В чем изменяют гемоглобин при анализах

Министерство здравоохранения Украины

Запорожский государственный медицинский университет

Кафедра биохимии и лабораторной диагностики

Тема: «Изменение общего анализа крови при разных патологических состояниях»

1.4. Эритроцитарные индексы

1.4.1. Средний объем эритроцитов

1.4.2. Среднее содержание гемоглобина в эритроците

1.4.3. Средняя концентрация гемоглобина в эритроците

1.4.4. Ширина распределения эритроцитов по объему

1.6.6. Количество и процент средних клеток

1.7.1. Средний объем тромбоцитов

1.7.2. Ширина распределения тромбоцитов по объему

2. Скорость оседания эритроцитов

3. Подготовка пациента к сдаче крови на общий анализ и СОЭ

4. Правила забора крови на общий анализ и СОЭ

Функции. Кровь — это жидкая ткань, выполняющая различные функции, в том числе, транспорта кислорода и питательных веществ к органам и тканям и выведения из них шлаковых продуктов. Состоит из плазмы и форменных элементов: эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов.

Общий анализ крови в «Лабораторной диагностике» включает в себя определение концентрации гемоглобина, количества эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов, величины гематокрита и эритроцитарных индексов, подсчет лейкоцитарной формулы, тромбоцитарных индексов.

Показания к назначению анализа: Общий анализ крови широко используется как один из самых важных методов обследования при большинстве заболеваний. Изменения, происходящие в периферической крови, неспецифичны, но в то же время отражают изменения, происходящие в целом организме.
Подготовка к исследованию: взятие крови проводят утром, натощак.
Материал для исследования: цельная венозная кровь (с ЭДТА).
Метод определения: автоматический счетчик крови Hemolux-19: подсчет форменных элементов и определение MCV по изменению импеданса; гемоглобин — цианметгемоглобиновый метод; гематокрит, MCH, MCHC — расчетные методы.
Сроки исполнения: 1 день.

1.1. Гемоглобин (Hb, hemoglobin)

Гемоглобин — дыхательный пигмент крови, участвующий в транспорте кислорода и углекислоты, выполняющий также буферные функции (поддержание рН). Содержится в эритроцитах (красные кровяные тельца крови). Состоит из белковой части — глобина — и железосодержащей порфириновой части — гема. Это белок с четвертичной структурой, образованной 4 субъединицами. Железо в геме находится в двухвалентной форме.

Физиологические формы гемоглобина: 1) оксигемоглобин (HbО2) — соединение гемоглобина с кислородом образуется, преимущественно, в артериальной крови и придает ей алый цвет (кислород связывается с атомом железа посредством координационной связи); 2) восстановленный гемоглобин или дезоксигемоглобин (HbH) — гемоглобин, отдавший кислород тканям; 3) карбоксигемоглобин (HbCO2) — соединение гемоглобина с углекислым газом; образуется, преимущественно, в венозной крови, которая вследствие этого приобретает темно-вишневый цвет.

Патологические формы гемоглобина: 1) карбгемоглобин (HbCO) — образуется при отравлении угарным газом (СО), при этом гемоглобин теряет способность присоединять кислород; 2)метгемоглобин — образуется под действием нитритов, нитратов и некоторых лекарственных препаратов (происходит переход двухвалентного железа в трехвалентное с образованием метгемоглобина- HbMet).

При цианметгемоглобиновом методе определения содержания гемоглобина в крови двухвалентное железо гемоглобина окисляется до трехвалентного железа метгемоглобина, затем метгемоглобин переводится в стабильный цианметгемоглобин цианидом. Таким образом, этим методом определяются все формы гемоглобина без их дифференцировки.

Содержание гемоглобина в крови у мужчин несколько выше, чем у женщин. У детей первого года жизни наблюдается физиологическое снижение концентрации гемоглобина. Снижение содержания гемоглобина в крови (анемия) может быть следствием повышенных потерь гемоглобина при разного рода кровотечениях или повышенном разрушении (гемолизе) эритроцитов. Причиной анемии может быть нехватка железа, необходимого для синтеза гемоглобина, или витаминов, участвующих в образовании эритроцитов (преимущественно В12, фолиевая кислота), а также нарушение образования клеток крови при специфических гематологических заболеваниях. Анемия может возникать вторично при разного рода хронических соматических заболеваниях.

Повышение уровня гемоглобина:

заболевания, сопровождающиеся увеличением количества эритроцитов (первичные и вторичные эритроцитозы);
сгущение крови;
врожденные пороки сердца;
легочно-сердечная недостаточность;
физиологические причины (у жителей высокогорья, летчиков после высотных полетов, альпинистов, после повышенной физической нагрузки).

Понижение уровня гемоглобина:

анемии различной этиологии (основной симптом).

1.2. Гематокрит (Ht, hematocrit)

Гематокрит — это доля (%) от общего объема крови, которую составляют эритроциты. Гематокрит отражает соотношение эритроцитов и плазмы крови, а не общее количество эритроцитов. Например, у пациентов в состоянии шока за счет сгущения крови гематокрит может быть нормальным или даже высоким, хотя, вследствие потери крови, общее число эритроцитов может значительно снижаться. Поэтому гематокрит нельзя использовать для оценки степени анемии вскоре после потери крови или гемотрансфузии. Гематокрит может несколько снижаться при взятии крови в положении лежа. Ложно повышенные результаты могут наблюдаться при длительном сжатии вены жгутом во время взятии крови. Ложное снижение гематокрита может наблюдаться вследствие разведения крови (взятие крови из той же конечности непосредственно после внутривенных введений).

эритремия;
симптоматические эритроцитозы (врожденные пороки сердца, дыхательная недостаточность, гемоглобинопатии, новообразования почек, сопровождающиеся усиленным образованием эритропоэтина, поликистоз почек);
гемоконцентрация при ожоговой болезни, перитоните, дегидратации организма (при выраженной диарее, неукротимой рвоте, повышенной потливости, диабете).

анемия;
гипергидратация;
вторая половина беременности.

1.3. Эритроциты (красные кровяные тельца, red blood cells, RBC)

Эритроциты — форменные элементы крови, содержащие гемоглобин, транспортирующие кислород и углекислый газ. Зрелые эритроциты не содержат ядра, имеют дисковидную форму. Средний срок жизни эритроцитов — 120 дней. У новорожденных размер эритроцитов несколько больше, чем у взрослых. Увеличение количества эритроцитов называется эритроцитозом (полиглобулией). Снижение количества эритроцитов (и гемоглобина) — анемией.

Физиологический эритроцитоз отмечается у новорожденных в первые дни жизни, при стрессовом состоянии, повышенной физической нагрузке, усиленном потоотделении, голодании. Количество эритроцитов может физиологически несколько снизиться после еды, в период между 17.00 и 7.00, а также при взятии крови в положении лежа. После длительного сжатия жгутом возможно получение ложно завышенных результатов.

Кроме определения количества эритроцитов в диагностике используют ряд морфологических характеристик эритроцитов, которые оцениваются с помощью автоматического анализатора (см. Эритроцитарные индексы MCV, MCH, MCHC).

Макроцитоз — состояние, когда 50% и более от общего числа эритроцитов составляют макроциты. Отмечается при В12 и фолиеводефицитных анемиях, болезнях печени.

Микроцитоз — состояние, при котором 30-50% составляют микроциты. Наблюдается при железодефицитной анемии, микросфероцитозе, талассемии, свинцовой интоксикации.

