Анализ на инфекцию хеликобактер пилори

Возможны сомнительные результаты исследования. В таких случаях анализ на антитела к Helicobacter pylori повторяют через 2-3 недели.

• помогает выявить даже низкие концентрации возбудителя;
• безопасный метод, не сопровождается радиоактивной нагрузкой на пациента (при использовании тестовых растворов мочевины, меченой нерадиоактивными изотопами);
• оценивается процент бактерий на всей поверхности слизистой желудка;
• удобен для пациентов (неинвазивный метод);
• дыхательный уреазный тест с раствором карбамида разрешен беременным и младенцам;
• является точным диагностическим исследованием.

1. Дыхательный уреазный тест проводится натощак. Перед исследованием с утра можно почистить зубы без применения ополаскивателей и освежителей для полости рта. Не рекомендуется использовать жевательные резинки.
2. Накануне забора проб разрешен легкий ужин. С 22 часов вечера и до начала процедуры есть нельзя, питье отменяют за час до исследования.
3. За 2-3 дня до аэротеста запрещен прием алкоголя (пары алкоголя искажают результаты проб). Также на этот период исключаются продукты, вызывающие метеоризм (капуста, бобовые, чеснок, яблоки, грибы, черный хлеб и другие).
4. Курение прекращают за 8 часов до начала процедуры.
5. За 2 недели до исследования отменяют препараты висмута (“Де-нол”, “Викалин”, “Викаир”), ингибиторы протонной помпы (“Омез”, “Нольпаза”, “Нексиум” и другие). Данные средства угнетают активность уреазы.
6. За неделю до проведения теста прекращают прием нестероидных противовоспалительных и антибактериальных препаратов.
7. За 2 дня до процедуры исключаются лекарственные средства из группы блокаторов Н₂ – гистаминовых рецепторов (“Гистодил”, “Примамет”, “Ранитидин”, “Фамотидин” и другие).
8. Разрешены препараты, снижающие избыточную продукцию соляной кислоты желудком (антациды – “Алмагель”, “Фосфалюгель”, “Маалокс”, “Гевискон” и т. д.).

Специфичность метода

Дыхательный уреазный тест на Helicobacter pylori связан с особенностями жизнедеятельности бактерии. Возбудитель в процессе своего существования выделяет защитный фермент – уреазу. Это биологически активное соединение помогает микроорганизму справляться с агрессивным воздействием соляной кислоты, выделяемой в составе желудочного сока. В процессе пищеварения уреаза расщепляет продукт метаболизма белков – мочевину. В результате образуется аммиак и углекислота. Эта химическая реакция стала основой для аэротеста. При дыхании пациента можно измерить концентрацию углекислого газа в выдыхаемом воздухе.

• Аэротест с применением тестового раствора или драже мочевины, меченой радиоактивным углеродом ( 14 С). Данный метод применяется редко из-за лучевой нагрузки на организм человека.

Пациент дышит через специальную трубку, находящуюся глубоко в ротовой полости. Дыхание должно быть ровным и спокойным. Трубка подсоединяется к специальному газовому спектрометру, замеряющему процент меченого углекислого газа в выдыхаемом воздухе. В начале процедуры берут 2 фоновые пробы аэротеста. Затем пациенту дают выпить тестовый раствор или проглотить специальное драже с мочевиной, меченой радиоактивным изотопом. Через каждые 15 минут (в течение часа) осуществляют забор дополнительных 4 проб выдыхаемого воздуха. Не допустимо попадание слюны в трубку, результат исследования может стать недостоверным. В этом случае пробу придется повторить через 40-60 минут после предыдущей. Чтобы избежать неприятной ситуации, трубку во время процедуры необходимо периодически вынимать, а слюну сглатывать.

• Дыхательный уреазный тест с применением стабильного раствора мочевины, меченой нерадиоактивным углеродом ( 13 С). Данный метод является “золотым стандартом” в диагностике хеликобактериоза (подробнее о методе см. здесь).

Во время исследования осуществляют забор 2 проб выдыхаемого воздуха. Процедура проводится на голодный желудок, в положении сидя. Пациент делает глубокий вдох и на несколько секунд задерживает дыхание. Затем выдыхает в герметичный одноразовый пакет, который сразу же плотно закрывают. Пациенту дают выпить тестовый раствор мочевины, меченой нерадиоактивным изотопом. Через полчаса осуществляют повторный забор выдыхаемого воздуха. С помощью масс-спектрометра измеряют концентрацию углекислоты в выдыхаемом воздухе. Полученные результаты сравнивают и делают выводы о наличии инфицирования.

• Аэротест с применением раствора мочевины (карбамида). Данная методика не является максимально точной. Рекомендуется для диагностики хеликобактериоза у беременных женщин и маленьких детей.

Методика схожа с предыдущим тестом. У пациента делают забор 2 проб выдыхаемого воздуха. Измеряют концентрацию углекислого газа до и после применения тестового раствора карбамида.

Инфицирования нет или полное излечение после эрадикационной терапии

Положительный аэротест

Инфицирование Helicobacter pylori

Количественное определение уреазной активности Helicobacter pylori (по процентному содержанию изотопа в выдыхаемом воздухе) Менее 1%

Хеликобактериоза нет

• 1-3,4% – легкое инфицирование Helicobacter pylori
• 3,5-6,4% – среднетяжелый воспалительный процесс
• 6,5-9,4% – тяжелое инфицирование
• Более 9,5% – крайне тяжелая степень хеликобактериоза

Во время проведения гастроскопии (ФГДС) врач-эндоскопист берет кусочек слизистой из любого отдела желудка. Биоптат помещают на реагентную тест-полоску, обработанную раствором мочевины. Под действием фермента уреазы, выделяемой бактериями Helicobacter pylori, происходит ощелачивание среды. Мочевина расщепляется. Вследствие этого индикаторная полоска меняет свою окраску – с желтой на малиновую. Тест считается положительным. От скорости изменения цвета реагента зависит выраженность воспалительного процесса и концентрация возбудителя в биоптате.

Оценка полученного результата:

• Helicobacter pylori (+) – слабое инфицирование (реагентная тест-полоска изменила свой цвет в течение суток).
• Helicobacter pylori (++) – умеренный инфекционный процесс (реагентная тест-полоска изменила свой цвет в течение 2-3 часов).
• Helicobacter pylori (+++) – тяжелое инфицирование (реагентная тест-полоска изменила свой цвет в течение одного часа).

• наиболее точный метод диагностики Helicobacter pylori (специфичность до 100%);
• исключает возможность ложноположительных результатов, подтверждает наличие инфекции.

1. Процедура ФГДС предусматривает 3-х дневную диету с исключением продуктов, раздражающих пищеварительный тракт (нельзя жареные, копченые, соленые, жирные и острые блюда).
2. Запрещаются газированные напитки, кофе, алкоголь.
3. Диета бесшлаковая на основе легкоусвояемого меню (каши на воде, отварное мясо, йогурты, овощные салаты и т. д.). Последний прием пищи за 12 часов до проведения ФГДС.
4. За 3 часа до начала исследования необходимо отказаться от сигарет.
5. Нельзя принимать лекарства перед эндоскопической процедурой.
6. Прием жидкости прекращают за 1-2 часа до начала исследования.
7. Не разрешается перед процедурой чистить зубы, применять ополаскиватели или освежители для полости рта, а также жевательные резинки.
8. Гастроскопия проводится на голодный желудок.

ФГДС сопровождается введением специального зонда в желудок. Процедура неприятна из-за диспепсических проявлений. Во время проглатывания зонда происходит раздражение рецепторов ротоглотки, и пациент испытывает чувство тошноты и рвотные позывы. Длительность процедуры обычно не превышает 10-15 минут. За это время специалист осматривает слизистую желудка и двенадцатиперстной кишки, выявляет очаги воспаления (эрозии, язвы, дефекты и т. д.) и проводит забор материала для последующего морфологического исследования.

