Анализ пцр на 12 инфекций отзывы

Здравствуйте,меня просто замучили белые густые выделения из влагалища,
они без запаха, зуда тоже нет.!Сейчас стал тянуть низ живота.Сходила ко врачу,она меня осмотрела-сказала ничего не видит,но взяла мазок. Сегодня я была у нее,она сказала,что лейкоцитов у меня 60 ,а должно быть до единицы!!На вопрос,что это может быть,она пожала плечами и отправила меня в платную какую-то клинику,чтобы я там сдала анализ «ПЦР -12 качеств». Денег столько у меня нет,я не могу себе этого позволить. Что мне делать?может можно как-нибудь дома полечиться. И скажите пожалуйста,что этот анализ выявляет,это правда так страшно?спасибо!

Узнай мнение эксперта по твоей теме

Психолог. Специалист с сайта b17.ru

Врач-психотерапевт, Супервизор. Специалист с сайта b17.ru

Психолог, Консультант. Специалист с сайта b17.ru

Психолог, Арт-терапевт. Специалист с сайта b17.ru

Психолог, Консультант. Специалист с сайта b17.ru

Врач-психотерапевт. Специалист с сайта b17.ru

Психолог, Гештальт-терапевт. Специалист с сайта b17.ru

Психолог, Консультант. Специалист с сайта b17.ru

Психолог. Специалист с сайта b17.ru

Психолог, Гештальт-терапевт. Специалист с сайта b17.ru

Автор, у вас как с головой? Вы от чего конкретно собрались лечиться? от какого конкретно воспаления?
Что за анализ легко узнать в ЛЮБОЙ поисковой системе. Комплексный анализ на 12 инфекций, быстрый и точный метод диагностики заболеваний, передающихся половым путем, позволяющий выявить возбудителей заболеваний даже при очень низком их содержании. Соответственно, после него вам и назначат чем и от чего лечиться.

Автор, идите в кожвен диспансер и проверьтесь

К гинекологу ходить — дорогое удовольствие, сначала анализ, потом возможно бак пассев, потом антибиотики (вообще недешевые), потом контрольный анализ, но лечить надо, так что занимайте где нибудь

В цервикальном канале до 30 лейкоцитов должно быть, а не до 1. ПЦР сейчас самый точный анализ. найдите деньги и сдайте.

а на фига сдавать 12 инфекций качественно. У вас НЕ ДОЛЖНО быть хламидий, трихомонад и гонококков. Вот на это и сдают КАЧЕСТВЕННО. Остальное МОЖЕТ и ДОЛЖНО быть в определенных количествах. Вот это сдают КОЛИИЧЕСТВЕННО.

Лейкоциты — смотря где, в норме во влагалище — 0-10, в цервикальном каннале — 0-30, в уретре — 0-5 в поле зрения, у вас же 60, что говорит о наличии воспаления.
По симптомам очевидно молочница, которая может вызвать воспаление, молочница не всегда проявляется всеми симптомами, у меня проявляется только зудом, выделений нет. Лейкоциты были во влаг- до 45. вылечила молочницу, лейкоциты в норме.
Поменяйте врача, сдайте мазок на флору, если есть молочница- вылечите, затем контроль. После контрольного анализа, можно будет сдать пцр, хотя врачи в основном рекомендют 3 анализа — хламидии, уреалпазма, микоплазма. Все остальное, кроме впч, по сути можно выявить в мазке на флору, только в разных лабораториях они исследуют по-разному, где-то более детально, где-то нет

ой поясните пожалуйста поподробнее. автор неправильно анализ назвала , да ? а т овы в какой то другой формулировке пишите.

Ольга
а на фига сдавать 12 инфекций качественно. У вас НЕ ДОЛЖНО быть хламидий, трихомонад и гонококков. Вот на это и сдают КАЧЕСТВЕННО. Остальное МОЖЕТ и ДОЛЖНО быть в определенных количествах. Вот это сдают КОЛИИЧЕСТВЕННО.
ой поясните пожалуйста поподробнее. автор неправильно анализ назвала , да ? а т овы в какой то другой формулировке пишите.

Сдается мне, что в гинекологии сегодня много развода на деньги! У меня был первый половой акт, и то не до конца, плеву не прорвали. После этого было воспаление, зуд и жжение во влагалище несколько дней, к зуду присоединились белые выделения хлопьями. Я посмотрела в интернете — пришла к выводу, что молочница на фоне травмирования. После 2 таблеток флуконазола все прошло. Но к врачу сходила! Партнер сам в медицине работает, а их проверяют, никакого криминала быть не должно! Врач -гинеколог после обнаружения повышенных лейкоцитов в мазке поставила диагноз кольпит и написала мне ПЦР -анализы на 1200 р. Я стала в инете читать. Она мне например назначила 2 микоплазмы — hominis и genitalium, а пишут, что genitalium только у мужчин проблемы вызывает, женщинам его делать не надо! И что это за профессионал. Та же гарднерелла в норме тоже должна пристутсвовать во влагалище. Я читаю в сети, что ПЦР на нее не информативен, нужен другой анализ, так как важно ее количество, а не факт наличия! И вообще прочитала в одном источнике, что ПЦР делают в последний момент, после мазка посев должны сделать, раз мазок возбудителя воспаления не показал. Уреаплазмы и Микоплазмы кольпит НЕ ВЫЗЫВАЮТ! Они вызывают воспаление слизистой и шейки матки! И их ищут, только если после мазка и ПОСЕВА не нашли причину, или нашли, пролечили, а симптомы остались. Почему она мне посев не назначила. А когда качественный анализ покажет ту же гарднереллу, она же мне дорогие вредные таблетки назначит, а причина воспаления может быть совсем в другом. И еще натсорожил один факт: врач очень хотела. чтобы я оплатила по бумажке, выписанной ей. она уходила в отпуск. сказала, что если я повременю и пойду к другому врачу, то та мне может вообще на 3000 р выпистаь анализов! Складывается впечатление, что они имеют процент от работы платных лабораторий! и назначают ПЦР вперед посева! А потом назначают неправильное лечение!

источник

Рядом с метро Кропоткинская
Работаем каждый день с 9:00 до 20:00
Стоимость консультации 900 рублей

Метод полимеразной цепной реакции является одним из эффективных способов лабораторной диагностики множества различных заболеваний.

Сокращенно метод называется ПЦР (по первым буквам), или PCR от английского «polymerase chain reaction».

Хранение и передача генетической информации в живых организмах осуществляется с помощью макромолекул ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислоты).

В некоторых случаях, например, у вируса иммунодефицита человека, такую функцию выполняет РНК (рибонуклеиновая кислота).

Каждый живой объект имеет свою уникальную последовательность структурных фрагментов макромолекул.

При этом набор «кирпичиков» ограничен всего четырьмя нуклеотидами.

В основе исследования лежит многократное копирование (создание так называемых «амплификаций») изучаемого фрагмента ДНК-цепи.

Даже небольшой кусочек ДНК может быть подвергнут разделению с последующим воспроизведением строго определенного участка с помощью ферментативного синтеза.

Количественное увеличение в исследуемом образце фрагмента ДНК с данной последовательностью позволяет провести визуальное сравнение с имеющимися образцами.

А затем и достоверно определить, какому организму он принадлежит.

Эксперименты по разработке ПЦР были проведены Кэри Мюллисом еще в 1983-1984 годах.

Спустя десятилетие американский ученый-биохимик получил Нобелевскую премию за свой труд.

По мере развития технологий расшифровки нуклеотидных последовательностей ДНК накапливались базы данных с соответствующими характеристиками различных биологических объектов.

И на сегодняшний день разработаны различные модификации метода, позволяющие обнаруживать следы микроорганизмов, мутации и многое другое.

