Меню Рубрики

Что означает анализ ифа на сифилис

ИФА — иммуноферментный анализ — является одним из самых прогрессивных методов диагностики сифилиса. Он выявляет признаки присутствия возбудителя заболевания на разных стадиях последнего. В основе анализа лежит выявление специфических антител, которые появляются в крови больного при внедрении в организм бледной трепонемы (бактериального возбудителя).

Метод ИФА работает не только для группы заболеваний, передающихся половым путем. В равной степени он применим и для диагностики самых разных болезней инфекционного характера. Принцип проведения анализа был разработан еще в 60-х годах прошлого столетия. Однако активно использоваться он начал только спустя 20 лет.

Сейчас ИФА применяется для диагностики сифилиса, СПИДа, туберкулеза и многих других болезней. Для обнаружения антител используются специально разработанные ферменты, активно реагирующие на специфические белки крови.

Больной может сам прийти в клинику для проведения анализа, если у него присутствуют подозрительные симптомы (характерные высыпания на теле, повышенная температура, боли в мышцах и пр.). Однако на определенных стадиях недуг не проявляется столь явно. Через несколько недель после инфицирования симптомы исчезают, и пациент может ошибочно считать себя выздоровевшим. По этой причине существует ряд случаев, когда анализ ИФА проводится в обязательном порядке:

  1. При устройстве на работу на предприятия, где есть контакт с большим количеством людей, продуктами питания, детскими и медицинскими товарами.
  2. При постановке на учет беременной. Болезнь передается от больной матери младенцу, поэтому важно ее вовремя выявить.
  3. При донорстве крови. Перед тем как сдавать кровь, донор обязан проверить ее на наличие опасных инфекций, в том числе и сифилиса.
  4. Во время подготовки к операции. Проведение такого рода вмешательств подразумевает прямой контакт с кровью больного. Это может быть небезопасно для медперсонала и других пациентов клиники.
  5. При обнаружении симптомов у одного из половых партнеров. В этом случае второй партнер также обязан сдать кровь на пробу.
  6. При прохождении воинской службы, а также в случае тюремного заключения. Обе ситуации предполагают продолжительный контакт с большим количеством людей. Поскольку недуг передается не только половым, но и контактно-бытовым путем, любой человек из окружения инфицированного находится под угрозой.

Главная особенность ИФА — высокая точность данных. Позволяет не просто обнаружить антитела, но и определить их количественное соотношение.

Это значит, что иммуноферментный анализ позволяет с 99,99%-ной вероятностью выявить болезнь и одновременно определить, на какой стадии развития болезнь в данный момент находится.

При проведении ИФА у пациента берут кровь из вены. Затем ее особым образом подготавливают и размещают на полистироловой панели со множеством лунок. При диагностике в сыворотку крови добавляют специальные ферменты, которые при наличии антител/антигенов недуга образуют с ними прочные соединения.

Результатом образования таких соединений становится изменение цвета плазмы крови в лунке (с бесцветного — на ярко-желтый). Работнику лаборатории достаточно визуально оценить результат, чтобы понять, что на панели — кровь больного.

При ИФА на сифилис оценивают наличие 3 классов антител (иммуноглобулинов): A, M и G. Эти вещества образуются в крови инфицированного человека в строго определенной последовательности:

  1. Наличие иммуноглобулина A указывает на то, что с момента заражения бледной трепонемой прошло больше месяца.
  2. Антитела M выявляются при длительном присутствии инфекции в организме. Также они могут быть реакцией на обострение хронической болезни.
  3. Иммуноглобулин G организм вырабатывает на самом пике заболевания, а также после уже проведенного лечения.

Интенсивность окрашивания плазмы крови в ярко-желтый цвет при проведении ИФА напрямую указывает на количество антител. Если цвет плазмы слегка желтоватый, результаты ставят под сомнение и процедуру повторяют. При отрицательном результате цвет плазмы не меняется и остается прозрачным.

На протяжении всей жизни человеку довольно часто приходится делать ИФА на сифилис (перед устройством на работу и пр.). Положительный результат всегда становится стрессом. Однако не стоит паниковать раньше времени! Иногда ИФА может дать ложноположительный результат. В этом случае есть смысл провести повторное обследование.

Специалисты не советуют беспокоиться после первого же положительного результата ИФА, поскольку это исследование направлено на выявление не самой бледной трепонемы, а антител, которые организм вырабатывает в ответ на атаку патогенных бактерий. ИФА — анализ с высокой точностью (вероятность погрешности меньше 1%). При наличии сомнений врачи не ставят диагноз сразу же, а предлагают пациенту сдать кровь еще раз.

Ложноположительный ответ ИФА возможен при болезнях:

  • соединительной ткани, суставов (васкулит, ревматоидный артрит и пр.);
  • сердца (главным образом это касается воспалительных заболеваний: миокардита, эндокардита);
  • эндокринной системы (диабет);
  • инфекционных (гепатит, туберкулез и пр.).

Ложноположительный результат может быть при беременности или в том случае, если незадолго до ИФА пациенту была проведена вакцинация. Изменить итоги анализа не в лучшую сторону способно и употребление алкоголя, наркотиков.

В достаточно большом количестве случаев положительную реакцию дает проверка крови пациентов, которые уже прошли лечение. У 10% излеченных положительная реакция остается на всю жизнь, поскольку в крови постоянно циркулирует определенное количество антител как иммунный ответ на возникшее однажды заболевание.

Наряду с ложноположительным возможна и ложноотрицательная реакция. В самом начале болезни, когда трепонема только попала в организм, антитела вырабатываются в недостаточном для выявления количестве. Ферменты могут их не зафиксировать, поэтому итоги ИФА оказываются отрицательными.

При наличии подозрений на сифилис (пациент имел незащищенный половой акт, тем или иным образом контактировал с возможными больными и пр.) проводится повторный анализ.

Существует определенный протокол действий на тот случай, если у пациента со 100%-ной достоверностью был выявлен недуг. В первую очередь обследование проходит его половой партнер: муж, жена, другие лица, вступавшие с зараженным в интимную связь. В этом плане медики категоричны. Обследование сексуальных партнеров является обязательным во избежание распространения опасного заболевания.

Лечение проходят все члены семьи больного, даже если их анализы показали отрицательный результат. Помним: сифилис — острозаразная болезнь, передающаяся контактно-бытовым путем. Дети и другие члены семьи могут получить трепонему во время пользования санузлом, общими полотенцами, посудой.

Как только данные ИФА на сифилис подтвердились, инфицированный и контактировавшие с ним лица проходят терапию антибиотиками. Все рекомендации врача — дозировку, периодичность приема лекарств — необходимо соблюдать в точности!

На время лечения работающим гражданам выдается справка с зашифрованным согласно МКБ-10 диагнозом. После полного излечения медицинская книжка продлевается. Выздоровевший работник может приступать к своим непосредственным обязанностям. Работодатель не вправе отказать ему в восстановлении на рабочем месте.

Таковы основные данные по проведению ИФА. Заразившимся нужно помнить: постановка диагноза не ставит крест на всей последующей жизни больного. Сейчас существуют эффективные препараты, позволяющие надежно излечивать это заболевание. Вовремя проведенные обследование и лечение позволяют избежать самых опасных последствий недуга и защитить от него других членов общества.

