Анализ на вирусный гепатит с генотипирование

Для проведения адекватной терапии, подбора лекарственных средств и составления прогноза исхода заболевания.

ВОЗ выделяет 6 основных генотипов вируса гепатита С. Каждый определенный тип наиболее распространен в конкретном регионе или стране. Генотипы от 1 до 3 распространены по всему миру, на Ближнем Востоке, в Африке у пациентов 4 генотип определяют чаще, шестой присущ азиатским странам, пятый распространен в ЮАР.

Кроме основных типов различают подтипы или квази-типы, от отдельного подтипа зависит течение заболевания и клинические проявления. Чувствительность вируса к применяемым схемам терапии зависит от генотипа и подтипа вируса.

• Первый имеет три квази-типа a, b и c.
• 2 генотип вируса гепатита С разделяется на четыре формы – от a до d.
• У третьего типа 6 подтипов – от a до f.
• 4 генотип имеет 10 квази-типов – от a до j.
• Пятый и шестой генотипы гепатита С имеют только подтип a.

Чтобы правильно определить тип вируса необходимо сдать анализ на генотип гепатита С. Он называется генотипирование вируса гепатита С.

Метод исследования – ПЦР (полимеразная цепная реакция) Real time. Этот метод позволяет произвести правильное определение генотипа гепатита с точностью более 97%.

Для диагностики генотипированием вируса гепатита С берется венозная кровь. Выявляется идентифицирующий участок РНК. В большинстве лабораторий при анализе на генотип гепатита С определяются самые распространенные квази-типы – 1,2 и 3.

Иногда генотип при проведении генотипирования HCV не определяется, такой результат проведенного анализа крови на генотип гепатита С не означает, что вируса нет. Такой исход можно объяснить двумя причинами:

1. нетипичный генотип для конкретного региона, необходим другой набор реагентов для проведения анализа на генотип вируса гепатита С;
2. низкие концентрации вирусных РНК в крови пациента, тогда нужна более мощная и чувствительная аппаратура для проведения генотипирования вируса гепатита С.

При комбинации двух типов вирусов в одном организме также осложняется проведение генотипирования HCV. Сдавать анализы лучше в крупных лабораториях, обладающих всем необходимым набором реактивов и современным оборудованием, тогда можно быть уверенным в результатах проведенных исследований.

Генотип с течением времени не может измениться, поэтому результат анализа действителен на протяжении всего курса лечения.

При проведении анализа на генотип гепатита С цена – это немаловажный фактор, в зависимости от региона она может варьироваться от 1200 до 2000 рублей. Это небольшая цена за уверенность в отсутствии или наличии определенного типа. Это крайне важно для назначения правильной схемы лечения, которая действительно поможет с 99% гарантией.

С появлением в 2013 году прямых противовирусных препаратов (ингибиторов обратной транскриптазы), ВОЗ и Европейской ассоциацией по изучению печени (EASL) были разработаны новые схемы лечения в зависимости от генотипа гепатита С. Выздоровление наступает в более 96% случаев.

После получения нового прямого противовирусного препарата Велпатасвира началась новая эра в лечение гепатита С. Комбинация Велпатасвира с Софосбувиром позволяет излечить пациентов даже без получения результата анализа крови на определение генотипа гепатита С. Перед пациентом и врачом уже не так остро стоит вопрос – как определить генотип гепатита С, как это было раньше до появления Велпатасвира. Но всё же генотипирование остается важным звеном диагностики и исключать его нельзя.

Для получения гарантированного положительного результата лечения необходимо не только пить назначаемые врачом препараты, но и соблюдать следующие ограничения:

• не употреблять алкоголь, наркотические вещества;
• хотя бы на время лечения нужно бросить курить;
• не применять народные средства и гепатопротекторы;
• максимально исключить любые нагрузки на печень – фаст-фуд, жирное, жареное, копченое.

Имеются клинически подтвержденные данные, что самолечение и алкогольная зависимость в большом проценте случаев приводят к циррозу. Кроме вирусной нагрузки пациент дополнительно разрушает печень этилом.

При сопутствующих заболеваниях, таких как: сахарный диабет, лишний вес, патологии щитовидной железы, индивидуальная непереносимость компонентов медикаментов, может потребоваться корректировка схем лечения. Все решения по изменению терапии может правильно принять только лечащий врач (вирусолог, гепатолог).

До появления прямых противовирусных средств самым опасным генотипом гепатита С считался 1b. Он в большинстве случаев приводил к тяжелым поражениям печени – циррозу, печеночной недостаточности, тяжелой интоксикации, раку печени. Заболевание протекало очень тяжело и только половина больных полностью излечивались. Высокий риск возможности появления рецидивов.

Схема лечения гепатита С первого генотипа всех подтипов в зависимости от имеющихся дополнительных патологий выглядит следующим образом:

источник

Гепатит С — заболевание печени, вызванное флавивирусом HCV (hepatitis C virus). Заражение происходит через кровь и биологические жидкости инъекционным, половым и трансплацентарным (от матери к плоду) путем.

В группе риска заражения HCV находятся люди, ведущие беспорядочные половые отношения, потребляющие инъекционные наркотические вещества, медицинские работники и пациенты, которым проводится переливание крови и другие манипуляции. Какой анализ на гепатит С нужно сдавать в первую очередь?

Попадая в кровь, вирус гепатита HCV дает непосредственное цитопатическое действие — поражает клетки печени, там же происходит его размножение. Параллельно с поражением клеток вирус HCV вызывает аутоиммунные реакции организма (аутоиммунный тиреоидит, ревматоидный артрит и т.п.)

Особенностью HCV по сравнению с другими формами вирусной болезни печени является менее выраженная клиническая картина. В 95% случаев заболевание проходит в скрытой форме, что часто затрудняет постановку диагноза.

Анализы на гепатит С — это комплекс лабораторных тестов, позволяющих определить наличие активного вируса HCV в крови.

Из-за особенностей и различной чувствительности диагностических систем невозможно верно диагностировать заболевание на основании какого-то одного из скрининговых тестов, поэтому для подтверждения наличия вируса проводится несколько исследований.

Какие анализы на гепатит С нужно сдавать?

Первичный анализ на гепатит С — это исследование сыворотки крови на присутствие антител методом иммуноферментного анализа (ИФА).

При выявлении anti-HCV требуется обязательная перепроверка результатов.

Какие еще анализы сдают на гепатит С?

Для диагностирования заболевания проводятся дополнительные анализы при гепатите С. После иммуноферментного исследования в случае позитивного ответа используется метод ПЦР. Положительный анализ на гепатит С при ПЦР показывает, что на момент проведения исследования в крови находится вирус.

Во время ПЦР проводится исследование количественных характеристик инфекции, позволяющее выявить концентрацию вируса HCV. Далее следует анализ РНК вируса гепатита С — генотипирование, на основании которого определяются индивидуальные генетические особенности возбудителя. Всего в природе насчитывается 11 генетических типов вируса HCV. Исследование РНК гепатита С позволяет выбрать тактику лечения, а также сделать предварительное заключение о результатах противовирусной терапии.

В таком случае пациент считается потенциально инфицированным, и для подтверждения наличия anti HCV гепатита С назначается развернутое исследование сыворотки методом рекомбинантного иммуноблота (recomBlot HCV).

Этот тест позволяет точно идентифицировать анти HCV гепатита С — антитела, вырабатываемые иммунной системой человека в ответ на белковые компоненты вируса. Специфические белки к нему появляются в крови на 3-4 неделе после инфицирования, поэтому информативность ИФА тестов и recomBlot HCV на этой стадии достаточно высока.

Иммуноферментный тест проводится на сыворотке крови, не содержащей фибрина и форменных элементов.

ИФА основывается на взаимодействии антигена с антителами, при котором содержимое пробирки меняет цвет. На основании сравнения полученного цвета сыворотки с существующей цветовой шкалой устанавливается антиген, например, возбудитель инфекционного заболевания.

Какие анализы при гепатите С относятся к ИФА?

