Анализ на резистентность гепатит с

Сообщение Parker » 01 июн 2017, 20:28

Сокращения: AASLD, Американская ассоциация по изучению заболеваний печени; DAA, противовирусное средство прямого действия; EBV / GZV, elbasvir / grazoprevir;
HCV, вирус гепатита С; NS5Ai, неструктурные ингибиторы 5А; PI, ингибитор протеазы; РАН, резистентная замена;
RAV, резистентный вариант; SOF / LDV, sofosbuvir / ledipasvir; TE, опыт лечения; TN, наивное лечение.
Из Торонтского центра по заболеванию печени, больнице Торонто, университетской сети здравоохранения, Сандра Ротман Центр глобального
Здоровье, Университет Торонто, Торонто, О.Н.
Потенциальный конфликт интересов: J.J.F. Получил консультационную и / или исследовательскую поддержку от AbbVie, Abbott, Gilead, Janssen и Merck.
Поступило 12 января 2017 года; Принято 22 февраля 2017 года

Внедрение антивирусных препаратов прямого действия (DAA) произвело революцию
Лечение инфекции вирусом гепатита С (HCV).
Высокоэффективные и чрезвычайно хорошо переносимые режимы
Теперь доступны почти для всех пациентов. С таким высоким успехом
Пациенты ожидают лечения, когда они
Начать курс антивирусного лечения. Помимо пациентов,
Ожидания, со стоимостью терапии и ограничениями на
Повторное лечение, правильное в первый раз, или, конечно же,
Второй раз, должен быть приоритетом для всех клиницистов. По крайней мере, для
В настоящее время, максимизация шансов на успех требует
Тестирование сопротивления в определенных клинических сценариях.

Было много споров о правильных условиях
Для описания сопротивления. Хотя это несколько семантический аргумент, полезно использовать правильную терминологию. сопротивление
Происходит потому, что нуклеотидные замены происходят случайным образом
Во всем геноме HCV с каждым
Цикл репликации. Случайно, некоторые замены мешают
Со связыванием специфических DAAs с их белковыми мишенями.
Устойчивыми вариантами являются вирусы, которые растут лучше, чем дикий тип
Вирус в присутствии DAA; Вариант не
(RAV), он устойчив. Однако,
Когда вирус секвенирован у пациента, конкретные замены
Могут быть признаны, которые связаны с сопротивлением,
Но зависит ли конкретный вирион с этим
Замена фактически растет лучше в присутствии
Данный DAA неизвестен. Другими словами, это невозможно
Для выявления резистентных вариантов у пациентов. Возможно
Идентифицировать замены, связанные с сопротивлением;
Следовательно, термин связанные с сопротивлением замены
(RASs) .
Таким образом, устойчивым вариантом является предпочтительный термин
Для HCV, изучаемого in vitro, и RAS — предпочтительный термин для секвенирования результатов из образцов пациентов (рисунок 1
И Таблица 1)

таб. 1 Сохранение RAS после отказа DAA. Репликационная пригодность вариантов с RASs отличается классом DAA. RASs к нуклеотидной полимеразе
Ингибиторы (например, sofosbuvir) очень непригодны и не сохраняются в течение длительного времени после лечения (не показаны). RAS для PI имеют относительно
Плохой фитнес и в основном исчезли на 48 недель после лечения. RAS для ингибиторов ненуклеотидной полимеразы варьируют в зависимости от конкретного агента
Но обычно сохраняются> 1 год у большинства пациентов, тогда как ингибиторы RAS-NS5A очень подходят и сохраняются> 1 год почти во всех
пациентов. Данные взяты у пациентов, которые после лечения получали паритапревир / ритонавир / омбитасвир и дасабувир.3

Вирусный фитнес
Важно помнить, что DAAs не делают
RASs, они просто выбирают для них. Замены происходят случайным образом
С репликацией, и большинство из них ухудшит жизнеспособность вируса,
То есть, насколько хорошо вирус реплицируется. Варианты с RAS
Имеют преимущество в фитнесе в присутствии DAAs, но
Большинство из них будет превзойдено вирусом дикого типа в
Отсутствие препарата. Подгонка конкретных RASs имеет
Влияние на то, сохраняются ли РС после неудачной терапии
И существуют ли они на начальном этапе лечения наивными
пациентов. RASs к различным классам DAA заметно
Различная пригодность. Классический софосвивир-ассоциированный РАН
(S282T) реплицируется крайне плохо и быстро перерос
Вирусом дикого типа, объясняя, почему это почти никогда
Наблюдается даже после неудачного лечения софосбувиром.2
Высокоуровневые ингибиторы ингибиторов протеазы (PI) также имеют плохую
И может быть обнаружен в течение некоторого времени после лечения
С ПИ, но редко встречаются на исходном уровне и в конечном итоге
Вернуться к низким или неопределяемым уровням лечения.3 RAS
К ингибиторам ненуклеотидной полимеразы имеют промежуточные
Фитнес и, таким образом, сохраняются после терапии, но являются необычными
У пациентов, не получавших лечение.3 В отличие от RASs к неструктурным
Ингибиторы 5А (NS5Ai) имеют очень минимальное ухудшение состояния
И конкурировать с вирусом дикого типа.
Они обычно встречаются у пациентов, наивных для NS5Ai (10-15%
Генотип 1) и сохраняются в течение длительного времени после неудачного
Курс терапии NS5Ai4. Поскольку NS5Ai являются
Компонентов большинства одобренных схем, влияние
Базовый уровень и посттерапия NS5Ai RAS является клинически значимым

Подписание отчетов RAS для лечения софосвивиром / лейспасвиром (SOF / LDV) и elbasvir / grazoprevir (EBV / GZV). Значение
Базового RAS на SVR во многом зависит от того, как они сообщаются. (A) Как показано, NS5A RASs являются общими, но имеют небольшой эффект
На УВО в 1765 пациентах, получавших софосбувир / ледипасвир в исследованиях фазы 2/3, когда все пациенты с генотипом 1 были включены с использованием 1% порога
Обнаружения. Эффект более заметен у пациентов с генотипической инфекцией 1a по сравнению с инфекцией генотипа 1b. когда
Учитываются только отраслевые RAS-индикаторы, и пороговое значение увеличивается с 1% до 15%, RAS менее распространены, но имеют гораздо больший
Влияние на УВО, особенно у пациентов с неудачными ответами на предшествующий курс пегинтерферона и рибавирина (лечение
[TE]). 6 (B) Аналогичный эффект наблюдается с EBV / GZV. Эффект NS5A RASs при инфекции генотипа 1b отсутствует, а эффект elbasvirspecific
RASs больше, чем все RAS-классы NS5A в группах с инфекцией генотипа 1a.5 Процент со стрелкой указывает на распространенность
РАН в конкретной популяции. 1% или 15% относится к распространенности RAS в вирусной популяции. Сокращение: TN, наивное лечение.

Отчеты по РСБУ
К сожалению, определения — это не просто проблема
РАН по сравнению с РАВ. Отчетность об эффектах РСУ в
Литература была очень запутанной. Некоторые RASs влияют
Ответ всем членам класса DAA, тогда как другие
Оказывают различное воздействие на разные DAA того же
класс. Распространенность RAS также имеет значение. Несмотря на то что
Более глубокое секвенирование с большей вероятностью обнаруживает РАС, если они не
Составляют не менее 15-20% вирусной популяции,
Они, вероятно, имеют ограниченное клиническое значение. Удобно, что последовательность народонаселения, которая дает наиболее распространенную / среднюю последовательность вирусов, циркулирующих у пациента, будет определять, что RAS учитывает от 15% до 20% вирусной популяции. RAS имеют разные эффекты в разных
Популяции (разные генотипы / подтипы) и
Может быть более уместным у пациентов с опытом лечения
И с циррозом.

