Нормы анализа кала на кальпротектин

Обнаружение кальпротектина в кале более 50 мкг/г говорит о воспалительном процессе в кишечнике инфекционной этиологии. Возбудителями могут быть:

• сальмонеллы, вызывающие сальмонеллёз;
• кампилобактеры, вызывающие кампилобактериоз (вибриоз);
• аденовирусы;
• норовирусы;
• ротавирусы.

Причинами повышенного кальпротектина в кале также могут быть целиакия (наследственное заболевание, характеризующееся дефицитом ферментов расщепляющего глютен), кровотечения и новообразования в кишечнике, муковисцидоз (поражение желёз внутренней секреции, наследственный характер).

В случае выявления кальпротектина в кале выше референсных значений лечащий врач назначает дополнительные методы исследования желудочно-кишечного тракта для точной диагностики причин воспалительных изменений. Среди них могут быть:

• реакция Грегерсена (анализ кала на скрытую кровь);
• копрограмма (общеклиническое исследование кала);
• раковый эмбриональный антиген (РЭА) – маркёр онкологических заболеваний;
• количественное определение С-реактивного белка (СРБ) – маркёра воспаления;
• ревматоидный фактор;
• ОАК – общеклинический анализ крови с подсчётом лейкоцитарной формулы;
• определение скорости оседания эритроцитов;
• антитела к ядерным антигенам (ANA).

Анализ кала на кальпротектин является высокоспецифичным исследованием, которое без инвазивного вмешательства позволит судить о наличии воспалительных процессов в стенке кишечника. Этот показатель поможет различить болезнь Крона и синдром раздражённого кишечника. В случае обнаружения кальпротектина выше референсных значений лечащий врач назначит дополнительные методы исследования. Они помогут правильно поставить диагноз и вовремя назначить необходимую терапию.

Мы приложили много усилий, чтобы Вы смогли прочитать эту статью, и будем рады Вашему отзыву в виде оценки. Автору будет приятно видеть, что Вам был интересен этот материал. Спасибо!

источник

Кровь и слизистые включения в дефекациях, которые подкрепляются тошнотой и болями возле пупка – все это признаки воспаления в кишечнике. Чтобы уберечь свое здоровье от негативных последствий, следует проконсультироваться с гастроэнтерологом (в крайнем случае с терапевтом). Для определения дальнейшего курса лечения нужно установить характер и первопричину воспаления, поэтому требуется специальное исследование кала на кальпротектин и дополнительная диагностика ЖКТ.

Анализ кала на кальпротектин

Важно определить, что значит кальпротектин, и как проводится выявление его уровня. В лейкоцитах образуется специальный белок – это и есть кальпротектин. По природе, его можно определить, как протеин, что соединяется с кальцием. Подобное содержимое при исследовании можно найти в слюне, спинномозговой жидкости, а также в каловых массах человека.

Внимание! В медицинских исследованиях важен только кальпротектин, что содержится в кале. Благодаря ему можно получить некоторые сведения о клинической картине кишечника.

Анализ, что подтверждает количественный показатель кальпротектина проводится в медицинских учреждениях с целью определения воспаления в кишечнике. Для его проведения требуется биологический материал – каловые массы.

Анализ кала на кальпротектин проводится с целью определения воспаления в кишечнике

Определение уровня данного белка необходимо для выявления патологического процесса в кишечнике.

1. Для диагностирования болезни Крона либо колита.
2. Может быть назначен в процессе терапии недуга воспалительного характера.
3. С целью диагностирования раздраженного кишечника.
4. Рекомендовано обязательно проводить в детском возрасте.

Кишечник при болезни Крона

Если наблюдаются следующие признаки, то проведение анализа обязательно:

• постоянные проблемы со стулом (запор либо диарея);
• быстрое снижение массы тела;
• дисфункция кишечника;
• болезненные ощущения в ЖКТ и повышение температуры;
• появление кровяных либо слизистых вкраплений в кале;
• отсталость развития у детей;
• рвота;
• гипергидроз;
• постоянная слабость.

Для получения максимально точных показателей следует соблюдать такие рекомендации:

1. Если пациент принимает какие-либо лекарственные препараты, витамины либо БАДы (все средства, что содержат большое количество цинка, магния, кальция), то прием необходимо прекратить и только спустя 5 дней подготовить биологический материал для исследования. Таким образом, в каловых массах будут отсутствовать завышенные показатели микроэлементов.
2. Для забора кала рекомендовано приобрести специально предназначенную емкость – медицинский горшок либо судно. Категорически противопоказано извлекать дефекации из унитаза.
3. Особых требований в диете перед сдачей анализа нет.
4. При менструации разрешено проводить анализ, однако собирать биологический материал аккуратно, чтобы месячная кровь не попала в дефекации.
5. Нужно проследить, чтобы при сборе каловых масс в них не попала моча (это может привести к ложным результатам анализа).

Как собрать кал на анализ

Чтобы подготовить дефекации для анализа, потребуется заранее приобрести медицинскую емкость – горшок/судно. В крайнем случае можно простерилизовать обычную стеклянную банку небольшого объема. Время проведения процедуры – утро.

Рекомендация! Перед сбором материала необходимо провести утреннюю гигиеническую процедуру либо принять душ.

Если дефекации собирались перед сном, то в специальной емкости их нужно отправить в холодильник в основной отсек, чтобы максимальная температура не превышала 7 С.

По факту природного процесса дефекации для исследования нужно собрать не менее 10 грамм. Визуально это одна чайная ложка биологического материала. Сразу после сбора можно отправляться в лабораторию. Скорость получения результатов зависит от медицинского учреждения, но в среднем не превышает одной недели. Готовые результаты забираются в регистратуре.

В первую очередь нельзя отправлять биологический материал, если больной принимает противовоспалительные лекарственные средства нестероидного характера. Также может наблюдаться положительный результат после приема Аспирина, Ацетилсалициловой кислоты и блокаторов протоновой помпы.

Содержание фекального кальпротектина у больных с воспалительными заболеваниями толстой кишки

Не исключено максимальное снижение количественного показателя кальпротектина в дефекациях. Объясняется это таким заболеванием, как нейтропения. Когда у пациента наблюдается понижение показателя гранулоцитов в крови (гранулоцитопения), то данный белок при исследовании кала будет в минимальных количествах.

Измерения количественного показателя данного белка определяются в нанограммах. Если результаты исследований получены, то их можно расшифровать самостоятельно.

Это важно! Норма кальпротектина для взрослых и малышей старше 5 лет составляет 0 – 10 нг/мл. Любые отклонения свидетельствуют о развитии воспалительного процесса.

Результаты определения уровня фекального кальпротектина

Результаты анализа — содержание кальпротектина ниже 10 нг/мл., считаются отрицательными, поэтому у пациента отсутствует воспалительный процесс.

