Меню Рубрики

Оптическая плотность в анализе на гепатит

Вирусные поражения печени сегодня все часто проявляются в практике гастроэнтерологов. И лидером, безусловно, будет среди таковых гепатит С. Переходя в хроническую стадию, вызывает значительное поражение клеток печени, нарушая ее пищеварительные и барьерные функции.

Гепатиту С свойственно вялотекущее течение, длительный период без проявления основных симптомов заболевания и высокий риск осложнений. Болезнь долгое время себя никак не выдает и может быть раскрыта только тестом на антитела к гепатиту С и другими маркерами.

Поражаются вирусом гепатоциты (клетки печени), он вызывает их дисфункцию и деструкцию. Постепенно, пройдя этап хронизации, заболевание приводит к летальному исходу человека. Своевременная диагностика больного на антитела гепатита С способна приостановить развитие болезни, улучшить качество и продолжительность жизни пациента.

Вирус гепатита С впервые был выделен в конце 20 века. Медицина сегодня различает шесть вариаций вируса и более чем сто его подтипов. Определение разновидности микроба и его подтипа у человека очень важно, так как они определяют течение болезни и, следовательно, подходы к ее лечению.

С момента первичного попадания вируса в кровь человека до появления первых симптомов проходит от 2 до 20 недель. Более чем у четырех пятых всех заболевших острая инфекция развивается без каких-либо симптомов. И лишь в одном из пяти случаев возможно развитие острого процесса с характерной яркой клинической картиной по всем правилам перенесения желтухи. Хроническое течение инфекция приобретает более чем у половины заболевших, далее переходя в цирроз печени.

Выявленные вовремя антитела к вирусу гепатита С способны диагностировать заражение на самой первичной его стадии и подарить пациенту шанс на полное излечение.

У людей, не связанных с медициной, может возникнуть закономерный вопрос — антитела гепатита С, что это такое?

Вирус данного заболевания в своей структуре содержит ряд белковых компонентов. При попадании в организм человека эти белки вызывают реакцию иммунной системы и к ним образуются антитела на гепатит С. Выделяют разные типы антител, в зависимости от типа исходного белка. Они определяются лабораторно в разные периоды времени и диагностируют различные стадии заболевания.

Чтобы обнаружить антитела к гепатиту С, человеку в лаборатории производят забор венозной крови. Данное исследование удобно тем, что не требует какой-либо предварительной подготовки, кроме воздержания от приема пищи за 8 часов до процедуры. В стерильной пробирке сохраняется кровь обследуемого, после методом иммуноферментного анализа (ИФА), основанного на связи антиген-антитело, выявляются соответствующие иммуноглобулины.

Показания к проведению диагностики:

  • нарушения в работе печени, жалобы пациента;
  • повышение индикаторов работы печени в биохимическом анализе — трансаминаз и фракций билирубина;
  • предоперационное обследование;
  • планирование беременности;
  • сомнительные данные УЗИ—диагностики органов брюшной полости, в частности печени.

Но часто в крови обнаружены антитела гепатита С совершенно случайно, при обследовании беременной или плановой операции. Для человека эта информация во многих случаях является шоком. Но паниковать не стоит.

Есть ряд случаев, когда вероятны как ложноотрицательные, так и ложноположительные итоги диагностики. Поэтому после консультации со специалистом рекомендуется повторить сомнительный анализ.

Если обнаружены антитела к гепатиту С, настраиваться на худшее не стоит. Следует обратиться за консультацией к профильному специалисту и провести дополнительные обследования.

В зависимости от антигена, к которому они сформированы, антитела при гепатите С делятся на группы.

Это основной тип антител, определяемых для диагностики заражения при первоначальном скрининге у пациентов. «Данные маркеры гепатита С, что это такое?» — спросит у врача любой пациент.

Если эти антитела к гепатиту С положительные, то это говорит о том, что иммунная система сталкивалась с данным вирусом прежде, может присутствовать вялотекущая форма заболевания без яркой клинической картины. В момент взятия проб не происходит активная репликация вируса.

Обнаружение данных иммуноглобулинов в крови человека является поводом дополнительного обследования (выявление РНК возбудителя гепатита С).

Этот тип маркеров начинает выделяться сразу после попадания патогенного микроорганизма в организм человека. Лабораторно его можно отследить через месяц после случая заражения. Если обнаружены антитела к гепатиту С класса М, то диагностируют острую фазу. Количество этих антител увеличивается в момент ослабления иммунитета и активации вируса при хроническом процессе заболевания.

При снижении активности возбудителя и переходе заболевания в хроническую форму данный вид антител может перестать диагностироваться в крови при проведении исследований.

В практических ситуациях чаще обращаются именно к данному типу исследования. Антитела к вирусу гепатита С суммарные представляют собой обнаружение обоих классов маркеров, как М, так и G. Данный анализ становится информативен после накопления первого класса антител, то есть через 3-6 недель после факта заражения. Через два месяца в среднем после этой даты начинают активно вырабатываться иммуноглобулины G класса. Они определяются в крови болеющего человека всю жизнь или до момента ликвидации вируса.

Суммарные антитела к гепатиту С являются универсальным способом первичного скрининга заболевания через месяц после заражения человека.

Обозначенные выше маркеры относились к структурным белковым соединениям возбудителя гепатита С. Но есть класс белков, называемыми неструктурными. По ним также можно провести диагностику заболевания пациента. Это NS3, NS4, NS5 группы.

Антитела к элементам NS3 обнаруживаются на самом первой стадии. Характеризуют первичное взаимодействие с патогеном и служат самостоятельным индикатором наличия инфекции. Длительное сохранение этих титров в большом объеме может быть индикатором повышенного риска перехода инфекции в хроническую форму.

Антитела к элементам NS4 и NS5 обнаруживаются в поздние периоды развития заболевания. Первый из которых свидетельствует об уровне поражения печени, второй — о запуске хронических механизмов инфекции. Уменьшение титров обоих показателей будет положительным знаком наступления ремиссии.

На практике наличие в крови неструктурных антител гепатита С проверяют редко, так как это значительно повышает стоимость исследования. Чаще для изучения состояния печени используются антитела core к гепатиту С.

В медицинской практике есть еще несколько показателей, по которым судят о наличии у пациента вируса гепатита С.

Возбудитель гепатита С — РНК—содержащий, поэтому можно ПЦР-способом с обратной транскрипцией провести обнаружение самого гена возбудителя в крови или биоматериале, взятом при биопсии печени.

Данные тест—системы очень чувствительны и могут определить даже одну единственную частицу вируса в материале.

Этим способом возможно не только диагностировать болезнь, но и определить ее тип, что помогает выработать план будущего лечения.

Если пациент получил результаты анализа на обнаружение гепатита С иммуноферментным методом (ИФА), он может задаться вопросом — антитела гепатита С, что это? И что они показывают?

При исследовании биоматериала на гепатит С, антитела суммарные в норме не обнаруживаются.

Рассмотрим примеры ИФА анализов на гепатит С и их интерпретации:

Результаты анализов Интерпретация
HСV IgG cor 16.45 (положительно)

Аnti-HСV IgG NS3 14,48 (положительно)

Аnti-НCV IgG NS4 16,23 (положительно)

Аnti-НCV IgG NS5 0,31 (отрицательно)

В крови имеются высоки титры антител к вирусу гепатита С. Вероятно наличие заболевания. Необходима ПЦP-диагностика для подтверждения диагноза и определения типа возбудителя.
Аnti-НCV IgG cоr 0.17 (отрицательно)

Аnti-НCV IgG NS3 0.09 (отрицательно)

Аnti-НCV IgG NS4 8.25 (положительно)

Аnti-НCV IgG NS5 0.19 (отрицательно)

НBsАg (австралийский антиген) 0.43 (отрицательно)

Антитела IgM к НАV 0.283 (отрицательно)

Присутствуют антитела в крови к гепатиту С. Сомнительный результат. Для уточнения диагноза необходимо провести ПЦP-диагностику

Как видно из таблицы, если все-таки обнаружены антитела к гепатиту С, то расшифровка анализа должна проводится только специалистом. В зависимости от типа маркеров, выявленных в биологическом материале обследуемого, можно говорить о наличии заболевания и стадии его развития.

