Что значит неопределенный анализ на гепатит

Коварство вирусных заболеваний, таких как гепатиты, заключается в том, что заражение происходит вмиг, но больной долгое время может даже не догадываться о том, что он инфицирован. Точно диагностировать болезнь и подобрать необходимую терапию помогают вовремя сделанные анализы. Давайте поговорим о них более подробно.

Под гепатитом понимают воспалительное заболевание печени. Оно может иметь как острую, так и хроническую форму. Чаще всего встречаются болезни вирусного характера. На сегодняшний день известно семь основных разновидностей вирусов гепатитов – это группы A, B, C, D, E, F и G. Однако, независимо от типа вируса, на начальном этапе болезнь протекает схоже: неприятные ощущения в правом подреберье, температура, слабость, тошнота, ломота во всем теле, потемнение мочи, желтуха. Все эти симптомы являются поводом для сдачи анализа на гепатит.

Следует знать, что заболевание может передаваться разными способами: через зараженную воду и пищу, через кровь, слюну, половым путем, при использовании чужих средств гигиены, в том числе бритвы, полотенца, маникюрных ножниц. Поэтому если симптомы не проявляются (а инкубационный период может длиться до двух месяцев и даже более), но у вас имеются предположения, что вы можете быть заражены, то тест на гепатит нужно сделать как можно скорее.

Кроме того, регулярно сдавать подобные анализы необходимо медицинским работникам, сотрудникам служб безопасности, специалистам по маникюру и педикюру, стоматологам, словом – всем, чья повседневная работа связана с соприкосновением с биологическими материалами других людей. Также тест показан специалистам, чья профессиональная деятельность сопряжена с поездками в экзотические страны.

Вызывается РНК-вирусом семейства Picornaviridae. Вирус передается через бытовые предметы и продукты питания, поэтому заболевание также называют «болезнь грязных рук». Симптоматика типичная для любого вида гепатита: тошнота, температура, боль в суставах, слабость. Затем проявляется желтуха. Инкубационный период длится в среднем 15–30 дней. Различают острую (желтушную), подострую (безжелтушную) и субклиническую (бессимптомную) формы болезни.

Выявить гепатит А позволяет анализ Anti-HAV-IgG (антитела класса IgG к вирусу гепатита А). Также данный тест помогает определить наличие иммунитета к вирусу гепатита А после вакцинации, это исследование особенно необходимо во время эпидемий. При клинических признаках гепатита А, контактах с больным, холестазе (нарушение оттока желчи) назначают Anti-HAV-IgM (антитела класса IgM к вирусу гепатита А). При этих же показаниях делают тест на определение РНК-вируса в сыворотке крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в плазме крови.

Вызывается вирусом HBV из семейства гепаднавирусов. Возбудитель очень устойчив к высоким и низким температурам. Гепатит В представляет серьезную опасность: около 2 миллиардов людей в мире инфицированы этим вирусом, а более 350 миллионов – больны им.

Заболевание передается через колюще-режущие предметы, кровь, биологические жидкости, при половых контактах. Инкубационный период может длиться от 2 до 6 месяцев, если в этот период не выявить и не начать лечить заболевание, то оно из острой может перейти в хроническую стадию. Течение болезни проходит со всеми симптомами, характерными для гепатита. В отличии от гепатита А при гепатите В нарушение функций печени носит более выраженный характер. Чаще развиваются холестатический синдром, обострения, возможны затяжное течение, а также рецидивы болезни и развитие печеночной комы. Нарушение правил гигиены и незащищенные случайные половые контакты являются поводом для проведения теста.

Для выявления этого заболевания назначают количественный и качественный тесты на определение HBsAg (Hepatitis B surface antigen, HBs-антиген, поверхностный антиген вируса гепатита B, австралийский антиген). Интерпретация показаний количественного анализа такова: и = 0,05 МЕ/мл – положительно.

Вирусное заболевание(ранее назывался «гепатит ни А, ни В»), передающееся через зараженную кровь. Вирус гепатита С (ВГC) относится к флавивирусам. Он весьма устойчив во внешней среде. Три структурных белка вируса имеют сходные антигенные свойства и обусловливают выработку антител anti-HCV-core. Инкубационный период заболевания может длиться от двух недель до полугода. Болезнь очень распространена: в мире около 150 миллионов человек инфицированы вирусом гепатита С и подвергаются риску развития цирроза или рака печени. Ежегодно более 350 тысяч человек умирают от связанных с гепатитом С болезней печени.

Гепатит С коварен тем, что может скрываться под видами других болезней. Желтуха при данном виде гепатита проявляется редко, повышение температуры тоже наблюдается не всегда. Отмечались многочисленные случаи, когда единственными проявлениями болезни были хроническая усталость и психические расстройства. Известны также случаи, когда люди, являясь носителями и переносчиками вируса гепатита С, годами не испытывали никаких проявлений болезни.

Диагностировать заболевание можно с помощью качественного анализа Anti-HCV-total (антитела к антигенам вируса гепатита C). Количественное определение РНК-вируса делается методом ПЦР. Результат интерпретируется следующим образом:

• не обнаружено: РНК гепатита С не выявлена или значение ниже предела чувствительности метода (60 МЕ/мл);
• 108 МЕ/мл: результат положительный с концентрацией РНК гепатита С более 108 МЕ/мл.

В группу риска возникновения рака печени относят больных гепатитом В и С. До 80% случаев первичного рака печени во всем мире фиксируется у хронических носителей этих форм заболевания.

Развивается только при наличии вируса гепатита B. Способы заражения аналогичны гепатиту В. Инкубационный период может длиться от полутора месяцев до полугода. Заболевание часто сопровождается отеками и асцитом (брюшной водянкой).

Болезнь диагностируется с помощью анализа на определение РНК-вируса гепатита D в сыворотке крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме реального времени, а также анализом на антитела класса IgM (Hepatitis delta virus, IgM antibodies, anti-HDV IgM ). Положительный результат теста означает наличие острой инфекции. Отрицательный результат теста фиксирует ее отсутствие либо ранний инкубационный период заболевания или позднюю стадию. Тест показан пациентам, у которых выявлен гепатит В, а также колющимся наркоманам.

Вакцинация против гепатита В защищает от заражения гепатитом D.

Инфекция часто передается через продукты и воду. Вирус нередко обнаруживается у жителей жарких стран. Симптомы схожи с гепатитом А. В 70% случаев болезнь сопровождается болевым синдромом в правом подреберье. У больных расстраивается пищеварение, ухудшается общее самочувствие, затем начинается желтуха. При гепатите Е тяжелое течение болезни, приводящее к смерти, встречается чаще, чем при гепатитах А, В и С. Исследование рекомендуется делать после посещения стран, где распространен этот вирус (центральная Азия, Африка).

Заболевание выявляется при проведении теста Anti-HEV-IgG (антитела класса IgG к вирусу гепатита Е). Положительный результат означает наличие острой формы заболевания либо свидетельствует о недавно проведенной вакцинации. Отрицательный – об отсутствии гепатита Е или о выздоровлении.

Этот тип заболевания на данный момент мало изучен, а сведения, собранные о нем, противоречивы. Возбудителей болезни два, один можно обнаружить в крови, другой – в фекалиях человека, которому было сделано переливание зараженной крови. Клиническая картина – такая же, как и при заболевании другими типами гепатита. Лечение, которое было бы направлено непосредственно на сам вирус гепатита F, пока не разработано. Поэтому проводится симптоматическая терапия.

Помимо анализа крови, для выявления этой болезни исследуют мочу и кал.