источник

ИФА на сифилис является одним из самых эффективных методов, применяемых для диагностирования венерического заболевания, вызванного бледными трепонемами. Анализ позволяет определить связь антигена с антителом и осуществляется с помощью ферментов. Этот высокоточный способ выявляет инфекцию в 90% случаев. Тест-система, используемая в иммуноферментной диагностике, предназначена для обнаружения как сифилиса, так и других заболеваний, вызванных патогенными микроорганизмами.

Анализ методом ИФА на сифилис назначается через 3-4 недели после предполагаемого инфицирования.

Часто его применяют для того, чтобы подтвердить диагноз после получения положительного результата способом, основанном на реакции Вассермана. Иммуноферментный анализ проводят, если:

  • у пациента обнаружены высыпания в области половых органов;
  • имелись случаи незащищенных сексуальных контактов;
  • женщина беременна;
  • мужчина желает стать донором семенной жидкости;
  • ребенок родился у матери, страдающей сифилисом;
  • у пациента повышена температура по неизвестной причине;
  • планируется госпитализация или оперативное вмешательство;
  • проводится медосмотр работникам детских учреждений, общепита.

Для того чтобы достоверность иммуноферментного анализа была максимальной, пациенты должны быть осведомлены о правилах подготовки, при несоблюдении которых результат может оказаться ложноположительным. В целях минимизирования погрешности нужно:

  1. Сдавать кровь на голодный желудок.
  2. За двое-трое суток воздержаться от употребления спиртосодержащих напитков, еды с повышенным содержанием жиров.
  3. Ограничить физические нагрузки за несколько дней до забора крови.
  4. За три часа до сдачи биоматериала отказаться от курения.
  5. Сообщить врачу о лекарственных средствах, используемых в настоящее время, а также об имеющихся заболеваниях и прививках, сделанных недавно.

О том, сколько может делаться анализ, лучше спросить работников лаборатории. Срок проведения связан не только с ее загруженностью, но и с наличием специального оборудования.

С помощью ИФА возможно выявить антитело, принадлежащее разным классам (А, G, M). При повышении уровня М-иммуноглобулинов врачи определяют время, когда произошло инфицирование бледными спирохетами. Обычно этот период не превышает 90 дней. Если у пациента увеличен титр класса А, это значит, что инфицирование произошло в течение последних 30 суток. G-иммуноглобулины позволяют выявить острый процесс, пролеченное заболевание.

Суммарный анализ, обозначаемый в медицинских центрах как “сифилис igg ИФА”, назначается людям, ранее не обследованным на это венерическое заболевание. Метод позволяет обнаружить его при появлении первых симптомов и в первоначальной стадии инфицирования.

Получив на руки расшифровку, пациент не всегда может правильно истолковать ее значение. Только врач способен определить результаты и поставить точный диагноз. В лабораторном бланке могут быть указаны следующие данные:

  • IgA+ IgM- IgG- – заражение произошло недавно;
  • IgA+ IgM+ IgG- – патогенный возбудитель попал в организм менее 30 дней назад;
  • IgA+ IgM+ IgG+ – инфицирование состоялось более месяца;
  • IgA- IgM- IgG+ – венерическое заболевание пролечено.

В некоторых случаях, если результат теста положительный, врач может назначить проведение дополнительных анализов другими методами.

Способ выявления инфекционного заболевания, вызванного бледными трепонемами, считается высокочувствительным. Прозводители ИФА-тестов дают гарантию качества и подтверждение его на опытах, в ходе которых сравнивались результаты других специфических диагностик. Точность составляет 98%.

Ложноположительный результат возможен в следующих случаях:

  1. Беременность. В этот период существует вероятность получения искаженных результатов, поскольку генетические материалы отца и сам плод могут быть расценены как чужеродный агент.
  2. Хроническое заболевание. Сомнительный результат возможен, если у пациента имеется запущенная форма туберкулеза, аутоиммунные процессы, патологии печени.
  3. Недавно сделанные прививки. Вакцина оказывает влияние на синтез иммуноглобулинов.
  4. Травма. У пациента с недавними повреждениями развиваются воспалительные процессы, которые могут спровоцировать получение ложноположительного анализа.
  5. Пожилой возраст. У таких людей нередко наблюдается сразу несколько хронических патологий, оказывающих сильное влияние на иммунную систему.
  6. Новорожденные. До полутора лет у маленьких детей серодиагностика по ИФА-методу может показать положительные результаты, если женщины были инфицированы трепонемами в период беременности. В крови малыша в течение года и более циркулируют иммуноглобулины матери.

В зависимости от лаборатории цены на специфические тесты методом ИФА варьируются в пределах от 6,1$ до 11,4$. В некоторых диагностических центрах за процедуру взятия крови на анализ берется 2,5$.

Во многих государственных медицинских учреждениях ИФА можно сдать бесплатно. При большой загруженности лабораторий и необходимости получения быстрого результата тест на сифилис лучше сдать в частных лабораториях.

ИФА на выявление сифилиса можно сдать в Инвитро. Стоимость услуг составляет 14$, включая забор крови в процедурном кабинете. Срок выполнения — 7 дней.

Центр CMD также предоставляет услуги по определению венерического заболевания. Стоимость анализа составляет 9,2$. Срок выполнения — до 3 дней. При необходимости лаборанты учреждения могут провести взятие крови на дому.

Пройти исследование на сифилис можно в медицинской лаборатории Гемотест. Цена анализа на сифилис РПГ (реакция пассивной гемагглютинации) составляет 10,3$. Срок выполнения — 1 сутки.

Все диагностические центры гарантируют полную анонимность.

Сифилитический тест, основанный на иммуноферментной реакции, позволяет с высокой точностью выявить венерическое заболевание, вызванное трепонемами. Анализ назначается, если неспецифический способ выявления инфекции, показывает отрицательный результат при наличии симптомов у пациента или контактах с зараженными лицами.

Лечение проводится только при наличии положительных результатов, полученных несколькими методами.

источник

ИФА — это иммуноферментный анализ, применяющийся в качестве высокочувствительного теста в диагностике различных патологий, в том числе сифилиса. Позволяет выявить заболевание и максимально точно определить его стадию.

Сифилис зарождается при проникновении в организм бактерии Treponema pallidum (Трепонема бледная). Через 2 — 4 недели на кожных покровах образуется твёрдый шанкр в локализации, где произошло внедрение, чаще всего характерная для сифилиса папула образуется на половых органах, что означает начальный этап первичного сифилиса. По мере развития заболевания папулы преобразуются в язвы, а затем в большинстве случаев исчезают, что даёт пациенту ложную надежду на самоизлечение. Но латентный период переходит в стадию вторичного сифилиса, при этом трепонемы распространяются уже по всему организму, проникая в ткани и органы. На коже и слизистых оболочках образуются множественные высыпания. При отсутствии лечения наступает следующий этап — третичный сифилис с формированием гумм и поражением ЦНС, сердца, костной ткани, ЖКТ, ротовой полости и других органов.