Иммуноферментный тест на Anti HCV позволяет установить факт инфицирования на основании наличия в крови иммуноглобулинов — антител к возбудителю. Белки крови anti HCV гепатита С бывают двух типов— M и G, которые обозначаются в ходе лабораторных анализов как IgG и IgM. Белки типа М вырабатываются в крови через 4-6 недель после внедрения вируса, в это время их содержание максимально. К 5-6 месяцу уровень IgM снижается, но может возрастать при реактивации заболевания. Антитела типа G обнаруживаются через 11-12 недель после заражения, их уровень достигает пика на 5-6 месяц.

Для определения маркеров HCV проводится тест на Anti-HCV total, который показывает суммарное значение наличия антител IgG и IgM. Пропорция между иммуноглобулинами этих классов также позволяет судить о характере заболевания. Преобладание IgM над IgG говорит об активности вируса, и в ходе лечения заболевания показатели соотношения антител выравниваются.

Этот тест делается на основании чувствительности реагента к белкам HCV, в ответ на которые появляются антитела. Это — структурный белок С1 и С2, а также неструктурные протеины — NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5B. Иммуноглобулины к этим протеинам могут выявляться в крови в различном соотношении и количестве.

Рекомбинантный иммуноблот — это высокоспецифичное лабораторное исследование сыворотки крови, дающее возможность верифицировать позитивные результаты тестов на anti HCV гепатита С. Этот тест назначается для подтверждения неясных показателей ИФА.

Recomblot HCV проводится для выявления антител к С1, С2, NS3, NS4. Различные комбинации антител могут давать отрицательные, положительные, сомнительные и возможно-положительные (пограничные) результаты. Наличие антител к двум из четырех белков HCV дает основание для позитивного результата Recomblot HCV.

Полимеразная цепная реакция — это анализ, позволяющий изучить генетический код вируса, а также установить уровень концентрации вирионов в крови. На основании результатов RNA можно выбрать способ и узнать продолжительность терапии, а также определить фактор риска передачи инфекции от одного носителя к другому.

Качественный ПЦР — это общий показатель, который свидетельствует о наличии/отсутствии вируса в крови. Анализ проводится методом исследования сыворотки крови Real-Time PCR с разной степенью чувствительности скрининговой системы. Результат качественного анализа может быть либо позитивный («выявлено») или негативный («не выявлено»).

Количественный ПЦР — это показатель концентрации вирионов в 1 мл биологического материала. На основании этого теста можно определить, есть ли вероятность распространения инфекции от зараженного пациента на новых носителей, а также установить методы и длительность лечения (чем выше концентрация вируса, тем интенсивнее требуются терапия с применением комбинированных противовирусных препаратов).

Анализ на генотип гепатита С — это еще один важный лабораторный тест, показывающий генетические особенности вируса. Кроме 11 основных генотипов HCV известно множество субтипов вируса. Разница между генотипами обуславливает особенности протекания болезни, выбор терапии и исход лечения.

Разные генотипы имеют различную резистентность к лекарственным препаратам, а также разную продолжительность лечения. Например, гепатит С, вызванный 1-м генотипом вируса HCV, может заметно регрессировать за 48 недель, а при наличии вируса 2 и 3 генотипов болезнь при надлежащем лечении может регрессировать за 24 недели.

В зависимости от типа лабораторных тестов норма анализов на гепатит С может быть в качественных и количественных показателях.

Для иммуноферментного анализа у здорового человека, никогда не болевшего гепатитом С, суммарные анти HCV гепатита С в норме должны отсутствовать (референсное значение — «не найдено»), или быть меньше 0,9 (после перенесенного заболевания в прошлом). При превышении показателя 1,0 можно сделать вывод, что вирус есть в крови пациента в настоящий момент.

Показатели гепатита С в анализах ПЦР типа выражаются в числовых значениях:

• нижний показатель нормы находится на уровне 600.000 МЕ/мл;
• среднее значение колеблется в пределах 600.000-700.000 МЕ/мл (международных единиц на 1 мл биологического материала);
• при показателях вирусной нагрузки от 800.000 МЕ/мл и выше можно говорить о повышенной концентрации HCV в крови.

Несмотря на высокую чувствительность скрининговой системы при исследовании сыворотки крови на антитела, вероятность ошибочных результатов тестов всегда есть.

Объясняется такой результат тем, что существует т.н. серологическое окно — временной промежуток между инфицированием HCV и появлением реакции со стороны иммунной системы (выработки антител к HCV). Если анализ крови был проведен в этот отрезок времени, то диагностическая система может дать отрицательный результат. Поэтому в медицинской практике при подозрении на гепатит С анализы рекомендуется делать несколько раз с небольшим интервалом.

Чтобы сдать анализ на гепатит С и получить правдивый результат, нужно соблюдать несколько несложных правил лабораторных тестов.

1. Кровь берется из вены натощак.
2. Перед тем как сдавать тест на гепатит С, следует исключить из употребления алкоголь, жирную, жареную и копченую пищу.
3. Между приемом пищи и моментом забора крови должно пройти 8-10 часов.

О гепатите С, его возбудителе, симптомах, диагностике и лечении можно узнать из следующего видео:

источник

Hepatitis C Virus (HCV) опасен не только скрытыми симптомами. Патология может годами разрушать печень человека и при этом не вызывать значимых клинических проявлений. На основании отличий в порядке расположения аминокислотных остатков, специалисты выделяют несколько разновидностей вирусного патогена.

Генотипы гепатита С разнятся по симптоматике, скорости прогрессирования некротических поражений печени и вероятности развития осложнений. Именно генотип является основополагающим фактором подбора эффективной терапии.

Периодически в медицинской литературе появляется информация об открытии новой разновидности вирусной инфекции. В итоге данные, сколько генотипов у гепатита С, разнятся. Некоторые специалисты называют цифру 11 (без учета квази-типов). Но практикующие гепатологи руководствуются рекомендациями Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ), в соответствии с которыми выделяют 6 генотипов вируса HCV.

Молекулярные методы диагностики позволяют с высокой точностью изучить структуру патогена, обнаруженного в плазме крови или биоптате тканей печени пациента. Таким образом специалисты могут с высокой точностью установить тип патогена, и на основании полученных результатов доктор назначает соответствующую терапию.

Чтобы объяснить принцип разделения HCV на генотипы и как одна разновидность патогена отличается от другой, доктора сравнивают структуру вируса с цепочкой. Набор звеньев цепи одинаков вне зависимости от типа возбудителя инфекции, но порядок их расположения отличается. Схожие группы объединены в типы, причем внутри каждого выделяют несколько субтипов, которые лишь незначительно разнятся друг от друга.

Вопрос, как узнать, какой генотип вируса у больного, целесообразно решать только после подтверждения диагноза. Подобное исследование проводится с использованием молекулярных методик путем постановки полимеразной цепной реакции. Нередко определение разновидности HCV проводят в комплексе с количественной оценкой вирусемии. Для проведения анализа пациенту следует сдать кровь из вены, срок выполнения – до 5 дней.

Многих пациентов интересует вопрос, меняется ли генотип в процессе терапии. Ответ однозначен: структура вируса неизменна, поэтому при гепатите С достаточно однократно определить разновидность заболевания до начала терапии. Резистентность к проводимому лечению объясняют не мутацией патогена уже после инфицирования, а индивидуальными особенностями пациента.

После сдачи крови на определение генотипа и получения результатов доктор может сориентировать пациента относительно следующих вопросов:

• риск развития осложнений;
• прогнозируемая эффективность терапии (на основании клинических испытаний);
• длительность лечения;
• вероятность возникновения внепеченочных проявлений заболевания.

Терапия различных генотипов отличается. Для разновидностей HCV, сложно поддающихся лечению, разработаны многокомпонентные лекарственные препараты. Но если на фоне приема противовирусных лекарств улучшения не наступает, исследование на определение разновидности HCV и прочие диагностические тесты проводят повторно для уточнения диагноза и исключения других факторов, негативно влияющих на эффективность лечения.

Генотипы вирусного гепатита С разнятся по территориальной распространенности. Статистика диагностируемых разновидностей патологии приведена в таблице.

