Меню Рубрики

Анализ ифа или маркеры на гепатит

Поверхностный антиген гепатита В в сыворотке крови в норме отсутствует.
Обнаружение поверхностного антигена (HBsAg) гепатита В в сыворотке подтверждает острое или хроническое инфицирование вирусом гепатита В.

При остром заболевании HBsAg выявляется в сыворотке крови в последние 1-2 недели инкубационного периода и первые 2-3 недели клинического периода. Циркуляция HBsAg в крови может ограничиваться несколькими днями, поэтому следует стремиться к раннему первичному обследованию больных. Метод ИФА позволяет выявить HBsAg более чем у 90% больных. Почти у 5% больных самые чувствительные методы исследования не обнаруживают HBsAg, в таких случаях этиология вирусного гепатита В подтверждается наличием анти-HBсAg JgM или ПЦР.

Концентрация HBsAg в сыворотке крови при всех формах тяжести гепатита В в разгар заболевания имеет значительный диапазон колебаний, вместе с тем имеется определенная закономерность: в остром периоде существует обратная связь между концентрацией HBsAg в сыворотке и тяжестью болезни.

Высокая концентрация HBsAg чаще наблюдается при легких и среднетяжелых формах болезни. При тяжелых и злокачественных формах концентрация HBsAg в крови чаще низкая, причем у 20% больных с тяжелой формой и у 30% со злокачественной антиген в крови может вообще не обнаруживаться. Появление на этом фоне у больных антител к HBsAg расценивается как неблагоприятный диагностический признак; он определяется при злокачественных формах гепатита В.

При остром течении гепатита В концентрация HBsAg в крови постепенно снижается вплоть до полного исчезновения этого антигена. HBsAg исчезает у большинства больных в течение 3 месяцев от начала острой инфекции.

Снижение концентрации HBsAg более чем на 50% к концу 3-й недели острого периода, как правило, свидетельствует о близком завершении инфекционного процесса. Обычно у больных с высокой концентрацией HBsAg в разгар болезни он обнаруживается в крови в течение нескольких месяцев.
У больных с низкой концентрацией HBsAg исчезает значительно раньше (иногда через несколько дней после начала заболевания). В целом срок обнаружения HBsAg колеблется от нескольких дней до 4-5 мес. Максимальный срок обнаружения HBsAg при гладком течении острого гепатита В не превышает 6 месяцев от начала заболевания.

HBsAg может быть обнаружен у практически здоровых людей, как правило, при профилактических или случайных исследованиях. В таких случаях исследуют другие маркеры вирусного гепатита В – анти HBсAg JgM, анти- HBсAg JgG, анти HBеAg и изучают функцию печени.

При отрицательных результатах необходимы повторные исследования на HBsAg.
Если повторные исследования крови в течение более 3 месяцев выявляют HBsAg, такого пациента относят к хроническим больным вирусным гепатитом В.
Наличие HBsAg – довольно распространенное явление. В мире насчитывается более 300 млн. носителей, а у нас в стране – около 10 млн. носителей.
Прекращение циркуляции HBsAg с последующей сероконверсией (образование анти-HBs) всегда свидетельствует о выздоровлении — санации организма.

Исследование крови на наличие HBsAg применяется в следующих целях:

для диагностики острого гепатита В:

  • инкубационный период;
  • острый период заболевания;
  • ранняя стадия реконвалесценции;

для диагностики хронического вирусного гепатита В;

при заболеваниях:

  • персистирующем хроническом гепатите;
  • циррозе печени;

для скрининга и выявления больных в группах риска:

  • больные с частыми гемотрансфузиями;
  • больные с хронической почечной недостаточностью;
  • больные с множественным гемодиализом;
  • больные с иммунодефицитными состояниями, в том числе СПИДом.

Результаты исследования выражаются качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBsAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBsAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В, а также при хроническом вирусном гепатите В.

В норме анти-HBcAg JgG в сыворотке отсутствует.
У больных анти-HBcAg JgG появляются в острый период вирусного гепатита В и сохраняются на протяжении всей жизни. Анти-HBcAg JgG – ведущий маркер перенесенного ВГВ.

Исследование крови на наличие анти-HBcAg JgG применяются для диагностики:

  • хронического вирусного гепатита В при наличии HBs антигена в сыворотке крови;
  • перенесенного вирусного гепатита В.
  • Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие анти-HBcAg JgG в сыворотке крови. Положительный результат – выявление анти-HBcAg JgG свидетельствует об острой инфекции, реконвалесценции или ранее перенесенном вирусном гепатите В.

    В норме HBeAg в сыворотке крови отсутствует.
    HBeAg можно обнаружить в сыворотке крови большинства больных острым вирусным гепатитом В. Он обычно исчезает в крови раньше HBs-антигена. Высокий уровень HBeAg в первые недели заболевания или обнаружение его на протяжении более 8 недель дает основание заподозрить хроническую инфекцию.

    Этот антиген часто обнаруживается при хроническом активном гепатите вирусной этиологии. Особый интерес к определению HBeAg связан с тем, что его обнаружение характеризует активную репликативную фазу инфекционного процесса . Установлено, что высокие концентрации HBeAg соответствуют высокой ДНК-полимеразной активности и характеризуют активную репликацию вируса.

    Наличие HBeAg в крови свидетельствует о высокой ее инфекциозности, т.е. присутствии в организме обследуемого активной инфекции гепатита В, и обнаруживается только в случае присутствия в крови HBs-антигена. У больных хроническим активным гепатитом противовирусные препараты применяются только при обнаружении в крови HBeAg. HBeAg – антиген – маркер острой фазы и репликации вируса гепатита В.

    Исследование крови на наличие HBe-антигена применяется для диагностики:

  • инкубационного периода вирусного гепатита В;
  • продромального периода вирусного гепатита В;
  • острого периода вирусного гепатита В;
  • хронического персистирующего вирусного гепатита В.
  • Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBeAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В или продолжающейся репликации вируса и инфекциозности больного.

    Анти-HBeAg в сыворотке в норме отсутствует. Появление анти-НВeAg антител указывает обычно на интенсивное выведение из организма вируса гепатита В и незначительное инфицирование больного.

    Эти антитела появляются в острый период и сохраняются до 5 лет после перенесенной инфекции. При хроническом персистирующем гепатите анти-НВeAg обнаруживаются в крови больного вместе с НВsAg. Сероконверсия, т.е. переход HBeAg в анти-НВeAg, при хроническом активном гепатите, чаще прогностически благоприятна, но такая же сероконверсия при выраженной цирротической трансформации печени прогноза не улучшает.

    Исследование крови на наличие анти-НВeAg применяются в следующих случаях при диагностике вирусного гепатита В:

  • установление начальной стадии заболевания;
  • острый период инфекции;
  • ранняя стадия реконвалесценции;
  • реконвалесценция;
  • поздняя стадия реконвалесценции.
  • диагностика недавно перенесенного вирусного гепатита В;
  • диагностика хронического персистирующего вирусного гепатита В.
  • Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие антител к HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление антител к HBeAg, которые могут свидетельствовать о начальной стадии острого вирусного гепатита В, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции, реконвалесценции, перенесенном недавно вирусном гепатите В или персистирующем вирусном гепатите В.

    Критериями наличия хронического гепатита В являются:

  • бнаружение или периодическое выявления ДНК ВГВ в крови;
  • постоянное или периодическое повышение активности АЛТ/АСТ в крови;\
  • морфологические признаки хронического гепатита при гистологическом исследовании биоптата печени.
  • Вирус гепатита В в крови в норме отсутствует.
    Качественное определение вируса гепатита В методом ПЦР в крови позволяет подтвердить наличие вируса в организме больного и тем самым устанавливает этиологию заболевания.

