Анализы пцр на сифилис в

Сифилис – это хроническое системное инфекционное заболевание, при котором поражается кожа, слизистые оболочки, органы и в конечном итоге – нервная система.

Возбудитель заболевания — Treponema pallidum. Считается «не живучей», но во влажной биологической среде может сохраняться длительное время (сперма, гной, слизь, влагалищный секрет).

Болезнь может передаваться через интимную связь, предметы личной гигиены больного сифилисом, от матери к плоду или через зараженную кровь при переливании.

Инфекции, что передаются половым путем (хламидиоз, герпес, папилломавирусная инфекция) и разнообразные повреждения слизистой оболочки при анальных контактах способны повышать вероятность заболевания сифилисом.

Заразиться от больного сифилисом человека можно в каждый из периодов протекания болезни. Наиболее инфекционными принято считать первичный и вторичный сифилис,когда явны сифилитические активные высыпания на коже или слизистой оболочке.

В таком случае Бледная трепонема попадает внутрь организма через мелкие повреждения кожи сначала в лимфатические сосуды, а потом – в лимфатические узлы, откуда уже возбудитель сможет распространиться в органы и определятся в слюне, молоке, сперме и других биологических средах.

При первых подозрительных симптомах, врач назначает исследование крови. В иных случаях врач может настаивать на обследовании даже при отсутствии внешних признаков заражения.

Анализ на наличие сифилиса совершают в случаях:

Донорского забора крови;
Трудоустройства в учреждения, связанные с дошкольным воспитанием, общественным питанием, здравоохранением;
Госпитализации;
Общения с людьми группы риска (чаще всего это наркоманы или заключенные).

Поскольку на некоторых стадиях болезни результаты анализов крови могут показывать отрицательные результаты (или в период выздоровления – ложноположительные), существует несколько видов анализов крови для обнаружения сифилиса в организме.

Специалисты рекомендуют использовать несколько разных анализов для точного определения наличия или отсутствия болезни в организме.

Исследование начинается из первого посещения врача и результатов скрининговых диагностик.

Поскольку при заболевании сифилисом в организме человека вырабатывается огромное количество антител, то на принципе их обнаружения построены серологические исследования.

Виды анализов крови на сифилис:

Анализ Вассермана
Реакцию РИБТ
ИФА
Исследование РПГА
ПЦР

Первый вид – анализ Вассермана сдают беременные женщины, доноры крови или просто люди, которым необходимо пройти медкомиссию.

Такой вид исследования дает возможность не только обнаружить сифилис, но и узнать приблизительное время заражения.

Принцип работы анализа крови прост: при положительном результате проявляются антитела, которые в количественном числе вырабатываются при попадании в организм бледной трепонемы.

Правда, иногда результаты могут быть ложноположительными – это, как правило, происходит во время сильного ослабления иммунитета (после перенесения тяжелых заболеваний крови, печени или во время беременности).

По этой причине специалисты часто назначают повторное исследование другого вида.

Другой вид – реакция РИБТ отличается от первого способа тем, что РИБТ обладает высокой специфичностью и чувствительностью.

Ее часто используют при распознавании скрытого сифилиса, поскольку она может отсеять осадочные реакции от истинных, что проявляются при анализе Вассермана.

Также такой вид анализа крови принято считать критерием излеченности сифилиса. Отрицательный результат РИБТ обозначает исчезновение специфических антител из сыворотки.

Третий вид – ИФА (расшифровывается как иммуноферментный анализ). Суть этого вида анализа крови на наличие сифилиса состоит в его возможности определить активность антител (титр).

Диагностика ИФА используется при подозрении на инфекционные заболевания разной локализации для определения стадии патологического процесса; для определения уровня гормонов при исследовании возможных патологий эндокринных органов; для выяснения причин интоксикации при укусах змей, отравлениях.

Четвертый вид — РПГА. Чаще всего анализ назначается для подтверждения сифилиса на любой из стадий. Принцип его исследования основан на определении агглютинацииэритроцитов, на которых имеются гены бледной трепонемы.

Пятый вид – ПЦР. Суть метода раскрывается уже в расшифровке «полимерная цепная реакция».

Этот метод имеет преимущество – он может определять ДНК, РНК даже в тех случаях, когда иным способам анализа это не под силу. Это делает его мощным и эффективным видом лабораторного исследования инфекционных заболеваний.

Сдать анализ на сифилис можно в любом государственном или приватном учреждении.

Разница между ними может сказываться только на цене и времени, которое вам придется тратить при сдаче анализов и ожидании результатов.

Большое количество пациентов выбирают частные клиники из-за отсутствия очередей, подборе квалифицированного персонала и индивидуальном подходе к клиенту.

Цени на разные виды анализов отличаются, но в целом остаются доступными. Можно пройти исследование за оплату от 240 руб.

Реакцию Вассермана можно сделать почти у всех частных и государственных клиниках:

Лаборатория «Invitro» предоставляет такую услугу за 370 руб. + взятие крови из вены – 199 руб.
Клиника «Onclinic» — от 400 руб.
Лаборатория«Гемотест»- 545 руб. с взятием биоматериала.

Лаборатория «Onclinic» — от 1300 руб.
МедЦентр Сервис — от 350 руб.
КВД (кожно венерологический диспансер) — от 300 руб.

источник

Диагностика сифилиса методом ПЦР получило широкое распространение в практической медицине, в частности в дерматовенерологии.

Как проводится исследование?

ПЦР на сифилис основывается на выявлении генетического материала ДНК возбудителя данной половой инфекции – специфической бактерии бледной трепонемы (Treponema pallidum) в исследуемом материале. Реакция представляет собой множественное копирование нуклеотидных оснований (амплификация) с их накоплением и последующей идентификацией. Для проведения анализа используется различный биологический материал, выбор которого зависит от стадии течения сифилиса.

ПЦР диагностика сифилиса проводится не всегда, а по определенным медицинским показаниям.

Диагностика серонегативного сифилиса, который характеризуется развитием инфекционного воспалительного процесса в органах половой системы без образования антител в крови. По этой причине другие исследования (РМП, реакция Вассермана) могут быть ложноотрицательными.
Выявление нейросифилиса – патологический процесс, который характеризуется попаданием возбудителя в структуры центральной нервной системы с их поражением.
Диагностика врожденного сифилиса, при котором бледная трепонема проникает в организм развивающегося плода от зараженной беременной женщины.
Выявление сифилиса при других патологических состояниях, сопровождающихся снижением функциональной активности иммунитета (вторичный иммунодефицит при развитии СПИДа) – в основном используется исследование ПЦР ВИЧ, сифилис.

Определяет целесообразность данного метода лечащий врач на основании результатов клинического обследования, а также лабораторных и инструментальных методов диагностики.

Первичный сифилис методом ПЦР диагностируется при помощи исследования биологического материала, взятого со слизистых оболочек в области возможного проникновения возбудителя. Для этого у женщин берется мазок со слизистой оболочки уретры (мочеиспускательный канал), влагалища и шейки матки. У мужчин материалом для исследования служит мазок из уретры.

После незащищенного орального секса также может исследоваться мазок со слизистой оболочки рта, а после анального секса – со слизистой оболочки прямой кишки. В сомнительных случаях дополнительно может исследоваться моча у мужчин и женщин, а также сперма и простатический сок у мужчин.

Поздние стадии развития инфекционного процесса характеризуются проникновением бледной трепонемы в кровь и ее распространением в организме с поражением структур нервной системы, внутренних органов.

В этом случае проводится ПЦР крови. Сифилис выявляется таким способом не всегда, поэтому исследование проводится совместно с другими методиками лабораторной диагностики.