Но статистика распространенности определенного генотипа меняется из-за военных действий, постоянных миграционных перемещений населения, активного развития экзотического туризма. С этими же факторами связывают и постоянно растущее количество инфицированных. Если в Европе, США, Канаде, России удалось достичь контроля над заболеваемостью (своевременная диагностика, соответствующая информационная политика), население стран с неразвитой медициной (например, на территории Африки) является носителем и источников распространения болезни.

В большинстве отечественных медицинских публикаций, посвященных проблеме HCV, практически не встречается информация, чем отличаются 5 и 6 генотипы патогена. Эти разновидности инфекции диагностируются крайне редко и только в странах Африки и Азии.

Для первой разновидности гепатита Ц характерно наличие трех подтипов, но обычно диагностируют один из двух – 1а или генотип 1b (б).

Отличительными чертами вида служат:

• высокая распространенность, встречается по всему миру, в России диагностируется с частотой 58–61% от всех случаев инфицирования;
• преимущественно хроническое течение (вероятность такого исхода превышает 80%), при этом острая фаза обычно проходит быстро, без клинической симптоматики;
• высока вероятность рецидива.

Первый тип HCV отличает резистентность даже к современным противовирусным препаратам. По сравнению с другими генотипами патологии, реже регистрируется быстрый вирусологический ответ (лабораторно неопределяемые концентрации на 4 неделе лечения). При подобной форме гепатита С максимальную вероятность выздоровления врачи прогнозируют только на начальных стадиях инфекции до 3–4 лет с момента инфицирования.

HCV 2 типа подразделяется на три подгруппы – a, b и c. Второй генотип встречается относительно редко. На территории РФ и стран ближнего зарубежья практически не диагностируется.

Характерны такие особенности:

• вероятность самостоятельного разрешения инфекции (эрадикация патогена возможна под влиянием иммунитета без дополнительного приема медикаментов);
• низкая вероятность осложнений;
• реактивация инфекции регистрируется в единичных случаях;
• медленное прогрессирование.

Генотип 2 хорошо «отвечает» на современные методики терапии. Более того, инфекция достаточно легко лечится и по устаревшим схемам, которые подразумевают применение комбинации интерферонов и рибавирина. Но в медицинской литературе описаны случаи сочетания второй разновидности патологии с другими генотипами HCV и гепатитом В, что негативно влияет на прогноз терапии.

На территории России гепатит С генотип 3 является вторым по распространенности после первой разновидности. Выделяют два типа: a и b.

Третий генотип отличается:

1. Высокой вероятностью развития осложнений. После анализа рандомизированных клинических исследований установлено, что тяжелые формы цирроза и гепатоцеллюлярный рак отмечаются на 5–8% чаще у пациентов с третьим генотипом.
2. Более быстрыми сроками патогенных изменений в печени. В среднем, начальная стадия цирроза диагностируется на 3–5 лет раньше, чем при 1 генотипе.
3. Преимущественно гематогенным путем передачи. Часто болезнь выявляют у лиц с пристрастием к инъекционным наркотикам.
4. Возрастной группой. Это значит, что патологию обычно выявляют у людей активного трудоспособного возраста – 25–35 лет.

Срок, сколько живут пациенты с подобной разновидностью патологии, напрямую зависит от момента диагностирования. В целом, 3 генотип хорошо поддается лечению, при условии применения современных таргетных средств. Но если болезнь выявлена на поздних стадиях, когда изменения структуры печени приобрели необратимый характер, шансы на полное выздоровление невелики. Кроме того, такой тип HCV опасен злокачественным перерождением клеток органа. Рак печени считается одним из самых тяжелых форм онкологии. Количество пациентов, переступивших пятилетний порог выживаемости, не превышает 4–6%.

Генотип 4, как и 5, 6 разновидности HCV диагностируются реже всего. В большинстве отечественных лабораторий определение подобных типов вируса даже не предусмотрено. Исследование на эти группы гепатита С назначают только при негативном результате на определение 1–3 типа. В связи с низкой распространенностью такие разновидности патологии изучены в недостаточной степени.

Установлено, что для них характерно:

• преимущественно острое течение;
• высокая вероятность эффективного иммунного ответа и самостоятельного излечения;
• длительное латентное течение без изменения параметров виремии в большую сторону;
• низкий риск осложнений (случаи рака печени у пациентов с 4, 5 или 6 типами практически не зарегистрировано).

Четвертый генотип подразделяется на 10 квази-типов. Что касается пятого и шестого, на сегодняшний день известно только об одной подгруппе – а. Терапия данных типов HCV не представляет сложности. Достаточно стандартного курса пангенотипных противовирусных средств. Но вероятность осложнений течения инфекции повышается, если заражение произошло уже на фоне поражения ткани печени.

Смешанных генотипов HCV не существует. В некоторых случаях диагностируют комбинированный субтип. Это происходит, если по результатам генотипирования однозначно установлена разновидность патологии, но определить подтип затруднительно (тогда запись в карточке пациента выглядит, например, следующим образом – генотип 3аb). Крайне редко возможно заражение другой группой HCV на фоне уже присутствующей в организме инфекции. Как правило, таким пациентам назначаются длительные курсы пангенотипных противовирусных медикаментов.

Сдать анализ на генотип гепатита С можно практически в любой частной лаборатории. Исследование проводится методом полимеразной цепной реакции. Техника выполнения исследования состоит в следующем: обнаруженные в плазме крови образцы РНК патогена сравнивают с изолятами генотипов, а далее – подтипов.

Показаниями к проведению генотипирования служат:

• наличие иммуноглобулинов класса М или G;
• позитивный результат качественной ПЦР;
• определяемая методом количественной ПЦР виремия.

Сдавать кровь для генотипирования необходимо после подтверждения диагноза, но до начала терапии.

В некоторых случаях необходимо повторное исследование. Это:

• сохранение прежнего уровня виремии, увеличение вирусологической нагрузки на фоне применения противовирусных препаратов;
• положительные результаты ПЦР после окончания курса лечения вне зависимости.

Если в ходе стандартного исследования определить разновидность патологии не удается, проводят расширенное генотипирование вируса. Такой анализ подразумевает диагностику не только трех наиболее распространенных типов, но и выявление 4, 5 или 6 разновидностей. Данный тест показан и в том случае, если предполагается инфицирование в странах, где встречаются более редкие типы патологии.

Способ, как определить генотип по анализам, прост. Срок проведения исследования – от 3 до 5 дней. Пациенту выдается бланк с результатами тестирования, где указан точный тип и подтип патологии. С результатами анализа необходимо обратиться к врачу для назначения курса терапии.

Наряду с вопросом, какие бывают типы HCV, еще до получения результатов всех диагностических тестов пациенты интересуются, какой генотип гепатита С самый опасный. Если анализировать данные клинических исследований, неблагоприятный исход чаще отмечают при 1b разновидности патологии.

Именно эта группа инфекции обычно диагностируется на стадии необратимого некроза гепатоцитов и разрастания соединительной ткани в печеночной паренхиме. С учетом тенденции к рецидивам и резистентности доктора чаще назначают современные лекарственные средства, в состав которых входит 2 или 3 противовирусных ингредиента в фиксированной комбинации.

Но учитывая патогенез HCV, у некоторых пациентов даже сравнительно легкие разновидности инфекции могут вызвать серьезных осложнения. Вероятность успешной терапии существенно снижается при коинфекции ВИЧ и других тяжелых системных заболеваниях. Также результат лечения и риск осложнений во многом зависит от диеты, готовности больного отказаться от вредных привычек, употребления спиртного.

Легче лечится вторая разновидность вирусной инфекции, но она практически не диагностируется в России. Поэтому обычно на вопрос, какой генотип гепатита С лучше всего поддается лечению, отечественные инфекционисты называют третий тип. Хотя данная группа патологии чаще сопровождается различного рода осложнениями, высока вероятность полного излечения при условии своевременной диагностики.

Третий подвид болезни – не самый легкий, но при использовании современных противовирусных средств возможно выздоровление без значимого влияния на продолжительность жизни пациента. Чтобы снизить вероятность тяжелого течения патологии, необходимо следовать всем рекомендациям врача, четко соблюдать прописанный доктором режим питания.