    Данное исследование дает полезную информацию для диагностики острого вирусного гепатита В в инкубационном и раннем периоде развития заболевания, когда основные серологические маркеры в крови у пациента могут отсутствовать. Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Аналитическая чувствительность метода ПЦР составляет не менее 80 вирусных частиц в 5 мкл, прошедшей выявление ДНК пробы, специфичность – 98%.

    Этот метод имеет важное значение для диагностики и мониторинга течения хронического ВГВ. Примерно 5-10% случаев цирроза и других хронических заболеваний печени обусловлены хроническим носительством вируса гепатита В. Маркерами активности таких заболеваний является наличие HBeAg и ДНК вируса гепатита В в крови.

    Метод ПЦР позволяет определять в крови ДНК вируса гепатита В как качественно, так и количественно. Определяемым фрагментом в обоих случаях служит уникальная последовательность ДНК гена структурного белка вируса гепатита В.

    Обнаружение ДНК вируса гепатита В в биоматериале с помощью ПЦР необходимо для:

  • разрешения сомнительных результатов серологических исследований;
  • выявление острой стадии заболевания по сравнению с перенесенной инфекцией или контактом;
  • контроля эффективности противовирусного лечения.
  • Исчезновение ДНК вируса гепатита В из крови – признак эффективности терапии

    Этот метод дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к активным препаратам.
    Для диагностики вирусного гепатита методом ПЦР в сыворотке крови применяются тест-системы, чувствительность которых составляет 50-100 копий в пробе, что позволяет детектировать вирус при его концентрации 5 Х 10^3 -10^4 копий/мл. ПЦР при вирусном гепатите В безусловно необходима для суждения о вирусной репликации.

    Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Материалом для выявления ДНК вируса гепатита В могут служить сыворотка крови, лимфоциты, гепатобиоптаты.

    • Оценку уровня виремии осуществляют следующим образом:
    • менее 2.10^5 копий/мл (менее 2.10^5 МЕ/мл) – низкая виремия ;
    • от 2.10^5 копий/мл (2.10^5 МЕ/мл) до 2.10^6 копий/мл (8.10^5 МЕ/мл) – средняя виремия;
    • более 2.10^6 копий/мл – высокая виремия.

    Существует зависимость между исходом острого вирусного гепатита В и концентрацией ДНК ВГВ в крови больного. При низком уровне виремии процесс хронизации инфекции близок к нулю, при средней – хронизация процесса наблюдается у 25-30% больных, а при высоком уровне виремии острый вирусный гепатит В чаще всего переходит в хронический.

    Показаниями для лечения хронического ВГВ интерфероном-альфа следует считать наличие маркеров активной репликации вируса (выявление HBsAg, HBeAg и ДНК ВГВ в сыворотке крови в течение предшествующих 6 месяцев.).

    Критериями оценки эффективности лечения служат исчезновение HBeAg и ДНК ВГВ в крови, что обычно сопровождается нормализацией уровня трансаминаз и долговременной ремиссией заболевания, ДНК ВГВ исчезает из крови к 5-му месяцу лечения у 60%, к 9-му месяцу – у 80% больных. Снижение уровня виремии на 85% и более к третьему дню от начала лечения по сравнению с исходным служит быстрым и достаточно точным критерием для прогнозирования эффективности терапии.

    источник

    Гепатит — общее название диффузных, то есть захватывающих весь орган, воспалительных заболеваний печени. Гепатиты бывают аутоиммунными, токсическими и вирусными. Современная медицина различает 7 видов вирусных гепатитов — А, В, С, D, E, F, G, гепатиты как компоненты других вирусных заболеваний (СПИД, краснуха, желтая лихорадка) и бактериальные гепатиты, возникающие при сифилисе или лептоспирозе.

    Вирусные гепатиты распространены наиболее широко, поскольку легко передаются бытовым способом, с кровью, от матери к плоду или при незащищенном половом контакте. В анализе крови инфицированного больного могут быть обнаружены антигены и антитела — маркёры заболевания, а также специфические внутриклеточные ферменты печени. В число необходимых анализов для полноценной диагностики гепатита входит биохимия крови.

    Вирусные гепатиты в 90% случаев протекают бессимптомно и излечиваются самопроизвольно за счет действия иммунной системы человека. Если болезнь все-таки дала о себе знать, активная ее фаза делится на два периода: преджелтушный и желтушный. Сначала отмечаются такие общие для вирусных инфекций симптомы, как:

    • общая слабость;
    • кожный зуд;
    • тошнота, рвота, диарея;
    • температура тела до 38°С;
    • головные, мышечные, суставные боли.

    Затем наступает желтушный период, когда пораженная печень выбрасывает в кровь большое количество билирубина — желтого пигмента. Именно с этого момента становится очевидно, что у пациента проблемы с печенью, и назначается комплекс лабораторных исследований крови, мочи и кала.

    Однако следует учитывать тот факт, что многие случаи заражения не проявляются в симптоматике. То есть после инкубационного периода, который может длиться от пары недель до месяцев, гепатиты не позволяют себя обнаружить по внешним клиническим признакам не только в продромальной (преджелтушной) стадии, но и в желтушной — по причине отсутствия ее как таковой. Например, в 2/3 всех случаев гепатит B проходит в атипичной (безжелтушной, или субклинической) форме. В такой ситуации следует задаться справедливым вопросом…

    Периодическая проверка на гепатит необходима каждому, особенно если планируется беременность или сменился половой партнер, ухудшилась эпидемиологическая обстановка в окружающем вас коллективе, обнаружен вирус у кого-то из родственников, у вас нашли хронические формы каких-либо заболеваний, при любых симптомах, напоминающих пищевое отравление, или при патологической усталости и утомляемости. В профилактических целях золотым стандартом считается ежегодное вирусологическое исследование. Срочно следует провериться, если вы случайно порезались или укололись сомнительным предметом, которым могли пользоваться до вас — например, если в почтовом ящике вы нашли использованный одноразовый шприц и успели им пораниться.

    Врач обязательно назначит вам анализ крови на гепатит, если вы пришли с жалобами на следующие симптомы:

    • пожелтение кожи и белков глаз;
    • тяжесть, распирание, боли в правом подреберье;
    • непереносимость жирной пищи;
    • моча бурого цвета, обесцвечивание стула.

    Анализы на гепатит входят в список необходимых исследований при оформлении медицинских книжек для персонала лечебно-профилактических учреждений, роддомов, детских больниц и детских поликлиник, домов ребенка, школ-интернатов, учреждений особого режима. Доноры крови и лица, стоящие на учете в наркологических и кожно-венерологических диспансерах и кабинетах, в обязательном порядке проходят проверку.

    Кровь на биохимический анализ сдается строго натощак, в утренние часы, с 8 до 11. Это обусловлено суточными ритмами, которые влияют на содержание гормонов в крови. Вирусологический анализ на гепатит (антигены и антитела) может быть сдан в любое время суток, но тоже натощак: важно не принимать пищу в течение 4–6 часов до забора крови. В обоих случаях используется венозная кровь, которая как биоматериал более качественна, чем капиллярная.

    Читайте также:  Качественный анализ на гепатит с чувствительность

    Накануне сдачи любых анализов крови рекомендуется избегать физических и эмоциональных нагрузок, приема алкоголя и тяжелой пищи. Питьевой режим должен быть обычным.

    Гепатит А, передающийся бытовым путем, также называется болезнью Боткина. Чаще всего вспышки гепатита А отмечаются в условиях скученности людей, при низкой санитарии. Гепатит А не переходит в хроническую форму и дает наименьшие осложнения. Тем не менее, в острой форме он способен причинить инфицированному больному существенный дискомфорт.

