Анализ на скрытые инфекции методом ифа

Иммуноферментный анализ (ИФА) — это метод лабораторной диагностики, заключающийся в выявлении специфических (индивидуальных для каждого микроорганизма, вируса) антител.

Антитела (иммуноглобулины, Ig) — специфические белки-защитники, вырабатываемые лейкоцитами (белыми кровяными тельцами) в ответ на появление в организме чужеродного генетического материала (вирусов, бактерий, простейших).

Иными словами, результат иммуноферментного анализа (ИФА) показывает не факт наличия инфекционного агента (инфекции) в организме, а состояние иммунитета к этому инфекционному агенту.

Таким образом, на основании результатов исследования крови методом ИФА можно лишь опосредованно (косвенно) судить о наличии /отсутствии инфекционного агента (вирусов, бактерий, простейших) по ответной реакции на него иммунной (защитной) системы организма.

В зависимости от срока давности существования в организме человека вирусов, бактерий, простейших вырабатываются антитела классов А, M, G (IgА, IgM, IgG).

Антитела классов А, M, G свидетельствуют о свежем, недавнем или давно существующем заражении соответственно.

По комбинации количественных показателей антител данных классов можно судить об обострении или снижении активности хронического инфекционного процесса, или повторном заражении.

Данная информация представляет в гинекологии и дерматовенерологии известную ценность, позволяя ответить на вопрос «кто кого заразил?» и подобрать лечение в зависимости от длительности инфекционного процесса.

Исследование крови методом ИФА в гинекологии широко используют для диагностики микоплазмоза, уреаплазмоза, трихомоноза, гарднереллеза, гонореи, TORCH-инфекций (токсоплазмы, краснухи, цитомегаловирусной инфекции и герпеса).

В случае низкой иммуногенности инфекционного агента (инфекции) либо недостаточной активности иммунной системы выработка антител (иммуноглобулинов классов А, M, G) может отсутствовать или быть диагностически незначимой при фактическом (реальном) наличии инфекционного агента (инфекции) в организме по данным полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Слабой иммуногенностью (способностью существовать незаметно для иммунной системы) обладают микоплазмы, уреаплазмы, трихомонада.

Результаты иммуноферментного анализа (ИФА) в ряде случаев могут быть ложноположительными, т.е. при фактическом отсутствии инфекционного агента (инфекции) в организме иммуноферментный анализ (ИФА) определяет наличие антител к нему.

Высокая частота ложноположительных реакций часто отмечается при диагностике методом ИФА трихомоноза (трихомониаза).

Низкой иммуногенностью инфекционного агента (бактерий, вирусов, простейших) и индивидуальными особенностями иммунитета человека объясняется кажущееся противоречие результатов ИФА и ПЦР, при котором исследование методом ИФА не находит инфекцию, а метод ПЦР свидетельствует о наличии инфекции в организме.

Таким образом, диагностика инфекционных заболеваний, включая инфекции, передаваемые половым путем (анализ на скрытые инфекции), требует комплексной (совокупной) оценки результатов нескольких диагностических методов.

Иммуноферментный анализ (ИФА) позволяет выявить специфические белки, возникающие в организме человека при наличии онкологического процесса — так называемые онкомаркеры.

ПЦР (полимеразная цепная реакция, ПЦР-анализ) — это метод лабораторной диагностики различных вирусов, бактерий, простейших на основании выявления их генетического материала (РНК и ДНК) в исследуемом биологическом материале: в крови, слюне, эякуляте (сперме), моче, выделениях из половых путей, мазках, соскобах и т.д.

В основе метода ПЦР лежит многократное удвоение типоспецифического (т.е. характерного для конкретного микроорганизма) участка РНК или ДНК, вследствие чего нарабатывается достаточное для точной идентификации данного микроорганизма количество РНК или ДНК.

Метод ПЦР является молекулярно-генетическим методом исследования.

В настоящее время полимеразная цепная реакция (ПЦР) является самым точным и чувствительным методом диагностики скрытых инфекций (инфекций, передаваемых половым путем) и иных инфекционных заболеваний после культурального исследования (посева на среду).

Таким образом, результаты исследования методом ПЦР свидетельствуют о наличии/отсутствии непосредственно инфекционного агента (вирусов, бактерий, простейших) в исследуемом органе (образце клеток, ткани).

Основным преимуществом метода ПЦР является высокая чувствительность и специфичность, т.е. способность определить возбудителя заболевания при наличии в пробе всего нескольких молекул его ДНК или РНК. Поэтому возможным становится обнаружение возбудителей заболеваний (в том числе скрытых инфекций) даже в тех случаях, когда другими методами их выявление не возможно.

Специфичность ПЦР (т.е. способность безошибочно определить данный вирус, бактерию) близка к 100%, что значительно превышает возможности микроскопии, иммуноферментного анализа (ИФА).

По этой причине исследование методом ПЦР нашло широкое применение в практике врачей Курортной клиники женского здоровья при экспертном выявлении скрытых инфекций: хламидиоза, микоплазмоза, уреаплазмоза, трихомоноза, бактериального вагиноза, вирусов папилломы человека и других вялотекущих либо скрыто существующих инфекций.

Следует учитывать, что результат ПЦР-исследования распространяется лишь на орган (ткань), клеточный материал которого с помощью мазка-соскоба забирается на исследование.

Это вносит известные ограничения, не позволяющие в ряде случаев судить о распространенности процесса. Например, выявление хламидий в канале шейки матки не позволяет утверждать присутствие хламидий в маточных трубах, ткани яичников, суставах, легких и иных органах и тканях.

Таким образом, метод ПЦР (ПЦР-анализ) отличается высокой информативностью и достоверностью относительно инфицирования (заражения) конкретного органа (участка ткани), а метод ИФА косвенно показывает распространенность процесса и возможную вовлеченность в инфекционный процесс органов и тканей, недоступных для прямой диагностики.

Методы ИФА и ПЦР взаимо дополняют друг друга. В рутинной (повседневной) практике Курортной клиники женского здоровья мы применяем все методы исследования для быстрой, достоверной диагностики.

Забор крови и мазков с целью проведения исследований методами ИФА и ПЦР в Курортной клинике женского здоровья осуществляют профессионально подготовленные акушерки, прошедшие специализацию по лабораторной диагностике. Забор крови и мазков выполняется безболезненно и в комфортных условиях.

Особенности диагностики инфекций, передаваемых половым путем (скрытых инфекций), и условия подготовки к исследованиям подробно изложены на нашем сайте в соответствующих статьях.

Мы в полном Вашем распоряжении при возникновении любых сомнений или пожеланий.

Мы работаем без выходных и праздничных дней:

понедельник — пятница с 8.00 до 20.00,
суббота, воскресенье, праздничные дни с 8.00 до 17.00.
Прием по предварительной записи по многоканальному телефону 8 (800) 500-52-74 (звонок по России бесплатный), или +7 (928) 022-05-32 , или info@kurortklinika.ru.

Вопрос: Анализ ИФА, что это в гинекологии?
Ответ: Иммуноферментный анализ (ИФА) — это метод лабораторной диагностики, заключающийся в выявлении специфических (индивидуальных для каждого микроорганизма, вируса) антител.
На основании результатов исследования крови методом ИФА можно лишь опосредованно (косвенно) судить о наличии /отсутствии инфекционного агента (вирусов, бактерий, простейших) по ответной реакции на него иммунной (защитной) системы организма.

