Меню Рубрики

Коклюш у детей результат анализа

Многие из заболеваний детского возраста развиваются у детей только 1 раз за всю жизнь. К ним относятся ветрянка, корь. Особое место среди данных заболеваний занимает коклюш. Мало кто знает, как проводят анализ на коклюш и зачем он нужен.

Так запрограммировано природой, что дети в силу особенностей своего иммунитета болеют чаще, чем взрослые. В первую очередь это обусловлено состоянием их иммунной системы: отсутствие антител ко многим заболеваниям, за исключением тех (антител), что прошли через гематоплацентарный барьер и попали в организм ребенка от матери.

Коклюш — высококонтагиозное заболевание, передающееся воздушно-капельным путем. Это заболевание приходится на детский возраст; взрослые болеют им очень редко (частота встречаемости среди всех заболевших у взрослых не составляет и 0,5 процента).

Возбудитель коклюша у детей — бактерия Борде-Жангу (относится к семейству бордетелл Bordetella pertussis). Является грамотрицательной коккобациллой. Попадает в организм через верхние дыхательные пути (при вдыхании аэрозоля, содержащего микроорганизмы). Попадая в носоглотку, микроорганизм начинает вырабатывать свой основной антиген — коклюшный токсин, на который и вырабатывается иммунный ответ. Непосредственное повреждающее влияние оказывают цитолизин и фимбрии. Каждый из антигенов специфичен и отвечает за определенные функции (лизис эпителиоцитов, адгезия и т.д.).

Бактерия поражает преимущественно дыхательные пути и в крови выделяется крайне редко. Если удалось высеять бактерию из взятого анализа, то стоит готовиться к худшему.

Типичная картина заболевания состоит из синдромов:

  • лихорадочного (повышение температуры выше 38°C);
  • поражения дыхательного тракта (интенсивный кашель, который сложно спутать с другими респираторными заболеваниями);
  • интоксикационного (слабость, тошнота, недомогание), неврологического (нарушение сна на фоне интенсивного кашля).

Часто из-за того, что ребенок сильно и долго кашляет, возможно появление небольших ранок или надрывов в области углов рта, на уздечке нижней губы. Наличие данных признаков косвенно позволяет поставить диагноз коклюша.

Ребенок становится заразным уже с первого дня развития заболевания. Обычно заражение происходит при контакте с другими детьми. Передача возбудителя часто наблюдается в тесных детских коллективах (сады, школы), в результате чего наблюдается массовость заражения.

Своевременная диагностика заболевания должна складываться из наличия типичной картины заболевания, данных анамнеза (контакт с кашляющим ребенком) и изменения лабораторных показателей. Наиболее интересующими являются носовая слизь и мазки из носо- и ротоглотки и кровь.

Как и большинство бактериальных заболеваний, коклюш диагностируется по изменениям анализов при обнаружении бактерии в исследуемом материале. Чаще всего диагноз выставляется при исследовании мазков из носовой полости и ротоглотки, при вырастании колонии бактерий на питательной среде. В кровь же сама бактерия проникает довольно редко (обычно ее попадание в общий кровоток, где кровь стерильна, грозит развитием сепсиса).

Как же можно при помощи крови определить наличие в организме бордетеллы?

В первую очередь для определения того, имеется ли в организме та или иная инфекция, следует сделать общий анализ крови. Процедура несложная и может проводиться на любом уровне оказания медицинской помощи.

В данном анализе выявляют количество клеток крови (эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов и гемоглобина) в единице объема крови. Так как коклюш заболевание бактериальное, то как и у всех подобных инфекций в крови обнаруживается увеличение лейкоцитов (лейкоцитоз) с увеличением в лейкоцитарной формуле количества нейтрофилов (определенных клеток, отвечающих за антибактериальный иммунитет). Другие компоненты анализа изменяются редко.

Более специфичным методом является серодиагностика. Принцип ее основан на определении в сыворотке крови антител, свидетельствующих о протекании инфекционного процесса, о наличии перенесенного и поствакцинального иммунитета.

Наиболее часто проводимым методом является реакция агглютинации. Метод зарекомендовал себя уже давно, используется более 50 лет. Данная методика позволяет выявить антитела, образованные к антигенам возбудителя, находящегося в первой фазе развития заболевания. Однако, имеет данная реакция и свои недостатки — она не обладает специфичностью конкретно к бактерии коклюша. Несомненным минусом ее является и то, что до сих пор не создано единой методики проведения данной реакции, из-за чего результаты могут интерпретироваться по-разному.

Суть реакции такова: полистироловый латекс наполняют компонентами коклюшной палочки. Исследуемую сыворотку крови (обычно разведенную в два раза) добавляют к сенсибилизированному латексу. После последующего окрашивания судят о наличии в сыворотке антител к данному возбудителю.

Реакция довольно проста и не требует массивных затрат. Однако из-за того, что в ней используются антигены клеток возбудителя, находящиеся в стадии распада, нередко реакция дает ложноположительные результаты.

Более трудоемким методом диагностики является реакция нейтрализации. Принцип реакции основан на количественном определении вырабатываемых к коклюшному токсину антител путем оценки состояния исследуемой ткани (чаще всего реакцию проводят на специальном субстрате — клетках яичников китайских хомяков). На основании того, как изменились клетки субстрата, судят о количестве нейтрализующих антител.

Метод высокоспецифичен и позволяет определять даже самые малые концентрации антител. Минусом реакции является ее трудоемкость и сложность проведения.

С 1980 года для диагностики заболевания используется иммуноферментный анализ (ИФА). Данная реакция является более специфичной, чем реакция агглютинации, и позволяет получить более точные и достоверные результаты (в определенных условиях).

Методика заключается в следующем: для проведения реакции можно использовать как непосредственно бактерии и бактериальные комплексы, так и компоненты их клеток, однако, при этом возрастает риск развития перекрестных реакций между антигенами коклюшной палочки и антигенами других грамотрицательных бактерий.

В среду или раствор, содержащий бактерии или их антигены, добавляли сыворотку, которую требовалось исследовать на наличие антител к возбудителю. Кроме того, в раствор добавляли специальные флуоресцеин-содержащие ферменты, которые оседали на образованном комплексе антиген-антитело, и в результате исследования делали данные комплексы видимыми под микроскопом (реакция флуоресценции).

При сравнении полученных результатов было видно, что наиболее точные результаты были достигнуты при определении антител к коклюшному токсину, ФГА и комплекса (ФГА, пертактин и КТ).

Данная методика оправдывает себя при определении антител на 4 неделе развития заболевания. До этого в крови антител мало (преобладают среди них иммуноглобулины класса М).

На более ранних этапах развития заболевания серологические методы не особо эффективны и уступают по результативности бактериоскопии, ПЦР и посевам на питательные среды.

Вышеуказанные серологические методы начинают проводиться уже с 4 недели развития заболевания. Диагноз коклюша считается обоснованным при наличии титра антител не ниже 1:80.

Следует помнить, что у детей картина крови может иногда отличаться от классических проявлений коклюша.

Довольно часто наблюдается развитие иммунодефицита примерно на 2-3 неделе развития заболевания. Высок риск присоединения оппортунистической инфекции, из-за чего первичная диагностика коклюша может замедляться, скрываться за клиникой вторичного заболевания. Кроме того, присоединение другой инфекции может вызвать осложнения, из-за которых сам коклюш будет отодвинут на второй план, и лечение будет назначено несвоевременно.

В некоторых случаях может наблюдаться следующий парадокс — казалось бы, заболевание было пролечено и все клинические признаки ушли, однако картина крови остается все той же (нейтрофильный лейкоцитоз и ускоренная СОЭ). Подобная картина может наблюдаться у ослабленных детей с имеющимся иммунодефицитом за счет более длительного персистирования антигенов бактерии Борде-Жангу в организме и замедленной их элиминации.