    Необходимые качественные анализы:

    • Anti-HAV-IgG (антитела класса IgG к вирусу гепатита А) . Результат может быть положительным, если больной был вакцинирован против гепатита А, болеет им в настоящий момент или только что перенес заболевание. В этом случае у него вырабатывается иммунитет. Отрицательный результат означает отсутствие иммунитета к гепатиту А и возможность заражения.
    • Anti-HAV-IgM (антитела класса IgM к вирусу гепатита А) . Варианты результатов — «положительно», «отрицательно», «сомнительно». В первом случае речь идет об остром или недавно перенесенном гепатите А, во втором — не выявлено иммунитета к вирусу и возможно заражение в ближайшее время при наличии очага инфекции дома или в коллективе. Сомнительным считается результат, близкий к пороговому значению. В этом случает необходимо следить за состоянием пациента в течение недели. Результаты исследования anti-HAV IgM используют обязательно в комплексе с другими маркёрами гепатита и данными о самочувствии пациента.
    • Определение РНК (HAV-RNA) в сыворотке крови. Результат «обнаружено» означает, что в образце крови нашли фрагмент РНК, специфичный для вируса гепатита А, можно диагностировать заражение гепатитом А. Отрицательный результат говорит об отсутствии фрагментов вредоносной РНК или о том, что их концентрация ниже чувствительности теста.

    Гепатит А считается в основном детской болезнью, но его последствия сказываются на здоровье всю жизнь. Поэтому при вспышке инфекции важно изолировать больных и следить за состоянием остальных людей, находившихся в очаге заражения.

    Вирус гепатита В передается в быту, половым путем или с кровью. Является очень устойчивым и может сохраняться во внешней среде около недели, даже в засохшей крови, на лезвии бритвы или на конце иглы. Им инфицировано 350 000 000 людей во всем мире, и ежегодно от последствий гепатита В погибает 1 000 000 человек. Благодаря повсеместной вакцинации эти цифры имеют тенденцию к снижению. Для диагностики гепатита В нужны следующие анализы:

    • Анализ на HBs-антиген, или австралийский антиген. Этот анализ на вирус гепатита может быть как качественным, так и количественным. Референсное значение — 0,5 МЕ/мл. Если получен меньший результат, тест отрицательный, если больший — положительный. Если антиген выявлен, это может свидетельствовать об остром или хроническом гепатите В, а также о носительстве вируса. Отрицательный результат может трактоваться как отсутствие гепатита В только при отрицательных результатах анализов на другие маркёры. Не исключается хронический гепатит В с низкой интенсивностью репликации. В редких случаях отрицательный результат получают при молниеносном, злокачественном течении болезни либо при гепатите В с дефектным HBs-антигеном.
    • Исследование HBеAg (HBе-антиген вируса гепатита В). Качественный тест. При положительном результате диагностируется острый или хронический гепатит В с высокой интенсивностью репликации. Отрицательный результат означает отсутствие гепатита В только при отсутствии других маркёров. Может быть получен при остром или хроническом гепатите с низкой интенсивностью репликации, а также в период инкубации или выздоровления.
    • Определение Anti-HBс-total (антитела классов IgM и IgG к HB-core антигену вируса гепатита) . Качественный тест, который при положительном результате позволяет диагностировать гепатит В, но не дает возможности уточнить, острый он или хронический и в какой фазе протекает. Отрицательный результат при отсутствии других маркёров может означать отсутствие гепатита В, его инкубационный период или хроническую форму.
    • Анализ на Anti-HBс IgМ (антитела класса IgМ к HB-core-антигену вируса гепатита B) . Качественный анализ, с вариантами «отрицательно», «положительно», «сомнительно». При сомнительном результате рекомендуется повторить анализ через 10–14 дней. Положительный результат всегда выдается при остром гепатите и иногда — при хроническом. Отрицательный результат при отсутствии других маркёров может означать отсутствие гепатита В, его инкубационный период или хроническую форму.
    • Определение Anti-HBе (антитела к HBе-антигену вируса гепатита B). Качественный тест. Положительный результат может означать фазу выздоровления после острого гепатита В, хронический гепатит В или хроническое бессимптомное носительство вируса. Отрицательный результат может быть получен как при отсутствии гепатита, так и при его хронической форме или в инкубационном периоде острой формы. Также нельзя исключить носительство HBs-антигена с низкой репликацией.
    • Выявление Anti-HBs (антитела к HBs-антигену вируса гепатита B). Количественный тест. Референсное значение — 10 мЕд/мл. Если показатель выше, это может означать успешную вакцинация против гепатита В, выздоровление или хронический гепатит В с низкой инфекционностью. Если показатель ниже, это означает, что не был достигнут эффект вакцинации или заболевание не было перенесено ранее. Также возможно, что пациент переживает инкубационный или острый период острого гепатита В, хроническую форму болезни с высокой инфекционностью или является носителем HBs-антигена с низкой репликацией.
    • Определение ДНК (HBV-DNA) в сыворотке крови. Положительный результат (более 40 МЕ/л) говорит об инфицировании вирусом гепатита В. Отрицательный (менее 40 МЕ/л) — об отсутствии инфицирования или концентрации возбудителя заболевания в образце крови ниже границы чувствительности теста.

    Будучи наиболее распространенным, гепатит В может быть предотвращен только при высокой информированности населения и организации вакцинирования. Для лиц группы риска вакцинирование является основным методом защиты.

    Этот вид гепатита передается с кровью и другими биологическими жидкостями. Он имеет шесть разновидностей, поэтому анализы необходимо проводить в комплексе. В группу риска входят люди, принимающие наркотики внутривенно, ведущие беспорядочную половую жизнь, медработники, а также пациенты, которым прописывались гемодиализ или переливания крови.

    При подозрении на гепатит С и в профилактических целях сдаются следующие анализы:

    • Анализ на аnti-HCV-total (антитела к антигенам вируса гепатита C). Качественный анализ, который при положительном результате означает инфицирование или период восстановления после него. Не позволяет различить форму и стадию гепатита С. При отрицательном результате возможен инкубационный период или вариант гепатита С, нечувствительный к данному анализу.
    • Определение РНК (HCV-RNA) в сыворотке или плазме крови. Анализ может быть качественным и количественным. При качественном анализе результат «обнаружено» позволяет диагностировать заражение гепатитом C. Отрицательный результат говорит об отсутствии фрагментов вредоносной РНК или о том, что их концентрация ниже чувствительности теста.

    При количественном анализе плазмы крови:

      • «не обнаружено» : РНК гепатита С не выявлена или значение ниже предела чувствительности метода (15 МЕ/мл). Результат интерпретируют как «РНК гепатита С не выявлена»;
      • 100 000 000 МЕ/мл : результат интерпретируется как: «РНК гепатита С выявлена в указанной концентрации, выходящей за пределы линейного диапазона, тест ставился в разведении 1:Х».

    При количественном анализе сыворотки крови:

    • «не обнаружено» : РНК гепатита С не выявлена или значение ниже предела чувствительности метода (60 МЕ/мл). Результат интерпретируют как «РНК гепатита С не выявлена»;
    • 2 МЕ/мл : результат положительный с концентрацией РНК гепатита С менее 102 МЕ/мл;
    • от 10 2 до 10 8 МЕ/мл : результат положительный. Полученное значение находится в пределах линейного диапазона;
    • 10 8 МЕ/мл : результат положительный с концентрацией РНК гепатита С более 108 МЕ/мл.
  • Определение антител IgG (recomBlot HCV IgG). Качественный тест. Отрицательный результат говорит об отсутствии инфицирования. Исключения составляют инкубационный период и очень ранняя острая фаза, иммуносупрессированные пациенты, новорожденные с антителами матери. Положительный результат: пациент был инфицирован ранее. Сомнительный результат: возможно, была инфекция.
  • Гепатит С второй по распространенности после гепатита В, поэтому при подозрении на патологии печени чаще всего анализы делают именно на эти два вирусных заболевания. Однако менее «популярные» вирусы тоже могут причинить печени существенный вред.

