Меню Рубрики

Качественные и количественные методы анализа мочи

Патологическая протеинурия является одним из наиболее важных и постоянных признаков заболеваний почек и мочевых путей. Определение концентрации белка в моче является обязательным и важным элементом исследования мочи. Выявление и количественная оценка протеинурии важна не только в диагностике многих первичных и вторичных заболеваний почек, оценка изменения выраженности протеинурии в динамике несет информацию о течении патологического процесса, об эффективности проводимого лечения. Обнаружение белка в моче даже в следовых количествах должно настораживать в отношении возможного заболевания почек или мочевых путей и требует повторного анализа. Особо следует отметить бессмысленность исследования мочи и, в частности, определения белка мочи без соблюдения всех правил ее сбора.

Все методы определения белка в моче можно разделить на:

  • Качественные,
  • Полуколичественные,
  • Количественные.

Все качественные пробы на белок в моче основаны на способности белков к денатурации под влиянием различных физических и химических факторов. При наличии белка в исследуемом образце мочи появляется либо помутнение, либо выпадение хлопьевидного осадка.

Условия определения белка в моче на основе реакции коагуляции:

  1. Моча должна иметь кислую реакцию. Мочу щелочной реакции подкисляют несколькими (2 — 3) каплями уксусной кислоты (5 – 10%).
  2. Моча должна быть прозрачной. Помутнение устраняется через бумажный фильтр. Если помутнение не исчезает, добавляют тальк или жженую магнезию (около 1 чайной ложки на 100 мл мочи), взбалтывают и фильтруют.
  3. Качественную пробу следует проводить в двух пробирках, одна из них – контрольная.
  4. Искать помутнение следует на черном фоне в проходящем свете.

К качественным методам определения белка в моче относятся:

Как показывают многочисленные исследования, ни один из большого числа известных методов качественного определения белка в моче не позволяет получать надежные и воспроизводимые результаты. Несмотря на это, в большинстве КДЛ в России эти методы широко используются в качестве скрининга – в моче с положительной качественной реакцией в дальнейшем проводят количественное определение белка. Из качественных реакций чаще используют пробу Геллера и пробу с сульфосалициловой кислотой, однако пробу с сульфосалициловой кислотой большей частью считают наиболее подходящей для выявления патологической протеинурии. Проба с кипячением в настоящее время практически не используется в связи с ее трудоемкостью и длительностью.

В основе метода Брандберга-Робертса-Стольникова лежит кольцевая проба Геллера, поэтому при данном методе наблюдаются те же ошибки, что и при пробе Геллера.

В настоящее время для определения белка в моче все чаще используются диагностические полоски. Для полуколичественного определения белка в моче на полоске в качестве индикатора чаще всего используется краситель бромфеноловый синий в цитратном буфере. О содержании белка в моче судят по интенсивности сине-зеленой окраски, развивающейся после контакта реакционной зоны с мочой. Результат оценивается визуально или с помощью анализаторов мочи. Несмотря на большую популярность и очевидные преимущества методов сухой химии (простота, скорость выполнения анализа) данные методы анализа мочи в целом и определения белка в частности не лишены серьезных недостатков. Одним из них, приводящих к искажению диагностической информации, является большая чувствительность индикатора бромфенолового синего к альбумину по сравнению с другими белками. В связи с этим, тест-полоски в основном приспособлены к обнаружению селективной гломерулярной протеинурии, когда практически весь белок мочи представлен альбумином. При прогрессировании изменений и переходе селективной гломерулярной протеинурии в неселективную (появление в моче глобулинов) результаты определения белка оказываются заниженными по сравнению с истинными значениями. Данный факт не дает возможности использовать данный метод определения белка в моче для оценки состояния почек (гломерулярного фильтра) в динамике. При тубулярной протеинурии результаты определения белка также оказываются заниженными. Определение белка с помощью диагностических полосок не является надежным индикатором низких уровней протеинурии (большинство выпускаемых в настоящее время диагностических полосок не обладают способностью улавливать белок в моче в концентрации ниже, чем 0,15 г/л). Отрицательные результаты определения белка на полосках не исключают присутствия в моче глобулинов, гемоглобина, уромукоида, белка Бенс-Джонса и других парапротеинов.

Хлопья слизи с высоким содержанием гликопротеидов (например, при воспалительных процессах в мочевых путях, пиурии, бактериурии) могут оседать на индикаторной зоне полоски и приводить к ложноположительным результатам. Ложноположительные результаты могут также быть связаны с высокой концентрацией мочевины. Плохое освещение и нарушение цветоощущения может быть причиной неточного результата.

В связи с этим, использование диагностических полосок следует ограничить скринирующими процедурами, а результаты, полученные с их помощью, следует рассматривать лишь как ориентировочные.

Корректное количественное определение белка в моче в ряде случаев оказывается непростой задачей. Трудности ее решения определяются следующим рядом факторов:

  • низким содержанием белка в моче здорового человека, часто находящимся на пороге чувствительности большинства известных методов;
  • присутствием в моче множества соединений, способных вмешиваться в ход химических реакций;
  • значительными колебаниями содержания и состава белков мочи при различных заболеваниях, затрудняющими выбор адекватного калибровочного материала.

В клинических лабораториях преимущественно применяются так называемые «рутинные» методы определения белка в моче, однако они далеко не всегда позволяют получать удовлетворительные результаты.

С точки зрения специалиста-аналитика, работающего в лаборатории, метод, предназначенный для количественного определения белка в моче, должен отвечать следующим требованиям:

  • обладать линейной зависимостью между поглощением образовавшегося в ходе химической реакции комплекса и содержанием белка в пробе в широком диапазоне концентраций, что позволит избежать дополнительных операций при подготовке пробы к исследованию;
  • должен быть прост, не требовать высокой квалификации исполнителя, выполняться при малом количестве операций;
  • обладать высокой чувствительностью, аналитической надежностью при использовании небольших объемов исследуемого материала;
  • быть устойчивым к воздействию различных факторов (колебаниям состава образца, присутствию лекарственных препаратов и др.);
  • обладать приемлемой стоимостью;
  • быть легко адаптируемым к автоанализаторам;
  • результат определения не должен зависеть от белкового состава исследуемого образца мочи.

Ни один из известных к настоящему времени методов количественного определения белка в моче не может в полной мере претендовать на роль «золотого стандарта».

Количественные методы определения белка в моче можно разделить на турбидиметрические и колориметрические.

К турбидиметрическим методам относятся:

  • определение белка с сульфосалициловой кислотой (ССК),
  • определение белка с трихлоруксусной кислотой (ТХУ),
  • определение белка с бензетоний хлоридом.

Турбидиметрические методы основаны на снижении растворимости белков мочи вследствие образования суспензии взвешенных частиц под воздействием преципитирующих агентов. О содержании белка в исследуемой пробе судят либо по интенсивности светорассеяния, определяемого числом светорассеивающих частиц (нефелометрический метод анализа), либо по ослаблению светового потока образовавшейся суспензией (турбидиметрический метод анализа).

Величина светорассеяния в преципитационных методах обнаружения белка в моче зависит от множества факторов: скорости смешивания реактивов, температуры реакционной смеси, значения pH среды, присутствия посторонних соединений, способов фотометрии. Тщательное соблюдение условий реакции способствует образованию стабильной суспензии с постоянным размером взвешенных частиц и получению относительно воспроизводимых результатов.

Некоторые лекарственные препараты влияют на результаты турбидиметрических методов определения белка в моче, приводя к так называемым «ложноположительным», либо «ложноотрицательным» результатам. К ним относятся некоторые антибиотики (бензилпенициллин, клоксациллин и др.), рентгеноконтрастирующие йодсодержащие вещества, сульфаниламидные препараты.

Турбидиметрические методы плохо поддаются стандартизации, часто приводят к получению ошибочных результатов, но, несмотря на это, в настоящее время они широко используются в лабораториях из-за невысокой стоимости и доступности реактивов. Наиболее широко в России используется метод определения белка с сульфосалициловой кислотой.

Наиболее чувствительными и точными являются колориметрические методы определения общего белка мочи, основанные на специфических цветных реакциях белков.

  1. биуретовая реакция,
  2. метод Лоури,
  3. методы, основанные на способности различных красителей образовывать комплексы с белками:
    • Понсо S (Ponceau S),
    • Кумасси бриллиантовый синий (Coomassie Brilliant Blue)
    • пирогаллоловый красный (Pyrogallol Red).

С точки зрения исполнителя, в повседневной работе лаборатории при большом потоке исследований биуретовый метод является неудобным из-за большого числа операций. В то же время, метод характеризуется высокой аналитической надежностью, позволяет определять белок в широком диапазоне концентраций и выявлять альбумин, глобулины и парапротеины со сравнимой чувствительностью, вследствие чего биуретовый метод рассматривают в качестве референтного и рекомендуют для сравнения других аналитических методов обнаружения белка в моче. Биуретовый метод определения белка в моче предпочтительно выполнять в лабораториях, обслуживающих нефрологические отделения, и использовать в тех случаях, когда результаты определения с помощью других методов представляются сомнительными, а также для определения величины суточной потери белка у нефрологических больных.

Метод Лоури, обладающий более высокой чувствительностью по сравнению с биуретовым методом, сочетает биуретовую реакцию и реакцию Фолина на аминокислоты тирозин и триптофан в составе белковой молекулы. Несмотря на высокую чувствительность, данный метод не всегда обеспечивает получение надежных результатов при определении содержания белка в моче. Причиной тому служит неспецифическое взаимодействие реактива Фолина с небелковыми компонентами мочи (чаще всего аминокислотами, мочевой кислотой, углеводами). Отделение этих и других компонентов мочи путем диализа или осаждения белков позволяет с успехом использовать данный метод для количественного определения белка в моче. Некоторые лекарственные препараты – салицилаты, хлорпромазин, тетрациклины способны оказывать влияние на данный метод и извращать результаты исследования.