Во многих исследованиях сообщается о специфических для класса, а не о лекарственных
RAS, часто при низких пороговых значениях (1% против 15%)
И в плохо определенных группах пациентов (генотип 1
Против 1a / 1b, все против опытного / наивного, все против цирротического / нецирротического).
В совокупности эти подходы
Для преуменьшения влияния исходных RASs путем включения
Пациенты, для которых они неактуальны, что
Размера эффекта в соответствующих популяциях (Рисунок 2 и Таблица 2)

Исходный тест RAS
В тестировании нет никакой ценности (см. Комментарий ниже) для
Базовые RAS, если результаты не изменят управление.
К счастью, для генотипов 1b, 2, 4 и 6 базовый уровень
По-видимому, RAS не влияют на реакцию на лечение,
И, следовательно, базовое тестирование RAS не оправдано.1 Однако,
Для лиц с генотипом 1а и, возможно, генотипа 3,
Базовые значения RAS имеют отношение к определенным режимам в определенных
(Таблица 3). Для elbasvir / grazoprevir присутствие
Базовых RASs снижают частоту ответов в генотипе
1a. К счастью, продление до 16 недель и добавление
Рибавирин, по-видимому, преодолевает эффект исходных RAS,
И, таким образом, рекомендуется использовать этикетку (рисунок 3) .5 Данные со светодиодискавиром / софосвивиром
Показывают, что некоторые RAS имеют
Эффекты у пациентов с генотипом 1а, которые не ответили успешно
К предшествующей терапии пегинтерфероном / рибавирином и в
Пациенты с наихудшим уровнем лечения с циррозом. Хотя данные
Ограничено, добавление рибавирина и / или расширение терапии аналогичным образом преодолевают влияние RASs.6 Для других
Одобренные схемы, влияние исходных RASs в генотипе
1a ограничено либо из-за более высокого барьера для
Сопротивление (sofosbuvir / velpatasvir) или требование
Использование рибавирина (paritaprevir / r / ombitasvir / dasabuvir).

В исследовании ASTRAL-3 устойчивый вирусологический ответ
(СВР) с софосбувиром / velpatasvir в течение 12 недель у пациентов
С генотипом 3 снизились с 97% до 88% у пациентов с циррозом
Укрывавших исходные значения Y93 RASs.8 Подобного эффекта не наблюдалось
В софосбувире / вельпатавирской группе исследования POLARIS-3
Несмотря на аналогичную популяцию. Причина разницы
не ясно. Американская ассоциация по изучению заболеваний печени
(AASLD) рекомендуют тестировать Y93
РАН у пациентов с циррозом и добавлением рибавирина для пациентов
В которой он присутствует на основе экстраполяции с
ASTRAL-4 исследование софосбувира / velpatasvir в декомпенсированной
Цирроз, при котором пациенты с генотипом 3, которые получали
Наилучшие показатели ответа были получены у рибавирина.1

Рис. 3. Преодоление эффекта исходных RAS с элбасвиром / гразопревиром.
Исходные значения elbasvir RASs оказывают значительное влияние на ставки
УВО у пациентов с инфекцией генотипа 1а. Как отмечалось, в
Пациенты без исходных ИБС, показатели УВО были от 99% до 100%
С 12 неделями и без рибавирина. Напротив, ставка УВО была
Только 53% у пациентов с исходными элбасвирскими RAS, которые получили 12
Недель терапии. Добавление рибавирина и расширение до 16
До 18 недель улучшились показатели ответа, а комбинация
Как более длительная терапия, так и рибавирин приводили к 100% СВР.

Контраргумент
Некоторые утверждают, что базовое тестирование RAS не требуется
Даже для конкретных популяций, упомянутых
Номер с базовыми RAS-серверами, которые не будут отвечать
Относительно небольшой процент от общей численности населения,
И тестирование может стать препятствием для доступа к лечению /
поглощение. Стоимость, ограниченный доступ и труднодоступные отчеты
Также приводятся в качестве аргументов против тестирования. Для индивидуального
Пациент, наличие РАН может иметь
Влияние на вероятность СВР. Это правда, что отчеты должны
Быть улучшенными. Сообщая, что конкретная RAS «вероятно»
Или, что еще хуже, «возможно», устойчивое к конкретному препарату, не
полезно. Было бы более полезно связать с практическими рекомендациями
Рекомендовать модификации лечения для схем
(Например, расширить / добавить рибавирин). К счастью, комбинации в
В поздней стадии развития улучшены барьеры на пути сопротивления,
И, вероятно, тестирование на базовое сопротивление будет
Не требуются в ближайшем будущем.

ОТКАЗ ОТ ПОСТУПЛЕНИЯ
В рекомендациях AASLD рекомендуется проводить тестирование RAS во всех
Пациентов до повторного лечения после неудачного курса
DAAs.11 Важно отметить, что стратегии преодоления сопротивления
С нынешними режимами не были
Настройка повторного лечения. Повторное лечение редко бывает чрезвычайной ситуацией.
Учитывая очень многообещающие данные с несколькими режимами спасения
Используется специально для повторного лечения у пациентов с
RASs, было бы лучше, если бы большинство пациентов дождались предстоящей терапии, а не отступили с существующими
Одобренные методы лечения

ВЫВОД
Сопротивление добавило слой сложности к HCV
управление. Если правильно интерпретироваться, базовые данные RAS
Могут добавить значительную клиническую ценность для конкретных популяций пациентов.
Надеемся, что стандартизованная отчетность в литературе
И улучшенные клинические отчеты сделают тестирование RAS
Легче использовать клинически. К счастью, это, скорее всего, временный
ситуация. Будущие схемы вряд ли потребуют
Тестирование сопротивления базовой линии и даже не требует тестирования
До повторного лечения. Пока эти схемы не появятся,
Наибольшее сопротивление, которое необходимо преодолеть, — это сопротивление
К испытанию сопротивления.

источник

Понимание принципов появления лекарственно-устойчивых вирусов имеет решающее значение при использовании целенаправленной антивирусной терапии. Лучший пример этих принципов можно почерпнуть из исследования ВИЧ. Как и ВИЧ, ВГС представляет собой вирус РНК приблизительно 9,5 килобаз, который очень быстро реплицируется (миллиарды вирусов ежедневно). Производство каждого нового вируса осуществляется ферментом, который в среднем вызывает от 1 до 3 ошибок на цикл репликации. Многие из этих ошибок либо не влияют на продукт вируса потомства, либо приводят к вирусам потомства, которые не являются реплицируемыми (т. е. мертвыми вирусами). Однако для некоторых новых вирусов ошибки транскрипции приводят к изменениям в критических областях кодирования, которые могут случайно, изменить восприимчивость вируса к 1 или более лекарственным средствам, используемым для лечения вируса. Появление таких лекарственно-устойчивых вирусов чаще всего происходит, когда уровни лекарственного средства являются субтерапевтическими, тем самым создавая избирательное давление для устойчивых вирусов, которые появляются как доминирующие виды. Эти вновь образованные устойчивые вирусы обладают преимуществом селективного роста, которое позволяет им реплицироваться в присутствии противовирусных препаратов. В подгруппе пациентов с хронической инфекцией HCV вирусные варианты, содержащие замены, связанные с резистентностью к противовирусным препаратам, действующим на ВГС (DAA), обнаруживаются до антивирусной терапии и, особенно в случае схем, содержащих ингибитор NS5A, могут отрицательно влиять на ответ лечения. Такие замены часто упоминаются как базовые, связанные с резистентностью (RAS).

