% из воды, остальные 4% приходятся на растворенные в ней азотистые продукты обмена белков (мочевина, мочевая кислота, креатинин и др.), минеральные соли и др. вещества.

    Общий анализ мочи у детей и взрослых включает оценку физико-химических характеристик мочи и микроскопию осадка. Данное исследование позволяет оценить функцию почек и других внутренних органов, а также выявить воспалительный процесс в мочевых путях

    Физико-химические исследования мочи включают оценку следующих показателей:

    • цвет;
    • прозрачность мочи;
    • удельный вес (относительная плотность);
    • рН;
    • концентрация белка;
    • концентрация глюкозы;
    • концентрация билирубина;
    • концентрация уробилиногена;
    • концентрация кетоновых тел;
    • концентрация нитритов;
    • концентрация гемоглобина.

    Микроскопия мочевого осадка включает оценку следующих объектов:

    • Организованный осадок мочи:
      • присутствие эритроцитов;
      • лейкоцитов;
      • эпителиальных клеток;
      • цилиндров;
      • бактерии;
      • дрожжевых грибов;
      • паразиты;
      • опухолевые клетки;
    • Неорганизованный осадок мочи (кристаллы и аморфные соли).

    Оценка физических свойств мочи, таких как запах, цвет, мутность, проводится органолептическим методом. Удельный вес мочи измеряется при помощи урометра, рефрактометра или оценивается методами «сухой химии» (тест-полоски) – визуально или на автоматических анализаторах мочи.

    У взрослого человека моча желтого цвета. Оттенок ее может колебаться от светлого (почти бесцветного) до янтарного. Насыщенность желтого цвета мочи зависит от концентрации растворенных в ней веществ. При полиурии моча имеет более светлую окраску, при уменьшении диуреза приобретает насыщенно-желтый оттенок. Окраска меняется при приеме лекарственных препаратов (салицилаты и др.) или употреблении некоторых пищевых продуктов (свекла, черника).

    Патологически измененная окраска мочи бывает при:

    • гематурии – вид «мясных помоев»;
    • билирубинемии (цвет пива);
    • гемоглобинурии или миоглобинурии (черный цвет);
    • лейкоцитурии (молочно-белый цвет).

    В норме свежесобранная моча совершенно прозрачна. Мутность мочи обусловлена наличием в ней большого количества клеточных образований, солей, слизи, бактерий, жира.

    В норме запах мочи нерезкий. При разложении мочи бактериями на воздухе или внутри мочевого пузыря, например в случае цистита, появляется аммиачный запах. В результате гниения мочи, содержащей белок, кровь или гной, например при раке мочевого пузыря, моча приобретает запах тухлого мяса. При наличии в моче кетоновых тел моча имеет фруктовый запах, напоминающий запах гниющих яблок.

    Почки выделяют из организма «ненужные» и задерживают необходимые вещества для обеспечения обмена воды, электролитов, глюкозы, аминокислот и поддержания кислотно-основного баланса. Реакция мочи – рН – в значительной мере определяет эффективность и особенность этих механизмов. В норме реакция мочи слабокислая (рН 5,0–7,0). Она зависит от многих факторов: возраста, диеты, температуры тела, физической нагрузки, состояния почек и др. Наиболее низкие значения рН – утром натощак, наиболее высокие – после еды. При употреблении преимущественно мясной пищи – реакция более кислая, при употреблении растительной – щелочная. При длительном стоянии моча разлагается, выделяется аммиак и рН сдвигается в щелочную сторону.

    Щелочная реакция мочи характерна для хронической инфекции мочевыводящих путей, также отмечается при поносе и рвоте.

    Кислотность мочи увеличивается при лихорадочных состояниях, сахарном диабете, туберкулезе почек или мочевого пузыря, почечной недостаточности.

    Удельный вес (относительная плотность) мочи

    Относительная плотность отражает функциональную способность почек концентрировать и разводить мочу. Для нормально функционирующих почек характерны широкие колебания удельного веса мочи в течение суток, что связано с периодическим приемом пищи, воды и потерей жидкости организмом. Почки в различных условиях могут выделять мочу с относительной плотностью от 1,001 до 1,040 г/мл.

    • гипостенурию (колебания удельного веса мочи менее 1,010 г/мл);
    • изостенурию (появление монотонного характера удельного веса мочи соответствующее таковому первичной мочи (1,010 г/мл);
    • гиперстенурию (высокие значения удельного веса).

    Максимальная верхняя граница удельного веса мочи у здоровых людей – 1,028 г/мл, у детей – 1,025 г/мл. Минимальная нижняя граница удельного веса мочи составляет 1,003–1,004 г/мл.