Ложноположительные маркеры периодически обнаруживаются в крови беременных женщин, онкологических больных и лиц, имеющих ряд других типов инфекций.

Ложноотрицательные результаты анализа практически не встречаются, и могут проявиться у пациентов с иммунодефицитом и у принимающих иммуноподавляющие препараты.

Сомнительным признается результат при наличии клинических признаков заболевания у обследуемого, но отсутствия маркеров в крови. Такая ситуация возможно при ранней диагностике методом ИФА, когда антитела еще не успели выработаться в крови у человека. Рекомендуется провести повторную диагностику через месяц после первой и контрольный анализ через шесть месяцев.

Если обнаружены антитела к гепатиту С положительные, то они могут свидетельствовать и о ранее перенесенном гепатите С пациентом. В 20% случаев данное заболевание переносится латентно и не переходит в хроническую форму.

Но вот как быть, если какие-то иммуноглобулины были все-таки выявлены? Не паниковать и не расстраиваться! Нужна очная консультация профильного специалиста. Только он способен компетентно расшифровать обозначенные маркеры.

Квалифицированный врач всегда проверит у пациента все возможные варианты ложноотрицательных и ложноположительных результатов в соответствии с его анамнезом.

Также должно быть назначено контрольное обследование. При первичном обнаружении титров можно повторить анализ немедленно. Если он подтвердит предыдущий, показано исследование другими методами диагностики.

Также проводится дополнительная диагностика состояния пациента спустя шесть месяцев после первой сдачи крови.

И только по расширенному списку анализов, очной консультации специалиста и подтвержденных результатов через промежуток времени можно диагностировать заражение обследуемого вирусом.

При этом вместе с определением маркеров в крови целесообразно назначить контроль состояния пациента методом ПЦР. Анализ на антитела к гепатиту С не является абсолютным критерием наличия заболевания. Необходимо анализировать и общую клиническую картину состояния человека.

В следующем видео – дополнительная информация об анализе на антитела к гепатиту С:

Антитела к вирусу гепатита С в крови человека дают развернутую информацию о контакте его с этим возбудителем заболевания. В зависимости от типов маркеров специалист всегда определит стадию заболевания, тип возбудителя и предложит наилучший план лечения.

При эффективно подобранной терапии и ранней диагностике инфекции методом ИФА возможно предотвратить переход болезни в хроническую стадию. Поэтому проходить скрининговые исследования на обнаружение антител в крови к гепатиту С периодически показано всем.

источник

В медицинском мире заболевание гепатита В считается одним из самых опасных в наши дни.

Данный вирус способен передавать при контакте с кровью зараженного – это могут быть ножницы для кутикулы в маникюрном салоне, медицинские инструменты, в частности инструменты дантистов, которые не прошли необходимую стерилизацию, или она была выполнена не надежным путем. Кроме того, вирус передается половым путем.

Для того, чтобы констатировать заболевание на гепатит В, у пациента необходимо взять кровь на анализ.

Как было описано выше, вирус может передаваться половым, бытовым путем, он относится к гематогенному типу распространения. При заражении вирус попадает в клетки печени, и оттуда начинает распространяться по всему организму. Вирус разносится через кровеносную систему, он крайне стойкий к перепадам температуры и сохраняет свою способность, вредить живим клеткам.

В том случае, когда человек ощутил первые симптомы заболевания гепатит В, следует немедленно обратится к доктору и сдать анализы. При исследовании у больного берут кровь, чтобы ее протестировать. Кровь берут натощак, последний прием пищи должен быть не меньше 8 часов назад.

Чтобы установить наличие заболевания в организме человека, необходимо сделать три типа анализа крови:

  • Полимеразная цепная реакция покажет, имеется ли в клетках ДНК НВ V;
  • Исследуют наличие белка и антигена в крови пациента;
  • Анализы о наличии белка укажут на обострение заболевания.

Доктора очень часто проводят клинические анализы по нескольким маркерам для того, чтобы установить полную картину заболевания.

В данный период времени достоверными являются иммунологические анализы на гепатит В. Анализы нацелены на то, чтобы выявить в крови антитела, образовавшиеся в печени. Обычно проверка на гепатит В затрагивает расшифровку собранных данных отдельных клеток белка. Во время пробы обращают внимание на такие антитела:

  • HBsAg – их часто можно встретить в начале заражения, еще до того, как болезнь даст о себе знать. Положительный маркер указывает на то, что человека инфицирован, хотя были случаи положительного результата у совершенно здорового человека. Результаты негативны в том случае, когда в организме пациента насчитываться не больше 0.05 МЕ/мл, при большей концентрации антител – анализ положительный.
  • HBeAg – данные антитела имеются почти у всех зараженных пациентов. При длительной высокой концентрации антител в крови, происходит переход заболевания в хроническую форму. Маркер положительный означает обострение заболевания. Наличие вышеупомянутого антитела в организме пациента, говорит о том, что болезнь прогрессирует и выходит на пик.
  • Anti-НВс имеет два типа антител – это l gGи lgM. Наличие в крови антитела lgM говорит о том, что болезнь подходит к своей высшей точке и способна перейти в хроническую форму. Доктора должны следить за тем, что данное антитело не увеличило свои показатели в крови. К счастью lgG – это хорошо, означает образование иммунитета на вирус гепатита В.
  • Anti-НВе – антитело говорит о том, что заболевание протекает нормальным путем и в организме пациента формируется иммунитет к гепатиту В.
  • Anti-HBs – это означает, что пациент здоров и его иммунная система значительно окрепла.

Для клинического исследование, которое поможет определит заражен ли пациент вирусом гепатита В, выбирают метод ПРЦ. Аббревиатура ПЦР означает полимеразная цепная реакция, путем ее изучения можно определить наличие вируса в организме.

Результаты исследования помогают определить наличие генного возбудителя в клетках печени. При правильном проведении процедуры – результаты считаются достоверными.

  • Качественное ПРЦ – положительный или отрицательный результат. Данная процедура обязательна для всех пациентов с подозрением на заражение гепатитом В. В том случае, когда в клетках ДНК вирус находится в маленьком количестве, он не будет обнаружен.
  • Количественное ПРЦ. Данное исследование покажет не только, наличие или отсутствие вируса, но и стадию его заражения. Благодаря определению стадии заболевания можно назначить необходимый курс лечебной терапии.

Кроме всего прочего ПРЦ помогает точно назначить лечение и даже корректировать дозировку лекарственных препаратов. Определяется также длительность лечебной терапии, в некоторых случаях ее можно прекратить раньше времени, а другим пациентам требуется дополнительной курс реабилитации.

Для того, чтобы составить всю картинку заражения и протекания заболевания необходимо сделать биохимический анализ крови. Данное исследование, поможет установить, в каком состоянии находятся внутренние органы пациента и как они функционируют. Анализы дают общую картину метаболических процессов в организме, а также говорит о скорости обмена веществ.

Биохимический анализ также укажет на все витамины и микроэлементы, которые необходимы для нормальной борьбы организма с заболеванием и для укрепления иммунной системы.

Анализы на гепатит В можно сдать в любой клинике, частной или государственной. При выявлении вируса гепатита В в организме человека, путем биохимического анализа, имеются такие составляемые.

Данный фермент можно встретить в большой концентрации, при отрой или хронической форме инфицирования вирусом гепатита В. Фермент находится в клетках печени, а благодаря кровотоку распространяется по всем сосудам.

Читайте также:  Ошибка анализа на гепатит причина

Концентрация вещества в организме постоянно меняется из-за чего, следует проводить анализы раз в квартал. Благодаря АЛТ можно исследовать не только активность вируса, но и оценить масштабы его негативного влияния на печень и организм в целом.

Белок – это одно из самых главных веществ в организме человека, из него строятся все жизненно важные органы, в том числе и сердце. При заболевании гепатитом В большой показатель АСТ, говорит о фиброзе печени.

Высокие показатели указывают на разрушение клеток печени. Для окончательного диагноза следует учесть соотношение АСТ и АЛТ. При высокой концентрации обоих ферментов, развивается некроз печени.