    Вирус гепатита D имеет в составе оболочки белок гепатита В, поэтому развивается только у инфицированных гепатитом В. Воздействие на организм сразу двух вирусов приводит к тяжелому и хроническому воспалению печени.

    Вирус гепатита G встречается у 85% инъекционных наркоманов, также передается половым путем, часто сопутствует гепатитам В, С и D. Для диагностики гепатитов D и G используются следующие тесты:

    • Определение РНК (HDV-RNA) в сыворотке крови . Результат «обнаружено» означает, что в образце крови нашли фрагмент РНК, специфичный для вируса, можно диагностировать заражение гепатитом D. Отрицательный результат говорит об отсутствии фрагментов вредоносной РНК или о том, что их концентрация ниже чувствительности теста.
    • Определение РНК (HDV-RNA) гепатита G в сыворотке крови . Результат «обнаружено» означает, что в образце крови нашли фрагмент РНК, специфичный для вируса гепатита G, можно диагностировать заражение. Отрицательный результат говорит об отсутствии фрагментов вредоносной РНК или о том, что их концентрация ниже чувствительности теста.
    • Анализ на наличие антител класса IgM (Hepatitis delta virus, IgM antibodies; anti-HDV IgM). Качественный анализ, при положительном результате говорящий об остром течении вирусного поражения гепатитом D. Положительный результат в редких случаях может дать неспецифическая интерференция сыворотки. Отрицательный ответ можно получить при отсутствии острой инфекции, в раннем инкубационном периоде и через один-два года после выздоровления.
    • Суммарные антитела к гепатиту D (Hepatitis delta virus antibodies; anti-HDV total) . Качественный анализ. «Положительно» — острая или хроническая инфекция, текущая или имевшая место в прошлом. Положительный результат в редких случаях может дать неспецифическая интерференция сыворотки. Отрицательный результат получают при отсутствии острой инфекции, в раннем инкубационном периоде и через один–два года после выздоровления.

    После окончания острого периода, антитела к гепатитам D и G могут сохраняться в крови до двух лет. Поэтому при положительном результате анализа обычно назначается повторное исследование.

    Вирус гепатита Е передается бытовым путем — в основном через загрязненную питьевую воду — и протекает только в острой форме. После перенесенного гепатита Е формируется стойкий, но не пожизненный иммунитет. Сдается всего два качественных анализа:

    • Определение аnti-HEV-IgM (антитела класса IgM к вирусу гепатита Е) . Положительный результат говорит об острой стадии гепатита Е, отрицательный — либо об отсутствии, либо о ранней стадии, либо о периоде выздоровления.
    • Определение anti-HEV-IgG (антитела класса IgG к вирусу гепатита Е). Положительный результат может быть получен на острой стадии гепатита Е, а также при наличии вакцинации или экспозиции к вирусу гепатита Е в прошлом. Отрицательный результат возможен в отсутствие гепатита Е, на ранней стадии заболевания или во время выздоровления.

    Расшифровать результаты анализов и поставить диагноз с учетом клинической и эпидемиологической картины под силу только специалисту. Заниматься самодиагностикой означает причинять вред своему здоровью и ставить под угрозу здоровье окружающих.

    По итогам всех проведенных тестов, если не найдено никаких маркёров вирусного гепатита, можно говорить об отсутствии заболевания. Однако в некоторых случаях врачи рекомендуют сделать анализы повторно через две недели.

    В случае положительной реакции обязательно проводится повторный уточняющий анализ через две недели, поскольку возможен вариант, когда пациент только что переболел острой формой вирусного гепатита и маркёры в крови пока еще сохраняются.

    В целях профилактики вирусных гепатитов желательно пройти вакцинацию (актуально для гепатита В), а также соблюдать гигиену в быту, избегать случайных половых связей и употребления инъекционных наркотиков.

    К ана­ли­зам на ви­ру­сы ге­па­ти­та мо­гут по­двиг­нуть не­бла­гоп­ри­ят­ные ре­зуль­та­ты био­хи­ми­чес­ко­го ис­сле­до­ва­ния на АлАт (ала­нин-ами­нот­ран­сфе­ра­зу) и АсАт (ас­пар­тат-ами­нот­ран­сфе­ра­зу), на пря­мой и об­щий би­ли­ру­бин, ГГТ (гам­ма-глу­та­мил-транс­пеп­ти­да­зу) и ще­лоч­ную фос­фа­та­зу. Но воз­мо­жен и об­рат­ный сце­на­рий: для уточ­не­ния кли­ни­чес­кой кар­ти­ны за­бо­ле­ва­ния врач на­зна­чит скри­нин­го­вое об­сле­до­ва­ние пе­че­ни по этим по­ка­за­те­лям. В лю­бом слу­чае ви­ру­со­ло­ги­чес­кие и био­хи­ми­чес­кие те­с­ты вза­им­но до­пол­ня­ют друг дру­га, по­сколь­ку име­ют раз­лич­ные объ­ек­ты ис­сле­до­ва­ния.

    источник

    Диагностика HCV– поэтапный процесс, требующий всестороннего обследования пациента и проведения нескольких тестов. Но подтверждение заболевания происходит только в том случае, если обнаружены маркеры гепатита С. Это показатели лабораторных исследований, которые однозначно указывают на наличие вирусной инфекции.

    Из-за особенностей проведения анализов, точный диагноз невозможно поставить на основании одного теста. Для получения полной клинической картины следует не только выявить специфические показатели, появляющиеся при инфицировании гепатитом С. Существует и ряд других признаков, которые служат дополнительным подтверждением наличия патологии.

    Гепатит С – вирусное заболевание, избирательно поражающее клетки печени. В медицинской литературе чаще обозначается по русской или английской аббревиатуре – ВГС или HCV соответственно. Инфицирование провоцирует ряд изменений: начинается выработка иммуноглобулинов (их структура строго специфична в соответствии с протеиновым строением антигенов гепатита С), в плазме появляется патогенная РНК вируса, изменяется уровень форменных элементов крови, нарушается функционирование печени.

    Подобные процессы не могут не отражаться на картине лабораторных показателей. Что значит маркеры гепатита С? Это основные параметры, играющие роль в диагностике острой и хронической формы HCV.

    Спектр серологических исследований включает следующие анализы:

    • антитела класса М и G (при некоторых анализах могут определяться суммарно, без дифференцировки),
    • антиген core (протеин, входящий в структуру капсида HCV), обнаружение данного соединения – маркер репликации хронического вирусного гепатита С и острой формы патологии;
    • антитела к неструктурным белкам HCV, позволяют с высокой точностью дифференцировать острую стадию вирусной инфекции от хронической

    Как правило, для выполнения исследований пользуются методикой ПЦР. Тесты проводят всем пациентам:

    • определяемая РНК патогена в крови (качественная ПЦР),
    • лабораторно устанавливаемая вирусная нагрузка (количественная ПЦР),
    • генотипирование

    Иногда подозрения на HCV возникают при расшифровке некоторых общеклинических исследований. На инфицирование может указывать:

    • повышение уровня АЛТ,
    • увеличение концентрации АСТ,
    • увеличение свободного билирубина,
    • изменения показателей липидного обмена,
    • отклонение от нормы параметров белковых фракций,
    • изменение картины крови
    Прямые и косвенные маркеры гепатита C Описание
    Серологические показатели
    Молекулярные показатели
    Косвенные показатели вирусного гепатита С
    Читайте также:  Качественный анализ на гепатит с обнаружен

    При расшифровке и определении, что означает тот или иной показатель анализов крови, принимают во внимание общую клиническую картину и наличие других заболеваний.