источник

Общий анализ крови, как открытая книга для специалиста, по которой он может судить о состоянии здоровья пациента, о предрасположенности к некоторым патологиям, об образе жизни. Это один из первых анализов, которые сдает человек при диагностике того или иного заболевания. Такой показатель, как гемоглобин в разном возрасте, входит в группу обязательных при исследовании крови. А изменение уровня гемоглобина очень нежелательное явление, которое имеет множество причин.

Гемоглобин – важнейшая фракция человеческой крови, состоящая из гемы- молекулы железа и глобина – белковой части. Он не может самостоятельно передвигаться в кровяном русле, поэтому его транспорт и доставку в органы и ткани осуществляют эритроциты. Роль гемоглобина — способность связываться с молекулами газа и мельчайшими веществами, образующимися в процессе жизнедеятельности клетки.

Структура гемоглобина

На этом основаны самые важные функции, выполняемые гемоглобином: обеспечение дыхания и выделения, поддержание кислотно-щелочного баланса в клеточных структурах.

Соединяясь в кровеносных сосудах легочной ткани с молекулами кислорода, гемоглобин доставляет их в мельчайшие капилляры, кровоснабжающие органы. Там непрочная связь разрывается, и место кислорода занимает углекислый газ, который относится гемоглобином обратно в легкие по второму кругу кровообращения.
Гемоглобин способен выводить из крови не только углекислый газ, но и катионы водорода, тем самым, регулируя кислотность внутриклеточной среды. Что обеспечивает нормальное протекание биохимических процессов.
Он способен соединяться с токсинами и солями тяжелых металлов, очищая организм от них, но при этом сам погибает. Особенно опасен в этом отношении угарный газ, так как существенно нарушает снабжение тканей кислородом. Больше всего в таком случае страдает головной мозг.

Общий анализ крови на гемоглобин для женщины и мужчины проводится в общем комплексном исследовании. Правила подготовки к сдаче включают в себя: соблюдение малокалорийной диеты в течение двух дней; отказ от приема лекарственных препаратов на это же время; исключение тяжелых физических нагрузок перед сдачей. Кровь берут натощак в утреннее время, на исследование берется капиллярная кровь из пальца. При необходимости врач может назначить биохимический анализ крови на выявление уровня сывороточного железа.

Расшифровка анализа крови на гемоглобин проводится в привязке к возрасту и полу пациента. У взрослых людей нормы гемоглобина стабильные, у детей они различаются по возрастным категориям.

Таблица нормы гемоглобина по возрасту

Гемоглобин у ребенка на первой неделе жизни до 200 г/л, впоследствии они выравниваются и к 17 -18 годам достигают пределов своей половозрелой группы.

Гемоглобин у женщин составляет 120 -140 г/л, причем уровень в составе крови изменяется в течение месяца и напрямую зависит от менструального цикла.

Гемоглобин у мужчин 140 -160 г/л. В случае с сильным полом, уровень гемоглобина у парней наблюдается стабильный, без физиологических изменений. Однако у курильщиков (а таких среди мужчин не мало) количество гемоглобина, как правило, повышено, при этом его качество страдает в значительной мере.

Какие изменения происходят при беременности? В первом триместре гемоглобин во время беременности обычно держится в пределах нормы, незначительное понижение 110 – 115 г/л, не считается патологией. Уровень гемоглобина при беременности начинает падать примерно с 24 недели и может снизиться до 100 г/л. Опасение вызывает понижение у беременных раньше означенного срока или более низкие цифры.

При стабильно пониженном уровне гемоглобина у женщин и подозрении на железодефицитную анемию назначается биохимическое исследование крови на содержание в сыворотке железа. В норме количество железа в крови здорового человека варьируется от 5 до 7 г. Его концентрация может незначительно меняться в течение одних суток, в среднем составляет 10,7 – 21,5ммоль/л у мужской половины и 14,3 – 21,0ммоль/л – у представительниц слабого пола. С возрастом эта разница постепенно стирается, и в пожилом возрасте наблюдается дефицит железа у обоих полов, примерно, в равной степени.

Низкий гемоглобин — не самостоятельная патология, это сигнал о том, что в организме происходят неблагоприятные изменения.

Проявляются они:

Повышенная утомляемость, слабость, апатия.
Трудности с концентрацией внимания из-за хронической гипоксии мозга (кислородное голодание).
Головные боли различной степени тяжести.
Снижение АД, сбои в ритмах сердца.
Нарушение менструации у женщин, потенции – у мужчин.

Все эти симптомы низкого количества гемоглобина редко вызывают серьезной озабоченности и воспринимаются как банальная усталость. Что приводит к усугублению ситуации и развитию более тяжелых симптомов:

Бледность, как результат анемии, сухость слизистых и кожных покровов.
Ломкость и выпадение волос.
Симптомы одышки, затруднение дыхания.
Сбои в работе сердца.
Снижение иммунитета, как результат частые инфекционные заболевания, в том числе грибковые поражения кож и слизистых оболочек.
Характерный признак недостатка железа в организме – измененные вкусовые предпочтения (тяга поесть мел, землю, глину).

Высокий гемоглобин у взрослых и детей так же не является благом для организма. В народе этот процесс называется сгущением крови. Результатом таких изменений могут стать: инфаркт миокарда, гипертонический криз, обмороки. Причиной повышения концентрации гемоглобина у людей становятся: курение, регулярное употребление алкоголя, недостаточный питьевой режим, у женщин — период беременности.

Изменение количества сывороточного железа напрямую связано с уровнем гемоглобина.

Казалось бы, как гемоглобин может быть связан с гипергликемией. Оказывается, его соединение с молекулой глюкозы гораздо прочнее прочих. Связываясь, таким образом, он получает название гликированный гемоглобин или гликогемоглобин. Опасность такого содружества в том, что сахар, присоединяясь к гемоглобину, может циркулировать в общем кровотоке до четырех месяцев, не подвергаясь распаду. При этом он оказывает деструктивное воздействие на углеводный обмен, к тому же, занимая «законное место» кислорода. Чем больше глюкозы выходит в плазму, тем большее количество гемоглобина подвергается ее воздействию. Такая длительная связь носит необратимый характер.

Гликированный гемоглобин определяется в биохимии крови специальными методами исследования. По его количеству, возможно, установить точный диагноз, определить форму и стадию заболевания, контролировать результативность проводимой терапии, спрогнозировать возможные осложнения.

Таблица предельного уровня гликированного гемоглобина

Дефицит железа в организме – явление не редкое, поскольку самостоятельно производить этот элемент наш организм не в состоянии, а потребляемая пища, зачастую, не соответствует потребностям организма. Внешние проявления недостатка железа в крови очень размыты, их легко принять за усталость и нервное перенапряжение: сонливость; приступы головокружения; нарушение зрения; головные боли различной силы; ломкость ногтей, волос; бледность, синюшность губ. Причин возникновения железодефицитной анемии множество, прежде чем прибегать к лечению, следует пройти всестороннее обследование.

Для того, чтобы количество гемоглобина в крови держалось в нормативных рамках, следует придерживаться простых правил организации питания и физической активности:

В рационе питания (особенно детей, подростков, беременных и кормящих матерей) присутствие мясной продукции обязательно, поскольку основное количество железа человек получает из продуктов животного происхождения. Для удерживания необходимого количества гемоглобина необходимы витамины В6 и В12, содержащиеся в мясо-молочной продукции, яйцах, бобовых, зерновых.
Неоценимую помощь в поддержании гемоглобина и железа в крови могут оказать соки свежих овощей, фруктов и ягод, особенно свекольный, морковный, яблочный.

