Анализ на гепатит антитела не обнаружены

Когда в организме человека появляется инфекция, то иммунная система начинает бороться с ней при помощи продуцирования определенных антител. В случае инфицирования гепатитом, при сдаче анализов обнаруживаются антитела к вирусу гепатита С, однако это не является непреложной истиной.

Выявить защитные антитела организма, подтверждающие факт инфицирования человека ВГС, можно при помощи нескольких скрининг-тестов.

Первый анализ, который сдается при подозрении на гепатит С – это ИФА (иммуноферментный анализ), он помогает понять, есть ли в крови отдельные частицы антител гепатита С – IgM и IgG, а также, если сдается анализ на суммарные антитела гепатита С, то определяется их общее количество – antiHVC total. Когда антитела к гепатиту С обнаружены, нужно расшифровать, какие именно это иммуноглобулины, а также исключить возможность получения ложноположительного анализа.

Антитела по отношению к белкам вируса разделяют на структурные (core) и неструктурные (NS).

Когда обнаружены определенные антитела к гепатиту C – это означает:

• AntiHVC core IgG – говорят о хроническом процессе, когда пациент долго не лечился, то они обнаруживаются всю жизнь;
• AntiHVC core IgM – обнаружение этих антител к гепатиту C является ярким маркером острого течения заболевания, при переходе в хроническую форму (в среднем через 6 недель после инфицирования) могут полностью исчезнуть;
• AntiHVC NS – диагностическими маркерами являются антитела к неструктурным белкам: NS3, NS4 и NS5;
• NS3 – острый гепатит C;
• NS4 и NS5 – хроническое течение гепатита C;
• NS5 – могут присутствовать данные антитела после гепатита C, в стадии ремиссии и длительное время после наступления выздоровления.

Нужно принять во внимание: когда анализ на антитела к гепатиту C положительный, не нужно паниковать, это исследование не дает право постановки точного диагноза, всегда назначаются дополнительные анализы, например ПЦР.

Так называемый ложноположительный результат анализа на антитела к гепатиту C может быть по следующим причинам:

1. Аутоиммунные патологии – в этом случае реакция иммунитета на раздражители может трактоваться неверно;
2. Беременность – иммунная система находится в угнетенном состоянии и реактивность процессов нарушается, поэтому в 10-15% случаев можно получить определенные результаты анализов на суммарные антитела к гепатиту C, которые расшифровываются неверно;
3. Тяжелые осложнения после полученной прививки от гепатита А или В, гриппа, столбняка, когда организм вырабатывает антигены, в том числе в крови есть антитела к гепатиту C;
4. Пациент вылечился, но антитела после гепатита C у него остались;
5. При проведении терапии препаратами с альфа-интерфероном или иммунодепрессантами;
6. Когда сильно повышены показатели АСТ и АЛТ;
7. Нарушение режима подготовки к сдаче анализа на антитела к вирусу гепатита С – злоупотребление алкоголем или жирной едой за сутки до проведения исследования.

Методом полимеразной цепной реакции определяется присутствие РНК вирусных частиц в крови пациента. Так как данное исследование более дорогостоящее, то назначают его только после получения положительного результата анализов на антитела к гепатиту C (ИФА).

ПЦР может быть качественным и количественным.

При обнаружении только антител к гепатиту C нельзя судить о размножении вируса и фазе виремии – то есть во время проникновения вируса в кровь.

Качественный ПЦР дает подробное представление о репликации вируса и показывает результативность терапии, помогая составить дальнейший прогноз течения заболевания.

Количественная методика позволяет определить скорость развития заболевания, оценить вирусную нагрузку и понять, эффективно ли назначенное лечение.

При выявлении положительных результатов на антитела к гепатиту C и на присутствие РНК вируса в сыворотке крови, а также при наличии соответствующих симптомов ставится диагноз – гепатит C.

Важно отметить, что около 10% пациентов могут выздороветь самостоятельно без лечения, но только при остром гепатите C. Когда процесс становится хроническим, он требует лечения.

Для назначения грамотной терапии необходимо, кроме определения антител к гепатиту C, провести дополнительные исследования, это:

• Генотипирование – в соответствии с выявленным типом вируса подбирается сочетание прямых противовирусных комбинаций;
• Биопсия (старая методика) или эластометрия – определение степени и глубины повреждения печени;
• УЗИ – оценка скорости кровообращения и зон, где оно отсутствует;
• Биохимический анализ крови – оценка АЛТ и АСТ, результаты показывают наличие некротических, дистрофических, воспалительных процессов в клетках печени, пораженных вирусом гепатита С.

Важно понимать, что после получения положительных результатов иммуноферментного анализа на наличие HCV антител не нужно делать поспешных выводов, а необходимо пройти более детальное обследование, и только после этого начинать терапию, строго следуя всем рекомендациям лечащего врача.

По итогам всех исследований назначается лечение. Современный метод терапии позволил полностью отказаться от интерферона, так как самыми эффективными препаратами от гепатита С на данный момент считаются прямые противовирусные лекарственные формулы: Софосбувир, Даклатасвир, Ледиспавир, Велпатасвир. Они не назначаются как монопрепарат, а только в комбинации. Подбор медикаментов осуществляется в индивидуальном порядке в зависимости от генотипа и общей клинической картины.

источник

В настоящее время заражение HCV-инфекцией приобретает масштабы эпидемии. Если раньше заболевание считали проблемой определенных социально неблагополучных категорий населения (наркоманов, женщин и мужчин, предоставляющих/пользующихся сексуальными услугами), сейчас заразиться можно во время эстетических манипуляций, в кабинете у стоматолога и т.д. Поэтому ранняя диагностика вируса, включая анализ на антитела к гепатиту С, приобретает все большее клиническое значение.