В медицине ПЦР диагностика особенно эффективна в отношении выявления инфекционных заболеваний, в том числе и ИППП (инфекций с преимущественной передачей половым путем).

Многие лаборатории предлагают комплексное обследование на самые распространенные половые инфекции.

Например, подобный профиль есть у Инвитро (ПЦР 12 инфекций + мазок на флору).

При этом, в зависимости от исследователя, набор анализов может отличаться.

Если врач назначает обследование на половые инфекции, следует заранее поинтересоваться, в профиль «ПЦР 12» какие инфекции входят в данной лаборатории.

В большинстве случаев перечень диагностируемых патогенных микроорганизмов включает выявление:

хламидий;
микоплазм;
уреаплазм;
кандид;
гонококков;
гарднерелл;
трихомонад;
вирусов герпеса (I и II типы);
цитомегаловируса;
вируса Эпштейна-Барр;
вирусов папилломы человека (ВПЧ) разных типов и групповой принадлежности;
ВИЧ;
вирусов гепатитов В и С.

Не все из перечисленного может включаться в профиль.

Где-то за отдельные исследования считают обнаружение вирусов разных типов (простого герпеса I-го и II-го типа, ВПЧ 16-го и 18-го типа) и не проводится анализ на ВИЧ, гепатит.

Где-то не включается исследование на ВЭБ и пр.

Распространенность половых инфекций очень высока.

Особенно их малосимптомных или бессимптомных форм (т. н. скрытых инфекций), оказывающих весьма негативное воздействие на здоровье человека.

Это объясняет высокую потребность в своевременной и адекватной диагностике.

Сдать анализ «ПЦР 12 инфекций» рекомендуется при наличии таких симптоматических проявлений, как:

любого вида выделения из половых органов;
зуд, боли, высыпания в окологенитальной зоне;
боли в надлобковой области, промежности;
проблемы с мочеиспусканием;
продолжительная субфебрильная температура, хроническая слабость, утомляемость;
пожелтение кожи, склер и др.

Профилактическое обследование на ИППП-12 ПЦР методом рекомендуется:

после незащищенного полового контакта со случайным партнером;
при наличии нескольких половых партнеров;
перед плановыми хирургическими вмешательствами;
в период планирования беременности;
при оформлении на работу;
при наличии хронических патологий;
неэффективности проводимой терапии.

Дать направление на обследование может как врач общего профиля, так и терапевт, гинеколог, уролог, венеролог и др.

После сомнительного контакта и при отсутствии проявлений оптимально проводить исследование спустя 2 недели.

Для такого исследования, как «ПЦР 12», цена зависит от лаборатории, включенных в профиль анализов.

Стоимость «ПЦР 12» (Москва) варьируется в пределах примерно 2500 – 4500 рублей.

Результат может быть готов уже в течение суток (обычно до 2-х рабочих дней).

Как показывают многочисленные исследования, ПЦР-диагностика:

является самым достоверным и высокоточным исследованием на возбудители генитального герпеса (герпес-вирусы 1-го и 2-го типов);
позволяет не только установить заражение папилломавирусами, но и идентифицировать их отдельные типы (например, вирусы 11 и 6 типов являются представителями группы низкого онкогенного риска и вызывают образование аногенитальных кондилом; вирусы 16 и 18 типов относятся к группе высокого онкогенного риска и могут провоцировать развитие рака шейки матки);
помогает определять эффективную терапевтическую тактику при бактериальном вагинозе, определяя микрофлорный состав влагалищной среды и выявляя основные маркеры патологического процесса (мобилункуса, гарднереллу и др.);
эффективна для выявления в любых биологических тканях цитомегаловируса;
практически незаменима при диагностике упорных кандидозов, вызванных Candida nonalbicans (такие грибки весьма устойчивы к стандартным противогрибковым препаратам, эффективным в отношении «обычных» Candida albicans).

На территории РФ и стран СНГ ПЦР применяется в диагностике гонококковой инфекции, а также в качестве анализа на хламидии у беременных при постановке на учет и перед родами.

можно изучать любой биологический материал (клетки эпителия, кровь, мочу, слюну, сперму, выделения и пр.);
выявляются следы/части собственно инфекционного агента, а не продукты его распада или ответные реакции организма;
выявление ДНК-фрагмента, соответствующего только данному конкретному возбудителю;
удается обнаруживать всего несколько клеток (желательно порядка 10 – 100 в образце);
на все исследование уходит не более 5 часов;
можно диагностировать как острые, так и хронические, и бессимптомные формы заболеваний и др.

не самый дешевый метод;
не позволяет установить живой или неживой возбудитель обнаружен;
обнаруженный микроорганизм не является гарантированно причиной имеющихся проблем (благодаря высокой чувствительности обнаруживаются даже минимальные, клинически незначимые количества);
возможны ложноположительные/ложноотрицательные результаты;
предъявляет высокие требования к точности соблюдения техники проведения и к квалификации персонала.

Провести ПЦР-исследование можно практически для любого биоматериала.

Для получения образца берутся соскобы из мочеиспускательного канала, влагалища, маточной шейки.

При этом правильная методика взятия биоматериала имеет очень важное значение.

Поскольку ПЦР очень точный метод, то попадание в исследуемую пробу посторонних примесей может исказить итоговые данные (ложноположительный результат).

Аналогично, если нарушена техника забора и материал взят не с подходящего участка, в пробу возбудитель не попадет и результат окажется ложноотрицательным.

Например, у женщин возбудители гонококковой инфекции обычно размещаются в канале шейки матки, а во влагалище могут отсутствовать.

У мужчин инфекционные агенты могут существовать в предстательной железе, придатках яичек при полном отсутствии в мочеиспускательном канале.

Стоит отметить, что применяемые ранее техники провокации (предполагаемого увеличения количества возбудителей при действии различных факторов) сейчас не используются ввиду неэффективности.

Для забора материала из органов урогенитального тракта применяются вагинальные тампоны и специальные зонды.

Подготовка к исследованию методом ПЦР на 12 инфекций зависит от исследуемого материала.

Рекомендуется проводить забор перед менструацией или спустя пару суток по ее завершении.

Следует воздержаться от мочеиспускания и половых контактов в течение примерно 3-х – 4-х часов.

Непосредственно в день процедуры не нужно проводить гигиенический уход за половыми органами и спринцевания.

Примерно за неделю, после согласования с врачом, прекращают лечебные процедуры и прием препаратов.

Все манипуляции проводятся в процессе гинекологического осмотра.

Забор осуществляется обычно из уретры, прямой кишки, канала маточной шейки и заднего влагалищного свода.

Важно, чтобы в образце отсутствовали примеси крови.

При подготовке к анализу рекомендуется воздержаться от приема лекарственных препаратов и проведения лечебных процедур за 5-7 дней до исследования, а от мочеиспускания – за 3-4 часа.

Материал берут из передней части уретры, как правило, с глубины 1 – 3 см от наружного отверстия.

При необходимости предварительно проводят массаж простаты.

В целом процедура безболезненна, слегка дискомфортна.

Однако из-за механического травмирования слизистой могут кратковременно наблюдаться симптомы уретрита (небольшая болезненность мочеиспускания, раздражение и др.).

В общем случае при заборе биоматериала из уретры:

наружное отверстие предварительно обрабатывают тампоном, смоченным стерильным физраствором;
если есть выделения гнойного характера, соскоб берут или сразу или спустя примерно 20 минут после мочеиспускания;
если выделения отсутствуют, предварительно зондом проводят массаж уретры;
забор обычно осуществляется вращательными движениями после введения зонда на глубину 1 – 1,5 см у женщин, 3 – 4 см у мужчин;
у детей проводится только с наружного отверстия;

Из вульвы и влагалищного преддверия:

забор проводят стерильным ватным тампоном;
в случае воспаления бартолиновых желез проводится их пункция;

Из влагалища:

забор осуществляют из заднего свода или измененных областей;

Из канала шейки матки:

предварительно удаляют слизь ватным тампоном и обрабатывают стерильным физраствором шейку матки;
зонд вводя на глубину от 5 до 15 мм;
при эрозивных поражения материал берут с граничной области измененная/здоровая ткань;
зонд извлекается строго без касания влагалищных стенок;

забор проводят специальным шприцеподобным инструментом;

Из маточных придатков:

образцы (тканей, экссудата, гноя) берут в ходе операции либо чрезвлагалищной пункцией.