Как показывает практика, прививка против коклюша не всегда эффективна. Об этом свидетельствует тот факт, что риск заболеть коклюшем остается и у привитых детей (хотя они заболевают примерно в 6 раз реже, чем непривитые), и у взрослых (у них клиническая картина более стерта и заболевание может протекать под видом ОРВИ).

Обычно привитые дети заболевают в результате недостаточной выработки иммунитетом необходимых антител (в данном случае необходима пункция или трепанобиопсия костного мозга для диагностики хронических заболеваний крови). В результате этого риск заболевания у привитых детей возрастает спустя 3-4 года после перенесенной прививки.

При этом у привитых детей часто наблюдается картина относительного лейкоцитоза. В отношении выработки антител применим термин «бустер-эффект» — интенсивная выработка иммуноглобулинов уже на второй неделе развития заболевания.

Как было сказано выше, высевание бактерии из мазка крови крайне неблагоприятно. Это означает, что бактерия уже не развивается в виде локального заболевания, а вышла на системный уровень. Это грозит массивным размножением микроорганизма (кровь является прекрасной средой для развития любого микроорганизма, а в отношении бордетеллы — среда, содержащая кровь, является единственной, на которой бактерия растет).

В результате разноса микроорганизма по органам развивается синдром диссеминации, лечение которого крайне сложное и чаще всего не заканчивается успешно. В данном случае, если во время посева крови удалось высеять бактерию, пациент должен экстренно быть доставлен в отделение реанимации для проведения соответствующего лечения (существует угроза жизни).

Иногда результаты анализов могут быть ложноположительными. Это наблюдается в результате персистирования в организме антигенов бактерии (после перенесенного коклюша). Реже наблюдается ситуация перекрестной реакции антигенов, когда при наличии другого граммотрицательного микроорганизма проведение тестов на антитела к коклюшу дают положительный результат. В данном случае единственным методом диагностики является ПЦР для установления типа генетического материала, вызвавшего подобную реакцию микроорганизма.

Если все же был коклюш у детей, при правильной диагностике и своевременном лечении картина крови должна нормализоваться. В пределах нормы считается состояние, при котором лейкоцитоз может наблюдаться некоторое время (обычно до полутора недель) после перенесенного заболевания. После этого в крови появляются специфические иммуноглобулины класса G, которые отвечают за развитие постоянного, пожизненного иммунитета против коклюша. Выявление данных антител проводится серологическими методами.

Несмотря на то что коклюш является заболеванием преимущественно детского возраста, знать о том, как оно проявляется, должен каждый человек. Не существует стопроцентной гарантии того, что заболевание не разовьется даже у привитого или перенесшего его человека. Именно поэтому крайне важно знать о том, как может проявиться заболевание, где и каким образом диагностировать его развитие.

источник

Анализы на коклюш у детей проводятся с целью подтверждения присутствия в организме бактерий Bordetellapertussis, вызывающих заболевание. Коклюш считается опасной болезнью. На первых порах симптомы аналогичны ОРВИ, но примерно через неделю состояние обостряется. Появляется тяжелый приступообразный кашель, который сложно вылечить. Для точной диагностики разработано несколько методов, каждый из которых по-своему информативен.

Для диагностики коклюша недостаточно видеть клиническую картину. Подтверждают диагноз с помощью ряда исследований:

  • Анализ крови на коклюш;
  • Серологический (ИФА);
  • Мазок из носоглотки;
  • Молекулярно-генетический тест (ПЦР).

Обычно детям не назначаются сразу все исследования. Врач решает, какие анализы сдавать, исходя из симптоматики, времени появления признаков болезни, возраста ребенка и других факторов.

Общий анализ крови помогает определить состав плазмы, обнаружить признаки воспалительной реакции, предоставляет неспецифическую информацию о заболевании у ребенка. ОАК назначают при любой затянувшейся или остро протекающей простуде.

Забор крови производится на голодный желудок, предпочтительно утром. Собранный образец анализируется вручную или с помощью гемоанализатора. Когда в результате обработки анализа обнаруживаются признаки коклюша, дополнительно проводится ручное исследование. Срок получения результатов – 1 день без учета дня сбора анализа.

Обнаружить коклюш позволяет посев отделяемого из носоглотки у ребенка. Параллельно мазок исследуется на клеточный состав. Результаты анализа на коклюш достоверны, если исследование проводят не позже 3-х недель от появления первых симптомов. Оптимальным временем для анализа считается первая неделя болезни. Выполнение бакпосева требует определенной подготовки.

Не следует перед сдачей материала:

  • Кушать, пить в среднем за 2,5 часа до времени проведения посева;
  • Чистить зубы, полоскать рот, горло;
  • Интенсивно высмаркиваться;
  • Закапывать в нос капли, пить антибиотики.

Процедура включает забор отделяемого из горла, носа при помощи тупфера – стерильного тампона на палочке. Отдельный тампон вводят в носовые проходы, вторым тупфером проводят по миндалинам, задней поверхности глотки. Рекомендуется сдавать анализ дважды – через 1 день или 2 дня подряд.

В качестве альтернативы забор материала осуществляют на «кашлевую пластинку». Слизь попадает на нее, когда ребенок кашляет или чихает.

После взятия материала, тупферы помещают в специальные пробирки со средой, в которых жизнедеятельность патологических организмов будет поддерживаться искусственно. На протяжении нескольких дней наблюдают за ростом микроорганизмов.

Анализ производится с учетом скорости роста и распространения бактерий коклюша, ферментативной активности. Для уточнения клеточного состава проводится забор материала на предметное стекло. В дальнейшем его окрашивают, рассматривают под микроскопом и описывают.

Предварительные результаты доступны в течение 5-ти дней, окончательные – не позднее, чем через неделю.

Достоверность результатов полимеразной цепной реакции при диагностике коклюша составляет 100%, если анализ проводится не позднее месяца от обнаружения симптомов. За 2-3 часа до проведения исследования нельзя кушать, пить, чистить зубы. Перед забором отделяемого можно прополоскать рот теплой кипяченой водой.

Образец материала берут из носоглотки тупфером, помещают в амплификатор, куда добавляют ферменты или праймеры, ведущие к копированию ДНК бактерии. Детектор, которым оборудован амплификатор, позволяет точно генетические цепи, присущие возбудителю коклюша. Результаты обычно готовы в течение 2-х дней.

Исследование назначается спустя 2-3 недели от момента первых симптомов заболевания, когда бакпосев уже не информативен. При подготовке к исследованию нельзя пить, кушать, за 12 часов детям не рекомендуется испытывать физическую нагрузку. Анализ рекомендуется сдавать дважды, с перерывом от 10 до 14 дней.

В ходе исследования сыворотку крови помещают в специальные ячейки с антигенами к бактерии – возбудителю коклюша и паракоклюша, затем смешивают с помеченными ферментами иммуноглобулинами. Происходит расщепление, в результате которого смесь приобретает определенный цвет. Интенсивность окраски свидетельствует о количественном составе антител. Подсчет точного числа определяется фотометрическими анализаторами. Срок готовности результатов – до 8 дней.

Общий анализ не показывает присутствие коклюша в организме ребенка. Однако при коклюше отмечается снижение количества лейкоцитов и повышение лимфоцитов. Показатели СОЭ не повышены. При атипичной форме результаты могут быть в норме. Более специфичными анализами являются бакпосев, ПЦР и ИФА.

Достоверность результатов бакпосева зависит от срока сдачи анализа. На первой неделе точность составляет порядка 90%, через 3 недели после появления симптомов не превышает 20%. Диагноз ставят на основе обнаружения в материале колоний бактерий и подтверждения факта их роста.

Точность результатов, полученных при сдаче серологического анализа крови на коклюш у детей, оценивается приблизительно в 70%, а специфичность составляет 100%.