Развивается только при наличие других вирусов этой болезни – В, С и D. Он встречается у 85% наркоманов, вводящих психотропные вещества непродезинфецированной иглой. Также возможно заражение при нанесении татуировок, прокалывании ушей, иглоукалывании. Передается заболевание и половым путем. Долгое время оно может протекать без выраженной симптоматики. Течение болезни во многом напоминает гепатит С. Исходами острой формы заболевания могут быть: выздоровление, формирование хронического гепатита или длительное носительство вируса. Сочетание с гепатитом С может привести к циррозу.

Выявить болезнь можно с помощью анализа на определение РНК (HGV-RNA) в сыворотке крови. Показанием для проведения теста являются зафиксированные ранее гепатиты С, В и D. Также тест необходимо пройти наркоманам и тем, кто с ними контактирует.

Для анализов на все виды гепатита берут кровь из вены. Забор крови производится утром натощак. Специальной подготовки процедура не требует, однако накануне следует воздержаться от физических и эмоциональных перегрузок, отказаться от курения и употребления алкоголя. Обычно результаты тестов бывают готовы через сутки после забора крови.

Анализы на выявление гепатитов могут быть качественными (они указывают на наличие или отсутствие вируса в крови) или количественными (устанавливают форму заболевания, помогают контролировать течение болезни и эффективность терапии). Интерпретировать анализ и ставить диагноз на основании теста может только врач-инфекционист. Однако давайте в общих чертах рассмотрим, какими бывают результаты тестов.

Подобный результат говорит о том, что вируса гепатита в крови не обнаружено – качественный анализ показал, что тестируемый здоров. Ошибки быть не может, так как антиген проявляется в крови уже во время инкубационного периода.

Говорить о хорошем результате количественного анализа можно в том случае, если количество антител в крови ниже пороговой величины.

В случае положительного результата через некоторое время (по усмотрению врача) проводится повторный анализ. Дело в том, что повышенное содержание антител может быть вызвано, например, тем, что пациент недавно перенес острую форму гепатита, и антитела в крови все еще присутствуют. В иных случаях положительный результат свидетельствует об инкубационном периоде, наличии острого или вирусного гепатита или подтверждает то, что пациент является носителем вируса.

Согласно российскому законодательству, информация о положительных результатах серологических исследований на маркёры парентеральных вирусных гепатитов передается в отделы учета и регистрации инфекционных заболеваний соответствующих центров Госсанэпиднадзора.

В случае если тест был проведен анонимно, его результаты не могут быть приняты для оказания медицинской помощи. При положительном результате теста следует обратиться к врачу-инфекционисту для назначения дальнейшего обследования и проведения необходимой терапии.

Гепатит не приговор, в большинстве случаев острая форма заболевания полностью излечивается, хронический гепатит, при соблюдении определенных правил, кардинально не меняет качества жизни. Главное – вовремя обнаружить вирус и начать борьбу с ним.

В частных клиниках Москвы можно сдать анализы на выявление и конкретизацию вируса гепатита. Так, качественный анализ на гепатит А стоит в среднем 700 рублей, столько же на гепатит В; а вот количественный тест на поверхностный антиген вируса гепатита B обойдется примерно в 1300 рублей. Определение вируса гепатита G – в 700 рублей. А вот более сложный анализ, количественное определение РНК вируса гепатита С методом ПЦР, стоит около 2900 рублей.

В настоящее время не существует затруднений в проведении диагностики гепатитов, тем более в центральных областях развитых стран. А вот чтобы избежать подобных болезней, не стоит пренебрегать правилами личной гигиены. Также следует помнить о том, что случайные сексуальные контакты могут стать причиной болезни. Лучшей защитой от возможных заболеваний станет вакцинация – против большинства вирусов гепатита она давно и успешно практикуется.

источник

Основной источник заражения гепатитом С – больной человек. Иногда тот, кто является носителем вируса, не проявляет клинические симптомы гепатита ц. Путь заражения гепатовирусом – через кровь. Это может произойти при любом контакте крови зараженного человека с кровью здорового человека. Чаще всего заражаются следующим образом:

• дети от матери при родах;
• медицинские работники во время проведения манипуляций;
• у взрослых чаще всего гепатит проникает в кровь из-за посещения маникюрных салонов, салонов татуажа и пирсинга, где могут работать с инструментами без должной дезинфекции;
• заболевание часто обнаруживается у наркоманов, вводящих себе в вену наркотические препараты;
• половой путь хотя и редко, но тоже может спровоцировать заражение гепатовирусом.

Более подробно об основном источнике инфицирования Гепатитом Ц читайте тут.

Поскольку заболевание является наиболее распространенной разновидностью, а также от него нет вакцины, то оно признано одним из наиболее приоритетных в диагностике. Именно поэтому во всех государственных клиниках анализ крови на гепатит С бесплатный. При себе достаточно иметь лишь направление от лечащего врача на сдачу анализа.

В поисках, где сдать анализ на гепатит, пациенты часто пользуются услугами частных клиник и лабораторий. Не стоит не доверять частным лабораториям, поскольку зачастую именно такие диагностические центры имеют более мощное оборудование, нежели государственные учреждения. Поэтому результаты современных лабораторий могут не просто не отличаться, а даже быть более точными, нежели результаты в государственных лабораториях. Некоторые категории пациентов специально сдают кровь на гепатит несколько раз в различных центрах, чтобы сравнить результаты анализа крови на гепатит и избежать ложного диагноза.

Сразу вас успокоим, гепатит С излечим. На сегодняшний день, в мире уже появились препараты от гепатита С с эффективностью приближенной к 100% Современная фарм промышленность создала лекарства, которые практически не имеют побочных эффектов. Многие пациенты получают первые результаты в виде облегчения симптомов и снижения вирусной нагрузки уже через неделю приёма. Подробнее о индийских дженериках от гепатита с читайте в нашей отдельной статье.

На рынке компаний по перевозке индийского лекарства от гепатита С «GalaxyRus (Galaxy Super Speciality)» отлично зарекомендовала себя. Данная компания успешно помогает людям излечиться от недуга больше 2-х лет. Отзывы и видео довольных пациентов вы можете посмотреть здесь. На их счету более 4000 людей, которые выздоровели благодаря купленным препаратам. Не откладывайте свое здоровье в долгий ящик, перейдите на сайт www.galaxyrus.com или позвоните по номеру 8-800-3500-695 , + 7 (495) 369 00 95.

На результаты анализов могут повлиять следующие факторы: прием лекарственных средств, прием пищи, перегрузки организма, как моральные, так и физические, употребление алкоголя, табакокурение, физиотерапевтические процедуры, время забора крови. Все выше перечисленные показатели могут сделать так, что норма уже не будет соблюдаться и появятся отклонения, которые по сути таковыми не являются. Поэтому перед обследованием пациента врач расскажет, какие анализы надо сдать и как к ним подготовиться. Можно привести для примера общие правила подготовки к анализу на гепатит С:

1. нужно сдать кровь утром, с 8 до 11 часов;
2. в день забора крови не курить и не нервничать;
3. за восемь часов – не пить, за четырнадцать часов – не есть;
4. сказать врачу о приеме каких-либо лекарственных средства и при необходимости прекратить их прием на время;
5. исключить алкоголь любой крепости за пару дней до того, как сдают кровь.

Для того, чтобы определить наличие заболевания, необходимо сделать ряд диагностических процедур:

1. общий анализ крови при гепатите С;
2. биохимический анализ крови при гепатите на активность трансаминаз;
3. полимеразно-цепную реакцию на наличие рнк вируса гепатита С;
4. при обнаружении возбудителя делается анализ на генотип гепатита;
5. ультразвуковое исследование печени может дополнительно подтвердить наличие поражений паренхимы.