    Большую роль играет:

    • самочувствие человека (на гепатит Ц может указывать слабость, сонливость, субфебрильная температура, разнообразные нарушения пищеварения);
    • наличие аутоиммунных расстройств;
    • состояние иммунной системы;
    • прием лекарств, влияющих на резистентность к инфекциям, на работу печени.

    Помимо результатов анализов крови, учитываются данные инструментального диагностического обследования.

    При оценке общего состояния больного важна:

    • информация, полученная в ходе ультразвукового осмотра органов брюшной полости (при гепатите С обычно изменены размеры, а также очертания печени);
    • данные процедуры «Фиброскан» (могут обнаруживаться очаги соединительной ткани, в зависимости от их размеров устанавливают степень фиброза печени либо подтверждают его отсутствие);
    • данные томографии (процедура дает представление о структуре паренхимы печени, позволяет обнаружить очаги злокачественной малигнизации клеток);
    • результаты гистологии после малоинвазивной пункционной биопсии печени (микроскопическое исследование образца тканей не может выявить вирусные частицы, но предоставляет информацию о наличии и тяжести цирроза, установить тип опухоли при ее наличии).

    Многие пациенты интересуются, сколько маркеров учитываются при постановке диагноза острого либо хронического типа HCV. Ключевую роль играют параметры ИФА (серологические маркеры вирусных гепатитов) и ПЦР. Остальные показатели имеют вспомогательное значение для оценки общего состояния пациентов, определения стратегии терапии и последующей реабилитации.

    Положительные маркеры вирусного поражения печени HCV – это специфические лабораторные показатели, которые позволяют однозначно подтвердить наличие возбудителя гепатита С в организме. Но выявление подобных параметров не освобождает от необходимости проведения дальнейшего обследования.

    В целом все виды диагностических тестов можно разделить на лабораторные и инструментальные. Первые включают исследования биологических жидкостей: крови, мочи, кала, спермы, слюны, желудочного секрета, желчи, биоптатов тканей. Инструментальные проводят при помощи специального медицинского оборудования (ультразвуковых сканеров, томографов, рентгена, эндоскопов). При подозрении на гепатит С выполняются и лабораторные, и инструментальные тесты.

    Специфические для HCV маркеры определяются только при анализе крови.

    Основные разновидности тестов, применяемых в протоколах диагностики гепатита С, перечислены в таблице.

    Помогает определить серологические маркеры HCV. Методом ИФА можно определить (в зависимости от вида тест-системы):

    • общее содержание иммуноглобулинов к возбудителю патологии (anti-HCV Total),
    • антитела класса М,
    • антитела класса G,
    • антигены core,
    • антигены структурных протеинов типа NS.

    Положительные маркеры ИФА требуют дальнейшего подтверждения

    По методике ПЦР проводят три исследования:

    • Качественный тест – высокочувствительный способ, предназначен для подтверждения позитивного или опровержения негативного результата ИФА, позволяет обнаружить только РНК патогена.
    • Количественный тест. Проводится уже после подтверждения диагноза, при анализе определяют вирусную нагрузку, т. е. концентрацию патогенных частиц в крови пациенты.
    • Генотипирование. Выполняется для определения генотипа. Повторно тест делают при подозрении на повторное инфицирование (обнаружение положительных маркеров через 2 года после окончания противовирусного лечения, при условии, что на протяжении этого времени все тесты были отрицательными)
    Виды клинических исследований Описание проводимого анализа, показания к выполнению и другие особенности
    Иммуноферментный анализ

    Прочие тесты (биохимия крови, общеклинические исследования, печеночные пробы) являются лишь вспомогательными.

    Целью их проведения служит:

    • определение степени поражения печени;
    • оценка риска развития осложнений;
    • выявление возможных сопутствующих заболеваний, которые могут прямо или косвенно повлиять на ход лечения (аутоиммунные патологии, онкологические новообразования, нарушения функции почек, кардиоваскулярные расстройства);
    • выявление скрытых, латентно протекающих системных инфекций (ВИЧ, туберкулеза, хронического пиелонефрита, гломерулонефрита).

    При сомнительных или положительных результатах дальнейшим ведением пациента должен заниматься врач. Только специалист может грамотно расшифровать анализы, а затем составить схему обследования. К этапу лечения можно переходить, когда определены основные маркеры гепатита C и выполнены дополнительные тесты.

    Для получения достоверных результатов важно соблюдать все правила, как сдавать кровь. Негативное влияние на печень из-за неправильной диеты, употребления спиртных напитков и воздействия других факторов может исказить результаты тестирования. Основное требование – это соответствующая диета.

    Принципы режима питания, которые нужно соблюдать как минимум за 5 дней до исследования, состоят в следующем:

    1. Не есть жирные сорта мяса, рыбы, птицы. Их заменяют нежирной морской и речной рыбой, говядиной, индейкой, курицей, кроликом.
    2. Ограничить употребление молока, кисломолочных продуктов с высоким процентом жирности. Разрешены нежирные йогурты, кефир, молоко, творог.
    3. Исключается сдоба, любые кондитерские изделия, содержащие какао продукты. Из хлебобулочных изделий разрешены лаваши, черный хлеб.
    4. Категорически запрещены любые алкогольные напитки.
    5. Не пить сладкую газировку, энергетики.
    6. Исключается фастфуд и колбасные изделия.

    При приготовлении блюд руководствуются следующими рекомендациями:

    • нужно обязательно следить за качеством приобретаемых продуктов питания;
    • мясо, рыбу, птицу нужно употреблять в отварном или тушеном виде, разрешены блюда из фарша – котлеты (паровые), тефтели, суфле;
    • каши и другие гарниры можно готовить с использованием растительного масла;
    • разрешены бутерброды с маслом и сыром (через день во время завтрака или обеда, но не чаще 1 раза в сутки).

    Диету нужно соблюдать не только перед анализами, но и до получения результатов и их расшифровки. При подтверждении диагноза гепатита С таким принципам питания следуют до восстановления печени.

    Другие правила подготовки:

    • сдавать кровь натощак;
    • за несколько часов до посещения клиники нельзя курить;
    • за 1–2 дня ограничить физические нагрузки (это не означает постельный режим, но от посещения тренировки или спортивного зала лучше отказаться).

    При выборе клиники, где сдать кровь на маркеры гепатита С, можно руководствоваться несколькими критериями. Обследование проводят бесплатно (при наличии полиса ОМС и направления от терапевта) в поликлинике по месту жительства. Чтобы не ждать в очереди, некоторые пациенты предпочитают частные лаборатории. В таком случае документов от доктора не требуется, достаточно факта оплаты и личных данных. Последний способ удобнее и в плане получения результатов. Сейчас не обязательно повторно посещать лабораторию – бланк отправят по оставленному электронному адресу.

    Сколько ждать результатов, определяют в лаборатории. Обычно этот срок не превышает 3 дней. Средняя стоимость анализов зависит от региона. Например, для Москвы цена исследования ИФА составляет около 500 рублей.

    Диагностика гепатита С начинается со следующих маркеров: ИФА и ПЦР. Иммуноферментный анализ относят к группе рутинных и проводится как при подозрении на HCV, так и при профилактической диспансеризации. Как правило, назначают тест anti-HCV Тотал, определяющий общее количество антител без их дифференцировки на классы. В дальнейшем требуется проведение дифференцированного исследования, в ходе которого отдельно устанавливают титр иммуноглобулинов типа G и класса М.

    Более расширенный анализ на серологические маркеры HCV (определение антигенов) выполняется по строгим показаниям из-за сложностей и дороговизны проведения обследования.