Читайте также:  Сдать анализы на ротавирусную инфекцию

ИФА определяет первичный, вторичный, третичный (чаще всего только на начальном этапе), врождённый, рецидивный и латентный сифилис. Суть метода заключается в обнаружении антител, которые организм вырабатывает в ответ на внедрение трепонемы. На начальном этапе болезни образуются антитела класса М, через несколько недель к ним присоединяются иммуноглобулины класса G. Концентрация тех или иных антител меняется в зависимости от этапа развития сифилиса, что позволяет определить стадию болезни. При выполнении ИФА используется истинная трепонема бледная либо её антигены, поэтому тест относится к трепонемным анализам.

Ранее в диагностике сифилиса применялись различные методы, такие как: РПГА (реакция пассивной гемагглютинации), RW (реакция Вассермана), МР (микрореакция преципитации), РСК (реакция связывания комплемента) и другие тесты. Разнообразие анализов в качестве отборочных тестов и отсутствие единой системы нередко приводило к путанице, а в результате — к негативным последствиям, например, когда донор с ложноотрицательным результатом становился посредником в заражении реципиентов. С 2006 года тестирование стало более стандартизированным, ИФА был признан одним из наиболее эффективных методов диагностики и используется в настоящее время в качестве проверочного теста при обнаружении положительного результата нетрепонемного анализа.

Теперь нетрепонемные анализы используются для выявления возможного заражения сифилисом у всех групп населения, то есть являются скрининг-тестами. При сомнительном либо положительном результате назначается ИФА либо иной трепонемный анализ. ИФА стал одним из ведущих тестов на сифилис благодаря своим преимуществам:

  • высокая чувствительность, позволяющая выявить антитела к трепонеме в очень низкой концентрации;
  • высокая специфичность достигается за счёт использования антигенов трепонемы бледной;
  • объективность результатов благодаря автоматическому учёту;
  • лёгкость постановки реакции осуществляется благодаря полной комплектации наборов для диагностики;
  • универсальность теста: может применяться для профилактического обследования населения, для диагностики всех стадий болезни и проверки сомнительных результатов.

Антитела к Treponema pall >

ИФА проводится как подтверждающий тест после нетрепонемного анализа, но может выступать и в качестве отборочного анализа. Назначается в следующих случаях:

  • плановое тестирование при устройстве на некоторые виды работ;
  • плановое выявление риска инфицирования;
  • госпитализация, предоперационный период;
  • донорство;
  • беременность;
  • обследование при симптомах сифилиса.

Заподозрить сифилис можно по специфичному признаку — образованию твёрдого шанкра, а также болевым ощущениям в суставах и костях, отёчности половых органов, повышению температуры тела до 38 °С, увеличению лимфоузлов. В качестве профилактики рекомендуется проходить исследование регулярно при активной сексуальной жизни со сменой партнёров.

Для минимизации риска получения ложного результата следует выполнять правила.

  1. Образец крови сдаётся на голодный желудок, в зависимости от лаборатории период голода должен составлять от 4 до 12 часов.
  2. В предыдущие сутки исключается алкоголь и жирная пища, курение ограничивается минимум за час до исследования.
  3. Накануне анализа пить можно только чистую воду, не допускается употребление соков, кофе, лекарственных препаратов.
  4. Все иные исследования и медицинские манипуляции проводятся после сдачи теста.
  5. Не следует сдавать анализ, если в предыдущие дни отмечалось лихорадочное состояние либо проводилась вакцинация.
  6. Женщинам не рекомендуется проходить тест в период менструации.
  • наличие инфицирования трепонемой бледной;
  • ложноположительный результат при наличии иных факторов;
  • последствия вылеченного ранее сифилиса.
  • отсутствие заражения;
  • инкубационный (ранний первичный) период сифилиса;
  • поздний период, в том числе поздние этапы развития третичного сифилиса.

По статистике чаще всего ложноположительные результаты проявляются в следующих случаях:

  • гепатиты;
  • лепра;
  • инфаркт миокарда;
  • интоксикация;
  • заболевания соединительной ткани;
  • аутоиммунные патологии;
  • сахарный диабет;
  • беременность;
  • период менструации;
  • поствакцинальный период.

Treponema pallidum является не единственным видом трепанем, к патогенным возбудителям относятся и другие спирохеты: Treponema pertenue (возбудитель явса), Treponema bejel (возбудитель беджеля), Treponema carateum (возбудитель пинты) и многие другие. При микроскопическом осмотре они мало отличаются от бледной трепонемы, а антитела против них схожи на иммуноглобулины при сифилисе.

Положительный результат может отражать наличие болезни в прошлом, так как иммуноглобулины класса G способны задерживаться в кровотоке годами.

На начальном этапе болезни ИФА показывает отрицательный результат, этот период является инкубационным, когда первичный сифилис ещё не наступил, и отсутствуют характерные признаки болезни. Инкубационный период по сравнению с данными по инфицированию сифилисом середины XX века увеличился на 7 — 10 дней, в настоящее время составляет около 3 недель. Это означает, что после проникновения трепонемы в организм, ложноотрицательный результат будет выявляться на протяжении 3-х, а иногда и более недель.

Третичный сифилис при отсутствии терапии обычно развивается через 3 — 5 лет с момента инфицирования, в некоторых случаях болезнь может проявиться через 10 — 15 лет на фоне бессимптомного протекания и перехода сифилиса из одной стадии в другую. К этому времени число антител значительно снижается или они отсутствуют вовсе, что приводит к ложноотрицательному результату. По некоторым данным на некорректный ложный итог могут повлиять различные инфекционные заболевания, сахарный диабет, приём некоторых антибиотиков.

источник

ИФА на сифилис — сложное многоступенчатое лабораторное исследование. Оно проводится для обнаружения возбудителей данной венерической патологии в системном кровотоке, установления их количественного содержания. Иммунологический анализ информативен, не требует длительной подготовки, а расшифровка полученных данных редко занимает более 1-3 дней.

Не всегда результаты исследования соответствуют истинному положению дел. Иногда они бывают как ложноположительными, так и ложноотрицательными. Поэтому для выставления основного диагноза требуется проведение и других лабораторных тестов, в том числе инструментальных.

Анализ ИФА на сифилис помогает с достаточно высокой точностью обнаружить в крови пациента специфические иммуноглобулины — антитела. Они всегда вырабатываются иммунной системой в ответ на вторжение в организм человека чужеродных белков. Все они специфичны, то есть для уничтожения бледных трепонем продуцируются антитела, не способные разрушать клетки возбудителей других заболеваний. Поэтому обнаружение в кровеносном русле специфического антигена прямо указывает на развивающийся сифилис.

Исследование методом ИФА преимущественно назначается пациентам при выявлении у них внешних признаков данной венерологической патологии — это твердый шанкр, гуммы, вторичные или третичные сифилиды на коже и слизистых, укрупнившиеся и болезненные лимфоузлы.

