Меню Рубрики

Пцр анализ на скрытые инфекции расшифровка

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это современный инструмент диагностики разнообразных инфекций, отличающийся высокой точностью. Анализ ПЦР позволяет определять возбудителей инфекционных заболеваний, опираясь на их генетический материал (РНК или ДНК). Биологическим материалом для исследования может служить кровь, мазок из половых органов, слюна и прочее.

Метод ПЦР был открыт в 1983. Его создатель Кэри Мюллис (США), за это открытие получил Нобелевскую премию в области химии. Уже за первые десять лет методика стала обязательным лабораторным исследованием во всем мире, получив признание ученых и врачей.

Анализ ПЦР в клинике ДИАНА

Медицинский центр Диана предлагает провести исследование по методике полимеразной цепной реакции в кратчайшие сроки и с высочайшим уровнем точности. Наша диагностическая база соответствует всем международным стандартам и требованиям.

На диагностику отправляют гинеколог, уролог или дерматолог. Анализ ПЦР дает возможность диагностировать большое число разнообразных инфекций. В эту группу попадают и скрытые, бессимптомные заболевания, находящиеся в инкубационном периоде:

С помощью метода ПЦР можно обнаружить:

  • гепатит C, B;
  • уреаплазмоз половых органов;
  • ИППП – уреаплазмоз, трихомониаз, гарднереллез,;
  • хламидиоз половых органов и дыхательных путей;
  • микоплазмоз половых органов и дыхательных путей;
  • бактериальный вагиноз;
  • кандидоз половых органов;
  • инфекционный мононуклеоз;
  • туберкулез;
  • сальмонеллез;
  • туберкулез (легочные и внелегочные формы);
  • листериоз, клещевые энцефалиты, болезнь Лайма;
  • цитомегаловирусную, папилломавирусную, герпесную инфекцию;
  • детские заразные болезни, выявляемые при беременности и до зачатия — краснуху, паротит, дифтерию, корь;
  • ВИЧ.

При каждом из вышеперечисленных заболеваний, обнаруженным другим методом, желательно делать и ПЦР — исследование. Возбудители многих инфекций имеют несколько типов (штаммов), а более точная диагностика делает лечение эффективнее. Поскольку разные типы возбудителей обладают своими способами передачи инфекции, точное определение возбудителя помогает уберечь от заражения окружающих. Например, гепатитом А можно заразиться через общие предметы и посуду (болезнь грязных рук), а гепатитом С — только через кровь, медицинские инструменты и половые контакты. Это важно для тех, кто находится рядом с больным.

Метод основан на выявлении возбудителя по участкам ДНК или РНК. ПЦР напоминает криминалистику, когда преступника находят по частичкам кожи или волосам, оставленным на месте преступления. Поскольку каждый живой организм имеет уникальную структуру ДНК или РНК. Метод позволяет безошибочно идентифицировать микроорганизм, даже если он присутствует в исследуемом материале в минимальных количествах.

ПРЦ подходит для выявления скрытого носительства, нетипичных, стертых и прочих форм заразных заболеваний. Диагностика отличается высокой точностью, поэтому практически не дает ошибок и ложных результатов. Анализ часто назначается, как дополнительное обследование, чтобы выявить конкретный тип вируса или микроба.

Анализ ПЦР – результативный диагностический инструмент, позволяющий врачу не только правильно определить тип инфекционного возбудителя в организме больного, но также и количество микробов. Эта особенность позволяет методу ПЦР эффективно обнаруживать и хронические инфекции, к примеру, вирусный гепатит.

Преимущества методики заключаются в следующих особенностях:

  • Универсальность . Метод дает возможность определить все известные на сегодняшний день микроорганизмы, вне зависимости от вида исследуемого материала.
  • Специфичность . ПЦР позволяет определить ДНК вируса или бактерии со 100% точностью, что не дает ни один другой способ диагностики.
  • Чувствительность – даже один мельчайший «обломок» ДНК или РНК может быть обнаружен и идентифицирован, благодаря быстрой реакции образования копий.
  • Оперативность – поставить диагноз на основании полимеразной цепной реакции можно уже через несколько часов после забора биологического материала, что дает возможность своевременно приступить к лечению заболевания.
  • Возможность проведения количественного анализа . Эта особенность важна при выявлении болезней, вызванных условно-патогенной флорой (например, молочницы). Повышенное содержание грибков кандида в организме вызывает заболевание, а нормальное количество до 10 3 — 104 КОЕ/тамп. – нет.

Недостатки ПЦР-диагностики – это необходимость в высокотехнологичном оборудовании и высококвалифицированных специалистах. Для анализа нужен специальный бокс-ламинар, где поддерживается необходимая температура и обеспечивается чистота эксперимента.

Чтобы понять, как именно следует подготовиться к предстоящему анализу ПЦР, пациент должен обязательно уточнить у своего врача, какой именно биологический материал планируется взять. От этого непосредственно зависит подготовка.

  • Выделения из половых органов, мазок из шейки матки или мочеиспускательного канала, моча – посредством исследования данных вариантов материала методом ПЦР эффективно диагностируются инфекции половых органов.
  • Вирусный гепатит C, ВИЧ инфекция требуют взятие крови на анализ ПЦР.
  • С помощью мазка из зева можно подтвердить или опровергнуть факт наличия инфекционного мононуклеоза.

Для диагностики половых инфекций методом ПЦР у женщин, как правило, берут мазок из влагалища . При беременности действуют стандартные правила подготовки к анализу ПЦР.

  • За пару дней до проведения ПЦР нужно отказаться от спринцеваний, средств интимной гигиены.
  • За неделю до анализа на инфекции стоит перестать применять любые виды лекарственных препаратов, разумеется, если они не входят в программу подготовки к анализу ПЦР, прописанную врачом.
  • За пару дней до обследования нужно начать воздерживаться от полового акта.
  • Подмывание в день анализа ПЦР не нужно, гигиена половых органов проводится накануне вечером, используется только теплая вода.
  • За пару часов до сдачи анализа мочиться нельзя.

Подготовиться к забору мазка из мочеиспускательного канала для проведения ПЦР несложно. Достаточно соблюдать изложенные ниже правила.

  • За 2 суток до ПЦР обследования нужно начать воздерживаться от сексуальных отношений.
  • Прием лекарств прекращается приблизительно за 7 дней до проведения анализа, если, конечно же, они не были специально назначены врачом.
  • Гигиена половых органов должна проводиться накануне вечером, в день анализа ПЦР это делать не стоит.
  • Рекомендуется не мочиться примерно 2-3 часа перед сдачей анализа.

Если в процессе ПЦР анализа объектом изучения станет кровь пациента, правила подготовки к нему следующие.

  • Оптимальное время для сдачи крови – утро, анализ нужно обязательно сдавать натощак (минимум 8 часов отсутствия пищи). Воду можно пить свободно.
  • Отказ от алкоголя за сутки до ПЦР анализа, отказ от курения за час до него.
  • Если здоровье допускает такой вариант, от приема лекарственных средств рекомендуется на время отказаться.
  • Перед сдачей проб крови в обязательном порядке следует отдохнуть около 20 минут.
  • Накануне ПЦР исследования совершенно исключены эмоциональные и физические перегрузки, они могут сказаться на результатах анализа.

Для исследования берется любая среда, в которой может находиться возбудитель, но чаще всего используются:

  • Кровь сыворотка или плазма – для выявления множества возбудителей – вирусов гепатита B, C, D, G, герпеса, ВИЧ, цитомегаловируса;
  • Моча и сок простаты – при диагностике ЗППП;
  • Мокрота, плевральная жидкость, бронхоальвеолярный лаваж – для диагностики легочных и внелёгочных форм туберкулеза;
  • Спинномозговая жидкость – для диагностики инфекций нервной системы;
  • Околоплодная жидкость – для определения внутриутробных заражений;
  • Мазок из зева – для выявления возбудителей инфекционного мононуклеоза и дифтерии;
    соскобы и мазки со слизистых для диагностики ЗППП;
    клетки слизистой желудка и желудочный сок — для выявления бактерии хеликобактер, вызывающей гастрит и язву.