После выздоровления следует продолжать прием медикаментов, обладающих гепатопротекторной активностью. Также сохраняются правила относительно диеты и отказа от спиртных напитков.

Инфицирование HCV не сопровождается формированием специфического иммунитета. Поэтому перенесенная болезнь не исключает необходимости соблюдения всех мер профилактики в дальнейшем.

Ранее терапия HCV вне зависимости от типа проводилось сочетанием интерферона и рибавирина. Подобное лечение часто вызывало побочные реакции. Причем степень их тяжести нередко становилась причиной отказа от терапевтической схемы. Впоследствии рекомендации относительно медикаментозной терапии изменились. Вместо интерферонов со стандартной продолжительностью действия доктора стали чаще прописывать пролонгированные формы, которые требовалось колоть только 1 раз в 7 дней.

Но в настоящее время перечень медикаментов, применяемых при различных генотипах, расширился противовирусными препаратами прямого действия.

Основные принципы лечения инфекции в зависимости от разновидности приведены в таблице:

Определение генотипа является ключевым для выяснения дальнейшей тактики терапии гепатита С. Но вне зависимости от разновидности патологии конечный результат лечения во многом зависит от самого пациента. Недостаточно приема противовирусных средств. Обязательно соблюдение диеты №5, полный отказ от алкоголя и вредных привычек.

источник

Синонимы : HCV RNA, Hepatitis C virus genotype

Мы сократили затраты на рекламу и содержание точек забора биоматериала. Поэтому цена на анализы для вас в 2 раза ниже. Мы сделали это, чтобы вы сдавали анализы легко и управляли своим здоровьем

Анализ будет готов в течение 7 дней, исключая субботу и воскресенье (кроме дня взятия биоматериала). Вы получите результаты на эл. почту сразу по готовности.

Срок исполнения: 2 дня, исключая субботу и воскресенье (кроме дня взятия биоматериала)

Не сдавайте анализ крови сразу после рентгенографии, флюорографии, УЗИ, физиопроцедур.

Обсудите с врачом прием лекарственных препаратов накануне и в день проведения исследования крови, а также другие дополнительные условия подготовки.

За 24 часа до взятия крови:

Ограничьте жирную и жареную пищу, не принимайте алкоголь.

Исключите тяжёлые физические нагрузки.

Не менее 4х часов до сдачи крови не принимайте пищу, пейте только чистую негазированную воду.

60 минут до забора крови не курить.

15-30 минут перед забором крови находиться в спокойном состоянии.

Вирус гепатита С или ВГС (Hepatitis C Virus — HCV) – вирус, который поражает клетки печени и вызывает гепатит. Хроническое заболевание может приводить к циррозу печени, увеличивая риск развития печеночной недостаточности и гепатоцеллюлярной карциномы (рака печени).

Генотип вируса гепатита C влияет на тяжесть заболевания, результат проводимой терапии. Схема лечения гепатита С также зависит от генотипа вируса, вызвавшего заболевание.

Широко распространены генотипы 1, 2 и 3, при этом тот или иной их субтип доминирует в разных географических зонах.

В результатах этого исследования вы получите только определение генотипа вируса. В случае необходимости определения также субтипов (1a, 1b, 2a, 2b, 2c, 2i, 3, 4, 5a, 6), необходимо будет выполнить дополнительный анализ.

Анализ проводится для выявления генотипа вируса гепатита С.

Назначается терапевтом, инфекционистом, гепатологом.

Метод исследования — ПЦР Real time

Материал для исследования — Венозная кровь с ЭДТА

Гепатит С – заболевание печени, которое вызывается вирусом гепатита С (Hepatit C Virus). Источниками вируса являются больные всеми формами острого и хронического гепатита С, а также вирусоносители. Около 80% заболевших острым гепатитом С болеют лица в возрасте 15-29 лет. Заразиться можно при инъекциях, абортах, прививках, стоматологических процедурах и т. д.

Группы повышенного риска инфицирования: больные, получающие лечение хроническим гемодиализом, больные гемофилией, наркоманией. К группе повышенного риска инфицирования относят и медицинских работников, имеющих контакт с кровью (например, сотрудники отделений гемодиализа).

Передача вируса может случиться при родах, менструации, сексуальном контакте, повреждении кожи и слизистых в быту и на производстве.

Начало заболевания гепатитом С постепенное.

В продромальном периоде основными симптомами могут быть: слабость, анорексия, тошнота, рвота и др. Так же, как и при гепатите В, могут быть зарегистрированы боли в суставах (15—20%). Это значительно осложняет диагностику. Продромальный период — период заболевания, который протекает между бессимптомным периодом и собственно болезнью.

Часто заболевание переходит в хроническую стадию и обнаруживается в случае профилактических анализов. Хроническое течение болезни приводит к циррозу печени и гепатоцеллюлярной карциноме (рак печени). Страдает не только печень, появляются смешанная криоглобулинемия и другие ревматические заболевания.

Самый первый анализ, который покажет заражение вирусом гепатита С — РНК ВГС. Этот анализ показывает инфицирование уже спустя 10-12 дней от заражения. Часто его используют, если был риск заражения, чтобы исключить возможное инфицирование.

В более поздний срок, через 1-2 месяца в крови начинают обнаруживаться Антитела к вирусу гепатита С.

Для постановки диагноза и назначения терапии вашему врачу может понадобится набор нескольких исследований, в том числе анализ на определение генотипа вируса.

Генотип вируса гепатита C влияет на тяжесть заболевания, результат проводимой терапии.

Схема лечения гепатита С также зависит от генотипа вируса, вызвавшего заболевание.

Отличительной особенностью вируса гепатита С является его существенная изменчивость с образованием множества одновременно существующих, иммунологически различающихся антигенных вариантов – видов.

В настоящее время за основу принята классификация, предложенная P. Simmonds. Согласно этой классификации выделяют 6 генотипов, пронумерованных от 1 до 6 в порядке их открытия; более 80 субтипов, обозначаемых прописными латинскими буквами (а, b, с и т.д.).

Показано, что наибольшее распространение в мире имеет генотип 1b, этот же генотип хуже всего поддаётся лечению (интерферонотерапии). Широко распространены генотипы 1, 2 и 3, при этом тот или иной их субтип доминирует в разных географических зонах. Субтип 1а доминирует в Северной Европе и Северной Америке, тогда как субтип 1b – в Японии, Южной и Восточной Европе, преобладает в Азии. Генотип 2 встречается в этих странах значительно реже по сравнению с генотипом 1.

Субтипы 2а и 2b характерны для Северной Америки, Европы и Японии, а субтип 2с – для Италии. Вирус гепатита С генотипа 3 наиболее распространен в Юго-Восточной Азии, Таиланде, Индии, Пакистане. Субтип 3а занимает второе место по частоте выявления на большей части Европы, США, при этом им инфицированы в основном пациенты моложе 20 лет, в частности, лица, внутривенно употребляющие наркотические средства. Генотипы 4, 5 и 6 имеют более локальное распространение. Генотип 4 – основной тип вируса гепатита С в Центральной и Северной Африке и на Среднем Востоке. Генотип 5 распространен исключительно в Южной Африке, а генотип 6 широко представлен во Вьетнаме, Гонконге и Китае. В Российской Федерации чаще всего обнаруживаются генотипы 1b и 3а, встречаются также 1а и 2а.

Интерпретация результатов анализов носит информационный характер, не является диагнозом и не заменяет консультации врача. Референсные значения могут отличаться от указанных в зависимости от используемого оборудования, актуальные значения будут указаны на бланке результатов.

Исследование проводится только при выявлении РНК вируса гепатита C в крови, включает в себя качественное определение генотипов вируса гепатита С (1, 2 и 3). При обнаружении РНК какого-либо генотипа выдаётся результат «обнаружена», если РНК не обнаружена — «не обнаружена».
В случае присутствия у пациента вируса гепатита C другого генотипа, результат исследования генотипов 1, 2 и 3 будет «не обнаружена».