Для бактериологического посева биоптата на питательную среду потребуется не менее 5 образцов тканей. Их помещают в стерильные пробирки с транспортным раствором. Затем доставляют в бактериологическую лабораторию. Helicobacter pylori выращивают на питательных средах в течение 3-6 дней, иногда дольше (до 12 суток).

Гистологическое исследование мазков-отпечатков, полученных из биоптатов слизистой желудка, является “золотым стандартом” среди инвазивных методов диагностики хеликобактериоза. Участки тканей при ФГДС берут с неповрежденного эпителия (исключают эрозивно-язвенные дефекты). Helicobacter pylori живет на здоровой слизистой желудка и двенадцатиперстной кишки. Затем полученные мазки-отпечатки окрашивают (по Романовскому-Гимзе, по Граму или другими красителями). Производят микроскопию. Бактерии обнаруживаются в желудочной слизи, располагаются свободно. Helicobacter pylori имеет характерные для него изогнутые формы: спиралевидную, в виде буквы “S” или распахнутых крыльев птицы.

(рост бактерий не обнаружен)

Положительный

(на питательной среде выросли культуры Helicobacter pylori)

Гистологическое исследование биоптата на Helicobacter pylori (качественный анализ) Отрицательный

(бактерии в мазке отсутствуют)

Положительный (обнаружена одна или большее количество бактерий при микроскопии) Гистологическое исследование биоптата на Helicobacter pylori (количественный анализ) Отрицательный (0 бактерий в мазке, инфицирования нет) 3 степени распространения возбудителя (микроскопия на увеличении в 360 раз):

• Слабая обсемененность Helicobacter pylori (+) – в поле зрения не более 20 бактерий
• Умеренная обсемененность Helicobacter pylori (++) – в поле зрения от 20 до 50 микроорганизмов
• Высокая обсемененность Helicobacter pylori (+++) – в поле зрения более 50 микробных тел

Таким образом, существует 2 точных диагностических метода выявления хеликобактериоза. Они являются “золотым стандартом” в современной гастроэнтерологии. Первый метод – неинвазивный: дыхательный уреазный тест с раствором мочевины, меченой нерадиоактивным углеродом; второй – инвазивный: ФГДС с биопсией и последующим гистологическим изучением образцов тканей.

Для подтверждения инфицирования Helicobacter pylori требуется не менее 2 различных исследований. Диагноз ставят на основании клинической симптоматики и результатов, полученных в процессе лабораторных и эндоскопических мероприятий.

источник

Не каждый случай патологии желудка и двенадцатиперстной кишки вызван инфицированием хеликобактерией. Ее участию по статистическим исследованиям отводят 70% (среди случаев язвы желудка до 38%, язвы двенадцатиперстной кишки — 56%). Наиболее достоверным фактом служит выявление этого микроорганизма непосредственно в слизистой оболочке желудка, в крови она не живет.

Однако, анализ крови на хеликобактер пилори способен показать результаты присутствия возбудителя. Это важно для диагностики и выбора лечения пациента. Сравнение полученных цифровых значений отклонений с нормой учитывается при расшифровке анализа крови на хеликобактер пилори и позволяет прогнозировать течение болезни.

Дословное латино-греческое название Helicobacter pylori («спиралевидная привратниковая») связано с характерной формой бактерии и максимальным проживанием в зоне перехода из желудка в двенадцатиперстную кишку (привратнике).

С помощью жгутиков обеспечивается подвижность и возможность двигаться в гелеобразной среде слизи на внутренней поверхности желудка. Это единственный микроорганизм, способный жить в кислой среде.

От открытия в 1875 году до вручения Нобелевской премии в 2005 прошло 130 лет. Многие ученые вложили свои знания и опыт в изучение необычной инфекции. Она не росла на питательных средах. С целью подтверждения своих исследований профессор кафедры клинической микробиологии из Западного Университета Австралии Барри Маршалл провел на себе эксперимент: выпил содержимое чашки с наличием бактерии. Затем через 10 дней на эндоскопии показал связь возникших признаков воспаления желудка с присутствием хеликобактерии.

Маршалл со своим коллегой Уорреном на этом не остановился. Они сумели доказать излечение гастрита курсом Метронидазола и препаратом висмута, показали роль антибиотиков в терапии гастрита, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки.

Современные исследования прояснили условия существования микроорганизма. Helicobacter pylori использует для себя энергию молекул водорода, выделяемого кишечными бактериями. Синтезирует ферменты:

Важным моментом является нахождение в желудке у человека без признаков болезни. Но в случае падения защитных сил ведет себя очень агрессивно, вызывает от воспаления до язв и ракового перерождения. Вот почему своевременно обнаружить следы хеликобактерии пилори по анализу крови так важно для здоровья человека.

Внедрение хеликобактерии в стенку желудка может сопровождаться нетипичной, но, заслуживающей внимания, симптоматикой:

• боли — по интенсивности колеблются от слабых до сильных, возникают во время или после еды, возможны «голодные», часто человек описывает свои ощущения при прохождении пищевого комка по пищеводу;
• изжога — связана с забросом желудочного сока в нижние отделы пищевода, частые повторы вызваны повышенной кислотностью и поражением процессов регуляции;
• чувство тяжести в зоне эпигастрия — проявляется после даже необильной пищи;
• тошнота — без признаков токсикоза беременности или какой-либо патологии;
• иногда рвота и острые боли в желудке, похожи на пищевое отравление;
• наличие слизи и крови в каловых массах;
• постоянная отрыжка;
• вздутие живота (метеоризм);
• нарушение опорожнения кишечника (запоры или склонность к поносам);
• непонятное снижение веса.

В случае если перечисленные симптомы постоянно связаны с такими факторами риска, как:

• постоянный дискомфорт или переедания, приема алкоголя, голода;
• наследственное неблагополучие в семье.

Человеку следует провести полное обследование для исключения:

• язвенной болезни;
• рака желудка или пищевода;
• эзофагита (воспаления пищевода);
• выявления различий с диспепсией другой этиологии;
• гастрита и дуоденита;
• заражения хеликобактерией близких родственников;
• отношения к группе риска.

Повторно сдавать кровь на анализ рекомендуют для оценки состояния пациента в ходе лечения.

Статистика заболеваемости показывает, что хеликобактериозом заражено в России 35% детей дошкольного возраста, 75% школьников. Маленькие дети получают инфекцию от матерей, облизывающих соски, ложечку при кормлении, из слюны на фоне поцелуев, общей посуды.

Выявление антител в крови позволяет своевременно провести курс терапии для излечения ребенка. Но одновременно следует искать бактерионосителя среди взрослых членов семьи. Поскольку установлено, что спустя 3 года после курса лечения у 35% детей наблюдается повторное заражение. Через период 7 лет количество инфицированных доходит до 90%.

Наиболее часто клиника поражения складывается у ребенка:

• из тошноты;
• отказа от еды;
• диспепсических явлений (обильное срыгивание, вздутие живота);
• неясных болей.

Организм любого человека реагирует на инфекционный возбудитель развитием защитной реакции. В крови нарастает уровень антител. Они образованы специфическими белковыми комплексами и клетками. Уровень диагностики позволяет выявить:

• наличие антител и дать им количественную оценку;
• структуру белков (иммуноглобулинов), которые вовлечены в реакцию антиген-антитело;
• ДНК клеток, участвующих в воспалении.

Соответственно применяемые методики называются:

• иммуноферментный анализ (ИФА);
• анализ на антитела и их белковые компоненты (иммуноглобулины);
• метод полимеразной цепной реакции (ПЦР).

ИФА на хеликобактер заключается в выявлении в сыворотке крови определенной концентрации антител. Показатель оценивается их разведением или титром. Наличие положительной реакции говорит, что в организме происходит реакция с чужеродным антигеном в виде хеликобактерии. Выраженность и величина показателя определяют силу ответной иммунной реакции.

Положительные стороны метода:

• возможность проведения исследования на уровне лаборатории в поликлинике;
• обнаружение бактерии на ранних стадиях заражения;
• отсутствие необходимости в фиброгастроскопии для подтверждения этиологии заболевания.