Анти-HCV – это анализ на наличие иммуноглобулинов к вирусным белкам. Если анализ на антитела показывает положительный результат, то это свидетельствует о заражении человека гепатовирусом или ранее перенесенном заболевании. Специфические иммуноглобулины начинают появляться как реакция организма на белок ядра гепатовируса и фрагменты его генома. Первые антитела в большинстве случаев появляются в первые три-шесть месяцев заражения вирусом, но в редких случаях они не попадают в кровь более года.

Иммуноферментный анализ длительное время был и остается одним из основных диагностических способов определения возбудителя в организме человека. Анализ достаточно высокочувствителен и дает возможность в 95 процентах случаев обнаружить хроническую форму течения заболевания. Выполняется несколько дней. Но, тем не менее, несмотря на высокую информативность анализа, существует риск получить ложный результат – как положительный, так и отрицательный. Например, пациенты, у которых заболевание находится в острой стадии, получают правильный ответ лишь в среднем в 60 процентах случаев. Это происходит из-за того, что антитела в среднем появляются в течение четырех-пяти месяцев от заражения, поэтому до этого времени ИФА будет показывать отрицательный результат. Ложноотрицательные реакции будут наблюдаться у тех пациентов, которые лечатся от сифилиса, онкологического заболевания или страдают аутоиммунными патологиями. В этом случае чувствительность колеблется в диапазоне 50-95 процентов. В восьми процентах ИФА у ВИЧ инфицированных также получается ложноположительный результат. Поэтому можно утверждать, что погрешности ИФА не позволяют точно поставить диагноз гепатит.

Этот анализ позволяет непосредственно увидеть присутствие генетического материала вируса в крови. Анализ основывается на оценке качественных и количественных показателей и выполняется до семи дней. Качественный тест показывает лишь наличие вируса в крови, поэтому результат может быть либо однозначно положительный, либо однозначно отрицательный. Норма для здорового человека, когда в выписке стоит пометка «не обнаружено», т.е. тест отрицательный. Количественный тест позволяет определить концентрацию вируса гепатита С в крови, так называемую вирусную нагрузку. Обычно такой тест делают через три месяца, если предыдущий тест показал наличие гепатовируса в организме.

Биохимия крови – важная часть общего исследования. По наличию разнообразных микроэлементов в человеческой крови, уже через несколько дней анализ позволяет определить состояние здоровья. Для оценки гепатита С важно получить данные по содержанию аланинаминотрансферазы, астаспартатаминовой трансферазы, билирубина, гамма-глутамилтранспептидазы, глюкозы, ферритина, альбумина, общего белка и белковых фракций, креатинина.

Расшифровку этих основных маркеров представляет следующая таблица

При острой форме заболевания, когда вирус гепатита только попал в организм человека, и проходит период инкубации, симптоматика не проявляется не только со стороны здоровья пациента, но не видно изменений и в картине лабораторных исследований. Это связано с тем, что вирус достаточно долго появляется в крови. Например, в среднем можно обнаружить генотип вируса только лишь через несколько месяцев. Показатели крови – маркеры гепатита, которые указывают на вирус.

Хроническая форма течения заболевания характерна тем, что в ней появляются признаки наличия возбудителя и если сдавать анализ на вирус, то это подтверждается и результатами анализа. Например, повышение аминотрансферазы будет вызвано гибелью гепатоцитов, а уровень ГГТ будет существенно выше при циррозе. Зная это, врачи делают несколько анализов и при подозрении на возможное заражение анализы на гепатит С повторяют через несколько месяцев.

Обычно врач может назначить ультразвуковое исследование. Узи помогает выявить увеличение размеров печени и места, пораженные вирусом. Но наиболее точные результаты даст единственный анализ – он называется биопсия. Это забор специальной иглой образцов гепатоцитов. Пациентов пугает это исследование, и они хотят знать сколько делается биопсия, больно ли проводится процедура. Биопсия проводится довольно быстро, под спинальной анестезией, ее результаты укажут на изменения в самой печени, что подтвердит или опровергнет подозрения.

Ложноположительный анализ появляется даже у здорового человека. Что это значит? Это означает, что у человека определяется в крови присутствие антител к гепатиту С. При этом такой анализ чаще всего получается методом ИФА – наиболее распространенным методов, но и наиболее «грешным». Ложноположительный анализ можно получить в следующих случаях:

• при аутоиммунных заболеваниях:
• при опухолях;
• при заражении другими тяжелыми инфекциями;
• если есть беременность.

Ложноположительный анализ может возникнуть и в результате человеческого фактора, профессиональной недобросовестности, нарушении техники проведения анализа. В данном случае приходится переделывать анализ.

К сожалению, выпуск препарата о котором говорится в видео в России так и не начат. но уже сейчас его можно заказать из Индии, подробнее читайте об этом в нашей статье «Дженерики от гепатита с»

Для того, чтобы точно узнать, качественная ли диагностика гепатита С, можно поступить двумя способами:

1. сдать анализы в нескольких лабораториях и сравнить результаты анализов крови при гепатит С с расшифровкой. Наиболее информативным будет сравнение государственной лаборатории и частной. Если результаты не внушают доверия, можно провести еще несколько анализов в разных клиниках. Всегда нужно помнить о человеческом факторе, а в случае, если получен положительный анализ на гепатит С, лучше перестраховаться. Также стоит принять во внимание, что лабораторная диагностика гепатита С может быть не точной, если есть беременность;
2. если пациент доверяет клинике полностью, он может сделать анализ повторно позже. Как правило, это назначают и врачи, если результаты анализа на гепатит С положительны. Если они отрицательны через три месяца, также можно подозревать человеческий фактор или другие патологии, благодаря которым сдвинулась норма показателей. После этого нужно сделать анализ крови еще раз.

Определение генотипа вируса чрезвычайно важно для пациента. Анализ проводится на основе взятой венозной крови методом полимеразно-цепной реакции. От того, какой вирус обнаружен, зависит план лечения заболевания. Известно, что генотип 1б в девяноста процентах случаев приведет к развитию хронической формы заболевания, а вот генотип 2а и генотип 3a – лишь в половине случаев. Также стоит отметить, что генотип 1b протекает наиболее тяжело – после такого поражения высок риск развития карциномы. Поэтому определение генотипа необходимо для дальнейшей терапии и прогноза заболевания.

Чтобы диагностировать заболевание, необходимо сдать анализы крови на гепатит С с расшифровкой, после чего врач сравнит полученные показатели с референсными значениями.

источник

Может ли анализ на гепатит С быть ошибочным? К большому сожалению, такие случаи иногда бывают. Эта патология опасна тем, что после заражения симптомы часто отсутствуют у человека в течение многих лет. Точность в диагностике гепатита С особенно важна, так как при несвоевременном выявлении и лечении недуг приводит к катастрофическим осложнениям: циррозу или раку печени.

Вирусы гепатита C передаются через кровь, поэтому важен ее анализ. Иммунная система вырабатывает против возбудителей болезни белковые антитела — иммуноглобулины М и G. Они являются маркерами, посредством которых печеночная инфекция диагностируется при применении иммуноферментного анализа (ИФА).

Примерно месяц спустя после инфицирования или при обострении хронического гепатита С формируются антитела класса М. Наличие таких иммуноглобулинов доказывает: организм поражен вирусами и стремительно уничтожает их. В ходе выздоровления пациента численность этих белков неуклонно сокращается.

Антитела G (anti-HCV IgG) формируются значительно позже, в период от 3 месяцев до полугода после вторжения вирусов. Их обнаружение в кровотоке сигнализирует о том, что инфицирование случилось давно, поэтому острота болезни миновала. Если таких антител немного и в повторном анализе становится еще меньше, это свидетельствует о выздоровлении больного. Но у пациентов с хроническим гепатитом С иммуноглобулины G присутствуют в кровеносной системе всегда.