В медицине существует понятие незначительного отклонения от нормы. Данное явление считается нормальным. Первопричиной отклонения бывает гастрит, недуг тонкого кишечника, недостаточное количество лактозы. Следовательно, гастроэнтерологи рекомендуют наблюдать кишечник и систематично сдавать анализы.

Положительные результаты определяются при повышенном содержании в каловых массах кальпротектина. Такие клинические показатели могут свидетельствовать об опасных заболеваниях, что угрожают жизни пациента.

Факты о фекальном кальпротектине

В каловых массах повышается кальпротектин за счет высвобождения его из лейкоцитов, направляющихся в область кишечника при активизации воспалительного процесса. Ряд заболеваний может провоцировать повышение кальпротектина, к ним относятся:

• болезнь Крона (воспаление охватывает ЖКТ);
• поражение кишечника раком;
• язвенный колит;
• дивертикулит;
• пародонтоз;
• целиакия;
• кровотечение в ЖКТ;
• муковисцидоз (недуг наследственного характера кистозной природы).

Стадии поражения кишечника язвенным колитом

Значительное отклонение от показателей нормы является поводом для направления пациента на дополнительные исследования:

1. Скрининг.
2. Анализ крови.
3. Копрограмма.
4. Исследование кала на скрытые кровяные вкрапления.
5. Специальный анализ СОЭ/РЭА.

Нормальный состав микрофлоры кишечника

Обратите внимание! Повышение кальпротектина не всегда считается признаком патологического отклонения. Завышенные показатели белка могут возникнуть в случае кишечного кровоизлияния, аллергии после приема противовоспалительных нестероидных лекарственных средств. Стоит учитывать, что у детей, возрастом четыре года данный белок будет повышен, что считается нормой.

После прохождения пациентом медицинских диагностик, специалист определяет диагноз и выписывает необходимый курс лечения в индивидуальном порядке. Приблизительная терапия при повышении кальпротектина предусматривает ряд следующих препаратов.

Это важно! В индивидуальном порядке врач принимает решение о госпитализации пациента. Дополнительно специалисты могут порекомендовать больному отказаться от пагубных привычек, обратиться к диетическому питанию и минимизировать стрессовые ситуации.

По факту завершения лечебной терапии больному нужно пройти повторную медицинскую диагностику, что включает анализ на уровень кальпротектина в дефекациях. Благодаря последнему анализу можно быстро выявить воспалительный процесс в кишечнике, а, следовательно, и серьезные заболевания. Направление выписывает только гастроэнтеролог, а в некоторых случаях терапевт. Нельзя игнорировать отклонения кальпротектина, поскольку показатели данного белка могут предупреждать о раковом заболевании.

источник

Анализ кала на кальпротектин – лабораторный тест, в результате которого выясняется наличие белка в экскрементах, служащего специфическим маркером воспалений, локализующихся в области ЖКТ человека.

Если вы хотите узнать, как подготовиться к сдаче данного анализа, то читайте статью.

• Кальпротектином называют особый вид белка, высвобождающегося из лейкоцитов крови в процессе их активации или умирания.
• Количественный показатель, прописанный в результатах анализа кала, имеет прямопропорциональную связь с числом лейкоцитов, в момент забора материала находящихся в кишечнике человека.
• Кальпротектин образуется на базе активных лейкоцитов, называемых нейтрофилами, или тех, которые уже погибли под влиянием негативных внутренних факторов.
• Как правило, высвобождение данного белка происходит в момент борьбы лейкоцитов с различными воспалительными заболеваниями кишечника.
• Традиционное лечение, направленное на смягчение воспаления, может исказить результаты анализа.
• Поэтому перед тем как приступить к сбору биологического материала, предназначенного для лабораторного исследования, следует отменить любое лечение (даже то, которое ранее было согласовано с врачом).

Разумеется, данный совет не касается приема жизненно важных препаратов, в особенности когда они не обладают противовоспалительным действием.

Анализ кала, направленный на выяснение уровня кальпротектина, назначается тем людям, которые жалуются на различные проблемы, локализующиеся в области желудочно-кишечного тракта и имеющие симптомы, указывающие на наличие воспалительных процессов.

Кроме того, данный анализ кала позволяет исключить наличие такого заболевания, как синдром раздраженного кишечника, так как при нем повышение специфического маркера не наблюдается.

Исследование кала на кальпротектин – несложная и безболезненная процедура. Чтобы ее осуществить, нужно правильно собрать биологический материал и отнести его в лабораторию на исследование.

READ Причины крови с калом у мужчин

Повышенная концентрация кальпротектина в кале, выявленная в ходе лабораторного анализа, – повод для инициации более серьезных и точных исследований.

Выяснение уровня кальпротектина в кале проводится в тех случаях, когда пациент жалуется на следующие симптомы:

• проблемный стул (к примеру, нерегулярный или жидкий, обогащенный слизью или сухой, содержащий кровь и проч.);
• сильные боли, локализующиеся в области живота;
• регулярная гипертермия;
• избыточное выделение пота;
• резкая и необоснованная потеря веса;
• слабость, апатия, сонливость;
• быстрая физическая утомляемость;
• рвота, сопровождающаяся тошнотой.

Кроме того, анализ на содержание кальпротектина в кале рекомендуется сдавать тем людям, которые страдают от хронических абсцессов или свищей, локализующихся в области желудочно-кишечного тракта.

Причины повышения кальпротектина в кале разнообразны. Объединяет их лишь тот факт, что все заболевания данного спектра сопровождаются присутствием воспалительного процесса, протекающего в тканях желудка или кишечника.

Какое количество кальпротектина в кале считается нормой? В кале у взрослого здорового человека может содержаться до 10 мг/мл кальпротектина.

«Нормальный» кальпротектин – еще не повод для отсутствия беспокойства. Показатели, попадающие в данный количественный промежуток, не являются поводом для постановки диагноза, указывающего на наличие воспалительного заболевания.

1. Но стоит помнить о том, что существует немало проблем, способных порождать схожие симптомы и негативным образом влиять на работу пищеварительной системы.
2. Исследование, проводимое с целью определения уровня кальпротектина в кале, является достаточно точным.
3. Поэтому его повторное прохождение назначают лишь тем пациентам, которые имеют выраженные симптомы воспалительных заболеваний (несмотря на то, что норма содержания вещества не превышена).
4. Если симптоматика является смытой и в кале не находят превышенного содержания кальпротектина, то в подавляющем большинстве случаев врачи ставят диагноз «синдром раздраженного кишечника».

READ О копрологии — что показывает анализ кала?

Стоит отметить, что кальпротектин в кале повышен не только в тех случаях, когда есть «прямой» воспалительный процесс, протекающий в тканях желудка.