• сохраняется возможность ложноотрицательного результата у зараженных пациентов, если иммунитет недостаточно силен;
• ложноположительный эффект может быть получен у больных уже пролеченных, но сохранивших антитела к хеликобактер пилори;
• саму бактерию выделить не удается;
• низкие титры антител выявляют на фоне лечения цитостатиками;
• результаты исследования крови на антитела к хеликобактер пилори сложно оценить, если пациент пролечен антибиотиками, даже по поводу, не имеющему отношения к патологии желудка.

Иммуноглобулины (Ig) — особые белки, принимающие активное участие в борьбе с инфицирующим антигеном.

Но вырабатываются не сразу. В диагностике заражения хеликобактерией важное значение придается трем типам иммуноглобулинов, обозначаемых: A, M, G. Каждый играет свою роль в воспалительном процессе:

• IgG — считаются маркером, который подтверждает наличие в организме бактерии, могут обнаружиться уже на третьей-четвертой неделе после внедрения возбудителя, важно, что высокие цифры титра IgG остаются у человека еще на протяжении нескольких месяцев после выздоровления и гибели хеликобактерии;
• IgМ — является показателем раннего инфицирования, обнаруживается редко, у пациента еще отсутствует какая-либо симптоматика воспалительного процесса, поэтому выявлением можно установить заражение в семье;
• IgА — указывает на раннюю стадию инфицирования или на выраженный воспалительный процесс, возможно его обнаружение в слюне и желудочном соке зараженного человека, что указывает на высокую активность и заразность возбудителя.

Положительной стороной метода можно считать:

• высокую эффективность лабораторного исследования, IgG выявляется у 95–100% пациентов, IgA — в 67–82% случаев, IgM — 18–20%;
• по анализу крови путем сравнения титров иммуноглобулинов с предыдущими показателями можно контролировать отклонения от нормы, развитие патологического процесса, эффективность лечения;
• исследование с большей вероятностью, чем антитела в крови, доказывает зараженность.

• до появления главного маркера (IgG) должен пройти месячный срок, это играет на руку задержке в диагностике;
• после излечения особенно у пожилых пациентов титр остается высоким длительное время (IgG у половины больных обнаруживается полтора года);
• нет возможности распознать острую форму болезни от пассивного попадания бактерий в желудок.

С помощью полимеразной цепной реакции в крови пациента можно выявить ДНК бактерии, основу генного состава микроорганизма. Поэтому этот метод считается наиболее достоверным. Результат оценивается как положительный (бактерия находится в организме) или отрицательный (бактерии у пациента нет). Подтверждая факт наличия хеликобактерии, метод не дает информации о ее патогенности. Известно, что у многих людей возбудитель не вызывает болезни.

Кроме того, сдавая анализ нужно точно учитывать, что не должно проводиться никакого лечения (не только антибиотиками). Это мало достижимо, поскольку все пациенты принимают какие-либо препараты для снятия неприятных ощущений или болей. Анализ проводится в специализированных центрах, поэтому его доступность низка.

Как сдавать анализ, подробно расскажет врач. В подготовку входит:

• исключение из питания за день до сдачи крови жирной пищи;
• категорический запрет на алкоголь;
• прием лекарств должен быть прекращен за 2 недели;
• сведение к минимуму физических нагрузок;
• в утро сдачи анализа не разрешается завтракать, можно только пить воду (от последней еды должно пройти не менее восьми часов).

Из взятой венозной крови с помощью осаждения эритроцитов и других элементов получают плазму. Микропипеткой она вносится в лунки специального планшета с нанесенным на них стандартом антигена. Между веществами, в случае наличия антител в сыворотке происходит реакция и образуются комплексные соединения, которые визуализируют добавлением красящего соединения.

Для более точной оценки результата проводится фотометрирование на аппарате спектрофотометре. В нем происходит сравнение исследуемого материала с контрольными образцами. Математическая обработка позволяет получить количественные показатели. Лабораторный тест на иммуноглобулин G готовится 24 часа, пациент получит результат на следующий день. Для изучения других глобулинов необходима неделя.

Правильно расшифровать результаты анализа может только специалист. Врачи обычно не заостряют внимание на нормальных значениях хеликобактер пилори и отклонениях. Достаточным считается положительный или отрицательный ответ. Но степень повышения по сравнению с нормой все же указывает на активность размножения бактерий в организме.

Иногда дается заключение о сомнительном анализе, тогда его следует повторить спустя 2 недели. Каждая лаборатория определяет свои значения (референтные) для нормы, они вписываются в бланк-заключение.

Титры иммуноглобулинов оцениваются в разных системах. В единицах на мл плазмы (ед./мл) за норму принято 0,9. Соответственно нормальными для иммуноглобулинов:

• А и G считаются значения менее 0,9;
• М — менее 30.

• менее 0,9 считается отрицательным результатом;
• 0,9–1,1 — сомнительным;
• более 1,1 — положительным.

• отрицательный результат — менее 12,5;
• сомнительный 12,5–20;
• положительный — более 20.

Отрицательный результат М и G иммуноглобулинов говорит об отсутствии инфицирования хеликобактерией, при негативном результате по типу А такого вывода сделать нельзя, поскольку возможна ранняя стадия заражения.

Оценить повышенный уровень можно для иммуноглобулинов:

• G — наличие в организме бактерии или пациент переболел и находится в периоде выздоровления;
• М — заражение произошло недавно;
• А — разгар воспалительного процесса с высокой активностью.

Через 2 недели после окончания курса лечения титр иммуноглобулина G снижается наполовину. Если его понижение за 6 месяцев произошло на 2% в течение, то можно надеяться на полное уничтожение хеликобактерии. Соотношение результатов подавления патогенного возбудителя и картины фиброгастроскопии показывает четкую связь со сниженным воспалительным процессом в полости желудка.

Другой результат: исследование в динамике показывает отсутствие снижения титров. Такой эффект не означает неправильного лечения, более похож на слишком активный процесс.

Кровь из вены на анализ не берут:

• при общем возбуждении пациента;
• на фоне судорог;
• при флебите, тромбофлебите (воспалении) вены;
• изменениях на коже в месте предполагаемой инъекции.

Не стоит забывать, что повышенный титр антител к хеликобактерии часто выявляют у здоровых людей. Это объясняется бессимптомным бактерионосительством. В таких случаях патогенный микроорганизм «проживает» в желудке человека и не наносит ему вреда.

Однако бактерионоситель может спровоцировать заболевание желудка у близких родственников, детей. Поскольку передается через посуду, слюну. Нужно ли принимать курс лечения для избавления от бактерии устанавливает врач после осмотра, клинического обследования, изучения факторов риска пациента.

Выявить инфицирование Helicobacter pylori по крови можно не всегда. Ложные результаты путают диагностику. Поэтому методы следует применять в комплексе с учетом всего обследования пациента, возможностей лаборатории.

источник

Хеликобактер Пилори представляет собой опасную бактерию, которая легко передается от человека к человеку при достаточно плотном контакте, через неочищенную воду, загрязненную пищу.

Эта спиралевидная бактерия устойчива к желудочному соку и способна долгое время жить в слизистых слоях желудка, никак себя не проявляя. Однако под воздействием определенных факторов, которые снижают иммунную защиту организма, бактерия активизируется.

Она начинает активно размножаться, провоцируя при этом образование опасных патологий – гастритов, язвенной болезни, эрозивных поражений, гепатитов, полипов, злокачественных новообразований.

Диагностика Хеликобактер Пилори становится необходимостью в случае, когда у пострадавшего начинают отмечать развитие следующих симптомов, указывающих на проблему:

• Возникают постоянные проблемы со стулом – запоры либо диареи.
• В районе живота ощущается тяжесть.
• Появляется отрыжка и изжога, возникает тошнота и рвотные позывы.
• В ротовой полости появляется неприятный запах при отсутствии кариеса и прочих заболеваний.
• Развиваются аллергические реакции.
• Отмечается невозможность усвоения мяса организмом.
• Усиливается выпадение волосяного покрова.
• Ногтевые пластины поражаются грибком, усиливается их ломкость.
• При малом количестве принятой пищи возникает быстрая насыщаемость.
• Развиваются желудочные боли, которые купирует прием пищи.

