Анализы на антитела у детей

Анализ крови на антитела – виды (ИФА, РИА, иммуноблоттинг, серологические методики), норма, расшифровка результатов. Где можно сдать? Цена исследования.

Сайт предоставляет справочную информацию исключительно для ознакомления. Диагностику и лечение заболеваний нужно проходить под наблюдением специалиста. У всех препаратов имеются противопоказания. Консультация специалиста обязательна!

Анализ крови на антитела означает совокупное название целого ряда лабораторных методов диагностики, предназначенных для определения различных веществ и микроорганизмов в крови по наличию антител к этим выявляемым биологическим структурам.

Чтобы понимать значение термина «анализ крови на антитела», нужно знать, что такое антитела, против чего и кого они бывают, и как используются в лабораторных методах.

Итак, антитела представляют собой белки, которые вырабатываются клетками иммунной системы (В-лимфоцитами) против каких-либо микробов, попавших в организм, либо против биохимических молекул. Вырабатываемые иммунными клетками антитела предназначены для уничтожения тех микроорганизмов или биохимических соединений, против которых они были синтезированы. Иными словами, когда иммунные клетки синтезируют достаточное количество антител, последние появляются в системном кровотоке и начинают планомерное уничтожение микробов или биологических молекул, попавших в организм человека и вызывающих различные заболевания.

Иммунные клетки вырабатывают исключительно специфичные антитела, которые работают и уничтожают только строго определенный вид микробов или биомолекул, ранее распознанные иммунной системной, как чужеродные. Схематично это происходит следующим образом: в организм попадает какой-либо патогенный микроорганизм или биологическая молекула. На это соединение или микроб «садится» клетка иммунной системы, которая как бы «считывает» его характеристики (имеющиеся на поверхности белки-рецепторы), то есть «знакомится». Далее иммунная клетка-посредник путем сложного каскада биохимических реакций передает «считанную информацию» лимфоцитам. Получившие «информацию» лимфоциты активируются – они как бы приняли «задачу». И после активации лимфоциты начинают синтезировать антитела, которые содержат рецепторы, позволяющие им «узнавать» и прицепляться к поверхности только тех микробов или молекул, «характеристики» которых были переданы клетками-посредниками. В результате получаются строго специфические антитела, эффективно уничтожающие исключительно «узнанные» патогенные микробы и биомолекулы.

Такие специфические антитела нарабатываются в организме всегда при попадании в него какого-либо патогенного микроорганизма – бактерии, вируса, простейшего, гельминта и т.д. Также антитела могут синтезироваться для уничтожения биологических молекул, которые иммунная система признала «чужеродными». Например, при попадании в организм крови другой группы иммунная система распознает ее эритроциты, как «чужие», передает сигнал лимфоцитам, которые нарабатывают антитела, в свою очередь, уничтожающие чужеродные эритроциты. Из-за этого развивается реакция «хозяин против трансплантата».

Но всегда иммунная система вырабатывает антитела, действующие строго против конкретного микроба или биомолекулы, а не против всех, кто «похож» на них. Благодаря подобной специфичности и избирательности не происходит уничтожения антителами нужных клеток и биомолекул, а подвергаются нападению только признанные иммунной системой «чужими» и опасными.

Антитела на языке биохимии называются иммуноглобулинами, и обозначаются английской аббревиатурой Ig. В настоящее время выделяют пять классов иммуноглобулинов, которые может синтезировать В-лимфоцит, – это иммуноглобулины А (IgA), иммуноглобулины G (IgG), иммуноглобулины М (IgM), иммуноглобулины Е (IgE) и иммуноглобулины D (IgD). Каждый класс иммуноглобулинов обладает вышеописанной специфичностью в отношении уничтожаемых им микробов или биомолекул. Но каждый класс иммуноглобулинов имеет и, так сказать, свой «фронт», на котором они действуют.

Так, иммуноглобулины А, главным образом, расположены на слизистых оболочках, и обеспечивают уничтожение патогенных микробов во рту, носу, носоглотке, мочеиспускательном канале, влагалище. Иммуноглобулины М нарабатываются первыми при попадании микроба в кровоток, и потому считаются ответственными за острый воспалительный процесс. Иммуноглобулины G, напротив, нарабатываются медленнее, но зато долго циркулируют в крови и обеспечивают уничтожение всех остатков микробов, попавших в организм. Именно иммуноглобулины G ответственны за хронический инфекционно-воспалительный процесс, который они поддерживают вялотекущим, уничтожая патогенные микробы настолько, что они не могут привести к смертельному исходу, но недостаточно для их полного удаления из организма. Иммуноглобулины Е обеспечивают постоянное протекание аллергических реакций, так как вырабатываются в ответ на различные антигены, присутствующие в окружающей среде. А иммуноглобулины D выполняют разные функции.

Таким образом, обобщая вышесказанное, можно коротко резюмировать, что антитела в крови могут быть различных классов, и что каждое антитело строго специфично к какому-либо патогенному микробу либо к биомолекуле.

Когда лабораторными методами определяют наличие в крови антител, то обязательно указывают, к какой биомолекуле или к какому микробу ищут антитела. Определение антител к какому-либо микробу позволяет понять, заражен человек этим микроорганизмом или нет, так как если заражение отсутствует, то и антител в крови не будет. Но если заражение имеется, то в крови у человека будут циркулировать антитела, нарабатываемые иммунной системой для уничтожения микроорганизма.

Кроме того, определение антител в крови используют для того, чтобы понять, болел ли в прошлом человек какой-либо инфекцией. Такое применение анализа на антитела возможно благодаря тому, что даже после полного выздоровления в крови у человека остается небольшое количество антител (клеток памяти), уничтоживших патогенный микроб. Эти антитела циркулируют в крови «на всякий случай», чтобы при повторном попадании в организм такого же, уже знакомого микроба сразу его уничтожить и даже не дать болезни начаться. Собственно, именно такие клетки памяти и обеспечивают то, что называется иммунитетом к инфекции, а именно – то, что человек, перенесший болезнь, больше ей не заражается.

Анализ крови на антитела проводят с целью обнаружения антител к тому или иному конкретному микроорганизму или биомолекуле. Причем для обнаружения каждого конкретного вида антител делают отдельный анализ. Например, иммунная система организма против вируса гепатита В вырабатывает несколько разных антител – антитела против оболочки, антитела против ДНК вируса и т.д. Соответственно, для обнаружения антител против оболочки вируса гепатита В выполняют один анализ, а для выявления антител против ДНК вируса – другой анализ, и т.д. Таким образом, совершенно справедливым является простое правило: один вид антител – один анализ. Это правило всегда нужно учитывать при планировании обследования, когда нужно обнаружить антитела в крови к каким-либо патогенным микроорганизмам или биомолекулам.

