Анализы на гепатит с пцр

Вирусный гепатит С относится к наиболее опасным и тяжело диагностируемым заболеваниям. Проблема в том, что нередко эта болезнь обнаруживается только на поздних стадиях ввиду того, что основной ее формой является хроническая, а ХГС проходит бессимптомно. Однако именно ранняя диагностика позволяет подобрать наиболее подходящее лечение, которое поможет навсегда забыть о вирусном воспалении печени.

Одним из самых универсальных способов определения ВГС является полимеразная цепная реакция (ПЦР). Но что такое анализ ПЦР при гепатите С? В чем особенности этого тестирования? Чем анализ ПЦР на гепатит С качественный отличается от количественного? Как расшифровывается результат тестирования? Ответы на каждый из этих вопросов вы сможете найти в нашей статье.

Полимеразная цепная реакция относится к наиболее распространенным и точным методам диагностики ВГС. Но что показывает ПЦР анализ на гепатит С? Результаты тестирования позволяют определить наличие флававируса в организме носителя, а также степень вирусной нагрузки в его организме.

Для анализа используется проба венозной крови пациента, взятой в день проведения исследования. Сдача ПЦР-теста на гепатит С рекомендуется следующим категориям лиц:

• Пациентам с обнаруженными иммуноглобулинами к антигенам возбудителя ВГС
• Женщинам в период беременности
• Работникам медицинских учреждений, постоянно контактирующим с инфицированными биологическими жидкостями
• Пациентам, в анамнезе которых числился ранее вылеченный вирусный гепатит
• Больным с явными симптомами поражения печени

Тест на гепатит С ПЦР может быть качественным или количественным. Оба метода активно используются при диагностике ВГС. Рассмотрим подробнее особенности качественного и количественного анализа ПЦР на гепатит С.

Качественная реакция проводится в том случае, если предварительно установленный диагноз ВГС требует подтверждения. Результаты тестирования бывают положительными и отрицательными. Положительная реакция указывает на наличие возбудителя инфекции в организме обследуемого. В свою очередь, отрицательный результат указывает либо на отсутствие патогена, либо на его несущественную концентрацию.

Что такое ПЦР при гепатите (анализ качественного типа)? Это тестирование, помогающее окончательно определить диагноз. Стоимость его проведения в Москве, в зависимости от клиники, варьируется в пределах от 1800 до 3000 рублей.

Кровь на количественную полимеразную цепную реакцию сдается в том случае, если диагноз уже установлен. Анализ позволяет определить патогенную нагрузку в организме больного на текущий момент. Таким образом, лечащий врач получает информацию о том, какая площадь печени поражена флававирусом и может подобрать необходимую в конкретном случае терапевтическую схему.

Чем выше показатели патогена в крови обследуемого, тем более серьезную стадию заболевания придется лечить. Стоимость количественной полимеразной цепной реакции в московских клиниках колеблется в пределах от 1800 до 4000 рублей в зависимости от выбора медучреждения.

Итак, ответ на вопрос «Что такое анализ ПЦР при гепатите С?» найден. Но как подготовиться к предстоящей диагностике? При подготовке к сдаче образца крови для теста на гепатит С ПЦР пациент должен:

• За несколько суток до явки в лабораторию полностью отказаться от фаст-фуда и другой тяжелой и жирной пищи
• В течение 24 часа до сдачи анализа ПЦР на гепатит С не употреблять спиртные напитки и воздерживаться от курения
• В течение 8 часов до диагностики не принимать пищу
• В целях собственной безопасности, перед введением в вену инъекционной иглы проследить за тем, чтобы медработник использовал исключительно стерильный одноразовый шприц

Крови для полимеразной цепной реакции берется совсем немного. Поэтому после процедуры пациенту реабилитация не требуется. Поэтому сразу же после процедуры больной отправляется домой. Диагностика проводится в утренние часы.

Расшифровка ПЦР-теста на гепатит С проводится в условиях медицинской лаборатории. Погрешность в итоговых результатах зависит от компетентности медработников, а также от того, насколько обследуемый следовал правилам подготовки к тестированию.

В случае расшифровки анализа ПЦР на гепатит С качественного, важно учитывать порог чувствительности реагентов, колеблющийся в пределах 10-500 МЕ/мл. У качественной полимеразной цепной реакции может быть только 2 результата:

• Положительный. Диагноз вирусный гепатит С подтверждается за счет обнаружения флававируса в крови больного. Концентрация патогена в плазме крови достаточна для постановки диагноза. Если диагностика проводилась после лечения, такой результат указывает на неэффективность терапии.
• Отрицательный. Патоген отсутствует, либо концентрация его в крови до крайности мала. Подобный результат не всегда указывает на отсутсвие инфекции. Обследуемому рекомендуется сдать дополнительные тесты на чувствительность к реагентам.

Чтобы выяснить, что показывает ПЦР анализ на гепатит С при количественном тестировании, необходимо отталкиваться от серединного показателя, равного 8х10^5 МЕ/мл (800 000 МЕ/мл).

Если уровень патогенной нагрузки ниже или равен среднему, больному назначается медикаментозная терапия на основе препаратов прямого противовирусного действия. Если же показатель выше 800 000 единиц, лечащему врачу придется подумать о более серьезных мерах борьбы с ВГС. Возможно, больному понадобится трансплантация печени.

Определение вирусного гепатита С методом ПЦР проводится во многих медучреждениях столицы. При этом пройти тестирование можно как в стационарных, так и в амбулаторных условиях.

источник

ПЦР-диагностика гепатита С – это исследование биологических образцов с применением полимеразной цепной реакции. Способ заключается в многократном копировании фрагментов РНК вируса. Благодаря такой методике всего нескольких молекул возбудителя достаточно для того, чтобы тест отреагировал на присутствие вируса. Результат можно получить уже в первые 5-7 дней после контакта с зараженным человеком. ПЦР позволяет выявить факт инфицирования, а также приблизительную концентрацию HCV и его генотип.

Самая очевидная причина для назначения ПЦР на гепатит С в крови – это наличие признаков заболеваний печени:

• хроническая усталость;

• боли в области печени;

• желтизна кожи и белков глаз;

• гипертрофия печени;

• тошнота.

Анализ на ПЦР целесообразно сделать в условиях повышенного риска заражения:

1. сексуальный контакт с предполагаемым носителем гепатита;
2. повышенная активность АЛТ и АСТ, выявленные по результатам биохимического анализа крови;
3. если результат ИФА на антитела к вирусу гепатита положительный.