Моча на инфекции исследуется до начала приема антибиотиков после тщательной гигиенической обработки половых органов.

Собирается примерно 5 мл средней порции.

У мужчин при диагностике простатита отдельно исследуются три порции мочи (первая и средняя, а также последняя, собираемая после массажа простаты) и секрет предстательной железы.

Секрет простаты объемом около 1 мл собирают после массажа в сухую пробирку.

Если не удается получить простатический сок, анализируют первую порцию мочи (10мл), полученную после массажа простаты.

Для исследования на сифилис методом ПЦР материал берется из лимфоузлов и зон поражения.

Поскольку для большинства ИППП гематогенный путь распространения в организме не является основным, кровь для ПЦР-диагностики используется не для всех инфекций.

Возможно выявление методом ПЦР крови ВИЧ, вирусов гепатитов.

В случае длительного сохранения после полноценной терапии положительных серореакций (результатов исследований на антитела/антигены в крови) на сифилис может проводиться ПЦР выявление в крови участков ДНК трепонем.

В ситуации, когда исследуется кровь, особой подготовки не требуется.

Как правило, анализ делают натощак.

Если количество анализируемых объектов оказывается ниже предела чувствительности стандартных тест-систем (что случается при осуществлении ПЦР крови), предварительно образец может быть сконцентрирован.

Во всех случаях исследование проводится только после прекращения использования препаратов местного действия и после полного выведения действующих веществ из организма.

С целью контроля эффективности терапии анализ делают спустя 2 недели после окончания лечения (если нет симптомов).

Метод обладает высокой чувствительностью и может выявлять остатки ДНК даже нежизнеспособных патогенных микроорганизмов.

Поэтому контрольное исследование рекомендуют повторить через месяц от даты последнего приема лекарства.

В большинстве лабораторий проводится качественный анализ.

Результат в таком случае выдается в форме «обнаружено»/«не обнаружено» и показывает имеется ли в образце фрагмент ДНК, специфичный для данного патогенного микроорганизма.

Если при проведении исследования методом ПЦР на 12 инфекций один или несколько показателей оказываются положительными?

Следует обратиться к врачу (гинекологу, венерологу, инфекционисту и пр.) для определения дальнейшей диагностико-лечебной тактики.

Количественный вариант ПЦР-диагностики (ПЦР «в реальном времени») используется реже и обычно не входит в профиль «ПЦР 12 инфекций».

Подобное исследование бывает необходимо для отслеживания динамики изменений в процессе проводимой терапии и для установления вирусной нагрузки.

Метод находит применение в отношении РНК вируса гепатита С, ДНК вируса гепатита В.

При обнаружении соответствующих нуклеотидных последовательностей на бланке с результатами могут указываться цифровые значения в МЕ/мл (до 10 2 , 10 2 — 10 8 , от 10 8 ).

Такие данные важны при определении варианта дальнейшего ведения больного.

Так, противовирусное лечение гепатита В проводят, если число копий в 1 мл превышает 2000 МЕ/мл.

Параметр «контроль взятия материала», иначе КВМ, определяет достоверность полученных результатов.

Оценку такого параметра проводят до начала основного исследования.

При этом подсчитывают количество содержащихся в образце молекул и устанавливают возможно ли в принципе исследование.

Минимальное значение КВМ – 4 ед.

Если показатель ниже, то результаты признаются недостоверными и необходимо повторное взятие образцов.

Для сдачи анализа ПЦР на 12 инфекций обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

источник

ПЦР на 12 инфекций проводят с целью скрининга населения или при выявлении признаков воспалительных процессов урогенитального тракта.

Методика обладает высокой чувствительностью и позволяет обнаружить большинство самых распространенных венерических заболеваний.

Показания к ПЦР на 12 ИППП

с целью скрининга – при отсутствии клинических или лабораторных признаков инфекционного поражения урогенитального тракта;
с целью выявления ЗППП – в случае появления симптомов уретрита или вагинита.

Поводом для обследования может быть инфекционное поражение мочеполовой системы.

Если пациент обращается с жалобами на боль при мочеиспускании, выделения и другие симптомы, его обследуют.

Лабораторная диагностика обычно начинается с мазка на флору.

В нем могут быть обнаружены лишь некоторые инфекции.

Если возбудитель не выявлен, но признаки воспаления есть (большое количество лейкоцитов в поле зрения), проводят анализ ПЦР на 12 инфекций.

Если возбудитель обнаружен, это не значит, что дальше обследоваться нет смысла.

У большинства пациентов выявляют одновременно 2-3 и более патогенных микроорганизмов.

Это связано с тем, что венерические заболевания являются «болезнями поведения».

Причины заражения разными патологиями одни и те же – это незащищенные половые контакты.

Поэтому человек может заразиться:

в разное время разными инфекциями от разных людей;
сразу двумя-тремя инфекциями от одного человека.

Стоит ли обследоваться на ПЦР 12, если нет симптомов

Часто сдать анализ ПЦР 12 люди хотят с целью скрининга.

То есть, они просто обследуются для профилактики.

Потому что следят за своим здоровьем и желают знать, не являются ли они носителем венерических инфекций.

Многие из них протекают в бессимптомной форме.

передаются партнерам при половом контакте;
могут вызывать осложнения;
нередко обостряются на фоне других заболеваний;
отягощают течение беременности и становятся причинами перинатальных потерь.

Человек, который имеет за год 3 и более половых партнера, должен обследоваться по крайней мере 1 раз в 12 месяцев.

Когда на ПЦР может направить врач

Даже если симптомов венерических инфекций нет, доктор всё равно может направить человека на диагностику.

Это может потребоваться по ряду причин:

Предстоящие хирургические вмешательства на органах малого таза.

Даже носительство патогенных бактерий без симптомов опасно.

Потому что после операции они могут вызывать сильные воспалительные процессы.

Показанием также являются предстоящие инвазивные диагностические процедуры.

Многие инфекции могут спровоцировать бесплодие или выкидыши, повышают риск внематочной беременности.

Они могут инфицировать плод, вызывая тяжелые заболевания у новорожденного.

Излечивать инфекции желательно до беременности, а не в период гестации.

Потому что любые лекарственные средства для женщины, вынашивающей ребенка, нежелательны.

Обследование при бесплодии.

Если пара обращается в центр репродукции, так как не может забеременеть, обоих супругов тщательно обследуют.

Ведь одной из причин нарушения фертильности могут быть венерические заболевания.

Эта процедура используется для преодоления бесплодия, если естественная фертильность не может быть восстановлена.

Перед искусственным оплодотворением необходимо выявить и излечить инфекции урогенитального тракта.

Какие инфекции входят в ПЦР 12

Соответствующий анализ берут во многих лабораториях.

Наборы инфекций могут отличаться.

Рассмотрим на примере Инвитро ПЦР 12. Там это исследование называют «Сексом в большом городе».

Цена ПЦР 12 составляет 4 тысячи рублей. Но это дешевле, чем делать каждый тест по отдельности.

В ходе исследования определяется ДНК таких возбудителей в мазке из урогенитального тракта:

хламидия трахоматис;
микоплазма хоминис;
гарднерелла вагиналис;
гонококк Нейссера;
микоплазма гениталиум;
герпес 1 и 2 типа;
папилломавирус 16 и 18 типа;
цитомегаловирус;
уреаплазма уреалитикум;
уреаплазма парвум;
кандида альбиканс.