В процессе исследования проверяется наличие антител трех групп:

  • IgG говорит о пройденной иммунизации или о том, что ребенок болел коклюшем;
  • IgM указывает на острую фазу болезни либо недавно проведенной вакцинации;
  • IgA свидетельствует о том, что малыш болеет коклюшем на день проведения исследования.
Читайте также:  Анализы по нечипоренко у детей

Показатели оцениваются качественно и количественно. В первом случае результат фиксируется как положительный, отрицательный, сомнительный. Количественные границы нормы определяются каждой лабораторией отдельно.

Норма анализа на коклюш у ребенка:

Превышение указанных показателей – положительный результат, означает, что ребенок болен коклюшем.

Точность результатов ПЦР – 90%. Расшифровка анализа на коклюш свидетельствует о присутствии бактерии (положительный результат) или ее отсутствии (отрицательный). Анализ считается наиболее специфичным.

Для каждого анализа предусмотрена своя процедура забора материала:

  • Для ОАК у ребенка берут капиллярную и венозную кровь;
  • ИФА проводится на основе венозной;
  • При проведении бакпосева и ПЦР используют отделяемое из носа и горла.

Исследования проводятся в частных и государственных лабораториях по назначению врача.

Медицинская лаборатория Гемотест, центры которой расположены в 65 городах России, выполняет различные анализы, направленные на обнаружение коклюша. Здесь поводят несколько видов исследований.

Антитела Возраст, лет Показатель нормы, МЕ/ мл
Наименование Цена, руб
Клинический анализ, включая лейкоформулу, СОЭ 670
Посев 1.000
IgG 820
IgA 830
IgM 820
Исследование мокроты 440

Ряд анализов, позволяющих обнаружить бактерии, вызывающие коклюш, можно сдать в клиниках Инвитро, расположенных во многих населенных пунктах России. Цены, действующие на текущий момент, указаны в таблице:

Наименование Цена, руб
ОАК, включая лейкоцитарную формулу, СОЭ, ручной анализ мазка 1.020
ОАК, в том числе лейкоцитарная формула, СОЭ 720
Бакпосев 1.415
IgG 825
IgA 825
IgM 825

Дополнительно оплачивается 199 руб. за забор крови из вены.

источник

Фото с сайта medaboutme.ru

Опыт многолетних исследований показывает, что лабораторные анализы на коклюш одинаково эффективны в отношении малышей и взрослых, привитых и невакцинированных пациентов. Современная медицина научились довольно точно распознавать неустойчивую и прихотливую бактерию, что заметно упрощает диагностику самых сложных случаев недомогания со стертой симптоматикой.

Достоверность и информативность тестов во многом зависит от качества подготовки и времени сдачи анализов. Для каждой из методик существует свой период забора, когда выявляемые компоненты наиболее активны. При соблюдении всех условий исследования на коклюш очень содержательны и дают исчерпывающие сведения о заболевании.

Не менее важно для информативности и место, где выполняется диагностика. Если общий анализ крови можно с одинаковым успехом сделать как в частной, так и в муниципальной клинике, то специфические тесты при коклюше лучше сдавать в платных учреждениях. Несмотря на высокую достоверность исследований, в городских поликлиниках правильный диагноз устанавливается только в половине случаев. Остальные пациенты лечатся от пневмонии, бронхита, ОРВИ и т. д.

Какие анализы сдают на коклюш? В большинстве случаев больным назначают ряд специфических тестов: молекулярно-генетический, серологический и бактериологический. Каждая из этих методик дает верный результат в 95–98% случаев. Из общих наиболее распространен ОАК.

Обычно для подтверждения недомогания не требуется выполнять все исследования сразу. Доктор, исходя из симптоматики и продолжительности недуга, решает, какие именно анализы необходимо сдать на коклюш.

Клинический анализ крови назначают всем пациентам без исключения для обнаружения воспалительного процесса, силы и продолжительности его течения, но определить по нему наличие коклюша невозможно. Данный тест не относится к специфическим и имеет диагностическую значимость лишь в совокупности с другими клиническими признаками недомогания. Анализ крови может только навести врача на мысль о коклюше, но не более того.

Биоматериал для ОАК берут с утра, на голодный желудок. Забранный образец изучается с помощью гемоанализатора, но если в результате обработки обнаруживаются аномалии, выполняется ручной подсчет компонентов.

Какие показатели типичны для заболевания? Как правило, в анализе крови при коклюше заметно возрастает концентрация лейкоцитов — до 20–40*10 9 /л. У младенцев эти значения могут быть несколько ниже — 15–30*10 9 /л. При этом СОЭ остается на прежнем уровне. Исследование проводят только по направлению врача.

Стоимость анализа крови с оценкой количества лейкоцитов и СОЭ не превышает 450 рублей.

Самый капризный и наиболее информативный тест в катаральном периоде коклюша. Его делают только те клиники, где хорошо отлажен процесс доставки и хранения биоматериала. Анализ назначают не позднее третьей недели болезни, обычно дважды, с промежутком в 1–2 дня.

Достоверность теста зависит от сроков посева, разновидности используемых сред, соблюдения правил забора отделяемого. По истечении двадцати суток информативность анализа падает до 20%. Влияет на надежность исследования и прием антибиотиков. Противомикробные лекарства нарушают жизнедеятельность патогенов и ухудшают высеваемость.

Сколько делается культуральный анализ на коклюш? Предварительные сведения могут быть готовы уже на третьи сутки, но они редко несут достоверные данные. Окончательный результат выдают на 6–7 день.

Чтобы увеличить информативность бак-посева на коклюш, перед посещением процедурного кабинета нельзя пить и употреблять пищу, чистить зубы, полоскать горло, рассасывать пастилки от кашля или использовать аэрозоли. У взрослых биоматериал на анализ забирается заднеглоточным тампоном — слизь снимают с миндалин и берут из носа. Для детей чаще используют вариант «кашлевых пластинок». Для этого чашку с питательным субстратом подносят ко рту малыша и просят покашлять.

Расшифровать данные бак-анализа на коклюш очень просто — колонии Bordetella либо присутствуют в пробирках и чашках со средой, либо нет. В последнем случае говорят об отрицательном результате. В некоторых посевах из зева детей могут быть получены микроорганизмы, сходные по своим морфологическим и серологическим качествам с бактерией коклюша. Тогда назначается дополнительный тест с реакцией иммуноэлектрофореза.

Сколько стоит подобный анализ для детей и взрослых? Цены на посев возбудителя коклюша не зависят от возраста пациента и колеблются от 900 до 1500 рублей.

Самым трудоемким считается ПЦР-анализ на коклюш. Исследование информативно целый месяц с начала недомогания, дает 100% результат и наиболее эффективно у малышей раннего возраста, но отличается сложностью забора биоматериала. Врачу нужно исхитриться и взять как можно больше слизи, содержащей бактерии коклюша.

Соскоб снимают со слизистой носа или ротоглотки, стараясь проникнуть тупфером как можно глубже. Затем тампон помещают в термоциклер и с помощью комплекта реактивов обнаруживают ДНК возбудителя. Для получения качественного анализа за 2 часа до забора биоматериала нельзя есть и пить, в течение 5 часов перед тестом запрещено орошать горло или пользоваться пастилками.

Сколько готовится молекулярный анализ на коклюш? Данный метод диагностики недаром называют экспресс-тестом — расшифровку можно получить в течение ближайших суток. Делают его в любой лаборатории по вполне демократичной цене — от 500 до 800 рублей за тест.

Положительный результат анализа на коклюш говорит о том, что в крови пациента присутствуют следы возбудителя. Некоторые клиники указывают количественное значение патогенов.

Считается самым надежным анализом на коклюш и позволяет диагностировать болезнь на поздних этапах, когда другие методы уже неэффективны. Среди медиков этот тест называется «золотым стандартом», дает 100% специфичность и диагностическую чувствительность не менее 66%.

Биоматериал для анализа у взрослых берется из вены (3–4 мл), у детей из подушечки среднего пальца (0,5–1,0 мл). Процедура выполняется в первой половине дня, строго натощак. Собранную кровь направляют в лабораторию, где ее обрабатывают методом ИФА.