Вопрос: Хламидиоз в крови как выявить?
Ответ: Хламидиоз в крови можно выявить методом иммуноферментного анализа (ИФА). Иммуноферментный анализ позволяет определить в крови антитела классов A, M, G к хламидии. Чувствительность выявления хламидий методом ИФА (точность метода) составляет 50-60%.
Иными словами, иммуноферментный анализ (ИФА) позволяет определить в крови наличие антител (иммуноглобулинов (Ig) классов А,М,G) к хламидии. Специфические иммуноглобулины классов A, M, G вырабатываются организмом в ответ на свежее (Ig A), недавнее (Ig M) появление хламидий и длительное (Ig G) носительство хламидий.

Вопрос: Анализ ПЦР положительный после лечения. Как такое может быть?
Ответ: Положительный ПЦР после лечения свидетельствует о наличии ДНК возбудителя инфекции: вируса или бактерии. При этом, если ПЦР-мазок был взят ранее, чем через 30 дней после последнего приема антибиотиков, положительный анализ ПЦР может свидетельствовать о выявлении мертвых бактерий или вирусов.
Положительный анализ ПЦР после 30 дней с момента окончания лечения свидетельствует о сохранении инфекции и устойчивости инфекции к лечению, то есть о необходимости продолжить лечение.

Вопрос: ПЦР анализ, что это такое?
Ответ: ПЦР (полимеразная цепная реакция, ПЦР-анализ) — это метод лабораторной диагностики различных вирусов, бактерий, простейших на основании выявления их генетического материала (РНК и ДНК) в исследуемом биологическом материале: в крови, слюне, эякуляте (сперме), моче, выделениях из половых путей, мазках, соскобах и т.д.
Результаты исследования методом ПЦР свидетельствуют о наличии/отсутствии непосредственно инфекционного агента (вирусов, бактерий, простейших) в исследуемом органе (образце клеток, ткани).

источник

#1 Сообщение Anton » Сб мар 05, 2016 12:30 am

ВЫЯВЛЕНИЕ ИНФЕКЦИЙ МЕТОДАМИ ИФА И ПЦР НА ПРИМЕРЕ ХЛАМИДИЙ

Если ИФА на хламидии положительный (уровень антител превышает границы нормы) и при этом ПЦР отрицателен, то скорее всего тот материал, который исследовался методом ПЦР не содержит хлам, значит место локализации инфекции не в том месте и не в том материале. Хлам может значительно глубже засесть, нежели место и материал, которые были взяты на исследование ПЦРом. Если предположим хлам засел в придатке яичка или в самом яичке, то взяв мазок из передней уретры, хлам ты не обнаружишь. Хламидии это внутриклеточные паразиты, и если они уже давненько сидят в организме, т.е. инфекция не свежая, то хлам перестает размножаться, сидит внутри клеток и не выходит оттуда в жидкости. И если при заборе материала пораженные клетки не попали в исследуемый материал, то ты хоть заобследуйся методом ПЦР, результат будет отрицательным. Т.е. если хам сидит в тканях простаты, задней уретры, яичек, придатков яичек, семенных пузырьков, то взяв обычный соскоб из передней уретры, либо сперму, либо секрет простаты — хлам в этих материалах не обнаружится, или может быть обнаружен только если хлам в острой фазе, т.е. когда он свежий и размножается, т.е. выходит из клеток в жидкости, тогда его возможно выловить ПЦРом в сперме, секрете простаты, в первой порции мочи. А когда хлам хронический/латентный/аберантный, засевший в клетках тканей органов мочеполовой системы, то ПЦРом ты его не выловишь. Другой вариант, если сделать биопсию тканей из мест локализаций хлама, т.е. из мест поражения, то ПЦРом обнаружить хлам засевший в клетках возможно.
Поэтому, если методом ПЦР в мазке из передней уретры, в сперме, в секрете простаты, в первой порции мочи хлам не обнаружен, но при этом методом ИФА обнаружен повышенный титр антител к хламу, то хлам в таком случае на 99,99% есть, просто он сидит в клетках тканей пораженных органов мочеполовой системы, т.к. хлам в данном случае это уже не свежая инфекция.
Хлам вначале инфекционного процесса ПЦРом обнаруживается в передней уретре, а также может быть обнаружен в секрете простаты, сперме, первой порции мочи, т.к. когда хлам свежий или в острой фазе активно делится (размножается) и выходит за пределы клеток в жидкости.
Хлам это восходящая инфекция, т.е. в начале инфекционного процесса он может быть выявлен в передней уретре, а далее он переходит в верх по восходящей в заднюю уретру, в простату, семенные пузырьки, семенные канатики (семевыводящие пути), яички, придатки яичек, также и в шейку мочевого пузыря, сам мочевой пузырь, также и далее другие органы и системы, в т.ч. суставы, позвоночник, может поражать печень (Перигепатит) и пр. При этом, если курс лечения подобран не верно, либо лечение было начато поздно, из передней уретры он может бить элиминирован, а во всех выше восходящих мочеполовых путях и органах оставаться на долгие годы. Т.о. хлам может сидеть не только в органах мочеполовой системы, но может и перебраться в органы других систем. Поэтому хлам методом ИФА часто и обнаруживается, при этом в мазке из уретры, сперме, моче, секрете простаты методом ПЦР не обнаруживается. Это сигнал грамотному добросовестному врачу, что хлам уже в латентной форме, забрался высоко и глубоко, и искать его нужно в клетках тканей органов, а не жидкостях и не передней уретре.
Более того, если хлам уже давний, перешедший в хроническую скрытую форму, засевший глубоко в ткани органов мочеполовой и не только систем, он оказывает супрессивное воздействие на иммунную систему, т.е. подавляет её, и как следствие подавляет выработку к нему антител. Т.о. мы может получить и по ПЦР отрицательно и по ИФА тоже отрицательно. При этому хлам есть.
Единственный выход из данной ситуации в плане диагностики это:
— либо иммунная модуляция иммуномодулятором (Пирогенал, Интерфероны, и т.п.) для выработки антител к хламу и последующее обнаружение их методом ИФА
— либо опять же иммунная модуляция/провокация (Пирогенал, Интерфероны, и т.п.) для провокации хлама и выводу его в острую фазу, т.е. к делению/размножению, что спровоцирует выход хлама из клеток тканей в жидкости и распространению по половым путям, в этом случае возможно обнаружение хлама в сперме, секрете простаты, передней уретре, первой порции мочи.
ЭТО КАСАЕТСЯ ЛЮБОЙ ИНФЕКЦИИ, А НЕ ТОЛЬКО ХЛАМИДИЙ.

#2 Сообщение Anton » Сб мар 05, 2016 9:17 pm

РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ВЫЯВЛЕНИЮ ИНФЕКЦИЙ МЕТОДОМ ИФА

Исследование крови методом ИФА на антитела классов IgM, IgA, IgG к ИППП инфекциям с предварительной иммуномодуляцией. http://hron-prostatit.ru/forum/viewtopic.php?t=9253

Если на какие-то герпесвирусы ИФА сдать не найдешь где, к примеру на 6,7,8 типы герпесвирусов, то можно сдать на эти вирусы слюну на исследование методом ПЦР. Да и вообще рекомендуется на все типы герпесвирусов (1-8 типы) также исследовать слюну методом ПЦР.
Но в принципе и ИФА будет достаточно.

Интерпретация результатов ИФА применительно к ИППП:
Антитела класса IgA — хроническая, упорно текущая инфекция
Антитела класса IgM — свежая инфекция, либо обострение хронической инфекции
Антитела класса IgG — если титры в пределах допустимой нормы, то инфекция была когда-то. если высоченные титры, то хроническая активная инфекция, также не исключено, что низкие титры IgG могут быть признаком хронической инфекции

источник

Анализ крови на скрытые инфекции необходим для выявления патогенных микроорганизмов, которые являются провокаторами таких заболеваний, передающихся половым путем, как уреаплазмоз, микоплазмоз, генитальный герпес, папилломавирусная и цитомегаловирусная болезни, гепатит и ВИЧ-инфекция.