В диагностический комплекс также входит микроскопия урогенитального мазка.

Подготовка к сдаче ПЦР

Есть несколько простых правил, которых стоит придерживаться, если вы хотите получить достоверные результаты.

За 2 дня до диагностики нужно:

отказаться от интимной жизни;
не использовать тампоны;
не делать спринцеваний;
не использовать местных препаратов и процедур;

Следует не мочиться 2 часа до взятия мазков.

ПЦР 12 не проводится на фоне антибактериальной терапии.

Вначале берут материал для исследования, только после этого начинают лечение, если оно необходимо.

Больно ли брать мазок на ПЦР

В качестве материала для исследования используется мазок из уретры.

Брать его больно. Потому что для этой цели используется зонд в виде щёточки. Он помещается в уретру на несколько сантиметров. Затем врач вращает щеточку и таким образом делает соскоб эпителиальных клеток.

Но в нашей клинике эта процедура проходит безболезненно. Потому что мы используем крем для анестезии. Он наносится на половые органы и уретру. Слизистая теряет чувствительность. Поэтому врач может взять соскоб, не доставляя дискомфорта пациенту.

Что делать, если в ПЦР выявлены инфекции

Если ПЦР 12 показывает наличие каких-либо возбудителей, это не означает, что вы больны.

Безусловно, некоторые инфекционные агенты очень опасны.

Они считаются высокопатогенными и требуют лечения сразу.

Но некоторые микроорганизмы могут проживать в вашей репродуктивной системе, не представляя большой угрозы.

Поэтому решение о необходимости лечения принимается в каждом случае индивидуально.

Оно может зависеть от таких факторов:

количественные показатели выявленного возбудителя;
наличие симптомов уретрита;
признаки воспаления в урогенитальном тракте по данным бактериоскопии.

Учитывается также цель обследования.

В пользу необходимости лечения говорит:

смена полового партнера (чтобы не передать ему инфекцию);
предстоящая или текущая беременность;
предстоящее лечение бесплодия;
самопроизвольные аборты в анамнезе;
явления дисбиоза влагалища у женщин.

Когда нужно лечение инфекций при отсутствии симптомов

При выявлении некоторых возбудителей лечение будет назначено сразу.

И не важно, в каком количестве они содержатся в урогенитальном тракте, планируется ли беременность и т.д.

Эти возбудители опасны. Они распространяются среди ваших половых партнеров. Поэтому должны быть уничтожены полностью.

К числу таких инфекций относятся:

трихомониаз;
хламидиоз;
гонорея;
микоплазма гениталиум.

Критерием излеченности является отрицательный результат ПЦР исследования.

ПЦР положительный на гарднереллез: нужно ли лечить

Гарднереллы являются частью нормальной микрофлоры для женщин, но не для мужчин.

В случае выявления гарднереллы вагиналис у женщин лечение не назначают сразу.

Требуется дополнительная оценка биоценоза влагалища.

Также оцениваются клинические симптомы.

Если у женщины наблюдаются обильные выделения из влагалища, неприятный запах, требуется лечение.

Если симптомов нет, то показанием для назначения терапии является низкий процент лактобацилл.

В норме они составляют большую часть нормальной микрофлоры.

Но при нарушении биоценоза могут вытесняться гарднереллами и другой флорой.

У мужчин гарднерелла в большинстве случаев является транзиторным микроорганизмом.

Пациент заражается от женщины.

Но затем гарднереллы через несколько дней или недель сами покидают его урогенитальный тракт.

Поэтому лечение в большинстве случаев не требуется.

Оно необходимо, только если выявления гарднереллы сочетается с симптомами уретрита или баланопостита.

Если в ПЦР 12 обнаружена уреаплазма: нужно ли лечить

При выявлении уреаплазмоза в большинстве случаев лечить его нужно.

Исключение составляют случаи, когда такие факторы сходятся вместе:

пациент живет в обоюдно моногамном браке и никогда не будет менять полового партнера;
если это женщина, она не планирует беременеть никогда;
если это мужчина, его супруга никогда не забеременеет.

На практике только пожилые люди могут дать подобные гарантии.

Все остальные время от времени меняют партнеров и заводят детей.

Даже если сегодня вы считаете, что это маловероятно, завтра ситуация может измениться.

Поэтому пациентов до 40-45 лет обычно пролечивают от уреаплазмоза в случае обнаружения этой инфекции.

Если в ПЦР 12 обнаружен кандидоз

Кандида – представитель нормальной микрофлоры кожи.

Сам факт обнаружения этого гриба говорит только о его носительстве.

Но не о патологическом процессе, которого может и не быть.

Поэтому лечение назначается лишь в таких случаях:

есть симптомы воспаления;
ПЦР с концентрацией показывает, что количество грибка – 10 в 4 степени копий ДНК и больше.

Нужно ли лечиться при выявлении герпеса в ПЦР 12

В комплекс ПЦР 12 входит сразу три вируса семейства герпесов.

Это простой герпес 1 и 2 типа, а также цитомегаловирус.

Они, попадая в организм, остаются в нем навсегда.

Поэтому сам факт обнаружения возбудителя – не повод для назначения лечения.

А вот если появляются симптомы, терапия применяется.

Есть исключения из этого правила.

Человек может получать лечение постоянно и непрерывно, если:

он имеет постоянные половые контакты с партнером, у которого нет герпеса (чтобы не заразить его);
рецидивы происходят слишком часто ли протекают очень тяжело.

Лечение также назначают женщинам в последние 4 недели беременности, чтобы избежать заражения плода.

В ПЦР 12 обнаружен ВПЧ: нужно ли лечиться

ПЦР на 12 инфекций включает вирус папилломы человека.

Определяются только 16 и 18 тип.

То есть, наиболее опасные разновидности ВПЧ.

Они могут вызывать цервикальный рак у женщин.

У мужчин в редких случаях развивается рак пениса.

Возможны также плоскоклеточный рак кожи, ануса, горла.

На практике чаще всего врачи сталкиваются с цервикальным раком.

Это самая часто встречаемая злокачественная опухоль у женщин репродуктивного возраста.

70% случаев вызваны именно теми типами ВПЧ, которые входят в комплекс ПЦР 12.

Часто после инфицирования никаких симптомов не развивается.

У женщины нет субъективных ощущений.

Лишь при целенаправленном обследовании можно выявить патологические изменения эпителия шейки матки.

Это явление называют дисплазией.

В будущем она может трансформироваться в рак.

Сам факт обнаружения ВПЧ 16 и 18 типов в ходе исследования ПЦР 12 не является поводом для назначения лечения.

К тому же, специфического лечения против этих вирусных заболеваний нет.

Но женщина должна быть дополнительно обследована.

У неё берут мазок на онкоцитологию.

По показаниям может быть назначена кольпоскопия.

Если выявлены патологические участки измененной эпителиальной ткани выполняется биопсия.

После этого устанавливается диагноз.

Это может быть дисплазия 1-3 степени.

При 1 степени, самой легкой, продолжают наблюдение.

Женщина посещает врача раз в полгода.

В 80% случаев такие диспластические изменения регрессируют.

Если наступает 2 стадия, то требуется хирургическое лечение.

Очаги измененного эпителия удаляют или прижигают лазером.

Своевременное выявление ВПЧ, наблюдение и лечение предраковых процессов позволяют предотвратить цервикальный рак.

Возможно также консервативное лечение инфекции.

Оно проводится для профилактики цервикальных неоплазий.

Так как специфического лечения не существует, то врача назначают иммуномодуляторы и противовирусные препараты общего действия.