Иногда повышенное содержание данного белка может указывать и на наличие патологий, обладающих вирусной или бактериальной этиологией. К таким патологиям можно отнести сальмонеллез, бруцеллез, кампилобактериоз и проч.

Другие распространенные причины повышения уровня кальпротектина в кале:

• острая непереносимость лактозы (при употреблении молочных продуктов);
• острая непереносимость глютена (при съедании пищи, приготовленной на основе злаковых культур);
• различные новообразования, локализующиеся в области желудочно-кишечного тракта (чаще – кишечника), обладающие невыясненной этиологией;
• дивертикулы кишечника;
• муковисцидоз, сопровождающийся нарушениями в работе эндокринных желез внутренней секреции.

• Лечение патологий, на которые может указывать повышенный уровень кальпротектина в кале, является специфическим.
• Поэтому данный анализ никогда не проводят соло, его дополняют другими, более глубокими исследованиями.
• Можно сказать, что исследование кала на кальпротектин является базовым, поэтому не стоит пугаться, когда врач его назначает.
• В качестве дополнительных анализов, благодаря которым можно уточнить специфику заболевания, повышающего уровень кальпротектина в кале, назначаются:

• копрограммы;
• исследование на содержание крови в экскрементах;
• тесты, позволяющие определить наличие (и содержание в кале) C-реактивного белка, раковых эмбриональных антигенов и антител к ядерным антигенам.

1. Готовиться к сдаче кала для выявления уровня кальпротектина нужно за два или за три дня перед проведением процедуры.
2. Важно понимать, что анализ сможет показать адекватный результат только в случае выполнения определенных подготовительных действий.
3. Если пренебречь некоторыми из них, то можно добиться стойкого искажения результатов и получить недостоверную информацию, вносящую опасные коррективы в конечный диагноз.

Кал нужно собирать в утреннее время, после посещения душа и совершения всех необходимых гигиенических процедур.

Для полноценного исследования требуется не более двадцати – тридцати граммов биологического материала.

READ Тревожный симптом — кровь в кале ребенка

Его нужно поместить в специальный стерильный контейнер, который можно приобрести в аптеке. В крайнем случае, контейнер можно заменить на стеклянную банку, обработанную кипяченой водой.

Собранный кал нужно доставить в лабораторию не позднее двух-трех часов после сбора. В процессе транспортировки не стоит переохлаждать или перегревать собранный материал.

Результаты исследования будут готовы уже через два или три дня. Как правило, они отправляются непосредственно к тому врачу, который инициировал проведение исследования, выписав направление (тогда, когда анализ сдается в государственной клинике).

Врач, который получит результаты анализа пациента, изучит их и сможет составить верную схему лечения проблем, беспокоящих человека.

Лечение будет напрямую связано с выявленным видом патологии. К примеру, если кальпротектин в кале повышен из-за наличия сальмонеллеза или какого-либо вирусного заболевания, то больному будут прописаны препараты, предназначенные для угнетения активности возбудителя инфекции.

• Нередко для борьбы с причинами, вызывающими повышенное содержание кальпротектина в кале, используются препараты ферментативной группы, способные восстанавливать нарушенную работу органов желудочно-кишечного тракта.
• Лабораторное исследование кала на кальпротектин – анализ, которым не следует пренебрегать ни взрослым, ни даже маленьким детям.
• В идеале, его нужно делать два раза в год, посещая профилактические осмотры в государственных или частных поликлиниках.
• Информация, которая выясняется в ходе его проведения, позволяет выявить наличие серьезных патологий и вовремя приступить к их адекватному и профессиональному лечению.

знаю что воспаление есть, он мне поможет узнать что у меня-няк или крон или что еще?

Мне интересно что спецы отвечают на этот вопрос. Думаю не поможет, раз Вы и так видели воспаленную слизистую на колонушке. Могу ошибаться.

Поправьте меня, например, если знаете какие «что ещё» выглядят как воспаленная слизистая, но не повышают продукцию этого белка нейтрофилами. Кстати, читал, что во время самого проявления воспаления кальпротектин бывает ниже, чем перед ним.

То есть смысл в предсказании того, чего пока на колонушке не видно. Да и менее запарно по сравнению с колонушкой.

Увеличенную см тут: http://journals.lww.com/jpgn/Fulltex. n_With.21.aspx

Найдите плиз кто-нибудь другие статьи про бета-дефензин в диагностике ВЗК у взрослых.

1. Дифференциальный диагноз между органическими воспалительными заболеваниями кишечника и функцилнальным синдромом раздраженного кишечника
2. В клинико-диагностической лаборатории ЕМС проводится количественный тест – «Фекальный Кальпротектин» .
3. ФК – высокочувствительный биомаркер интестинального воспаления.

Тест имеет большое значение в дифференциальной диагностике таких распространенных органических воспалительных заболеваний кишечника, как болезнь Крона и язвенный колит, и функциональных нарушений в работе кишечного тракта .

Кальпротектин отражает миграцию нейтрофилов через стенку кишечника.

Значительно возрастает его концентрация при язвенном колите и болезни Крона.

• Фекальный кальпротектин стабилен в кале, что позволяет увеличить период времени от взятия образца до его исследования до 7-ми дней.
• ФК является важнейшим прогностическим маркером клинического рецидива для болезни Крона и язвенного колита и неинвазивным методом контроля лечения.
• Другие аспекты клинической интерпретации уровня ФК в кале:

Высокие концентрации ФК определяются у больных с бактериальными инфекциями ЖКТ. Но его уровень не повышается значительно при воспалительных заболеваниях верхних отделов ЖКТ , а также у пациентов с колоректальными полипами, дивертикулезом и аденомой толстого кишечника.

В то же время, повышенные значения ФК могут быть выявлены при колоректальной неоплазии.

Концентрация ФК не изменяется или может быть лишь незначительно увеличена при целиакии.

Концентрация ФК высокая у новорожденных и детей до 1 года.Поэтому определение ФК следует использовать с осторожностью у детей младше четырех лет. В тоже время, у детей старше указанного возраста исследование ФК может помочь выявить язвенный колит и болезнь Крона в латентный период.

На результаты анализа могут влиять некоторые НПВС, препараты, богатые цинком, магнием, кальцием.

Концентрация ФК ниже 50 мкг/г свидетельствует об отсутствии воспалительных процессов в кишечнике.

Уровень ФК от 50 до 200 мкг/г говорит о наличии воспалительного процесса в кишечнике. При первичном выявлении рекомендуется проведение повторного анализа.

Уровень ФК выше 200 мкг/г указывает на активно развивающийся воспалительный процесс.