ПЦР является высокочувствительным и специфическим методом исследования, при котором для выявления и идентификации бледной трепонемы достаточно наличие единичных клеток бактерий в исследуемом материале.

Эффективность такой диагностики сифилиса достигает 98%. В сомнительных случаях врач обязательно назначает дополнительные методики диагностики, включающие серологические, бактериологические исследования, а также микроскопию.

Выявить заболевание даже на ранней стадии можно в нашей клинике.

источник

ПЦР на сифилис – это высокоточный метод диагностики заболевания, основанный на новейших достижениях молекулярной биологии. Чаще всего для выявления возбудителя в организме человека используется ДНК патогена, но в последнее время появилась возможность работать и с РНК возбудителя.

Благодаря практически 100% вероятности выявления вида микрофлоры, ПЦР считается «золотым стандартом» в диагностике практически всех инфекционных заболеваний. С этого метода, как правило, обычно начинается диагностика инфекционных заболеваний, в том числе и сифилиса.

В данной статье мы разберем технологию проведения пцр, плюсы и минусы метода, а также узнаем как расшифровываются результаты при сифилисе.

ПЦР – это полимеразная цепная реакция, используемая для работы с генетическим материалом, в частности с дезоксирибонуклеиновой кислотой. ДНК является внутренней структурой каждого организма, хранящей всю информацию о нем.

Для выявления вида патогенной микрофлоры при проведении ПЦР на любое инфекционное заболевание, в том числе и сифилис, достаточно минимального фрагмента возбудителя. Оборудование современных клинических лабораторий позволяет досконально исследовать клеточную ДНК.

Для проведения анализа биологический материал проходит следующие этапы обработки:

внутренний генетический материал патогенного микроорганизма многократно синтезируется (клонируется), увеличивая количество имеющихся один или несколько фрагментов ДНК в миллионы раз. Для этого пробирки с материалом помещаются в специальные приборы, где по сложному алгоритму происходит изменение температуры. Таки образом оказывается влияние на процесс синтезирования. Через определенное время после завершения реакции можно получить результат о выявленном генетическом материале;
из всей массы полученной ДНК берется образец и сравнивается с эталоном (маркером или праймером). Такой анализ позволяет выявить наличие генетического материала, идентичного эталонному. Визуализация результата зависит от разновидности метода. Это может быть ультрафиолетовое облучение, использование геля в качестве основы для электрофореза, оценка на скорость реакции в реальном времени и другие способы.

Методика также позволяет провести количественный анализ ПЦР. Для этого высчитывается, сколько материала приходится на единицу количества клеток в содержащемся образце.

В настоящее время количественное определение возбудителя сифилиса методом полимеразной цепной реакции не проводится. Это связано с тем, что количество возбудителя в мазках или другом материале может ежедневно изменяться под влиянием защитных сил организма, предпочтений в питании, сексуальных связей и других факторов.

В случае необходимости методом ПЦР также можно выявить генетические особенности пациента, которые могут повлиять на течение заболевания. Это исследование поможет подобрать наиболее эффективные методы терапии.

Метод цепной полимерной реакции имеет ряд преимуществ перед другими способами диагностики сифилиса. Для пациентов большое значение имеет невысокая стоимость исследования.

А для врачей наибольшую ценность имеют такие показатели:

высокая оперативность. Результат исследования можно получить в течение одного дня. ПЦР позволяет синтезировать единичную молекулу патогена в течение 3 минут. Для получения нужного количества материала для качественной визуализации и постановки точного диагноза достаточно 30-40 циклов. Такой метод позволяет за короткий промежуток времени выявить микрофлору, для роста и развития которой в обычных условиях в целях идентификации потребуется намного больше времени;
специфичность. Для получения достоверных результатов анализа ПЦР на сифилис для определения инфекции достаточно присутствие одного фрагмента возбудителя. Также полимеразный анализ, в случае необходимости, дает возможность одновременно выявить и другие болезнетворные организмы;
сверхчувствительность. Методика позволяет обнаружить патогенную микрофлору в организме даже тогда, когда другие методы диагностики не выявили присутствия или следов возбудителя болезни;
высокая точность. Диагностическая ценность полимеразной реакции достаточно высокая и составляет 98%;
избирательность метода. ПЦР позволяет идентифицировать ДНК конкретного микроорганизма в присутствии генной информации миллионов других носителей.

Полимеразная цепная реакция позволяет обнаружить ДНК бледной трепонемы и, следовательно, наличие самой патогенной микрофлоры, а не антитела или другие следы присутствия возбудителя, которые могут оставаться в организме длительное время после лечения сифилиса. Поэтому после излечения в контрольных анализах присутствия дезоксирибонуклеиновой кислоты быть не должно.

В случае заражения инфекцией анализ ПЦР становится положительным на порядок раньше, что помогает своевременно обнаружить не только сифилис, но и другие опасные инфекции. Этот факт имеет большое значение в раннем выявлении заболевания, когда важную роль играет время начала лечения и присутствует высокая опасность стремительного распространения патологии в силу повышенной заразности.

Для получения достоверных результатов лаборатория должна иметь современное высокотехнологичное оснащение. Также обязательно наличие фильтра биологического очищения воздуха, чтобы патогенный материал не попал в образцы других пациентов.

Преимущества метода ПЦР в ранней диагностике инфекционных заболеваний, передающихся при половых контактах, очень важны в раннем выявлении такого высоко заразного заболевания, как сифилис.

К недостаткам метода можно отнести влияние человеческого фактора. Забор материала для анализа и само исследование должны проводиться в строгом соответствии с инструкцией.

Для полимеразной реакции на сифилис врач может назначить исследование крови, смывов, соскобов. Но наибольшей популярностью пользуется анализ мазков из урогенитальных путей. Это связано с тем, что именно в этом материале легче всего обнаружить присутствие возбудителя в высокой концентрации.

источник

Внимание: для получения достоверных результатов, данный вид исследования должен проводиться не ранее, чем через 2 недели после последнего приема антибактериальных препаратов.

Не рекомендуется взятие биоматериала ранее 24-48 часов после полового контакта.

Соскоб из уретры (для мужчин): рекомендуется сдавать через 2 часа после последнего мочеиспускания.

Соскоб из урогенитального тракта (для женщин):

во время менструации;
ранее 5 дней после использования вагинальных свечей, тампонов или спермицидов;
после вагинального исследования (УЗИ малого таза, кольпоскопия), спринцевания;

» [«opisanie»]=> string(3320) «

Сифилис — инфекционное заболевание, вызываемое бледной трепонемой (Treponema pallidum), передаваемое преимущественно половым путем. Заболевание характеризуется поражением кожи, слизистых оболочек, нервной системы, внутренних органов и опорно-двигательного аппарата, может протекать в скрытой форме. Продолжительность инкубационного периода в среднем составляет от 2 недель до 2 месяцев.

В диагностике заболевания применяют прямые методы (обнаружение возбудителя или его ДНК) и косвенные методы лабораторной диагностики (выявление в крови специфических антител).

Косвенные методы определения подразделяются на нетрепонемные (RPR, РМП) и трепонемные (ИФА, ИХЛА, РПГА, РИФ, иммуноблотинг).

Обнаружение ДНК Treponema pallidum методом ПЦР в соскобах эрозивно-язвенных элементов информативно на ранних стадиях заболевания (первичном и вторичном сифилисе). В качестве образца используется серозное отделяемое сифилидов, в связи с этим тест не информативен на стадии разрешения элементов. Тест необходимо проводить одновременно с определением антител в крови (методы RPR, РПГА, ИФА).