источник

Гемоглобин – белок, содержащийся в эритроцитах и осуществляющий обмен кислорода между легкими и тканями организма. Имеет в своем составе железо. Также он обуславливает цвет крови.

Синонимы английские

Hemoglobin, Haemoglobin, Haemoglobin concentration, Hb, Hgb.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Общая информация об исследовании

Измеряется количество гемоглобина, содержащегося в эритроцитах белка, который доставляет кислород к тканям и органам, а углекислый газ – от тканей и органов к легким, где он выдыхается.

Это происходит за счет того, что кислород способен связываться железом, атомы которого «встроены» в гемоглобин. «Подходя» к тканям, эритроциты освобождаются от кислорода и забирают «отработанный» диоксид углерода (углекислый газ).

Гемоглобин состоит из аминокислот, образующих белковый комплекс глобин, и гема, содержащего железа. Образование глобина и гема у некоторых людей может нарушаться, что грозит анемией.

Сниженный уровень гемоглобина, скорее всего, свидетельствует об анемии – состоянии, при котором организм не получает достаточно кислорода, что вызывает слабость и быструю утомляемость.

Гемоглобин повышается при увеличении количества эритроцитов и снижается, соответственно, если их становится меньше.

Снижение количества эритроцитов может происходить из-за уменьшения их образования в костном мозге, их потери в результате кровотечения или разрушения внутри организма.

Для чего используется исследование?

Чтобы оценить тяжесть анемии или полицитемии.
Чтобы отслеживать в динамике эффективность терапии этих состояний.

Когда назначается исследование?

Входит в рутинный клинический анализ крови, который может назначаться по различным показаниям.

Гемоглобин, г/л

Причины изменения уровня гемоглобина

Уровень гемоглобина выше у мужчин, так как андрогены стимулируют образование эритроцитов.

Причины повышения уровня гемоглобина:

дегидратация (обезвоживание) из-за сгущения крови – гемоконцентрации;
истинная полицитемия в результате избыточной продукции эритроцитов в костном мозге;
хроническая обструктивная болезнь легких; хроническая сердечная недостаточность.

Причины понижения уровня гемоглобина:

железо-, B₁₂— или фолиево-дефицитная анемия;
острое или хроническое кровотечение (хотя во время кровотечения или сразу после него уровень гемоглобина будет повышен),
нарушения синтеза гемоглобина (серповидно-клеточная анемия, талассемия);
хронические болезни почек (как правило, из-за уменьшения синтеза гормона эритропоэтина, который стимулирует образование эритроцитов в костном мозге);
цирроз печени;
микседема (снижение функции щитовидной железы);
гемолиз (разрушение эритроцитов), который может происходить по разным причинам – из-за наследственного дефекта эритроцитов, в результате появления антител к собственным эритроцитам или токсического действия при малярии;
онкологические заболевания костного мозга или метастазы других опухолей в костный мозг;
апластическая анемия;
системные заболевания соединительной ткани;
хронические инфекции.

Что может влиять на результат?

Повышенный уровень гемоглобина наблюдается:

у людей, поднимающихся на большую высоту, так как их организм адаптируется к пониженной концентрации кислорода;
у курильщиков (вследствие кислородного голодания тканей);
при влиянии гентамицина и пентоксифиллина.

Уровень гемоглобина понижен:

в норме у беременных,
у соблюдающих вегетарианскую диету,
после сдачи крови,
при выраженной липемии и повышении количества лейкоцитов,
при сдаче крови в положении лежа (снижение до 5 %).

Следует понимать: нормальный уровень эритроцитов не всегда означает, что содержание в них гемоглобина будет тоже в норме.

Кто назначает исследование?

Врач общей практики, терапевт, гематолог, нефролог, хирург.

источник

Определение показателей содержания в крови жизненно важных элементов, таких, как гемоглобин, эритроциты, лейкоциты и др., является основой точного диагноза. Своевременное выявление отклонений может сохранить жизнь и здоровье пациента. Не всегда изменения нормальных показателей происходит явно – при некоторых заболеваниях патологические процессы протекают бессимптомно. Регулярная диагностика состояния организма поможет предотвратить необратимые изменения, и уровень гемоглобина является одним из самых важных показателей.

Высокомолекулярное органическое вещество, насыщенное железом – это гемоглобин, который, по сути, является белком животных, имеющих систему кровообращения. В организме человека это железосодержащее вещество находится в цитоплазме красных кровяных клеток (эритроцитов), его синтез происходит в костном мозге. Гемоглобин придает эритроцитам красный цвет. Роль клеток, содержащих атом железа, заключается в насыщении кислородом тканей и органов и удалении из них продуктов метаболизма (углекислого газа).

Помимо транспортировки кислорода, участвуя в процессе дыхания, высокомолекулярное вещество выполняет буферную функцию, которая заключается в поддержании постоянства кислотно-основного равновесия кровеносной системы. Гемоглобиновая буферная система является одной из самых мощных в организме, занимая почти четверть всей буферной емкости (совокупности всех живых клеток плазмы и крови).

По своему строению гемоглобин относится к классу хромопротеинов (сложных белков, состоящих из простого белка и небелкового компонента). Вне эритроцитов этот сложный белок представляет собой высокотоксичное вещество и попадание его в плазму крови приводит к тканевой гипоксии. Дефицит или избыток этого элемента в крови является патологией и требует соответствующего лечения. Для контроля уровня железосодержащего белка следует периодически сдавать анализ крови.

Точную информацию о количестве белка группы хромпротеинов в составе крови можно получить, только сдав необходимые анализы. При расшифровке результатов диагностики следует иметь в виду, что уровень железосодержащего вещества может меняться на протяжении жизни. На показатели влияют такие факторы, как возраст, качество питания, вредные привычки, физическая активность. Гемоглобин в анализе крови у новорожденного очень высокий и ему отведен специальный термин – фетальный. К первому году жизни ребенка фетальный белок полностью разрушается и замещается взрослым.

Показатели гемоглобина у мужчин выше, чем у женщин, что объясняется стимулирующим действием мужского гормона тестостерона на процесс образования крови. Установленными нормальными значениями являются следующие:

Постепенное увеличение до показателей, как у взрослых

Снижение концентрации железосодержащего белка в крови называется малокровие или анемия. Это состояние характеризуется уменьшением количества эритроцитов и проявляется в специфических симптомах. Как самостоятельное заболевание анемия не рассматривается – она является одним из признаков патологических процессов, происходящих в организме. Для применения в клинической практике малокровие по степени выраженности снижения уровня гемоглобина классифицируется на следующие группы:

Степень выраженности симптомов

Общая слабость, повышенная потливость, перманентное чувство усталости, эмоциональный упадок

Головные боли, головокружение, повышенная сухость и шелушение кожных покровов, трещины в уголках губ, сонливость, постоянная усталость, аритмия, боли в сердце, одышка, нарушение пищеварения

Потеря сознания, алопеция, бледность кожных покровов, изменение структуры ногтей, разрушение зубной эмали, онемение конечностей, нарушение вкусовых и обонятельных ощущений

Пациенты, страдающие анемией, зачастую не подозревают о наличии заболевания и списывают повышенную утомляемость на стресс или недостаток сна. Обращение за врачебной помощью происходит только на третьей стадии болезни, когда появляются ощутимые проблемы с сердцем. Преуменьшение опасности малокровия может привести к тяжелым последствиям, поэтому анализ на гемоглобин относится к самым важным лабораторным исследованиям.

