Меню Рубрики

Анализ кала на хеликобактер пилори пцр

Положительный результат анализа кала на хеликобактер служит достоверным доказательством заражения человека. Исследование относится к прямым видам, когда выявляется конкретный возбудитель или его ДНК, а не последствия его воздействия или продукты распада (как при проведении иммунологических анализов крови).

Кроме того, достоинством способа является его неинвазивность — отсутствие необходимости применять для забора материала более или менее травматичные процедуры (прокола вены для взятия крови, введения дуоденального зонда).

Проведение анализа кала не связано с присутствием пациента, достаточно своевременной доставки в лабораторию испражнений. Это особенно важно для обследования детей.

Существуют разные методики выявления Helicobacter pylori, каждая обладает своими достоинствами и недостатками.

Лечащий врач определяет необходимость и выбор способа исследования. Немалое значение имеет доступность анализа для конкретного пациента из-за цены. Большая часть выполняется только в частных клиниках и лабораториях, поскольку требует дорогостоящего оборудования.

Цель исследования — выявление причинной связи заболевания с хеликобактер и назначение целевого курса лечения для избавления от возбудителя.

Название Helicobacter pylori переводится как «спиралевидная привратниковая». Оно привязано к характерной форме бактерии, локализации в области привратника (приграничная зона желудка с двенадцатиперстной кишкой). Микроорганизм имеет жгутики, помогающие ему перемещаться даже в густой слизи.

Хеликобактерия способна выдерживать кислую среду желудочного сока. Для жизнеобеспечения использует энергию молекул водорода, которую вырабатывают кишечные бактерии.

Наиболее известные ферменты хеликобактер:

К особенностям микроорганизма относятся:

  • сложность выделения культуральным способом, поскольку хеликобактерия не растет на обычных питательных средах;
  • длительный период отсутствия симптоматики, указывающей на заражение;
  • возможность в «опасной» ситуации трансформироваться в шаровидную форму и покрываться защитной пленкой.

В кале спиралевидную форму обнаружить невозможно, поскольку кишечная среда неблагоприятна для существования хеликобактерии. Здесь не имеется нужной кислотности, мало кислорода, действуют сильные разрушающие ферменты желчи, поджелудочной железы. Поэтому в каловых массах находится кокковая форма бактерии.

Симптомы поражения желудка, вызванные хеликобактерией, могут быть минимальными или соответствовать клинике обострения заболевания. У пациента наблюдаются:

  • вздутие живота;
  • отрыжка;
  • изжога;
  • болевой синдром, особенно при обострениях весной и осенью;
  • запоры или поносы;
  • чувство тяжести в эпигастрии;
  • снижение аппетита;
  • резкое падение веса.

Показаниями к исследованию могут быть:

  • необходимость проверки перед длительным курсом терапии нестероидными противовоспалительными лекарствами, ингибиторами протонной помпы, поскольку они снижают выработку соляной кислоты в желудке;
  • признаки железодефицитной анемии;
  • неясная тромбоцитопения;
  • возможность заражения членов семьи;
  • контроль проведенного курса антибиотикотерапии;
  • выяснение связи с генетической предрасположенностью.

У ребенка о признаках заражения говорят жалобы на тошноту, неясные боли в животе, плохой аппетит и отказ от еды, частое обильное срыгивание, а также вздутие и урчание живота.

Выделение культуры возбудителя — микробиологический вид исследования. Классика способа требует посева материала на питательную среду, подсчета выросших колоний, исследования микроорганизма из колонии под микроскопом. Также необходимо проведения биохимических проб для изучения его свойств и дополнительного посева на среду с антибиотиками для выявления чувствительности к разным препаратам.

Анализ кала на хеликобактер пилори с помощью культурального способа провести сложно:

  • посев должен проходить без доступа кислорода;
  • можно выделить только спиралевидные формы, которые редко попадают в кал, а не кокковые;
  • результаты реакции на чувствительность к антибиотикам in vitro (инвитро означает «на стекле, в пробирке») на практике оказываются обманчивыми и в некоторых случаях не совпадают с фактическим применением у пациента (in vivo), обнаруженный оптимальный антибиотик оказывается недостаточно эффективным;
  • анализ требует длительного срока (7–10 дней) для полного проведения.

Суть иммунологического анализа — выявление комплексов антитело+антиген, в котором чужеродным агентом является хеликобактерия. Более привычно использование по исследованию крови. Но фактически косвенные признаки наличия антигена можно подтвердить по наличию в стуле, слюне, моче, у беременных в околоплодной жидкости.

В методиках используются готовые «помеченные» антитела. При обработке ими кала пациента, содержащего антигены (остатки хеликобактерии) возникает реакция соединения со стандартными антителами. Длительность исследования — сутки. Анализ кала на антиген хеликобактер назначается, если у пациента имеются любые симптомы нарушения пищеварения.

Наиболее распространенный вариант — первичный скрининг населения (обследование всех обратившихся или определенных групп), не имеющего специфических жалоб. В России не применяется из-за отсутствия достаточного количества иммунологических тестов в лабораториях поликлиник.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) относится к молекулярно-генетической диагностике. С ее помощью выявляется не бактерия, а ее специфическая ДНК. Даже при малом количестве, в случае выздоровления или бессимптомного носительства метод позволяет с достаточной точностью связать изменения в организме с действием хеликобактер.

Методика рассчитана на искусственный синтез отдельных частей ДНК, удвоение и построение цепочки из 30 циклов. Процесс не происходит в случае отсутствия малейших остатков биоматериала. Для реакции необходим прибор ампликатор. Полимераза — фермент, ускоряющий процесс.

ПЦР кала назначают для подтверждения роли хеликобактерии в патологии и определения целесообразности специфической терапии:

  • при эрозиях и язвах в желудке, пищеводе и двенадцатиперстной кишке;
  • желудочно-пищеводном рефлюксе (заброс содержимого в обратном направлении);
  • атрофическом поражении слизистой желудка;
  • полипах;
  • опухолях желудка;
  • выявлении наследственной предрасположенности в случае наличия у родственников злокачественных опухолей органов пищеварения;
  • контроле за результатами терапии антибиотиками.

Преимуществами ПЦР кала можно считать:

  • высокую чувствительность и специфичность (соответственно определяются в 94% и 100%), реакция бывает положительной даже при наличии 10 бактерий;
  • простоту проведения;
  • безопасность для пациента, отсутствие травматичности при заборе материала;
  • возможность определения ДНК как в спиралевидных, так и в кокковых формах хеликобактерии;
  • выделение и изучение различных генетических модификаций, штаммов.
  • не представляется возможность определения оптимального антибиотика по чувствительности;
  • нет различий между протекающим острым заболеванием и остаточными явлениями после обострения, ДНК бактерий остаются в кале почти месяц после клинического выздоровления;
  • чувствительность все-таки ниже, чем при исследовании биоптата из стенки желудка;
  • сравнительно высокая стоимость;
  • необходимость подготовки персонала и приобретения оборудования;
  • положительная реакция в случаях загрязнения персоналом материала из чужого образца (контаминация извне).

Расшифровка результатов исследования — дело врача специалиста. Не стоит прибегать к самостоятельной трактовке или пользоваться услугами знакомых. Оценка проводится по комплексу признаков. При ПЦР выдается результат:

  • отрицательный, если не выделился генотип хеликобактерии, обнаруживается в норме;
  • положительный, если у пациента разгар заболевания или заражение было в анамнезе.

При бактериологическом исследовании:

  • выявлено нулевое количество бактерий или хеликобактер отсутствует;
  • если количество микроорганизмов больше нуля — подтверждается хелибактериоз;
  • знак S означает чувствительность к заявленному антибиотику;
  • R — указывает на устойчивость (резистентность) к препарату;
  • I — чувствительность умеренная.

Бакпосев кала позволяет дать не только качественную, но и количественную характеристику хеликобактериального заражения. Для этого учитываются степени роста бактерии:

  • 1 степень — наблюдается слабый рост на жидкой среде, на твердых образцах — роста нет;
  • 2 степень — вырастает до 10 колоний;
  • 3 степень — число выросших колоний достигает 100;
  • 4 степень — распространенность и активность возбудителя очень активны, вырастает более 100 колоний.

Иммунологические тесты показывают отрицательный результат, если антиген возбудителя не определяется, положительный — при наличии хеликобактериоза. Достоверность иммунологического и культурального методов значительно уступает ПЦР, для их проведения необходима массивная распространенность возбудителя в фекалиях.

Где можно сдать анализ, укажет врач. Он же должен ознакомить пациента с правилами забора материала и подготовки. Некоторые частные клиники выдают посетителям напечатанную инструкцию «Как сдавать анализы». От соблюдения указанных условий зависит результативность исследования.

Общими правилами забора фекалий на выявления хеликобактер являются:

  • прекращение приема антибактериальных средств за трое суток до анализа;
  • контрольную сдачу анализа кала проводят через месяц после окончания курса лечения;
  • некоторые анализы требуют за три дня до исследования перейти на диету без продуктов с пищевой клетчаткой, исключить соленья, алкогольные напитки;
  • запрет на использование слабительных препаратов, ректальных свечей, если лечение требует ежедневного приема, нужно предупредить врача;
  • собирать кал нужно в чистую лабораторную посуду (выдается в клинике или покупается в аптеке), желательно отбор проб производить из трех точек;
  • непригодным считается кал с примесями слизи, гноя, крови, мочи;
  • доставка материала в лабораторию должна быть обеспечена в первые 2 часа, при необходимости разрешается хранить в холодильнике не более суток при температуре от 2 до 8 градусов.

Пациент при диагностике не должен настаивать на изолированном исследовании кала. Используя дополнительные виды, врач повышает достоверность информации о заражении хеликобактерией.

Большой популярностью пользуются уреазные дыхательные тесты.

Неопровержимым видом обследования является цитологическое исследование образца слизистой желудка, полученного при биопсии во время фиброгастроскопического исследования. При высокой разрешающей возможности микроскопа лаборант видит окрашенную хеликобактерию.

Фиброгастроскопическая картина самой слизистой с характерными эрозиями, атрофией, изъязвлением указывает на косвенные признаки присутствия возбудителя в желудке. Рентгенологическая диагностика также позволяет по нарушениям в направлении складок, контуров желудка судить об органической патологии, вызванной хеликобактерией.

По итогам анализов врач может ввести пациента в группу риска с повышенной вероятностью заболевания язвой желудка, злокачественными опухолями. Предварительное применение специфического лечения позволяет снизить степень риска. При выборе медицинского учреждения для выполнения исследований на платных условиях нужно посоветоваться по поводу репутации и ответственности его сотрудников.

источник

Заболевания, поражающие главным образом желудочно-кишечный тракт (ЖКТ), в большинстве своем могут приводить к тяжелым последствиям при отсутствии должного лечения. Для того чтобы вовремя выявлять зарождающуюся болезнь, врачи проводят специальные исследования, которые зачастую идентифицируют даже бессимптомный недуг на ранней стадии развития, позволяя своевременно предпринять должные меры по устранению проблемы.

К числу наиболее важных диагностических процедур относится анализ кала на хеликобактер – он дает возможность обнаружить патогенные организмы, паразитирующие в ЖКТ и вместе с тем препятствующие его нормальному функционированию.