Гемоглобин расщепляется в тканях печени и селезенки, благодаря этому появляется такое вещество как билирубин. Именно данный компонент является основой желчи. Билирубин может быть прямой и непрямой. При высокой концентрации прямого билирубина в крови, можно установить заражение гепатитом В или другими заболеваниями печени.

Высокая концентрация не прямого билирубина в крови говорит о синдроме Жильбера. Кроме того, большая концентрация любого билирубина сигнализирует о плохой проходимости желчных протоков. При заражении гепатитом моча становится темной, лицо и белки глаз приобретают желтый цвет.

Альбумин – это белок, который синтезируется в печени. При низком показатели данного белка в организме происходит поражение клеток печени.

Снижение концентрации общего белка в организме пациента говорит о нарушение работы печени.

Данный фермент доктора используют, чтобы выявить желтуху или холецистит. Повышенный уровень ГГТ говорит о токсическом поражении клеток печени, которое может произойти вследствие хронического алкоголизма или отравления медикаментами. Белок крайне чувствителен к алкоголю и токсинам и при их избыточном количестве, активность белка увеличивается.

В печени происходит белковый обмен, а продукт данного обмена в медицине называют креатинином. При понижении уровня креатинина замедляется работа печени.

Низкий уровень белковых фракций говорит о явных нарушениях в работе печени.

Для диагностики вируса необходимо провести целый ряд различных исследований. Результаты всех анализов в комплексе дадут четкую картину заболевания.

Анализы на антитела при гепатите В

Положительный (встречается у здоровых людей)

Положительный (хроническая и острая формы)

Положительный (формирование иммунитет к болезни)

Положительный (обострение, хроническая форма)

Положительный (образование иммунитета)

Положительный (хорошее протекание болезни)

Вирус не обнаружен, низкий уровень генного материала, курс лечения на основе биопсии клеток печени, сильное поражение клеток печени и нарушение ее функционирования

Биохимический анализ крови

Непрямой – не больше 17 мкмоль/л

Всего – не больше 20.5 мкмоль/л

Ложным анализом чаще всего называют анализ при положительной реакции на вирус, которого в действительности нет в организме человека. На такое стечение обстоятельств могут повлиять следующие факторы:

  • Беременность;
  • Онкологические заболевания;
  • Острые инфекционные заболевания;
  • Вакцинация;
  • Нарушение работы иммунной системы.

Кроме того, ложную информацию могут показать анализы, которые не были выполнены по всем правилам. Для подтверждения диагноза назначают повторные анализы. Для того, чтобы удостоверится больны вы или нет, лучше всего проходить анализ на ПРЦ.

источник

Основной источник заражения гепатитом С – больной человек. Иногда тот, кто является носителем вируса, не проявляет клинические симптомы гепатита ц. Путь заражения гепатовирусом – через кровь. Это может произойти при любом контакте крови зараженного человека с кровью здорового человека. Чаще всего заражаются следующим образом:

  • дети от матери при родах;
  • медицинские работники во время проведения манипуляций;
  • у взрослых чаще всего гепатит проникает в кровь из-за посещения маникюрных салонов, салонов татуажа и пирсинга, где могут работать с инструментами без должной дезинфекции;
  • заболевание часто обнаруживается у наркоманов, вводящих себе в вену наркотические препараты;
  • половой путь хотя и редко, но тоже может спровоцировать заражение гепатовирусом.

Более подробно об основном источнике инфицирования Гепатитом Ц читайте тут.

Поскольку заболевание является наиболее распространенной разновидностью, а также от него нет вакцины, то оно признано одним из наиболее приоритетных в диагностике. Именно поэтому во всех государственных клиниках анализ крови на гепатит С бесплатный. При себе достаточно иметь лишь направление от лечащего врача на сдачу анализа.

В поисках, где сдать анализ на гепатит, пациенты часто пользуются услугами частных клиник и лабораторий. Не стоит не доверять частным лабораториям, поскольку зачастую именно такие диагностические центры имеют более мощное оборудование, нежели государственные учреждения. Поэтому результаты современных лабораторий могут не просто не отличаться, а даже быть более точными, нежели результаты в государственных лабораториях. Некоторые категории пациентов специально сдают кровь на гепатит несколько раз в различных центрах, чтобы сравнить результаты анализа крови на гепатит и избежать ложного диагноза.

Сразу вас успокоим, гепатит С излечим. На сегодняшний день, в мире уже появились препараты от гепатита С с эффективностью приближенной к 100% Современная фарм промышленность создала лекарства, которые практически не имеют побочных эффектов. Многие пациенты получают первые результаты в виде облегчения симптомов и снижения вирусной нагрузки уже через неделю приёма. Подробнее о индийских дженериках от гепатита с читайте в нашей отдельной статье.

На рынке компаний по перевозке индийского лекарства от гепатита С «GalaxyRus (Galaxy Super Speciality)» отлично зарекомендовала себя. Данная компания успешно помогает людям излечиться от недуга больше 2-х лет. Отзывы и видео довольных пациентов вы можете посмотреть здесь. На их счету более 4000 людей, которые выздоровели благодаря купленным препаратам. Не откладывайте свое здоровье в долгий ящик, перейдите на сайт www.galaxyrus.com или позвоните по номеру 8-800-3500-695 , + 7 (495) 369 00 95.

На результаты анализов могут повлиять следующие факторы: прием лекарственных средств, прием пищи, перегрузки организма, как моральные, так и физические, употребление алкоголя, табакокурение, физиотерапевтические процедуры, время забора крови. Все выше перечисленные показатели могут сделать так, что норма уже не будет соблюдаться и появятся отклонения, которые по сути таковыми не являются. Поэтому перед обследованием пациента врач расскажет, какие анализы надо сдать и как к ним подготовиться. Можно привести для примера общие правила подготовки к анализу на гепатит С:

  1. нужно сдать кровь утром, с 8 до 11 часов;
  2. в день забора крови не курить и не нервничать;
  3. за восемь часов – не пить, за четырнадцать часов – не есть;
  4. сказать врачу о приеме каких-либо лекарственных средства и при необходимости прекратить их прием на время;
  5. исключить алкоголь любой крепости за пару дней до того, как сдают кровь.

Для того, чтобы определить наличие заболевания, необходимо сделать ряд диагностических процедур:

  1. общий анализ крови при гепатите С;
  2. биохимический анализ крови при гепатите на активность трансаминаз;
  3. полимеразно-цепную реакцию на наличие рнк вируса гепатита С;
  4. при обнаружении возбудителя делается анализ на генотип гепатита;
  5. ультразвуковое исследование печени может дополнительно подтвердить наличие поражений паренхимы.

Анти-HCV – это анализ на наличие иммуноглобулинов к вирусным белкам. Если анализ на антитела показывает положительный результат, то это свидетельствует о заражении человека гепатовирусом или ранее перенесенном заболевании. Специфические иммуноглобулины начинают появляться как реакция организма на белок ядра гепатовируса и фрагменты его генома. Первые антитела в большинстве случаев появляются в первые три-шесть месяцев заражения вирусом, но в редких случаях они не попадают в кровь более года.

Иммуноферментный анализ длительное время был и остается одним из основных диагностических способов определения возбудителя в организме человека. Анализ достаточно высокочувствителен и дает возможность в 95 процентах случаев обнаружить хроническую форму течения заболевания. Выполняется несколько дней. Но, тем не менее, несмотря на высокую информативность анализа, существует риск получить ложный результат – как положительный, так и отрицательный. Например, пациенты, у которых заболевание находится в острой стадии, получают правильный ответ лишь в среднем в 60 процентах случаев. Это происходит из-за того, что антитела в среднем появляются в течение четырех-пяти месяцев от заражения, поэтому до этого времени ИФА будет показывать отрицательный результат. Ложноотрицательные реакции будут наблюдаться у тех пациентов, которые лечатся от сифилиса, онкологического заболевания или страдают аутоиммунными патологиями. В этом случае чувствительность колеблется в диапазоне 50-95 процентов. В восьми процентах ИФА у ВИЧ инфицированных также получается ложноположительный результат. Поэтому можно утверждать, что погрешности ИФА не позволяют точно поставить диагноз гепатит.