Под скрытой инфекцией подразумевают собой носительство патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, способных при благоприятных для них условиях спровоцировать развитие инфекционно-воспалительного процесса.

Скрытая инфекция может долго не давать о себе знать, но присутствовать в организме, то есть период носительства может быть довольно продолжительным. При определенных условиях, например, ослаблении функциональности иммунной системы, возбудитель инициирует патологический процесс, после чего развивается полноценная клиническая картина того или иного заболевания. Каждая болезнь характеризуется своими особенностями этапности и течения, поэтому нельзя выделить строгие этапы развития скрытой инфекции. Однозначно можно сказать только о двух обязательных стадиях — стадии носительства и стадии развития клинической симптоматики.

Перечень признаков развития скрытой инфекции также варьирует в зависимости от патологии. Инфекционные патологии, передающиеся половым путем, не всегда затрагивают только лишь репродуктивную систему. Поэтому клиника может быть многообразной. Особенности симптоматики отдельных болезней будут рассмотрены ниже.

В перечень показаний для назначения анализа на скрытые инфекционные заболевания, передающиеся половым путем, входят:

• болевой синдром в нижней части живота;
• выделения из влагалища в большом количестве, с неприятным запахом, нехарактерным цветом;
• планирование беременности;
• подготовка к хирургического вмешательству на органы выделительной и репродуктивной систем;
• случайный незащищенный половой акт;
• проблемы бесплодия и невынашивания;
• контроль эффективности терапевтической коррекции инфекционных заболеваний мочеполовой системы.

Особенно важен анализ на скрытые инфекции при вынашивании беременности и во время подготовки к ней. Врач должен выдавать направление на обследование женщинам, которые планируют забеременеть, а также контролировать состояние здоровья пациенток, которые уже вынашивают ребенка.

В перечень заболеваний, которые могут быть выявлены после лабораторного обследования, включены патологии, рассмотренные ниже.

Герпетические заболевания — простой герпес и цитомегаловирусная инфекция — широко распространены, могут протекать скрыто. Опасны для беременных, поэтому включены в перечень обязательных анализов (комплекс ToRCH-исследований).

Инфекция, спровоцированная вирусом папилломы человека. Определенные типы ВПЧ являются провокаторами онкологических патологий., в частности, рака шейки матки. В настоящее время во многих странах проводится вакцинация против 16 и 18 типов ВПЧ, которые наиболее часто провоцируют онкозаболевания.

Гарнднереллез, или бактериальный вагиноз, развивается как следствие нарушения дисбаланса микрофлоры влагалища. Возбудителем патологии является специфический микроорганизм — гарднерелла. При заболевании увеличивается объем выделений из влагалища и они приобретают неприятный запах.

Кандидоз, или молочница, — заболевание, которое развивается из-за нарушения баланса флоры влагалища и интенсивного размножения грибков рода кандида. Патология характеризуется появлением творожистых выделений, а также зудом. Болезнь может проявляться при ослаблении иммунитета и приеме больших доз антибиотиков.

Эти патологии провоцируются, соответственно, такими возбудителями, как микоплазма и уреаплазма. Таксономически эти патогены находятся между бактериями, вирусами и грибами, имея сходные и отличные черты с каждым из этих классов. Основным путем передачи инфекции является половой. Симптоматика после заражения может не проявляться на протяжении долгого времени. Заболевание может проявиться при снижении функциональности иммунитета, то есть возбудителей следует считать условно-патогенными.

Пациентам мужского пола заражение может грозить простатитом, а женского — повреждением эндометрия и плодного яйца в период вынашивания ребенка. Из-за этого возможны выкидыши, мертворождения, а также отрицательное влияние на развитие плода в случае нормального вынашивания.

Возбудитель — хламидия, внутриклеточный паразит. Заболевание может протекать бессимптомно, однако, также опасно для женщин во время беременности, поскольку может оказать негативное влияние на плод. Кроме того, инфекция может стать причиной бесплодия.

Гонококки провоцируют такое неприятное и опасное заболевание, как гонорея. Патология проявляется как интенсивный воспалительный процесс, провоцирующий такие симптомы, как зуд, обильные желтоватые выделения, боли и кровь при мочеиспускании.

Следует рассмотреть еще ряд заболеваний:

1. Актиномикоз. При нарушении местного иммунитета актиномицеты способны вызывать воспалительный процесс на слизистой оболочке.
2. Трихомониаз. Симптоматика данной патологии заключается в появлении обильных пенистых выделений с неприятным запахом, также для заболевания характерны зуд, неприятные ощущения при мочеиспускании, дискомфорт при половых контактах. Однако, хронический трихомониаз может и не давать ярких симптомов. Поэтому после курса терапии от этой патологии следует обязательно несколько раз проходить лабораторный контроль для подтверждения излечения.
3. Гепатиты (В, С). Возбудителями являются вирусы гепатита, которые могут поступать в организм человека при половом контакте. Заболевание на протяжении длительного времени может не давать о себе знать, однако, может провоцировать крайне тяжелые последствия. Поэтому следует регулярно проходить профилактические обследования.
4. ВИЧ-инфекция. Опасная болезнь, возбудитель которой может передаваться половым путем. Чтобы предупредить заболевание, следует соблюдать профилактические меры, исключая незащищенные половые контакты, использование нестерильного медицинского инструментария и другие факторы, способные спровоцировать заражение.

Скрытые инфекции весьма коварны и могут вызывать очень тяжелые заболевания. По этой причине и велика важность регулярных профилактических и диспансерных обследований.

Анализ на скрытые инфекции может проводиться с использованием нескольких основных методик:

1. Иммуноферментный анализ (кратко называется ИФА). С его помощью в крови определяются антитела к антигенам возбудителей скрытых инфекций. Методика отличается высокой чувствительностью и специфичностью.
2. Полимеразная цепная реакция (ПЦР). С ее помощью в биоматериале (мазок из влагалища, уретры, кровь, сперма) определяется РНК или ДНК патогена. Методика характеризуется высокой точностью и специфичностью, позволяет определить наличие генетического материала инфекционного микроорганизма даже при крайне малом его количестве.
3. Бактериальный посев с выделением культуры провокатора заболевания и определением его чувствительности к антибиотическим препаратам. Метод важен для подбора наиболее эффективной схемы лечения заболевания при его выявлении.
4. Бактериоскопия. Мазок на скрытые инфекции исследуется посредством микроскопии.

Расшифровка мазка на ИППП может выявить гонококки, гарднереллы, мицелий и споры грибка рода Кандида, трихомонады. При подозрении на гонорею проводят еще одно исследование, при котором изучают мазок биоматериала на гонококки.

Перед посещением медицинского учреждения для сдачи биоматериала из влагалища или уретры необходимо:

• за двое суток исключить половые контакты;
• за двое суток исключить применение интравагинальных таблеток, суппозиториев и спринцевания;
• на протяжении двух часов до взятия биоматериала не мочиться;
• женщинам рекомендуется сдавать анализ на 4-5 день менструального цикла, сразу после завершения менструальных кровотечений.

Перед визитом в лабораторию для сдачи крови на анализ следует:

• не принимать пищу на протяжении 8 часов (рекомендуется кровь сдавать утром натощак);
• за два дня не пить алкоголь и не есть слишком жирную, копченую, соленую пищу;
• не курить непосредственно перед сдачей крови;
• исключить физическое и эмоциональное перенапряжение;
• посоветоваться с врачом насчет необходимости отмены принимаемых лекарственных препаратов.

