Описание анализов на гепатит с

При подозрении на наличие вируса необходимо прежде всего сдать анализы на гепатит С, чтобы точно быть уверенным в диагнозе, определить генотип и правильно подобрать соответствующую схему терапии. Сдается сразу несколько анализов, чтобы не было никаких сомнений в наличии заболевания.

Алгоритм диагностики и ведения пациентов с подозрением на гепатит С заключается в следующем:

1. Вирусологические исследования проводятся в два этапа (линии). Первая – ИФА (иммуноферментный анализ крови на наличие маркеров гепатита С – анти-HCV). Вторая линия – ПЦР и генотипирование.
2. Биохимическое исследование крови – главные показатели этого анализа АЛТ, АСТ и уровень билирубина. Для оценки общего состояния организма и возможных патологических процессов в других системах назначается общий анализ крови.
3. Биопсия или ультразвуковая эластометрия.

Биохимия, общий анализ крови и эластометрия являются дополнительными исследованиями, которые позволяют составить полную картину заболевания и назначить грамотную терапию.

Позволяет подтвердить наличие или отсутствие антител (специфических белков) в сыворотке крови. Они являются основным показателем иммунного ответа на присутствие инфекции в печени.

Сразу важно понять, что наличие антител – это не 100% подтверждение присутствия вируса гепатита С в организме больного. Если анализ крови на гепатит С положительный по методу ИФА, то это является только основой для более углубленных исследований – направление на вирусологическое обследование второй линии – ПЦР.

На исследование берут только венозную кровь пациента, целесообразно проводить анализ только натощак, когда на показатели крови не оказывает влияние процесс всасывания пищи. Кроме этого пациент должен в течение трех суток соблюдать определенную диету – нельзя употреблять жирное, жареное, выпечку, спиртосодержащие напитки.

В сыворотке крови можно обнаружить несколько видов антител, все зависит от стадии заболевания. Иногда наличие определенных антител доказывает наступление ремиссии.

Можно выделить четыре класса антител, которые определяют при анализе на гепатит С:

1. Иммуноглобулины G (Anti-HCV IgG) – их присутствие сигнализирует о хронической форме гепатита С, когда вирус находится в подавленном состоянии. Носителей также можно вычислить по присутствию этих антител.
2. Антитела класса М (Anti-HCV core IgM) – повышенный уровень этих иммуноглобулинов говорит об остром течении инфекции, либо рецидиве хронического гепатита. Их можно обнаружить по истечению 12 недель после инфицирования.
3. Суммарное определение антител к гепатиту С (Anti-HCV total) – это одновременный учет фракций класса М и G. Данное обследование сыворотки крови на вирус гепатита С позволяет установить даже минимальные концентрации антител и является универсальной методикой. Обнаружение этих антител происходит уже после 4-6 недель развития заболевания.
4. Антитела к неструктурным белкам HCV (Anti-HCV NS) – этот метод применяют редко, так как суммарное определение антител дает те же результаты. В сыворотке можно определить несколько белковых соединений: Anti-NS3, Anti-NS4, Anti-NS5. Anti-NS3 можно вычленить на ранних стадиях развития заболевания. А два других распознаются уже после выявления остальных маркеров при анализе на гепатит С.

Этот анализ сыворотки крови полимеразной цепной реакции (ПЦР) позволяет выявить наличие РНК вируса гепатита С. Если результат негативный, то обследование больного прекращается. Повторная сдача анализа ПЦР HCV РНК назначается через полгода.

Первый этап – это качественный ПЦР, если сдать этот анализ на гепатит С, то он покажет наличие или отсутствие вируса в крови. Лучше выбрать обычную чувствительность до 60 МЕ/мл.

Если качественный ПЦР дал позитивный результат анализа крови на гепатит С, то проводится дополнительный количественный. Он помогает определить вирусную нагрузку на организм, узнать концентрацию вируса в крови. Данный метод более дорогостоящий, поэтому его стоит проводить после получения результатов качественного ПЦР.

Алгоритм сдачи Качественного и Количественного ПЦР.

Интерпретация исследований ПЦР количественный:

• Низкие показатели вирусной нагрузки – до 400 тыс. МЕ/мл.
• Средние показатели до 800 000 МЕ/мл.
• Высокая степень – свыше 800 тысяч МЕ/мл.

Таким образом два вида анализа на гепатит С (на присутствие и количество вирусных вирионов в крови) позволяют поставить правильный диагноз.

Для того чтобы начать грамотное лечение необходимо сдать анализы на гепатит С, только случае получения положительных результатов по нескольким методикам (окончательным является ПЦР) можно говорить о верно поставленном диагнозе.

В таблице представлены расшифровки анализа крови на присутствие гепатита С. Если сдается проба на Anti-HCV total и ПЦР, то можно сделать следующие выводы:

Схема терапии, комбинация медикаментов и продолжительность лечения напрямую зависят от генотипа. Существует 6 генотипов, при использовании лекарственных формул с прямым противовирусным действием удается успешно излечить все генотипы.

Исследование проводится методом ПЦР Real time, то есть основой для определения генотипа становится РНК вируса – это высокоточный метод диагностики.

Для данного исследования используется венозная или капиллярная кровь. Сдается анализ на голодный желудок (нельзя кушать в течение 12 часов перед сдачей крови). Желательно за три дня до проведения обследования не употреблять алкоголь, за 30 минут до забора крови нельзя курить.

После получения результатов они анализируются: при увеличении содержания определённых ферментов можно говорить о наличии процессов, связанных с поражениями определенных участков печени. Нормальные показатели указаны в таблице:

Гистологическая картина после определения биохимических показателей крови показывает неспецифические воспалительно-некротические изменения, сочетание жировых и гидропических дистрофических состояний, образование лимфоидных фолликул, общую оценку работоспособности печени.

Биопсия – это более старый и травматичный метод исследования печени, который позволяет определить тяжесть ее поражения при гепатите С.

С 2013 года крупные клиники в России стали устанавливать оборудование для ультразвуковой эластографии. Этот метод позволяет получить более точный результат и без травмирования клеток печени.

Существуют две шкалы оценки степени фиброза, не важно каким методом получены результаты – по Knodell и METAVIR. Второй способ более чувствительный и разработан для оценки влияния гепатита С на работу печени. Он выделяет, в отличии от Knodell, в отдельную стадию – умеренную активность. Она характеризует фиброз портальных трактов с единичными септами, таким образом оценка будет более детальной.