    Следующий этап диагностики – полимеразная цепная реакция (ПЦР). Основной маркер наличия вируса – позитивный результат качественного теста. Обнаружение частиц патогена в плазме свидетельствует о заражении, дальнейшие тесты направлены на определение тяжести и активности вирусного патологического процесса.

    К числу обязательных относят исследования, которые на первый взгляд не имеют отношения к поражению печени. Но результат этих тестов необходим для определения хода лечения и предупреждения возможных осложнений терапии, определения противопоказаний.

    Так, нужно сдать кровь на:

    • ВИЧ;
    • иммунограмму;
    • коагулограмму;
    • биохимию;
    • печеночные пробы;
    • венерические заболевания;
    • другие формы вирусных гепатитов (особенно, HBV);
    • туберкулез;
    • беременность (для женщин детородного возраста).

    Но ход диагностического процесса иногда корректируют в зависимости от особенностей пациента. Например, получение ложных результатов ИФА возможно при:

    • беременности;
    • иммунодефиците (любой этиологии, в том числе вызванном приемом лекарств);
    • онкологических заболеваниях;
    • аутоиммунных процессах;
    • тяжелых системных инфекциях;
    • перенесенном HCV;
    • у детей, рожденных у инфицированных матерей (до 3–5 лет).

    При беременности проводят ИФА, но предупреждают женщину о возможности ложноположительных результатов. У остальных категорий пациентов серологическое исследование всегда выполняют вместе с качественной ПЦР. Косвенным признаком гепатита С, требующим ИФА, служит повышение уровня печеночных ферментов, билирубина и явные клинические признаки поражения печени.

    С учетом роста количества выявленных случаев инфицирования тестирование на маркеры HCV рекомендуют проводить ежегодно всем людям старше 18 лет. Но в особую группу риска попадают работники здравоохранения, зараженные ВИЧ, посетители сомнительных нелицензированных салонов красоты, мастеров, выполняющих пирсинг и тату, перманентный макияж, занимающихся мезотерапией. Также регулярное обследование требуется мужчинам и женщинам, ведущим беспорядочную половую жизнь, особенно если были случаи незащищенных сексуальных контактов.

    Несмотря на то, что практически все современные лаборатории в бланке указывают референсные значения, интерпретацию результатов всех исследований лучше доверить врачу. В целом, расшифровка серологических маркеров на гепатит С и данных ПЦР приведена в таблице ниже.

    Полученные результаты Возможная расшифровка (но конечные выводы должен делать только врач)
    Позитивный тест на общие антитела Является одним из маркеров HCV, но для исключения ложноположительного и ложноотрицательного результатов требуется подтверждение ПЦР
    Негативный тест на общие антитела Исследование демонстрирует, что человек не инфицирован. Но такой результат можно получить, если заражение произошло менее 4–6 недель назад или при ослабленной иммунной системе
    Обнаружение IgG Это один из маркеров носителя гепатита С, то есть проявляется при скрытом течении инфекции и отсутствии прогрессирования процесса. Также свидетельствует о хронической форме патологии. Но может обнаруживаться на протяжении многих лет после выздоровления
    Выявление IgМ Маркер острого вирусного процесса
    Выявление core-антигена Служит более сложным в выполнении аналогом качественной ПЦР, подтверждает инфицирование
    Положительная качественная ПЦР Один из основных маркеров патологии, однозначно свидетельствует о наличии заболевания

    Бывает, что анализ на РНК отрицательный, а маркеры положительные. То есть в крови пациента были обнаружены антитела к HCV, но последующая качественная ПЦР продемонстрировала негативный результат.

    Как правило, подобная ситуация – следствие ложноположительного ИФА, и человек, скорее всего, здоров. Но для исключения латентной инфекции тесты на обнаружение маркеров вируса проводят еще несколько раз с интервалом в 4–5 месяцев. Дополнительно необходимо точно установить причину ошибочного ИФА.

    источник

    Современная лабораторная диагностика HCV-инфекции основана на нескольких основных методиках исследования, которые делят на две группы в зависимости от технологии проведения – серологические и молекулярные. Эти анализы направлены на то, чтобы выявить основные маркеры гепатита С максимально точно и в кратчайшие сроки. В большинстве лабораторий сейчас применяют современные реагенты и оборудование, что позволяет поставить диагноз через 14–20 дней после заражения.

    Эксперты не могут озвучить точное количество инфицированных HCV, так как в подавляющем большинстве случаев через несколько недель после заражения происходит хронизация вирусного процесса. В дальнейшем болезнь часто протекает в скрытой, латентной форме годами. Более чем у половины пациентов патологию диагностируют случайно при обращении к врачу по другому поводу, прохождении диспансеризации, оформлении медицинской книжки, постановке на учет по причине беременности и т.д.

    По данным Всемирной организации здравоохранения, более полумиллиона человек ежегодно умирают от осложнений, вызванных HCV. Данная патология лидирует в перечне показаний для трансплантации печени.

    Несмотря на меры по профилактике распространения заболевания, появление высокоэффективных лекарственных препаратов и методов диагностики, позволяющих своевременно выявить и полностью излечить болезнь, остановить рост количества инфицированных не удается ни в одной стране мира.

    Возбудитель гепатита С, Hepatitis C Virus, относится к семейству Flaviviridae. Основу генома вируса составляет одноцепочечная РНК, включающая более 10 000 нуклеотидных остатков. Из-за неоднородности структуры специалисты выделили несколько генотипов HCV. Их распространенность не одинакова в различных уголках планеты. Но в большей степени диагностируют первый генотип (более 46% инфицированных), на втором месте – третий (треть случаев).

    Еще одной характерной особенностью возбудителя гепатита Ц является мутационная активность. Так, у пациента в рамках одного генотипа идентифицируют до 40 подвидов HCV. По этой причине специалисты не могут создать вакцину для пожизненной защиты от инфицирования.

    Заражение часто происходит при использовании одного шприца несколькими людьми для введения внутривенных наркотиков. Путь передачи болезни может быть также связан с применением уже использованных или недостаточно стерилизованных медицинских и/или косметологических инструментов. Возможно заражение при половом контакте, не исключен и вертикальный путь инфицирования.

    В 80% случаев болезнь протекает без выраженных клинических проявлений.

    Только у незначительного количества пациентов возникает один или несколько из таких симптомов:

    • повышение температуры без катаральных признаков;
    • усталость;
    • снижение аппетита;
    • тошноту с приступами рвоты;
    • боли в животе;
    • потемнение мочи;
    • появление у фекальных масс сероватого оттенка;
    • боли в суставах;
    • желтизна склер и кожных покровов (встречается относительно редко, только при желтушной форме заболевания).

    Что касается хронического течения патологии, период отсутствия симптомов может продолжаться вплоть до развития цирроза печени, печеночной недостаточности либо злокачественного онкологического образования.

    Острую форму HCV диагностируют крайне редко, что связывают с бессимптомным прогрессированием заболевания. Для выявления патологии используют серологические методы, направленные на определение ряда специфических иммуноглобулинов, которые являются обязательной частью иммунного ответа на попадание вирусного патогена внутрь гепатоцитов. Другим методом диагностики является определение структурных частиц вируса при помощи молекулярно-химических реакций.

    Что значит маркеры гепатита С? В медицинской литературе этот термин означает ряд высокоспецифичных лабораторных параметров, свидетельствующих о наличии острого либо хронического ВГС. Это, в частности, иммуноглобулины G и M (и их суммарный титр без дифференцирования на классы) и РНК (определенная часть генома) вириона. Соответственно, результаты, полученные в ходе выполнения ИФА и ПЦР (данные оценивают только в комплексе), и являются маркерами HCV.