На осмотре гинеколог или уролог берет биоматериал при помощи стерильного одноразового инструмента. У мужчин материал берется из мочеиспускательного канала, а у женщин — из влагалища, цервикса и уретры. После этого или делается мазок и стекло поставляется в лабораторию, или биоматериал помещается в одноразовую пробирку и также отправляется на исследование. Скорость проведения анализа зависит от загруженности лаборатории.

Процедура забора крови для анализа

Так же берут анализ крови на скрытые инфекции. Кровь берут из локтевой вены, центрифугируют, отбирают сыворотку и проводят исследование.

Скорость выполнения анализа зависит от загруженности лаборатории, но в среднем составляет 1-2 дня. Исключением являются бактериологические анализы, требующие более долгого ожидания — 5-7 суток. Расшифровка исследования проводится специалистом. В здоровом состоянии никаких инфекций не должно быть выявлено. При подтверждении присутствия возбудителя заболевания в биоматериале необходима консультация специалиста для назначения лечения.

Обратите внимание! После курса терапии обязателен регулярный лабораторный контроль, который призван подтвердить эффективность лечения и своевременно предпринять необходимые меры, если полное излечение не было достигнуто.

Диагностика скрытых инфекций у беременных женщин крайне важна, поскольку некоторые патологии довольно опасны и могут привести к нежелательным последствиям, которые включают риск невынашивания и пороки развития у малыша. Поэтому на протяжении беременности женщина несколько раз должна сдать анализы на выявление скрытых инфекций. Своевременное обнаружение патологии позволит предотвратить развитие серьезных осложнений.

Каждый человек должен помнить и о мерах профилактики, предупреждающих возможность заражения половыми инфекциями. В их перечень входят:

• использование барьерных средств контрацепции при половом контакте;
• воздержание от случайных сексуальных связей;
• соблюдение правил личной гигиены;
• обращение к врачу при необходимости экстренной профилактики заболеваний, передающихся половым путем (специалист назначит антисептические, антибактериальные, противовирусные препараты по ситуации).

Таким образом, важность исследований биоматериала на скрытые инфекции, передающиеся половым путем, неоспорима. При наличии показаний, а также в процессе регулярного профилактического обследования следует сдать нужный анализ для выявления возбудителей или для подтверждения того, что пациент ничем не болеет и носителем патогенов не является.

При обнаружении инфекционных микроорганизмов и антител к ним врач должен назначить курс терапевтической коррекции, по завершению которого обязательно проведение лабораторного контроля состояния здоровья пациента.

Помните! Внимательное отношение к своему здоровью позволит предупредить заболевания или выявить их на ранней стадии, когда меры терапевтической коррекции будут наиболее эффективны.

Однако, некоторые болезни очень сложно, а иногда и практически невозможно вылечить даже при условии ранней диагностики. Поэтому крайне важно соблюдать все меры профилактики заражения заболеваниями, которые передаются половым путем.

источник

ПЦР: СВЕРХЧУВСТВИТЕЛЬНАЯ ДИАГНОСТИКА ИНФЕКЦИЙ

ПЦР — это метод лабораторной диагностики, направленный на выявление возбудителей инфекционных заболеваний. Трехбуквенный вариант — это аббревиатура названия «полимеразная цепная реакция». Собственно, в этом названии и отражается суть метода

Метод ПЦР был разработан в 1983 году Кэри Мюллисом, за что он был удостоен Нобелевской премии. Изначально метод использовался в основном для научных целей, но затем, разглядев его перспективность и эффективность, метод стали продвигать в практическую медицину.

За генетическую информацию в живом организме любого размера отвечает ДНК — двухспиральная дезоксирибонуклеиновая кислота, состоящая из последовательности четырех нуклеотидов, которые принято обозначать буквами А (аденин), Г (гуанин), Т (тимидин) и Ц (цитозин). Одно из основных правил генетики – правило комплементарности, то есть нуклеотиды соседних спиралей ДНК соединяются только в определеном порядке: А с Т, Г с Ц, и никак иначе. У каждого живого создания (бактерия, вирус, рыба, зверь) – своя ДНК, причем для выявления конкретного организма достаточно иметь лишь небольшой участок этого хранилища генетической информации. Некоторые виды микроорганизмов, например, вирус иммунодефицита человека, хранят генетическую информацию в другой нуклеиновой кислоте – РНК, но и ее фрагменты можно находить с помощью ПЦР. Именно на обнаружении этого небольшого, но уникального для каждого отдельного организма участка и построен принцип ПЦР.

Для каждого возбудителя создан свой специфический генетический детектор, эталонный фрагмент ДНК, который по принципу комплементарности точно обнаруживает «свой» фрагмент ДНК и запускает реакцию создания огромного количества его копий. Один цикл ПЦР длится около трех минут, количество копий растет в геометрической прогрессии. Таким образом, за несколько часов количество фрагментов увеличивается в несколько миллиардов раз.

Понятно, что теперь определить, какой возбудитель у данной конкретной инфекции, достаточно легко.

Какую же практическую выгоду получает человек, когда отправляется на поиски вредоносных микроорганизмов, вооруженный ПЦР?

• Безусловно, одно из главных достоинств — это универсальность метода. ПЦР позволяет обнаруживать любые ДНК и РНК, даже когда бессильны другие методы. Оборудование, используемое для ПЦР, стандартно, оно не зависит от того, что именно и где именно мы ищем.
• Следующий плюс — высокая специфичность. В материале, направленном на исследование, определяется уникальная последовательность нуклеотидов, характерная только для конкретного возбудителя. Таким образом, можно говорить, что специфичность метода достигает 100%. Кроме того, это позволяет одновременно, в одном и том же материале, проводить поиск нескольких возбудителей без какого-либо ущерба для качества ответа.
• Метод ПЦР обладает высочайшей чувствительностью – мы уже говорили о том, что возможно найти всего один фрагмент генетического материала возбудителя.
• Несомненное преимущество метода – оперативность. Постановка реакции занимает несколько часов, таким образом, вся диагностика, от момента сдачи материала на анализ до получения результата, отнимет всего один день.
• При помощи ПЦР определяют возбудителя, а не реакцию на его внедрение со стороны организма. Таким образом, появилась возможность точно диагностировать заболевание еще в инкубационном периоде, когда нет никаких клинических или лабораторных признаков болезни. Когда нужно делать?

Когда следует бежать в лабораторию, чтобы проанализировать итоги вашего летнего отпуска?

Специалисты советуют делать это в следующих случаях: выделения, зуд, чувство жжения в области половых органов, резко изменившийся запах от половых органов, дискомфорт при мочеиспускании, необычный характер выделений (цвет, количество, консистенция), случайный половой контакт без применения презерватива. Безусловно, ПЦР — мощный и эффективный диагностический инструмент, позволяющий быстро и точно найти возбудителей очень многих инфекций. Чаще всего его используют для диагностики именно заболеваний, передающихся половым путем.

В любом случае нельзя ограничиваться только одним методом. Лучше всего комбинировать различные методы исследования – помимо определения самого возбудителя методом ПЦР? необходимо оценивать и иммунный ответ организма, который определяется традиционными серологическими методами, например — ИФА.

ИССЛЕДОВАНИЕ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ МЕТОДОМ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА (ИФА)

В основе иммуноферментного анализа (ИФА) лежит иммунная реакция антигена с антителом.

Для исследования методом ИФА используется кровь из вены, полученная натощак.

