Пцр гепатит с когда сдавать анализы

Гепатит С переходит из острой фазы в хроническую в 80% случаев. Репликация болезнетворных вирусов в функциональных клетках печени ведет к дисфункции органа. Это обусловлено тем, что паренхиматозная ткань заменяется соединительной. В результате анамнез больного дополняется кровотечениями в ЖКТ, интоксикацией организма, проблемами со свертываемостью крови. Поэтому чем раньше будут диагностированы патологические изменения, тем больше у пациента шансов на выздоровление. Анализ ПЦР на гепатит С считается наиболее точным методом исследования.

Этот диагностический метод разрешено проводить спустя несколько дней после заражения. Полимеразная цепная реакция позволяет достоверно определить генотип и концентрацию вируса в крови. Чтобы сделать анализ, у пациента берут биологический материал, в котором может присутствовать РНК возбудителя.

ПЦР на гепатит С осуществляют в три этапа:

• Качественный анализ – с его помощью определяют генетический материал возбудителя.
• Количественное исследование – таким образом выявляют вирусную нагрузку.
• Генотипирование – на этой стадии врач узнает разновидность заболевания.

Методику разработали около 30 лет назад. Ее применяют для диагностики многих инфекционных заболеваний. ПЦР позволяет обнаружить уникальный генетический материал. Для этого используют праймеры. Так называют короткие нити РНК, которые присоединяют к началу гена.

В результате количество фрагментов болезнетворного вируса многократно увеличивается. Каждая фаза требует особого температурного режима и определенного промежутка времени. Молекула ДНК формируется в течение 3 минут. Амплификация включает в себя около 30 циклов. ПЦР делают в лаборатории посредством специального оборудования.

Сдача анализа ПЦР может быть обусловлена наличием клинических симптомов гепатита С. Процедура показана людям, которые:

• контактировали с инфицированным человеком;
• страдают от острых и хронических заболеваний печени;
• проходят лечение от патологических изменений в паренхиматозной ткани;
• входят в группу риска;
• являются донорами крови и ее компонентов.

ПЦР осуществляют не только при гепатите С. Анализ используют в медицине, биологии, криминалистике. Определение специфических показателей – этап, необходимый для подбора лекарственной схемы.

В схему диагностического обследования включают иммунофлуоресцентный анализ и ПЦР. С помощью первого можно определить концентрацию иммуноглобулинов. Эти вещества вырабатываются защитным механизмом после проникновения болезнетворных вирусов в организм. В отличие от ПЦР ИФА не обладает эффективностью во время инкубационного периода. С помощью полимеразной цепной реакции гепатит С можно выявить в первые 7 дней после инфицирования.

Данное клиническое исследование обладает следующими характеристиками:

• Минимальная вероятность ложного результата.
• Высокая эффективность.
• Специфичность.
• Чувствительность.
• Универсальность.
• Автоматизация процесса.
• Безопасность.
• Скорость получения показателей.

Единственным минусом ПЦР является ее техническая сложность. Это связано с тем, что врачу необходимо подобрать правильный состав нуклеотидов, в функциях которых синтез ДНК. Из-за повышенной чувствительности метода возможно получение ложноположительного или ложноотрицательного результатов.

Чтобы добиться точности значимых показателей, биологический материал тщательно очищают от медикаментозных препаратов и белковых соединений. Для подтверждения результата требуется сравнение ранее проверенных образцов. К факторам, провоцирующим ошибку, причисляют:

Нарушение техники забора анализа

• Нарушение техники забора анализа.
• Изменения в последовательности фрагментов РНК.
• Совпадение синтезируемых нуклеотидов и генов болезнетворных вирусов.

Вероятность получения ложного результата при гепатите С присутствует из-за невозможности определения генетической основы заболевания. ПЦР-диагностика позволяет напрямую выявить возбудителя. С помощью амплификации ДНК происходит обнаружение болезнетворных микроорганизмов в продуктах питания, воде и почве.

Ограничения, касающиеся данного метода, не уменьшают его эффективности и популярности. Клиническое исследование проводят регулярно. Таким образом врач может оценить эффективность принятых лечебных мер. Необходимость в этом возникает из-за того, что вирус гепатита С способен мутировать. Отсутствие положительного эффекта означает адаптацию вируса к применяемым лекарственным средствам.

Для того чтобы провести полимеразную цепную реакцию у больного, страдающего от гепатита С, берут венозную кровь. Обычно для изучения требуется две порции биологического материала. Посредством одной делается непосредственно ПЦР, а другую направляют на иммуноферментный анализ.

Кровь для анализа ПЦР берут из вены

Подготовка имеет большое значение. Пациент сдает кровь на ПЦР утром на голодный желудок. За несколько дней до процедуры придется отказаться от вредных продуктов питания, спиртных напитков, никотина и наркотиков. Больному следует избегать половых контактов, чрезмерной физической и эмоциональной нагрузки. Бассейн и спортзал оказываются под запретом. Подготавливаться придется в любом случае.

Существуют особые указания относительно медикаментозных препаратов. Это касается антибиотиков и антидепрессантов. Женщины, у которых начались менструации, должны отсрочить сдачу анализа на гепатит С. Кольпоскопия также является поводом для отказа от процедуры.

Перечисленные правила довольно просты. Благодаря им, можно добиться максимальной достоверности данного диагностического метода. Расшифровывать результаты должен специалист. Самостоятельно интерпретировать их у пациента вряд ли получится.

ПЦР-диагностику осуществляют следующим образом:

Кровь помещают в термостат

• Сначала забирают биологический материал. Кровь помещают в простерилизованные приспособления. Необходимый объем не превышает 1-1,5 мл. Держать кровь и ее компоненты следует не дольше 24 часов. Температура хранения не должна превышать 4 градусов по Цельсию.
• После начинают клиническое исследование. Подготовленную кровь помещают в термостат вместе с амплификационной смесью. Обычно требуется не более 25 мл специального состава. Амплификация проводится в автоматическом режиме на протяжении нескольких часов.
• Параллельно делают контрольные анализы. Для этого используют биологические материалы, взятые у здорового человека. Это поможет избежать ложных результатов.
• Расшифровка и регистрация показателей. Генетический материал обнаруживают с помощью бромистого этидия. Благодаря специфическому воздействию, фрагменты ДНК высвечиваются. Наличие (отсутствие) вируса выявляют ориентируясь на данные таблицы.

Определить значение полученных показателей может только инфекционист и гепатолог. Анализ ПЦР вводят диагностический комплекс вместе с биохимическим исследованием крови, УЗИ, ИФА и биопсией. Диагноз ставят на основании всех результатов. Порядок расшифровки анализов зависит от этапа диагностического обследования.

Ультразвуковая диагностика

На первой стадии ПЦР положительным результатом теста считается обнаружение фрагментов ДНК болезнетворного вируса. При проведении количественного анализа определяют уровень вирусной нагрузки. Она может быть низкой (менее 8*10^5 МЕ/мл), средней (от 8*10^5 МЕ/мл), высокой (больше 2,4*10^7 МЕ/мл). Нормой (отрицательным результатом) считается отсутствие специфических антител и частиц вирусной РНК. На этапе генотипирования об инфекционном заражении свидетельствует РНК определенного генотипа.

При получении положительного результата больному назначают эффективную терапевтическую схему. При этом обязательно учитывают информацию о наличии вируса в крови, степени его активности и генотипе. Цена процедуры зависит от методики тестирования, вида биологического материала. К общей стоимости могут быть добавлены затраты за забор крови или других жидкостей. Последнее обусловлено тем, что возбудителя часто обнаруживают в урине, каловых массах и сперме.

источник

Гепатит — общее название диффузных, то есть захватывающих весь орган, воспалительных заболеваний печени. Гепатиты бывают аутоиммунными, токсическими и вирусными. Современная медицина различает 7 видов вирусных гепатитов — А, В, С, D, E, F, G, гепатиты как компоненты других вирусных заболеваний (СПИД, краснуха, желтая лихорадка) и бактериальные гепатиты, возникающие при сифилисе или лептоспирозе.

