Меню Рубрики

Соп по общему анализу мочи

СИСТЕМА МЕНЕДЖМЕНТА КАЧЕСТВА

СТАНДАРТНАЯ ОПЕРАЦИОННАЯ ПРОЦЕДУРА

1 Область применения

Настоящая стандартизованная операционная процедура (далее – СОП) определяет порядок выполнения общего анализа крови.

Настоящая СОП предназначена для врача клинической лабораторной диагностики, биолога и фельдшера-лаборанта.

2 Нормативные ссылки

2.1 ГОСТ Р 53079.4 – 2008. Технологии лабораторные клинические. Обеспечение качества лабораторных исследований. Часть 4. Правила ведения преаналитического этапа.

2.2 Руководство пользователя автоматического гематологического анализатора SysmexKX-21.

2.3 С. А. Луговская и др. «Гематологические анализаторы. Интерпретация общего анализа крови».

2.5 Инструкция по применению красителя азур-эозин по Романовскому

2.6 С. А. Луговская и соавт. «Лабораторная гематология»

2.7 Справочник заведующего КДЛ №1 январь 2009 г. М. М. Антипов «Скорость оседания эритроцитов. Современные методы определения и клиническая интерпретация».

2.8 Руководство для пользователей автоматического анализатора СОЭ SRS20/II

2.9 Руководство по эксплуатации модуля окрашивания мазковHematekSlideStainer.

3 Термины и определения

3.1. Клинический анализ крови (общий анализ крови) – анализ качественных и количественных свойств форменных элементов крови.

3.2. Лейкограмма — процентное соотношение различных видов лейкоцитов, определяемое при подсчёте их в окрашенном мазке крови под микроскопом.

4 Общие положения

Клинический анализ крови – один из важнейших диагностических методов, тонко отражающих реакцию кроветворных органов на воздействие различных физиологических и патологических факторов. Общеклиническое исследование крови имеет большое значение в постановке диагноза, а при заболеваниях системы кроветворения ему отводят ведущую роль.

5 Требования к обеспечению выполнения технологии

5.1 Лабораторное оборудование: автоматический гематологический анализатор SysmexKX-21, ротамикс RM1-L, микроскоп бинокулярный с иммерсией и встроенным осветителем LeicaDM1000, счетчик лейкоцитарной формулы крови СЛФ-ЭЦ-01-09, автоматический анализатор СОЭSRS 20/II, модуль окрашивания мазков HematekSlideStainer.

5.2 Реагенты, реактивы: Диюлент CELLPACK,WBC/RBC лизирующий раствор STROMATOLYSER-WH, детергент CELLCLEAN, набор реагентов для автоматической окраски препаратов крови и костного мозга (НПФ Арбис+)

5.3 Прочий расходуемый материал: масло иммерсионное, предметные стекла, шпатель для приготовления мазков крови Flexi-strip, вакуумная система для забора крови BDVacutainerK2E, вакуумная система для забора крови Vacuette 4NCESRsodiumcitrate, перчатки медицинские, дезинфицирующее средство «Мелисептол», спирт медицинский 70%, дозатор автоматическмй 20-200 мкл, наконечники для автоматического дозатора, штативы для предметных стекол, буферная смесь для гематологических исследований (производства НПФ «Абрис+»), штативы для предметных стекол, штативы пластиковые для пробирок, марля, вода дистиллированная, бумага фильтровальная, цилиндры мерные вместимостью 25-1000 мл, таймер.

6 Требования к технологии выполнения исследования (работ)

6.1 Взятие образца: для общего анализа крови используется венозная кровь. Забор крови производится с использованием вакуумной системы BDVacutainerK2E, для определения СОЭ используются система для забора кровиVacuette 4NCESRsodiumcitrate . Пробы крови доставляются в течении 1 часа в лабораторию при соблюдении температурного режима 2-8 о С . Технология взятия и требования к преаналитическому этапу согласно ГОСТ Р 53079.4 – 2008. Технологии лабораторные клинические. Обеспечение качества лабораторных исследований. Часть 4. Правила ведения преаналитического этапа.

6.2 Идентификация и приемлемость образца: при поступлении образца крови в лабораторию лаборант, принимающий материал, должен проверить правильность оформления направления на анализ, маркировку пробирки (наличие штрих-кода), оценить объем пробы, отсутствие видимых сгустков, дату и время забора крови, время доставки образца в лабораторию и соблюдение правил транспортировки, в случае необходимости отметить в бланке отсрочку анализа и использование охлаждения образца, зарегистрировать полученный материал. Перед проведением исследования образцы должны быть доведены до комнатной температуры.

6.3 Технология исследования.

Этапы клинического исследования крови:

  1. Выполнение исследования на гематологическом анализаторе (показатели: количество лейкоцитов (WBC), количество эритроцитов (RBC), концентрация гемоглобина (HGB), гематокрит (HCT), количество тромбоцитов (PLT), средний объем эритроцита (MCV), среднее содержание гемоглобина в эритроцитах (MCH), средняя концентрация гемоглобина в эритроците (MCHC), показатель гетерогенности эритроцитов по объему (RDW-CV, RDW-SD), взвешенное распределение тромбоцитов (PDW), средний объем тромбоцита (MPV), отношение (%) объема крупных тромбоцитов ко всему объему тромбоцитов (P-LCR)): образцы помещаются в ротамикс для перемешивания пробы в течении 3-5 минут. С помощью сканера с пробирки считывается штрих-код. Порядок проведения аналитической процедуры на гематологическом анализаторе см. «Руководство пользователя автоматического гематологического анализатора SysmexKX-21» п. 2.4.1.
  2. После аспирации образца анализатором на предметное стекло с помощью дозатора наносится 10 мкл крови и с помощью шпателя готовится мазок крови. Приготовление и покраска мазков см. Руководство по эксплуатации модуля окрашивания мазков HematekSlideStainer.
  3. Установка пробирок для определения СОЭ по методу Вестергрена в автоматический анализатор СОЭ SRS20/II.
    1. Подсчет лейкоцитарной формулы в мазке производится с помощью бинокулярного микроскопа Leica и счетчика лейкоцитарной формулы крови. Технологию подсчета см. С. А. Луговская и соавт. «Лабораторная гематология» «Морфологическое исследование мазков крови». Лейкоцитарная формула записывается в виде лейкограммы на бланк распечатки результатов анализа, выполненного на гематологическом анализаторе.
    2. Показатели исследования, выполненные на гематологическом анализаторе, переносятся в электронную форму бланка ответа автоматически. Лейкограмма с указанием особенностей морфологии эритроцитов и лейкоцитов и СОЭ вносятся вручную, проверяются врачом лабораторной диагностики, утверждаются и отправляются в регистратуру медицинского центра. Бланк распечатки результатов общего анализа крови с гематологического анализатора вклеивается в бумажный журнал регистрации исследований общего анализа крови.

7. Обеспечение качества выполнения исследования

7.1 Контроль качества оборудования и материалов

Контроль работы оборудования проводится согласно документированной процедуре «Управление оборудованием».

Наборы реагентов используются в пределах установленных сроков годности и хранятся при регламентированных в паспорте условиях.

7.2 Контроль качества исследования

Контроль качества работы гематологического анализатора см. «Руководство пользователя автоматического гематологического анализатора SysmexKX-21» п. 5, Х контроль.

7.3 Регистрация контрольных мероприятий

Результаты контроля качества выводятся на компьютер и хранятся в электронном виде.

источник

Моча – продукт обмена веществ, образующийся в почках в результате фильтрации жидкой части крови, а также процессов реабсорбции и секреции разных аналитов. Состоит на 96% из воды, остальные 4% приходятся на растворенные в ней азотистые продукты обмена белков (мочевина, мочевая кислота, креатинин и др.), минеральные соли и др. вещества.

Общий анализ мочи у детей и взрослых включает оценку физико-химических характеристик мочи и микроскопию осадка. Данное исследование позволяет оценить функцию почек и других внутренних органов, а также выявить воспалительный процесс в мочевых путях

Физико-химические исследования мочи включают оценку следующих показателей:

  • цвет;
  • прозрачность мочи;
  • удельный вес (относительная плотность);
  • рН;
  • концентрация белка;
  • концентрация глюкозы;
  • концентрация билирубина;
  • концентрация уробилиногена;
  • концентрация кетоновых тел;
  • концентрация нитритов;
  • концентрация гемоглобина.

Микроскопия мочевого осадка включает оценку следующих объектов:

  • Организованный осадок мочи:
    • присутствие эритроцитов;
    • лейкоцитов;
    • эпителиальных клеток;
    • цилиндров;
    • бактерии;
    • дрожжевых грибов;
    • паразиты;
    • опухолевые клетки;
  • Неорганизованный осадок мочи (кристаллы и аморфные соли).

Оценка физических свойств мочи, таких как запах, цвет, мутность, проводится органолептическим методом. Удельный вес мочи измеряется при помощи урометра, рефрактометра или оценивается методами «сухой химии» (тест-полоски) – визуально или на автоматических анализаторах мочи.

У взрослого человека моча желтого цвета. Оттенок ее может колебаться от светлого (почти бесцветного) до янтарного. Насыщенность желтого цвета мочи зависит от концентрации растворенных в ней веществ. При полиурии моча имеет более светлую окраску, при уменьшении диуреза приобретает насыщенно-желтый оттенок. Окраска меняется при приеме лекарственных препаратов (салицилаты и др.) или употреблении некоторых пищевых продуктов (свекла, черника).

Патологически измененная окраска мочи бывает при:

  • гематурии – вид «мясных помоев»;
  • билирубинемии (цвет пива);
  • гемоглобинурии или миоглобинурии (черный цвет);
  • лейкоцитурии (молочно-белый цвет).

В норме свежесобранная моча совершенно прозрачна. Мутность мочи обусловлена наличием в ней большого количества клеточных образований, солей, слизи, бактерий, жира.

В норме запах мочи нерезкий. При разложении мочи бактериями на воздухе или внутри мочевого пузыря, например в случае цистита, появляется аммиачный запах. В результате гниения мочи, содержащей белок, кровь или гной, например при раке мочевого пузыря, моча приобретает запах тухлого мяса. При наличии в моче кетоновых тел моча имеет фруктовый запах, напоминающий запах гниющих яблок.

Почки выделяют из организма «ненужные» и задерживают необходимые вещества для обеспечения обмена воды, электролитов, глюкозы, аминокислот и поддержания кислотно-основного баланса. Реакция мочи – рН – в значительной мере определяет эффективность и особенность этих механизмов. В норме реакция мочи слабокислая (рН 5,0–7,0). Она зависит от многих факторов: возраста, диеты, температуры тела, физической нагрузки, состояния почек и др. Наиболее низкие значения рН – утром натощак, наиболее высокие – после еды. При употреблении преимущественно мясной пищи – реакция более кислая, при употреблении растительной – щелочная. При длительном стоянии моча разлагается, выделяется аммиак и рН сдвигается в щелочную сторону.