В случае, когда применяемая схема ПППД терпит неудачу, резистентные вирусы также селектируются, увеличиваются в количестве. Эти вирусы содержат нуклеотидные замены, которые обозначают как связанные с лечением RAS.

При неудачах с применением схем, содержащих ПППД класса NS5A и NS3, часто обнаруживаются замены, связанные с резистентностью к ингибиторам NS5A и NS3. Напротив, нуклеотидные замены, связанные с резистеностью к ингибиторам NS5B, встречаются редко при неудачах лечения с применением схем с NS5B, не более 1%. Это вероятно связано с высококонсервативной областью каталитического центра, связывающего нуклеотиды, что делает замены в этой области чрезвычайно редкими.

Величина отрицательного воздействия RAS, как базовых, так и связанных с лечением, варьирует в зависимости от режима (применяемых совместно препаратов); факторов пациента, влияющих на ответ (цирроз); кратное уменьшение потенциальных возможностей конкретной RAS.

Учитывая эти соображения, тестирование RAS само по себе не будет определять оптимальный выбор режима ПППД. Кроме того, препарат, который, как ожидается, подвергнется значительной потере активности в присутствии RAS, тем не менее может быть использован в специфических клинических условиях или режимах.

Тестирование замен, связанное с устойчивостью к NS5A, рекомендуется для пациентов с генотипом 1a, наивных пациентов и с опытом лечения. Если RAS NS5A присутствует, необходимо добавить рибавирин, исходя из массы тела, продлить лечение до 16 недель или использовать другую рекомендованную терапию.

Исследование замен, связанное с устойчивостью к NS5A, может быть рассмотрено для пациентов с генотипом 1a, проходивших лечение, без цирроза. Если более чем 100-кратная потеря чувствительности присутствует, необходимо добавить рибавирин, исходя из массы тела, продлить лечение до 12 недель или использовать другую рекомендованную терапию.

У пациентов с генотипом 1а и циррозом при более чем 100-кратной потере чувствительности, необходимо добавить рибавирин, исходя из массы тела, продлить лечение до 24 недель или использовать другую рекомендованную терапию.

Исследование замен, связанное с устойчивостью к NS5A, рекомендуется пациентам с 3 генотипом, опытом лечения (с циррозом или без него) и наивным пациентам с циррозом. Если присутствует Y93H, необходимо добавить рибавирин, исходя из массы тела.

Исследование замен, связанное с устойчивостью к NS5A, рекомендуется пациентам с 3 генотипом, опытом лечения, без цирроза. Если присутствует Y93H, необходимо добавить рибавирин, исходя из массы тела.

У наивных пациентов с 3 генотипом и циррозом, если присутствует Y93H, необходимо добавить рибавирин, исходя из массы тела, или использовать другую рекомендованную терапию.

Тестирование RAS не рекомендуется для пациентов с генотипом 1b.

Тестирование RAS не рекомендуется для пациентов с генотипом 1, 2, 3, 4, 5 или 6, в отношении которых решается вопрос о назначении глекапревир / пибрентасвир в течение 8, 12 или 16 недель.

Тестирование NS5A RAS не рекомендуется для пациентов с генотипом 1b.

Тестирование NS5A RAS не рекомендуется для наивных пациентов с генотипом 1а.

Тестирование NS5A RAS не рекомендуется для наивных пациентов с генотипом 1а или 1b без цирроза, с вирусной нагрузкой менее 6 млн МЕ/мл, относительно которых решается вопрос о 8-недельном курсе лечения.

Паритепаревир/ритонавир/омбитавир с дасабувиром и рибавирином или без него; паритепаревир/ритонавир/омбитавир с рибавирином

Тестирование RAS не рекомендуется для наивных или получавших лечение пациентов с генотипом 1 или 4 соответственно.

Тестирование RAS не рекомендуется для пациентов с генотипом 1, 2, 4, 5 или 6 инфекций, относительно которых решается вопрос о лечении в течение 12 недель.

Тестирование RAS не рекомендуется для пациентов с генотипом 1, 2, 3, 4, 5 или 6 инфекций, относительно которых решается вопрос о лечении в течение 12 недель.

источник

Определение мутаций устойчивости вируса гепатита В к противовирусным препаратам

Лекарственная устойчивость (резистентность) – природная или приобретенная способность возбудителя болезни сохранять жизнедеятельность при воздействии на него лекарственных средств. Как правило, лечение ХГВ проводится с применением аналогов нуклеозидов/нуклеотидов – ингибиторов РНК-зависимой ДНКполимеразы (обратной транскриптазы), которая кодируется Р-геном ВГВ. Противовирусный препарат встраивается в вирусный геном в процессе обратной транскрипции, и конкурентно ингибирует вирусную репликацию, т. о. эти лекарственные препараты эффективно снижают вирусную нагрузку у больных ХГВ. При возникновении некоторых точечных мутаций в Р-гене ВГВ аналоги нуклеозидов/нуклеотидов теряют способность встраиваться в растущую цепь ДНК вследствие конформационного изменения локуса связывания обратной транскриптазы. Мутации лекарственной устойчивости подразделяются на:

• основные (первичные) – мутации, снижающие чувствительность к противовирусному препарату;
• компенсаторные (вторичные) – мутации, которые компенсируют функциональные дефекты активности полимеразы, связанные с появлением первичной мутации.

Мутации устойчивости определяются по номеру позиции аминокислоты в домене обратной транскриптазы, причем аминокислота дикого типа указывается слева от номера аминокислоты, вариант мутации устойчивости – справа. Например, M204I – замена метионина, аминокислоты дикого типа, в 204 положении домена обратной транскриптазы на аминокислоту изолейцин, наличие которой в данной позиции ассоциировано с возникновением мутации лекарственной устойчивости.

Информация о наличии мутаций лекарственной устойчивости в геноме ВГВ необходима при выборе препаратов противовирусной терапии у пациентов, ранее получавших аналоги нуклезидов/нуклеотидов.

Исследование предназначено для больных ХГВ в определенных случаях перед началом противовирусной терапии и во время приема противовирусных препаратов (Табл. 8).

Критерии назначения исследований для определения устойчивости ВГВ к противовирусным препаратам

*Если пациент сохраняет приверженность к лечению.

Материал для исследования Плазма крови.