Вирусные гепатиты распространены наиболее широко, поскольку легко передаются бытовым способом, с кровью, от матери к плоду или при незащищенном половом контакте. В анализе крови инфицированного больного могут быть обнаружены антигены и антитела — маркёры заболевания, а также специфические внутриклеточные ферменты печени. В число необходимых анализов для полноценной диагностики гепатита входит биохимия крови.

Вирусные гепатиты в 90% случаев протекают бессимптомно и излечиваются самопроизвольно за счет действия иммунной системы человека. Если болезнь все-таки дала о себе знать, активная ее фаза делится на два периода: преджелтушный и желтушный. Сначала отмечаются такие общие для вирусных инфекций симптомы, как:

• общая слабость;
• кожный зуд;
• тошнота, рвота, диарея;
• температура тела до 38°С;
• головные, мышечные, суставные боли.

Затем наступает желтушный период, когда пораженная печень выбрасывает в кровь большое количество билирубина — желтого пигмента. Именно с этого момента становится очевидно, что у пациента проблемы с печенью, и назначается комплекс лабораторных исследований крови, мочи и кала.

Однако следует учитывать тот факт, что многие случаи заражения не проявляются в симптоматике. То есть после инкубационного периода, который может длиться от пары недель до месяцев, гепатиты не позволяют себя обнаружить по внешним клиническим признакам не только в продромальной (преджелтушной) стадии, но и в желтушной — по причине отсутствия ее как таковой. Например, в 2/3 всех случаев гепатит B проходит в атипичной (безжелтушной, или субклинической) форме. В такой ситуации следует задаться справедливым вопросом…

Периодическая проверка на гепатит необходима каждому, особенно если планируется беременность или сменился половой партнер, ухудшилась эпидемиологическая обстановка в окружающем вас коллективе, обнаружен вирус у кого-то из родственников, у вас нашли хронические формы каких-либо заболеваний, при любых симптомах, напоминающих пищевое отравление, или при патологической усталости и утомляемости. В профилактических целях золотым стандартом считается ежегодное вирусологическое исследование. Срочно следует провериться, если вы случайно порезались или укололись сомнительным предметом, которым могли пользоваться до вас — например, если в почтовом ящике вы нашли использованный одноразовый шприц и успели им пораниться.

Врач обязательно назначит вам анализ крови на гепатит, если вы пришли с жалобами на следующие симптомы:

• пожелтение кожи и белков глаз;
• тяжесть, распирание, боли в правом подреберье;
• непереносимость жирной пищи;
• моча бурого цвета, обесцвечивание стула.

Анализы на гепатит входят в список необходимых исследований при оформлении медицинских книжек для персонала лечебно-профилактических учреждений, роддомов, детских больниц и детских поликлиник, домов ребенка, школ-интернатов, учреждений особого режима. Доноры крови и лица, стоящие на учете в наркологических и кожно-венерологических диспансерах и кабинетах, в обязательном порядке проходят проверку.

Кровь на биохимический анализ сдается строго натощак, в утренние часы, с 8 до 11. Это обусловлено суточными ритмами, которые влияют на содержание гормонов в крови. Вирусологический анализ на гепатит (антигены и антитела) может быть сдан в любое время суток, но тоже натощак: важно не принимать пищу в течение 4–6 часов до забора крови. В обоих случаях используется венозная кровь, которая как биоматериал более качественна, чем капиллярная.

Накануне сдачи любых анализов крови рекомендуется избегать физических и эмоциональных нагрузок, приема алкоголя и тяжелой пищи. Питьевой режим должен быть обычным.

Гепатит А, передающийся бытовым путем, также называется болезнью Боткина. Чаще всего вспышки гепатита А отмечаются в условиях скученности людей, при низкой санитарии. Гепатит А не переходит в хроническую форму и дает наименьшие осложнения. Тем не менее, в острой форме он способен причинить инфицированному больному существенный дискомфорт.

Необходимые качественные анализы:

• Anti-HAV-IgG (антитела класса IgG к вирусу гепатита А) . Результат может быть положительным, если больной был вакцинирован против гепатита А, болеет им в настоящий момент или только что перенес заболевание. В этом случае у него вырабатывается иммунитет. Отрицательный результат означает отсутствие иммунитета к гепатиту А и возможность заражения.
• Anti-HAV-IgM (антитела класса IgM к вирусу гепатита А) . Варианты результатов — «положительно», «отрицательно», «сомнительно». В первом случае речь идет об остром или недавно перенесенном гепатите А, во втором — не выявлено иммунитета к вирусу и возможно заражение в ближайшее время при наличии очага инфекции дома или в коллективе. Сомнительным считается результат, близкий к пороговому значению. В этом случает необходимо следить за состоянием пациента в течение недели. Результаты исследования anti-HAV IgM используют обязательно в комплексе с другими маркёрами гепатита и данными о самочувствии пациента.
• Определение РНК (HAV-RNA) в сыворотке крови. Результат «обнаружено» означает, что в образце крови нашли фрагмент РНК, специфичный для вируса гепатита А, можно диагностировать заражение гепатитом А. Отрицательный результат говорит об отсутствии фрагментов вредоносной РНК или о том, что их концентрация ниже чувствительности теста.

Гепатит А считается в основном детской болезнью, но его последствия сказываются на здоровье всю жизнь. Поэтому при вспышке инфекции важно изолировать больных и следить за состоянием остальных людей, находившихся в очаге заражения.

Вирус гепатита В передается в быту, половым путем или с кровью. Является очень устойчивым и может сохраняться во внешней среде около недели, даже в засохшей крови, на лезвии бритвы или на конце иглы. Им инфицировано 350 000 000 людей во всем мире, и ежегодно от последствий гепатита В погибает 1 000 000 человек. Благодаря повсеместной вакцинации эти цифры имеют тенденцию к снижению. Для диагностики гепатита В нужны следующие анализы:

• Анализ на HBs-антиген, или австралийский антиген. Этот анализ на вирус гепатита может быть как качественным, так и количественным. Референсное значение — 0,5 МЕ/мл. Если получен меньший результат, тест отрицательный, если больший — положительный. Если антиген выявлен, это может свидетельствовать об остром или хроническом гепатите В, а также о носительстве вируса. Отрицательный результат может трактоваться как отсутствие гепатита В только при отрицательных результатах анализов на другие маркёры. Не исключается хронический гепатит В с низкой интенсивностью репликации. В редких случаях отрицательный результат получают при молниеносном, злокачественном течении болезни либо при гепатите В с дефектным HBs-антигеном.
• Исследование HBеAg (HBе-антиген вируса гепатита В). Качественный тест. При положительном результате диагностируется острый или хронический гепатит В с высокой интенсивностью репликации. Отрицательный результат означает отсутствие гепатита В только при отсутствии других маркёров. Может быть получен при остром или хроническом гепатите с низкой интенсивностью репликации, а также в период инкубации или выздоровления.
• Определение Anti-HBс-total (антитела классов IgM и IgG к HB-core антигену вируса гепатита) . Качественный тест, который при положительном результате позволяет диагностировать гепатит В, но не дает возможности уточнить, острый он или хронический и в какой фазе протекает. Отрицательный результат при отсутствии других маркёров может означать отсутствие гепатита В, его инкубационный период или хроническую форму.
• Анализ на Anti-HBс IgМ (антитела класса IgМ к HB-core-антигену вируса гепатита B) . Качественный анализ, с вариантами «отрицательно», «положительно», «сомнительно». При сомнительном результате рекомендуется повторить анализ через 10–14 дней. Положительный результат всегда выдается при остром гепатите и иногда — при хроническом. Отрицательный результат при отсутствии других маркёров может означать отсутствие гепатита В, его инкубационный период или хроническую форму.
• Определение Anti-HBе (антитела к HBе-антигену вируса гепатита B). Качественный тест. Положительный результат может означать фазу выздоровления после острого гепатита В, хронический гепатит В или хроническое бессимптомное носительство вируса. Отрицательный результат может быть получен как при отсутствии гепатита, так и при его хронической форме или в инкубационном периоде острой формы. Также нельзя исключить носительство HBs-антигена с низкой репликацией.
• Выявление Anti-HBs (антитела к HBs-антигену вируса гепатита B). Количественный тест. Референсное значение — 10 мЕд/мл. Если показатель выше, это может означать успешную вакцинация против гепатита В, выздоровление или хронический гепатит В с низкой инфекционностью. Если показатель ниже, это означает, что не был достигнут эффект вакцинации или заболевание не было перенесено ранее. Также возможно, что пациент переживает инкубационный или острый период острого гепатита В, хроническую форму болезни с высокой инфекционностью или является носителем HBs-антигена с низкой репликацией.
• Определение ДНК (HBV-DNA) в сыворотке крови. Положительный результат (более 40 МЕ/л) говорит об инфицировании вирусом гепатита В. Отрицательный (менее 40 МЕ/л) — об отсутствии инфицирования или концентрации возбудителя заболевания в образце крови ниже границы чувствительности теста.