Наличие антител в крови к различным микробам и биомолекулам определяют целым рядом различных лабораторных методик. В настоящее время наиболее распространенными методами выявления различных антител в крови являются следующие методы:

• Иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA);
• Радиоиммунный анализ (РИА);
• Иммуноблоттинг;
• Серологические методики (реакция гемагглютинации, реакция непрямой гемагглютинации, реакция торможения гемагглютинации и т.д.).

Рассмотрим методы определения наличия антител в крови подробнее.

Метод иммуноферментного анализа (ИФА) позволяет определить наличие различных антител в крови. В настоящее время подавляющее большинство анализов крови на антитела выполняются именно методом ИФА, который относительно прост в использовании, недорог и очень точен.

Метод иммуноферментного анализа состоит из двух частей – иммунной и ферментной, которые позволяют с точностью «вылавливать» строго определенные микробы или биомолекулы в крови, и потом определять их.

Иммунная часть методики заключается в следующем: в наборе для лабораторного анализа на дно лунок прикреплены антигены, которые способны связываться с искомыми строго определенными антителами. Когда в эти лунки вносится исследуемая кровь, то присутствующие в ней антитела связываются с антигенами на дне лунок, образуя прочный комплекс. Если же в крови выявляемые антитела отсутствуют, то в лунках не образуются прочные комплексы, и результат анализа будет отрицательным. После внесения исследуемой крови в лунки ее оставляют на некоторое время, достаточное для образования комплекса антиген-антитело, после чего выливают. Далее лунку несколько раз промывают от остатков крови специальными растворами, которые не могут разъединить образовавшихся комплексов антиген-антитело, прочно прикрепленных к дну лунок.

Далее проводится ферментная часть анализа: в промытые лунки вносится специальный фермент, как правило, пероксидаза хрена, которая прочно связывается с комплексами антиген-антитело. Затем в лунки добавляют перекись водорода, которую разлагает пероксидаза хрена с образованием окрашенного вещества. Соответственно, чем больше будет комплексов антиген-антитело, тем большее количество пероксидазы окажется в лунках. А значит, тем большее количество окрашенного вещества получится в результате разложения перекиси водорода, и тем интенсивнее будет окраска раствора в лунке. Далее на специальном приборе измеряется степень интенсивности окраски полученного в лунках вещества, и по формулам вычисляется сначала концентрация пероксидазы. После этого, на основании концентрации пероксидазы, рассчитывается концентрация комплексов антиген-антитело, и, соответственно, количество, выявляемых антител в крови.

Как видно, метод ИФА не сложный, но надежный, простой, информативный и высокоточный. Более того, методом ИФА можно определить концентрацию практически любых антител в крови – достаточно просто «приклеить» к лункам вещество, с которым эти детектируемые антитела будут связываться. Именно из-за этих качеств метод ИФА и получил широчайшее распространение в настоящее время для выявления различных антител в крови человека.

Данный метод реже используется для выявления различных антител ввиду его дороговизны, отсутствия необходимого оборудования в лабораториях и сложности производства реактивов для его проведения. По своей сути РИА основан на тех же принципах, что и ИФА, только в качестве веществ, по которым производится определение концентрации искомых антител, применяются меченые изотопы, дающие излучение, а не пероксидаза хрена. Естественно, изготовление меченых изотопов и их фиксация на антигенах, прикрепленных к дну лунок, гораздо сложнее и дороже производства пероксидазы хрена. В остальном РИА состоит из тех же двух этапов, что и ИФА – на первом, иммунном этапе искомые антитела из крови связываются с прикрепленными на дне лунок антигенами. А на втором, радиоэтапе, меченые изотопы связываются с комплексами антиген-антитело, причем их количество пропорционально концентрации искомых антител. Далее специальные приборы улавливают количество посылаемых изотопами импульсов, которые затем пересчитываются в концентрации определяемых антител.

Данный метод представляет собой сочетание ИФА или РИА с электрофорезом. Иммуноблоттинг – очень точный метод выявления антител к различным микроорганизмам или биомолекулам, и именно поэтому в настоящее время его активно используют.

Иммуноблоттинг заключается в том, что сначала антигены различных микробов разделяют методом электрофореза в геле, после чего эти разные фракции антигенов наносят на специальную бумагу или нитроцеллюлозную мембрану. А далее уже на этих полосках бумаги или мембраны, на которых закреплены известные антигены, проводят обычный ИФА или РИА для выявления наличия в крови антител к тем микробам, антигены которых зафиксированы на бумаге или мембране.

Серологические методы обнаружения антител в крови человека к различным микроорганизмам-возбудителям инфекционных заболеваний являются наиболее старыми способами «анализов на антитела». Но из-за своей «старости» эти методы не потеряли актуальности, довольно высокой точности и по-прежнему широко применяются для скорейшего выявления антител к некоторым опасным вирусам, бактериям и простейшим. А ряд заболеваний по наличию антител к микробу-возбудителю в крови можно диагностировать и вовсе только серологическими методами.

К серологическим методикам относят реакцию нейтрализации (РН), реакцию торможения гемагглютинации (РТГА), реакцию непрямой гемагглютинации (РНГА, РПГА), реакцию торможения гемадсорбции (РТГАд), реакцию связывания комплемента (РСК), реакцию иммунофлуоресценции (РИФ). Все серологические методики основаны на взаимодействии искомых (определяемых) антител, присутствующих в крови человека, с антигеном. При этом в качестве антигена подбирается именно такое вещество, на которое должны среагировать антитела, которые пытаются выявить. На практике имеются готовые наборы антигенов различных микробов, которые и соединяют с исследуемой кровью, и если в последней имеются антитела к взятому антигену, то результат анализа положителен – то есть в крови человека присутствуют антитела к микробу, который был выбран для анализа.

В ходе серологических реакций удается также установить и концентрацию выявляемых антител в крови. Только эта концентрация выражается не в миллиграммах на миллилитр или в иных привычных величинах, а в титрах. Рассмотрим подробнее, что это значит, и как проводятся серологические реакции.

Конечно, каждая разновидность серологической реакции имеет собственные правила проведения, но мы постараемся описать в общем виде, как их делают, так как в принципиальных моментах они однотипны. Так, любая серологическая реакция основана на том, что в лунку или пробирку вносят исследуемую сыворотку крови с предполагаемыми в ней антителами. Затем в эту же сыворотку вносят определенное количество антигенов микроба, к которому в крови предположительно есть антитела.