Иммуно-ферментный анализ (ИФА) применяется в диагностике урогенитальных инфекций для выявления наличия в сыворотке крови специфических иммуноглобулинов (Ig или антител) — белков, вырабатываемых клетками иммунной системы, направленных на борьбу с внедрившимся в организм инфекционным агентом. Связываясь с микробной клеткой или продуктами ее жизнедеятельности, иммуноглобулины нейтрализуют их и способствуют их элиминации. Таким образом, иммуноглобулины представляют собой суть гуморального иммунитета, то есть иммунитета, обусловленного субстанциями, содержащимися в жидкостях тела, в отличие от клеточного иммунитета, связанного с присутствием специальных клеток иммунной системы.

На каждый вид (и даже подвид) возбудителя вырабатываются свои определенные антитела, которые, как правило, не связываются ни с каким другим инфекционным агентом. Благодаря этому определение антител обеспечивает достаточно высокую специфичность анализа. Из пяти классов Ig в диагностике инфекционных заболеваний чаще всего используются Ig трех типов А, M и G. Прежде всего нужно помнить, что существует некоторый промежуток времени с момента внедрения инфекционного агента в организм и до момента появления антител в сыворотке крови — это так называемый серонегативный период. Для различных инфекций и отдельных индивидуумов он может быть неодинаков, в среднем же для возбудителей урогенитальных заболеваний он составляет 1-4 недели.

РАСХОЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИФА И ПЦР

Случается, что результаты ПЦР и ИФА-диагностики могут не совпадать. Обычно это происходит вследствие нескольких причин:

• «Иммунологический след» — «след» от уже перенесенной инфекции. В ответ на внедрение инфекции организм начинает вырабатывать антитела, в частности, антитела класса IgG. Эти антитела «улавливает» ИФА-анализ. Метод ПЦР реагирует только на наличие молекул ДНК инфекции в организме. В такой ситуации ПЦР-анализ дает отрицательный результат, а ИФА — положительный. При чем в связи с индивидуальными особенностями иммунной системы положительный результат ИФА-диагностики, вызванный повышенным содержанием антител, может сохраняться несколько месяцев и даже лет после полного выздоровления.
• Разница в оборудовании для проведения диагностики. Получение положительного результата ИФА и ПЦР — отрицательного, может быть вызвано использованием особых тест-систем в ИФА-анализе, которые выявляют все виды бактерий, в том числе те, которые в определенном количеств в норме содержатся в организме человека. Тест-система, используемая в ПЦР-анализе, может быть основана только на определении особого вида болезнетворных бактерий. Например, тест-система для ИФА-диагностики настроена на выявление всех видов хламидий: С. Pneumonia, C. Pecorum, C. Psittaci, а в проведении ПЦР-анализа может быть использована тест-система, выявляющая только С. Trachomatis. Вот почему ИФА-анализ на С. Pneumonia будет положительным, а ПЦР — отрицательным.
• Разница в используемом материале.

Материал для ПЦР получают из места предполагаемой локализации инфекции. Для ИФА-диагностики разницы в месте нет, поскольку ИФА «реагирует» на антитела, которые вырабатываются при инфекционном процессе любой локализации. Как результат — ПЦР-диагностика дает отрицательный, а ИФА — положительный результат. Например, хламидии могут локализироваться в разных местах организма. Вызвав хронический сальпингит, проведенный в области шейки матки анализ ПЦР хламидии не обнаружит. Но ИФА-диагностика все равно выявит выработку антител, сопровождающую инфекционный процесс.

Хронические инфекционные заболевания могут стать причиной разницы в результатах ИФА и ПЦР-диагностики. При этом зачастую ПЦР дает положительный, а ИФА — отрицательный результат. Уставшая от хронического инфекционного процесса иммунная система может «не показать» повышенный уровень антител к инфекции. Подобное может наблюдать врач-лаборант в том случае, если инфекция «свежая», т. е. даже при наличии определенных симптомов уровень антител класса IgG в крови не превысит норму, поскольку они еще не начали вырабатываться. Для половых инфекций подобный период «молчания» ИФА-диагностики может достигать двух недель.

Как и анализ ПЦР, ИФА-методы широко применяются в современной лабораторной диагностике ИППП . При чем врач может назначить Вам не только сдать ПЦР анализ, но и провести ИФА — диагностику для выявления определенной инфекции. С непрофессиональной точки зрения пациента подобный комплекс исследования вызывает много вопросов, поскольку все лабораторные методы исследования на первый взгляд кажутся абсолютно одинаковыми. Но, несмотря на внешнюю схожесть, разница между ПЦР, ИФА и другими иммунологическими исследованиями все же есть.

ИФА-анализ основан на выявлении не самой инфекции, а ее продуктов жизнедеятельности — белов-маркеров. ПЦР-анализ напротив выявляет существующие в настоящее время инфекционные агенты (бактерии, вирусы, грибы).

РИФ , как и другие иммунологические методы исследования, тоже несколько уступает достоверности ПЦР-инфекции. Суть РИФ такова, при проведении анализа антигены возбудителя (молекулы белка, свойственные инфекции) ищут антителами к ним. Если антитело «обнаружит» белок, антиген инфекции, значит потенциально человек инфицирован. Однако свойство антитела таково, что они могут реагировать не с одним, а с разными антигенами — так называемые перекрестно-реагирующие антигены. Из-за этого специфичность (способность метода выявлять лишь тот инфекционный агент, для которого данный метод исследования назначен) у РИФ чуть ниже, чем у ПЦР.

Случается, что результаты ПЦР и ИФА-диагностики могут не совпадать. Обычно это происходит вследствие нескольких причин:

• «Иммунологический след» — «след» от уже перенесенной инфекции . В ответ на внедрение инфекции организм начинает вырабатывать антитела, в частности,антитела класса IgG . Эти антитела «улавливает» ИФА-анализ. Метод ПЦР реагирует только на наличие молекул ДНК инфекции в организме. В такой ситуации ПЦР-анализ дает отрицательный результат, а ИФА — положительный. При чем в связи с индивидуальными особенностями иммунной системы положительный результат ИФА-диагностики, вызванный повышенным содержанием антител, может сохраняться несколько месяцев и даже лет после полного выздоровления.
• Разница в оборудовании для проведения диагностики . Получение положительного результата ИФА и ПЦР — отрицательного, может быть вызвано использованием особых тест-систем в ИФА-анализе, которые выявляют все виды бактерий, в том числе те, которые в определенном количеств в норме содержатся в организме человека. Тест-система , используемая в ПЦР-анализе, может быть основана только на определение особого вида болезнетворных бактерий. Например, тест-система для ИФА-диагностики настроена на выявление всех видов хламидий: С. Pneumonia, C. Pecorum, C. Psitaci. А в проведении ПЦР-анализа может быть использована тест-система, выявляющая только С. Trachomatis . Вот почему, ИФА-анализ на С. Pneumonia будет положительным, а ПЦР — отрицательным.
• Разница в используемом материале . Материал для ПЦР получают из места предполагаемой локализации инфекции. Для ИФА-диагностики разницы в месте нет, поскольку ИФА «реагирует» на антитела, которые вырабатываются при инфекционном процессе любой локализации. Как результат — ПЦР-диагностика дает отрицательный, а ИФА — положительный результат. Например, хламидии могут локализироваться в разных местах организма. Вызвав хронический сальпингит, проведенный в области шейки матки анализ ПЦР хламидии не обнаружит. Но ИФА-диагностика все равно выявит выработку антител, сопровождающую инфекционный процесс.
• Хронические инфекционные заболевания могут стать причиной разницы в результатах ИФА и ПЦР-диагностики. При этом зачастую ПЦР дает положительный, а ИФА — отрицательный результат. Уставшая от хронического инфекционного процесса иммунная система может «не показать» повышенный уровень антител к инфекции. Подобное может наблюдать врач-лаборант в том случае, если инфекция «свежая», т. е. даже при наличии определенных симптомов уровень антител класса IgG в крови не превысит норму, поскольку они еще не начали вырабатываться. Для половых инфекций подобный период «молчания» ИФА-диагностики может достигать двух недель.