Тест на антитела к коклюшу бывает качественным или количественным. При проведении анализа определяют 3 класса маркеров — IgA, IgG и IgM. Антитела типа А и М характерны для первичной инфекции и начинают образовываться с двадцатого дня заболевания, а еще через 7 суток появляются антитела уровня G. Они же обнаруживаются после вакцинации и остаются в крови на долгие годы.

О положительном результате можно говорить, если в расшифровке ИФА-анализа на коклюш указаны следующие значения:

  • IgA — более 26 ед./мл;
  • IgM — более 18 ед./мл;
  • IgG — более 18 ед./мл.

При слабом иммунитете или истощении организма анализ может дать ложноотрицательный ответ. В любом случае через 2 недели тест рекомендуется выполнить повторно. Увеличение иммуноглобулина класса G в четыре раза однозначно укажет на развитие коклюша.

Сдать серологический анализ можно в любой клинике. Определение каждого класса титров обойдется в 850 руб. К данной сумме нужно прибавить расходы на забор крови. Это еще примерно 100–130 рублей.

Еще сто лет назад коклюш считался смертельно опасным недугом. От него умирал практически каждый заболевший ребенок. Сегодня положение намного улучшилось, однако Bordetella pertussis по-прежнему доставляет немало проблем.

Токсины, которые производит возбудитель коклюша, отравляют весь организм, вызывают нарушение дыхания и связанную с этим гипоксию. При резком увеличении уровня углекислого газа в крови создаются все условия для развития энцефалопатии. Особенно тяжело переносят коклюш младенцы.

При поздней диагностике и неграмотном лечении у малышей возникают серьезные нарушения со стороны респираторной системы — может произойти спадение доли легкого, развиться пневмония, тяжелый бронхит, астма. Нарушается деятельность сердечно-сосудистой и нервной систем, во время сильного кашля появляются кровоизлияния в кожу и конъюнктиву глаз, возникает рвота.

Кроме того, что пациент мучается сам, в первые недели коклюш очень заразен и представляет серьезную угрозу для окружающих. При раннем выявлении недуга появляется шанс остановить развитие бактерий и снизить вирулентность болезни до минимума. К преимуществам раннего обнаружения недуга можно отнести и быстрое выздоровление правильно пролеченных детей и взрослых.

Диагностика коклюша основана на множестве лабораторных данных. Каждый анализ по-своему информативен и необходим в строго определенный период. При расшифровке результатов следует учитывать особенности иммунитета у новорожденных, наличие вакцинации и прием антибиотиков. Все эти факторы могут несколько исказить показатели, поэтому не стоит заниматься интерпретацией анализов самостоятельно. Лучше доверить расшифровку специалисту — педиатру либо участковому терапевту.

Автор: Елена Медведева, врач,
специально для lechim-gorlo.ru

Список источников:

  • Диагностика типичного случая инфекционной болезни (стандартизованный пациент): учебное пособие /Н. Д. Ющук, Е. В. Волчкова // Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2017.
  • Диагностическая ценность метода ИФА при коклюше у детей / Попова О. П., Скирда Т. А., Федорова И. М. и др. // Детские инфекции, 2016.
  • Коклюш: эпидемиология, биологические свойства bordetella pertussis, принципы лабораторной диагностики и специфической профилактики / Тюкавкина С. Ю., Харсеева Г. Г. // Эпидемиология и инфекционные болезни, 2014.
  • Ценева Г. Я., Курова Н. Н. Микробиологическая характеристика возбудителя коклюша и лабораторная диагностика // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия, 2003.
  • Руководство по лабораторным методам диагностики / А. А. Кишкун, д. м. н., проф. // ГЭОТАР-Медиа, 2007.

источник

Коклюш — это бактериальная инфекция, вызываемая коккобациллой Bordetella pertussis. Для диагностики этого заболевания используются различные лабораторные исследования; правильный анализ на коклюш позволит определить не только наличие болезни, но и ее стадию.

Заподозрить коклюш следует при наличии у больного следующих симптомов:

  • кашель неясного происхождения продолжительностью более 2 недель;
  • приступы тяжелого кашля;
  • симптомы ОРВИ после контакта с больным.

Диагностика коклюша начинается с дифференциации его с острыми респираторными болезнями, гриппом, корью, обострением бронхиальной астмы, бронхоаденитом и попаданием в дыхательные пути инородного тела.

Дифференциальный диагноз основывается на следующих чертах похожих заболеваний:

  1. Грипп начинается остро, наблюдаются симптомы интоксикации (лихорадка, нейротоксикоз), которые преобладают над симптомами поражения верхних дыхательных путей.
  2. Корь отличается присутствием насморка, чихания, слезотечения, отечности слизистых оболочек наряду с кашлем, чего также не бывает при коклюше.
  3. ОРВИ, как и грипп, сопровождаются симптомами интоксикации и поражения слизистых. Разные вирусные инфекции могут характеризоваться воспалением глотки, признаками воспаления бронхов, отеком слизистых, конъюнктивитом.
  4. Туберкулез характеризуется схожими приступами сильного кашля. Для дифференциации болезней требуются рентгенография и реакция Манту.

При подозрении на коклюш для подтверждения диагноза используются различные лабораторные методы исследования. Основными являются ПЦР и бактериологический анализ на ранних сроках, серологическая диагностика — на поздних.

Общий анализ крови на коклюш позволяет определить состав крови и обнаружить наличие лейкоцитоза. Как и в случае других бактериальных заболеваний, при коклюше количество лейкоцитов на единицу крови возрастает, что свидетельствует об иммунном ответе на поражение возбудителем. Как правило, выделяют концентрацию лейкоцитов, равную 2–7*109/л.

Другие общие характеристики крови, как правило, не меняются; сдвиги наблюдаются только в катаральной стадии болезни. Скорость оседания эритроцитов может быть сниженной.

В большинстве случаев гематологическая лабораторная диагностика коклюша ограничивается общим анализом крови; для выявления возможных осложнений также может проводиться биохимическое исследование, дополняемое общим анализом мочи. Если болезнь протекает благоприятно, все показатели будут в норме.

Для дифференциации коклюша с астмой, гриппом и туберкулезом нужно сдать общий анализ мокроты.

Мокрота при нормальном течении болезни является слизистой; если болезнь осложнена пневмонией, к слизи добавляется гной.

Дополнительно может использоваться генетическое исследование — выделение ДНК возбудителя в мокроте при помощи полимеразной цепной реакции (ПЦР). На поздних стадиях болезни ПЦР неэффективен.

Бакпосев помогает определить заболевание у ребенка или взрослого в течение короткого периода после заражения — колонии возбудителя в питательной среде и температуре 36°С начинают появляться уже на 3–5 сутки.

Посев на коклюш делается на материале из носоглотки пациента — мокроте, слизи, собранном при кашле или искусственным путем.

Собирается материал с задней стенки глотки, через 2–3 ч после приема пищи. Применяется три метода сбора слизи:

  • «кашлевые пластинки» — больной кашляет на чашку Петри с питательным субстратом, на котором бациллы, попавшие из капель слизи, размножаются в течение 2–4 дней;
  • мазок из зева при помощи тампонов — ватные тампоны, смоченные в альгинате кальция, вводят через нос в носоглотку и оставляют на 10 с, после чего помещают в питательную среду;
  • сбор шприцем через тонкий назальный катетер.

Для бактериологического исследования на коклюш важен правильный выбор питательной среды, так как бацилла Bordetella pertussis размножается только в элективных средах. Вариантов три:

  1. Казеиново-угольный агар. Среда готовится из сухого субстрата, 5 г которого растворяется в 100 мл воды, после чего добавляется цефалексин в концентрации 40 мг/л. Смесь стерилизуется в автоклаве 30 мин при 110°C. Колонии бактерий образуются через 3–4 дня.
  2. Среда Борде-Жангу, используемая, если из-за тяжелого течения болезни анализ на коклюш требует сбора материала непосредственно у постели пациента. Готовится субстрат из 0,5 кг картофеля, 1 л воды и 40 мл глицерина.