Патология опасна скрытым течением. При одном из самых распространенных генотипов HCV – 1b заболевание быстро переходит в хроническую форму, не проявляя при этом специфических симптомов. Лишь у небольшой части пациентов возникает астенический синдром, непереносимость физических нагрузок, возможно периодическое повышение температуры до субфебрильных цифр. Часто подобные признаки списывают на переутомление или ОРВИ.

Доктора нередко сталкиваются со случаями, когда положительные результаты анализов на вирус обнаруживаются в ходе профилактического скрининга (например, на этапе подготовки к беременности или постановке на учет в женской консультации, оформлении медицинских документов и т.д.).

Современные технологии позволяют выявить гепатит Ц на ранних стадиях, через несколько недель после заражения. Это улучшает прогноз развития заболевания, предупреждает поражение тканей печени и внутренних органов.

Специалисты рекомендуют регулярно проверяться на HCV. Сдать необходимые исследования можно либо по направлению от терапевта, либо в любой частной лаборатории. Одним из предлагаемых исследований является ИФА – иммуноферментный анализ, задача которого выявить специфические антитела (АТ) к вирусу гепатита С. Данный тест отличается высокой чувствительностью и служит основой для дальнейших диагностических мероприятий.

Чтобы разобраться в вопросе, что это значит, антитела к вирусу гепатита С, следует кратко остановиться на механизме формирования иммунного ответа. Это соединения белковой структуры, которые при проникновении патогена в организм вырабатываются на поверхности определенного вида лимфоцитов и попадают в системный кровоток. Основная функция антител состоит в связывании с вирусом, препятствуя проникновению в клетку и последующей репликации.

У человека обнаружены пять групп антител (их также именуют иммуноглобулинами – Ig):

• тип А – вырабатываются вскоре после инфицирования и постепенно исчезают по мере устранения патогенной флоры (в результате иммунной активности или соответствующей терапии);
• тип М – выделяются в острой фазе течения инфекции, обнаруживаются и при активизации хронического патологического процесса;
• тип G – составляют более 70% от общей массы иммуноглобулинов человека, «отвечают» за формирование вторичного иммунного ответа;
• тип D – выявлен сравнительно недавно, функции практически не изучены;
• тип Е – выделяется при развитии аллергической реакции в ответ на попадание специфического раздражителя (аллергена).

Для диагностики гепатита C решающую роль играет наличие антител класса М и G. Положительный анализ методом ИФА не означает 100% диагноза гепатита C. Определение суммарных антител (М + G) – начальный этап диагностического процесса. В дальнейшем для подтверждения инфицирования проверяют наличие и фактический уровень РНК HCV методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

По результатам анализа ИФА доктор может определить, является ли человек носителем вируса, либо заболевание прогрессирует и требует немедленной терапии. Случаи самоизлечения и отсутствие поражений печени является результатом полноценной работы иммунной системы и активной выработки АТ, которые останавливают развитие вирусной инфекции. Именно в таком случае антитела к гепатиту С есть, а ПЦР отрицательный.

Подобную картину отмечают, если АТ обнаружены у ребенка. Обычно это происходит, если беременная женщина была инфицирована вирусом, либо получала соответствующую терапию до зачатия. При соблюдении необходимых мер профилактики и защиты от заражения, АТ исчезнут в 12–18 месяцев.

В клинической практике из всех разновидностей иммуноглобулинов у человека, значение имеют только два вида – IgM и IgG. Первые активно вырабатываются вскоре после проникновения патогена в клетки организма, вторые свидетельствуют о длительном, хроническом течении заболевания.

Однако современные методы диагностики позволили расширить спектр определяемых ИФА антител:

Из перечисленных исследований на практике реально применяют только три: Anti-HCV IgG, Core Ag (антиген) и суммарный Anti-HCV. Последний анализ на антитела к структурным белкам финансово затратен, поэтому назначается только в критических случаях (например, необъяснимая резистентность к терапии, рецидив и т.д.).

Процесс выработки антител в значимых концентрациях в среднем занимает несколько недель. Однако в зависимости от того, какой обнаруживается маркер, возможно определение стадии и степени тяжести HCV-инфекции.

Предполагаемые сроки выявления АТ представлена в таблице:

Тест, предполагающий выявление антител гепатита С, лучше проводить по назначению врача. В отличие от качественного ПЦР, в результатах которого указан однозначный вывод – обнаружен в организме HCV или нет, профессионально расшифровать данные серологического исследования может только специалист.

В зависимости от того, когда появляются те или иные антитела, доктор подбирает оптимальную схему терапии. Резистентные и хронические формы патологии часто требуют не только применения комбинации современных противовирусных препаратов, но и дополнительного назначения Рибавирина и/или Интерферонов пролонгированного действия (ПЕГ-ИФН).

В настоящее время существуют два основных метода выявления HCV-инфекции:

• серологические анализы (ИФА) – выявление специфических антител к HCV (anti-hcv);
• молекулярно-биологические исследования, обнаруживающие РНК вируса (качественная и количественная ПЦР, генотипирование).

Двойная диагностика исключает риск ложноположительной, как и ложноотрицательной реакции. При выявлении anti-hcv с помощью ИФА доктор рекомендует исследование ПЦР (сначала качественное, затем количественное).

Но иногда результаты обследования являются противоречивыми, и ответ на вопрос, что значит, антитела к гепатиту С обнаружены, а ПЦР отрицательная, зависит от ряда факторов.

Методика расшифровки результатов ПЦР и ИФА приведена в таблице.

Первичная лабораторная диагностика HCV начинается с определения основного маркера инфицирования – антител к антигенам вируса гепатита С. Они начинают появляться практически сразу после заражения, но в терапевтически значимых концентрациях обнаруживаются спустя несколько недель. Наличие АТ свидетельствует о перенесенном или текущем вирусе (при положительном результате ПЦР).