    Для оценки химического состава мочи в настоящее время, как правило, применяют диагностические тест-полоски (метод «сухой химии»), выпускаемые разными производителями. Химические методы, используемые в тест-полосках, основаны на цветных реакциях, дающих изменение цвета тестовой зоны полоски при разных концентрациях аналита. Изменение окраски определяется визуально или с помощью отражательной фотометрии с использованием полуавтоматических или полностью автоматизированных анализаторов мочи, результаты оцениваются качественно или полуколичественно. При обнаружении патологического результата исследование может быть выполнено повторно с использованием химических методов.

    Белок в норме в моче отсутствует или присутствует в неопределяемой обычными методами концентрации (следы). Выявляют несколько видов протеинурии (появление белка в моче):

    • физиологическая (ортостатическая, после повышенной физической нагрузки, переохлаждении);
    • клубочковая (гломерулонефрит, действие инфекционных и аллергических факторов, гипертоническая болезнь, декомпенсация сердечной деятельности);
    • канальцевая (амилоидоз, острый канальцевый некроз, интерстициальный нефрит, синдром Фанкони).
    • преренальная (миеломная болезнь, некроз мышечной ткани, гемолиз эритроцитов);.
    • постренальная (при циститах, уретритах, кольпитах).

    В норме глюкоза в моче отсутствует. Появление глюкозы в моче может иметь несколько причин:

    • физиологическая (стресс, прием повышенного количества углеводов);
    • внепочечная (сахарный диабет, панкреатит, диффузные поражения печени, рак поджелудочной железы, гипертиреоз, болезнь Иценко-Кушинга, черепно-мозговые травмы, инсульты);
    • ренальная (почечный диабет, хронические нефриты, острая почечная недостаточность, беременность, отравление фосфором, некоторыми лекарственными препаратами).

    Билирубин в норме в моче отсутствует. Билирубинурия выявляется при паренхиматозных поражениях печени (гепатиты), механической желтухе, циррозах, холестазе, в результате действия токсических веществ.

    Нормальная моча содержит низкую концентрацию (следы) уробилиногена. Уровень его резко возрастает при гемолитической желтухе, а также при токсических и воспалительных поражениях печени, кишечных заболеваниях (энтериты, запоры).

    К кетоновым телам относятся ацетон, ацетоуксусная и бета-оксимаслянная кислоты. Увеличение выделения кетонов с мочой (кетонурия) появляется при нарушении углеводного, липидного или белкового обмена.

    Нитриты в нормальной моче отсутствуют. В моче они образуются из нитратов пищевого происхождения под влиянием бактерий, если моча не менее 4 часов находилась в мочевом пузыре. Обнаружение нитритов в правильно хранившихся образцах мочи свидетельствует об инфицировании мочевого тракта.

    В норме в моче отсутствует. Гемоглобинурия – результат внутрисосудистого гемолиза эритроцитов с выходом гемоглобина – характеризуется выделением мочи красного или темно-бурого цвета, дизурией, нередко болями в пояснице. При гемоглобинурии эритроциты в осадке мочи отсутствуют.

    Осадок мочи делят на организованный (элементы органического происхождения – эритроциты, лейкоциты, эпителиальные клетки, цилиндры и др.) и неорганизованный (кристалы и аморфные соли).

    Исследование проводят визуально в нативном препарате с использованием микроскопа. Кроме визуального микроскопического исследования, применяется исследование с помощью автоматических и полуавтоматических анализаторов.

    За сутки с мочой выделяется 2 млн. эритроцитов, что при исследовании осадка мочи составляет в норме 0–3 эритроцита в поле зрения для женщин и 0–1 эритроцит в поле зрения у мужчин. Гематурией называют увеличение эритроцитов в моче выше указанных значений. Выделяют макрогематурию (изменен цвет мочи) и микрогематурию (цвет мочи не изменен, эритроциты обнаруживаются только при микроскопии).

    В мочевом осадке эритроциты могут быть неизмененные (содержащие гемоглобин) и измененные (лишенные гемоглобина, выщелоченные). Свежие, неизмененные эритроциты характерны для поражения мочевыводящих путей (цистит, уретрит, прохождение камня).

    Появление в моче выщелоченных эритроцитов имеет большое диагностическое значение, т.к. они чаще всего имеют почечное происхождение и встречаются при гломерулонефритах, туберкулезе и других заболеваниях почек. Для определения источника гематурии применяют трехстаканную пробу. При кровотечении из уретры гематурия бывает наибольшей в первой порции (неизмененные эритроциты), из мочевого пузыря – в последней порции (неизмененные эритроциты). При других источниках кровотечения эритроциты распределяются равномерно во всех трех порциях (выщелоченные эритроциты).

    Лейкоциты в моче здорового человека содержатся в небольшом количестве. Норма для мужчин 0–3, для женщин и детей 0–6 лейкоцитов в поле зрения.