В лабораторных анализах определяют и наличие антител к неструктурным вирусным белкам NS3, NS4 и NS5. Anti-NS3 и Anti-NS5 выявляются на ранней стадии болезни. Чем больше их показатель, тем вероятнее, что она станет хронической. Anti-NS4 помогают установить, давно ли инфицирован организм и как сильно поражена печень.

У здорового человека в анализах крови нет АЛТ (аланинаминотрансферазы) и АСТ (аспартатаминотрансферазы). Каждый из данных печеночных ферментов свидетельствует о ранней стадии острого гепатита. Если же обнаружены оба, то это может сигнализировать о начале некроза клеток печени. А наличие фермента ГГТ (гамма-глутамилтранспептидазы) — один из признаков цирроза органа. Доказательством разрушительной работы вирусов является и присутствие в крови билирубина, фермента ЩФ (щелочной фосфатазы), белковых фракций.

Самая точная диагностика при правильном ее проведении — методом ПЦР (полимеразной цепной реакции). Основывается она на выявлении не иммунных антител, а структуры РНК (рибонуклеиновой кислоты) и генотипа возбудителя гепатита С. Используют 2 варианта этого метода:

• качественный — есть вирус или нет;
• количественный — какова его концентрация в крови (вирусная нагрузка).

«Анализ на гепатит С — отрицательный». Такой формулировкой подтверждается отсутствие болезни при качественном исследовании методом ПЦР. Аналогичный результат количественного теста ИФА показывает, что в крови нет антигенов вируса. В иммунологических исследованиях иногда указывают их концентрацию ниже нормы — это тоже отрицательный результат. Но если антигенов нет, а антитела к ним есть, данное заключение сигнализирует о том, что пациент или уже переболел гепатитом С или недавно был вакцинирован.

«Анализ на гепатит С — положительный». Такая формулировка требует уточнения. Позитивный результат лаборатория может выдать человеку, который когда-то болел им в острой форме. Эта же формулировка применима и к людям, которые в настоящее время здоровы, но являются вирусоносителями. Наконец, это может быть ложный анализ.

В любом случае необходимо провести исследование повторно. Больному с острым гепатитом С, находящемуся на лечении, врач может назначать тестирование через каждые 3 дня, чтобы отслеживать эффективность терапии и динамику состояния. Пациент с хроническим недугом должен сдавать контрольные анализы через каждые полгода.

Если результат теста на антитела положительный, а заключение исследования методом ПЦР отрицательное, считается, что человек потенциально инфицирован. Чтобы убедиться в наличии или отсутствии антител, проводят диагностику методом RIBA (РИБА — рекомбинантного иммуноблота). Данный метод информативен через 3–4 недели после инфицирования.

Во врачебной практике различают 3 варианта неадекватных результатов диагностического исследования:

• сомнительный;
• ложноположительный;
• ложноотрицательный.

Иммуноферментный метод считается весьма точным, но порой он дает ошибочную информацию. Сомнительный анализ — когда клинические симптомы гепатита С у пациента есть, но маркеров в крови нет. Чаще всего это происходит при слишком ранней диагностике, поскольку антитела не успевают сформироваться. В таком случае делают повторный анализ через 1 месяц, а контрольный — через полгода.

Ложноположительный анализ на гепатит С врач получает, когда методом ИФА обнаруживаются иммуноглобулины класса М, а методом ПЦР РНК вируса не выявляется. Такие результаты нередко бывают у беременных женщин, пациентов с иными типами инфекции, онкобольных. Им тоже нужно делать повторные тесты.

Ложноотрицательные результаты появляются весьма редко, например, в инкубационном периоде болезни, когда человек уже инфицирован вирусом гепатита С, но и иммунитет к нему, и симптомы еще отсутствуют. Такие результаты могут быть у пациентов, которые принимают препараты, подавляющие защитную систему организма.

Гепатит С протекает по-разному в зависимости от генотипа вируса. Поэтому в ходе диагностики важно определить, какой из 11 его вариантов находится в крови пациента. У каждого генотипа есть несколько разновидностей, которым присвоены буквенные обозначения, например 1а, 2в и т. д. Точно подобрать дозировки препаратов, длительность лечения можно, узнав вид вируса.

В России распространены преимущественно генотипы 1, 2 и 3. Из них хуже и дольше всего лечится генотип 1, особенно подтип 1в. У вариантов 2 и 3 более благоприятные прогнозы. Но генотип 3 может приводить к тяжелому осложнению: стеатозу (ожирению печени). Бывает, пациент инфицируется вирусами сразу нескольких генотипов. При этом один из них всегда доминирует над другими.

Диагностика гепатита С показана, если:

• возникли подозрения на нарушения в деятельности печени;
• получены сомнительные данные о ее состоянии при УЗИ органов брюшной полости;
• в анализе крови содержатся трансферазы (АЛТ, АСТ), билирубин;
• планируется беременность;
• предстоит операция.

Ложноположительные анализы, когда инфекции в организме нет, но результаты указывают на ее наличие, составляют до 15% лабораторных исследований.

• минимальная вирусная нагрузка в начальной стадии гепатита;
• прием препаратов-иммунодепрессантов;
• индивидуальные особенности защитной системы;
• высокий уровень криоглобулинов (белков плазмы крови);
• содержание гепарина в крови;
• тяжелые инфекции;
• аутоиммунные заболевания;
• доброкачественные новообразования, раковые опухоли;
• состояние беременности.

Ложноположительные результаты тестов возможны, если у будущей матери:

• нарушается обмен веществ;
• имеются эндокринные, аутоиммунные заболевания, грипп и даже банальная простуда;
• появляются специфические белки беременности;
• резко снижается уровень микроэлементов в кровотоке.

Кроме того, при проведении тестов на гепатит С причины ошибок могут заключаться в человеческом факторе. Нередко сказываются:

• низкая квалификация лаборанта;
• ошибочный анализ чужой крови;
• некачественные химические реактивы;
• устаревшие медицинские приборы;
• загрязнение образцов крови;
• нарушения правил их транспортировки и хранения.

Любая лаборатория может иногда ошибаться. Но это возможно при тестах только ИФА или только ПЦР. Поэтому при проведении диагностики заболевания следует применять оба метода исследования. Тогда оно наиболее достоверно, поскольку сложно допустить ошибку, если в крови нет вируса.

Важно делать анализ на гепатит С, когда нет никаких недомоганий, даже легкой простуды. Не требуется сдавать кровь натощак. Следует только накануне отказаться от жирных, жареных, острых блюд, не употреблять спиртное. И последнее: первоначальный ложноположительный результат о гепатите С — не повод для паники. Вывод нужно делать лишь после дополнительных исследований.

источник

Согласно данным Всемирной организации здравоохранения, вирусом гепатита С инфицировано 3,0% населения Земли. Широкое распространение, высокая степень хронизации инфекционного процесса, отсутствие специфической профилактики, высокая стоимость и недостаточная эффективность лечения определяют необходимость ранней диагностики заболевания с последующим диспансерным наблюдением инфицированных лиц.

Согласно данным Всемирной организации здравоохранения, вирусом гепатита С инфицировано 3,0% населения Земли. Широкое распространение, высокая степень хронизации инфекционного процесса, отсутствие специфической профилактики, высокая стоимость и недостаточная эффективность лечения определяют необходимость ранней диагностики заболевания с последующим диспансерным наблюдением инфицированных лиц. При длительном малосимптомном течении с отсутствием характерных клинических признаков особое значение для выявления случаев гепатита С приобретает лабораторная диагностика.