Анализ крови на гемоглобин является одним из самых массовых ввиду его важности для диагностической практики. Определение железосодержащего белка происходит путем анализа его производных, образованных в процессе реакций окисления и присоединения других химических элементов. Методы сапониновый, Сали, химический, спектрофотометрический, хоть и имеют высокую точность, но для рутинных лабораторных исследований не применяются ввиду трудоемкости и дороговизны процесса.

Появление современного диагностического оборудования существенно упростило проведение анализов. Применяемые сейчас методы простые и быстрые в исполнении. Основными способами определения содержания важного элемента в крови являются:

колориметрические (гемихромный, калибровочный, гемиглобинцианидный) – заключаются в добавлении к крови химических веществ и определении количества искомого вещества по интенсивности окраски полученного состава, достоинством этой группы методов является доступность, недостатком – вероятность погрешности;
газометрические – основаны на окислении биологического материала химическими элементами в щелочной среде и измерении количества выделяемой окиси углерода, способ отличается высокой точностью, но сложностью и длительностью расчетов;
выявление количественного содержания железа в молекуле белка – применение специфических реагентов (кислот, аминокислот) для придания характерного ультрафиолетового спектра поглощения и выявления содержания железа с помощью спектрофотометра, метод дает точные результаты, но занимает много времени.

Ввиду того, что кровь на гемоглобин, как самостоятельный анализ, назначается редко (чаще при сдаче общих анализов), требуется предварительная подготовка. Пациенту рекомендуется соблюдать ряд правил для того чтобы результаты анализов не были искажены нетипичной реакцией организма (например, на пищевые раздражители, лекарства, физическую нагрузку). Основные требования к подготовке заключаются в следующем:

за день до сдачи анализов воздержаться от интенсивных занятий спортом;
исключить из рациона сладкую и острую пищу;
в течение 3-4 дней до сдачи воздержаться от приема лекарственных средств;
кровь сдается утром натощак (в день сдачи можно пить чистую воду);
за час до сдачи анализа не курить.

Если же другие показатели не важны и значимым является только определение содержания белкового вещества, предварительная подготовка не требуется, так как количество белка за короткий промежуток времени не изменится, даже под воздействием внешних и внутренних факторов. Процедура заключается в проколе пальца и заборе небольшого количества крови, после чего материал передается в лабораторию для исследования. Результаты будут готовы через 1-2 дня.

В некоторых случаях определение количества железосодержащего белка не имеет диагностического значения и требуется определение его качественного состава. Важным анализом при подозрении на сахарный диабет является определение уровня гликозилированного (гликированного) гемоглобина, т.е. части белка, связанного с глюкозой. Этот показатель измеряется в процентном соотношении и показывает среднее количество глюкозы в организме за 100-120 дней. Сдача крови на гемоглобин этого типа происходит путем забора материала из вены и не требует особой подготовки.

Низкая, относительно нормальных значений, концентрация железосодержащего белка называется олигохромемия (другие термины – гемоглобинопения, железодефицитная анемия). Причиной гемоглобинопении часто являются заболевания или патологические изменения в организме. Наряду с болезнями железодефицитную анемию может спровоцировать несбалансированное питание или вегетарианство. Основными причинообразующими факторами пониженного уровня гемоглобина являются:

острые кровопотери;
внутренние кровотечения;
наличие новообразований (опухолей);
аутоиммунные заболевания;
поражения костного мозга;
продолжительное поражение организма инфекциями или паразитами (гепатит, пневмония, туберкулез, гельминтоз и др.);
патологические изменения состава крови;
нарушения выработки гормонов (щитовидной или половых желез);
неспособность организма усваивать железо;
нехватка витаминов группы В (являются катализатором синтеза железа);
прием некоторых лекарственных средств;
строгая диета, длительное голодание;
частое употребление кофе (происходит торможение процессов усвоения железа);
злоупотребление алкоголем.

Белок, содержащий железо, выполняет ряд важных функций в организме, и снижение его нормального значения приводит к нарушению работы всех систем, органов и тканей. Если анализы на гемоглобин показывают низкий его уровень – это свидетельствует о кислородном дефиците, последствия которого будут проявляться все сильнее при отсутствии предпринятых мер. Особую опасность снижение железосодержащего бека представляет для беременных женщин и маленьких детей. Критически низкий уровень этого элемента может спровоцировать преждевременные роды и даже вызвать гибель плода.

Последствия снижения белка, транспортирующего кислород, проявляются в симптомах гипоксии (кислородного голодания). На первой стадии изменения происходят в менее важных для жизни органах (кожа, ногти, волосы), организм перераспределяет запасы кислорода и пытается экономить энергию (упадок сил, обмороки). Если после этих признаков уровень белка не будет повышен, последствия могут быть такими:

нарушение менструального цикла (у женщин);
половая дисфункция (у мужчин);
остановка умственного и физического развития (у детей);
снижение иммунитета;
анорексия;
судороги нижних конечностей;
нарушение функционирования легких, сердца, центральной нервной системы;
летальный исход.

Тактическое лечение при сниженном уровне белка зависит от степени дефицита гемоглобина и заключается в выявлении и исключении причин снижения. При возникновении нехватки вещества вследствие несбалансированного рациона питания, повысить его уровень можно с помощью диеты. Но если отклонения от нормы вызваны другими факторами, возникает необходимость специализированного лечения с применением медикаментозных препаратов.

Для оптимизации питания при низком уровне железосодержащего белка следует знать, что железо (как белковый элемент) по скорости усвоения организмом подразделяется на два вида: гемовое (содержится в мясных продуктах) и негемовое (источник поступления – растительная пища). При употреблении в пищу мяса, усвоение железа составляет 20%, растительных продуктов – 6%. Диета для повышения уровня белка предполагает включение следующих продуктов:

печень (отварная);
овощи (свекла, морковь);
сыры;
желток;
мясо (кролика, индейки);
бобы, фасоль;
лесные орехи;
грибы;
ягоды (малина, черника);
фрукты (персики, абрикосы, яблоки).

Если корректировка питания по каким-либо причинам невозможна или не способствовала повышению уровня белка, назначается лечение с применением железосодержащих препаратов. Фармакологическая терапия должна проходить под контролем врача для выявления реакции организма пациента на принимаемые средства. Лечение происходит путем перорального приема таблеток или внутривенного введения препаратов (посредством капельниц или инъекций). Самыми популярными и часто назначаемыми средствами для повышения гемоглобина являются:

Гемобин;
Ферро-фольгамма;
Мальтофер;
Ировит;
Феррум Лек;
витаминные комплексы (Фенюльс, Нутримакс).

Если анализ на гемоглобин показывает высокое содержание этого элемента в организме – это не означает, что для беспокойства не причин. Слишком высокие показатели тоже свидетельствуют об отклонениях и могут быть признаками серьезных заболеваний. Так, возможными причинами отклонения от нормы уровня белка, содержащего железо, являются:

нарушение соотношения между притоком и оттоком крови;
изменения газового состава крови;
врожденные заболевания сердечно-сосудистой системы;
разрастание соединительной ткани легких патологического характера;
непроходимость кишечника;
дегидратация;
системные онкологические заболевания;
стрессовые состояния;
длительный прием диуретиков.

К другим факторам повышения уровня железосодержащего белка относятся условия образ жизни. Категория людей, для которых высокий уровень гемоглобина является нормой, — это жители горных районов, спортсмены (велосипедисты, горнолыжники, сноубордисты), курильщики. Еще одной причиной повышения белка является резкое увеличение количества эритроцитов, что бывает при переливании крови.