Референсные значения (вариант нормы):

Параметр	Референсные значения
ДНК Treponema pallidum	Не обнаружено

Выявление ДНК Treponema pallidum является подтверждением сифилиса.

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» от 21 ноября 2011 года, должны производиться врачом соответствующей специализации.

» [«serv_cost»]=> string(3) «365» [«cito_price»]=> NULL [«parent»]=> string(2) «25» [10]=> string(1) «1» [«limit»]=> NULL [«bmats»]=> array(4) array(3) string(1) «N» [«own_bmat»]=> string(2) «12» [«name»]=> string(118) «Отделяемое пузырьковых высыпаний и эрозивно-язвенных поражений» > [1]=> array(3) string(1) «N» [«own_bmat»]=> string(2) «12» [«name»]=> string(51) «Соскоб/отделяемое из уретры» > [2]=> array(3) string(1) «N» [«own_bmat»]=> string(2) «12» [«name»]=> string(78) «Соскоб/отделяемое из цервикального канала» > [3]=> array(3) string(1) «N» [«own_bmat»]=> string(2) «12» [«name»]=> string(57) «Соскоб/отделяемое из влагалища» > > >

Биоматериал и доступные способы взятия:

Тип	В офисе
Отделяемое пузырьковых высыпаний и эрозивно-язвенных поражений
Соскоб/отделяемое из уретры
Соскоб/отделяемое из цервикального канала
Соскоб/отделяемое из влагалища

Подготовка к исследованию:

Не рекомендуется взятие биоматериала ранее 24-48 часов после полового контакта.

Соскоб из уретры (для мужчин): рекомендуется сдавать через 2 часа после последнего мочеиспускания.

Соскоб из урогенитального тракта (для женщин):

во время менструации;
ранее 5 дней после использования вагинальных свечей, тампонов или спермицидов;
после вагинального исследования (УЗИ малого таза, кольпоскопия), спринцевания;

Референсные значения (вариант нормы):

Параметр	Референсные значения
ДНК Treponema pallidum	Не обнаружено

Выявление ДНК Treponema pallidum является подтверждением сифилиса.

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Центральный офис: 111123, Россия, Москва, ул. Новогиреевская, д.3а, метро «Шоссе Энтузиастов», «Перово»
+7 (495) 788-000-1, info@cmd-online.ru

! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

источник

Сифилис – заболевание инфекционной природы, обусловленное спирохетой Treponema pallidum, склонное к прогредиентному хроническому течению, с чёткой периодизацией клинической симптоматики.

Преобладание полового пути передачи над контактным и трансплацентарным ставит это заболевание в ряд венерических (ЗППП, ИППП). Помимо указанных способов передачи инфекции особую роль играет артифициальный путь (от лат. «artificio» — искусственно созданный).

Он характерен для медицинских учреждений, в основном, реализуется в условиях стационара. Инфицирование происходит при гемотрансфузиях, различных хирургических операциях, инвазивных диагностических методах.

Несмотря на карантинизацию донорской крови, проблема выявления сифилиса у доноров на разных стадиях заболевания все ещё актуальна.

Поэтому диагностические мероприятия при сифилисе требуют стандартизации, внедрения новых чувствительных и информативных методов идентификации, а также сведения к минимуму ошибок и неправильной трактовки результатов анализов.

Классификация методов лабораторной диагностики

Диагностика сифилиса имеет некоторые особенности и отличается от диагностики других бактериальных инфекций. Сложное строение и антигенные свойства бледной трепонемы обусловливают ошибки в интерпретации результатов серологических реакций.

Сдать анализ крови на сифилис предлагают 3 основным группам пациентов:

Скрининг и диспансеризация групп населения (в том числе и беременность, постановка на учет в женской консультации, поступление на работу и оформление медкнижки и так далее).
Скрининг в группах риска (незащищенные половые контакты с человеком, инфицированным сифилисом, лица после принудительных сексуальных контактов, ВИЧ-инфицированные и так далее).
Лица, имеющие симптомы заболевания, или лица с подозрением на сифилитическую инфекцию.

Все лабораторные методы условно подразделяют на прямые и непрямые.

Серологические реакции — это методы лабораторной диагностики, базирующиеся на обнаружении антител (сокращенно АТ) к антигенам бледной трепонемы (сокращенно АГ). Они имеют основное значение для подтверждения диагноза.

Нетрепонемные тесты:
- Реакция Вассермана (РСК);
- Реакция микропреципитации (МР, РМП) и ее аналоги, которые приведены ниже;
- Тест быстрых плазменных реагинов (RPR, РПР);
- Тест с красным толуидином и сывороткой (TRUST);
- Нетрепонемный тест Лаборатории исследования венерических болезней — VDRL.
Трепонемные тесты:
- Р-ция иммобилизации Treponema pallidum – РИБТ/РИТ;
- Р-ция иммунофлюоресценции – РИФ, FTA (разведения сывороток РИФ-10, РИФ-200, РИФ-абс);
- Р-ция пассивной гемагглютинации (РПГА, ТРПГА, TPHA);
- Иммуноферментный анализ (ИФА, EIA);
- Иммуноблоттинг.

Эти методы сводятся к выявлению особенностей гистоморфологии сифилитических проявлений. Внимание уделяется тонкостям строения твёрдого шанкра. Однако, дифференциальная диагностика инфекции с помощью гистологии весьма затруднительна. Гистоморфология используется с другими лабораторными и клиническими тестами.

Микроскопия Treponema pallidum в тёмном поле

Этот метод основывается на непосредственном обнаружении бледной трепонемы в исследуемом материале с помощью микроскопа и специальных приспособлений (чаще всего отделяемое эрозий и язв, реже спинномозговая жидкость и другие субстраты).

С помощью скарификации, соскоба, сдавливания с эрозий и язвенных дефектов получают экссудат, затем исследуют в микроскоп подготовленный препарат.

Обычно бледные трепонемы выявляют в препарате, полученном из шанкра, из очагов вторичного свежего, вторичного рецидивного сифилиса, а также пунктата лимфоузлов, плаценты.

Основанный на феномене свечения мелких частиц в тёмном поле при попадании луча света (феномен Тиндаля), метод прекрасно позволяет дифференцировать возбудителя сифилиса от других трепонем на основании морфологических отличий и отличий в способах передвижения бактерии.

Для микроскопии используют специальный темнопольный конденсор соответствующего оптического разрешения. Препарат получают способом раздавленной капли (каплю материала наносят на чистое обезжиренное предметное стекло и закрывают очень тонким покровным).

На покровное стекло капают иммерсионное масло. С помощью поворота тубуса и поворота увеличивающей линзы регулируют нужное освещение.

В тёмном поле микроскопа обнаруживаются клетки крови, эпителиальные клетки и сам возбудитель сифилиса. Бледная трепонема выглядит как спираль, очень тонкая, излучающая серебристый цвет, с плавными движениями.

Treponema pallidum необходимо отличать от других трепонем, в том числе и Tr. refringens, которая может содержаться в ротоглотке и на слизистой половых органов. Эта бактерия совершает хаотичные движения, имеет широкие и несимметричные, довольно грубые завитки. Кроме того, Treponema pallidum отличают от Tr. Microdentium, Tr. Buccalis и Tr. vincenti.

Визуализация бактерий в тёмном поле иногда дополняется реакцией флюоресценции. Для этого меченые флюоресцирующим красителем противотрепонемные АТ добавляют в нативный материал. При этом образуется комплекс, называемый антиген-антитело (сокращенно АГ-АТ), который и является объектом для исследования с помощью люминесцентного микроскопа.