Будучи наиболее распространенным, гепатит В может быть предотвращен только при высокой информированности населения и организации вакцинирования. Для лиц группы риска вакцинирование является основным методом защиты.

Этот вид гепатита передается с кровью и другими биологическими жидкостями. Он имеет шесть разновидностей, поэтому анализы необходимо проводить в комплексе. В группу риска входят люди, принимающие наркотики внутривенно, ведущие беспорядочную половую жизнь, медработники, а также пациенты, которым прописывались гемодиализ или переливания крови.

При подозрении на гепатит С и в профилактических целях сдаются следующие анализы:

• Анализ на аnti-HCV-total (антитела к антигенам вируса гепатита C). Качественный анализ, который при положительном результате означает инфицирование или период восстановления после него. Не позволяет различить форму и стадию гепатита С. При отрицательном результате возможен инкубационный период или вариант гепатита С, нечувствительный к данному анализу.
• Определение РНК (HCV-RNA) в сыворотке или плазме крови. Анализ может быть качественным и количественным. При качественном анализе результат «обнаружено» позволяет диагностировать заражение гепатитом C. Отрицательный результат говорит об отсутствии фрагментов вредоносной РНК или о том, что их концентрация ниже чувствительности теста.

При количественном анализе плазмы крови:

• «не обнаружено» : РНК гепатита С не выявлена или значение ниже предела чувствительности метода (15 МЕ/мл). Результат интерпретируют как «РНК гепатита С не выявлена»;
• 100 000 000 МЕ/мл : результат интерпретируется как: «РНК гепатита С выявлена в указанной концентрации, выходящей за пределы линейного диапазона, тест ставился в разведении 1:Х».

При количественном анализе сыворотки крови:

• «не обнаружено» : РНК гепатита С не выявлена или значение ниже предела чувствительности метода (60 МЕ/мл). Результат интерпретируют как «РНК гепатита С не выявлена»;
• 2 МЕ/мл : результат положительный с концентрацией РНК гепатита С менее 102 МЕ/мл;
• от 10 2 до 10 8 МЕ/мл : результат положительный. Полученное значение находится в пределах линейного диапазона;
• 10 8 МЕ/мл : результат положительный с концентрацией РНК гепатита С более 108 МЕ/мл.

Определение антител IgG (recomBlot HCV IgG). Качественный тест. Отрицательный результат говорит об отсутствии инфицирования. Исключения составляют инкубационный период и очень ранняя острая фаза, иммуносупрессированные пациенты, новорожденные с антителами матери. Положительный результат: пациент был инфицирован ранее. Сомнительный результат: возможно, была инфекция.

Гепатит С второй по распространенности после гепатита В, поэтому при подозрении на патологии печени чаще всего анализы делают именно на эти два вирусных заболевания. Однако менее «популярные» вирусы тоже могут причинить печени существенный вред.

Вирус гепатита D имеет в составе оболочки белок гепатита В, поэтому развивается только у инфицированных гепатитом В. Воздействие на организм сразу двух вирусов приводит к тяжелому и хроническому воспалению печени.

Вирус гепатита G встречается у 85% инъекционных наркоманов, также передается половым путем, часто сопутствует гепатитам В, С и D. Для диагностики гепатитов D и G используются следующие тесты:

• Определение РНК (HDV-RNA) в сыворотке крови . Результат «обнаружено» означает, что в образце крови нашли фрагмент РНК, специфичный для вируса, можно диагностировать заражение гепатитом D. Отрицательный результат говорит об отсутствии фрагментов вредоносной РНК или о том, что их концентрация ниже чувствительности теста.
• Определение РНК (HDV-RNA) гепатита G в сыворотке крови . Результат «обнаружено» означает, что в образце крови нашли фрагмент РНК, специфичный для вируса гепатита G, можно диагностировать заражение. Отрицательный результат говорит об отсутствии фрагментов вредоносной РНК или о том, что их концентрация ниже чувствительности теста.
• Анализ на наличие антител класса IgM (Hepatitis delta virus, IgM antibodies; anti-HDV IgM). Качественный анализ, при положительном результате говорящий об остром течении вирусного поражения гепатитом D. Положительный результат в редких случаях может дать неспецифическая интерференция сыворотки. Отрицательный ответ можно получить при отсутствии острой инфекции, в раннем инкубационном периоде и через один-два года после выздоровления.
• Суммарные антитела к гепатиту D (Hepatitis delta virus antibodies; anti-HDV total) . Качественный анализ. «Положительно» — острая или хроническая инфекция, текущая или имевшая место в прошлом. Положительный результат в редких случаях может дать неспецифическая интерференция сыворотки. Отрицательный результат получают при отсутствии острой инфекции, в раннем инкубационном периоде и через один–два года после выздоровления.

После окончания острого периода, антитела к гепатитам D и G могут сохраняться в крови до двух лет. Поэтому при положительном результате анализа обычно назначается повторное исследование.

Вирус гепатита Е передается бытовым путем — в основном через загрязненную питьевую воду — и протекает только в острой форме. После перенесенного гепатита Е формируется стойкий, но не пожизненный иммунитет. Сдается всего два качественных анализа:

• Определение аnti-HEV-IgM (антитела класса IgM к вирусу гепатита Е) . Положительный результат говорит об острой стадии гепатита Е, отрицательный — либо об отсутствии, либо о ранней стадии, либо о периоде выздоровления.
• Определение anti-HEV-IgG (антитела класса IgG к вирусу гепатита Е). Положительный результат может быть получен на острой стадии гепатита Е, а также при наличии вакцинации или экспозиции к вирусу гепатита Е в прошлом. Отрицательный результат возможен в отсутствие гепатита Е, на ранней стадии заболевания или во время выздоровления.

Расшифровать результаты анализов и поставить диагноз с учетом клинической и эпидемиологической картины под силу только специалисту. Заниматься самодиагностикой означает причинять вред своему здоровью и ставить под угрозу здоровье окружающих.

По итогам всех проведенных тестов, если не найдено никаких маркёров вирусного гепатита, можно говорить об отсутствии заболевания. Однако в некоторых случаях врачи рекомендуют сделать анализы повторно через две недели.

В случае положительной реакции обязательно проводится повторный уточняющий анализ через две недели, поскольку возможен вариант, когда пациент только что переболел острой формой вирусного гепатита и маркёры в крови пока еще сохраняются.

В целях профилактики вирусных гепатитов желательно пройти вакцинацию (актуально для гепатита В), а также соблюдать гигиену в быту, избегать случайных половых связей и употребления инъекционных наркотиков.

