Меню Рубрики

Метод рпга при анализе на сифилис

Поскольку антитела, принадлежащие к классу иммуноглобулинов G, сохраняются в сыворотке крови, как правило, пожизненно, то даже после активного и успешного лечения сифилиса с последующим выздоровлением эти антитела остаются положительными. Только в том случае, когда сифилис заподозрили и пролечили в «самом зародыше», через несколько дней после заражения, на стадии формирования твердого шанкра и регионарного лимфаденита, то тогда РПГА может быть отрицательной.

Тот факт, что и при вторичном сифилисе, и при третичном РПГА будет одинаково положительной, то это значит, что такое исследование нельзя использовать для дифференциальной диагностики стадий заболевания. С помощью РПГА также невозможно оценить эффективность лечения, поскольку при этом антитела всё равно будут циркулировать в крови. Эффективность терапии необходимо оценивать с помощью других лабораторных анализов. Особенно высокие показатели, то и значительное разведение сыворотки крови пациента при проведении РПГА возникают при вторичном сифилисе, а также при ранней и скрытой форме этой болезни.

венеролог
13 февраля 2019 г. / Сергей

Здравствуйте.
Доктор, 3 месяца сдавать на сифилис после момента полового акта или с момента возникновения язвы на члене? открыть (еще 2 сообщения)Последние 5:

15 февраля 2019 г. / Сергей

Сергей Куликов,
Сходил сегодня в квд.
Сдал названия РПР и РПГА, к обеду сделали, оба отрицательные.
А как вы написали содержимое язвы проверить так даже не предложили!

венеролог
27 декабря 2018 г. / Лана / Уфа

… перед операцией в КВД и каждый раз одно и то же. Ифа суммарно 0,278/0,277, ифаLgm отрицательно,ИФАLgg отрицательно, РПГА отрицательно, МР отрицательно. Дают справку отрицательно. Я уже Незнаю что и думать почему у ифа суммарно показывает такую цифру.? Я … открыть

Доктор,
В том то и дело когда сдаю ифа суммарно она говорят положительно 0,277/0,278 , а развернутый имуноглобулины и рпга и мр все отрицательно. Это мне в КВД делают . Что может дать такую ифа суммарно? Это уже не первый раз года три так. Они говорят …

инфекционист
27 декабря 2018 г. / Лана

… . Я уже запуталась сдаю в КВД скрнинг перед операцией ифа суммарно 0,278/0,277, ифа Lgm отрицательно, Lgg отрицательно, РПГА отрицательно, МР отрицательно. И это уже третий год такие результаты,. Говорят если имуноглобулины отрицательно ,то ифа суммарно … открыть (еще 1 сообщение)Последние 5:

венеролог
25 декабря 2018 г. / Эллина / Москва

Здравствуйте! Подскажите, пожалуйста, может ли давать анализ IgM на сифилис давать ложноположительный результат из-за возможного заражения вич? То есть, если в данный… открыть (еще 4 сообщения)Последние 5:

26 декабря 2018 г. / Эллина

РПГА, IgG, RPR — отрицательно.
была в 3 клиниках и в КВД. везде говорят, что это ложноположительнвя реакция.
Возможно из-за хламидиоза или герпеса, если они в активной стадии.
скажите, пожалуйста, это действительно так?
просто я боюсь, что если это …

венеролог
13 декабря 2018 г. / Ирина / Москва

Ифа суммарные отрицательно, ифа igg,igm отрицательно; Рмп отрицательно; рпга положительный. Это сифилис? Никогда не болела, не лечилась, проявлений не было. открыть

венеролог
4 декабря 2018 г. / Пух

Здравствуйте, скажите пожалуйста ваше мнение,на сколько достоверны анонимные анализы в отличае от анализов по паспорту. Спасибо. открыть (еще 5 сообщений)Последние 5:

венеролог
22 ноября 2018 г. / Ирина / Москва

Анализ на сифилис:
Ифа качественно и количественно не обнаружено
Рмп с кардиолипиновым антигеном отрицательно
Рпга обнаружено

У меня сифилис? Я два года в протоколах ЭКО, сдаю этот анализ каждый месяц, всегда был отрицательный открыть

22 ноября 2018 г. / Сергей Куликов

Нжуно дойти до врача, пройти осмотр, повторить (перепроверить) исследования (РПГА, ИФА сумм., РИФабс.) и тогда уже решать.

венеролог
16 ноября 2018 г. / Аноним / Санкт-Петербург

… !В 2010 г выявлен нейросифилис поздний(диагноз поставлен после проведения пункции).Проведено 2 курса лечения пенициллином внутривенно.М/р 4+1/4, РПГА 4+,РИФ 4+.Доп лечение в 2011г +пункция повторно-без изменений. Доп.лечение в 2013г-все анализы без … открыть

РПГА тест обычно назначают на профилактических осмотрах и перед госпитализацией. Также это один обязательных тестов для тех, кто хочет стать донором. В первую очередь, эта проверка необходима при планировании беременности, и в случае выявления клинических признаков сифилиса. К последним относятся:

  • симметричные высыпания по всему телу;
  • увеличение лимфоузлов;
  • безболезненные язвочки в области половых органов;
  • обильное выпадение волос.

Проверка крови методом РПГА показана людям, которые контактировали с инфицированными сифилисом и тем, кому требуется подтверждение результатов, полученных при другом исследовании.

Назначение на исследование может дать терапевт, дермато-венеролог или другой узкий специалист. Если у вас есть желание пройти это обследование, то вы можете обратиться в любую поликлинику.

Анализ крови методом РПГА, также могут назначить для поверки на:

Обязательно нужен при оформлении некоторых документов, например, санитарной книжки, и для подготовки к хирургическому вмешательству.

Реакция Вассермана- РВ, RW, в среднем, становится положительной на 4-6 неделе заболевания. С увеличением поступления возбудителя сифилиса в кровь растет и титр RW. Своего максимума он достигает во вторичном рецидивном периоде сифилиса. При поздних формах заболевания реакция Вассермана нередко становится отрицательной.

Результат реакции Вассермана определяется наличием или отсутствием гемолиза. RW резко положительная — ++++, полная задержка гемолиза, RW положительная -+++, значительная задержка гемолиза, слабоположительная rw -++, +- сомнительная RW- частичная и соответственно незначительная задержка гемолиза. Отрицательная RW — полный гемолиз.

Недостатком RW является ее неспецифичность, т.е. реакция Вассермана становится положительной при отсутствиии сифилиса. Такой анализ называется ложноположительный.

Реакция Вассермана может быть ложноположительной при различных заболеваниях и состояниях — болезни соединительной ткани ( системная красная волчанка, системная склеродермия, дерматомиозит), ревматоидный артрит, туберкулез, онкология, болезни крови, заболевания сердечно-сосудистой системы — инфаркт миокарда, сахарный диабет, заболевания почек, беременность , употребление лекарственных препаратов и т.д.

Из-за неспецифичности реакции Вассермана, ее ложных результатов также используются другие реакции.

Реакция микропреципитации (РМП) и ее аналоги: RPR тест — Rapid Plasma Reagins и тест VDRL (Venereal Diseases Research Laboratory) — это нетрепонемные тесты, которые широко применяются в качестве отборочных реакций на сифилис.

Реакцию микропреципитации целесообразно сдавать через 20-30 дней после опасного контакта.

Суть реакции РМП — несколько капель сыворотки крови обследуемого смешивается с кардиолипиновым антигеном, в ходе реакции выпадает осадок — преципитат. Реакция оценивается качественно — по количеству +, от 4+(резко положительный) результат, до1+(сомнительный результат). В случае положительного результата проводят количественную оценку — титрование — максимальное разведение, при котором образуется осадок-преципитат. Результат является положительным начиная с титра 1:2-1:4. В подавляющем большинстве случаев положительный результат микрореакции означает заболевание сифилисом. Однако, микрореакция бывает ложноположительной при системных заболеваниях — системная красная волчанка, ревматоидный артрит, гломерулонефрит, сахарный диабет; при онкологических процессах, заболеваниях сердца — острый инфаркт миокарда, эндокардит, миокардит; при беременности и т.д.

Отрицательный результат микрореакции свидетельствует об отсутствии сифилиса, о раннем серонегативном периоде заболевания, до появления антител в крови. Также микрореакция становится отрицательной или сомнительной при поздних формах сифилиса.

Акция. Анализ крови на сифилис, ВИЧ, СПИД, гепатиты — 2500 руб.!
Телефон: 8 985 9230340

РМП является одним из критериев достоверности проведенного лечения сифилиса. В отличие от других серологических реакций — РИФ, РИБТ, ИФА, РПГА, после успешного лечения сифилиса РМП становится отрицательной более чем в 90% случаев.


Нетрепонемные тесты (реакция микропреципитации (РМП) и реакция Вассермана (RW)) относятся к неотъемлемым методам диагностики сифилиса. Отрицательный результат этих реакций в подавляющем большинстве случаев означает, что обследуемый здоров. В противном случае, при получении положительных результатов анализов назначаются трепонемные тесты.