Щелочная реакция мочи характерна для хронической инфекции мочевыводящих путей, также отмечается при поносе и рвоте.

Кислотность мочи увеличивается при лихорадочных состояниях, сахарном диабете, туберкулезе почек или мочевого пузыря, почечной недостаточности.

Удельный вес (относительная плотность) мочи

Относительная плотность отражает функциональную способность почек концентрировать и разводить мочу. Для нормально функционирующих почек характерны широкие колебания удельного веса мочи в течение суток, что связано с периодическим приемом пищи, воды и потерей жидкости организмом. Почки в различных условиях могут выделять мочу с относительной плотностью от 1,001 до 1,040 г/мл.

  • гипостенурию (колебания удельного веса мочи менее 1,010 г/мл);
  • изостенурию (появление монотонного характера удельного веса мочи соответствующее таковому первичной мочи (1,010 г/мл);
  • гиперстенурию (высокие значения удельного веса).

Максимальная верхняя граница удельного веса мочи у здоровых людей – 1,028 г/мл, у детей – 1,025 г/мл. Минимальная нижняя граница удельного веса мочи составляет 1,003–1,004 г/мл.

Для оценки химического состава мочи в настоящее время, как правило, применяют диагностические тест-полоски (метод «сухой химии»), выпускаемые разными производителями. Химические методы, используемые в тест-полосках, основаны на цветных реакциях, дающих изменение цвета тестовой зоны полоски при разных концентрациях аналита. Изменение окраски определяется визуально или с помощью отражательной фотометрии с использованием полуавтоматических или полностью автоматизированных анализаторов мочи, результаты оцениваются качественно или полуколичественно. При обнаружении патологического результата исследование может быть выполнено повторно с использованием химических методов.

Белок в норме в моче отсутствует или присутствует в неопределяемой обычными методами концентрации (следы). Выявляют несколько видов протеинурии (появление белка в моче):

  • физиологическая (ортостатическая, после повышенной физической нагрузки, переохлаждении);
  • клубочковая (гломерулонефрит, действие инфекционных и аллергических факторов, гипертоническая болезнь, декомпенсация сердечной деятельности);
  • канальцевая (амилоидоз, острый канальцевый некроз, интерстициальный нефрит, синдром Фанкони).
  • преренальная (миеломная болезнь, некроз мышечной ткани, гемолиз эритроцитов);.
  • постренальная (при циститах, уретритах, кольпитах).

В норме глюкоза в моче отсутствует. Появление глюкозы в моче может иметь несколько причин:

  • физиологическая (стресс, прием повышенного количества углеводов);
  • внепочечная (сахарный диабет, панкреатит, диффузные поражения печени, рак поджелудочной железы, гипертиреоз, болезнь Иценко-Кушинга, черепно-мозговые травмы, инсульты);
  • ренальная (почечный диабет, хронические нефриты, острая почечная недостаточность, беременность, отравление фосфором, некоторыми лекарственными препаратами).

Билирубин в норме в моче отсутствует. Билирубинурия выявляется при паренхиматозных поражениях печени (гепатиты), механической желтухе, циррозах, холестазе, в результате действия токсических веществ.

Нормальная моча содержит низкую концентрацию (следы) уробилиногена. Уровень его резко возрастает при гемолитической желтухе, а также при токсических и воспалительных поражениях печени, кишечных заболеваниях (энтериты, запоры).

К кетоновым телам относятся ацетон, ацетоуксусная и бета-оксимаслянная кислоты. Увеличение выделения кетонов с мочой (кетонурия) появляется при нарушении углеводного, липидного или белкового обмена.

Нитриты в нормальной моче отсутствуют. В моче они образуются из нитратов пищевого происхождения под влиянием бактерий, если моча не менее 4 часов находилась в мочевом пузыре. Обнаружение нитритов в правильно хранившихся образцах мочи свидетельствует об инфицировании мочевого тракта.

В норме в моче отсутствует. Гемоглобинурия – результат внутрисосудистого гемолиза эритроцитов с выходом гемоглобина – характеризуется выделением мочи красного или темно-бурого цвета, дизурией, нередко болями в пояснице. При гемоглобинурии эритроциты в осадке мочи отсутствуют.

Осадок мочи делят на организованный (элементы органического происхождения – эритроциты, лейкоциты, эпителиальные клетки, цилиндры и др.) и неорганизованный (кристалы и аморфные соли).

Исследование проводят визуально в нативном препарате с использованием микроскопа. Кроме визуального микроскопического исследования, применяется исследование с помощью автоматических и полуавтоматических анализаторов.

За сутки с мочой выделяется 2 млн. эритроцитов, что при исследовании осадка мочи составляет в норме 0–3 эритроцита в поле зрения для женщин и 0–1 эритроцит в поле зрения у мужчин. Гематурией называют увеличение эритроцитов в моче выше указанных значений. Выделяют макрогематурию (изменен цвет мочи) и микрогематурию (цвет мочи не изменен, эритроциты обнаруживаются только при микроскопии).

В мочевом осадке эритроциты могут быть неизмененные (содержащие гемоглобин) и измененные (лишенные гемоглобина, выщелоченные). Свежие, неизмененные эритроциты характерны для поражения мочевыводящих путей (цистит, уретрит, прохождение камня).

Появление в моче выщелоченных эритроцитов имеет большое диагностическое значение, т.к. они чаще всего имеют почечное происхождение и встречаются при гломерулонефритах, туберкулезе и других заболеваниях почек. Для определения источника гематурии применяют трехстаканную пробу. При кровотечении из уретры гематурия бывает наибольшей в первой порции (неизмененные эритроциты), из мочевого пузыря – в последней порции (неизмененные эритроциты). При других источниках кровотечения эритроциты распределяются равномерно во всех трех порциях (выщелоченные эритроциты).

Лейкоциты в моче здорового человека содержатся в небольшом количестве. Норма для мужчин 0–3, для женщин и детей 0–6 лейкоцитов в поле зрения.

Увеличения числа лейкоцитов в моче (лейкоцитурия, пиурия) в сочетании с бактериурией и наличием клинических симптомов свидетельствует о воспалении инфекционной природы в почках или мочевыводящих путях.

В мочевом осадке практически всегда встречаются клетки эпителия. В норме в анализе мочи не больше 10 эпителиальных клеток в поле зрения.

Эпителиальные клетки имеют различное происхождение:

  • клетки плоского эпителия попадают в мочу из влагалища, уретры, их наличие особого диагностического значения не имеет;
  • клетки переходного эпителия выстилают слизистую оболочку мочевого пузыря, мочеточников, лоханок, крупных протоков предстательной железы. Появление в моче большого количества клеток такого эпителия может наблюдаться при мочекаменной болезни, новообразованиях мочевыводящих путей и воспалении мочевого пузыря, мочеточников, лоханок, крупных протоков предстательной железы;
  • клетки почечного эпителия выявляются при поражении паренхимы почек, интоксикациях, лихорадочных, инфекционных заболеваниях, расстройствах кровообращения.

Цилиндр – белок, свернувшийся в просвете почечных канальцев и включающий в состав своего матрикса любое содержимое просвета канальцев. Цилиндры принимают форму самих канальцев (слепок цилиндрической формы). В норме в пробе мочи, взятой для общего анализа цилиндры отсутствуют. Появление цилиндров (цилиндрурия) является симптомом поражения почек.

  • гиалиновые (с наложением эритроцитов, лейкоцитов, клеток почечного эпителия, аморфных зернистых масс);
  • зернистые;
  • восковидные;
  • пигментные;
  • эпителиальные;
  • эритроцитарные;
  • лейкоцитарные;
  • жировые.

Основным компонентом неорганизованного осадка мочи являются соли в виде кристаллов или аморфных масс. Характер солей зависит от рН мочи и других свойств мочи. Например, при кислой реакции мочи обнаруживаются мочевая кислота, ураты, оксалаты, при щелочной реакции мочи – кальций, фосфаты, мочекислый аммоний. Особого диагностического значения неорганизованный осадок не имеет, косвенно можно судить о склонности пациента к мочекаменной болезни. При ряде патологических состояний в моче могут появляться кристаллы аминокислот, жирных кислот, холестерина, билирубина, гематоидина, гемосидерина и т.д.

Появление в моче лейцина и тирозина говорит о выраженном расстройстве обмена веществ, отравлении фосфором, деструктивном заболевании печени, пернициозной анемии, лейкозе.

Цистин – врожденное нарушение цистинового обмена – цистиноз, цирроз печени, вирусный гепатит, состояние печеночной комы, болезнь Вильсона (врожденный дефект обмена меди).

Ксантин – ксантинурия обусловлена отсутствием ксантиноксидазы.

В норме моча в мочевом пузыре стерильна. При мочеиспускании в нее попадают микробы из нижнего отдела уретры.

Появление в общем анализе мочи бактерий и лейкоцитов на фоне симптомов (дизурия или лихорадка) свидетельствует о клинически проявляющейся мочевой инфекции.

Наличие в моче бактерий (даже в сочетании с лейкоцитами) при отсутствии жалоб расценивается как бессимптомная бактериурия. Бессимптомная бактериурия повышает риск инфекции мочевых путей, особенно при беременности.

Обнаружение грибов рода Саndida свидетельствует о кандидамикозе, возникающего чаще всего в результате нерациональной антибиотикотерапии, приеме иммуносупрессоров, цитостатиков.

В осадке мочи могут быть обнаружены яйца кровяной шистосомы (Schistosoma hematobium), элементы эхинококкового пузыря (крючья, сколексы, выводковые капсулы, обрывки оболочки пузыря), мигрирующие личинки кишечной угрицы (стронгилиды), смываемые мочой с промежности онкосферы тениид, яйца острицы (Enterobius vermiсularis) и патогенные простейшие – трихомонады (Trichomonas urogenitalis), амебы (Entamoeba histolitika – вегетативные формы).

Для общего анализа собирают утреннюю порцию мочи. Сбор мочи проводят после тщательного туалета наружных половых органов без применения антисептиков. Для исследования используется свежесобранная моча, хранившаяся до анализа не более четырех часов. Образцы стабильны при температуре 2–8 °С не более 2 сут. Использование консервантов нежелательно. Перед исследованием мочу тщательно перемешивают.