Далее сыворотку исследуемой крови разводят в 10 раз, наливают в другую пробирку или лунку и добавляют к ней антигены. Затем сыворотку крови разводят снова в 10 раз, получая уже разведение 1:100, помещают в отдельную лунку или пробирку и добавляют антиген. Так делают несколько разведений, например, 1:1, 1:100, 1:1000, 1:10000 и т.д. Не обязательно всегда делают разведения, кратные 10 – часто используют разведения в два раза, и в таком случае получаются пробирки с разведениями сыворотки 1:1, 1:2, 1:4, 1:8 и т.д. Такие разведения и называются титрами.

В пробирки со всеми разведениями вносят антигены микробов, антитела к которым пытаются выявить. Затем пробирки или лунки инкубируют (оставляют в теплом месте или при комнатной температуре на некоторое время, причем для каждого антигена свой промежуток времени инкубации), чтобы антигены смогли связаться с антителами, если таковые, конечно, присутствуют в крови. После завершения инкубации в пробирки со всеми разведениями вносят чистые эритроциты кур, баранов и т.д. Далее смотрят, в какой пробирке произошло разрушение этих эритроцитов. Ведь если сформировался комплекс антиген-антитело, то он обладает определенными свойствами, среди которых разрушение специально подготовленных чистых эритроцитов. Если в какой-то пробирке видно разрушение эритроцитов, то смотрят, какое разведение сыворотки в ней. И это значит, что в крови человека присутствуют искомые антитела в титре, например, 1:8.

Анализ крови на антитела любым методом (ИФА, РИА, иммуноблоттинг, серологические методы), в принципе, выполняется в течение нескольких часов, максимум суток. Но на практике лаборатории не выдают результатов через несколько часов после сдачи крови, что обусловлено особенностями работы медицинских учреждений.

Так, во-первых, любая лаборатория, даже частная, ждет некоего часа Х, когда у нее считается завершенным набор проб на сегодняшний день. Например, такой час Х – это 12-00. Значит, даже если человек сдаст кровь в 8-00 утра, до 12-00 часов она будет просто храниться в холодильнике, пока не завершится период сбора проб. Далее, в 12-00 часов сотрудник лаборатории пустит пробы крови в работу, которая и займет несколько часов. Таким образом, результат будет только вечером, а возможно и утром, если методика выполнения анализа длинная.

Во-вторых, из-за небольшого количества запросов многие лаборатории ряд анализов проводят не каждый день, а только раз в неделю или раз в месяц. В этом случае имеется назначенный день Х, в который все собранные за неделю или месяц пробы пускают в работу. До наступления такого дня проба крови будет просто храниться замороженной. Если лаборатория действует по такому принципу, то результат анализа на антитела может быть выдан через 1 – 4 недели, в зависимости от частоты выполнения данной методики в конкретном учреждении.

В крови могут определять концентрации различных типов антител, а именно – IgG, IgM, IgA, IgE. Причем зачастую определяют концентрацию каждого типа антител отдельно, так как они имеют разное диагностическое значение. Но в некоторых случаях, когда это информативно с точки зрения диагностики, определяют концентрацию сразу всех типов антител, то есть, IgG + IgM + IgA. Ситуации, когда определяют концентрации сразу нескольких типов антител в крови, называются анализом на суммарные антитела.

Такие анализы на суммарные антитела могут выполняться для диагностики различных инфекций, например, гепатита С, сифилиса и т.д.

Аббревиатура igg – это неправильная запись IgG, что означает иммуноглобулины типа Джи. Эти иммуноглобулины относятся к антителам, которые вырабатываются иммунной системой для уничтожения различных патогенных микробов, попавших в организм. Таким образом, очевидно, что антитела igg – это антитела типа IgG, которые могут присутствовать в крови и определяться лабораторными методами анализа.

Однако просто анализа на антитела IgG не существует, так как иммунная система вырабатывает антитела этого типа против разных микробов. Причем против каждого микроба вырабатывается собственная разновидность IgG, и все они разные. То есть антитела IgG против вируса кори – одни, против вируса краснухи – вторые, против вируса гриппа – третьи, против стафилококка – четвертые, и т.д. Соответственно, можно выполнить анализы на определение IgG в крови против вируса кори, против вируса краснухи, против микобактерии туберкулеза, и т.д. А значит, нужно сначала выяснить, антитела против какого именно микроба нужно искать в крови, и только после этого выполнять анализ на антитела типа IgG к этому микроорганизму.

Вирусы являются патогенными микроорганизмами, при проникновении которых в организм иммунная система начинает вырабатывать антитела для их уничтожения. Но против каждого вируса иммунная система вырабатывает собственные, уникальные, подходящие только к этому виду микроба антитела. Соответственно, можно выявить наличие в крови антител к какому-либо конкретному вирусу, но нельзя определить антитела к вирусам вообще. Поэтому, прежде чем сдавать анализ крови на вирусы, следует точно выяснить, антитела к каким именно вирусным микроорганизмам человек желает отыскать.

Результат анализа крови на антитела, проведенный любым методом, всегда бывает двух видов – положительный или отрицательный. Положительный результат означает, что в крови человека обнаружены искомые антитела к какому-либо микробу или биомолекуле. Это свидетельствует о том, что человек был в прошлом или является в настоящий момент инфицированным каким-либо микробом (инфекционным заболеванием). Отрицательный результат означает, что в крови человека отсутствуют искомые антитела, и он не был заражен инфекционным заболеванием, гельминтами и т.д.

Кроме того, при положительном результате анализа на антитела практически всегда указывается их концентрация. Если определение проводилось методом ИФА, РИА или иммуноблоттинга, то концентрация антител указывается в МЕ/мл. Но если для анализа крови на антитела применялись серологические методики, то в таком случае концентрация антител указывается в титрах, например, 1:64 и т.д.

Расшифровка каждого анализа на антитела зависит от того, какой вид антител выявлялся в крови (IgG, IgM, IgA), а также от того, к какому именно микробу или биомолекуле эти антитела. Например, если в крови обнаруживаются антитела типов IgG и IgM к какому-либо патогенному микроорганизму, то это свидетельствует о том, что человек в настоящее время болеет инфекционным заболеванием, вызываемым этим микробом. Обнаружение же в крови антител к микробу типа IgG свидетельствует о хроническом течении инфекции или о том, что человек в прошлом ее перенес и выздоровел.

Часто для определения того, насколько давно человек был инфицирован каким-либо микробом, оценивают не просто концентрацию антител типа IgG в крови, но и их авидность. Авидность антител определяет то, насколько давно они циркулируют в крови человека. Соответственно, чем выше авидность, тем больше давность перенесенного инфекционного заболевания. Например, если авидность антител к краснухе составляет менее 40 %, то человек перенес это заболевание недавно, в ближайшие три месяца. А если авидность антител к краснухе более 60 %, то инфекция была перенесена более полугода назад.