Так как мы уже выяснили, что ни одна методика, в том числе РПГА, не дает стопроцентной уверенности в результате, не вызывает удивления, что медики назначают обширные обследования. В таких комплексных исследованиях удачно комбинируются как специфические и так неспецифические методы тестирования, что позволяет, практически полностью, исключить вероятность ошибочной диагностики.

Итак, в комплексе с РПГА или вместо неё используют такие неспецифические тесты, как реакцию Вассермана и микрореакцию преципитации. И первый, и второй метод, требуют использования крови из пальца и не используется на начальных этапах течения болезни.

Из специфических тестов, которыми можно заменить РПГА, стоит отметить:

  • ИФА или иммуноферментный анализ. Это один из наиболее точных методов диагностики, который обычно назначают, после прохождения неспецифических исследований.
  • РИФ или МФА. Метод флуоресцирующих антител. Подходит для диагностики на ранних стадиях.
  • TPI — Treponema pallidum immobilization test. Точный метод, но используется, только после четвертого месяца болезни.
  • ИБ. Иммуноблоттинг или вестернблоттинг. Новый метод. Очень точный и очень дорогой.
  • Лабораторный анализ. Быстрый и недорогой.

Суммируя все написанное, можно сделать вывод, что проверка крови на РПГА, это современный и достаточно точный метод для проверки здоровья. Благодаря тому, что РПГА относительно несложный и недорогой анализ, он используется повсеместно.

Этот способ исследования (реакция пассивной гемагглютинации, РПГА) имеет и второе название: реакция непрямой гемагглютинации (РНГА). И в практике может встретиться как аббревиатура РПГА, так и РНГА. Что это за анализ? Для него необходима центрифугированная сыворотка крови пациента, которую совмещают с особым диагностическим реагентом. Классически он называется «эритроцитарный антигенный диагностикум». Для его приготовления долгие годы использовались клетки красной крови, или эритроциты. Но так было сравнительно давно, а в настоящее время биологический материал уже не используют, и вместо этого применяют микроскопические частицы латекса.

На эти частицы с помощью особой технологии наносят характерные для данного инфекционного возбудителя антигены, которые являются его «визитной карточкой». В результате получается множество частиц, на поверхности которых находятся адсорбированные, и крепко связанные с носителем активные молекулы антигена.

В том случае, если в сыворотке крови пациента находятся выработанные к данному возбудителю антитела, то эти частицы латекса или эритроциты, склеиваются антителами между собой, и выпадают в осадок, который называется агглютинацией (переводе означает «склеивание»). Эту реакцию ставят в специальных планшетах, которые выполнены из пластика и рассчитаны на небольшие объемы. А раньше анализ крови на РПГА проводилась с набором обычных пробирок. В них в разных разведениях находилась кровь пациента, к которой и добавляли диагностикум.

В некоторых случаях применяется зеркальный метод, когда диагностикум содержит не антигены, а антитела. Этот метод (РОНГА, или обратная гемагглютинация) применяется при поиске инфекции, при которых в крови циркулируют токсины, например при ботулизме. В таком случае, если у пациента в крови есть ботулотоксин, то он связывается со специфическими антитоксическими антителами диагностикумов, и также наблюдается реакция агглютинации, которую можно определить в зависимости от разведения сыворотки крови.

Расшифровка складывается из самого факта агглютинации, и того максимального разведения сыворотки крови, при которой она еще уверенно определяется. Чем больше разведена кровь, при которой еще есть агглютинация, тем больше в организме пациента находится антител, и тем выше специфическая напряженность иммунитета при классическом проведении этой реакции. Наиболее часто используется разведения от 1:20 до 1:160 и выше. В настоящее время непрямую РНГА чаще всего используют для первичной диагностики сифилиса.

Сифилис – хроническое инфекционное ЗППП, вызываемое бледной трепонемой. Бледная трепонема – микроорганизм из порядка спирохет, которые представляют собой бактерии в виде спиралей.

Бледная трепонема в отличие от других спирохет имеет от 8 до 15 завитков, двигается плавно и медленно

Есть несколько путей заражения сифилисом:

  1. Прямой (половой), преобладающий.
  2. Косвенный (бытовой).
  3. Трансплацентарный (от женщины к плоду).

Бледная трепонема способна поражать практически все ткани организма

Сифилис принято разделять на несколько этапов:

  1. Инкубационный период.
  2. Первичный сифилис.
  3. Вторичный сифилис.
  4. Третичный сифилис.

Инкубационный период длится около двух недель, при этом нет никаких видимых признаков заражения. Бледная трепонема в этот момент активно осваивается в организме, размножается. Вследствие этого на коже/слизистой, в том месте, через которое попали микроорганизмы, формируется первичный очаг.

Первичный очаг представляет собой узелок, твердый и безболезненный, характерно его покраснение. Такое образование, иначе именуемое твердым шанкром, указывает на начало первичного сифилиса. По прошествии некоторого времени (до 2-3 недель) поражаются ближайшие лимфоузлы.

На фото в центре изъязвленного твердого шанкра красное дно: под ним множество мелких сосудов

Во время вторичного сифилиса на коже больного обнаруживаются множественные высыпания. Они могут быть разных форма и размеров, называются сифилидами. В каждом таком сифилиде содержится огромное количество трепонем, потому период считается самым заразным.

В настоящее время редко встречается последняя стадия, так как она развивается лишь через годы от момента заражения. Кроме того, заболевание вполне успешно поддается лечению, если проходить терапию на первых этапах.

Во время третичного сифилиса поражаются внутренние органы и системы, это может приводить к летальному исходу. Для этого периода характерны гуммы – особые отграниченные зоны воспаления, которые имеют хронический характер. Эта стадия практически не несет опасности для окружающих.

В центре гуммы располагаются трепонемы и зона мертвых клеток (некроза), иммунная система не справляется с их уничтожением. Иммунные клетки вокруг центра видоизменяются, укрупняются

Проанализировав все вышесказанное, можно выделить несколько критериев, которые влияют на выраженность и локализацию поражения:

  • путь проникновения трепонемы в организм;
  • стадия заболевания;
  • время начала лечения и сам подход к терапии.

Подготовки к анализу никакой не требуются, единственное исключение сделано для курящих. Последняя сигарета должна быть выкуренной не раньше, через 30 минут до сдачи крови, а лучше вообще отказаться от курения в этот день. Забирается венозная кровь из локтевой вены, и показано проведение этого исследования четырем группам пациентов:

  • лицам, у которых есть симптомы и признаки сифилиса (к ним относятся вероятный шанкр, увеличение регионарных паховых лимфоузлов, непонятная кожная сыпь на фоне подозрительного анамнеза, вялотекущий менингит, диффузное облысение, симптомы сифилитической лейкодермы во втором периоде, либо подозрение на образование гумм, признаки спинной сухотки, звездчатые рубцы, говорящие о запущенном третичном сифилисе;
  • лица, находящиеся в половом и бытовом контакте с больными;
  • доноры;
  • оформление санитарной книжки, профилактические медицинские осмотры, плановая госпитализация в лечебное учреждение.

Пятой категорией лиц являются те пациенты, у которых была выявлена положительная реакция на сифилис, полученная другими методами диагностики, чаще всего реакцией Вассермана.

Для проведения РПГА требуется направление от врача. Направить пациента на анализ могут в нескольких случаях:

  1. Если имеются видимые признаки болезни. Сюда относятся язвы на коже, увеличенные лимфоузлы, частичное облысение волосяного покрова и пр.
  2. Если у пациента был прямой контакт с больными сифилисом, для профилактики ему также необходимо пройти обследование.
  3. Все доноры, сдающие кровь, обязаны проверяться на сифилис перед процедурой.
  4. Для оформления санитарной книжки или ежегодных профосмотров на предприятиях также потребуется пройти необходимые обследования.
  5. Если скрининг дал положительный результат.
  6. На сифилис проверяют каждого, кого готовят к госпитализации в стационар.
  7. Обследование пациента перед любой операцией также требует прохождения обследования.

Врач может назначить РПГА не только при подозрении на сифилис или для планового осмотра, но и для диагностики следующих заболеваний:

  • Стоимость: .
  • Срок исполнения: 4 рабочих дней.
  • Где можно сдать: В медицинском центре «ДИАМЕД» взятие биоматериала не производится. Необходимо по предварительному звонку заказать в центре «ДИАМЕД» стерильную пробирку и ознакомиться с правилами забора биоматериала в справочно-информационной службе по тел. (8342) 322-889
  • Подготовка к анализу: Венозная кровь сдается утром натощак из вены.
Читайте также:  Риф и рпга анализ на сифилис

Реакция гемагглютинации. В основе реакции прямой гемагглютинации лежит способность эритроцитов склеиваться при адсорбции на них определенных антигенов. Поскольку это происходит без участия иммунной сыворотки, реакция не является серологической. В серологических исследованиях реакцию прямой гемагглютинации применяют для выбора рабочего разведения антигена, используемого в реакции торможения гемагглютинации. В основе последней лежит задержка гемагглютинирующего действия антигена специфической сывороткой.