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР)

ПЦР, разработанная в 1991 году для обнаружения молекулы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) бледной трепонемы, является высокочувствительным и специфичным, позволяет выявить фрагменты ДНК возбудителя.

Базируется данный анализ на копировании коротких участков ДНК бледной спирохеты, который удовлетворяет заданным параметрам и присутствует в образце. Всё это выполняется в искусственных условиях (in vitro). Реакция проводится в приборе — амплификаторе, который обеспечивает периодизацию температурных циклов. Происходит охлаждение с последующим нагреванием пробирок с погрешностью в 0,1˚С.

ДНК-матрицу прогревают в течение 2 минут при температуре 92-98˚С (максимальная температура используется, если полимераза термостабильна). При нагревании цепи ДНК расходятся из-за распада водородных связей между ними. В стадии отжига температуру реакции снижают для связывания праймера с одноцепочечной матрицей.

Отжиг занимает около 30 секунд, в течение этого времени синтезируются сотни нуклеотидов. Вновь синтезируемые молекулы копируются полимеразой, в результате многократно увеличиваются специфические фрагменты дезоксирибонуклеиновой кислоты. Последующая детекция фрагментов проводится с помощью электрофореза в геле агар.

ПЦР-диагностика сифилиса пока носит экспериментальный характер, но оправдана при выявлении врождённой инфекции, в сложных диагностических случаях или при минимальном содержании бледных трепонем в исследуемом материале.

ДНК-гибридизация выполняется in vitro и основана на полном или частичном соединении двух одноцепочечных молекул ДНК в одну молекулу. В случае полного соответствия комплементарных фрагментов объединение происходит легко. Если комплементарное соответствие частичное, то объединение цепочек ДНК происходит медленно. На основании времени слияния цепей можно оценить степень комплементарности.

При нагреве ДНК в буферном растворе разрываются водородные связи азотистыми основаниями, являющимися комплементарными, в результате цепочки ДНК расходятся. Далее получают препарат из двух денатурированных дезоксирибонуклеиновых кислот. При охлаждении одноцепочечные участки ренатурируют. Образуется так называемый гибрид ДНК.

Метод позволяет оценить и анализировать скорость отжига, учитывая особенности (сходства и различия) ДНК между видами или внутри вида.

Применение ДНК-зонда заключается в гибридизации меченого фрагмента ДНК со специфичным участком ДНК для идентификации комплементарных последовательностей нуклеотидов. Для метки зонда используется группа ненасыщенных атомов (хромофоры) или радиоактивные изотопы.

ДНК–зонд применяют для гетерогенного и гомогенного детектирования нуклеиновых кислот. Роль зонда заключается в определении участков, на которых произошло слияние мишень-зонд. Детектирование в гомогенной системе имеет преимущество — позволяет отследить гибридизацию молекул ДНК в реальном времени.

Суть метода сводится в денатурации ДНК и ренатурации (воссоединения цепочек ДНК). Процесс ренатурации нуклеиновой кислоты и ДНК-зонда заканчивается образованием «гибрида».

Специфические последовательности нуклеиновых кислот гибридизуются с ДНК–зондом и, таким образом, выявляются и позволяют оценить количество ДНК в исследуемом материале.

Заражение лабораторных животных

Высокая чувствительность кроликов к Treponema pallidum (порядка 99,9%) позволяет применять их в диагностике сифилитической инфекции.

Заражение кроликов проводится в научно-исследовательских центрах и является «золотым стандартом» оценки чувствительности других методов.

Вернёмся к трепонемным и нетрепонемным тестам, так как они используются чаще всего. Рассмотрим их преимущества и недостатки, а также ошибки в интерпретации результатов.

Это тесты определения антител IgG и IgM к стандартизированному кардиолипиновому антигену. Их существенным недостатком является сравнительно небольшая специфичность.

Низкая стоимость и простота выполнения позволяют отнести эти тесты к отборочным диагностическим, необходимым для установки предварительного диагноза и скрининга среди населения.

Именно нетрепонемные тесты сдаются при оформлении медицинской книжки, устройстве на работу, постановке на учет в женской консультации.

Минимальная чувствительность в стадии сифилиса первичного – 70%;
Минимальная чувствительность в стадии сифилиса позднего – 30%;
Возможность появления ложноотрицательных и ложноположительных результатов;
Трудоёмкость выполнения РСК.

Относительно маленькая стоимость производства тестов;
Получение быстрого ответа;
Возможность их применения для скрининга.

Получение ложноположительных или слабоположительных проб возможно в следующих случаях:

Нарушение технологии выполнения, при блокировании комплекса АГ-АТ.
Наличие у больного аутоиммунных заболеваний (ревматоидный артирит, ревматизм, склеродермия, системная красная волчанка, саркоидоз и др.).
Злокачественные новообразования.
Вирусные и бактериальные инфекции.
Эндокринные заболевания (аутоиммунный тиреоидит, сахарный диабет).
Беременность.
Употребление алкоголя.
Приём жирной пищи.
Старческий возраст.

Как видно из списка, существует достаточно причин для неверного результата. Поэтому к нему следует весьма настороженно относиться. Рассмотрим наряду с РСК ещё две пробы. Это реакция микропреципитации и VDLR (ее модификация).

Реакция связывания комплемента (РСК, Вассермана, RW)

Это проба, основанная на способности комплемента связываться с комплексами АГ-АТ. Идентифицируют образовавшийся комплекс с помощью гемолитической системы. Кардиолипиновый антиген заметно повышает чувствительность пробы.

Чувствительной является и реакция Колмера, которая заключается в выполнении при различных температурных режимах. Так, первая фаза реакции Колмера протекает при температуре 20˚С в течение получаса, вторая фаза при тепературе 4-8˚С на протяжении 20-ти часов. За это время происходит связывание комплемента.

При выполнении РСК возможно получение резко положительных результатов. Причиной, вероятно, является большой титр антител в неразведенной сыворотке. В этом случае пробы ставят с уменьшающими дозами.

Для дифференцировки стадий сифилиса и оценки эффективности противосифилитического лечения определяют количество АТ в сыворотке.

Позитивность пробы оценивают с помощью крестов, также в реакциях Вассермана, Колмера и Канна указывается разведение сыворотки.

Иммуноферментный анализ (сокращенно ИФА) базируется на специфической реакции антиген-антитело. Биологический материал (сыворотка крови пациента, ликвор) вносят в лунки, на твердой поверхности которых фиксированы антигены бледной трепонемы. Исследуемый материал инкубируют, затем отмывают антитела, не связавшиеся с антигенами (см. рисунок 5).

Идентификация полученного комплекса осуществляется на этапе ферментации с помощью иммунной сыворотки, меченной ферментом. При химической реакции фермент окрашивает полученные комплексы. Интенсивность окрашивания зависит от количества специфических антител в крови пациента и фиксируется спектрофотометром.

Чувствительность ИФА составляет более 95% . Метод используется в автоматизированном режиме для исследования декретируемых групп населения: доноров, беременных и других, для уточнения диагноза при положительных и ложноположительных нетрепонемных тестах.

Иммуноблоттинг – высокочувствительный метод, модификация простого ИФА. Реакция основана на электрофорезе с разделением антигенов бледных трепонем.

Разделенные иммунодетерминанты переносят на нитроцеллюлозную бумагу и проявляют в ИФА. Далее инкубируют сыворотку и смывают не связавшиеся антитела. Полученный материал обрабатывают иммуноглобулинами (IgМ или IgG), меченными ферментом.