Достаточная чувствительность, хорошая воспроизводимость и простота определения белка по связыванию красителей делают эти методы перспективными, однако высокая стоимость реактивов препятствует более широкому их использованию в лабораториях. В настоящее время в России все большее распространение получает метод с пирогаллоловым красным.

Проводя исследование уровня протеинурии, нужно иметь ввиду, что различные методы определения протеинурии имеют разную чувствительность и специфичность к многочисленным белкам мочи.

Исходя из эмпирических данных, рекомендуется определять белок двумя разными методами и рассчитывать истинное значение по одной из приведенных формул:

протеинурия = 0,4799 B + 0,5230 L;
протеинурия = 1,5484 B – 0,4825 S;
протеинурия = 0,2167 S + 0,7579 L;
протеинурия = 1,0748 P – 0,0986 B;
протеинурия = 1,0104 P – 0,0289 S;
протеинурия = 0,8959 P + 0,0845 L;

где:
B – результат измерения с Кумасси G-250;
L — результат измерения с реактивом Лоури;
P — результат измерения с молибдатом пирогаллола;
S — результат измерения с сульфосалициловой кислотой.

Учитывая выраженные колебания уровня протеинурии в различное время суток, а также зависимость концентрации белка в моче от диуреза, различное его содержание в отдельных порциях мочи, в настоящее время при патологии почек принято оценивать выраженность протеинурии по суточной потере белка с мочой, то есть определять так называемую суточную протеинурию. Она выражается в г/сут.

При невозможности сбора суточной мочи рекомендуется определять в разовой порции мочи концентрации белка и креатинина. Поскольку скорость выделения креатинина в течение дня достаточно постоянна и не зависит от изменения скорости мочеотделения, отношение концентрации белка к концентрации креатинина постоянно. Данное отношение хорошо коррелирует с суточной экскрецией белка и, следовательно, может использоваться для оценки выраженности протеинурии. В норме отношение белок/креатинин должно быть менее 0,2. Белок и креатинин измеряют в г/л. Важным достоинством метода оценки выраженности протеинурии по соотношению белок-креатинин является полное исключение ошибок, связанных с невозможностью или неполным сбором суточной мочи.

  • О. В. Новоселова, М. Б. Пятигорская, Ю. Е. Михайлов, «Клинические аспекты выявления и оценки протеинурии», Справочник заведующего КДЛ, № 1, январь 2007 г.
  • А. В. Козлов, «Протеинурия: методы ее выявления», лекция, Санкт-Петербург, СПбМАПО, 2000 г.
  • В. Л. Эмануэль, «Лабораторная диагностика заболеваний почек. Мочевой синдром», — Справочник заведующего КДЛ, № 12, декабрь 2006 г.
  • В.И. Пупкова, Л.М. Прасолова — Определение белка в моче и спинномозговой жидкости. Кольцово, 2007 г.
  • Справочник по клиническим лабораторным методам исследования. Под ред. Е. А. Кост. Москва, «Медицина», 1975 г.

Для количественного определения белка пригоден любой образец мочи. Большинство исследователей для выяснения величины суточной потери белка предпочитают определять содержание белка в моче, собранной за сутки.

Раздел: Анализ мочи

В настоящее время для определения белка в моче все чаще используются диагностические полоски. Для полуколичественного определения белка в моче на полоске в качестве индикатора чаще всего используется краситель бромфеноловый синий в цитратном буфере. О содержании белка в моче судят по интенсивности сине-зеленой окраски, развивающейся после контакта реакционной зоны с мочой.

Раздел: Анализ мочи

Все качественные пробы на белок в моче основаны на способности белков к денатурации под влиянием различных физических и химических факторов. При наличии белка в исследуемом образце мочи появляется либо помутнение, либо выпадение хлопьевидного осадка.

Раздел: Анализ мочи

Проба с 20% сульфосалициловой кислотой относится к качественным реакциям определения белка в моче. Так как она основана на реакции коагуляции, то исследуемая моча должна соответствовать определенным требованиям: быть прозрачной и иметь кислую реакцию.

Раздел: Анализ мочи

Кольцевая проба Геллера относится к качественным реакциям определения белка в моче. Так как она основана на реакции коагуляции, то исследуемая моча должна соответствовать определенным требованиям: быть прозрачной и иметь кислую реакцию.

Раздел: Анализ мочи

источник

Проба по Аддису – Каковскому

Исследования суточной мочи предпочтительнее для определения истинного количества форменных элементов, так как их выделение в дневные и ночные часы может быть различно.

Техника. Моча собирается за 24 часа при обычном режиме и диете, путем естественного мочеиспускания. Утром ребенок мочиться и эта порция выливается и с момента первого утреннего опорожнения мочевого пузыря начинается отсчет суток, т.е. далее моча собирается в одну посуду. Моча в течение суток храниться в холодильнике в предварительно промытой и прокипяченной посуде без добавления консервирующих средств. В лабораторию отправляется вся моча или отливается около 100 мл мочи после тщательного смешивания общего количества суточной мочи.

Перед исследованием обязательно определяют рН и удельный вес мочи, так как при щелочной реакции или низком удельном весе все форменные элементы могут лизироваться в течение суток, в таких случаях проводится проба Амбурже.

Для подсчета: берется 10 мл, центрифугируется, образуется около 1 мл осадка и 9 мл надосадочной жидкости, которую удаляют. Одна капля осадка помещается в счетную камеру.

Проба по Амбурже

Исследование мочи за небольшой отрезок времени (3 – 4 часа).

Техника. Для исследования берется утренняя моча, чаще с 7 до 10 часов. Первая порция выливается, последующие собираются в одну посуду.

Для подсчета: берется 10 мл, центрифугируется, образуется около 1 мл осадка и 9 мл надосадочной жидкости, которую удаляют. Одна капля осадка помещается в счетную камеру.

Проба по Нечипоренко

Техника. Исследованию подвергается утренняя собранная из средней порции без учета промежутка времени, за которую данная порция выделена.

Количество форменных элементов подсчитывается в 1 мл мочи.

Количество элементов мочевого осадка у здоровых детей.

Методы исследования Время Лейкоциты Эритроциты Цилиндры
По Аддису – Каковскому За 24 часа До 2 млн До 1 млн. До 20 тыс.
По Нечипоренки До 2 тыс. До 1 тыс. До 20
По Амбурже За 3 – 4 часа До 1000 в мин До 500 в мин. До 20

КАЧЕСТВЕННЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ МОЧИ.

  • Определение клубочковой фильтрации
  • Почечного плазмотока
  • Способы исследования функций проксимального и дистального отделов канальцевого аппарата почек

Для выявления почечной недостаточности определяют показатели:

    1. Мочевина, креатинин, индикан, остаточный азот в сывортке крови
    2. Калий, натрий, кальций, магний, фосфаты в сыворотке крови
    3. Показатели КЩС

    Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

    Лучшие изречения: При сдаче лабораторной работы, студент делает вид, что все знает; преподаватель делает вид, что верит ему. 9411 — | 7313 — или читать все.

    193.124.117.139 © studopedia.ru Не является автором материалов, которые размещены. Но предоставляет возможность бесплатного использования. Есть нарушение авторского права? Напишите нам | Обратная связь.

    Отключите adBlock!
    и обновите страницу (F5)

    очень нужно

    источник

    Почка, её строение, экскреторная, осморегулирующая, ионорегулирующая функции. Процессы фильтрации и реабсорбции в почках. Метод Нечипоренко по количественному определению форменных элементов в моче. Преимущество и недостаток метода Каковского-Аддиса.

    Почка — важнейший орган выделительной системы. В почках происходят жизненно важные процессы, такие как фильтрация, реабсорбция, образование мочи. Нарушения этих и других процессов, сказывающихся на свойствах мочи свидетельствуют о большом разнообразии патологий в организме человека. Вот почему так важно знать и применять в лабораторной диагностике необходимый комплекс методов качественного и количественного анализа мочи.

    Целью данной работы является подробное рассмотрение строения и функции почки, а также важнейших методов количественного анализа: Нечипоренко и Каковского-Аддиса.

    Глава I. Почка, её строение и функции

    У человека почки — парные бобовидные органы, расположенные на задней брюшной стенке по обеим сторонам позвоночника обычно на уровне 12-го грудного — 3-го поясничного позвонков. Одна почка расположена выше другой приблизительно на 2-3 см. Известны аномалии развития, когда имеется 1 или 3 почки. У взрослого человека каждая почка весит 120-200 г, её длина 10-12 см, ширина 5-6 см, толщина 3-4 см. Передняя поверхность почки покрыта брюшиной, но сама почка находится вне брюшинной полости. Почки окружены фасцией, под которой находится жировая капсула; непосредственно паренхима почек окружена фиброзной капсулой. Почка имеет гладкий выпуклый наружний край и вогнутый внутренний край, в центре его находятся ворота почки, через которые открывается доступ в почечную пазуху с почечной лоханкой, ворнкообразный резервуар, образованный в почке путём слияния больших почечных чашечек, продолжающийся в мочеточник. В этом же месте в почку входят артерия и нервы; выходят вена и лимфатические сосуды.

    Читайте также:  16000 лейкоцитов в анализе мочи

    Отличительная особенность почек — ясно выраженное деление на 2 зоны — внешнюю (корковую) красно-коричневого цвета и внутреннюю (мозговую), имеющую лилово-крачный цвет. Мозговое вещество почек образует 8-18 пирамид; над пирамидами и между ними лежат слои коркового вещества — почечные (бертиниевы) столбы.