Дифференциальный диагноз между язвенным колитом и болезнью Крона проводится с использованием детекции антител к SaccharomysescerevisiaeASCA . Их специфичность для болезни Крона составляет 95-100%.

Сдать образец на фекальный кальпротектин, а так же кровь на антитела к ASCA можно круглосуточно в любой из клиник ЕМС.

Кальпротектин — белок, продуцируемый нейтрофилами слизистой оболочки кишечника.

Высокий уровень кальпротектина надежно отражает активность и распространенность воспаления в слизистой оболочке кишечника, а также является предиктором близкого обострения у пациентов с болезнью Крона, язвенным колитом.

Кальпротектин высоко стабилен в кале в течение нескольких дней. Чувствительность теста составляет 100%, специфичность — 97%.

Тест позволяет проводить дифференциальный диагноз между органическими воспалительными заболеваниями кишечника и функциональным синдромом раздраженного кишечника . При СРК кальпротектин в пределах нормы .

ß-дефензины являются частью врожденного иммунитета и антимикробной активности против бактерий, грибков и некоторых вирусов. Снижение ß-дефензина-2 наблюдается у пациентов с болезнью Крона, т.к. система дефензинов у них неполноценна. Тест используется для дифференциальной диагностики болезни Крона и язвенного колита .

Лактоферрин — железосвязывающий белок, является естественным антимикробным, антигрибковым и антивирусным белком, обладает антиоксидантными и иммуномодулирующими свойствами, поддерживает микробаланс в гастроинтестинальной системе. При болезни Крона концентрация лактоферрина в кале возрастает в десятки и даже сотни раз и поэтому является очень чувствительным и специфичным маркером данной патологии.

Определение комбинации перечисленных маркеров может быть очень информативным для:

• дифференциальной диагностики функциональных и воспалительных заболеваний кишечника
• надежной оценки активности воспалительного процесса в кишечнике неинвазивным методом
• мониторинга течения и эффективности терапии болезни Крона и язвенного колита
• быстрого получения первых результатов без дорогостоящих радиологического и/или эндоскопического исследований

Кальпротектин медленно разлагается протеазами микроорганизмов, что позволяет исследовать его концентрацию. Показатель относят к биомаркерам «фекального воспаления».

Синтез кальпротектина в кале отражает приток нейтрофилов в просвет кишки. Кровотечение из стенки кишки незначительно отражается на концентрации кальпротектина в стуле, и увеличивает его концентрацию не более чем на 10 мкг/гр.

1. Повышение концентрации фекального кальпротектина более 120 мкг/гр отмечаются более чем у 90% больных с воспалительными заболеваниями кишечника на этапе первичной диагностики.
2. Выявление фекального кальпротектина позволяет дифференцировать больных с синдромом раздраженной толстой кишки от органических причин поражения ЖКТ.
3. Концентрация фекального кальпротектина выше у новорожденных и детей до 1 года , поэтому определение кальпротектина следует использовать с осторожностью у детей моложе 4 лет.
4. При болезни Крона

В связи с низкой специфичностью, фекальный кальпротектин не может заменить инструментальные методы диагностики болезни Крона. В определенной степени, исследование фекального кальпротектина в сочетании с реацией стула на скрытую кровь и специфическими жалобами позволяет отобрать пациентов для проведения колоноскопии.

• Преимуществом исследования фекального кальпротектина при болезни Крона является то, что повышенные концентрации могут отражать сегментарные поражение тонкой кишки, которая недоступна для эндоскопического и гистологического исследования.
• Поскольку концентрация фекального кальпротектина в стуле непосредственно коррелирует с гистологической и эндоскопической активностью заболевания стойко повышенные уровни фекального кальпротектина могут указывать на неэффективность терапии, кроме того повышение содержания кальпротектина в динамике отмечается при приближающемся обострении заболевания.
• Факты о фекальном кальпротектине:
• — у детей до 1 года концентрации кальпротектина > 500 мкг/г, до 4 лет в норме концентрация 200 мкг/г — вероятно воспалительное заболевание кишечника.

При язвенном колите поражается слизистая толстой кишки с развитием деструктивно-язвенного воспаления разной интенсивности. Это хроническое рецидивирующее заболевание кишечника иммунной природы.

Опасность его в том, что на ранних стадиях многие занимаются самолечением, определяя начальные симптомы язвенного колита, как признаки геморроя — частый жидкий стул с примесью крови, слизи или гноя, кровотечения из анального отверстия.

Между тем, серьезное развитие заболевания требует экстренной госпитализации и длительного лечения.

Поэтому, при подозрении на язвенный колит, мы проводим полное диагностическое исследование на наличие язвенного колита, которое включает:

• УЗИ брюшной полости
• Колоноскопию – основной метод обследования ;
• Гистологический анализ ткани. взятой во время колоноскопии;
• Анализ крови — коагулограмма ; C-реактивный белок крови ; оценка ауто-антител

• Анализ кала — копрограмма ; фекальный кальпротектин .
• Бактериологические посевы ; Молекулярно-генетические исследования для исключения вирусного и паразитарного поражения

Если итоги проведенной диагностики дают возможность проведения амбулаторного лечения, врач-гастроэнтеролог подбирает медикаментозную терапию и специальную диету, которая абсолютно необходима при данном заболевании.

Желчекаменная болезнь

Диагностика и лечение в Столичной Медицинской Клинике проводится с использованием самых современных технологий и препаратов. Большой клинический опыт, профессиональный уровень специалистов клиники дополняются чутким неравнодушным отношениям к пациентам.

Подготовка к исследованию: Специальной подготовки не требуется Исследуемый материал: Кал

Кальпротектин представляет собой белок, который содержится в нейтрофильных гранулоцитах, где он составляет около 5% общего белка и 60% — белка цитоплазмы. Гораздо меньшие количества кальпротектина были обнаружены в моноцитах и активированных макрофагах.

Структурно кальпротектин состоит из одной легкой и двух тяжелых полипептидных цепей, а его молекулярная масса достигает 36,5 kDa. Бактериостатические и микостатические свойства кальпротротектина, содержащегося в нейтрофилах, сопоставимы с эффектом антибиотиков. Предполагают, что высокие концентрации белка в нейтрофильных гранулоцитах необходимы для защиты организма.

Кальпротектин был обнаружен в различных биологических жидкостях: слюне, сыворотке, спинномозговой жидкости, моче и кале. Однако диагностическое значение имеет именно фекальный кальпротектин.

При возникновении воспалительных процессов в кишечнике нейтрофилы направляются к очагу воспаления, где и происходит их дегрануляция. Высвобождающийся кальпротектин попадает в кал.

Добавим, что белок отличается чрезвычайной стабильностью: он может быть обнаружен в стуле в неизменном виде в течение более 7 дней после высвобождения. Определение содержания белка в кале является широко используемым методом диагностики воспалительных процессов кишечника.