В клинической диагностике определение мутаций устойчивости вируса гепатита В к противовирусным препаратам включает ПЦР-амплификацию ревертазного домена Р-гена ВГВ и последующий анализ специфичных нуклеотидных последовательностей методами:

• прямого секвенирования амплифицированного фрагмента. Данный метод способен выявлять мутации устойчивости, если доля популяции вируса с мутацией составляет более 20%. Метод позволяет идентифицировать все мутации, включая дополнительные потенциальные компенсаторные и новые неизвестные;

В результате проведенного исследования врач получает информацию по каждой аминокислотной позиции, ассоциированной с мутацией лекарственной устойчивости, и клиническую интерпретацию результатов исследования:

• ВГВ может быть устойчив к определенному противовирусному препарату, т. е. в ревертазном домене Р-гена ВГВ выявлены основные мутации устойчивости к этому препарату;
• ВГВ может быть чувствителен к противовирусному препарату, т. е. мутации устойчивости не обнаружены;
• у ВГВ возможно возникновение устойчивости к противовирусному препарату, т. е. выявлены только компенсаторные (вторичные) мутации устойчивости к этому препарату, основных мутаций не обнаружено.

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Copyright ФБУН Центральный НИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 1998 — 2019

Центральный офис: 111123, Россия, Москва, ул. Новогиреевская, д.3а, метро «Шоссе Энтузиастов», «Перово»
+7 (495) 788-000-1, info@cmd-online.ru

! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

источник

Выявление мутаций, ассоциированных с устойчивостью к лечению хронического гепатита С Интерфероном и Рибавирином (Интерлейкин 28В — IL28B).

Диагностика генных мутаций, сопряженных с устойчивостью к лечению хронического гепатита С препаратами интерферона и рибавирина по гену интерлейкина 28B — IL28B – это диагностический тест из группы цитогенетических методов молекулярной биологии, позволяющий определить устойчивость к лечению препаратами интерферона и рибавирином у больных хроническим гепатитом C. Метод помогает спрогнозировать эффективность предстоящей терапии базовыми лекарственными препаратами.

Выявление генных мутаций, связанных с устойчивостью к лечению хронического гепатита С препаратами интерферона и рибавирина по гену IL28B представляет собой анализ крови, позволяющий определить вариант гена, отвечающего за устойчивость организма к вирусу гепатита С и его чувствительность к лечению интерфероном и рибавирином. Это позволяет с определенной долей уверенности спрогнозировать эффективность предстоящей противовирусной терапии.

Все свойства и индивидуальные особенности человеческого организма определяются набором генов, каждый из которых отвечает за определенные признаки и характеристики. В составе 19 хромосомы расположен ген IL28B. Он кодирует информацию о естественных механизмах противовирусной защиты против гепатита С. Установлено, что этот же ген ответственный за чувствительность организма к элиминации вируса гепатита С при помощи комбинации интерферона с рибавирином. IL28B может иметь несколько вариаций, которые называются полиморфизмом гена. Именно от конкретных типов полиморфизма зависит заложенная природой чувствительность организма как к вирусу гепатита С, так и базовой противовирусной терапии. Анализ крови, направленный на выявление мутаций гена IL28B, позволяет определить вариант полиморфизма.

Важно помнить! Лечение гепатита С – это очень длительный процесс (42-74 недели). Его организация и проведение сопряжены с огромными финансовыми трудностями и побочными эффектами. Поэтому очень важно, принимая решение о его целесообразности, иметь четкий ориентир, на основании которого можно начинать противовирусную терапию. Нет смысла в лечении, если заранее известна его неэффективность!

Целесообразность в проведении теста на определение устойчивости к лечению гепатита С препаратами интерферона и рибавирином возникает в таких ситуациях:

• Необходимость спрогнозировать наиболее вероятный исход лечебного процесса;
• Проведение дифференцированного выбора между разными типами препаратов интерферона, которые будут включены в лечение в комбинации с рибавирином;
• Необходимость дифференцированного выбора между стандартным лечением гепатита С и тройной терапией.

Возможные результаты анализа и их интерпретация приведены в таблице.

источник

Глобальная эпидемиология подтипов вируса гепатита C и мутаций резистентности по результатам секвенирования

Статья из Journal of hepatology. Русское издание. ТОМ 3. НОМЕР 5.

Авторы: Tania M. Welzel, Neeru Bhardwaj, Charlotte Hedskog, Krishna Chodavarapu, Gregory Camus, John McNally, Diana Brainard, Michael D. Miller, Hongmei Mo, Evguenia Svarovskaia, Ira Jacobson, Stefan Zeuzem, Kosh Agarwal

/Секвенирование биополимеров (белков и нуклеиновых кислот — ДНК и РНК) — определение их аминокислотной или нуклеотидной последовательности (от лат. sequentum — последовательность). В результате секвенирования получают формальное описание первичной структуры линейной макромолекулы в виде последовательности мономеров в текстовом виде./

Актуальность и цели. Генотип, подтип вируса гепатита С (HCV) и наличие мутаций резистентности (МР) являются основными факторами, определяющими выбор схем противовирусных препаратов прямого действия (ПППД). Однако существующие в настоящее время методы генотипирования HCV имеют недостатки в отношении дифференцировки между подтипами HCV, а распространенность МР практически неизвестна. Целью настоящего исследования было изучить эпидемиологию HCV с помощью 12 645 образцов, взятых у пациентов в 28 странах в 5 географических регионах.

Методы. Мы сравнивали генотип и подтипы HCV с помощью метода INNO-LiPA 2.0 и метода секвенирования ампликона у 8945 участников клинических исследований ПППД II и III фаз. Изучена глобальная молекулярная эпидемиология HCV у 12 615 пациентов. Распространенность МР изучалась с помощью популяционного или глубокого секвенирования, также был выполнен филогенетический анализ для исследования разнообразия подтипов.

Результаты. Несмотря на высокую согласованность между методами INNO-LiPA и секвенирования при определении генотипа, метода INNO-LiPA было недостаточно для определения генотипов 2, 3, 4 и 6. Секвенирование позволило уточнить наличие генотипов 2, 3, 4 и 6 у 42, 10, 81 и 78 % пациентов соответственно. Несовпадение результатов определения генотипа с помощью разных методов (генотип 2 — генотип 1) наблюдалось у 28 (3 %) из 950 пациентов с генотипом 2, что согласуется с наличием рекомбинаций между генотипами. Анализ результатов секвенирования продемонстрировал различия в распространенности подтипов в разных регионах, особенно генотипов 2, 4 и 6. Распространенность МР варьировала в зависимости от подтипа. При этом клинически значимая мутация гена NS3 Q80K была обнаружена у пациентов с генотипами 1а, 5а и 6а, а мутация гена NS5A Y93H была выявлена у больных с генотипами 1b, 3а, 4b, 4r и 7.

Выводы. Результаты данных анализов дают представление о точности диагностики подтипа и распределении МР, что имеет ключевое значение для внедрения глобальных стратегий лечения гепатита C.

Резюме. HCV обладает высокой изменчивостью. На сегодня описано 7 его генотипов и 67 подтипов. Целью настоящего исследования было: 1) сравнить два разных метода для определения генотипов; 2) изучить распространенность подтипов HCV каждого генотипа во всем мире; 3) установить распространенность МР внутри разных подтипов. Мы обнаружили, что оба метода характеризуются высокой согласованностью при разделении генотипов, однако определение конкретного подтипа было не всегда точным. Анализ результатов секвенирования показал наличие разницы в распространенности подтипов некоторых генотипов по регионам, особенно подтипов генотипов 2, 4 и 6. Распространенность МР также колебалась в зависимости от подтипа. На основании этих различий можно судить об эффективности разных препаратов для лечения гепатита C.