ИФА проводится при помощи высокочувствительных современных, но в то же время финансово доступных тест-систем 2 и 3 поколения. Подобные наборы реагентов основаны на захвате специфических к HCV антител рекомбинантными белками, а затем определении вторичных АТ против IgG или IgM. Эти антитела помечены ферментами, катализирующими проведение реакции.

ИФА тест-системы II поколения помимо обнаружения основных АТ способны обнаружить антитела против эпитопов, полученных из участка core и неструктурных белков (NS3, NS4). Таким образом достигается высокая чувствительность исследования и низкая вероятность ложных результатов. При помощи таких тестов HCV можно обнаружить через 2,5 месяца после заражения.

ИФА – системы III поколения разработаны на основе антигена структурного протеина NS5 и высокоиммуногенного эпитопа NS3. Подобная методика позволяет существенно сократить время от попадания вируса в организм до выработки антител.

Обнаружение IgM недостаточно для выявления острого или хронического течения HCV, так как у некоторых пациентов при длительном течении заболевания регулярно вырабатываются IgM, но в то же время не все больные «отвечают» на острую форму заболевания выделением IgM.

Вероятность ложноположительных результатов (впоследствии отмечают исчезновение АТ) возрастает при:

• беременности;
• аутоиммунных патологиях;
• положительных ревмопробах и др.

Возможность ложноотрицательных результатов присутствует при:

• регулярном проведении гемодиализа;
• ВИЧ;
• злокачественных поражениях системы кроветворения.

Считается, что при HCV-инфекции одного ИФА недостаточно, так как АТ появляются не сразу. Кроме того, всегда присутствует вероятность ложных результатов. Поэтому обязательным в диагностике гепатита С является дополнительное проведение качественной и количественной ПЦР.

Некоторые гепатологи считают, что такого термина, как «носитель HCV» не существует, человек или болен гепатитом С, или нет. Иногда подобный диагноз ставят при выявлении в крови антител к HCV, но отрицательном результате ПЦР.

Подобная ситуация возможна в нескольких случаях:

• пренатальный контакт с вирусом, АТ в крови ребенка сохраняются до 1,5–3 лет, затем отмечают, что они просто пропали;
• перенесенная острая форма HCV, которая либо проходит без симптомов, либо протекает с вариабельной клинической картиной.

В любом случае эта проблема требует постоянного наблюдения врача. Обязательна ПЦР, ее повторяют регулярно (раз в несколько месяцев) и проведение других диагностических мероприятий. Также необходимо исключить состояния, повышающие риск ложноположительного результата ИФА.

При проведении контрольных анализов после окончания противовирусной терапии многих пациентов интересует вопрос, когда исчезают АТ и надолго остаются ли антитела после лечения гепатита С. Доктора предупреждают, что IgG могут циркулировать в крови несколько лет, однако их уровень должен постепенно снижаться.

При проведении исследование методом ИФА на выявление суммарных антител, также возможен положительный результат. Но в таком случае требуется дифференцировать IgG и IgM. Обнаружение последних говорит в пользу рецидива заболевания и требует срочного начала дополнительного курса медикаментозного лечения оставшейся в организме инфекции.

В норме после лечения гепатита С остаются IgG.

Анализ на суммарные антитела к вирусу гепатита С выявляет общее количество иммуноглобулинов без их дифференцировки – IgG + IgM. В бланках лабораторий такое исследование часто называют Anti-HCV Total. Отрицательный результат свидетельствует об отсутствии заболевания (за исключением отдельных случаев). Положительный результат требует дальнейшей диагностики.

Пациенту назначают:

• ПЦР (сначала качественную, затем количественную);
• дифференцированную серодиагностику (анализ для выявления титров IgG и IgM по отдельности);
• ультразвуковое исследование печени;
• печеночные пробы;
• анализ на сопутствующие заболевания (ВИЧ, аутоиммунные патологии, расстройства кроветворения и иммунной функции).

Окончательный диагноз врач ставит только после получения всех результатов. Также обращают внимание на анамнез. Прохождение противовирусной терапии обязательно только после достоверного подтверждения наличия вируса в крови.

Если суммарное определение АТ к HCV не укладывается в общепринятые нормы показано дальнейшее обследование. Начало лечения без дополнительных исследований противопоказано.

Как правило, в бланке анализа на антитела к вирусу гепатита С приведены результаты и норма параметров. При некоторых типах исследований пишут титр АТ.

Расшифровкой показателей ИФА должен заниматься только врач. Самолечение по результатам одного или нескольких исследований противопоказано.

Регулярно проводить серологическое исследование на выявление маркеров гепатита С необходимо определенной категории людей:

• работникам медицинских учреждений;
• с диагностированным ВИЧ;
• при подготовке и в период беременности;
• после полового акта с носителем вируса;
• больным с онкологическими патологиями крови;
• при неразборчивости в сексуальных контактах.

Также в категорию риска попадают люди, пристрастившиеся к инъекционным наркотическим препаратам, постоянно контактирующие с носителем вируса (например, муж/жена больны HCV). Но врачи-гепатологи обращают внимание пациентов на возможность ложных показателей исследования, что требует комплексной диагностики.

источник

Антитела к гепатиту С (АТ) – один из основных маркеров инфицирования. Лабораторное определение иммуноглобулинов (IgG и IgM) входит в протоколы обязательного обследования работников торговли, медицинских и детских образовательных учреждений, беременных женщин и т.д.

С учетом распространения HCV (по данным статистики, инфицировано порядка 200 млн. человек) очень важно наличие точных и доступных методов диагностики. Только так можно вовремя выявить не проявляющую себя болезнь и немедленно начать лечение, которое при использовании современных препаратов будет результативным практически у 100% пациентов.