Референсные значения: РНК не обнаружена

Lab4U — медицинская онлайн-лаборатория, цель которой сделать анализы удобными и доступными, чтобы Вы могли заботиться о своем здоровье. Для этого мы исключили все затраты на кассиров, администраторов, аренду и прочее, направив деньги на использование современного оборудования и реактивов от лучших мировых производителей. В лаборатории внедрена система TrakCare LAB, которая автоматизирует лабораторные исследования и сводит к минимуму влияние человеческого фактора

• Вам удобно выбрать назначенные анализы из каталога, либо в строке сквозного поиска, у Вас всегда под рукой точное и понятное описание подготовки к анализу и интерпретация результатов
• Lab4U моментально формирует для Вас список подходящих медцентров, остается выбрать день и время, рядом с домом, офисом, детским садом или по пути
• Вы можете заказать анализы для любого члена семьи в несколько кликов, один раз внеся их в свой личный кабинет, быстро и удобно получив результат на почту
• Анализы выгоднее средней рыночной цены до 50%, так Вы можете направить сэкономленный бюджет на дополнительные регулярные исследования или другие важные траты
• Lab4U всегда онлайн работает с каждым клиентом 7 дней в неделю, это значит что каждый Ваш вопрос и обращение видят руководители, именно за счет этого Lab4U постоянно улучшает сервис
• В личном кабинете удобно хранится архив ранее полученных результатов, вы легко сравните динамику
• Для продвинутых пользователей мы сделали и постоянно совершенствуем мобильное приложение

Мы работаем с 2012 года в 24 городах России и выполнили уже более 400 000 анализов (данные на август 2017 года)

Команда Lab4U делает все, чтобы малоприятная процедура стала простой, удобной, доступной и понятной. Сделайте Lab4U своей постоянной лабораторией

Добавьте к заказу анализы

Выберите дату и время сдачи

Оформите и оплатите заказ

Сдайте анализы без очереди

Получите результаты по эл. почте

• Москва
• Санкт-Петербург
• Нижний Новгород
• Астрахань
• Белгород
• Владимир
• Волгоград
• Воронеж
• Иваново
• Йошкар-Ола
• Казань
• Калуга
• Кострома
• Краснодар
• Курск
• Орел
• Пенза
• Пермь
• Ростов-на-Дону
• Рязань
• Самара
• Саратов
• Тверь
• Тула
• Уфа
• Ярославль

Годовой абонемент входит в состав первого заказа и дает возможность год Вам и членам Вашей семьи сдавать анализы в два раза дешевле. Результаты всех анализов бессрочно будут храниться в личном кабинете. Подробнее

источник

ПЦР-диагностика гепатита С – это исследование биологических образцов с применением полимеразной цепной реакции. Способ заключается в многократном копировании фрагментов РНК вируса. Благодаря такой методике всего нескольких молекул возбудителя достаточно для того, чтобы тест отреагировал на присутствие вируса. Результат можно получить уже в первые 5-7 дней после контакта с зараженным человеком. ПЦР позволяет выявить факт инфицирования, а также приблизительную концентрацию HCV и его генотип.

Самая очевидная причина для назначения ПЦР на гепатит С в крови – это наличие признаков заболеваний печени:

• хроническая усталость;

• боли в области печени;

• желтизна кожи и белков глаз;

• гипертрофия печени;

• тошнота.

Анализ на ПЦР целесообразно сделать в условиях повышенного риска заражения:

1. сексуальный контакт с предполагаемым носителем гепатита;
2. повышенная активность АЛТ и АСТ, выявленные по результатам биохимического анализа крови;
3. если результат ИФА на антитела к вирусу гепатита положительный.

Другие показания к сдаче крови:

• Врачи-гепатологи назначают ПЦР на гепатит С в профилактических целях перед операциями.
• Медработники и сотрудники детских садов и школ сдают анализ в ходе плановых проверок.
• Метод показан при проведении вакцинации против вируса гепатита В.
• Анализ проводится несколько раз в ходе терапии гепатита С, чтобы оценить ее эффективность.
• ПЦР нужен для исключения смешанного поражения печени, что иногда бывает при гепатите В.

В течение дня у человека меняется соотношение эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, а также активность некоторых гормонов. Прием пищи влияет на наличие жирных кислот в крови. Этот фактор мешает точности анализа. По этим причинам анализ ПЦР на гепатит С проводится утром натощак. В качестве исследуемого образца берется кровь из вены.

Перед сдачей анализа требуется подготовка:

1. за 2-3 дня – ограничить нагрузку на печень (исключить алкогольные напитки, не употреблять жирную и жареную пищу);
2. за сутки – исключить стресс, поднятие тяжестей, посещение спортзала и бассейна;
3. за 8 часов – прекратить употребление любой пищи, так как глюкоза, жиры, минералы, попадающие в кровь, изменяют качество ферментной реакции;
4. с утра до момента сдачи крови – не курить.

На результат анализа может повлиять повышение концентрации адреналина в крови. Чтобы исключить эту погрешность, нужно прийти на 20 минут раньше, отдышаться и успокоиться.

На эффективность анализа крови могут влиять разные препараты – БАДы, средства с кофеином, этанолом, глюкозой, леводопой, пероральные контрацептивы, антибиотики. Даже если человек принимает обычные витамины, об этом нужно предупредить врача.

В настоящее время используются три метода ПЦР:

1. качественный (тест на наличие или отсутствие вируса);
2. количественный (тест на концентрацию вируса в крови);
3. с генотипированием (определяет принадлежность HVC к конкретному генотипу и субтипу).

Качественный анализ – это метод диагностики гепатита С, который позволяет подтвердить или опровергнуть присутствие вируса в крови. Выявляет наличие в определенной концентрации – в пределах 10-500 МЕ/мл. Выполняется в течение 1-4 дней и дает следующие результаты:

• «Не обнаружено» – вирус отсутствует либо его концентрация так мала, что реагент его не распознает.
• «Обнаружено» – вирус HCV присутствует, и его концентрация выше минимального порога чувствительности. Анализ выдает такой результат уже на 3-4 день после заражения.

Этот метод оценивает вирусную нагрузку, которая меняется в зависимости от стадии заболевания или этапа излечения. Метод не только показывает наличие флавивируса, но и его концентрацию в МЕ (международных единицах) на 1 мл крови. Это играет решающую роль при выборе тактики лечения гепатита С. Результаты количественной ПЦР-диагностики записываются следующим образом:

В результатах анализов очень часто можно увидеть степени, которые обозначаются как «^», например, 6*10^5 МЕ/МЛ, 10 в пятой степени это 100 тысяч, соответственно 6*10^5 МЕ/МЛ = 600 000 МЕ/МЛ.

Просто подставляйте результат вашего анализы, который стоит перед знаком умножить, и вы получите результат. Учтите, что единицы измерения могут отличаться (копий/мл, ме/мл).

Если затрудняетесь или есть вопросы по другим переменным анализов, вы всегда можете написать нашему дежурному врачу-инфекционисту (чат в правом нижнем углу экрана). Он бесплатно расшифрует ваши анализы.

Количественный анализ ПЦР на гепатит С необходим для оптимального выбора препарата. С его помощью можно прогнозировать осложнения и эффективность терапии. Он позволяет оценить степень заразности носителя гепатита для окружающих: чем большее число вирусов насчитывается в крови, тем больше риск заражения.

Сегодня известно, что у гепатита С имеется 11 генотипов и огромное количество субтипов. В разных странах есть свои приоритетные разновидности. В России в основном встречается 1 генотип (1b чаще, чем 1а), на втором месте по распространенности – 3 генотип (субтип 3а), на третьем – 2.

У каждого генотипа свои особенности. Зная их, можно спрогнозировать характер течения инфекции, риск перехода в хроническую форму и вероятность ответа на противовирусную терапию. Например, 3 генотип HCV провоцирует стеатоз, а 1 генотип требует лечения в течение 48 недель. По рекомендациям Минздрава генотипирование должно предшествовать противовирусной терапии.

Исходя из результатов, врач определяет противовирусный препарат, его дозировку, курс приема.