К ана­ли­зам на ви­ру­сы ге­па­ти­та мо­гут по­двиг­нуть не­бла­гоп­ри­ят­ные ре­зуль­та­ты био­хи­ми­чес­ко­го ис­сле­до­ва­ния на АлАт (ала­нин-ами­нот­ран­сфе­ра­зу) и АсАт (ас­пар­тат-ами­нот­ран­сфе­ра­зу), на пря­мой и об­щий би­ли­ру­бин, ГГТ (гам­ма-глу­та­мил-транс­пеп­ти­да­зу) и ще­лоч­ную фос­фа­та­зу. Но воз­мо­жен и об­рат­ный сце­на­рий: для уточ­не­ния кли­ни­чес­кой кар­ти­ны за­бо­ле­ва­ния врач на­зна­чит скри­нин­го­вое об­сле­до­ва­ние пе­че­ни по этим по­ка­за­те­лям. В лю­бом слу­чае ви­ру­со­ло­ги­чес­кие и био­хи­ми­чес­кие те­с­ты вза­им­но до­пол­ня­ют друг дру­га, по­сколь­ку име­ют раз­лич­ные объ­ек­ты ис­сле­до­ва­ния.

источник

Причина развития вирусного гепатита C – инфицирование возбудителем, который относится к семейству Flaviviridae. Между заражением и началом выработки антител выявляется длительный временной промежуток, что не позволяет своевременно диагностировать заболевание посредством иммуноферментного исследования крови.

Анализ ПЦР на гепатит C, биохимия, ОАК, печеночные пробы проводятся при подозрении на заражение. Путем полимеразной цепной реакции можно выявить вирус в крови даже на первой неделе инфицирования, что выступает доминирующим преимуществом метода.

Количественный и качественный анализ на гепатит C и особенности исследования, как нужно подготавливаться, бывают ли ошибки, расшифровка – рассмотрим подробно.

Полимеразная цепная реакция – методика молекулярного исследования для определения генетического материала вирусного агента с первых дней инфицирования. Анализ характеризуется высокой степенью достоверности, специфичностью, точностью. Благодаря нему не только выявляют отсутствие/наличие вируса, но и вирусную нагрузку (количественное значение), генотип.

Для исследования необходима кровь больного, в которой предположительно находится РНК вирусной инфекции. В лабораторных условиях в биологическую жидкость добавляют праймеры – это синтезированные искусственным образом фрагменты искомого гена малой длины. Плюс РНК-полимеразу – специализированный фермент, многократно увеличивающий концентрацию искомого материала.

Далее кровь с добавлением компонентов нагревают и охлаждают несколько раз в специальном приборе. После идет анализ полученных результатов, сопоставление с известными генами вирусного агента. На основе этого делают заключение о заболевании.

Анализ на гепатит C ПЦР проводится в лаборатории с добавлением нужных реагентов, имеет три разновидности с отличительными характеристиками:

1. Качественный ПЦР анализ на гепатит C является первым этапом исследования. Посредством него обнаруживают генетический материал возбудителя в сыворотке крови.
2. Количественное исследование позволяет оценить вирусную нагрузку – это содержание вирусного материала в 1 мл крови больного. Проводится перед началом курса лечения, а потом после 1-4-12 недели терапии. Когда курс продолжительный, то исследование необходимо провести после 24 недели терапии, чтобы оценить результативность.
3. Генотипирование. Заразное заболевание развивается стремительно, вирус имеет свойство мутировать. Поэтому необходимо выявить генотип вируса.

Ученые выявили 7 генотипов вируса. В РФ большую распространенность получили 1-2-3 виды.

Каждый из генотипов характеризуется устойчивостью к лечению.

Например, при 1-м типе результативность терапии около 60%, на фоне 2-3 вида показатель достигает 85%.

Чтобы подобрать нужные лекарства, продолжительность лечения, требуется выявить не только сам факт заражения, но и концентрацию вируса, его генотип.

Маркеры на гепатиты, ПЦР и ИФА, другие исследования имеют определенные медицинские показания:

• Когда в анамнезе больного ВИЧ-инфекция, СПИД.
• Контакт с зараженным человеком, поскольку вирусный гепатит отличается высокой степенью контагиозности.
• Симптоматика циррозного поражения печени – гепатомегалия, увеличение размеров селезенки, на животе проявился венозный рисунок и пр.
• Клиника функционального нарушения печени – периодическая/постоянная боль в области правого подреберья, пожелтение кожного покрова, тошнота.
• Высокие значения АСТ и АЛТ в биохимии крови.
• При беременности, когда плохие показатели печеночных проб.
• Перед началом противовирусного курса, чтобы определить вирусную нагрузку.
• Для контроля результативности проводимой терапии.
• После терапии, чтобы предупредить рецидив вирусной инфекции.

ПЦР проводится при подтвержденном диагнозе гепатита B, чтобы исключить смешанный вид поражения печени.

Как готовиться к анализу, расскажет доктор. Чтобы получить точный результат, пациенту рекомендуется подготовка. Она состоит в следующих рекомендациях:

1. Анализ нужно сдавать утром, натощак. Допускается перед забором крови пить только чистую, негазированную воду. Последний прием пищи – за 8 часов до забора.
2. Если не получается сдать анализ в утренние часы, это можно сделать вечером или в обед, главное – через 5-6 часов после приема пищи, не раньше.
3. За 48 часов до исследования отказаться от алкогольной продукции, кофеинсодержащих напитков, соков.
4. За 2 суток нужно соблюдать диету, исключив все вредные продукты. Однако некоторые врачи полагают, что жирная, жареная еда не сказывается на точности ПЦР исследования.

За 24 часа до медицинской манипуляции не принимать лекарства. Если это невозможно, сообщить лечащему врачу. Анализ не рекомендуется выполнять сразу же после УЗИ, КТ, массажа и др. физиотерапевтических процедур.

Забор крови происходит следующем образом:

• Посредством специального жгута, который затягивается на предплечье пациента, медик останавливает венозный кровоток. Вены становятся более заметными, что облегает процедуру введения иглы, последующего забора крови.
• Участок кожи перед введением стерильной иглы обрабатывают спиртосодержащей жидкостью.
• В вену вводят иглу, после к ней прикрепляют пробирку, в которую поступает кровь.
• После введения иглы жгут снимают. Набирают необходимое количество крови, извлекают иглу.
• К месту укола прикладывают ватку, смоченную в спирте.

Чтобы предупредить формирование синяка в месте введения иглы, необходимо ватный тампон достаточно сильно прижать к травмированной области, согнуть руку и держать в таком положении 3-4 минуты.

Если больной принимает лекарства, способствующие разжижению крови (Аспирин, Варфарин), могут быть определенные проблемы с остановкой кровотечения.

У метода полимеразной цепной реакции имеются определенные преимущества в сравнении с другими диагностическими методиками.

Плюсы исследования представлены в таблице:

Когда пациент получает положительный результат, это будет означать, что в биологической жидкости был обнаружен генетический материал возбудителя гепатита. Отрицательный итог – следы вируса отсутствуют.

Расшифровывать результаты должен доктор на основании заключения, которое пациент получает в лаборатории. Анализировать данные необходимо в совокупности с показателями биохимии, ОАК, УЗИ.

Качественное исследование будет показывать наличие либо отсутствие возбудителя вирусного заболевания в крови человека. Вариантов может быть два – отрицательный (норма) либо положительный результат.

В бланке иногда написано: обнаружено или не обнаружено.

Положительный результат – лаборант выявил в крови больного генетический материал вирусного агента, заражение подтверждено. Отрицательное заключение – заражения нет, фрагменты РНК вируса находятся ниже пределов чувствительности.

Количественный анализ подразумевает несколько вариантов результатов. Для удобства ознакомления представим их в виде таблицы.

Результат – обнаружена рибонуклеиновая кислота конкретного генотипа. Дополнительно указывают генотип и подтип, лаборант кодирует заключение латинскими буквами и цифрами. Например, генотип 1a. Всего выделяют 7 генотипов, 67 подтипов.