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Copyright ФБУН Центральный НИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 1998 — 2019

Центральный офис: 111123, Россия, Москва, ул. Новогиреевская, д.3а, метро «Шоссе Энтузиастов», «Перово»
+7 (495) 788-000-1, info@cmd-online.ru

! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

источник

СТАНДАРТНЫЕ ОПЕРАЦИОННЫЕ ПРОЦЕДУРЫ ВЕДЕНИЯ ПРЕАНАЛИТИЧЕСКОГО ЭТАПА ДЕЯТЕЛЬНОСТИ КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ЛАБОРАТОРИЙ

СТАНДАРТНЫЕ ОПЕРАЦИОННЫЕ ПРОЦЕДУРЫ ВЕДЕНИЯ ПРЕАНАЛИТИЧЕСКОГО ЭТАПА ДЕЯТЕЛЬНОСТИ КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ЛАБОРАТОРИЙ

O.А. Тарасенко — канд. мед. наук, зав. диагностико-серологической лабораторией,

О.Н. Осипова — врач клинической лабораторной диагностики,

Ю.Ф. Тарасенко — врач клинической лабораторной диагностики,

М.В. Еремина — врач клинической лабораторной диагностики,

Станция переливания крови Департамента здравоохранения г. Москвы

Развитие лабораторной диагностики в последние годы привело к расширению номенклатуры лабораторных анализов, результаты которых играют все большую роль в диагностике и выборе тактики лечения больных. В свою очередь с увели­чением объема лабораторных исследований растет количество ошибочных дан­ных, которые могут отрицательно влиять на диагностический и лечебный про­цессы, повышать стоимость лабораторных анализов (повторные пробы, контроль и т. д.) и соответственно увеличивать расходы здравоохранения. Даже если мето­дика выполнения анализа полностью соблюдена, на его результаты все равно мо­гут влиять различные факторы. Главными причинами лабораторных ошибок (60-80%) являются преаналитические факторы, такие как неправильные взятие пробы, обращение с образцом и его транспортировка и т. д.

Так, например, при взятии капиллярной крови сильно влияние факторов, ко­торые могут существенно изменять исследуемые показатели (глубина прокола кожи, форма и острота скарификатора, сдавление пальца, разбавление пробы межклеточной жидкостью, активация свертывания при контакте с тканевыми ак­тиваторами и т. д.). Поэтому для обеспечения максимальной стандартизации об­разцов рекомендуется проводить исследования проб венозной крови. Взятие ве­нозной крови для проведения анализов является самой частой инвазивной процедурой. При этом ее кажущаяся простота и отсутствие четких стандартов проведения, а также использование устаревших материалов (стеклянные пробир­ки, самостоятельное приготовление добавок и т. д.) приводят к ошибкам на преаналитическом этапе, вызывающим большие потери материальных средств и ра­бочего времени медперсонала из-за назначения повторных анализов, расхода дорогостоящих реагентов и т. д.

Читайте также:  17 он прогестерон анализ мочи

Для уменьшения количества ошибок на преаналитическом этапе необходи­мо соблюдать выполнение стандартных операционных процедур (СОП). Ниже представлены СОП, которые могут быть использованы заведующими КДЛ для разработки собственных документов в деятельности клинико-диагностических лабораторий и процедурных кабинетов ЛПУ

Область применения СОП

Главным образом СОП используются:

  • при технологическом процессе подготовки пациента к лабораторным иссле­дованиям;
  • венепункции, взятии капиллярной крови;
  • взятии, сборе биологического материала;
  • центрифугировании биологического материала;
  • транспортировке биологического материала в лабораторию.

Значение преаналитического этапа в лабораторной диагностике

Преаналитический этап — важная составляющая качества деятельности всей лаборатории, который включает в себя подготовку пациента, процедуру взятия, сбора, транспортировки и обработки биологического материала перед проведе­нием лабораторных исследований. На него влияет следующий спектр факторов:

· режим питания пациента, его физическая активность, стиль жизни, прием лекарственных препаратов, масса тела, курение, употребление спиртных на­питков и т. д.;

· способ и качество взятия биологического материала;

· время взятия материала (циркадные ритмы, фазы менструального цикла, время последнего приема пищи и т. д.);

· количество расходного материала;

· положение тела при взятии материала;

· вид пробирок, антикоагулянтов, стабилизаторов, сепарирующих гелей;

· техника идентификации проб отдельных пациентов;

· время, температура и механические воздействия во время транспортировки пробы от места взятия до лаборатории;

· стандартизация способов доставки проб в отдаленные лаборатории;

· способ хранения проб в лаборатории.

ПАМЯТКИ ПАЦИЕНТУ ОБ ОСОБЕННОСТЯХ ПОДГОТОВКИ К ЛАБОРАТОРНЫМ ИССЛЕДОВАНИЯМ

Исследование крови

Вы должны подготовить себя к этому исследованию следующим образом: воздержаться от физических нагрузок, приема алкоголя и лекарственных веществ, изменений в питании в течение 24 ч до взятия крови.

Вам не следует принимать пищу после ужина, лечь спать нужно накануне в обычное для вас время и встать не позднее, чем за час до взятия крови.

Нельзя ничего есть в течение 12 ч, предшествующих началу исследования, но голодание ни в коем случае не должно быть более 16 ч.

Нельзя пить соки, чай, кофе и другие напитки. Используйте для питья воду.

Утром после подъема воздержитесь от курения и физической нагрузки.

Если вы испытываете трудности с отменой лекарственных препаратов, то обязательно сообщите об этом лечащему врачу.

Очень важно, чтобы вы точно следовали указанным рекомендациям, т. к. толь­ко в этом случае будут получены правильные результаты исследования крови.

Глюкозотолерантный тест

Необходимо изменить диету и исключить прием лекарственных препаратов (по рекомендации врача), по меньшей мере, за 3 дня до проведения теста. Очень

важно, чтобы вы точно исполняли приведенную ниже инструкцию, т. к. только в этом случае будут получены достоверные результаты исследования крови.

Вы должны следовать правилам:

· количество углеводов в пище должно быть не менее 125 г в день в течение 3 дней перед проведением теста;

· нельзя ничего есть в течение 12 ч, предшествующих началу теста, но голода­ние ни в коем случае не должно быть более 16 ч;

· перед исследованием можно пить только воду (нельзя пить соки, чай, кофе и другие напитки);

· необходимо исключить физическую нагрузку в течение 12 ч перед началом теста.

Если вы принимаете какие-то лекарственные препараты помимо тех, кото­рые назначил лечащий врач, то необходимо сообщить ему об этом, т. к. эти веще­ства могут повлиять на результаты исследования.

Вы должны сообщить врачу о своем самочувствии перед исследованием, обя­зательно упомянув при этом об имеющейся беременности и (или) стрессе.

Накануне вечером перед проведением теста подойдите к процедурной медицин­ской сестре и уточните, где вам необходимо находиться утром для его выполнения.

Исследование мочи

Вы должны подготовить себя к этому исследованию следующим образом:

· воздержаться от физических нагрузок;

· лекарственных веществ, особенно влияющих на цвет мочи (амидопирин, фуразолидон, ибупрофен, метронидазол и т. д.), либо сообщить об их приеме врачу;

· лечь спать накануне в обычное для вас время.

При плановом назначении анализа вы должны собрать первую утреннюю порцию мочи. Утром после подъема вам необходимо провести тщательный туа­лет наружных половых органов, промыв их под душем с мылом, чтобы в мочу не попали выделения из них.

При назначении теста с исследованием суточного количества мочи следует точно соблюдать 24-часовой период ее сбора.

Для анализа мочи по Зимницкому вы должны соблюдать обычный режим питания, но учитывать количество выпитой жидкости.

При исследовании йода в моче (йодурия) за 2-3 дня до начала сбора должны быть исключены лекарственные препараты, содержащие йод и бром. За 3 ч до сбора мочи должны быть исключены значительные физические нагрузки.

Перед проведением «трехстаканной пробы» мочи вы не должны мочиться в течение 3-5 ч.

Нельзя сдавать мочу во время менструации.

Исследование кала

Вы должны подготовить себя к этому исследованию следующим образом:

· следует соблюдать диету, предписанную вашим лечащим врачом;

· нужно воздержаться от приема лекарственных препаратов, влияющих на секреторные процессы в желудке, на перистальтику желудка и кишечника, а также меняющих цвет кала (индометацин, препараты железа, сенна, сулема, фенолфталеин и т. д.).

Перед исследованием кала на скрытую кровь нельзя принимать некоторые лекарственные вещества, в т. ч. аскорбиновую и ацетилсалициловую кислоту. Прием лекарственных препаратов необходимо согласовать с врачом.

Перед исследованием кала на скрытую кровь из диеты должны быть исклю­чены мясо, рыба, помидоры, огурцы, цветная капуста, зеленые овощи.

Исследование мокроты

Перед сбором мокроты необходимо тщательно почистить зубы, прополо­скать рот и глотку кипяченой водой. Ограничений в режиме питания и приеме лекарственных препаратов нет.

Исследование слюны

За 12 ч до исследования необходимо исключить прием пищи, алкоголя и ле­карственных препаратов (по согласованию с врачом).

Перед сбором слюны необходимо отказаться от использования зубной пасты и удалить зубные протезы. Зубы чистят без зубной пасты, затем прополаскивают рот кипяченой водой.

Подготовка обследуемых

Взятие венозной крови производится натощак, в утренние часы. При взятии венозной крови необходимо учитывать ряд факторов которые могут повлиять на результат гематологических исследований: физическое перенапряжение (бег, быстрая ходьба, подъем по лестнице), эмоциональное возбуждение, прием пищи накануне исследования, купение, прием алкоголя и т.д. Для исключения этих факторов, следует соблюдать следующие условия подготовки пациентов:

— взятие венозной крови осуществляется после 15-минутного отдыха обследуемого;

— пациент во время взятия сидит, у тяжелых больных взятие крови может осуществляться лежа.

— курение, прием алкоголя и пищи непосредственно перед исследованием исключаются;

Основной способ взятия венозной крови для лабораторного исследования – пунктирование вены. Венозную кровь, как правило, забирают из локтевой вены. В случае необходимости ее можно получить из любой вены (запястья, тыла ладони, над большим пальцем и т.д.). У новорожденных и грудных детей кровь обычно берется из лобной, височной или яремной вены.

При взятии крови из вены необходимо избегать: мест шрамов, гематом; вен, используемых для переливания растворов; ножных вен (у больных диабетом, при нарушениях периферического кровотока, ангиопатиях).

Оборудование

Для венепункции можно использовать три варианта пункционных систем:

— одноразовые пластиковые системы (вакутейнеры), состоящие из контейнера с навинчивающейся на него одноразовой иглой и пробирки с плотно прилегающей пробкой и вакуумом внутри;

— одноразовые шприцы с подходящим диаметром иглы;

— иглы с внутренним диаметром 0,55-0,65 мм.

— манжета или жгут для пережатия руки;

— ватные или марлевые тампоны;

При взятии крови следует строго соблюдать правила асептики и антисептики в соответствии с “Инструкцией по мерам профилактики распространения инфекционных заболеваний при работе в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений”, утвержденной МЗ СССР 17. 01. 1991 г. и действующей до настоящего времени.

Взятие крови необходимо проводить в одноразовых резиновых перчатках; в тех случаях, когда это невозможно, перед каждым взятием перчатки следует обрабатывать 70 0 спиртом. Все оборудование для взятия крови, включая одноразовые системы, шприцы, иглы, бинты, ватные и марлевые тампоны, пластыри должно быть стерильным.