Шкала METAVIR:

• А0 – некровосполительной активности нет;
• А1 – активность минимальна;
• А2 – умеренная;
• А3 – выраженная.

По шкале METAVIR тяжесть фиброза оценивается следующим образом:

• F0 – фиброз отсутствует – 5,8 кПа;
• F1 – фиброз без вовлечения в патологический процесс перегородок (септ) – от 5,9 до 7,2 кПа;
• F2 – с вовлечением нескольких септ – диапазон показателей 7,3-9,5 кПа;
• F3 – в фиброз вовлечено несколько перегородок – 9,6-12,5кПа;
• F4 – цирроз – выше 12,6 кПа.

Кроме вышеперечисленных методик врач может назначить УЗИ, но не простое, а с цветным допплеровским картированием. Это исследование позволяет оценить скорость и вектор движения крови внутри органа, области, где кровообращение отсутствует.

источник

Гепатит С является одним из наиболее распространенных заболеваний печени у человека. Диагностировать его можно своевременно. Соответственно, от этого будет зависеть скорость и эффективность лечения. Далее будет рассказано, как правильно сдавать анализ на гепатит С. Расшифровка тех или иных исследований тоже будет предложена нашему вниманию. Какие именно анализы необходимо сдать? Какие отклонения могут наблюдаться у человека, заболевшего гепатитом C? Обо всем этом будет рассказано далее. В действительности все намного труднее, чем кажется.

Гепатит С является довольно распространенным заболеванием. Оно появляется вследствие заражения человека соответствующим вирусом гепатита. Передается он в основном при попадании крови зараженного в организм здорового гражданина.

Различают две формы заболевания — хроническую и острую. Обычно при втором типе болезни у пациента отсутствуют всякие проявления недуга. Лишь изредка наблюдается желтушный оттенок кожи, тошнота, рвота, изменение цвета кала и мочи, потеря аппетита, повышенная утомляемость и боли в животе.

Чтобы точно диагностировать заболевание на ранних стадиях, необходимо сдать анализ на гепатит С. Расшифровка данного исследования будет предложена позже. Для начала придется узнать, какие методы диагностики будут использоваться.

На самом деле их очень много. Заболевшему придется сдать огромное количество анализов. К счастью, почти все они сводятся к исследованию венозной крови. Поэтому большинство анализов удастся сдать за один раз.

Итак, среди основных методов диагностики гепатита С выделяют следующие исследования:

• общий анализ крови;
• общий анализ мочи;
• биохимия крови;
• ПЦР;
• выявление антител к HVC;
• анализ крови к антителам печени;
• биопсия печени.

На практике чаще всего именно первые 5 анализов делаются всегда. А вот исследование на антитела печени и биопсия являются крайне редкими. Они зачастую требуются не для подтверждения диагноза, а для правильного лечения и поиска причины заболевания. Далее будет более подробно рассказано о каждом методе.

Но для начала необходимо понять, в каких случаях потребуется сделать анализ на гепатит С. Расшифровка всех полученных результатов должна проводиться только опытным врачом. Иначе можно ошибиться в показаниях. Для некоторых категорий граждан подобные ошибки не допускаются.

Сдавать анализ на гепатит С должны:

• планирующие беременность пары;
• беременные женщины;
• люди, у которых есть подозрения (признаки) на заболевание;
• доноры органов/крови;
• наркоманы;
• люди с ВИЧ-заболеванием;
• граждане, ведущие беспорядочную половую жизнь;
• медицинские работники;
• сотрудники МВД.

Остальные люди сдают данный анализ по желанию. Рекомендуется проверять здоровье раз в год. Этот прием поможет вовремя диагностировать заболевание, если оно появится.

Хочется сдать анализ на гепатит С? Расшифровка данного исследования на самом деле не такая уж и трудная. Но многое зависит от того, какой именно анализ будет сдаваться.

К каждому методу диагностики необходимо правильно подготовиться. К счастью, анализ на гепатит С никаких особенностей не имеет. Если речь идет о сдаче крови, необходимо просто делать это натощак. Придется не принимать пищу около 8-10 часов.

При сдаче мочи рекомендуется за несколько дней до сбора биологического материала отказаться от жирной и жареной пищи и вредных привычек. Потребуется принести в лабораторию первую утреннюю урину. Именно она является наиболее информативной. Больше никаких особенностей подготовка к исследованиям не имеет.

Теперь немного о каждом типе анализа и его расшифровке. Что должно насторожить человека в том или ином случае? Желательно не заниматься самолечением и самодиагностикой. Как уже было сказано, опытные врачи смогут быстро определить наличие гепатита С у пациента. Но по каким признакам?

Начнем с общих анализов крови и мочи. Как было подчеркнуто ранее, цвет урины меняется. Он темнеет. А какие еще изменения могут быть заметны?

Для этого необходимо изучить результаты проведенных исследований. При гепатите C наблюдаются следующие изменения (преимущественно в анализе крови):

• уменьшаются такие составляющие, как гемоглобин, лейкоциты и тромбоциты;
• лимфоциты повышаются;
• наблюдается нарушение свертываемости крови;
• увеличивается СОЭ.

Также в моче может быть обнаружен уробелин. Данное вещество указывает на наличие нарушений в работе печени. И не более того.

Как обнаружить маркеры гепатита С? Расшифровка анализов поможет понять, есть ли у человека данное заболевание. После общих исследований необходимо сдать кровь на биохимию. Это расширенный метод диагностики большинства болезней.

При гепатите C наблюдаются следующие изменения:

• ферменты печени повышаются (АЛТ и АСТ);
• повышается уровень глутамилтранспептидазы щелочной фосфатазы;
• билирубин возрастает;
• альбумины снижаются;
• гамма-глобулины повышаются;
• триглицериды в крови увеличиваются.

Именно так будет меняться биохимический анализ крови при гепатите С. Расшифровка подобного плана действительно помогает судить о наличии заболевания. А какие существуют нормы перечисленных веществ? Какие ограничения помогают судить о повышении или понижении той или иной составляющей?