Другие показания к сдаче крови:

• Врачи-гепатологи назначают ПЦР на гепатит С в профилактических целях перед операциями.
• Медработники и сотрудники детских садов и школ сдают анализ в ходе плановых проверок.
• Метод показан при проведении вакцинации против вируса гепатита В.
• Анализ проводится несколько раз в ходе терапии гепатита С, чтобы оценить ее эффективность.
• ПЦР нужен для исключения смешанного поражения печени, что иногда бывает при гепатите В.

В течение дня у человека меняется соотношение эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, а также активность некоторых гормонов. Прием пищи влияет на наличие жирных кислот в крови. Этот фактор мешает точности анализа. По этим причинам анализ ПЦР на гепатит С проводится утром натощак. В качестве исследуемого образца берется кровь из вены.

Перед сдачей анализа требуется подготовка:

1. за 2-3 дня – ограничить нагрузку на печень (исключить алкогольные напитки, не употреблять жирную и жареную пищу);
2. за сутки – исключить стресс, поднятие тяжестей, посещение спортзала и бассейна;
3. за 8 часов – прекратить употребление любой пищи, так как глюкоза, жиры, минералы, попадающие в кровь, изменяют качество ферментной реакции;
4. с утра до момента сдачи крови – не курить.

На результат анализа может повлиять повышение концентрации адреналина в крови. Чтобы исключить эту погрешность, нужно прийти на 20 минут раньше, отдышаться и успокоиться.

На эффективность анализа крови могут влиять разные препараты – БАДы, средства с кофеином, этанолом, глюкозой, леводопой, пероральные контрацептивы, антибиотики. Даже если человек принимает обычные витамины, об этом нужно предупредить врача.

В настоящее время используются три метода ПЦР:

1. качественный (тест на наличие или отсутствие вируса);
2. количественный (тест на концентрацию вируса в крови);
3. с генотипированием (определяет принадлежность HVC к конкретному генотипу и субтипу).

Качественный анализ – это метод диагностики гепатита С, который позволяет подтвердить или опровергнуть присутствие вируса в крови. Выявляет наличие в определенной концентрации – в пределах 10-500 МЕ/мл. Выполняется в течение 1-4 дней и дает следующие результаты:

• «Не обнаружено» – вирус отсутствует либо его концентрация так мала, что реагент его не распознает.
• «Обнаружено» – вирус HCV присутствует, и его концентрация выше минимального порога чувствительности. Анализ выдает такой результат уже на 3-4 день после заражения.

Этот метод оценивает вирусную нагрузку, которая меняется в зависимости от стадии заболевания или этапа излечения. Метод не только показывает наличие флавивируса, но и его концентрацию в МЕ (международных единицах) на 1 мл крови. Это играет решающую роль при выборе тактики лечения гепатита С. Результаты количественной ПЦР-диагностики записываются следующим образом:

В результатах анализов очень часто можно увидеть степени, которые обозначаются как «^», например, 6*10^5 МЕ/МЛ, 10 в пятой степени это 100 тысяч, соответственно 6*10^5 МЕ/МЛ = 600 000 МЕ/МЛ.

Просто подставляйте результат вашего анализы, который стоит перед знаком умножить, и вы получите результат. Учтите, что единицы измерения могут отличаться (копий/мл, ме/мл).

Если затрудняетесь или есть вопросы по другим переменным анализов, вы всегда можете написать нашему дежурному врачу-инфекционисту (чат в правом нижнем углу экрана). Он бесплатно расшифрует ваши анализы.

Количественный анализ ПЦР на гепатит С необходим для оптимального выбора препарата. С его помощью можно прогнозировать осложнения и эффективность терапии. Он позволяет оценить степень заразности носителя гепатита для окружающих: чем большее число вирусов насчитывается в крови, тем больше риск заражения.

Сегодня известно, что у гепатита С имеется 11 генотипов и огромное количество субтипов. В разных странах есть свои приоритетные разновидности. В России в основном встречается 1 генотип (1b чаще, чем 1а), на втором месте по распространенности – 3 генотип (субтип 3а), на третьем – 2.

У каждого генотипа свои особенности. Зная их, можно спрогнозировать характер течения инфекции, риск перехода в хроническую форму и вероятность ответа на противовирусную терапию. Например, 3 генотип HCV провоцирует стеатоз, а 1 генотип требует лечения в течение 48 недель. По рекомендациям Минздрава генотипирование должно предшествовать противовирусной терапии.

Исходя из результатов, врач определяет противовирусный препарат, его дозировку, курс приема.

ПЦР-диагностика на вирусный гепатит С опережает иные методы по чувствительности, низкой вероятности ошибок и другим показателям:

• Позволяет выявить вирус на самых ранних стадиях, когда концентрация его в крови ничтожно мала. Для сравнения, иммунофлюоресцентный анализ (ИФА) реагирует только на иммуноглобулины, а они вырабатываются лишь через несколько недель в ответ на инфекцию. В то же время ПЦР реагирует на сам антиген и показывает присутствие вируса уже через 5 дней после заражения.

• Ложные результаты возникают гораздо реже, чем у других методов. Так, у ИФА возможны ложные результаты на гепатит при появлении перекрестных антител, но ПЦР реагирует непосредственно на патогены и такой погрешности не имеет.

• ПЦР – высокочувствительный метод. Анализ реагирует на присутствие РНК вируса гепатита уже 10-100 клеток в пробе и дает результат еще задолго до появления первых симптомов.

• В отличие от культуральных методов исследования, ПЦР проводится методом высокотехнологичной автоматизированной амплификации, что позволяет проводить тестирование в день забора.

Тест универсален и позволяет обнаружить несколько типов возбудителей гепатита в одной биологической пробе.

ПЦР-диагностика гепатита имеет и свои недостатки. Главный из них связан со способностью микроорганизмов к мутации. Вирусы гепатита приспосабливаются к условиям окружающей среды, и их генотип меняется. Когда это происходит, диагностическая система не может уловить гибрид. Второй недостаток ПЦР связан с возможностью получения ложноположительного и ложноотрицательного результата. Чтобы избежать ошибки, нужно соблюдать правила забора материала. Чаще всего погрешности возможны после уже проведенного лечения, поэтому принимать решение об отмене терапии может только лечащий врач.