Повышенная концентрация фекального кальпротектина является прямым следствием дегрануляции нейтрофилов из-за повреждения слизистой оболочки кишечника.

У пациентов, страдающих воспалительными заболеваниями кишечника — язвенным колитом, болезнью Крона,— уровень кальпротектина в стуле, как правило, очень высок. При этом он коррелирует со степенью тяжести воспаления.

С помощью анализа на фекальный кальпротектин удается дифференцировать воспалительные и невоспалительные заболевания кишечника.

Анализ позволяет определить уровень кальпротектина в стуле. Исследование помогает диагностировать и определить степень тяжести воспалительных заболеваний кишечника.

Иммуно-ферментный анализ — ИФА

Источники: kronportal.ru, www.emcmos.ru, labtest-spb.ru, diseases.medelement.com, www.gastroscan.ru, cmclinic.ru, www.analizmarket.ru

Специальное исследование каловых масс поможет выявить воспалительный процесс в полости кишечника, а также возможные проблемы пищеварительной функции. Этот метод диагностики весьма информативен, позволяет обнаружить причину неконтролируемой потери веса, а также нарушения пищеварения, слабость и болей в животе.

Что означает анализ кала на кальпротектин, как к нему правильно подготовиться, а также расшифровку возможных результатов даст наша статья.

Проведение этого исследования позволяет выявить в фекалиях белок кальпротектин. Он образуется в плазме крови при связывании молекул кальция с протеином. В разных концентрациях содержится в кале, моче, слюне, спинномозговой жидкости и крови.

В медицине большое значение имеет содержание кальпротектина в каловых массах.

Чтобы обеспечить чистоту собранного материала, необходимо воспользоваться медицинским судном, либо любой другой стерильной емкостью.

Существуют общие правила:

• Кал собирается в стерильную емкость накануне обследования.
• В фекалии не должно попасть ни капли мочи.
• У женщин допускается сбор материала во время менструации, но при этом необходимо исключить попадание крови.
• Примерно за три-четыре дня до сбора кала, необходимо исключить прием любых лекарственных средств, включая БАДы, в состав которых входят микроэлементы (кальций, магний, цинк и другие).
• Нельзя применять слабительные средства, делать клизмы. Опорожнение кишечника должно быть естественным путем.
• Перед дефекацией необходимо провести гигиенические процедуры без использования моющих средств.
• Для проведения анализа достаточно предоставить кал в объеме 5-10 грамм (не более столовой ложки).

В аптеках можно приобрести специальный стерильный контейнер для кала. Альтернативой может стать простерилизованная стеклянная баночка и герметично закрывающейся крышкой.

Кал лучше всего собрать утром и сразу же отнести в лабораторию. При невозможности утреннего опорожнения, можно заготовить материала накануне, плотно закупорить и поставить в холодильник.

При невозможности доставить фекалии в течение суток, материал для проведения обследования уже не годится.

Обычно результаты обследования готовы в течение трех-пяти дней, но все зависит от типа медицинского учреждения и его загрузки. Расшифровка анализов показывает содержание кальпротектина в микрограммах на грамм.

Норма этого показателя:

• У взрослых нормальные показатели варьируются от 0 до 50 мкг/гр.
• У детей до года норма может составлять до 500 единиц.
• У детей от года до четырех норма составляет 150 мкг/гр.
• У пожилых пациентов (старше 65 лет)также наблюдается увеличение показателя до 100 мкг/гр.

Возможное превышение нормальных показателей — не повод для паники. Значение имеет то, на сколько этот критерий был превышен. Незначительное отклонение может свидетельствовать о нарушениях усваиваемости лактозы, заболевания тонкого кишечника, аутоиммунный гастрит.

В этом случае рекомендуется регулярные обследования и наблюдение за работой кишечника. При необходимости также назначаются инструментальные методы исследования этого органа.

• Сильное отклонение от нормы может указывать на серьезные патологии в работе ЖКТ, а также развитие воспалительного процесса в полости кишечника.
• К ним относятся:
• Значительное превышение показателей этого анализа — достаточный повод для дополнительного обследования.

Выбранная тактика лечения зависит от окончательного диагноза. Если был обнаружен воспалительный процесс, используются антибиотики или противовирусные средства.

Для воспаления водно-солевого баланса применяются дегидратационные растворы. Кроме того, могут использоваться пищеварительные ферменты, энтеросорбенты, общеукрепляющие средства.

При необходимости проводится хирургическое вмешательство, госпитализация пациента и назначается курс физиологических процедур. Важную роль в успешном лечении играет соблюдение диеты и отказ от вредных привычек, стрессов и физических нагрузок.

В частных клиниках обследование кала на кальпротектин обойдется примерно в 1500 рублей. В поликлинике это можно сделать бесплатно при наличии направления от лечащего врача.

Анализ кала на кальпротектин — современное и очень информативное обследование. Таким образом можно узнать и наличие воспалительного процесса в кишечнике, а также возможных патологиях пищеварительной системы.

При превышении показателей рекомендуется пройти дополнительные инструментальные обследования для точного диагностирования патологии.

ФЕКАЛЬНЫЙ КАЛЬПРОТЕКТИНВрачи назначают на фекальный кальпротектин анализ при возникновении различных недугов кишечника с наличием частых рецидивов и признаками хронического проявления.

Такое исследование считают сейчас наиболее информативным. Именно этим способом можно провести качественную диагностику воспалительных процессов кишечника и помочь в установлении причины такого явления.

Когда назначают обследованиеАнализ на наличие и концентрацию в кале кальпротектина могут назначить несколько специалистов. Это может быть гастроэнтеролог, терапевт, врач общей практики или педиатр.

Показаниями для назначения этого вида анализа могут быть такие факторы:

• * Определение характера воспаления в кишечнике на ранней стадии.
• * Выявление причины раздраженного кишечника.
• * Подтверждение или исключение наличия опухолей.
• * Наблюдение за воспалительным процессом при таких недугах, как болезнь Крона и язвенный колит.
• * Проверка качества лечения при инфекционных заболеваниях в кишечном отделе.
• * Исключение развития энтероколита некротического характера у грудничков и наблюдение за этим недугом при его наличии.
• * Наблюдение за состоянием кишечника после перенесенных операций, в том числе за трансплантатами.
• В любом случае, если специалист назначает подобный анализ, то он имеет на это довольно веские причины, поэтому такое предписание необходимо выполнять.

Особенность метода диагностикиВещество кальпротектин является белком, который производится в лейкоцитах. Его наличие и концентрация характеризуют множество процессов, происходящих в отделах кишечника. Определенная концентрация этого белка наблюдается в кале у взрослого и ребенка. Наличие вещества в кале обычно пропорционально количеству клеток лейкоцитов, расположенных в кишечнике.