В целом ситуация складывается неоднозначная. На сегодняшний день у мужчин и женщин в крови содержится разное количество перечисленных составляющих. Человек сдал на гепатит С анализы? Расшифровка (норма веществ) биохимии крови будет такой:

• ферменты печени у мужчин должны содержаться в количестве до 41 МЕ/л, у женщин — до 31 МЕ/л;
• уровень содержания глутамилтранспептидазы щелочной фосфатазы не превышает 150 МЕ/л;
• желтый пигмент в норме — до 27-34 мкмоль/л.

Именно на такие нормы необходимо ориентироваться человеку. При сдаче крови на биохимический анализ в частных клиниках предельные значения нормы обязательно будут указаны непосредственно в результатах.

Следующий весьма информативный тест — это проведение анализа ПЦР. Данный вариант предлагает количественный анализ на гепатит С. Расшифровка исследования подразумевает поиск клеток вируса даже при их минимальной концентрации. Точный результат можно получить уже через 5 дней с момента предполагаемого инфицирования.

Немного о расшифровке. Если результат проведенного анализа положительный, это значит, что гепатит С имеется в организме. На момент забора крови из вены заболевание находится в активной фазе.

Особенностью ПЦР-диагностики является то, что она может быть как качественной, так и количественной. Существенной разницы в этом нет. Расшифровка результатов будет одинаковой. Если будет обнаружен гепатит С (качественный анализ), расшифровка результата исследования укажет на положительную реакцию. То есть тест окажется положительным. В противном случае он будет отрицательным.

Теперь немного о количественном анализе ПЦР на гепатит С. Дело все в том, что такой вариант выбирается после обнаружения клеток заболевания в крови. Он помогает устанавливать степень развития болезни. Прекрасный способ подбора правильного лечения.

Найден вирус гепатита С? Количественный анализ, расшифровка которого будет приведена ниже, показывает степень вирусной нагрузки на организм. Она может быть высокой и не очень.

Так, если качественный ПЦР-анализ положительный, рекомендуется отдать предпочтение количественному. Он поможет понять, как правильно лечить человека.

В расшифровке анализов будет подразумеваться объем РНК HVC, содержащийся в крови. Если результаты показали 400 000 МЕ/л, то такой результат можно считать средним. Соответственно, показания ниже указанного минимума — это низкая вирусная нагрузка. А при значении количественного анализа на гепатит С выше 800 000 МЕ/л, предполагается сильная нагрузка заболевания на организм.

Помимо всего прочего, можно определить антитела к гепатиту С. Расшифровка анализа сводится к указанию антител не только ко всем типам изучаемого заболевания, но и к печеночным антигенам.

Такой вариант диагностики может проводиться как в виде обычного исследования, так и посредством экспресс-теста. Для последнего используют как кровь, так и слюну. При окрашивании полоски в определенный цвет (согласно инструкции), можно говорить о наличии антител к гепатиту C у человека. Преимуществом экспресс-тестов является то, что их разрешается выполнять на дому.

Обычно расшифровка исследования сводится к указанию наличия/отсутствия антител к изучаемому заболеванию. Если пришел положительный результат, в организме они имеются. В противном случае говорить о наличии антител к гепатиту и печеночным клеткам нельзя.

Теперь понятно, как подготовиться к той или иной диагностике, а также каким образом расшифровать результаты проведенных исследований. На самом деле все намного проще, чем кажется.

Наиболее простым решением при наличии изучаемого заболевания является анализ крови при гепатите C. Расшифровка ПЦР-диагностики (самый информативный способ) сводится к определению наличия/отсутствия вируса, а также к выяснению его нагрузки на организм. Ничего трудного в этом нет.

Как правило, все перечисленные методы диагностики могут оказаться ложноположительными или ложноотрицательными. Поэтому рекомендуется при подозрениях на гепатит сдать несколько разных анализов. Только так удастся 100% подтвердить результаты.

На практике неверные итоги диагностики встречаются не очень часто. Обычно они возникают при нарушении процедуры забора биоматериала для дальнейшего исследования. Например, при загрязнении мочи или крови. Если в крови есть гепарин, результаты могут прийти неверные. Химические или белковые субстанции — это еще несколько причин, по которым анализ на гепатит С не позволяет точно понять, болен ли человек. При подозрительных результатах рекомендуется повторить исследование через некоторое время.

источник

Заболевания печени в современном мире очень актуальны, ведь этот орган подвержен негативному влиянию со стороны окружающей среды, неправильного образа жизни и т.д.

Но есть такие заболевания, которыми заразиться может абсолютно каждый, и предугадать, произойдет это или нет – крайне сложно. Это, например, вирусные гепатиты, которые передаются в основном через кровь и изначально не дают о себе знать. В частности, речь идет о С-гепатите.

То, что вирус изначально не подает особых признаков серьезно затрудняет постановку диагноза, но, тем не менее, существуют достаточно эффективные и разнообразные исследования, которые помогут точно указать на проблему.

Основной принцип обнаружения заболевания HCV – расшифровка анализов на гепатит С, то есть сравнение определенных показателей с нормами.

Диагностику гепатита С проводят людям по разным причинам, в основном это:

• подозрение на возможный гепатит;
• человек находится в группе риска;
• диагностика обязательна в виду специфики работы;
• женщинам во время беременности или при планировании.

Видов диагностик несколько: какие-то из них – это поверхностные исследования, другие – глубокие и высокоточные, принцип которых – изучение минимальных отклонений нормальных показателей или обнаружение специфических веществ.

Для обнаружения вируса гепатита С в крови человека используют 3 вида диагностических методов, это:

1. Иммуноферментный анализ (ИФА). Проводится в лаборатории, принцип заключается в определении антител к гепатиту, в частности: IgG, IgM. Эта диагностика не даст развёрнутого ответа: болен человек или нет, ведь у трети носителей антитела не обнаруживаются. Происходит это из-за промежутка между попаданием в тело вируса и выработкой к нему антител, поэтому это сомнительный и очень поверхностный анализ.
2. Рекомбинантный иммуноблотинговый анализ. Его проводят лишь для подтверждения лабораторного исследования, если результат положительный, значит, человек является или являлся переносчиком заболевания. Антитела к вирусу не выводятся сразу даже после успешного лечения гепатита. Кроме того, возможен ложный результат из-за некоторых сторонних факторов.
3. Полимеразный (ПЦР) анализ. Какой самый точный метод в определении гепатита? – однозначно ПЦР. Является самым молодым и самым высокоточным способом диагностики. Именно ПЦР может дать развернутый ответ о протекании заболевания, позволяет установить концентрацию вируса в крови и его генотип (всего их 6). Принцип основывается на обнаружении ДНР/РНК вируса в плазме крови. Этот метод обходит все вышеперечисленные по качеству диагностики: до клинических проявлений гепатита должно пройти минимум 20, максимум – 120 суток, до выработки антител – 10-12 недель после проникновения вируса. А вот обнаружение в крови возбудителя никак не может оказаться ложным, единственное ограничение: с момента заражения должно пройти 5 суток, ведь в исследуемом объеме крови вируса может еще не быть.