источник

Для постановки диагноза «хронический вирусный гепатит С (ХВГС)» требуется комплексное обследование человека, которое включает клинические, лабораторные и инструментальные исследования. Важным с точки зрения диагностики для постановки правильного диагноза является метод ПЦР – полимеразная цепная реакция.

Этим лабораторным методом обнаруживают РНК вируса гепатита С в крови человека. Вместе с иммуноферментным анализом (ИФА) на антитела к вирусу, ПЦР используют для постановки диагноза ХВГС и генотипа его возбудителя. Это исследование является одним из новейших методов лабораторной диагностики. Его достоверность при ХВГС превышает 97%, что считается очень хорошим показателем для исследований.

Существует три ПЦР анализа крови при ХВГС: качественный, количественный и генотипирование вируса. Первое исследование (качественный анализ) на вирус обнаруживает его в крови, поэтому используется только для постановки диагноза.

Второе (количественное) исследование определяет степень вирусной нагрузки на организм, поэтому применяется для контроля эффективности терапии.

Третий ПЦР (генотипирование) уточняет диагноз, устанавливая генотип вируса, что очень важно для назначения правильного противовирусного лечения.

Суть методики полимеразной цепной реакции заключается в использовании ферментов, которые многократно размножают генетический материал возбудителя в биоматериале. В процессе такой репликации пробирку с кровью несколько раз подогревают и охлаждают до температуры, необходимой для ускорения ферментативной реакции. В результате этих манипуляций количество вирусного генома многократно увеличивается, что позволяет его выявить даже при минимальном количестве.

ПЦР диагностика имеет много преимуществ перед другими лабораторными исследованиями:

• высокая чувствительность – 97-98%;
• гарантированная аналитическая специфичность (выявляет именно тот возбудитель, который требуется найти, а не его родственный штамм);
• быстрота проведения (требуется не более 2 суток для получения заключения).

Качественный ПЦР анализ назначается всем пациентам, у кого ИФА-анализом были выявлены антитела к вирусу ХВГС. После проведения качественного ПЦР может быть получено два варианта ответа: «РНК обнаружено» или «РНК не обнаружено». Чтобы обнаружить в крови минимальное количество вируса, необходимы тест-системы с чувствительностью не менее 50 МЕ/мл. Если концентрация вируса в крови больного будет меньше, чем может определить диагностикум, то результат исследования может быть и ложноотрицательным. Чтобы избежать такой диагностической ошибки, лаборатории, осуществляющие ПЦР-диагностику, должны быть обеспечены высокочувствительными тест-системами. В лаборатории «Инвитро», к примеру, используются тесты с чувствительностью от 15 МЕ/мл. Информацию о чувствительности тестов работники лаборатории обязаны предоставлять пациентам и врачам по их первому требованию.

Количественный анализ ПЦР определяет степень виремии, то есть концентрацию возбудителя в крови, вирусную нагрузку. Результат этого исследования, в отличие от качественного ПЦР, выражается цифрами, например, 2×10*6 МЕ/мл, что означает 2 миллиона международных единиц в 1 мл крови. Часть лабораторий применяет другой показатель – число копий/мл. Эти два показателя легко конвертировать: 1 международная единица равна 4 копиям РНК. Таким образом, 2×10*6 МЕ/мл будет означать, что в крови больного обнаружено 8×10*6 копий вирусной РНК в 1 мл, т.е. 8 млн. копий в 1мл крови.

Генотипирование – это определение одного из шести генотипов вируса. От генотипа возбудителя зависит клиническая картина, скорость развития осложнений со стороны печени и прогноз для дальнейшей жизни пациента. Генотип вируса очень важен уже на стадии постановки диагноза, поскольку от его правильного определения зависит комбинация препаратов и длительность терапевтического курса, который будет назначен больному.

Однако даже такое казалось бы «идеальное» лабораторное исследование имеет свои минусы:

• в ходе исследования происходит репликация генетического материала всех возбудителей, даже неживых, что может исказить результат. Поэтому для осуществления контроля эффективности с помощью ПЦР повторный анализ проводят не ранее, чем через 2 месяца после предыдущего, чтобы погибшие вирусы успели «покинуть» организм больного;
• часть вирусного генома, который определяют с помощью тест-систем, теоретически может присутствовать и в других вирусах или микроорганизмах, поэтому есть вероятность ложноположительного ответа;
• вирусы быстро мутируют. Иногда скорость и степень мутирования вируса настолько высока, что тест-система перестает улавливать их геном. Как следствие, возможен ложноотрицательный результат.

Для нивелирования этих недостатков, производители лабораторных тест-систем для ПЦР диагностики постоянно проводят их испытания, в том числе на перекрестные реакции и на чувствительность к тому или иному генотипу вируса.

Чтобы заключение обследования методом ПЦР были достоверными, необходимо строго соблюдать правила подготовки к его проведению:

• исследование проводится на голодный желудок (глюкоза, жиры, минералы, попадающие в кровь из пищи, могут повлиять на скорость и качество ферментной реакции);
• разрыв между последним приемом пищи и отбором крови для анализа должен составлять не менее 8 часов;
• накануне исследования запрещено принимать алкоголь и употреблять жирную пищу, период выведения которых затяжной;
• за сутки до похода в лабораторию следует избегать сильных физических и эмоциональных нагрузок;
• до момента забора крови не рекомендуется курить.

Чтобы избежать появления ложных заключений, предполагаемому больному необходимо прийти в лабораторию немного раньше, чем будет проведен забор крови. Нужно 15-20 минут для того, чтобы человек отдышался, успокоился. Адреналин, присутствующий в крови после быстрой ходьбы, может повлиять на результат обследования.

Если направляемый на анализ пациент принимает какие-либо лекарственные препараты, об этом он должен уведомить врача. Вполне возможно, что от приема некоторых из них придется на некоторое время отказаться (если это возможно).

Расшифровкой результатов занимается врач-лаборант той лаборатории, которая проводила анализ. Расшифровка – это определение отклонения полученного результата от нормы. Норма показателей устанавливается непосредственно производителем тест-системы, которая используется лабораторией для диагностики. Поэтому не стоит удивляться, что в одних лабораториях вирусную нагрузку определяют в МЕ/мл, а в других – в копиях/мл.