Эта разновидность белка была найдена также в таких биологических средах, как слюна, моча, спинномозговая жидкость.

Но для диагностического обследования главную роль играет именно исследование фекалий, так как этот специфический белок при различных нарушениях кишечника концентрируется именно там.

К тому же такой фермент, как кальпротектин, очень устойчив и разрушается не сразу. Поэтому его могут обнаруживать даже на седьмой день после опорожнения.

Каждому возрасту человека, если в организме все процессы проходят нормально, присуща своя концентрация белка в фекалиях. Поэтому кальпротектин является своеобразным маркером всех отклонений и воспалительных реакций организма на происходящие в кишечнике процессы.

Фекальный вид обследования позволяет по количеству такого белка определить причины различных недугов, выявить протекающие воспалительные процессы в кишечнике, найти взаимосвязь заболеваний желудочного тракта с проблемами отделов толстой кишки.

В отдельных случаях такой вид анализа дает возможность вовремя определить развитие опухолей, а также найти различные аномальные проявления. Анализ на наличие кальпротектина у новорожденных помогает выявить раннее развитие врожденных, инфекционных и других недугов.

Конечно, такой метод диагностики имеет свои особенности и в некоторых ситуациях может быть не очень точным. Так, кровотечение из кишечника может отражаться на концентрации в кале кальпротектина, увеличивая на несколько процентов его количество.

Повышенная концентрация в фекалиях белка обычно встречается у больных с первичными признаками заболевания и при наличии острой формы недуга.

В ситуации с кровотечением завышенная концентрация белка уже не характерна воспалительным процессам, так как такое проявление недуга относится к более запущенным формам. Поэтому каждый показатель фекальной диагностики должен рассматриваться в комплексе с симптомами заболевания.

На ранних стадиях обследования состояния кишечника методом фекального кальпротектина и тщательного анализа структуры кала на наличие крови у пациентов, которые имеют специфические жалобы, помогают специалистам выявить скрытый характер недуга. После такой диагностики и подтверждения опасения врачей многим больным назначают колоноскопию.

Нормы и показатели обследованияТак называемый маркер диагностики кальпротектин выделяется в больших количествах при определенных повреждениях кишечника. Поэтому его высокая концентрация характеризует довольно серьезные воспалительные процессы в этой системе организма.

Фекальный анализ на наличие белка делают лаборатории в течение трех или пяти рабочих дней.Кальпротектин является одним из видов белка. Он находится в лейкоцитах и составляет лишь 5% от общего количества биологически активного белка организма и 60% от белка цитоплазмы. Поэтому есть определенная норма его концентрации при нормальном состоянии организма и при различных нарушениях.

Такой метод исследования может быть назначен детям от одного месяца. Новорожденному этот анализ не делают, так как в течение четырех недель в организме у ребенка идут сложные процессы перестройки, поэтому он будет нецелесообразен.

1. Нормы для детей рассчитаны в мкг/г таким образом:
2. * В возрасте от одного месяца до полугода белок должен быть до 538 единиц.
3. * От полугода до трех лет фермент в норме может быть обнаружен до 214 единиц.
4. * От трех до четырех лет нормой является наличие белка до 75.
5. * Для детей от четырех лет норма должна быть до 50 единиц.

Для взрослых нормой является наличие белка в пределах 50 единиц. Причем, если анализ показал концентрацию в пятьдесят единиц ровно, то это может послужить поводом для назначения дополнительных методов диагностики и наблюдения за пациентом какое-то время.

При показателях анализа с концентрацией кальпротектина до 100 единиц требуется постоянное наблюдение за пациентом, назначение при необходимости щадящей терапии. Если количество белка выше 100, то это серьезный повод для беспокойства и более усиленного лечения с применением антибиотиков, лечебных диагностических процедур и возможного оперативного вмешательства.

Расшифровка фекального анализа может быть проведена только хорошим специалистом. Самостоятельно определить наличие воспаления или какого-либо заболевания вряд ли представляется возможным, так как только врач может сопоставить полученные результаты диагностики с жалобами пациента и признаками недуга.

К тому же в фекальном анализе, кроме наличия белка, есть и другие показатели, на которые смотрит врач, чтобы правильно поставить диагноз и разработать лечебную терапию. К этим показателям относятся нормы микроскопического исследования и общая зрительная диагностика фекалий.

При диагностике микроскопического метода в норме должны отсутствовать лейкоциты, эритроциты, примеси кровеносных телец, характеризующие внутренне кровотечение, воспаление.

К внешней или зрительной диагностике относят анализ состояния каловых масс: их текстуру, консистенцию, цвет. Нормальный вид фекалий у взрослых имеет коричневый, темный цвет.

У детей до трех-пяти лет цвет кала может быть более светлый, но не слишком, иначе это является одним из характерных признаков инфекционных недугов.

Биологический материал собирают сразу после опорожнения в специальный медицинский одноразовый контейнер, который заранее приобретают в любой аптеке. Контейнер имеет закручивающуюся герметическую крышечку и ложечку для сбора материала. Набирать материал для анализа нужно в объеме не более третьей части от всей площади емкости.

Так как белок распадается не сразу, то контейнер с собранным материалом можно хранить в холодильнике до семи дней при температуре от 6-8ºС. Однако лучше всего сразу доставить его в лабораторию для исследования, чтобы скорее получить результат.Источник

В нашем случае (БК), Фекальный Кальпротектин — яркий показатель воспаления:

Выписка от 18.02.2016 — пункт 14: 967 мкг/гр, при норме до 50 (АТАКА БК!)

Кальпротектин в кале — неспецифический показатель воспаления в кишечнике, помогает в диагностике неспецифического язвенного колита и болезни Крона.

Синонимы: фекальный кальпротектин, калгранулин, calprotectin, CALPRO, stool calprotectin, calprotectin in human faeces.

не большой белок, содержащийся в лейкоцитах (нейтрофилах, моноцитах-макрофагах) и эпителиальных клетках, выполняет антибактериальную функцию. В нейтрофилах находится 60% кальпротектина.

При нарушении целостности кишечной стенки активируется иммунная система и массово “созываются” лейкоциты к месту воспаления.

Цель лейкоцита, а особенно нейтрофила и макрофага — уничтожить бактерию-вирус-аллерген. В ходе данной борьбы из лейкоцита выделяются белки, а среди них и кальпротектин.

Он проникает через кишечный эпителий, попадает в просвет кишечника и таким образом в кал.

Кальпротектин устойчив к действию пищеварительных ферментов, поэтому на выходе из пищеварительной трубке его концентрация такая же как и в месте воспаления.