Дезинфекция и стерилизация оборудования проводится в соответствии с ОСТ-ом 42-21-2-85 “Стерилизация и дезинфекция изделий медицинского оборудования” и приказом МЗ СССР “О мерах по снижению заболеваемости вирусным гепатитом в стране” (1989 г.) и “Инструкцией по противоэпидемическому режиму в лабораториях диагностики СПИД” 42-28/39-90 от 05.06.1990 г.

Приготовление сыворотки

Венозная кровь, полученная без антикоагулянтов в центрифужную стеклянную пробирку, отстаивается в ней при комнатной температуре (15-200С) в течение 30 минут до полного образования сгустка. По окончании образования сгустка пробирки открывают и осторожно проводят тонкой стеклянной палочкой или запаянным капилляром Пастеровской пипетки по внутренним стенкам пробирки по окружности в верхнем слое крови для отделения столбика сгустка от стенок пробирки. Сыворотку сливают в другую центрифужную пробирку, придерживая сгусток стеклянной палочкой, и центрифугируют, либо центрифугируют в тех же, первичных, пробирках.

Центрифугирование

После ретракции сгустка пробы центрифугируют при относительной центробежной силе RCF от 1000 до 1200 g (максимально до 1500 g) в течение 10 минут.

В случае использования микропробирок и центрифуги для них центрифугирование проводят при 6000-15000 g в течение 1,5 минут. После центрифугирования сыворотку сливают во вторичные (транспортные) пробирки. Сыворотка не должна быть гемолизированной.

Плазма получается из крови путем отделения клеток крови. Она представляет собой бесклеточную надосадочную жидкость, которая получается при центрифугировании крови, свертываемость которой ингибирована добавлением антикоагулянтов тотчас после взятия. В плазме содержатся факторы свертывания крови. В связи с тем, что плазма и сыворотка содержат около 93% воды, в отличае от цельной крови, которая содержит около 81% воды, концентрация компонентов в плазме на 12% выше, чем в цельной крови. Это может иметь принципиальное диагностическое значение при исследовании активности, например ЛДГ у которого наиболее высокая концентрация наблюдается в сыворотке крови, чем в плазме.

Наряду с коммерческими системами для получения сыворотки при взятии венозной крови широко применяются коммерческие системы для получения плазмы. Они представляют собой пробирки или устройства типа шприцев (“вакутейнер”) с вакуумом внутри, содержащие различные антикоагулянты и/или ингибиторы гликолиза. Как и в случае устройств для сыворотки, эти пробирки для плазмы имеют разные варианты, содержащие разделительные гели и гранулят из полистирола, ускоряющие получение плазмы, облегчающие транспортировку и хранение. В них уже имеются антикоагулянты и метки до которых следует набирать кровь.

МЕТОДИКА ПОЛУЧЕНИЯ ПЛАЗМЫ(без коммерческих разделительных устройств)

Оборудование

1. Центрифужные стеклянные, химически чистые, сухие пробирки.

2. Центрифуга, обеспечивающая центрифугирование до 1500 xg.

3. Химически чистые, сухие химические пробирки.

4. Крышки для пробирок или лабораторная пленка типа “Парафильм”.

Приготовление плазмы

Венозную кровь, полученную с антикоагулянтом немедленно после взятия перемешивают переворачиванием пробирок с кровью, закрытых крышками, не менее 5 раз. Перемешивание должно осуществляться без встряхивания и пенообразования. Время между началом наложения жгута и смешиванием крови с антикоагулянтом не должно превышать 2 минут. После уравновешивания пробирок с кровью, их центрифугируют при RCF 1000-1200 xg, но не более 1500 xg, в течение 10-15 минут. Плазму немедленно сливают в транспортную центрифужную или химическую пробирку. Пробирку закрывают крышкой.

Общие положения

У взрослых пациентов взятие капиллярной крови производится:

· при ожогах, занимающих большую площадь поверхности тела пациента;

· при наличии у пациента очень мелких вен или их труднодоступности;

· при выраженном ожирении пациента;

· при установленной склонности к венозному тромбозу;

· для проведения теста по толерантности к глюкозе;

· для исследования дневных колебаний концентрации глюкозы;

· для определения времени свертывания крови и длительности кровотечения.

Прокол кожи является методом выбора для взятия крови в педиатрии. Боль­шие объемы крови при венепункции могут вызвать анемию у детей, особенно у новорожденных или недоношенных.

Не пунктируются пальцы новорожденных, т. к. кость находится на глубине всего 1-2 мм под поверхностью кожи. Используйте для пункции кожу пятки.

Подготовка рабочего места

Для взятия капиллярной крови на рабочем месте необходимо иметь:

· передвижные столики для расходных материалов;

· скарификаторы (длина копья зависит от размеров пациента);

· пробирки — системы для взятия капиллярной крови (СВКК);

· тампоны со спиртом или индивидуально упакованные салфетки, пропитан­ные спиртом;

· стерильные марлевые салфетки;

· емкости с дезинфицирующим раствором;

· компрессы для согревания места пункции;

В зависимости от цели исследования образцы мочи собирают либо в виде отдельных порций, либо за определенный промежуток времени.

Первая утренняя моча (после сна) используется для общеклинического ис­следования. Вторая (средняя) утренняя порция мочи — для количественного исследования в соотношении с выделением креатинина. микробиологического исследования, ПЦР-диагностики и пробы Нечипоренко. Суточная моча — для ко­личественного определения экскреции аналитов, пробы Зимницкого.

Правила сбора мочи

По возможности, надо собирать мочу в ту емкость, которая будет доставлена в лабораторию. Брать мочу из судна, утки или горшка нельзя! Если в лабораторию доставляется не вся собранная моча, то перед тем как отлить ее часть в контейнер, необходимо перемешать всю порцию.

Консервация проб мочи очень важна для сохранения ее исходных свойств и предупреждения роста бактериальной флоры. В первую порцию собираемой за сутки мочи в зависимости от назначенного вида исследования добавляют различ­ные консерванты:

· тимол (несколько кристаллов вещества на 100 мл мочи) — для определения концентрации большинства компонентов;

· азид натрия (0,5 или 1,0 г на все количество суточной мочи) — для определе­ния концентрации глюкозы, мочевины, мочевой кислоты, калия, кальция;

· соляная кислота (25 мл 6 моль/л на объем суточной мочи) — для определения концентрации катехоламинов, кальция, магния, фосфатов;

· карбонат натрия (2 г на литр мочи) — для определения концентрации порфи-ринов и уробилиногена.

Для некоторых проб мочи консервация небезразлична, поэтому предпочти­тельнее охлаждение. Для исследования осадка мочи важно использовать собран­ную мочу, без консерванта.

Сбор мочи у детей

Сбор мочи у детей требует особого внимания из-за возможности загрязне­ния мочи калом.

Для сбора мочи у новорожденных используют особую емкость, не вызываю­щую аллергических реакций, которая закрепляется в промежности. Проверяется контейнер через каждые 10-15 мин.

Необходимо дать подробные письменные или устные инструкции пациенту или родителям маленьких детей и предупредить о том, что в случае нарушения рекомендаций моча будет непригодна для лабораторного исследования.

Сбор кала должен осуществляться в чистые сухие пластиковые или стеклян­ные контейнеры с герметично закрывающимися крышками. Недопустимо на­правлять кал на исследование в спичечных или картонных коробках. Для бакте­риологических исследований посуда должна быть стерильной.

В КДЛ для сбора кала целесообразно использовать следующие приспособления:

· пластиковые (полипропилен) контейнеры с ложечкой;

· пластиковые (полипропилен) герметичные контейнеры (тубы) с ложечкой-шпателем на 1 мл для сбора точного количества кала (1 мл соответствует 1 г образца).

Правила сбора кала

Результаты копрологического исследования зависят от правильной подго­товки пациента и от правильного сбора материала.

После необходимой подготовки пациента кал собирают за одну дефекацию. Для исследования достаточно 10-15 г кала.

Кал не должен содержать посторонних примесей (мочи, отделяемого мочепо­ловых органов). Нельзя собирать фекалии после клизм. Если необходимо знать точное количество испражнений, то пустую емкость перед сбором и после сбора материала взвешивают.

Для микробиологического исследования кала на кишечный дисбактериоз и для ПЦР-диагностики сбор материала производится до начала лечения антибак­териальными и химиотерапевтическими препаратами.

Пациенту рекомендуется помочиться в унитаз, далее путем естественной де­фекации в подкладное судно или горшок собираются испражнения (следить, что­бы не попала моча).

Кал, взятый из разных мест, в количестве 1 г, собирается в стерильную ем­кость.

Перед сбором материала подкладное судно (горшок) предварительно обра­батывают дезинфицирующими средствами, промывают несколько раз проточ­ный водой, ополаскивают кипятком. Емкость с собранным материалом маркиру­ют и немедленно направляют в лабораторию.

Для паразитологических исследований кала специальной подготовки не тре­буется. Ложечкой собирают 10-15 г теплого кала, взятого из разных мест.

СБОР МОКРОТЫ

Для сбора мокроты целесообразно использовать широкогорлые стерильные пла­стиковые контейнеры вместимостью не менее 50 мл с завинчивающейся крышкой.

Правила сбора мокроты

После специальной подготовки пациент утром до приема пищи собирает мокроту.

Пациента следует предупредить о том, что собирать необходимо только мок­роту, отделяющуюся при кашле, а не при отхаркивании.

Для микробиологического исследования мокроту собирают в стерильный контейнер с соблюдением правил асептики.

Емкость с мокротой маркируют и как можно скорее доставляют в лабораторию.

Слюна используется для исследования содержания ряда гормонов, лекарст­венных веществ, в т. ч. и лекарственного мониторинга.

Образцы могут быть получены из одной железы или являться смесью секре­тов различных желез (смешанная слюна). Легкость в сборе слюны делает ее иде­альной для самостоятельного исследования дома и в случаях, когда взятие крови не желательно, например у новорожденных. Ограничения в использовании слю­ны связаны с ее вязкостью и недостаточным объемом.

Правила сбора слюны

Существует несколько способов сбора: смешанную слюну выплевывают изо рта или отсасывают со дна рта одноразовым шприцем и переносят в пробирку с транспортной средой. Также сбор слюны может осуществляться с помощью уст­ройств (тампонов, шариков), состоящих из различных адсорбирующих материа­лов (хлопок, вискоза, полимеры).

ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ ПРОЦЕСС ТРАНСПОРТИРОВКИ И ХРАНЕНИЯ
БИОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА НА ПРЕАНАЛИТИЧЕСКОМ ЭТАПЕ

Важнейшим моментом в обеспечении качества клинических лабораторных ис­следований является доставка проб биологического материала в лабораторию. Транс­портировка образцов в лабораторию может осуществляться различными путями.