Клиническая оценка результатов лабораторной диагностики сифилиса

В таблице 1 ниже мы привели возможные результаты анализов и их расшифровку. Как можно видеть в таблице, основное значение при расшифровке имеет комплексная оценка тестов.

Оценка реактивности тестов выполняется также «крестами»:

Максимальный ответ (резко положительная проба) обозначается с помощью 4-х крестов.
Положительная проба обозначается с помощью 3-х крестов.
Слабоположительную реакцию обозначают двумя крестами.
Один крест свидетельствует о сомнительном и отрицательном результате.
Отрицательный ответ маркируют знаком «минус».

Проблема оптимизации лабораторной диагностики сифилиса не потеряла свою актуальность до настоящего времени. Современные методы диагностики, несмотря на стремление учёных привести диагностику к максимально высоким показателям чувствительности и специфичности, требуют контрольной проверки и индивидуального подхода.

Особенностью сифилитической инфекции является феномен серорезистентности, который так и не получил научного объяснения. Диагноз выставляется после полноценного обследования больного эпидемиологическими, клиническими, лабораторными методами.

На фоне экономико-технического развития медицины наблюдается и прогресс в разработке новых критериев диагностики сифилиса. Всё это позволит быстро, успешно и безошибочно лечить пациентов.

В начальной стадии можно использовать бактериоскопический метод, основанный на определении возбудителя – бледной трепонемы – под микроскопом. В дальнейшем широко используются серологические тесты, основанные на определении микробных антигенов и вырабатываемых организмом антител в биологическом материале.

Бактериологические исследование не проводят, так как возбудитель сифилиса очень плохо растет на питательных средах в искусственных условиях.

Все методы обнаружения трепонемы, то есть виды анализов на сифилис, делятся на две большие группы:

1. Прямые, которые непосредственно обнаруживают сам микроб:

темнопольная микроскопия (выявление трепонем на темном фоне);
RIT-тест – заражение исследуемым материалом кроликов;
полимеразная цепная реакция (ПЦР), обнаруживающая участки генетического материала микроорганизма.

2. Непрямые (серологические), основанные на выявлении антител к микробу, которые вырабатываются организмом в ответ на инфицирование.

Серологические анализы делятся на две группы

реакция связывания комплемента с кардиолипиновым антигеном (РСКк);
реакция микропреципитации (РМП);
тест быстрых плазменных реагинов (RPR);
проба с толуидиновым красным.

реакция связывания комплемента с трепонемным антигеном (РСКт);
реакция иммобилизации трепонем (РИТ или РИБТ);
реакция иммунофлюоресценции (РИФ);
реакция пассивной гемагглютинации (РПГА);
иммуноферментный анализ (ИФА);
иммуноблоттинг.

Методики этих анализов достаточно сложны, поэтому мы остановимся в основном на том, когда они проводятся и насколько точную информацию дают.

Сразу скажем, что основа диагностики сифилиса – серологические методы. Как называется анализ на сифилис: в каждом случае обследование может включать разные методики. Ниже мы более подробно расскажем о них.

Убедительно доказывает наличие трепонем их обнаружение под микроскопом. Вероятность сифилиса при этом достигает 97%. Вместе с тем микробы можно обнаружить лишь у 8 больных из 10, поэтому отрицательный тест не исключает заболевание.

Диагностика проводится в первичном и вторичном периодах, когда имеются твердый шанкр или кожная сыпь. В отделяемом этих заразных элементов и ищут возбудителей болезни.

Более эффективный, но вместе с тем более дорогой и сложный анализ – обнаружение трепонем после предварительной обработки их флуоресцентными антителами. Это вещества, «прилипающие» к микробам и образующие «свечение» их в поле микроскопа.

Чувствительность методов снижается при большой длительности болезни, обработке язв и сыпи антисептиками, а также после лечения.

Биологический метод диагностики RIT высокоспецифичен, но дорог, а результат получается лишь через долгое время, когда у зараженного животного разовьется заболевание. В настоящее время метод практически не используют, хотя он практически самый точный из всех. Отличный анализ крови на сифилис для обнаружения генетического материала трепонем – ПЦР. Единственное его ограничение – относительная дороговизна диагностики.

В первичном серонегативном периоде (до 2 месяцев после заражения) проводят поиск трепонемы в темном поле или с использованием флюоресцирующих антител.

При первичном серопозитивном, вторичном и скрытом сифилисе используют РМП и ИФА, а как подтверждающий тест – РПГА.

У пациентов с рецидивами вторичного сифилиса исследуют элементы сыпи, пытаясь выделить из них трепонемы для микроскопического изучения.

В третичном периоде РМП у трети больных отрицательная. ИФА и РПГА положительные, но они могут свидетельствовать не о третичном сифилисе, а о перенесенном ранее заболевании. Слабоположительный анализ скорее говорит о выздоровлении, чем о третичном сифилисе.

При выставлении диагноза «врожденный сифилис» принимают во внимание наличие болезни у матери, разницу в показателях РМП у матери и ребенка, положительные ИФА и РПГА у новорожденного, иммуноблоттинг.

Обязательно обследуются на сифилис беременные женщины, особенно те, у которых уже были роды мертвым плодом, неразвивающаяся беременность, ранние выкидыши. Им проводится РМП, ИФА, РПГА. Обследуют на наличие заболевания и перед прерыванием беременности.

Чтобы получить направление в лабораторию, нужно посетить своего участкового терапевта. Если хочется сдать анализ быстрее, это можно сделать в частной лаборатории без направления (например, лаборатории Инвитро анализ на сифилис делают быстро и анонимно).

Как сдать анализ на сифилис? Кровь сдается с утра, натощак. Можно пить лишь чистую воду.

Подготовка: за два дня до сдачи анализа нужно исключить из питания жирную пищу и особенно алкоголь.

Как берут анализ? обычным способом из пальца или локтевой вены.

Сколько делается анализ на сифилис? Результат пробы обычно бывает готов уже на следующий день. Расшифровка может быть взята у врача или в лаборатории.

Сколько действителен анализ? На срок до трех месяцев.

Если получен положительный результат, рекомендуется обратиться к дерматовенерологу для дообследования. Интерпретация анализов – работа врача, не стоит ломать голову самостоятельно в поисках правильного ответа.

В некоторых случаях для диагностики нейросифилиса берут анализ ликвора.

Это обследование назначается всем пациентам со скрытым сифилисом, если у них существуют признаки патологии нервной системы, а также при скрытом и позднем нейросифилисе.

Кроме того, анализ выполняется всем пациентам после выздоровления при сохранении у них положительных серологических реакций. Мы уже писали в нашей статье, что такое явление случается нередко.

Анализ ликвора при сифилисе назначает и проводит только врач.

Спинно-мозговую жидкость получают путем прокола между двумя позвонками поясничного отдела. Ее собирают по 4 мл в две пробирки. Затем место пункции обрабатывается йодом и накрывается стерильной повязкой. После пункции пациент должен лежать на животе с приподнятым ножным концом кровати не менее 3-4 часов, затем он может лечь на бок. Постельный режим после пункции показан в течение двух суток.

Ликвор из первой пробирки исследуют с помощью общепринятых реакций на содержание белка, клеток, определение признаков менингита (воспаления мозговых оболочек).

Спинно-мозговая жидкость из второй пробирки исследуется на содержание антител к трепонеме с помощью реакции Вассермана, РМП, РИФ и РИБТ, о которых мы говорили выше.

По степени выраженности нарушений различают четыре вида изменений ликвора. Анализируя их, врач может сделать вывод о наличии разных форм поражения нервной системы (сосудистый нейросифилис, сифилитический менингит, менинго-васкулярный сифилис, спинная сухотка, поздний мезенхимальный нейросифилис), а также о выздоровлении больного с положительными серологическими тестами.