Показатель Значение
IgM+, core IgG+, (NS и IgG)-, RNA (=РНК) HCV+ Острая форма заболевания
IgM+, core IgG+, (NS и IgG)+, RNA (=РНК) HCV+ Хроническая форма
IgM-, core IgG+, (NS и IgG)+, RNA (=РНК) HCV- Латентная фаза
IgM-, core IgG+, (NS и IgG)+/-, RNA (=РНК) HCV- Выздоровление пациента после недуга

Этот анализ позволяет непосредственно увидеть присутствие генетического материала вируса в крови. Анализ основывается на оценке качественных и количественных показателей и выполняется до семи дней. Качественный тест показывает лишь наличие вируса в крови, поэтому результат может быть либо однозначно положительный, либо однозначно отрицательный. Норма для здорового человека, когда в выписке стоит пометка «не обнаружено», т.е. тест отрицательный. Количественный тест позволяет определить концентрацию вируса гепатита С в крови, так называемую вирусную нагрузку. Обычно такой тест делают через три месяца, если предыдущий тест показал наличие гепатовируса в организме.

Показатель Значение
200 копий/мл = 400 МЕ/мл Вирус не обнаруживается либо его количество настолько мало, что не дает возможности его диагностировать
4*10^6 МЕ/мл Высокая концентрация вируса
>2*10^8 МЕ/мл Концентрация является наивысшей из определяемой

Биохимия крови – важная часть общего исследования. По наличию разнообразных микроэлементов в человеческой крови, уже через несколько дней анализ позволяет определить состояние здоровья. Для оценки гепатита С важно получить данные по содержанию аланинаминотрансферазы, астаспартатаминовой трансферазы, билирубина, гамма-глутамилтранспептидазы, глюкозы, ферритина, альбумина, общего белка и белковых фракций, креатинина.

Расшифровку этих основных маркеров представляет следующая таблица

Показатель Норма Характеристика
АЛТ 0,1-0,68 мкмоль/л Показатели повышены при гепатите в острой стадии и при разрушении печени, а снижение показателей указывает на развитие цирроза
АСТ 0,1-0,45 мкмоль/л
Билирубин До 20 мкмоль/л Повышение билирубина указывает на желтуху – основной признак гепатита С в хронической стадии
ГГТ У женщин – 6-42 Ед/л,

У мужчин – 10-71 Ед/л

Показатель повышается при развитии цирроза печени

При острой форме заболевания, когда вирус гепатита только попал в организм человека, и проходит период инкубации, симптоматика не проявляется не только со стороны здоровья пациента, но не видно изменений и в картине лабораторных исследований. Это связано с тем, что вирус достаточно долго появляется в крови. Например, в среднем можно обнаружить генотип вируса только лишь через несколько месяцев. Показатели крови – маркеры гепатита, которые указывают на вирус.

Хроническая форма течения заболевания характерна тем, что в ней появляются признаки наличия возбудителя и если сдавать анализ на вирус, то это подтверждается и результатами анализа. Например, повышение аминотрансферазы будет вызвано гибелью гепатоцитов, а уровень ГГТ будет существенно выше при циррозе. Зная это, врачи делают несколько анализов и при подозрении на возможное заражение анализы на гепатит С повторяют через несколько месяцев.

Обычно врач может назначить ультразвуковое исследование. Узи помогает выявить увеличение размеров печени и места, пораженные вирусом. Но наиболее точные результаты даст единственный анализ – он называется биопсия. Это забор специальной иглой образцов гепатоцитов. Пациентов пугает это исследование, и они хотят знать сколько делается биопсия, больно ли проводится процедура. Биопсия проводится довольно быстро, под спинальной анестезией, ее результаты укажут на изменения в самой печени, что подтвердит или опровергнет подозрения.

Ложноположительный анализ появляется даже у здорового человека. Что это значит? Это означает, что у человека определяется в крови присутствие антител к гепатиту С. При этом такой анализ чаще всего получается методом ИФА – наиболее распространенным методов, но и наиболее «грешным». Ложноположительный анализ можно получить в следующих случаях:

  • при аутоиммунных заболеваниях:
  • при опухолях;
  • при заражении другими тяжелыми инфекциями;
  • если есть беременность.

Ложноположительный анализ может возникнуть и в результате человеческого фактора, профессиональной недобросовестности, нарушении техники проведения анализа. В данном случае приходится переделывать анализ.

К сожалению, выпуск препарата о котором говорится в видео в России так и не начат. но уже сейчас его можно заказать из Индии, подробнее читайте об этом в нашей статье «Дженерики от гепатита с»

Для того, чтобы точно узнать, качественная ли диагностика гепатита С, можно поступить двумя способами:

  1. сдать анализы в нескольких лабораториях и сравнить результаты анализов крови при гепатит С с расшифровкой. Наиболее информативным будет сравнение государственной лаборатории и частной. Если результаты не внушают доверия, можно провести еще несколько анализов в разных клиниках. Всегда нужно помнить о человеческом факторе, а в случае, если получен положительный анализ на гепатит С, лучше перестраховаться. Также стоит принять во внимание, что лабораторная диагностика гепатита С может быть не точной, если есть беременность;
  2. если пациент доверяет клинике полностью, он может сделать анализ повторно позже. Как правило, это назначают и врачи, если результаты анализа на гепатит С положительны. Если они отрицательны через три месяца, также можно подозревать человеческий фактор или другие патологии, благодаря которым сдвинулась норма показателей. После этого нужно сделать анализ крови еще раз.

Определение генотипа вируса чрезвычайно важно для пациента. Анализ проводится на основе взятой венозной крови методом полимеразно-цепной реакции. От того, какой вирус обнаружен, зависит план лечения заболевания. Известно, что генотип 1б в девяноста процентах случаев приведет к развитию хронической формы заболевания, а вот генотип 2а и генотип 3a – лишь в половине случаев. Также стоит отметить, что генотип 1b протекает наиболее тяжело – после такого поражения высок риск развития карциномы. Поэтому определение генотипа необходимо для дальнейшей терапии и прогноза заболевания.

Чтобы диагностировать заболевание, необходимо сдать анализы крови на гепатит С с расшифровкой, после чего врач сравнит полученные показатели с референсными значениями.

источник

Ведущий метод диагностики воспаления печени — количественный анализ на гепатит С. Определение болезни подразумевает проведение количественного, качественного анализа с проверкой генотипа вируса, что дает возможность определить основные параметры течения заболевания. Ввиду способности к мутации требуется точное и своевременное диагностирование с правильно расшифровкой данных для разработки терапевтической схемы.

С 2012 года болезнь гепатита C официально считается полностью излечимым заболеванием. Но для этого важна своевременная диагностика.

Полимеразная цепная реакция или же ПЦР — метод, позволяющий выявить гепатит на начальных стадиях. Чувствительность немного ниже ИФА. Метод определяет ДНК- фрагменты вируса в пробе крови пациента даже в малых количествах. Исходя из этого врач правильно вычисляет именно возбудителя инфекции, а не его продукты жизнедеятельности. По результатам анализа ПЦР есть возможность выявить даже следы вируса и его генотип.

Читайте также:  Определить гепатит по общему анализу

В ПЦР выделяют 3 вида анализа:

  • Качественный. ПЦР гепатита С, который основывается на поиске иммуноглобулинов (антител) типа M и G, характеризующих факт заражения. Анализ может выдать — «не обнаружено», что будет считаться нормой.
  • Количественный. Подтверждает диагноз, позволяет контролировать лечение, указывает на риск заражения других людей. Определяется количество в международной системе единиц — МЕ/мл. Показатель рассчитывается из количества РНК-вируса в 1 мл пробы крови. Высокий результат указывает на повышенный риск инфицирования других людей.
  • Генотипирование. Метод, основывающийся на выявлении генотипов HCV, которых насчитывается 7.

Перед сдачей крови на проверку важно придерживаться правил:

  • За 8 часов до анализов в последний раз покушать.
  • Не пить спиртного за 2 дня, желательно не курить в это время или хотя бы за 1—2 часа до.
  • Сообщить о приеме лекарств.