При появлении указанных признаков можно предположить наличие вредоносной бактерии в организме, однако для назначения лечения необходимы уточняющие исследования. При подозрении на Хеликобактер диагностика включает проведение как минимум двух анализов для повышения точности. Основными методами определения Хеликобактера являются:

• Исследование крови на предмет наличия антител к бактерии.
• Исследование испражнений на наличие антигена Хеликобактер.
• Дыхательный тест, определяющий уреазную активность бактерии в желудке.
• Обнаружение бактерии под микроскопом при проведении фиброгастродуоденоскопии.

Чаще всего для подтверждения наличия в организме Хеликобактера назначают исследования крови и дыхательный тест. В первом случает предварительная подготовка проводится за восемь часов до анализа и состоит из прекращения приема пищи, отказа от курения, употребления кофе либо чая, алкоголя. Суть анализа – определить имеющиеся виды иммуноглобулинов в организме.

При проникновении в системы определенных микроорганизмов иммуноглобулины контактируют с ними и нейтрализуют вредителей. Для проведения исследования крови в данном случае иммуноглобулины состоят из категорий А, M, G и соответственно в тесте показатели обозначаются как iga, igm, igg.

В случае, когда уровень показателей не выше установленной отметки, делают вывод об отсутствии инфекции.

Превышение igg указывает на наличие проблемы в ЖКТ. Следует учесть, что данные иммуноглобулины присутствуют в организме на протяжении определенного времени после проведенного лечения, потому результат может быть ложноположительным.

В этом случае назначают повторное исследование спустя три или четыре недели. Иммуноглобулины igg появляются в крови примерно через месяц после заражения.

Иммуноглобулины igm,iga говорят о воспалительных процессах в слизистом слое и указывают на начало заражения бактерией.

Дыхательный тест считается наиболее эффективным диагностическим методом, при этом совершенно безопасным и не инвазивным. Он позволяет не только выявить бактерию, но и определить количество микроорганизмов. Предварительная подготовка включает:

• Отказ от спиртного и употребления бобовых культур.
• Прекращение приема определенных лекарственных препаратов после консультации со специалистом.
• Прекращение приема пищи за восемь часов до исследования, воды – за полтора часа.

Сама процедура состоит из выдыхания пациентом воздуха в специальную трубку на протяжении нескольких минут. Затем вводится карбамид и проводится сравнение первоначально выдыхаемого воздуха с воздухом после контакта с раствором.

Диагностирование детей на предмет Хеликобактера проводят при помощи экспресс-метода, когда исследованиям подвергают свежевыделенные испражнения ребенка. У детей вредоносную бактерию определяют достаточно часто, в особенности, когда в семье имеются зараженные пациенты. Потому появление подозрительных признаков требует немедленного обращения к врачу и назначения необходимого анализа.

Фиброгастродуоденоскопия дает стопроцентно верный результат и позволяет не только подтвердить предположения, но и оценить степень поражения слизистого слоя.

При этом данная процедура одна из наиболее неприятных – исследование проводится при помощи зонда, который необходимо ввести внутрь.

Однако данная мера необходима, поскольку страдающие от Хеликобактера пациенты чаще прочих подвержены развитию онкологических патологий, процедура же позволяет взять материал для гистологического анализа.

В результате жизнедеятельности микроорганизма хеликобактер пилори в желудочно-кишечном тракте человека развиваются хронические заболевания, приводящие к поражению слизистой оболочки гастритом, язвой, раком.

Для выздоровления важно установить и нейтрализовать причину болезни. Своевременная диагностика хеликобактер пилори помогает избежать тяжелых последствий.

Используются различные методы, чтобы обнаружить прямые или косвенные признаки присутствия бактерии.

Попавший в организм вредоносный микроорганизм долгое время может ничем не проявлять своего присутствия. Человек часто даже не подозревает, что болен. Но при ослаблении иммунитета бактерия начинает усиленно размножаться, отравляя своими выделениями желудочно-кишечный тракт и весь организм человека.

Если развитие хеликобактер пилори не остановить, может начаться злокачественное перерождение тканей желудка и двенадцатиперстной кишки.

Заражение бактериями можно выявить по следующим признакам:

• частая изжога, тошнота, рвота;
• мучительные желудочные боли, проявляющиеся натощак;
• чувство тяжести в желудке после еды;
• для ощущения сытости достаточно малых порций пищи;
• аллергические реакции;
• непредсказуемое чередование запоров и поносов;
• поражение ногтей грибковой инфекцией;
• выпадение волосяного покрова;
• плохая перевариваемость мяса.

Слизистая оболочка желудка при заражении хеликобактер пилори покрывается язвами, появляется бугристость, покраснение и отекание пораженных участков, слипание естественных складок, образуются слизистые выделения.

В группе риска находятся пациенты, у которых:

• есть язва в любой стадии;
• было удаление части желудка при злокачественном поражении;
• имеются онкологические заболевания ЖКТ у ближайших родственников;
• есть поражение атрофическим гастритом.

Микроорганизм хеликобактер пилори отличается высокой выживаемостью в агрессивной среде желудочного сока. Бактерия прикрепляется к стенке желудка, ощелачивая окружающее пространство с помощью преобразования кислотного содержимого в ацетон. Нарушается секреторная функция желудка, поверхность слизистой покрывается язвами различной величины.

Наличие вредоносной бактерии в организме человека признано одной из основных причин, способствующих злокачественному преобразованию клеток желудка. Поэтому не следует откладывать диагностику, если она назначена врачом.

Диагностика может быть проведена инвазивным и неинвазивным способом. В первом случае для исследования берется небольшой кусочек пораженной ткани слизистой, а во втором оценка производится по анализам кала, крови, выдыхаемого воздуха, зубному налету. При первичной диагностике не рекомендуется нарушать целостность слизистой оболочки желудка или кишечника. Также не желательно использовать метод биопсии для детей.

Инвазивные методы диагностики хеликобактер пилори:

1. Бактериологический способ исследования заключается в выращивании колонии микроорганизмов на небольшом кусочке слизистой, изъятой из больного органа. Возможность правильно диагностировать наличие бактерий есть не у каждой лаборатории. Необходимо строго выдерживать условия для выращивания микроорганизмов: определенную температуру и влажность окружающего воздуха, качественный состав воздушной среды. В противном случае результат исследования может исказиться. К тому же длительность выявления бактерий превышает неделю.
2. Морфологическое исследование производится с использованием окрашивающих материалов по Вартину-Старри, Гимзе. Результат оценивается визуально через микроскоп. Выделяется 3 фазы поражения, зависящих от количества видимых на поверхности микроорганизмов. Для получения более точного анализа нужно не менее 5 образцов, взятых из разных мест слизистой оболочки желудка и 12-перстной кишки. Оптимальное количество — 10 штук. Недостаток исследования заключается в том, что невозможно точно определить разновидность бактерии, а при небольшом количестве микроорганизмов получается ложноотрицательный ответ.
3. Скоростной уреазный тест основан на способности бактерии расщеплять мочевину на составляющие: аммиак и углекислый газ. Кусочек слизистой желудка, взятый при биопсии, помещают в специальную лунку с мочевиной и индикатором. Если хеликобактер пилори присутствуют на образце, то продукты жизнедеятельности микроорганизма изменяют кислую среду на щелочную, в результате чего индикатор меняет свою окраску с желтой на малиновую. По скорости реакции судят о количестве микроорганизмов, распределяя результат на 3 степени: значительную, умеренную и незначительную. Недостатком метода считается ложноотрицательный результат при незначительном количестве бактерий.