Исследование кала на энтеробиоз

Анализ каловых масс считается одним из самых основных исследований состояния пищеварительной системы человека. Именно он способен показать наличие практически всех видов гельминтов в кишечнике человека. В некоторых случаях именно по анализу кала устанавливается диагноз энтеробиоз – заболевание, вызываемое круглыми червями класса нематод, или острицами.

При подозрениях на энтеробиоз проводят два типа исследований:

Анализ фекалий на энтеробиоз, позволяющий обнаружить взрослого паразита.
Мазок или соскоб для микроскопического исследования наличия яиц остриц.

Анализ каловых масс на энтеробиоз достаточно редко может показать в них наличие яиц. Случаи нахождения яиц достаточно редкие, поскольку жизненный цикл острицы не предполагает кладку внутри человеческого организма. Половозрелой самке необходим кислород для осуществления процесса откладывания яиц. Поэтому она вынуждена выходить на поверхность через анальное отверстие, и только после этого откладывать яйца в перианальных складках.

Но в каловых массах иногда можно обнаружить взрослую особь острицы. При обнаружении паразит помещается в 75% спиртовой раствор, после чего подвергается лабораторным исследованиям. Но процент обнаружения гельминта ничтожно мал, и составляет не более 5% от всего количества сданных анализов на яйцеглист.

Тем не менее, кал для исследований на энтеробиоз необходимо сдавать, как взрослым, так и детям. И не только при подозрении на данное заболевание собирается кал. Анализ каловых масс на гельминты берут:

при устройстве на работу, связанную с общепитом и продуктами питания;
для посещения бассейнов;
перед плановой госпитализацией;
при посещении санаторно-курортного комплекса;
при поступлении ребенка в дошкольное и школьное учебное заведение.

Для подтверждения диагностирования поражения организма острицами, дополнительно назначают взятие соскоба или мазка из области вокруг анального отверстия.

Анализ фекалий на энтеробиоз можно сдать в районной поликлинике, а можно собрать и дома. Для этого приобретается пластиковый специализированный контейнер, оснащенный специальной мерной или заборной ложкой, объемом около 5.0 гр.

При получении направления для анализов, к нему прилагается бланк, в котором пациент прописывает свою фамилию, адрес, дату и время сбора каловых масс,говорит инфекционист московского клинико-диагностического центра МЕДСИ на Белорусской, детский врач Мария Алексеевна Серова.

Из испражнений заборной ложкой отбираются три пробы – в начале, срединной части и с конца выхода фекалий, упаковываются в контейнер, укупориваются крышкой и сдается для лабораторных исследований.

В домашних условиях фекалии можно собрать в пузырек из стекла с широким горлышком и плотно прилегающей крышкой, поскольку организм человека не может производить дефекацию в строго отведенный или назначенный час. Взятый анализ можно сохранить в холодильнике, поместив его на нижнюю полку, но не более суток.

Для подтверждения или опровержение наличия остриц в организме человека, одновременно с анализом кала нужно сдавать соскоб или мазок. Такой вид анализа берется исключительно для диагностирования энтеробиоза. Другие гельминты анализом мазка или при соскобе не могут быть выявлены. Их можно обнаружить только, если сдать кал на анализ по подозрению на поражение гельминтами других видов – аскаридами, лямблиями, цепнем.

Для энтеробиоза нормой показаний является не нахождение в соскобе яиц острицы.

Правила сбора кала для анализа

Сбор производится в утренние часы, сразу, как только человек проснулся. Накануне не желательно подмываться перед сном. Также не рекомендуется принимать водные процедуры утром, до дефекации.

В контейнер не нужно помещать все количество фекалий, или столько, сколько получится. Для этого к специальному контейнеру прилагается мерная ложка. Ею производится забор каловых масс, объем которого составляет не более 20 грамм. Важно, чтобы забор был произведен из трех точек – начальной, серединой и конечной.

Укупоренный контейнер желательно в этот же день сдать в биохимическую лабораторию. Исследование кала делается не более суток, и уже на следующий день выдается результат.

Соскоб или мазок с перианальных складок, считается основным показателем поражения организма человека острицами. Сдавать кровь при подозрении на энтеробиоз не нужно, поскольку такого анализа не существует.

В заключении следует отметить, что самым точным показателем наличия остриц в организме человека, является трехкратное обследование методом соскоба, проводимое каждое утро. Допустимым интервалом считается два дня между проведением соскоба. Сколько случаев скрытой формы энтеробиоза выявляет такое обследование! Данные результатов выявляют заболевание более 90% случаев поражения гельминтами.

Виды исследований и биоматериалов для анализа

Для выявления болезни используют различные методики и биоматериалы. На ранних этапах сифилис определяют с помощью бактериоскопического теста. Образцы исследуют под микроскопом. Прибор позволяет обнаружить штаммы возбудителя. Позднее проводят серологические анализы крови. Благодаря им, в пробах выявляют антигены и антитела сифилиса.

Способы определения половой инфекции поделены на 2 категории:

Прямые, выявляющие патогенный микроорганизм. К ним относят: темнопольная микроскопия, RIT-анализ (инфицирование кроликов биоматериалом для исследования), метод ПЦР – полимеразной цепной реакции (с его помощью находят генетические элементы возбудителя).
Непрямые (серологические) позволяют обнаружить антитела к патогену. Они продуцируются иммунной системой, как ответная реакция на заражение.

Серологические методики поделены на 2 категории: трепонемные и нетрепонемные.

Нетрепонемные, включающие: тест с толуидиновым красным, анализ РСК, RPR- тест, исследование крови экспресс-методом РМП.
Трепонемные, включающие: иммуноблоттинг, РСК-тест, РИТ-анализ, исследование РИФ, РПГА-тест, ИФА-анализ.

Информативность тестов на инфекцию различна. Чаще делают основные виды анализов на сифилис, к которым отнесены серологические методики.

Чтобы выявить бледную трепонему – патогена, который выглядит, как спираль и вызывает сифилис, берут пробы:

венозной крови;
ликвора (секрета из спинномозгового канала);
содержимое лимфатических узлов;
ткани изъязвлений.

Если необходимо провести тесты на обнаружение сифилиса, кровь сдают не только из локтевой вены, но и из пальца. На выбор биоматериала и способ исследования влияет тяжесть течения инфекции и оснащенность диагностического центра.

Убедительным доказательством сифилиса является выявление возбудителей инфекции под микроскопом. Таким способом находят патоген у 8 обследуемых из 10. Отрицательный результат у 2 оставшихся пациентов не говорит о том, что они не инфицированы.

Исследование делают на первичном и вторичном этапе (стадии) заболевания, для которых характерно появление высыпаний на коже и сифилом (изъязвлений) на эпителиальных тканях или слизистых оболочках. В отделяемом из очагов поражения находят патогены, вызывающие венерическое заболевание.

Точнее с определением трепонем справляется сложный тест, обозначающийся как РИФ – реакция иммунофлуоресценции. Образец для исследования предварительно обрабатывают флуоресцентными антителами. Соединения, способные светиться, склеиваются с бактериями. Рассматривая под микроскопом образцы, в случае заражения лаборант видит сверкающих возбудителей.

Тест используют для раннего диагностирования болезни. Чем дольше длится заболевание, тем ниже чувствительность исследовательских способов. Кроме того, она падает после обрабатывания высыпаний и язв антисептическими средствами и у пациентов, прошедших лечение. Изредка исследование дает ложноотрицательные и ложноположительные результаты.