источник

ВГС может сохраняться на экологических поверхностях при комнатной температуре в течение, по крайней мере, 16-ти часов, но не дольше 4 дней. Способность вируса гепатита С сохранять свои инфицирующую активность на поверхностях еще раз подчеркивает необходимость строгого соблюдения правил уборки и дезинфекции, безопасных методик инъекций, а также важность просветительной работы, направленной на уменьшение риска заражения среди наркоманов.

Резервуар и источник инфекции — больные хроническими и острыми формами болезни, протекающими как с клиническими проявлениями, так и бессимптомно. Сыворотка и плазма крови инфицированного человека заразны в течение периода, начинающегося с одной или нескольких недель до появления клинических признаков болезни, и могут содержать вирус неопределённо долгое время.

Механизм передачи. Аналогичен вирусному гепатиту В, однако структура путей заражения имеет свои особенности. Это связано с относительно невысокой устойчивостью вируса во внешней среде и довольно большой инфицирующей дозой, необходимой для заражения. Вирус вирусного гепатита С передаётся прежде всего через заражённую кровь и в меньшей степени через другие биологические жидкости человека. РНК вируса обнаружена в слюне, моче, семенной и асцитической жидкостях.

К группам повышенного риска относят лиц, которым многократно переливали кровь и её препараты, а также лиц, имеющих в анамнезе массивные медицинские вмешательства, пересадку органов от доноров с ВГС-положительной реакцией и многократные парентеральные манипуляции, особенно при повторном использовании нестерильных шприцев и игл. Распространённость вирусного гепатита С среди наркоманов очень высока (70-90%); этот путь передачи представляет собой наибольшую опасность в распространении заболевания.

Вертикальная передача вирусного гепатита С от беременной к плоду редка, но возможна при высоких концентрациях вируса у матери или при сопутствующем инфицировании вирусом иммунодефицита человека. Роль половых контактов в передаче вирусного гепатита С достаточно невелика и составляет около 5-10% (при передаче вирусного гепатита В — 30%). Частота половой передачи возбудителя возрастает при сопутствующей ВИЧ-инфекции, большом количестве сексуальных партнёров. Определение идентичных генотипов вирусного гепатита С в семьях подтверждает возможность (хотя и маловероятную) его бытовой передачи.

Остаётся плохо изученным. Прямому цитопатическому действию вируса на гепатоциты отводится незначительная роль, причём только при первичной инфекции. Основные поражения различных органов и тканей при вирусном гепатите С обусловлены иммунологическими реакциями. Доказана репликация вируса вне печени — в тканях лимфоидного и нелимфоидного происхождения. Размножение вируса в иммунокомпетентных клетках (моноцитах) приводит к нарушению их иммунологических функций.

Высокая хронизация вирусного гепатита С, очевидно, в первую очередь объясняется отсутствием формирования достаточного защитного иммунного ответа, т.е. образования специфических антител, что является следствием большой частоты сбоев транскрипции РНК вирусного гепатита С. У инфицированных лиц происходит постоянная быстрая мутация вирусного гепатита С, особенно по поверхностным белкам вируса, что не позволяет полностью реализоваться клеточным звеньям иммунитета (антителозависимый и Т-клеточно-опосредованный киллинг инфицированных вирусом клеток).

Всё это позволяет предположить наличие двух ведущих факторов в патогенезе вирусного гепатита С:

1. Постоянная неконтролируемая репликация вируса;

2. Активный, но неэффективный гуморальный иммунный ответ. Эти факторы способствуют образованию значительного количества перекрёстно реагирующих аутоантител и поликлональной гаммаглобулинопатии, что реализуется в виде большого числа аутоиммунных заболеваний, ассоциируемых с персистенцией вирусного гепатита С или запускаемых вирусным гепатитом С с последующей элиминацией вируса.

Инкубационный период. Составляет 2-13 нед, однако в зависимости от пути передачи может удлиняться до 26 нед.

По истечении инкубационного периода, во время которого вирус размножается и адаптируется в организме (2-26 недель), болезнь начинает проявлять себя. Сначала, до появления желтухи, гепатит напоминает грипп. Заболевание начинается с:

· иногда — высыпания на коже.

Симптомы, как правило, возникают постепенно, подъём температуры плавный.

Через несколько дней картина начинает меняться:

· появляются боли в правом подреберье,

Врачи фиксируют увеличение печени и реже — селезёнки. В крови обнаруживаются характерные для гепатитов изменения: повышается уровень билирубина, печёночные пробы значительно увеличиваются, появляются специфические маркеры вирусного гепатита. Как правило, после появления желтухи состояние больных улучшается.

Со временем у 20% больных происходит обратное развитие симптомов и выздоровление.

Еще у 20% зараженных возникает носительство вируса гепатита С. В таких случаях отсутствуют какие-либосимптомы заболевания и изменения в биохимическом анализе крови, но анализы показывают присутствие вируса в крови (персистенция). Вирусоносители, как правило, выявляются случайно при проведении обследования.

Частота неблагоприятных исходов при этом варианте течения гепатита С до конца не установлена. Даже при отсутствии лабораторных признаков поражения печени гепатит С может прогрессировать.

Примерно у 70% людей, переболевших острым гепатитом, развивается хронический гепатит.

Хроническое течение гепатитов представляет наибольшую опасность. Наиболее характерными признаками хронических гепатитов являются недомогание, повышенная утомляемость, невозможность выполнять прежние физические нагрузки. Эти симптомы непостоянны, из-за чего многие не относятся к болезни серьёзно. Кроме того, могут возникать:

· суставные и мышечные боли,

Желтуха, потемнение мочи, кожный зуд, кровоточивость, похудание, увеличение печени и селезёнки, сосудистые звёздочки обнаруживаются лишь на далеко зашедшей стадии хронического вирусного гепатита. А затем может возникать цирроз печени и /или гепатома.

источник

Вирусный гепатит С представляет серьезную медико-социальную проблему. Около 180 млн. человек в мире сегодня страдают этим заболеванием, 350 тысяч ежегодно умирает. Длительное скрытое (бессимптомное) течение заболевания приводит к запоздалой диагностике. Анализ на гепатит С проводится с целью диагностики заболевания, дифференциальной диагностики, с его помощью определяют ранее перенесенное заболевание «на ногах».

Исследование применяется у лиц с симптомами гепатита С, повышенным уровнем ферментов печени, при получении сведений о перенесенном ранее заболевании неуточненной этиологии, у лиц из групп риска и скрининговых исследованиях.

Диагностика гепатита С проводится в 2 этапа:

1 этап. Определение наличия в сыворотке крови антител к вирусу (анти HCV).

2 этап. При наличии анти HCV проводится тест на наличие РНК (рибонуклеиновой кислоты) методом ПЦР на гепатит С. Тест позволяет выявить фазу процесса — «активная/неактивная», решить вопрос о необходимости лечения. Известно, что около 30% инфицированных лиц, самостоятельно избавляются от инфекции, так как имеют сильную иммунную систему и в лечении не нуждаются. С помощью ПЦР определяется генотип вируса. Разные генотипы по-разному реагируют на лечение.

Степень поражения печени определяется с помощью биопсии или других инвазивных и неинвазивных тестов (например, фибротест). Степень стеатоза печени определяется с помощью стеатотеста. Во всех случаях диагностика гепатита С должна базироваться на данных эпидемиологического расследования, клинике заболевания и данных биохимического исследования крови.

Рис. 1. Тяжелые последствия вирусного поражения печени — напряженный асцит.