ПЦР проводят для точной постановки диагноза, бывает он трех подвидов:

1. Качественный анализ. С его помощью определяют только наличие вируса.
2. Количественная диагностика. Используется для определения точного содержания вируса в объеме крови; при лечении используется для проверки эффективности.
3. Генотипическая диагностика. Используется для определения генотипа, а в последствии и фенотипа вируса. Знать генотип возбудителя крайне важно для терапии, ведь в зависимости от особенностей меняется курс и концентрация приема препаратов.

В методах диагностики важную роль играют дополнительные анализы, которые, порой, полностью изменяют особенности лечения, а иногда могут указать даже на другой диагноз.

Биохимический анализ

Для того, чтобы правильно назначит лечение и не усугубить картину, нужно достоверное определить степень поражения печени, для этого используют биохимический анализ крови, который покажет отклонения от нормы в её составе.

Изменения характеризуют особенности поражения печеночной ткани, это: стадия заболевания, тяжесть фиброза, нарушения работы печени. Биохимический метод покажет реальные цифры содержания в крови билирубина, белка, мочевины, креатинина, сахара, АСТ и АЛТ, щелочной фосфатозы, железа и гамма-глютамилтрансспептидазы. Кроме того, будет определен липидный профиль и качество белкового обмена.

Фиброзо-диагностика

Фиброз – поражение тканей печени, от его степени зависит особенности курса, поэтому диагностика тяжести поражения тканей очень важна. Судя по картине протекания заболевания, врач может судить о срочности лечения: если ситуация некритичная, его могут даже отложить, чтобы не наносить препаратами вред другим органам.

Другие анализы

Иногда, для того чтобы получить полную картину болезни, используют УЗИ брюшной полости и щитовидной железы, общий анализ крови. Людям преклонного возраста проводят диагностику сердечно-сосудистой и пищеварительной системы, легких.

Если возможности провести стандартные ИФА/ПЦР-анализы нет, проходят специфические: анализ слюны и других жидкостей на наличие возбудителя.

Технологии проведения диагностики на гепатит С находятся на высоком уровне и, зачастую, не выдают ложных результатов.

Несмотря на это, невозможно предоставить 100%-ю гарантию точности: возможны ложно-положительные результаты.

Дать неправильный ответ исследование крови может в случае несоблюдения правил анализа или при некоторых других факторах. Основные причины искажения результатов:

• некоторые специфические инфекции, что реагируют с экранирующими веществами и тест оказывается положительным;
• исследование при беременности;
• наличие в организме побочных веществ;
• нарушение работы иммунной системы;
• нарушение правил забора крови.

Расшифровкой анализов на гепатит занимается опытный специалист, который определит отклонения от нормы каждого из показателей и напишет заключение насчет вероятности гепатита.

При диагностике методами ИФА, обнаружение антител в крови будет безошибочно говорить о том, что в теле человека есть или был вирус гепатита: либо пациент болен сейчас, либо перенес болезнь и антигены просто не успели вывестись из организма. Следует помнить, что антитела врабатываются не сразу – должно пройти определенное время, чтобы такой анализ дал достоверные результаты, поэтому при необходимости нужно повторно сдать кровь на проверку.

Если диагностика ПЦР дала положительный ответ, то с вероятностью 99% в организме находится возбудитель. В этом случае нужно определить степень тяжести и провести генотипирование rna для коррекции курса, а затем неотложно начинать лечение, чтобы гепатит не перерос в хронический. Данные полимеразных анализов считаются очень точными, ведь способны выявить вплоть до 1 представителя вируса в клетке. Если норма протекания полимеразной цепной реакции не нарушена – значит ответ отрицательный и волноваться не стоит.

При установлении гепатита С используют количественное определение показателей билирубина, АЛТ и АСТ, белков. Их содержание так же говорит о степени и тяжести заболевания.

Общая таблица показателей веществ в крови, которые могут указывать на С-гепатит после биохимического анализа:

Если был проведен количественный тест на гепатит, то его результаты скажут о наличии острого или хронического гепатита С, его тяжести и скорости размножения вируса. Возможные результаты:

Чтобы диагностика была максимально правдивой, нужно соблюдать определенные правила: за несколько дней до сдачи забора крови нужно исключить жареную и жирную пищу, запрещается пить соки, чай и кофе, употреблять сахар. Недопустимо проведение исследований после физиопроцедур и лучевой диагностики. Ну и главный вопрос: влияет ли алкоголь на достоверность результатов? – да, влияет, причем кардинально – результат может абсолютно не соответствовать действительности.

У взрослых людей сформировался стереотип, что гепатит С неизлечим, но это не так, уже есть методы лечения, которые позволяют убить вирусы гепатита в теле человека на ранних и средних стадиях.

При недолжном внимании, гепатит С приводит к очень трагичным последствиям, это рак (43%)и цирроз печени (57%), поэтому ранняя диагностика и правильная расшифровка анализа крови hcv – залог успешного излечения.

Бывают ситуации, когда уже нельзя полностью вылечить гепатит и человек навсегда останется его носителем, поэтому приступать к лечению нужно как можно раньше.

Норма АЛТ и АСТ в крови: расшифровка анализов и повышенные значения АЛАТ И АСАТ.

источник

Ведущий метод диагностики воспаления печени — количественный анализ на гепатит С. Определение болезни подразумевает проведение количественного, качественного анализа с проверкой генотипа вируса, что дает возможность определить основные параметры течения заболевания. Ввиду способности к мутации требуется точное и своевременное диагностирование с правильно расшифровкой данных для разработки терапевтической схемы.

С 2012 года болезнь гепатита C официально считается полностью излечимым заболеванием. Но для этого важна своевременная диагностика.