Одним из основных методов выявления антител к антигенам вируса гепатита С (анти-ВГС) является иммуноферментный анализ (ИФА). На сегодняшний день можно обозначить две серьезные проблемы, связанные с интерпретацией результатов, полученных при использовании данного исследования. Первая — получение противоречивых результатов при повторных исследованиях образцов в тестах разных производителей. Основная причина расхождений результатов связана с оригинальными конструкциями антигенов, используемых в диагностикумах, и низкий уровень качества ИФА-исследований в лабораториях.

К искажению результатов могут приводить следующие ошибки: нарушение регламента пробоподготовки и/или проведения реакции (наличие загрязненной, в т. ч. дезинфицирующими и моющими средствами, посуды и наконечников пипеток, неточность работы оборудования), отсутствие системы внутрилабораторного контроля качества.

Вторая проблема, с которой сталкиваются лаборатории, — получение “неопределенных” результатов. Поскольку на территории России применяется большой ассортимент отечественных и импортных наборов реагентов, позволяющих выявить анти-ВГС, производители по-разному интерпретируют результаты анализа. Иногда один и тот же образец, содержащий одни и те же антитела, в тестах разных производителей может расцениваться как положительный,“неопределенный” или отрицательный.

В настоящее время как в нашей стране, так и в мире алгоритм лабораторного исследования, проводимого на станциях переливания крови и в клинико-диагностических лабораториях, включает первичное тестирование сывороток крови для выявления суммарных анти-ВГС с последующим подтверждением положительного результата скрининга путем определения антител к высокоспецифичным антигенам ВГС — структурному (core) и неструктурным (NS3, NS4, NS5).

Как правило, в наборах реагентов, предназначенных для скрининга, — “Бест анти-ВГС” (ЗАО “Вектор-Бест”, Новосибирск), “ВГС-ДСМ” (“Медико-биологический союз”, Новосибирск), “ИФА-АНТИ-HCV” (НПО “Диагностические системы”, Нижний Новгород), “ИФА-ВГС” (ЗАО “Эколаб”, Электрогорск) — результаты интерпретируются только как положительные или отрицательные.

В перечисленных наборах реагентов образцы, оптическая плотность (ОП) которых равна или превышает значение ОПкрит., считаются положительными. Согласно инструкции образец положительно реагирующей сыворотки должен быть исследован повторно в этом же наборе параллельно в двух лунках (для воспроизведения положительного результата или исключения технической ошибки). При повторном получении положительного результата хотя бы в одной лунке образец исследуется с использованием подтверждающего теста, обладающего большей чувствительностью и специфичностью.

Однако существуют скрининговые тест-системы, где особое внимание уделяется образцам, результаты которых ниже уровня ОПкрит. Так, согласно инструкции диагностического набора MONOLISA HCV PLUS V.2 BIO-RAD (Франция) сыворотки, ОП которых ниже уровня ОПкрит. на 10,0%, обязательно следует тестировать повторно в дубле для окончательной интерпретации. Если при использовании наборов Murex anti HCV (Murex Diagnostica, Великобритания) результат оказывается в “серой зоне” (показатель ОП выше ОП (K-)+0,3, но ниже ОПкрит.), образцы рассматриваются как погранично положительные. Согласно инструкции такие сыворотки также должны быть исследованы повторно. Если результат повторяется или если получены противоречивые результаты, необходимо тестировать образцы с использованием тест-системы другого производителя или подтверждающего теста.

Если при использовании тест-системы другого производителя или подтверждающего теста получен положительный результат, то считается, что сыворотка пациента содержит антитела к анти-ВГС.

Если значение ОП образца остается в “серой зоне” или если получены противоречивые результаты, то донор или больной, чья кровь исследовалась, в дальнейшем нуждается в наблюдении врача (инструкция к Murex anti HCV, комплект VK47).

Таким образом, “неопределенный” результат можно получить уже в ходе скрининга. Но, как правило, чаще в практике с понятием “неопределенный” результат врачи сталкиваются при использовании метода имму- ноблота и “подтверждающих” наборов реагентов для выявления спектра антител к каждому из анти-ВГС.

Следует отметить, что большинство производителей дают одинаковую интерпретацию положительных результатов: образец считается положительным (содержащим анти-ВГС), если значение ОП в лунке выше или равно ОПкрит. по двум или более антигенам, или по одному core-антигену.

Согласно критериям, внесенным в инструкции к некоторым тестсистемам, выявление антител к одному из неструктурных белков вируса не дает точного ответа. Поэтому образцы с ОП, большей или равной ОПкрит. только для одного неструктурного антигена (NS3, NS4 или NS5), считаются “неопределенными”. Такая формулировка интерпретации результатов содержится в инструкциях наборов реагентов ЗАО “Вектор- Бест”, “ЭКОлаб”, “Медико-биологический союз”.

Другой подход к интерпретации результатов предлагает НПО “Диагностические системы” в подтверждающем наборе “ДС-ИФА-АНТИ- HCV-СПЕКТР-GM”. Результаты анализа считаются “неопределенными”, если значение ОП образца хотя бы с одним из сорбированных антигенов равно или превышает ОПкрит. менее чем на 20,0%, независимо от вида антигена (структурный или неструктурный). Соответственно в данном наборе результаты анализа считаются положительными, если значение ОП образца хотя бы с одним из сорбированных антигенов превышает ОПкрит. на 20,0% и более. Таким образом, сыворотка, содержащая антитела только к одному неструктурному анти-ВГС, в данной системе уже будет считаться положительной.

Технология подтверждающих тестов при применении метода им- муноблота использует синтетические пептиды и рекомбинантные белки ВГС. Эти пептиды и белки нанесены и фиксированы в виде отдельных линий, расположенных в строго определенном порядке для удобства считывания результата на полосках нитроцеллюлозы (стрипах), что позволяет осуществлять многопараметровое тестирование для выявления специфических антител к анти-ВГС. При использовании наборов CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA (США) результат считается “неопределенным” (сомнительным), если на стрипе появляется полоса, соответствующая анти-ВГС (независимо, к шге или неструктурным антигенам), с интенсивностью окрашивания “1+” или выше. Похожая интерпретация предлагается в наборах реагентов других производителей: “ВГС-блот- БЕСТ” (ЗАО “Вектор-Бест”), INNO-LIA HCV Score (INNOGENETICS), Deciscan HCV PLUS (BIO-RAD). Соответственно образец, содержащий антитела к одному core-антигену, для которого получен положительный результат при выявлении антител методом ИФА, может считаться “неопределенным” в иммуноблоте.

В инструкции набора реагентов с использованием иммуноблота INNO-LIA HCV Score присутствует уточнение: если антигенная линия для NS3 окрашена “+/-” или выше, а все другие не окрашены, то такой образец также считается “неопределенным”. Особое внимание уделяется этому неструктурному антигену, поскольку при инфицировании ВГС одними из первых могут появиться антитела именно к NS3. Примером могут служить сероконверсионные панели — специальные наборы образцов сывороток крови одного и того же инфицированного человека, полученные в динамике в период сероконверсии. Так, в панели № 6212 (ZeptoMetrix Corporation) все образцы содержат РНК ВГС. С помощью иммуноблотов INNO-LIA HCV Score, CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA антитела в данной панели определяются исключительно к NS3 антигену, начиная со второго образца с реактивностью “+/-” и заканчивая “4+” (образец № 9). Результаты интерпретируются как “неопределенные”. Таким образом, уже на ранней стадии можно выявить инфицированные образцы.