Если взятие и сбор биологического материала производится в том же учреж­дении, где расположена лаборатория, то контейнеры с образцами должны быть доставлены как можно быстрее, максимум в течение 2 ч (быстрая транспорти­ровка). Быстрая транспортировка увеличивает достоверность результатов лабо­раторных исследований. Охлаждение, использование транспортной среды или консерванта не обязательно.

Несколько другие требования предъявляются к биологическому материалу, взятому и собранному в других учреждениях, который требует длительной транс­портировки (отсроченная транспортировка).

При отсроченной транспортировке необходимо строго соблюдать опреде­ленные правила безопасности. Не должно возникнуть риска ни для людей, ни для окружающей среды. Кроме того, необходимо обеспечить целостность и герметич­ность образцов биологического материала. Образцы следует упаковывать так, чтобы они противостояли ударам, тряске, изменениям давления, температуры и другим воздействиям внешней среды. Нужно избегать протекания содержимого образцов, прямого воздействия света на них В качестве упаковочного материала при транспортировке нельзя использовать стекло.

Рекомендуется следующая структура упаковки для транспортировки биоло­гического материала:

· внутренний контейнер/упаковка для образцов биологического материала;

адсорбирующий материал (помещается между внутренним и наружным кон­тейнерами);

· наружный контейнер/упаковка, с указанием информации об образце;

коробка, сумка или посылочная упаковка.

Для транспортировки замороженных и охлажденных образцов необходимы специальные контейнеры, поддерживающие необходимую температуру, или пор­тативные холодильники.

Контейнеры с инфекционным материалом должны быть помечены специаль­ной надписью.

Читайте также:  1 кетоновые тела при анализе мочи

В микробиологическую лабораторию посевы транспортируются в термокон­тейнерах (биксах) отдельно от другого клинического материала.

Важным фактором обеспечения качества клинических лабораторных иссле­дований является время доставки биологического материала в лабораторию, ко­торое должно быть четко определено и постоянно контролироваться каждые 30/60 мин. Время взятия биологического материала обязательно указывается в за­явках или направлениях на лабораторные исследования.

ТРЕБОВАНИЯ К ТРАНСПОРТИРОВКЕ БИОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА.

Правила центрифугирования

Центрифугирование крови для получения сыворотки проводится через 30 мин после взятия (время полного сворачивания крови).

Кровь для получения сыворотки или плазмы центрифугируют в течение 10-15 мин при ускорении 1000-1200 g.

Кровь с добавлением цитрата центрифугируют 15 мин при 2000 g. Для получе­ния плазмы, свободной от тромбоцитов, центрифугирование длится 15-30 мин при 2000-3000 g.

Центрифугирование крови в пробирках малого объема с антикоагулянтом и без него, а также капиллярной крови выполняется в микроцентрифугах при 6000-15 000 g в течение 90 с.

Центрифугирование обычно проводится при температуре от 20 до 22 °С. Для аналитов (адренокортикотропный гормон, ренин), которые неустойчивы при комнатной температуре, центрифугирование осуществляется при +4 °С. Однако следует учитывать, что охлаждение может привести к выходу калия из клеток.

После взятия сыворотки или плазмы образцы крови не следует подвергать повторному центрифугированию.

При осаждении гепаринизированной крови сила и время центрифугирова­ния должны быть достаточными для удаления из плазмы кровяных пластинок.

Недостаточно полное осаждение тромбоцитов приведет к серьезному увеличе­нию концентрации калия, лактатдегидрогеназы, кислой фосфатазы и неорганиче­ских фосфатов.

Для получения осадка мочи транссудата, экссудата и другой биологической жидкости на микроскопическое исследование центрифугирование проводят при ускорении 800 g в течение 10 минут при комнатной температуре.

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1.Долгов В.В., Мошкин А.В., Малахов В.Н. и др. Обеспечение качества в лабо­раторной медицине: Учеб. пособие. М.: РМАПО, 1997.

2. Козлов А.В. и др. Влияние лекарственных препаратов на лабораторные по­казатели: Учеб. пособие для врачей-слушателей. СПб.: МАПО, 1997.

3. Кудрявцева Л.В., Конарева Т.Н., Горбатенко Е.В., Попова Т.И., Говорун В.М. Правила взятия и доставки биологического материала для лабораторных исследо­ваний в НПФ «ЛИТЕХ»: Методическое пособие для врачей-клиницистов. М., 2004.

4. Меньшиков В.В., Пименова Л.М., Кишкун А.А. Правила ведения преаналитического этапа клинических лабораторных исследований: Проект нормативного документа. Лабораторная диагностика России, 2004-2005.

5. Методические рекомендации «Забор, транспортировка, хранение клиниче­ского материала для ПЦР-диагностики». Министерство здравоохранения РФ. Цен­тральный научно-исследовательский институт эпидемиологии МЗ РФ. М., 2004.

6. Медицинская лабораторная диагностика (Программы и алгоритмы): Спра­вочник / Под ред. А.И. Карпищенко. СПб.: Интермедика. 1997.

7. Назаренко Г.И., Кишкун А.А. Клиническая оценка результатов лабораторных исследований. М.: Медицина, 2000.

8. Назаренко Г.И., Кишкун А.А. Управление качеством лабораторных исследований. М.: Медицина, 2001.

9. Руководство «Преаналитический этап лабораторного анализа». Чешская система внешнего контроля качества по рекомендации Чешского общества кли­нической биохимии ЧЛС ЕП. Пардубице. 1999. Адаптированный перевод канд.мед. наук Почтарь М.Е.

10. Синельников Р.Д., Синельников Я.Р. Атлас анатомии человека. М.: Медици­на, 1992.

11. Dennis J. Ernst MT, Catherine Ernst R.N. Phlebotomy for Nurses and Nursing Personnel «HealthStar Press», January 1,2001.

12. D. Garza, K. Becan-Mc.Bride. Phlebotomy Handbook. 6 r Edition,»Prentice Hall». 2002.

13. NCCLS. H3-A4, Procedures for the Collection of Diagnostic Blood Specimens by Venipuncture; Approved Standard-Fourth Edition. NCCLS document H3-A4 [ISBN 1-56238-350-7] NCCLS, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wavne, Pennsylvania 19087 USA, 1998.

14. S. Narayanan. The preanalytic phase. An important component of laboratory medicine // Am. J. Clin. Pathol. 2000. № 113. P. 429-452.

15. Ruth £., Bs, Mt McCall, Cathee M., Bs, Mt, Cls, Tankersley. Phlebotomy Essentials, «Lippincott Williams & Wilkins Publishers; 3rd edition», 2002

СТАНДАРТНЫЕ ОПЕРАЦИОННЫЕ ПРОЦЕДУРЫ ВЕДЕНИЯ ПРЕАНАЛИТИЧЕСКОГО ЭТАПА ДЕЯТЕЛЬНОСТИ КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ЛАБОРАТОРИЙ

O.А. Тарасенко — канд. мед. наук, зав. диагностико-серологической лабораторией,

О.Н. Осипова — врач клинической лабораторной диагностики,

Ю.Ф. Тарасенко — врач клинической лабораторной диагностики,

М.В. Еремина — врач клинической лабораторной диагностики,

Станция переливания крови Департамента здравоохранения г. Москвы

Развитие лабораторной диагностики в последние годы привело к расширению номенклатуры лабораторных анализов, результаты которых играют все большую роль в диагностике и выборе тактики лечения больных. В свою очередь с увели­чением объема лабораторных исследований растет количество ошибочных дан­ных, которые могут отрицательно влиять на диагностический и лечебный про­цессы, повышать стоимость лабораторных анализов (повторные пробы, контроль и т. д.) и соответственно увеличивать расходы здравоохранения. Даже если мето­дика выполнения анализа полностью соблюдена, на его результаты все равно мо­гут влиять различные факторы. Главными причинами лабораторных ошибок (60-80%) являются преаналитические факторы, такие как неправильные взятие пробы, обращение с образцом и его транспортировка и т. д.

Так, например, при взятии капиллярной крови сильно влияние факторов, ко­торые могут существенно изменять исследуемые показатели (глубина прокола кожи, форма и острота скарификатора, сдавление пальца, разбавление пробы межклеточной жидкостью, активация свертывания при контакте с тканевыми ак­тиваторами и т. д.). Поэтому для обеспечения максимальной стандартизации об­разцов рекомендуется проводить исследования проб венозной крови. Взятие ве­нозной крови для проведения анализов является самой частой инвазивной процедурой. При этом ее кажущаяся простота и отсутствие четких стандартов проведения, а также использование устаревших материалов (стеклянные пробир­ки, самостоятельное приготовление добавок и т. д.) приводят к ошибкам на преаналитическом этапе, вызывающим большие потери материальных средств и ра­бочего времени медперсонала из-за назначения повторных анализов, расхода дорогостоящих реагентов и т. д.

Для уменьшения количества ошибок на преаналитическом этапе необходи­мо соблюдать выполнение стандартных операционных процедур (СОП). Ниже представлены СОП, которые могут быть использованы заведующими КДЛ для разработки собственных документов в деятельности клинико-диагностических лабораторий и процедурных кабинетов ЛПУ

Область применения СОП

Главным образом СОП используются:

  • при технологическом процессе подготовки пациента к лабораторным иссле­дованиям;
  • венепункции, взятии капиллярной крови;
  • взятии, сборе биологического материала;
  • центрифугировании биологического материала;
  • транспортировке биологического материала в лабораторию.

Поперечные профили набережных и береговой полосы: На городских территориях берегоукрепление проектируют с учетом технических и экономических требований, но особое значение придают эстетическим.

Опора деревянной одностоечной и способы укрепление угловых опор: Опоры ВЛ — конструкции, предназначен­ные для поддерживания проводов на необходимой высоте над землей, водой.

Механическое удерживание земляных масс: Механическое удерживание земляных масс на склоне обеспечивают контрфорсными сооружениями различных конструкций.

источник

Цель: диагностическая: определение количества клеточных элементов (эритроцитов, лейкоцитов, цилиндров). Показание: по назначению врача (при заболеваниях почек). Приготовьте: чистую сухую стеклянную банку 50-100 мл с широким горлом; напишите и наклейте направление (отделение, № палаты, ФИО пациента, цель исследования, дата, подпись м/с). Алгоритм действия: 1. Проведите инструктаж с пациентом о порядке сбора мочи для исследования. 2. Проведите деконтаминацию рук на гигиеническом уровне, наденьте перчатки. 3. Подмойте наружные половые органы пациента в направлении спереди назад. 4. Первую порцию струи ночи пациент должен выпустить в унитаз (мочеприемник, судно) на счет «1», «2» и задержать мочеиспускание. 5. Соберите в приготовленную банку среднюю порцию струи ночи в количестве 50 мл. 6. Отправьте собранную мочу в лабораторию.