При одном взятии материала можно обнаружить сразу нескольких возбудителей, попавших в организм. Такая универсальность избавляет пациента от дополнительных обследований и лишних трат.

Обнаружить и идентифицировать участки генетической информации удается при помощи специальных эталонных маркеров ДНК (праймеров) созданных для каждого известного возбудителя. Эталон позволяет найти «свой» фрагмент среди миллионов других. Если это происходит, запускается реакция полимеразной цепи.

» data-medium-file=»//i2.wp.com/medcentr-diana-spb.ru/wp-content/uploads/2017/01/ptsr-analiz.jpg?fit=422%2C300&ssl=1?v=1572898832″ data-large-file=»//i2.wp.com/medcentr-diana-spb.ru/wp-content/uploads/2017/01/ptsr-analiz.jpg?fit=662%2C471&ssl=1?v=1572898832″ />
ПЦР—реакция делает огромное число копий выявленного участка генной информации (репликацию). Важно, что реплицируются только участки ДНК и РНК, необходимые для проведения анализа. Поэтому так важны чистота эксперимента и умение персонала обращаться с аппаратурой и образцами.

Цепная реакция протекает очень быстро, уже через два часа участок ДНК увеличивается в миллионы раз, что позволяет обнаружить и точно идентифицировать инфекцию. Для работы с эталонами пробирки помещают в специальный прибор. При помощи программы задается алгоритм, несколько раз меняющий температуру среды и влияющий на протекание реакции. Результат ПЦР виден сразу после окончания исследования.

Проведение ПЦР исследования позволяет не просто установить тип инфекции, присутствующий в организме больного, но и оценить его с количественной точки зрения (количество микробов). Расшифровка результатов количественного анализа ПЦР играет важную роль в обнаружении и проверке эффективности лечения большого числа хронических заболеваний, скажем гепатита C.

Результатом анализа ПЦР могут стать положительный и отрицательный ответы.

  • Отрицательный результат. Следы инфекции не были выявлены в биологическом материале, который являлся объектом исследования в процессе анализа ПЦР. Как правило, на основании отрицательного результата можно полагать, что в организме действительно отсутствует инфекция.
  • Положительный результат. Такой результат анализа ПЦР свидетельствует о том, что следы инфекционного заболевания присутствуют в биологическом материале пациента. Положительный результат анализа ПЦР характеризуется большой степенью точности.

Иногда инфицирование выявляется на фоне полного здоровья и отсутствия признаков заболевания. Некоторые больные считают, что анализ сделан неправильно, но реальная ситуация другая. Если ПЦР показала, что возбудитель в организме есть, значит, он там действительно находится. Просто инфекционные болезни никогда не начинаются сразу после заражения, имея инкубационный период различной продолжительности.

Скрытый период может продолжаться очень долго, например, при СПИДе – несколько лет, пока какие-то механизмы не подтолкнут вирусы к размножению. Возбудитель определяется в организме носителей и тех, кто не долечился. Очень часто переходят в скрытую (латентную) форму различные ЗППП. В этом случае может понадобиться дополнительная лабораторная диагностика.

Метод ПЦР, позволяющий выявлять достаточно большое число инфекций, характеризуется повышенной точностью, чувствительностью и специфичностью. Эти характеристики говорят о том, что с помощью исследования ПЦР можно:

  • Максимально точно установить отсутствие или присутствие инфекционного возбудителя.
  • Максимально точно определить конкретную разновидность инфекционного возбудителя (специфичность).
  • Выявить инфекцию даже в том случае, когда она имеет скрытый характер. Речь идет о низком уровне присутствия в подвергаемом исследованию биологическом материале пациента ДНК микробов (чувствительность).

Преимущества метода ПЦР над иммуноферментным анализом и прочими иммунологическими инструментами выявления инфекции заключается в том, что он реже дает ошибочные результаты. То есть расшифровка анализа ПЦР значительно реже показывает отсутствие инфекционных микробов, если они есть в организме больного.

Кроме того, почти не бывает, чтобы расшифровка анализа выявляла наличие в организме несуществующей инфекции, то есть давала ложноположительные результаты.Разумеется, стопроцентно правильными результаты ПЦР назвать все же нельзя, поэтому необходимо обязательно дополнять это исследование другими методиками.

Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter

источник

ПЦР на ИППП – это специальный метод исследования различных биологических жидкостей на предмет наличия в организме венерических заболеваний. Изобретение такой диагностики позволило выявлять скрытые формы ЗППП в самой начальной стадии.

Показания к назначению ПЦР на ЗППП

Преимущества и недостатки метода

Какие заболевания можно выявить с помощью ПЦР?

Соскоб из уретры и цервикального канала

Подготовка к сдаче анализа

Сроки исполнения анализов на ЗППП

Сколько стоит ПЦР на ИППП?

ПЦР (полимеразная цепная реакция) на ИППП – это анализ, который позволяет выявить 12 самых распространённых инфекционных заболеваний, передающихся половым путем.

Показания к назначению ПЦР на ИППП:

  • высыпания в области половых органов;
  • боль во время мочеиспускания;
  • зуд или жжение;
  • обильные выделения с резким и неприятным запахом;
  • эрозии на слизистой или в области гениталий;
  • видоизменение (разрастание эпителия) слизистой в области шейки матки;
  • воспаление мочеполовой системы;
  • изменение цвета семенной жидкости у мужчин;
  • увеличение лимфатических узлов в области паха;
  • нарушение менструального цикла;
  • случаи выкидышей, патологий при беременности, трудности с зачатием;
  • наличие кисты на яичниках;
  • наличие спаек в области малого таза;
  • боли внизу живота;
  • наличие простатита у мужчин.

Следует отметить, что вне зависимости от симптомов, проходить обследование должны все в случаях:

  • незащищенного полового акта с двумя или более партнёрами в течение 6 месяцев;
  • планирование беременности.
  1. Высокий процент достоверности. Даже если в биоматериале была обнаружена единичная клетка возбудителя, диагностика её выявит.
  2. Оперативность получения результата.
  3. Универсальность исследования. ПЦР на ИППП можно выполнять при взятии любого материала: мазок из влагалища или уретры, кровь, сперма.
  4. Специфичность процедуры. Во время анализа находят специфичный фрагмент ДНК, который принадлежит конкретному вирусу.
  5. Доступность. Проводят такие обследования практически все лаборатории.
  6. Достаточно одной пробы, чтобы определить наличие или отсутствие ИППП.

Есть и недостатки в проведении процедуры, которые необходимо учитывать, прежде чем сдавать анализ:

  1. Вероятность ложного результата. Её процент очень низкий, но все же возможен.
  2. Возможность микроорганизмов мутировать структуру ДНК. В таком случае выявить болезнь будет сложно. Это редкость, но стоит учитывать этот фактор при обследовании.
  3. Некоторых возбудителей сложно выявлять. Например, хламидиоз или трихомоноз. Чтобы результат был точным, приходится прибегать к стимуляции. Такие инфекции называют скрытыми.

С помощью ПЦР методики можно обнаружить практически все вирусы и инфекции. Комплексный анализ предполагает сдачу стандартного перечня именуемого в медицине группа «ИППП-12».