Методы определения хеликобактер неинвазивным способом более предпочтительны при диагностике микроорганизмов, так как не требуют процедуры взятия проб из желудка и кишечника. Часто используемые в медицинской практике способы:

1. Уреазный тест исследования выдыхаемого воздуха обладает точностью диагностики до 95%. Процедура проводится натощак в утреннее время после специального подготовительного периода, длящегося 1 месяц. Запрещается принимать определенные лекарства, алкогольную продукцию, продукты, вызывающие чрезмерное газообразование, в течение различных временных промежутков до взятия анализа. Метод считается полностью безопасным. Специальный прибор сравнивает пробы воздуха, выдыхаемого человеком в обычном состоянии и после принятия раствора карбамида.
2. Анализ крови из вены назначается гастроэнтерологом или терапевтом при подозрении на заражение бактериями. Исследование проводится утром. Рекомендуется отказаться от приема пищи, питья и курения за 8 часов до процедуры. Результат оценивается по количеству вырабатываемых белков иммуноглобулинов в клетках организма. Недостаток — частые ложноположительные выводы.
3. Диагностика хеликобактерной инфекции методом полимеразной цепной реакции — наиболее точный вид исследования, проводимый на молекулярном уровне. Для анализа используется кал больного, взятый не более 24 часов назад. Если требуется оценить эффективность лечения, анализ на исследование берется не менее чем через месяц после его окончания, чтобы исключить ложноположительный результат. Метод отличается безопасностью забора исследуемого материала и эффективностью. Способ ПЦР используется также на материале, взятом из желудка.

Разнообразие методов определения присутствия бактерии в организме дает свободу выбора врачу и пациенту.

Результаты лабораторно-диагностического исследования позволяют назначить наиболее подходящее лечение взрослым больным и детям.

Микроорганизм присутствует у многих практически здоровых людей, правильно проведенное диагностирование способно отличить, в какой фазе — активной или нет — находятся бактерии.

Соблюдение норм гигиены способствует предупреждению распространения бактерии в организме:

• не рекомендуется во время приема пищи использовать общую посуду;
• перед едой и после посещения туалета обязательно требуется вымыть руки с мылом;
• нужно пользоваться только личными предметами гигиены — полотенцем, зубной щеткой, мочалкой;
• необходимо прекратить злоупотреблять алкогольными напитками и курить, в том числе пассивным способом.

Поражение только одного человека в семье микроорганизмом хеликобактер пилори практически невозможно. Поэтому диагностику и соответствующее лечение должен проходить каждый ее член.

Любое заболевания имеет причину. И от того, как правильно будет она определена, зависит эффективность лечения и будущее здоровье пациента. Помогают в установлении причины гастрита и язвы различные диагностические методы: инструментальные и лабораторные.

Рассмотрим основные способы выявления одной из наиболее распространённой бактерии, способной вызывать желудочно-кишечные проблемы – Н. руlori.

Глазом увидеть такой мельчайший организм длиной всего 2-3 мкм не представляется возможным, как и провести диагностику в домашних условиях.

Пациент может только предположить наличие гастрита по соответствующим симптомам: боли в эпигастрии после еды, тяжесть и дискомфорт в желудке, изжога, отрыжка воздухом или кислым, металлический привкус во рту. Эти признаки повышения кислотности очень часто сопровождают гастриты, ассоциированные с патогенным микробом.

• Но достоверно выявить, поселилась ли бактерия хеликобактер пилори в организме или нет, можно лишь в диагностическом отделении амбулаторно-поликлинического звена, стационара или лаборатории.
• Существуют специальные методы, позволяющие с высокой достоверностью обнаружить как сам микроб, так и продукты его жизнедеятельности, а также вырабатываемые организмом антитела в ответ на внедрение микроба:
• Обнаружение патогена в мазках с участка внутренней стенки желудка или культивирование микроорганизма на питательных средах.
• Обнаружение антител в крови, антигенов микробов в кале.

Выявление Н. руlori под микроскопом при покрытии образца исследования специальными красителями.

1. Методы полимеразно-цепной реакции.
2. Уреазный тест, дыхательный тест.
3. Все вышеперечисленные методы можно классифицировать на две большие группы:

1. Инвазивные. Способы диагностики, основанные на проведении эндоскопического исследования – ФГДС, со взятием биоптата. Участок внутренней стенки желудка затем можно подвергнуть цитологическому, культуральному исследованию, провести уреазный тест.
2. Неинвазивные. Другие способы обнаружения инфекции, при которых ФГДС не проводится.

Врачу, прежде чем проводить исследование и диагностику, имеется ли патогенный микроорганизм в желудке или нет, необходимо взять биологический материал у пациента. Таким материалом может стать:

• Небольшой участок слизистой желудочной оболочки.

Кусочек слизистой отщепляется при проведении фиброгастроскопии – производится биопсия специальным прибором прямо во время ФГДС.

Далее биоптат подвергается различным исследованиям: микроскопии, посеву на питательные среды, либо экспресс-диагностике. Цель у методов одна: выявление Нelicobacter руlori либо её токсинов.

Анализ крови позволяет обнаружить не саму бактерию, а иммуноглобулины, которые образуются в организме в ответ на инфекцию: IgA, IgG, IgM. расшифровку анализов на хеликобактерную инфекцию.

При проникновении Н.руlori в желудок и активном её размножении, иммунная система запускает каскад реакций, направленных на изгнание вредоносного микроорганизма. Это проявляется в выработке специфических антител, которые связывают микроб и стремятся к нейтрализации её токсинов.

Антитела или иммуноглобулины (IgA, IgG, IgM) в превышающем норму количестве могут появляться спустя несколько недель после заражения, а также высокий их уровень какое-то время сохраняется и после успешной эрадикации – терапии хеликобактериоза.

Анализ кала позволяет выявить в испражнениях фрагменты ДНК бактерии специальным высокоточным методом полимеразно-цепной реакции (ПЦР).

Этот метод очень удобен для следующих категорий лиц: пожилых, ослабленных пациентов, людей, которые имеют противопоказания к проведению ФГДС с биопсией, детей младшего возраста. Он неинвазивен и безболезненнен.

Минусом метода является то, что и после терапии и избавления от инфекции, с калом продолжают выходить остатки бактериальной ДНК погибшей Н.руlori, и анализ может оставаться положительным.

Для проведения дыхательного теста пациенту предлагают принять внутрь специальный раствор, содержащий меченные изотопы 13С мочевины. Это водный раствор безопасен для организма.

После того, как пациент его выпил, в течение часа с 15-и минутными интервалами берут 4 пробы выдыхаемого воздуха. Метод основан на способности патогена расщеплять мочевину и превращать её в аммиак и углекислый газ.

Специальным прибором масс-спектрометром определяют содержание изотопа 13С в выдыхаемом воздухе. В норме оно не превышает 1% от общего количества углекислого газа. Если показатель превышен – имеется инфицированность бактерией.

Данный метод доступен не во всех поликлинических учреждениях и его стоимость на сегодняшний день высока. Преимуществами его является быстрота, безболезненность и информативность.

In vitro – в переводе с греческого означает «в стекле». Это комплекс диагностических методов, которые проводятся вне организма человека.

• Хеликобактерная инфекция по сути диагностируется всеми методами инвитро:
• После забора биопсийного материала, участок слизистой отпечатывается на стекло, окрашивается и исследуется под микроскопом – цитологический метод, либо биоптат помещается в специальную среду – уреазный тест.
• С биоптата слизистой можно выращивать культуры клеток в пробирке или чашке петри на специальных питательных средах – микробиологический метод.
• Исследование мочи и кала с целью выявления антител и антигенов бактерии также проводятся инвитро, вне организма человека.

В настоящее время способов обнаружения бактерии, продуктов её жизнедеятельности и антител к ней великое множество. Каждый из методов имеет определённые достоинства и недостатки.

Поэтому пациенту рекомендуется сдавать несколько анализов для подтверждения наличия микроба в организме, порекомендовать их должен врач, с учетом конкретного клинического случая и технической оснащённости учреждения, в котором будет проводится диагностика.

Каждому пациенту необходимо пройти ФГДС с биопсией. Далее изучение биоптированной слизистой возможно под микроскопом, экспресс-тестами, либо путем культивированием бактерий на питательных средах.