Реакция непрямой гемагглютинации (пассивная гемагглютинация) наступает в том случае, когда к эритроцитам, сенсибилизированным антигеном, т.е. несущим на себе адсорбированный антиген, добавляют иммунную сыворотку, соответствующую антигену. Эта реакция часто превосходит по чувствительности и специфичности другие серологические методы, ее применяю при инфекциях, вызванных бактериями и риккетсиями. Реакцию непрямой гемагглютинации (РНГА или РПГА) с танизированными эритроцитами проводят в двух вариантах: с известным антигеном для обнаружения антител (по Бойдену) и с известными антителами (сывороткой) для выявления антигена (по Рыцаю). Антигенами в реакции непрямой гемагглютинации могут служить очищенные антигены соответствующих микробов, экстракты бактериальных взвесей, надосадочные жидкости формалиновых, спиртовых, гретых бактериальных вакцин.

Бактериальные инфекции, сальмонеллез, сыпной тиф, паратифы А и В, дифтерия, менингококковая инфекция и др.;

Идентификация выделенных микробов.

Материал для исследования: венозная кровь.

Указывается наличие или отсутствие патогенных микроорганизмов и их видовая принадлежность. При получении их роста определяется чувствительность к антибиотикам.

Результат: в норме не обнаружено.

Интерпретация результата: В норме результат отрицательный.

Отсутствие роста в посеве может косвенно свидетельствовать в пользу кишечной инфекции, вызванной патогенными микробами (особенно на фоне начатого лечения). В острый период заболевания резко нарушается видовой состав микрофлоры кишечника, и нормальные представители вытесняются патогенными. При низком титре последних может наблюдаться отсутствие роста какой-либо флоры. В этом случае рекомендуется повторное исследование.

источник

Исследование крови на сифилис РПГА методом проводится пациентам для подтверждения инфицирования бледными трепонемами и определения стадии болезни. Прямая реакция пассивной гемагглютинации является одним из самых достоверных методик и относится к специфическим тестам. Чувствительность РПГА достигает 98-100% при соблюдении определенных условий. При выдаче направления на анализ врач должен уведомить пациента о необходимости соблюдения правил. Невыполнение рекомендаций может привести к получению ложных результатов.

РПГА-тест связан с феноменом агглютинации эритроцитов, поверхность которых адсорбирует антиген бледной трепонемы в момент добавления к нему крови сифилитического больного. Организм начинает синтезировать антитела класса М спустя 14 суток после внедрения спирохеты. Иммуноглобулины класса G возникают в крови инфицированного через месяц. В некоторых случаях время образования антител удлиняется до 45 дней, поэтому РПГА-метод при первоначальной форме венерического заболевания менее чувствителен по сравнению с исследованием, осуществляемом на втором и третьем этапах сифилиса.

Тест, в котором применяется гемагглютинация, характеризуется высокой специфичностью (до 98%), что позволяет применять пассивный метод для подтверждения диагноза после использования неспецифического анализа. Степень чувствительности РПГА во вторичной, третичной фазе, а также при скрытой форме сифилиса достигает 100%. Достоверность этого и других трепонемных методик гораздо выше по сравнению с тестом, основанном на микрореакции преципиации, поэтому в настоящее время в лабораториях чаще применяются специфические способы при скрининговых исследованиях.

Часто результаты РПГА-метода остаются положительными даже после завершения терапии инфекционного заболевания. Лишь при проведении лечения на первоначальной стадии анализ становится отрицательным. Тест-система не позволяет дифференцировать раннюю и позднюю форму сифилиса, поскольку положительный результат сохраняется на всю жизнь. Также с помощью РПГА невозможно оценивать степень эффективности терапии.

Исследование с использованием реакции пассивной гемагглютинации рекомендуется пройти не только при наличии признаков инфицирования бледными трепонемами, но и при подготовке к беременности.

Выявление сифилиса на ранней стадии позволяет избежать развития врожденных дефектов у плода и раннего родовспоможения. Анализ может назначаться во время подготовки пациента к плановой операции, а также при желании стать донорами крови.

В условиях лаборатории к реагентам РПГА специалисты добавляют сыворотку инфицированного человека, что приводит к агглютинации эритроцитов и выпадению их в осадок. Степень склеивания связана с концентрацией белковых образований в крови, поэтому серодиагностика, проводимая этим методом, выявляет не только наличие антител, но и определяет их число.

Результаты исследования представляются в виде титров. При получении положительного анализа можно говорить о наличии в организме пациента бледной трепонемы. В некоторых случаях возможно получение ложноположительной реакции. Значительное завышение показателей означает, что у больного вторичный или скрытый сифилис.

  1. Последний прием пищи должен быть не позже 20 часов вечера. Накануне сдачи крови желательно употреблять продукты с минимальным количеством жиров. Тяжелая пища может способствовать получению ложноположительного или ложноотрицательного результатов. В этом случае пациенту придется пересдавать кровь на повторное исследование.
  2. Забор крови проводится утром, поскольку многим пациентам сложно обойтись без пищи длительное время.
  3. Перед посещением лаборатории запрещается курить, пить кофе и чаи. Вещество, содержащееся в табачном дыме и попавшее в кровь, может привести к получению ложноположительного или отрицательного результатов.
  4. Врачи не рекомендуют непосредственно перед сдачей анализов физически перегружать организм. Запрещено заниматься силовыми тренировками, избегать стрессовых ситуаций.
  5. За несколько дней до процедуры забора крови необходимо полностью отказаться от алкогольных напитков. Спирт может привести к искажению результатов и получению неверных значений.
  6. Перед сдачей анализов допускается выпить небольшое количество чистой питьевой воды без содержания газов.

Анализ на сифилис РПГА может проводиться с применением венозной, капиллярной крови, а также спинномозговой жидкости (ликвора), забираемой при подозрении на поражение бледными трепонемами нервной системы (нейросифилис).

Во многих лабораториях для проведения теста используют венозную кровь.

Она набирается в чистые сухие пробирки или вакутайнеры без использования веществ-антикоагулянтов. Биоматериал помещается в термостат на час (T=37 ), после чего переносится на 60-90 минут в холодное место. Центрифугирование получившегося сгустка совершается в течение ¼ часа при 1000 оборотах в минуту.

После расслаивания образца жидкая часть быстро забирается на исследование, поскольку может наступить распад антител. При необходимости плазма может храниться 5 дней в холодном месте (2-8 С). Сильная заморозка допускается только однократно. Хранение такого материала возможно не более 1,5 месяцев. Исследование ликвора проводится в краткие сроки. Перед анализом спинномозговая жидкость не подготавливается.

В стандартных тест-системах (Эколаб) применяются следующие наборы:

  • пробирка с эритроцитами с содержащимися на поверхностной части антигенами патогенного возбудителя;
  • флакон, в котором находятся чистые кровяные тельца;
  • емкость с буферным раствором для разведения крови больного;
  • сыворотка инфицированного человека, применяемая для контроля;
  • сыворотка здорового пациента для сравнительного анализа;
  • пластмассовый планшет, имеющий нумерованные лунки для перемешивания образцов и определения результата.

Набор для проведения исследования содержит определенное число реактивов.

Сифилитический РПГА-метод предоставляет два вида показателей:

  1. Качественный. Отвечает за наличие в сыворотке белковых телец, появление которых вызвано внедрением в организм патогенного возбудителя.
  2. Количественный. Помогает оценивать степень интенсивности продукции антител и определять характер активности бледной трепонемы.

В первую очередь лаборанты выявляют качественный результат. При обнаружении иммуноглобулинов устанавливается их число.

  • 4+ – результаты положительные;
  • 3+ – положительные;
  • 2+ – слабоположительные;
  • 1+ – результат сомнителен;
  • – – инфицирования нет.

При получении сомнительного результата рекомендуется провести повторное исследование через 14 дней после первого анализа.

Для первичной формы сифилиса характерны сниженные показатели (менее 1:320). При вторичном венерическом заболевании выявляются повышенные значения титров (более 1:320). При скрытом течении инфекции показатели также занижены.

Отрицательный РПГА-тест означает, что пациент не инфицирован бледными трепонемами либо заболевание находится в инкубационном периоде, который составляет 7-14 дней. В некоторых случаях такой результат получается из-за ошибки лаборанта при взятии биологического материала для проведения исследования.

Причиной получения ложноположительного результата становятся:

  1. Беременность.
  2. Аутоиммунные процессы.
  3. Гепатиты.
  4. Бактериальные эндокардиты.
  5. Состояния после вакцинаций.

Исследования с применением РПГА-метода не позволяют проводить дифференциацию сифилиса и других трепонематозов, ранней и поздней формы венерического заболевания. Результаты необходимо оценивать в совокупности с другими показателями, полученными с использованием лабораторных, инструментальных методов.