Норма анализа на антитела зависит от того, какой именно вид антител «искали» у конкретного человека. Например, если проводился анализ на антитела к вирусу краснухи у женщины, планирующей беременность, то наличие таких антител в крови, то есть положительный результат анализа, считается хорошим. Ведь если у женщины есть антитела, значит, она уже «сталкивалась» с вирусом краснухи (переболела или была привита), организм выработал иммунитет, и в настоящее время он сохранился. А значит, такой женщине не грозит заражение краснухой во время предстоящей беременности, и у нее нет риска того, что ребенок родится глухим из-за краснухи у матери.

Если же в крови человека обнаруживаются антитела к ДНК, то это плохой результат анализа, так как он свидетельствует о тяжелом аутоиммунном заболевании, когда иммунная система по ошибке считает свои органы и ткани чужими, и планомерно уничтожает их.

Чтобы записаться на прием к врачу или диагностику, Вам достаточно позвонить по единому номеру телефона
+7 495 488-20-52 в Москве

+7 812 416-38-96 в Санкт-Петербурге

Оператор Вас выслушает и перенаправит звонок в нужную клинику, либо примет заказ на запись к необходимому Вам специалисту.

Анализы крови на различные антитела можно сдать в частных или государственных лабораториях, которые выполняют необходимый тест. Так как анализ на каждый вид антител выполняется при помощи специального набора, то следует сначала точно определиться, какие именно антитела нужно обнаружить, и только после этого выяснить, какие лаборатории могут это сделать.

В зависимости от того, какие именно антитела будут определяться в крови, цена анализа может быть различной. Наиболее простые и дешевые анализы стоят около 100 рублей (например, на титр антител при беременности), а дорогие – до 3000 рублей. Конкретную стоимость анализа на антитела к определенному микроорганизму или биомолекуле нужно узнавать непосредственно в лабораториях, выполняющих такие исследования.

Симптомы полиомиелита. Лабораторная и дифференциальная диагностика полиомиелита. Антитела к вирусу – видео

Автор: Наседкина А.К. Специалист по проведению исследований медико-биологических проблем.

источник

Что такое антитела в крови — разновидности и показания к проведению анализа, норма и причины отклонений

Лабораторные тесты необходимы для постановки правильного диагноза, помогают врачам определить тяжесть заболевания, степень поражения внутренних органов, выбрать лучшую схему лечения. Анализ крови на антитела в обязательном порядке проводят беременным женщинам и тем пациентам, у которых есть нарушения в работе иммунной, репродуктивной или мочеполовой системы, щитовидной железы.

За разные периоды жизни человеческий организм «знакомится» с различными возбудителями заболеваний, химическими веществами (бытовой химией, лекарственными препаратами), продуктами распада собственных клеток (например, при ранениях, воспалении, гнойных поражениях кожи). В ответ на это он начинает продуцировать собственные иммуноглобулины или антитела в крови – это особые белковые соединения, сформированные из лимфоцитов и выступающие в качестве стимуляторов иммунитета.

В иммунологических лабораториях выделяют пять типов антител, каждый из которых действует строго на определенные антигены:

• IgM – первый иммуноглобулин, который начинает вырабатываться при попадании в организм инфекции. Его роль – стимулировать иммунитет на первичную борьбу с болезнью.
• IgG – появляется спустя 3-5 дней после начала болезни. Он формирует устойчивый иммунитет к инфекциям, отвечает за эффективность вакцинации. Этот класс белковых соединений настолько мал в размерах, что может проникать сквозь плацентарный барьер, формируя первичный иммунитет плода.
• IgA – защищают желудочно-кишечный тракт, мочевыводящую систему и дыхательные пути от вирусов, бактерий, микробов. Они связывают чужеродные объекты, не давая им закрепиться на стенках слизистых оболочек.
• IgE – активизируются для защиты организма от паразитов, грибков и аллергенов. Локализуются в основном в бронхах, подслизистой кожи, кишечнике и желудке. Принимают участие в формировании вторичного иммунитета. В свободном виде в плазме крови практически отсутствуют.
• IgD – не до конца изученная фракция. Считается, что данные агенты отвечают за формирование местного иммунитета, начинают вырабатываться при обострении хронических инфекций или миеломной болезни. В сыворотке крови составляют менее 1% фракции всех иммуноглобулинов.

Все они могут как свободно находится в плазме крови, так и прикрепляться к поверхности инфицированных клеток. Распознав антиген, специфические белки соединяются с ним при помощи хвоста. Он служит своеобразным сигналом для специализированных иммунных клеток, которые отвечают за нейтрализацию чужеродных объектов. В зависимости от того, как взаимодействуют белки с антигенами, их подразделяют на несколько видов:

• Антиинфекционные или антипаразитарные – связываются с телом патогенных микроорганизмов, приводя к их гибели.
• Антитоксические – не влияют на жизнедеятельность инородных тел, но обезвреживают вырабатываемые ими токсины.
• Аутоантитела – запускают механизм развития аутоиммунных нарушений, атакуя здоровые клетки организма-хозяина.
• Аллореактивные – иммуноглобулины, которые выступают против антигенов тканей и клеток других организмов, того же биологического вида. Анализ на определение антител данной фракции проводится при трансплантации (пересадке) почек, печени, костного мозга.
• Изоантитела – специфические белковые соединения вырабатываются против агентов клеток других биологических видов. Наличие антител в крови делает невозможным трансплантацию органов между эволюционно и иммунологически схожими видами (к примеру, пересадку сердца от шимпанзе к человеку).
• Антиидиотипические – белковые соединения, предназначенные для нейтрализации избытка собственных антител. Кроме того, данная фракция иммуноглобулинов запоминает структурное строение патогенных клеток, против которых было выработано исходное антитело, и воспроизводит ее при повторном попадании чужеродного агента в кровь.

Современной методикой лабораторной диагностики разных заболеваний считается исследование крови ИФА (иммунофлюоресцентный анализ). Данный тест на антитела помогает определить титр (активность) иммуноглобулинов, их класс и установить, на какой стадии развития находится патологический процесс. Метод проведения исследования состоит из нескольких этапов:

1. Для начала лаборант получает у пациента образец биологической жидкости – сыворотку крови.
2. Полученный образец помещают на специальную пластиковую планшетку с лунками, в которых уже содержатся очищенные антигены искомого возбудителя или белка (в случае, если антиген необходимо определить).
3. В лунки добавляют специальное красящее вещество, которое в случае положительной ферментной реакции окрашивает иммунные комплексы.
4. По плотности окрашивания лаборант делает вывод о результатах анализа.

Для проведения теста исследователям понадобится от одного до трех дней. Само исследование бывает двух типов: качественное и количественное. В первом случае подразумевается, что в образце крови будет найден или, напротив, отсутствовать искомый антиген. Количественный тест имеет более сложную цепную реакцию и помогает сделать выводы о концентрации антител в крови пациента, установить их класс, оценить как быстро развивается инфекционный процесс.