RIT-анализ – высокоточный способ обнаружения сифилиса. При проведении теста результаты приходится ждать долго. До тех пор, пока у инфицированного кролика не проявятся признаки инфекции. Тест применяют очень редко, несмотря на то, что он сверхточен.

С помощью полимеразной цепной реакции на сифилис определяют генетические элементы патогенов. Единственный недостаток ПЦР – дороговизна.

Такие анализы крови помогают выявить антитела, появляющиеся в ответ на кардиолипин – соединение, относящееся к общему строению мембран патогенов.

Самым известным исследованием на сифилис считается реакция Вассермана. РВ входит в категорию реакций связывания комплемента (РСК). Новые методы РСК обладают существенными отличиями от традиционной RW. Но обозначаются они, как и раньше понятием «реакция Вассермана».

Иммунная система, синтезирует антитела (маркеры) в ответ на вторжение трепонем. Их выявляют при анализе крови на сифилис методом реакции Вассермана. Положительный результат RW подтверждает инфицирование обследуемого.

Реакция гемолиза – индекс РВ анализа. При ней взаимодействуют 2 субстанции: гемолитическая сыворотка и эритроциты барана. Сыворотку делают, иммунизируя кролика эритроцитами барана. Активность биологической жидкости снижают путем прогревания.

Показатели РВ зависят от того, прошел гемолиз или нет. В пробе чистой от маркеров происходит гемолиз. При этом реакция на антигены невозможна. Комплемент тратится на взаимодействие с бараньими эритроцитами. Когда в образце есть маркеры, комплимент вступает в реакцию с антигенами. В этом случает гемолиз не протекает.

Компоненты для RW отмеряют в равном количестве. Образец, содержащий сыворотку, антиген и комплимент, прогревают. Добавляют в пробу бараньи эритроциты и сыворотку. Держат при температуре 37 градусов, пока не наступит гемолиз в контрольном образце, который вместо антигена содержит физраствор.

Для проведения РВ используют готовые антигены. На упаковках указывают титры и технологию их разбавления. Позитивный результат RW обозначается крестиками. Готовые результаты тестов обозначаются следующим образом:

++++ – максимально позитивные (гемолиз задержался);
+++ – положительные (гемолиз существенно запаздывает);
++ – слабо позитивные (гемолиз частично промедлил);
+ – сомнительные (гемолиз припозднился незначительно).

При отрицательной РВ гемолиз полностью осуществился во всех образцах. Но в некоторых случаях получают ложноположительные данные. Такое происходит, когда кардиолипин входит в состав клеток. Защитные механизмы не продуцируют маркеры к «родному» кардиолипину.

Однако изредка возникают исключительные ситуации. Положительную RW выявляют у незараженных людей. Такое возможно, если пациент перенес тяжелую болезнь, вызванную вирусами (пневмонию, малярию, туберкулез, патологии печени и крови). Положительной РВ бывает у беременных. Обусловлено это тем, что иммунитет чрезмерно ослаблен.

Если возникает подозрение, что результат анализа на сифилис ложноположительный, пациента обследуют дополнительно. Проблема в том, что эту инфекцию невозможно выявить по единственному клинико-лабораторному тесту. Часть исследований дает ложные показатели, которые бывают как отрицательными, так и положительными.

Получить достоверные данные помогает развернутый анализ на сифилис. Благодаря ему устанавливают истинный диагноз: доказывают заражение или исключают его. Кроме этого, расширенный тест позволяет остановить развитие инфекции, исключить проведение ненужной терапии.

Проводя обследование на сифилис, традиционную реакцию Вассермана применяют крайне редко. Вместо нее используют метод РСК. Анализ дает положительный результат спустя 2 месяца после инфицирования. При вторичной форме заболевания он положителен почти в 100% случаев.

Способ микропреципитации (РМП) – исследование с механизмом аналогичным реакции Вассермана. Методика проста в исполнении. Она быстро проводится. Для исследования кровь на сифилис в этом случае сдают из пальца. Методика дает положительный результат через 30 дней с момента появления сифилом. Ошибки при исследовании не исключены. Ложноположительные данные получают на фоне: обострившихся инфекций, пневмонии, инфаркта, инсульта, интоксикации.

К ошибочным тестам приводит:

туберкулез;
болезнь Бенье́-Бека-Ша́умана;
ревматоидные заболевания;
рак;
диабет;
цирроз;
бруцеллез;
лептоспироз;
мононуклеоз.

Обнаружив сомнительный анализ на сифилис, делают трепонемные исследования. Они помогают уточнить диагноз.

Метод плазменных реагинов (RPR) – очередной аналог реакции Вассермана. Его применяют, когда необходимо:

провести скрининг бессимптомных лиц;
подтвердить сифилис;
исследовать донорскую кровь.

Тест с толуидиновым красным, как и RPR, проводят, чтобы оценить динамику лекарственной терапии. Их показатели падают при отступлении болезни, и увеличиваются, когда патология рецидивирует.

Нетрепонемные анализы показывают насколько больной излечился. Получение отрицательных результатов на сифилис говорит о том, что болезнь отступила полностью. Первое обследование делают спустя 3 месяца после курсовой терапии.

Высоко результативные анализы проводят, используя трепонемные антигены. Их делают, когда:

получен положительный результат при методе РМП;
необходимо распознать ошибочные данные, возникающие при скрининговых тестах;
подозревают развитие сифилиса;
нужно диагностировать скрытно текущую инфекцию;
надо провести ретроспективную диагностику.

У множества пролеченных больных трепонемные исследования проб дают положительные результаты долгое время. По ним нельзя судить о степени эффективности лечения. РИТ и РИФ – сверхчувствительные тесты. Благодаря им получают достоверные данные. Эти анализы трудоемки, они требуют приличных временных затрат, наличия прогрессивного оборудования. Их способны проводить квалифицированные медработники.

Выполняя РИФ анализ на сифилис, положительные данные получают спустя 2 месяца после инфицирования. Отрицательные параметры подтверждают, что обследуемый здоров. Положительные – позволяют предположить, что человек инфицирован.

РИТ проводят, когда реакция микропреципитации положительна. Такой анализ крови на сифилис помогает опровергнуть или удостоверить наличие инфекции. Тест сверхчувствителен, он точно указывает заражен пациент или здоров. Но исследование дает достоверные данные только через 3 месяца после проникновения трепонем в организм.

К сверхточным тестам относят иммуноблоттинг. Такой анализ крови при сифилисе делают редко. Его применяют при обследовании новорожденных детей. Он не пригоден для экспресс-тестирования. Положительные результаты получают с опозданием. Их гораздо раньше дает метод микропреципитации.

К информативным сверхточным методам исследования относят тесты ИФА и РПГА. С их помощью проводят экспресс-диагностирование. Лаборанты делают огромное количество таких анализов. Благодаря им удается установить точный диагноз.

РПГА анализ на сифилис положителен через 30 дней после проникновения возбудителя в организм. С его помощью диагностируют первичную инфекцию, когда появляются язвы и сыпь. Благодаря ему удается выявить запущенные, скрытно текущие, а также врожденные формы патологии. Но проводят его совместно с нетрепонемными и трепонемными тестами. Комплексное диагностирование гарантирует достоверность результатов. Тройное тестирование точно доказывает наличие или отсутствие венерической инфекции.

ИФА анализ положителен спустя 21 день с момента заражения. Тест иногда дает ошибочные результаты. Они появляются при системных патологиях, нарушенных обменных процессах. Их результативность сомнительна у ребенка, родившегося от инфицированной матери.