    Каждая пирамида имеет широкое основание, примыкающее к корковому веществу, и закруглённую и более узкую верхушку — почечный сосочек, обращённый в малую почечную чашечку. Последние открываются в большие почечные чашечки, из них моча поступет в почечную лоханку и далее в мочеточник.

    В обеих почках человека около 2 млн. нефронов. Нефрон — это основная морфо-функциональная единица почек. Каждый нефрон состоит из частей, имеющих характерное название и выполняющих различные функции. Начальная часть нефрона (боуменова капсула), чашеобразный слепой конец мочевого канальца, окружающий сосудистый клубочек из, приблизительно 50 артериальных капилляров (клубочек Шумлянского), образуя вместе с ним мальпигиево, или почечное, тельце (общее количество которых достигает 4 млн.). Стенка боуменовой капсулы состоит из внутреннего и наружного листков, между которыми находится щель — полость боуменовой капсулы, выстланная плоским эпителием.

    Внутренний листок прилегает к клубочку, наружный продолжается в проксимальный извитой мочевой каналец, переходящий в прямую часть проксимального канальца. За ним следует тонкий нисходящий участок петли Генле, спускающийся в мозговое вещество почек, где он, изгибаясь на 180 градусов, переходит в тонкий восходящий, а затем толстый восходящий каналец петли Генле, возвращающийся к клубочку.

    Восходящая часть петли переходит в дистальный (вставочный) отдел нефрона; он соединяется связующим отделом с расположенными в коре почек собирательными трубками. Они проходят корковое и мозговое вещество почек и, сливаясь вместе, образуют в сосочке беллиниевы протоки, открывающиеся в почечную лоханку.

    В почках млекопитающих и человека имеется несколько типов нефронов, различающихся по месту расположения клубочков в коре почек и по функции канальцев: субкортикальные, интеркортикальные и юкстамедуллярные. Клубочки субкортикальных нефронов находятся в поверхностной зоне коры почек, юкстамедуллярные — у границы коркового и мозгового вещества почек. Юкстамедуллярные нефроны имеют длинную петлю Генле, спускающуюся в почечный сосочек и обеспечивающую высокий уровень осмотического концентрирования мочи.

    Для почек характерно строгое зональное распределение различных типов канальцев. В коре почек находятся все клубочки, проксимальные и дистальные извитые канальцы, корковые отделы собирательных трубок. В мозговом веществе располагаются петли Генле и собирательные трубки. От расположения отдельных элементов нефрона зависит эффективность осморегулирующих функций почек.

    Клетки каждого отдела канальцев отличаются по строению. Для кубического эпителия проксимального извитого канальца характерны многочисленный микроворсинки (щёточная каёмка) на поверхности, обращённой в просвет нефрона. На базальной поверхности клеточная оболочка образует узкие складки, между которыми расположены многочисленные митохондрии. В клетках прямого участка проксимального канальца менее выражены щёточная каёмка и складчатость базальной мембраны, мало митохондрий. Тонкий отдел петли Генле меньшего диаметра, выстлан плоскими клетками с малочисленными митохондриями.

    Характерная особенность эпителия дистального сегмента нефрона (толстый восходящий отдел петли Генле и дистальный извитой каналец со связующим отделом) — малое число микроворсинок на поверхности канальца, обращённой в просвет нефрона, ярко выраженная складчатость базальной плазматической мембраны и многочисленные крупные митохондрии с большим числом кристаллов. В начальных отделах собирательных трубок чередуются светлые и тёмные клетки (в последних больше митохондрий). Беллиниевы трубки образованы высокими клетками с немногочисленными митохондриями.

    Кровь в почки поступает из брюшной аорты по почечной артерии, распадающейся в ткани почек на междолевые, дуговые, междольковые артерии, от которых берут начало афферентные (приносящие) артериолы клубочков. В них артериола распадается на капилляры, затем они вноыь соединяются, образуя эфферентую (выносящую) артериолу. Афферентная артериола почти в 2 раза толще эфферентной, что способствует клубочковой фильтрации. Эфферентная артериола вновь распадается на капилляры, оплетающие канальца того же самого нефрона. Венозная кровь поступает в междольковые, дуговые и междолевые вены; они образуют почечную вену, впадающую в нижнюю полую вену.

    Кровоснабжение мозгового вещества почек обеспечивается прямыми артериолами. Почки иннервируют симпатические нейроны трёх нижних грудных и двух верхних поясничных сегментов спинного мозга; парасимпатические волокна идут к почкам от блуждающего нерва. Чувствительная иннервация почек в составе чревных нервов достигает нижних грудных и верхних поясничных узлов.

    Рис.1 — Внутреннее строение почки человека

    Основные функции почек (экскреторная, осморегулирующая, ионорегулирующая и др.) обеспечиваются процессами, лежащими в основе мочебразования: ультрафильтрацией жидкости и растворённых веществ из крови в клкубочках, обратным всасыванием частиц этих вешеств в кровь и секрецией некоторых веществ из крови в просвет канальца.

    У человека в условиях покоя около 1/4 крови, выбрасываемой в аорту левым желудочком сердца, поступает в почечные артерии. Кровоток в почках мужчин составляет 1300 мл/мин, у женщин несколько меньше. При этом в клубочках из полости капилляров в просвет боуменовой капсулы происходит ультрафильтрация плазмы крови, обеспечивающая образование так назывемой первичной мочи, в которой практически нет белка. В просвет канальцев поступает около 120 мл жидкости в 1 минуту. Однако в обычных условиях около 119 мл фильтрата поступает обратно в кровь и лишь 1 мл в

    виде конечной мочи выводится из организма. Процесс ультрафильтрации жидкости обусловлен тем, что гидростатическре давление крови в капиллярах клубочка выше суммы коллоидно- осмотического давления белков плазмы крови и внутрипочечного тканевого давления. Размер частиц, фильтруемых из крови, определяется величиной пор в фильтрующей мембране, что, по-видимому, зависит от диаметра пор центрального слоя базальной мембраны клубочка. В большинстве случаев радиус пор меньше 28 A, поэтому электролиты, низкомолекулярные неэлектролиты и вода свободно проникают в просвет нефрона, белки же практически не проходят в ультрафильтрат. Функциональное значение отдельных почечных канальцев в процессе мочеобразования неодинаково. Клетки проксимального сегмента нефрона всасывают (реабсорбируют) попавшие в фильтрат глюкозу, аминокислоты, витамины, большую часть электролитов. Стенка этого канальца всегда проницаема для воды; объём жидкости к концу проксимального канальца уменьшается на 2/3, но осмотическая концентрация жидкости остаётся той же, что и плазмы крови. Клетки проксимального канальца способны к секреции, т.е. выделению некоторых органических кислот (пенициллин, кардиотраст, парааминогиппуровая кислота, флуоресцеин и др.) и органических оснований (холин, гуанидин и др.) из околоканальцевой жидкости в просвет канальца. Клетки дистального сегмента нефрона и собирательных трубок участвуют в реабсорбции электролитов против значительного электрохимического градиента; некоторые вещества (калий, аммиак, ионы водорода) могут секретироваться в просвет нефрона. Проницаемость стенок дистального извитого канальца и

    собирательных трубок для воды увеличивается под влиянием антидиуретического гормона — вазопрессина, выделяемого задней долей гипофиза, вследствие чего происходит всасывание воды по осмотическому градиенту.

    Осморегулирующая функция почек обеспечивает постоянство концентрации осмотически активных веществ в крови при различном водном режиме. При избыточном поступлении воды в организм выделяется гипотоническая моча, в условиях воды образуется осмотически концентрированная моча. Механизм осмотического разведения и концентрирования мочи был открыт в 50-60х гг. 20 века. В почках млекопитающих канальцы и сосуды мозгового вещества образуют противоточно-поворотную множительную систему. В мозговом веществе почек параллельно друг другу проходят нисходящие и восходящие отделы петель Генле, прямые сосуды, собирательные трубки. В результате активного транспорта натрия клетками восходящего отдела петли Генле соли натрия накапливаются в мозговом веществе почек и вместе с мочевиной удерживаются в этой зоне почек. При движении крови вниз, вглубь мозгового вещества, мочевина и соли натрия поступают в сосуды, а при обратном движении, к корковому веществу, выходят из них, удерживаясь в ткани (принцип противотока). При действии вазопрессина высокая осмотическая концентрация характерна для всех жидкостей (кровь, межклеточная и канальцевая жидкость) на каждом уровне мозгового вещества почек, исключая содержимое восходящих отделов петель Генле. Стенки этих канальцев относительно водонепроницаемы, а клетки активно реабсорбируют соли натрия в окружающую межклеточную ткань, вследствие чего осмотическая концентрация уменьшается. При отстутсвии вазопрессина стенка собирательных трубок водонепроницаема; при действии этого гормона она становится водопроницаемой и вода всасывается из просвета по осмотическому градиенту в окружающую ткань. В почке человека моча может быть в 4-5 раз осмотически концентрированнее крови. У некоторых обитающих в пустынях грызунов, имеющих особенно развитое внутреннее мозговое вещество почек, моча может в 18 раз превосходить по осмотическому давлению кровь.

    Изучены молекулярные механизмы абсорбции и секреции веществ клетками почечных канальцев. При реабсорбции натрий пассивно поступает по электрохимическому градиенту внутрь клетки, движется по ней к области базальной плазматической мембраны и с помощью находящихся в ней «натриевых насосов» (Na/K ионнообменный насос, электрогенный Na насос и др.) выбрасывается во внеклеточную жидкость. Каждый из этих насосов угнетается специфическими ингибиторами. Применение в клинике мочегонных средств, используемых, в частности, при лечении отёков, основано на том, что они влияют на различные элементы системы реабсорции Na, K, в отличие от Na, клетка нефрона может не только реабсорбировать, но и секретировать. При секреции K из межклеточной жидкости поступает в клетку через базальную плазматическую мембрану за счёт работы Na/K насоса, а выделяется он в просвет нефрона через апикальную клеточную мембрану пассивно. Это обусловлено увеличением калиевой проницаемости мембран и высокой внутриклеточной концентрацией K. Реабсорбция различных веществ регулируется нервными и гормональными факторами. Всасывание воды возрастает под влиянием вазопрессина, реабсорбция Na увеличивается альдостероном и уменьшается

    натрийуретическим фактором, всасывание Ca и фосфатов изменяется под влиянием паратиреоидного гормона, тирокальциотинина и др.