Получив заключение, его нужно уметь правильно трактовать. Трактовкой результатов исследования должен заниматься лечащий врач больного гепатитом С. Только после объективного, инструментального и лабораторного обследования пациента, врач может получить достаточное количество данных для грамотной трактовки полученных результатов ПЦР.

Оценка качественного анализа, как правило, не вызывает затруднений, даже у пациентов. Результат там может быть только один: «обнаружен» или «не обнаружен». При этом второй из них является нормой.

Показатели количественного анализа трактовать сложнее. Он показывает степень вирусной нагрузки на пациента. Даже среди гепатологов нет единого мнения по поводу того, как трактовать обнаруженную виремию. Большинство врачей склоняются к тому, что высокой нужно считать нагрузку более 8×10*5 МЕ/мл. Очень высокой считается нагрузка более 1×10*7 МЕ/мл, а низкой – менее 4×10*5 МЕ/мл.

Степень вирусной нагрузки говорит о вирулентности (агрессивности) вируса: чем больше его количество в крови, тем быстрее могут развиваться осложнения со стороны печени. Высокая концентрация вируса в крови беременной женщины повышает вероятность его проникновения через гематоплацентарный барьер к плоду. Виремия также влияет на эффективность лечения: при низких цифрах результативность терапии выше, чем при высоких.

Для того, чтобы быть уверенным в достоверности проведенного анализа ПЦР на гепатит С, нужно отдавать предпочтение только тем лабораториям, которые хорошо себя зарекомендовали. Ценовая политика при этом не должна играть первостепенную роль.

источник

Причина развития вирусного гепатита C – инфицирование возбудителем, который относится к семейству Flaviviridae. Между заражением и началом выработки антител выявляется длительный временной промежуток, что не позволяет своевременно диагностировать заболевание посредством иммуноферментного исследования крови.

Анализ ПЦР на гепатит C, биохимия, ОАК, печеночные пробы проводятся при подозрении на заражение. Путем полимеразной цепной реакции можно выявить вирус в крови даже на первой неделе инфицирования, что выступает доминирующим преимуществом метода.

Количественный и качественный анализ на гепатит C и особенности исследования, как нужно подготавливаться, бывают ли ошибки, расшифровка – рассмотрим подробно.

Полимеразная цепная реакция – методика молекулярного исследования для определения генетического материала вирусного агента с первых дней инфицирования. Анализ характеризуется высокой степенью достоверности, специфичностью, точностью. Благодаря нему не только выявляют отсутствие/наличие вируса, но и вирусную нагрузку (количественное значение), генотип.

Для исследования необходима кровь больного, в которой предположительно находится РНК вирусной инфекции. В лабораторных условиях в биологическую жидкость добавляют праймеры – это синтезированные искусственным образом фрагменты искомого гена малой длины. Плюс РНК-полимеразу – специализированный фермент, многократно увеличивающий концентрацию искомого материала.

Далее кровь с добавлением компонентов нагревают и охлаждают несколько раз в специальном приборе. После идет анализ полученных результатов, сопоставление с известными генами вирусного агента. На основе этого делают заключение о заболевании.

Анализ на гепатит C ПЦР проводится в лаборатории с добавлением нужных реагентов, имеет три разновидности с отличительными характеристиками:

1. Качественный ПЦР анализ на гепатит C является первым этапом исследования. Посредством него обнаруживают генетический материал возбудителя в сыворотке крови.
2. Количественное исследование позволяет оценить вирусную нагрузку – это содержание вирусного материала в 1 мл крови больного. Проводится перед началом курса лечения, а потом после 1-4-12 недели терапии. Когда курс продолжительный, то исследование необходимо провести после 24 недели терапии, чтобы оценить результативность.
3. Генотипирование. Заразное заболевание развивается стремительно, вирус имеет свойство мутировать. Поэтому необходимо выявить генотип вируса.

Ученые выявили 7 генотипов вируса. В РФ большую распространенность получили 1-2-3 виды.

Каждый из генотипов характеризуется устойчивостью к лечению.

Например, при 1-м типе результативность терапии около 60%, на фоне 2-3 вида показатель достигает 85%.

Чтобы подобрать нужные лекарства, продолжительность лечения, требуется выявить не только сам факт заражения, но и концентрацию вируса, его генотип.

Маркеры на гепатиты, ПЦР и ИФА, другие исследования имеют определенные медицинские показания:

• Когда в анамнезе больного ВИЧ-инфекция, СПИД.
• Контакт с зараженным человеком, поскольку вирусный гепатит отличается высокой степенью контагиозности.
• Симптоматика циррозного поражения печени – гепатомегалия, увеличение размеров селезенки, на животе проявился венозный рисунок и пр.
• Клиника функционального нарушения печени – периодическая/постоянная боль в области правого подреберья, пожелтение кожного покрова, тошнота.
• Высокие значения АСТ и АЛТ в биохимии крови.
• При беременности, когда плохие показатели печеночных проб.
• Перед началом противовирусного курса, чтобы определить вирусную нагрузку.
• Для контроля результативности проводимой терапии.
• После терапии, чтобы предупредить рецидив вирусной инфекции.

ПЦР проводится при подтвержденном диагнозе гепатита B, чтобы исключить смешанный вид поражения печени.

Как готовиться к анализу, расскажет доктор. Чтобы получить точный результат, пациенту рекомендуется подготовка. Она состоит в следующих рекомендациях:

1. Анализ нужно сдавать утром, натощак. Допускается перед забором крови пить только чистую, негазированную воду. Последний прием пищи – за 8 часов до забора.
2. Если не получается сдать анализ в утренние часы, это можно сделать вечером или в обед, главное – через 5-6 часов после приема пищи, не раньше.
3. За 48 часов до исследования отказаться от алкогольной продукции, кофеинсодержащих напитков, соков.
4. За 2 суток нужно соблюдать диету, исключив все вредные продукты. Однако некоторые врачи полагают, что жирная, жареная еда не сказывается на точности ПЦР исследования.

За 24 часа до медицинской манипуляции не принимать лекарства. Если это невозможно, сообщить лечащему врачу. Анализ не рекомендуется выполнять сразу же после УЗИ, КТ, массажа и др. физиотерапевтических процедур.