Погрешности, получаемые при серологических способах исследования, стали причиной открытия прогрессивных методик диагностики. Газовая хроматография и масс-спектрометрия не дают ложных результатов. Единственное препятствие для их массового использования – дороговизна.

При нахождении сифилиса в первичной фазе (до 60 дней с момента инфицирования), возбудителя отыскивают на темном фоне или используют для их обнаружения флюоресцирующие антитела.
Если патология находится в первичной, вторичной или скрытой форме применяют РМП и ИФА. Подтвердить результаты помогает РПГА анализ крови на сифилис.
При рецидивах вторичной инфекции анализируют отделяемое изъязвлений и высыпаний. Из образцов извлекают возбудителей, изучают их с помощью микроскопии.
Когда заболевание входит в третичную фазу, у 1/3 пациентов РМП отрицательная. При этом результаты ИФА и РПГА положительны. Однако они не всегда указывают на третичный период, а подтверждают, что человек раньше перенес инфекцию. Слабоположительный тест – доказательство полного излечения, а не развития третичной фазы.
Подтверждая врожденный сифилис, анализ крови берут у матери и младенца. Сравнивают данные тестов РМП. Учитывают то, что у малыша ИФА и РПГА положительны. Подтверждают диагноз, используя методику иммуноблоттинга.

Сифилис, как любая системная патология, поражает весь организм. Поэтому обследование на него проходят при беременности, перед абортом. Пациенткам делают РМП, ИФА, РПГА.

Отправляет пациентов на анализ врач-венеролог. Частные лаборатории делают анонимные исследования на сифилис по желанию клиента. Для сдачи теста в них не нужно направление врача.

Правила проведения исследования:

Кровь в лаборатории берут утром на пустой желудок (едят после процедуры). До анализа разрешено пить только воду.
За 2 суток до обследования запрещено: питаться жирной едой и употреблять спиртное.
Кровь берут из пальца или вены.
Сколько длится исследование? Обычно не больше суток. Расшифровку анализов на сифилис получают у лаборантов либо лечащего врача.
Сколько действителен тест? По прошествии 3 месяцев результаты анализов теряют силу. Их сдают снова.

Если расшифровка анализа показывает, что тест положителен, необходимо посетить венеролога, который назначит дополнительное обследование для точного подтверждения диагноза и подберет схему необходимого лечения.

Тестирование спинномозгового содержимого

Диагноз нейросифилис ставят после того, как исследуют ликвор. Такой анализ делают:

людям со скрытой формой инфекции;
при симптомах заболеваний нервной системы;
бессимптомном, запущенном нейросифилисе;
выздоровевшим больным с положительными серологическими реакциями.

Направление на исследование ликвора дает врач. Из спинномозгового канала берут пункцию в 2 пробирки. Прокол смазывают йодом, закрывают стерильной салфеткой. После процедуры пациент соблюдает постельный режим на протяжении 2 дней.

В 1 образце определяют количество белка, клеток, следы менингита. Во второй пробе вычисляют антитела к возбудителю сифилиса. Для этого делают тесты: РВ, РМП, РИФ и РИБТ.

В зависимости от того сколько выявлено нарушений, различают 4 разновидности ликвора. Каждая указывает на определенные повреждения нервной системы. Врач диагностирует:

сосудистый нейросифилис;
сифилитический менингит;
спинную сухотку и прочее.

Помимо того, по результатам тестов судят о выздоровлении пациента.

Интерпретация тестов – задача врача. Только он способен сделать правильные выводы, при необходимости назначить дополнительное обследование, поставить точный диагноз. Не стоит делать самостоятельную диагностику при опасной системной патологии. Ошибка в диагнозе влечет за собой серьезные последствия.

Ни для кого не является секретом, что своевременная диагностика любого заболевания означает едва ли не половину успеха его лечения. Очень важно подобрать именно те анализы, методы или способы диагностики, которые действительно помогут поставить точный диагноз, а не запутают врача еще сильнее. Иммуноферментный анализ крови давно зарекомендовал себя методом, позволяющим не только получить положительный или отрицательный ответ на вопрос – болен ли человек какой-либо половой инфекцией, но и определить, на какой стадии развития находится заболевание, а также понять, была ли подобная проблема у пациента в анамнезе. ИФА на сифилис на сегодняшний день – один из наиболее чувствительных и специфичных анализов, при этом его точность составляет около 90%.

Тест-системы, которые использует метод иммуноферментной диагностики, предназначены для выявления не только сифилиса, но и множества других инфекций: гепатит, ВИЧ, ЦМВ, герпес, токсоплазмоз и т.д. Анализ ИФА на сифилис позволяет определить антитела (IgG, IgA, IgM) к бледной трепонеме, содержащейся в крови больного человека. Этот метод позволяет увидеть взаимодействие антител со специальными препаратами, в которых заложены антигены, способные в комплексе с антителами образовать признак заболевания, хорошо заметный при различных способах диагностики.

В основе иммуноферментного анализа на сифилис лежит метод взаимодействия выявляемых в крови антител с антигеном возбудителя инфекции. Диагностика будет зависеть от того, какие именно антитела использовались: могут выявляться либо антитела определенного класса, либо в общем. Для диагностики этим методом кровь берется натощак из вены.

ИФА анализ крови на сифилис подразумевает использование трех классов иммуноглобулинов: G, M, A. Указанные иммуноглобулины имеют одно важное для диагностики сифилиса методом ИФА свойство: они вырабатываются в строго определенной последовательности, благодаря чему ИФА позволяет определить, на какой именно стадии находится процесс и какова динамика его развития:

Иммуноглобулин М в крови показывает, сколько времени прошло с момента заражения. Однако не всегда положительные результаты его наличия означают наличие венерического заболевания: возможно, у человека произошло обострение какой-либо хронической болезни, вызвавшее подобную реакцию.

Наличие антител IgA означает, что с момента заражения прошло не менее месяца.

Поскольку иммунитет к данному заболеванию не вырабатывается, положительный результат обследования на IgG может показывать как пик заболевания, так и период после пройденной терапии.

Следует отметить, что ИФА положительный на сифилис – это не повод для паники. Дело в том, что такой метод позволяет определить лишь наличие антител, но не возбудителя. Следовательно, если результат ИФА сифилис – положительно, это еще не является основанием для того, чтобы поставить диагноз. Однако в научном мире тест-системы совершенствуются ежедневно, и на сегодняшний день это означает, что в большинстве случаев результатам анализов все же можно доверять.

Результатов диагностики бывает всего два: «положительный» и «отрицательный». В первом случае положительные данные означают, что у пациента заболевание в одной из стадий, либо что он совсем недавно окончил курс лечения. Отрицательный же результат иммуноферментного исследования крови означает либо отсутствие заболевания, либо очень раннюю стадию его развития.

Дерматокосметология как направление медицинской деятельности существует с незапамятных времен, поскольку ее предмет отражает постоянное и естественное стремление человека к красоте и здоровью тела.

В последнее время наблюдается повышение частоты воспалительных заболеваний гениталий герпетической этиологии с преобладанием латентного, хронического рецидивирующего течения с развитием различных нарушений репродуктивного и соматического здоровья.

Побочное действие лекарственных средств (ПДЛС) продолжает оставаться одной из актуальнейших проблем клинической медицины, в том числе дерматологии, занимая четвертое место после болезней сердца, онкологических заболеваний и инсульта среди причин смерти.

Выкидыш и замершая беременность для любой женщины, мечтавшей о ребенке, — большое горе. Как не допустить повторения такой ситуации в будущем? Узнайте больше о современных способах выявления и лечения нарушений, предрасполагающих к выкидышу.

источник