Хеликобактерия – это болезнетворный одноклеточный организм со спиралевидным тельцем, дающим возможность беспрепятственно «ввинчиваться» в густую слизистую оболочку желудка и двенадцатиперстной кишки. Живой патоген снабжен несколькими длинными жгутиками (от 4 до 6), с помощью которых передвигается по стенкам верхних отделов ЖКТ.

Данный паразит, в отличие от подавляющей части иных бактерий, превосходно себя чувствует, пребывая в кислой желудочной среде. Выделяемые хеликобактер пилори вредные токсичные вещества ежедневно воздействуют на слизистый слой ЖКТ, что может привести к воспалительным процессам, перфорации, эрозии, а также канцерогенезу (формированию онкологических очагов).

Что интересно, когда паразит хеликобактер чувствует опасность, он принимает вид свернувшегося шарика, покрытого плотной защитной оболочкой. Подобная форма позволяет пережидать неблагоприятные факторы окружающей среды, но одновременно разрушает пристеночные участки желудка с куда большей интенсивностью, создавая угрозу развития злокачественных образований.

Симптомы, указывающие на заражение хеликобактер пилори, дают о себе знать далеко не сразу, поэтому нередко та или иная болезнь, вызванная жгутиковыми организмами, выявляется довольно поздно, что влияет и на увеличение количества осложнений, и на длительность курса лечения.

Анализ кала на хеликобактер пилори, как правило, назначают людям, которых на протяжении длительного времени беспокоят симптомы, указывающие на сбой в работе желудочно-кишечного тракта. К признакам подобного рода относятся:

  • резкое снижение массы тела без каких-либо видимых предпосылок;
  • кислая отрыжка;
  • ощущение тяжести в области желудка;
  • диарея (регулярный жидкий стул);
  • обстипация (запоры);
  • желудочные боли после каждого приема пищи;
  • беспричинная потеря аппетита;
  • приступы изжоги;
  • метеоризм (чрезмерное скопление газов в ЖКТ, вызывающее вздутие);
  • постоянное урчание в животе, не связанное с голодом;
  • тошнота;
  • непереносимость пищи животного происхождения;
  • неутолимая жажда;
  • рвота, сопровождающаяся выделением крови;
  • повышенное слюноотделение;
  • неприятный запах изо рта;
  • дисфагия (затрудненный процесс глотания).

Если имеют место серьезные нарушения в функционировании желудка и кишечника, то вышеперечисленные симптомы могут сочетаться с мигренью, раздражительностью, анемией, общей слабостью, гипергидрозом (обильным выделением пота), бледностью кожных покровов, инсомнией (нарушением сна), тахикардией и высокой температурой (37–38 °C).

Помимо прочего, врачи настоятельно рекомендуют сдавать анализ кала на хеликобактер тем, у кого были выявлены следующие патологии:

  • атрофический гастрит;
  • дуоденит (воспаление двенадцатиперстной кишки);
  • диспепсия (несварение);
  • лимфома желудка;
  • железодефицитная анемия;
  • болезнь Менетрие (патологическое утолщение слизистых желудочных оболочек с дальнейшим поражением желез внутренней секреции, которое приводит к образованию множественных кист и аденом);
  • злокачественные образования, локализующиеся в ЖКТ;
  • тромбоцитопения (резкое снижение количества кровяных пластинок);
  • язва двенадцатиперстной кишки или желудка;
  • дисплазия кишечника.

Иногда пациенту требуется пройти исследование на хеликобактер, для того чтобы исключить различного рода отклонения перед назначением лекарственных препаратов, провоцирующих недостаточную выработку желудком соляной кислоты. Также диагностику осуществляют после основного курса антибиотикотерапии – это позволяет уточнить её результативность. В случае стагнации или ухудшения состояния специалисты корректируют тактику лечения.

На данный момент разработано 3 метода исследования кала на Helicobacter pylori, к которым и прибегают специалисты в лабораториях:

  • Культуральное исследование. Предполагает введение полученного биоматериала в питательную среду, способствующую размножению колониальных организмов. Идентифицированные представители хеликобактер пилори изучаются с применением различного рода химических красителей и лекарственных средств. Последние позволяют установить степень чувствительности хеликобактер к разным видам препаратов.
  • Иммунологический способ. К определенному количеству испражнений добавляют раствор с содержанием специальных белковых структур (антител), которые активно реагируют на наличие опасных антигенов хеликобактер, давая диагностам понять, что соответствующая проба заражена патогенными бактериями.
  • ПЦР (или полимеразная цепная реакция). Данный способ подразумевает выделение «вражеской» ДНК за счет особых ферментов с дальнейшим удвоением частицы дизоксирибунуклеиновой кислоты. Искусственная репликация ДНК осуществляется до тех пор, пока не будет получен полноценный генетический код, который затем сравнивают с имеющимся образцом хеликобактер пилори.

Подавляющая часть медицинских лабораторий отдает предпочтение именно методу ПЦР, причиной тому служит более качественный и достоверный результат диагностики в сравнении с остальными типами исследования на хеликобактер. Более того, обработка данных такого анализа требует всего нескольких часов, т. е. итоговый бланк с показателями выдается пациенту или лечащему врачу на следующий день.

Нормой считается полное отсутствие возбудителей хеликобактер, которое выражается обычно несколькими способами:

  • надписью «не обнаружено» или «не выявлено»;
  • печатью «отрицательный» или «отсутствуют»;
  • цифрой «0»;
  • прочерком.

У ПЦР существует всего два варианта результатов – отрицательный и положительный, наличие последней пометки свидетельствует об обнаружении хеликобактер пилори. Аналогична ситуация и с остальными видами исследования. Иногда степень заражения хеликобактер обозначается плюсиками: чем выше уровень содержания болезнетворных жгутиковых паразитов, тем больше соответствующих значков фигурирует в бланке (их число варьирует от 1 до 4).

Качественная подготовка требует акцентирования внимания на 3 ключевых пунктах, а именно на изменении рациона питания, ограничении употребления лекарственных препаратов и правильном сборе биоматериала. Теперь обо всем чуть подробнее.

Для того чтобы итоговые показатели не подверглись искажению, необходимо исключить за 3–4 дня до анализа на хеликобактер пилори следующие виды продуктов питания:

  • напитки: алкоголь, газировка, крепкий чай и кофе;
  • овощи: редька, капуста, свекла, редис, помидоры, морковь, болгарский перец;
  • фрукты: персики, абрикосы, апельсины, мандарины, гранат, нектарины, хурма, манго, грейпфрут;
  • специи: карри, куркума;
  • соусы: кетчуп, соевый;
  • первые блюда: отруби, перловая, гречневая или бобовая каша.

Во время подготовки к исследованию на хеликобактер пилори лучше всего ввести в привычный рацион больше слизистых каш, кисломолочной и молочной продукции, пюре (из фруктов и овощей), легких супов. К числу предпочтительных напитков относятся отвар шиповника, зеленый чай, компоты, неконцентрированные соки из винограда или яблок, морсы и, конечно, обычная вода.

На самом деле анализ кала на хеликобактер предполагает полный отказ от каких-либо препаратов, особенно это касается:

  • ректальных свечей;
  • антацидов (Альмагеля, Викалина, Маалокса и пр.);
  • слабительных средств;
  • антибиотиков.

Если же некоторые лекарства требуют регулярного употребления, об этом обязательно нужно предупредить лечащего врача.

Для начала следует приобрести специальную емкость накануне анализа на хеликобактер. Стерильный контейнер приобретается либо у самих врачей, либо в аптечной сети. В случае отсутствия подобной возможности можно прибегнуть к помощи миниатюрной чистой баночки из стекла с плотно закрывающейся крышкой (лучше прокипятить такую тару перед использованием).

Стоит отметить, что биоматериал категорически запрещено собирать непосредственно из подгузника или унитаза, так как к калу могут налипнуть инородные бактерии, которые имеют обыкновение искажать результаты исследования. Перед актом дефекации желательно подмыться. С помощью пластмассовой ложечки, крепящейся к крышке приобретенной емкости, необходимо отделить несколько сегментов биоматериала, взятого из различных точек.

Тару следует наполнить на ⅓ или ¼, затем прикрутить крышку. Желательно собирать кал за 1–3 часа до анализа на хеликобактер пилори, однако при необходимости можно обернуть контейнер в цельный полиэтиленовый пакет и поставить его в холодильник (ни в коем случае не в морозильную камеру). Требуемый температурный режим – не выше 3–4 °C. Хранить пробу подобным образом следует не более 48 часов.

Многое зависит от метода диагностики, к которому прибегали специалисты при выявлении хеликобактер. Несовершенными типами исследования признаны культуральный и иммунологический способы, поскольку каждый из них не учитывает ряд нюансов, связанных с обнаружением патологических бактерий.

Например, первый метод далеко не всегда может предоставить подходящую питательную среду для колониальных паразитов хеликобактер. Не менее важный пункт – по мере продвижения по кишечному тракту одноклеточные представители хеликобактер пилори подвергаются негативному воздействию соков, поступающих из поджелудочной железы и желчного пузыря, что вынуждает их принимать кокковую (сферическую) форму, о которой ранее шла речь.

Если жгутиковые паразиты находятся в защитных капсулах (а именно там они и пребывают, попадая в каловые массы), их сумеет обнаружить достоверно только ПЦР, основанный на искусственном удвоении бактериальной ДНК. Именно этот способ считается максимально правдивым.

Существует только одно «но»: ДНК хеликобактер может выявиться даже в течение месяца после излечения, поэтому для уточнения физиологического состояния пациента потребуются дополнительные медицинские исследования. Если персонал лаборатории не пренебрегал мерами предосторожности при работе с биоматериалом, избегая случайного смешения различных проб, то итоговые показатели будут соответствовать реальному положению вещей.

источник

Выявление Helicobacter pylori (H. pylori), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется генетический материал (ДНК) микроорганизма в образце биоматериала.

Хеликобактер [полимеразная цепная реакция в режиме реального времени].

H. pylori, Helicobacter pyloridis, DNA [real-time polymerase chain reaction, RT-PCR, quantitative RT-PCR, qPCR, qRT-PCR].

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Общая информация об исследовании

H. pylori – это грамотрицательная подвижная бактерия, устойчивая к воздействию соляной кислоты и способная колонизировать слизистую оболочку желудка и двенадцатиперстной кишки. Как правило, первичное инфицирование происходит в детстве и протекает бессимптомно, но у некоторых людей с течением времени приводит к развитию серьезных заболеваний. H. pylori обнаруживается в подавляющем большинстве случаев гастрита и язвенной болезни и, кроме того, многократно увеличивает риск развития аденокарциномы и В-клеточной лимфомы желудка. Современная диагностика этих заболеваний невозможна без точной и быстрой идентификации H. pylori.

H. pylori может быть выявлена с помощью нескольких методов. В настоящее время доступны неинвазивные методы диагностики, обладающие преимуществом простоты и безопасности взятия образца для исследования (исследование кала), что имеет особое значение при обследовании пожилых людей, детей, а также в условиях амбулатории.