  1. Молочно-кровяной агар Осиповой. Смешиваются 5% МПА, 1% хлорида натрия и такое же количество теплого обезжиренного молока. Смесь стерилизуется в автоклаве, фильтруется, после чего к ней добавляется 1/5 часть дефибринированной животной крови. Для исключения посторонней флоры добавляется 0,25–0,5 ед. пенициллина на 1 мл среды.

Следует учитывать, что колонии бактерий медленно развиваются — окончательный результат исследования может быть получен лишь на 5–7 сутки после посева. Этот анализ на коклюш эффективен только на ранних сроках заболевания. Из-за особенностей возбудителя окончательный диагноз на основании бактериологической диагностики ставится лишь в 15–25% случаев (данные по г. Санкт-Петербург).

На разных субстратах колонии возбудителя коклюша проявляются по-разному; важно знать их основные признаки, чтобы дифференцировать со схожими колониями бактерий паракоклюша.

КУА Мелкие, выпуклые колонии коккобактерий. Блестят, имеют гладкую текстуру и кремовый цвет. Более крупные размеры, окрашивают субстрат в коричневатый оттенок. Бактерии — палочки.
Борде-Жангу и агар Осиповой Гладкие, блестящие колонии коккобактерий. Прозрачные, имеют куполообразную форму и жемчужный оттенок. Окружены четкой гемолизной зоной. Крупные колонии палочек с коричневым цветом среды. Имеется зона слабого гемолиза.

Колонии коклюша нужно также отличать от бактерий септического бронхита. Последние, в отличие от кокков, растут на субстрате без изменения цвета среды и имеют уреазу.

Методы диагностики коклюша иногда включают микроскопическое исследование в качестве вспомогательного. Взрослые бактерии коклюша не имеют отличительных морфологических особенностей, но на ранних стадиях развития их можно определить.

На I фазе жизни бактерии имеют S-форму. Они грамотрицательны, отличаются мелкими размерами и однородностью.

Представляют собой палочки без спор с нежными капсулами. На II и III фазах бактерии превращаются в полиморфные или коккоидные формы жизни.

Поскольку прямые методы исследования (бактериологический и ПЦР) дают результаты только на ранних стадиях развития заболевания, при сроке более 3 недель от заражения используются серологические методы — анализы на антитела к коклюшу. Основная их цель — выявить наличие иммуноглобулинов IgM в крови и IgA в слизи.

Основные серологические методы исследования (РПГА, РА, РНГА) применяются также для эпидемиологического анализа. Диагностический титр при реакции пассивной гемагглютинации у непривитого ребенка, не перенесшего коклюш в прошлом — 1:80. У привитых и взрослых пациентов титры считаются диагностическими при нарастании в 4 раза.

Иммуноферментный анализ на иммуноглобулины IgM и IgA — это более современный метод анализа на коклюш у детей и взрослых.

Интерпретировать положительные (+) и отрицательные (-) результаты можно следующим образом:

коклюш не обнаружен
— или + — или + протекающее заболевание
+ — или + коклюш перенесен недавно
+ коклюш перенесен давно или была проведена иммунизация

Существует два метода анализа, позволяющие диагностировать коклюш в сжатые сроки:

  1. Иммунофлюоресцентный. Обнаруживает корпускулярные антигены в слизи на стенке глотки. Результат доступен уже через 2–6 ч.
  2. Латексная микроагглютинация. Выявляет антигены B. pertussis в течение 30–40 мин.

ПЦР также является быстрым методом анализа; его недостатком является невозможность применения на поздних сроках заболевания. Экспресс-диагностика коклюша у детей позволяет ускорить постановку диагноза и начало лечения, а также повысить процент лабораторных подтверждений коклюша.

Возбудителем коклюша является короткая неподвижная грамотрицательная палочка, которая называется Bordetella pertussis. Чаще всего она встречается у детей до пятилетнего возраста. Но иногда поражает дыхательные пути взрослых людей. Чтобы выявить истинную причину заболевания, необходимо сделать анализ на коклюш. Его производят несколькими способами в зависимости от стадии течения воспалительного процесса.

Палочка рода Бордетеллы передается воздушно-капельным путем, как и любая инфекция, провоцирующая грипп, ОРВИ или другие воспаления дыхательной системы. После ее проникновения в организм развивается коклюш, характеризирующийся циклическим течением с приступообразным судорожным кашлем.

Болезнетворный микроорганизм содержит экзотоксины и эндотоксины. Именно эти компоненты палочки Бордетеллы становятся опасными для организма больного, особенно, если заражение произошло у ребенка возрастом до пяти лет.

Как происходит развитие коклюша?

  1. Инфекция заселяет реснитчатый эпителий дыхательных путей (она не проникает в кровеносную систему и непосредственно внутрь клеток).
  2. Когда палочка погибает, образуется эндотоксин, провоцирующий спазматический кашель. Токсическое вещество усиливает воспаление, вызывает лимфоцитоз, гипогликемию.
  3. Кашлевой рефлекс сохраняется несколько недель. Сначала он характеризируется легким течением, но после закрепления в продолговатом мозгу раздражается блуждающий нерв, поэтому приступы усиливаются и учащаются.
  4. Сформировавшийся очаг возбуждения способен раздражать и другие подкорковые центры вегетативной системы. Именно поэтому при очередном кашлевом приступе у больного может возникнуть рвота, спазм сосудов и даже остановка дыхания.

Очень сложно выявить заболевание в первые недели после заражения, поскольку врачи направляют пациента на анализ крови на коклюш лишь при появлении симптомов патологического процесса.

А возбудитель Бордетелла сразу не вызывает характерных признаков интоксикации острых респираторных инфекций (высокая температура, насморк, кашель, озноб и др.).

Кульминация заболевания выявляется через 2-3 недели после начала циклического течения.

Опасность коклюша в том, что он способен провоцировать развитие осложнений:

  • Поражение бронхолегочных отделов дыхательной системы;
  • Заболевания сердечно-сосудистой системы (кровоизлияния, легочное сердце);
  • Энцефалопатия;
  • Пневмония.

Именно поэтому очень важно как можно раньше сделать анализ крови на коклюш и начать его лечение. Таким образом, удастся избежать осложнений.

  1. Инкубационный (от трех до четырнадцати дней).
  2. Катаральный (около двух недель).
  3. Судорожный или спазматический.
  4. Обратное развитие (в среднем длится от двух до 12 недель).

Уже на стадии катарального течения можно сделать анализ на выявление палочки Бордетеллы. В этот период начинает беспокоить сухой навязчивый кашель без повышения температуры. Кашлевые толчки усиливаются к вечеру и не проходят даже после приема противокашлевых препаратов. Других симптомов заболевания не отмечается.

В катаральный период течения коклюша расшифровка анализа периферической крови поможет определить лейкоцитоз, то есть, значительное повышение лейкоцитов. Обычно показатели поднимаются до 15-40*109/л. При этом скорость оседания эритроцитов (СОЭ) остается в норме.

При наступлении судорожного периода все симптомы коклюша станут очевидными. Характерным признаком являются частые кашлевые толчки со свистящим вдохом (реприз). Цикличность кашля повторяется в среднем от 2 до 15 раз. При тяжелом течении у пациентов период может насчитывать 50 циклов.

При этом, внешний вид больного не оставляет сомнений, что у него коклюш:

  • Глаза наливаются кровью;
  • Лицо краснеет или приобретает синюшный оттенок;
  • Язык выталкивается из ротовой полости и свисает с загнутым вверх кончиком;
  • Венозные сосуды головы набухают;
  • После приступа выделяется вязкая мокрота, может возникать рвота.

В период обратного развития симптоматика ослабляется и через некоторое время исчезает.