Структуру возбудителя гепатита С (Ц) составляют различные протеины, которые проникая в организм провоцируют ответную реакцию иммунной системы. Эти патогенные белки, антигены, стимулируют иммунитет, и результатом подобного взаимодействия служит появление антител.

Пространственная структура АТ напоминает английскую букву «Y». Нижняя часть одинакова у всех без иммуноглобулинов, но верхняя строго специфична и может взаимодействовать только с определенным антигеном.

Исследование, позволяющее выявить наличие иммуноглобулинов к антигенам HCV в крови человека, называют ИФА (иммуноферментным анализом). Благодаря современным технологиям, проведение данного теста не представляет сложности и возможно в условиях практически любой лаборатории.

Более того, в аптеках появляется все больше экспресс-тестов, предназначенных для предварительной диагностики вирусного гепатита С (ВГС) в домашних условиях.

Но расшифровка результатов серологических исследований проводится с оглядкой на особенности функционирования иммунитета. При некоторых заболеваниях, на фоне приема ряда лекарственных препаратов АТ или не вырабатываются, или синтезируются в недостаточном для лабораторного выявления количестве.

И наоборот, избыток антител вследствие системной инфекции (например, туберкулеза) или появление нетипичных белковых соединений при беременности нередко приводит к ложноположительному результату.

Антитела к вирусу гепатита С (АТ) – продуцируемые в крови белковые соединения в ответ на контакт организма с антигенами возбудителя инфекции. Соответственно, если при исследовании обнаружены специфические Ig (G или M), это значит (за редким исключением), что человек инфицирован.

Иногда больной не подозревает о своем диагнозе. По статистике, у 50–65% пациентов гепатит С диагностируется случайно при прохождении медицинского осмотра, постановке на учет при беременности и т.д.

Количественная полимеразная цепная реакция позволяет определить активность патологического процесса (вирусную нагрузку). ИФА не дает такой информации.

В ходе диагностики болезни, определение наличия антител проводят несколькими способами (в зависимости от показаний).

В настоящее время известно о 5 классах антител, циркулирующих в крови человека либо вырабатываемых при инфицировании, аллергической реакции и других синдромах.

Их обозначают буквами латинского алфавита (указывается после аббревиатуры Ig):

• IgG – основной класс антител, присутствующих в организме, является маркером вторичного иммунного ответа на инфицирование;
• IgM – вырабатывается при контакте с ранее «неизвестным» антигеном;
• IgD – роль данного антитела в иммунной реакции организма окончательно не установлена;
• IgE – вырабатывается при контакте с аллергеном, в том числе с токсинами, выделяемыми паразитами;
• IgA – преимущественно встречается в слизистом эпителии ротовой полости, уретры, половых органов, респираторного и пищеварительного тракта.

Учитывая патогенез развития гепатита С, диагностическое значение имеет только два класса иммуноглобулинов М и G. Но при выявлении HCV-инфекции немалую роль играют и антитела к структурным белкам и ядерному протеину core.

Такое исследование назначается не всем пациентам, но данный анализ часто необходим для определения прогноза терапии (особенно при решении вопроса для назначения схемы лечения).

Знание сроков, когда появляются те или иные иммуноглобулины, позволяет максимально точно провести диагностику и свести к минимуму риск ложноотрицательных результатов.

Так, выявление антител гепатита С целесообразно проводить с учетом следующих данных:

Точные сроки появления антител (вне зависимости от класса и включая АТ к структурным и неструктурным протеинам вируса) назвать практически невозможно, все зависит от интенсивности иммунного ответа. Поэтому, если не обнаруживается маркер Anti-HCV Total, но риск инфицирования велик. Рекомендовано повторное проведение теста через 14–21 день.

И наоборот, если антитела гепатита С есть, а ПЦР отрицательный, необходимо определить причину подобного результата. Но в любом случае человек остается под медицинским наблюдением. Направления на сдачу крови выдаются раз в 2–4 месяца до получения однозначного результата.

В настоящее время специалисты с уверенностью говорят, ВГС вполне излечим, но при условии своевременной диагностики. Процесс обследования пациента проходит в несколько стадий. Таким образом врач получает максимально полную картину о состоянии пациента.

Показаниями к проведению анализа методом ИФА (Anti-HCV Total) служат:

• регулярное ежегодное обследование (по требованиям законодательства);
• комплексная диагностика женщин при беременности;
• сомнительные результаты печеночных проб;
• типичные для ВГС клинические проявления;
• предполагаемое заражение, например, при использовании общих медицинских инструментов или половом акте с инфицированным;
• постоянное проживание с больным;
• наличие ВИЧ и других иммунодефицитных состояний.

Позитивный результат анализа на АТ является показанием для проведения других диагностических тестов. Назначаются:

• тест на авидность антител (для определения ориентировочных сроков инфицирования);
• дифференцированный анализ ИФА (отдельное выявление Ig различных классов).

Но иногда данными исследованиями пренебрегают и сразу назначают ПЦР. Суть данного анализа состоит в определении РНК возбудителя инфекции.

Полимеразная цепная реакция – наиболее точный маркер ВГС и делится на несколько типов:

• качественная, необходима только с целью выявления РНК;
• количественная;
• генотипирование, проводится после подтверждения диагноза для установления разновидности вируса.

Другие анализы и инструментальные исследования назначают по усмотрению доктора.

Обнаружение антигенов к HCV не входит в протокол обязательных диагностических исследований. Анализы проводят при положительных тестах ИФА для прогнозирования дальнейшего развития инфекции. В некоторых случаях терапию не начинают, дожидаясь возможного самоизлечения (вероятно у трети больных без приема каких-либо препаратов).