ИППП-12 может применяться при целом комплексе инфекций, в который входят:

  1. Уреаплазмоз. Обычно протекает бессимптомно, но может стать причиной выкидыша, поэтому требует незамедлительного лечения при планировании беременности.
  2. Микоплазмоз. Наиболее распространённые симптомы: боли в паху (усиливаются при половом акте), жжение при мочеиспускании, выделения. Мужчины являются носителями.
  3. Хламидиоз. Хламидии опасны тем, что поражают уретру, кишечник и шейку матки. При отсутствии надлежащей терапии приводят к бесплодию у женщин.
  4. Трихомонада. К наиболее частым симптомам относятся: покраснение и отёк половых органов, обильные выделения с резким неприятным запахом, небольшие язвочки на гениталиях. У мужчин заражение всего проходит бессимптомно, но может появляться жжение при мочеиспускании. Наряду с этой инфекцией, врачи могут выявить у женщин ещё такое заболевание, как трихомонадный кольпит. При отсутствии надлежащего лечения поражаются матка, яичники и мочевой пузырь.
  5. Кандидоз (молочница). Самые распространённые симптомы: зуд и обильные творожистые выделения.
  6. ВПЧ (вирус папилломы человека) 16 и ВПЧ 18. Различают бессимптомные (дисплазия) и клинически ярко выраженные варианты заболевания (кондиломы, папилломы и бородавки). Большинство из них безопасные. Но необходимо постоянно наблюдаться у гинеколога. Самым опасным осложнением является онкология.
  7. Цитомегаловирус. Чаще всего протекает бессимптомно. Но может проявляться в виде обычной ОРВИ.
  8. Генитальный герпес тип 1 и тип 2. На половых губах появляется небольшое красноватое пятнышко, которое вызывает чувство жжения и зуда. Затем надувается пузырёк и нарастают болевые ощущения. Через 3–5 дней волдырь лопается и вытекает жидкость. На месте ранки образуются корочки. На десятый день все симптомы полностью исчезают.
  9. Гонорея. Возбудителем которой является нейссерия. Симптомы: сильные боли внизу живота, жжение и дискомфорт при мочеиспускании, выделения желтовато-белого цвета с резким неприятным запахом.
  10. Гарднереллёз (бактериальный вагиноз). Симптоматика схожа с молочницей.
  11. Сифилис и нейросифилис (по симптоматике похож на менингит).
  12. ВИЧ (СПИД).
Читайте также:  21 век анализы на скрытые инфекции

При проведении лабораторных исследований устанавливается точный диагноз и назначается терапия, направленная именно на устранение выявленных возбудителей.

Наиболее эффективными методами считаются:

  • анализ крови;
  • анализ мочи;
  • соскоб из уретры и цервикального канала;
  • исследование спермы;
  • анализ секрета простаты.

Анализ крови на ИППП выполняется методом прямой и непрямой иммунной флюоресценции. Материал окрашивают особыми антителами в сочетании с красителями.

Например, достоверность подобного исследования достигает при выявлении:

  • сифилиса — 100%;
  • микоплазмоза – до 70%;
  • хламидиоза – 98%.

Можно выделить следующие исследования:

  • анализ крови на TORCH инфекции: токсоплазмоз, краснуха и цитомегаловирус;
  • RW – реакция Вассермана (применяется для выявления сифилиса);
  • ВИЧ-инфекции, гепатиты B и C.

С помощью общего анализа мочи диагностируется воспалительный процесс в мочеполовой системе, а также наличие инфекции.

Для ПЦР мочу сдают в основном мужчины. Единственным и главным недостатком такого метода обследования является то, что можно установить лишь сам факт наличия бактерий, но невозможно определить их количество.

Эта диагностика является наиболее эффективной для определения ИППП. Методика совершенно безопасная и безболезненная. Мазок позволяет обнаружить как наличие вредных микроорганизмов, так и их количество.

Забор проводится следующим способом: врач соскабливает материал из уретры и цервикального канала (только у женщин) с помощью специальных инструментов.

Метод диагностики предназначен для обнаружения в биоматериале:

  • специфических фрагментов ДНК основных возбудителей инфекций, которые могут передаваться половым путём;
  • урогенитальных инфекций мочеполовой системы у мужчин (к ним относятся: гонорея, хламидиоз, трихомониаз, микоплазмоз, уреаплазмоз).

Главным преимуществом диагностики является установление не только наличия возбудителей, но и определение точного их количества.

Семенную жидкость пациент собирает самостоятельно в контейнер. Секрет простаты собирает врач после массажа предстательной железы.

Для получения достоверного результата ПЦР на ИППП, необходимо основательно к нему подготовиться.

Если речь идёт об анализе крови, то следует придерживаться простых правил:

  1. Не рекомендуется употреблять пищу за 8–12 часов до забора.
  2. Следует отказаться от вредных привычек за 24 часа до анализа.
  3. Нельзя за два дня принимать антибиотики, иначе картина результата обследования будет смазана. Также следует закончить приём других лекарств за 4 недели до диагностики.

Чтобы сдать анализ мочи, необходимо следовать следующим рекомендациям:

  • воздержаться от половых контактов за 1 день до обследования;
  • за 4 недели до обследования следует прекратить приём антибиотиков;
  • собирать биоматериал нужно самостоятельно в контейнер с утра натощак.

При подготовке к взятию мазка из уретры и цервикального канала, следует выполнять следующие рекомендации:

  • за 7 дней до забора материала необходимо прекратить приём свечей, спринцеваний и спреев;
  • исключить половые акты за 2–3 дня до обследования;
  • вечером перед процедурой провести гигиенические процедуры, желательно без мыла;
  • рекомендуется не мочиться за 2–3 часа до процедуры;
  • у женщин брать мазок следует через 3 дня после менструации или за 3 дня до её начала.

Перед сдачей анализа семенной жидкости у мужчин необходимо:

  • накануне провести гигиену половых органов;
  • закончить приём антибиотиков за 4 недели до сдачи анализа;
  • воздержаться от половых актов за 3 дня до сбора материала.

Из видео вы узнаете о методах диагностики ПЦР, а так же как подготовиться к обследованию. Снято Московским КВД.

Как правило, средняя продолжительность исследования материалов составляет от 1 до 3 дней. Ответы на большинство анализов, где будут расшифровывать результаты, можно получить уже в день забора. Например, анализ крови или мочи.

Существует только 2 варианта расшифровки результата:

  1. Отрицательный ответ указывает на то, что во взятом для исследования материале не было обнаружено никаких вредоносных микроорганизмов.
  2. Положительный результат ПЦР свидетельствует о наличии следов инфекции в образце. С большой вероятностью такой ответ подтверждает наличие возбудителей в данный момент.

Нельзя исключать ситуации, когда ПЦР оказывается положительной, но активной инфекции не выявлено. Это «здоровое носительство», без ярко выраженных клинических симптомов. Оно не требует специальной терапии, но необходимо проходить плановые периодические обследования по назначению врача.

Стоимость ПЦР на ИПП по регионам приведена в таблице:

Регион Стоимость Фирма
Москва от 350 руб. «МедЦентрСервис»
Челябинск от 400 руб. Эститик Центр «Комильфо»
Краснодар от 230 руб. «ЗДРАВА»

Из этого видео можно узнать, что такое диагностика ПЦР на ИППП и как она проводится. Снято каналом MYVENEROLOG RU.

источник

Среди современных методов диагностики одним из наиболее точных и информативных считается мазок на ПЦР. Преимуществом метода полимеразной цепной реакции является возможность использования любого биологического материала. Чаще всего соскоб для лабораторного исследования берут из половых органов мужчин и женщин с целью обнаружения и профилактики инфекций, передающихся половым путем.

Метод ПЦР применяется не только в медицине. Его используют в археологии, генетике, криминалистике. Разработчиком этого вида диагностики является американский химик Кэри Мюллис – лауреат Нобелевской премии. Кстати, самую престижную международную награду он получил за открытие метода ПЦР.

Благодаря полимеразной цепной реакции у ученых появилась возможность определять сходство ДНК, устанавливать отцовство и родственные связи. И все же основным предназначением мазка методом ПЦР принято считать диагностику инфекционных заболеваний у человека.

Полимеразная цепная реакция представляет собой высокоточный способ молекулярно-генетического исследования, проведение которого позволяет выявлять вирусные, генетические и наследственные патологии. Преимущество данной методики заключается в возможности определения болезнетворных агентов не только на острой или хронической стадии заболевания, но и в инкубационный период, то есть до того, как проявятся первые симптомы патологии.