Стоимость исследования крови с применением реакции пассивной гемагглютинации составляет в среднем 5,6$. При этом в частных лабораторных центрах за взятия венозной крови для проведения анализа берется 2,8$. В государственных клиниках исследование проводится бесплатно по направлению врача-венеролога.

Услуги по осуществлению анализов с помощью РПГА-тестов предлагают разные диагностические центры.

В лабораторной службе Хеликс результаты можно получить через 2 дня после сдачи биологического материала. Инвитро предлагает свои услуги по исследованию крови на сифилис методом РПГА. Срок исполнения в этом центре — 1 рабочий день. В медицинской лаборатории Гемотест также можно сдать кровь на анализ с применением РПГА. Результаты выдаются через сутки после забора биологического материала.

Метод РПГА является высокоточным и позволяет определить наличие трепонемной инфекции на любом этапе венерического заболевания. Анализы назначаются для подтверждения заражения пациента, ранее обследованного с помощью неспецифических тестов.

Результаты могут быть ложными при определенных заболеваниях, связанных с аутоиммунными процессами, поражением печени, сердечной мышцы.

При получении сомнительного анализа врачи рекомендуют пройти повторное исследование через 2 недели.

источник

Сифилис – заболевание инфекционной природы, обусловленное спирохетой Treponema pallidum, склонное к прогредиентному хроническому течению, с чёткой периодизацией клинической симптоматики.

Преобладание полового пути передачи над контактным и трансплацентарным ставит это заболевание в ряд венерических (ЗППП, ИППП). Помимо указанных способов передачи инфекции особую роль играет артифициальный путь (от лат. «artificio» — искусственно созданный).

Он характерен для медицинских учреждений, в основном, реализуется в условиях стационара. Инфицирование происходит при гемотрансфузиях, различных хирургических операциях, инвазивных диагностических методах.

Несмотря на карантинизацию донорской крови, проблема выявления сифилиса у доноров на разных стадиях заболевания все ещё актуальна.

Поэтому диагностические мероприятия при сифилисе требуют стандартизации, внедрения новых чувствительных и информативных методов идентификации, а также сведения к минимуму ошибок и неправильной трактовки результатов анализов.

Классификация методов лабораторной диагностики

Диагностика сифилиса имеет некоторые особенности и отличается от диагностики других бактериальных инфекций. Сложное строение и антигенные свойства бледной трепонемы обусловливают ошибки в интерпретации результатов серологических реакций.

Сдать анализ крови на сифилис предлагают 3 основным группам пациентов:

  1. Скрининг и диспансеризация групп населения (в том числе и беременность, постановка на учет в женской консультации, поступление на работу и оформление медкнижки и так далее).
  2. Скрининг в группах риска (незащищенные половые контакты с человеком, инфицированным сифилисом, лица после принудительных сексуальных контактов, ВИЧ-инфицированные и так далее).
  3. Лица, имеющие симптомы заболевания, или лица с подозрением на сифилитическую инфекцию.

Все лабораторные методы условно подразделяют на прямые и непрямые.

Серологические реакции — это методы лабораторной диагностики, базирующиеся на обнаружении антител (сокращенно АТ) к антигенам бледной трепонемы (сокращенно АГ). Они имеют основное значение для подтверждения диагноза.

  1. Нетрепонемные тесты:
    • Реакция Вассермана (РСК);
    • Реакция микропреципитации (МР, РМП) и ее аналоги, которые приведены ниже;
    • Тест быстрых плазменных реагинов (RPR, РПР);
    • Тест с красным толуидином и сывороткой (TRUST);
    • Нетрепонемный тест Лаборатории исследования венерических болезней — VDRL.
  2. Трепонемные тесты:
    • Р-ция иммобилизации Treponema pallidum – РИБТ/РИТ;
    • Р-ция иммунофлюоресценции – РИФ, FTA (разведения сывороток РИФ-10, РИФ-200, РИФ-абс);
    • Р-ция пассивной гемагглютинации (РПГА, ТРПГА, TPHA);
    • Иммуноферментный анализ (ИФА, EIA);
    • Иммуноблоттинг.

Эти методы сводятся к выявлению особенностей гистоморфологии сифилитических проявлений. Внимание уделяется тонкостям строения твёрдого шанкра. Однако, дифференциальная диагностика инфекции с помощью гистологии весьма затруднительна. Гистоморфология используется с другими лабораторными и клиническими тестами.

Микроскопия Treponema pallidum в тёмном поле

Этот метод основывается на непосредственном обнаружении бледной трепонемы в исследуемом материале с помощью микроскопа и специальных приспособлений (чаще всего отделяемое эрозий и язв, реже спинномозговая жидкость и другие субстраты).

С помощью скарификации, соскоба, сдавливания с эрозий и язвенных дефектов получают экссудат, затем исследуют в микроскоп подготовленный препарат.

Обычно бледные трепонемы выявляют в препарате, полученном из шанкра, из очагов вторичного свежего, вторичного рецидивного сифилиса, а также пунктата лимфоузлов, плаценты.

Основанный на феномене свечения мелких частиц в тёмном поле при попадании луча света (феномен Тиндаля), метод прекрасно позволяет дифференцировать возбудителя сифилиса от других трепонем на основании морфологических отличий и отличий в способах передвижения бактерии.

Для микроскопии используют специальный темнопольный конденсор соответствующего оптического разрешения. Препарат получают способом раздавленной капли (каплю материала наносят на чистое обезжиренное предметное стекло и закрывают очень тонким покровным).

На покровное стекло капают иммерсионное масло. С помощью поворота тубуса и поворота увеличивающей линзы регулируют нужное освещение.

В тёмном поле микроскопа обнаруживаются клетки крови, эпителиальные клетки и сам возбудитель сифилиса. Бледная трепонема выглядит как спираль, очень тонкая, излучающая серебристый цвет, с плавными движениями.

Treponema pallidum необходимо отличать от других трепонем, в том числе и Tr. refringens, которая может содержаться в ротоглотке и на слизистой половых органов. Эта бактерия совершает хаотичные движения, имеет широкие и несимметричные, довольно грубые завитки. Кроме того, Treponema pallidum отличают от Tr. Microdentium, Tr. Buccalis и Tr. vincenti.

Визуализация бактерий в тёмном поле иногда дополняется реакцией флюоресценции. Для этого меченые флюоресцирующим красителем противотрепонемные АТ добавляют в нативный материал. При этом образуется комплекс, называемый антиген-антитело (сокращенно АГ-АТ), который и является объектом для исследования с помощью люминесцентного микроскопа.

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР)

ПЦР, разработанная в 1991 году для обнаружения молекулы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) бледной трепонемы, является высокочувствительным и специфичным, позволяет выявить фрагменты ДНК возбудителя.

Базируется данный анализ на копировании коротких участков ДНК бледной спирохеты, который удовлетворяет заданным параметрам и присутствует в образце. Всё это выполняется в искусственных условиях (in vitro). Реакция проводится в приборе — амплификаторе, который обеспечивает периодизацию температурных циклов. Происходит охлаждение с последующим нагреванием пробирок с погрешностью в 0,1˚С.

ДНК-матрицу прогревают в течение 2 минут при температуре 92-98˚С (максимальная температура используется, если полимераза термостабильна). При нагревании цепи ДНК расходятся из-за распада водородных связей между ними. В стадии отжига температуру реакции снижают для связывания праймера с одноцепочечной матрицей.

Отжиг занимает около 30 секунд, в течение этого времени синтезируются сотни нуклеотидов. Вновь синтезируемые молекулы копируются полимеразой, в результате многократно увеличиваются специфические фрагменты дезоксирибонуклеиновой кислоты. Последующая детекция фрагментов проводится с помощью электрофореза в геле агар.

ПЦР-диагностика сифилиса пока носит экспериментальный характер, но оправдана при выявлении врождённой инфекции, в сложных диагностических случаях или при минимальном содержании бледных трепонем в исследуемом материале.

ДНК-гибридизация выполняется in vitro и основана на полном или частичном соединении двух одноцепочечных молекул ДНК в одну молекулу. В случае полного соответствия комплементарных фрагментов объединение происходит легко. Если комплементарное соответствие частичное, то объединение цепочек ДНК происходит медленно. На основании времени слияния цепей можно оценить степень комплементарности.

При нагреве ДНК в буферном растворе разрываются водородные связи азотистыми основаниями, являющимися комплементарными, в результате цепочки ДНК расходятся. Далее получают препарат из двух денатурированных дезоксирибонуклеиновых кислот. При охлаждении одноцепочечные участки ренатурируют. Образуется так называемый гибрид ДНК.

Метод позволяет оценить и анализировать скорость отжига, учитывая особенности (сходства и различия) ДНК между видами или внутри вида.

Применение ДНК-зонда заключается в гибридизации меченого фрагмента ДНК со специфичным участком ДНК для идентификации комплементарных последовательностей нуклеотидов. Для метки зонда используется группа ненасыщенных атомов (хромофоры) или радиоактивные изотопы.