Выявление Anti-NS5 как предиктора перехода в хроническую форму служит показанием для начала лечения. Превышение показателей anti-NS4 – возможный признак тяжелой печеночной энцефалопатии. Это также служит показанием к соответствующей терапии: назначению сильнодействующих схем лечения, соответствующих гепатопротекторов, обязательном соблюдении строгой диеты и т.д.

По мере изучения строения вируса и особенностей развития болезни употребление термина «носительство HCV» является достаточно спорным. Иногда так именуют бессимптомное течение гепатита С на фоне позитивного результата Anti-HCV и минимальной вирусной нагрузки.

Но в соответствии с последними рекомендациями ВОЗ, при наличии критериев ВГС либо маркеров хронизации патологического процесса необходимо начинать соответствующее лечение.

На этапе терапии критерием ее эффективности является только результаты количественной и качественной ПЦР. Дело в том, что антитела класса G (IgG) вырабатываются на фоне хронической формы HCV и долгое время остаются в крови и, соответственно, определяются методом ИФА и после лечения гепатита С. Как правило, они исчезают через 3–5 лет после окончания терапии, но иногда их выявляют и на протяжении всей жизни.

После проведенного терапевтического курса единственным критерием выздоровления служит отрицательный результат качественной ПЦР (она более чувствительна по сравнению с количественной методикой определения).

Суммарное определение иммуноглобулинов проводят на первой стадии диагностики. В норме результат отрицательный.

Но вероятность ошибочного позитивного результата возникает:

• при вынашивании ребенка (выделяются специфические протеины, которые ошибочно распознаются тест-системами как Анти HCV);
• при системных инфекциях, когда существенно повышается уровень иммуноглобулинов всех классов;
• при перенесенном ранее гепатите С в острой форме, после чего в крови надолго сохраняются IgG.

Если АТ к гепатиту С обнаружены у ребенка, это далеко не всегда является критерием инфицирования. Специфические Ig могут появляться сразу после рождения и сохраняться на протяжении 1– 3 лет (потом отмечают их исчезновение) при наличии IgG или IgM у матери во время беременности вследствие активной инфекции либо перенесенного заболевания.

Риск внутриутробной передачи вируса невелик. Современные технологии родоразрешения практически на 100% защищают младенца от заражения. Но ребенок с положительным ИФА (при условии отрицательной ПЦР) должен оставаться под наблюдением врача до получения отрицательных результатов анализов.

Исследование на суммарные антитела к вирусу гепатита С может быть ложноотрицательным при:

• аутоиммунных заболеваниях (в том числе аутоиммунном гепатите);
• ВИЧ/СПИД;
• различных иммунодефицитных состояниях на фоне нарушения системы кроветворения, приема некоторых лекарственных препаратов (иммунодепрессантов, цитостатиков, противоопухолевых средств, больших доз кортикостероидов и т.д.).

Поэтому перед назначением анализов врач тщательно собирает анамнез пациента, обязательным является исследование на ВИЧ. Эта информация поможет избежать ненужных обследований и способствует правильной расшифровке результатов диагностических тестов.

Практически во всех бланках лабораторных исследований на антитела к вирусу гепатита С приведены референсные результаты (норма для здорового человека). При определении конкретного вида иммуноглобулинов указываются их количественные значения (титр), что свидетельствует о тяжести течения вирусной инфекции.

Примерная расшифровка данных ИФА приведена в таблице.

Но только доктор сможет точно объяснить, что значит, когда антитела к гепатиту С обнаружены или пропали после предшествующего анализа методом ИФА.

Диагноз HCV ставится только на основании нескольких анализов, включая ПЦР с определением значимых уровней вирусной нагрузки. Самостоятельная интерпретация результатов, а тем более начало терапии может закончиться резистентностью вируса и тяжелыми необратимыми последствиями.

Уже после пройденного курса терапии пациента обычно интересуются, остаются ли антитела после лечения гепатита С. Когда исчезают специфические иммуноглобулины, зависит от активности иммунной системы, вирусной нагрузки, длительности течения заболевания.

Как правило, доктора говорят о нескольких годах после терапии, иногда повышенные титры IgG сохраняются на протяжении всей оставшейся жизни. Но положительный результат качественной и/или количественной ПЦР уже после пройденного лечения свидетельствует либо о повторном инфицировании, либо о возобновлении патологического процесса.

С появлением доступных схем терапии, гепатит С перестал быть приговором. Но эффективность и прогноз лечения напрямую связан с тем, на каком этапе обнаружена патология.

Поэтому при наличии повышенного риска заражения рекомендуют сдавать кровь методом ИФА 1–2 раза в год:

• работникам в сфере медицины, причем речь идет не об администраторах, а медсестрах, врачах, работниках донорских служб, которые постоянно контактируют с кровью и другими биологическими жидкостями;
• трудящимся в сфере услуг (особенно, выполняющих маникюр и педикюр) из-за высокого риска заражения при использовании острых инструментов;
• пациентам с иммунодефицитными состояниями (особенно ВИЧ), аутоиммунными заболеваниями, онкологических больных;
• людям с тяжелыми болезнями, вынужденным по состоянию здоровья проходить частые инвазивные медицинские процедуры (гемодиализ, диагностические манипуляции, переливание крови и ее элементов, трансплантацию органов);
• парам, предпочитающим гомосексуальные отношения (особенно при отсутствии постоянного полового партнера).

Риск заражения существенно повышен у людей, ведущих асоциальный образ жизни.

источник

Гепатит С (HCV) — это опасное вирусное заболевание, которое протекает с поражением тканей печени. По клиническим признакам поставить диагноз невозможно, поскольку они могут быть одинаковыми при разных видах вирусного и незаразного гепатита. Для обнаружения и идентификации вируса больному необходимо сдать кровь на анализ в лабораторию. Там проводятся высокоспецифичные тесты, среди которых — определение антител к гепатиту С в сыворотке крови.