Где делают ПЦР 12 в Москве

Чтобы сдать анализы на венерические инфекции, обращайтесь в нашу клинику.

доступные цены;
безболезненное взятие мазков;
достоверные результаты анализов;
интерпретация результатов ПЦР 12 опытным врачом-венерологом;
отсутствие очередей и минимум вашего потраченного времени.

В случае выявления каких-то инфекций врач примет решение, требуется ли лечение.

При этом он будет руководствоваться результатами мазка на флору и клинической симптоматикой.

В случае необходимости вы получите лечение, направленное на эрадикацию возбудителей мочеполовых инфекций.

При необходимости сдать ПЦР 12 обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

ВИЧ
Гарднереллез
Кондиломатоз
Молочница
Сифилис
Трихомониаз
Баланопостит
Герпес
Гонорея
Микоплазмоз
Уреаплазмоз
Уретрит
Хламидиоз
ЗППП

источник

«Я уже на протяжении нескольких лет посещаю врача-терапевта Мазанову Ларису Ивановну. По всем вопросам терапевтического характера я обращаюсь только к ней. Она действительно помогает и лечит. Рекомендую.»

«Стоматология в этом центре на высшем уровне! Ходил туда несколько раз. Сначала верхний зуб лечили. Я думал нерв будут удалять, но всё обошлось благодаря профессиональным врачам. Потом приходил заменить старые пломбы. Тоже всё быстро и качественно сделали. »

«Все очень понравилось ! И как провели операцию, и ее результат ! Буду обращаться только к ней ! Всем советую !»

«Первый раз я пришла в ЦЭЛТ в 1994 году. Тогда поражала разница с «советской медициной», к которой все привыкли. Конечно, сейчас много разных клиник появилось — и с более шикарным интерьером, и с более вкрадчивым голосом операторов колл-центра. »

«Очень хороший врач. Профессионал своего дела.»

«У Ирины, проходила курс ручного массажа, это действительно специалист высокого уровня. Мне 50 лет, и я за свою жизнь многих массажистов прошла, могу сказать, что Ирина – один из лучших профессионалов массажа. Теперь обращаюсь только к ней.»

«Спасибо за ФГДС и напрасные страхи главврачу Сергейко А.А. Здоровья Вам доктор. »

«У моего мужа вечно проблемы с желудком. Он родился без желчного пузыря. И для нас было проблемой найти хорошего гастроэнтеролога. Аминова Альфия Иршадовна прекрасный специалист.»

«Врач Туктаров Рафаэль Рифатович вел меня при переломе руки, благодаря его ответственному отношению к работе у меня все замечательно срослось, без осложнений, и за довольно короткое время я пошла на поправку И в целом вежливый приятный врач, доверять можно. »

Проспект Вернадского (800 м)

«Попал к Тронь с мигренью. Сейчас уже пройдя курс лечения совсем забыл о головной боли. Чувствую себя абсолютно здоровым человеком. За что ей огромное человеческое спасибо. »

«Сегодня уже была на приеме у Бажановой Ю. А., оперирующий хирург-флеболог. Приятно удивлена. На приеме, за один визит и УЗИ сосудов, получила рекомендацию по подбору компрессионного трикотажа. На следующей неделе запланировали склеротерапию. И я забуду. »

«К Шаклеину А. А. пришла от ревматолога из поликлиники, сомневаясь в поставленном диагнозе, особенно в назначенном лечении мощными анельгетиками. После тщательного осмотра и процедуры рентгена обнаружил у меня у меня коксоартроз 2-й степени. Назначил. »

«С проблемами деликатного характера, Овчинников Виталий Георгиевич, хорошо справляется. Нашел его через интернет, так же по отзывам, показалось, что внушает доверие специалист, и не ошибся. Он выслушал меня, сразу обследоваться сказал и затем расписал. »

«Хочу выразить слова благодарности от себя, от моей семьи и моих соседей, потрясающему доктору — О. А. Борисовой! За профессионализм, внимательность, чуткость, человечность и доброжелательность. Всегда поможет, посоветует, всё объяснит, расскажет. После. »

«После успешно излеченной эррозии наблюдаюсь исключительно у Галины Эмировны. Хорошая врач, вежливая. Но не нравится, что невозможно день в день записатся к ней, расписание всегда забито, надо предварительно планировать визиты. А приложение мобильное удобное. »

«Здравствуйте! Очень понравилось и общение, и обследование, и разъяснение сути заболевания, и лечение. А самое главное, результат! Если вдруг придётся столкнуться с проблемами на коже мне или моим знакомым, теперь не будет проблем с выбором врача. Всё. »

«Хочу выразить благодарность своему любимому врачу Столбовой Татьяне Сергеевне, которая ведет прием в мед.клинике Диамед. Уже давно наблюдаюсь у нее в связи с сердечными проблемами. Я очень впечатлительный человек и страдаю ВСД, поэтому пульс у меня всегда. »

«Тоже восхищена работами этой семьи. Каждый в своей работе утопает и знает как лучше, и что лучше сделать. Мне кажется, что Николай Николаевич воспитал замечательных детей, которые сейчас помогают людям стать красивее. Я была на консультациях у многих. »

«Клинику GMT — clinic мне посоветовала подруга, а именно услугу smas-лифтинг Ulthera System. Решила воспользоваться, и не прогадала. Эта процедура проходит с использованием системы ультразвукового лифтинга ULTHERA SYSTEM. По времени занимает 1 час. И нужна. »

«Хочу сказать спасибо моему лечащему врачу-урологу Паукову Василию Викторовичу за чуткое, доброе, внимательное отношение. Доктор ответственный и добросовестный, с большим уважением к пациентам. Больница может гордиться таким специалистом. Побольше бы таких. »

источник

В статье рассмотрим, как проводится анализ ПЦР на 12 инфекций.

Современной методикой исследования для определения инфекции в организме считается ПЦР-диагностика. Данный метод основан на использовании полимеразной цепной реакции, позволяющей выявить возбудителей. При этом то, как протекает патологический процесс, в острой или хронической форме, не оказывает влияния на точность полученных результатов. Некоторые врачи не ставят окончательного диагноза без осуществления данного исследования. Сдать анализ ПЦР на 12 инфекций сейчас можно в любой частной лаборатории.

Этот метод пользуется широкой популярностью не только причине того, что результаты данного исследования можно получить примерно через 5 часов, но также и благодаря возможности выявления одновременно нескольких инфекций.

Анализ ПЦР на 12 инфекций включает:

ВИЧ – одну из наиболее опасных инфекций в мире, которая входит в категорию ЗППП.
Гепатиты различных разновидностей.
Вирус Эпштейна — Барр.
Герпес первого и второго типов.
Инфекции, передающиеся половым путем, то есть входящие в группу ЗППП — микоплазмоз, хламидиоз, трихомониаз, уреаплазмоз и др.
Цитомегаловирус.
Листериоз.
Бактерии, провоцирующие развитие туберкулеза.
Инфекция хеликобактер пилори.
Энцефалит клещевой.
ВПЧ и его многие разновидности.
Кандидозная инфекция.

ПЦР очень удобен в применении – результаты исследования известны через 5 часов, чем этот метод очень практичен.

В число патологий, которые выявляются при помощи анализа ПЦР на 12 инфекций, входит много тех, которые передаются половым путем. Поэтому рассматриваемая методика применяется в следующих областях:

онкологическая медицинская практика;
гастроэнтерология;
пульмонология;
гинекология;
урология;
фтизиатрия.

Практически в любых случаях можно проводить анализ ПЦР на 12 инфекций для выявления активной или скрытой формы.

Как было отмечено ранее, диагностика инфекционных процессов является довольно точным методом, который необходимо осуществлять в лабораторных условиях. Немаловажным условием также можно назвать правильность сбора анализов. Определение чужеродных ДНК и РНК происходит при обследовании разных биологических жидкостей. Исключением из такого правила является выявление вируса, проникающего половым путем: в подобном случае проводится анализ выделений из половых путей.