Результат – обнаружена РНК вирусного гепатита C – это ДНК редкого генотипа, который нельзя отнести к распространенным вирусным агентам, поэтому требуется провести дополнительную диагностику.

Расшифровывает заключение лаборанта гепатолог либо инфекционист. Всегда есть риск получения ложноотрицательного или ложноположительного результата. Иногда бывает, что ПЦР отрицательно, а ИФА положительно.

Это означает, что в данный момент вируса в крови больного нет, однако заболевание в острой форме им перенесено. Принято считать, что ИФА показывает антитела, которые продуцируются иммунной системой после вторжения в организм возбудителя.

ИФА в сравнении с ПЦР отличается малой надежностью и достоверностью, поэтому используется в качестве первичного скрининга. При диагностике вирусного гепатита без полимеразной цепной реакции не обойтись.

Сдать анализы можно в больнице, где больной наблюдается, если там имеется своя лаборатория, либо обратиться в частный центр на платной основе.

В короткие сроки получить результат можно в лабораторных центрах как Гемотест, Инвитро, Хеликс.

Стоимость исследования в зависимости от лаборатории:

Срок проведения исследования в среднем 2-3 дня. В некоторых лабораториях имеется услуга как срочный анализ, его стоимость в 1,5-2 раза выше. Также есть возможность вызвать медицинского специалиста домой, чтобы сдать кровь, а результаты получить по электронной почте либо лично при обращении в лабораторию.

источник

Анализ ПЦР гепатит С – это исследование, основной целью которого является идентификация генетического материала возбудителя. Анализ выявляет возбудитель заболевания методом использования полимеразной цепной реакции. Данная диагностика отличается высокой степенью точности, специфичностью к выявлению отсутствия или наличия вирусной инфекции.

Достоинства анализа ПЦР на гепатит

Как подготовиться к сдаче крови для ПЦР-исследования

Результаты анализа: нормы и отклонения

Расшифровка количественного анализа

Расшифровка качественного анализа

Ложноположительные и ложноотрицальные результаты

Где сделать ПЦР-диагностику и сколько стоит?

Чтобы провести ПЦР анализ на определение вируса гепатита С у пациента берётся венозная кровь, которая потенциально содержит в себе РНК (рибонуклеиновая кислота) HCV искомого вируса.

Тест ПЦР на гепатит С подразумевает порядок действий, когда в частицы крови пациента добавляют:

• праймеры (короткие искусственно-синтезируемые участки необходимо гена);
• специальный фермент (РНК-полимераза).

После забора биологический материал отправляется на исследования в лабораторию. Одна порция крови нужна для проведения непосредственно ПЦР анализа, вторая – отправляется на исследование по методу ИФА. Фермент способен за короткое время увеличить численность генетического материала вируса возбудителя. В специальном аппарате проводится несколько циклов тепловых и охлаждающих процессов. На конечном этапе полученный материал сопоставляется с генами вируса и делается заключение о наличии или отсутствии патологии в организме пациента.

Суть и проведение ПЦР анализа в лаборатории. Снято каналом SiberianMedicalLaboratory.

Существует 3 вида диагностики, дающие возможность определять наличия вируса гепатита С в организме человека:

• генотипирование;
• качественный;
• количественный.

Диагностика гепатита С качественным методом применима для пациентов, у которых в анализе крови определены антитела к вирусу. В случае наличия острой фазы РНК ВГС подобные диагностические мероприятия позволяют определить наличие заболевания за 1-2 недели после инфицирования. В этот период антитела к гепатиту С могут быть ещё не выработаны.

Количественный метод диагностики используется для определения концентрации вируса в образцах крови. Подобный тест на виремию (степень концентрации) даёт возможность точно определить количество единиц вирусной РНК. Конечный результат выражается в соответственном объёме. Если речь идёт о количественном анализе, тогда показатели измеряются в 1 мл (1 куб. см).

Параметр вирусной нагрузки означает уровень инфекционности заболевания, то есть отображает степень «заразности» пациента. На практике это значит, что чем выше концентрация вируса в крови, тем больше шансов у пациента заразить окружающих гепатитом С. Количественный метод исследования также позволяет установить качество и результативность проведённого лечения.

Генотипированием выявляют мутации возбудителя заболевания. Перед назначением лечебного плана определяют генотип вируса: от этого зависит качество и продолжительность терапии. Так, например, при лечении заболевания I-типа эффективность составляет 60%, в случае II, III-типа – около 80%.

Среди основных достоинств проведения процедуры выделяют:

1. Возможность ранней диагностики. ПЦР анализ способен определить наличие вируса на ранних стадиях заражения.
2. Низкая погрешность результатов. Исследуемый биологический ресурс позволяет диагностировать участок генетического материала, который является характерным только для одного типа вирусной инфекции. Это обстоятельство позволяет не допустить ложных результатов диагностики.
3. Высокая степень чувствительности. Анализ ПЦР способен выявлять РНК вируса в небольших количествах, что также дает возможность вовремя отследить скрытые инфекции.

Сдавать анализ ПЦР на гепатит C нужно, если есть:

• наличие контактов с больными людьми, которое могло бы привести к заражению;
• симптомы заболевания цирроза печени (увеличение селезенки, нехарактерные изменения размеров печени, обнаружение на животе венозного сплетения под кожей);
• положительные результаты ИФА;
• увеличение активности АСТ и АЛТ (проявляется в биохимическом анализе крови);
• необходимость контроля ведения антивирусной терапии;
• проведение начального этапа лечения для необходимости установления вирусной нагрузки;
• проведение завершающего этапа терапии для исключения возможных рецидивов;
• наличие у пациента гепатита В, чтобы исключить вариант развития смешанного поражения печени.

Подготовка к ПЦР анализу включает следующие рекомендации:

• забор крови проводится утром;
• анализ проводится натощак, поэтому желательно выдержать перерыв между последним приёмом пищи 8-10 часов;
• за несколько дней до проведения диагностики следует исключить жирную, острую и жареную пищу, алкогольные напитки и курение;
• за сутки до анализа следует воздержаться от тяжёлых физических нагрузок, исключить занятия в спортзале или бассейне.

Сам анализ делается недолго, а расшифровывает результаты ПЦР на гепатит С высококвалифицированный специалист гепатолог или инфекционист. На основании результатов анализа пациенту выставляется диагноз.

Чтобы правильно расшифровать результаты обследования, учитывают показатели:

• биохимического анализа крови;
• данные ультразвукового исследования;
• результаты биопсии.

При получении результатов количественного анализа ПЦР учитываются следующие показатели:

В заключении качественного анализа ПЦР на гепатит С могут присутствовать следующие данные:

При получении анализов на генотипирование вируса можно обнаружить следующие варианты показателей:

Ложно положительные и ложноотрицательные результаты ПЦР исследования получаются в таких случаях:

• при недостаточной квалификации медицинского персонала, которые проводят диагностику;
• ошибки в работе лаборантов, когда кровь транспортируется в лабораторию ненадлежащим способом или биоматериал загрязнён;
• случаи ненамеренной подмены проб крови;
• нарушения в процессе подготовки биологического материала;
• воздействие на исследуемые образцы повышенной температурой.

Среди других причин получения неточных результатов выделяют такие:

• кровь пациента содержит остаточные частицы гепарина и прочих коагулянтов;
• в образце присутствуют вещества-ингибиторы, способствующие замедлению или остановке полимеразной цепной реакции.

Подобные исследования проводятся:

• в частных медицинских центрах;
• в КДВ;
• в государственных поликлиниках.

Государственные поликлинники проводят анализ ПЦР на гепатит С бесплатно на основаниях наличия у пациента направления от гепатолога или инфекциониста.

Диагностика заболевания на платной основе проводится во всех крупных городах России.

Стоимость диагностики зависит от:

• качества оборудования клиники;
• скорость выполнения работы;
• типа теста.