Mikrogen Diagnostik в наборе реагентов для иммуноблота recomBlot HCV IgG 2.0 предлагает интерпретировать результаты на основе балльной системы. Значения линий анти-ВГС RecomBlot HCV IgG соответствуют определенным баллам: если антигенная линия для тоге окрашена на “+/-”, то это соответствует 5 баллам, если на “1+” или “2+”, то 8 баллам; неструктурным антигенам с интенсивностью окрашивания “1+” или выше присваивается следующее количество баллов: для NS3 — 3 балла, Helicase — 3 балла, NS4 — 4 балла, NS5 — 2 балла. Количество баллов суммируется, и результат исследования интерпретируется как отрицательный при сумме баллов 0-5, как пограничный (“неопределенный”) — 6-9 баллов, положительный — свыше 9 баллов. Соответственно если образец содержит антитела только к одному неструктурному антигену, то результат будет интерпретироваться как отрицательный. Таким образом, производитель “решает” проблему сывороток, содержащих антитела только к одному из неструктурных антигенов.

Получается, что если выполнить тестирование одного и того же образца с использованием разных наборов для выявления антител методом ИФА или иммуноблота, то результат может оказаться положительным, “неопределенным” или отрицательным.

Клинико-диагностические лаборатории и лаборатории службы переливания крови для выявления лабораторных маркеров ВГС применяют в работе разнообразные наборы отечественных и зарубежных производителей. Отсюда возникают проблемы, с которыми сталкивается врач-клиницист или пациент, когда получают из разных лабораторий противоречивые результаты одного и того же анализа. Безусловно, каждый производитель реагентов допускает возможность получения ложноположительных результатов, обусловленных неспецифическим реагированием рекомбинантных антигенов и синтетических пептидов, входящих в состав наборов, с белками сыворотки крови. Поэтому в инструкции для каждого набора реагентов дополнительно делается акцент на то, что неопределенные образцы необходимо исследовать повторно через 3-6 месяцев (некоторые производители указывают интервал от 2-3 недель (“Медико-биологический союз”) до 6-12 месяцев (CHIRON RIBA)) с момента первого исследования, чтобы определить, изменилась ли реактивность. Желательно, чтобы повторно взятый образец анализировался одновременно с предыдущим (“парные” образцы). При длительном наблюдении пациента с целью получения результатов, адекватно отражающих изменение содержания маркера в крови, необходимо использовать наборы реагентов одного наименования (одного предприятия-изготовителя). Некоторые производители предлагают также исследовать и “неопределенные” образцы с использованием подтверждающих тестов, выявляющих другие маркеры ВГС (иммуно- блотинг, ПЦР).

Ряд производителей берет на себя ответственность, заявляя в инструкции, что если при повторном (через 2-3 недели) исследовании образец дает положительную реакцию с антителами только к одному из NS-антигенов, то в этом случае реакцию следует считать отрицательной (инструкция “ВГС-ДСМ-подтверждающий тест” (комплект 2, “Медикобиологический союз”)). Другие, как recomBlot HCV IgG 2.0 (Mikrogen Diagnostik), интерпретирует подобные сыворотки как отрицательные. Но, интерпретируя таким образом результаты, не стоит забывать, что, по имеющимся в литературе данным, вирус гепатита С способен индуцировать различный по интенсивности гуморальный ответ — от полного отсутствия специфических антител до полного спектра антител к структурным и неструктурным белкам.

На сегодняшний день существует ряд статей, в которых отражены разные исследования сывороток крови с “неопределенными” результатами, когда в образце содержатся антитела только к одному неструктурному антигену ВГС. Опубликованные в литературе данные исследований по этой проблеме весьма противоречивы.

Так, Pawlotsky J.M. с соавт. проводили исследование 588 положительных образцов с помощью иммуноблота RIBA HCV 3.0. Распространенность образцов с “неопределенными” результатами составила около 10,0% (59/588). Причем, в 53,0% (31/59) “неопределенных” образцов была обнаружена РНК ВГС. Изолированные антитела к core-антигену определялись в 25 образцах (64,0% из них содержали РНК ВГС), анти-№3 — в 30 случаях (43,0% образцов содержали РНК), изолированные анти-№4 — в 3 случаях (в 67,0% образцов присутствовала РНК), и анти-№5 — в 1 случае (РНК не определялась). При этом авторы приходят к выводу, что образцы, содержащие антитела только к NS5, следует относить к ложноположительным.

С другой стороны, в работе Cavazza S. c соавт. было показано, что в 5,0% образцов с “неопределенным” результатом в иммуноблоте Riba-3, в которых присутствуют антитела только к NS5, определяется РНК ВГС. К тому же выявление антител к NS5 в более ранние сроки инфекции позволяет улучшить качество лабораторной диагностики острого гепатита С.

Данные, полученные Евпловой И.А. при изучении клинико-эпидемиологических характеристик детей с “неопределенными” результатами выявления анти-ВГС, свидетельствуют о скрытом течении инфекции и имеющемся иммунном дисбалансе в организме детей с изолированным выявлением антител к неструктурным NS3- или №4-антигенам вируса. Частота и характер желудочно-кишечных заболеваний, результаты УЗИ- сканирования у детей с “неопределенными” результатами — признаки поражения печени (60,0%), спленомегалия (25,0%), патологические изменения поджелудочной железы (45,0%) — сопоставимы с таковыми у детей, страдающих хроническим гепатитом С, с различной репликацией вируса.

В работе Потаповой А.А. приводятся данные исследования образцов с “неопределенным” результатом при выявлении анти-ВГС у молодых и пожилых людей. Интересно отметить, что такие образцы преимущественно содержали только анти-№4 ВГС. Причем анти-№4 у пожилых пациентов были как высоко-, так и низкоавидными, а при обнаружении в пробе молодого пациента только анти-№4 авидность антител не определялась. Однако по концентрации а-фетопротеина (биохимического маркера повреждения клеток печени) группа молодых людей с “неопределенными” результатами выявления анти-ВГС была близка к группе анти-ВГС-позитивных образцов, что подтверждает вывод Rios M. об эпидемиологической близости групп с анти-ВГС-положительными и “неопределенными” результатами.

Особое значение уделяется изучению “неопределенных” результатов выявления анти-ВГС, полученных в группе доноров крови.

По данным Lemaire J.M., из 758 образцов от доноров, интерпретирующихся как “неопределенные” при использовании иммуноблота RIBA-3, 10 образцов (1,3%) содержали РНК ВГС: 3,3% (6/180) и 1,3% (4/317) проб с антителами только к core и только к NS3 соответственно. В образцах, содержащих только анти-№4 и только анти-№5, в 52 и 209 пробах соответственно, РНК ВГС обнаружена не была. У 2 из 6 доноров с антителами к core была выявлена хроническая форма гепатита. Острый гепатит был диагностирован у 3 из 4 чел., в сыворотке крови которых определялись только антитела к NS3. Однако в литературе также имеются данные, свидетельствующие о том, что при наличии в сыворотке крови донора изолированных антител к неструктурным белкам вируса гепатита С, РНК ВГС, как правило, не выявляется.

В своем исследовании Melve G.K. с соавт. проанализировали в динамике кровь 92 чел., отстраненных от донорства крови из-за “неопределенных” результатов при выявлении анти-ВГС. Спустя 75 месяцев образцы крови 66 (71,0%) из 92 чел. по-прежнему демонстрировали “неопределенный” результат при исследовании методом иммуноблота (RIBA). Наиболее часто встречались образцы, в которых определялись антитела только к NS5. Более того, в исследовании была выявлена связь между такими образцами и обнаружением антител к аденовирусу в пробах, особенно в осенне-зимний период. Авторы предполагают, что вирусная инфекция и кросс-реактивность могут быть этиологическими факторами получения неопределенных результатов при определении анти-ВГС.