Helicobacter очень чувствительна к воздействию желчных кислот и пониженного содержания кислорода, поэтому при пассаже химуса через двенадцатиперстную и толстую кишку количество бактерий значительно снижается. Кроме того, активные спиралевидные формы бактерии претерпевают морфологические изменения, обеспечивающие большую устойчивость в неблагоприятных условиях. Результатом этого становится низкая концентрация микроорганизмов и преобладание кокковых форм в кале, что следует учитывать при выборе лабораторного метода исследования этого биоматериала. Среди многих неинвазивных методов особое место занимает исследование с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени.

Читайте также:  Анализы на калий на дому

Полимеразная цепная реакция в реальном времени (РТ-ПЦР) – это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале (например, в кале) фрагменты генетического материала (ДНК) возбудителя инфекции. РТ-ПЦР характеризуется очень высокой чувствительностью (93-95 %), что является преимуществом при анализе кала. В отличие от бактериологического посева, это исследование позволяет выявлять как спиралевидные, так и кокковые (некультивируемые) формы H. pylori. Из-за того что в реакции выявляется ДНК микроорганизма, исследование не применяется для дифференциальной диагностики текущей инфекции или инфекции в анамнезе – результат анализа будет положительным еще некоторое время после полной эрадикации H. pylori, что обусловлено выявлением фрагментов разрушенных ДНК микроорганизма.

На слизистой оболочке желудка могут также присутствовать другие представители рода Helicobacter (H. suis, H. baculiformis). Несмотря на то что их значение в развитии заболеваний ЖКТ еще до конца не установлено, они играют определенную роль при идентификации H. pylori. Так, например, лабораторные исследования, основанные на выявлении общего для всех видов Helicobacter антигена, будут характеризоваться большим числом ложноположительных результатов исследования на H. pylori за счет выявления других видов (как в случае с ELISA). Это практически исключено в исследовании с помощью РТ-ПЦР, так как реакция основана на выявлении специфического для H. pylori фрагмента ДНК.

Диагностика хеликобактериоза у детей представляет определенные трудности. Это связано с невыполнением ребенком дыхательного маневра при использовании уреазного дыхательного теста, а также необходимостью наркоза при использовании инвазивных методов. Исследование кала с помощью РТ-ПЦР является хорошей альтернативой этим методам и поэтому может быть с успехом применено в педиатрической практике.

Высокое содержание неорганических солей (фосфатов, кальция), ферментов ЖКТ, полисахаридов, желчных кислот и солей, растительных волокон, слизи и других компонентов кала может ингибировать РТ-ПЦР, поэтому подготовка к тесту требует должного внимания со стороны пациента и врача. Интерпретация результата анализа проводится с учетом дополнительных лабораторных и инструментальных данных.

Для чего используется исследование?

Для диагностики заболеваний, вызванных H. pylori:

  • атрофического или антрального гастрита;
  • язвы желудка и двенадцатиперстной кишки.

Когда назначается исследование?

  • При подозрении на гастрит или язвенную болезнь у детей и пожилых людей.
  • При невозможности использования инвазивных методов идентификации H. pylori у пациентов любого возраста.

Референсные значения: отрицательно.

  • текущая H. pylori-инфекция;
  • H. pylori-инфекция в анамнезе.
  • отсутствие H. pylori-инфекции.

Что может влиять на результат?

  • Присутствие в образце кала крови, желчи, избытка неорганических солей и других компонентов может приводить к получению ложноотрицательного результата.
  • Лечение препаратами тетрациклина, пенициллина (аминопенициллины), макролидами (кларитромицин, азитромицин) и метронидазолом может приводить к получению ложноотрицательного результата.



  • Исследование не позволяет дифференцировать текущую H. pylori-инфекцию и инфекцию в анамнезе.
  • Helicobacter pylori, IgA (количественно)
  • Helicobacter pylori, IgG (количественно)
  • Helicobacter pylori, антиген
  • Гастрин
  • Пепсиноген I
  • Пепсиноген II
  • Антитела к париетальным (обкладочным) клеткам желудка
  • Лабораторное обследование — гастрит и язвенная болезнь желудка
  • Лабораторная диагностика и мониторинг атрофического гастрита и язвенной болезни
  • Анализ кала на скрытую кровь
  • Копрограмма

Кто назначает исследование?

Гастроэнтеролог, педиатр, врач общей практики.

  • Tahereh Falsafi, Raha Favaedi, Fatemeh Mahjoub, and Mehri Najafi. Application of Stool-PCR test for diagnosis of Helicobacter pylori infection in children.
  • Kabir S. Detection of Helicobacter pylori DNA in feces and saliva by polymerase chain reaction: a review. Helicobacter. 2004 Apr;9(2):115-23. Review.
  • Sen N, Yilmaz O, Simsek I, Küpelioglu AA, Ellidokuz H. Detection of Helicobacter pylori DNA by a simple stool PCR method in adult dyspeptic patients. Helicobacter. 2005 Aug;10(4):353-9.
  • Monteiro L, Gras N, Vidal R, Cabrita J, Mégraud F. Detection of Helicobacter pylori DNA in human feces by PCR: DNA stability and removal ofinhibitors. J Microbiol Methods. 2001 Jun;45(2):89-94.

источник

Современные диагностические методы позволяют узнать многое о состоянии здоровья человека по его биологическим жидкостям: крови, моче, фекалиям.

Исследуя кал, можно узнать, поселилась ли в организме бактерия Н.руlori, способная вызывать гастриты, язвы желудка и провоцировать онкопатологию.

Кал на наличие или отсутствие данного микроба можно изучать тремя способами: культуральным, иммунологическим, и наиболее достоверным и распространённым – методом полимеразно-цепной реакции (ПЦР).

Сама бактерия крайне редко встречается в фекалиях в своей привычной S-образной форме целиком. Толстый кишечник и каловые массы не являются благоприятной средой для микроорганизма, поэтому, попадая в них, она может принимать круглую кокковую форму, изредка встречаясь в испражнениях именно в таком виде.

Культуральный метод подразумевает под собой посев части исследуемого материала на питательную среду, в которой бактерия будет хорошо себя чувствовать и начнёт размножаться.

Происходит рост колоний, которые анализируются, окрашиваются специальными реактивами и исследуются под микроскопом. Данным способом в прямом смысле выращивают патогенные микробы с целью их дальнейшего изучения.

Кроме обнаружения самой бактерии, метод позволяет установить чувствительность патогена к тому или иному антибиотику. Если при добавлении лекарственного препарата рост колонии сохраняется – Н.руlori устойчива к антибактериальному средству, а если микроорганизмы погибают – имеет смысл назначить данный препарат пациенту с целью лечения и эрадикации, бактерии чувствительны к нему.

Культуральный способ весьма достоверен, но только в том случае, если во взятом биологическом материале обнаружена S-форма микроба. Метод имеет свои недостатки, и по этой причине не слишком распространён:

  • Сроки исследования занимают от 6 до 12 дней
  • Дорогостоящие среды для высевания хеликобактерий
  • Специфические условия для сред, обеспечивающие рост колонии, которые сложно воспроизвести в лаборатории
  • Редкая встречаемость S-образных форм бактерии в испражнениях, пригодных для роста в питательных условиях (кокковые формы не исследуют)

Фекалии пациента могут быть подвергнуты иммунологическому исследованию, которое позволяет выявить уже не сам микроорганизм, а его части – антигены.

Используются специальные антитела, направленные на обнаружение чужеродного антигена – частей бактерии, продуктов её жизнедеятельности, генетического материала.

Взаимодействуя с чужеродным агентом, антитела образуют специфический комплекс, который и определяется иммуно-ферментным анализом.

Данный способ изучения кала редко применяется в России, не многие лаборатории оснащены необходимыми реактивами и необходимыми тестами.

Но в перспективе возможно включение данного способа обнаружения хеликобактер в качестве скрининг-тестов: исследования широких групп населения на заражённость бактерией.

Это наиболее распространённый метод исследования фекалий на данную бактерию, обладающий высокой точностью.

Из биологического материала пациента выделяется участок ДНК бактерии, который затем многократно искусственно дублируется на специальном аппарате, так происходит восстановление гететического кода Н.руlori

Когда геномный фрагмент микроба достигает достаточных размеров, его сравнивают с эталонным и делают вывод об исследуемом микроорганизме: хеликобактер ли это или другой патоген.

Положительный ПЦР анализ означает наличие в организме человека хеликобактерной инфекции: бактерия присутствует в желудке, ее фрагменты ДНК обнаружены в кале и совпали с эталонными.

Достоинства ПЦР-метода:

  • Высокая точность: даже незначительного количества генетического материала достаточно для исследования с большим процентом достоверности, приближающимся к 99%.
  • Быстрота исследования. 2 суток достаточно для анализа, но существуют экспресс-способы, позволяющие установить диагноз за несколько часов.
  • Безболезненность. Способ атравматичен, неинвазивен. Позволяет обследовать маленьких детей, пожилых, ослабленных пациентов, которым противопоказана ФГДС с биопсией и другие эндоскопические манипуляции.
  • Для точного результата не обязательно обнаружение ДНК-фрагментов именно S или спиралевидных форм, части кокковых микробов (наиболее встречающихся в испражнениях) тоже подходят для анализа.

У ПЦР-диагностики значительно больше плюсов, чем минусов. К недостаткам можно отнести:

  • Относительно высокую стоимость анализа.
  • Сохранение фрагментов ДНК микроба в фекалиях и после эрадикации. Даже если лечение успешно пройдено и бактерия отсутствует в организме, ещё спустя какое-то время фрагменты ДНК обнаруживаются в биологическом материале и стул тест на хеликобактер может дать положительный результат. Поэтому с целью контроля излеченности рекомендуется ПЦР-диагностика не ранее, чем через 1 месяц после окончания терапии.
  • Специальная дорогостоящая высокотехнологичная аппаратура, для работы на которой необходим подготовленный и обученный персонал.

Все диагностические исследования, проводимые с фекалиями пациента, относятся к манипуляциям ин витро – «в пробирке», «в стекле», вне организма человека.

Они обладают достаточно высокой точностью и информативностью, если преследуют цель обнаружения микроба.

Но не все процессы, происходящие «ин виво» — внутри человеческого организма, можно с той же достоверностью воссоздать «ин витро». К примеру, определение чувствительности к антибиотикам, анализируемую культуральным методом.

При исследовании антибактериальной чувствительности колоний микробов на питательных культурах, было выявлено, что самые подходящие препараты для бактерий ин витро, «не работали», оказывались малоэффективными при лечении пациента.

Результаты исследований чувствительности бактерии к антибиотикам «в пробирке» не всегда точны.

Информативность диагностического теста зависит не только от выбранного исследования, качества оборудования и квалификации персонала, а еще и от того, как пациент подготовился к анализу.

Кал для исследования необходимо правильно собрать:

  • После дефекации часть фекальных масс необходимо поместить в стерильный контейнер для сбора биологического материала, который нужно заранее приобрести в аптеке или в лаборатории.
  • Исключить попадание в биологический материал крови, мочи, слюны, гноя и других посторонних примесей, которые с большой вероятностью исказят результаты анализа.
  • Контейнер с содержимым необходимо плотно закрыть и доставить в лабораторию не позднее 4-5 часов до исследования.