Вернуться к оглавлению

Для проведения количественного метода исследования нужен ряд показаний, без которых эта диагностика невозможна. К ним относится:

  • выявление качественным анализом антител РНК-вируса;
  • присутствие хронического или острого вида заболевания;
  • планирование тактики лечения;
  • обнаружение микст-гепатитов при диагностировании.

Вернуться к оглавлению

Определение концентрации патогена — суть исследования. Диагностика определяет степень тяжести заболевания, что позволяет полностью увидеть клиническую картину болезни. С помощью это вида ПЦР обнаруживают, какая вирусная нагрузка при гепатите С. После проведения расшифровки полученных данных анализа, врачи назначают лечение, в ходе которого делают забор крови на 4, 12, 16 и 24-й неделях. По завершении 12-й должно быть улучшение, в обратном случае метод лечения стоит заменить.

Найденное в крови количество HCV, влияет на вероятность, с которой вирус гепатита передается окружающим — чем выше, тем больше вероятность. За счет этой процедуры составляется правильный план дальнейшего лечения. Полученные в ходе процедуры результаты измеряются в единицах МЕ/мл и копий/мл. Расшифровать показатели можно только после пересчета полученного количества с учетом коэффициента (КП). Есть 2 метода:

  • HCV Monitor с КП в МЕ — 2,7;
  • LCX HCV RNA с КП — 3,8.

источник

Гепатит С является одним из наиболее распространенных заболеваний печени у человека. Диагностировать его можно своевременно. Соответственно, от этого будет зависеть скорость и эффективность лечения. Далее будет рассказано, как правильно сдавать анализ на гепатит С. Расшифровка тех или иных исследований тоже будет предложена нашему вниманию. Какие именно анализы необходимо сдать? Какие отклонения могут наблюдаться у человека, заболевшего гепатитом C? Обо всем этом будет рассказано далее. В действительности все намного труднее, чем кажется.

Гепатит С является довольно распространенным заболеванием. Оно появляется вследствие заражения человека соответствующим вирусом гепатита. Передается он в основном при попадании крови зараженного в организм здорового гражданина.

Различают две формы заболевания — хроническую и острую. Обычно при втором типе болезни у пациента отсутствуют всякие проявления недуга. Лишь изредка наблюдается желтушный оттенок кожи, тошнота, рвота, изменение цвета кала и мочи, потеря аппетита, повышенная утомляемость и боли в животе.

Чтобы точно диагностировать заболевание на ранних стадиях, необходимо сдать анализ на гепатит С. Расшифровка данного исследования будет предложена позже. Для начала придется узнать, какие методы диагностики будут использоваться.

На самом деле их очень много. Заболевшему придется сдать огромное количество анализов. К счастью, почти все они сводятся к исследованию венозной крови. Поэтому большинство анализов удастся сдать за один раз.

Итак, среди основных методов диагностики гепатита С выделяют следующие исследования:

  • общий анализ крови;
  • общий анализ мочи;
  • биохимия крови;
  • ПЦР;
  • выявление антител к HVC;
  • анализ крови к антителам печени;
  • биопсия печени.

На практике чаще всего именно первые 5 анализов делаются всегда. А вот исследование на антитела печени и биопсия являются крайне редкими. Они зачастую требуются не для подтверждения диагноза, а для правильного лечения и поиска причины заболевания. Далее будет более подробно рассказано о каждом методе.

Но для начала необходимо понять, в каких случаях потребуется сделать анализ на гепатит С. Расшифровка всех полученных результатов должна проводиться только опытным врачом. Иначе можно ошибиться в показаниях. Для некоторых категорий граждан подобные ошибки не допускаются.

Сдавать анализ на гепатит С должны:

  • планирующие беременность пары;
  • беременные женщины;
  • люди, у которых есть подозрения (признаки) на заболевание;
  • доноры органов/крови;
  • наркоманы;
  • люди с ВИЧ-заболеванием;
  • граждане, ведущие беспорядочную половую жизнь;
  • медицинские работники;
  • сотрудники МВД.

Остальные люди сдают данный анализ по желанию. Рекомендуется проверять здоровье раз в год. Этот прием поможет вовремя диагностировать заболевание, если оно появится.

Хочется сдать анализ на гепатит С? Расшифровка данного исследования на самом деле не такая уж и трудная. Но многое зависит от того, какой именно анализ будет сдаваться.

К каждому методу диагностики необходимо правильно подготовиться. К счастью, анализ на гепатит С никаких особенностей не имеет. Если речь идет о сдаче крови, необходимо просто делать это натощак. Придется не принимать пищу около 8-10 часов.

При сдаче мочи рекомендуется за несколько дней до сбора биологического материала отказаться от жирной и жареной пищи и вредных привычек. Потребуется принести в лабораторию первую утреннюю урину. Именно она является наиболее информативной. Больше никаких особенностей подготовка к исследованиям не имеет.

Теперь немного о каждом типе анализа и его расшифровке. Что должно насторожить человека в том или ином случае? Желательно не заниматься самолечением и самодиагностикой. Как уже было сказано, опытные врачи смогут быстро определить наличие гепатита С у пациента. Но по каким признакам?

Начнем с общих анализов крови и мочи. Как было подчеркнуто ранее, цвет урины меняется. Он темнеет. А какие еще изменения могут быть заметны?

Для этого необходимо изучить результаты проведенных исследований. При гепатите C наблюдаются следующие изменения (преимущественно в анализе крови):

  • уменьшаются такие составляющие, как гемоглобин, лейкоциты и тромбоциты;
  • лимфоциты повышаются;
  • наблюдается нарушение свертываемости крови;
  • увеличивается СОЭ.

Также в моче может быть обнаружен уробелин. Данное вещество указывает на наличие нарушений в работе печени. И не более того.

Как обнаружить маркеры гепатита С? Расшифровка анализов поможет понять, есть ли у человека данное заболевание. После общих исследований необходимо сдать кровь на биохимию. Это расширенный метод диагностики большинства болезней.

При гепатите C наблюдаются следующие изменения:

  • ферменты печени повышаются (АЛТ и АСТ);
  • повышается уровень глутамилтранспептидазы щелочной фосфатазы;
  • билирубин возрастает;
  • альбумины снижаются;
  • гамма-глобулины повышаются;
  • триглицериды в крови увеличиваются.

Именно так будет меняться биохимический анализ крови при гепатите С. Расшифровка подобного плана действительно помогает судить о наличии заболевания. А какие существуют нормы перечисленных веществ? Какие ограничения помогают судить о повышении или понижении той или иной составляющей?

В целом ситуация складывается неоднозначная. На сегодняшний день у мужчин и женщин в крови содержится разное количество перечисленных составляющих. Человек сдал на гепатит С анализы? Расшифровка (норма веществ) биохимии крови будет такой:

  • ферменты печени у мужчин должны содержаться в количестве до 41 МЕ/л, у женщин — до 31 МЕ/л;
  • уровень содержания глутамилтранспептидазы щелочной фосфатазы не превышает 150 МЕ/л;
  • желтый пигмент в норме — до 27-34 мкмоль/л.

Именно на такие нормы необходимо ориентироваться человеку. При сдаче крови на биохимический анализ в частных клиниках предельные значения нормы обязательно будут указаны непосредственно в результатах.

Следующий весьма информативный тест — это проведение анализа ПЦР. Данный вариант предлагает количественный анализ на гепатит С. Расшифровка исследования подразумевает поиск клеток вируса даже при их минимальной концентрации. Точный результат можно получить уже через 5 дней с момента предполагаемого инфицирования.

Немного о расшифровке. Если результат проведенного анализа положительный, это значит, что гепатит С имеется в организме. На момент забора крови из вены заболевание находится в активной фазе.

Особенностью ПЦР-диагностики является то, что она может быть как качественной, так и количественной. Существенной разницы в этом нет. Расшифровка результатов будет одинаковой. Если будет обнаружен гепатит С (качественный анализ), расшифровка результата исследования укажет на положительную реакцию. То есть тест окажется положительным. В противном случае он будет отрицательным.

Теперь немного о количественном анализе ПЦР на гепатит С. Дело все в том, что такой вариант выбирается после обнаружения клеток заболевания в крови. Он помогает устанавливать степень развития болезни. Прекрасный способ подбора правильного лечения.