Полимеразная цепная реакция или же ПЦР — метод, позволяющий выявить гепатит на начальных стадиях. Чувствительность немного ниже ИФА. Метод определяет ДНК- фрагменты вируса в пробе крови пациента даже в малых количествах. Исходя из этого врач правильно вычисляет именно возбудителя инфекции, а не его продукты жизнедеятельности. По результатам анализа ПЦР есть возможность выявить даже следы вируса и его генотип.

В ПЦР выделяют 3 вида анализа:

• Качественный. ПЦР гепатита С, который основывается на поиске иммуноглобулинов (антител) типа M и G, характеризующих факт заражения. Анализ может выдать — «не обнаружено», что будет считаться нормой.
• Количественный. Подтверждает диагноз, позволяет контролировать лечение, указывает на риск заражения других людей. Определяется количество в международной системе единиц — МЕ/мл. Показатель рассчитывается из количества РНК-вируса в 1 мл пробы крови. Высокий результат указывает на повышенный риск инфицирования других людей.
• Генотипирование. Метод, основывающийся на выявлении генотипов HCV, которых насчитывается 7.

Перед сдачей крови на проверку важно придерживаться правил:

• За 8 часов до анализов в последний раз покушать.
• Не пить спиртного за 2 дня, желательно не курить в это время или хотя бы за 1—2 часа до.
• Сообщить о приеме лекарств.

Вернуться к оглавлению

Для проведения количественного метода исследования нужен ряд показаний, без которых эта диагностика невозможна. К ним относится:

• выявление качественным анализом антител РНК-вируса;
• присутствие хронического или острого вида заболевания;
• планирование тактики лечения;
• обнаружение микст-гепатитов при диагностировании.

Вернуться к оглавлению

Определение концентрации патогена — суть исследования. Диагностика определяет степень тяжести заболевания, что позволяет полностью увидеть клиническую картину болезни. С помощью это вида ПЦР обнаруживают, какая вирусная нагрузка при гепатите С. После проведения расшифровки полученных данных анализа, врачи назначают лечение, в ходе которого делают забор крови на 4, 12, 16 и 24-й неделях. По завершении 12-й должно быть улучшение, в обратном случае метод лечения стоит заменить.

Найденное в крови количество HCV, влияет на вероятность, с которой вирус гепатита передается окружающим — чем выше, тем больше вероятность. За счет этой процедуры составляется правильный план дальнейшего лечения. Полученные в ходе процедуры результаты измеряются в единицах МЕ/мл и копий/мл. Расшифровать показатели можно только после пересчета полученного количества с учетом коэффициента (КП). Есть 2 метода:

• HCV Monitor с КП в МЕ — 2,7;
• LCX HCV RNA с КП — 3,8.

При гепатите С проводится все три исследования ПЦР. Алгоритм диагностики состоит в следующем:

1. Общие клинические исследования («стандартный набор» – кровь, моча, биохимия и печеночные пробы), дополнительно могут назначать ревматоидные тесты и ряд других анализов при подозрении на аутоиммунные процессы;
2. Серологическое исследование (ИФА) на выявление антител к возбудителю гепатита С. Изначально показан тест Anti-HCV Total.
3. Качественная ПЦР, предназначена для подтверждения результатов ИФА.
4. Количественная ПЦР, выполняется при подтвержденном диагнозе HCV-инфекции.
5. Генотипирование, также проводится при установленном факте заражения.

Если человек желает самостоятельно обследоваться на гепатит С, рекомендуют сдавать ИФА. Дальнейшие обследования проводят в зависимости от полученных результатов. Если ИФА отрицательный и человек не предъявляет никаких жалоб, повторное тестирование проходят через год. Но при наличии симптомов патологии (в том числе и неспецифических, например, сильная слабость, утомляемость, боли в правом подреберье) следует сдать качественную ПЦР.

В целом, техника выполнения ПЦР по большому счету одинакова, как для качественного, так и количественного исследования. Образец биологического материала смешивают с тест-раствором, который содержит специальные соединения. Их роль состоит в стимуляции деления РНК патогена (причем строго специфичного генетического материала возбудителя).

В результате концентрация HCV достигает лабораторно определяемого уровня. На данном этапе возможно проведение качественного анализа. Однако после сложных подсчетов (обычно для этих целей используют компьютерные программы) устанавливают количественный показатель содержания HCV. После этого полученный результат переводят в Международные Единицы и фиксируют в лабораторном бланке.

В некоторых случаях вместо ПЦР используют другие методики – разветвленной ДНК и транскрипционной амплификации. Но из-за сложности выполнения и более низкой чувствительности большинство специалистов предпочитают выявлять количественные нормы гепатита С именно при помощи ПЦР.

Сейчас практически в любой частной лаборатории пациент может пройти обследования без каких-либо бумаг и направлений от терапевта. Количественное определение вируса гепатита С в крови не является исключением. Вопрос в том, когда целесообразна сдача теста?

Гепатологи рекомендуют проведение исследования в таких случаях:

• позитивный ИФА + положительная ПЦР;
• негативный ИФА + положительная ПЦР.

Кроме того, количественное определение HCV показано и в ходе противовирусной терапии. Врач сравнивает результаты виремии, полученные до начала курса приема медикаментов, с результатами тестирования, проведенного уже во время лечения. Нормой считается негативная ПЦР к 12 неделе применения препаратов. А предиктором 100% выздоровления считают отсутствие виремии уже через месяц терапии.

Тестирование продолжают и после окончания лечения для исключения риска рецидива. Пациент должен сдавать такой тест на протяжении еще 2 лет. При отрицательном результате говорят о выздоровлении. Больного снимают с учета у гепатолога или инфекциониста и дают общие рекомендации относительно восстановления состояния печени.

Если спустя 2 года количественный тест на HCV вновь положителен, все исследования повторяют заново. В таком случае предполагают повторное инфицирование и, возможно, другой генотип вируса. Но требуется новая схема лечения, а вероятность благополучного исхода существенно ниже.

Сроки выполнения количественного определения вирусной нагрузки при подтвержденной HCV-инфекции указаны в таблице.

Сама методика постановки ПЦР менее чувствительна к особенностям функционирования внутренних органов, иммунной системы. Однако это не исключает соблюдения правил подготовки к проведению теста. В большинстве случаев количественный тест проводится при уже подтвержденном диагнозе гепатита С.