Забор крови происходит следующем образом:

• Посредством специального жгута, который затягивается на предплечье пациента, медик останавливает венозный кровоток. Вены становятся более заметными, что облегает процедуру введения иглы, последующего забора крови.
• Участок кожи перед введением стерильной иглы обрабатывают спиртосодержащей жидкостью.
• В вену вводят иглу, после к ней прикрепляют пробирку, в которую поступает кровь.
• После введения иглы жгут снимают. Набирают необходимое количество крови, извлекают иглу.
• К месту укола прикладывают ватку, смоченную в спирте.

Чтобы предупредить формирование синяка в месте введения иглы, необходимо ватный тампон достаточно сильно прижать к травмированной области, согнуть руку и держать в таком положении 3-4 минуты.

Если больной принимает лекарства, способствующие разжижению крови (Аспирин, Варфарин), могут быть определенные проблемы с остановкой кровотечения.

У метода полимеразной цепной реакции имеются определенные преимущества в сравнении с другими диагностическими методиками.

Плюсы исследования представлены в таблице:

Когда пациент получает положительный результат, это будет означать, что в биологической жидкости был обнаружен генетический материал возбудителя гепатита. Отрицательный итог – следы вируса отсутствуют.

Расшифровывать результаты должен доктор на основании заключения, которое пациент получает в лаборатории. Анализировать данные необходимо в совокупности с показателями биохимии, ОАК, УЗИ.

Качественное исследование будет показывать наличие либо отсутствие возбудителя вирусного заболевания в крови человека. Вариантов может быть два – отрицательный (норма) либо положительный результат.

В бланке иногда написано: обнаружено или не обнаружено.

Положительный результат – лаборант выявил в крови больного генетический материал вирусного агента, заражение подтверждено. Отрицательное заключение – заражения нет, фрагменты РНК вируса находятся ниже пределов чувствительности.

Количественный анализ подразумевает несколько вариантов результатов. Для удобства ознакомления представим их в виде таблицы.

Результат – обнаружена рибонуклеиновая кислота конкретного генотипа. Дополнительно указывают генотип и подтип, лаборант кодирует заключение латинскими буквами и цифрами. Например, генотип 1a. Всего выделяют 7 генотипов, 67 подтипов.

Результат – обнаружена РНК вирусного гепатита C – это ДНК редкого генотипа, который нельзя отнести к распространенным вирусным агентам, поэтому требуется провести дополнительную диагностику.

Расшифровывает заключение лаборанта гепатолог либо инфекционист. Всегда есть риск получения ложноотрицательного или ложноположительного результата. Иногда бывает, что ПЦР отрицательно, а ИФА положительно.

Это означает, что в данный момент вируса в крови больного нет, однако заболевание в острой форме им перенесено. Принято считать, что ИФА показывает антитела, которые продуцируются иммунной системой после вторжения в организм возбудителя.

ИФА в сравнении с ПЦР отличается малой надежностью и достоверностью, поэтому используется в качестве первичного скрининга. При диагностике вирусного гепатита без полимеразной цепной реакции не обойтись.

Сдать анализы можно в больнице, где больной наблюдается, если там имеется своя лаборатория, либо обратиться в частный центр на платной основе.

В короткие сроки получить результат можно в лабораторных центрах как Гемотест, Инвитро, Хеликс.

Стоимость исследования в зависимости от лаборатории:

Срок проведения исследования в среднем 2-3 дня. В некоторых лабораториях имеется услуга как срочный анализ, его стоимость в 1,5-2 раза выше. Также есть возможность вызвать медицинского специалиста домой, чтобы сдать кровь, а результаты получить по электронной почте либо лично при обращении в лабораторию.

источник

До 1990-х годов для определения инфекционного гепатита С в медицинской литературе использовали термин «гепатит ни А, ни В с парентеральным механизмом заражения». Но в 1989 году был впервые выделен Hepatitis C virus (аббревиатура – HCV), однако достоверные методы диагностики, включая ПЦР на гепатит С, появились гораздо позже.

Полимеразная цепная реакция (расшифровка аббревиатуры ПЦР) с целью выявления HCV-инфекции является одной из составляющих общего скрининга, который в обязательном порядке назначается людям и больным при:

• беременности (исследование проводят несколько раз – при постановке на учет и в последнем триместре);
• донорстве крови и органов;
• у реципиентов перед и после переливания/трансплантации;
• работе, связанной с повышенным риском инфицирования;
• планировании хирургического вмешательства и других инвазивных манипуляций;
• поражении печени (анализ выполняют в ходе первичного обследования);
• проведении постоянных процедур гемодиализа;
• сопутствующем ВИЧ;
• онкологических заболеваниях;
• контакте с инфицированным человеком.

Проведение скрининга рекомендовано людям, употребляющим наркотические средства, предоставляющим сексуальные услуги, неразборчивым в половых связях. При этом такое же обследование необходимо пройти и их сожителям или постоянным партнерам. В обязательном порядке анализ на HCV показан детям, рожденным от инфицированных матерей.

Сам возбудитель болезни представляет собой РНК-содержащий вирус, покрытый липидной оболочкой. За трансляцию генома «отвечает» терминальный участок, состоящий из порядка 340 нуклеотидных субъединиц. Его структурное строение схоже у 90% различных подтипов HCV. Именно он и является основной мишенью для проведения анализа на гепатит С методом ПЦР.

Дополнительно состав вирусного генома представлен ядерным (core) и неструктурными (NS) участками. Первый регулирует репликацию возбудителя заболевания, а NS обеспечивают быстрое проникновение вируса в здоровую клетку. Зачастую на участке NS E2 отмечают вариабельность структуры, чем объясняют отсутствие должного иммунного ответа у некоторых пациентов, скрытое развитие патологии и склонность к хроническому течению (до 80% случаев).

В связи с широким распространением гепатита С во многих клинических центрах проводятся бесплатные анализы. Предоставление результатов исследования является обязательным требованием для оформления санитарной книжки.

Помимо подтверждения HCV-инфекции, современные методы диагностики позволяют оценить тяжесть течения заболевания, определить генотип вируса. Это влияет на схему терапии (подбор комбинации лекарственных препаратов, их дозировки, продолжительности приема) и прогноз патологии.

Анализ крови на гепатит С можно сделать несколькими методиками, причем каждая отличается по информативности и надежности.