Гиперхромемия (повышение уровня железосодержащего белка) не рассматривается в клинической практике, как самостоятельное заболевание, но она может носить патологический характер и привести к развитию таких заболеваний, как:

стенокардия;
острая ишемия миокарда;
нарушение мозгового кровообращения;
сосудистый атеросклероз;
увеличение вязкости крови;
повышенное тромбообразование (как следствие сгущения крови).

Гипергемоглобинемия, не являющаяся физиологической аномалией, а выступающая, как проявление какого-либо заболевания, проявляется в следующих симптомах:

локальная гиперемия (покраснение отдельных участков кожи);
частые головокружения;
пересыхание слизистых оболочек, чувство жажды;
эмоциональный дисбаланс, нарушение биологических ритмов организма (бессонница ночью, сонливость днем);
боль в суставах и мышцах;
слабость;
проблемы с опорожнением кишечника (запоры).

Для приведения значений анализов к нормальным показателям следует выявить причину повышения уровня белка. После устранения причинообразующих факторов количество гемоглобина быстро нормализуется. Если выявить или исключить провоцирующие факторы не представляется возможным, основу лечения составляет диета, предполагающее ограничение или полный отказ от продуктов с высоким содержанием железа. Основные принципы питания для снижения уровня железосодержащего белка заключаются в следующем:

Продукты, от которых необходимо отказаться или максимально ограничить их употребление

источник

Гемоглобин (Hb) – молекула, с помощью которой переносится кислород. Она расположена внутри зрелых эритроцитов, лишенных ядер. Клетки получают кислород из альвеол легких, переносят его органам к клеткам-мишеням. От них получают углекислый газ, и переносят его обратно в легочную систему. Без этого действия невозможна жизнь человека. Существуют различные состояния, при которых гемоглобин может повышаться или снижаться. Для диагностики используют различные лабораторные методы определения функции соединения гемоглобина. Их подбирает врач индивидуально для каждого пациента.

У взрослого человека норма концентрации Hb зависит от пола:

женщины 11-14г/% или 110-140 г/л;
мужчины 12-16 г/% или 120-160 г/л.

Для мужчин норма более завышена, так как они имеют большую мышечную массу, по сравнению с женщинами.

Снижение концентрации гемоглобина наблюдается при следующих состояниях и заболеваниях:

сниженная концентрация эритроцитов в следствии железодефицитной, серповидно-клеточной анемии;
недостаточное количество веществ, которые влияют на продукцию эритроцитов (фолиевая кислота, витамин B12);
заболевание красного костного мозга.

Повышенная концентрация Hb наблюдается при следующих состояниях и заболеваниях:

повышенная продукция эритроцитов при заболевании красного костного мозга, злокачественных новообразованиях;
компенсаторное повышение количества эритроцитов вследствие сердечно-сосудистых и легочных заболеваний;
снижение количества плазмы крови вследствие чего число форменных элементов повышается в 1 л биологической жидкости.

Гемоглобин появляется в эритроцитах после утраты ядра и приобретении зрелости клетки. Местом утилизации красных кровяных клеток и Hb является селезенка. Жизненный цикл 1 клетки совместно составляет 120 дней. После гибели в кровь выделяется железо, которое поставляется в красный костный мозг. С помощью этого элемента продуцируются новые красные кровяные тельца.

Существуют следующие методы анализа гемоглобина в биологической жидкости:

После использования соответствующей методики чаще всего применяют полуавтоматический анализатор, который измеряет спектр длины волны молекулы Hb.

Подсчет показателей осуществляется не только в крови, но и в моче, так как в мочевыделительной системе возможны небольшие или значительные кровотечения.

Полуавтоматический гематологический анализатор полностью исключают реставрации врачебные ошибки в отчете необходимого значения. Но прибор не сможет увидеть и распознать нарушение различных параметров.

Ручной подсчет основывается на применении реактива и биологической жидкости. Метод не подсчитывает число клеток, а определяется их присутствие или отсутствие. Подходит для мочи

Унифицированная методика – способы измерения показателей, применяемые в большинстве лаборатории. Являются точными, быстрыми, практичными. Для Hb это гемицианидный метод с фотоколориметрическим подсчетом. Позволяет выявить точное количество показателя с помощью подсчета длины волны на специализированном полуавтоматическом приборе.

Второй унифицированной методикой является гимехромный способ. Его принцип тот же, но используются более качественные реактивы, которые не приносят вреда здоровью врачей.

У гемоглобина имеется множество форм, поэтому рассчитать длину его волны очень сложно. Для упрощения подсчета применяют специализированные химические вещества, которые переводит его в метгемоглобин.

Для получения точных результатов необходимо использовать трансформирующий раствор, специализированные измерительные пробирки, фотоэлектроколориметр. Hb имеет длину волны 540 м. Именно в таком пределе прибор подсчитывает заданный показатель.

Полученные данные подставляют в формулу, которая переводит общее количество показатели в граммы на литры (г/л).

Важно! На данный момент метод определения концентрации гемоглобина в крови используется редко, так как применяемые реактивы опасны для жизни и здоровья в врачей-лаборантов. При нарушении правил приготовления могут возникнуть ожоги кожных покровов и слизистых оболочек.

Читай подробно о гемиглобинцианидном методе в отдельной статье!

С помощью методики Hb переводится в циангемоглобин с помощью реактивов, которые полностью безопасны для человека. Для этого используют цианистые соединения (натрий додецилсульфат, лаурилсульфат).

Образуется гемихром, который подсчитывается при длине волны 540 нм. Полученные данные подставляют в формулу для перевода показателя в г/л.

Для проведения анализа используют капиллярную и венозную кровь. В биологическую жидкость человека добавляют трансформирующий раствор. С помощью него происходит преобразование всех форм Hb в метгемоглобин.

В пробирку наливают 5 мл реагента и 20 мкл биологической жидкости. Выжидают 10 минут, пока произойдет реакция. Полученную жидкость заливают в специальную кювету, фотоэлектроколориметр пропускает через нее лучи, подсчитывает элементы в области длины волны, равной 543 нм. Содержание Hb рассчитывается по формуле с помощью полученных показателей.

Определение количества гемоглобина по методу Сали редко применяется в клинических учреждениях, так как существуют более совершенные способы.

Получают биологическую жидкость человека, в которую добавляют хлористоводородная кислоту. Раствор тщательно перемешивают. Это позволяет Hb перейти в другую форму – солянокислый гематин. Добавляют дистиллированную воду до тех пор, пока окрашивание не будет идентичным с контрольной пробиркой (коричневый цвет).

На нижнем мениске пробирки будет стоять цифра, которая указывает на содержание показателя в 100 г крови. Для вычисления концентрации в 1 литре, показатели умножают на 10. Процентное содержание Hb вычисляется с помощью пропорции:

А%=Х
Х=А×100/16,7
Х – определяемый показатель,
А – полученное число гемоглобина с помощью гемометра,
16,7 – процентное количество гемоглобина в контрольной пробе.

Наиболее точным методом определения гемоглобина является использование спектрофотометра. Он определяет только 1 из форм гемоглобина, улавливая длину его волны. В крови человека существуют различные формы Hb:

Оксигемоглобин;
Дезоксигемоглобин;
Карбоксигемоглобин;
Метгемоглобин.

Для исследования с помощью спектрофотометра необходим перевод показателей только в 1 из форм. Для этого применяют различные реактивы. Показатель окрашивается определенным цветом (красный, зеленый). Его длину волны улавливает прибор, подсчитывает все элементы в заданной траектории.