Также биохимическое исследование показано в следующих случаях:

  • трудоустройство. На наличие сифилиса проверяются люди, новое место службы которых предполагает контакты с большим количеством людей. Регулярно сдавать кровь на анализ должны медики, педагоги, продавцы и фасовщики продуктов питания;
  • беременность. Несмотря на огромный объем профилактической информации, врожденный сифилис до сих пор не редкость. Женщинам, встающим на учет по беременности, 2-3 раза проводится исследование ИФА на протяжении всего периода вынашивания ребенка;
  • донорство. В венерологии существует такое понятие как трансфузионный сифилис. Это означает, что инфицирование произошло при переливании крови другого человека с лечебными целями. Доноры обязаны регулярно проверяться на наличие возбудителей сифилиса;
  • подготовка к хирургическому вмешательству. Анализ крови необходим, прежде всего, для предупреждения заражения сифилисом врачей и младшего медицинского персонала;
  • прохождение воинской службы. При выявлении сифилиса срочник не может быть призван до полного выздоровления.

Иногда человек через 2-6 недель после полового контакта, в том числе защищенного, обнаруживает на слизистых или коже весьма характерный шанкр. Он может самостоятельно обратиться в ближайшее медицинское учреждение для анонимной сдачи крови на сифилис.

Анализ на сифилис методом ИФА чаще проводится непрямым неконкурентным методом. Взятый антиген от бледной трепонемы переносится в лунки лабораторного приспособления. Затем туда же добавляется определенное количество плазмы или сыворотки крови, которые содержат антитела к бледным трепонемам. Наблюдается быстрое связывание биологического материала с подготовленными антигенами, оседание образовавшихся комплексов на дне лунок. Затем вводятся меченые ферментами антитела и реагенты. При наличии в крови возбудителей сифилиса содержимое лунок окрашивается в различные цвета.

Также выполняется диагностика сифилиса методом прямого конкурентного ИФА с использованием иммобилизованных на твердой поверхности специфических антигенов. После нанесения на них обработанных биоматериалов требуется некоторое время для инкубации. По ее окончанию происходит образование меченных и немеченных комплексов. После отмывания носителя добавляются субстрато-хромогенные реагенты, окрашивающие биоматериалы при наличии в них специфических антигенов.

Во время проведения анализа крови важно не только обнаружить антигены к возбудителям сифилиса. Обязательно устанавливается вид и количественное содержание в исследуемом образце иммуноглобулинов A, M и G.

Так как каждый из них вырабатывается иммунной системой на определенном этапе развитии болезни, то удается с высокой точностью установить стадию сифилиса:

  • высокая концентрация иммуноглобулинов A указывает, что с момента инфицирования прошло более 2 месяцев. Характерные симптомы сифилиса уже проявились, но пока еще бледные трепонемы не успели нанести серьезного вреда организму;
  • повышенный уровень иммуноглобулинов M свидетельствует о длительном течении сифилиса или его остром рецидиве на начальных этапах развития из-за резкого снижения иммунитета;
  • преобладание в биоматериале иммуноглобулинов G наблюдается чаще при вторичном сифилисе. Для этого периода характерно повреждение внутренних органов, развитие множественных воспалительных и деструктивных процессов.

Если результаты иммуноферментного исследования отрицательные при наличии специфических симптомов сифилиса, оно проводится заново. Анализ может быть повторен и по желанию самого обследуемого. Расшифровкой занимается врач из лаборатории. Результат готов спустя 1-3 дня, но в некоторых случаях, например, при срочной операции, все исследование занимает не более 2-3 часов.

Если ИФА на сифилис дал положительный результат, то он будет обязательно перепроверен. Дело в том, что иммунная система не всегда работает корректно, что становится причиной искажения параметров биохимического исследования.

Для человека, практикующего случайные сексуальные контакты, предстоящее проведение анализа является стрессом. Это также может спровоцировать получение некорректных данных из-за выброса в кровь комплекса биоактивных веществ. Искажение результатов наблюдается и при выкуривании сигареты за 3-5 часов до проведения исследования.

Также при наличии у пациента некоторых заболеваний данные ИФА на сифилис будут перепроверены:

  • патологии сердца, например, миокардит. Это воспаление мышечной оболочки чаще ревматического, инфекционного или инфекционно-аллергического характера оказывает негативное влияние на функционирование иммунной системы;
  • аутоиммунные заболевания — ревматоидный артрит, анкилозирующий спондилоартрит, системная красная волчанка. Они развиваются из-за атаки иммунной системы на собственные клетки организма.
  • результаты ИФА могут быть не всегда достоверны при тяжелых патологиях печени, органов мочевыделения, эндокринных расстройствах. Искажены они и при наличии у пациента респираторных, кишечных, других урогенитальных патологий, а также любой формы туберкулеза.

источник

Что это за анализ? Это выявление суммарных антител класса M и G к возбудителю сифилиса, которое может использоваться как эффективный сверхчувствительный скрининговый тест для диагностики раннего инфицирования сифилисом.

На данный момент Реакция Вассермана считается устаревшей, и с 2006 года для диагностики сифилиса почти не применяется. Ее заменили более чувствительные и современные анализы. Однако на бланках до сих пор выводят неизменное «RW». Подпись «RW » — это дань традиции, маленькое негласное правило среди врачей: оставляя старую подпись, сейчас имеют в виду новые современные анализы на сифилис.

Какой биоматериал можно использовать для исследования? Венозную кровь

Treponema pallidum (бледная трепонема) – бактерии, которая вызывает сифилис – хроническое венерическое инфекционное заболевание, которое чаще всего передается половым путем, например при прямом контакте с сифилитической язвой (твердым шанкром), также возможно внутриутробное заражение.

Источником инфекции является больной человек. Сифилис легкоизлечим, но грозит серьезными проблемами со здоровьем при бездействии. Инфицированная мать способна передавать заболевание своему плоду, у которого могут развиться серьёзные и необратимые изменения.

Сифилис относят к классическим заболеваниям, передающимся половым путем (венерическим болезням). Возбудитель – бледная трепонема (Treponema pallidum). Сифилис характеризуется медленным прогрессирующим течением. На поздних стадиях он может приводить к тяжелым поражениям нервной системы и внутренних органов

Симптомы сифилиса

Симптомы сифилиса очень разнообразны. Они меняются в зависимости от стадии заболевания. Выделяют три стадии сифилиса:

Первичный сифилис возникает после окончания инкубационного периода. В месте проникновения возбудителя в организм (половые органы, слизистая рта или прямой кишки) возникает безболезненная язва с плотным основанием (твердый шанкр). Через 1-2 нед после возникновения язвы увеличиваются ближайшие лимфатические узлы (при локализации язвы во рту увеличиваются подчелюстные, при поражении половых органов – паховые). Язва (твердый шанкр) самостоятельно заживает в течение 3-6 нед. после возникновения.

Вторичный сифилис начинается через 4-10 нед после появления язвы (2-4 мес. после заражения). Он характеризуется симметричной бледной сыпью по всему телу, включая ладони и подошвы. Возникновение сыпи нередко сопровождается головной болью, недомоганием, повышением температуры тела (как при гриппе). Увеличиваются лимфатические узлы по всему телу. Вторичный сифилис протекает в виде чередования обострений и ремиссий (бессимптомных периодов). При этом возможно выпадение волос на голове, а также появление разрастаний телесного цвета на половых органах и в области заднего прохода (широкие кондиломы).