Не все знают, как берут анализ ПЦР на 12 инфекций.

В иных случаях, например, при выявлении возбудителей ВИЧ, герпеса, гепатита и др. берется кровь пациента. Также может потребоваться моча или мазок из полости рта. При опасных патологических состояниях или подозрении на них для исследования могут брать спинномозговую жидкость.

Сдать количественный анализ ПЦР на 12 инфекций довольно просто. Результаты расшифровать может только специалист. В случае когда необходимо получить результат максимально быстро, в течение пяти часов, необходимо проводить именно этот диагностический метод. Важным моментом является то, что исследования на скрытые инфекции могут дать отрицательный или положительный ответ. Отрицательный указывает на то, что инфекционного возбудителя в организме нет. В случае положительного исследования врач должен назначить противовирусную терапию — антибиотики, а также лечение, направленное на усиление работы иммунной системы.

Метод ПЦР дает возможность выявить возбудителей, которые находятся в неактивной фазе своей жизнедеятельности. Такими являются, например, герпес и ВПЧ. Оценивая число клеток возбудителей можно установить тот факт, насколько активен конкретный патологический процесс в организме больного. Количественный результат проводимого анализа позволяет узнать точную стадию развития определенного заболевания.

В некоторых случаях может быть получен сомнительный результат, когда количество определяемых исследованием копий соответствует верхним границам нормы. Чтобы максимально точно выявить причину развития заболевания, необходимо повторить анализ, уделяя особое внимание сбору биологического материала.

Биоматериалом для ПЦР-исследования на 12 инфекций, в котором можно определить чужеродную ДНК болезнетворной бактерии или РНК и ДНК вируса могут служить разные биологические жидкости и среды человека:

Кровь, сыворотка, плазма. Используются для ПЦР вирусов гепатитов B, D, C, G, герпеса, ВИЧ, ЦМВ, исследования человеческих генов.
Моча. Может применяться при инфекционных поражениях женских мочевыделительных органов и мочеполовых каналов мужчин (применение в качестве биоматериала мочи может заменить эпителиальный соскоб).
Мокрота. Ее применяют для диагностики туберкулеза и в некоторых случаях для диагностики респираторных типов микоплазмоза и хламидиоза. Мокроту в количестве 20 миллилитров собирают в одноразовый стерильный флакон.
Иные биологические жидкости. Плевральная, околоплодная, спинномозговая, суставная жидкости, сок простаты, слюна, бронхоальвеолярный лаваж — забираются исключительно при наличии строгих показаний.
Биоптаты. Чаще всего применяются биоптаты двенадцатиперстной кишки и желудка для определения наличия хеликобактерной инфекции.
Эпителиальные соскобы со слизистых покровов. Обычно они применяются для диагностики патологий, передающихся половым путем, таких как, например, гонорея, микоплазмоз, хламидиоз, уреаплазмоз, гарднереллез, трихомониаз, герпетическая и прочие инфекции, поражающие слизистую оболочку.

Чтобы сдать анализ ПЦР на 12 инфекций, нужно предварительно подготовиться.

Достоверность результатов исследования ПЦР зависит непосредственного от правильности сдачи биологического материала. Материал не должен быть загрязненным, иначе результаты лабораторного исследования не будут объективны. К списку наиболее важных рекомендаций перед сдачей лабораторного анализа ПЦР относятся такие:

мочу необходимо сдавать утром в стерильном контейнере;
кровь на наличие инфекций следует необходимо сдавать в утреннее время, натощак;
за сутки до проведения данного исследования не рекомендуется проявлять половую активность.

Результат такого анализа может быть готов через пять часов, однако чаще всего время расшифровки результатов зависит от технической оснащенности медицинской лаборатории и загруженности персонала и составляет от полутора до двух суток после осуществления процедуры. Встречаются также ситуации, когда результаты пациент может получить в тот же день.

Итак, имеет ли смысл сдавать ПЦР?

Методика ПЦР отличается специфичностью, высокой точностью и чувствительностью. Это значит, что данный лабораторный анализ способен:

достоверно определить наличие или отсутствие инфекционного заражения;
точно указать на разновидность инфекционного возбудителя (специфичность);
обнаружить инфекционное заражение даже при крайне низком уровне содержания ДНК патогенных микроорганизмов в биологическом материале, подвергнутом исследованию (чувствительность).

«Гемотест» представляет собой сеть медицинских лабораторий, основанную в 2003 году и занимающуюся предоставлением услуг корпоративным клиентам и частным лицам. На сегодняшний день она является лидером отечественного рынка среди диагностических лабораторий.

Во франчайзинговых и собственных заведениях компании предоставляются такие виды услуг:

проведение анализов ПЦР (в том числе на двенадцать инфекций);
консультации врачей с целью расшифровки необходимых исследований;
забор биоматериалов с персональными штрих-кодами;
регистрация клиентов в общей системе;
выдача результатов по анализам.

Качество лабораторных исследований подтверждено международными сертификатами.

источник

ДНК Chlamydia trachomatis,

ДНК Mycoplasma genitalium,

ДНК Gardnerella vaginalis,

ДНК Trichomonas vaginalis,

ДНК Herpes simplex virus I и II типа,

ДНК Human Papillomavirus 16 типа,

ДНК Human Papillomavirus 18 типа.

Известно, что при сексуальных контактах передается более 30 различных бактерий, вирусов и паразитов — это инфекции, передающиеся половым путем (ИППП). С наибольшей заболеваемостью связаны: гонорея, хламидиоз, трихомониаз, вирус простого герпеса (ВПГ, или герпес), вирус папилломы человека (ВПЧ) .

Возбудители ИППП микроорганизмы плохо обнаруживаются обычными методами, для их выявления используется анализ методом ПЦР (полимеразная цепная реакция).

ПЦР дает возможность найти в исследуемом материала возбудителя, даже в самом незначительном количестве.

Данное исследование позволяет выявить до 12 возбудителей ИППП одновременно.

Исследования выполняются в качественном формате.

В нашей лаборатории метод ПЦР (полимеразной цепной реакции) используется для более точной диагностики заболеваний, которые передаются половым путем. Его главное преимущество заключается в том, что он позволяет одновременно выявить сразу несколько возбудителей таких половых инфекций, как вируса простого герпеса, уреаплазмоза, микоплазмоза, кандидоза, гонореи, трихомониаза, хламидиоза.

Большая часть этих заболеваний сопровождается появлением высыпаний на внешних половых органах, зудом и покраснением, нарушением половой функции, болезненным мочеиспусканием, а также неприятным запахом и интенсивными выделениями. Несвоевременное выявление возбудителей этих инфекций может привести к обширному поражению внутренних органов, к развитию онкозаболеваний и сложных форм патологий у мужчин и женщин.

Методика ПЦР позволяет обнаружить в биологическом материале возбудителя даже в минимальном его количестве. Тест-системы, которые используются в нашей лаборатории, обладают максимально высокой диагностической и аналитической чувствительностью, и позволяют врачу своевременно поставить диагноз и приступить к лечению.

Данная методика выявления заболеваний, которые передаются половым путем, является максимально эффективной благодаря тому, что:

она выявляет заболевание даже в случае его бессимптомного протекания;
результаты анализа готовы уже через несколько часов после его сдачи;
человек принимает минимальное участие в работе с биологическим материалом – возможность получения ошибочного результата исследования значительно снижается;
тест-системы на ПЦР 12 отличаются высоким уровнем специфичности и чувствительности.

К сдаче этого вида анализа на 12 половых инфекций пациентам требуется минимальная подготовка. Узнать о ней больше вы можете при консультации со специалистами нашего медицинского центра.