Все способы диагностических исследований можно разделить на несколько групп:

1. Серологические, способные обнаружить определенные антитела (иммуноглобулины), которые вырабатываются в организме в ответ на проникновение патогена, выполняется по методу ИФА либо иммуноблоттинга.
2. Молекулярные, направленные на определение РНК вируса гепатита С. Результаты исследования демонстрируют вирусологическую нагрузку, часто используются для контроля эффективности проводимой терапии, позволяют определить генотип HCV, что важно для подбора медикаментозного лечения. К данной группе диагностических тестов относят ПЦР, ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией (метод real time).
3. Генотипирование, назначается всем без исключения пациентам до начала приема противовирусных медикаментов. Необходимо для планирования продолжительности, иногда – для подбора дозировки лекарственной терапии.

В последнее время получает распространение анализ для определения генотипа пациента относительно интерлейкина IL28В. По данным клинических исследований, подобный тест позволяет прогнозировать время, необходимое для достижения устойчивого вирусологического ответа у пациентов с HCV I генотипа на фоне лечения ингибиторами протеаз первого поколения.

Проблемы, где сдать кровь на ПЦР или другие тесты для выявления HCV, в настоящее время нет. Срочный анализ можно сделать в платной лаборатории. В районных поликлиниках и больницах исследования выполняют в порядке очереди (за исключением проведения по строгим показаниям).

У пациентов часто возникает вопрос, что такое ПЦР анализ при гепатите С, и чем он отличается от других способов диагностики? Данная методика заключается в воспроизведении множества копий ДНК на основе РНК вируса. Это самый точный анализ, позволяющей определить генотип патогена и его количественное содержание как в сыворотке крови, так и в биоптате тканей печени.

Диагностика HCV-инфекции включает комплекс различных исследований. Биохимический анализ крови не может показать заражение. Отклонение результатов (уровня печеночных ферментов, билирубина и т.д.) от физиологических параметров свидетельствует о нарушении работы печени, и задача врача – установить причину подобной проблемы.

Для начала сдают ряд простых исследований, к числу которых относится:

• общий анализ крови (при HCV-инфекции возможно изменение уровня лейкоцитов, гемоглобина, количества форменных элементов крови и других показателей);
• биохимия (повышение концентрации печеночных ферментов, билирубина свидетельствует о тяжести поражения печени);
• тесты на сопутствующие инфекции (обязательно на ВИЧ, иногда – на некоторые венерические заболевания).

Для оценки общей клинической картины доктор выдает направления на анализ мочи, ультразвуковое обследование внутренних органов, рентгенографию или флюорографию грудной клетки. Другие диагностические процедуры делают по показаниям.

Какие анализы на гепатит С необходимо сдавать для точного определения диагноза ? В соответствии с рекомендациями ВОЗ, диагностику HCV начинают с серологического исследования методом ИФА (при наличии выраженных отклонений в биохимии). Если данный тест покажет положительный результат, необходимо проведение дальнейшего обследования пациента. Помимо ПЦР и общеклинических анализов, назначают HBS ag HCV. Некоторые противовирусные препараты могут спровоцировать обострение гепатита В, поэтому перед началом лечения эту патологию необходимо исключить.

Основным преимуществом ПЦР для определения HCV является возможность ранней диагностики (через 18–21 день после инфицирования). Выявление РНК вируса в крови позволяет однозначно трактовать неубедительные данные ИФА. Положительный результат служит однозначным показанием для дальнейшего обследования и назначения лечения, а отрицательный (при отклонениях от нормы анализов на биохимию) – поводом для повторного обследования через 3–4 недели.

Существует несколько разновидностей ПЦР-диагностики HCV:

1. Качественный. Что показывает качественный анализ ПЦР на гепатит C? Проведение подобного исследования позволяет определить, заражен ли человек. Специалисты рекомендуют делать пробу ультрачувствительным методом (с восприимчивостью тест-систем не менее 10–50 МЕ/мл). Расшифровка результатов проста – положительный указывает на инфицирование и прогрессирующее распространение вируса в организме, отрицательный – или на отсутствие заболевания, или на ничтожно малую концентрацию возбудителя (вполне возможно, что иммунная система человека справится с патогеном самостоятельно).
2. Количественный. Количественный анализ на гепатит С методом ПЦР (в отличие от качественного теста) позволяет количественно определить вирусную нагрузку, то есть уровень РНК HCV в объемной единице крови. Расшифровать результаты можно на основе диапазона нормы и патологических значений, измеряющихся в МЕ/мл. Положительной считается вирусная нагрузка выше 75 МЕ/мл. Количественное исследование будет отрицательным при значениях ниже 75 МЕ/мл.
3. Генотипирование. Подобный анализ сдается при установленном диагнозе HCV-инфекции для разработки индивидуального подхода к пациенту. Проводится с помощью секвенирования и обратной гибридизации. Вирусная нагрузка может меняться на протяжении болезни, однако генотип остается прежним.

Изучение различными методиками ПЦР показано на различных этапах диагностики и лечения гепатита С. Количественный повторяют чаще прочих для контроля эффективности противовирусной терапии.

Основными показаниями к сдаче крови на гепатит С служат:

• беременность (показан плановый скрининг);
• профилактический осмотр у людей из группы риска (медицинские работники, волонтеры в наркологических центрах);
• ВИЧ;
• незащищенный половой контакт с инфицированным человеком;
• неразборчивые сексуальные связи.

С учетом высокой распространенности гепатита С специалисты рекомендуют проводить исследование с профилактической целью каждому человеку. Риск заражения присутствует при посещении стоматологического кабинета, маникюрного/педикюрного салона, где недобросовестно относятся к стерилизации инструментов и т.д.

Строгим показанием к проведению анализов служит появление характерных и неспецифических симптомов гепатита С. К наиболее распространенным признакам относят:

• общую слабость;
• длительно сохраняющийся субфебрилитет на фоне отсутствия других инфекций;
• изменение цвета кала и/или мочи;
• тошноту, рвоту.

Желтушность слизистых оболочек и эпидермального покрова встречается редко. У 80% пациентов заболевание длительное время протекает бессимптомно, часто диагностируется случайно, в ходе плановой диспансеризации.

Выполнить анализ на гепатит С методом ПЦР можно практически в любой частной лаборатории или поликлинике по месту жительства. При госпитализации обследование делают в больнице в условиях стационара.

Преимуществами лабораторного центра служат:

1. Отсутствие необходимости в направлении от врача.
2. Короткие сроки выполнения исследования. Сколько делают анализ, скажет лаборант при оформлении заказа. Обычно это 1–2 дня. Некоторые лаборатории за отдельную плату предоставляют услуги проведения срочного исследования.
3. Сервис (отсутствие очередей, удобная оплата онлайн, получение результатов по электронной почте).
4. Качество оборудования, на котором проводится исследование (для исключения ложноположительного анализа).