ДНК–зонд применяют для гетерогенного и гомогенного детектирования нуклеиновых кислот. Роль зонда заключается в определении участков, на которых произошло слияние мишень-зонд. Детектирование в гомогенной системе имеет преимущество — позволяет отследить гибридизацию молекул ДНК в реальном времени.

Читайте также:  Рнга при анализе на сифилис

Суть метода сводится в денатурации ДНК и ренатурации (воссоединения цепочек ДНК). Процесс ренатурации нуклеиновой кислоты и ДНК-зонда заканчивается образованием «гибрида».

Специфические последовательности нуклеиновых кислот гибридизуются с ДНК–зондом и, таким образом, выявляются и позволяют оценить количество ДНК в исследуемом материале.

Заражение лабораторных животных

Высокая чувствительность кроликов к Treponema pallidum (порядка 99,9%) позволяет применять их в диагностике сифилитической инфекции.

Заражение кроликов проводится в научно-исследовательских центрах и является «золотым стандартом» оценки чувствительности других методов.

Вернёмся к трепонемным и нетрепонемным тестам, так как они используются чаще всего. Рассмотрим их преимущества и недостатки, а также ошибки в интерпретации результатов.

Это тесты определения антител IgG и IgM к стандартизированному кардиолипиновому антигену. Их существенным недостатком является сравнительно небольшая специфичность.

Низкая стоимость и простота выполнения позволяют отнести эти тесты к отборочным диагностическим, необходимым для установки предварительного диагноза и скрининга среди населения.

Именно нетрепонемные тесты сдаются при оформлении медицинской книжки, устройстве на работу, постановке на учет в женской консультации.

  1. Минимальная чувствительность в стадии сифилиса первичного – 70%;
  2. Минимальная чувствительность в стадии сифилиса позднего – 30%;
  3. Возможность появления ложноотрицательных и ложноположительных результатов;
  4. Трудоёмкость выполнения РСК.
  1. Относительно маленькая стоимость производства тестов;
  2. Получение быстрого ответа;
  3. Возможность их применения для скрининга.

Получение ложноположительных или слабоположительных проб возможно в следующих случаях:

  1. Нарушение технологии выполнения, при блокировании комплекса АГ-АТ.
  2. Наличие у больного аутоиммунных заболеваний (ревматоидный артирит, ревматизм, склеродермия, системная красная волчанка, саркоидоз и др.).
  3. Злокачественные новообразования.
  4. Вирусные и бактериальные инфекции.
  5. Эндокринные заболевания (аутоиммунный тиреоидит, сахарный диабет).
  6. Беременность.
  7. Употребление алкоголя.
  8. Приём жирной пищи.
  9. Старческий возраст.

Как видно из списка, существует достаточно причин для неверного результата. Поэтому к нему следует весьма настороженно относиться. Рассмотрим наряду с РСК ещё две пробы. Это реакция микропреципитации и VDLR (ее модификация).

Реакция связывания комплемента (РСК, Вассермана, RW)

Это проба, основанная на способности комплемента связываться с комплексами АГ-АТ. Идентифицируют образовавшийся комплекс с помощью гемолитической системы. Кардиолипиновый антиген заметно повышает чувствительность пробы.

Чувствительной является и реакция Колмера, которая заключается в выполнении при различных температурных режимах. Так, первая фаза реакции Колмера протекает при температуре 20˚С в течение получаса, вторая фаза при тепературе 4-8˚С на протяжении 20-ти часов. За это время происходит связывание комплемента.

При выполнении РСК возможно получение резко положительных результатов. Причиной, вероятно, является большой титр антител в неразведенной сыворотке. В этом случае пробы ставят с уменьшающими дозами.

Для дифференцировки стадий сифилиса и оценки эффективности противосифилитического лечения определяют количество АТ в сыворотке.

Позитивность пробы оценивают с помощью крестов, также в реакциях Вассермана, Колмера и Канна указывается разведение сыворотки.

Иммуноферментный анализ (сокращенно ИФА) базируется на специфической реакции антиген-антитело. Биологический материал (сыворотка крови пациента, ликвор) вносят в лунки, на твердой поверхности которых фиксированы антигены бледной трепонемы. Исследуемый материал инкубируют, затем отмывают антитела, не связавшиеся с антигенами (см. рисунок 5).

Идентификация полученного комплекса осуществляется на этапе ферментации с помощью иммунной сыворотки, меченной ферментом. При химической реакции фермент окрашивает полученные комплексы. Интенсивность окрашивания зависит от количества специфических антител в крови пациента и фиксируется спектрофотометром.

Чувствительность ИФА составляет более 95% . Метод используется в автоматизированном режиме для исследования декретируемых групп населения: доноров, беременных и других, для уточнения диагноза при положительных и ложноположительных нетрепонемных тестах.

Иммуноблоттинг – высокочувствительный метод, модификация простого ИФА. Реакция основана на электрофорезе с разделением антигенов бледных трепонем.

Разделенные иммунодетерминанты переносят на нитроцеллюлозную бумагу и проявляют в ИФА. Далее инкубируют сыворотку и смывают не связавшиеся антитела. Полученный материал обрабатывают иммуноглобулинами (IgМ или IgG), меченными ферментом.

Клиническая оценка результатов лабораторной диагностики сифилиса

В таблице 1 ниже мы привели возможные результаты анализов и их расшифровку. Как можно видеть в таблице, основное значение при расшифровке имеет комплексная оценка тестов.

Оценка реактивности тестов выполняется также «крестами»:

  1. Максимальный ответ (резко положительная проба) обозначается с помощью 4-х крестов.
  2. Положительная проба обозначается с помощью 3-х крестов.
  3. Слабоположительную реакцию обозначают двумя крестами.
  4. Один крест свидетельствует о сомнительном и отрицательном результате.
  5. Отрицательный ответ маркируют знаком «минус».

Проблема оптимизации лабораторной диагностики сифилиса не потеряла свою актуальность до настоящего времени. Современные методы диагностики, несмотря на стремление учёных привести диагностику к максимально высоким показателям чувствительности и специфичности, требуют контрольной проверки и индивидуального подхода.

Особенностью сифилитической инфекции является феномен серорезистентности, который так и не получил научного объяснения. Диагноз выставляется после полноценного обследования больного эпидемиологическими, клиническими, лабораторными методами.

На фоне экономико-технического развития медицины наблюдается и прогресс в разработке новых критериев диагностики сифилиса. Всё это позволит быстро, успешно и безошибочно лечить пациентов.

В начальной стадии можно использовать бактериоскопический метод, основанный на определении возбудителя – бледной трепонемы – под микроскопом. В дальнейшем широко используются серологические тесты, основанные на определении микробных антигенов и вырабатываемых организмом антител в биологическом материале.

Бактериологические исследование не проводят, так как возбудитель сифилиса очень плохо растет на питательных средах в искусственных условиях.

Все методы обнаружения трепонемы, то есть виды анализов на сифилис, делятся на две большие группы:

1. Прямые, которые непосредственно обнаруживают сам микроб:

  • темнопольная микроскопия (выявление трепонем на темном фоне);
  • RIT-тест – заражение исследуемым материалом кроликов;
  • полимеразная цепная реакция (ПЦР), обнаруживающая участки генетического материала микроорганизма.

2. Непрямые (серологические), основанные на выявлении антител к микробу, которые вырабатываются организмом в ответ на инфицирование.

Серологические анализы делятся на две группы

  • реакция связывания комплемента с кардиолипиновым антигеном (РСКк);
  • реакция микропреципитации (РМП);
  • тест быстрых плазменных реагинов (RPR);
  • проба с толуидиновым красным.
  • реакция связывания комплемента с трепонемным антигеном (РСКт);
  • реакция иммобилизации трепонем (РИТ или РИБТ);
  • реакция иммунофлюоресценции (РИФ);
  • реакция пассивной гемагглютинации (РПГА);
  • иммуноферментный анализ (ИФА);
  • иммуноблоттинг.

Методики этих анализов достаточно сложны, поэтому мы остановимся в основном на том, когда они проводятся и насколько точную информацию дают.

Сразу скажем, что основа диагностики сифилиса – серологические методы. Как называется анализ на сифилис: в каждом случае обследование может включать разные методики. Ниже мы более подробно расскажем о них.

Убедительно доказывает наличие трепонем их обнаружение под микроскопом. Вероятность сифилиса при этом достигает 97%. Вместе с тем микробы можно обнаружить лишь у 8 больных из 10, поэтому отрицательный тест не исключает заболевание.

Диагностика проводится в первичном и вторичном периодах, когда имеются твердый шанкр или кожная сыпь. В отделяемом этих заразных элементов и ищут возбудителей болезни.

Более эффективный, но вместе с тем более дорогой и сложный анализ – обнаружение трепонем после предварительной обработки их флуоресцентными антителами. Это вещества, «прилипающие» к микробам и образующие «свечение» их в поле микроскопа.

Чувствительность методов снижается при большой длительности болезни, обработке язв и сыпи антисептиками, а также после лечения.