Тест ИФА проводится в самых разных ситуациях. К примеру, в последние годы данная методика активно используется в экспериментальной медицине для разработки новых лекарственных препаратов и при проведении клинических исследования. Анализ на наличие антител в крови обязательно назначается до или во время беременности для выявления белковых соединений, активных по отношению к TORCH-инфекциям (заболеваний, которые передаются внутриутробно от матери к ребенку):

• токсоплазмозу;
• краснухе;
• цитомегаловирусной инфекции;
• вирусу герпеса.

Результаты теста помогают определить эффективность выбранной методики лечения, установить тип вируса, его активность. В клинической практике тест ИФА назначается по следующим показаниям:

• Диагностика заболеваний, передающихся половым путем (ЗППП). К ним относятся: хламидиоз, уреаплазмоз, микоплазмоз, трихомониаз, сифилис.
• Определение патологий щитовидной железы или других желез внутренней секреции.
• Диагностика вирусных гепатитов С, В, D, А, Е, СПИДа или ВИЧ-инфекции.
• Определение аллергена или соединений, ставших причиной интоксикации организма при отравлении, укусах змей или насекомых.
• Определение типа сахарного диабета, резистентности тканей к инсулину.
• Лечение бесплодия. Наличие в крови антиспермальных или антиовариальных антител становится причиной невозможности продуктивного зачатия.
• Диагностика инфекционных заболеваний, передающихся контактно-бытовым, воздушно-капельным или фекально-оральным путем – глистных инвазий, дифтерии, столбняка, лептоспироза (болезнь, характеризующаяся поражением капилляров почек и печени), кори, ветрянки.
• Диагностика или лечение онкологических заболеваний, болезней костного мозга.

В зависимости от образа жизни, типа питания, психоэмоционального состояния, состав крови любого человека постоянно меняется, поэтому перед началом исследования необходимо соблюдать определенный режим. Подготовка занимает 2-3 дня и предполагает соблюдение следующих правил:

• Сдавать кровь на антитела необходимо из вены, утром и обязательно натощак. Забор проводит специалист при помощи стерильных инструментов в условиях стационара.
• Для получения максимально точных результатов необходимо за 2 дня до сдачи биологического материала исключить из ежедневного рациона копченую, острую, соленую и жареную пищу. На этот же срок желательно полностью отказаться от курения, употребления алкогольных напитков или спиртосодержащих лекарств, фруктовых соков.
• Если анализ назначен врачом для определения типа венерического заболевания, диагностики глистной инвазии, гепатита или краснухи, за несколько дней стоит перейти на молочную диету.
• Нельзя сдавать материал на исследование после недавно перенесенного эмоционального потрясения, прохождения флюорографии, ультразвукового исследования, компьютерной или магнитно-резонансной томографии, физиопроцедур.

В диагностическом плане значимость представляют всего три типа иммуноглобулинов: IgM, IgG, IgA. По их отклонению от нормы можно судить о наличии или отсутствии инфекции. Отрицательный результат анализа не является стопроцентным показателем того, что инфекционный процесс отсутствует. Это связано с тем, что после инфицирования на образование цепной реакции иммунитета требуется некоторое время – от 2-3 дней до 2-3 недель. Для подтверждения отрицательного результата тест ИФА необходимо повторить через некоторое время.

Наличие антител чаще говорит о том, что в крови присутствуют аллергены, вирусы, бактерии или другие микроорганизмы. При этом даже положительный результат не всегда считается патологией. К примеру, выработкой дополнительных иммуноглобулинов организм может отреагировать на неправильно подобранное лечение, зачатие, трансплантацию органов. В целом, результаты исследования помогают ответить на следующие вопросы:

• насколько полноценно иммунитет отвечает на инфекцию, необходимо ли предпринимать дополнительные меры лечения;
• на какой стадии прогрессирования находится болезнь;
• есть ли у человека онкологические заболевания;
• как протекает процесс приживания имплантов;
• какое вещество стало причиной развития аллергии;
• произошло ли заражение вирусами, паразитами, бактериями и как давно;
• обострилось ли хроническое заболевание.

Иммуноглобулин класса А является одним из важных для дифференциальной диагностики. Он присутствует в организме постоянно и составляет примерно 10-25% всех фракций иммуноглобулинов. Референсные значения IgA могут различаться в зависимости от возраста и пола:

источник

Иммунная система человека способна не только самостоятельно бороться с различными заболеваниями, но и запоминать патогенные микроорганизмы и «вредоносные агенты», с которыми ей пришлось столкнуться. В результате этого в сыворотке крови появляются специфические белки, которые на профессиональном языке называются антителами.

Одним из самых информативных обследований является анализ крови на антитела, позволяющий определить, с какими заболеваниями раньше сталкивался человек и чем он болеет сейчас. Кроме того, обследование помогает выявить общий уровень иммунной системы и сбои в ее функционировании.

Антитела – это иммуноглобулины или глобулины, которые вырабатываются иммунной системой с целью выявления и уничтожения вредоносных и патогенных микроорганизмов. Но их продуцирование не всегда направлено на защиту от различных типов возбудителей. При разных патологиях и аутоиммунных заболеваниях они могут атаковать здоровые ткани организма. Анализ крови на антитела помогает выявить, с чем именно столкнулся пациент.

Формирование специфических белков в крови человека начинается только в следующих случаях:

• организм подвергается атаке вредоносных агентов, ведущих к дальнейшему инфицированию;
• при вакцинации (введение в организм искусственно ослабленных бактерий).

Развитие памяти иммунитета – важнейший для человека процесс, при котором глобулины запоминают антигены с прикрепленными к ним антителами. Если они попадут в организм повторно, иммунная система сможет обезвредить их. Медики предупреждают о том, что присутствие антител в сыворотке крови – важнейший показатель состояния иммунной системы. Любые отклонения от референсных значений указывают на развитие патологии.

На протяжении жизни человеческий организм сталкивается с различными возбудителями заболевания, химическими компонентами (средства бытовой химии, лекарства), продуктами переработки собственных клеток. В качестве ответной реакции организм начинает вырабатывать собственные иммуноглобулины. Антитела формируются из лимфоцитов и выступают как стимулятор иммунной системы.