Количество кальпротектина в кале пропорционально числу нейтрофилов в слизистой желудочно-кишечного тракта и служит косвенным маркером воспаления кишечника.

Специальная подготовка диетой не требуется.

Для анализа исследуют кал, собранный в ходе естественной дефекации в специальный контейнер. Объем 5-20 грамм, без добавления консервантов. Время хранения при комнатной температуре — 7 дней.

Чувствительность и специфичность теста — 85%.

Увеличение фекального кальпротектина не служит диагностическим критерием воспалительных заболеваний кишечника.

Неспецифические воспалительные заболевания кишечника — это две болезни — неспецифический язвенный колит и болезнь Крона. Их диагностика усложнена в связи с широким спектром неспецифических симптомов:

• жидкий кал с примесью крови
• периодическая боль в животе
• анемия — снижение уровня гемоглобина и/или эритроцитов в крови
• повышение температуры тела до 38С
• снижение веса
• задержка роста и развития у детей

При болезни Крона может быть поражен любой участок кишечника — от рта до ануса. Болеют в молодом возрасте — 20-30 лет. Поносы частые, ежедневные. Хроническое течение и склонность к появлению сужений кишечника (стенозов), абсцессов и свищей требуют ранней диагностики и назначения лечения.

Неспецифический язвенный колит — это воспаление слизистой толстого кишечника и прямой кишки. Течение также длительное и хроническое, требуется пожизненное лечение.

Диагностика обеих заболеваний — колоноскопия с биопсией для патогистологического исследования.

• диагностика воспалительных заболеваний кишечника — неспецифического язвенного колита и болезни Крона
• исключить диагноз раздраженного толстого кишечника
• оценка успешности лечения воспалительных заболеваний кишечника
• рекомендован в детском возрасте (поскольку неинвазивен)

• до 50 мкг/г
• “серая зона” — 50-120 мкг/г — анализ следует повторить через 4-6 недель

Норма кальпротектина в кале не определена международными стандартами, поэтому зависит от методик и реактивов, применяемых в лаборатории. В бланке лабораторного исследования норма написана в графе — референсные значения.

• молекулярный вес 36,5 кДа
• состоит из одной тяжелой и двух легких цепей
• связывает кальций и цинк
• кальпротектин можно исследовать в кале, крови, ликворе (спинно-мозговой жидкости)

• нестероидные противовоспалительные препараты, аспирин, блокаторы протоновой помпы
• ложное снижение — при нейтропении или гранулоцитопении (сниженном числе нейтрофилов или гранулоцитов в крови вообще)

— неспецифический язвенный колит

— болезнь Крона

• некротизирующий энтероколит у детей
• муковисцидоз
• целиакия
• рак толстого кишечника
• желудочно-кишечные хронические инфекции
• кровотечение в желудочно-кишечный тракт
• пищевая аллергия
• парадонтоз

Повышенный уровень кальпротектина в кале не является доказательством воспалительного заболевания кишечника. Одновременно — нормальные уровни кальпротектина в кале не позволяют исключить неспецифический язвенный колит и болезнь Крона. Данные диагнозы обязательно должны быть подтверждены гистологическим исследованием и колоноскопией.

Электронный научный журнал Современные проблемы науки и образования ISSN 2070-7428 «Перечень» ВАК ИФ РИНЦ = 0,737

2
1 ГБУ РО «Областной консультативно-диагностический центр», Ростов-на-Дону2 ФГБУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Минздравсоцразвития России
В статье разработан алгоритм дифференциальной диагностики воспалительных и онкологических заболеваний у больных с положительным результатом теста на скрытую кровь в кале с помощью определения эпигенетических маркеров (метилированная форма ДНК гена SEPT9) в составе циркулирующей ДНК крови и пептидных копрологических маркеров. У 71 пациента с положительным результатом анализа кала на скрытую кровь определяли уровень фекального кальпротектина и проводили тест на детекцию метилированной ДНК гена SEPT9 среди циркулирующих ДНК крови. Одновременное повышение уровня фекального кальпротектина и детекция метилированной ДНК гена SEPT9 среди пула циркулирующих ДНК в крови у больных с воспалительными заболеваниями кишечника является основанием для заключения о высоком онкологическом риске и активном поиске опухоли при колоноскопии. Диагностическая эффективность эпигенетического теста для выявления онкологических заболеваний у этой категории больных составила 90,6%.

Ключевые слова: рак толстой кишкивоспалительные заболевания толстой кишки
1. Егоренков В. В., Моисеенко Ф. В. Скрининг рака толстой кишки. Практическая онкология. — 2010. — Т. 11, № 2. — С.81-87.
2. Залетаев Д. В. Системы молекулярных маркеров в ДНК-диагностике онкозаболеваний // Молекулярная медицина. — 2005. — № 1. — С. 10-17.
3. Мейерхардт Дж., Сандерз М. Рак толстой кишки. — М.: ООО «Рид Элсивер», 2009. -188 с.
4. Сергеева Н. С., Маршутина Н. В. Общие представления о серологических биомаркерах и их месте в онкологии // Практическая онкология. — 2011.- Т.12, №4. — С.147-154.
5. Auge J. M., Sasot M., Escudero J. M. et al. The immunologic faecal occult blood test for the detection of significant colorectal neoplasia // Tumor Biology. — 2011; 32, Suppl.1: S.17.
6. Devos T., Tetzner .R, Model F., Weiss G. et al. Circulating methylated SEPT9 DNA in plasma is a biomarker for colorectal cancer // ClinChem, 2009; 55: 1337-1346. 7. El-Badry A., Sedrak H., Rashed L. FaecalCalprotectin in Differentiating between Functional and Organic Bowel Diseases // Arab Journal of Gastroenterology. — 2010. — Vol.11. — P.70-73.
8. Lofton-Day C., Model F., Devos T. DNa methylation biomarkers for blood-based colorectal cancer screening // Clin Chem., 2008; 54(2): 414-423.
9. Mandel J. S., Smith R. Principles of Cancer Screening. Cancer. Principles & Practice of Oncology / Eds. V.T. De Vita, Jr. S. Hellman, S.A. Rosenberg. — Philadelphia, Baltimore: Lippincott Williams & Wilkins, 2008: 659-676.
10. Rheenen P. V., Van-De-Vijve E., Fidler V. FaecalCalprotectin for Screening of Patients with Suspected Inflammatory Bowel Disease: Diagnostic Meta-Analysis // BMJ. — 2010. — Vol. 341. -P.567-569.
11. Roon A.C.V. Diagnostic Precision of Fecal Calprotectin for Inflammatory Bowel Disease and Colorectal Malignancy // Am. J. Gastroenterol. — 2007. — Vol.102. — P. 803-813.
12. Van Rheine P. F., Van de Vijver E., Fidler V. Fecal Calprotectin a Sign of Inflammatory Bowel Disease // BMJ. — 2010. — Vol.341. — P. 33-59.
В России проблема скрининга, ранней диагностики рака толстой кишки и своевременной дифференциальной диагностики с воспалительными заболеваниями кишки до сих пор остает­ся нерешенной. Это связано не столько с отсутствием должного государственно­го финансирования, сколько с недостаточной разработкой критериев, с помощью которых можно выделить группу лиц, подлежащих углубленному клинико-инструментальному обследованию [1]. До настоящего времени эффективность скрининговых программ по выявлению колоректального рака в России не превышает 1 % [1]. Несмотря на это, целесообразность использования диагнос­тических методов, направленных на раннее выявление рака толстой кишки, уже научно обоснована на примере многих западных стран, таких как США, Япония, Австралия, Германия. Считается, что в 90 % случаев рак толстой кишки можно пре­дупредить [9]. Основанием для таких убеждений служат знания о патогенезе опухо­лей в толстой кишке. Высокую вероятность развития колоректального рака (КРР) имеют пациенты, страдающие воспалительными заболеваниями толстой кишки (прежде всего, неспецифический язвенный колит), с семейной предрасположенностью к данной форме рака и/или имеющие полипы толстой кишки. Воспалительные заболевания кишечника (ВЗК) повышают риск развития рака толстой кишки, особенно если неспецифический язвенный колит длится более 10 лет. Недавние исследования показали, что болезнь Крона на 5-10 % повышает риск раковых заболеваний [3]. Частота случаев развития рака из ворсинчатых аденом (полипов) более 2 см в диаметре составляет 35-53 %. При полипах диаметром более 3 см вероятность их озлокачествления составляет 100 % [3].