    Молекулярные механизмы регуляции переноса различных веществ клеткой нефрона неодинаковы. Так, ряд гормонов (например, вазопрессин) стимулирует внутриклеточное образование из АТФ циклической формы АМФ, которая воспроизводит эффект гормона. Другие же гормоны (например, альдостерон) воздействуют на генетический аппарат клетки, вследствие чего в рибосомах усиливается синтез белков, обеспечивающих изменение переноса веществ через клетку канальца.

    Важное значение имеет почка как инкреторный (внутрисекреторный) орган. В клетках её юкстагломерулярного аппарата, расположенного в области сосудистого полюса клубочка между приносящей и выносящей артериолами, происходит образование ренина, а возможно и эритропоэтина. Секреция ренина возрастает при уменьшении почечного артериального давления и снижении содержания Na в организме. В почках вырабатывается как эритропоэтин, так и, по-видимому, вещество, угнетающее образование эритроцитов; эти вещества участвуют в регуляции эритроцитарного состава крови. Установлено, что в почке синтезируются простагландины, вещества, меняющие чувствительность почечной клетки к некоторым гормонам (например, вазопрессину) и снижающее кровяное давление.

    Рис.2 — Процессы фильтрации и реабсорбции в почках

    Глава II. Количественные методы исследования мочи

    Метод Нечипоренко в отечественной лабораторной диагностике является наиболее распространенным методом количественного определения форменных элементов в моче. Этот метод наиболее прост, доступен любой лаборатории и удобен в амбулаторной практике, а также имеет ряд преимуществ перед другими известными количественными методами исследования осадка мочи. По методу Нечипоренко определяют количество форменных элементов (эритроцитов, лейкоцитов и цилиндров) в 1 мл мочи.

    Специальной подготовки для исследования мочи по методу Нечипоренко не требуется.

    Для исследования мочи по методу Нечипоренко собирается только средняя порция (в середине мочеиспускания) первой утренней мочи (достаточно 15 — 20 мл). На это обязательно следует указать пациенту. При этом необходимо соблюдать основные правила сбора мочи. Моча сразу же доставляется в лабораторию.

    В стационаре для уточнения топической диагностики для исследования мочи по методу Нечипоренко может быть использована моча, полученная при раздельной катетеризации мочеточников.

    мерная центрифужная пробирка,

    счетная камера (Горяева, Фукса-Розенталя или Бюркера),

    Доставленную мочу хорошо перемешивают, отливают 5 — 10 мл в центрифужную градуированную пробирку и центрифугируют 3 мин при 3 500 об/мин, отсасывают верхний слой мочи, оставляя 1 мл вместе с осадком. Хорошо перемешивают осадок и заполняют камеру Горяева или любую счетную камеру. Обычным способом во всей сетке камеры подсчитывают число форменных элементов (раздельно лейкоцитов, эритроцитов и цилиндров) в 1 мм3 осадка мочи (x). Установив эту величину и подставив ее в формулу, получают число форменных элементов в 1 мл мочи:

    N — число лейкоцитов, эритроцитов или цилиндров в 1 мл мочи,

    x — число подсчитанных лейкоцитов, эритроцитов или цилиндров в 1 мм3 (1 мкл) осадка мочи (при подсчете в камере Горяева и Бюркера x = H/0,9, где H — количество подсчитанных в камере клеток, а 0,9 — объем камеры, а при подсчете в камере Фукс- Розенталя x = H/3,2, так как объем камеры 3,2 мм3),

    V — количество мочи, взятой для исследования (если моча берется катетером из лоханки, то V обычно меньше 10), 1000 — количество осадка (в кубических миллиметрах).

    Примечание. Для подсчета цилиндров необходимо просмотреть не менее 4 камер Горяева (или Бюркера) или 1 камеру Фукса-Розенталя. Количество цилиндров, сосчитанное в 4 камерах Горяева или Бюркера, затем следует разделить на 4, а уже потом полученное число можно вставлять в формулу для определения количества цилиндров в 1 мкл осадка мочи.

    Нормальные значения форменных элементов для метода Нечипоренко

    Для метода Нечипоренко нормальным считается содержание в 1 мл мочи лейкоцитов до 2000, эритроцитов — до 1000, цилиндры отсутствуют или обнаруживаются в количестве не более одного на камеру Фукса-Розенталя или на 4 камеры Горяева. Цифры одни и те же для взрослых и детей, для лоханочной и пузырной мочи.

    Преимущества метода Нечипоренко

    — технически прост, удобен, доступен; не обременителен для обследуемого и персонала, так как не требует дополнительной подготовки пациента, сбора мочи за строго определенное время;

    — для исследования может быть использована средняя порция мочи (что исключает необходимость катетеризации мочевого пузыря) и моча, полученная из почек при раздельной катетеризации мочеточников для уточнения топической диагностики;

    — не требует большого количества мочи — определение лейкоцитурии можно проводить в небольшом количестве мочи, полученной из почки;

    по количественным показателям не уступает другим методам;

    — легко выполним в динамике;

    — является унифицированным методом.

    Недостаток метода Нечипоренко

    При исследовании мочи по методу Нечипоренко не учитываются суточные колебания выделения форменных элементов с мочой.

    Клиническое значение метода Нечипоренко

    — Метод Нечипоренко позволяет выявить скрытую лейкоцитурию, которая часто наблюдается при хронических, скрытых и вялотекущих формах гломерулонефрита и пиелонефрита и не обнаруживается при ориентировочной микроскопии осадка мочи.

    — Метод используется для диагностики заболеваний почек. Так, преобладание эритроцитов над лейкоцитами характерно для хронического гломерулонефрита и артериосклероза почек, а преобладание лейкоцитов — для хронического пиелонефрита. Необходимо помнить, что при наличии калькулезного пиелонефрита в осадке могут преобладать эритроциты.

    — Неоднократное проведение исследования мочи по методу Нечипоренко в процессе лечения позволяет судить об адекватности назначенной терапии и помогает в случае необходимости скорректировать ее.

    — При диспансерном наблюдении метод Нечипоренко позволяет следить за течением заболевания и своевременно назначать терапию в случае обнаружения отклонений от нормы.

    Метод Нечипоренко в модификации Пытель А. Я.

    В детской и урологической практике, при диспансеризации широко применяется метод Нечипоренко в модификации Пытель А. Я. Сбор мочи и оборудование те же, что и при обычном методе Нечипоренко, отличие заключается в самом подсчете форменных элементов (подсчет форменных элементов осуществляется в камере Горяева, но не во всей, а только в 100 больших квадратах), в связи с чем нормальное количество лейкоцитов для данного метода отличается от такового при классическом методе Нечипоренко и это следует учитывать врачу при интерпретации полученных данных.

    Мочу хорошо перемешивают, наливают 10 мл в градуированную центрифужную пробирку и центрифугируют в течение 5 мин при 2000 об/мин. Удаляют верхний слой, оставляя 1 мл мочи вместе с осадком. Хорошо перемешивают осадок, заполняют камеру Горяева и производят подсчет раздельно лейкоцитов, эритроцитов и цилиндров в 100 больших квадратах (1600 малых квадратов). Учитывая, что объем малого квадрата равен 1/4000 мм3. Подсчет форменных элементов в 1 мм3 производят по следующей формуле:

    x — количество форменных элементов в 1 мм3 мочи,

    a — количество форменных элементов в 100 больших квадратах,

    b — количество малых квадратов, в которых производился подсчет,

    c — количество мочи, взятой для центрифугирования (в миллилитрах).

    При умножении полученного числа на 1000, узнают количество форменных элементов в 1 мл мочи:

    K — количество форменных элементов в 1 мл мочи,

    a — количество форменных элементов в 100 больших квадратах.

    При получении небольшого количества мочи в случае катетеризации мочеточника число форменных элементов подсчитывают в 1 мл нецентрифугированной мочи, используя ту же формулу, но исключая в знаменателе c. Тогда формула будет иметь следующий вид:

    K = (a*4000*1000)/b = (a*4000*1000)/1600=a*2500.

    В норме при подсчете форменных элементов в моче по методу Нечипоренко в модификации Пытель в 1 мл мочи содержится лейкоцитов — до 4000, эритроцитов — до 1000, цилиндров — до 20.

    Клиническое значение методов количественного определения форменных элементов в моче.

    2.2 Метод Каковского-Аддиса

    Метод Каковского-Аддиса является унифицированным методом количественного определения форменных элементов в суточном объеме мочи. Этот наиболее трудоемкий и имеющий много недостатков метод все реже применяется на практике в последнее время.

    При исследовании мочи по методу Каковского-Аддиса во избежание получения заниженных данных, обусловленных распадом форменных элементов в нейтральной или щелочной моче, а также в моче с низким удельным весом, пациенту в течение суток, предшествовавших исследованию, назначают мясную диету и ограничивают прием жидкости. При этих условиях обычно стандартизуется удельный вес мочи (1020 — 1025) и ее pH (5,5).

    Читайте также:  1500 эритроцитов в анализе мочи

    Классический вариант исследования мочи по методу Каковского-Аддиса требует строго соблюдать правила сбора мочи и ее хранения в течение длительного времени. При этом мочу собирают в течение суток: утром больной освобождает мочевой пузырь, а затем в течение 24 часов собирает мочу в сосуд с 4 — 5 каплями формалина или 2 — 3 кристаллами тимола, мочу следует хранить в холодильнике.