В международной медицине различают 5 типов антител, каждый из которых реагирует только на определенные антигены:

• IgM . Иммуноглобулин этого типа вырабатывается, если в организм попала инфекция. Его основная задача – стимуляция иммунной системы и оказание сопротивления болезни;
• IgG . Их выработка начинается через несколько суток после начала болезни. Антитела IgG формируют устойчивый к инфекциям иммунитет, также от них зависит эффект от вакцинации. Клетки этой фракции отличаются крошечными размерами, поэтому они могут проникать сквозь плацентарный барьер, формируя первичный иммунитет плода;
• IgA . Отвечают за безопасность ЖКТ (желудочно-кишечного тракта), органов мочевыделительной системы и дыхательных путей. Такие тела обнаруживают и «фиксируют» между собой патогенные организмы, мешая им прикрепиться к стенкам слизистой оболочки;
• IgE . Отвечают за защиту от грибков, паразитов и аллергенов. Антитела IgE обитают в бронхах, кишечном тракте и желудке. Также от них зависит формирование вторичного иммунитета. В свободной форме их практически невозможно найти в плазме крови;
• IgD . Эта фракция до сих пор изучена лишь частично. Последние исследования показали, что агенты IgD отвечают за местный иммунитет и обычно начинают вырабатываться при обострении хронических инфекций. Их количество составляет менее 1% от всех антител, присутствующих в сыворотке крови.

Специалисты утверждают, что вне зависимости от типа все антигены могут присутствовать как в плазме крови, так и фиксироваться к инфицированным клеткам. Обнаружив тип антигена, специфические белки прикрепляются к ним. После этого иммунной системе поступает сигнал о присутствии чужеродных объектов, которые необходимо уничтожить.

В международной медицине антитела также различаются с учетом того, как именно они взаимодействуют с антигенами:

• антиинфекционные и антипаразитарные. Прикрепляются к телу микроорганизма, приводя к его гибели;
• антитоксические. Антитела этого типа нейтрализуют токсины, продуцируемые инородными телами, но сами по себе они неспособны уничтожать патогенные микроорганизмы;
• аутоантитела. Приводят к развитию аутоиммунных заболеваний, поскольку атакуют здоровые клетки организма;
• аллореактивные. Конфликтуют с антигенами тканей и клетками других организмов того же биологического типа. Анализ на эту фракцию всегда проводится, если человеку назначена трансплантация почек, печени или костного мозга;
• антиидиотипические. Вырабатываются для нейтрализации собственных антител (только при их избытке).

Врачи часто назначают пациентам проведение анализа на антитела. Такое исследование помогает выявить, что стало причиной повышения или снижения уровня глобулинов. После расшифровки результатов врач сможет понять, что значит и с чем связано отклонение от нормы.

Также анализ часто назначается для отслеживания динамики развития некоторых патологий. Исследование необходимо, если у медика есть подозрение на дефицит иммуноглобулинов, что становится причиной ослабления иммунитета и увеличивает вероятность развития разных заболеваний.

Чаще всего анализ на антитела назначается при подозрении на следующие заболевания:

• гепатит C;
• заболевания щитовидной железы аутоиммунного происхождения. Определяется по количеству антител к тиреопероксидазе (ТПО);
• вирус иммунодефицита человека. Для постановки достоверного диагноза пациенту придется сдать кровь на исследование не менее 3 раз;
• ветрянка;
• краснуха;
• корь;
• воспаление щитовидной железы, хронический тиреоидит. При этих заболеваниях сильно повышается продуцирование антител к тиреоглобулину;
• паразитарные заболевания, вызванные глистами, аскаридами, круглыми и колючеголовыми червями;
• дифтерия, столбняк;
• полиомиелит;
• герпес, вирус Эпштейна-Барра (ВЭП);
• коклюш;
• заболевания инфекционного происхождения, вызванные хламидиями.

Также исследование на иммуноглобулины определенного класса может быть назначено при следующих заболеваниях:

• ревматоидный артрит;
• рак;
• цирроз печени;
• заражение крови;
• отит, воспаление легких, менингит хронической формы;
• дисфункция иммунной системы;
• ВИЧ-инфекции.

Исследование незаменимо и при выявлении причин бесплодия. При сложностях с зачатием ребенка обычно назначается анализ на антитела к ХГЧ и на антиспермальные антитела. Во время беременности всегда назначается анализ на антитела к резус-фактору. Также беременным женщинам нужно сдавать кровь на групповые антитела.

Один из наиболее распространенных анализов этого типа – изучение крови на присутствие антител к тиреоглобулину. Повышение выработки подобных антител указывает на патологии щитовидной железы и помогает определить присутствие воспалительного процесса. Несомненным преимуществом этого исследования является то, что оно дает возможность выявить заболевание на начальном этапе и свести к минимуму риск нежелательных осложнений.

Если пациенту назначен анализ на антитела, врач обязательно должен рассказать, зачем проводится исследование и как к нему подготовиться. Состав сыворотки крови человека постоянно меняется. На него влияет образ жизни, особенности питания, психическое состояние.

Пациентам необходимо запомнить следующие правила:

• забор крови осуществляется утром натощак (только в условиях стационара). Кушать перед анализом запрещено;
• за 3 суток до анализа нужно отказаться от потребления жирной и жареной пищи, солений и копченостей, концентрированных соков. Категорически запрещено употреблять спиртные напитки и курить. По возможности в подготовительный период рекомендуется отказаться от потребления лекарственных средств;
• если анализ назначен для определения наличия венерического заболевания, гепатита или паразитных заболеваний, за 2 дня до сдачи биоматериала рекомендуется перейти на молочную диету.

Кровь нельзя сдавать, если за несколько дней до предполагаемого анализа пациент перенес эмоциональное потрясение или стресс. Также существует повышенная вероятность ложного результата, если накануне проводилось ультразвуковое исследование, МРТ или делалась флюорография.

Наиболее современным и эффективным методом выявления антител в сыворотке крови считается иммунофлюоресцентный анализ. При помощи такого лабораторного исследования можно определить тип и титр (активность) иммуноглобулинов, а также выявить, насколько сильно развилась патология. Исследование включает в себя следующие этапы:

• лаборант забирает у пациента биологический материал;
• несколько капель полученной крови капают на специальную планшетку с лунками, в которых содержатся очищенные антигены предполагаемого возбудителя;
• далее лаборант добавляет в лунки специальный реагент;
• с учетом окрашивания медик делает выводы о результате анализа.

Само исследование может быть 2 типов:

• качественное. Назначается для подтверждения присутствия или отсутствия искомого антигена;
• количественное. Этот тип анализа считается более сложным и показывает концентрацию антител в изучаемой сыворотке. При помощи него можно оценить, насколько быстро развивается инфекция.

Вне зависимости от типа анализа расшифровка результатов занимает от 1 до 3 суток.

Анализ проводится с целью определения присутствия и числа глобулинов различных типов. Если количество антител повышено, это означает присутствие определенного заболевания. Для выявления общей клинической картины и назначения подходящей схемы лечения пациенту назначают дальнейшую диагностику. Норма иммуноглобулинов в крови отличается в зависимости от пола и возраста.