    Читайте также:  Качественный анализ на гепатит с ифа

    В настоящее время существуют законодательно определенные критерии (на основе рекомендаций ВОЗ и Министерства здравоохранения), кому нужно обязательно сдавать анализ крови для выявления возможной HCV-инфекции:

    • в период вынашивания ребенка (в I и III триместре);
    • реципиентам донорского биологического материала (вне зависимости от его вида и количества), особенно если процедура и/или операция была проведена до 1992 года (именно тогда появились достоверные методы исследования, позволяющие выявить основные маркеры гепатита C);
    • работникам медицинской, косметологической, торговой сферы (в соответствии со сроками оформления медкнижки);
    • пациентам, регулярно проходящим процедуру гемодиализа, регулярно подвергающихся разнообразным инвазивным вмешательствам;
    • перед назначением операционных вмешательств;
    • перед началом курса химиотерапии;
    • при отклонениях в показателях печеночных проб (для исключения или подтверждения гепатита);
    • пациенты, состоящие на учете в специализированных клиниках и диспансерах на предмет пристрастия к наркотическим веществам;
    • персонал детских образовательных учреждений, интернатов (при регулярном прохождении диспансеризации);
    • члены семей и находящиеся в близком контакте с человеком с диагностированным ВГС;
    • лица с повышенным риском инфицирования (инъекционные наркоманы, люди, отдающие предпочтение гомосексуальным, случайным или коммерческим половым связям);
    • осужденные и пребывающие в местах лишения свободы;
    • доноры биологического материала, органов;
    • дети до достижения годовалого возраста (если выявлены положительные серологические маркеры вирусных гепатитов, то дольше) при наличии у матери диагностированного ВГС во время беременности;
    • у людей с ВИЧ.

    HCV-инфекция – серьезный диагноз, требующий немедленного начала терапии. Поэтому положительные маркеры, выявленные в одном из исследований, не являются показанием к приему лекарственных препаратов. Подтверждают наличие инфекции по нескольким специфическим анализам.

    Где сдать кровь на выявление HCV, решает пациент. Можно обратиться в поликлинику по месту жительства, записавшись на консультацию к терапевту или инфекционисту. Врач выдаст направление на проведение анализа, но перед этим придется сделать клиническое исследование крови, печеночные пробы. Стоимость тестов компенсируется по полису ОМС.

    Можно выполнить анализы в платной лаборатории. Там не требуется направление от врача. Стоимость в клиниках Москвы колеблется в пределах 3000–7000 тысяч рублей и выше в зависимости от разновидности диагностического теста и того, сколько маркеров необходимо определить.

    Все исследования, применяемые для диагностики HCV-инфекции, можно разделить на несколько групп. Проведение каждого анализа является обязательным до начала терапии, а некоторые исследования выполняются и на определенных этапах лечебного цикла для оценки правильности и эффективности подобранной противовирусной схемы.

    Для постановки диагноза врачу нужны следующие данные:

    1. Серологические маркеры вирусных гепатитов. Обнаруживаются вне зависимости от генотипа HCV. Это специфические антитела (anti-HCV) разновидностей G и/или M. Выявляются иммуноферментными методами (ИФА), технологиями иммунохемилюминисценции, иммуноблотинга и т.д. Изначально определяют суммарное количество антител (IgG + IgM) А подтверждающее исследование направлено на выявление антител к специфическим протеинам HCV, входящим в структуру капсида и оболочки, при помощи ИФА или иммуноблотинга.
    2. Молекулярные маркеры. Назначаются в качестве подтверждающих тестов для определения наличия РНК возбудителя патологии, оценки его количественного содержания. К этой же группе исследований относят генотипирующие анализы, предназначенные для установления разновидности вируса. Для проведения тестов используются различные методики постановки полимеразной цепной реакции (ПЦР).

    Следующий этап диагностики проводят только при положительном результате предыдущих тестов. По мнению специалистов у пациентов с первым генотипом HCV целесообразно определение уровня IL28B. Подобное исследование помогает прогнозировать эффективность противовирусного лечения. Но такая схема диагностики подходит при использовании интерфероновых схем терапии. Связь между показателем IL28B и действием современных лекарственных средств (Софосбувира, Асунапревира и т.д.) не установлена, потому необходимость в проведении такого исследования остается под вопросом.

    Первичная лабораторная диагностика HCV начинается с определения в сыворотке крови параметра anti-HCV. Положительный результат свидетельствует об активном течении патологического процесса (то есть заражении гепатитом С) либо о встрече иммунной системы организма с инфекцией в прошлом.

    В большинстве лабораторий Москвы и других крупных городов серологический маркер определяется при помощи иммуноферментных систем (ИФА) II и III поколения. Суть анализа состоит в захвате рекомбинантными белками антител к HCV из исследуемой сыворотки. Впоследствии они определяются вторичными антителами против Ig класса G и V, мечеными ферментами, которые катализируют течение цветной реакции.

    Тест-системы I поколения имели низкую специфичность, так как были способны обнаружить антитела, вырабатываемые к белку NS4. Чувствительность ИФА не превышала 70%, а сроки обнаружения иммуноглобулинов – минимум 16 недель с момента инфицирования.

    ИФА II поколения способны выявить антитела к участку генома core, NS3 и NS4, что повышает специфичность теста до 95%, снижает риск получения ложноположительных результатов и сокращают срок обнаружения иммуноглобулинов до 10 недель от дня попадания РНК вируса в кровь человека.

    Тест-системы ИФА III поколения разработаны на основе антигена NS5 и высокоиммуногенного эпитопа (части молекулы антигена) NS3. Подобная техника выполнения анализа обеспечивает срок сокращения серологического окна: положительные маркеры (либо отрицательный результат) можно получить уже на 4–6 неделе после заражения. Чувствительность ИФА последнего поколения достигает 99%.

    Несмотря на то, что серологическое исследование является одним из золотых стандартов диагностики HCV, возможно получение ложноположительных или ложноотрицательных результатов, связанных не с качеством тест-систем, а особенностями состояния пациента.

    Так, на проведение ИФА могут повлиять:

    • аутоиммунные поражения суставов, особенно при положительном ревматоидном факторе, и другие заболевания подобного генеза;
    • беременность;
    • регулярное проведение гемодиализа;
    • тяжелые иммуносупрессивные состояния (например, на фоне ВИЧ);
    • гематологические злокачественные новообразования.

    Современные тест-системы, дополненные рекомбинантными NS5, специфичны и чувствительны на 99,95% не реагируют на наличие в крови ревматоидного фактора и/или С-реактивного белка.

    Серологический скриннинг является обязательным, но недостаточным компонентом диагностики HCV. Для подтверждения результатов анализа обязательно назначают исследование методом полимеразной цепной реакции.

    Сейчас доступны качественные и количественные способы выявления РНК возбудителя вирусного гепатита С. Первая методика предназначена для подтверждения диагноза HCV-инфекции у лиц с положительным anti-HCV и для обследования донорского материала.

    Количественный анализ служит основным маркером определения вирусной нагрузки. Является ключевым для оценки активности патологического процесса и эффективности противовирусной терапии. Применяемые тест-системы позволяют провести полимеразную цепную реакцию в режиме «real time». Диапазон вирусной нагрузки колеблется в пределах от 10–15 до 10 млн. МЕ/мл.

    Техника количественной полимеразной цепной реакции – маркер репликации хронического вирусного гепатита С. Согласно современным рекомендациям, анализ проводят на 4–12–24 неделе лечения (и дополнительно на 48 при проведении интерфероновой терапии). Повторно исследование делают через 24 и 48 недель после окончания приема и/или инъекций медикаментов.

    Отрицательный результат количественной ПЦР на 4 неделе лечения – один из основных факторов быстро вирусологического ответа и благоприятного исхода заболевания. Отсутствие РНК вируса на 24 неделе после завершения терапии является признаком выздоровления.