Цена на изучение крови методом ПЦР колеблется в следующих пределах:

• качественный ПЦР анализ — 600-900 рублей (в Москве и Санкт-Петербурге);
• качественный ПЦР анализ — 300-800 рублей (регионы);
• определение вирусной нагрузки — 17000-22000;
• определение других видов инфекции количественного анализа 1200-10000 рублей.

Ошибочные анализы на гепатит С. Снято каналом Гепатит С побежден.

источник

Гепатит С – серьезная болезнь, которая разрушает печень. Она может привести к циррозу печени. Между началом заболевания и тем моментом, когда начнут вырабатываться антитела, может пройти до полугода, поэтому диагностировать заболевание с помощью иммуноферментного анализа невозможно. Своевременно определить болезнь и начать лечение поможет анализ ПЦР на гепатит С.

• если иммуноферментный анализ дал положительный результат;
• у пациента наблюдаются симптомы цирроза или поражения печени: она меняется в размере, селезёнка становится больше, в области живота видны расширенные вены, кожа желтеет, наблюдаются боли в правой части живота;
• активность АЛТ и АСТ в анализе крови повышена;
• перед тем, как начать лечение, для того, чтобы определить количество вируса в крови инфицированного;
• чтобы следить, насколько эффективной оказалась терапия. После лечения – чтобы контролировать состояние здоровья и избежать рецидива;
• если диагностирован гепатит В, чтобы исключить смешанное поражение печени;
• после полового акта с человеком, зараженного гепатитом.

Цель ПЦР (или полимеразной цепной реакции) – изучить состав крови и обнаружить флавивирус (гепатит С). Существенный плюс этого анализа в том, что он распознаёт вирус на той стадии, когда он ещё не начал процесс необратимых реакций. ПЦР позволяет увидеть, насколько сильно поражён организм, показывает качественные характеристики и определяет генотип вируса. Всё это позволяет назначить максимально подходящее лечение для каждого конкретного случая.

ПЦР на выявление гепатита С подразумевает несколько исследований:

• качественного анализа;
• количественного анализа;
• генотипирования.

ПЦР ещё называют качественным анализом. Если он показывает отрицательный результат, значит, распознать вирус в организме нельзя, так как его содержание меньше, чем оборудование может уловить. В такой ситуации нужно определиться, насколько реагент чувствителен, чтобы скорректировать дальнейшее решение.

Анализ может показать положительный результат уже приблизительно через пять дней после того, как человек заразился.

Этот вид исследования анализа демонстрирует уровень вирусной нагрузки, т. е. концентрацию флавивируса в теле – сколько фрагментов вируса приходится на 1 кубический см крови пациента.

Этот вид анализа ПЦР назначается больному перед тем, как начать противовирусную терапию, или после трёх месяцев лечения, чтобы посмотреть, насколько эффективен назначенный курс.

Этот вид анализа показывает:

• насколько велика опасность заразить другого человека, эта вероятность прямо пропорциональна показаниям вирусной нагрузки;
• какое лечение подойдёт в этом случае, и насколько оно будет плодотворным;
• длительность лечения – чем выше концентрация вирусов, тем дольше будет терапия.

Пациенту стоит знать, что тяжесть заболевания может не зависеть от уровня вирусной нагрузки. Иногда даже при высокой концентрации вирусов в крови пациента, печень оказывается поврежденной лишь в незначительной степени. Однако если у беременной женщины высокий уровень вирусной нагрузки, то велика вероятность передать заболевание своему ребёнку.

Считается, что нижняя норма концентрации РНК-вируса – до 600.000 МЕ/мл, среднее – от 600.000 до 700.000, высокое – от 800.000 и выше.

Из-за того, что этот вирус подвержен высокой мутации, в ходе исследования очень важно определить, какой конкретно генотип находится в крови человека. Всего существуют 11 генотипов гепатита С и множество их подвидов. Но на территории России распространены всего три: 1, 2 и 3.

Генотипирование даёт возможность определить, насколько устойчивым оказался вирус. От этого зависит метод лечения.

Все генотипы гепатита С по-разному реагируют на лечение. 1 генотип лечится минимум год, а шанс выздороветь – около 60%. Генотипы 2 и 3 лечатся по полгода, а вероятность избавиться от недуга – около 85%.

Кроме того, генотипирование даёт возможность посмотреть, в каком состоянии находится печень больного. Например, накапливание в печени жира указывает на то, что пациент страдает от 3 генотипа вируса.

Анализ крови на данной стадии показывает цифру, которая характеризует генотип. Изредка случается, что определить генотип не получается, и в ответах из лаборатории указано «не типируется». Это означает, что человек страдает от генотипа, нераспространенного в этой географической зоне. Чтобы обнаружить его, придётся сдать анализ еще раз, но с той системой диагностики, которая сможет его распознать.

В анализах ПЦР на гепатит С, полученных из лаборатории, обычно указывают определённые данные, и расшифровать их можно даже самостоятельно:

• обнаружено/не обнаружено (качественный анализ);
• количество вирусов (количественный анализ);
• цифра генотипа;
• название теста.

Считается, что наибольшее внимание следует уделить второму пункту, так как исходя из этих показателей, можно сделать прогноз, определить продолжительность лечения и его тип.

Несмотря на понятность анализа, нельзя самостоятельно ставить себе диагноз и заниматься самолечением, результаты анализа нужно показать лечащему врачу.

Для того чтобы получить достоверный результат, важно соблюсти ряд правил:

1. Сдавать анализы стоит утром натощак (постараться поесть в последний раз минимум за 8 часов до процедуры).
2. Нельзя перед сдачей крови пить что-то, кроме воды.
3. За два дня нужно исключить жирные и жареные продукты, а также алкоголь.
4. Минимум за час лучше отказаться от сигарет.
5. Не рекомендуется сдавать анализы после массажа, УЗИ или рентгена.
6. За день до обследования пациент должен отказаться от медицинских препаратов, физической активности и эмоциональных нагрузок.
7. Полчаса перед обследованием стоит провести спокойно и расслаблено.

На скорость проведения обследования ПЦР влияет то, каким из типов вируса страдает пациент, каким методом проводится анализ крови. В зависимости от сложности результаты анализов больной может получить через несколько часов или несколько дней. Но обычно это не занимает больше 7 суток.

На стоимость ПЦР-исследования влияет статус клиники, куда пациент обратится, и от того, насколько сложным будет проведение анализа. Цена варьируется от 400 рублей до 11 тысяч.

Пациенту важно знать, что есть такое понятие, как отрицательно ложные анализы. Это может произойти, если кровь на анализ был сделан неправильно, с нарушением правил, или транспортировался ненадлежащим образом (например, попал в лабораторию больше, чем через два часа после забора). При такой ситуации больной рискует получить ложное представление о состоянии своего здоровья и потерять драгоценное время.

Поэтому крайне важно выбрать максимально подходящую клинику, которая печётся о своей репутации и не может позволить себе халатного отношения к пациентам. Перед тем как определиться, стоит почитать отзывы об учреждении и его персонале. Выбор лучше остановить на престижной и известной клинике – вероятность ошибки в этом случае будет мала.

источник

До 1990-х годов для определения инфекционного гепатита С в медицинской литературе использовали термин «гепатит ни А, ни В с парентеральным механизмом заражения». Но в 1989 году был впервые выделен Hepatitis C virus (аббревиатура – HCV), однако достоверные методы диагностики, включая ПЦР на гепатит С, появились гораздо позже.

Полимеразная цепная реакция (расшифровка аббревиатуры ПЦР) с целью выявления HCV-инфекции является одной из составляющих общего скрининга, который в обязательном порядке назначается людям и больным при:

• беременности (исследование проводят несколько раз – при постановке на учет и в последнем триместре);
• донорстве крови и органов;
• у реципиентов перед и после переливания/трансплантации;
• работе, связанной с повышенным риском инфицирования;
• планировании хирургического вмешательства и других инвазивных манипуляций;
• поражении печени (анализ выполняют в ходе первичного обследования);
• проведении постоянных процедур гемодиализа;
• сопутствующем ВИЧ;
• онкологических заболеваниях;
• контакте с инфицированным человеком.