Мазок на ПЦР никогда не дает ложноположительного ответа. Этим и отличается данный метод диагностики от других. Если инфекции в организме нет, пациент не получит положительный результат – в этом можно не сомневаться. Сегодня анализ на полимеразную цепную реакцию сдают с целью определить тип возбудителя и его количество.

Ни один из методов исследования не способен найти возбудителя непосредственно в гене, содержащемся в исследуемых материалах. ПЦР – это максимально точный и достоверный анализ на венерические заболевания и латентные вирусы в организме. В отличие от иных способов диагностики, анализ полимерной цепной реакции имеет ряд преимуществ:

  • он нацелен на обнаружение возбудителя инфекции;
  • является универсальным, поскольку позволяет выявлять сразу несколько типов инфекционных агентов;
  • при этом достаточно использования только одного биологического образца пациента;
  • обладает сверхчувствительностью, за счет чего вероятность возможных перекрестных реакций равняется нулю.

В сравнении с методом бактериологического посева, мазок на ПЦР считается самым надежным и быстрым диагностическим способом. Сама процедура лабораторной диагностики не занимает более четырех часов. Для получения результата бакпосева требуется не менее семи дней. Суть этого метода состоит в следующем: образец биоматериала помещают в благоприятную среду и наблюдают за активностью возбудителей, если таковые обнаруживаются, на протяжении всего периода исследования.

Анализ мазка на ПЦР способен раскрыть любое количество инфекционных возбудителей в организме, включая «скрытые» вирусы, не проявляющие себя никакой симптоматикой в течение длительного времени. Этот диагностический метод применяют тогда, когда необходимо подтвердить или опровергнуть наличие у пациента:

  • вирусного гепатита;
  • уреаплазмоза;
  • хламидиоза половых путей;
  • вируса папилломы человека;
  • герпеса;
  • злокачественных клеток;
  • микоплазмоза;
  • вагиноза;
  • мононуклеоза;
  • трихомониаза;
  • ВИЧ-инфекции.

В качестве исследуемого материала для анализа на ПЦР используют кровь, слюну, мокроту, мочу. Перед процедурой взятия соскоба пациенту необходимо подготовиться к нему. О том, как подготовиться перед анализом ПЦР-мазка, пациенту сообщит лечащий врач. Как правило, специалисты проводят с больными соответствующую консультацию. Например, кровь сдают натощак, а непосредственно перед соскобом шейки матки нежелательно проводить гигиенические процедуры.

Материалом для ПЦР-анализа могут быть практически любые биологические жидкости человека. Чужеродные ДНК болезнетворных микроорганизмов способны проникать в любую среду. Чаще всего в качестве образца для исследований применяется кровь и ее отдельные компоненты (плазма или сыворотка). В жидкой ткани могут присутствовать РНК вирусного гепатита, простого герпеса, цитомегаловируса, ВИЧ.

Широкие показания к исследованию имеют биологические жидкости. К ним относятся:

  • сок простаты;
  • сперма;
  • вагинальный секрет;
  • спинномозговая (ликвор);
  • амниотическая;
  • бронхоальвеолярный лаваж;
  • суставная жидкость;
  • слюна.

Для диагностики венерических заболеваний типа гонореи, хламидиоза, микоплазмоза, уреаплазмоза, трихомониаза, гарднереллеза, герпетических форм и др., у пациентов берут эпителиальные соскобы со слизистых оболочек. У мужчин берут мазок ПЦР из уретры, а у женщин – из влагалища или шейки матки.

Отдельная категория – биоптаты. Чаще всего биоптаты исследуют с целью определения природы новообразования, подтверждения его злокачественности. Биоптаты желудка и двенадцатиперстной кишки требуются для выявления бактерии Хеликобактер пилори и ее количественной нагрузки.

Моча как биоматериал используется при инфекционных поражениях мочевыделительной системы. У мужчин мазок ПЦР нередко заменяют исследованием мочи, поскольку уретра у представителей сильного пола является универсальным элементом мочеполового тракта.

Для диагностики туберкулеза и обструктивных болезней легких исследуется мокрота. Материал могут собирать в стерильный флакон (15-20 мл) или брать мазок из зева. ПЦР-анализ также используют для выявления осложненных форм микоплазмоза и хламидиоза – при отсутствии лечения и других неблагоприятных факторов данные виды инфекции способны поражать респираторную систему человека.

Способ подготовки зависит от того, какой именно биоматериал необходимо сдать на исследование:

  • Если для анализа требуется образец слюны, то процедуру проводят натощак. За несколько часов до исследования нельзя принимать лекарственные препараты. Кроме того, нежелательно пить много жидкости, тем более горячей, чтобы не нарушить естественный состав микрофлоры ротовой полости.
  • Мочу для ПЦР необходимо собирать с утра. Для этого необходимо подготовить стерильный контейнер и тщательно подмыться. Материал не должен содержать посторонних примесей, поэтому мужчинам во время мочеиспускания необходимо оттянуть крайнюю плоть, а женщинам – закрыть влагалище ватным тампоном.
  • За три дня до сдачи спермы мужчине необходимо отказаться от сексуальных контактов. В период подготовки нежелательно посещать баню, принимать горячую ванну, употреблять алкоголь, острые блюда. Перед сбором биоматериала нельзя мочиться, поэтому за сутки до анализа желательно ограничить потребление жидкости.
  • Кровь, как уже было отмечено, сдавать нужно с утра, натощак. За 2-3 дня до анализа желательно отказаться от жирной пищи, алкоголя и сильнодействующих медикаментов.

При подозрении на то или иное заболевание, передающееся половым путем, врач может назначить женщине мазок на ПЦР. В лабораториях, которые относятся к бюджетным поликлиникам, такие анализы обычно не делают. Прежде чем выбирать место для исследования, необходимо убедиться, что там проводят необходимую диагностику.

Большинство из тех заболеваний, которые передаются половым путем, могут не проявлять себя в течение нескольких месяцев, поэтому отсутствие симптомов не является гарантией того, что девушка не заражена. Будучи носителем инфекции и не догадываясь о болезни, женщина может не только заразить партнера, но и упустить время для успешного лечения. Венерические заболевания могут приводить к бесплодию, воспалению органов малого таза и прочим осложнениям.

Мазок ПЦР на инфекцию назначается женщине в том случае, если имел место контакт с малознакомым партнером. Если венерический статус последнего неизвестен, значит, присутствует риск инфицирования. Сдача мазка на ПЦР целесообразна в случае, если:

  • женщина сомневается в «чистоте» своего нового партнера, так как во время полового акта не использовался презерватив;
  • в течение года у женщины было несколько половых партнеров;
  • у пациентки ранее было выявлено венерическое заболевание;
  • наступила беременность.

Обследование на половые инфекции является обязательным для будущих матерей, поскольку некоторые из них, даже если протекают скрыто и не дают о себе знать, могут нести серьезную опасность жизни и здоровью плода.

Соскоб у женщин берет врач-гинеколог. Сама процедура взятия соскоба на полимеразную цепную реакцию ничем не отличается от обычного гинекологического исследования на влагалищную флору. Процедура взятия мазка ПЦР на хламидии, трихомониаз, вирус папилломы человека, гонорею и другие половые инфекции происходит по стандартной схеме:

  1. Пациентка подготавливается к процедуре и занимает место на гинекологическом кресле.
  2. Для сбора материала гинеколог надевает одноразовые стерильные перчатки и производит осмотр наружных половых органов.
  3. Далее во влагалище женщины вводят специальный расширитель, который позволяет с помощью зеркала осмотреть внутренний эпителий.
  4. Для забора биоматериала используется специальная щетка, которая не обладает впитывающими свойствами и не способна повредить слизистые оболочки. С ее помощью берут соскоб с цервикального канала, стенок влагалища. Обыкновенная ватная палочка для этой цели не подходит.
  5. Использованный медицинский прибор, содержащий вагинальный секрет, вставляют в пробирку, закрывают и отправляют в лабораторию.