Возбудитель гепатита С — это вирус, который содержит РНК. Человек может заразиться при попадании его в кровь. Существует несколько путей распространения возбудителя гепатита:

• при переливании крови от донора, который является источником инфекции,
• во время процедуры гемодиализа — очистки крови при почечной недостаточности,
• при инъекционном приеме препаратов, в том числе наркотиков,
• при беременности от матери к плоду.

Болезнь чаще всего протекает в хронической форме, лечение длительное. При попадании вируса в кровь человек становится источником инфекции и может передавать болезнь окружающим. Перед появлением первых симптомов должен пройти инкубационный период, в течение которого популяция вируса увеличивается. Далее он поражает ткани печени, и развивается выраженная клиническая картина болезни. Сначала пациент чувствует общее недомогание и слабость, затем появляются боли в правом подреберье. На УЗИ печень увеличена, биохимия крови укажет на повышение активности печеночных ферментов. Окончательный диагноз можно поставить только на основании специфических тестов, которые определяют разновидность вируса.

Когда вирус гепатита попадает в организм, иммунная система начинает с ним бороться. Вирусные частицы содержат антигены — белки, которые распознаются иммунной системой. У каждого типа вируса они отличаются, поэтому механизмы иммунного ответа также будут разными. По ним иммунитет человека идентифицирует возбудителя и выделяет ответные соединения — антитела, или иммуноглобулины.

Существует вероятность появления ложноположительного результата на антитела гепатита. Диагноз ставится на основании нескольких анализов одновременно:

• биохимии крови и УЗИ,
• ИФА (иммуноферментного анализа) — собственно способа определения антител,
• ПЦР (полимеразной цепной реакции) — обнаружение РНК вируса, а не собственных антител организма.

Гепатит С — это вирусное заболевание, при котором происходит постепенное разрушение печени

Если все результаты указывают на наличие вируса, нужно определить его концентрацию и начинать лечение. Могут также быть и отличия в расшифровке различных тестов. Например, если антитела к гепатиту С положительные, ПЦР отрицательный, вирус может находиться в крови в незначительном количестве. Такая ситуация возникает после выздоровления. Возбудитель удалось удалить из организма, но иммуноглобулины, которые вырабатывались в ответ на него, еще циркулируют в крови.

Основной способ проведения такой реакции — это ИФА, или иммуноферментный анализ. Для его проведения необходима венозная кровь, которую берут натощак. За несколько суток до процедуры пациент должен придерживаться диеты, исключить жареные, жирные и мучные продукты из рациона, а также алкоголь. Эту кровь очищают от форменных элементов, которые не нужны для реакции, а только затрудняют ее. Таким образом, тест проводит с сывороткой крови — жидкостью, очищенной от лишних клеток.

В лаборатории уже заранее заготовлены лунки, в которых находится вирусный антиген. В них и добавляют материал для исследования — сыворотку. Кровь здорового человека никак не отреагирует на попадание антигена. Если в ней присутствуют иммуноглобулины, произойдет реакция антиген-антитело. Далее жидкость исследуют при помощи специальных инструментов и определяют ее оптическую плотность. Пациенту придет уведомление, в котором будет указано, обнаружены антитела в исследуемой крови или нет.

В зависимости от стадии болезни можно обнаружить разные типы антител. Некоторые из них вырабатываются сразу после попадания возбудителя в организм и ответственны за острую стадию заболевания. Далее появляются другие иммуноглобулины, которые сохраняются в течение хронического периода и даже при ремиссии. Кроме того, некоторые из них остаются в крови и после полного выздоровления.

Иммуноглобулины класса G обнаруживаются в крови в течение наиболее длительного времени. Они вырабатываются спустя 11—12 недель после инфицирования и сохраняются, пока вирус присутствует в организме. Если в исследуемом материале выявлены такие белки, это может свидетельствовать о хроническом или вялотекущем гепатите С без выраженной симптоматики. Также они активны в период носительства вируса.

Anti-HCV core IgM — это отдельная фракция белков-иммуноглобулинов, которые особо активны в острую фазу заболевания. Их можно обнаружить в крови через 4—6 недель после того, как вирус попадает в кровь больного. Если их концентрация возрастает, это значит, что иммунная система активно борется с инфекцией. При хронизации течения их количество постепенно снижается. Также их уровень повышается во время рецидива, накануне очередного обострения гепатита.

Перед сдачей крови рекомендуется отказаться от нездоровой пищи и вредных привычек

Во врачебной практике чаще всего определяют суммарные антитела к вирусу гепатита С. Это значит, что в результате анализа будут учитываться иммуноглобулины фракций G и M одновременно. Их можно обнаружить спустя месяц после инфицирования больного, как только антитела острой фазы начнут появляться в крови. Примерно через такой же промежуток времени их уровень возрастает из-за накопления антител-иммуноглобулинов класса G. Метод выявления суммарных антител считается универсальным. Он позволяет определить носителя вирусного гепатита, даже если концентрация вируса в крови мала.

Перечисленные антитела вырабатываются в ответ на структурные белки вируса гепатита. Кроме них, есть еще несколько маркеров, которые связываются с неструктурными белками. Их также можно обнаружить в крови при диагностике этого заболевания.

• Anti-NS3 — это антитела, по которым можно определить развитие острой стадии гепатита.
• Anti-NS4 — это белки, которые накапливаются в крови при длительном хроническом течении. Их количество косвенно указывает на степень поражения печени возбудителем гепатита.
• Anti-NS5 — белковые соединения, также подтверждающие наличие вирусной РНК в крови. Они особенно активны при хроническом гепатите.