Проведение скрининга рекомендовано людям, употребляющим наркотические средства, предоставляющим сексуальные услуги, неразборчивым в половых связях. При этом такое же обследование необходимо пройти и их сожителям или постоянным партнерам. В обязательном порядке анализ на HCV показан детям, рожденным от инфицированных матерей.

Сам возбудитель болезни представляет собой РНК-содержащий вирус, покрытый липидной оболочкой. За трансляцию генома «отвечает» терминальный участок, состоящий из порядка 340 нуклеотидных субъединиц. Его структурное строение схоже у 90% различных подтипов HCV. Именно он и является основной мишенью для проведения анализа на гепатит С методом ПЦР.

Дополнительно состав вирусного генома представлен ядерным (core) и неструктурными (NS) участками. Первый регулирует репликацию возбудителя заболевания, а NS обеспечивают быстрое проникновение вируса в здоровую клетку. Зачастую на участке NS E2 отмечают вариабельность структуры, чем объясняют отсутствие должного иммунного ответа у некоторых пациентов, скрытое развитие патологии и склонность к хроническому течению (до 80% случаев).

В связи с широким распространением гепатита С во многих клинических центрах проводятся бесплатные анализы. Предоставление результатов исследования является обязательным требованием для оформления санитарной книжки.

Помимо подтверждения HCV-инфекции, современные методы диагностики позволяют оценить тяжесть течения заболевания, определить генотип вируса. Это влияет на схему терапии (подбор комбинации лекарственных препаратов, их дозировки, продолжительности приема) и прогноз патологии.

Анализ крови на гепатит С можно сделать несколькими методиками, причем каждая отличается по информативности и надежности.

Все способы диагностических исследований можно разделить на несколько групп:

1. Серологические, способные обнаружить определенные антитела (иммуноглобулины), которые вырабатываются в организме в ответ на проникновение патогена, выполняется по методу ИФА либо иммуноблоттинга.
2. Молекулярные, направленные на определение РНК вируса гепатита С. Результаты исследования демонстрируют вирусологическую нагрузку, часто используются для контроля эффективности проводимой терапии, позволяют определить генотип HCV, что важно для подбора медикаментозного лечения. К данной группе диагностических тестов относят ПЦР, ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией (метод real time).
3. Генотипирование, назначается всем без исключения пациентам до начала приема противовирусных медикаментов. Необходимо для планирования продолжительности, иногда – для подбора дозировки лекарственной терапии.

В последнее время получает распространение анализ для определения генотипа пациента относительно интерлейкина IL28В. По данным клинических исследований, подобный тест позволяет прогнозировать время, необходимое для достижения устойчивого вирусологического ответа у пациентов с HCV I генотипа на фоне лечения ингибиторами протеаз первого поколения.

Проблемы, где сдать кровь на ПЦР или другие тесты для выявления HCV, в настоящее время нет. Срочный анализ можно сделать в платной лаборатории. В районных поликлиниках и больницах исследования выполняют в порядке очереди (за исключением проведения по строгим показаниям).

У пациентов часто возникает вопрос, что такое ПЦР анализ при гепатите С, и чем он отличается от других способов диагностики? Данная методика заключается в воспроизведении множества копий ДНК на основе РНК вируса. Это самый точный анализ, позволяющей определить генотип патогена и его количественное содержание как в сыворотке крови, так и в биоптате тканей печени.

Диагностика HCV-инфекции включает комплекс различных исследований. Биохимический анализ крови не может показать заражение. Отклонение результатов (уровня печеночных ферментов, билирубина и т.д.) от физиологических параметров свидетельствует о нарушении работы печени, и задача врача – установить причину подобной проблемы.

Для начала сдают ряд простых исследований, к числу которых относится:

• общий анализ крови (при HCV-инфекции возможно изменение уровня лейкоцитов, гемоглобина, количества форменных элементов крови и других показателей);
• биохимия (повышение концентрации печеночных ферментов, билирубина свидетельствует о тяжести поражения печени);
• тесты на сопутствующие инфекции (обязательно на ВИЧ, иногда – на некоторые венерические заболевания).

Для оценки общей клинической картины доктор выдает направления на анализ мочи, ультразвуковое обследование внутренних органов, рентгенографию или флюорографию грудной клетки. Другие диагностические процедуры делают по показаниям.

Какие анализы на гепатит С необходимо сдавать для точного определения диагноза ? В соответствии с рекомендациями ВОЗ, диагностику HCV начинают с серологического исследования методом ИФА (при наличии выраженных отклонений в биохимии). Если данный тест покажет положительный результат, необходимо проведение дальнейшего обследования пациента. Помимо ПЦР и общеклинических анализов, назначают HBS ag HCV. Некоторые противовирусные препараты могут спровоцировать обострение гепатита В, поэтому перед началом лечения эту патологию необходимо исключить.

Основным преимуществом ПЦР для определения HCV является возможность ранней диагностики (через 18–21 день после инфицирования). Выявление РНК вируса в крови позволяет однозначно трактовать неубедительные данные ИФА. Положительный результат служит однозначным показанием для дальнейшего обследования и назначения лечения, а отрицательный (при отклонениях от нормы анализов на биохимию) – поводом для повторного обследования через 3–4 недели.

Существует несколько разновидностей ПЦР-диагностики HCV:

1. Качественный. Что показывает качественный анализ ПЦР на гепатит C? Проведение подобного исследования позволяет определить, заражен ли человек. Специалисты рекомендуют делать пробу ультрачувствительным методом (с восприимчивостью тест-систем не менее 10–50 МЕ/мл). Расшифровка результатов проста – положительный указывает на инфицирование и прогрессирующее распространение вируса в организме, отрицательный – или на отсутствие заболевания, или на ничтожно малую концентрацию возбудителя (вполне возможно, что иммунная система человека справится с патогеном самостоятельно).
2. Количественный. Количественный анализ на гепатит С методом ПЦР (в отличие от качественного теста) позволяет количественно определить вирусную нагрузку, то есть уровень РНК HCV в объемной единице крови. Расшифровать результаты можно на основе диапазона нормы и патологических значений, измеряющихся в МЕ/мл. Положительной считается вирусная нагрузка выше 75 МЕ/мл. Количественное исследование будет отрицательным при значениях ниже 75 МЕ/мл.
3. Генотипирование. Подобный анализ сдается при установленном диагнозе HCV-инфекции для разработки индивидуального подхода к пациенту. Проводится с помощью секвенирования и обратной гибридизации. Вирусная нагрузка может меняться на протяжении болезни, однако генотип остается прежним.

Изучение различными методиками ПЦР показано на различных этапах диагностики и лечения гепатита С. Количественный повторяют чаще прочих для контроля эффективности противовирусной терапии.

Основными показаниями к сдаче крови на гепатит С служат:

• беременность (показан плановый скрининг);
• профилактический осмотр у людей из группы риска (медицинские работники, волонтеры в наркологических центрах);
• ВИЧ;
• незащищенный половой контакт с инфицированным человеком;
• неразборчивые сексуальные связи.

С учетом высокой распространенности гепатита С специалисты рекомендуют проводить исследование с профилактической целью каждому человеку. Риск заражения присутствует при посещении стоматологического кабинета, маникюрного/педикюрного салона, где недобросовестно относятся к стерилизации инструментов и т.д.

Строгим показанием к проведению анализов служит появление характерных и неспецифических симптомов гепатита С. К наиболее распространенным признакам относят:

• общую слабость;
• длительно сохраняющийся субфебрилитет на фоне отсутствия других инфекций;
• изменение цвета кала и/или мочи;
• тошноту, рвоту.

Желтушность слизистых оболочек и эпидермального покрова встречается редко. У 80% пациентов заболевание длительное время протекает бессимптомно, часто диагностируется случайно, в ходе плановой диспансеризации.