Для бакпосева делают забор слизи из задней стенки глотки. Процедура должна осуществляться утром натощак или же через 2-3 часа после приема пищи. Также могут применять метод «кашлевых пластинок» для изучения выделившихся капель мокроты. Но он малоэффективен при заборе отделяемой слизи у деток, которые «плохо» кашляют.

Бактериологический посев производят на казеиново-угольный агар. Результат диагностики после прорастания микроорганизма получают через 3-7 суток. Такой анализ будет информативным, если взять забор слизи у пациента, кашляющего не более месяца. Дальше возбудитель не выделяется.

Также расшифровка будет ложной, если пациент принимает антибиотики. Бакпосев помогает отличить коклюш от туберкулеза, бронхиальной астмы, ОРВИ, пневмонии.

Заключается в исследовании сыворотки человеческой крови на наличие антител или иммуноглобулинов IgM (на раннем сроке) и IgG (на позднем сроке) к антигенам коклюшного микроба. Наиболее достоверный лабораторный метод – это иммуноферментный анализ (ИФА). Он позволяет не только определить болезнетворного возбудителя, но и понять, на какой стадии находится болезнь по количеству антител.

Серологическая диагностика коклюша эффективна, потому что после проникновения инфекции в организме человека сразу же вырабатываются иммунные защитные комплексы. В сыворотку крови лаборант добавляет антиген заболевания и после химических реакций выдает результат.

Расшифровка анализа крови на коклюш серологическим методом показывает, есть ли в сыворотке пациента антитела к палочке Бордетелла.

Повышение титра IgG или IgM в четыре раза подтверждает диагноз острого течения болезни. Слабое увеличение титра может свидетельствовать о перенесенном ранее коклюше, о недавней вакцинации АКДС.

Показатель «0» — это норма и говорит об отсутствии анаэробной инфекции.

Иммуноферментный анализ крови сдают дважды. Первый раз для выявления болезнетворного возбудителя. А второй – чтобы понять, насколько динамично развивается воспалительный процесс.

Очень часто для диагностики коклюша используют иммунофлюоресцентный способ обследования (РНИФ) отделяемого со стенки глотки. Он обнаруживает антитела за 2-6 часов.

Латексная микроагглютинация (ЛМА) – это очень быстрый диагностический способ выявить возбудителя коклюша. Процедура длится всего 30-40 минут.

Нередко анализы на коклюш у детей и взрослых на раннем сроке заболевания проводят с помощью ПЦР – полимеразная цепная реакция. Он основан на выявлении ДНК палочки Бордетеллы, поэтому в 100% случаев определяет, есть ли возбудитель в организме или его нет.

ПЦР является информативной диагностической процедурой, поскольку она не зависит от реакции организма на инфекцию, как при ИФА. Молекулярный метод выявляет конкретного микроба даже в инкубационный период, когда еще нет никаких симптомов заболевания. А при коклюше, с продолжительным сроком «тихого» развития, он как раз будет идеальным лабораторным исследованием.

Но для получения точного результата анализа и его расшифровки необходимо сохранить чистоту биологического материала.

Если на образец случайно попадет чужой фрагмент ДНК палочки коклюша (из воздуха или каких-то других предметов), то может возникнуть «ложное срабатывание».

А отсутствие инфекции по показателям анализа при явных симптомах заболевания случается, если материал взят неправильно (мазок не из зева или носоглотки).

  1. За день до сдачи анализа рекомендовано соблюдать диету – снизить потребление жирной пищи, сладостей, алкогольных напитков. Желательно исключить стрессовые ситуации и серьезные физические нагрузки.
  2. Забор крови производится натощак утром из локтевой вены (у детей 5 мл, у взрослых до 10 мл). Воду пить разрешено. От последнего приема ужина отсчитывают минимум 8 часов.
  3. Повторное обследование нужно пройти спустя две недели после первой серологической диагностики.
  4. Если больной принимает медикаменты, включая антибиотики, он должен рассказать название и дозировку доктору.

В основном перед забором анализов в лаборатории сотрудники предупреждают о том, как правильно сдавать кровь. В профессиональных учреждениях есть свои сайты, где указано, каких правил нужно придерживаться перед приходом к лаборанту. В Инвитро и других крупных медицинских компаниях результаты анализов максимально точные, главное, соблюдать указания врача, чтобы не исказить полученные данные.

В расшифровке серологической диагностики показывают, какой должна быть норма показателей крови.

Если в анализе пациента содержится значительное количество антител, которое при повторном обследовании увеличивается, значит, диагноз коклюш подтверждается.

Незначительное повышение уровня иммуноглобулинов или антител может говорить о сформировавшемся иммунитете к перенесенному инфекционному заболеванию.

Если пациента направляют на неспецифический гематологический анализ крови с пальца, тогда специальной подготовки не требуется. Главное условие – проводить забор натощак утром. Если по результатам анализа в крови повышенное количество лейкоцитов и нейтрофилов, но СОЭ в норме, то такие изменения характерны для коклюша.

Если при сдаче анализа крови существует не так много ограничений, то для проведения бакпосева или молекулярного способа диагностики очень важно получить чистый биологический материал без примесей каких-либо добавок (пищевых, лекарственных и др.). Также большое значение имеет профессионализм лаборанта, который будет брать мазок слизи из зева или носоглотки. Если забор производится не из того места, где сосредоточен инфекционный возбудитель, результат анализа будет ложным.

Перед сдачей слизистого отделяемого из ротоглотки нужно придерживаться следующих правил:

  • Не принимать пищу или спиртных напитков в течение четырех часов до посещения лаборатории;
  • Запрещено чистить зубы натощак, иначе образец материала будет смыт или испорчен;
  • Не принимать лекарственных средств перед сдачей анализа;
  • Рекомендовано только прополоскать рот обычной кипяченой водой без добавок.

В настоящее время есть множество различных государственных или частных медучреждений, которые предлагают лабораторную диагностику различных возбудителей.

Можно воспользоваться бесплатным проведением анализов в поликлинике по месту жительства или прибегнуть к услугам комфортных лабораторий, где есть все необходимые реагенты и материалы, чтобы получить максимально точные результаты диагностики.

Цена таких исследований на наличие возбудителя коклюша зависит от выбранного медучреждения.

В профессиональных частных лабораториях результаты анализов выдают с расшифровкой. Пациент самостоятельно может понять, какие у него показатели – в норме или свидетельствуют о наличии инфекционного агента. После этого врач, если потребуется, назначит эффективное лечение или направит на дополнительное обследование.

Коклюш – острое инфекционное заболевание органов дыхания, основным проявлением которого является длительный приступообразный кашель. Болеют коклюшем люди любого возраста – у кого нет достаточного иммунитета после вакцинации, тот в зоне риска.

Однако тяжелее всего переносят недуг маленькие дети, у них часто возникают осложнения со стороны нервной системы, расстройства дыхания и кровообращения.

Своевременная диагностика коклюша в большинстве случаев позволяет избежать затягивания болезни и развития осложнений.

1. Почему важно своевременно диагностировать коклюш 2. В каких случаях показано обследование на коклюш 3.

Анализы при подозрении на коклюш – Бактериологический анализ отделяемого глотки на коклюш – Выявление возбудителя коклюша методом ПЦР – Определение концентрации специфических антител в крови – Общий анализ крови при коклюше 4. Стоимость анализов на коклюш 5. Где можно сдать анализы на коклюш

Для этого перед походом в лабораторию обследуемый не должен чистить зубы, кушать, пить, полоскать рот и горло. Если это условие нарушено, сдавать материал можно будет не ранее чем через 2-3 часа.

  1. Выделения для анализа на коклюш забирают специальным тампоном с задней стенки глотки в инфекционной больнице или прямо в лаборатории.
  2. Далее материал сеют на питательные среды, в которых хорошо растет и размножается возбудитель коклюша.
  3. Есть еще один метод забора слизи для исследования – открытую чашку с питательной средой подносят непосредственно ко рту обследуемого во время кашлевого приступа.