Найден вирус гепатита С? Количественный анализ, расшифровка которого будет приведена ниже, показывает степень вирусной нагрузки на организм. Она может быть высокой и не очень.

Так, если качественный ПЦР-анализ положительный, рекомендуется отдать предпочтение количественному. Он поможет понять, как правильно лечить человека.

В расшифровке анализов будет подразумеваться объем РНК HVC, содержащийся в крови. Если результаты показали 400 000 МЕ/л, то такой результат можно считать средним. Соответственно, показания ниже указанного минимума — это низкая вирусная нагрузка. А при значении количественного анализа на гепатит С выше 800 000 МЕ/л, предполагается сильная нагрузка заболевания на организм.

Помимо всего прочего, можно определить антитела к гепатиту С. Расшифровка анализа сводится к указанию антител не только ко всем типам изучаемого заболевания, но и к печеночным антигенам.

Такой вариант диагностики может проводиться как в виде обычного исследования, так и посредством экспресс-теста. Для последнего используют как кровь, так и слюну. При окрашивании полоски в определенный цвет (согласно инструкции), можно говорить о наличии антител к гепатиту C у человека. Преимуществом экспресс-тестов является то, что их разрешается выполнять на дому.

Обычно расшифровка исследования сводится к указанию наличия/отсутствия антител к изучаемому заболеванию. Если пришел положительный результат, в организме они имеются. В противном случае говорить о наличии антител к гепатиту и печеночным клеткам нельзя.

Теперь понятно, как подготовиться к той или иной диагностике, а также каким образом расшифровать результаты проведенных исследований. На самом деле все намного проще, чем кажется.

Наиболее простым решением при наличии изучаемого заболевания является анализ крови при гепатите C. Расшифровка ПЦР-диагностики (самый информативный способ) сводится к определению наличия/отсутствия вируса, а также к выяснению его нагрузки на организм. Ничего трудного в этом нет.

Как правило, все перечисленные методы диагностики могут оказаться ложноположительными или ложноотрицательными. Поэтому рекомендуется при подозрениях на гепатит сдать несколько разных анализов. Только так удастся 100% подтвердить результаты.

На практике неверные итоги диагностики встречаются не очень часто. Обычно они возникают при нарушении процедуры забора биоматериала для дальнейшего исследования. Например, при загрязнении мочи или крови. Если в крови есть гепарин, результаты могут прийти неверные. Химические или белковые субстанции — это еще несколько причин, по которым анализ на гепатит С не позволяет точно понять, болен ли человек. При подозрительных результатах рекомендуется повторить исследование через некоторое время.

источник

Согласно данным Всемирной организации здравоохранения, вирусом гепатита С инфицировано 3,0% населения Земли. Широкое распространение, высокая степень хронизации инфекционного процесса, отсутствие специфической профилактики, высокая стоимость и недостаточная эффективность лечения определяют необходимость ранней диагностики заболевания с последующим диспансерным наблюдением инфицированных лиц.

Согласно данным Всемирной организации здравоохранения, вирусом гепатита С инфицировано 3,0% населения Земли. Широкое распространение, высокая степень хронизации инфекционного процесса, отсутствие специфической профилактики, высокая стоимость и недостаточная эффективность лечения определяют необходимость ранней диагностики заболевания с последующим диспансерным наблюдением инфицированных лиц. При длительном малосимптомном течении с отсутствием характерных клинических признаков особое значение для выявления случаев гепатита С приобретает лабораторная диагностика.

Одним из основных методов выявления антител к антигенам вируса гепатита С (анти-ВГС) является иммуноферментный анализ (ИФА). На сегодняшний день можно обозначить две серьезные проблемы, связанные с интерпретацией результатов, полученных при использовании данного исследования. Первая — получение противоречивых результатов при повторных исследованиях образцов в тестах разных производителей. Основная причина расхождений результатов связана с оригинальными конструкциями антигенов, используемых в диагностикумах, и низкий уровень качества ИФА-исследований в лабораториях.

К искажению результатов могут приводить следующие ошибки: нарушение регламента пробоподготовки и/или проведения реакции (наличие загрязненной, в т. ч. дезинфицирующими и моющими средствами, посуды и наконечников пипеток, неточность работы оборудования), отсутствие системы внутрилабораторного контроля качества.

Вторая проблема, с которой сталкиваются лаборатории, — получение “неопределенных” результатов. Поскольку на территории России применяется большой ассортимент отечественных и импортных наборов реагентов, позволяющих выявить анти-ВГС, производители по-разному интерпретируют результаты анализа. Иногда один и тот же образец, содержащий одни и те же антитела, в тестах разных производителей может расцениваться как положительный,“неопределенный” или отрицательный.

В настоящее время как в нашей стране, так и в мире алгоритм лабораторного исследования, проводимого на станциях переливания крови и в клинико-диагностических лабораториях, включает первичное тестирование сывороток крови для выявления суммарных анти-ВГС с последующим подтверждением положительного результата скрининга путем определения антител к высокоспецифичным антигенам ВГС — структурному (core) и неструктурным (NS3, NS4, NS5).

Как правило, в наборах реагентов, предназначенных для скрининга, — “Бест анти-ВГС” (ЗАО “Вектор-Бест”, Новосибирск), “ВГС-ДСМ” (“Медико-биологический союз”, Новосибирск), “ИФА-АНТИ-HCV” (НПО “Диагностические системы”, Нижний Новгород), “ИФА-ВГС” (ЗАО “Эколаб”, Электрогорск) — результаты интерпретируются только как положительные или отрицательные.

В перечисленных наборах реагентов образцы, оптическая плотность (ОП) которых равна или превышает значение ОПкрит., считаются положительными. Согласно инструкции образец положительно реагирующей сыворотки должен быть исследован повторно в этом же наборе параллельно в двух лунках (для воспроизведения положительного результата или исключения технической ошибки). При повторном получении положительного результата хотя бы в одной лунке образец исследуется с использованием подтверждающего теста, обладающего большей чувствительностью и специфичностью.

Однако существуют скрининговые тест-системы, где особое внимание уделяется образцам, результаты которых ниже уровня ОПкрит. Так, согласно инструкции диагностического набора MONOLISA HCV PLUS V.2 BIO-RAD (Франция) сыворотки, ОП которых ниже уровня ОПкрит. на 10,0%, обязательно следует тестировать повторно в дубле для окончательной интерпретации. Если при использовании наборов Murex anti HCV (Murex Diagnostica, Великобритания) результат оказывается в “серой зоне” (показатель ОП выше ОП (K-)+0,3, но ниже ОПкрит.), образцы рассматриваются как погранично положительные. Согласно инструкции такие сыворотки также должны быть исследованы повторно. Если результат повторяется или если получены противоречивые результаты, необходимо тестировать образцы с использованием тест-системы другого производителя или подтверждающего теста.

Если при использовании тест-системы другого производителя или подтверждающего теста получен положительный результат, то считается, что сыворотка пациента содержит антитела к анти-ВГС.

Если значение ОП образца остается в “серой зоне” или если получены противоречивые результаты, то донор или больной, чья кровь исследовалась, в дальнейшем нуждается в наблюдении врача (инструкция к Murex anti HCV, комплект VK47).

Таким образом, “неопределенный” результат можно получить уже в ходе скрининга. Но, как правило, чаще в практике с понятием “неопределенный” результат врачи сталкиваются при использовании метода имму- ноблота и “подтверждающих” наборов реагентов для выявления спектра антител к каждому из анти-ВГС.

Следует отметить, что большинство производителей дают одинаковую интерпретацию положительных результатов: образец считается положительным (содержащим анти-ВГС), если значение ОП в лунке выше или равно ОПкрит. по двум или более антигенам, или по одному core-антигену.

Согласно критериям, внесенным в инструкции к некоторым тестсистемам, выявление антител к одному из неструктурных белков вируса не дает точного ответа. Поэтому образцы с ОП, большей или равной ОПкрит. только для одного неструктурного антигена (NS3, NS4 или NS5), считаются “неопределенными”. Такая формулировка интерпретации результатов содержится в инструкциях наборов реагентов ЗАО “Вектор- Бест”, “ЭКОлаб”, “Медико-биологический союз”.