Аммиачный метод количественного определения гемоглобина соответствует предыдущим способам. Разницу составляет использование аммиака в концентрации 0,04%. Проба должна настояться, чтобы произошла реакция перехода всех форм Hb в одну. Ее рассчитывают с помощью полуавтоматического анализатора в виде спектрофотометра. Раствор помещают в кювету, устанавливают в прибор. Рассчитывают показатель на длине волны 543 нанометров.

Существует 4 разновидности исследования мочи. Каждая из них отличается применяемыми реактивами. Для исследования собирают только свежую порцию урины. Если она настоится, Hb превратиться в медгемоглобин, Поэтому реакция будет невозможна. Урину подготавливают. Для этого к ней добавляет 2 мл уксусной кислоты и 5 мл диэтилового эфира.

Реакция с гваяковой кислотой. Разводят щепотку кислоты, добавляют 3 мл этанола 96%. Добавляют 8-10 капель получившейся жидкости к 8-10 каплям разведенной урины. Если Hb присутствует в образце, он окрашивается в синий цвет.
Реакция с амидопирином. К 2-3 мл разведенной урины добавляют 10 капель раствора амидопирина и 10 капель 3% перекиси водорода. Если Hb присутствует, урина окрашивается в фиолетовый цвет.
Реакция с бензидином. В пробирку добавляют 6 капель бензидина, 6 капель 3% перекиси водорода,4 капли чистой урины. Если Hb присутствует, получившаяся жидкость окрашивается в зеленый цвет.
Использование тест-полосок, таблеток. Они содержат специализированные реактивы в готовом виде. Полоски опускают в мочу, достают, оценивают цветовую шкалу. Таблетки полностью растворяют в биологической жидкости человека. Индикаторная шкала подписана на упаковке.

Наиболее точным методом определения показателя считается фотоколориметрический с использованием гемихромного разведения. С помощью него снижается риск врачебной ошибки. Прибор автоматически подсчитывает показатель. Здесь важно правильно подготовить приборы, пробирки, кюветы, настроить аппарат. Методика безопасна для лаборанта.

В определении Hb в моче наиболее информативным является использование тест-полосок. Здесь полностью исключается риск неправильного разведения реактивов.

Определение гемоглобина является важным информативным тестом. Можно определить кровотечение в мочевыводящих путях, состояние сердечно-сосудистой и легочной системы. С помощью методов вовремя выявляются различные виды анемии при низких концентрациях гемоглобина. После получения данных рекомендуется обратиться к лечащему врачу. Он расшифрует полученный результат, выявит нормы и отклонения, назначит лечение.

Екатерина Беликова, врач лабораторной диагностики, специально для Mirmam.pro

источник

Методы измерения гемоглобина (Hb) были впервые разработаны еще более ста лет назад, так что гемоглобин был одним из первых диагностических анализов крови, доступных клиницистам в первые десятилетия 20-го века, когда лабораторная медицина находилась в зачаточном состоянии.

Сегодня это наиболее часто запрашиваемый анализ крови и он проводится не только в больничной лаборатории, но и в различных медицинских учреждениях, рядом медицинских работников, использующих технологии различной сложности.

Например, в условиях интенсивной терапии и неотложной помощи гемоглобин измеряется персоналом медсестер с использованием технологий, встроенных в анализаторы газов крови.

В центре внимания этой статьи являются методы, используемые в настоящее время для измерения концентрации гемоглобина в крови (c tHb) как в лаборатории, так и за ее пределами, но она начинается с краткого рассмотрения структуры и функции гемоглобина и клинической пользы измерения.

Нормальная функция клетки зависит от непрерывной подачи в нее кислорода. Поскольку кислород потребляется во время метаболизма клеток, образуется двуокись углерода.

Принципиальной функцией крови является доставка кислорода (O2), присутствующего во вдыхаемом воздухе, из легких в каждую клетку в организме и доставку углекислого газа (CO2) из клеток в легкие, для удаления из организма во внешний воздух.

Эти жизненно важные функции транспорта газа зависят от белкового гемоглобина, содержащегося в эритроцитах. Каждый из 5 10*10 эритроцитов, обычно присутствующих в 1 мл крови, содержит около 280 миллионов молекул гемоглобина.

Молекула гемоглобина (Hb) примерно сферическая и содержит две пары разнородных субъединиц.

Каждая из субъединиц представляет собой сложенную полипептидную цепь (часть глобина) с присоединенной группой гема (полученной из порфирина).

В центре каждой группы гема находится единственный атом железа в состоянии железа (Fe 2+ ). Таким образом, гем является металлопорфирином, который, кстати, ответственен за красный цвет крови.

Кислородсвязывающая часть Hb представляет собой своеобразный карман гема, присутствующий в каждой из четырех полипептидных цепей; один атом кислорода образует обратимую связь с железом в каждом из этих участков, поэтому молекула Hb связывает четыре молекулы кислорода; продукт представляет собой оксигемоглобин (O2Hb).

Функция доставки кислорода гемоглобином, то есть его способность «присоединять» кислород в легких и «высвобождать» его в тканевые клетки, стала возможной благодаря небольшим конформационным изменениям в четвертичной структуре, которые происходят в молекуле гемоглобина и которые изменяют сродство гема-карман для кислорода. Hb имеет два четвертичных структурных состояния: «дезокси-состояние» (с низким сродством к кислороду) и кислородное состояние (с высоким сродством к кислороду).

Ряд факторов окружающей среды определяет четвертичное состояние Hb и, следовательно, его относительное кислородное сродство. Микроокружение в легких благоприятствует окси-четвертичному состоянию, и, следовательно, Hb имеет высокое сродство к кислороду здесь.

Напротив, микроокружение тканей индуцирует конформационное изменение структуры Hb, которое уменьшает его сродство к кислороду, что позволяет высвобождать кислород в тканевые клетки.

Небольшое количество (до 20%) СО 2 переносится из тканей в легкие, слабо связанные с N-концевой аминокислотой четырех гемоглобиновых единиц гемоглобина; продуктом этой комбинации является карбаминогемоглобин (карбоксигемоглобин). Однако большинство CO 2 транспортируется в виде бикарбоната в плазме крови.

Эритроцитарная конверсия СО 2 в бикарбонат, необходимый для этого режима переноса СО 2 , приводит к получению ионов водорода (Н + ). Эти водородные ионы забуферированы дезоксигенированным гемоглобином.

В капиллярной крови, протекающей через ткани, кислород высвобождается из гемоглобина и переходит в тканевые клетки. Углекислый газ диффундирует из тканевых клеток в эритроциты, где карбоксиангидраза ферментов в красной клетке позволяет ее реакции с водой образовывать углекислоту.

Углекислота диссоциирует до бикарбоната (который переходит в плазму крови) и ионов водорода, которые сочетаются с ныне дезоксигенированным гемоглобином. Кровь течет в легкие, а в капиллярах альвеол легких вышеуказанные пути меняются на противоположные. Бикарбонат входит в эритроциты и здесь объединяется с ионами водорода, высвобождаемыми из гемоглобина, с образованием угольной кислоты.

Это диссоциирует с диоксидом углерода и водой. Углекислый газ диффундирует из крови в альвеолы легких и устраняется в выдыхаемом воздухе. Между тем, кислород диффундирует из альвеол в капиллярную кровь и сочетается с гемоглобином.