    Однако на практике чаще пользуются другим, более простым способом сбора мочи — мочу собирают за 10 — 12 часов. При этом способе страдает точность результата. При данном варианте сбора мочи для метода Каковского-Аддиса перед сном больной опорожняет мочевой пузырь и отмечает это время. Утром, через 10 — 12 часов после вечернего мочеиспускания, пациент мочится в приготовленную посуду, вся моча отправляется в лабораторию для исследования. На бланке направления должно быть указано, в течение какого времени была собрана моча. При невозможности удержать мочу в течение 10 — 12 часов пациент собирает ее в несколько приемов, соблюдая условия ее хранения. У женщин мочу собирают катетером.

    мерная центрифужная пробирка,

    счетная камера (Горяева, Фукса-Розенталя или Бюркера),

    Доставленную мочу тщательно перемешивают, измеряют ее количество и отбирают для исследования количество, соответствующее 12 минутам или 1/5 часа. Это количество определяют по формуле:

    Q — количество мочи (в мл), выделенное за 12 минут,

    V — общий объем собранной мочи (в мл),

    t — время (в часах), за которое собрана моча,

    5 — число для расчета объема мочи, выделенной за 12 минут.

    Рассчитанное количество мочи помещают в градуированную центрифужную пробирку и центрифугируют 3 мин при 3500 об/мин, или 5 минут при 2000 об/мин.

    Отсасывают верхний слой, оставляя 0,5 мл мочи вместе с осадком. Если осадок превышает 0,5 мл, то оставляют 1 мл мочи. Осадок с надосадочной жидкостью тщательно перемешивают и заполняют камеру Горяева (или другую счетную камеру). В этой камере подсчитывают раздельно количество лейкоцитов, эритроцитов и цилиндров (эпителиальные клетки мочевыводящих путей не считают).

    Примечание. Для подсчета цилиндров необходимо просмотреть не менее 4 камер Горяева (или Бюркера) или 1 камеру Фукса-Розенталя. Количество цилиндров, сосчитанное в 4 камерах Горяева или Бюркера, затем следует разделить на 4, а уже потом полученное число можно вставлять в формулу для определения количества цилиндров в 1 мкл осадка мочи.

    Рассчитывают количество форменных элементов в 1 мкл осадка мочи (x). При подсчете в камере Горяева и Бюркера x = H/0,9, где H — количество подсчитанных в камере клеток, а 0,9 — объем камеры. При подсчете в камере Фукс- Розенталя x = H/3,2, так как объем камеры 3,2 мм3.

    Затем, исходя из того, что для исследования было взято 0,5 мл, или 500 мм3, полученные количества форменных элементов в 1 мм3 умножают на 500 (а при осадке в 1 мл — на 1000), и получают количество форменных элементов, выделенных с мочой за 12 минут. В пересчете на 1 час это количество умножают на 5, а при расчете за сутки — еще на 24. Так как, 500, 5 и 24 являются постоянными числами, то соответственно полученное количество эритроцитов, лейкоцитов и цилиндров (x) умножают на 60 000,

    если в пробирке для исследования было оставлено 0,5 мл мочи, или на 120 000, если осадок был обильный и был оставлен 1 мл.

    Нормальные значения форменных элементов для метода Каковского-Аддиса

    Число Каковского-Аддиса для нормальной мочи составляет до 1 000 000 для эритроцитов, до 2 000 000 для лейкоцитов, до 20 000 для цилиндров. Некоторые авторы указывают другие цифры для метода Каковского-Аддиса: эритроцитов — до 2 000 000 — 3 000 000, лейкоцитов — до 4 000 000, цилиндров — до 100 000.

    Преимущество метода Каковского-Аддиса

    Преимущество метода заключается в том, что при сборе мочи за 24 часа учитываются суточные колебания выделения форменных элементов с мочой.

    Недостаток метода Каковского-Аддиса

    — не каждый больной может удержать мочу в течение 12 часов, особенно при никтурии; почка моча исследование

    — не каждый пациент может самостоятельно полностью опорожнить мочевой пузырь (аденома, рак предстательной железы);

    — получение мочи путем катетеризации возможно лишь в лечебном учреждении;

    — метод Каковского-Аддиса трудно применим в детской практике;

    — повышение показателей при данном исследовании может наблюдаться не только при патологии почек, но и при хронических гнойных процессах, воздействии ядов (отравление сулемой, угарным газом), гепаринотерапии;

    главный недостаток метода — более низкая информативность: при сборе мочи за 12 или 24 часа частями необходимость длительного хранения мочи ведет к частичному лизису форменных элементов (особенно лейкоцитов) за счет щелочного брожения, что приводит к ложным результатам;

    — метод непригоден при одностороннем поражении почек (дает суммарный результат).

    Клиническое значение методов количественного определения форменных элементов в моче.

    Физиологические показатели при исследовании мочи

    источник

    1. Общий анализ мочи.Для общего анализа исследуют среднюю порцию утренней мочи, собранную в сухую чистую посуду. Для полноценного исследования необходимо получить 100-150 мл мочи. Общий анализ мочи включает макро- и микроскопию, химические и физические методы исследования. При физическом исследовании определяют удельный вес, цвет, прозрачность и запах мочи. Относительная плотность мочи (удельный вес) колеблется в широких пределах — от 1001 до 1040. Величина относительной плотности мочи зависит от концентрации и молекулярной массы растворенных в ней веществ (мочевая кислота, соли, протеины, глюкоза и пр.), и отражает способность почек к концентрированию и разведению. В утренней порции мочи удельный вес должен быть не менее 1018. Цвет нормальной мочи зависит от ее концентрации и может колебаться от соломенно-желтого до янтарно-желтого; нормальная окраска мочи обусловлена содержанием в ней урохромов, уробилиноидов и других мочевых пигментов. Наиболее яркие изменения окраски мочи связаны с появлением в ней эритроцитов в большом количестве («мясные помои»), билирубина, уробилина, присутствием некоторых лекарственных и пищевых веществ (ацетилсалициловая кислота, амидопирин окрашивают мочу в розово-красный цвет, метиленовый синий в сине-зеленый, ревень — в зеленовато-желтый цвет). Нормальная моча прозрачна. Помутнение мочи может быть вызвано солями, клеточными элементами, слизью, жирами, бактериями. Запах мочи обычно нерезкий, специфический. При разложении мочи бактериями вне или внутри мочевого пузыря появляется резкий аммиачный запах. При наличии в моче кетоновых тел (при тяжелых формах сахарного диабета) моча приобретает так называемый фруктовый запах, напоминающий запах гниющих яблок. Химическое исследование мочи. Реакция мочи (рН) может колебаться от 4,5 до 8,4. Среднее значение рН мочи здоровых людей при обычном питании около 6,0; на величину рН влияют лекарственные препараты (мочегонные, кортикостероидные гормоны). Кислотность мочи может увеличиваться при сахарном диабете, почечной недостаточности, туберкулезе почек, ацидозе, гипокалиемическом алкалозе. Моча приобретает щелочную реакцию при рвоте, хронических инфекциях мочевых путей вследствие бактериально-аммиачного брожения. Определение белка в моче. Нормальная моча практически не содержит белка; то небольшое количество плазменных белков (до 150 мг/сутки), которое попадает в мочу, доступными практической медицине качественными пробами не обнаруживается. Появление белка в моче в концентрациях, дающих возможность выявить его качественными методами, называется протеинурией. Определение билирубина и уробилиноидов. Нормальная моча билирубина практически не содержит. Выделение билирубина с мочой наблюдается при паренхиматозной и гемолитической желтухах, когда в крови увеличивается концентрация билирубин-глюкоуронида. К уробилиноидам относятся уробилиновые (уробилиногены, уробилины) и стеркобилиновые (стеркобилиногены, стеркобилины) тела. В лабораторной практике нет методов их раздельного определения. Выделение уробилиноидов с мочой в большом количестве носит название уробилинурии, которая встречается при заболеваниях печени (гепатиты, циррозы), гемолитических анемиях, а также при заболеваниях кишечника (энтериты и др.). Определение сахара (глюкозы) в моче. Глюкозурия появляется при превышении так называемого почечного порога гликемии, то есть когда содержание глюкозы в плазме крови превышает 10 ммоль/л (сахарный диабет). Ацетонурия наблюдается при накоплении в крови кетоновых тел (ацетоуксусной и β-оксимасляной кислот) у больных сахарным диабетом.