Процедура взятия соскоба обычно безболезненна, но иногда пациентки испытывают неприятные ощущения из-за контакта чувствительной слизистой с гинекологическими инструментами. Боль в процессе забора биоматериала может свидетельствовать о протекающем воспалительном процессе.

  • Вступать в интимную связь перед процедурой нельзя – после последнего контакта должно пройти не менее двух суток.
  • Если женщина проходит лечение антибиотиками или применяет вагинальные суппозитории, за три недели до взятия мазка ПЦР курс терапии необходимо завершить. В противном случае результат анализа может оказаться ложным.
  • Во время менструации мазок не берут.
  • Непосредственно перед забором биоматериала нельзя спринцеваться или использовать антибактериальное мыло.
  • Перед процедурой нельзя посещать туалет, последний раз помочиться можно за три часа до процедуры.
Читайте также:  Акции на анализы на инфекции

Как уже было сказано, мазок ПЦР у мужчин берут из мочеиспускательного канала. Чтобы получить необходимый биоматериал, врач-уролог использует специальный тонкий зонд и вводит его на глубину 3-4 см. Процесс взятия мазка ПЦР на уреаплазму, гонорею и другие распространенные возбудители может принести боль и значительный дискомфорт. Но придется потерпеть. Нередко у мужчин мазок на ПЦР вызывает жжение и зуд, поэтому перед введением зонда с целью уменьшить дискомфортные ощущения пациентам рекомендуют массажировать уретру. Поэтапно процедура взятия соскоба выглядит так:

  • Мужчина освобождает половые органы от одежды.
  • Прежде чем вводить зонд в уретру, врач надевает одноразовые перчатки и осуществляет визуальный осмотр кожных покровов, слизистых оболочек на предмет высыпаний.
  • Затем с помощью инструмента уролог берет мазок методом ПЦР из мочеиспускательного канала. Зонд вводится на 3-4 см в глубину уретры и несколько раз прокручивается.
  • После извлечения зонда врач делает мазок на предметном стекле, которое впоследствии и отправит в лабораторию.

Помимо болезненных ощущений, процедура взятия соскоба вызывает у мужчин психологический дискомфорт. У тех, кто посещает уролога регулярно, подобных проблем не возникает. Кроме того, имеет значение правильная подготовка к мазку ПЦР. Она заключается в соблюдении следующих условий:

  • За несколько дней до анализа мужчине нужно отказаться от интимных связей.
  • Мазок берут в утренние часы.
  • Перед процедурой мужчине не нужно проводить гигиену половых органов, лучше всего принять душ с вечера.
  • За три часа до взятия образца биоматериала нельзя посещать туалет.

Так же, как и у женщин, сильнодействующие препараты могут исказить результат анализа на полимеразную цепную реакцию.

В принципе для того, чтобы разобраться в результатах лабораторного исследования на полимеразную цепную реакцию, не нужно обладать медицинским образованием. Расшифровать заключение экспертов достаточно просто. В ответах, которые выдают пациенту на руки, содержится информация о типе инфекции. Если возбудитель обнаружен, в заключении будет отмечен положительный результат. Он свидетельствует о наличии в организме исследуемого человека ДНК или РНК вируса.

Для эффективного лечения некоторых заболеваний необходимо иметь точные данные о количественной нагрузке, которая означает присутствие РНК-копий возбудителя на 1 мл крови. В большей степени определение количественной нагрузки важно при болезнях, спровоцированных условно-патогенной микрофлорой, поскольку инфекционные агенты активизируются и негативно воздействуют на организм человека только в том случае, если их количество превышает установленные пороги. Такой анализ ПЦР имеет особое значение для составления плана лечения и наблюдением за динамикой пациентов, инфицированных вирусным гепатитом или ВИЧ-инфекцией.

Исследования на ПЦР отличаются максимальной точностью, специфичностью и чувствительностью. Мазок на полимеразную цепную реакцию позволяет узнать, есть ли в организме обследуемого конкретный тип инфекции, определить ее штамм и количество РНК-копий. Метод ПЦР позволяет выявлять возбудителя даже при минимальном содержании ДНК вируса в представленных образцах биоматериала.

Сроки выполнения анализа во многом зависят от того, какой из существующих методов полимеразной цепной реакции применяется в конкретной лаборатории. Самым простым способом изучения биологического материала считается микроскопический. Обычно этот метод исследования не занимает много времени. За срочность пациентам приходится платить дополнительно, но если по каким-либо причинам есть необходимость в проведении экстренного исследования, результаты могут выдать пациенту на руки спустя час. Быстрее всего ответы анализов получают те, кто обращается в специализированные медучреждения, оснащенные собственной лабораторией. Иначе необходимо учитывать время, которое будет потрачено на доставку биоматериала.

Конечная стоимость анализа будет зависеть от того, на какую инфекцию необходимо проверить пациента. В Москве на лабораторные исследования методом ПЦР установлены такие цены:

  • заболевания, передающиеся половым путем – анализ выполняется в среднем за 1-2 дня, стоимость составляет 300-500 руб. (за обнаружение одного возбудителя);
  • такие же сроки и цены установлены на диагностику методом ПЦР вируса Эпштейна-Барра, папилломы человека, герпеса, цитомегаловирусной инфекции;
  • обследование на гепатит A, B, C, D, G обойдется пациенту в 650-800 руб., за уточнение количественной нагрузки придется заплатить еще 2000 руб. (на выполнение исследования потребуется 4-5 дней);
  • подтверждение наличия в желудочном или кишечном биоптате бактерии Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori) – 400-600 руб.;
  • антитела и антигены ВИЧ— 400-500 руб.;
  • количество РНК ВИЧ в образцах крови – более 10 тыс. руб.

С целью экономии врачи рекомендуют выбирать пакеты анализов — такие исследования обходятся дешевле. Услуги со скидками предоставляются в большинстве сетевых клиник, где делают анализы по методу ПЦР («СМ-Клиника», «Инвитро», «ОН-Клиник») и многопрофильных медцентрах.

Если в мазке обнаружились патогенные возбудители, не нужно отчаиваться. Главное – это как можно скорее начать терапию. Сегодня существует немало препаратов, благодаря которым даже пациенты с неизлечимыми болезнями имеют все шансы на высокое качество и нормальную продолжительность жизни. Выбор тактики лечения должен осуществлять врач. Самолечение при инфекционных заболеваниях недопустимо.

источник

Результаты ПЦР и особенности их расшифровки интересуют многих людей, чьим диагнозом является подозрение на ЗППП.

Как отмечают доктора, метод обладает высокой результативностью и минимальным процентом ошибок. Поэтому зачастую используется как контрольный в диагностике инфекционных процессов.

В чем состоит суть ПЦР методики, хотят знать больные люди, и благодаря чему обеспечивается высокая вероятность получения верных результатов. Как расшифровываются полученные итоги, и есть ли связь между этим методом и другими способами диагностики?

  • Суть метода ПЦР
  • Какие материалы можно использовать для ПЦР
  • Что значит положительный результат ПЦР
  • Что значит отрицательный результат ПЦР
  • Кто из докторов выполняет расшифровку результатов ПЦР
  • Когда показатели ПЦР становятся положительными после заражения
  • Вид бланка анализов на ПЦР
  • Вероятность ошибочных итогов при ПЦР
  • Связь ПЦР с другими методиками

ПЦР-методика – исследование, используемое довольно широко в современном мире. Диагностика позволяет поставить диагноз не только при инфекционных процессах, но и при генетических патологиях, некоторых онкологических недугах. Изначально ПЦР изобреталась не для применения в медицине.

В отрасль здравоохранения метод пришел из области молекулярной биологии, в которой активно использовался после своего открытия. Ученый, создавший ПЦР, получил нобелевскую премию.