Хотя обычно присутствуют только в следовых количествах, существует три вида гемоглобина: метгемоглобин (MetHb или Hi), сульфгемоглобин (SHb) и карбоксигемоглобин (COHb), которые не могут связывать кислород.

Таким образом, они функционально несостоятельны и увеличение количества любого из этих видов гемоглобина, как правило, является результатом воздействия конкретных лекарств или токсинов окружающей среды, может серьезно подорвать доставку кислорода.

В общем анализе крови (c tHb), общую концентрацию гемоглобина обычно определяют как сумму оксигенированного гемоглобина, дезоксигенированного гемоглобина, карбоксигемоглобина и метгемоглобина.

Основной причиной измерения общего анализа крови c tHb является выявление анемии и оценка ее тяжести.

Анемия может быть определена как уменьшение кислородонесущей способности крови за счет сокращения числа эритроцитов. Чем ниже гемоглобин c tHb, тем тяжелее анемия.

Анемия не является заболеванием, а скорее следствием или признаком болезни. Причина, почему ctHb — такой часто запрашиваемый анализ крови, заключается в том, что анемия является признаком целого ряда патологий, многие из которых относительно распространены.

Общие симптомы анемии, большинство из которых неспецифичны, включают: бледность, усталость и сонливость, одышка — особенно при нагрузке, головокружение и обморок, головные боли, запоры и повышенная частота пульса.

В то время как анемия характеризуется уменьшением ctHb, повышенная ctHb указывает на полицитемию. Полицитемия возникает как ответ на любое физиологическое или патологическое состояние, при котором кровь содержит меньше кислорода, чем обычно (гипоксемия).

Реакция организма на гипоксемию включает увеличение производства эритроцитов для увеличения доставки кислорода и, как следствие, повышение ctHb. Эта так называемая вторичная полицитемия является частью физиологической адаптации к большой высоте и может быть признаком хронической неспецифической болезни легких.

Первичная полицитемия является гораздо менее распространенным злокачественным заболеванием костного мозга, которое характеризуется неконтролируемым образованием всех клеток крови, включая эритроциты. Полицитемия, как вторичная, так и первичная, обычно гораздо менее распространена, чем анемия.

Первый клинический тест на измерение Hb, разработанный более века назад, включал добавление капель дистиллированной воды к измеряемому объему крови до тех пор, пока ее цвет не соответствовал искусственному цветному стандарту.

Более поздняя модификация включала в себя первую насыщаемую кровь углекислым газом (окисью углерода) для преобразования гемоглобина в более стабильный карбоксигемоглобин. Современная гемоглобинометрия датируется 50-ми годами двадцатого века после развития спектрофотометрии и метода гемоглобинцинида (цианаметгемоглобина).

Последовала адаптация этого метода и других для использования в автоматизированных гематологических анализаторах. За последние два десятилетия успехи были сосредоточены на разработке методов, которые позволяют проводить тестирование на предмет оказания неотложной помощи.

В этом разделе сначала рассматриваются некоторые из методов, используемых в настоящее время в лабораториях, а затем с использованием тех методов POCT, которые используются вне лаборатории.

Спустя почти 40 лет после того как он был впервые принят в качестве эталонного метода для измерения гемоглобина Международным комитетом по стандартизации в гематологии (ICSH), тест гемиглобинцианида (HiCN) остается рекомендуемым методом ICSH, против которого все новые методы c tHb оцениваются и стандартизируются.

Приведенное подробное рассмотрение отражает его постоянное значение как в качестве эталонного, так и рутинного лабораторного метода.

Кровь разбавляют в растворе, содержащем феррицианид калия и цианид калия. Феррицианид калия окисляет железо в геме в состояние трехвалентного железа с образованием метгемоглобина, который превращается в гемиглобинцианид (HiCN) цианидом калия.

HiCN — это стабильный цветной продукт, который в растворе имеет максимум поглощения при 540 нм и строго подчиняется закону Бир-Ламберта. Абсорбцию разбавленного образца при 540 нм сравнивают с поглощением на той же длине волны стандартного раствора HiCN, эквивалентная концентрация гемоглобина.

Большинство производных гемоглобина (оксигемоглобин, метгемоглобин и карбоксигемоглобин, но не сульфгемоглобин) превращаются в HiCN и поэтому измеряются этим методом.

25 мкл крови добавляют к 5,0 мл реагента, перемешивают и оставляют на 3 минуты. Абсорбирование считывают при 540 нм против заготовки реагента. Точно так же измеряется поглощение стандарта HiCN.

Основным преимуществом этого метода является то, что существует стандартное решение HiCN, произведенное и назначенное значение концентрации в соответствии с очень точными критериями, установленными и периодически пересматриваемыми Международным советом по стандартизации в области гематологии (ICSH).

Это международное стандартное решение является основным калибратором для коммерческих стандартных решений, используемых в клинических лабораториях по всему миру. Таким образом, все те, кто использует стандартизацию HiCN, эффективно используют один и тот же стандарт, значение которого было скрупулезно проверено.

Мутность из-за белков, липидов и клеточного вещества является потенциальной проблемой со спектрофотометрической оценкой любого компонента крови, включая гемоглобин.

Большое разведение (1: 251) образца в значительной степени устраняет проблему, но ложно поднятые результаты c tHb могут возникать у пациентов с высокой концентрацией белка в плазме.

Выраженные липемические образцы и те, которые содержат очень большое количество белых клеток (лейкоцитов), также могут артефактивно повышать анализ c tHb аналогичным механизмом.

Международный стандарт — точный.
Легко адаптируется к автоматизированным гематологическим анализаторам; таким образом, воспроизводимый (низкий SD и CV — внутри цикла CV обычно Недостатки HiCN.

Вышеуказанное ограничивает его использование за пределами лаборатории.

От большого количества взвешенных липидов, белков плазмы и числа лейкоцитов — возможны ошибки (ложные результаты).

Не дифференцирует производные гемоглобина, которые не обладают кислородонесущей способностью (MetHb, COHb, SHb). Таким образом, можно переоценить кислородную способность крови, если они присутствуют в аномальных (более чем следовых) количествах.

Лаурилсульфат натрия (SLS) представляет собой поверхностно-активное вещество, которое лизирует эритроциты и быстро образует комплекс с высвобожденным гемоглобином. Продукт SLS-MetHb стабилен в течение нескольких часов и имеет характерный спектр с максимальной поглощающей способностью при 539 нм.

Комплекс подчиняется закону Бир-Ламберта, поэтому существует точная линейная корреляция между концентрацией Hb и поглощением SLS-MetHb.

Метод просто включает смешивание 25 мкл крови с 5,0 мл 2,08-ммоль/л раствора SLS (забуференного до рН 7,2) и считывания поглощения при 539 нм. Показано, что результаты c tHb методом SLS-Hb очень тесно коррелируют (r=0,998) с эталонным методом HiCN.

Этот метод был адаптирован для автоматизированных гематологических анализаторов и является столь же надежным с точки зрения точности и точности, как и автоматизированные методы HiCN. Основным преимуществом является то, что реагент нетоксичен. Он также менее подвержен ложному вмешательству липемии и повышенной концентрацией лейкоцитов.

Долгосрочная нестабильность SDS-MetHb исключает его использование в качестве стандарта, поэтому метод должен быть откалиброван с помощью крови, c tHb которой определяется с использованием эталонного метода HiCN.

Этот метод основан на превращении гемоглобина в стабильный окрашенный продукт — азид-метгемоглобин, который имеет почти идентичный спектр поглощения по сравнению с HiCN.