Читайте также:  Сдать анализы на сифилис и консультация

Третичный сифилис возникает в отсутствие лечения через много лет после заражения. При этом поражается нервная система (включая головной и спинной мозг), кости и внутренние органы (включая сердце, печень и т. д.).

При заражении во время беременности у ребенка возможен врожденный сифилис.

Осложнения сифилиса

По результатам научных исследований, в отсутствие лечения примерно у трети больных развивается третичный сифилис. Примерно четверть больных из-за него погибает. Врожденный сифилис может приводить к тяжелым поражениям или смерти ребенка.

Лечение сифилиса

Достаточно сложное и требует дальнейшего длительного наблюдения. Стоит отметить, что лечение сифилиса на ранних стадиях не представляет особенной сложности с точки зрения выбора препаратов. Особенность бледной трепонемы заключается в том, что она все еще сохраняет чувствительность к пенициллину, который является препаратом выбора при сифилисе.

В случае аллергии на пенициллин назначают антибиотики из ряда макролидов (эритромицин,кларитромицин) или цефалоспоринов (цефтриаксон и тд). Препараты назначаются внутримышечно или в таблетках. Лечение активных форм заболевания проходит в стационарных условиях, пациенты с латентной формой могут получать амбулаторную терапию. Длительность лечения зависит от стадии заболевания и может занимать от нескольких недель до нескольких лет.

Антитела к возбудителю сифилиса

Когда происходит контакт человека с T. pallidum, его иммунная система реагирует, вырабатывая антитела к бактерии. В крови могут быть обнаружены два вида антител к бледной трепонеме: IgM и IgG. В ответ на инфицирование T. pallidum антитела IgM к T. pallidum вырабатываются организмом в первую очередь. Они выявляются у большинства пациентов в конце второй недели заболевания и присутствуют у них в первичную и вторичную стадию. Иммуноглобулины класса G к T. pallidum в определяемых количествах появляются в крови через 3-4 недели после инфицирования. Концентрация их нарастает и на 6-й неделе начинает преобладать над концентрацией IgM, достигая максимума, а затем сохраняется на определённом уровне в течение длительного времени. Начиная с 4-й недели в крови нарастает количество обоих видов иммуноглобулинов, что ведет к положительному результату теста на суммарные антитела к T. Pallidum. Это позволяет использовать данное исследование для ранней диагностики инфицирования T. pallidum. После эффективного лечения концентрация иммуноглобулинов постепенно снижается, но происходит это медленно, в отдельных случаях антитела могут обнаруживаться спустя год и более. От сифилиса можно избавиться с помощью антибиотиков, причём предпочтительно применять производные пенициллина. На ранней стадии заболевание лечится легче и быстрее. Более длительная терапия может понадобиться для пациентов, инфицированных больше года.

Зачем проводится анализ?

Повышение и понижение показателей

Для диагностики сифилиса. Для обследования всех беременных с профилактической целью (желательно на первом приеме гинеколога, при постановке на учет).

Когда назначается исследование? При симптомах сифилиса, таких как твердый шанкр на половых органах или в горле. Когда пациент лечится от другого ЗППП, например от гонореи. При ведении беременности, потому что сифилис может передаться развивающемуся плоду и даже убить его. Когда необходимо определить точную причину заболевания, если у пациента неспецифические симптомы, которые схожи с сифилисом (нейросифилисом). Если пациент инфицирован, он должен повторить анализ на сифилис через 3, 6, 12 и 24 месяца, чтобы убедиться, что лечение прошло успешно.

Результаты/Норма/Расшифровка анализа

Референсные значения (значения в норме)

Результат: отрицательно. Отношение S/CO (signall/cutoff): 0 — 0,9.

Положительный результат означает, что у пациента недавно приобретённое инфицирование. Вместе с тем отрицательный результат не всегда означает, что у пациента нет сифилиса.

Положительный результат

Положительный результат у ранее серонегативного пациента, а также значительный прирост титров в парных сыворотках, взятых с интервалом 7 дней, говорит о первичной инфекции. Обнаружение антител к трепонеме в крови новорождённого помогает подтвердить диагноз «врождённый сифилис». Кроме того, причиной положительного результата может быть третичный или скрытый сифилис.

Отрицательный результат

Отрицательный результат анализа может свидетельствовать об отсутствии инфицирования или слишком раннем его сроке, когда не выработался иммунный ответ. При этом отсутствие антител у младенца, родившегося от инфицированной матери, не исключает врождённого заболевания, поскольку на момент исследования антитела могут ещё не сформироваться.

Подготовка к сдаче анализа

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови

Что может повлиять на результат анализа?

Могут отмечаться ложноположительные результаты при таких заболеваниях, как ВИЧ, болезнь Лайма, малярия, системная красная волчанка, некоторые виды пневмоний, а также при наркомании и беременности. И многие другие соматические заболевания.

Важные замечания

  • Обследование на сифилис обязательно должно быть комплексным и включать в себя учёт анамнеза, клинической картины и подтверждение диагноза лабораторными данными.
  • Людям, ведущим активную сексуальную жизнь, необходимо консультироваться с врачом насчёт любых подозрительных высыпаний или болей в области половых органов.
  • Если у пациента выявлено инфицирование, ему необходимо поставить в известность и своего сексуального партнера (партнершу), чтобы он (она) тоже прошел обследование и при необходимости лечение.
  • При сифилисе риск заражения другими заболеваниями, передающимися половым путем, повышается, в том числе риск заражения ВИЧ, который ведёт к СПИДу.

• Сифилис может также передаваться при переливании крови через загрязненные медицинские инструменты, поэтому перед госпитализацией в стационар очень важно проводить обследование.

источник

В перечень стандартных диагностических мероприятий, применяемых для инфекционных заболеваний, входит иммуноферментный анализ. Если ИФА на сифилис положительный, не стоит сразу впадать в панику.

Рассмотрим подробнее особенности этой методики исследования и принципы расшифровки полученных результатов у разных категорий пациентов.

Иммуноферментный анализ является одним из наиболее распространенных методов диагностики инфекционных заболеваний. Он относится к категории трепонемных тестов, то есть с его помощью можно установить наличие в организме пациента возбудителя сифилиса – бледной трепонемы.

Методом ИФА сифилис обнаруживается благодаря выявлению антител к трепонеме. Они содержаться в крови больного, причем их тип и количество зависят от стадии и формы заболевания, что позволяет получить важную информацию о текущем состоянии здоровья человека.

Этот метод также применяется для диагностики других венерических и инфекционных заболеваний, в частности, аутоиммунных, паразитарных, системных и т. д.

ИФА очень часто назначается при подозрении на сифилис или другие инфекционные заболевания. Это обусловлено тем, что анализ позволяет выявить точный тип и стадию заболевания, причем его достоверность сохраняется на высоком уровне – вероятность ошибки по итогам многократного исследования составляет всего 1%, первичный ИФА имеет точность около 90%.

Использование качественных реактивов и современного оборудования позволяет максимизировать точность показателей.