Биологический метод диагностики RIT высокоспецифичен, но дорог, а результат получается лишь через долгое время, когда у зараженного животного разовьется заболевание. В настоящее время метод практически не используют, хотя он практически самый точный из всех. Отличный анализ крови на сифилис для обнаружения генетического материала трепонем – ПЦР. Единственное его ограничение – относительная дороговизна диагностики.

В первичном серонегативном периоде (до 2 месяцев после заражения) проводят поиск трепонемы в темном поле или с использованием флюоресцирующих антител.

При первичном серопозитивном, вторичном и скрытом сифилисе используют РМП и ИФА, а как подтверждающий тест – РПГА.

У пациентов с рецидивами вторичного сифилиса исследуют элементы сыпи, пытаясь выделить из них трепонемы для микроскопического изучения.

В третичном периоде РМП у трети больных отрицательная. ИФА и РПГА положительные, но они могут свидетельствовать не о третичном сифилисе, а о перенесенном ранее заболевании. Слабоположительный анализ скорее говорит о выздоровлении, чем о третичном сифилисе.

При выставлении диагноза «врожденный сифилис» принимают во внимание наличие болезни у матери, разницу в показателях РМП у матери и ребенка, положительные ИФА и РПГА у новорожденного, иммуноблоттинг.

Обязательно обследуются на сифилис беременные женщины, особенно те, у которых уже были роды мертвым плодом, неразвивающаяся беременность, ранние выкидыши. Им проводится РМП, ИФА, РПГА. Обследуют на наличие заболевания и перед прерыванием беременности.

Чтобы получить направление в лабораторию, нужно посетить своего участкового терапевта. Если хочется сдать анализ быстрее, это можно сделать в частной лаборатории без направления (например, лаборатории Инвитро анализ на сифилис делают быстро и анонимно).

Как сдать анализ на сифилис? Кровь сдается с утра, натощак. Можно пить лишь чистую воду.

Подготовка: за два дня до сдачи анализа нужно исключить из питания жирную пищу и особенно алкоголь.

Как берут анализ? обычным способом из пальца или локтевой вены.

Сколько делается анализ на сифилис? Результат пробы обычно бывает готов уже на следующий день. Расшифровка может быть взята у врача или в лаборатории.

Сколько действителен анализ? На срок до трех месяцев.

Если получен положительный результат, рекомендуется обратиться к дерматовенерологу для дообследования. Интерпретация анализов – работа врача, не стоит ломать голову самостоятельно в поисках правильного ответа.

В некоторых случаях для диагностики нейросифилиса берут анализ ликвора.

Это обследование назначается всем пациентам со скрытым сифилисом, если у них существуют признаки патологии нервной системы, а также при скрытом и позднем нейросифилисе.

Кроме того, анализ выполняется всем пациентам после выздоровления при сохранении у них положительных серологических реакций. Мы уже писали в нашей статье, что такое явление случается нередко.

Анализ ликвора при сифилисе назначает и проводит только врач.

Спинно-мозговую жидкость получают путем прокола между двумя позвонками поясничного отдела. Ее собирают по 4 мл в две пробирки. Затем место пункции обрабатывается йодом и накрывается стерильной повязкой. После пункции пациент должен лежать на животе с приподнятым ножным концом кровати не менее 3-4 часов, затем он может лечь на бок. Постельный режим после пункции показан в течение двух суток.

Ликвор из первой пробирки исследуют с помощью общепринятых реакций на содержание белка, клеток, определение признаков менингита (воспаления мозговых оболочек).

Спинно-мозговая жидкость из второй пробирки исследуется на содержание антител к трепонеме с помощью реакции Вассермана, РМП, РИФ и РИБТ, о которых мы говорили выше.

По степени выраженности нарушений различают четыре вида изменений ликвора. Анализируя их, врач может сделать вывод о наличии разных форм поражения нервной системы (сосудистый нейросифилис, сифилитический менингит, менинго-васкулярный сифилис, спинная сухотка, поздний мезенхимальный нейросифилис), а также о выздоровлении больного с положительными серологическими тестами.

Исследование кала на энтеробиоз

Анализ каловых масс считается одним из самых основных исследований состояния пищеварительной системы человека. Именно он способен показать наличие практически всех видов гельминтов в кишечнике человека. В некоторых случаях именно по анализу кала устанавливается диагноз энтеробиоз – заболевание, вызываемое круглыми червями класса нематод, или острицами.

При подозрениях на энтеробиоз проводят два типа исследований:

  1. Анализ фекалий на энтеробиоз, позволяющий обнаружить взрослого паразита.
  2. Мазок или соскоб для микроскопического исследования наличия яиц остриц.

Анализ каловых масс на энтеробиоз достаточно редко может показать в них наличие яиц. Случаи нахождения яиц достаточно редкие, поскольку жизненный цикл острицы не предполагает кладку внутри человеческого организма. Половозрелой самке необходим кислород для осуществления процесса откладывания яиц. Поэтому она вынуждена выходить на поверхность через анальное отверстие, и только после этого откладывать яйца в перианальных складках.

Но в каловых массах иногда можно обнаружить взрослую особь острицы. При обнаружении паразит помещается в 75% спиртовой раствор, после чего подвергается лабораторным исследованиям. Но процент обнаружения гельминта ничтожно мал, и составляет не более 5% от всего количества сданных анализов на яйцеглист.

Тем не менее, кал для исследований на энтеробиоз необходимо сдавать, как взрослым, так и детям. И не только при подозрении на данное заболевание собирается кал. Анализ каловых масс на гельминты берут:

  • при устройстве на работу, связанную с общепитом и продуктами питания;
  • для посещения бассейнов;
  • перед плановой госпитализацией;
  • при посещении санаторно-курортного комплекса;
  • при поступлении ребенка в дошкольное и школьное учебное заведение.

Для подтверждения диагностирования поражения организма острицами, дополнительно назначают взятие соскоба или мазка из области вокруг анального отверстия.

Анализ фекалий на энтеробиоз можно сдать в районной поликлинике, а можно собрать и дома. Для этого приобретается пластиковый специализированный контейнер, оснащенный специальной мерной или заборной ложкой, объемом около 5.0 гр.

При получении направления для анализов, к нему прилагается бланк, в котором пациент прописывает свою фамилию, адрес, дату и время сбора каловых масс,говорит инфекционист московского клинико-диагностического центра МЕДСИ на Белорусской, детский врач Мария Алексеевна Серова.

Из испражнений заборной ложкой отбираются три пробы – в начале, срединной части и с конца выхода фекалий, упаковываются в контейнер, укупориваются крышкой и сдается для лабораторных исследований.

В домашних условиях фекалии можно собрать в пузырек из стекла с широким горлышком и плотно прилегающей крышкой, поскольку организм человека не может производить дефекацию в строго отведенный или назначенный час. Взятый анализ можно сохранить в холодильнике, поместив его на нижнюю полку, но не более суток.

Для подтверждения или опровержение наличия остриц в организме человека, одновременно с анализом кала нужно сдавать соскоб или мазок. Такой вид анализа берется исключительно для диагностирования энтеробиоза. Другие гельминты анализом мазка или при соскобе не могут быть выявлены. Их можно обнаружить только, если сдать кал на анализ по подозрению на поражение гельминтами других видов – аскаридами, лямблиями, цепнем.

Для энтеробиоза нормой показаний является не нахождение в соскобе яиц острицы.

Правила сбора кала для анализа

Сбор производится в утренние часы, сразу, как только человек проснулся. Накануне не желательно подмываться перед сном. Также не рекомендуется принимать водные процедуры утром, до дефекации.

В контейнер не нужно помещать все количество фекалий, или столько, сколько получится. Для этого к специальному контейнеру прилагается мерная ложка. Ею производится забор каловых масс, объем которого составляет не более 20 грамм. Важно, чтобы забор был произведен из трех точек – начальной, серединой и конечной.

Укупоренный контейнер желательно в этот же день сдать в биохимическую лабораторию. Исследование кала делается не более суток, и уже на следующий день выдается результат.

Соскоб или мазок с перианальных складок, считается основным показателем поражения организма человека острицами. Сдавать кровь при подозрении на энтеробиоз не нужно, поскольку такого анализа не существует.

В заключении следует отметить, что самым точным показателем наличия остриц в организме человека, является трехкратное обследование методом соскоба, проводимое каждое утро. Допустимым интервалом считается два дня между проведением соскоба. Сколько случаев скрытой формы энтеробиоза выявляет такое обследование! Данные результатов выявляют заболевание более 90% случаев поражения гельминтами.

Виды исследований и биоматериалов для анализа

Для выявления болезни используют различные методики и биоматериалы. На ранних этапах сифилис определяют с помощью бактериоскопического теста. Образцы исследуют под микроскопом. Прибор позволяет обнаружить штаммы возбудителя. Позднее проводят серологические анализы крови. Благодаря им, в пробах выявляют антигены и антитела сифилиса.