Реагент, используемый в этом методе, очень похож на тот, который используется в эталонном методе HiCN с замещением азида натрия для более токсичного цианистого калия. Как и в методе HiCN, гемоглобин превращается в метгемоглобин феррицианидом калия; азид затем образует комплекс с метгемоглобином.

Результаты ctHb по этому методу сопоставимы с результатами, полученными с помощью эталонного метода HiCN; это приемлемый альтернативный ручной метод. Однако взрывной потенциал азида натрия препятствует его использованию на автоматизированных гематологических анализаторах. Реакция азида-MetHb была адаптирована для гемоглобинометров POCT.

Рассматриваемые здесь методы POCT:

Портативные гемоглобинометры.
CO-оксиметрия — метод, используемый в анализаторах газов крови POCT.
Цветовая шкала ВОЗ.

Портативные гемоглобинометры, такие как HemoCue-B, позволяют точно определять гемоглобин у постели больного. Они представляют собой, по существу, фотометры, которые позволяют измерять интенсивность цвета растворов.

Микрокапля крови, в которой эти измерения сделаны, также действует как реакционный сосуд. Реагенты, необходимые как для высвобождения Hb из эритроцитов, так и для превращения Hb в стабильный окрашенный продукт, присутствуют в высушенной форме на стенках кюветы.

Все, что требуется, — это введение небольшого образца (обычно 10 мкл) капиллярной, венозной или артериальной крови в микропробирку и установки ее в прибор.

Прибор изготовлен на заводе-изготовителе с использованием стандарта HiCN, а поглощение тестового решения автоматически преобразуется в c tHb. Результат отображается менее чем за минуту.

Портативность.
Аккумулятор или электропитание можно использовать в любом месте.
Небольшой объем образца (10 мкл), полученный с помощью прокола пальца.
Быстрота (результат за 60 секунд).
Простота использования — без пипетирования.
Минимальная подготовка, требуемая к «нелабораторному» персоналу.
Стандартизован с HiCN — результаты, сопоставимые с результатами, полученными в лаборатории.
Коррекция мутности. В этом отношении переносные гемоглобинометры превосходят большинство методов ctHb.

Эта технология была широко оценена в различных условиях, и большинство исследований подтвердили приемлемую точность по сравнению с лабораторными методами.

Однако некоторые исследования вызвали обеспокоенность в связи с тем, что в результате отсутствия лабораторных результатов персонал может быть менее удовлетворительным. Несмотря на простоту эксплуатации, эти инструменты не защищены от ошибок оператора, а эффективное обучение, все-таки имеет важное значение.

Имеются данные, свидетельствующие о том, что результаты, полученные из образцов капилляров (пальцев), менее точны, чем результаты, полученные из хорошо перемешанных капиллярных или венозных образцов, собранных в пробирки.

CO-оксиметр представляет собой специализированный спектрофотометр, название которого отражает исходное приложение, которое должно было измерять COHb и MetHb.

Многие современные анализаторы газов крови имеют встроенный CO-оксиметр, позволяющий одновременную оценку c tHb при анализе газового состава.

Измерение c tHb с помощью CO-оксиметрии основано на том, что гемоглобин и все его производные являются цветными белками, которые поглощают свет на определенных длинах волн и, следовательно, имеют характерный спектр поглощения.

Закон Пира-Ламберта диктует, что поглощение одного соединения пропорционально концентрации этого соединения. Если известна спектральная характеристика каждого поглощающего вещества в растворе, то для расчета концентрации каждого такого вещества можно использовать показания поглощения раствора на нескольких длинах волн.

В измерениях поглощения CO-оксиметром образца гемолизированной крови на нескольких длинах волн в диапазоне, который поглощают свет гемоглобина (520-620 нм), используется установленным программным обеспечением для расчета концентрации каждого из производных гемоглобина (HHb, O 2 Hb, MetHb и COHb), c tHb — расчетная сумма этих производных.

Все, что требуется от оператора, — это инъекция хорошо смешанного образца венозной крови в газоанализатор крови или СО-оксиметр.

Образец или его часть автоматически накачивается в измерительную кювету СО-оксиметра, где — посредством химического или физического воздействия — эритроциты лизируются для высвобождения гемоглобина, который спектроскопически сканируется, как описано выше.

Результаты отображаются вместе с результатами анализа крови в течение минуты или двух.

Несколько исследований подтвердили, что результаты ctHb, полученные с помощью CO-оксиметрии, клинически значительно не отличаются от результатов, полученных из эталонных лабораторных методов. CO-оксиметрия обеспечивает приемлемый способ срочной оценки ctHb в условиях неотложной помощи.

Скорость анализа.
Простота анализа.
Небольшой объем забора крови.
Невысокая стоимость затрат.
Дополнительные измеренные параметры: (MetHb, COHb, O 2 Hb).
На качество анализа не влияет высокое количество белых клеток в образце крови.

Разработанный для Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) этот низкотехнологичный тест имеет ограниченное применение в развитых странах, но имеет огромное значение для экономически неблагополучных стран развивающегося мира, где наиболее распространена анемия.

В районах, где нет лабораторных установок и недостаточных ресурсов для финансирования более сложных гемоглобинометров POCT, это практически единственный способ определения c tHb.

Тест HCS основан на простом принципе, согласно которому цвет крови является функцией c tHb. Капля крови поглощается на бумаге и ее цвет по сравнению с графикой из шести оттенков красного, каждый оттенок представляет собой эквивалент c tHb: самые светлые 40 г/л и самые темные 140 г/л. Хотя в принципе очень просто, в разработке были использованы значительные исследования и технологии для обеспечения максимально возможной точности.

Например, обширные исследования различных документов информировали окончательный выбор бумаги для матрицы тест-полосок, а спектрофотометрический анализ смесей крови и красителей использовался для достижения максимально возможного соответствия между цветом диаграммы и цветом крови при каждом исследовании c tHb.

Прост в использовании — требуется только 30 минут обучения.
Быстро — результат в течение 1 минуты.
Требуется только капля капиллярной крови.
Очень дешев (около 0,12 доллара США за тест).

Надежные результаты зависят от строгого соблюдения инструкций по проведению исследования.

Неадекватная или чрезмерная кровь на тест-полоске.
Чтение результатов слишком поздно (за 2 минуты) или слишком рано (менее 30 секунд).
Чтение результата при плохом освещении.

Тест HSC явно имеет присущие ему ограничения. В лучшем случае он может определить, что ctHb образца пациента находится в одном из шести диапазонов концентрации: 30-50 г/л, 50-70 г/л, 70-90 г/л, 90-110 г/л, 110-130 г/л или 130-150 г/л. Тем не менее этого теоретически достаточно, чтобы идентифицировать количество гемоглобина у всех пациентов и дать указание на серьезность состояния у них.

Раннее исследование продемонстрировало способность испытуемого идентифицировать анемию (определяемую как ctHb Резюме.

c tHb является одним из двух параметров, обычно используемых для оценки кислородной способности крови и тем самым установления диагноза анемии и полицитемии.

Разработаны многочисленные методы, большинство из которых основано на измерении цвета гемоглобина. Методы, выбранные для обсуждения в этой статье, относятся к числу наиболее часто используемых сегодня.

При проведении отбора методов была предпринята попытка передать спектр технологий, которые в настоящее время используются, и как они применяются для удовлетворения клинического спроса на c tHb в условиях, которые варьируются от беднейших районов развивающегося мира, где медицинская помощь едва ли имеет плацдарм, до высокотехнологичного мира современного отделения интенсивной терапии.

источник