Прежде чем разбираться, как расшифровывать результаты анализов ПЦР, необходимо понять, в чем основная суть методики.

На самом деле на словах все выглядит довольно просто. У пациента берется биологический материал. Затем он обрабатывается особым образом с помощью специальных химических реагентов.

Затем получившуюся смесь помещают в особую машину, которая проводит процесс амплификации. То есть многократного умножения определенных фрагментов ДНК или РНК, что удалось выявить с помощью добавления реагентов.

Когда процесс амплификации подойдет к концу, доктору остается только идентифицировать полученные результаты, чтобы поставить верный диагноз.

Главное – проявить внимательность на этапе идентификации. Но учитывая, что сегодня большую часть работы делает компьютер, все сильно упрощается.

ПЦР отличается высокой эффективностью. Ее широко применяют для того, чтобы определять наличие в организме скрытых инфекционных процессов, которые не дают положительных серологических реакций. Также скрытые инфекции обычно нельзя выявить с помощью посева или микроскопии. Поэтому зачастую ПЦР – единственный достоверный способ постановки диагноза в этом случае.

Часто удачность исследования зависит от того, как и какой материал брался для выполнения анализа. Однако в случае с полимеразной цепной реакцией расшифровка результатов ПЦР исследований мало зависит от биологического материала, который брался у пациента. Гораздо большее значение имеет подготовка к обследованию с помощью метода.

В качестве материала могут служить:

  • кровь, сдаваемая в соответствии со стандартными рекомендациями из вены на локтевом сгибе
  • мокрота, собираемая при откашливании
  • налет с ротовой полости, собираемый доктором в утреннее время, пока пациент еще не завтракал и не чистил зубы
  • мазок с половых органов, дающий хорошие результаты в том случае, если больной не мочился в течение нескольких часов, отказывался от сексуальных контактов несколько дней и соблюдал ряд других рекомендаций
  • исследование мочи, при котором биоматериал также предпочтительно собирать с утра, не проводя накануне гигиену половых органов
  • биоптаты органов или тканей, получаемые с помощью специальных инструментов и др.

Как отмечают врачи, материалом для ПЦР может быть совершенно любая жидкая среда организма человека.

При выборе главное помнить о том, что предпочтение отдают той среде, где с большей долей вероятности будет присутствовать возбудитель. Например, при половых инфекциях целесообразнее брать мазок с половых органов или кровь, чем мазок из ротовой полости.

Решать вопрос о том, какие материалы используются для получения результатов ПЦР в том или ином случае, лучше всего с лечащим врачом на приеме. Доктор сделает оптимальный выбор, исходя из предполагаемого у пациента заболевания.

ПЦР – метод, который может похвастаться своей высокой специфичностью.

Предположим, доктор поставил себе цель обнаружить какой-то патогенный микроорганизм в теле пациента. И если тот на самом деле присутствует в теле, он будет обнаружен. При этом спутать его с каким-либо другим патогеном благодаря уникальному коду ДНК будет невозможно.

Если ПЦР положительный, значит, в организме с вероятностью почти в 100% находится возбудитель, поиск которого проводился врачом. Ведь методика рассчитана, в отличие от многих других диагностических методов, именно на поиск самих возбудителей, а не их следов.

Как отмечают доктора, при данном исследовании вероятность случайно принять один возбудитель за другой сводится к нулю. Зато существует вероятность получения положительных результатов после терапии.

Если в организме будут оставаться обломки нуклеиновых кислот. Однозначно положительной реакция чаще всего бывает, если пациент предъявляет жалобы на какие-то конкретные симптомы инфекционного процесса. Причем результат будет сохраняться даже в течение нескольких месяцев после того, как возбудитель будет полностью побежден и удален из организма.

Если ПЦР результат отрицательный, значительное число пациентов автоматически считают, что они здоровы. Это практически правильное решение.

Ведь если итоги оказались отрицательными, значит фрагменты патогенного микроорганизма не были определены тест-системой. Из этого следует логичный вывод, что микроорганизма в теле нет.

Однако стоит учитывать, что несмотря на всю свою высокую чувствительность и специфичность, методика имеет определенный порог чувствительности. Если концентрация возбудителя на момент обследования не переходит границу этого порога, результат будет расцениваться, как отрицательные. Хотя на самом деле окажется ложным до поры до времени.

Доктора акцентируют особое внимание на том, что отрицательный результат не всегда означает отсутствие патологии. Чтобы на 100% быть уверенным в своем здоровье, пройти исследование повторно рекомендуется через несколько недель, а порой и месяцев.

Часто среди пациентов звучит вопрос о том, какой врач будет проводить расшифровку ПЦР исследования.

В первую очередь необходимо запомнить, что доверять результаты стоит тому же медицинскому работнику, что первоначально давал направление на исследование. Связана эта рекомендация с тем, что в этом случае доктор будет представлять себе, что он ожидает увидеть в анализах. Сможет грамотно интерпретировать итоги, соотнося их с клинической картиной.

Получить направление наиболее часто можно от уролога, гинеколога или венеролога. Соответственно, после получения итогов относить бланк с результатами стоит кому-то из них. Важно помнить, что ПЦР – довольно дорогой метод диагностики. Его не принято использовать просто так, без специальных показаний к обследованию.

  • появление специфических для ЗППП симптомов
  • обследование перед планированием беременности или процедурой искусственного оплодотворения
  • поиск причин бесплодия и другие показания

Часто пациенты задают на приеме у медицинского работника вопрос о том, когда результаты ПЦР крови и мазков становятся положительными после заражения. Все зависит от того, насколько быстро конкретная инфекция сможет, размножаясь, пройти пороговую для теста концентрацию в материале.

Преимуществом ПЦР является то, что порог чувствительности у теста довольно низкий. Это значит, что выявить признаки заражения можно даже в том случае, если количество возбудителя в биологическом материале будет минимальным.

Подобная особенность дает возможность постановки диагноза даже в период инкубации, когда симптомы еще полностью отсутствуют.

Однако осечка возможна и при применении ПЦР методики. Это происходит, например, если пороговая концентрация все же не успела достичь определяемых тестом значений. В этом случае велика вероятность получения далеких от правды результатов.

Вопрос о том, как выглядит бланк результатов анализов ПЦР, весьма актуален.

Как отмечают доктора, ничего сложного во внешнем виде бумаги нет. Зачастую на документе можно обнаружить название искомого возбудителя. А напротив него пометку «обнаружен» или «не обнаружен».

В первом случае пациенту рекомендуется озаботиться собственным здоровьем. Так как анализ расценивается как положительный, а человек, как зараженный. Следовательно, ему требуется терапия.

Во втором случае чаще всего состояние пациента оценивают, как здоровое, хотя могут быть и исключения. Важно помнить, что количество возбудителей, указанных на бланке, зависит во многом от того, какое конкретно вид анализа применялся.

Если проводился поиск только одного патогенного микроорганизма, в результате будет фигурировать только его название с соответствующей пометкой. Если ПЦР проводилось сразу на несколько инфекций, что тоже возможно, в бланке будет список патологий с пометками.

Сегодня в лабораториях при комплексном анализе на группу инфекций не принято выдавать на каждый патогенный микроорганизм отдельный бланк. Их все указывают на одном листе.

Часто пациенты интересуются вопросом о том, возможно ли получение ложных результатов обследования при использовании методики. К сожалению, как отмечают врачи, ошибки хоть и редко, но случаются.

Существует, например, вероятность получить ложноположительные результаты ПЦР сразу после лечения. Объясняется это очень просто.

Терапия уже окончена, возбудитель удален из организма и не может заражать новые ткани. Однако остатки ДНК или РНК еще могут циркулировать в крови или ином диагностическом материале. В этом случае тест-система будет улавливать их и воспринимать за полноценную патологию, выдавая ложноположительный итог.