7. Снимите перчатки, вымойте и осушите руки.

Примечание: исследование мочи можно проводить в любое время суток. Метод Нечипоренко — это количественный метод определения лейкоцитов, эритроцитов и цилиндров более объективен, чем микроскопия осадка. Метод имеет большое значение для диагностики неясных, скрыто протекающих форм нефрита и пиелонефрита, для динамического наблюдения за больными и для контроля эффективности проводимого лечения.

Показатели форменных элементов в норме: лейкоцитов — до 4000 в 1 мл; эритроцитов — до 1000 в 1 мл; цилиндров — отсутствуют.

Цель: диагностическая: исследование выделительной и концентрационной функции почек, определение суточного диуреза (дневного и ночного). Показание: заболевания почек. Приготовьте: 8 чистых сухих стеклянных банок 500 мл с широким горлом; напишите и подклейте на каждой банке направление (отделение, № палаты, ФИО, цель исследования, № порции, время сбора, дата, подпись м/с). Алгоритм действия: 1. Проведите инструктаж с пациентом о порядке сбора мочи для исследования: перед проведением исследования отменяются мочегонные препараты, ограничиваются пациентом употребление жидкости до 1,5 л в сутки, чтобы не произошло увеличения диуреза и снижения относительной плотности ночи, при сборе ночи учитывается количество выпитой жидкости за сутки. 2. В 6 часов утра пациент должен опорожнить мочевой пузырь в унитаз. 3. Затем собирайте мочу в отдельные пронумерованные банки каждые 3 часа: порция №1 с 6 до 9 часов; порция №2 с 9 до 12 часов; порция №3 с 12 до 15 часов; порция №4 с 15 до 18 часов; порция №5 с 18 до21 часа; порция №6 с 21 до 24 часов; порция №7 с 24 до 3 часов; порция №8 с 3 до 6 часов. 4. Медицинская сестра в период с 24 до 6 часов утра должна будить пациента для сбора мочи. 5. Утром следующего дня отправьте все 8 порций мочи в лабораторию.

Примечание: — если моча не поместилась в приготовленную банку, то она собирается в дополнительную и на этикетке необходимо отметить — «дополнительная моча к порция №. » — при отсутствии мочи в какой-либо порций на анализ отправляется пустая банка.

Проба Зимницкого — это функциональная почечная проба, основанная на определения количества и относительной плотности мочи в 8 трехчасовых порциях в течение 1 суток. Эта проба определяет концентрационную функцию почек и ее широко используют в клинических условиях у лиц, страдающих заболеваниями почек. По удельному весу каждой порция определяют диапазон колебаний удельного веса и величину наибольшего удельного веса в одной из порций мочи. Сравнивая количества мочи отдельных порций, определяют диапазон колебаний количества мочи отдельных порций. Для нормальной функции почек характерно: 1. Суточный диурез около 1,5 л. 2. Выделение с ночей 60 — 80% всей выпитой за сутки жидкости. 3. Значительное преобладание дневного диуреза над ночным. 4. Удельный вес хотя бы в одной из порций не ниже 1,020 — 1,025. 5. Значительные колебания в течение суток количества мочи в отдельных порциях и удельного веса.

источник

НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Технологии лабораторные клинические

ОБЕСПЕЧЕНИЕ КАЧЕСТВА КЛИНИЧЕСКИХ ЛАБОРАТОРНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Правила ведения преаналитического этапа

Clinical laboratory technologies. Quality assurance of clinical laboratory tests. Part 4. Rules for conducting of preanalytical stage

Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. N 184-ФЗ «О техническом регулировании», а правила применения национальных стандартов Российской Федерации — ГОСТ Р 1.0-2004 «Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения»

Сведения о стандарте

1 РАЗРАБОТАН Лабораторией проблем клинико-лабораторной диагностики Московской медицинской академии им. И.М.Сеченова Росздрава, кафедрой биохимии Российской медицинской академии последипломного образования Росздрава

2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 466 «Медицинские технологии»

4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежемесячно издаваемых информационных указателях «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет

Настоящий стандарт устанавливает требования к условиям и процедурам ведения преаналитического этапа клинических лабораторных исследований с целью исключения или ограничения влияния эндогенных, экзогенных, ятрогенных и иных факторов, мешающих правильному отражению состояния внутренней среды обследуемых пациентов в результатах клинических лабораторных исследований.

Настоящий стандарт может использоваться всеми организациями, учреждениями и предприятиями, а также индивидуальными предпринимателями, деятельность которых связана с оказанием медицинской помощи.

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие национальные стандарты:

ГОСТ Р ИСО 15189-2006 Лаборатории медицинские. Специальные требования к качеству и компетентности

ГОСТ Р ИСО 15190-2007* Лаборатории медицинские. Требования к безопасности
_______________
* Вероятно ошибка оригинала. Следует читать ГОСТ Р 52905-2007 (ИСО 15190:2003) Лаборатории медицинские. Требования к безопасности, здесь и далее по тексту. — Примечание изготовителя базы данных.

Примечание — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодно издаваемому информационному указателю «Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

Достоверность отражения в результатах лабораторных исследований состояния внутренней среды пациента, содержания искомых компонентов биологических материалов в значительной степени зависит от условий, в которых пациент находился в период, предшествовавший взятию у него образца биоматериала, от условий и процедур взятия образца, его первичной обработки и транспортирования в лабораторию, то есть от факторов преаналитического этапа клинического лабораторного исследования.

С целью исключения или ограничения влияния внелабораторных факторов преаналитического этапа на результаты лабораторных исследований настоящий стандарт регламентирует:

а) условия периода, предшествующего взятию у пациента образца биологического материала (приложение А);

б) условия и процедуры взятия образца биологического материала у пациента;

в) процедуры первичной обработки образца биологического материала;

г) условия хранения и транспортирования образцов биоматериалов в клинико-диагностические лаборатории.

Требования стандарта основаны на:

а) научных данных о постоянных и переменных факторах физического, химического и биологического характера, способных оказать влияние на содержание веществ и клеток в биологических материалах пациентов;

б) обобщенных данных о стабильности компонентов в образцах биологических материалов после их взятия при различных условиях хранения (приложения Б, В, Г);

в) обобщенных данных о влиянии принимаемых пациентом лекарственных средств на результаты лабораторных исследований (приложение Д);

г) требованиях ГОСТ Р ИСО 15189 (раздел 5.4).

Правила предназначены для обеспечения такого качества ведения преаналитического этапа клинических лабораторных исследований, которое необходимо для получения их результатов, достоверно отражающих состояние внутренней среды обследуемых пациентов в момент обследования, путем:

— правильной подготовки пациентов к проведению лабораторных тестов;

— информирования пациентов о требуемых ограничениях в диете, физической активности, курении, о правилах сбора биологических материалов, которые обычно собирает сам пациент (моча, кал);

— инструктирования персонала, участвующего во взятии образцов биологических материалов у пациентов, об особенностях процедур взятия различных видов этих материалов;

— рациональной организации процесса взятия образцов биоматериалов;

— полноценного обеспечения процедур взятия образцов биоматериалов необходимыми инструментами, посудой, средствами первичной обработки и транспортировки.

Принимая во внимание потенциальную биоопасность образцов биологического материала, получаемого от пациентов, персонал, выполняющий эти функции, должен быть информирован и обучен правилам безопасного взятия образцов и должен располагать средствами защиты (перчатки, устройства для безопасного сбора использованных игл и т.п.) в соответствии с требованиями ГОСТ Р ИСО 15190.

Настоящие правила содержат общие положения, которые по отношению к отдельным биологическим материалам и отдельным изучаемым в них аналитам, биологическим объектам могут требовать особых условий и процедур, что должно быть отражено в нормативных документах по технологиям оказания соответствующих простых или комплексных медицинских услуг, применительно к функциям различных категорий клинического персонала.

На основании этих общих правил в каждой медицинской организации следует разрабатывать и вводить для обязательного исполнения внутренние правила ведения преаналитического этапа применительно к каждому виду исследований, выполняемых в лаборатории, учитывающие особенности медицинского профиля и организационной формы учреждения. В случае выполнения исследований в лаборатории другого учреждения правила ведения преаналитического этапа, включая условия транспортирования образцов, применительно к этим исследованиям следует согласовывать с руководителем лаборатории, выполняющей эти исследования. Наличие и исполнение персоналом правил ведения преаналитического этапа лабораторных исследований является одним из обязательных условий при сертификации процессов выполнения исследований в клинико-диагностической лаборатории.

Взятие образца или пробы — это процесс изъятия или образования проб, охарактеризованный процедурой их взятия, то есть оперативными требованиями и/или инструкциями для отбора, изъятия и подготовки одной или нескольких проб из инспектируемого лота для выяснения характеристик этого лота (в лабораторной медицине инспектируемый лот — это обследуемый пациент, а образцы или пробы — это порции того или иного биологического материала).

3.2.1 Биологический материал — кровь

Большая часть клинических лабораторных исследований проводится в образцах крови: венозной, артериальной или капиллярной. Венозная кровь — лучший материал для определения гематологических, биохимических, гормональных, серологических и иммунологических показателей.

Для исследования аналитов в цельной крови, сыворотке или плазме образец крови берут чаще всего из локтевой вены. Показания для взятия крови из пальца на клиническое исследование крови:

— при ожогах, занимающих большую площадь поверхности тела пациента;

— при наличии у пациента очень мелких вен или когда они труднодоступны;

— при выраженном ожирении пациента;

— при установленной склонности к венозному тромбозу;

— у новорожденных.

При взятии образца крови из венозного или артериального катетера, через который проводилось вливание инфузионного раствора, катетер следует предварительно промыть изотоническим солевым раствором в объеме, соответствующем объему катетера, и отбросить первые 5 мл (миллилитров) взятой из катетера крови. Недостаточное промывание катетера может привести к загрязнению образца крови препаратами, вводившимися через катетер. Из катетеров, обработанных гепарином, нельзя брать образцы крови для исследований системы свертывания крови.

В зависимости от назначенного вида исследования образец крови должен собираться при наличии строго определенных добавок [1]. Для получения плазмы кровь собирают с добавлением антикоагулянтов: этилендиаминтетрауксусной кислоты, цитрата, оксалата, гепарина [2]. Для исследований системы свертывания крови применяется только цитратная плазма (в точном соотношении одной части 3,8%-ного (0,129 моль/л) раствора цитрата натрия и девяти частей крови). В большинстве гематологических исследований используют венозную кровь с солями этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА, К или К -ЭДТА). Для получения сыворотки кровь собирают без антикоагулянтов. Для исследования глюкозы кровь собирают с добавлением ингибиторов гликолиза (фтористого натрия или йодоацетата).

Для исследования ряда нестабильных гормонов (остеокальцина, кальцитонина, адренокортикотропного гормона) используют ингибитор апротинин.