Другой подход к интерпретации результатов предлагает НПО “Диагностические системы” в подтверждающем наборе “ДС-ИФА-АНТИ- HCV-СПЕКТР-GM”. Результаты анализа считаются “неопределенными”, если значение ОП образца хотя бы с одним из сорбированных антигенов равно или превышает ОПкрит. менее чем на 20,0%, независимо от вида антигена (структурный или неструктурный). Соответственно в данном наборе результаты анализа считаются положительными, если значение ОП образца хотя бы с одним из сорбированных антигенов превышает ОПкрит. на 20,0% и более. Таким образом, сыворотка, содержащая антитела только к одному неструктурному анти-ВГС, в данной системе уже будет считаться положительной.

Технология подтверждающих тестов при применении метода им- муноблота использует синтетические пептиды и рекомбинантные белки ВГС. Эти пептиды и белки нанесены и фиксированы в виде отдельных линий, расположенных в строго определенном порядке для удобства считывания результата на полосках нитроцеллюлозы (стрипах), что позволяет осуществлять многопараметровое тестирование для выявления специфических антител к анти-ВГС. При использовании наборов CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA (США) результат считается “неопределенным” (сомнительным), если на стрипе появляется полоса, соответствующая анти-ВГС (независимо, к шге или неструктурным антигенам), с интенсивностью окрашивания “1+” или выше. Похожая интерпретация предлагается в наборах реагентов других производителей: “ВГС-блот- БЕСТ” (ЗАО “Вектор-Бест”), INNO-LIA HCV Score (INNOGENETICS), Deciscan HCV PLUS (BIO-RAD). Соответственно образец, содержащий антитела к одному core-антигену, для которого получен положительный результат при выявлении антител методом ИФА, может считаться “неопределенным” в иммуноблоте.

В инструкции набора реагентов с использованием иммуноблота INNO-LIA HCV Score присутствует уточнение: если антигенная линия для NS3 окрашена “+/-” или выше, а все другие не окрашены, то такой образец также считается “неопределенным”. Особое внимание уделяется этому неструктурному антигену, поскольку при инфицировании ВГС одними из первых могут появиться антитела именно к NS3. Примером могут служить сероконверсионные панели — специальные наборы образцов сывороток крови одного и того же инфицированного человека, полученные в динамике в период сероконверсии. Так, в панели № 6212 (ZeptoMetrix Corporation) все образцы содержат РНК ВГС. С помощью иммуноблотов INNO-LIA HCV Score, CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA антитела в данной панели определяются исключительно к NS3 антигену, начиная со второго образца с реактивностью “+/-” и заканчивая “4+” (образец № 9). Результаты интерпретируются как “неопределенные”. Таким образом, уже на ранней стадии можно выявить инфицированные образцы.

Mikrogen Diagnostik в наборе реагентов для иммуноблота recomBlot HCV IgG 2.0 предлагает интерпретировать результаты на основе балльной системы. Значения линий анти-ВГС RecomBlot HCV IgG соответствуют определенным баллам: если антигенная линия для тоге окрашена на “+/-”, то это соответствует 5 баллам, если на “1+” или “2+”, то 8 баллам; неструктурным антигенам с интенсивностью окрашивания “1+” или выше присваивается следующее количество баллов: для NS3 — 3 балла, Helicase — 3 балла, NS4 — 4 балла, NS5 — 2 балла. Количество баллов суммируется, и результат исследования интерпретируется как отрицательный при сумме баллов 0-5, как пограничный (“неопределенный”) — 6-9 баллов, положительный — свыше 9 баллов. Соответственно если образец содержит антитела только к одному неструктурному антигену, то результат будет интерпретироваться как отрицательный. Таким образом, производитель “решает” проблему сывороток, содержащих антитела только к одному из неструктурных антигенов.

Получается, что если выполнить тестирование одного и того же образца с использованием разных наборов для выявления антител методом ИФА или иммуноблота, то результат может оказаться положительным, “неопределенным” или отрицательным.

Клинико-диагностические лаборатории и лаборатории службы переливания крови для выявления лабораторных маркеров ВГС применяют в работе разнообразные наборы отечественных и зарубежных производителей. Отсюда возникают проблемы, с которыми сталкивается врач-клиницист или пациент, когда получают из разных лабораторий противоречивые результаты одного и того же анализа. Безусловно, каждый производитель реагентов допускает возможность получения ложноположительных результатов, обусловленных неспецифическим реагированием рекомбинантных антигенов и синтетических пептидов, входящих в состав наборов, с белками сыворотки крови. Поэтому в инструкции для каждого набора реагентов дополнительно делается акцент на то, что неопределенные образцы необходимо исследовать повторно через 3-6 месяцев (некоторые производители указывают интервал от 2-3 недель (“Медико-биологический союз”) до 6-12 месяцев (CHIRON RIBA)) с момента первого исследования, чтобы определить, изменилась ли реактивность. Желательно, чтобы повторно взятый образец анализировался одновременно с предыдущим (“парные” образцы). При длительном наблюдении пациента с целью получения результатов, адекватно отражающих изменение содержания маркера в крови, необходимо использовать наборы реагентов одного наименования (одного предприятия-изготовителя). Некоторые производители предлагают также исследовать и “неопределенные” образцы с использованием подтверждающих тестов, выявляющих другие маркеры ВГС (иммуно- блотинг, ПЦР).

Ряд производителей берет на себя ответственность, заявляя в инструкции, что если при повторном (через 2-3 недели) исследовании образец дает положительную реакцию с антителами только к одному из NS-антигенов, то в этом случае реакцию следует считать отрицательной (инструкция “ВГС-ДСМ-подтверждающий тест” (комплект 2, “Медикобиологический союз”)). Другие, как recomBlot HCV IgG 2.0 (Mikrogen Diagnostik), интерпретирует подобные сыворотки как отрицательные. Но, интерпретируя таким образом результаты, не стоит забывать, что, по имеющимся в литературе данным, вирус гепатита С способен индуцировать различный по интенсивности гуморальный ответ — от полного отсутствия специфических антител до полного спектра антител к структурным и неструктурным белкам.

На сегодняшний день существует ряд статей, в которых отражены разные исследования сывороток крови с “неопределенными” результатами, когда в образце содержатся антитела только к одному неструктурному антигену ВГС. Опубликованные в литературе данные исследований по этой проблеме весьма противоречивы.

Так, Pawlotsky J.M. с соавт. проводили исследование 588 положительных образцов с помощью иммуноблота RIBA HCV 3.0. Распространенность образцов с “неопределенными” результатами составила около 10,0% (59/588). Причем, в 53,0% (31/59) “неопределенных” образцов была обнаружена РНК ВГС. Изолированные антитела к core-антигену определялись в 25 образцах (64,0% из них содержали РНК ВГС), анти-№3 — в 30 случаях (43,0% образцов содержали РНК), изолированные анти-№4 — в 3 случаях (в 67,0% образцов присутствовала РНК), и анти-№5 — в 1 случае (РНК не определялась). При этом авторы приходят к выводу, что образцы, содержащие антитела только к NS5, следует относить к ложноположительным.

С другой стороны, в работе Cavazza S. c соавт. было показано, что в 5,0% образцов с “неопределенным” результатом в иммуноблоте Riba-3, в которых присутствуют антитела только к NS5, определяется РНК ВГС. К тому же выявление антител к NS5 в более ранние сроки инфекции позволяет улучшить качество лабораторной диагностики острого гепатита С.

Данные, полученные Евпловой И.А. при изучении клинико-эпидемиологических характеристик детей с “неопределенными” результатами выявления анти-ВГС, свидетельствуют о скрытом течении инфекции и имеющемся иммунном дисбалансе в организме детей с изолированным выявлением антител к неструктурным NS3- или №4-антигенам вируса. Частота и характер желудочно-кишечных заболеваний, результаты УЗИ- сканирования у детей с “неопределенными” результатами — признаки поражения печени (60,0%), спленомегалия (25,0%), патологические изменения поджелудочной железы (45,0%) — сопоставимы с таковыми у детей, страдающих хроническим гепатитом С, с различной репликацией вируса.