Читайте также:  Аденовирусная инфекция у собак анализы

Именно поэтому рекомендуется после терапии сдавать исследование несколько раз с разными промежутками времени. Только в этом случае итоги будут достаточно объективными.

Ложноотрицательные результаты анализов ПЦР после приема антибиотиков также возможны. Происходит это в том случае, если пациент, неверно используя препараты антибактериального ряда, смазал симптомы болезни.

Не позволил микроорганизму активно размножаться в теле, но при этом и не довел его уничтожение до конца. В этом случае количество возбудителей может упасть ниже пороговой концентрации чувствительности. Это и даст неверные результаты тестирования.

С помощью метода ПЦР доктора нередко подтверждают или, напротив, опровергают результаты других методов обследования, используемых для диагностики ИППП.

Например, с этой целью может использоваться ИФА.

Бывает так, что ПЦР отрицательный, а ИФА положительный. Тогда больной оказывается в замешательстве относительно своего состояния.

Доктора рекомендуют не теряться, а сначала провести оба теста повторно. Если ИФА останется положительным, а ПЦР отрицательным, с большой вероятностью заболевание в организме пациента отсутствует.

Ведь иммуноферментный анализ направлен на реакцию антиген-антитело. И порой может принимать сходные по структуре антигены других возбудителей за искомый, выдавая ложноположительные результаты.

Вероятность того, что ИФА дало верный результате на второй раз, а ПЦР, напротив, выдало ошибку, например, из-за низкого титра возбудителя, сведена к минимуму. Это скорее казуистика, чем реальная клиническая практика.

Результаты ПЦР диагностики обладают высокой ценностью в диагностике большого количества различных патологий. В первую очередь методика является незаменимой при подозрении на различные ЗППП.

Если вам нужно сдать получить комментарии по результатам ПЦР, обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

  • ВИЧ
  • Гарднереллез
  • Кондиломатоз
  • Молочница
  • Сифилис
  • Трихомониаз
  • Баланопостит
  • Герпес
  • Гонорея
  • Микоплазмоз
  • Уреаплазмоз
  • Уретрит
  • Хламидиоз
  • ЗППП

источник

  • Рядом с метро Кропоткинская
  • Работаем каждый день с 9:00 до 20:00
  • Стоимость консультации 900 рублей

Метод полимеразной цепной реакции является одним из эффективных способов лабораторной диагностики множества различных заболеваний.

Сокращенно метод называется ПЦР (по первым буквам), или PCR от английского «polymerase chain reaction».

Хранение и передача генетической информации в живых организмах осуществляется с помощью макромолекул ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислоты).

В некоторых случаях, например, у вируса иммунодефицита человека, такую функцию выполняет РНК (рибонуклеиновая кислота).

Каждый живой объект имеет свою уникальную последовательность структурных фрагментов макромолекул.

При этом набор «кирпичиков» ограничен всего четырьмя нуклеотидами.

В основе исследования лежит многократное копирование (создание так называемых «амплификаций») изучаемого фрагмента ДНК-цепи.

Даже небольшой кусочек ДНК может быть подвергнут разделению с последующим воспроизведением строго определенного участка с помощью ферментативного синтеза.

Количественное увеличение в исследуемом образце фрагмента ДНК с данной последовательностью позволяет провести визуальное сравнение с имеющимися образцами.

А затем и достоверно определить, какому организму он принадлежит.

Эксперименты по разработке ПЦР были проведены Кэри Мюллисом еще в 1983-1984 годах.

Спустя десятилетие американский ученый-биохимик получил Нобелевскую премию за свой труд.

По мере развития технологий расшифровки нуклеотидных последовательностей ДНК накапливались базы данных с соответствующими характеристиками различных биологических объектов.

И на сегодняшний день разработаны различные модификации метода, позволяющие обнаруживать следы микроорганизмов, мутации и многое другое.

В медицине ПЦР диагностика особенно эффективна в отношении выявления инфекционных заболеваний, в том числе и ИППП (инфекций с преимущественной передачей половым путем).

Многие лаборатории предлагают комплексное обследование на самые распространенные половые инфекции.

Например, подобный профиль есть у Инвитро (ПЦР 12 инфекций + мазок на флору).

При этом, в зависимости от исследователя, набор анализов может отличаться.

Если врач назначает обследование на половые инфекции, следует заранее поинтересоваться, в профиль «ПЦР 12» какие инфекции входят в данной лаборатории.

В большинстве случаев перечень диагностируемых патогенных микроорганизмов включает выявление:

  • хламидий;
  • микоплазм;
  • уреаплазм;
  • кандид;
  • гонококков;
  • гарднерелл;
  • трихомонад;
  • вирусов герпеса (I и II типы);
  • цитомегаловируса;
  • вируса Эпштейна-Барр;
  • вирусов папилломы человека (ВПЧ) разных типов и групповой принадлежности;
  • ВИЧ;
  • вирусов гепатитов В и С.

Не все из перечисленного может включаться в профиль.

Где-то за отдельные исследования считают обнаружение вирусов разных типов (простого герпеса I-го и II-го типа, ВПЧ 16-го и 18-го типа) и не проводится анализ на ВИЧ, гепатит.

Где-то не включается исследование на ВЭБ и пр.

Распространенность половых инфекций очень высока.

Особенно их малосимптомных или бессимптомных форм (т. н. скрытых инфекций), оказывающих весьма негативное воздействие на здоровье человека.

Это объясняет высокую потребность в своевременной и адекватной диагностике.

Сдать анализ «ПЦР 12 инфекций» рекомендуется при наличии таких симптоматических проявлений, как:

  • любого вида выделения из половых органов;
  • зуд, боли, высыпания в окологенитальной зоне;
  • боли в надлобковой области, промежности;
  • проблемы с мочеиспусканием;
  • продолжительная субфебрильная температура, хроническая слабость, утомляемость;
  • пожелтение кожи, склер и др.

Профилактическое обследование на ИППП-12 ПЦР методом рекомендуется:

  • после незащищенного полового контакта со случайным партнером;
  • при наличии нескольких половых партнеров;
  • перед плановыми хирургическими вмешательствами;
  • в период планирования беременности;
  • при оформлении на работу;
  • при наличии хронических патологий;
  • неэффективности проводимой терапии.

Дать направление на обследование может как врач общего профиля, так и терапевт, гинеколог, уролог, венеролог и др.

После сомнительного контакта и при отсутствии проявлений оптимально проводить исследование спустя 2 недели.

Для такого исследования, как «ПЦР 12», цена зависит от лаборатории, включенных в профиль анализов.

Стоимость «ПЦР 12» (Москва) варьируется в пределах примерно 2500 – 4500 рублей.

Результат может быть готов уже в течение суток (обычно до 2-х рабочих дней).

Как показывают многочисленные исследования, ПЦР-диагностика:

  • является самым достоверным и высокоточным исследованием на возбудители генитального герпеса (герпес-вирусы 1-го и 2-го типов);
  • позволяет не только установить заражение папилломавирусами, но и идентифицировать их отдельные типы (например, вирусы 11 и 6 типов являются представителями группы низкого онкогенного риска и вызывают образование аногенитальных кондилом; вирусы 16 и 18 типов относятся к группе высокого онкогенного риска и могут провоцировать развитие рака шейки матки);
  • помогает определять эффективную терапевтическую тактику при бактериальном вагинозе, определяя микрофлорный состав влагалищной среды и выявляя основные маркеры патологического процесса (мобилункуса, гарднереллу и др.);
  • эффективна для выявления в любых биологических тканях цитомегаловируса;
  • практически незаменима при диагностике упорных кандидозов, вызванных Candida nonalbicans (такие грибки весьма устойчивы к стандартным противогрибковым препаратам, эффективным в отношении «обычных» Candida albicans).

На территории РФ и стран СНГ ПЦР применяется в диагностике гонококковой инфекции, а также в качестве анализа на хламидии у беременных при постановке на учет и перед родами.