    Микроскопия мочевого осадка. При микроскопии в мочевом осадке можно встретить клетки плоского, переходного и почечного эпителия. Клетки плоского эпителия попадают в мочу из наружных половых органов и мочеиспускательного канала; особого диагностического значения не имеют. Появление в моче большого количества клеток переходного эпителия говорит о воспалительном процессе в лоханках или мочевом пузыре. Наличие клеток почечного эпителия в моче является характерным признаком острых и хронических поражений почек, а также лихорадочных состояний, интоксикаций, инфекционных заболеваний. Лейкоциты в моче здорового человека представлены главным образом нейтрофилами. Увеличение числа лейкоцитов в моче более 6-8 в поле зрения (лейкоцитурия) свидетельствует о воспалительных процессах в почках или мочевыводящих путях (уретрит, простатит, цистит, пиелонефрит). У женщин лейкоцитурия может быть внепочечной (смыв с половых органов). Если количество лейкоцитов не поддается подсчету, говорят о пиурии. Лейкоцитурии нередко сопутствует бактериурия – выделение с мочой большого количества бактерий (более 100 000 в 1 мл мочи). Эритроциты в нормальной моче обычно не встречаются; если их количество больше 1-3 в поле зрения говорят о гематурии. Эритроциты могут происходить либо из почек (гломерулонефрит, инфаркт почки, опухоль почки), либо из МВП (мочекаменная болезнь, опухоль мочевого пузыря), ложная гематурия наблюдается при менструациях. Цилиндры — белковые или клеточные образования канальцевого происхождения, имеющие цилиндрическую форму и различную величину, являются одним из важнейших признаков поражения почек. Различают цилиндры гиалиновые(стекловидные белковые образования, обнаруживаются при острых и хронических нефритах, нефротическом синдроме, у здоровых людей при резком снижении рН мочи и увеличении ее относительной плотности), зернистые (состоящие из распавшихся клеток почечного эпителия), восковидные(имеют резкие контуры и гомогенную структуру желтого цвета, характерны для хронических заболеваний почек), эритроцитарные и лейкоцитарные. «Неорганизованный осадок» мочи состоит из солей, выпавших в осадок в виде кристаллов и аморфных масс. Характер солей зависит от коллоидного состояния мочи, рН и других свойств. При кислой реакции мочи обнаруживаются: кристаллы мочевой кислоты, ураты, оксалаты. При щелочной реакции мочи в ней находят кислый мочекислый аммоний, углекислый кальций, трипельфосфаты, аморфные фосфаты, нейтральную фосфорнокислую известь.

    Основные нормальные показатели общего анализа мочи

    Удельный вес Выше 1018
    Цвет Соломенно-желтый
    Прозрачность Прозрачная
    Реакция Нейтральная или слабокислая
    Белок, сахар, ацетон, билирубин Отсутствуют
    Эпителий 0-3 в поле зрения
    Лейкоциты 0-2 в поле зрения
    Эритроциты У мужчин — отсутствуют У женщин 0-3 в поле зрения
    Цилиндры Отсутствуют
    Слизь Отсутствует
    Бактерии Не более 50 000 в 1 мл

    2. Количественные методы исследования мочи— используются для подсчета количества эритроцитов, лейкоцитов и цилиндров в выделяемой моче. Количественные методы позволяют объективно контролировать эффективность проводимого лечения.

    2.1. Проба Нечипоренко позволяет определить количество форменных элементов в 1 мл мочи. Для исследования берут среднюю порцию свежевыпущенной утренней мочи, отделяют 1 мл, центрифугируют и подсчитывают количество форменных элементов под микроскопом в счетной камере Горяева. Нормой считается содержание в 1 мл мочи до 1000 эритроцитов, до 4000 лейкоцитов и не более 220 гиалиновых цилиндров. Преимущества пробы Нечипоренко — простота сбора материала и техники исследования, позволяет исключить разрушение форменных элементов при длительном хранении мочи.

    2.2. Проба Каковского-Аддиса применяется для количественного определения форменных элементов в суточной моче. Методика: собирают мочу утром за 10-часовой период, тщательно перемешивают, измеряют ее количество, отмеряют порцию, выделенную за 12 мин (1/50 всего объема), помещают мочу в градуированную пробирку и центрифугируют 5 мин при 2000 об/мин. Отсосав пипеткой надосадочную жидкость, оставляют 0,5 мл осадка, размешивают его и заполняют счетную камеру Горяева. Полученное число клеток в 1 мкл мочи умножают на 60 000, производя перерасчет на суточное количество мочи. Нормой считается выделение за сутки: эритроцитов до 1 000 000, лейкоцитов до 2 000 000, цилиндров до 20 000.

    2.3. Проба Амбюрже – вариант пробы Каковского-Аддиса. Собирают мочу за 3 часа, а перерасчет форменных элементов производят на то количество мочи, которое выделяется за одну минуту.

    3. Функциональное исследование почек (качественные методы). Чаще всего определяют азотвыделительную и концентрационную функции почек.

    3.1. Проба Зимницкого позволяет оценить способность почек к осмотическому концентрированию и разведению мочи. Исследование проводится в условиях обычного водного и пищевого режима и двигательной активности; для этого в отдельные емкости собирают восемь порций мочи через равные трехчасовые интервалы в течение суток (начиная с 6 часов утра, после опорожнения мочевого пузыря). Изучаемые показатели: объем каждой порции, удельный вес каждой порции, суточный объем мочи, соотношение дневного (первые 4 порции, с 6 до 18 ч) и ночного (с 18 до 6 ч) диуреза. У здорового человека суточное выделение мочи составляет 80% от количества выпитой жидкости; дневной диурез – 2/3 от суточного; относительная плотность мочи колеблется в пределах от 1005 до 1025, объем каждой из 8 порций составляет от 50 до 250 мл.

    NB! При сохранной концентрационной функции почек удельный вес мочи должен быть выше 1020 хотя бы в одной из порций, а суточные колебания удельного веса должны составлять не менее 8 единиц.

    При нарушении способности почек к концентрированию и разведению мочи в пробе Зимницкого выявляются следующие изменения:

    · Выделение с мочой менее чем 80% выпитой за сутки жидкости;

    · Никтурия — преобладание ночного диуреза над дневным;

    · Изостенурия – выделение мочи с монотонным удельным весом (суточные колебания менее 8 ед.);

    · Гипостенурия – выделение мочи с низким удельным весом (менее 1015);

    · Изогипостенурия — монотонное выделение мочи с низким удельным весом (меньше 1010-1012), наблюдается при прогрессировании почечной недостаточности.

    3.2. Проба Реберга. Уровни креатинина и мочевины в сыворотке крови четко характеризуют азотвыделительную функцию почек. При этом именно креатинин полностью фильтруется в клубочках и не реабсорбируется в канальцах, что позволяет рассчитать скорость клубочковой фильтрации (СКФ) или клиренс эндогенного креатинина. Методика: после полного опорожнения мочевого пузыря, пациент собирает мочу за 1 час, что позволяет рассчитать минутный диурез (V). В течение этого часа забирают кровь из вены и определяют концентрацию креатинина (P), также концентрацию креатинина определяют в часовой порции мочи (U). СКФ определяют по формуле: (U*V)/P. В норме величина СКФ составляет 80-125 мл/мин. При заболеваниях почек снижение СКФ обусловлено уменьшением фильтрующей поверхности вследствие склерозирования клубочков и снижения массы действующих нефронов, снижением почечного кровотока и коэффициента ультрафильтрации.

    источник

    Подать заявку

    Для учеников 1-11 классов и дошкольников

    Специальности 31.02.03. Лабораторная диагностика

    ПМ 01. Проведение лабораторных общеклинических исследований

    Лабораторные методы исследования мочи. Функциональные пробы

    Цель: овладение студентами методикой лабораторного исследования мочи и клинической оценкой полученных данных.

    2. Исследование физических свойств.

    3. Исследование химических свойств.

    4. Микроскопическое исследование осадка.

    5. Бактериологическое исследование.

    Лабораторное исследование мочи проводится у всех пациентов, независимо от характера их заболевания. Для клинического анализа необходимо 100 — 200 мл первой утренней мочи (средняя порция), которую собирают в чистую сухую одноразовую посуду. Перед забором мочи необходим туалет наружных половых органов или взятие мочи катетером. На посуду с мочой наклеивают этикетку с указанием фамилии и инициалов больного, номера палаты и отделения, диагноза и характера исследования (общий анализ, исследование на сахар и ацетон и т. д.).

    Количественное определение составных частей мочи (например, сахара при сахарном диабете) производят из суточного количества мочи. Мочу собирают за сутки в один сосуд, измерив общее количество, направляют на исследование 100 — 150 мл мочи.

    Для бактериологического исследования достаточно 10 мл мочи, собранной в стерильную пробирку, стерильным катетером.

    Для выявлении лейкоцитурии (метод Каковского — Аддиса) мочу собирают за 10 — 12 часов, т. е. с 21 часа до 9 часов. Собранную мочу тщательно размешивают и измеряют ее количество. На исследование направляют количество, выделенное за 12 минут, которое определяют по формуле:

    Х — количество мочи за 12 минут,

    Y — объем мочи, измеренной в мл,

    t — время, за которое собрана моча, 1/5 часа — 12 минут.

    Проба по 3имницкому. При обычном питьевом режиме мочу собирают в течение суток за каждые 3 часа, первая порция мочи в 6 часов утра выливается. На каждую бутылочку наклеивается этикетка с указанием фамилии, палаты, номера порции и

    промежутка времени, за который собрана порция (6 ч. — 9 ч., 9 ч. — 12 ч., и т. д.). Все 8 порций направляют на исследование.

    Анализ мочи по Нечипоренко

    Правила сбора мочи на анализ

    Исключаются тяжелые физические нагрузки за день до анализа, посещение бани или сауны;

    За день до сдачи анализа из рациона исключаются острые и очень сладкие блюда, алкоголь, овощные соки, особенно свекольный и морковный (так как они способны изменить цвет мочи). Количество белковой пищи рекомендуется сократить;

    Нельзя принимать мочегонные средства за двое суток до анализа. При необходимости приема препаратов это обстоятельство следует согласовать с врачом;

    Читайте также:  10 мл мочи грудничок анализ

    Не рекомендуется принимать антибактериальные препараты, противовоспалительные средства (ацетилсалициловая кислота, ибупрофен, индометацин) за сутки до анализа;

    В день, предшествующий анализу, не рекомендуется как пить слишком много жидкости, так и воздерживаться от питья;

    Собирается первая моча после утреннего пробуждения;

    Перед сбором мочи рекомендуется обмыть чистой теплой водой область, окружающую выход мочеиспускательного канала;

    При сборе мочи следует использовать лишь ту жидкость, которая была получена в середине процесса мочеиспускания;

    Для анализа достаточно взять 20-25 мл мочи;

    Мочу рекомендуется хранить в чистом закрытом пластиковом или стеклянном контейнере. Контейнеры, предназначенные для этой цели, можно приобрести в аптеке;

    Мочу следует доставить в лабораторию не позднее, чем через 2 часа после сбора (при длительном хранении в ней могут появиться бактерии, а также начнут распадаться некоторые важные элементы).