Не лишним будет сдать кровь и кал для серологической диагностики. Ведь подтверждением инфекции может стать высокий титр антител бактерии или её ДНЕ-фрагменты в испражнениях.

Дыхательный тест – прекрасный неинвазивный способ, позволяющий достоверно подтвердить наличие в организме бактерии и ее активность. И если есть возможность пройти его в лечебном учреждении, следует обязательно её воспользоваться.

Анализы на хеликобактерную инфекцию сдают не только для выявление микроорганизма, но и с целью контроля излеченности. Какие именно нужны исследования, всегда определяет врач.

Точными анализами являются:

• цитологический метод, когда врач наблюдает наличие бактерии под микроскопом
• культуральный метод – выращивание бактерий на питательных средах
• метод ПЦР-диагностики или молекулярно-генетический – обнаружение генов или ДНК-фрагментов бактерии

Все эти методы основаны на первоначальном взятии биоптата – кусочка слизитой желудка при проведении ФГДС. Они являются инвазивными. Без «глотания трубки» данные методы провести невозможно.

В отличие от методов серологического исследования крови, при котором выявляются антитела, которые косвенно свидетельствуют о нахождении в организме микроба или ферментных методов, которые способны диагностировать продукты его жизнедеятельности, цитология выявляет патогена целиком, собственной персоной.

Для данного исследования используются мазки-отпечатки биоптатов слизистой желудка. Важно взять биопсию из наиболее информативных участков и предполагаемых мест обитания бактерии – чаще это антральный отдел.

Мазки высушиваются, окрашиваются специальными красителями и изучаются под микроскопом. Бактерии располагаются в слизи, они S-образной или спиралевидной формы, имеют жгутики на конце тела. Опытный глаз врача-диагноста не спутает данные микроорганизмы с любыми другими.

Культуральный метод позволяет вырастить целую колонию бактерий на специальных питательных средах. Патогены любят среду с низким содержанием кислорода (не более 5%), для их выращивания используют кровяные питательные среды.

При благоприятных условиях, соблюдения температурного режима при культивировании и анаэробных условий, через 3-5 суток на среде вырастают круглые, прозрачные колонии бактерий, которые далее подвергаются идентификации.

ПЦР-методы обнаружения генов и фрагментов хеликобактерных ДНК является информативным, но требует специального оборудования и реактивов. Им располагает не каждое поликлиническое учреждение на сегодняшний день.

Врачи рекомендуют для выявления Н.руlori целью наибольшей информативности использовать три, а лучше четыре метода диагностики: цитологический, культуральный, ПЦР, дыхательный тест.

1. Перечень анализов должен определит врач с учетом конкретного случая и цели исследования.
2. С профилактической целью без жалоб со стороны органов ЖКТ можно воспользоваться неинвазивными методами диагностики (без ФГДС):

• анализ крови для серологического выявления антител к микробу
• анализ кала для ПЦР-диагностики фрагментов ДНК
• дыхательный тест

Также неинвазивные методы рекомендованы после проведения лечения с целью уточнения его эффективности, ослабленным, тяжелобольным пациентам, которым нельзя сделать зонд и произвести инвазивные способы диагностики.

Если имеются жалобы со стороны органов ЖКТ или подозрения на инфицирование – обязательно проведение ФГДС с последующим взятием участка слизистой желудка. В этом случае рекомендованы цитологический, культуральный, уреазный экспресс-тест или ПЦР-диагностика биоптата.

«Золотого стандарта» диагностики микроба не существует. Все методы дополняют друг друга, поэтому использовать нужно несколько из них. Выбор и тактика диагностики – прерогатива лечащего врача.

Если хотят диагностировать саму бактерию или её фрагменты – берут участок слизистой из желудка специальным прибором при проведении ФГДС. Врач определяет место пункции – это наиболее гиперемированные и отекшие участки внутренней желудочной стенки. Нельзя брать для исследования кусочек из дна эрозий или язв.

Если цель диагностики – профилактическое обследование или оценка эффективности лечения, можно применять неинвазивные методы: взять анализ крови, кала, провести дыхательный тест.

Перед проведением инвазивных анализов от пациента требуется подготовка лишь к эндоскопическому обследованию – фиброгастроскопии.

Кровь для исследования берут из вены, особой подготовки от пациента анализ не требует. Желательно сдавать кровь натощак, вечером допустим легкий ужин, не желательно переедать или употреблять жирную пищу.

Перед анализом кала 3 дня следует питаться правильно: не кушать продукты, содержащие большое количество красителей и консервантов, грубоволокнистой пищи, не принимать медицинские препараты, алкоголь.

Перед проведением дыхательного теста также важна подготовка. Нельзя кушать после 22.00 вечера накануне теста и утром. За два дня перед исследованием исключить все повышающие газообразование продукты и жидкости, способные с выдыхаемым воздухом повышать концентрацию СО2: капуста, бобовые, яблоки, сдоба, газировка. Нельзя употреблять спиртное и курить, использовать жевательную резинку.

От того, насколько сознательно отнесется пациент к подготовке к анализам, зависит их качество и результат. А значит последующее лечение и общее самочувствие.

Широкую популярность приобретают экспресс-тесты в диагностике бактерии. Они достаточно информативны, позволяют быстро установить инфицированность Н.руlori в течение нескольких минут после проведения ФГДС. Это экспресс-уреазные тесты.

Они основаны на способности микробного фермента уреазы расщеплять мочевину с выделением аммония. Ионы аммония создают щелочную среду, и способствует смене цвета индикатора экспресс-системы.

В одноразовый экспресс-набор входит:

• мочевина
• индикатор РН (изначально его цвет жёлтый)
• бактериостатический агент

При проведении ФГДС производится забор участка слизистой. Данный участок помещается на панель экспресс-набора. Если данная слизистая содержит микроб, его фермент уреаза начинает активно расщеплять содержащуюся в тесте мочевину.

Выделяется аммиак, защелачивает среду, индикатор реагирует на его выделение и меняет свой цвет с желтого на малиновый. Оценивается тест от нескольких минут до суток. Малиновое окрашивание будет свидетельствовать о наличии инфекции и положительном тесте.

Если смены окраски индикатора не произошло, или оно появилось спустя сутки – результат считается отрицательным. Патогена в биоптате нет.

Необходимо пройти лицам, которые:

1. Имеют симптомы патологии желудочно-кишечного тракта: изжогу, тошноту, дискомфорт или боли в эпигастрии, металлический привкус во рту
2. Имеют тесный контакт с лицами, у которых уже диагностирована данная инфекция, либо среди членов семьи данный диагноз установлен
3. В анамнезе уже имеют гастрит, эзофагит, язву без установленной этиологии
4. Прошли курс эрадикационной терапии по поводу данной инфекции для оценки качества лечения
5. Имеют проблемы кожи неустановленной этиологии, иммунные нарушения
6. Успешно прошли лечение от Н.руlori с достоверно подтверждёнными лабораторными данными, для профилактики реинфекции 1 раз в год.

Среди всего многообразия методов диагностики Helicobаcter pylori выделяют две большие группы — инвазивные и неинвазивыне методы.

Инвазивные методы основаны на взятии биоптатов при проведении фиброгастродуоденоскопии(цитологический,гистологический,быстрый уреазный тест).

Неинвазивные методы же, не требуют проведения эндоскопического исследования (уреазный дыхательный тест). Наиболее распространенными из них являются цитологический, уреазный и гистологический методы.

Материалом для цитологического исследования служат мазки-отпечатки биоптатов, полученные при эндоскопии из участков слизистой оболочки антрального отдела желудка или двенадцатиперстной кишки с наиболее выраженными морфологическими изменениями (гиперемия, отек и т.п.).

Мазки высушивают и окрашивают по Романовскому-Гимзе, по Папенгейму или метанолазурэозиновой смесью. При цитологической диагностике можно не только определить наличие возбудителя, но и судить о составе клеточной инфильтрации по наличию лимфоцитов, плазмоцитов, эозинофилов и нейтрофилов.