Антитела к вирусам (анти HCV) являются специфическими маркерами инфицирования. В организме больного человека к белкам вируса (антигенам) вырабатываются специфические антитела — иммуноглобулины класса IgM и IgG (анти HCV IgM/IgG).

При получении положительного результата на антитела выполняется подтверждающий тест — определение суммарных антител к структурным и неструктурным белкам вируса. К структурным оболочечным белкам вируса Е1 и Е2 вырабатываются aнти HCV IgM, нуклеокапсидному белку С — cor (aнти HCV IgG), к 7-и неструктурным белкам-ферментам NS (aнти HCV NS IgG).

Для выявления антител к вирусу гепатита С используется иммуноферментный анализ (ИФА). Для подтверждения (+) результатов ИФА применяют подтверждающие тесты — RIBA (рекомбинатный иммуноблотинг), реже Inno-Lia (анализ синтетических пептидов).

• Антитела IgM появляются в сыворотке крови через 4 — 6 недель после инфицирования и быстро достигают максимума. По окончании острого процесса (через 5 — 6 мес.) их концентрация падает.
• Длительная регистрация наличия анти HCV IgM говорит о том, что гепатит С приобрел хроническое течение.
• Повышение уровня IgM в период хронического течения говорит о реактивации инфекционного процесса.
• Уровень иммуноглобулинов IgM позволяет проводить оценку эффективности лечения.

Антитела IgG появляются в сыворотке крови больного через 11 — 12 недель после инфицирования. На 5 — 6 месяце регистрируется пик концентрации. Далее антитела сохраняются на постоянном уровне в течение всего срока заболевания в острый период и период выздоровления.

Суммарные антитела к вирусу (аnti HCV total) используются для диагностики «свежих» случаев заболевания. Суммарные антитела — это антитела нуклеокапсидному белку С — cor (aнти HCV IgG) и 7-и неструктурным белкам-ферментам NS (aнти HCV NS IgG) — aнти HCV NS3, aнти HCV NS4 и aнти HCV NS5.

Суммарные антитела к вирусу гепатита С появляются в сыворотке крови инфицируемого спустя 11 — 12 недель от начала инфицирования, достигают пика к 5 — 6 месяцу и сохраняются на постоянном уровне в течение всего срока заболевания в острый период и в течение 5 — 9 лет после периода выздоровления.

Каждый из видов антител имеет самостоятельное диагностическое значение:

• Анти HCV C (cor) являются основными показателями контакта с вирусами гепатита С.
• Анти HCV NS3 выявляются одними из первых в процессе сероконверсии (выработки антител в ответ на присутствие вируса), указывают на остроту инфекционного процесса и свидетельствуют о высокой вирусной нагрузке. С их помощью определяется гепатит С у больных, не подозревающих у себя наличие инфекции. Продолжительное нахождение анти HCV NS3 в сыворотке крови говорит о высоком риске хронизации процесса.
• Анти HCV NS4 говорят о том, что гепатит С имеет длительное течение. По уровню титров антител можно судить о степени поражения печени.
• Анти HCV NS5 указывают на наличие вирусной РНК. Их обнаружение в острый период является предвестником хронизации процесса. Высокие титры антител на фоне лечения говорят о том, что больной не отвечает на лечение.
• Анти HCV NS4 и анти HCV Данный вид антител появляются на поздних сроках развития гепатита. Их снижение указывает на формирование ремиссии инфекционного процесса. После излечения титры антител NS4 и NS5 снижаются в течение 8 — 10 лет. От повторного заражения этот вид антител не защищает.

Рис. 2. Макропрепарат. Цирроз печени — грозное осложнение вирусного гепатита С.

Отсутствие антител к вирусу гепатита С обозначается термином «Норма». Однако это не всегда это обозначает отсутствие заболевания у человека. Так отсутствие антител в крови у инфицированного человека регистрируется до момента их появления в крови — в срок до 6-и месяцев с момента заражения (в среднем через 12 недель). Период отсутствия антител в крови инфицируемого называется «серологическим окном». Высокой специфичностью (до 99,7%) обладают тест-системы 3-го поколения (ELISA-3). Около 0,3% приходится на получение ложноположительных результатов.

Наличие анти HCV свидетельствуют о текущей инфицированности или перенесенной в прошлом инфекции.

• Обнаружение антител IgM и антител Corе IgG , нарастание титров антител Corе IgG и (+) результат ПЦР при наличии клинических и лабораторных признаков острого гепатита говорит об остром периоде заболевания.
• Обнаружение антител IgM, анти HCV Corе IgG, анти HCV NS IgG и (+) результат ПЦР при наличии клинических и лабораторных признаков заболевания указывает на реактивацию хронического гепатита С.
• Обнаружение анти HCV Corе IgG и анти HCV NS IgG при отсутствии клинических и лабораторных признаков заболевания и отрицательном результате ПЦР говорит о наличии у больного хронического гепатита в латентной фазе.

Рис. 3. Макропрепарат печени. Первичный рак печени — грозное осложнение гепатита С.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) является «золотым стандартом» диагностики вирусного гепатита С. Высокая чувствительность теста позволяет выявлять генетический материал вирусов (РНК) даже если их в исследуемом материале единицы. ПЦР способна выявлять РНК вирусов задолго до появления антител в сыворотке крови, но не ранее чем с 5-го дня от момента инфицирования. При заболевании с помощью ПЦР РНК вирусов обнаруживаются не только в сыворотке крови, но и в биоптатах печени.

• Полимеразная цепная реакция позволяет определить наличие или отсутствие в крови вирусов гепатита С и решить вопрос о начале лечения. Известно, что до 30% больных самостоятельно избавляются от инфекции, так как имеют сильную иммунную систему и в лечении не нуждаются.
• С помощью ПЦР определяется генотип вируса. Разные генотипы по-разному реагируют на лечение.
• ПЦР применяется с целью контроля за эффективностью лечения.
• ПЦР применяется при отсутствии антител в крови, но при наличии весомых подозрений на заболевание (повышение уровня щелочной фосфатазы, общего билирубина, превышение в 2 раза печеночных ферментов АСТ и АЛТ).
• Анализ ПЦР на гепатит С используется с целью контроля над внутриутробной передачей вирусов гепатита.

к содержанию ↑

С помощью анализа ПЦР возможно определить не только наличие РНК вирусов в крови — качественный анализ (обнаружено/не обнаружено), но и их количество — вирусную нагрузку (количество единиц вирусной РНК в 1 мл крови). Количественный показатель ПЦР применяется с целью контроля эффективности лечения.

Методы, применяющиеся для проведения ПЦР, обладают разной чувствительностью. В РФ согласно методическим рекомендациям 2014 года рекомендовано применять методики, обладающие чувствительностью 25 МЕ/мл и менее. Согласно рекомендациям Европейской ассоциации по изучению печени 2015 года предлагается применять методики определения вирусной РНК, обладающих чувствительностью 15 МЕ/мл и менее.

В зависимости от чувствительности тест-системы больной получает тот или иной результат исследования:

• Минимальная чувствительность анализатора COBAS AMPLICOR составляет 600 МЕ/мл (анализатор старого поколения).
• Минимальная чувствительность анализатора COBAS AMPLICOR ВГС-TEST составляет 50 МЕ/мл, что составляет 100 копий в 1 мл.
• Минимальная чувствительность анализатора РеалБест РНК ВГС составляет 15 МЕ/мл, что составляет 38 копий в 1 мл (входит в группу современных тест-систем). Специфичность данных анализаторов составляет 100%. С их помощью выявляются РНК вирусов гепатита С субтипов 1а и 1b, 2а, 2b, 2c и 2i, 3, 4, 5а и 6.