В целом преимуществами метода являются:

  1. Высокая точность результата. Вероятность получения ложных данных очень мала.
  2. Минимизация человеческого фактора влияния. Современное оборудование для проведения ИФА исключает влияние человека на итоги исследования за счет автоматизации процесса.
  3. Выявление конкретных антител. Спутать антигены одного вида с другими невозможно, поэтому анализ показывает точный результат по конкретному диагнозу.
  4. Фиксация малейших отклонений от нормы. Даже самая незначительная концентрация патологических агентов не останется без внимания.

Не стоит забывать и о слабых сторонах этого метода. ИФА обладает следующими недостатками:

  1. Высокая цена. Высокая стоимость обусловлена многими факторами, в частности, необходимостью хорошего оборудования, качественных реагентов и специалистов с достаточным уровнем подготовки.
  2. Необходимость постановки предварительного диагноза. Нужно знать какие именно антигены искать, так как без дополнительных данных поставить точный диагноз будет невозможно.
  3. Вероятность ложноположительного результата. Некоторые состояния организма и прочие факторы могут исказить итоговые данные.

Врач может назначить проведение иммуноферментного анализа для диагностики не только сифилиса, но и ряда других инфекционных заболеваний.

Если рассматривать ситуацию непосредственно с заражением трепонемой, поводом для обследования могут стать:

  • появление внешних симптомов заболевания (шанкры, сифилитическая сыпь, гуммы и т.д.);
  • существенное понижение иммунитета;
  • выявление или подозрение на сифилис у полового партнера, близких и членов семьи;
  • положительная реакция при проведении других тестов;
  • выявление других заболеваний, которые могут быть связаны с сифилисом;
  • личное пожелание человека пройти обследование.

ИФА может проводиться разными способами. В каждом конкретном случае подбирается наиболее подходящий вариант.

В первую очередь, существует разделение методов на:

  1. Качественный. Выявляется наличие инфекции или вируса в организме пациента.
  2. Количественный. Определяет концентрацию антител к патогенному агенту в организме человека, что указывает на стадию и интенсивность развития заболевания.

Также существует классификация способов проведения ИФА по принципу воспроизведения необходимой реакции.

  1. Прямой. Меченные антитела вводятся в предоставленные образцы крови.
  2. Непрямой с антигенами. Предварительно производится размещение сорбированных антигенов в ячейки полистирольного планшета, предназначенного для проведения ИФА. Затем к ним добавляются антитела вирусов, что провоцирует образование иммунных комплексов, необходимых для дальнейшей оценки результатов.
  3. Непрямой с антителами. Для венерических заболеваний часто используется именно этот способ. Он предполагает предварительное сорбирование антител, лишь затем на планшет добавляют антигены.

Для того чтобы сократить риски получения недостоверных результатов, необходимо правильно сдать кровь для анализа.

Перед прохождением ИФА нужно соблюдать некоторые ограничения:

  • избегать интенсивных физических и эмоциональных нагрузок;
  • отказаться от курения и приема алкоголя минимум за 1 — 3 дня;
  • на несколько дней нужно перейти на правильное питание;
  • женщинам желательно контролировать фазу менструального цикла, так как гормоны способны исказить результаты;
  • последний прием пищи должен быть за 8 — 10 часов до сдачи крови;
  • за 10 дней исключается прием лекарств, которые могут повлиять на результаты исследования.

Для ИФА берется венозная кровь из локтевой вены, сдавать ее нужно утром натощак. В целом применяются стандартные правила подготовки к забору венозной крови. В зависимости от того наличие какого заболевания тестируется, могут вноситься дополнительные требования к предварительной подготовке пациента.


Инструкция по проведению ИФА достаточно проста:

  1. У пациента берется кровь из вены.
  2. Взятый материал проходит подготовку и разделяется на пробы на специальной мелкоячеистой палетке.
  3. Проводится смешивание антигенов с антителами по выбранной методике.
  4. Оценивается реакция. Пробы сравниваются с контрольными образцами, производится качественная и количественная оценка результатов.
  5. Данные заносятся в специальную таблицу с приложением количественных показателей (суммарные антитела).
  6. Лечащим врачом производится расшифровка результатов. При необходимости назначается соответствующее лечение.

После проведения исследований пациенту выдается документ с результатами. Он имеет вид таблицы с соответствующими обозначениями напротив каждого типа иммуноглобулина на пересечении с наименованиями инфекционных заболеваний.

Только специалист сможет грамотно расшифровать результаты анализов. Самостоятельно трудно разобраться, например, что означает результат ИФА к=1 4. Сифилис к тому же может протекать в разных формах, что также отражается на итоговых данных.

В результатах указываются 3 вида иммуноглобулинов:

  1. IgM. Позволяют определить срок заражения сифилисом. Положительный результат свидетельствует об обострении заболевания. Их отсутствие может указывать на ремиссию хронических патологий или скрытую форму болезни.
  2. IgA. Указывает на заболевание, с момента заражения которым прошло больше месяца. Также является признаком острой фазы болезни, причем как при обычных патологиях, так и запущенных хронических.
  3. IgG. Является признаком пикового периода заболевания, то есть его обострение. При сифилисе положительная реакция проявляется некоторое время после прохождения лечения. При некоторых видах заболеваний может быть признаком выработанного иммунитета.

Эти вещества вырабатываются организмом в определенной последовательности, что является дополнительным признаком болезни. При качественных тестах устанавливается лишь присутствие иммуноглобулинов в крови каждого типа.

Это выражается в изменении цвета материалов, участвующих в анализе. Количественные показатели являются вспомогательными, они более точно описывают ситуацию. Соотношение антигенов и антител указывает на степень тяжести заболевания и интенсивность ответных действий организма.

Если у пациента действительно имеется сифилис, положительный ИФА обнаруживается абсолютно всегда, не заметить присутствия трепонем при таком исследовании невозможно. Не стоит отчаиваться, заболевание хорошо поддается лечению, особенно на начальных стадиях.

Что необходимо делать при положительных результатах теста:

  • по показаниям врача пройдите дополнительные обследования;
  • пройдите курс антибиотикотерапии по выбранной схеме;
  • направьте усилия на укрепление иммунитета;
  • сообщите о заболевании своему половому партнеру;
  • в дальнейшем регулярно проходите профилактическую диагностику до момента снятия с учета в диспансере (через 5 лет при отсутствии положительных результатов анализов).

Не нужно откладывать уход на больничный и бояться огласки результатов. Диагноз шифруется и остается в секрете, лишь при угрозе инфицирования других людей необходимо сообщить о проблеме родственникам и половому партнеру, чтобы они прошли требуемые обследования.

Читайте также:  Сдать анализы на сифилис спб

Иногда фиксируется результат других тестов и ИФА ложноположительный на сифилис. Именно поэтому рекомендуется проводить 2 — 3 вспомогательных метода и через некоторое время повторять иммуноферментный анализ.

Подобные неточности встречаются редко, они обусловлены преимущественно такими факторами:

  • беременность;
  • хронические заболевания;
  • недавняя вакцинация;
  • травмы.

Ложноположительные результаты разделяют на острые и хронические, в зависимости от характера спровоцировавшего их фактора.