Это подразумевает как минимум отказ от алкоголя и соблюдение строгой диеты (по столу №5 или №5а в зависимости от тяжести состояния больного). Лечащий врач уже ознакомлен с анамнезом, знает, какие лекарственные средства принимает пациент и от каких патологий страдает. Это облегчает расшифровку анализа ПЦР и снижает вероятность постановки ошибочного диагноза.

Но чтобы получить максимально точный результат необходимо:

• сдавать кровь натощак (после ужина должно пройти не менее 12 часов, завтрак противопоказан);
• посещать лабораторию следует в первой половине дня;
• до сдачи крови нельзя есть и пить что-либо кроме воды;
• нельзя курить за 8–10 часов до исследования.

Перечисленные правила нужно соблюдать перед каждой проверкой на количественное содержащие патогена. Если исследование проводят после лечения и врач разрешил ослабления в диете, за 7–10 дней до проведения тестирования необходимо вновь вернуться к строгому режиму питания. Что касается спиртного, ограничения сохраняются на протяжении всей жизни.

Ранее отечественные специалисты делили виремию на несколько групп: очень низкую, низкую, умеренную, высокую и очень высокую. Но в настоящее время расшифровка анализа крови на гепатит С проводится в соответствии с международными нормами. Сейчас виремию делят только на 2 группы. В таблице указаны вероятные данные количественного анализа на гепатит С (окончательная расшифровка вне зависимости от показателей должна проводиться врачом).

Но только специалист может грамотно расшифровать количественное исследование на HCV и отличить показатели нормы от критических, свидетельствующих об отсутствии результата от противовирусной терапии либо о рецидиве инфекции. Все анализы должны быть подшиты в амбулаторную карту, чтобы у доктора была полная информация об активности вирусной инфекции и ответной реакции на прием таргетных медикаментов.

Показатели нормы при расшифровке количественного анализа на гепатит С бывают только тогда, когда результат ПЦР отрицателен, то есть РНК вируса во взятом образце крови отсутствует. В остальных случаях наличие патогена свидетельствует о заражении.

При подтверждении диагноза количественные показатели крови при гепатите С служат основой для оценки степени активности вирусного процесса. Высокая виремия повышает вероятность осложнений и сокращает срок наступления необратимых изменений в печени.

Вирусологическая нагрузка, превышающая 800 000 МЕ/мл служит основанием для проведения ряда инструментальных обследований:

• эластографии – диагностического метода для определения степени фиброза (разрастания и размеров очагов соединительной ткани);
• томографии – подробное рентгенологическое исследование, позволяющее исключить либо подтвердить наличие злокачественных или доброкачественных новообразований;
• биопсии печени, которая дает максимально полную информацию о структурных изменения в органе.

Низкая вирусная нагрузка говорит о медленно развивающейся вирусной инфекции. Такой процесс не исключает прогрессирования поражения печени, но вероятность возникновения тяжелого декомпенсированного цирроза или гепатоцеллюлярной карциномы низка. У такой категории пациентов редко возникают внепеченочные проявления гепатита С (кардиоваскулярные расстройства, аутоиммунные нарушения), что также повышает шансы не только успешной противовирусной терапии, но и быстрого общего восстановления.

При постановке диагноза назначают несколько исследований, таким образом ошибка в проведении тестирования исключается.

Основными маркерами при гепатите С служат:

1. Положительный результат иммуноферментного анализа. Но ИФА во многом зависит от состояния иммунной системы человека, поэтому на этапе первичной диагностики не исключают ложноположительный либо ложноотрицательный результат.
2. Коэффициент позитивности при гепатите С выше 1. Рассчитывается по титру антител. Иногда референсные значения могут отличаться в зависимости от используемой тест-системы, но физиологическая норма всегда указывается в бланке с результатами.
3. Положительный результат качественного теста ПЦР. Обнаружение РНК возбудителя патологии однозначно указывает на инфицирование.
4. Определяемая виремия методом количественной ПЦР.

Косвенными лабораторными признаками гепатита С служат:

• повышение уровня печеночных ферментов, билирубина;
• изменение уровня лимфоцитов, в некоторых случаях, лейкоцитов, ускорение СОЭ.

Но при ответе на вопрос, какие показатели крови указывают на гепатит С, доктора руководствуются результатами ПЦР, так как ИФА может быть непоказательным при наличии определенных заболеваний (ВИЧ, аутоиммунных расстройств). Также неверные результаты вероятны при беременности, приеме некоторых лекарств. Не последнюю роль играет и анамнез.

При гепатите С антитела, как и РНК обнаруживаются при помощи тест-систем не сразу, а спустя как минимум 10–14 дней. ИФА может дать достоверный результат позже – через 4–6 недель после инфицирования. Поэтому если есть серьезные основания предполагать контакт с кровью больного, при негативном результате все анализы имеет смысл повторить через 1–1,5 месяца.

В современных лабораториях тестирование проводят с соблюдением всех норм (в соответствии с требованиями отечественного и зарубежного законодательства), но исключить вероятность ошибок и ложных результатов нельзя.

Если на выполнение ИФА оказывает влияние состояние иммунной системы человека, правильность выполнения ПЦР зависит от:

• соблюдения стерильности при заборе, транспортировке и работе с образцами крови пациента, чтобы исключить возможный контакт с контаминированными образцами;
• соблюдения температурного режима и других правил при хранении и перевозке пробирок с кровью;
• правильности постановки ПЦР (начиная от работы лаборанта и заканчивая функционированием автоматических диагностических систем);
• качества используемых лабораторных материалов.

Но количественный анализ проводится на основании уже выполненных исследований, которые однозначно указывают на наличие HCV (ИФА и качественная ПЦР). Поэтому при отрицательном результате на фоне подтвержденного диагноза исследование повторяют. Кроме того, обращают внимание, как обозначается гепатит С в анализах.

В некоторых клиниках могут пользоваться устаревшей системой, когда виремия указывается не в международных единицах, а в количестве копий. Иногда путаница возникает с подсчетом нулей в указанных цифрах. Именно поэтому расшифровкой обозначений в бланке результатов должен заниматься врач.

Определение вирусной нагрузки возможно и с использованием других методик, включая серологические. Так, исследование на антиген core считают альтернативой количественной ПЦР.