При наличии копий РНК ниже порога чувствительности данного анализатора пациент получает ответ «не обнаружено».

Рис. 4. Пример анализа ПЦР (количественный тест). Определение вирусной нагрузки.

• Отсутствие РНК вируса указывает на отсутствие инфицирования.
• Отсутствие РНК в анализе на фоне наличия антител в крови указывает на исчезновение болезни под влиянием лечения или при самоизлечении.
• В ряде случаев вирус присутствует в крови, но в подпороговых уровнях, когда его концентрация не улавливается анализаторами. Такие больные остаются опасными в плане заражения.
• Выявление РНК вируса в течение 6 месяцев подряд у больных с острым гепатитом С говорит о том, что заболевание приняло хроническое течение.
• Снижение вирусной РНК в анализах на фоне лечения говорит об эффективности проводимой терапии и наоборот.

Рис. 5. Макропрепарат. Жировой гепатоз — одно из последствий заболевания.

Биохимические анализы крови помогают установить функциональное состояние многих органов и систем человека.

Печеночные ферменты синтезируются внутриклеточно. Они принимают участие в синтезе аминокислот. Их большое количество находится в клетках печени, сердца, почек и скелетной мускулатуры. При поражении органов (нарушение целостности клеточных мембран) ферменты поступают в кровь, где их уровень повышается. Повышенный уровень ферментов регистрируется при поражении (лизисе, разрушении) печеночных клеток, инфаркте миокарда и других заболеваниях. Чем выше уровень трансаминаз в сыворотке крови, тем больше клеток подверглось разрушению. АЛТ преобладают в клетках печени, АСТ — в клетках миокарда. При разрушении клеток печени уровень АЛТ повышается в 1,5 — 2 раза. При разрушении клеток миокарда уровень АСТ повышается в 8 — 10 раз.

При диагностике хронического вирусного гепатита необходимо обращать внимание на соотношение АСТ/АЛТ (коэффициент де Ритиса). Превышение уровня АСТ над АЛТ говорит о поражении печеночных клеток.

• Норма АСТ для мужчин составляет до 41 ед./л, женщин — до 35 ед./л, детей старше 12 лет — до 45 ед./л.
• Норма АЛТ для мужчин составляет до 45 ед./л, женщин — до 34 ед./л, дети 12 лет и старше — до 39 ед./л.
• В норме (у здоровых людей) коэффициент АСТ/АЛТ имеет значение от 0,91 — 1,75.

Билирубин является продуктом распада гемоглобина. Билирубин в крови содержится в виде непрямого (до 96%) и прямого (4%). Процесс распада этого вещества происходит, в основном, в клетках печени, откуда с желчью выводится из организма. При разрушении клеток печени уровень билирубина в сыворотке крови возрастает. В норме содержание общего билирубина составляет менее 3,4 — 21,0 мкмоль/л. При уровне 30 — 35 мкмоль/л и выше билирубин проникает в ткани, из-за чего кожа и склеры приобретают желтушную окраску.

Рис. 6. Желтуха — один из признаков поражения печени.

источник

Гепатит C – это повреждение тканей печени вследствие возникновения воспалительного процесса, вызываемого РНК-содержащим вирусом. Этот тип вируса впервые был идентифицирован в 1988 году.

Заболевание может протекать в острой или хронической форме, но чаще характеризуется длительным латентным, т. е. бессимптомным течением. Склонность к хронизации заболевания объясняется способностью возбудителя к мутации. Благодаря образованию мутантных штаммов вирус HCV ускользает от иммунного надзора и длительное время находится в организме, не вызывая ярко выраженных симптомов заболевания.

Антигены HCV имеют низкую способность вызывать иммунные реакции, поэтому ранние антитела к ним появляются только через 4–8 недель от начала заболевания, иногда еще позже, титры антител невысокие – это осложняет раннюю диагностику заболевания.

Длительный воспалительный процесс, вызванный HCV, вызывает разрушение ткани печени. Процесс протекает скрыто благодаря компенсаторным возможностям печени. Постепенно они истощаются, и появляются признаки печеночной дисфункции, обычно это свидетельствует о глубоком ее поражении. Задача анализа на гепатит C – выявить заболевание на скрытой стадии и как можно ранее начать лечение.

Анализы на гепатит C проводятся по следующим поводам:

• обследование лиц, имевших контакт с инфицированными;
• диагностика гепатитов смешанной этиологии;
• контроль эффективности проводимого лечения;
• цирроз печени;
• профилактический медицинский осмотр работников здравоохранения, сотрудников детских дошкольных учреждений и т. д.

Пациент может быть направлен на анализ при наличии признаков поражения печени:

• увеличение печени, боли в правом подреберье;
• желтушность кожных покровов и белков глаз, зуд;
• увеличение селезенки, сосудистые «паучки».

Для диагностики гепатита C используется как прямое выделение вируса в крови, так и выявление косвенных признаков его присутствия в организме – так называемых маркеров. Кроме того, исследуются функции печени и селезенки.

Маркеры гепатита C – суммарные антитела к вирусу HCV (Ig M + IgG). Первыми (на четвертой-шестой неделе инфицирования) начинают образовываться антитела класса IgM. Через 1,5-2 месяца начинается выработка антител класса IgG, их концентрация достигает максимума с 3 по 6 месяц заболевания. Этот вид антител может обнаруживаться в сыворотке крови годами. Следовательно, обнаружение суммарных антител позволяет провести диагностику гепатита C, начиная с 3-й недели после инфицирования.

Передача вируса гепатита C происходит при тесном контакте с вирусоносителем или поступлении в организм инфицированной крови.

Антитела к HCV определяются методом иммуноферментного анализа (ИФА) – ультрачувствительного теста, который часто используется в качестве экспресс-диагностики.

Для определения РНК вируса в сыворотке крови используется метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). Это основной анализ для установления диагноза гепатита C. ПЦР – качественный тест, при котором определяется только наличие вируса в крови, но не его количество.

Определение уровня антител HCVcor IgG NS3-NS5 необходимо, чтобы исключить или подтвердить диагноз при наличии отрицательного результата ПЦР.

Для диагностики функций печени назначаются печеночные пробы – определение АЛТ (аланинаминотранферазы), АСТ (аспартатаминотрансферазы), билирубина, щелочной фосфатазы, ГГТ (гамма-глутамилтрансферазы), тимоловая проба. Их показатели сравниваются с таблицами норм, значение имеет комплексная оценка результатов.

Обязательным этапом диагностики является анализ крови с определением лейкоцитарной формулы и тромбоцитов. При гепатите C в общем анализе крови выявляют нормальное или пониженное количество лейкоцитов, лимфоцитоз, уменьшение СОЭ, при биохимическом исследовании крови – гипербилирубинемию за счет прямой фракции, повышение активности АЛТ, нарушения обмена белков. В начальном периоде гепатита также возрастает активность некоторых веществ, которые в норме содержатся в гепатоцитах и ​​поступают в кровь в очень малых количествах – сорбитдегидрогеназы, орнитинкарбамоилтрансферазы, фруктозо-1-фосфатальдолазы.