Другая подобная работа была посвящена наблюдению за донорами с “неопределенными” результатами, полученными при использовании иммуноблота (RIBA). В течение 5 лет было обследовано 102 979 доноров. Среди них для 271 образца получен положительный результат при выявлении антител методом ИФА (наборы Abbott Axsym System HCV version 3.0 assay (USA) или Ortho Vitros ECi anti-HCV assay (USA)). Для подтверждения данные пробы тестировали методом иммуноблота CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA: 178 сывороток (65,7%) показали отрицательный результат, 28 (10,3%) — положительный, а 65 (24,0%) — “неопределенный”. Значительное количество ложноположительных результатов при выявлении антител методом ИФА (65,7%) авторы объясняют факторами, не связанными с инфекцией. Ложноположительные результаты выявления анти-ВГС описаны после вакцинации против гриппа. За 24 донорами (из 65) с “неопределенными” результатами наблюдение велось 25 месяцев. За этот период у 8 чел. (33,0%) результат обнаружения анти-ВГС изменился на отрицательный, а у 16 доноров (67,0%) по-прежнему сохранился “неопределенный” результат.

В работе Rios M. изучались характеристики группы доноров, при тестировании крови которых методом иммуноблота (RIBA) выявлены положительные и “неопределенные” результаты. РНК ВГС наиболее часто (в 71,0% случаев) присутствовала в образцах с положительным результатом в иммуноблоте, по сравнению с сыворотками с “неопределенным” результатом (в 10,0% случаев). Увеличение активности трансаминаз сыворотки крови в течение 3 лет наблюдения регистрировалось соответственно в 54,0% случаев у доноров с положительным результатом и в 13,0% случаев — с “неопределенным” результатом. У 46,0% пациентов с “неопределенным” результатом данные биопсии печени были в норме (диагностировались лишь незначительные изменения), однако 33,0% из них имели хронический персистирующий гепатит, а 21,0% пациентов — хронический активный гепатит. Гистологическое исследование показало, что у 50,0% пациентов отсутствовал фиброз, у 46,0% наблюдался фиброз 1-й степени, у 4,0% — фиброз 2-й степени тяжести. Авторы приходят к заключению, что группа пациентов с “неопределенными” результатами, вероятно, имеет доброкачественное течение заболевания без вирусной репликации.

Кадровые доноры — обычные люди, которые в реальной жизни также сталкиваются с факторами риска заражения ВГС-инфекцией (инъекции, посещения стоматолога и гинеколога, зондовые обследования, оперативные вмешательства и др.). Поэтому данные Makuria A.T. согласуются с данными других исследователей и в работе делается вывод, что “неопределенные” результаты также могут быть у доноров, которые перенесли ВГС-инфекцию. Доказательством является то, что у доноров с “неопределенными” результатами отмечался сильный иммунный ответ, схожий с таковым у больных, которые спонтанно выздоровели от ВГС-инфекции, и отличающийся от контрольной группы и группы хронических больных ВГС.

Безусловно, перед сотрудником лаборатории стоит сложная задача — как разграничить ложноположительный результат и истинное присутствие анти-ВГС. Ложноположительные результаты являются одной из наиболее важных проблем при проведении исследований. Их появление может быть обусловлено неспецифическим взаимодействием компонентов реакции, возможными перекрестными реакциями с другими вирусными антигенами и многими другими факторами. Повышенная частота таких результатов отмечена среди больных онкологическими и аутоиммунными заболеваниями, лиц с иммунодефицитными состояниями и больных сифилисом. Обнаружение в образце сыворотки крови РНК ВГС является хорошим подтверждающим маркером инфекции гепатита С. Однако и здесь можно рассуждать о ложноотрицательных и ложноположительных результатах ПЦР. Вместе с тем отсутствие РНК ВГС не позволяет говорить о наличии ложноположительного результата выявления анти- ВГС. Возможным объяснением отсутствия РНК ВГС в образцах с “неопределенным” результатом выявления анти-ВГС могут быть экспрессия генома вируса ниже порога чувствительности используемых вариантов ПЦР, сохранение вируса в иммунологически привилегированных зонах. Необходимо учитывать, что анти-ВГС могут циркулировать в крови пациента, который выздоровел после острого гепатита С (10,0-15,0%) или у которого произошла элиминация РНК ВГС в результате проводимой терапии. В исследовании Seeff L.B. показано, что в 23,0% случаев РНК ВГС может исчезать у пациентов, изначально инфицированных.

Таким образом, исходя из вышеизложенного, для служб крови одним из вариантов решения проблемы “неопределенных” результатов может стать использование таких скрининговых и подтверждающих тестов (например, двухлуночных, где core нанесен отдельно от неструктурных антигенов), в которых результаты интерпретируются исключительно как положительные или отрицательные.

Когда речь идет о пациенте, то требуется более тщательное обследование. В этом случае для подтверждения положительного результата лучше использовать определение антител к отдельным анти-ВГС с использованием метода иммуноблота или ИФА, отслеживая в динамике, как со временем меняется спектр и титр антител у данного пациента. Трактовка “неопределенный результат” на сегодняшний день необходима в случае отсутствия четких показаний, позволяющих определенно судить о наличии или отсутствии анти-ВГС в исследуемом образце. Правомочность ответа — “неопределенный результат выявления анти-ВГС”, выдаваемого специалистом лаборатории клиницисту, очевидна не только при проведении подтверждающего теста, но и при рутинном исследовании для обнаружения анти-ВГС. Необходимость такой трактовки полученных результатов является отражением современного состояния лабораторной диагностики гепатита С. В лабораторной диагностике гепатита С необходима комплексная оценка маркеров ВГС-инфекции, основанная на динамическом наблюдении за пациентом.

источник

Недавно в горячем появился пост об ошибочном результате на гепатит С. Одни методы называют плохими, говорят об ошибках лаборатории. Я мало в чем разбираюсь, но диагностика вирусных гепатитов и ВИЧ одна из тех немногих тем, в которых я что-то смыслю, поэтому и хочу поделиться с вами: какие анализы показывают окончательный диагноз, какие имеет смыл пересдавать, когда и какие анализы сдавать, чтобы получить точный результат. Немного больше ясности для сохранения ваших нервов)

Первый пост, не ругайте сильно. Итак, поехали.

Гепатит С – вирус, поражающий печень.

Какой анализ сдается для скрининга?

Смысл скрининга – проверить как можно больше людей как можно быстрее и дешевле. В качестве скрининга на гепатит С используется анализ Anti-HCV-total (суммарные антитела к антигенам вируса гепатита C) методом ИФА. Антитела – это белки иммуноглобулины крови человека, которые иммунная система продуцирует в ответ на вирусы, бактерии, вредные и не очень вещества (аллергия) а иногда и на собственные клетки (аутоиммунные заболевания). Каждое антитело специфично, оно связывает и нейтрализует только один вид бактерий или вирусов и не действует на другие. Таким образом, анализ Anti-HCV-total ищет не сам вирус, а белки крови, которые сталкивались с вирусом гепатита С или с чем-то похожим на этот вирус. Этим и объясняется низкая специфичность такого анализа – только у 90% получивших положительный результат на Anti-HCV-total действительно есть или был гепатит С. Не стоит также забывать, что 30% людей, заразившихся гепатитом С, спонтанно от него излечиваются в течении первых полугода болезни, а антитела к этому вирусу могут оставаться у них годами. В итоге имеет то, что меньше 2/3 положительных результатов теста действительно говорят о гепатите С. Является ли та ложноположительная 1/3 ошибкой врача или лаборатории? Нет, это погрешность самого метода.

Что сдается для подтверждения болезни?