Для получения из образцов крови вариантов проб для различных видов исследований рекомендуется следующая последовательность наполнения пробирок:

— кровь без добавок — для получения гемокультуры, используемой в микробиологических исследованиях;

— кровь без антикоагулянтов — для получения сыворотки, используемой при клинико-химических и серологических исследованиях;

— кровь с цитратом — для получения плазмы, используемой при коагулологических исследованиях;

— кровь с гепарином — для получения плазмы, используемой при биохимических исследованиях;

— кровь с ЭДТА — для получения цельной крови, используемой для гематологических исследований, и плазмы, используемой для некоторых клинико-химических исследований.

С целью сохранения в образце крови эритроцитов применяют смесь антикоагулянтов с добавками, например, АЦД (антикоагулянт — цитрат-декстроза или кислота-цитрат-декстроза).

Во избежание ятрогенной анемизации пациентов объем забираемой для исследований крови должен быть рационально рассчитан, исходя из того, что в конечном итоге непосредственно для анализа расходуется лишь половина от первоначально взятого объема (с учетом использования сыворотки или плазмы при гематокрите 0,5).

Читайте также:  1500 эритроцитов в анализе мочи

При использовании современных анализаторов достаточны следующие объемы образцов:

— для биохимических исследований: 4-5 мл; при использовании гепаринизированной плазмы: 3-4 мл;

— для гематологических исследований: 2-3 мл крови с ЭДТА;

— для исследований свертывающей системы: 2-3 мл цитратной крови;

— для иммуноисследований, включая исследования белков и др.: 1 мл цельной крови для 3-4 иммуноанализов;

— для исследования скорости оседания эритроцитов: 2-3 мл цитратной крови;

— для исследования газов крови: капиллярная кровь — 50 мкл (микролитров); артериальная или венозная кровь с гепарином — 1 мл.

Рационально применение пробирок для взятия крови небольшого объема (4-5 мл) при соотношении диаметра и высоты пробирки 13 на 75 мм. Использование плазмы вместо сыворотки дает увеличение на 15%-20% выхода анализируемого материала при одном и том же объеме взятой у пациента крови. Взятие венозной крови облегчается применением вакуумных пробирок. Под влиянием вакуума кровь из вены быстро поступает в пробирку, что упрощает процедуру взятия и сокращает время наложения жгута.

Для обозначения содержимого пробирок с различными добавочными компонентами применяют цветное кодирование закрывающих их пробок. Так, для пробирок с антикоагулянтами лиловый цвет пробки означает наличие ЭДТА, зеленый цвет — гепарина, голубой — цитрата. Добавление в пробирку ингибиторов гликолиза (фторида, йодацетата) как одних, так и в комбинации с антикоагулянтами (гепарином, ЭДТА), кодируется пробкой серого цвета (см. таблицу 1).

Таблица 1 — Добавки в пробирках с цветным кодом

Пустая, без добавок, для сыворотки

Гематология и отдельные химические анализы в плазме

Цитрат натрия (0,105-0,129 моль/л)

Фторид натрия (2-4 мг/мл)/оксалат калия (1-3 мг/мл)

Примечание — Пробирки, содержащие кислоту-цитрат-декстрозу (АЦД, формула А и В) используют для сохранения клеток и кодируют желтым цветом.

3.2.2 Биологический материал — спинномозговая жидкость

Взятие образца спинномозговой жидкости производят в строгом соответствии с утвержденной в установленном порядке процедурой и по возможности вскоре после взятия крови для исследований в сыворотке, с результатами которых данные в спинномозговой жидкости сопоставляют.

Первые 0,5 мл и всю спинномозговую жидкость (далее — СМЖ) с примесью крови следует удалить. Рекомендуемые объемы проб СМЖ — в соответствии с таблицей 2.

Таблица 2 — Рекомендуемые объемы проб СМЖ

Супернатант, используемый для клинической химии

Пробу помещают с соблюдением правил асептики в пробирки с пробками (для микробиологических исследований — в стерильные, для цитологических и клинико-химических исследований — в свободные от частиц пыли, без ЭДТА и фторида).

3.2.3 Биологический материал — моча

В зависимости от цели исследования образцы мочи собирают либо в виде отдельных порций, либо за определенный промежуток времени. Первая утренняя порция мочи (натощак, сразу после сна) используется для общего анализа, вторая утренняя порция мочи — для количественных исследований в соотношении с выделением креатинина и для бактериологического исследования, случайная порция — для качественных или количественных клинико-химических исследований, суточная моча — для количественного определения экскреции аналитов.

Желательно использовать сосуд с широкой горловиной и крышкой, по возможности надо собирать мочу сразу в посуду, в которой она будет доставлена в лабораторию. Мочу из судна, утки, горшка брать нельзя, так как даже после прополаскивания этих сосудов может сохраняться осадок фосфатов, способствующих разложению свежей мочи. Если в лабораторию доставляется не вся собранная моча, то перед сливанием ее части необходимо тщательное взбалтывание, чтобы осадок, содержащий форменные элементы и кристаллы, не был утрачен.

При взятии утренней мочи (например, для общего анализа) собирают всю порцию утренней мочи (желательно, чтобы предыдущее мочеиспускание было не позже, чем в два часа ночи) в сухую, чистую, но не стерильную посуду, при свободном мочеиспускании. При сборе суточной мочи пациент собирает ее в течение 24 ч на обычном питьевом режиме [1,5-2 л (литра) в сутки]. Утром в 6-8 ч он освобождает мочевой пузырь (эту порцию мочи выливают), а затем в течение суток собирает всю мочу в чистый сосуд с широкой горловиной и плотно закрывающейся крышкой, емкостью не менее 2 л. Последняя порция берется точно в то же время, когда накануне был начат сбор (время начала и конца сбора отмечают). Если не вся моча направляется в лабораторию, то количество суточной мочи измеряют мерным цилиндром, отливают часть в чистый сосуд, в котором ее доставляют в лабораторию, и обязательно указывают объем суточной мочи.

Если для анализа требуется собрать мочу за 10-12 ч, сбор обычно проводят в ночное время: перед сном больной опорожняет мочевой пузырь и отмечает время (эту порцию мочи отбрасывают), затем больной мочится через 10-12 ч в приготовленную посуду, эту порцию мочи доставляют для исследований в лабораторию. При невозможности удержать мочеиспускание 10-12 ч, больной мочится в приготовленную посуду в несколько приемов и отмечает время последнего мочеиспускания.

При необходимости сбора мочи за два или три часа, больной опорожняет мочевой пузырь (эта порция отбрасывается), отмечает время и ровно через 2 или 3 часа собирает мочу для исследования.

При проведении пробы трех сосудов (стаканов) собирают утреннюю порцию мочи следующим образом: утром натощак после пробуждения и тщательного туалета наружных половых органов больной начинает мочиться в первый сосуд, продолжает во второй и заканчивает — в третий. Преобладающей по объему должна быть вторая порция. При диагностике урологических заболеваний у женщин чаще используют пробу двух сосудов, то есть делят при мочеиспускании мочу на две части, важно, чтобы первая часть в этом случае была небольшой по объему. При проведении пробы трех сосудов у мужчин последнюю третью порцию мочи собирают после массажа предстательной железы. Все сосуды готовят предварительно, на каждом обязательно указывают номер порции.

В первую порцию собираемой за сутки мочи в зависимости от назначенного вида исследования добавляют различные консерванты: для большинства компонентов — тимол (несколько кристаллов тимола на 100 мл мочи), для глюкозы, мочевины, мочевой кислоты, калия, кальция, оксалата, цитрата — азид натрия (0,5 или 1,0 г) на все количество суточной мочи, для катехоламинов и их метаболитов, 5-гидрокси-уксусной кислоты, кальция, магния, фосфатов — соляная кислота (25 мл, что соответствует 6 моль/л на объем суточной мочи), для порфиринов, уробилиногена — карбонат натрия, 2 г на литр мочи. Возможно также применение жидкости Мюллера (10 г сульфата натрия, 25 г бихромата калия, 100 мл воды) по 5 мл на 100 мл мочи, борной кислоты по 3-4 гранулы на 100 мл мочи, ледяной уксусной кислоты по 5 мл на все количество суточной мочи, бензоата или фторида натрия по 5 г на все количество суточной мочи. Несколько миллилитров толуола добавляют в сосуд с мочой так, чтобы он тонким слоем покрывал всю поверхность мочи; это дает хороший бактериостатический эффект и не мешает химическим анализам, но вызывает легкую мутность. Формалин, добавленный из расчета приблизительно 3-4 капли на 100 мл мочи, задерживает рост бактерий, хорошо сохраняет клеточные элементы, но мешает при некоторых химических определениях (сахар, индикан). Хлороформ, добавляемый из расчета 2-3 мл хлороформной воды (5 мл хлороформа на 1 л воды) на 100 мл мочи, проявляет недостаточный эффект консервирования, а также неблагоприятно влияет на результаты исследования осадка мочи (изменение клеток) и результаты некоторых химических исследований.

3.2.4 Биологический материал — слюна

Слюну, представляющую собой либо продукт только одной железы, либо смесь секретов нескольких желез, допускается использовать для исследования ряда гормонов и лекарственных веществ, в том числе для лекарственного мониторинга. Сбор слюны может осуществляться с помощью устройств (тампонов, шариков), состоящих из различных абсорбирующих материалов (хлопка, вискозы, полимеров).

3.2.5 Биологический материал — кал

Кал для исследования должен быть собран в чистую сухую посуду с широкой горловиной, желательно стеклянную (не следует собирать кал в баночки и флаконы с узким горлом, а также в коробочки, спичечные коробки, бумагу и т.д.). Следует избегать примеси к испражнениям мочи, выделений из половых органов и других веществ, в том числе лекарств. Если для какого-либо химического определения (например, уробилиногена) нужно точно знать количество выделенного кала, то посуду, в которую собирают испражнения, нужно предварительно взвесить.

При взятии образцов для бактериологических исследований особенное внимание должно быть уделено предотвращению загрязнения. Содержимое абсцесса следует набирать через кожу, если это возможно, поскольку ее легче дезинфицировать, чем слизистые оболочки. Жидкий материал предпочтительнее образцов на тампонах. Секрет, содержащий интерферирующие вторичные микроорганизмы, должен быть удален с поверхности открытой раны, затем образец собирают бактериологическим тампоном круговыми вращательными движениями от центра к периферии раны. Объем пробы должен быть насколько возможно большим. Образцы для культуры крови, если возможно, следует собирать в период повышения температуры тела. При подозрении на инфекционный эндокардит следует брать не менее десяти культур крови.

Образцы для выделения и идентификации вирусов обычно собирают немедленно после появления симптомов (если возможно — в первые три дня). Для анализа используют образцы на тампонах (из носа, гортани, глаз), смывы из глотки, жидкость из пузырьков при кожных поражениях, кал, мочу и спинномозговую жидкость.