Кроме соблюдения технических моментов сбора материала для анализа, на протяжении нескольких дней до сдачи кала, нужно соблюдать следующие рекомендации:

  • За неделю до сдачи перестать принимать антибиотики.
  • За три дня не употреблять алкоголь, пищу, с большим содержанием клетчатки, а также способную приводить к окраске каловых масс: свеклу, напитки с красителями.
  • Не применять ректально свечи либо мази, не пользоваться слабительными препаратами.

Соблюдение вышеописанных правил позволить врачу лабораторной диагностики максимально точно оценить состояние здоровья пациента и сделать правильные выводы при анализе.

ПЦР — диагностика фекалий наиболее достоверна из всех трех вышеописанных способов, она в какой-то степени уступает лишь биопсийному эндоскопическому исследованию.

ПЦР-анализ кала редко дает ложноположительные результаты, обладает высокой специфичностью, позволяет исследовать ДНК-материал часто встречаемых кокковых форм хеликобактерий в испражнениях.

Достоверность культурального и иммунологического метода ниже, чем ПЦР. Эти методы «грешат» появлением ложноположительных результатов, но в совокупности с другими способами выявления Helicobacter pylori, они являются прекрасным подспорьем для постановки диагноза.

В случае, если в кале обнаружен антиген хеликобактер пилори либо ДНК-фрагмент исследуемого микроорганизма, это означает, что:

  • Человек инфицирован Н.руlori.
  • Эрадикационная терапия недостаточно эффективна и микроб не исчез из слизистой оболочки ЖКТ.
  • Прошло меньше месяца после терапии и в кале сохраняются антигены умертвлённых патогенов.

Чтобы исключить ложноположительный результат после прохождения схемы антихеликобактерной терапии (когда анализ положительный, а организм человека не содержит Н.рylori), следует не торопиться узнавать эффективность лечения, а выждать не менее одного месяца после его окончания.

Если лечение бактерии проведено успешно, спустя 1 месяц после эрадикации в кале не выявляются антигены и ДНК микроба. Результат обследования – отрицательный.

В случае выявления антигенов при первичном анализе, врач порекомендует пациенту пройти курс специальной терапии, направленной на уничтожение Н.руlori.

источник

Хеликобактер пилори относится к числу самых опасных для человека бактерий. Патогенный микроорганизм способен провоцировать серьезные отклонения в функциональном состоянии пищеварительного тракта и организма в целом. Бактерии данного типа отличаются повышенной устойчивостью к многочисленным факторам.

Результат терапии напрямую зависит от правильно составленной схемы лечения. Для определения чувствительности микроорганизмов к определенным видам антибактериальных препаратов используются специальные анализы каловых масс. Каждая методика имеет свои достоинства и недостатки. Для получения точных результатов рекомендуется провести несколько тестов.

Хеликобактер пилори длительное время присутствует в организме бессимптомно. Признаки нарушения функционального состояния желудочно-кишечного тракта проявляются только при активной жизнедеятельности бактерий. Одним из основных провоцирующих факторов является снижение иммунитета.

При наличии у пациента определенных заболеваний или отдельных симптомов процедура анализа на хеликобактериоз становится обязательной.

Показания к анализу:

  • проведение антибактериальной терапии (для контроля результатов лечения);
  • эрозии и язвы двенадцатиперстной кишки или желудка;
  • симптомы нарушения функционального состояния пищеварительного тракта (регулярные запоры или диарея, метеоризм, болевые ощущения различной локализации);
  • генетическая предрасположенность к заболеваниям, провоцируемым хеликобактер пилори (злокачественные опухоли органов пищеварения, хронические патологии пищеварительного тракта);
  • прогрессирующая атрофия слизистых оболочек желудка;
  • регулярные болевые ощущения в желудке после употребления пищи;
  • железодефицитная анемия;
  • резкое снижение массы тела в сочетании с другими симптомами отклонений в функциональном состоянии пищеварительного тракта;
  • наличие крови в рвотных или каловых массах;
  • выявленные новообразования и полипы в пищеварительной системе;
  • язва пищевода или гастроэзофагеальный рефлюкс.

Рекомендуем посмотреть видео:

Проведение процедуры исследования каловых масс на наличие патогенных бактерий подразумевает соблюдение ярда правил. Если подготовка к анализу или сбор биологического материала будут совершены неправильно, то результаты тестов могут показать ложный результат. Каловые массы имеют определенный срок хранения. Если материал будет доставлен в лабораторию с нарушением сроков, то тестирование также может стать недостоверным.

Подготовительные меры для анализа кала на хеликобактер пилори включают в себя рекомендации по соблюдению определенного режима питания, а также корректировку медикаментозной терапии (при ее наличии). Если прием назначенных препаратов временно прекратить не получается, то данный нюанс обязательно сообщается врачу.

Вещества, содержащиеся в антибиотиках и других категориях медикаментов, могут стать причиной неправильной расшифровки данных исследования.

Рекомендации:

  • за несколько дней до процедуры следует прекратить прием слабительных или антацидных средств;
  • в течение месяца до проведения теста пациент не должен принимать антибактериальные препараты;
  • нельзя в течение нескольких дней употреблять продукты с содержанием грубой клетчатки (свекла, капуста, редис, редька);
  • в течение трех дней до процедуры из рациона исключаются крепкий чай, кофе, острые специи и приправы, овощи и фрукты красного или оранжевого цвета);
  • блюда в течение трех дней перед анализом рекомендуется готовить только методами варки, тушения или паровой обработки;
  • несколько дней нельзя употреблять алкогольные напитки.

Стерильную емкость для сбора биологического материала можно приобрести в аптеке. При покупке такой баночки исключается наличие загрязнений. В качестве альтернативы можно использовать другие варианты тар (например, емкости от детского питания). Важным нюансом является их стерильность. Емкости должны быть максимально очищены от любых видов загрязнений.

Запрещено собирать каловые массы с памперса или из унитаза. Идеальным вариантом является забор биологического материала из горшка или с полиэтиленового пакета. Емкость для хранения кала должна быть заполнена на одну третью часть. К таре обязательно прикрепляется заполненное направление.

Емкость с каловыми массами доставляется в лабораторию как можно быстрее. Если возможность быстро направить материал для анализа отсутствует, можно воспользоваться двумя вариантами хранения. В первом случае каловые массы однократно замораживаются. Во втором — хранятся не более двух суток при температуре не выше 4 градусов.

Назначением конкретного анализа на хеликобактериоз занимается врач. Специалист учитывает индивидуальную клиническую картину состояния здоровья пациента. Сдать анализы на хеликтобактериоз можно самостоятельно, если возникают подозрения на функциональное отклонение пищеварительного тракта.

При молекулярном анализе выявляется специфическая ДНК бактерии. Код дублируется на специальном аппарате. При достижении бактерией нужного размера, ее сравнивают с этанолом. Если части ДНК совпадают с оригиналом, то результат теста положительный (хеликтобактериоз выявлен). Методика отличается высокой степенью информативности.

Бактериальный посев (или культуральный анализ) относится к категории микробиологических методов исследований. В процессе поведения процедуры биологический материал помещается в среду, которая является максимально благоприятной для размножения патогенных микроорганизмов. Через неделю каловые массы изучаются с помощью микроскопа.

Для идентификации хеликобактер пилори учитываются окраска бактерий и их способности вступать в определенные реакции.

Особенности методики:

  • процедура позволяет выявить патологический антиген;
  • в процессе изучения биологического материала проводится тест на чувствительность к антибактериальным препаратам;
  • результаты исследования позволяют подобрать максимально эффективную схему терапии.

Главной целью проведения иммунологических тестов при выявлении хеликобактер пилори является определение комплексов антиген + антитело. Для исследования используются помеченные антитела. Вступая в реакцию с калом, такие вещества подвергаются определенным изменениям. Антитела способны определить наличие в каловых массах не только патогенные бактерии, но и их части, а также продукты жизнедеятельности.

ПЦР-диагностика имеет ряд достоинств и недостатков. Некоторые виды патогенных бактерий можно выявить только с помощью данной методики (например, цитотоксичные типы микроорганизмов). Сбор материала для анализа не подразумевает причинение боли или дискомфорта пациенту. Процедура показывает максимально достоверные результаты.

Преимущества методики:

  • процедура позволяет выявить различные штаммы патогенных бактерий;
  • метод отличается высокой степенью чувствительности;
  • анализ безопасен для пациента (для сбора материала не применяются медицинские инструменты);
  • неинвазивность и простота процесса забора биологического материала;
  • высокая степень специфичности теста;
  • метод позволяет определить не только спиралевидные, но и кокковые типы бактерий.

Высокая степень чувствительности теста является его одновременным достоинством и недостатком. Анализ с точностью определяет наличие бактерий, но при загрязнениях биологического материала или тары, результаты процедуры могут быть ложноположительными.

Для исключения ложных показателей следует соблюдать все правила сбора каловых масс для проведения их исследования.

Другие недостатки:

  • относительно высокая цена процедуры;
  • отсутствие возможности определить чувствительность бактерии к антибактериальным препаратам;
  • более низкий показатель чувствительности в сравнении с процедурой исследования биоптата слизистой оболочки желудка.

Процедуры исследования каловых масс осуществляются вне организма пациента («ин витро» — «в стекле», «в пробирке»). Для обнаружения микроба такие методы являются максимально точными и эффективными. Однако процедуры имеют некоторые недостатки. Некоторые процессы, происходящие в человеческом организме нельзя воссоздать искусственным способом.

Анализы могут показать уровень чувствительности бактерий к определенным антибиотикам, но стопроцентной информативности такие тесты не дают.

Уровень достоверности результатов

Расшифровка результатов исследования

Положительный — выявлен хеликтобактериоз; отрицательный — не выявлено ни одного типа хеликобактер пилори

Бактериологический анализ на чувствительность к антибактериальным препаратам

Низкая — на выявление антигена

Высокая — на определение чувствительности

Количество бактерий 0 — результат отрицательный, бактерии не выявлены; показатели больше 0 — определен хеликтобактериоз; R — устойчивость к определенному антибиотику; I — умеренная степень чувствительности к антибиотику; S — высокая степень чувствительности к антибиотику

Положительный — выявлен хеликтобактериоз; отрицательный — патогенная бактерия не выявлена

  • существует несколько способов определения хеликобактерии в каловых массах лабораторным методом;
  • каждый вариант анализов имеет свои достоинства и недостатки;
  • для получения максимально точных результатов рекомендуется сдать несколько анализов разных типов;
  • каловые массы для анализа собираются с учетом ряда правил;
  • за несколько дней до процедуры из рациона исключается грубая клетчатка, жареные, жирные блюда, острые специи и приправы, алкоголь и любые плоды оранжевого или красного цвета;
  • емкость для кала должна быть стерильной (оптимальный вариант — аптечные тары).

Видео на тему: Чем опасна бактерия Хеликобактер Пилори?

источник

Положительный результат анализа кала на хеликобактер служит достоверным доказательством заражения человека. Исследование относится к прямым видам, когда выявляется конкретный возбудитель или его ДНК, а не последствия его воздействия или продукты распада (как при проведении иммунологических анализов крови).

Кроме того, достоинством способа является его неинвазивность — отсутствие необходимости применять для забора материала более или менее травматичные процедуры (прокола вены для взятия крови, введения дуоденального зонда).