Антитела к возбудителю вирусного гепатита обнаруживаются не одновременно. Начиная с первого месяца болезни, они проявляются в следующем порядке:

• Анти-HCV суммарные – через 4—6 недель после попадания вируса,
• Anti-HCV core IgG – спустя 11—12 недель после заражения,
• Anti-NS3 – самые ранние белки, появляются на ранних этапах гепатита,
• Anti-NS4 и Anti-NS5 можно обнаружить уже после того, как все остальные маркеры были выявлены.

Носитель антител — это не обязательно пациент с выраженной клинической картиной вирусного гепатита. Наличие этих элементов в крови говорит об активности иммунной системы по отношению к вирусу. Такая ситуация может наблюдаться у больного в периоды ремиссии и даже после лечения гепатита.

Исследования на гепатит С проводят не только тогда, когда пациент обращается в больницу с первыми симптомами. Такие анализы сдают планово при беременности, поскольку заболевание может передаваться от матери к ребенку и вызывать патологии развития плода. Нужно понимать, что в быту пациенты не могут быть заразны, потому что возбудитель попадает в организм только с кровью либо при половом контакте.

Для комплексной диагностики используется также полимеразная цепная реакция (ПЦР). Для ее проведения также необходима сыворотка венозной крови, а исследования проводятся в лаборатории на специальном оборудовании. Этот метод основан на обнаружении непосредственно вирусной РНК, поэтому положительный результат такой реакции становится основанием для постановки окончательного диагноза на гепатит С.

Существует две разновидности ПЦР:

• качественная — определяет наличие либо отсутствие вируса в крови,
• количественная — позволяет выявить концентрацию возбудителя в крови, или вирусную нагрузку.

Количественный метод дорогостоящий. Он используется только в тех случаях, когда больной начинает проходить лечение специфическими препаратами. Перед началом курса определяют концентрацию вируса в крови, а затем отслеживают изменения. Таким образом, можно делать выводы об эффективности конкретных лекарственных средств, которые пациент принимает против гепатита.

ИФА проводят в специальных лунках, в которых уже присутствуют вирусные антигены

Бывают случаи, когда антитела у больного есть, а ПЦР показывает отрицательный результат. Такому явлению есть 2 объяснения. Это может происходить, если по завершении курса лечения в крови осталось незначительное количество вируса, которое не удалось убрать медикаментами. Также может быть, что после выздоровления антитела продолжают циркулировать в кровеносном русле, но возбудителя болезни уже нет. Повторный анализ спустя месяц прояснит ситуацию. Проблема в том, что ПЦР, хоть и является высокочувствительной реакцией, может не определять минимальные концентрации вирусной РНК.

Расшифровать результаты анализов и разъяснить их пациенту сможет врач. В первой таблице указаны возможные данные и их интерпретация, если для диагностики проводились общие исследования (тест на суммарные антитела и качественная ПЦР).

источник

В ответ на внедрение чужеродного агента иммунная система человека вырабатывает иммуноглобулины (Ig). Эти специфические вещества предназначены для связывания с чужеродным агентом и его обезвреживания. Определение противовирусных антител имеет большое значение для диагностики при хроническом вирусном гепатите С (ХВГС).

Антитела к вирусу в крови человека выявляет метод ИФА (иммуноферментный анализ). Эта методика основана на реакции между антигеном (вирусом) и иммуноглобулинами (antiHVC). Суть метода состоит в том, что в специальные планшеты вносят чистые вирусные антигены, антитела к которому ищут в крови. Затем в каждую лунку добавляют кровь больного. Если в ней есть антитела к вирусу гепатита С определенного генотипа, в лунках происходит образование иммунных комплексов «антиген-антитело».

Спустя некоторое количество времени в лунки добавляют специальное красящее вещество, которое вступает в цветную ферментную реакцию с иммунным комплексом. По плотности окраски проводят количественное определение титра антител. Метод имеет высокую чувствительность – до 90%.

К преимуществам метода ИФА можно отнести:

• высокую чувствительность;
• простоту и быстроту проведения анализа;
• возможность проведения исследования при малом количестве биологического материала;
• невысокую себестоимость;
• возможность ранней диагностики;
• пригодность для скрининга большого количества людей;
• возможность отслеживать показатели в динамике.

Единственным недостатком ИФА является то, что он определяет не сам возбудитель, а лишь реакцию иммунной системы на него. Поэтому при всех преимуществах метода для постановки диагноза ХВГС его недостаточно: требуется проведение дополнительных анализов, выявляющих генетический материал возбудителя.

Современная диагностика с помощью метода ИФА позволяет обнаружить в крови пациента как отдельные фракции антител (IgM и IgG), так и их общее количество — antiHVC total. Эти иммуноглобулины с диагностической точки зрения являются маркерами ХВГС. Что означает их обнаружение? Иммуноглобулины класса М определяются при остром процессе. Они могут выявляться уже спустя 4-6 недель после заражения. G-иммуноглобулины являются признаком хронизации процесса. Их можно обнаружить в крови спустя 11-12 недель после инфицирования, а после лечения они могут сохраняться до 8 и более лет. При этом их титр постепенно снижается.

Бывают случаи, когда у здорового человека при проведении ИФА на antiHVC total обнаруживают противовирусные антитела. Это может быть как признаком хронической патологии, так и следствием самопроизвольного излечения пациента. Такие сомнения не позволяют врачу установить диагноз ХВГС, руководствуясь только ИФА.

Различают антитела к структурным (ядерным, core) и неструктурным (nonstructural, NS) белкам вируса. Целью их количественного определения является установление:

• активности вируса;
• вирусной нагрузки;
• вероятности хронизации процесса;
• степени повреждения печени.

AntiHVC core IgG – это антитела, которые появляются при хронизации процесса, поэтому для определения острой фазы ХВГС не используются. Своей максимальной концентрации эти иммуноглобулины достигают к пятому-шестому месяцу болезни, а у длительно болеющих и не получающих лечения пациентов они определяются в течение всей жизни.