Предварительный результат бактериологического анализа можно получить уже на 2-3 день после посева, а заключительный – только через 5-7 суток. Bordetella pertussis на искусственных средах растет достаточно медленно, поэтому бактериологом необходимо время для точной идентификации микроорганизмов.

  • Материалом для данного исследования служит соскоб с задней стенки глотки.
  • Эффективность метода ПЦР в диагностике коклюша является самой высокой (около 80%), ложноотрицательные результаты встречаются редко.
  • Проводится такой анализ в первые 3-4 недели заболевания, то есть когда в слизистой дыхательных путей еще присутствуетBordetella pertussis.
  • Особенности подготовки: нельзя чистить зубы, кушать и пить минимум за 2-3 часа до исследования, непосредственно перед взятием материала можно пополоскать рот кипяченой водой.

Серологическое исследование применяется для диагностики коклюшной инфекции на поздних сроках ее развития – приблизительно с 3 недели заболевания.

В это время описанные выше методы оказываются малоэффективными, поскольку возбудителя в дыхательных путях уже нет, а сохранение кашля связано с остаточными воспалительными явлениями и перевозбуждением кашлевого центра в головном мозге.

В ходе серологической диагностики коклюша определяют титры антител к антигенам Bordetella pertussis трех классов:

  • иммуноглобулины М – появляются на 2 недели заболевания;
  • иммуноглобулины А – синтезируются с 2-3 недели;
  • иммуноглобулины G – обнаруживаются только после 3 недели недуга.

Основным методом серологической диагностики коклюша является иммуноферментный анализ (ИФА). Исследуемый материал – венозная кровь.

Подготовка к сдаче крови должна быть такой же, как и перед другими анализами: приходить в лабораторию необходимо утром натощак, за 12 часов до исследования желательно исключить физические нагрузки и не принимать лекарственные средства, если это возможно.

Особенностью серологической диагностики коклюша является необходимость в исследовании парных сывороток, то есть проведении двух анализов с промежутком в 10-14 дней. Такая тактика дает возможность выявить нарастание титров антител, которое говорит в пользу развивающегося заболевания, а не иммунитета, приобретенного вследствие ранее перенесенного коклюша или вакцинации.

Согласно рекомендациям ВОЗ подтверждением наличия коклюша у невакцинированных от этой инфекции детей является нарастание уровня антител Ig М и Ig А к одному или нескольким антигенам Bordetella pertussis. Для оптимальной лабораторной диагностики одновременно должны использоваться два метода исследования: бактериологический посев и серологический анализ крови.

  • Данный метод исследования не является специфическим и не может подтвердить или опровергнуть диагноз «Коклюш».
  • Единственное предназначение этого анализа – выявление воспалительного процесса и коррекция плана дальнейшего обследования.
  • Врач может заподозрить коклюш при наличии у пациента соответствующей клинической картины и высокого лимфоцитоза и лейкоцитоза в результате общего анализа крови.

В частных клиниках и лабораториях бактериологическое исследование на коклюш стоит в среднем 1,5 тыс. рублей. Определение титра антител к коклюшу обойдется по 750-800 рублей за каждый иммуноглобулин.

Приблизительно такая же цена и у анализа глоточного соскоба на коклюш методом ПЦР.

Дополнительно оплачивается услуга по забору материала: мазки и соскобы – 300-400 рублей, взятие венозной крови – 100-150 рублей.

Коклюш – острая антропонозная инфекционная болезнь с воздушно-капельным механизмом передачи возбудителя, вызываемая коклюшным микробом и характеризующаяся длительным своеобразным спазматическим кашлем с поражением дыхательной, сердечно-сосудистой и нервной систем. Возбудитель коклюша – Bordetella pertussis – грамотрицательная коккобацилла, относится к роду Bordetella. Помимо B. pertussis респираторные инфекции у людей могут вызывать B.parapertussis и B.bronchiseptica.

B.parapertussis вызывает паракоклюш – заболевание, подобное коклюшу, но с более легким течением. Перекрестный иммунитет в отношении коклюша и паракоклюша отсутствует. B.

bronchiseptica вызывает бронхисептикоз (бордетеллез), протекающий как ОРВИ, возникающий при контакте с инфицированным животным, у людей с ослабленной иммунной системой может вызывать пневмонию. Выделяют типичные (кашель имеет приступообразный характер) и атипичные (отсутствует спастический кашель) формы коклюша.

В течении типичных форм коклюша различают 4 периода: инкубационный (в среднем 14 дней), катаральный (1–2 недели), период спазматического кашля (4–6 недель) и период разрешения.

Выраженность клинических проявлений зависит от тяжести заболевания, оцениваемой по: длительности катарального периода, частоте приступов кашля, наличию цианоза лица при кашле, гипоксии вне приступов кашля, степени нарушения работы сердечно-сосудистой системы, наличию и степени выраженности энцефалических расстройств.

Диагноз коклюша считается подтвержденным, если имеется соответствие клиническому стандартному определению случая коклюша, лабораторное подтверждение и/или имеется эпидемиологическая связь с лабораторно подтвержденным случаем. Возможно сочетанное инфицирование с другими возбудителями ОРЗ, что отягощает течение болезни.

Показания к обследованию. Диагностика: больные с подозрением на коклюш и паракоклюш (в соответствии со стандартным определением случая*), а также длительно (5–7 дней и более) кашляющих, независимо от указаний на контакт с больными.

По эпидемическим показаниям: дети и взрослые в детских учреждениях, родильных отделениях и детских больницах, в которых были выявлены больные коклюшем.

  • Острые бронхиты, вызванные Mycoplasma pneumoniae, Chlamydophila pneumoniae, вирусными возбудителями респираторных инфекций;
  • аспирация инородного тела;
  • муковисцидоз;
  • лимфогранулематоз.

Материал для исследований

  • Заднеглоточный мазок – культуральное исследование;
  • носоглоточный мазок – культуральное исследование;
  • мазки со слизистой носоглотки и ротоглотки – выявление ДНК микроорганизмов;
  • гортанно-глоточные смывы – обнаружение АГ;
  • сыворотка крови – обнаружение АТ.

Этиологическая лабораторная диагностика включает выделение чистой культуры бордетелл и определение их видовой принадлежности; выявление ДНК B.pertussis, B.parapertussis, B.Bronchiseptica методом ПЦР, выявление АГ B. pertussis в гортанно-глоточных смывах с использованием РНИФ; обнаружение специфических АТ.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. При выявлении бордетелл выполняют выделение чистой культуры микроорганизмов и определение их видовой принадлежности методами микроскопии, постановкой РА с видоспецифическими сыворотками, проведением биохимических тестов и оценкой подвижности микроба.

Культуральный метод характеризуются большой продолжительностью исследования, его диагностическая чувствительность не превышает 10–20%; аналитические характеристики во многом зависят от качества используемых сред (добавление крови животных является обязательным условием) и реагентов для иммунологических и биохимических идентификационных тестов.

Обнаружение ДНК методом ПЦР наиболее эффективно и востребовано для ранней диагностики, наибольшими диагностическими возможностями обладают методики, позволяющие обнаруживать и дифференцировать значимые для человека виды Bordetella с чувствительностью 5 x 102 – 1 x 103 ГЭ/мл исследуемого материала со специфичностью 100%.

Выявление АТ позволяет диагностировать коклюш на поздних сроках. Обнаружение специфических АТ проводят с использованием: РА для диагностики коклюша и паракоклюша, ИФА для обнаружения АТ (Ig M, A, G) к различным антигенам B.pertussis и B.parapertussis.

Выявление специфических IgА методом РНИФ практически не используется по причине отсутствия стандартизации; чувствительность анализа, по данным авторов метода, варьирует в широком диапазоне от 103 до 105 микробных клеток в 1 мл, при этом положительные результаты исследования можно учитывать только при наличии типичной симптоматики коклюша.