Проведение анализа кала не связано с присутствием пациента, достаточно своевременной доставки в лабораторию испражнений. Это особенно важно для обследования детей.

Существуют разные методики выявления Helicobacter pylori, каждая обладает своими достоинствами и недостатками.

Лечащий врач определяет необходимость и выбор способа исследования. Немалое значение имеет доступность анализа для конкретного пациента из-за цены. Большая часть выполняется только в частных клиниках и лабораториях, поскольку требует дорогостоящего оборудования.

Читайте также:  Анализы на калий натрий хлор

Цель исследования — выявление причинной связи заболевания с хеликобактер и назначение целевого курса лечения для избавления от возбудителя.

Название Helicobacter pylori переводится как «спиралевидная привратниковая». Оно привязано к характерной форме бактерии, локализации в области привратника (приграничная зона желудка с двенадцатиперстной кишкой). Микроорганизм имеет жгутики, помогающие ему перемещаться даже в густой слизи.

Хеликобактерия способна выдерживать кислую среду желудочного сока. Для жизнеобеспечения использует энергию молекул водорода, которую вырабатывают кишечные бактерии.

Бактерия синтезирует около 20 ферментов

Наиболее известные ферменты хеликобактер:

К особенностям микроорганизма относятся:

  • сложность выделения культуральным способом, поскольку хеликобактерия не растет на обычных питательных средах;
  • длительный период отсутствия симптоматики, указывающей на заражение;
  • возможность в «опасной» ситуации трансформироваться в шаровидную форму и покрываться защитной пленкой.

Агрессивность бактерии является основной причиной атрофической формы хронического гастрита с дальнейшим переходом в язвенную болезнь и раковую опухоль.

В кале спиралевидную форму обнаружить невозможно, поскольку кишечная среда неблагоприятна для существования хеликобактерии. Здесь не имеется нужной кислотности, мало кислорода, действуют сильные разрушающие ферменты желчи, поджелудочной железы. Поэтому в каловых массах находится кокковая форма бактерии.

Симптомы поражения желудка, вызванные хеликобактерией, могут быть минимальными или соответствовать клинике обострения заболевания. У пациента наблюдаются:

  • вздутие живота;
  • отрыжка;
  • изжога;
  • болевой синдром, особенно при обострениях весной и осенью;
  • запоры или поносы;
  • чувство тяжести в эпигастрии;
  • снижение аппетита;
  • резкое падение веса.

Показаниями к исследованию могут быть:

  • необходимость проверки перед длительным курсом терапии нестероидными противовоспалительными лекарствами, ингибиторами протонной помпы, поскольку они снижают выработку соляной кислоты в желудке;
  • признаки железодефицитной анемии;
  • неясная тромбоцитопения;
  • возможность заражения членов семьи;
  • контроль проведенного курса антибиотикотерапии;
  • выяснение связи с генетической предрасположенностью.

У ребенка о признаках заражения говорят жалобы на тошноту, неясные боли в животе, плохой аппетит и отказ от еды, частое обильное срыгивание, а также вздутие и урчание живота.

Выделение культуры возбудителя — микробиологический вид исследования.

Классика способа требует посева материала на питательную среду, подсчета выросших колоний, исследования микроорганизма из колонии под микроскопом.

Также необходимо проведения биохимических проб для изучения его свойств и дополнительного посева на среду с антибиотиками для выявления чувствительности к разным препаратам.

Среда для посева довольно дорогая, готовится специально

Анализ кала на хеликобактер пилори с помощью культурального способа провести сложно:

  • посев должен проходить без доступа кислорода;
  • можно выделить только спиралевидные формы, которые редко попадают в кал, а не кокковые;
  • результаты реакции на чувствительность к антибиотикам in vitro (инвитро означает «на стекле, в пробирке») на практике оказываются обманчивыми и в некоторых случаях не совпадают с фактическим применением у пациента (in vivo), обнаруженный оптимальный антибиотик оказывается недостаточно эффективным;
  • анализ требует длительного срока (7–10 дней) для полного проведения.

По этим причинам использование метода для диагностики ограничено.

Суть иммунологического анализа — выявление комплексов антитело+антиген, в котором чужеродным агентом является хеликобактерия. Более привычно использование по исследованию крови. Но фактически косвенные признаки наличия антигена можно подтвердить по наличию в стуле, слюне, моче, у беременных в околоплодной жидкости.

В методиках используются готовые «помеченные» антитела. При обработке ими кала пациента, содержащего антигены (остатки хеликобактерии) возникает реакция соединения со стандартными антителами. Длительность исследования — сутки. Анализ кала на антиген хеликобактер назначается, если у пациента имеются любые симптомы нарушения пищеварения.

Наиболее распространенный вариант — первичный скрининг населения (обследование всех обратившихся или определенных групп), не имеющего специфических жалоб. В России не применяется из-за отсутствия достаточного количества иммунологических тестов в лабораториях поликлиник.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) относится к молекулярно-генетической диагностике. С ее помощью выявляется не бактерия, а ее специфическая ДНК. Даже при малом количестве, в случае выздоровления или бессимптомного носительства метод позволяет с достаточной точностью связать изменения в организме с действием хеликобактер.

Длительность анализа экспресс-методом 5–6 часов, обычным — 2–3 суток

Методика рассчитана на искусственный синтез отдельных частей ДНК, удвоение и построение цепочки из 30 циклов. Процесс не происходит в случае отсутствия малейших остатков биоматериала. Для реакции необходим прибор ампликатор. Полимераза — фермент, ускоряющий процесс.

ПЦР кала назначают для подтверждения роли хеликобактерии в патологии и определения целесообразности специфической терапии:

  • при эрозиях и язвах в желудке, пищеводе и двенадцатиперстной кишке;
  • желудочно-пищеводном рефлюксе (заброс содержимого в обратном направлении);
  • атрофическом поражении слизистой желудка;
  • полипах;
  • опухолях желудка;
  • выявлении наследственной предрасположенности в случае наличия у родственников злокачественных опухолей органов пищеварения;
  • контроле за результатами терапии антибиотиками.

Преимуществами ПЦР кала можно считать:

  • высокую чувствительность и специфичность (соответственно определяются в 94% и 100%), реакция бывает положительной даже при наличии 10 бактерий;
  • простоту проведения;
  • безопасность для пациента, отсутствие травматичности при заборе материала;
  • возможность определения ДНК как в спиралевидных, так и в кокковых формах хеликобактерии;
  • выделение и изучение различных генетических модификаций, штаммов.

Результат редко выдает ложноположительную информацию при отсутствии инфицированности человека.

  • не представляется возможность определения оптимального антибиотика по чувствительности;
  • нет различий между протекающим острым заболеванием и остаточными явлениями после обострения, ДНК бактерий остаются в кале почти месяц после клинического выздоровления;
  • чувствительность все-таки ниже, чем при исследовании биоптата из стенки желудка;
  • сравнительно высокая стоимость;
  • необходимость подготовки персонала и приобретения оборудования;
  • положительная реакция в случаях загрязнения персоналом материала из чужого образца (контаминация извне).

ПЦР-лаборатория имеет усовершенствованную технику, позволяющую получить достоверные результаты диагностики

Расшифровка результатов исследования — дело врача специалиста. Не стоит прибегать к самостоятельной трактовке или пользоваться услугами знакомых. Оценка проводится по комплексу признаков. При ПЦР выдается результат:

  • отрицательный, если не выделился генотип хеликобактерии, обнаруживается в норме;
  • положительный, если у пациента разгар заболевания или заражение было в анамнезе.

При бактериологическом исследовании:

  • выявлено нулевое количество бактерий или хеликобактер отсутствует;
  • если количество микроорганизмов больше нуля — подтверждается хелибактериоз;
  • знак S означает чувствительность к заявленному антибиотику;
  • R — указывает на устойчивость (резистентность) к препарату;
  • I — чувствительность умеренная.

Бакпосев кала позволяет дать не только качественную, но и количественную характеристику хеликобактериального заражения. Для этого учитываются степени роста бактерии:

  • 1 степень — наблюдается слабый рост на жидкой среде, на твердых образцах — роста нет;
  • 2 степень — вырастает до 10 колоний;
  • 3 степень — число выросших колоний достигает 100;
  • 4 степень — распространенность и активность возбудителя очень активны, вырастает более 100 колоний.

Последние две степени считаются наиболее достоверными источниками информации об участии хеликобактер в патологических изменениях желудка.

Тестирование проводят методом иммуноферментного анализа со стандартными сыворотками

Иммунологические тесты показывают отрицательный результат, если антиген возбудителя не определяется, положительный — при наличии хеликобактериоза. Достоверность иммунологического и культурального методов значительно уступает ПЦР, для их проведения необходима массивная распространенность возбудителя в фекалиях.

Где можно сдать анализ, укажет врач. Он же должен ознакомить пациента с правилами забора материала и подготовки. Некоторые частные клиники выдают посетителям напечатанную инструкцию «Как сдавать анализы». От соблюдения указанных условий зависит результативность исследования.

Общими правилами забора фекалий на выявления хеликобактер являются:

  • прекращение приема антибактериальных средств за трое суток до анализа;
  • контрольную сдачу анализа кала проводят через месяц после окончания курса лечения;
  • некоторые анализы требуют за три дня до исследования перейти на диету без продуктов с пищевой клетчаткой, исключить соленья, алкогольные напитки;
  • запрет на использование слабительных препаратов, ректальных свечей, если лечение требует ежедневного приема, нужно предупредить врача;
  • собирать кал нужно в чистую лабораторную посуду (выдается в клинике или покупается в аптеке), желательно отбор проб производить из трех точек;
  • непригодным считается кал с примесями слизи, гноя, крови, мочи;
  • доставка материала в лабораторию должна быть обеспечена в первые 2 часа, при необходимости разрешается хранить в холодильнике не более суток при температуре от 2 до 8 градусов.

Дополнительные исследования

Пациент при диагностике не должен настаивать на изолированном исследовании кала. Используя дополнительные виды, врач повышает достоверность информации о заражении хеликобактерией.

Большой популярностью пользуются уреазные дыхательные тесты.

Проведение иммунологических исследований сыворотки крови может быть порекомендовано в случае необходимости дифференциальной диагностики формы поражения.

Неопровержимым видом обследования является цитологическое исследование образца слизистой желудка, полученного при биопсии во время фиброгастроскопического исследования. При высокой разрешающей возможности микроскопа лаборант видит окрашенную хеликобактерию.

Фиброгастроскопическая картина самой слизистой с характерными эрозиями, атрофией, изъязвлением указывает на косвенные признаки присутствия возбудителя в желудке. Рентгенологическая диагностика также позволяет по нарушениям в направлении складок, контуров желудка судить об органической патологии, вызванной хеликобактерией.

По итогам анализов врач может ввести пациента в группу риска с повышенной вероятностью заболевания язвой желудка, злокачественными опухолями. Предварительное применение специфического лечения позволяет снизить степень риска. При выборе медицинского учреждения для выполнения исследований на платных условиях нужно посоветоваться по поводу репутации и ответственности его сотрудников.

Хеликобактер пилори – одна из самых опасных бактерий, которая провоцирует развитие различных заболеваний желудка и двенадцатиперстной кишки. Для диагностики патологии назначают не только анализ крови, но и анализ кала.