При взятии кожных образцов для микологических исследований соскобы с зон активного поражения берут с помощью скальпеля после тщательной дезинфекции участка кожи. При отложениях на волосах их образцы берут с помощью эпиляционной пипетки или остригают. При поражении ногтей берут их срезы и соскобы с нижней части ногтей. Для обнаружения дрожжей в моче используют случайный образец мочи, для детекции дрожжей или грибков в мокроте предпочтительнее использовать ее утренний образец.

При диагностике паразитарных заболеваний исследуют кровь (для обнаружения плазмодиев, трипаносомы, лейшмании, микрофилярии), кал (для обнаружения лямблии, гельминтов), образцы тканей пораженных органов (для обнаружения Trichinella spiralis larvae, Echinococcus) или самих паразитов (артроподы: клещи, насекомые), мочу (при мочеполовом шистозомозе). ПЦР-анализ может быть проведен в образцах: крови с ЭДТУК и цитратом, высушенной крови (на фильтровальной бумаге), костного мозга, мокроты, жидкости из полости рта, бронхиальной лаважной жидкости, спинномозговой жидкости, мочи, кала, биопсийного материала, культуре клеток, фиксированной или покрытой (парафинированной) ткани и т.д. Важным условием получения достоверных результатов является предотвращение загрязнения образцов экзогенной дезоксирибонуклеиновой кислотой (ДНК), обычными источниками которой являются волосы и кожа людей, дверные ручки, лабораторная мебель, порошки, реагенты, термоциклер и наконечники пипеток. Идеальным средством создания чистой беспылевой среды служат настольные шкафы с ламинарным потоком профильтрованного воздуха. Взятие образцов для молекулярно-биологических исследований лучше всего проводить в закрытые одноразовые системы, которые должны быть свободны от нуклеаз, для чего подвергаются автоклавированию в токе горячего воздуха. При использовании незакрытых систем для взятия проб следует, по меньшей мере, надевать одноразовые перчатки. Стеклянная посуда должна обрабатываться 1%-ным раствором диэтилпирокарбоната, который тормозит РНКазы. Оставшийся препарат следует тщательно удалить путем автоклавировения посуды и последующей ее обработки жаром при температуре 250 °С в течение 4 ч.

3.4.1 Правила оформления направления на лабораторные исследования

Заявки на анализы должны быть согласованы со всеми врачами-специалистами, участвующими в лечении больного, чтобы при венепункции взять материал для всех необходимых исследований и не повторять процедуру. Медицинская сестра должна собрать все заявки данного пациента и дать суммарную заявку на анализы (применительно только к стационару). Если пациент будет переведен в другое отделение, то она также должна предупредить лабораторию об этом, чтобы результаты исследований были направлены в нужное отделение и не утеряны.

В направлении на лабораторные исследования (заявке) должны быть отображены следующие данные:

— дата и время назначения;

— дата и время взятия крови (сбора биологического материала);

— фамилия и инициалы пациента;

— отделение, номер истории болезни, номер палаты;

— возраст, пол;

— диагноз;

— время приема последней дозы препаратов, способных повлиять на результата анализа;

— фамилия и инициалы лечащего врача, назначившего исследование;

— перечень необходимых исследований;

— подпись специалиста, проводившего взятие крови или другого биологического материала.

3.4.2 Правила первичной обработки образца биоматериала

Важнейшей процедурой первичной обработки образцов биоматериалов после взятия их у пациентов является их кодирование с целью последующей надежной их идентификации. Кодирование видов образцов по характеру внесенных в них добавок закреплено с помощью разного цвета крышек пробирок, содержащих соответствующие добавки: красный/белый — без добавок, для сыворотки, клинико-химические исследования, серология; зеленый — гепарин, для плазмы, клинико-химические исследования; фиолетовый — ЭДТА, для плазмы, гематологические исследования; голубой — цитрат натрия, для коагулологических исследований; серый — фторид натрия, для исследования глюкозы, лактата. Идентификация образцов от определенных пациентов наиболее рациональна с помощью штрих-кодов, в которых отражены идентификационные признаки пациентов: фамилия, клиническое отделение, фамилия лечащего врача и т.п. Штрих-коды изготавливают в месте взятия образца (при доставке проб из другой лаборатории маркировку допускается проводить в лаборатории, выполняющей анализ) и считывают с помощью специального устройства в клинической лаборатории. В небольших учреждениях возможно ручное кодирование пробирок нанесением на них карандашом по стеклу или фломастером условных знаков, цифр.

Другие процедуры первичной обработки образцов биоматериалов по месту их взятия зависят от общей организации лабораторного обеспечения в данном учреждении. Если процедурные кабинеты расположены в том же здании, что и лаборатория, то контейнеры с образцами следует как можно скорее доставлять в лабораторию, где и будут осуществляться все дальнейшие действия.

Пробы, содержащие инфекционные агенты, следует обрабатывать иначе, чем пробы с относительно небольшим риском инфицирования (подобно большинству проб крови, сыворотки, мочи, кала, тампонам, мазкам и фильтровальным бумажкам).

3.4.2.1 Биологический материал — кровь

При необходимости более длительного транспортирования в лабораторию образцы свернувшейся крови (обычно свертывание происходит в течение 30 мин), предназначенные для получения сыворотки, должны быть отцентрифугированы на месте не позднее, чем через 1 ч после взятия образца. Кровь для получения сыворотки или плазмы центрифугируют в течение 10-15 мин при ускорении 1000-1200 g (оборотов в минуту). Цитратную плазму для исследований системы свертывания крови центрифугируют в течение 15 мин при 2000 g; для получения плазмы, свободной от тромбоцитов, центрифугирование длится 15-30 мин при 2000-3000 g. Центрифугирование пробирок с капиллярной кровью выполняется при 6000-15000 g в течение 90 с. Обычно центрифугирование проводят при температуре 20 °С — 22 °С. Для отдельных аналитов может требоваться центрифугирование при температуре 4 °С, 6 °С. Мазки крови для дифференциального подсчета лейкоцитов должны быть подготовлены не позднее, чем через 3 ч после взятия образца.

Поскольку нуклеиновые кислоты быстро распадаются, образцы для молекулярно-биологических исследований следует быстро подвергать стабилизации путем инактивации ДНКаз и РНКаз с помощью хаотропных веществ (гуанидин-изотиоцианат — ГИТЦ) и органического растворителя, например, фенола. Конечная концентрация ГИТЦ в стабилизированной пробе должна быть не ниже чем 4 моль/л. Стабилизированный таким способом материал не должен охлаждаться во избежание кристаллизации ГИТЦ. Кровь с ЭДТА для экстракции ДНК из лейкоцитов не требует стабилизации.

3.4.2.2 Биологический материал — кал

Вегетативные формы паразитов можно обнаружить только в свежих образцах кала в течение 40 мин после испражнения при условии его хранения при температуре 4 °С. Цисты стабильны. Для концентрации паразитов и их сохранения в образцах кала обычно применяют растворы мертиолят-йод-формалин и ацетат натрия-формалин.

3.5 Требования к условиям хранения и транспортирования образцов биоматериалов в клиническую лабораторию

Условия хранения образцов биоматериалов, взятых у пациентов, определяются стабильностью в этих условиях искомых аналитов. Максимально допускаемая нестабильность, выраженная в процентном отклонении результата после хранения от исходного уровня, не должна превышать половины размера общей ошибки определения, рассчитываемой из суммы биологической и аналитической вариации данного аналита. Максимально допускаемое время хранения измеряется периодом времени, в течение которого в 95% образцов содержание аналита сохраняется на исходном уровне.

Стабильность аналитов в различных видах образцов (крови, мочи, спинномозговой жидкости) и проб (сыворотке, плазме, осадке, мазке крови) неодинакова [2] (см. приложения Б, В, Г). Данные о стабильности проб следует учитывать и при их хранении после поступления в лабораторию. В отношении аналитов, нестабильных на свету, должны быть соблюдены соответствующие предосторожности (сбор материала в темную посуду, защита образца от прямого света).

3.5.1 Биологический материал — кровь

Содержание электролитов, субстратов, некоторых ферментов может не изменяться при хранении образцов сыворотки крови при температуре холодильника 4 °С в течение до четырех дней. Гемоглобин, эритроциты стабильны в течение одного дня при хранении в закрытой пробирке. Хранение образцов плазмы крови, предназначенной для исследований свертывающей системы, в условиях комнатной температуры более 4 ч не рекомендуется.

Исследование газов крови следует проводить немедленно; при невозможности неотложного исследования — образцы в закрытых стеклянных контейнерах могут храниться в бане с ледяной водой до 2 ч.

При транспортировании в лабораторию контейнеры с образцами крови следует предохранять от тряски во избежание развития гемолиза. Температура ниже 4 °С и выше 30 °С может существенно изменить содержание в образце многих аналитов. Образцы цельной крови пересылке не подлежат.

3.5.2 Биологический материал — моча

Собранную мочу как можно быстрее доставляют в лабораторию. Длительное хранение мочи при комнатной температуре приводит к изменению физических свойств, разрушению клеток и размножению бактерий. Моча, собранная для общего анализа, может храниться не более 1,5-2,0 ч обязательно в холодильнике, применение консервантов нежелательно, но допускается, если между мочеиспусканием и исследованием проходит более 2 ч. Наиболее приемлемый способ сохранения мочи — охлаждение (можно хранить в холодильнике, но не замораживать). При охлаждении не разрушаются форменные элементы, но возможно влияние на результаты определения относительной плотности.

3.5.3 Биологический материал — спинномозговая жидкость

При исследовании в пределах 1 ч пробу не охлаждают. Для транспортирования проб СМЖ используют закрытые пробирки. При исследовании в пределах трех часов — хранить на льду, не замораживать, не фиксировать, не добавлять консерванты. Транспортирование следует осуществлять как можно скорее в связи с нестабильностью клеток. Для цитологических исследований следует отсылать препараты, полученные путем цитоцентрифугирования пробы СМЖ (20 мин при 180 g), которые стабильны в течение 4-6 дней при комнатной температуре. Для длительного хранения после отделения клеток с помощью центрифугирования пробу следует быстро заморозить до минус 70 °С в тщательно закупоренном полипропиленовом сосуде.

3.5.4 Доставка в лабораторию биоматериалов для микробиологического исследования

Доставка в лабораторию любого образца биоматериала, предназначаемого для микробиологического исследования, должна длиться не более двух часов после взятия материала. Даже наиболее совершенная транспортная система не может служить заменой быстрому транспортированию и немедленному исследованию образца. Требования к транспортированию и хранению бактериологических проб приведены в таблице 3. Если соблюдение этих условий не может быть обеспечено, рекомендуется инокуляция во флакон для культур крови или в гемофлакон или, например, для проб мочи, использование погружных слайдов.

Таблица 3 — Условия транспортирования и хранения образцов различных биоматериалов для бактериологических исследований

источник