ПЦР-диагностика на вирусный гепатит С опережает иные методы по чувствительности, низкой вероятности ошибок и другим показателям:

• Позволяет выявить вирус на самых ранних стадиях, когда концентрация его в крови ничтожно мала. Для сравнения, иммунофлюоресцентный анализ (ИФА) реагирует только на иммуноглобулины, а они вырабатываются лишь через несколько недель в ответ на инфекцию. В то же время ПЦР реагирует на сам антиген и показывает присутствие вируса уже через 5 дней после заражения.

• Ложные результаты возникают гораздо реже, чем у других методов. Так, у ИФА возможны ложные результаты на гепатит при появлении перекрестных антител, но ПЦР реагирует непосредственно на патогены и такой погрешности не имеет.

• ПЦР – высокочувствительный метод. Анализ реагирует на присутствие РНК вируса гепатита уже 10-100 клеток в пробе и дает результат еще задолго до появления первых симптомов.

• В отличие от культуральных методов исследования, ПЦР проводится методом высокотехнологичной автоматизированной амплификации, что позволяет проводить тестирование в день забора.

Тест универсален и позволяет обнаружить несколько типов возбудителей гепатита в одной биологической пробе.

ПЦР-диагностика гепатита имеет и свои недостатки. Главный из них связан со способностью микроорганизмов к мутации. Вирусы гепатита приспосабливаются к условиям окружающей среды, и их генотип меняется. Когда это происходит, диагностическая система не может уловить гибрид. Второй недостаток ПЦР связан с возможностью получения ложноположительного и ложноотрицательного результата. Чтобы избежать ошибки, нужно соблюдать правила забора материала. Чаще всего погрешности возможны после уже проведенного лечения, поэтому принимать решение об отмене терапии может только лечащий врач.

источник

Генотипирование гепатита С — необходимая процедура, которая иногда способна спасти жизнь человеку. Существует ряд заболеваний, которые на первоначальном этапе протекают бессимптомно, но способны значительно ухудшить качество жизни и даже привести к преждевременной смерти.

Заразиться вирусом гепатита С может каждый. Если раньше эта болезнь передавалась преимущественно в среде наркоманов, то теперь наблюдается всплеск инфицирования практически во всех слоях населения. Гепатит С передается с кровью, поэтому заразиться им можно даже в медицинском учреждении или в салоне красоты.

Инкубационный период недуга составляет до полугода. Но бессимптомное развитие заболевания в хронической форме может длиться десятилетиями. В этот период поражается печень, вызывая цирроз и рак. Остро выраженный гепатит С проявляется:

• повышением температуры тела;
• апатией и усталостью;
• тошнотой, рвотой;
• неприятными ощущениями в области живота и суставах;
• желтухой кожи и склер.

При первых же подобных симптомах необходим скрининг, диагностика и лечение.

Всемирная организация здравоохранения неоднократно высказывала беспокойство темпами заражения гепатитом С во многих странах. В целях профилактики рекомендуют ежегодно сдавать анализ крови на это заболевание — серологический скрининг на антитела ВГС.

При выявлении гепатита С в организме человека проводят тест на рибонуклеиновую кислоту (РНК), чтобы определить форму заболевания — острую или хроническую. При первом типе недуга около 1/3 всех пациентов не нуждаются в лечении, поскольку иммунная система этих людей самостоятельно справляется с инфекцией. Но одним из отличий вируса является его способность к мутации — изменчивости в строении гена. Благодаря этому он может ускользать от иммунной системы и практически беспрепятственно разрушать здоровые клетки. В таком случае тест на РНК укажет на хроническую форму заболевания. Врачу при этом нужно будет:

• определить степень поражения печени (фиброз, цирроз) с помощью биопсии;
• провести установление генотипа вируса гепатита С.

Без специалистов не удастся распознать заболевание.

Гепатит С — упрощенное название целого спектра вирусов, которые сгруппированы по генотипам и субтипам по различиям в структуре РНК. Соответственно, реакции на воздействие препаратов будут индивидуальными. Из 11 известных генотипов наибольшее распространение в мире получили 6. Субтипов насчитывается около 500, и они отличаются своеобразной чувствительностью к препаратам.

Для постсоветского пространства характерными являются типы 1, 2 и 3. Из субтипов на территории Центральной и Восточной Европы, а также в Азии наиболее часто встречается вирус гепатита С 1b. Его специфика:

1. Форма недуга в основном хроническая.
2. Бессимптомное протекание болезни (пациент может узнать о своей проблеме через десятилетия после заражения).
3. Вирус с высокой долей вероятности спровоцирует цирроз печени, гепатоцеллюлярную карциному, внепеченочные осложнения (криоглобулинемический васкулит, злокачественные опухоли лимфатической системы), которые могут привести к летальному исходу.
4. Интерфероновые схемы лечения практически не дают никакой реакции. Терапия разновидности Даклатасвир + Асунапревир/Софосбувир позволяет достичь стойкого вирусологического ответа.

Следующим по распространенности на территории Украины, Белоруссии и России является вирус гепатита С 3а. Он:

• значительно реже протекает в хронической форме;
• характеризуется поражением желчевыводящих путей и стеатозом (накоплением жира в печеночных клетках);
• реже приводит к циррозу;
• при подборе дозировки Рибавирина следует отталкиваться от веса пациента, а для недуга генотипа 3a количество препарата назначается врачом.

Но не только эти генотипы может обнаружить подобная процедура. Метод разработан для выявления присутствия РНК вируса гепатита С (субтипы 1a, 1b, 2a, 2b, 2c, 2i, 3, 4, 5a, 6) и идентифицирования генотипов 1a, 1b, 2, 3а/3b (без разделения на субтипы генотипа 3).

Анализ на генотип нужен, чтобы подобрать адекватное лечение для каждого конкретного случая заболевания. От схемы терапии зависит ее продолжительность и результативность. Итоги исследования позволяют спрогнозировать развитие заболевания, подобрать приемлемые терапевтические мероприятия, дозировки препаратов. В некоторых случаях и биопсия печени проводится только после выполнения генотипирования.

С чего нужно начинать диагностику и как определить генотип вирусного заболевания? Назначение на выполнение теста на генотип гепатита С дает инфекционист либо гепатолог. Для проведения манипуляций необходима кровь из вены пациента. Перед процедурой сдачи анализов запрещается курить (хотя бы в течение получаса), употреблять алкогольные напитки или наркотические вещества.

Анализ на генотип гепатита С может не только подтвердить или опровергнуть поражение организма человека вирусом определенного типа, но в редких случаях даже не дать определенного результата. Если генотип не определяется, то это еще не означает, что человек здоров. В этом случае возможны 2 варианта:

1. Нетипичный для данного региона вирус (нужны иные реагенты для проведения анализа на все возможные типы гепатита С).
2. Низкая концентрация вирусной РНК в крови пациента (лаборатория, в которой проводили анализ, оснащена не столь мощной и чувствительной аппаратурой).

У некоторых пациентов в организме присутствуют сразу несколько генотипов вируса. Гепатит С, генотипирование и соответствующее лечение которого были проведены успешно, у больного не исчезает. После избавления от одного вируса, следует приступить к лечению оставшегося в организме.

Влияют на результат и последующую терапию при генотипировании гепатита С условия сдачи анализа, хранения материала. Поэтому следует выбирать медицинское учреждение, имеющее опыт проведения данной процедуры. Персонал клиники должен быть обученным, а оборудование — новым и рабочим.

Возможно, разрабатываемые пан-генотипические схемы лечения со временем избавят от необходимости в генотипировании, однако на данный момент это один из основных анализов при выявлении гепапита С. Альтернативы такой процедуре пока не существует.

источник

До 1990-х годов для определения инфекционного гепатита С в медицинской литературе использовали термин «гепатит ни А, ни В с парентеральным механизмом заражения». Но в 1989 году был впервые выделен Hepatitis C virus (аббревиатура – HCV), однако достоверные методы диагностики, включая ПЦР на гепатит С, появились гораздо позже.