Хеликобактер пилори – это патогенные бактерии, которые инфицируют двенадцатиперстную кишку и желудок

Хеликобактер пилори – это болезнетворная бактерия, которая при попадании в организм становится причиной развития хеликобактериоза. Она небольшая по размеру и имеет спиралевидную форму. Выделяя большое количество токсинов, она поражает желудок и двенадцатиперстную кишку. Бактерия получила свое название от того, что находится в пилорическом отделе желудка.

Размножаясь, Хеликобактер воздействует на все клетки желудка, что и приводит к воспалительным процессам. Эта бактерия устойчива к кислой среде и можете передвигаться по стенкам желудка с помощью жгутиков.

Признаки инфекции могут проявляться не сразу. Заболевание развивается при сопутствующих факторах: неправильное питание, стрессовые ситуации, снижение иммунитета. Заражение может происходить через загрязненную воду или пищу, при контакте с зараженным человеком во время чихания и кашля.

Для хеликобактерной инфекции характерны следующие симптомы:

  • Изжога
  • Тошнота и рвота
  • Запах изо рта
  • Потеря аппетита
  • Вздутие живота
  • Расстройство стула
  • Дискомфорт после приема пищи

Перечисленные симптомы схожи с признаками гастрита и язвы, поэтому для выявления возбудителя и лечения хеликобактериоза необходимо пройти обследование.

Медицинские одноразовые контейнеры для сбора кала для анализа

Анализ кала – лабораторное исследование, которое позволяет обнаружить паразитов, обитающих в кишечнике. С помощью этого анализа можно с точностью определить Хеликобактер в организме. Достоверность результатов зависит от правильной подготовки и сбора материала:

  • За 3-4 дня необходимо отменить прием антибиотиков, слабительных препаратов, ректальных свечей. При этом важно предупредить врача о применение препаратов.
  • Материал для анализа нужно собирать в чистую емкость. В аптеке продается специальная емкость для этих целей. Запрещается собирать материал после клизм, приема слабительных средств, так как результаты будут недостоверными.
  • После сбора материал можно хранить в течение 12 часов при температуре 2-8 градусов, но для исследования лучше сдать через 4-5 часов после процесса дефекации.
  • Если сбор каловых масс выполняется после проведения антибиотикотерапии при хеликобактериозе, то это делать следует только через месяц после окончания приема антибиотиков.

В лаборатории полученный материал исследуют методом ПЦР. Это молекулярно-генетическая диагностика, которая позволяет выявить Хеликобактер даже маленького фрагмента ДНК бактерии в собранном материале. Исследование проводится в определенных условиях и температурном режиме.

Больше информации о Хеликобактер пилори можно узнать из видео:

Читайте: Кал черного цвета: причины, диагностика и терапия

Для выявлении хеликобактерной инфекции могут применять другие методы: культуральный и иммунологический анализ. Под культуральным методом принято понимать бактериологический посев исследуемого материала.

Его помещают в специальную среду для роста бактерий. Обычно это около 10 дней. Затем исследуют под микроскопом вид бактерии, способность вступать в биохимические реакции.

Данный метод позволяет определить чувствительность выявленной бактерии к антибиотикам, что позволяет назначить правильное и адекватное лечение.

Иммунологический метод предполагает слипание антител с антигенами. Этот способ исследования проводят при выраженной симптоматике и перед инструментальным методом обследования. Выбор определенного метода осуществляет врач с учетом различных факторов.

При исследовании кала методом ПЦР на Хеликобактер пилори результат может быть отрицательным или положительным. В первом случае бактерии в каловых массах выявлено не было, а в другом – присутствует антиген к Хеликобактер.

Анализ на бакпосев кала предполагает качественную и количественную оценку микроорганизмов в исследуемой среде. Выделяют 4 степени роста бактерий:

  • 1 степень. В благоприятной жидкой среде рост выявленных бактерий осуществляется слабо, а на твердой — вовсе не наблюдается.
  • 2 степень. Размножение и рост микрофлоры определенного вида доходит до 10 колоний.
  • 3 степень. Отличается значительным ростом до 100 колоний в твердой среде.
  • 4 степень. Рост бактерии очень высокий и превышает 100 колоний.

Третья и четвертая степень свидетельствует о воспалительном процессе, спровоцированном конкретным видом бактерии.

Наличие Хеликобактер в кале не указывает на язву желудка или другие заболевания желудочно-кишечного тракта, а лишь определяют наличие болезнетворной бактерии. Если по результатам анализа слизистая желудка заселена Хеликобактер, то во многих случаях это сопровождается такими патологиями, как язва, гастрит, синдром раздраженного кишечника, канцерогенная опухоль, панкреатит и др.

Для точной постановки диагноза одних лабораторных исследований недостаточно. Обследование должно быть комплексное и включать биопсию и гистологическое исследование.

Болезнетворная бактерия не оказывает влияния на течение беременности и состояние ребенка

В период беременности желудочно-кишечный тракт подвергается большой нагрузке. При этом очень часто наблюдается изжога, боль в эпигастральной области и др. Риск развития язвы очень высокий, поэтому будущая мама должна пройти обследование на выявление данной инфекции, чтобы избежать возможных нарушений.

Обследование лучше выполнить на первых месяцах, так как с увеличением срока диагностика затрудняется. Для диагностики применяются неинвазивные методы исследования.

Эффективным диагностическим методом определения Хеликобактер является желудочное зондирование. Процедура проводится щадящим способом.

Эндоскопия проводится в редких случаях и с большой осторожностью, так как увеличивается давление на органы матки.

Лечение при беременности и в период лактации хеликобактериоза запрещено, из-за возможного негативного влияния антибиотиков на плод.

Из препаратов разрешаются Фосфалюгель, Маалокс. Из спазмолитиков только с разрешения врача можно использовать Дротаверин, Баралгин, Папаверин.

Если хеликобактерная инфекция активно проявляется во время вынашивания, то симптомы токсикоза ярко выражены и появляются очень рано. Токсикоз может наблюдаться вплоть до 5 месяца.

Беременная женщина должна придерживаться специальной диеты и исключить из рациона продукты, раздражающие слизистую оболочку желудка. Диета №1 назначается в острый период.

Запрещается употреблять жирные сорта мяса и рыбы, наваристые бульоны, копченые продукты, капусту, шпинат, редьку и т.д.

При выявлении хеликобактерной инфекции назначается антибиотикотерапия

Схема лечения Хеликобактер пилори определяется врачом индивидуально с учетом выраженности симптоматики и результатов анализа. Терапия хеликобактериоза предусматривает гибель бактерии, а также заживление язв:

  • Из антибактериальных препаратов применяют Метронидазол, Кларитромицин, Тетрациклин, Амоксициллин др.
  • Кроме антибиотиков назначают препараты, противокислотной направленности: Эзомепразол, Лансопразол, Омепразол и др. При использовании этих препаратов уменьшается выработка соляной кислоты.
  • Для снижения кислотности показано применение Алмагеля, Маалокса, Алюмага и других подобных препаратов. Эти лекарственные средства оказывают адсорбирующее, обволакивающее и гастропротекторное действия.
  • Чтобы восстановить микрофлору кишечника, после применения антибиотиков используют пробиотики: Лактоферрин, Витафлор,

На время лечения следует придерживаться правильного питания. Пища должна быть дробной, не горячей и не холодной. Принимать пищу следует строго в определенные часы. Диетическое меню должен согласовать врач, однако рекомендации для всех больных заболеваниями ЖКТ одинаковы: отказ от жирной, жареной, соленой пищи, специй, маринадов, алкоголя и газированных напитков.

Современные диагностические методы позволяют узнать многое о состоянии здоровья человека по его биологическим жидкостям: крови, моче, фекалиям.

Исследуя кал, можно узнать, поселилась ли в организме бактерия Н.руlori, способная вызывать гастриты, язвы желудка и провоцировать онкопатологию.

Кал на наличие или отсутствие данного микроба можно изучать тремя способами: культуральным, иммунологическим, и наиболее достоверным и распространённым – методом полимеразно-цепной реакции (ПЦР).

Сама бактерия крайне редко встречается в фекалиях в своей привычной S-образной форме целиком. Толстый кишечник и каловые массы не являются благоприятной средой для микроорганизма, поэтому, попадая в них, она может принимать круглую кокковую форму, изредка встречаясь в испражнениях именно в таком виде.

Культуральный метод подразумевает под собой посев части исследуемого материала на питательную среду, в которой бактерия будет хорошо себя чувствовать и начнёт размножаться.

Происходит рост колоний, которые анализируются, окрашиваются специальными реактивами и исследуются под микроскопом. Данным способом в прямом смысле выращивают патогенные микробы с целью их дальнейшего изучения.

Кроме обнаружения самой бактерии, метод позволяет установить чувствительность патогена к тому или иному антибиотику. Если при добавлении лекарственного препарата рост колонии сохраняется – Н.руlori устойчива к антибактериальному средству, а если микроорганизмы погибают – имеет смысл назначить данный препарат пациенту с целью лечения и эрадикации, бактерии чувствительны к нему.

Культуральный способ весьма достоверен, но только в том случае, если во взятом биологическом материале обнаружена S-форма микроба. Метод имеет свои недостатки, и по этой причине не слишком распространён:

  • Сроки исследования занимают от 6 до 12 дней
  • Дорогостоящие среды для высевания хеликобактерий
  • Специфические условия для сред, обеспечивающие рост колонии, которые сложно воспроизвести в лаборатории
  • Редкая встречаемость S-образных форм бактерии в испражнениях, пригодных для роста в питательных условиях (кокковые формы не исследуют)

  • Фекалии пациента могут быть подвергнуты иммунологическому исследованию, которое позволяет выявить уже не сам микроорганизм, а его части – антигены.
  • Для этого:
  • Используются специальные антитела, направленные на обнаружение чужеродного антигена – частей бактерии, продуктов её жизнедеятельности, генетического материала.
  • Взаимодействуя с чужеродным агентом, антитела образуют специфический комплекс, который и определяется иммуно-ферментным анализом.
  • Данный способ изучения кала редко применяется в России, не многие лаборатории оснащены необходимыми реактивами и необходимыми тестами.
  • Но в перспективе возможно включение данного способа обнаружения хеликобактер в качестве скрининг-тестов: исследования широких групп населения на заражённость бактерией.
  1. Это наиболее распространённый метод исследования фекалий на данную бактерию, обладающий высокой точностью.
  2. Суть способа в следующем:
  3. Из биологического материала пациента выделяется участок ДНК бактерии, который затем многократно искусственно дублируется на специальном аппарате, так происходит восстановление гететического кода Н.руlori
  4. Когда геномный фрагмент микроба достигает достаточных размеров, его сравнивают с эталонным и делают вывод об исследуемом микроорганизме: хеликобактер ли это или другой патоген.
  5. Положительный ПЦР анализ означает наличие в организме человека хеликобактерной инфекции: бактерия присутствует в желудке, ее фрагменты ДНК обнаружены в кале и совпали с эталонными.