Подводя итоги, можно сказать, что и ИФА, и ПЦР-анализы сами по себе не являются панацеей в диагностике инфекций. Нельзя одной ПЦР или ИФА-диагностикой заменить все существующие методы исследования, ими можно лишь дополнить их, позволив всем методам достигнуть реальных, точных, достоверных результатов.

В лабораторной диагностике существует множество методов выявления необходимого элемента в биоматериале. Для диагностики инфекционных заболеваний чаще всего используют два принципиально разных метода: ИФА и ПЦР . Мы предлагаем Вам ознакомиться с данными методами, чтоб понять плюсы и минусы каждого из них.

ПЦР – один из самых наукоемких методов. Он обнаруживает ДНК микроорганизма. Генетический материал индивидуален для любого микроба, а это значит, что метод обладает самой высокой специфичностью и не может «обознаться». Принцип ПЦР заключается в том, что в пробирке происходит многократное удвоение искомого генетического кода. В случае присутствия даже незначительного количества этого кода, произойдет увеличение его количества, и анализатор сможет «уловить» его наличие. Таким образом, ПЦР – «золотой стандарт» выявления инфекционных агентов. Однако, у этого метода есть и свои минусы. Во-первых, в отличие от ИФА, ПЦР может сказать о наличии возбудителя только в месте взятия биоматериала, которое ограничено мазком (например, с уретры или из носа). Во-вторых, за счет своей высокой чувствительности, ПЦР может обнаружить даже мертвые частицы микробов, что наблюдается сразу после лечения. В таком случае, результат будет ложноположительный.

Резюмируя вышесказанное, приведем таблицу сравнения этих двух методов друг с другом:

источник

ПЦР: СВЕРХЧУВСТВИТЕЛЬНАЯ ДИАГНОСТИКА ИНФЕКЦИЙ
ПЦР — ЭТО МЕТОД ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ, НАПРАВЛЕННЫЙ НА ВЫЯВЛЕНИЕ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ. ТРЕХБУКВЕННЫЙ ВАРИАНТ — ЭТО АББРЕВИАТУРА НАЗВАНИЯ «ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ». СОБСТВЕННО, В ЭТОМ НАЗВАНИИ И ОТРАЖАЕТСЯ СУТЬ МЕТОДА

Метод ПЦР был разработан в 1983 году Кэри Мюллисом, за что он был удостоен Нобелевской премии. Изначально метод использовался в основном для научных целей, но затем, разглядев его перспективность и эффективность, метод стали продвигать в практическую медицину. За генетическую информацию в живом организме любого размера отвечает ДНК — двухспиральная дезоксирибонуклеиновая кислота, состоящая из последовательности четырех нуклеотидов, которые принято обозначать буквами А (аденин), Г (гуанин), Т (тимидин) и Ц (цитозин). Одно из основных правил генетики – правило комплементарности, то есть нуклеотиды соседних спиралей ДНК соединяются только в определеном порядке: А с Т, Г с Ц, и никак иначе. У каждого живого создания (бактерия, вирус, рыба, зверь) – своя ДНК, причем для выявления конкретного организма достаточно иметь лишь небольшой участок этого хранилища генетической информации. Некоторые виды микроорганизмов, например, вирус иммунодефицита человека, хранят генетическую информацию в другой нуклеиновой кислоте – РНК, но и ее фрагменты можно находить с помощью ПЦР. Именно на обнаружении этого небольшого, но уникального для каждого отдельного организма участка и построен принцип ПЦР. Для каждого возбудителя создан свой специфический генетический детектор, эталонный фрагмент ДНК, который по принципу комплементарности точно обнаруживает «свой» фрагмент ДНК и запускает реакцию создания огромного количества его копий. Один цикл ПЦР длится около трех минут, количество копий растет в геометрической прогрессии. Таким образом, за несколько часов количество фрагментов увеличивается в несколько миллиардов раз.

ДОСТОИНСТВА
Понятно, что теперь определить, какой возбудитель у данной конкретной инфекции, достаточно легко. Какую же практическую выгоду получает человек, когда отправляется на поиски вредоносных микроорганизмов, вооруженный ПЦР?

— Безусловно, одно из главных достоинств — это универсальность метода. ПЦР позволяет обнаруживать любые ДНК и РНК, даже когда бессильны другие методы. Оборудование, используемое для ПЦР, стандартно, оно не зависит от того, что именно и где именно мы ищем.
— Следующий плюс — высокая специфичность. В материале, направленном на исследование, определяется уникальная последовательность нуклеотидов, характерная только для конкретного возбудителя. Таким образом, можно говорить, что специфичность метода достигает 100%. Кроме того, это позволяет одновременно, в одном и том же материале, проводить поиск нескольких возбудителей без какого-либо ущерба для качества ответа.
— Метод ПЦР обладает высочайшей чувствительностью – мы уже говорили о том, что возможно найти всего один фрагмент генетического материала возбудителя.

— Несомненное преимущество метода – оперативность. Постановка реакции занимает несколько часов, таким образом, вся диагностика, от момента сдачи материала на анализ до получения результата, отнимет всего один день.
— При помощи ПЦР определяют возбудителя, а не реакцию на его внедрение со стороны организма. Таким образом, появилась возможность точно диагностировать заболевание еще в инкубационном периоде, когда нет никаких клинических или лабораторных признаков болезни. Когда нужно делать?
Когда следует бежать в лабораторию, чтобы проанализировать итоги вашего летнего отпуска?
Специалисты советуют делать это в следующих случаях: выделения, зуд, чувство жжения в области половых органов, резко изменившийся запах от половых органов, дискомфорт при мочеиспускании, необычный характер выделений (цвет, количество, консистенция), случайный половой контакт без применения презерватива. Безусловно, ПЦР — мощный и эффективный диагностический инструмент, позволяющий быстро и точно найти возбудителей очень многих инфекций. Чаще всего его используют для диагностики именно заболеваний, передающихся половым путем.

В любом случае нельзя ограничиваться только одним методом. Лучше всего комбинировать различные методы исследования – помимо определения самого возбудителя методом ПЦР? необходимо оценивать и иммунный ответ организма, который определяется традиционными серологическими методами, например — ИФА.

ИССЛЕДОВАНИЕ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ МЕТОДОМ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА (ИФА)
В основе иммуноферментного анализа (ИФА) лежит иммунная реакция антигена с антителом.
Для исследования методом ИФА используется кровь из вены, полученная натощак.
Иммуно-ферментный анализ (ИФА) применяется в диагностике урогенитальных инфекций для выявления наличия в сыворотке крови специфических иммуноглобулинов (Ig или антител) — белков, вырабатываемых клетками иммунной системы, направленных на борьбу с внедрившимся в организм инфекционным агентом. Связываясь с микробной клеткой или продуктами ее жизнедеятельности, иммуноглобулины нейтрализуют их и способствуют их элиминации. Таким образом, иммуноглобулины представляют собой суть гуморального иммунитета, то есть иммунитета, обусловленного субстанциями, содержащимися в жидкостях тела, в отличие от клеточного иммунитета, связанного с присутствием специальных клеток иммунной системы.
На каждый вид (и даже подвид) возбудителя вырабатываются свои определенные антитела, которые, как правило, не связываются ни с каким другим инфекционным агентом. Благодаря этому определение антител обеспечивает достаточно высокую специфичность анализа. Из пяти классов Ig в диагностике инфекционных заболеваний чаще всего используются Ig трех типов А, M и G. Прежде всего нужно помнить, что существует некоторый промежуток времени с момента внедрения инфекционного агента в организм и до момента появления антител в сыворотке крови — это так называемый серонегативный период. Для различных инфекций и отдельных индивидуумов он может быть неодинаков, в среднем же для возбудителей урогенитальных заболеваний он составляет 1-4 недели.

РАСХОЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИФА И ПЦР
Случается, что результаты ПЦР и ИФА-диагностики могут не совпадать. Обычно это происходит вследствие нескольких причин:
— «Иммунологический след» — «след» от уже перенесенной инфекции. В ответ на внедрение инфекции организм начинает вырабатывать антитела, в частности, антитела класса IgG. Эти антитела «улавливает» ИФА-анализ. Метод ПЦР реагирует только на наличие молекул ДНК инфекции в организме. В такой ситуации ПЦР-анализ дает отрицательный результат, а ИФА — положительный. При чем в связи с индивидуальными особенностями иммунной системы положительный результат ИФА-диагностики, вызванный повышенным содержанием антител, может сохраняться несколько месяцев и даже лет после полного выздоровления.
— Разница в оборудовании для проведения диагностики. Получение положительного результата ИФА и ПЦР — отрицательного, может быть вызвано использованием особых тест-систем в ИФА-анализе, которые выявляют все виды бактерий, в том числе те, которые в определенном количеств в норме содержатся в организме человека. Тест-система, используемая в ПЦР-анализе, может быть основана только на определении особого вида болезнетворных бактерий. Например, тест-система для ИФА-диагностики настроена на выявление всех видов хламидий : С. Pneumonia, C. Pecorum, C. Psittaci, а в проведении ПЦР-анализа может быть использована тест-система, выявляющая только С. Trachomatis. Вот почему ИФА-анализ на С. Pneumonia будет положительным, а ПЦР — отрицательным.
— Разница в используемом материале.
Материал для ПЦР получают из места предполагаемой локализации инфекции. Для ИФА-диагностики разницы в месте нет, поскольку ИФА «реагирует» на антитела, которые вырабатываются при инфекционном процессе любой локализации. Как результат — ПЦР-диагностика дает отрицательный, а ИФА — положительный результат. Например, хламидии могут локализироваться в разных местах организма. Вызвав хронический сальпингит, проведенный в области шейки матки анализ ПЦР хламидии не обнаружит. Но ИФА-диагностика все равно выявит выработку антител, сопровождающую инфекционный процесс.
— Хронические инфекционные заболевания могут стать причиной разницы в результатах ИФА и ПЦР-диагностики. При этом зачастую ПЦР дает положительный, а ИФА — отрицательный результат. Уставшая от хронического инфекционного процесса иммунная система может «не показать» повышенный уровень антител к инфекции. Подобное может наблюдать врач-лаборант в том случае, если инфекция «свежая», т. е. даже при наличии определенных симптомов уровень антител класса IgG в крови не превысит норму, поскольку они еще не начали вырабатываться. Для половых инфекций подобный период «молчания» ИФА-диагностики может достигать двух недель.

источник

И ИФА (иммуноферментный анализ) являются одними из самых современных и точных методов диагностики инфекционных болезней в лабораторных условиях.

Каждый из этих методов позволяет оценить проблему с разных сторон, а их информативность зависит от вида . Таким образом, определять, какой из них лучше, возможно в конкретных случаях (при конкретных заболеваниях ). Порой, для оценки болезни в целом необходимо применять оба метода.

• высокая специфичность;
• повышенная чувствительность;
• позволяет определить возбудителя инфекции;
• позволяет сделать количественный анализ (определить количество вирусов, микробов в организме );
• возможность диагностировать одновременно несколько возбудителей;
• возможность контролировать эффективность медикаментозного лечения;
• быстрота (получение результатов в течение суток ).

Методом ПЦР определяют латентные (бессимптомные ) и хронические инфекции, которые, практически, невозможно определить другим способом.

В качестве этих антител выступают белки – иммуноглобулины трех классов:

• иммуноглобулины M;
• иммуноглобулины A;
• иммуноглобулины G.

В течение первых недель заражения появляются иммуноглобулины М, затем – иммуноглобулины А. На более поздних стадиях формируются иммуноглобулины G, которые могут указывать на хроническое течение инфекции.
Выявление этих иммуноглобулинов методом ИФА помогает определить точную стадию инфекционного процесса и проследить его динамику. С помощью данного метода выявляется ВИЧ -инфекция и ее стадия.

• ПЦР анализ позволяет определить микроорганизм, который вызвал инфекцию. ИФА определяет только наличие контакта организма с инфекцией.
• ПРЦ определяет присутствие возбудителя в тех органах и тканях, которые были взяты на анализ. Таким образом, ПЦР указывает на поражение конкретного органа. ИФА метод позволяет определить распространенность инфекции по всему организму.
• При ПЦР материалом для диагностики служат ткани и жидкости организма, в которых могут быть возбудители. Для ИФА нет разницы, какой материал будет исследоваться, потому что иммуноглобулины циркулируют во всем организме.

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Иммуноферментный анализ (ИФА ) — это метод лабораторной диагностики, заключающийся в выявлении специфических (индивидуальных для каждого микроорганизма, вируса) антител.

Антитела (иммуноглобулины, Ig) — специфические белки-защитники, вырабатываемые лейкоцитами (белыми кровяными тельцами) в ответ на появление в организме чужеродного генетического материала (вирусов, бактерий, простейших).

Иными словами, результат иммуноферментного анализа (ИФА) показывает не факт наличия инфекционного агента (инфекции) в организме, а состояние иммунитета к этому инфекционному агенту.

Таким образом, на основании результатов исследования крови методом ИФА можно лишь опосредованно (косвенно) судить о наличии /отсутствии инфекционного агента (вирусов, бактерий, простейших) по ответной реакции на него иммунной (защитной) системы организма.

В зависимости от срока давности существования в организме человека вирусов, бактерий, простейших вырабатываются антитела классов А, M, G (IgА, IgM, IgG).

Антитела классов А, M, G свидетельствуют о свежем, недавнем или давно существующем заражении соответственно.

По комбинации количественных показателей антител данных классов можно судить об обострении или снижении активности хронического инфекционного процесса, или повторном заражении.

Данная информация представляет в гинекологии и дерматовенерологии известную ценность, позволяя ответить на вопрос «кто кого заразил?» и подобрать лечение в зависимости от длительности инфекционного процесса.

Исследование крови методом ИФА в гинекологии широко используют для диагностики микоплазмоза , уреаплазмоза , трихомоноза , гарднереллеза , гонореи, TORCH-инфекций (токсоплазмы, краснухи, цитомегаловирусной инфекции и герпеса).

В случае низкой иммуногенности инфекционного агента (инфекции) либо недостаточной активности иммунной системы выработка антител (иммуноглобулинов классов А, M, G) может отсутствовать или быть диагностически незначимой при фактическом (реальном) наличии инфекционного агента (инфекции) в организме по данным полимеразной цепной реакции (ПЦР ).

Слабой иммуногенностью (способностью существовать незаметно для иммунной системы) обладают микоплазмы , уреаплазмы , трихомонада .