Основные из них представлены в таблице:

Организм реагирует воспалительным процессом, может произойти сопутствующее инфицирование. Интоксикация

Возникает при отравлении токсическими веществами или проникновении некоторых патогенных микроорганизмов. Инфаркт

Острые проблемы с сердцем создают существенную нагрузку на организм и вызывают ряд десенсибилизирующих реакций. Вакцинация

При подобных сбоях выработка иммуноглобулинов может быть необоснованной наличием антител. Болезни соединительной ткани

Преимущественно являются генетическими патологиями и иногда «сбивают» результаты обследований. Возрастные изменения

У пожилых людей иммунная система работает со сбоями, к тому же имеется множество хронических болезней.

При наличии подобных проблем со здоровьем тест на сифилис может показать положительный результат, но это является лишь следствием выработки организмом белков для борьбы с заболеванием. Однако ИФА распознает их, как антигены.

У здорового ребенка до полуторагодовалого возраста могут наблюдаться ложноположительные результаты ИФА, если женщина во время беременности была инфицирована сифилисом. До этого возраста кровь еще не успевает полностью обновиться, поэтому в ней могут присутствовать антитела матери. Исключение составляет ситуация с обнаружением иммуноглобулинов IgM.

Больше информации об особенностях иммуноферментного анализа и методике его проведения вы можете узнать, посмотрев видео в этой статье.

источник

ИФА анализ — что это такое, расшифровка иммуноферментного анализа крови на паразитов, сифилис, ВИЧ, туберкулез. Норма в таблице, результаты

Благодаря развитию современной медицины, врачу при постановке диагноза больше не нужно ориентироваться на косвенные проявления заболеваний или проводить многоступенчатые лабораторные исследования. Достаточно провести один анализ, который подтвердит или опровергнет предполагаемый первоначальный диагноз.

Таким методом является иммуноферментный анализ (ИФА) — это исследование позволяет обнаружить специфические антитела и антигенны свойственные при разнообразных патологиях, что во многом ускоряет установку диагноза.

ИФА анализ — это такое лабораторное исследование (метод), которое помогает определить присутствие или отсутствие определённых антител в организме для борьбы с вирусом и их количество.

Основой исследования является естественная реакция антиген (вредоносный организму объект) – антитело (белок уничтожающий вредоносные объекты), позволяющая выявить присутствие разнообразных вирусов, бактерий.

ИФА представляет собой естественный иммунный ответ организма – взаимодействие антитела с соответствующим антигеном. Так во время ИФА в пробирку с материалом добавляются поочередно антигены или антитела, после чего происходит выявление концентрации получившихся комплексов антиген-антитело.

Если совпадения образовались, то возникают иммунные комплексы, далее происходит ферментная реакция красящего вещества с объединённой молекулой. Именно благодаря изменению цвета в ходе ферментативной индикации происходит идентификация заболевания после исследования уровня определяемого соединения.

Иммуноглобулины человека дифференцируются на несколько классов, отличающихся друг от друга свойствами, структурой и антигенными особенностями тяжелых цепей (Н-цепи). У всех млекопитающих, в том числе и человека, выделяют пять Н-цепей, которые и определяют принадлежность иммуноглобулинов к соответствующему классу: G, М, A, D, Е.

Каждый класс отличается друг от друга биологическими свойствами, и способностями связывать антигены, и скоростью и прочностью связи с молекулой.

Функции каждых иммуноглобулинов (lg) различны:

Кол-во в организме Функции Период полураспада (дней) Значение
G 70% Формируют пассивный иммунитет у новорожденного;

необходимы для иммунного ответа

улучшают фагоцитоз,

21-24 обеспечивают длительный гуморальный иммунитет при инфекционных заболеваниях
М 5-10% нужны для активации фагоцитоза,

способны связать 5 молекул антигена,

5 Обеспечивает первичную иммунную реакцию
А 10-15 Нейтрализуют токсины и вирусы

нужны для формирования раннего иммунитета

Образование местного иммунитета

4-5 Защита слизистых оболочек
Е 0,2% вызывают аллергию и анафилаксию активируют тканевые базофилы 2 Защита от паразитов
D 0,2% задействованы в выработке лимфоцитов, необходим как мембранный рецептор для антигенов; 3 Их роль малоизучена

Возникновение иммуноглобулинов происходит по своеобразной «цепочке» — lgM lgG, именно так реагирует организм на появление в организме антигена. Во время лабораторной диагностики проводится оценка концентрации трех основных иммуноглобулинов – G, M, A.

ИФА-анализ с каждым годом становится все более популярным.

Такое исследование ускоряет постановку диагноза, а это очень важно для терапии таких патологий как:

  • вирусный гепатит;
  • ВИЧ-инфекция;
  • цитомегаловирус,
  • вирус Эпштейна-Барр,
  • вирус герпеса,
  • корь
  • краснуха,
  • туберкулез,
  • сальмонеллёз,
  • дизентерия,
  • клещевой энцефалит,
  • бактерии хеликобактер,
  • боррелиоз,
  • столбняк,
  • сифилис,
  • дифтерия,
  • лептоспироз,
  • хламидиоза,
  • уреаплазмоз,
  • микоплазмоз,
  • коклюш.

Так же анализ позволяет определить инфицирование паразитами:

  • плоскими червями
  • аскаридами
  • гистолическими амебами,
  • печеночными тремадами,
  • лямблиями,
  • токсоплазмами,
  • трихинеллами,
  • двуусткой,
  • цестодозами.

ИФА является своеобразным маркером аутоиммунных патологий и злокачественных новообразований.

При подготовке к исследованию следует придерживаться таких правил:

  • за сутки до забора крови нельзя курить и употреблять алкоголь,
  • не заниматься спортом или другими физическими нагрузками,
  • стараться не допускать стрессов,

Перед тем как сдать ИФА анализ, нужно избегать стрессов.

  • прекратить употребление лекарственных средств не позже чем за 10 дней до манипуляции.
  • Так же врачи рекомендуют придерживаться специальной диеты – исключить жирную и жареную пищу, а если исследование проводится на гепатиты, то необходимо не употреблять любые оранжевые овощи и особенно цитрусовые. Сдавать кровь следует с утра на голодный желудок.

    Ложноположительным анализ бывает из-за невыполненных рекомендаций, особенно употребления жирной пищи, что приводит к слишком большой концентрации триглицеридов в плазме, из-за чего проводимость ИФА снижается.

    В качестве исследуемого материала может использоваться цельная кровь, сыворотка или плазма венозной крови. Забор материала, обычно проводится из локтевой вены, для этого применяется одноразовая игла и вакуумная пробирка, необходимо 5-10 мл крови.

    Для точности результата важно придерживаться правильной техники взятия пробы – прокол самого сосуда и окружающих тканей должен быть произведен одной манипуляцией, поэтому используется короткая игла с большим диаметром, благодаря чему не травмируется противоположная стенка вены и не повреждаются эритроциты.

    Так же для сохранения целостности эритроцитов, нужно чтобы кровь стекала по стенкам пробирки.

    Во время хранения материала следует избегать возможной его ионизации, кроме того материал не должен контактировать с остатками дезинфицирующих средств, поэтому используется только одноразовая пластиковая пробирка, с маркировкой ФИО пациента, датой и временем сдачи материала.