Для подтверждения или опровержения диагноза после положительного результата скрининга сдается 2 анализа: анализ на расширенный спектр к антителам тем же методом ИФА и анализ на РНК самого вируса методом ПЦР.

Первый из них ищет уже не общие антитела к антигену HCV, а антитела к структурным (ядерным) белкам Cor-1 и Cor-2 и неструктурным NS3, NS4, NS5. Если часть из них отрицательна, то предыдущий ИФА такого анализ можно считать ложноположительным. Самый частый белок, который «фонит», искажая данные анализа, это NS5 – видимо, он очень похож на какой-то другой белок, продуцируемый нашей иммунной системы.

Второй анализ выполняется методом ПЦР, при котором ищут уже не белки крови человека, а сам вирус, точнее его РНК. В настоящий момент такие системы очень чувствительны, они видят вирус уже при 10-60 копиях в 1мл крови, для сравнения, обычная вирусная нагрузка у больного – сотни тысяч или миллионы копий; т.е. система вирус не пропустит. В теории данный анализ обладает 100% специфичностью — при правильном проведении ПЦР он не может быть ложноположительным, в отличие от ИФА. На практики же, при несоблюдении инструкций и правила чистых комнат, в пробирку с вашей кровью может попасть частичка вируса инфицированного, и тогда анализ окажется недостоверен. Именно поэтому его не используют для скрининга – если бы лаборатории загрузили таким анализом, не обучая сотрудников и не меняя сами лаборатории, то такие ошибки вполне могли случаться довольно часто. Второй причиной неиспользования данного анализа для массового выявления гепатита С – его дороговизна (необходимы более дорогие реактивы, больше лаборантов, больше времени и т.д.). Оба недостатка принципиально преодолимы и, в связи с тем, что появились эффективные лекарства против гепатита С, а значит здоровых людей с Anti-HCV+ и РНК- будет становиться всё больше, я надеюсь, рано или поздно, мы перейдем на ПЦР диагностику в качестве скрининга гепатита С.

Для тех же, у кого ИФА показал + без ПЦР-диагностики диагноз гепатит С поставить не могут: пока не нашли сам вирус – нет и болезни!

Ниже приведен график появления в крови РНК гепатита С и антител от даты заражения. Анализ на РНК окажется достоверным уже 10 дней после заражения, анализ на антитела – через 1,5-3 месяца.

ВИЧ – вирус иммунодефицита человека

Какой анализ сдается для скрининга?

В качестве скрининга на ВИЧ используется анализ HIV Ag/Ab Combo методом ИФА. Современные тест-системы ИФА на ВИЧ отличаются от ИФА на гепатит С тем, что ловят не только антитела к вирусу (Ab), но и антиген самого вируса (Ag), отсюда и название — Combo. Антиген – этот небольшой кусочек самого вируса, который является раздражителем нашей иммунной системы. По таким чужеродным антигенам она и вырабатывает специфические тела. Метод антитела+антиген позволяет диагностировать ВИЧ на ранних стадиях, но это не избавляет ИФА от его главного недостатка – специфичности 98%, не 100%. Ситуация аналогична гепатиту С – не все положительные анализы первичного ИФА являются достоверным свидетельством болезни, но ИФА ВИЧ показывает неверные результаты только в 2%, а не в 35%, как в случае с гепатитом, ведь от ВИЧ, к сожалению, пока нельзя излечиться. И это снова не ошибка врача или лаборатории, а проблемы метода.

Что сдается для подтверждения болезни?

К счастью, здесь система продумана. В случае положительного или сомнительного ИФА лаборатория сразу отправляет пробирку на дополнительный анализ, который называется Иммуноблот. Иммуноблот ищет больше десятка специфических белков, которые иммунная система продуцирует в ответ на ВИЧ: один белок может «фонить» и давать неверный анализ, но если обнаружено множество белков – тут диагноз можно подтвердить. Полностью положительный иммуноблат трактуется как наличие ВИЧ-инфекции.

В случае сомнительного или положительного иммуноблота человек приглашается в СПИД-центр, где ему берут кровь на определение РНК самого вируса ВИЧ-1 методом ПЦР – этот анализ окончательно подтвердит или опровергнет диагноз, если до того были какие-то сомнения.

Современные тест-системы 4-го поколения HIV Ag/Ab Combo позволяют получить достоверный результат через 4-6 недель после предполагаемого заражения. Если есть серьезные опасения заражения (незащищенный половой акт с партнером ВИЧ+, использование одного шприца с ВИЧ-позитивным), то существует возможность начать постконтактную профилактику в течении 72 часов и снизить риск заражения ВИЧ.

Гепатит В – ещё один вирус, поражающий печень

Какой анализ сдается для скрининга?

В случае гепатита В ищутся не антитела нашей иммунной системы, а кусочек самого вируса, его поверхностный антиген HBsAg или «австралийский» антиген. Данный анализ вполне точен, на него не влияют специфические белки крови и, в принципе, положительный результат HBsAg говорит о наличии острого или хронического гепатита В. В теории специфичность теста равна 100%, но человеческий фактор никто не исключал.

Что сдается для подтверждения болезни?

В случае обнаружения HBsAg сдаются дополнительные анализы, которые позволяют охарактеризовать стадию болезни: антиген HBеAg и антитела Anti-HBс-total, Anti-HBс IgМ , Anti-HBе (они также могут называться HBсAb, HBсAb IgМ, HbeAb), а также ПЦР-диагностика ДНК HBV.

Это, в данном случае, неправильный вопрос. Если есть основания полагать, что произошел риск по гепатиту Б, а прививки от него нет, то необходимо её сделать в первые дни/недели после риска. Перед вакцинацией одновременно сдаются 3 анализа: HBsAg (показывает, есть ли сейчас гепатит), Anti-HBsAg (показывает, есть ли защитные антитела к гепатиту) и Anti-HBc (показывает, был ли когда-то контакт с вирусом). Интерпретация следующая:

1. HBsAg+ Анти-HBsAg- Анти-HBc+ есть гепатит В, нужно дообследоваться;

2. HBsAg- Анти-HBsAg+ Анти-HBc+ был острый гепатит В, произошло выздоровление, есть защитные антитела, больше никогда не заболеете;

3. HBsAg- Анти-HBsAg- Анти-HBc+ либо выздоровление без иммунитета, либо человек находится в точке (см. график), когда красная сплошная линия ещё не успела превратиться в красную пунктирную;

4. HBsAg- Анти-HBsAg- Анти-HBc- никогда не болели гепатитом, бежим делать прививку по схеме 0-1-6 или ускоренную 0-1-2-12 (числа — это месяцы, 0 — первая вакцинация);

5. HBsAg- Анти-HBsAg+ Анти-HBc- никогда не болели и никогда не заболеете гепатитом, прививка уже есть.

На графике показан хороший вариант течения гепатита В: острая стадия закончилась выздоровлением с формированием пожизненного иммунитета, что и происходит у 95% заразившихся гепатитом В взрослых. У оставшихся 5% пунктирные линии Anti-HBsAg и Anti-HBeAg не появляются, а уровень ДНК, HBsAg и HBeAg остается стабильно высоким – это хроническая стадия гепатита В. Такой диагноз можно поставить, только если имеются 2 положительных анализа на основной маркер HBsAg, между которыми прошло полгода и более.

Надеюсь, теперь стало чуть понятнее про разницу между антителами, антигенами и ДНК/РНК вирусов. Всем не болеть и внимательнее читайте названия анализов!

Если кому интересно, могу сделать пост о пред/пост контактной профилактике и рискам гепатитов В, С и ВИЧ — они разные, и на эту тему много мифов засели в головах.

источник