Однако без предварительной консультации врача сложно определить, какой именно вид ПЦР нужен. Также нельзя самостоятельно интерпретировать результаты. Некоторые лаборатории используют различные шкалы измерения вирусной нагрузки, что может стать причиной ошибки. Исследование методом полимеразной цепной реакции нередко является частью комплексного обследования, включающего как лабораторные, так и инструментальные тесты, которые дешевле выполнять в поликлинике по полису ОМС.

На результаты может повлиять незнание правил, как сдавать кровь. Основной материал для ПЦР – сыворотка. Информативно исследование биоптата печени, однако инвазивная процедура не подходит для рутинного анализа. Как сдать кровь правильно?

Для получения достоверных результатов соблюдают следующие рекомендации:

1. Сдают кровь строго натощак: прием пищи исключается за 10–12 часов до процедуры.
2. За 2–3 дня до анализа воздержаться от потребления алкоголя, «тяжелой» (жирной, жареной, соленой, копченой) пищи, приправ.
3. Утром перед исследованием можно пить только воду (чай, кофе противопоказаны).
4. За сутки ограничить тяжелую физическую активность.
5. За 10 часов до процедуры воздержаться от курения.

Забор крови осуществляется из вены.

Необходимо проконсультироваться с врачом и поставить в известность специалиста, если пациент принимает какие-либо лекарственные препараты. По возможности, следует приостановить использование медикаментов за сутки до сдачи крови.

Конкретные сроки выполнения анализа на HCV методом ПЦР зависят от загруженности лаборатории и наличия необходимого диагностического оборудования. Например, если материал транспортируют из пункта забора крови в лабораторный центр, время выполнения исследования увеличивается.

Сколько в среднем делается анализ на гепатит С? В большинстве диагностических центров установлены следующие сроки для проведения исследования:

• качественное определение вируса – 1–4 дня;
• количественное выявление вирусной нагрузки методом ПЦР – 1–2 дней;
• генотипирование – 1–4 дня.

В поликлиниках данный срок может составлять до 7–10 дней. При выполнении исследования в частном лабораторном центре на руки выдается квитанция с кодом, по которому можно загрузить полученные результаты. Как правило, при готовности пациенту приходит сообщение с уведомлением.

Данные лабораторного исследования выдаются пациенту в виде таблицы, где обязательно указаны следующие параметры:

• вид ПЦР (качественная, количественная или генотипирование);
• какие результаты анализов получены;
• референсные значения и расшифровка отклонения от нормы (данная графа может присутствовать не на всех бланках во избежание ошибочной диагностики и последующего самолечения).

Также указывают дату забора крови и выдачи результатов, координаты и печать лабораторного центра, ФИО и роспись медицинского работника, проводившего исследование.

Расшифровка, т. е. что означает полученный результат, должна проводиться только квалифицированным врачом.

Данные, которые может показать исследование методом ПЦР, приведены в таблице ниже:

Расшифровкой результатов должен заниматься квалифицированный специалист. Так, иногда возникают ситуации, когда ИФА на гепатит С положительный, а ПЦР отрицательный. Подобное расхождение объясняют несколькими причинами. Это может быть ошибкой лаборатории, поэтому одно из исследований необходимо повторить спустя 2–3 недели.

Иногда такие результаты возникают вследствие скрыто перенесенной острой HCV-инфекции. ИФА определяет наличие антител, но по факту, РНК вируса в организме или отсутствует, или не выявляется из-за ничтожно малой концентрации. В любом случае пациент с подобными данными исследований нуждается в дальнейшем наблюдении и консультациях врача.

Качественный анализ ПЦР является относительно быстрым и наиболее точным методом первичной диагностики гепатита С. По результатам исследования можно определить, заражен человек или нет, а затем проводить более детальные лабораторные методы. Ложноотрицательный результат вероятен в первые 14–21 день после заражения, когда количества РНК вируса недостаточно, для выявления даже высокочувствительными тест-системами.

Ложноположительный результат возможен по вине сотрудников лаборатории. Иногда такие данные получают при беременности, активном течении онкологических и/или аутоиммунных заболеваний.

Чтобы исключить вероятность неправильной расшифровки, качественный анализ рекомендуют повторить через 3–4 недели.

Количественный анализ методом ПЦР на гепатит С обычно назначают для определения вирусемии в ходе противовирусной терапии. В норме, по мере приема лекарственных средств вирусологическая нагрузка постепенно снижается. Цель лечения – отрицательные или минимально допустимые показатели исследования.

Расшифровка результатов зависит от единиц измерения, используемых в лаборатории, поэтому обычно в бланке указывают полученные данные, референсные значения и описание отклонений от нормы.

Количественный анализ ПЦР необходим для оценки эффективности лечения, подбора схемы терапии (сочетание нескольких противовирусных препаратов), определения продолжительности приема медикаментов. Исследование периодически проводится и после окончания курса лечения для своевременного выявления рецидива.

Одно из основных исследований, которые проводятся на этапе диагностики и обязательно до начала терапии, так как генотип – главный фактор, влияющий на подбор лекарственных средств.

К настоящему моменту известно об 6 генотипах HCV (каждый имеет свои подтипы), но в России и странах Европы у подавляющего числа больных выявляют:

• 1b – один из самых неблагоприятных в плане прогноза, быстро переходит в хроническую форму, агрессивен по отношению к тканям печени, сложно поддается терапии;
• 4 – плохо «отвечает» на терапию, требует тщательного подбора схемы приема препаратов;
• 2а, 3а – успешное лечение отмечают в 70% случаев и чаще (при использовании современных противовирусных медикаментов).

Остальные генотипы диагностируют реже. В отличие от количественного анализа, генотипирование выполняют один раз и не повторяют в процессе лечения (исключение составляют устойчивые формы HCV, не поддающиеся терапии.

Несмотря на то, что ВОЗ рекомендует ИФА как основной метод выявления HCV-инфекции, исследование методом ПЦР имеет ряд «плюсов»:

• высокая точность;
• возможность первичной диагностики;
• оценка эффективности лечения по определению вирусологической нагрузки;
• точное установление генотипа вируса, что предопределяет тактику дальнейшего лечения;
• доступная стоимость.