Показания к применению различных лабораторных исследований. Культуральное исследование с диагностической целью следует проводить в ранние сроки заболевания (1–2 недели болезни); в более поздние сроки высеваемость возбудителя резко снижается. Оптимальное время для обнаружения ДНК методом ПЦР – до 3-х недель от начала заболевания.

Определение АТ целесообразно с 3-й по 6-ю недели от начала заболевания, далее титры АТ начинают снижаться.

У детей до 6 лет, вакцинированных против коклюша, можно использовать только пробы крови, взятые в динамике (парные сыворотки), причем первый раз кровь берется не ранее чем через 3 недели от начала заболевания, повторно – спустя 2 недели.

Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Диагноз коклюша считается лабораторно подтвержденным в случае выделения культуры B.pertussis; обнаружения специфического фрагмента генома B.

pertussis методом ПЦР; выраженной сероконверсии (увеличение в 4 и более раз уровня специфических IgG и/или IgA в парных сыворотках, или обнаружении у не привитого пациента специфических IgM). Диагностическим титром реакции агглютинации у не привитых и не болевших детей считают разведение 1:80.

Необходимо учитывать, что у детей в возрасте до 3 месяцев могут присутствовать материнские АТ, но, как правило, в низких титрах. Диагноз коклюш, вызванный B.parapertussis, ставится в случае выделения культуры B.parapertussis или обнаружения специфического фрагмента генома B.

parapertussis методом ПЦР, или при обнаружении АТ методом РА в титре не менее 1:80. Заболевание, вызванное B.bronchiseptica, диагностируется при выделении культуры или обнаружения специфического фрагмента генома методом ПЦР.

Стандартное определение случая заболевания коклюшем – острое заболевание, характеризующееся: сухим кашлем с постепенным его усилением и приобретением характера приступообразного спазматического на 2-3 неделе заболевания, особенно в ночное время суток или после физической и эмоциональной нагрузки; явлениями апноэ, гиперемией лица, цианозом, слезотечением, рвотой, лейко- и лимфоцитозом в периферической крови, развитием «коклюшного легкого», жестким дыханием, отделением вязкой мокроты; незначительным повышением температуры.

  • Комплексное исследование, направленное на диагностику коклюша и паракоклюша, а также на оценку эффективности вакцинации против коклюша.
  • Синонимы русские
  • Возбудители коклюша, паракоклюша; комплексное обследование.
  • Синонимыанглийские
  • Bordetella pertussis, Bordetella parapertussis; comprehensive examination.
  • Какой биоматериал можно использовать для исследования?
  • Венозную кровь, мазок из носоглотки, мазок из зева (ротоглотки).

Как правильно подготовиться к исследованию?

За 3-4 часа до взятия мазков из ротоглотки (зева) не употреблять пищу, не пить, не чистить зубы, не полоскать рот/горло, не жевать жевательную резинку, не курить. За 3-4 часа до взятия мазков из носа не закапывать капли/спреи и не промывать нос. Взятие мазков оптимально выполнять утром, сразу после ночного сна.

Общая информация об исследовании

Коклюш представляет собой острую антропонозную бактериальную инфекцию. Возбудитель – Bordetella pertussis (палочка Борде — Жонгу), мелкая неподвижная грамотрицательная коккобацилла, строгий аэроб. Инфекция передается воздушно-капельным путём. Источником инфекции является больной человек с любой формой инфекционного процесса.

В течении заболевания выделяют следующие периоды: инкубационный период (длительностью от нескольких дней до двух недель), катаральный (от 5-8 до 11-14 дней), пароксизмальный, или спазматический (2-8 недель), разрешения (2-4 недели) и реконвалесценции (2-6 месяцев).

Наиболее характерными для коклюша являются проявления, характеризующие пароксизмальный период заболевания. К ним относятся сухой спастический кашель, цианоз носогубного треугольника, акроцианоз, возможна рвота, лихорадка, слабость, в гемограмме – лейкоцитоз, лимфоцитоз.

Следует отметить, что наиболее тяжело заболевание протекает у детей раннего возраста, возможно развитие осложнений со стороны бронхолегочной и нервной систем. У взрослых и лиц после вакцинации коклюш чаще протекает в легкой, атипичной форме, как правило, без осложнений.

Паракоклюш – это острая бактериальная инфекция респираторного тракта, поражающая детей и взрослых. Возбудителем инфекции является аэробная палочка Bordetella parapertussis. Клинические проявления данного заболевания схожи с картиной коклюша, характерна более стертая смена периодов, легкое течение, редкое развитие осложнений, преимущественно у детей.

Диагностика коклюша и паракоклюша основана на клинико-эпидемиологических данных, результатах изменений в клиническом анализе крови и подтверждается лабораторными методами.

В клинической лабораторной диагностике данных заболеваний применяют несколько методов: бактериологический метод для выявления роста колоний возбудителей коклюша/паракоклюша; серологический метод, направленный на определение суммарных антител к данным возбудителям; метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) – для выявления генетического материала возбудителя коклюша.

Бактериологическое обследование является первым этапом диагностики, но позволяет выявлять возбудителей только на ранних сроках заболевания, в первые 2-3 недели.

Метод ПЦР является высокоэффективным в диагностике коклюша, позволяет выявлять фрагменты ДНК возбудителя B. pertussis в исследуемом биоматериале, обладает высокой диагностической специфичностью, достигающей 100 %.

Использование данного метода рекомендовано в первые три недели от начала клинических проявлений заболевания, то есть в катаральный и ранний пароксизмальный период. В более поздние сроки заболевания диагностическая чувствительность метода падает.

Следует отметить, что в отличие от других лабораторных методов ПЦР эффективна на фоне лечения антибактериальными препаратами. Также она используется при обследовании детей раннего возраста, в отличие от более старших детей и взрослых, когда возможно возрастание числа ложноположительных результатов.

У лиц, вакцинированных против коклюша, положительный результат данного метода может свидетельствовать о транзиторном носительстве патогена, а не об активной форме заболевания.

Серологическое обследование позволяет выявлять в сыворотке крови специфические антитела, направленные к антигенам возбудителей B. pertussis и B. parapertussis. Они могут быть обнаружены с помощью реакции непрямой гемагглютинации (РНГА).

При выборе РНГА в качестве диагностического теста при подозрении на коклюш и паракоклюш следует учитывать клинический период заболевания, возраст пациента и наличие предшествующей вакцинации. Для подтверждения диагноза необходимо определение нарастания титра антител в четыре и более раза в парных сыворотках, взятых с интервалом 10-14 дней.

Реакцию ставят параллельно с коклюшным и паракоклюшным антигеном. Серологическое обследование рекомендовано применять в период 3-6 недель от начала первых клинических симптомов заболевания, характеризующий пароксизмальный период коклюша.

Данный метод не рекомендуется применять детям до 3 месяцев, так как иммунная система новорождённых в это время ещё незрелая и могут быть обнаружены материнские антитела в низких титрах.

Также не рекомендуется проводить серологическое исследование лицам в течение 1 года после вакцинации против коклюша вследствие невозможности различить иммунный ответ на вакцинацию или на первичную инфекцию. Титр антител к B. pertussis может быть определен для оценки эффективности прививки против коклюша у детей.

Для чего используется исследование?

  • Для комплексной лабораторной диагностики коклюша и паракоклюша.
  • Для диагностики коклюша в первые три недели от начала заболевания, характеризующие катаральный и ранний пароксизмальный период, а также на фоне лечения антибактериальными препаратами.
  • Для диагностики коклюша и паракоклюша в спазматический (пароксизмальный) период заболевания.
  • Для оценки эффективности вакцинации против коклюша.

Когда назначается исследование?

  • При клинических проявлениях коклюша/паракоклюша: сухой спастический кашель, сопровождающийся глубоким свистящим вдохом, рвотой, цианозом носогубного треугольника, акроцианоз, лихорадка, слабость, насморк, слезотечение.
  • При обследовании лиц, находившихся в тесном контакте с больными коклюшем/паракоклюшем.
  • При оценке эффективности вакцинации против коклюша.

источник