    В принципе, данные рекомендации подходят и для сдачи других разновидностей анализа мочи (за исключением анализа по Зимницкому и суточного сбора мочи), а не только анализа по Нечипоренко.

    Исследование физических свойств

    Исследование физических свойств мочи включает в себя определение количества, цвета, прозрачности, запаха и удельного веса мочи.

    Количество выделяемой за сутки мочи (диурез) в норме составляет в среднем 50 — 80% выпитой жидкости и колеблется от 1000 до 2000 мл. Измерение производят с помощью мерной посуды по нижнему мениску (уровню жидкости).

    Цвет мочи в норме колеблется от светло-желтого до насыщенного желтого и обусловлен содержащимися в ней пигментами: урохромом А, урохромом Б, уроэтрином, урорезином и др. Определяют цвет простым осмотром, после предварительного отстаивания в проходящем свете на белом фоне.

    3апах свежевыпущенной мочи здорового человека своеобразный мочевой, слабый ароматический, который зависит от содержания в ней минимальных количеств летучих эфирных кислот. При длительном стоянии, в результате щелочного брожения, моча приобретает резкий неприятный аммиачный запах. Запах гниющих яблок при наличии в моче ацетоновых тел. Прием некоторых пищевых продуктов и лекарств придают моче свой запах.

    Прозрачность (мутность) . Нормальная свежевыпущенная моча прозрачна. Мутность может быть вызвана: солями, клеточными элементами, бактериями.

    Посуда, оборудование и реактивы:

    — 10% раствор уксусной кислоты, раствор щелочи ( NaОН ).

    В цилиндр емкостью 10 — 15 мл наливают мочу, отстаивают и через слой мочи читают печатный текст. Степень мутности обозначают следующим образом: прозрачная моча — печатный текст читается легко; слабая степень мутности — легко читается средний и крупный печатный текст; умеренная — буквы различаются нечетко; большая — буквы неразличимы.

    Причину помутнения определяют следующим образом. В пробирку наливают 2-3 мл мочи, нагревают. Исчезновение помутнения указывает на наличие уратов; усиление — на наличие фосфатов. Последние растворяются после добавления 2-3 капель 10% уксусной кислоты, Исчезновение помутнения от добавления нескольких капель щелочи говорит о присутствии кристаллов мочевой кислоты.

    Удельный вес зависит от количества растворенных в моче плотных веществ. В норме удельный вес мочи 1012 — 1025.

    — цилиндр емкостью в 50 — 100 мл,

    — урометр с делениями от 1000 до 1050 .

    Мочу наливают в цилиндр, избегая образование пены. Если пена образуется, то ее следует удалить фильтровальной бумагой. Осторожно погружают урометр в жидкость; верхняя часть урометра должна быть сухой и урометр не должен касаться стенок цилиндра. Когда урометр перестал погружаться, его слегка толкают сверху, иначе он опускается меньше, чем следует. После прекращения колебаний по нижнему мениску жидкости по шкале урометра отмечают удельный вес. При малом количестве мочи, ее следует развести дистиллированной водой (1 мл мочи +1 мл воды — разведение в 2 раза, 1 мл мочи +2 мл воды — в 3 раза и т.д.) . Определив удельный вес, две последние цифры удельного веса умножают на степень разведения. Необходимо при определении удельного веса учитывать температуру окружающей среды, так как урометры выверены при температуре 15’С. Измеряя удельный вес, следует вносить поправку: на каждые 3′ выше 15′ необходимо прибавить 0,001, и на каждые 3′ ниже 15′ вычитать 0,001.

    Реакция мочи ( PH ) в норме при смешанной пище кислая или слабокислая. Ориентировочный способ определения реакции мочи при помощи синей и красной лакмусовой бумажек. В кислой моче синяя лакмусовая бумага краснеет, в щелочной — красная синеет; в нейтральной обе бумажки не меняют своего цвета.

    Исследование химических свойств

    Прежде чем приступить к химическому исследованию, необходимо профильтровать мочу.

    Химическое исследование включает в себя определение в моче белка, глюкозы, ацетона и ацетоуксусной кислоты, желчных пигментов и уробилина.

    Качественные реакции на белок основаны на его осаждении реактивами или нагреванием. При наличии белка в моче образуется большая или меньшая степень помутнения. Условия определения белка:

    1) — моча должна иметь кислую реакцию. Щелочную мочу подкисляют, добавляя 2 — 3 капли уксусной кислоты.

    2) — моча должна быть прозрачной. Помутнение устраняется фильтрованием через бумажный фильтр. Качественную пробу следует проводить в двух пробирках, одна — контроль.

    0ценка: В норме белка в моче не содержится.

    Проба с сульфосалициловой кислотой

    — 20% раствор сульфосалициловой кислоты.

    В пробирку наливают 4 — 5 мл мочи и добавляют 8 — 10 капель реактива. При наличии белка в моче, в зависимости от количества его, может быть помутнение или выпадает хлопьевидный осадок. Проба считается одной из самых чувствительных, положительна при наличии белка в моче в количестве — 0,015%.

    Проба с уксусной кислотой

    — 10% раствор уксусной кислоты.

    В пробирку наливают 8 — 10 мл мочи, нагревают верхний слой мочи до кипения и прибавляют 8 — 10 капель уксусной кислоты. При наличии белка в нагретой части мочи образуется помутнение или хлопья свернувшегося белка.

    Количественное определение белка (способ Робертса — Стольникова):

    Принцип метода: Если при наслаивании мочи на азотную кислоту на границе двух жидкостей образуется тонкое белое кольцо между 2-й и 3-й минутами, то в исследуемой моче содержится 0,033%o белка.

    — концентрированная азотная кислота,

    В пробирку наливают 1 — 3 мл азотной кислоты и осторожно по стенке наслаивают такое же количество мочи. Замечают время после наслаивания. Если кольцо на границе жидкостей (рассматривать его следует на черном фоне) образуется сразу или раньше 2-х минут после наслаивания, мочу необходимо развести водой. После чего производят повторное определение белка в разведенной моче. Разведение производят до тех пор, пока белое кольцо при наслаивании на азотную кислоту разведенной мочи не появится между 2-й и 3-й минутами. Количество белка вычисляют путем умножения 0,033%o на степень разведения.

    Качественная проба (проба Гайнеса)

    Проба основана на свойстве глюкозы восстанавливать гидрат окиси меди в гидрат закиси меди (желтый цвет) или закись меди (красный цвет).

    реактив Гайнеса (смесь растворов сернокислой меди, едкого натра и глицерина).

    В пробирку наливают 3 — 4 мл раствора Гайнеса, прибавляют 8 — 10 капель мочи и нагревают до кипения. При наличии глюкозы цвет мочи изменяется от коричневато-зеленого до красного, в зависимости от количества сахара.

    0ценка: В норме глюкозы в моче нет.

    Количественное определение глюкозы мочи

    Принцип метода заключается в использовании свойства глюкозы вращать плоскость поляризации вправо. По углу вращения поляризованного луча можно определить количество глюкозы.

    Моча должна быть прозрачной, не содержать белка, кислой реакции. Для этого мочу подкисляют слабой уксусной кислотой, кипятят, охлаждают и фильтруют. Трубку поляриметра заполняют профильтрованной мочой без пузырьков воздуха, накрывают шлифованным стеклом, завинчивают плотно, насухо вытирают и помещают в аппарат.

    Определение производят спустя 2 — 3 минуты после заполнения трубки, так как колебание частиц жидкости мешает исследованию. Оптически активный раствор глюкозы, отклоняя луч, меняет интенсивность света в окуляре; восстановить освещенность можно, повернув анализатор на определенный угол. Угол отклонения выражается в градусах шкалы прибора. Угол отклонения в 1 градус соответствует 1 % глюкозы при длине трубки 18,94; если длина 9,47 — полученный результат умножить на 2.

    Определение ацетоновых тел (проба Ланге)

    К ацетоновым телам относятся ацетон, ацетоноуксусная кислота и оксимасляная кислота. В моче встречаются совместно, поэтому раздельное их определение клинического значения не имеет. В норме в моче не содержатся.

    — смесь нитропрусидного натрия с сернокислым аммонием;

    В пробирку насыпают немного, так чтобы было покрыто дно нитропрусидной смеси, и приливают 5 мл мочи, взбалтывают и осторожно наслаивают 2 мл аммиака. Фиолетово-красное кольцо, появившееся на границе двух жидкостей, свидетельствует о наличии в моче ацетона.

    Определение билирубина (проба Розина)

    Качественная реакция основана на превращении билирубина под воздействием окислителей (йода) в биливердин зеленого цвета.

    — раствор Люголя или 1% спиртовой раствор йода.

    На 3 — 4 мл мочи осторожно наслаивают 1 — 2 мл 1% спиртового раствора йода или раствора Люголя. При наличии желчных пигментов (билирубина) на границе жидкостей появляется зеленое кольцо.

    0ценка: В норме билирубин в моче не содержится.

    Определение уробилина (проба Флоренса)

    — концентрированная серная кислота;

    — концентрированная соляная кислота.

    К 10 мл мочи добавляют 3 — 4 капли концентрированной серной кислоты, смешивают, приливают 2 — 3 мл эфира, пробирку закрывают резиновой пробкой и осторожно смешивают, не взбалтывая. В другую пробирку наливают 2 мл концентрированной соляной кислоты. Пипеткой отсасывают из первой пробирки эфирный слой и наслаивают его на соляную кислоту. На границе жидкостей при наличии уробилина образуется красно-фиолетовое кольцо различной интенсивности.