AntiHVC IgМ являются антителами острого периода и говорят об уровне виремии. Их концентрация нарастает в течение первых 4-6 недель болезни, а после перехода процесса в хронический – уменьшается вплоть до исчезновения. Повторно в крови больного иммуноглобулины класса М могут появляться при обострении заболевания.

Антитела к неструктурным белкам (AntiHVC NS) выявляются в разные сроки болезни. Диагностически значимыми из них являются NS3, NS4 и NS5. AntiHVC NS3 – самые ранние антитела к вирусу ХВГС. Они являются маркерами острого периода болезни. По титру (количеству) этих антител определяют вирусную нагрузку на организм пациента.

AntiHVC NS4 и NS5 – антитела хронической фазы. Считается, что их появление связано с поражением ткани печени. Высокий титр AntiHVC NS5 указывает на наличие в крови вирусной РНК, а его постепенное снижение – на начало фазы ремиссии. Эти антитела длительное время после выздоровления присутствуют в организме.

В зависимости от клинической симптоматики и результатов анализа на РНК вируса гепатита С данные, полученные после ИФА, могут трактоваться по-разному:

• положительные результаты на AntiHVC IgМ, AntiHVC IgG и вирусную РНК говорят об остром процессе или об обострении хронического;
• если в крови обнаружены только антитела класса G без генов вируса, это указывает на перенесенное, но излеченное заболевание. При этом РНК вируса в крови нет;
• отсутствие в крови и AntiHVC и РНК вируса считается нормой, или отрицательным анализом на антитела.

Если выявлены специфические антитела, а самого вируса в крови нет, это не означает, что человек болен, но и не отрицает этого. Такой анализ считается сомнительным и требует повторного исследования через 2-3 недели. Таким образом, если в крови найдены иммуноглобулины к вирусу ХВГС, необходима комплексная диагностика: клинические, инструментальные, серологические и биохимические исследования.

Для постановки диагноза важен не только положительный ИФА, что означает наличие вируса в крови в настоящее время или ранее, но и обнаружение вирусного генетического материала.

Вирусный антиген, а точнее его РНК, определяют методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Этот метод, наряду с ИФА, является одним из ключевых лабораторных анализов, позволяющих врачу поставить диагноз ХВГС. Назначается он тогда, когда получен положительный результат анализа на антитела.

Анализ на антитела является более дешевым, чем ПЦР, поэтому именно он используется для скрининга некоторых категорий населения (беременных, доноров, медиков, детей из группы риска). Вместе с исследованием на гепатит С чаще всего проводят и определение австралийского антигена (гепатит В).

Если методом ИФА в крови пациента обнаружены AntiHVC к вирусу, но никаких клинических признаков гепатита С при этом нет, это может быть трактовано, как носительство возбудителя. Вирусоноситель может сам не болеть, но при этом активно заражать контактирующих с ним людей, например, через кровь носителя. В таком случае нужна дифференциальная диагностика: расширенный анализ антител и проведение ПЦР. Если анализ ПЦР окажется отрицательным, человек, возможно, перенес заболевание латентно, то есть бессимптомно, и самостоятельно излечился. При положительном ПЦР вероятность носительства очень высока. Как быть, если антитела к гепатиту С есть, а ПЦР отрицательный?

Важно правильно трактовать анализы не только для постановки диагноза ХВГС, но и для контроля эффективности его лечения:

• если на фоне проводимого лечения антитела к гепатиту С не пропадают, это указывает на его неэффективность;
• если после противовирусной терапии вновь выявлены AntiHVC IgМ, это означает, что процесс снова активировался.

В любом случае, если по результатам анализов РНК вирус не обнаружен, но антитела к нему обнаружены, следует провести повторное обследование, чтобы убедиться в точности результата.

Остаются ли антитела в крови после курса лечения и почему? После эффективной противовирусной терапии в норме могут выявляться только IgG. Время их циркуляции в организме переболевшего человека может составлять несколько лет. Главным признаком излеченного ХВГС является постепенное уменьшение титра IgG при отсутствии вирусной РНК и IgМ. Если пациент вылечил гепатит С уже давно, а суммарные антитела у него остались, нужно провести идентификацию антител: остаточные титры IgG – это норма, а вот IgМ – это неблагоприятный признак.

Не стоит также забывать, что бывают ложные результаты анализов на антитела: как положительные, так и отрицательные. Так, например, если в крови есть РНК вируса (качественной или количественной ПЦР), а антител к нему нет, это можно трактовать как ложноотрицательный или сомнительный анализ.

Причин появления ложных результатов несколько:

• аутоиммунные заболевания;
• доброкачественные и злокачественные опухоли в организме;
• тяжелые инфекционные процессы; после прививки (от гепатитов А и В, гриппа, столбняка);
• лечение интерфероном-альфа или иммунодепрессантами;
• значительное повышение печеночных показателей (АСТ, АЛТ);
• беременность;
• неправильная подготовка к сдаче анализа (прием алкоголя, употребление жирной пищи накануне).

При беременности процент ложных анализов достигает 10-15%, что связано со значительным изменением реактивности организма женщины и физиологическим угнетением ее иммунной системы. Нельзя игнорировать также человеческий фактор и нарушение условий проведения анализа. Анализы проводятся «инвитро», то есть вне живых организмов, поэтому лабораторные ошибки имеют место быть. К индивидуальным особенностям организма, которые могут влиять на результаты исследования, относятся гипер- или гипореактивность организма.

Анализ на антитела, несмотря на все свои преимущества, не является 100%-ным поводом для постановки диагноза. Риск ошибок есть всегда, поэтому, чтобы избежать возможных ошибок, нужно комплексное обследование пациента.

источник