    Если необходимо непродолжительное хранение исследуемого материала, то используется холодильная камера с температурой 2-4 о С, если необходимо более продолжительное хранение, то материал замораживается при температуре -20 о С.

    После подготовки исследуемого материала врач-лаборант приступает к необходимым манипуляциям. Для этого используются ряд специальных наборов антигенов, обдающих свойством спровоцировать ответные реакции организма на раздражитель, это разнообразные инфекции, гормоны, аллергены.

    Схема ожидаемой реакции «антиген-антитело» выглядит приблизительно так:

    • Первичная реакция — определяемый Ig (Ab) и очищенный антиген возбудителя (Ag).
    • Для обнаружения получившихся иммунных комплексов далее следует новая иммунологическая реакция, где антигеном выступает связанный специфический Ig, а антителом для него выступает коньюгат- Ig (Ab).
    • Последний этап — ферментативная реакция, вместе с катализатором молекулой коньюгата. Субстратом выступает хромоген (не окрашенный), который в процессе протекания реакции окрашивается, и интенсивность цвета и определяется количественный показатель иммуноглобулина в пробе.

    В настоящий момент разработано множество разнообразных вариантов ИФА, четкая классификация их отсутствует. Обычно, методы рассматриваются исходя из разделения её на гетеро- и гомогенные — все фазы анализа происходят с применением твердой фазы или с использованием только раствора.

    Современные клинико-диагностические лаборатории обычно используют гетерогенный (твердофазный) ИФА, в нем под твердой фазой подразумевается абсорбция антигенов или антител на твердой поверхности специальных лунок, расположенных на полистироловом микропланшете, метод подразделяется на прямой и непрямой ИФА.

    При прямом ИФА, вносимый антиген закрепляет в период инкубационного процесса на поверхности пустых лунок, для этого исследуемые пробы материал помещают в чистые лунки на 20-25 минут, это нужно для прикрепления антигена к их поверхности. После этого происходит добавление необходимого антитела. Далее материал остается на определенное время для образования связей.

    Антитела всегда добавляют в избытке, поэтому даже при их наличии в пробе остаются не связанные антигены, а если антигенов нет совсем, то связей не будет. Чтобы удалить«лишние» антитела проводится декантация, после чего остаются только те антитела, которые создали связь с антигеном.

    После этого следует ферментативная реакции – добавление в лунки раствора с ферментом, после чего происходит окрашивание полученных связей.

    При непрямом методе ИФА используемые антитела, заранее соединенные с субстратом ферментативной реакции; в этом случае связь антител с антигеном происходит в период инкубационного процесса, после чего происходит мобилизация связей на поверхности лунок, а вносимый после конъюгат и субстратно-хромогенный реагент окрашивают реакцию.

    Таким образом, главным отличием непрямого от прямого метода является не приклеивание материала к поверхности чистых лунок, а связывание с антигеном, иммобилизованным на планшете.

    Останавливается протекание реакции с применением специализированных устройств, далее каждая лунка подвергается процессу фотометрирования, за которым следует сравнительная характеристика полученного результата с проведенными ранее контрольными пробами.

    Если обнаруживается повышение оптической плотности в пробе, то завышена и концентрация специфических антител в исследуемом результате.

    Проведение исследования не занимает много времени, от забора крови до получения результата проходит от 1 до 10 дней, в зависимости от диагностических мероприятий.

    На полученном пациентом бланке-результате диагностики указывается отрицательный либо положительный результат на определенные классы иммуноглобулинов, так же указывается количественный показатель различных классов антител.

    Возможны различные интерпретации результатов:

    1. IgM (+) (IgA, IgG не определялись) – процесс выздоровления;
    2. IgM (-) ;IgG (+), IgA (+) – хроническая инфекционная патология;
    3. IgM, IgG, IgA (все с – значением) – отсутствие защитных механизмов к инфекциям;
    4. IgG (+/-) и IgA (+/-), IgM (+) – острый процесс;
    5. IgM (-), IgA(-),IgG(+) – постинфекционный иммунитет;
    6. IgM, IgG, IgA (+) – хроническая патология в стадии обострения.

    Так, например, если были обнаружены IgG и IgM, то возможно у пациента одно из таких заболеваний:

    • вирусный гепатит;
    • цитомегаловирус;
    • герпес;
    • ветряная оспа;
    • хламидиозом;
    • стафилококковая или стрептококковая инфекция.

    Иммуноферментный анализ часто назначается при гормональных исследованиях, нормы показаны в таблице:

    Название гормона Пол Норма
    1 тиреоглобулин м/ж До 70 МЕ/мл
    2 тироксин м/ж 64-146 нмоль/л
    3 трийодтиронин м/ж 1,8-2,8 нмоль/л
    4 Свободный тироксин м/ж 11-25 пмоль/л
    5 Свободный трийодритонин м/ж 4,49-9,3 пмоль/л
    6 Тестостерон, дегидротестостерон Ж 0,5-10 мЕд/л

    ИФА анализ — это такое диагностическое исследование, которое позволяет оценить вероятность образования онкологических патологий. Однако интерпретация результатов проводится только лечащим врачом.

    ИФА подходит для выявления разнообразных форм половых инфекций, в том числе сифилиса, часто используется и для скрининга беременных.

    Благодаря этому исследованию можно узнать, как давно произошло заражение и стадия заболевания на момент исследования:

    • иммуноглобулины М говорят о длительности заболевания;
    • IgA — пациент заразился более 30 дней назад;
    • IgG обнаруживается на «пике» заболеваний, или же в тот момент, когда терапия окончилось недавно.

    В процессе исследования лунки на планшете с отрицательным показателем остаются бесцветные, а положительные окрашиваются в ярко-желтый цвет. Если цвет положительных лунок не совпадает с цветом контроля, то результат считается сомнительным и необходимо повторное исследование.

    Иммуноферментный анализ — это первая ступень в диагностике ВИЧ. Проводить анализ нельзя сразу же после предполагаемого заражения необходимо дождаться окончания инкубационного периода (от 14 дней до 6 месяцев).

    В ходе анализа определяются антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, происходит поиск АТ класса G, который обычно появляется на более поздних сроках и АТ класса А и М, они могут быть определены на ранних стадиях (во время инкубационного периода).

    При получении положительных проб далее следует:

    • если первый тест дал положительный результат, то кровь вновь перепроверяется другим лаборантом;
    • повторный положительный результат предполагает пересдачу материала,
    • при повторении результата, пациенту назначается иммуноблотинг.

    Окончательный вывод о наличии ВИЧ-инфекции выдается только после результата иммуноблотинга.

    ИФА также применяется в качестве диагностического исследования туберкулеза, но если у пациента даже и были выявлены антитела к данной патологии, то это не всегда подтверждает наличие у него туберкулеза, поэтому ИФА часто применяется качестве уточняющей методики, либо же для диагностики скрытой внелегочной формы.

    ИФА анализ — это такое исследование, позволяющее обнаружить у пациента заражения паразитами и простейшими, в ходе диагностики можно определить даже время заражения.

    Цитомегаловирус IgM обнаруживаются через 30-45 дней после заражения, либо во время реактивации инфекции в течение 4-6 месяцев

    источник