В работе Потаповой А.А. приводятся данные исследования образцов с “неопределенным” результатом при выявлении анти-ВГС у молодых и пожилых людей. Интересно отметить, что такие образцы преимущественно содержали только анти-№4 ВГС. Причем анти-№4 у пожилых пациентов были как высоко-, так и низкоавидными, а при обнаружении в пробе молодого пациента только анти-№4 авидность антител не определялась. Однако по концентрации а-фетопротеина (биохимического маркера повреждения клеток печени) группа молодых людей с “неопределенными” результатами выявления анти-ВГС была близка к группе анти-ВГС-позитивных образцов, что подтверждает вывод Rios M. об эпидемиологической близости групп с анти-ВГС-положительными и “неопределенными” результатами.

Особое значение уделяется изучению “неопределенных” результатов выявления анти-ВГС, полученных в группе доноров крови.

По данным Lemaire J.M., из 758 образцов от доноров, интерпретирующихся как “неопределенные” при использовании иммуноблота RIBA-3, 10 образцов (1,3%) содержали РНК ВГС: 3,3% (6/180) и 1,3% (4/317) проб с антителами только к core и только к NS3 соответственно. В образцах, содержащих только анти-№4 и только анти-№5, в 52 и 209 пробах соответственно, РНК ВГС обнаружена не была. У 2 из 6 доноров с антителами к core была выявлена хроническая форма гепатита. Острый гепатит был диагностирован у 3 из 4 чел., в сыворотке крови которых определялись только антитела к NS3. Однако в литературе также имеются данные, свидетельствующие о том, что при наличии в сыворотке крови донора изолированных антител к неструктурным белкам вируса гепатита С, РНК ВГС, как правило, не выявляется.

В своем исследовании Melve G.K. с соавт. проанализировали в динамике кровь 92 чел., отстраненных от донорства крови из-за “неопределенных” результатов при выявлении анти-ВГС. Спустя 75 месяцев образцы крови 66 (71,0%) из 92 чел. по-прежнему демонстрировали “неопределенный” результат при исследовании методом иммуноблота (RIBA). Наиболее часто встречались образцы, в которых определялись антитела только к NS5. Более того, в исследовании была выявлена связь между такими образцами и обнаружением антител к аденовирусу в пробах, особенно в осенне-зимний период. Авторы предполагают, что вирусная инфекция и кросс-реактивность могут быть этиологическими факторами получения неопределенных результатов при определении анти-ВГС.

Другая подобная работа была посвящена наблюдению за донорами с “неопределенными” результатами, полученными при использовании иммуноблота (RIBA). В течение 5 лет было обследовано 102 979 доноров. Среди них для 271 образца получен положительный результат при выявлении антител методом ИФА (наборы Abbott Axsym System HCV version 3.0 assay (USA) или Ortho Vitros ECi anti-HCV assay (USA)). Для подтверждения данные пробы тестировали методом иммуноблота CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA: 178 сывороток (65,7%) показали отрицательный результат, 28 (10,3%) — положительный, а 65 (24,0%) — “неопределенный”. Значительное количество ложноположительных результатов при выявлении антител методом ИФА (65,7%) авторы объясняют факторами, не связанными с инфекцией. Ложноположительные результаты выявления анти-ВГС описаны после вакцинации против гриппа. За 24 донорами (из 65) с “неопределенными” результатами наблюдение велось 25 месяцев. За этот период у 8 чел. (33,0%) результат обнаружения анти-ВГС изменился на отрицательный, а у 16 доноров (67,0%) по-прежнему сохранился “неопределенный” результат.

В работе Rios M. изучались характеристики группы доноров, при тестировании крови которых методом иммуноблота (RIBA) выявлены положительные и “неопределенные” результаты. РНК ВГС наиболее часто (в 71,0% случаев) присутствовала в образцах с положительным результатом в иммуноблоте, по сравнению с сыворотками с “неопределенным” результатом (в 10,0% случаев). Увеличение активности трансаминаз сыворотки крови в течение 3 лет наблюдения регистрировалось соответственно в 54,0% случаев у доноров с положительным результатом и в 13,0% случаев — с “неопределенным” результатом. У 46,0% пациентов с “неопределенным” результатом данные биопсии печени были в норме (диагностировались лишь незначительные изменения), однако 33,0% из них имели хронический персистирующий гепатит, а 21,0% пациентов — хронический активный гепатит. Гистологическое исследование показало, что у 50,0% пациентов отсутствовал фиброз, у 46,0% наблюдался фиброз 1-й степени, у 4,0% — фиброз 2-й степени тяжести. Авторы приходят к заключению, что группа пациентов с “неопределенными” результатами, вероятно, имеет доброкачественное течение заболевания без вирусной репликации.

Кадровые доноры — обычные люди, которые в реальной жизни также сталкиваются с факторами риска заражения ВГС-инфекцией (инъекции, посещения стоматолога и гинеколога, зондовые обследования, оперативные вмешательства и др.). Поэтому данные Makuria A.T. согласуются с данными других исследователей и в работе делается вывод, что “неопределенные” результаты также могут быть у доноров, которые перенесли ВГС-инфекцию. Доказательством является то, что у доноров с “неопределенными” результатами отмечался сильный иммунный ответ, схожий с таковым у больных, которые спонтанно выздоровели от ВГС-инфекции, и отличающийся от контрольной группы и группы хронических больных ВГС.

Безусловно, перед сотрудником лаборатории стоит сложная задача — как разграничить ложноположительный результат и истинное присутствие анти-ВГС. Ложноположительные результаты являются одной из наиболее важных проблем при проведении исследований. Их появление может быть обусловлено неспецифическим взаимодействием компонентов реакции, возможными перекрестными реакциями с другими вирусными антигенами и многими другими факторами. Повышенная частота таких результатов отмечена среди больных онкологическими и аутоиммунными заболеваниями, лиц с иммунодефицитными состояниями и больных сифилисом. Обнаружение в образце сыворотки крови РНК ВГС является хорошим подтверждающим маркером инфекции гепатита С. Однако и здесь можно рассуждать о ложноотрицательных и ложноположительных результатах ПЦР. Вместе с тем отсутствие РНК ВГС не позволяет говорить о наличии ложноположительного результата выявления анти- ВГС. Возможным объяснением отсутствия РНК ВГС в образцах с “неопределенным” результатом выявления анти-ВГС могут быть экспрессия генома вируса ниже порога чувствительности используемых вариантов ПЦР, сохранение вируса в иммунологически привилегированных зонах. Необходимо учитывать, что анти-ВГС могут циркулировать в крови пациента, который выздоровел после острого гепатита С (10,0-15,0%) или у которого произошла элиминация РНК ВГС в результате проводимой терапии. В исследовании Seeff L.B. показано, что в 23,0% случаев РНК ВГС может исчезать у пациентов, изначально инфицированных.

Таким образом, исходя из вышеизложенного, для служб крови одним из вариантов решения проблемы “неопределенных” результатов может стать использование таких скрининговых и подтверждающих тестов (например, двухлуночных, где core нанесен отдельно от неструктурных антигенов), в которых результаты интерпретируются исключительно как положительные или отрицательные.

Когда речь идет о пациенте, то требуется более тщательное обследование. В этом случае для подтверждения положительного результата лучше использовать определение антител к отдельным анти-ВГС с использованием метода иммуноблота или ИФА, отслеживая в динамике, как со временем меняется спектр и титр антител у данного пациента. Трактовка “неопределенный результат” на сегодняшний день необходима в случае отсутствия четких показаний, позволяющих определенно судить о наличии или отсутствии анти-ВГС в исследуемом образце. Правомочность ответа — “неопределенный результат выявления анти-ВГС”, выдаваемого специалистом лаборатории клиницисту, очевидна не только при проведении подтверждающего теста, но и при рутинном исследовании для обнаружения анти-ВГС. Необходимость такой трактовки полученных результатов является отражением современного состояния лабораторной диагностики гепатита С. В лабораторной диагностике гепатита С необходима комплексная оценка маркеров ВГС-инфекции, основанная на динамическом наблюдении за пациентом.

источник