Выполнить анализ на гепатит С методом ПЦР можно практически в любой частной лаборатории или поликлинике по месту жительства. При госпитализации обследование делают в больнице в условиях стационара.

Преимуществами лабораторного центра служат:

1. Отсутствие необходимости в направлении от врача.
2. Короткие сроки выполнения исследования. Сколько делают анализ, скажет лаборант при оформлении заказа. Обычно это 1–2 дня. Некоторые лаборатории за отдельную плату предоставляют услуги проведения срочного исследования.
3. Сервис (отсутствие очередей, удобная оплата онлайн, получение результатов по электронной почте).
4. Качество оборудования, на котором проводится исследование (для исключения ложноположительного анализа).

Однако без предварительной консультации врача сложно определить, какой именно вид ПЦР нужен. Также нельзя самостоятельно интерпретировать результаты. Некоторые лаборатории используют различные шкалы измерения вирусной нагрузки, что может стать причиной ошибки. Исследование методом полимеразной цепной реакции нередко является частью комплексного обследования, включающего как лабораторные, так и инструментальные тесты, которые дешевле выполнять в поликлинике по полису ОМС.

На результаты может повлиять незнание правил, как сдавать кровь. Основной материал для ПЦР – сыворотка. Информативно исследование биоптата печени, однако инвазивная процедура не подходит для рутинного анализа. Как сдать кровь правильно?

Для получения достоверных результатов соблюдают следующие рекомендации:

1. Сдают кровь строго натощак: прием пищи исключается за 10–12 часов до процедуры.
2. За 2–3 дня до анализа воздержаться от потребления алкоголя, «тяжелой» (жирной, жареной, соленой, копченой) пищи, приправ.
3. Утром перед исследованием можно пить только воду (чай, кофе противопоказаны).
4. За сутки ограничить тяжелую физическую активность.
5. За 10 часов до процедуры воздержаться от курения.

Забор крови осуществляется из вены.

Необходимо проконсультироваться с врачом и поставить в известность специалиста, если пациент принимает какие-либо лекарственные препараты. По возможности, следует приостановить использование медикаментов за сутки до сдачи крови.

Конкретные сроки выполнения анализа на HCV методом ПЦР зависят от загруженности лаборатории и наличия необходимого диагностического оборудования. Например, если материал транспортируют из пункта забора крови в лабораторный центр, время выполнения исследования увеличивается.

Сколько в среднем делается анализ на гепатит С? В большинстве диагностических центров установлены следующие сроки для проведения исследования:

• качественное определение вируса – 1–4 дня;
• количественное выявление вирусной нагрузки методом ПЦР – 1–2 дней;
• генотипирование – 1–4 дня.

В поликлиниках данный срок может составлять до 7–10 дней. При выполнении исследования в частном лабораторном центре на руки выдается квитанция с кодом, по которому можно загрузить полученные результаты. Как правило, при готовности пациенту приходит сообщение с уведомлением.

Данные лабораторного исследования выдаются пациенту в виде таблицы, где обязательно указаны следующие параметры:

• вид ПЦР (качественная, количественная или генотипирование);
• какие результаты анализов получены;
• референсные значения и расшифровка отклонения от нормы (данная графа может присутствовать не на всех бланках во избежание ошибочной диагностики и последующего самолечения).

Также указывают дату забора крови и выдачи результатов, координаты и печать лабораторного центра, ФИО и роспись медицинского работника, проводившего исследование.

Расшифровка, т. е. что означает полученный результат, должна проводиться только квалифицированным врачом.

Данные, которые может показать исследование методом ПЦР, приведены в таблице ниже:

Расшифровкой результатов должен заниматься квалифицированный специалист. Так, иногда возникают ситуации, когда ИФА на гепатит С положительный, а ПЦР отрицательный. Подобное расхождение объясняют несколькими причинами. Это может быть ошибкой лаборатории, поэтому одно из исследований необходимо повторить спустя 2–3 недели.

Иногда такие результаты возникают вследствие скрыто перенесенной острой HCV-инфекции. ИФА определяет наличие антител, но по факту, РНК вируса в организме или отсутствует, или не выявляется из-за ничтожно малой концентрации. В любом случае пациент с подобными данными исследований нуждается в дальнейшем наблюдении и консультациях врача.

Качественный анализ ПЦР является относительно быстрым и наиболее точным методом первичной диагностики гепатита С. По результатам исследования можно определить, заражен человек или нет, а затем проводить более детальные лабораторные методы. Ложноотрицательный результат вероятен в первые 14–21 день после заражения, когда количества РНК вируса недостаточно, для выявления даже высокочувствительными тест-системами.

Ложноположительный результат возможен по вине сотрудников лаборатории. Иногда такие данные получают при беременности, активном течении онкологических и/или аутоиммунных заболеваний.

Чтобы исключить вероятность неправильной расшифровки, качественный анализ рекомендуют повторить через 3–4 недели.

Количественный анализ методом ПЦР на гепатит С обычно назначают для определения вирусемии в ходе противовирусной терапии. В норме, по мере приема лекарственных средств вирусологическая нагрузка постепенно снижается. Цель лечения – отрицательные или минимально допустимые показатели исследования.

Расшифровка результатов зависит от единиц измерения, используемых в лаборатории, поэтому обычно в бланке указывают полученные данные, референсные значения и описание отклонений от нормы.

Количественный анализ ПЦР необходим для оценки эффективности лечения, подбора схемы терапии (сочетание нескольких противовирусных препаратов), определения продолжительности приема медикаментов. Исследование периодически проводится и после окончания курса лечения для своевременного выявления рецидива.

Одно из основных исследований, которые проводятся на этапе диагностики и обязательно до начала терапии, так как генотип – главный фактор, влияющий на подбор лекарственных средств.

К настоящему моменту известно об 6 генотипах HCV (каждый имеет свои подтипы), но в России и странах Европы у подавляющего числа больных выявляют:

• 1b – один из самых неблагоприятных в плане прогноза, быстро переходит в хроническую форму, агрессивен по отношению к тканям печени, сложно поддается терапии;
• 4 – плохо «отвечает» на терапию, требует тщательного подбора схемы приема препаратов;
• 2а, 3а – успешное лечение отмечают в 70% случаев и чаще (при использовании современных противовирусных медикаментов).

Остальные генотипы диагностируют реже. В отличие от количественного анализа, генотипирование выполняют один раз и не повторяют в процессе лечения (исключение составляют устойчивые формы HCV, не поддающиеся терапии.

Несмотря на то, что ВОЗ рекомендует ИФА как основной метод выявления HCV-инфекции, исследование методом ПЦР имеет ряд «плюсов»:

• высокая точность;
• возможность первичной диагностики;
• оценка эффективности лечения по определению вирусологической нагрузки;
• точное установление генотипа вируса, что предопределяет тактику дальнейшего лечения;
• доступная стоимость.

Пункты забора крови для проведения исследования есть в любом городе, что дополнительно облегчает диагностику и делает сдачу анализов доступными для каждого пациента.

Стоимость анализа ПЦР на гепатит С зависит от ряда факторов:

1. Ценовая политика лабораторного центра и его местонахождение (так, в Москве подобные услуги обходятся дороже).
2. Разновидность исследования (цена на качественный, количественный анализ и генотипирование отличается).
3. Сроки выполнения (ряд лабораторий предлагают доплатить определенную сумму за срочное получение результатов).

Узнать, сколько стоит ПЦР на гепатит С можно либо по телефону, либо на интернет-сайте лаборатории.

Средняя цена по России составляет:

• качественное определение РНК вируса – 700–1000 рублей и до 3000 рублей с использованием ультрачувствительных тест-систем;
• генотипирование – 1000–1200 рублей (в комплексе с количественным определением – до 4000 рублей);
• количественное определение вирусологической нагрузки – 2300–3000 рублей.

В поликлинике по месту жительства подобные исследования проводят бесплатно (при наличии полиса ОМС). Но лаборанту обязательно предъявляют направление от лечащего врача.

источник