Общий анализ мочи с микроскопией осадка позволит выявить в моче уробилин, а на поздних стадиях заболевания – билирубин.

Проводится аппаратное исследование органов брюшной полости, в том числе печени – УЗИ, компьютерная или магнитоядерная томография.

Вирус гепатита C не передается через рукопожатие, поцелуи и большинство предметов быта, например, общую посуду.

Важный метод диагностики гепатита C – морфологическое исследование биоптата печени. Оно не только дополняет данные биохимических, иммунологических и аппаратных исследований, но и нередко указывает на характер и стадию патологического процесса, чего другие методы не обнаруживают. Морфологическое исследование необходимо для определения показаний к интерферонотерапии и оценки ее эффективности. Биопсия печени показана всем больным гепатитом C и носителям HBsAg.

Для анализа на гепатит C нужно сдать кровь из вены. Как правильно подготовиться к забору крови? Можно ли есть и пить перед анализом?

Анализ сдается строго натощак. Между последним приемом пищи и взятием крови должно пройти не менее 8 часов. Перед сдачей анализа нужно исключить физические нагрузки, курение, употребление алкоголя, жирной и жареной пищи, газированных напитков. Можно пить чистую воду. Большинство лабораторий принимает кровь на анализ только в первой половине дня, поэтому кровь сдают с утра.

Анализы на определение антител к вирусу гепатита качественные, то есть говорят о наличии или отсутствии антител, но не определяют их количество.

В случае обнаружения в сыворотке анти-HCV антител назначается повторный анализ для исключения ложноположительного результата. Положительный ответ при повторном анализе говорит о наличии гепатита C, но не дифференцирует острую и хроническую форму.

При отсутствии антител к вирусу выдается ответ «отрицательно». Однако отсутствие антител не может исключить инфицирование. Ответ также будет отрицательным, если со времени заражения прошло меньше четырех недель.

Для диагностики гепатита C используется как прямое выделение вируса в крови, так и выявление косвенных признаков его присутствия в организме – так называемых маркеров.

Может ли результат анализа быть ошибочным? Неправильная подготовка к анализу может приводить к ложным результатам. Ложноположительный результат может быть получен в таких случаях:

• загрязнение представленного биоматериала;
• наличие гепарина в крови;
• присутствие белковых, химических субстанций в образце.

От человека к человеку гепатит C передается, как правило, парентеральным путем. Основной путь передачи – через зараженную кровь, а также через другие биологические жидкости (слюну, мочу, сперму). Кровь носителей инфекции представляет опасность до проявления у них симптомов болезни и сохраняет способность к заражению на протяжении длительного времени.

В мире насчитывается более 180 млн человек, инфицированных HCV. Вакцины от гепатита C в настоящее время не существует, но ведутся научные исследования по ее разработке. Чаще вирус возбудителя выявляют у молодых людей в возрасте 20–29 лет. Эпидемия вирусного гепатита C растет, ежегодно заражается около 3–4 млн. человек. Количество летальных исходов от осложнений заболевания насчитывает более 390 тысяч в год.

Среди некоторых групп населения уровень инфицирования значительно выше. Так, в группе риска находятся:

• часто госпитализируемые больные;
• пациенты, требующие постоянного гемодиализа;
• реципиенты крови;
• пациенты онкодиспансеров;
• лица, подвергавшиеся трансплантации органов;
• профессиональные группы медицинских работников, непосредственно контактирующие с кровью пациентов;
• дети, рожденные от инфицированных матерей (при высоких концентрациях вируса у матери);
• носители ВИЧ;
• половые партнеры лиц, больных гепатитом C;
• люди, находящиеся в заключении;
• лица, употребляющие инъекционные наркотики, пациенты наркодиспансеров.

Важный метод диагностики гепатита C – морфологическое исследование биоптата печени. Оно не только дополняет данные биохимических, иммунологических и аппаратных исследований, но и нередко указывает на характер и стадию патологического процесса.

Передача вируса происходит при тесном контакте с вирусоносителем или поступлении в организм инфицированной крови. Половой и вертикальный путь заражения (от матери ребенку) фиксируется в редких случаях. У 40–50% больных обнаружить точный источник инфицирования не удается. Вирус гепатита C не передается через рукопожатие, поцелуи и большинство предметов быта, например, общую посуду. Но если в семье есть инфицированный человек, нужно соблюдать осторожность: маникюрные принадлежности, бритвенный станок, зубная щетка, мочалки не могут быть общими, так как на них могут оставаться следы крови.

В момент заражения вирус попадает в кровь и оседает в тех органах и тканях, где происходит его размножение. Это печеночные клетки и мононуклеары крови. В этих клетках возбудитель не только размножается, но и остается на длительное время.

Затем HCV приводит к повреждению клеток печени (гепатоцитов). Возбудитель проникает в паренхиму печени, изменяя ее структуру и нарушая жизнедеятельность. Процесс разрушения гепатоцитов сопровождается разрастанием соединительной ткани и замещением ею клеток печени (цирроз). Иммунной системой вырабатываются анитела к клеткам печени, усиливая их повреждение. Постепенно печень теряет способность выполнять свои функции, развиваются тяжелые осложнения (цирроз, печеночная недостаточность, гепатоцеллюлярная карцинома).

Антигены HCV имеют низкую способность вызывать иммунные реакции, поэтому ранние антитела к ним появляются только через 4–8 недель от начала заболевания, иногда еще позже, титры антител невысокие – это осложняет раннюю диагностику заболевания.

Интенсивность симптомов болезни во многом зависит от концентрации вируса в крови, состояния иммунной системы. Инкубационный период составляет в среднем 3–7 недель. Иногда этот период затягивается до 20–26 недель. Острая форма заболевания диагностируется редко и чаще случайно. В 70% случаев острой инфекции заболевание проходит без клинических проявлений.

Анализ сдается строго натощак. Между последним приемом пищи и взятием крови должно пройти не менее 8 часов. Перед сдачей анализа нужно исключить физические нагрузки, курение, употребление алкоголя, жирной и жареной пищи, газированных напитков.

Симптомы, которые могут указывать на острый гепатит C:

• общее недомогание, слабость, снижение работоспособности, апатия;
• головная боль, головокружение;
• пониженный аппетит, снижение толерантности к пищевым нагрузкам;
• тошнота, диспепсия;
• тяжесть и дискомфорт в правом подреберье;
• лихорадка, озноб;
• кожный зуд;
• потемнение, пенистость мочи (моча, похожая на пиво);
• поражения суставов и сердечной мышцы;
• увеличение печени и селезенки.

Желтушное окрашивание кожных покровов может отсутствовать или появляться на короткое время. Примерно в 80% случаях болезнь протекает в безжелтушной форме. С появлением желтухи снижается ферментная активность печеночных трансаминаз.

Обычно симптоматика имеет стертый характер, и больные не придают клиническим проявлениям большого значения, поэтому более чем в 50% случаев острый гепатит переходит в хронический. В редких случаях острая инфекция может протекать тяжело. Особую клиническую форму болезни – фульминантный гепатит – сопровождают тяжелые аутоиммунные реакции.

Лечение осуществляет врач-гепатолог или инфекционист. Назначаются противовирусные препараты, иммуностимуляторы. Длительность курса, дозировка и схема приема зависят от формы течения и степени тяжести заболевания, но в среднем продолжительность курса противовирусной терапии составляет 12 месяцев.

Видео с YouTube по теме статьи:

источник