Достоинства ПЦР-метода:

  • Высокая точность: даже незначительного количества генетического материала достаточно для исследования с большим процентом достоверности, приближающимся к 99%.
  • Быстрота исследования. 2 суток достаточно для анализа, но существуют экспресс-способы, позволяющие установить диагноз за несколько часов.
  • Безболезненность. Способ атравматичен, неинвазивен. Позволяет обследовать маленьких детей, пожилых, ослабленных пациентов, которым противопоказана ФГДС с биопсией и другие эндоскопические манипуляции.
  • Для точного результата не обязательно обнаружение ДНК-фрагментов именно S или спиралевидных форм, части кокковых микробов (наиболее встречающихся в испражнениях) тоже подходят для анализа.

У ПЦР-диагностики значительно больше плюсов, чем минусов. К недостаткам можно отнести:

  • Относительно высокую стоимость анализа.
  • Сохранение фрагментов ДНК микроба в фекалиях и после эрадикации. Даже если лечение успешно пройдено и бактерия отсутствует в организме, ещё спустя какое-то время фрагменты ДНК обнаруживаются в биологическом материале и стул тест на хеликобактер может дать положительный результат. Поэтому с целью контроля излеченности рекомендуется ПЦР-диагностика не ранее, чем через 1 месяц после окончания терапии.
  • Специальная дорогостоящая высокотехнологичная аппаратура, для работы на которой необходим подготовленный и обученный персонал.
Читайте также:  Анализы на калий натрий магний

Все диагностические исследования, проводимые с фекалиями пациента, относятся к манипуляциям ин витро – «в пробирке», «в стекле», вне организма человека.

Они обладают достаточно высокой точностью и информативностью, если преследуют цель обнаружения микроба.

Но не все процессы, происходящие «ин виво» — внутри человеческого организма, можно с той же достоверностью воссоздать «ин витро». К примеру, определение чувствительности к антибиотикам, анализируемую культуральным методом.

При исследовании антибактериальной чувствительности колоний микробов на питательных культурах, было выявлено, что самые подходящие препараты для бактерий ин витро, «не работали», оказывались малоэффективными при лечении пациента.

Информативность диагностического теста зависит не только от выбранного исследования, качества оборудования и квалификации персонала, а еще и от того, как пациент подготовился к анализу.

Кал для исследования необходимо правильно собрать:

  • После дефекации часть фекальных масс необходимо поместить в стерильный контейнер для сбора биологического материала, который нужно заранее приобрести в аптеке или в лаборатории.
  • Исключить попадание в биологический материал крови, мочи, слюны, гноя и других посторонних примесей, которые с большой вероятностью исказят результаты анализа.
  • Контейнер с содержимым необходимо плотно закрыть и доставить в лабораторию не позднее 4-5 часов до исследования.

Кроме соблюдения технических моментов сбора материала для анализа, на протяжении нескольких дней до сдачи кала, нужно соблюдать следующие рекомендации:

  • За неделю до сдачи перестать принимать антибиотики.
  • За три дня не употреблять алкоголь, пищу, с большим содержанием клетчатки, а также способную приводить к окраске каловых масс: свеклу, напитки с красителями.
  • Не применять ректально свечи либо мази, не пользоваться слабительными препаратами.

Соблюдение вышеописанных правил позволить врачу лабораторной диагностики максимально точно оценить состояние здоровья пациента и сделать правильные выводы при анализе.

ПЦР — диагностика фекалий наиболее достоверна из всех трех вышеописанных способов, она в какой-то степени уступает лишь биопсийному эндоскопическому исследованию.

ПЦР-анализ кала редко дает ложноположительные результаты, обладает высокой специфичностью, позволяет исследовать ДНК-материал часто встречаемых кокковых форм хеликобактерий в испражнениях.

Достоверность культурального и иммунологического метода ниже, чем ПЦР. Эти методы «грешат» появлением ложноположительных результатов, но в совокупности с другими способами выявления Helicobacter pylori, они являются прекрасным подспорьем для постановки диагноза.

В случае, если в кале обнаружен антиген хеликобактер пилори либо ДНК-фрагмент исследуемого микроорганизма, это означает, что:

  • Человек инфицирован Н.руlori.
  • Эрадикационная терапия недостаточно эффективна и микроб не исчез из слизистой оболочки ЖКТ.
  • Прошло меньше месяца после терапии и в кале сохраняются антигены умертвлённых патогенов.

Чтобы исключить ложноположительный результат после прохождения схемы антихеликобактерной терапии (когда анализ положительный, а организм человека не содержит Н.рylori), следует не торопиться узнавать эффективность лечения, а выждать не менее одного месяца после его окончания.

Если лечение бактерии проведено успешно, спустя 1 месяц после эрадикации в кале не выявляются антигены и ДНК микроба. Результат обследования – отрицательный.

Результат терапии напрямую зависит от правильно составленной схемы лечения. Для определения чувствительности микроорганизмов к определенным видам антибактериальных препаратов используются специальные анализы каловых масс. Каждая методика имеет свои достоинства и недостатки. Для получения точных результатов рекомендуется провести несколько тестов.

Хеликобактер пилори длительное время присутствует в организме бессимптомно. Признаки нарушения функционального состояния желудочно-кишечного тракта проявляются только при активной жизнедеятельности бактерий. Одним из основных провоцирующих факторов является снижение иммунитета.

При наличии у пациента определенных заболеваний или отдельных симптомов процедура анализа на хеликобактериоз становится обязательной.

Показания к анализу:

  • проведение антибактериальной терапии (для контроля результатов лечения);
  • эрозии и язвы двенадцатиперстной кишки или желудка;
  • симптомы нарушения функционального состояния пищеварительного тракта (регулярные запоры или диарея, метеоризм, болевые ощущения различной локализации);
  • генетическая предрасположенность к заболеваниям, провоцируемым хеликобактер пилори (злокачественные опухоли органов пищеварения, хронические патологии пищеварительного тракта);
  • прогрессирующая атрофия слизистых оболочек желудка;
  • регулярные болевые ощущения в желудке после употребления пищи;
  • железодефицитная анемия;
  • резкое снижение массы тела в сочетании с другими симптомами отклонений в функциональном состоянии пищеварительного тракта;
  • наличие крови в рвотных или каловых массах;
  • выявленные новообразования и полипы в пищеварительной системе;
  • язва пищевода или гастроэзофагеальный рефлюкс.

Проведение процедуры исследования каловых масс на наличие патогенных бактерий подразумевает соблюдение ярда правил.

Если подготовка к анализу или сбор биологического материала будут совершены неправильно, то результаты тестов могут показать ложный результат. Каловые массы имеют определенный срок хранения.

Если материал будет доставлен в лабораторию с нарушением сроков, то тестирование также может стать недостоверным.

Подготовительные меры для анализа кала на хеликобактер пилори включают в себя рекомендации по соблюдению определенного режима питания, а также корректировку медикаментозной терапии (при ее наличии). Если прием назначенных препаратов временно прекратить не получается, то данный нюанс обязательно сообщается врачу.

Вещества, содержащиеся в антибиотиках и других категориях медикаментов, могут стать причиной неправильной расшифровки данных исследования.

Рекомендации:

  • за несколько дней до процедуры следует прекратить прием слабительных или антацидных средств;
  • в течение месяца до проведения теста пациент не должен принимать антибактериальные препараты;
  • нельзя в течение нескольких дней употреблять продукты с содержанием грубой клетчатки (свекла, капуста, редис, редька);
  • в течение трех дней до процедуры из рациона исключаются крепкий чай, кофе, острые специи и приправы, овощи и фрукты красного или оранжевого цвета);
  • блюда в течение трех дней перед анализом рекомендуется готовить только методами варки, тушения или паровой обработки;
  • несколько дней нельзя употреблять алкогольные напитки.

Стерильную емкость для сбора биологического материала можно приобрести в аптеке. При покупке такой баночки исключается наличие загрязнений. В качестве альтернативы можно использовать другие варианты тар (например, емкости от детского питания). Важным нюансом является их стерильность. Емкости должны быть максимально очищены от любых видов загрязнений.

Запрещено собирать каловые массы с памперса или из унитаза. Идеальным вариантом является забор биологического материала из горшка или с полиэтиленового пакета. Емкость для хранения кала должна быть заполнена на одну третью часть. К таре обязательно прикрепляется заполненное направление.

Емкость с каловыми массами доставляется в лабораторию как можно быстрее. Если возможность быстро направить материал для анализа отсутствует, можно воспользоваться двумя вариантами хранения. В первом случае каловые массы однократно замораживаются. Во втором — хранятся не более двух суток при температуре не выше 4 градусов.

Назначением конкретного анализа на хеликобактериоз занимается врач. Специалист учитывает индивидуальную клиническую картину состояния здоровья пациента. Сдать анализы на хеликтобактериоз можно самостоятельно, если возникают подозрения на функциональное отклонение пищеварительного тракта.

При молекулярном анализе выявляется специфическая ДНК бактерии. Код дублируется на специальном аппарате. При достижении бактерией нужного размера, ее сравнивают с этанолом. Если части ДНК совпадают с оригиналом, то результат теста положительный (хеликтобактериоз выявлен). Методика отличается высокой степенью информативности.

Бактериальный посев (или культуральный анализ) относится к категории микробиологических методов исследований. В процессе поведения процедуры биологический материал помещается в среду, которая является максимально благоприятной для размножения патогенных микроорганизмов. Через неделю каловые массы изучаются с помощью микроскопа.

Для идентификации хеликобактер пилори учитываются окраска бактерий и их способности вступать в определенные реакции.

Особенности методики:

  • процедура позволяет выявить патологический антиген;
  • в процессе изучения биологического материала проводится тест на чувствительность к антибактериальным препаратам;
  • результаты исследования позволяют подобрать максимально эффективную схему терапии.

Главной целью проведения иммунологических тестов при выявлении хеликобактер пилори является определение комплексов антиген + антитело. Для исследования используются помеченные антитела.

Вступая в реакцию с калом, такие вещества подвергаются определенным изменениям.

Антитела способны определить наличие в каловых массах не только патогенные бактерии, но и их части, а также продукты жизнедеятельности.

ПЦР-диагностика имеет ряд достоинств и недостатков. Некоторые виды патогенных бактерий можно выявить только с помощью данной методики (например, цитотоксичные типы микроорганизмов). Сбор материала для анализа не подразумевает причинение боли или дискомфорта пациенту. Процедура показывает максимально достоверные результаты.

Преимущества методики:

  • процедура позволяет выявить различные штаммы патогенных бактерий;
  • метод отличается высокой степенью чувствительности;
  • анализ безопасен для пациента (для сбора материала не применяются медицинские инструменты);
  • неинвазивность и простота процесса забора биологического материала;
  • высокая степень специфичности теста;
  • метод позволяет определить не только спиралевидные, но и кокковые типы бактерий.

Высокая степень чувствительности теста является его одновременным достоинством и недостатком. Анализ с точностью определяет наличие бактерий, но при загрязнениях биологического материала или тары, результаты процедуры могут быть ложноположительными.

Для исключения ложных показателей следует соблюдать все правила сбора каловых масс для проведения их исследования.

Другие недостатки:

  • относительно высокая цена процедуры;
  • отсутствие возможности определить чувствительность бактерии к антибактериальным препаратам;
  • более низкий показатель чувствительности в сравнении с процедурой исследования биоптата слизистой оболочки желудка.