    Увеличения числа лейкоцитов в моче (лейкоцитурия, пиурия) в сочетании с бактериурией и наличием клинических симптомов свидетельствует о воспалении инфекционной природы в почках или мочевыводящих путях.

    В мочевом осадке практически всегда встречаются клетки эпителия. В норме в анализе мочи не больше 10 эпителиальных клеток в поле зрения.

    Эпителиальные клетки имеют различное происхождение:

    • клетки плоского эпителия попадают в мочу из влагалища, уретры, их наличие особого диагностического значения не имеет;
    • клетки переходного эпителия выстилают слизистую оболочку мочевого пузыря, мочеточников, лоханок, крупных протоков предстательной железы. Появление в моче большого количества клеток такого эпителия может наблюдаться при мочекаменной болезни, новообразованиях мочевыводящих путей и воспалении мочевого пузыря, мочеточников, лоханок, крупных протоков предстательной железы;
    • клетки почечного эпителия выявляются при поражении паренхимы почек, интоксикациях, лихорадочных, инфекционных заболеваниях, расстройствах кровообращения.

    Цилиндр – белок, свернувшийся в просвете почечных канальцев и включающий в состав своего матрикса любое содержимое просвета канальцев. Цилиндры принимают форму самих канальцев (слепок цилиндрической формы). В норме в пробе мочи, взятой для общего анализа цилиндры отсутствуют. Появление цилиндров (цилиндрурия) является симптомом поражения почек.

    • гиалиновые (с наложением эритроцитов, лейкоцитов, клеток почечного эпителия, аморфных зернистых масс);
    • зернистые;
    • восковидные;
    • пигментные;
    • эпителиальные;
    • эритроцитарные;
    • лейкоцитарные;
    • жировые.

    Основным компонентом неорганизованного осадка мочи являются соли в виде кристаллов или аморфных масс. Характер солей зависит от рН мочи и других свойств мочи. Например, при кислой реакции мочи обнаруживаются мочевая кислота, ураты, оксалаты, при щелочной реакции мочи – кальций, фосфаты, мочекислый аммоний. Особого диагностического значения неорганизованный осадок не имеет, косвенно можно судить о склонности пациента к мочекаменной болезни. При ряде патологических состояний в моче могут появляться кристаллы аминокислот, жирных кислот, холестерина, билирубина, гематоидина, гемосидерина и т.д.

    Появление в моче лейцина и тирозина говорит о выраженном расстройстве обмена веществ, отравлении фосфором, деструктивном заболевании печени, пернициозной анемии, лейкозе.

    Цистин – врожденное нарушение цистинового обмена – цистиноз, цирроз печени, вирусный гепатит, состояние печеночной комы, болезнь Вильсона (врожденный дефект обмена меди).

    Ксантин – ксантинурия обусловлена отсутствием ксантиноксидазы.

    В норме моча в мочевом пузыре стерильна. При мочеиспускании в нее попадают микробы из нижнего отдела уретры.

    Появление в общем анализе мочи бактерий и лейкоцитов на фоне симптомов (дизурия или лихорадка) свидетельствует о клинически проявляющейся мочевой инфекции.

    Наличие в моче бактерий (даже в сочетании с лейкоцитами) при отсутствии жалоб расценивается как бессимптомная бактериурия. Бессимптомная бактериурия повышает риск инфекции мочевых путей, особенно при беременности.

    Обнаружение грибов рода Саndida свидетельствует о кандидамикозе, возникающего чаще всего в результате нерациональной антибиотикотерапии, приеме иммуносупрессоров, цитостатиков.

    В осадке мочи могут быть обнаружены яйца кровяной шистосомы (Schistosoma hematobium), элементы эхинококкового пузыря (крючья, сколексы, выводковые капсулы, обрывки оболочки пузыря), мигрирующие личинки кишечной угрицы (стронгилиды), смываемые мочой с промежности онкосферы тениид, яйца острицы (Enterobius vermiсularis) и патогенные простейшие – трихомонады (Trichomonas urogenitalis), амебы (Entamoeba histolitika – вегетативные формы).

    Для общего анализа собирают утреннюю порцию мочи. Сбор мочи проводят после тщательного туалета наружных половых органов без применения антисептиков. Для исследования используется свежесобранная моча, хранившаяся до анализа не более четырех часов. Образцы стабильны при температуре 2–8 °С не более 2 сут. Использование консервантов нежелательно. Перед исследованием мочу тщательно перемешивают.

    Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

    Copyright ФБУН Центральный НИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 1998 — 2019

    Центральный офис: 111123, Россия, Москва, ул. Новогиреевская, д.3а, метро «Шоссе Энтузиастов», «Перово»
    +7 (495) 788-000-1, info@cmd-online.ru

    ! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

    источник