Гистологическое исследование биоптата характеризуется высокой специфичностью — 100%, в случае, если выполняется опытным специалистом. Чувствительность же метода колеблется от 69% до 95%-100%.

Данный метод имеет ряд преимуществ: широкая доступность, удобство хранения и транспортировки препаратов и возможность оценки в любое время любым специалистом, который легко может проводить ретроспективный анализ. Гистологический метод позволяет оценить любую из форм повреждения СОЖ (выраженность воспаления, атрофии, обнаружение метаплазии и дисплазии слизистой).

При взятии биопсийных проб возможен ложноотрицательный результат вследствие неоднородности локализации бактерии на слизистой, поэтому для уменьшения вероятности ложноотрицательных результатов рекомендовано взятие двух биоптатов из антрального отдела, двух из тела желудка и одного из угла желудка.

Биопсийный материал, фиксированный в формалине и залитый в парафин, обрабатывается моноклональными антителами против Helicobacter pylori. Готовые к применению коммерческие наборы с моноклональными антителами работают при разведении 1:200000 и избирательно окрашивают только Helicobacter pylori.

Этот метод хорошо зарекомендовал себя при исключительно низкой степени обсемененности слизистой оболочки желудка Helicobacter pylori, когда морфологический метод и уреазный тест дают ложноотрицательные или сомнительные результаты.

Он также используется для выявления морфологически измененных (кокковых форм) Helicobacter pylori, ,и даёт возможность не только существенно повысить чувствительность и специфичность гистологического выявления Helicobacter pylori, но и идентифицировать различные штаммы Helicobacter pylori, что важно для выяснения природы повторного инфицирования слизистой оболочки после эффективного антихеликобактерного лечения.

Уреазный дыхательный тест метод («золотой стандарт» диагностики):

В развитых странах в последние годы стандартным методом контроля за эрадикацией стал уреазный дыхательный тест, который основан на способности уреазы разлагать мочевину до НСО3 Ї и NH4 +. Из НСО3Ї образуется СО2, который, попадая в кровоток, затем транспортируется в легкие.

Для проведения УДТ необходима мочевина, меченная радиоактивным углеродом №іС или 14С. Чаще в клинической практике применяется нерадиоакивный стабильный углерод №іС. 14С используется реже, так как является источником излучения низкоэнергетических в-частиц, которые обнаруживаются сцинтилляционным счетчиком.

Изотоп количественно определяют газовым хроматомасс-спектрометром или с помощью инфракрасного и лазерного оборудования.

В начале исследования берутся 2 фоновые пробы выдыхаемого воздуха. Далее пациент съедает легкий завтрак и тестовый субстрат; в течение 1 часа, с интервалами в 15 минут, у него берут 4 пробы выдыхаемого воздуха.

Уровень радиоактивного изотопа в выдыхаемом воздухе определяют в течение 10-30 минут. Затем пробирки направляются на масс-спектрометрию.

Результат выражается как приращение №іСО2 — д№іСО 2, его экскреция (‰) и считается положительной при значениях выше 5‰.

• В ряде стран используется определение изотопного отношения концентраций №іСО2/№ІСО2, что позволяет свести к минимуму влияние на конечный результат методических и инструментальных погрешностей.
• При использовании дыхательного уреазного теста ложноположительные результаты считаются редкими (4-10%), ложноотрицательные результаты возможны у пациентов, принимавших перед исследованием антисекреторные и висмутсодержащие препараты, которые ингибируют уреазу бактерий, в связи с чем рекомендуется осуществлять диагностику эрадикации уреазными методами не ранее чем через месяц после приема этих препаратов, а так же у пациентов имеющих кокковые формы Helicobacter pylori.
• Быстрый уреазный тест:
• Уреазный тест («кампи-тест») относится к числу экспресс-методов выявления Helicobacter pylori.
• Стандартный «кампи-тест» состоит из:
• содержащего мочевину геля-носителя;
• раствора азида натрия;

раствора фенол-рота — используется в качестве индикатора рН, который при сдвиге рН среды в щелочную сторону меняет свой цвет от желтого к малиновому; сдвиг рН происходит в том случае, если под действием хеликобактерной уреазы происходит гидролиз мочевины с образованием аммиака.

В качестве источника хеликобактерной уреазы используют биоптаты слизистой оболочки, которые помещают в луночку специальной плашки из синтетического материала, заполненную готовой стерильной средой.

Появление малинового окрашивания теста свидетельствует о наличии в биоптате микробных тел Helicobacter pylori.

1. О количестве Helicobacter pylori в биоптате косвенно судят по времени изменения окраски теста:
2. *значительное инфицирование слизистой оболочки НР (+++) — малиновая окраска теста появляется в течение 1 часа от начала исследования;
3. *умеренное инфицирование слизистой оболочки НР (++) — окраска индикатора изменяется через 2-3 часа;
4. *незначительное инфицирование слизистой оболочки НР (+) — малиновое окрашивание теста появляется к концу суток.
5. Более позднее окрашивание теста относят к отрицательным результатам.
6. При проведении уреазного теста нужно учитывать и тот факт, что он может быть положительным у лиц, желудок которых колонизирован Helicobacter heilmanii, имеющим близкое сродство с Helicobacter pylori.

В соответствии со стандартами диагностики и лечения ассоциированных с Helicobacter pylori заболеваний [39], наиболее точный диагноз хронического Helicobacter pylori-ассоциированного гастрита может быть установлен после морфологического исследования биоптатов слизистой оболочки желудка.

Такой подход позволяет оценить состояние слизистой оболочки желудка, дать характеристику воспалительного процесса и оценить прогноз развития рака желудка на основании выраженности атрофических изменений слизистой оболочки желудка, что дает возможность клиницисту персонифицировать программу наблюдения больного хроническим Helicobacter pylori-ассоциированным гастритом [17, 77].

По требованиям Модифицированной Сиднейской системы для того чтобы правильно интерпретировать состояние слизистой оболочки желудка, необходимо минимум пять биоптатов: два из антрального отдела на расстоянии 2-3 см от привратника по большой и малой кривизне, два из тела желудка на расстоянии 8 см от кардии по большой кривизне и на 4 см проксимальнее угла по малой кривизне, один — из угла желудка [17, 80]. Заключение должно содержать сведения об активности и выраженности воспаления, степени атрофии, метаплазии и о наличии Helicobacter pylori [26]. Современный подход для установления уровня выраженности атрофических изменений слизистой оболочки желудка предполагает определение стадии хронического гастрита согласно современной классификации хронического гастрита OLGA — Operative Link for Gastritis Assessment [56, 73]. Модифицированный вариант OLGA system — Российский пересмотр классификации хронического гастрита был утвержден III Съездом Российского общества патологоанатомов (Самара, 2009), где для интегральной оценки атрофии слизистой оболочки использована визуально-аналоговая шкала, разработанная в виде таблицы стадий хронического гастрита [3]. Принципиально важным для практического использования предлагаемой оценки стадии хронического гастрита является прогнозирование риска развития рака желудка, возможное на основании оценки лишь атрофических изменений слизистой оболочки, то есть еще до появления признаков эпителиальной дисплазии/неоплазии [3, 57]. Известно, что с нарастанием стадии атрофии увеличивается риск рака желудка кишечного типа, так как на стадии III-IV риск рака желудка кишечного типа возрастает в шесть раз [3, 69]. Следовательно, врач, наблюдающий больного Helicobacter pylori-acco- циированным гастритом, должен проводить эрадикационную терапию с целью предупреждения появления атрофических изменений слизистой оболочки желудка.

Основой гистологического метода является микроскопическое морфологическое и морфометрическое исследование парафиновых срезов, окрашенных различными способами: гематоксилин-эозином, по Гимзе, то- луидиновым синим, по Вартину-Старри и др. При этом специфичность метода составляет 93-94%, чувствительность — 95% [45].

С использованием метода ПЦР возможно выделение высокопатогенных и низкопатогенных штаммов Helicobacter pylori. Это важно для определения прогноза заболевания и эффективности эрадикации. Специфичность метода — 95%, чувствительность — 94% [22, 44].