Процедуры исследования каловых масс осуществляются вне организма пациента («ин витро» — «в стекле», «в пробирке»). Для обнаружения микроба такие методы являются максимально точными и эффективными. Однако процедуры имеют некоторые недостатки. Некоторые процессы, происходящие в человеческом организме нельзя воссоздать искусственным способом.

Анализы могут показать уровень чувствительности бактерий к определенным антибиотикам, но стопроцентной информативности такие тесты не дают.

Процедура Уровень достоверности результатов Расшифровка результатов исследования
ПЦР Высокая Положительный — выявлен хеликтобактериоз; отрицательный — не выявлено ни одного типа хеликобактер пилори
Бактериологический анализ на чувствительность к антибактериальным препаратам Низкая — на выявление антигенаВысокая — на определение чувствительности Количество бактерий 0 — результат отрицательный, бактерии не выявлены; показатели больше 0 — определен хеликтобактериоз; R — устойчивость к определенному антибиотику; I — умеренная степень чувствительности к антибиотику; S — высокая степень чувствительности к антибиотику
Иммунологические методы Низкая Положительный — выявлен хеликтобактериоз; отрицательный — патогенная бактерия не выявлена
  • существует несколько способов определения хеликобактерии в каловых массах лабораторным методом;
  • каждый вариант анализов имеет свои достоинства и недостатки;
  • для получения максимально точных результатов рекомендуется сдать несколько анализов разных типов;
  • каловые массы для анализа собираются с учетом ряда правил;
  • за несколько дней до процедуры из рациона исключается грубая клетчатка, жареные, жирные блюда, острые специи и приправы, алкоголь и любые плоды оранжевого или красного цвета;
  • емкость для кала должна быть стерильной (оптимальный вариант — аптечные тары).

После заражения микроб появляется во многих средах организма. Так что становится возможным анализ на хеликобактер пилори по биохимии крови, слюне, калу и так далее.

Вопрос об этом решается по наличию соответствующих возможностей у местной лаборатории. Анализ крови на хеликобактер пилори проводится с целью выявить наличие антител IgG и некоторых других комплексов, формируемых под действием антигенов (CagA и другие).

Расшифровка анализа ведётся по таблицам. Так норма в крови этих веществ известна.

Золотым методом у медиков считается вовсе не анализ крови на хеликобактер пилори. Рекомендуется сделать биопсию с последующим посевом образца на питательные среды. Это как результативный анализ хеликобактер, так и путь для определения чувствительности культуры к лекарственным препаратам.

В сыворотке быстро формируются антитела к хеликобактер пилори. Картина характеризуется количественным изменением интелейкинов:

  1. Повышение числа IL-6, 8 и 10.
  2. Снижение количества IL-2.

Однако в исследованиях, проведённых на подростках, обнаружено несоответствие картин у детей и взрослых. С 14 до 17 лет у людей не зафиксировано количественного изменения цитокинов. Подростки сдали кровь на хеликобактер, и не выявилось никаких различий по содержанию интерлейкинов, факторов некроза и интерферонов.

Цитокины пока ещё недостаточно изучены, так что диагностика в этом плане носит скорее предположительный характер. О чем и было сказано выше. Медики пока ещё выясняют соотношения между понятиями хеликобактер пилори, анализ крови, норма и цитокины.

Описываемые структуры представляют собой белковые комплексы, формируемые как ответ иммунной системы. По конфигурации цитокины близки к гормонам, а функции их пока что не изучены. Вот некоторые предположения на этот счёт:

  1. Контроль за производством клеток крови и их дифференцированием.
  2. Балансировка иммунной системы.
  3. Регулировка процессов воспаления.
  4. Поддержание нормального давления крови и её свёртывания.

Цитокины сегодня постоянно пополняются новыми представителями класса. Медики делят их на классы следующим образом:

  • Интерлейкины.
  • Интерфероны.
  • Хемокины.
  • Монокины.
  • Лимфокины.
  • Колониестимулирующие факторы.

Когда велось исследование новой тогда ещё инфекции хеликобактер пилори, медики обнаружили в цифрах повышенный фон IL-1 бета и IL-6 (на слизистой, а не в крови).

Со временем стало ясно, что неадекватные реакции иммунной системы, которая отказывается бороться с инфекцией и постепенно переключается на аутоиммунные реакции, обусловлены формируемыми цитокинами.

Указанные вещества проникали в цитоплазму клеток и межклеточное вещество.

Вот почему сегодня положительный анализ крови расшифровывается, как источник проблем в области сердечно-сосудистой системы, кожных заболеваний, анемии и других. При эрадикации helicobacter pylori в первую очередь фиксируется снижение уровня факторов некроза опухоли альфа, IL-8 и IL-1 бета.

Не все штаммы провоцируют подобные изменения, а те, которые содержат антиген CagA. IL-8 – провокатор воспаления в организме.

Когда медики столкнулись с проблемой замены биопсии ввиду сложности проведения процедуры, то выдумали сонм иных методик. Исследования на антитела в крови относятся к этому разряду.

Анализ считается неинвазивным, хотя проводится при помощи шприца. Первоначально исследование на антитела напоминало то, что проводится для кампилобактера.

Посредством перекрёстной реакции антигенов медики решали вопрос о присутствии их в сыворотке крови.

Что касается исследований на специфические факторы, например, CagA, то было вынесено решение о нецелесообразности такого подхода из-за плохой чувствительности.

Наличие IgG не указывает на присутствие инфекции. Удаётся обнаружить при анализе этот фрагмент в течение продолжительного времени. Из-за резкого снижения носителей инфекции в развитых странах удаётся определить наличие IgG у тех, кто давно уже получил негативный статус присутствия микроба.

Постепенно титры антител падают. Требуется парный анализ (до и после лечения), чтобы понять, каков диагноз. Потому единые цифры не удаётся выявить для отдельно взятого пациента. Снижение титров длится десятилетиями. Сегодня медики предлагают оценивать успех лечения по 50% снижению за 6 месяцев. Этот признак отличается повышенной чувствительностью (97%) и специфичностью (95%).

Сегодня тесты на иммуноглобулины IgA и IgM не одобряются в развитых странах. Поскольку показатели достоверности желают лучшего.

Помимо морфологических признаков, регистрируемых инструментальными методиками (гастрит, язва и так далее), выделяют клинические признаки, как например, сильный голод.

Это обусловлено биохимическим составом крови – повышенным уровнем гастрина. Слабоположительный прирост уровня пепсиногена рассматривается как фактор риска развития язвы.

Однако этот фактор указывает не на формирование заболевания, а выявляет в крови маркер присутствия хеликобактера.

Сначала этот признак отнесли к генетически заложенному в организме человека. Поскольку то же характерно при аутоиммунном гастрите. Однако повторный анализ ситуации показал, что бактерия – причина.

Так что медики уровень пепсиногена и гастрина в крови считают весомым доводом в пользу выставляемого диагноза. Так при росте соотношения пепсиногенов I и II на 25% пора уже присмотреться.

Фурута сообщает о специфичности этой методики в 90% случаев и чувствительности – 95%.

Гипотеза проверялась путём оценки титров IgG после лечения инфекции. Через 2 недели после излечения медики зафиксировали снижение гастрина. Однако, чтобы сдать тест крови по этой методики, придётся выполнить его дважды с интервалом 6-12 месяцев.

Результат оценивается, например, по той сумме, которую дают антитела к хеликобактер (иммуноглобулины А, М и G):

  1. 0,8 – суммарные показатели указывают на негативный ответ о наличии диагноза.
  2. 0,8 – 1,1 – требуется дополнительное исследование.
  3. Свыше 1,1 – значит, что в желудке локализована инфекция.

Бактерия обнаруживается в испражнениях, так что анализ кала на хеликобактер – неотъемлемое исследования на бактерию. Однако стул анализируется на антиген. В США (штат Цинциннати) уже разработан комплект количественной оценки кала на наличие нужных молекул.

В основу заложен иммуноферментный анализ, чувствительность которого к антигену составляет 185 нг/мл. Подготовка сильно напоминает то, о чем было написано выше в отношении проб крови.

На антитела из состава оборудования осаждаются антигены (посредством белковых механизмов идентификации). Однако это не даёт представления о том, как лечить инфекцию.

То, что антиген в кале, показывает наличие бактерии в желудке.

Поликлональные антитела, связанные с пероксидазой, и пробу инкубируют в течение 1 часа. Затем материал наносится на лунки и выдерживается 10 минут. Связанный фермент изменяет цвет, регистрируемый спектрофотометрическими методами. Для фиксации результата (чтобы остановить процесс) добавляют стоп-раствор.

Результат по достоверности сравним с гистологическим исследованием биопсии. Медики даже не берутся сказать, какой самый точный. Однако ошибки (5%) все-таки встречаются. С биопсией это случается реже.

Медики обратили внимание на зависимость качества ингредиентов, поставляемых вместе с набором, а также значение профессионализма сотрудников лаборатории. Реактивы получают из подопытных кроликов, и стандартизация сильно осложнена из-за недостатка знаний о нужных технологиях.

Исследование кала по результативности сравнивается с тестом дыхательным. Этим путём проводится определение достоверности результатов, полученных по крови.

Помимо того, как сдаётся анализ, как берут пробу, выделяют пути оценки нужных параметров. Выше приведены сведения о биохимических и иммуноферментных разновидностях. Но точный – ПЦР. Это клонирование участков ДНК при помощи специальных реакций, что позволяет обнаружить бактерию.

Этот метод считается сегодня перспективным. В особенности, когда речь идёт о дизентерии. ПЦР на определение микроба в кале затруднено, так как наличие специфических компонентов препятствует протеканию реакции.

Это мешает правильно понять результаты. К тому же, некоторые участки ДНК схожи с теми, что выявлены у других бактерий (которых в испражнениях много).

Поэтому тест в этом случае не считается оптимальным, а стоит дороже, нежели дыхательный.

Однако ПЦР позволяет быстрее обнаруживать мутации ДНК, обусловливающие резистентность класса к тем или иным медицинским препаратам. Так что достоверность отходит на второй план перед перспективами, открывающимися исследователям (в научном, а не клиническом смысле).

Из сказанного понятно, что одно обследование дополняет другое. Они не альтернатива друг другу. Проверяйтесь по той и другой методике, чтобы правильно диагностировать заболевание. Этим методы дополняют собой дыхательный тест.

По большей части оба применяются уже после лечения для оценки успешности эрадикации. С целью определения титра, где повышен эффект присутствия антител.

Если речь идёт о диагностике, то сдаётся в лаборатории кал. Поскольку так обнаруживается присутствие микроба в ЖКТ.

Что касается крови, то наилучшие результаты получаются при двух разнесённых по времени пробах. Что далеко не во всех случаях уместно.

Чаще делается всё-таки дыхательный тест, который люди иной раз сдают в домашних условиях. А кровь при необходимости берётся медиками в клинике. Проверенным случаем считается тот, когда при ФГДС проводится взятие биопсии с последующим высеванием на питательную среду. Лучше пока что ничего не придумано.

А рассматриваемые виды – вспомогательные методики. Если речь идёт об экспресс-анализе, исследование кала помогает уточнить диагноз. Если о лечении – состояние крови характеризует результативность эрадикации. Желающим определить наличие микроба лучше начинать с дыхательного теста, как безобидного и простого в реализации.

источник