Прохождение этого вида исследования позволяет выявить возбудителей таких широко распространенных заболеваний, как кандидоз, трихомониаз, гонорея, хламидиоз, цитомегаловирус, уреаплазмоз, микоплазмоз, гарднереллез, вирус папилломы человека 16 и 18 типа, а также вирус простого герпеса 1 и 2 типов

Этот вид комплексного анализа обладает высокой чувствительностью и позволяет диагностировать заболевание еще до того, как успеют проявиться его основные симптомы.

ОБЩИЕ ПРАВИЛА ПОДГОТОВКИ К ИССЛЕДОВАНИЮ УРОГЕНИТАЛЬНЫХ МАЗКОВ У МУЖЧИН

Необходимо воздержаться от половых контактов в течение 2-3 дней до исследования. Рекомендуется не мочиться в течение 2-3 часов до исследования. Повторное исследование возможно не ранее чем через неделю.

ОБЩИЕ ПРАВИЛА ПОДГОТОВКИ К ИССЛЕДОВАНИЮ УРОГЕНИТАЛЬНЫХ МАЗКОВ У ЖЕНЩИН

За сутки до взятия биоматериала воздержаться от половых контактов. Исследования можно проводить до или не ранее, чем через сутки после мануального исследования, кольпоскопии, ультразвукового исследования с использованием влагалищного датчика.

Рекомендуется не мочиться в течение 2-3 часов до получения биоматериала из уретры. Исследование отделяемого урогенитального тракта не проводится во время менструации. Повторное исследование возможно не ранее чем через неделю.

источник

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – наиболее информативный, точный и современный метод диагностики инфекционных заболеваний, позволяющий обнаружить возбудителя в организме пациента, даже если количество вредоносных клеток исчисляется единицами, и они пока не успели спровоцировать развитие болезни. Еще 25 лет назад врачи не могли даже мечтать о таких возможностях, а сегодня сдать анализ ПЦР можно в любой крупной лаборатории.

ПЦР-диагностика открыла перед людьми многие другие ценные перспективы – с помощью этой методики можно изучать генные мутации, устанавливать отцовство, вычислять риск развития онкологических заболеваний, оценивать возраст и происхождение археологических артефактов и даже доказывать вину преступников, обнаруживая их ДНК в уликах. Но сегодня мы обсудим именно медицинский аспект этого открытия и расскажем вам, какие заболевания можно диагностировать методом ПЦР, как сдавать анализ и что означают его результаты.

Любое живое существо на Земле, будь то человек, животное или микроб, имеет гены – носители наследственной информации, которые представляют собой участки ДНК или РНК с определенной последовательностью нуклеотидов, уникальной для каждого организма. ДНК (дезоксирибонуклеиновая кислота) и РНК (рибонуклеиновая кислота) образует длинные молекулы, состоящие из двух нитей, закрученных в спираль друг относительно друга, и эти нити собираются из нуклеотидов, как из бусинок.

Допустим, требуется увидеть, есть ли в биологическом материале пациента ДНК или РНК инфекционного возбудителя или ее фрагменты. Но как это сделать, если молекулы крошечные и их мало? Методика ПЦР дает ответ: можно искусственно размножить вредоносную ДНК или РНК в лабораторных условиях, чтобы без труда ее обнаружить и идентифицировать.

Суть полимеразной цепной реакции состоит в том, чтобы разъединить нити молекул и попытаться «подсадить» к их противоположным концам фрагменты ДНК или РНК возбудителей – если они подойдут, значит, это и есть искомый микроб. А добавленный в пробирку фермент под названием «ДНК-полимераза» запустит синтез новых копий нужных участков молекул, они многократно размножатся и станут заметны. Далее мы опишем простыми словами, как происходит этот удивительный процесс и для чего это необходимо.

Американский ученый Кэрри Муллис изобрел ПЦР в 1983 году, а спустя десять лет, в 1993 году, получил за свое открытие Нобелевскую премию по химии. Однако методика была несовершенной и требовала существенных доработок. На сегодняшний день существует уже более десятка видов ПЦР для разных диагностических целей.

Итак, мы знаем, что длинная молекула ДНК или РНК образована двумя цепочками нуклеотидов, всего их бывает пять типов:

Ген – это устойчивая, многократно повторяемая уникальная комбинация нуклеотидов, и в одном гене их может быть несколько десятков или даже сотен, но все они располагаются друг напротив друга в строгом соответствии с правилом комплементарности. Это означает, что напротив гуанина в одной нити может стоять только цитозин из другой нити, а напротив аденозина – только тимин, иначе молекула ДНК не сложится и не закрутится в спираль. При этом пары «А – Т», «Т – А», «Г – Ц» и «Ц – Г» могут сочетаться в любых комбинациях: повторяться несколько раз подряд или идти вразнобой.

Схематически это можно представить так:

У РНК вместо тимина есть урацил, и такие молекулы выступают носителями генетической информации у некоторых вирусов, называемых ретровирусами. Например, у вируса иммунодефицита человека (ВИЧ).

Вот это свойство – комплементарность – является ключевым для ПЦР-диагностики. Ведь чтобы началась амплификация (синтез дополнительных копий участков ДНК на родительской матрице), нужно чтобы «подсаженный» фрагмент ей подходил. Такой фрагмент называется праймером или попросту «затравкой» и содержит до тридцати нуклеотидов, расположенных в уникальной для каждого возбудителя последовательности. Праймеры для проведения ПЦР-анализов производятся отдельно и доставляются в лабораторию в готовом виде. На сегодняшний день в распоряжении врачей есть праймеры сотен различных бактерий, вирусов и простейших.

Чтобы процесс начался, необходимо соблюсти ряд условий: добавить нужные реагенты и создать особый температурный режим. Все это происходит в приборе под названием «амплификатор» или «термоциклер», который может обеспечить нагревание и охлаждение пробирок с точностью до 0,1°C. Современные модификации амплификаторов могут замораживать и хранить готовые материалы, а некоторые даже имеют встроенный флуоресцентный детектор для определения результатов анализа ПЦР в режиме реального времени, когда нужно вычислить вирусную нагрузку (об этом мы расскажем ниже).

Внутри амплификатора взятый у пациента биоматериал проходит несколько десятков циклов, каждый из которых состоит из трех стадий: денатурации, отжига и элонгации. Это самая интересная часть ПЦР-диагностики, давайте рассмотрим весь процесс в подробностях, а начнем с необходимых реагентов.

Стандартный набор выглядит так:

Биоматериал, предположительно содержащий ДНК возбудителя заболевания;

Праймеры, то есть два комплекта нуклеотидов, комплементарных противоположным концам цепочек нужного фрагмента ДНК;

ДНК-полимераза – термостабильный фермент, который выступает катализатором реакции амплификации. К этому ферменту очень серьезные требования: он должен сохранять активность при высокой температуре длительное время – несколько часов, пока повторяются циклы ПЦР. Поэтому для проведения анализа используются ферменты, выделенные из термофильных микроорганизмов: Thermus aquaticus (Taq-полимераза), Pyrococcus woesei (Pwo-полимераза), Thermus thermophilus (Tth-полимераза), Pyrococcus furiosus (Pfu-полимераза) и другие;

Mg2+, то есть ионы магния, двухвалентного металла, необходимого ДНК-полимеразе для эффективной работы;

dATP, dGTP, dCTP и dTTP, четыре дезоксирибонуклеозидтрифосфата, из которых будут строиться новые фрагменты цепочек ДНК;

Буферный раствор, позволяющий поддерживать оптимальные условия – в него входят некоторые соли и сывороточный белок альбумин.

Итак, реагенты помещены в пробирку, она установлена в амплификатор, что же происходит дальше? Запускается повторяющийся цикл из трех стадий, целью которых является амплификация ДНК инфекционных возбудителей, если таковые будут обнаружены в пробе.