Результаты иммуноферментного анализа (ИФА) в ряде случаев могут быть ложноположительными, т.е. при фактическом отсутствии инфекционного агента (инфекции) в организме иммуноферментный анализ (ИФА) определяет наличие антител к нему.

Высокая частота ложноположительных реакций часто отмечается при диагностике методом ИФА трихомоноза (трихомониаза) .

Низкой иммуногенностью инфекционного агента (бактерий, вирусов, простейших) и индивидуальными особенностями иммунитета человека объясняется кажущееся противоречие результатов ИФА и ПЦР, при котором исследование методом ИФА не находит инфекцию, а метод ПЦР свидетельствует о наличии инфекции в организме.

Таким образом, диагностика инфекционных заболеваний, включая инфекции, передаваемые половым путем (анализ на скрытые инфекции), требует комплексной (совокупной) оценки результатов нескольких диагностических методов.

Иммуноферментный анализ (ИФА) позволяет выявить специфические белки, возникающие в организме человека при наличии онкологического процесса — так называемые онкомаркеры .

ПЦР (полимеразная цепная реакция, ПЦР-анализ) — это метод лабораторной диагностики различных вирусов, бактерий, простейших на основании выявления их генетического материала (РНК и ДНК) в исследуемом биологическом материале: в крови, слюне, эякуляте (сперме), моче, выделениях из половых путей, мазках, соскобах и т.д.

В основе метода ПЦР лежит многократное удвоение типоспецифического (т.е. характерного для конкретного микроорганизма) участка РНК или ДНК, вследствие чего нарабатывается достаточное для точной идентификации данного микроорганизма количество РНК или ДНК.

Метод ПЦР является молекулярно-генетическим методом исследования.

В настоящее время полимеразная цепная реакция (ПЦР) является самым точным и чувствительным методом диагностики скрытых инфекций (инфекций, передаваемых половым путем) и иных инфекционных заболеваний после культурального исследования (посева на среду).

Таким образом, результаты исследования методом ПЦР свидетельствуют о наличии/отсутствии непосредственно инфекционного агента (вирусов, бактерий, простейших) в исследуемом органе (образце клеток, ткани).

Основным преимуществом метода ПЦР является высокая чувствительность и специфичность, т.е. способность определить возбудителя заболевания при наличии в пробе всего нескольких молекул его ДНК или РНК. Поэтому возможным становится обнаружение возбудителей заболеваний (в том числе скрытых инфекций) даже в тех случаях, когда другими методами их выявление не возможно.

Специфичность ПЦР (т.е. способность безошибочно определить данный вирус, бактерию) близка к 100%, что значительно превышает возможности микроскопии, иммуноферментного анализа (ИФА).

По этой причине исследование методом ПЦР нашло широкое применение в практике врачей Курортной клиники женского здоровья при экспертном выявлении скрытых инфекций: хламидиоза , микоплазмоза , уреаплазмоза , трихомоноза, бактериального вагиноза, вирусов папилломы человека и других вялотекущих либо скрыто существующих инфекций.

Следует учитывать, что результат ПЦР-исследования распространяется лишь на орган (ткань), клеточный материал которого с помощью мазка-соскоба забирается на исследование.

Это вносит известные ограничения, не позволяющие в ряде случаев судить о распространенности процесса. Например, выявление хламидий в канале шейки матки не позволяет утверждать присутствие хламидий в маточных трубах, ткани яичников, суставах, легких и иных органах и тканях.

Таким образом, метод ПЦР (ПЦР-анализ) отличается высокой информативностью и достоверностью относительно инфицирования (заражения) конкретного органа (участка ткани), а метод ИФА косвенно показывает распространенность процесса и возможную вовлеченность в инфекционный процесс органов и тканей, недоступных для прямой диагностики.

Для выявления инфекций, передающихся половым путём, как правило, используется несколько методов лабораторной диагностики: микроскопия, ПИФ, ПЦР, ИФА, культуральный метод исследования.

Обычно мазок окрашивается 1% метиленовым синим или используется методика окраски по Грамму. Данный метод даёт возможность обнаружить такие половые инфекции как трихомонады, гонококки, гарднереллы, грибки. Однако есть определённые сложности диагностики хронических форм трихомониаза и гонореи этим методом. Чувствительность этого метода не превышает 40% в отношении выявления трихомонад и гонококков. Важность микроскопии заключается в том, что есть возможность по количеству лейкоцитов, обнаруженных в мазках, говорить о наличии обострения воспалительного процесса в половых путях и предполагать наличие инфекции. В то же время при хронических формах половых инфекций в стадии неактивного течения обычные мазки могут быть совершенно нормальными, без повышения лейкоцитов и изменения флоры.

Метод основан на окраске мазка моноклональными флюорохром-меченными антителами, которые соединяются с той инфекцией, на которую проводится исследование и в результате флюоресцирующий микроб визуализируется в люминесцентном микроскопе. Данный метод применим для диагностики таких инфекций как хламидии, уреаплазмы, микоплазмы, которые не видны при обычном исследовании в микроскопе. Также этот метод на сегодняшнее время является самым чувствительным по выявлению трихомонадной инфекции. Метод даёт возможность обнаружить нетипичные формы трихомонад, которые не выявляются лаборантами при обычной микроскопии. Чувствительность ПИФ диагностики достаточно высокая — 70-80%.

Метод основан на выявлении ДНК различных инфекций и позволяет с высокой достоверностью выявлять такие инфекции как: вирусы, уреаплазмы, микоплазмы, гарднереллы, грибки. К сожалению, обнаружить трихомонаду или гонококк методом ПЦР получается крайне редко, обычно чувствительность в отношении этих инфекций не более 2-5%.

Основан на выращивании микроорганизмов в специальных средах. За счёт сложности и длительности исполнения метод применяется достаточно редко. Не всегда бактериологические лаборатории снабжены средами для выращивания половых инфекций. А так же имеет большое значение качество сред, используемых для анализа. Поэтому чаще всего мы сталкиваемся с низкой чувствительностью этого метода для выявления хронических форм половых инфекций.

Если ПИФ, ПЦР, обычная микроскопия и культуральный методы дают возможность обнаружить непосредственно инфекцию в мазках или моче, метод ИФА даёт возможность обнаружить антитела в крови, которые появляются при наличии инфекции в организме. Антитела — это иммунные белки, которые организм вырабатывает в ответ на внедрение в организм инфекции. Антитела специфичны к каждой инфекции и дают возможность ставить диагноз определённой половой инфекции с высокой долей вероятности. Но и у этого метода есть свои недостатки. Дело в том, что не всегда человеческий организм формирует антитела на инфекцию, обитающую в организме. Чаще всего формирование антител происходит на уреаплазмы, микоплазмы и хламидии, а так же вирусы. К трихомонадам антитела формируются редко, так как трихомонады способны к своей поверхности прикреплять белки организма человека и не обнаруживаются иммунитетом человека. К гонококкам антитела практически не формируются. В то же время, если происходит обнаружение антител к инфекциям методом ИФА, можно говорить о высокой вероятности присутствия инфекции в организме. Длительность выведения антител из организма после лечения инфекции различная для разных инфекций. Для уреаплазм, микоплазм и хламидий мы можем ожидать выведение антител через 2 месяца.

Учитывая, что каждый метод диагностики имеет свои достоинства и недостатки и не является на 100% информативным, рекомендовано проведение диагностики половых инфекций одновременно несколькими методами. Поэтому обычно используют для диагностики метод ИФА, микроскопическое исследование мазка, для обнаружения уреаплазм, микоплазм, хламидий — ПЦР или/и ПИФ метод, для обнаружения трихомонады — метод ПИФ.

Взятие мазка. Источник: kozhmed.ru