Пункты забора крови для проведения исследования есть в любом городе, что дополнительно облегчает диагностику и делает сдачу анализов доступными для каждого пациента.

Стоимость анализа ПЦР на гепатит С зависит от ряда факторов:

1. Ценовая политика лабораторного центра и его местонахождение (так, в Москве подобные услуги обходятся дороже).
2. Разновидность исследования (цена на качественный, количественный анализ и генотипирование отличается).
3. Сроки выполнения (ряд лабораторий предлагают доплатить определенную сумму за срочное получение результатов).

Узнать, сколько стоит ПЦР на гепатит С можно либо по телефону, либо на интернет-сайте лаборатории.

Средняя цена по России составляет:

• качественное определение РНК вируса – 700–1000 рублей и до 3000 рублей с использованием ультрачувствительных тест-систем;
• генотипирование – 1000–1200 рублей (в комплексе с количественным определением – до 4000 рублей);
• количественное определение вирусологической нагрузки – 2300–3000 рублей.

В поликлинике по месту жительства подобные исследования проводят бесплатно (при наличии полиса ОМС). Но лаборанту обязательно предъявляют направление от лечащего врача.

источник

➤ На нашем портале вы можете записаться на услугу анализ пцр на гепатит с по телефону +7 (499) 116-80-04 или онлайн. У нас собраны актуальные цены и проверенные отзывы пациентов о лучших клиниках Москвы.

Обратите внимание! Информация на странице представлена для ознакомления. Для назначения лечения обратитесь к врачу.

Анализ ПЦР на гепатит С (HCVRNA, РНК гепатита С) – лабораторное исследование крови, определяющее в ней наличие генетического материала вируса гепатита С и выполняемое методом полимеразной цепной реакции. Помимо показателей наличия инфекции в организме, он определяет специфику и характер вирусных частиц. Анализ крови выполняется для ранней диагностики и коррекции терапии заболевания.

Анализ ПЦР на гепатит С назначают в следующих случаях:

• подозрение на гепатит С у пациента;
• сопутствующие заболевания печени;
• выявление антител к вирусу гепатита С по результатам иммуноферментного анализа (ИФА).

Показаниями к исследованию могут стать такие симптомы:

• боли и спазмы в правом подреберье;
• снижение аппетита;
• отвращение к белковой пище;
• общая слабость;
• повышенная утомляемость;
• апатия;
• ломота в суставах;
• расстройства пищеварения;
• папулезная сыпь на коже и слизистых;
• сосудистые звездочки и сетки на коже;
• пожелтение кожных покровов и глазных склер;
• плотный белесый налет на языке;
• неприятный запах изо рта.

Первоначальные проявления гепатита С размыты, поэтому его называют «ласковым убийцей». Патология может не проявляться. Нарастание симптоматики сигнализирует о ее стойком прогрессировании или присоединении смежных заболеваний. Обнаружение признаков гепатита С – повод для срочного обращения к врачу. Помните, что прогнозы при запущенной болезни неблагоприятны. Как и СПИД, гепатит С часто завершается летальным исходом. Смерть обычно наступает из-за гепатоцеллюлярной карциномы или острой печеночной недостаточности.

Анализ ПЦР на гепатит С классифицируется по двум типам:

Тип анализа проводится при настораживающих результатах маркеров гепатита С и ИФА (обнаружение присутствующих в сыворотке крови антител). Позволяет окончательно подтвердить или опровергнуть наличие вируса в крови. Сдавать анализ следует на 4, 12, 24 неделю после идентификации антител. В профилактическом режиме диагностика выполняется раз в год. Тест ультрачувствителен (10-500 МЕ / мл), поэтому его точность достигает 99%. Если вирус присутствует в концентрации, меньшей 10 МЕ / мл, дается расшифровка «не обнаружен». Интерпретирующий врач обязан учитывать индивидуальные особенности пациента, в том числе, текущее прохождение любой противовирусной терапии.

Это исследование актуально при диагностированном вирусном гепатите. Применяется для отслеживания динамики лечения и дачи прогнозов течения патологии. По исследованию определяют так называемую «вирусную нагрузку» (концентрацию частиц в крови). Низкий параметр (менее 800 МЕ / мл) сигнализирует о хорошей динамике и относительной безопасности пациента для окружающих, высокий (более 800 МЕ / мл) – наоборот.

Для экспертизы требуется венозная кровь, взятая в утреннее время натощак.

В современной практике жидкость предпочитают исследовать тактикой Real-Time ПЦР. Анализ позволяет измерять количество амплифицированной РНК, определять штамм вируса (генотипирование), проводить и качественное, и количественное исследование в режиме реального времени. Классическая ПЦР проводится в 4 этапа: выделение ДНК и РНК, амплификация и электрофорез. Она считается менее информативной.

Перед диагностикой воздерживайтесь от любой пищи в течение 8 часов. За сутки важно исключить тяжелые физические нагрузки. За 2-3 дня – отказаться от алкоголя и жирных блюд. Исключите прием гепарина – его примеси в крови дают ложноположительный результат исследования.

Сообщите врачу о схематическом приеме любых препаратов.

Сроки готовности составляют 24 часа.

Результат – достоверное определение гепатита С в организме, оценка генотипа вируса, подбор терапии с учетом особенностей течения болезни.

На сайте представлено 4 клиники, в которых можно пройти анализ ПЦР на гепатит С. Как выбрать правильную?

Для объективности восприятия следует читать и положительные, и отрицательные отзывы пользователей.

• Шаг 2. Определяем приемлемую стоимость

Многие клиники и медицинские центры проводят акции на диагностические процедуры. Это помогает пациентам экономить деньги для важных расходов.

• Шаг 3. Выбираем удобную локацию

Воспользуйтесь сортировкой по местоположению, чтобы выбрать ближайшее к дому учреждение. Помните, что большинство анализов сдается утром. А долгие «голодные» поездки в час пик могут выбить вас из колеи на весь день.

• Шаг 4. Оцениваем оснащение

Желательно, чтобы клиника располагала собственной лабораторно-исследовательской базой. Это повышает надежность исследований и обеспечивает возможность проведения срочного анализа.

Вам удалось найти отличную клинику и врача, который помог вам? Поделитесь информацией с другими пациентами – оставьте развернутое мнение на портале.

Выбирая врача для проведения процедуры, опирайтесь на отзывы пациентов о конкретном специалисте.

источник