    После базовых диагностических тестов и подтверждения положительных маркеров гепатита С обязательно проведение генотипирования. От результатов этого исследования зависит тактика дальнейшей терапии и прогноз развития риска осложнений. Определение генотипа HCV выполняется путем анализа нуклеотидной последовательности участка NS5 протеина вируса.

    Но применяемые для генотипирования тест-системы недостаточно совершенны и не могут точно идентифицировать недавно выявленные, редко встречающиеся генотипы (в частности, 7,8 и 9).

    В последних клинических исследованиях доказана роль определения полиморфизма гена IL28B у пациентов с генотипом 1а и 1b HCV. Проведение анализа важно для выбора между интерфероновыми схемами терапии и приемом комбинации противовирусных лекарственных препаратов.

    Пункционная биопсия печени также входит в перечень необходимых для пациента с вирусом гепатита С анализов. Процедура позволяет оценить тяжесть структурных изменений в печеночной ткани, установить локализацию и распространенность фибротического процесса, некроза гепатоцитов, наличие злокачественной малигнизации клеток (при длительном течении хронического гепатита С), роль сопутствующих осложнений в повреждениях печени.

    Но перед выполнением процедуры необходимо принять во внимание несколько факторов:

    1. Оценивают соотношение целесообразности проведения биопсии и потенциального вреда здоровью пациента.
    2. Перед манипуляцией делают УЗИ для оценки риска возможных осложнений. В идеале пункцию также нужно проводить под ультразвуковым контролем.
    3. За несколько дней до процедуры выполняют коагулограмму, определяют протромбиновое время и протромбиновый индекс. Если количество тромбоцитов менее 90 тыс. клеток/мм3, биопсию откладывают или выполняют при наличии строгих жизненных показаний.
    4. Перед манипуляцией необходимо взять письменное согласие пациента на процедуру.
    5. При необходимости (например, перевозбуждении) больному дают седативные средства (при отсутствии противопоказаний).
    6. После проведения забора ткани оценивают количество и качество биоптата. При необходимости процедуру сразу же повторяют.
    7. На протяжении 8 часов после манипуляции пациент должен оставаться под медицинским наблюдением.

    Еще одним сравнительно новым методом оценки состояния печени является эластометрия, проводимая с использованием приборов ФиброСкан, ФиброТест, ФиброМетр и др. Преимуществом данного способа диагностики служит неинвазивность, быстрое получение результатов и безболезненность, что важно в педиатрической практике. Но проведение исследования затруднительно при избыточном весе пациента, наличии стеатоза, превышении уровня печеночных ферментов в 3 раза и более.

    Для получения точных результатов важно соблюдать правила, предписывающие, как сдавать кровь и готовиться к проведению исследования.

    Все аспекты необходимо уточнить у врача, но перечень стандартных рекомендаций включает:

    • соблюдение диеты (№5 или №5а) с ограничением жирного, жареного, копченого за 7–10 дней до процедуры;
    • строгое ограничение алкоголя за 2–2,5 недели до выполнения анализа;
    • отказ от курения за 12–14 часов до забора крови;
    • сдачу крови строго натощак (последний прием пищи за 12 часов до посещения лаборатории).

    Результаты может быть искажены при приеме некоторых лекарственных препаратов. Поэтому при расшифровке данных необходимо сообщить врачу о каких-либо принимаемых медикаментах.

    Сколько ждать результатов исследования зависит от загруженности лаборатории, технологической оснащенности (иногда требуется транспортировка биологического материала). В среднем постановка полимеразной цепной реакции или выполнение ИФА занимает от 2 до 5 дней. Некоторые клиники предлагают услугу платного срочного исследования.

    Диагностика гепатита С проводится в несколько этапов.

    Показанием для определения серологических маркеров методом ИФА (anti-HCV Total) служат:

    • беременность (первый и третий семестр);
    • отношение к группам риска по ВГС;
    • ежегодное оформление медицинской книжки;
    • повышение уровня печеночных трансаминаз и/или билирубина;
    • самостоятельное желание пациента.

    Для подтверждения диагноза HCV при положительных результатах серологического исследования назначают качественный анализ ПЦР. Обнаружение РНК вируса свидетельствует об остром или хроническом течении вирусной инфекции, что требует дальнейшего обследования пациента для подготовки к проведению терапии.

    Назначают следующие диагностические тесты:

    • определение иммуноглобулинов G и М для установления стадии заболевания (острая, хроническая, рецидив латентного течения инфекции);
    • оценка вирусной нагрузки;
    • генотипирование;
    • • определение степени поражения печени.

    Обязательны и другие исследования: клинические анализы крови, мочи и кала, выявление возможных сопутствующих коинфекций (ВИЧ, аутоиммунные заболевания), исключение или подтверждение беременности.

    Биологическим материалом для проведения ИФА и ПЦР является сыворотка крови. Реже исследование проводят на биоптате печени, но такой тест трудоемкий, дорогостоящий и требует выполнение инвазивных медицинских процедур.

    В 2017 году на фармацевтическом рынке появились экспресс-тесты, позволяющие проводить предварительную диагностику гепатита С по образцу слюны. Преимуществом набора является возможность выполнения самостоятельно в домашних условиях. Но результат экспресс-теста также требует подтверждения, несмотря на то, что его специфичность достигает 96%.

    Расшифровка серологических маркеров на гепатит С обязательно проводится в тандеме с данными полимеразной цепной реакции. Значение полученных результатов приведено в таблице ниже.

    • минимальную вирусную нагрузку (маркер носительства гепатита С), когда уровня РНК HCV недостаточно для обнаружения стандартными тест-системами;
    • у детей до 3 лет – наличие в крови антител инфицированной вирусом матери;
    • период после выздоровления;
    • ложноположительный результат (например, на фоне беременности).
    Определяемый показатель Возможный диагноз
    Положительный anti-HCV
    На фоне отрицательного результата полимеразной цепной реакции
    На фоне положительного результата качественной ПЦР Подтверждение диагноза острого или хронического гепатита
    Положительные данные качественного анализа методом полимеразной цепной реакции – маркер HCV-инфекции
    При IgM «+» и отрицательном титре IgG Свидетельствует об остром течении заболевания и недавнем заражении (до полугода). Прогноз благоприятный, лечение могут отсрочить на несколько недель (4–6) из-за вероятности самостоятельного излечения без медикаментозного вмешательства
    При IgG «+» и отсутствии IgM Указывает на наличие хронической инфекции. Иногда такой результат – маркер носителя гепатита С, когда болезнь протекает без выраженной клинической картины
    При IgG «+» и IgM «+» Симптом острого рецидива хронического патологического процесса

    Иногда пациенты и врачи сталкиваются с ситуацией, когда качественный анализ методом ПЦР на РНК отрицательный, а маркеры положительные (при проведении серологического обследования).

    В таком случае доктора придерживаются следующей тактики:

    1. Повторная постановка полимеразной цепной реакции для исключения ошибочного результата вследствие лабораторной ошибки.
    2. Исключение/подтверждение заболеваний, синдромов и состояний, которые могут быть вероятной причиной ложноположительного результата ИФА.
    3. Сбор анамнеза. Такая картина характерна после перенесенного острого гепатита С. При этом человек может сам не знать о прошедшем заболевании. Сопоставление симптоматики (в том числе неспецифической), предположение пути заражения и данных клинических исследований позволяют доктору предположить такой исход патологического процесса.
    4. Повтор анализа через 3–4 недели, когда можно исключить вероятность диагностического окна.

    Но вне зависимости от результатов исследований трактовать полученные данные должен только врач. Специалисты предостерегают от самостоятельной терапии. Комбинация противовирусных препаратов и длительность их применения подбирается с учетом генотипа HCV наличия или отсутствия коинфекций и ряда других факторов.

    источник