Антитела этого типа находятся на слизистых оболочках (желудок, ротовая полость). Они присутствуют в секрете, выделяемом бронхами, и молоке кормящей женщины. Их повышенная концентрация может свидетельствовать о суставных патологиях, гнойных инфекционных процессах, заболеваниях желудочно-кишечного тракта и хронических недугах гипатобилиарной системы.

Если количество и активность антител IgA сильно снижены, это может быть признаком заболеваний кровеносной системы и кожных патологий. Также уровень антител к тканевой трансглютаминазе может быть сильно снижен у пациентов, которые длительное время принимали иммунодепрессанты или цитостатики.

Глобулины IgM отличаются повышенной активностью, именно они первыми начинают атаковать вредоносные микроорганизмы и бактерии, проникшие в организм. Их концентрация в крови начинает увеличиваться в первые недели развития инфекционного заболевания:

• повышение антител класса M может наблюдаться при внутриутробных инфекциях, паразитарных заболеваниях, патологиях органов дыхания и желудочно-кишечного тракта;
• снижение антител. Часто обнаруживается у людей, перенесших тяжелые кожные ожоги. Также их нехватка может указывать на лимфому.

Продуцирование глобулинов класса G увеличивается при бактериальных инфекциях и аллергии. Повышенный уровень антител IgG может быть признаком красной волчанки, вируса иммунодефицита человека, туберкулеза, суставных заболеваний. Снижение иммунных белков наблюдается при мышечной дистрофии генетической природы, аллергии и опухолевых процессах лимфатической системы.

Определение уровня антител в крови имеет важнейшее значение при диагностировании различных заболеваний. Также исследование незаменимо во время вынашивания ребенка, поскольку оно помогает выявить различные патологии у плода. Но необходимо учитывать, что результат исследования зависит от того, насколько правильно была проведена подготовка. Именно поэтому перед сдачей крови пациенту необходимо строго соблюдать все врачебные рекомендации.

источник

Глобулины сыворотки крови человека и животных, образующиеся в ответ на попадание в организм различных антигенов (принадлежащих бактериям, вирусам, белковым токсинам). Антитела вступают в реакции специфического взаимодействия с данными антигенами, в результате чего происходит дезактивация соответствующих бактерий, вирусов и токсинов.

Антитела являются важным элементом иммунной системы и принимают участие во многих процессах, отвечающих за защиту организма. Человек ежедневно сталкивается с огромным количеством чужеродных агентов, со многими из которых он встречается впервые, что создает потребность в постоянной адаптации защитных систем организма, представленных клеточным иммунитетом, исполнение задач которого возложено на специализированные клетки, и гуморальным, представленным специфическими (антитела) и неспецифическими структурами. Огромный прогресс в исследовании механизмов функционирования и регуляции иммунитета был достигнут в конце XIX века работой двух великих ученых – Ильи Мечникова, основоположника клеточной теории, и Пауля Эрлиха, основоположника гуморальной теории.

Антитела представлены белковыми молекулами Y-образной формы, состоящими из четырех полипептидных цепей (двух идентичных легких и тяжелых). Каждая легкая цепь соединена только с одной тяжелой цепью, в то время как тяжелые цепи соединены между собой. Антитела имеют три конца, два из которых называются Fab-фрагментами (fragment antigen binding, то есть фрагментами, отвечающими за связывание антигенов) и один – Fc -фрагментом (название обусловлено его тенденцией к кристаллизации в растворах). Fc фрагмент отвечает за выполнение биологических функций антител, связываясь с рецепторами на лимфоцитах и макрофагах или вызывая активацию комплемента.

Некоторые антитела объединены в мультимеры, состоящие из двух и более молекул, соединенных между собой.

Благодаря широкой вариабельности Fab-фрагментов, антитела способны связывать огромное количество антигенов, включающих как макромолекулы, так и маленькие химические соединения. Участки антигенов, содержащие уникальную последовательность химических соединений, узнаваемую антителами, называют эпитопами. Сила, с которой Fab-фрагмент взаимодействует с эпитопом, называется аффинитетом.

Антитела могут как свободно циркулировать, так и быть связанными с мембраной, являясь рецепторами В – лимфоцитов. У Т-лимфоцитов же рецепторами могут быть только ТCR (T cell receptor complex). Секретируемые антитела в норме представлены в крови и на слизистых, выполняя функции нейтрализации и удаления микробов и токсинов. Антитела также называют иммуноглобулинами, когда они попадают в кровоток, на слизистую или становятся рецепторами В-лимфоцитов.

После взаимодействия Fc фрагмента с антителом, связанным с антигенной детерминантой, сигнал через специальный комплекс передается внутрь клетки, приводя к ее активации.

Важно понять, что узнавание чужеродных агентов происходит в случайном порядке, и совпадение между индивидуальными участками антигенов и Fab-фрагментами антител обусловлено огромным количеством и вариабельностью клонов лимфоцитов.

Иммунитет у новорожденных не способен полноценно противостоять всем угрозам внешней среды, что обусловлено низкой степенью его развития. Постепенное совершенствование иммунного ответа происходит параллельно с развитием других органов и систем, однако на протяжении этого процесса можно наблюдать «критические периоды», сопровождаемые недостаточностью иммунной защиты.

Первый критический период длится первые 29 дней жизни и обусловлен тем, что иммунная защита ребенка представлена преимущественно антителами матери, попавшими в организм ребенка через плаценту или грудное молоко. В этом периоде повышен риск бактериальных и вирусных инфекций. Особое внимание следует уделить недоношенным.

Второй критический период наблюдается на 4-6 месяцах жизни и обусловлен истощением пула антител, попавших в организм ребенка от матери через плаценту и низкой способностью к синтезу своих антител. Кроме того, классом антител, производимым в этом периоде, являются антитела класса М. Почти полное отсутствие иммуноглобулинов G, являющихся главными защитниками, и других классов антител, приводит к низкой устойчивости ребенка в этом возрасте к инфекциям, передаваемым воздушно-капельным и кишечным путями.

Третий критический период можно наблюдать на 2-м году жизни, что связано с активной познавательной деятельностью ребенка и неполноценной иммунной защитой. В связи с недостаточной секрецией Ig А, отвечающего за местный иммунитет, сохраняется высокая восприимчивость к инфекциям, передаваемым воздушно-капельным и кишечным путями.

Четвертый критический период наблюдается на 6-7 годах жизни, что связано с физиологическим уменьшением количества лимфоцитов, однако сохраняющийся низкий уровень Ig A приводит к тому, что слизистые не способны полноценно противостоять инфекциям, передаваемым воздушно-капельным и кишечным путями. Кроме того, высокий уровень IgE, обусловленный значительной частотой глистных инвазий, повышает вероятность развития аллергических реакций в этой возрастной группе.