Полимеразная цепная реакция (расшифровка аббревиатуры ПЦР) с целью выявления HCV-инфекции является одной из составляющих общего скрининга, который в обязательном порядке назначается людям и больным при:

• беременности (исследование проводят несколько раз – при постановке на учет и в последнем триместре);
• донорстве крови и органов;
• у реципиентов перед и после переливания/трансплантации;
• работе, связанной с повышенным риском инфицирования;
• планировании хирургического вмешательства и других инвазивных манипуляций;
• поражении печени (анализ выполняют в ходе первичного обследования);
• проведении постоянных процедур гемодиализа;
• сопутствующем ВИЧ;
• онкологических заболеваниях;
• контакте с инфицированным человеком.

Проведение скрининга рекомендовано людям, употребляющим наркотические средства, предоставляющим сексуальные услуги, неразборчивым в половых связях. При этом такое же обследование необходимо пройти и их сожителям или постоянным партнерам. В обязательном порядке анализ на HCV показан детям, рожденным от инфицированных матерей.

Сам возбудитель болезни представляет собой РНК-содержащий вирус, покрытый липидной оболочкой. За трансляцию генома «отвечает» терминальный участок, состоящий из порядка 340 нуклеотидных субъединиц. Его структурное строение схоже у 90% различных подтипов HCV. Именно он и является основной мишенью для проведения анализа на гепатит С методом ПЦР.

Дополнительно состав вирусного генома представлен ядерным (core) и неструктурными (NS) участками. Первый регулирует репликацию возбудителя заболевания, а NS обеспечивают быстрое проникновение вируса в здоровую клетку. Зачастую на участке NS E2 отмечают вариабельность структуры, чем объясняют отсутствие должного иммунного ответа у некоторых пациентов, скрытое развитие патологии и склонность к хроническому течению (до 80% случаев).

В связи с широким распространением гепатита С во многих клинических центрах проводятся бесплатные анализы. Предоставление результатов исследования является обязательным требованием для оформления санитарной книжки.

Помимо подтверждения HCV-инфекции, современные методы диагностики позволяют оценить тяжесть течения заболевания, определить генотип вируса. Это влияет на схему терапии (подбор комбинации лекарственных препаратов, их дозировки, продолжительности приема) и прогноз патологии.

Анализ крови на гепатит С можно сделать несколькими методиками, причем каждая отличается по информативности и надежности.

Все способы диагностических исследований можно разделить на несколько групп:

1. Серологические, способные обнаружить определенные антитела (иммуноглобулины), которые вырабатываются в организме в ответ на проникновение патогена, выполняется по методу ИФА либо иммуноблоттинга.
2. Молекулярные, направленные на определение РНК вируса гепатита С. Результаты исследования демонстрируют вирусологическую нагрузку, часто используются для контроля эффективности проводимой терапии, позволяют определить генотип HCV, что важно для подбора медикаментозного лечения. К данной группе диагностических тестов относят ПЦР, ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией (метод real time).
3. Генотипирование, назначается всем без исключения пациентам до начала приема противовирусных медикаментов. Необходимо для планирования продолжительности, иногда – для подбора дозировки лекарственной терапии.

В последнее время получает распространение анализ для определения генотипа пациента относительно интерлейкина IL28В. По данным клинических исследований, подобный тест позволяет прогнозировать время, необходимое для достижения устойчивого вирусологического ответа у пациентов с HCV I генотипа на фоне лечения ингибиторами протеаз первого поколения.

Проблемы, где сдать кровь на ПЦР или другие тесты для выявления HCV, в настоящее время нет. Срочный анализ можно сделать в платной лаборатории. В районных поликлиниках и больницах исследования выполняют в порядке очереди (за исключением проведения по строгим показаниям).

У пациентов часто возникает вопрос, что такое ПЦР анализ при гепатите С, и чем он отличается от других способов диагностики? Данная методика заключается в воспроизведении множества копий ДНК на основе РНК вируса. Это самый точный анализ, позволяющей определить генотип патогена и его количественное содержание как в сыворотке крови, так и в биоптате тканей печени.

Диагностика HCV-инфекции включает комплекс различных исследований. Биохимический анализ крови не может показать заражение. Отклонение результатов (уровня печеночных ферментов, билирубина и т.д.) от физиологических параметров свидетельствует о нарушении работы печени, и задача врача – установить причину подобной проблемы.

Для начала сдают ряд простых исследований, к числу которых относится:

• общий анализ крови (при HCV-инфекции возможно изменение уровня лейкоцитов, гемоглобина, количества форменных элементов крови и других показателей);
• биохимия (повышение концентрации печеночных ферментов, билирубина свидетельствует о тяжести поражения печени);
• тесты на сопутствующие инфекции (обязательно на ВИЧ, иногда – на некоторые венерические заболевания).

Для оценки общей клинической картины доктор выдает направления на анализ мочи, ультразвуковое обследование внутренних органов, рентгенографию или флюорографию грудной клетки. Другие диагностические процедуры делают по показаниям.

Какие анализы на гепатит С необходимо сдавать для точного определения диагноза ? В соответствии с рекомендациями ВОЗ, диагностику HCV начинают с серологического исследования методом ИФА (при наличии выраженных отклонений в биохимии). Если данный тест покажет положительный результат, необходимо проведение дальнейшего обследования пациента. Помимо ПЦР и общеклинических анализов, назначают HBS ag HCV. Некоторые противовирусные препараты могут спровоцировать обострение гепатита В, поэтому перед началом лечения эту патологию необходимо исключить.

Основным преимуществом ПЦР для определения HCV является возможность ранней диагностики (через 18–21 день после инфицирования). Выявление РНК вируса в крови позволяет однозначно трактовать неубедительные данные ИФА. Положительный результат служит однозначным показанием для дальнейшего обследования и назначения лечения, а отрицательный (при отклонениях от нормы анализов на биохимию) – поводом для повторного обследования через 3–4 недели.

Существует несколько разновидностей ПЦР-диагностики HCV:

1. Качественный. Что показывает качественный анализ ПЦР на гепатит C? Проведение подобного исследования позволяет определить, заражен ли человек. Специалисты рекомендуют делать пробу ультрачувствительным методом (с восприимчивостью тест-систем не менее 10–50 МЕ/мл). Расшифровка результатов проста – положительный указывает на инфицирование и прогрессирующее распространение вируса в организме, отрицательный – или на отсутствие заболевания, или на ничтожно малую концентрацию возбудителя (вполне возможно, что иммунная система человека справится с патогеном самостоятельно).
2. Количественный. Количественный анализ на гепатит С методом ПЦР (в отличие от качественного теста) позволяет количественно определить вирусную нагрузку, то есть уровень РНК HCV в объемной единице крови. Расшифровать результаты можно на основе диапазона нормы и патологических значений, измеряющихся в МЕ/мл. Положительной считается вирусная нагрузка выше 75 МЕ/мл. Количественное исследование будет отрицательным при значениях ниже 75 МЕ/мл.
3. Генотипирование. Подобный анализ сдается при установленном диагнозе HCV-инфекции для разработки индивидуального подхода к пациенту. Проводится с помощью секвенирования и обратной гибридизации. Вирусная нагрузка может меняться на протяжении болезни, однако генотип остается прежним.

Изучение различными методиками ПЦР показано на различных этапах диагностики и лечения гепатита С. Количественный повторяют чаще прочих для контроля эффективности противовирусной терапии.

Основными показаниями к сдаче крови на гепатит С служат:

• беременность (показан плановый скрининг);
• профилактический осмотр у людей из группы риска (медицинские работники, волонтеры в наркологических центрах);
• ВИЧ;
• незащищенный половой контакт с инфицированным человеком;
• неразборчивые сексуальные связи.

С учетом высокой распространенности гепатита С специалисты рекомендуют проводить исследование с профилактической целью каждому человеку. Риск заражения присутствует при посещении стоматологического кабинета, маникюрного/педикюрного салона, где недобросовестно относятся к стерилизации инструментов и т.д.

Строгим показанием к проведению анализов служит появление характерных и неспецифических симптомов гепатита С. К наиболее распространенным признакам относят:

• общую слабость;
• длительно сохраняющийся субфебрилитет на фоне отсутствия других инфекций;
• изменение цвета кала и/или мочи;
• тошноту, рвоту.