Способы определения половой инфекции поделены на 2 категории:

  • Прямые, выявляющие патогенный микроорганизм. К ним относят: темнопольная микроскопия, RIT-анализ (инфицирование кроликов биоматериалом для исследования), метод ПЦР – полимеразной цепной реакции (с его помощью находят генетические элементы возбудителя).
  • Непрямые (серологические) позволяют обнаружить антитела к патогену. Они продуцируются иммунной системой, как ответная реакция на заражение.
Читайте также:  Результат нормального анализа на сифилис

Серологические методики поделены на 2 категории: трепонемные и нетрепонемные.

  • Нетрепонемные, включающие: тест с толуидиновым красным, анализ РСК, RPR- тест, исследование крови экспресс-методом РМП.
  • Трепонемные, включающие: иммуноблоттинг, РСК-тест, РИТ-анализ, исследование РИФ, РПГА-тест, ИФА-анализ.

Информативность тестов на инфекцию различна. Чаще делают основные виды анализов на сифилис, к которым отнесены серологические методики.

Чтобы выявить бледную трепонему – патогена, который выглядит, как спираль и вызывает сифилис, берут пробы:

  • венозной крови;
  • ликвора (секрета из спинномозгового канала);
  • содержимое лимфатических узлов;
  • ткани изъязвлений.

Если необходимо провести тесты на обнаружение сифилиса, кровь сдают не только из локтевой вены, но и из пальца. На выбор биоматериала и способ исследования влияет тяжесть течения инфекции и оснащенность диагностического центра.

Убедительным доказательством сифилиса является выявление возбудителей инфекции под микроскопом. Таким способом находят патоген у 8 обследуемых из 10. Отрицательный результат у 2 оставшихся пациентов не говорит о том, что они не инфицированы.

Исследование делают на первичном и вторичном этапе (стадии) заболевания, для которых характерно появление высыпаний на коже и сифилом (изъязвлений) на эпителиальных тканях или слизистых оболочках. В отделяемом из очагов поражения находят патогены, вызывающие венерическое заболевание.

Точнее с определением трепонем справляется сложный тест, обозначающийся как РИФ – реакция иммунофлуоресценции. Образец для исследования предварительно обрабатывают флуоресцентными антителами. Соединения, способные светиться, склеиваются с бактериями. Рассматривая под микроскопом образцы, в случае заражения лаборант видит сверкающих возбудителей.

Тест используют для раннего диагностирования болезни. Чем дольше длится заболевание, тем ниже чувствительность исследовательских способов. Кроме того, она падает после обрабатывания высыпаний и язв антисептическими средствами и у пациентов, прошедших лечение. Изредка исследование дает ложноотрицательные и ложноположительные результаты.

RIT-анализ – высокоточный способ обнаружения сифилиса. При проведении теста результаты приходится ждать долго. До тех пор, пока у инфицированного кролика не проявятся признаки инфекции. Тест применяют очень редко, несмотря на то, что он сверхточен.

С помощью полимеразной цепной реакции на сифилис определяют генетические элементы патогенов. Единственный недостаток ПЦР – дороговизна.

Такие анализы крови помогают выявить антитела, появляющиеся в ответ на кардиолипин – соединение, относящееся к общему строению мембран патогенов.

Самым известным исследованием на сифилис считается реакция Вассермана. РВ входит в категорию реакций связывания комплемента (РСК). Новые методы РСК обладают существенными отличиями от традиционной RW. Но обозначаются они, как и раньше понятием «реакция Вассермана».

Иммунная система, синтезирует антитела (маркеры) в ответ на вторжение трепонем. Их выявляют при анализе крови на сифилис методом реакции Вассермана. Положительный результат RW подтверждает инфицирование обследуемого.

Реакция гемолиза – индекс РВ анализа. При ней взаимодействуют 2 субстанции: гемолитическая сыворотка и эритроциты барана. Сыворотку делают, иммунизируя кролика эритроцитами барана. Активность биологической жидкости снижают путем прогревания.

Показатели РВ зависят от того, прошел гемолиз или нет. В пробе чистой от маркеров происходит гемолиз. При этом реакция на антигены невозможна. Комплемент тратится на взаимодействие с бараньими эритроцитами. Когда в образце есть маркеры, комплимент вступает в реакцию с антигенами. В этом случает гемолиз не протекает.

Компоненты для RW отмеряют в равном количестве. Образец, содержащий сыворотку, антиген и комплимент, прогревают. Добавляют в пробу бараньи эритроциты и сыворотку. Держат при температуре 37 градусов, пока не наступит гемолиз в контрольном образце, который вместо антигена содержит физраствор.

Для проведения РВ используют готовые антигены. На упаковках указывают титры и технологию их разбавления. Позитивный результат RW обозначается крестиками. Готовые результаты тестов обозначаются следующим образом:

  • ++++ – максимально позитивные (гемолиз задержался);
  • +++ – положительные (гемолиз существенно запаздывает);
  • ++ – слабо позитивные (гемолиз частично промедлил);
  • + – сомнительные (гемолиз припозднился незначительно).

При отрицательной РВ гемолиз полностью осуществился во всех образцах. Но в некоторых случаях получают ложноположительные данные. Такое происходит, когда кардиолипин входит в состав клеток. Защитные механизмы не продуцируют маркеры к «родному» кардиолипину.

Однако изредка возникают исключительные ситуации. Положительную RW выявляют у незараженных людей. Такое возможно, если пациент перенес тяжелую болезнь, вызванную вирусами (пневмонию, малярию, туберкулез, патологии печени и крови). Положительной РВ бывает у беременных. Обусловлено это тем, что иммунитет чрезмерно ослаблен.

Если возникает подозрение, что результат анализа на сифилис ложноположительный, пациента обследуют дополнительно. Проблема в том, что эту инфекцию невозможно выявить по единственному клинико-лабораторному тесту. Часть исследований дает ложные показатели, которые бывают как отрицательными, так и положительными.

Получить достоверные данные помогает развернутый анализ на сифилис. Благодаря ему устанавливают истинный диагноз: доказывают заражение или исключают его. Кроме этого, расширенный тест позволяет остановить развитие инфекции, исключить проведение ненужной терапии.

Проводя обследование на сифилис, традиционную реакцию Вассермана применяют крайне редко. Вместо нее используют метод РСК. Анализ дает положительный результат спустя 2 месяца после инфицирования. При вторичной форме заболевания он положителен почти в 100% случаев.

Способ микропреципитации (РМП) – исследование с механизмом аналогичным реакции Вассермана. Методика проста в исполнении. Она быстро проводится. Для исследования кровь на сифилис в этом случае сдают из пальца. Методика дает положительный результат через 30 дней с момента появления сифилом. Ошибки при исследовании не исключены. Ложноположительные данные получают на фоне: обострившихся инфекций, пневмонии, инфаркта, инсульта, интоксикации.

К ошибочным тестам приводит:

  • туберкулез;
  • болезнь Бенье́-Бека-Ша́умана;
  • ревматоидные заболевания;
  • рак;
  • диабет;
  • цирроз;
  • бруцеллез;
  • лептоспироз;
  • мононуклеоз.

Обнаружив сомнительный анализ на сифилис, делают трепонемные исследования. Они помогают уточнить диагноз.

Метод плазменных реагинов (RPR) – очередной аналог реакции Вассермана. Его применяют, когда необходимо:

  • провести скрининг бессимптомных лиц;
  • подтвердить сифилис;
  • исследовать донорскую кровь.

Тест с толуидиновым красным, как и RPR, проводят, чтобы оценить динамику лекарственной терапии. Их показатели падают при отступлении болезни, и увеличиваются, когда патология рецидивирует.

Нетрепонемные анализы показывают насколько больной излечился. Получение отрицательных результатов на сифилис говорит о том, что болезнь отступила полностью. Первое обследование делают спустя 3 месяца после курсовой терапии.

Высоко результативные анализы проводят, используя трепонемные антигены. Их делают, когда:

  • получен положительный результат при методе РМП;
  • необходимо распознать ошибочные данные, возникающие при скрининговых тестах;
  • подозревают развитие сифилиса;
  • нужно диагностировать скрытно текущую инфекцию;
  • надо провести ретроспективную диагностику.

У множества пролеченных больных трепонемные исследования проб дают положительные результаты долгое время. По ним нельзя судить о степени эффективности лечения. РИТ и РИФ – сверхчувствительные тесты. Благодаря им получают достоверные данные. Эти анализы трудоемки, они требуют приличных временных затрат, наличия прогрессивного оборудования. Их способны проводить квалифицированные медработники.

Выполняя РИФ анализ на сифилис, положительные данные получают спустя 2 месяца после инфицирования. Отрицательные параметры подтверждают, что обследуемый здоров. Положительные – позволяют предположить, что человек инфицирован.

РИТ проводят, когда реакция микропреципитации положительна. Такой анализ крови на сифилис помогает опровергнуть или удостоверить наличие инфекции. Тест сверхчувствителен, он точно указывает заражен пациент или здоров. Но исследование дает достоверные данные только через 3 месяца после проникновения трепонем в организм.