  • можно изучать любой биологический материал (клетки эпителия, кровь, мочу, слюну, сперму, выделения и пр.);
  • выявляются следы/части собственно инфекционного агента, а не продукты его распада или ответные реакции организма;
  • выявление ДНК-фрагмента, соответствующего только данному конкретному возбудителю;
  • удается обнаруживать всего несколько клеток (желательно порядка 10 – 100 в образце);
  • на все исследование уходит не более 5 часов;
  • можно диагностировать как острые, так и хронические, и бессимптомные формы заболеваний и др.
  • не самый дешевый метод;
  • не позволяет установить живой или неживой возбудитель обнаружен;
  • обнаруженный микроорганизм не является гарантированно причиной имеющихся проблем (благодаря высокой чувствительности обнаруживаются даже минимальные, клинически незначимые количества);
  • возможны ложноположительные/ложноотрицательные результаты;
  • предъявляет высокие требования к точности соблюдения техники проведения и к квалификации персонала.

Провести ПЦР-исследование можно практически для любого биоматериала.

Для получения образца берутся соскобы из мочеиспускательного канала, влагалища, маточной шейки.

При этом правильная методика взятия биоматериала имеет очень важное значение.

Поскольку ПЦР очень точный метод, то попадание в исследуемую пробу посторонних примесей может исказить итоговые данные (ложноположительный результат).

Аналогично, если нарушена техника забора и материал взят не с подходящего участка, в пробу возбудитель не попадет и результат окажется ложноотрицательным.

Например, у женщин возбудители гонококковой инфекции обычно размещаются в канале шейки матки, а во влагалище могут отсутствовать.

У мужчин инфекционные агенты могут существовать в предстательной железе, придатках яичек при полном отсутствии в мочеиспускательном канале.

Стоит отметить, что применяемые ранее техники провокации (предполагаемого увеличения количества возбудителей при действии различных факторов) сейчас не используются ввиду неэффективности.

Для забора материала из органов урогенитального тракта применяются вагинальные тампоны и специальные зонды.

Подготовка к исследованию методом ПЦР на 12 инфекций зависит от исследуемого материала.

Рекомендуется проводить забор перед менструацией или спустя пару суток по ее завершении.

Следует воздержаться от мочеиспускания и половых контактов в течение примерно 3-х – 4-х часов.

Непосредственно в день процедуры не нужно проводить гигиенический уход за половыми органами и спринцевания.

Примерно за неделю, после согласования с врачом, прекращают лечебные процедуры и прием препаратов.

Все манипуляции проводятся в процессе гинекологического осмотра.

Забор осуществляется обычно из уретры, прямой кишки, канала маточной шейки и заднего влагалищного свода.

Важно, чтобы в образце отсутствовали примеси крови.

При подготовке к анализу рекомендуется воздержаться от приема лекарственных препаратов и проведения лечебных процедур за 5-7 дней до исследования, а от мочеиспускания – за 3-4 часа.

Материал берут из передней части уретры, как правило, с глубины 1 – 3 см от наружного отверстия.

При необходимости предварительно проводят массаж простаты.

В целом процедура безболезненна, слегка дискомфортна.

Однако из-за механического травмирования слизистой могут кратковременно наблюдаться симптомы уретрита (небольшая болезненность мочеиспускания, раздражение и др.).

В общем случае при заборе биоматериала из уретры:

  • наружное отверстие предварительно обрабатывают тампоном, смоченным стерильным физраствором;
  • если есть выделения гнойного характера, соскоб берут или сразу или спустя примерно 20 минут после мочеиспускания;
  • если выделения отсутствуют, предварительно зондом проводят массаж уретры;
  • забор обычно осуществляется вращательными движениями после введения зонда на глубину 1 – 1,5 см у женщин, 3 – 4 см у мужчин;
  • у детей проводится только с наружного отверстия;

Из вульвы и влагалищного преддверия:

  • забор проводят стерильным ватным тампоном;
  • в случае воспаления бартолиновых желез проводится их пункция;

Из влагалища:

  • забор осуществляют из заднего свода или измененных областей;

Из канала шейки матки:

  • предварительно удаляют слизь ватным тампоном и обрабатывают стерильным физраствором шейку матки;
  • зонд вводя на глубину от 5 до 15 мм;
  • при эрозивных поражения материал берут с граничной области измененная/здоровая ткань;
  • зонд извлекается строго без касания влагалищных стенок;
  • забор проводят специальным шприцеподобным инструментом;

Из маточных придатков:

  • образцы (тканей, экссудата, гноя) берут в ходе операции либо чрезвлагалищной пункцией.

Моча на инфекции исследуется до начала приема антибиотиков после тщательной гигиенической обработки половых органов.

Собирается примерно 5 мл средней порции.

У мужчин при диагностике простатита отдельно исследуются три порции мочи (первая и средняя, а также последняя, собираемая после массажа простаты) и секрет предстательной железы.

Секрет простаты объемом около 1 мл собирают после массажа в сухую пробирку.

Если не удается получить простатический сок, анализируют первую порцию мочи (10мл), полученную после массажа простаты.

Для исследования на сифилис методом ПЦР материал берется из лимфоузлов и зон поражения.

Поскольку для большинства ИППП гематогенный путь распространения в организме не является основным, кровь для ПЦР-диагностики используется не для всех инфекций.

Возможно выявление методом ПЦР крови ВИЧ, вирусов гепатитов.

В случае длительного сохранения после полноценной терапии положительных серореакций (результатов исследований на антитела/антигены в крови) на сифилис может проводиться ПЦР выявление в крови участков ДНК трепонем.

В ситуации, когда исследуется кровь, особой подготовки не требуется.

Как правило, анализ делают натощак.

Если количество анализируемых объектов оказывается ниже предела чувствительности стандартных тест-систем (что случается при осуществлении ПЦР крови), предварительно образец может быть сконцентрирован.

Во всех случаях исследование проводится только после прекращения использования препаратов местного действия и после полного выведения действующих веществ из организма.

С целью контроля эффективности терапии анализ делают спустя 2 недели после окончания лечения (если нет симптомов).

Метод обладает высокой чувствительностью и может выявлять остатки ДНК даже нежизнеспособных патогенных микроорганизмов.

Поэтому контрольное исследование рекомендуют повторить через месяц от даты последнего приема лекарства.

В большинстве лабораторий проводится качественный анализ.

Результат в таком случае выдается в форме «обнаружено»/«не обнаружено» и показывает имеется ли в образце фрагмент ДНК, специфичный для данного патогенного микроорганизма.

Если при проведении исследования методом ПЦР на 12 инфекций один или несколько показателей оказываются положительными?

Следует обратиться к врачу (гинекологу, венерологу, инфекционисту и пр.) для определения дальнейшей диагностико-лечебной тактики.

Количественный вариант ПЦР-диагностики (ПЦР «в реальном времени») используется реже и обычно не входит в профиль «ПЦР 12 инфекций».

Подобное исследование бывает необходимо для отслеживания динамики изменений в процессе проводимой терапии и для установления вирусной нагрузки.

Метод находит применение в отношении РНК вируса гепатита С, ДНК вируса гепатита В.

При обнаружении соответствующих нуклеотидных последовательностей на бланке с результатами могут указываться цифровые значения в МЕ/мл (до 10 2 , 10 2 — 10 8 , от 10 8 ).

Такие данные важны при определении варианта дальнейшего ведения больного.

Так, противовирусное лечение гепатита В проводят, если число копий в 1 мл превышает 2000 МЕ/мл.

Параметр «контроль взятия материала», иначе КВМ, определяет достоверность полученных результатов.

Оценку такого параметра проводят до начала основного исследования.

При этом подсчитывают количество содержащихся в образце молекул и устанавливают возможно ли в принципе исследование.

Минимальное значение КВМ – 4 ед.

Если показатель ниже, то результаты признаются недостоверными и необходимо повторное взятие образцов.

Для сдачи анализа ПЦР на 12 инфекций обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

источник