Желтушность слизистых оболочек и эпидермального покрова встречается редко. У 80% пациентов заболевание длительное время протекает бессимптомно, часто диагностируется случайно, в ходе плановой диспансеризации.

Выполнить анализ на гепатит С методом ПЦР можно практически в любой частной лаборатории или поликлинике по месту жительства. При госпитализации обследование делают в больнице в условиях стационара.

Преимуществами лабораторного центра служат:

1. Отсутствие необходимости в направлении от врача.
2. Короткие сроки выполнения исследования. Сколько делают анализ, скажет лаборант при оформлении заказа. Обычно это 1–2 дня. Некоторые лаборатории за отдельную плату предоставляют услуги проведения срочного исследования.
3. Сервис (отсутствие очередей, удобная оплата онлайн, получение результатов по электронной почте).
4. Качество оборудования, на котором проводится исследование (для исключения ложноположительного анализа).

Однако без предварительной консультации врача сложно определить, какой именно вид ПЦР нужен. Также нельзя самостоятельно интерпретировать результаты. Некоторые лаборатории используют различные шкалы измерения вирусной нагрузки, что может стать причиной ошибки. Исследование методом полимеразной цепной реакции нередко является частью комплексного обследования, включающего как лабораторные, так и инструментальные тесты, которые дешевле выполнять в поликлинике по полису ОМС.

На результаты может повлиять незнание правил, как сдавать кровь. Основной материал для ПЦР – сыворотка. Информативно исследование биоптата печени, однако инвазивная процедура не подходит для рутинного анализа. Как сдать кровь правильно?

Для получения достоверных результатов соблюдают следующие рекомендации:

1. Сдают кровь строго натощак: прием пищи исключается за 10–12 часов до процедуры.
2. За 2–3 дня до анализа воздержаться от потребления алкоголя, «тяжелой» (жирной, жареной, соленой, копченой) пищи, приправ.
3. Утром перед исследованием можно пить только воду (чай, кофе противопоказаны).
4. За сутки ограничить тяжелую физическую активность.
5. За 10 часов до процедуры воздержаться от курения.

Забор крови осуществляется из вены.

Необходимо проконсультироваться с врачом и поставить в известность специалиста, если пациент принимает какие-либо лекарственные препараты. По возможности, следует приостановить использование медикаментов за сутки до сдачи крови.

Конкретные сроки выполнения анализа на HCV методом ПЦР зависят от загруженности лаборатории и наличия необходимого диагностического оборудования. Например, если материал транспортируют из пункта забора крови в лабораторный центр, время выполнения исследования увеличивается.

Сколько в среднем делается анализ на гепатит С? В большинстве диагностических центров установлены следующие сроки для проведения исследования:

• качественное определение вируса – 1–4 дня;
• количественное выявление вирусной нагрузки методом ПЦР – 1–2 дней;
• генотипирование – 1–4 дня.

В поликлиниках данный срок может составлять до 7–10 дней. При выполнении исследования в частном лабораторном центре на руки выдается квитанция с кодом, по которому можно загрузить полученные результаты. Как правило, при готовности пациенту приходит сообщение с уведомлением.

Данные лабораторного исследования выдаются пациенту в виде таблицы, где обязательно указаны следующие параметры:

• вид ПЦР (качественная, количественная или генотипирование);
• какие результаты анализов получены;
• референсные значения и расшифровка отклонения от нормы (данная графа может присутствовать не на всех бланках во избежание ошибочной диагностики и последующего самолечения).

Также указывают дату забора крови и выдачи результатов, координаты и печать лабораторного центра, ФИО и роспись медицинского работника, проводившего исследование.

Расшифровка, т. е. что означает полученный результат, должна проводиться только квалифицированным врачом.

Данные, которые может показать исследование методом ПЦР, приведены в таблице ниже:

Расшифровкой результатов должен заниматься квалифицированный специалист. Так, иногда возникают ситуации, когда ИФА на гепатит С положительный, а ПЦР отрицательный. Подобное расхождение объясняют несколькими причинами. Это может быть ошибкой лаборатории, поэтому одно из исследований необходимо повторить спустя 2–3 недели.

Иногда такие результаты возникают вследствие скрыто перенесенной острой HCV-инфекции. ИФА определяет наличие антител, но по факту, РНК вируса в организме или отсутствует, или не выявляется из-за ничтожно малой концентрации. В любом случае пациент с подобными данными исследований нуждается в дальнейшем наблюдении и консультациях врача.

Качественный анализ ПЦР является относительно быстрым и наиболее точным методом первичной диагностики гепатита С. По результатам исследования можно определить, заражен человек или нет, а затем проводить более детальные лабораторные методы. Ложноотрицательный результат вероятен в первые 14–21 день после заражения, когда количества РНК вируса недостаточно, для выявления даже высокочувствительными тест-системами.

Ложноположительный результат возможен по вине сотрудников лаборатории. Иногда такие данные получают при беременности, активном течении онкологических и/или аутоиммунных заболеваний.

Чтобы исключить вероятность неправильной расшифровки, качественный анализ рекомендуют повторить через 3–4 недели.

Количественный анализ методом ПЦР на гепатит С обычно назначают для определения вирусемии в ходе противовирусной терапии. В норме, по мере приема лекарственных средств вирусологическая нагрузка постепенно снижается. Цель лечения – отрицательные или минимально допустимые показатели исследования.

Расшифровка результатов зависит от единиц измерения, используемых в лаборатории, поэтому обычно в бланке указывают полученные данные, референсные значения и описание отклонений от нормы.

Количественный анализ ПЦР необходим для оценки эффективности лечения, подбора схемы терапии (сочетание нескольких противовирусных препаратов), определения продолжительности приема медикаментов. Исследование периодически проводится и после окончания курса лечения для своевременного выявления рецидива.

Одно из основных исследований, которые проводятся на этапе диагностики и обязательно до начала терапии, так как генотип – главный фактор, влияющий на подбор лекарственных средств.

К настоящему моменту известно об 6 генотипах HCV (каждый имеет свои подтипы), но в России и странах Европы у подавляющего числа больных выявляют:

• 1b – один из самых неблагоприятных в плане прогноза, быстро переходит в хроническую форму, агрессивен по отношению к тканям печени, сложно поддается терапии;
• 4 – плохо «отвечает» на терапию, требует тщательного подбора схемы приема препаратов;
• 2а, 3а – успешное лечение отмечают в 70% случаев и чаще (при использовании современных противовирусных медикаментов).

Остальные генотипы диагностируют реже. В отличие от количественного анализа, генотипирование выполняют один раз и не повторяют в процессе лечения (исключение составляют устойчивые формы HCV, не поддающиеся терапии.

Несмотря на то, что ВОЗ рекомендует ИФА как основной метод выявления HCV-инфекции, исследование методом ПЦР имеет ряд «плюсов»:

• высокая точность;
• возможность первичной диагностики;
• оценка эффективности лечения по определению вирусологической нагрузки;
• точное установление генотипа вируса, что предопределяет тактику дальнейшего лечения;
• доступная стоимость.

Пункты забора крови для проведения исследования есть в любом городе, что дополнительно облегчает диагностику и делает сдачу анализов доступными для каждого пациента.

Стоимость анализа ПЦР на гепатит С зависит от ряда факторов:

1. Ценовая политика лабораторного центра и его местонахождение (так, в Москве подобные услуги обходятся дороже).
2. Разновидность исследования (цена на качественный, количественный анализ и генотипирование отличается).
3. Сроки выполнения (ряд лабораторий предлагают доплатить определенную сумму за срочное получение результатов).

Узнать, сколько стоит ПЦР на гепатит С можно либо по телефону, либо на интернет-сайте лаборатории.

Средняя цена по России составляет:

• качественное определение РНК вируса – 700–1000 рублей и до 3000 рублей с использованием ультрачувствительных тест-систем;
• генотипирование – 1000–1200 рублей (в комплексе с количественным определением – до 4000 рублей);
• количественное определение вирусологической нагрузки – 2300–3000 рублей.

В поликлинике по месту жительства подобные исследования проводят бесплатно (при наличии полиса ОМС). Но лаборанту обязательно предъявляют направление от лечащего врача.

источник