К сверхточным тестам относят иммуноблоттинг. Такой анализ крови при сифилисе делают редко. Его применяют при обследовании новорожденных детей. Он не пригоден для экспресс-тестирования. Положительные результаты получают с опозданием. Их гораздо раньше дает метод микропреципитации.

К информативным сверхточным методам исследования относят тесты ИФА и РПГА. С их помощью проводят экспресс-диагностирование. Лаборанты делают огромное количество таких анализов. Благодаря им удается установить точный диагноз.

РПГА анализ на сифилис положителен через 30 дней после проникновения возбудителя в организм. С его помощью диагностируют первичную инфекцию, когда появляются язвы и сыпь. Благодаря ему удается выявить запущенные, скрытно текущие, а также врожденные формы патологии. Но проводят его совместно с нетрепонемными и трепонемными тестами. Комплексное диагностирование гарантирует достоверность результатов. Тройное тестирование точно доказывает наличие или отсутствие венерической инфекции.

ИФА анализ положителен спустя 21 день с момента заражения. Тест иногда дает ошибочные результаты. Они появляются при системных патологиях, нарушенных обменных процессах. Их результативность сомнительна у ребенка, родившегося от инфицированной матери.

Погрешности, получаемые при серологических способах исследования, стали причиной открытия прогрессивных методик диагностики. Газовая хроматография и масс-спектрометрия не дают ложных результатов. Единственное препятствие для их массового использования – дороговизна.

  • При нахождении сифилиса в первичной фазе (до 60 дней с момента инфицирования), возбудителя отыскивают на темном фоне или используют для их обнаружения флюоресцирующие антитела.
  • Если патология находится в первичной, вторичной или скрытой форме применяют РМП и ИФА. Подтвердить результаты помогает РПГА анализ крови на сифилис.
  • При рецидивах вторичной инфекции анализируют отделяемое изъязвлений и высыпаний. Из образцов извлекают возбудителей, изучают их с помощью микроскопии.
  • Когда заболевание входит в третичную фазу, у 1/3 пациентов РМП отрицательная. При этом результаты ИФА и РПГА положительны. Однако они не всегда указывают на третичный период, а подтверждают, что человек раньше перенес инфекцию. Слабоположительный тест – доказательство полного излечения, а не развития третичной фазы.
  • Подтверждая врожденный сифилис, анализ крови берут у матери и младенца. Сравнивают данные тестов РМП. Учитывают то, что у малыша ИФА и РПГА положительны. Подтверждают диагноз, используя методику иммуноблоттинга.

Сифилис, как любая системная патология, поражает весь организм. Поэтому обследование на него проходят при беременности, перед абортом. Пациенткам делают РМП, ИФА, РПГА.

Отправляет пациентов на анализ врач-венеролог. Частные лаборатории делают анонимные исследования на сифилис по желанию клиента. Для сдачи теста в них не нужно направление врача.

Правила проведения исследования:

  • Кровь в лаборатории берут утром на пустой желудок (едят после процедуры). До анализа разрешено пить только воду.
  • За 2 суток до обследования запрещено: питаться жирной едой и употреблять спиртное.
  • Кровь берут из пальца или вены.
  • Сколько длится исследование? Обычно не больше суток. Расшифровку анализов на сифилис получают у лаборантов либо лечащего врача.
  • Сколько действителен тест? По прошествии 3 месяцев результаты анализов теряют силу. Их сдают снова.

Если расшифровка анализа показывает, что тест положителен, необходимо посетить венеролога, который назначит дополнительное обследование для точного подтверждения диагноза и подберет схему необходимого лечения.

Тестирование спинномозгового содержимого

Диагноз нейросифилис ставят после того, как исследуют ликвор. Такой анализ делают:

  • людям со скрытой формой инфекции;
  • при симптомах заболеваний нервной системы;
  • бессимптомном, запущенном нейросифилисе;
  • выздоровевшим больным с положительными серологическими реакциями.

Направление на исследование ликвора дает врач. Из спинномозгового канала берут пункцию в 2 пробирки. Прокол смазывают йодом, закрывают стерильной салфеткой. После процедуры пациент соблюдает постельный режим на протяжении 2 дней.

В 1 образце определяют количество белка, клеток, следы менингита. Во второй пробе вычисляют антитела к возбудителю сифилиса. Для этого делают тесты: РВ, РМП, РИФ и РИБТ.

В зависимости от того сколько выявлено нарушений, различают 4 разновидности ликвора. Каждая указывает на определенные повреждения нервной системы. Врач диагностирует:

  • сосудистый нейросифилис;
  • сифилитический менингит;
  • спинную сухотку и прочее.

Помимо того, по результатам тестов судят о выздоровлении пациента.

Интерпретация тестов – задача врача. Только он способен сделать правильные выводы, при необходимости назначить дополнительное обследование, поставить точный диагноз. Не стоит делать самостоятельную диагностику при опасной системной патологии. Ошибка в диагнозе влечет за собой серьезные последствия.

Ни для кого не является секретом, что своевременная диагностика любого заболевания означает едва ли не половину успеха его лечения. Очень важно подобрать именно те анализы, методы или способы диагностики, которые действительно помогут поставить точный диагноз, а не запутают врача еще сильнее. Иммуноферментный анализ крови давно зарекомендовал себя методом, позволяющим не только получить положительный или отрицательный ответ на вопрос – болен ли человек какой-либо половой инфекцией, но и определить, на какой стадии развития находится заболевание, а также понять, была ли подобная проблема у пациента в анамнезе. ИФА на сифилис на сегодняшний день – один из наиболее чувствительных и специфичных анализов, при этом его точность составляет около 90%.

Тест-системы, которые использует метод иммуноферментной диагностики, предназначены для выявления не только сифилиса, но и множества других инфекций: гепатит, ВИЧ, ЦМВ, герпес, токсоплазмоз и т.д. Анализ ИФА на сифилис позволяет определить антитела (IgG, IgA, IgM) к бледной трепонеме, содержащейся в крови больного человека. Этот метод позволяет увидеть взаимодействие антител со специальными препаратами, в которых заложены антигены, способные в комплексе с антителами образовать признак заболевания, хорошо заметный при различных способах диагностики.

В основе иммуноферментного анализа на сифилис лежит метод взаимодействия выявляемых в крови антител с антигеном возбудителя инфекции. Диагностика будет зависеть от того, какие именно антитела использовались: могут выявляться либо антитела определенного класса, либо в общем. Для диагностики этим методом кровь берется натощак из вены.

ИФА анализ крови на сифилис подразумевает использование трех классов иммуноглобулинов: G, M, A. Указанные иммуноглобулины имеют одно важное для диагностики сифилиса методом ИФА свойство: они вырабатываются в строго определенной последовательности, благодаря чему ИФА позволяет определить, на какой именно стадии находится процесс и какова динамика его развития:

  • Иммуноглобулин М в крови показывает, сколько времени прошло с момента заражения. Однако не всегда положительные результаты его наличия означают наличие венерического заболевания: возможно, у человека произошло обострение какой-либо хронической болезни, вызвавшее подобную реакцию.
  • Наличие антител IgA означает, что с момента заражения прошло не менее месяца.
  • Поскольку иммунитет к данному заболеванию не вырабатывается, положительный результат обследования на IgG может показывать как пик заболевания, так и период после пройденной терапии.

    Следует отметить, что ИФА положительный на сифилис – это не повод для паники. Дело в том, что такой метод позволяет определить лишь наличие антител, но не возбудителя. Следовательно, если результат ИФА сифилис – положительно, это еще не является основанием для того, чтобы поставить диагноз. Однако в научном мире тест-системы совершенствуются ежедневно, и на сегодняшний день это означает, что в большинстве случаев результатам анализов все же можно доверять.

    Результатов диагностики бывает всего два: «положительный» и «отрицательный». В первом случае положительные данные означают, что у пациента заболевание в одной из стадий, либо что он совсем недавно окончил курс лечения. Отрицательный же результат иммуноферментного исследования крови означает либо отсутствие заболевания, либо очень раннюю стадию его развития.

    Дерматокосметология как направление медицинской деятельности существует с незапамятных времен, поскольку ее предмет отражает постоянное и естественное стремление человека к красоте и здоровью тела.

    В последнее время наблюдается повышение частоты воспалительных заболеваний гениталий герпетической этиологии с преобладанием латентного, хронического рецидивирующего течения с развитием различных нарушений репродуктивного и соматического здоровья.

    Побочное действие лекарственных средств (ПДЛС) продолжает оставаться одной из актуальнейших проблем клинической медицины, в том числе дерматологии, занимая четвертое место после болезней сердца, онкологических заболеваний и инсульта среди причин смерти.

    Выкидыш и замершая беременность для любой женщины, мечтавшей о ребенке, — большое горе. Как не допустить повторения такой ситуации в будущем? Узнайте больше о современных способах выявления и лечения нарушений, предрасполагающих к выкидышу.

    источник