Культуральное исследование и стандартное определение чувствительности Helicobacter pylori к антибиотикам перед терапией первой линии важно проводить в регионах или популяциях с высокой резистентностью к кларитромицину (более 15-20%), если планируется использовать стандартную трехкомпонентную эрадикационную терапию, одним из компонентов которой является клэритромицин. Бактериологический метод с определением чувствительности к антибиотикам также необходимо применять при неэффективности терапии второй линии [27]. Специфичность метода составляет практически 100%, чувствительность — 76- 90% [45]. Основой быстрого уреазного теста является определение Helicobacter pylori по уреазной активности микроорганизма в биоптатах слизистой оболочки желудка. Helicobacter pylori продуцирует уреазу, под влиянием которой происходит гидролиз мочевины с образованием иона аммония. При этом увеличивается pH среды, что можно зафиксировать с помощью изменения цвета индикатора. Биоптаты слизистой оболочки желудка помещают в раствор, содержащий мочевину и индикатор, изменение цвета которого косвенно свидетельствует о наличии Helicobacter pylori [22]. Специфичность — 96%, чувствительность — 95% [44].

В клинической практике для выявления Helicobacter pylori используется несколько неинвазивных диагностических тестов. Уреазный дыхательный тест, основанный на определении 13С-мочевины, является лучшим тестом для диагностики инфекции Helicobacter pylori [27].

Это быстрый и высокоточный метод определения инфицированности Helicobacter pylori слизистой оболочки желудка по уреазной активности микроорганизма: способности уреазы разлагать мочевину до NH4+ и НСОЗ- с последующим образованием из НС03- углекислого газа, который, попадая в кровоток, затем выделяется через легкие и может быть определен спектрометром в выдыхаемом воздухе. Специфичность метода — 93-100%, чувствительность — 95-97% [45].

В последние годы была разработана новая методика определения антигенов Helicobacter pylori в кале, в которой вместо поликлональных антител используются моноклональные [27]. Этот метод является высокоточным методом как для первичной диагностики Helicobacter pylori, так и для контроля лечения.

Такой подход позволяет избежать трудностей проведения эндоскопического исследования, включающего психологический и физический дискомфорт для пациентов.

Однако в группах пациентов с высоким риском развития рака желудка (возрастной порог или наличие симптомов «тревоги») предпочтительным является проведение эндоскопического исследования [27].

Серологический метод — третий среди неинвазивных диагностических тестов для диагностики инфекции Helicobacter pylori. Учитывая хронический характер инфекции, следует определять только IgG. Предпочтительным методом является иммуноферментный анализ (ИФА).

Как было отмечено в предыдущих Маастрихтских соглашениях, серологические тесты — единственные методы диагностики Helicobacter pylori, на которые не оказывают влияния локальные изменения слизистой оболочки желудка, приводящие к низкому содержанию микроорганизмов и ложноотрицательным результатам при применении других тестов.

Это связано с тем, что уровень антител к Helicobacter pylori, и в особенности к наиболее специфическому антигену CagA, остается повышенным, несмотря на временное уменьшение бактериальной нагрузки, а также в течение длительного времени после исчезновения Helicobacter pylori из желудка.

Серологическое определение антител IgG к Helicobacter pylori в сыворотке крови является простым и доступным методом первичного скрининга инфекции [21, 22].

Учитывая, что антитела к Helicobacter pylori сохраняются в течение многих месяцев после эрадикации микроорганизма, использование серологического метода не рекомендуется для оценки эффективности проведения эради- кационной терапии [27].

Врачу, осуществляющему первичную диагностику хеликобактериоза с помощью инвазивных тестов, необходимо помнить, что может быть получен ложноотрицательный результат при низкой плотности обсеменения слизистой оболочки желудка Helicobacter pylori, что часто имеет место на фоне приема ингибиторов протонной помпы (ИПП), антибиотиков и препаратов висмута, а также при выраженном атрофическом гастрите. В таких случаях рекомендуется обязательная комбинация инвазивных методов с определением антител к Helicobacter pylori в сыворотке крови [74].

Из неинвазивных методов наиболее перспективным является тест- система «ГасгроПанель», которая позволяет определять в сыворотке крови уровни гастрина-17 (G-17), пепсиногена-I (PGI), пепсиногена-И (PGII), а также специфических иммуноглобулинов класса G (IgG) к Helicobacter pylori. Тесты основаны на технологии иммуноферментного анализа [21, 23].

Гастрин-17 вырабатывается G-клетками антрального отдела желудка, и при атрофии в этом отделе уровень гастрина снижается. В случае атрофического гастрита тела желудка при отсутствии атрофии в антруме содержание гастрина-17 возрастает (> 10 пмоль/л) в связи с включением механизма отрицательной обратной связи регуляции кислотопродукции через гастрин.

При атрофии тела желудка снижается уровень сывороточного пепсиноге- на-I, который продуцируется главными клетками тела желудка. Пепсино- ген-П вырабатывается во всех отделах желудка и в двенадцатиперстной кишке, и при атрофическом гастрите тела желудка снижается отношение пепсиноген-1/пепсиноген-П.

Повышение уровня антител IgG к Helicobacter pylori до 42 ЕШ (ЕШ — иммуноферментные единицы) и более свидетельствует о наличии хеликобактерной инфекции [23].

Антитела класса IgA к Helicobacter pylori означают постоянное и длительное присутствие хеликобактера в организме, поскольку они появляются в крови через несколько недель после первого контакта с инфекцией и могут сохраняться в течение нескольких лет. Они служат показателем хронической инфекции.

Увеличение количества антител IgA говорит о возможной интенсивности воспалительных процессов в слизистой желудка. Во время лечения болезней желудка и двенадцатиперстной кишки серологическое исследование проводится неоднократно — таким образом контролируется эффективность лечебных мероприятий.

По падению титра IgA антител или их полному исчезновению из крови врач судит об успешности применяемой терапии.

Если антитела класса IgA к Helicobacter pylori не обнаруживаются в ходе исследования, то есть результат отрицательный, это объясняется либо «незнакомством» организма с хеликобактером (отсутствием заражения), либо ранним периодом инфицирования, или же следствием медикаментозного лечения. В любом случае оценку исследования осуществляет специалист.

Для первичной диагностики Helicobacter pylori могут быть использованы все указанные методы.

Однако отрицательный результат исследования может считаться истинно отрицательным только при условии отсутствия лечения ингибиторами желудочной секреции (ингибиторы протонной помпы, Н2-блокаторы) менее чем за 2 недели и антибактериальными препаратами в течение 1 месяца перед проведением теста.

Исключением является метод выявления антител к Helicobacter pylori в крови, который может быть критерием наличия инфекции на фоне приема антисекреторных препаратов, поскольку титр антител в крови сохраняется длительно. По этой же причине его не следует использовать для оценки эффективности эради- кации.

Контрольное исследование для оценки эрадикации любым методом, кроме иммунологических, должно проводиться не ранее, чем через 4 недели после окончания лечения антибиотиками, препаратами висмута и ингибиторами протонной помпы [22, 45].

При выборе метода диагностики хронического Helicobacter pylori- ассоциированного гастрита врач, в первую очередь, должен учитывать его диагностическую чувствительность и специфичность. Между тем каждый из применяемых методов имеет свои недостатки.

Возможно получение ложноотрицательных результатов при серологическом исследовании сыворотки крови — вследствие перекрестного реагирования антител; при быстром уреазном тесте — из-за контаминации другими уреазопродуцирующи- ми бактериями (протей, псевдомонады, стрептококки, грибы рода Candida) или при наличии уреазонегативных штаммов Helicobacter pylori; при гистологическом исследовании — из-за схожести морфологии ряда микроорганизмов; при бактериологическом исследовании — из-за сложностей культивирования Helicobacter pylori или снижение эффективности выделения Helicobacter pylori в случаях низкой обсемененности [44]. Следовательно, успешность выявления Helicobacter pylori зависит от правильного сочетания разных методов диагностики.

источник