    В центрифужную пробирку наливают 10 — 15 мл мочи и центрифугируют при 1000 — 1500 об/мин. 10 минут. После центрифугирования пробирку быстро опрокидывают для удаления надосадочной жидкости, затем переводят в исходное положение, чтобы осадок остался на дне. Пастеровской пипеткой осадок размешивают, небольшую каплю осадка помещают на предметное стекло и накрывают покровным. Микроскопия производится сначала под малым, а затем под большим увеличением.

    Различают организованный (эритроциты, лейкоциты, эпителиальные клетки, цилиндры) и неорганизованный осадок (соли).

    Эритроциты могут быть неизмененные в виде дисков желтовато-зеленоватого цвета, содержащих гемоглобин, и измененные (выщелоченные), свободные от гемоглобина, бесцветные, имеющие вид одноконтурных или двухконтурных колец. В норме содержатся единичные эритроциты в препарате.

    Лейкоциты обнаруживаются в моче в виде небольших зернистых клеток правильной округлой формы серого цвета. Лейкоциты в моче представлены нейтрофилами и содержатся в небольшом количестве в нормальной моче до 2000000 в сутки). Видоизмененные лейкоциты, так называемые клетки Штернгеймера- Мальбина. Для выявления их после центрифугирования к осадку прибавляют 1 — 2 капли краски, предложенной Штернгеймером и Мальбиным, размешивают, каплю берут на предметное стекло, покрывают покровным и микроскопируют. Клетки Штернгеймера-Мальбина в 2-3 раза больше обычных лейкоцитов, бледно-синие с бледно-синим или бледно-фиолетовым ядром, в цитоплазме заметно движение гранул.

    Плоский эпителий — большие (в 3 — 4 раза больше лейкоцитов), широкие полигональные клетки с одним ядром и мелкозернистой цитоплазмой. Встречаются группами и пластами. Наличие этих клеток в моче не имеет особого диагностического значения.

    Клетки круглого эпителия — довольно крупные, правильной округлой или овальной формы с гомогенной или мелкозернистой протоплазмой и небольшим ядром. В нормальной моче — единичные.

    Почечный эпителий — небольшие круглые или кубические клетки с большим пузыриковидным ядром и слегка зернистой протоплазмой. В нормальной моче не обнаруживаются.

    Цилиндры — белковые или клеточные образования канальцевого происхождения, имеют цилиндрическую форму. В нормальной моче может быть небольшое количество только гиалиновых цилиндров (2000 за сутки).

    Гиалиновые цилиндры — слепки белка, нежные, бледные, почти прозрачные образования, прямые и извитые, концы их закруглены или неправильно обломаны.

    Зернистые цилиндры — короткие широкие — состоят из зерен различной величины, имеют темный, часто желто-коричневый цвет.

    Восковидные цилиндры — очень толстые, короткие с желтоватым цветом воска, хорошо контурированы.

    Эпителиальные цилиндры имеют четкие контуры, состоят из клеток почечного эпителия.

    Эритроцитарные цилиндры — желтого цвета, состоят из массы эритроцитов. Цилиндроиды похожи на гиалиновые цилиндры, но не имеют продольной исчерченности, контуры их неправильные, концы раздваиваются.

    Кроме того, в осадке могут быть: сперматозоиды, бактерии, дрожжевые и другие грибки.

    В кислой моче встречаются:

    Мочевая кислота — кристаллы разнообразной формы (ромбической, шестигранной, в виде бочонков, брусков и др.), окрашенные в красно-бурый или желтовато-бурый цвет. Микроскопические кристаллы в осадке мочи имеют вид золотистого песка.

    Ураты — аморфные мочекислые соли — мелкие желтоватые, часто склеенные группами зернышки. Микроскопически ураты имеют вид плотного кирпично-розового осадка.

    Оксалаты — бесцветные кристаллы в форме почтовых конвертов — октаэдров.

    Сернокислая известь — тонкие, бесцветные иглы или розетки.

    В щелочной и нейтральной моче встречаются:

    Фосфаты — аморфные массы солей сероватого цвета (мелкозернистые). Микроскопически — осадок белого цвета.

    Трипельфосфаты — бесцветные яркие кристаллы в виде гробовых крышек или длинных призм.

    Мочекислый аммоний — желтые непрозрачные шары с шипами на

    Функциональные пробы почек и количественный метод определения форменных элементов

    В каждой из 8-ми полученных порций измеряют количество мочи с помощью мерного цилиндра, определяют удельный вес по ранее разобранной методике. В норме количество мочи за сутки — 1000 — 1500 мл, количество мочи в каждой порции 70 — 250 мл; дневной диурез — 2 части, ночной — 1 часть; колебания удельного веса — 1012 — 1025.

    Проба по Каковскому — Аддису

    Принцип исследования заключается в определении числа форменных элементов (эритроцитов, лейкоцитов, цилиндров) в суточном количестве мочи с помощью счетной камеры.

    Градуированная центрифужная пробирка.

    Количество мочи, соответствующее объему, выделенному за 1/5 часа (за 12 минут), наливают в центрифужную пробирку и центрифугируют при 2000 об/мин. в течение 5 минут. Пипеткой отсасывают надосадочную жидкость, оставляя 0,5 мл осадка. Осадок смешивают и пипеткой заполняют счетную камеру Горяева. Считают отдельно лейкоциты, эритроциты, цилиндры. Исследуемый осадок можно смешать с 1-2 каплями краски

    Штернгеймера в Мальбина для выявления наличия в моче клеток Штернгеймера — Мальбина. Подсчет клеток производится под большим увеличением в 100 любых больших квадратах. Полученное количество клеток 1 ммЗ умножают на 60 000, узнают количество форменных элементов, выделенных с мочой за сутки. Для нормальной мочи количество эритроцитов до 1 млн.; лейкоцитов до 2 млн., цилиндров до 2000.

    Анализ мочи по Нечипоренко

    Анализ впервые предложил советский врач и учёный А. З. Нечипоренко (1916—1980г.г.).

    Цель анализа состоит в выявлении воспалительного процесса в мочевыделительной системе и определении количества форменных элементов — лейкоцитов, эритроцитов и цилиндров, — в единице объёма (обычно в 1 мл).

    В норме допустимы следующие показатели:

    В силу относительной простоты и высокой информативности этот метод получил широкое распространение. Его используют для диагностики различных воспалительных процессов мочевыводящей системы (цистит, пиелонефрит), выявления крови в моче (гематурия) и цилиндрурии.

    Показания для проведения исследования:

    Наличие клинических проявлений заболевания органов мочевой системы при нормальном общем анализе мочи;

    Перенесенное ранее воспалительное заболевание органов мочевой системы.

    Для исследования необходимо взять сухую чистую банку и собрать среднюю порцию утренней мочи, предварительно тщательно промыв наружные половые органы. Собрать минимум 50-100 мл мочи.

    Собранная в посуду моча перемешивается.

    10 мл мочи отливается в градуированную пробирку.

    Пробирка центрифугируется 3 минуты при 3500 оборотов/мин.

    Верхний слой мочи аккуратно отбирается пипеткой, в пробирке оставляют 1 мл мочи с осадком.

    Осадок хорошо перемешивается и им заполняется счётная камера Горяева, камера Фукса-Розенталя или камера Бюркера.

    В счётной камере во всей сетке ведётся раздельный подсчёт лейкоцитов, эритроцитов и цилиндров и пересчитывается на 1 мм 3 осадка мочи.

    Производят подсчёт по формуле N = (H/v)*(V o /V s ).

    Здесь N — истинное количество элементов, V o — объём осадка (1000 мкл), V s — общий объём пробы, H — количество подсчитанных в камере клеток, v — объём камеры (0,9 мм 3 для камер Горяева и Бюркера, 3,2 мм 3 для камеры Фукс-Розенталя).

    Бактериоскопическое исследование производят, главным о6разом, с целью обнаружения микобактерий туберкулеза.

    Утреннюю порцию мочи, собранную в стерильную посуду, отстаивают. Образовавшийся осадок собирают пипеткой в центрифужную пробирку и центрифугируют. Из осадка приготавливают мазки, хорошо высушивают, фиксируют над пламенем и окрашивают по Цилю Нильсену и затем микроскопируют.

    Микобактерии туберкулеза , имеющие вид палочек, окрашены в красный цвет и отчетливо выделяются на синем фоне препарата.

    1. Камышников В.С. Техника лабораторных работ в медицинской практике. М., «Медпресс-информ», 2013.

    2. Методы клинических лабораторных исследований. Под ред.В.С.Камышникова. М., «Медпресс-информ», 2012.

    3. Кишкун А.А. Клиническая лабораторная диагностика. М., «ГЭОТАР-Медиа», 2010.

    4. Клиническая лабораторная диагностика: руководство. В 2 томах. Том 1. / Под ред. В.В. Долгова. 2012.

    5. Медицинские анализы. Справочник. Под ред. Ингерлейб М. Ростов, «Феникс», 2013.

    6. Руководство по лабораторным методам диагностики. Под ред. А.А.Кишкун. М., «ГЭОТАР-Медиа», 2013.

    7. Пустовалова Л.М. /Л.М. Пустовалова, И.Е.Никанорова/ — Техника лабораторных работ. Ростов н/Д.: «Феникс», 2014.

    1. Вахрушев Я.М. Лабораторные методы диагностики. / Я.М. Вахрушев. Е.Ю. Шкатова — Ростов – на Дону.: Феникс, 2015.

    2. БелевитинаА.Б. Клиническая интерпретация лабораторных исследований / Белевитина А.Б., Щербак С.Г. – Спб.: ЭЛБИ-Спб, 2010.

    3. Анализы полный справочник. – Под редакцией проф. Елисеева П.М., — М.: Издательство Эксмо, 2014.

    источник