Амплификатор нагревает пробирку до 94-98 °C и сохраняет такую температуру на протяжении 30 секунд – 2 минут, чтобы цепочки ДНК разошлись в стороны. Конкретное значение температуры и времени зависит от типа полимеразы и от того, какого именно микроба ищут. По-другому этот период называется стадией плавления. Большинство видов ПЦР-диагностики требуют прогрева пробирки перед первым циклом в течение 2-5 минут.

В игру вступают праймеры – один из них комплементарен первой нити развалившейся надвое цепочки ДНК, а другой подходит ко второй нити, причем, праймеры ограничивают начало и конец того участка молекулы, который необходимо достроить. Праймеры называют «затравкой», потому что фермент полимераза катализирует производство новых копий нужного фрагмента ДНК именно после соединения праймеров с родительской матрицей.

Чтобы это соединения произошло, амплификатор должен понизить температуру пробирки. Как правило, отжиг с праймерами производится при температуре на 5 °C ниже, чем нужно для их денатурации. Если установить слишком высокую температуру, праймеры будут плохо соединяться с матрицей, а если слишком низкую, они могут прикрепиться не в том месте, где нужно. Поэтому лучше показывают себя праймеры с температурой плавления выше 60 °C, ведь они позволяют проводить отжиг и элонгацию одновременно при 60-75 °C. Стадия отжига длится 30 секунд, и за этот короткий период полимераза уже успевает катализировать синтез двух-трех сотен новых нуклеотидов.

Происходит собственно амплификация, то есть размножение нужного участка вредоносной ДНК, если таковая обнаружена. В рамках одного цикла количество участков увеличивается вдвое, каждый последующий цикл опять приводит к двукратному увеличению их числа, то есть действует принцип геометрической прогрессии. А всего за время ПЦР-анализа проводится 30-50 циклов, что по времени занимает 2-3 часа.

Температура элонгации и длительность этой стадии зависит от того, какая полимераза используется и какова длина размножаемого участка ДНК. Например, для Taq и Pfu-полимеразы оптимальна температура 72 °C, при этом фермент произведет 1000 пар оснований за 1 минуту. По окончанию всех циклов ПЦР, как правило, запускают дополнительную, финальную стадию элонгации – она длится около 10 минут и позволяет достроить все оставшиеся участки ДНК.

Существует два способа определения итогов ПЦР-анализа: традиционный – электрофорез, когда в реакции задействуются обычные праймеры, а оценку результатов проводит человек, и более современный – сканирование в режиме реального времени, когда «затравки» меченые, а их свечение регистрирует прибор.

В первом случае все цепочки ДНК сортируются по размерам. У этого способа есть существенные недостатки: во-первых, лаборанту приходится открывать пробирки с материалом, следовательно, в них могут попасть посторонние фрагменты ДНК из соседних пробирок (контаминация ампликонами), и тогда результат анализа ПЦР будет ложноположительным. Во-вторых, оценку производит человек, что называется, «на глаз», поэтому достоверность полученных данных целиком зависит от внимательности и профессионализма специалиста.

В случае с ПЦР-диагностикой в режиме реального времени (Real-Time PCR) влияние человеческого фактора на итоги исследования минимально – пробирки помещаются в современный высокотехнологичный прибор и ни разу не открываются на протяжении всех циклов, включая анализ результатов, который тоже проводит умная машина. У этого способа только два очевидных недостатка – высокая стоимость и ограниченная доступность, поскольку амплификаторами нового поколения оснащена далеко не каждая лаборатория.

ПЦР-диагностика активно используется во многих отраслях клинической медицины:

Урогинекология и дерматовенерология. Это, пожалуй, самые заинтересованные в ПЦР врачебные направления. С помощью соответствующего анализа можно диагностировать любые заболевания, передающиеся половым путем: гонорею, трихомониаз, микоплазмоз, уреаплазмоз, хламидиоз, гарднереллез и т. д. Метод ПЦР позволяет обнаружить и вирусы, часто поражающие органы половой сферы человека – например, генитальный герпес или папилломовирус. А эти возбудители, как известно, обладают онкогенной активностью, то есть могут провоцировать развитие злокачественных опухолей (рака шейки матки у женщин, рака предстательной железы у мужчин);

Инфектология и эпидемиология. На втором (а возможно и на первом) месте по частоте использования ПЦР-диагностики находится инфекционная медицина, поскольку обсуждаемая методика позволяет диагностировать все распространенные заразные болезни, некоторые из которых несут смертельную угрозу здоровью людей и представляют эпидемиологическую опасность. Речь идет о ВИЧ, гепатитах, сифилисе, холере, бруцеллезе, токсоплазмозе, дифтерии, туляремии и прочих серьезных заболеваниях;

Донорство и трансплантология. ПЦР-диагностика позволяет службе крови оценивать качество донорского материала: выявлять опасных возбудителей и отсортировывать непригодный материал. А при пересадке органов очень важно оценить совместимость тканей донора и реципиента – тут на помощь тоже приходит методика ПЦР;

Генетика и репродуктология. С помощью специальных разновидностей ПЦР-анализа можно установить отцовство, просчитать риск возникновения опасных генных мутаций у предполагаемого потомства пары, обратившейся в центр планирования семьи, а также изучить взятый у беременной женщины биоматериал (например, амниотическую жидкость) с той же целью – вовремя обнаружить тяжелый порок развития плода;

Акушерство и неонатология. Современные родильные дома тоже часто используют ПЦР-диагностику, а некоторые даже имеют собственную лабораторию. Это нужно для того, чтобы максимально оперативно обследовать новорожденных малышей при подозрении на наличие у них внутриутробной или полученной во время родов инфекции: ВИЧ, сифилиса, хламидиоза, цитомегаловируса, мононуклеоза, краснухи и других;

Пульмонология и фтизиатрия. Метод ПЦР дает возможность специалистам этих врачебных направлений бороться с редкими, устойчивыми штаммами бактерий, вызывающих респираторные заболевания, например, атипичный хронический бронхит. В этом случае успех лечения целиком зависит от того, удастся ли точно идентифицировать возбудителя болезни и назначить адресную терапию. Кроме того, ПЦР-анализ позволяет проводить максимально раннюю диагностику туберкулеза;

Гастроэнтерология и аллергология. Врачи этих двух специальностей тоже крайне заинтересованы в методе ПЦР, поскольку он дает возможность обнаружить главную причину развития гастрита и язвы желудка – коварную бактерию Хеликобактер пилори, а также установить индивидуальную непереносимость продуктов питания у конкретного человека. Существуют врожденные особенности работы пищеварительного тракта, не позволяющие правильно перерабатывать и усваивать некоторые компоненты пищи, например, глютен или лактозу. Эти особенности наследуются генетически, следовательно, могут быть обнаружены методом ПЦР. Кстати, если у кого-то из родителей есть аллергия на определенный продукт (орехи, грибы, цитрусовые), то велика вероятность того, что у ребенка возникнет такая же проблема;

Онкология. Специалисты этого серьезнейшего направления медицины используют ПЦР-диагностику для оценки риска развития злокачественных опухолей у пациента, поскольку те клетки человеческого тела, которые подвергаются мутации и начинают бесконтрольно делиться, меняют структуру своей ДНК и начинают отличаться от здоровых клеток. Необходимо взять пункцию или биопсию подозрительных тканей и изучить материал методом ПЦР, чтобы установить масштабы угрозы.

А вот лишь неполный список тех вредоносных микроорганизмов, которые можно обнаружить с помощью ПЦР-анализа:

Обширное семейство герпес-вирусов, в том числе цитомегаловирус, варицелла-зостер, вирус Эпштейна-Барра и другие;

источник