Но большинство врачей отдают предпочтение ПЦР благодаря:

• доступности и качеству тест-систем: их производством занимаются ведущие мировые фармацевтические и медикотехнологические корпорации;
• быстроте и простоте выполнения;
• высокой чувствительности: современные методики ПЦР позволяют обнаружить РНК патогена в количестве 5 МЕ/мл;
• универсальности: количественное определение проводится одинаковыми методиками вне зависимости от генотипа HCV;
• объективности вне зависимости от состояния здоровья пациента (в отличие от ИФА), что позволяет проводить исследования на разных этапах диагностики и лечения;
• отсутствию влияния на результаты принимаемых лекарств.

Сейчас ПЦР остается основным методом количественного определения виремии. Тест используется повсеместно практически во всех лабораториях и больницах. Но во избежание ошибок, перед сдачей анализа нужно поинтересоваться, по какой технологии будет проводиться исследование, чтобы соотнести результаты дальнейших анализов.

источник

Учитывая бессимптомное течение и высокую вероятность передачи HCV-инфекции, большое значение имеет диагностика на ранних стадиях патологии. Наиболее точной считается постановка полимеразной цепной реакции. В отличие от методов выявления серологических маркеров, ПЦР мало зависит от сопутствующих заболевания и общего состояния организма пациента. Но если подтвержден вирус гепатита С, количественный анализ, расшифровка которого проводится врачом, обязателен.

HCV – тяжелое заболевание, требующее серьезной дорогостоящей и опасной побочными реакциями терапии. Поэтому диагноз никогда не ставят на основании результатов одного исследования. При подозрении на наличие вирусного заболевания пациенту приходится пройти несколько тестов. Но чтобы избежать лишних затрат и потери времени, анализы крови и инструментальные обследования проводят поэтапно.

Основные стадии диагностического процесса приведены в таблице:

Окончательный диагноз доктор ставит только по результатам, указанным во всех исследованиях. Некоторые препараты, например, гепатопротекторы, витамины показаны уже в начале диагностического процесса. Но таргетные противовирусные средства назначают после получения всех данных.

Техника проведения полимеразной цепной реакции известна достаточно давно и успешно используется для диагностирования ряда вирусных заболеваний, и HCV не является исключением.

В настоящее время существует несколько методик постановки ПЦР, но в принципиальном плане этот процесс состоит из нескольких этапов:

1. Разрушение двойной нити ДНК под воздействием нагревания либо определенных химических веществ.
2. Присоединение к разделенным основанием ДНК так называемых праймеров – остатков нуклеотидной цепи РНК вируса (в большинстве современных тест-систем используются 5`-NTR-области генома HCV).
3. Специфический фермент, ДНК-полимераза, распознает праймер, провоцирует присоединение других нуклеотидных остатков.

По окончании третьего этапа полимеразной цепной реакции ДНК между двумя праймерами удваивается, а впоследствии происходит амплификация участка генома в геометрической прогрессии (2–4–8 и т.д.).

Чувствительность современных тест систем составляет 10–50 копий РНК в 1 мл крови.

Расшифровка ПЦР на гепатит С должна проводиться квалифицированным специалистом. В соответствии с Международным стандартом ВОЗ для количественного определения вирусного генома служит образец плазмы крови в лиофилизированном виде, содержащий РНК первого генотипа вируса в концентрации 105 МЕ/мл.

При этом обращают внимание на количественные единицы, в которых выражены результаты исследований. Обычно количество копий РНК HCV указывают в абсолютном или логарифмическом выражении. Затем, в соответствии с международными стандартами, эту цифру пересчитывают при помощи специального коэффициента в международные единицы (МЕ). Таким образом конечные результаты обозначаются в МЕ/мл.

Для проведения количественного исследования применяют различные тест-системы и методики постановки полимеразной цепной реакции. Некоторые предназначены для оценки уровня виремии в плазме или сыворотке. Другие более эффективны и показательны при исследовании цельной крови.

Говорить о норме при интерпретации указанных в лабораторном бланке результатов не совсем корректно. Дело в том, что у здорового человека РНК вируса в организме отсутствует, а наличие частиц HCV вне зависимости от количественного показателя свидетельствует об инфицировании. В дальнейшем при помощи ПЦР оценивают эффективность лечения. При отрицательном результате на 4 неделе приема медикаментов, а затем и после окончания противовирусной терапии (на протяжении 48 недель) говорят о выздоровлении.

Проведение полимеразной цепной реакции предполагает определение не только наличия РНК HCV в крови, но и определение количества копий вируса и анализ структуры генома. Такие возможности делают ПЦР одним из наиболее информативных и точных методов диагностики вирусного гепатита C.

Все применяемые на практике методы постановки полимеразной цепной реакции приведены ниже в порядке проведения (каждый последующий тест назначают при положительном результате предыдущего):

1. Анализ ПЦР на гепатит С качественный, проводится только для обнаружения РНК вируса в крови.
2. Количественное исследование ПЦР. Расшифровка проводится согласно общепринятым нормам. В зависимости от результата вирусологическая нагрузка может быть низкой, умеренной или высокой. Данный показатель является одним из предикторов исхода терапии HCV.
3. Генотипирование (во многих частных лабораториях предлагается в комплексе с количественным анализом, что снижает общую стоимость). Обозначение генотипа HCV осуществляется одной из арабских цифр (с 1 по 6). На территории России чаще выявляют генотип 1 или 3, несколько реже – 2, 4–6 диагностируют в единичных случаях. Ранее при использовании интерфероновых схем лечения разновидность HCV определяла длительность и эффективность терапии. Современные противовирусные средства отличаются широким спектром действия, но некоторые из них прописывают только при 1–4 генотипах HCV.

Генотипирование проводится только один раз, перед началом терапии. По мере приема медикаментов количественные нормы гепатита С необходимы врачу для оценки эффективности противовирусных препаратов. После окончания курса лечения проводят качественное исследование ПЦР.

Количественный анализ методом ПЦР проводится для определения вирусной нагрузки. Под этим термином подразумевают количество копий РНК возбудителя в 1 мл крови.

Благодаря такому исследованию врач сможет оценить ряд факторов, играющих ключевую роль как в самом течении заболевания, так и исходе терапии. Это:

• вероятность развития осложнений (цирроза и гепатоцеллюлярной карциномы), так как чем активнее патологический процесс, тем выше риск появления патологий печени уже на начальных стадиях гепатита С;
• эффективность стандартной схемы терапии (в тяжелых случаях требуется дополнительное назначение противовирусных средств);
• риск для окружающих (особенно если пациент относится к социально благополучным слоям населения, имеет семью, детей);
• риск внепеченочных осложнений (развитие аутоиммунных заболеваний, поражения нервной, сердечно-сосудистой системы и т.д.).