Используемые в настоящее время методы диагностики рака толстой кишки малоэффективны для обнаружения опухоли до ее клинической манифестации. Белковые онкомаркеры, детектируемые в сыворотке/плазме крови при помощи иммуноферментного анализа, несмотря на относительно высокую специфичность (до 97 %), не обладают достаточной чувствительностью — не более 60 % [4], что ограничивает их использование для ранней диагностики рака толстой кишки. Большую распространенность при скрининге рака толстой кишки получили биохимические и иммуногистохимические тесты, идея которых основывается на обнаружении скрытой крови в фекалиях пациента [5]. Однако этот подход не удовлетворяет потребностей клинической онкологии из-за низкой чувствительности и специфичности. Действительно, далеко не все злокачественные новообразования толстой кишки характеризуются кровотечением. С другой стороны, скрытое кровотечение может сопровождать ВЗК [5], что сразу ставит актуальную задачу дифференциальной диагностики воспалительных и онкологических заболеваний кишки.

Таким образом, поиск новых маркеров, пригодных для ранней диагностики рака толстой кишки, которые бы позволяли выявить заболевание с высокой чувствительностью, а также специфичностью, позволяющей дифференцировать опухоли от ВЗК, является актуальной задачей.

В качестве таких маркеров наиболее перспективным представляется использование патогенетически значимых молекулярно-генетических маркеров, которые могут быть обнаружены в циркулирующей крови.

Действительно, ДНК трансформированных (опухолевых) клеток обнаруживаются во внеклеточных ДНК, циркулирующих в плазме крови (цир. ДНК) [2], и могут быть использованы для малоинвазивной диагностики опухолей.

Одним из таких методов для ранней диагностики рака толстой кишки является определение в крови метилированной ДНК гена SEPT9, кодирующего синтез гена-супрессорасептина-9 [6].

Целью работы явилось провести сравнительный анализ эффективности дифференциальной диагностики воспалительных и онкологических заболеваний у больных с положительным результатом теста на скрытую кровь в кале с помощью определения эпигенетических маркеров (метилированная форма ДНК гена SEPT9) в составе циркулирующей ДНК крови и пептидных копрологических маркеров.

Материалы и методы. Исследования были проведены на базе ГБУ Ростовской области «Областной консультативно-диагностический центр» с 2008 по 2011 г. На первом этапе больным проводили анализ кала на скрытую кровь (СКК) с помощью фотометрического анализатора Sentifob и теста FOB Gold.

Тест FOB Gold позволял точно определить количественное содержание гемоглобина в кале без предварительного придерживания пациентами диеты. Метод основан на реакции агглютинации антиген-антитело между присутствующим в образце гемоглобином человека и анти-гемоглобин-антитело на латексных частицах.

Агглютинация измерялась как увеличение при абсорбции в 570 нм, единица которой пропорциональна количеству гемоглобина человека в образце.

Далее у 71 пациента (42 мужчин и 29 женщин) в возрасте 38-72 лет с положительным результатом анализа кала на СКК определяли уровень фекального кальпротектина и проводили тест на детекцию метилированной ДНК гена SEPT9 среди цир. ДНК.

Количественное определение содержания кальпротектина в образцах стула проводили иммуноферментным анализом (ELISA) с помощью стандартных наборов Buhlmann (Швейцария).

Наличие метилированной ДНК гена SEPT9 определяли в крови с помощью ПЦР. Для проведения методики использовали EpiproColontest (Epigenomics, Германия). Образцы ДНК модифицировали путем бисульфитной конверсии по стандартному протоколу по DevosT. etal.[6], очищали с помощью наборов для выделения модифицированной ДНК «BisulfitessDNAIsolationKit» фирмы «BioSilicaLtd.».

В образцах плазмы одновременно определяли ДНК SEPT9 ибета-актина (ACTB). Вывод об обнаружении гена SEPT9 делали, если количество циклов при анализе ДНК SEPT9 было менее 45, а АСТВ — менее 36. Вывод об отрицательном результате делали при отсутствии специфичного участка ДНК либо при превышении количества циклов для SEPT9 более 45, а для АСТВ — более 36 циклов.

В качестве контрольной была сформирована выборка из 25 практически здоровых пациентов (возрастной интервал — 40-60 лет. 4 мужчин и 11 женщин), безонкологических и воспалительных заболеваний кишки в анамнезе.

На окончательном этапе пациентам проводили колоноскопию. В результате проведения колоноскопии забирали биоптаты кишки для последующего гистологического анализа. Препараты окрашивали гематоксилином и эозином, проводили световую микроскопию.

Статистическую обработку результатов проводили с использованием компьютерной программы STATISTICA 7.0 (StatSoft, США).

Результаты и их обсуждение

Результаты определения уровня фекального кальпротектина у 71 больных с положительным результатом теста на СКК и 25 здоровых пациентов отражены в табл.1.

Таблица 1 Результаты определения уровня фекального кальпротектина у больных с положительным результатом теста на СКК и у здоровых пациентов

источник