Количественное определение РНК HCV важно и для контроля эффективности проводимого лечения. По мере продолжения приема противовирусных средств полученные цифры снижаются. Целью терапии является достижение отрицательного результата качественного анализа методом ПЦР.

До появления большого количества частных лабораторий, где пациент может сдать практически любой анализ без документов от врача, направление на выполнение количественной ПЦР давали на определенном этапе диагностики или лечения.

В соответствии с нормами и протоколами ВОЗ, показаниями к проведению такого исследования служат:

• положительные серологические маркеры HCV (anti-HCV Total, наличие иммуноглобулинов класса G и/или М);
• положительный результат качественной ПЦР;
• контроль проводимого лечения.

При желании пациент может самостоятельно обратиться в частную клинику и выполнить подобное исследование. Но при отсутствии гепатита С проведение такого лабораторного теста считают нецелесообразным.

Для определения вирусной нагрузки установлены следующие сроки:

• до начала терапии (возможно, одновременно с генотипированием);
• 4 неделя лечения (отрицательные данные свидетельствуют о быстром вирусологическом ответе и служат предикторами благоприятного исхода);
• последняя неделя терапевтического курса (12 или 24 в зависимости от подобранной схемы), негативный результат подтверждает эффективность терапии, позитивный требует продолжения лечения, но уже с применением других медикаментов;
• 24 и 48 неделя после окончания лечебного курса (вне зависимости от его продолжительности), отсутствие вирусной нагрузки подтверждает выздоровление.

Дополнительно исследование проводят только по показаниям (например, ухудшение самочувствия, ошибки в приеме таблеток, выявление сопутствующих инфекций и т.д.). Выполнение ПЦР не исключает необходимости в других анализах – клинических исследованиях крови и мочи, печеночных проб, УЗИ и прочих.

Чтобы расшифровка анализа ПЦР не была ошибочной, необходимо соответствующим образом подготовиться к забору крови. За некоторым исключением правила не отличаются от таковых при других исследованиях.

• сдавать кровь строго натощак (последний прием пищи за 12 часов до посещения лаборатории);
• процедуру проводить в первой половине дня (как можно раньше);
• в день анализа после пробуждения пить можно только воду; чай, кофе, газированные и/или сладкие напитки, соки и т.д. противопоказаны;
• за 3–5 часов до сдачи крови нельзя курить;
• если невозможно прервать прием каких-либо медикаментов, сообщить названия принимаемых лекарств лаборанту и врачу, который будет интерпретировать полученные данные.

Наличие гепатита С уже подразумевает полный отказ от спиртного и строгую диету (стол №5). Но если анализ проводится на этапе диагностики, за 5–7 дней до забора крови обязателен контроль питания с исключением тяжелых для печени продуктов и алкоголя.

Обычно, когда пациент получает на руки результаты анализов, в бланке приведены показатели нормы, полученные значения и краткая интерпретация. Однако расшифровка анализа крови на гепатит С должна проводиться только врачом. Количественная ПЦР – один из этапов диагностики, поэтому врач сопоставляет приведенные цифры с полученными ранее результатами.

В зависимости от полученных показателей определяется степень вирусной нагрузки или полное отсутствие РНК HCV в организме.

Если проведен количественный анализ на гепатит С, расшифровка проводится в соответствии с таблицей:

Чтобы точно расшифровать анализ и не допустить ошибочных результатов, оценивать данные количественной ПЦР можно только после выявления серологических маркеров качественной ПЦР. При ИФА обязательно указывается коэффициент позитивности. Также принимают во внимание данные ультразвукового обследования, эластографии и биопсии, если исследование проводилось.

Количественный анализ ПЦР проводят только в том случае, если положительны другие показатели крови при гепатите С.

Получение отрицательного результата возможно при:

• самостоятельном выздоровлении (в медицинской литературе приведена статистика, по которой порядка 15% случаев инфицирования HCV остаются незамеченными, иммунная система человека полностью устраняет вирус);
• раннем вирусологическом ответе (при оценке результатов в ходе противовирусной терапии);
• при ошибочных данных предыдущих исследований (маловероятно, так как предварительно обычно назначают ИФА, качественную ПЦР, печеночные пробы).

Когда сдается анализ на гепатит С для оценки вирусологической нагрузки, расшифровка проводится врачом. Считается, что показатели нормы – это полное отсутствие РНК HCV в крови. Но для исключения скрытой инфекции исследование рекомендуют повторить через несколько недель.

Перед началом диагностического обследования необходимо точно знать, какие показатели крови указывают на HCV. С одной стороны это позволит избежать пациенту лишних финансовых трат на ненужные анализы, с другой – сэкономит время.

Так, при гепатите С показательны такие данные:

• позитивный ИФА вне зависимости от класса обнаруженных антител; но данный параметр оценивают на фоне других результатов, так как некоторые особенности работы иммунной системы могут повлиять на правильность исследования;
• позитивная качественная ПЦР (чувствительность и специфичность метода достигает 100%);
• определение количества копий вируса при количественной ПЦР.

Косвенными признаками HCV является превышение норм печеночных трансаминаз, билирубина, лейкоцитоз, ускорение СОЭ, наличие билирубина в моче.

При расшифровке результатов принимают во внимание сокращения, как обозначается гепатит С в анализах. Обычно вирусную нагрузку указывают в МЕ/мл или IU/ml, а РНК вируса английской аббревиатурой RNA HCV.

В отличие от ИФА вероятность ложного результата ПЦР практически нулевая. Ошибки возможны только в результате человеческого фактора, то есть при нарушении правил забора крови, хранения образцов и непосредственно проведении исследования.

Специалисты в области гепатологии подчеркивают, что количественная ПЦР не имеет аналогов и является одним из основных исследований для пациентов с HCV. Механизм проведения анализа сводит к минимуму вероятность ложноположительных или ложноотрицательных результатов.

Для получения результатов требуется несколько дней. Забор крови не требует особой подготовки, возможен практически в любой клинической лаборатории и не сопровождается какими-либо значимыми болевыми ощущениями. Но основным преимуществом такого анализа является высокая точность, достигающая 100%.

источник