Пятый критический период наблюдается в подростковом возрасте и обусловлен относительным несоответствием объема органов иммунной системы фактическим размерам организма. Также повышение секреции половых гормонов приводит к угнетению клеточного компонента иммунной системы. Как правило, наблюдается высокая восприимчивость к заболеваниям вирусной природы.

У детей также могут встречаться наследственные заболевания, при которых наблюдается дефект гуморального звена иммунитета.

К дисгаммаглобулинемиям относят:

• Недостаток антител A класса;
• Недостаток антител G класса;
• Недостаток транскобаламина II;
• Гипер-IgM- синдром;
• Гипер-IgE синдром;
• Гипер-IgD синдром.

В зрелом возрасте у людей иммунная система, как правило, полностью сформирована и наделена большими компенсаторными возможностями, позволяющими адаптироваться к изменяющимся или тяжелым условиям окружающей среды. Однако вредное воздействие неблагоприятных факторов внешней среды может приводить к значительному снижению уровня иммунной защиты. Устранение вредных факторов, как правило, восстанавливает ее первоначальный уровень.

Беременность является сложным физиологическим процессом, протекающим в течение длительного, порядка 40 недель в норме, срока. В этот период питание и дыхание плода, находящегося внутри материнского организма, осуществляется через гемоплацентарный барьер. Вместе с газами, растворенными в крови, и питательными веществами, через плаценту могут проходить иммуноглобулины. Однако, в норме не все антитела при беременности могут попадать в кровь плода. Этой способностью обладают только Ig G. Их основной целью в этом периоде является предотвращение развития внутриутробных инфекций или септических состояний.

К сожалению, не всегда антитела при беременности играют положительную роль. Так, развитие иммунных реакций, направленных против своего плода, не является редким явлением и может приводить к прерыванию беременности на ранних сроках.

Так, возможно формирование антител при беременности к белковым структурам на поверхности плода, отвечающим за резус-фактор или группу крови.

Резус-фактор присутствует у 85% населения и, при его наличии на поверхности эритроцитов, он считается положительным. При наличии положительного резус-фактора у плода, в то время как у матери он отрицателен, высока вероятность развития антител к эритроцитам и их последующему гемолизу. Выделяющийся при этом гемоглобин превращается в билирубин, в высоких концентрациях обладающий токсическим влиянием на нервную ткань. При условии, что мать не сталкивалась ранее с резус-положительной кровью и у нее отсутствуют антитела к резус-фактору, первая беременность может протекать без осложнений. Во время родов проводится инъекция анти-Д-иммуноглобулина, что в ряде случаев позволяет облегчить течение второй беременности и снизить риск резус-конфликта при повторной беременности до 10-15%. Однако, анализ на антитела может быть положительным и при несостоявшейся первой беременности и составляет 3% после выкидыша, после медицинского аборта в 5%, а при внематочной беременности- в 1% случаев.

Антитела при беременности к эритроцитам плода также могут вырабатываться у матери с I группой крови при рождении ребенка со II или III группами, что также может приводить к гемолизу эритроцитов, приводя к смерти плода.

В связи с незрелостью иммунной защиты новорожденных, выработка собственных антител у них практически отсутствует, что значительно повышает риск развития инфекционных процессов. Сразу после родов в грудном молоке содержится огромное количество Ig A, отвечающих за защиту слизистых оболочек и значительно снижающих риск заболеваний инфекционной природы. Кроме того, в организме ребенка циркулируют антитела, попавшие в кровь ребенка через плаценту еще до родов.

Таким образом, использование заменителей грудного молока значительно ухудшает прогноз в отношении иммунной защиты и не должно происходить без серьезных показаний.

Так как антитела являются неотъемлемой частью иммунитета, нельзя оценивать их состояние отдельно от общего состояния иммунной системы.

У людей с возрастом в норме происходят изменения, затрагивающие иммунные процессы:

• инволюция тимуса;
• дегенеративные изменения костного мозга;
• дегенеративные изменения органов лимфоидной системы.

Инволютивные изменения в тимусе начинаются во время полового созревания и сказываются на эффективности клеточного компонента иммунитета, что повышает риск инфекционных и онкологических болезней.

В отличие от клеточного, гуморальный иммунитет меньше подвержен влиянию возраста, хоть и может наблюдаться незначительное снижение уровня естественных иммуноглобулинов.

Однако, из-за снижения эффективности клеточного и гуморального компонентов иммунитета, повышается вероятность образования аутоантител, что повышает риск развития ревматоидного артрита, тиреоидита и других аутоиммунных заболеваний. Одной из причин образования антител к собственным тканям является снижение контроля за клетками, которые подверглись мутациям и не были уничтожены клеточным иммунитетом.

Следует отметить, что отмечается снижение атопий при увеличении инфекционной и химической форм аллергии с повышением риска развития анафилактического шока.

Цепи, принимающие участие в образовании молекулы антитела, имеют вариабельные участки (формируются в результате сложного процесса отбора отдельных участков ДНК В-лимфоцитов и участвуют в формировании Fab-фрагментов) и константные участки (участвуют в формировании Fc-фрагментов и определяют биологические функции молекулы). В зависимости от того, какие константные участки были синтезированы, выделяют 2 вида легких цепей и 5 видов тяжелых цепей, однако определяющее значение играют тяжелые цепи, в зависимости от которых выделяют пять изотипов, или классов:

Каждый изотип имеет определенные функции и биологические свойства.

Антигенными рецепторами неактивированных В-лимфоцитов являются связанные с мембраной Ig M или Ig D антитела. После одновременной стимуляции антигеном и Т-хелпером, В-лимфоцит, который соответствует конкретному антигену, активно делится и дифференцируется на разные клоны, синтезирующие определенные классы антител.

Продолжительность жизни составляет 5 дней.

Существуют в форме пентамера (состоят из пяти молекул антител формы Y, соединенных в области Fc-фрагмента).

• Активация комплемента;
• Рецептор В-лимфоцитов.

Продолжительность жизни составляет 23 дня. Существуют антитела G класса в качестве мономера, свободно циркулируя в кровотоке.

• Опсонизация;
• Активация комплемента;
• Антитело-опосредованная цитотоксичность;
• Обеспечивают неонатальный иммунитет;
• Являются основными антителами, синтезирующимися в ответ на повторную активацию клеток памяти идентичным антигеном;
• Ингибирование активности В-лимфоцитов по способу обратной связи.

Продолжительность жизни составляет 6 дней. Существуют в форме мономеров, димеров и тримеров.

Функция антител класса Ig A заключается в защите слизистых от чужеродных агентов путем их связывания до попадания в ткани.

Продолжительность жизни составляет 2 дня.

Антитела класса Е имеют две основные функции:

• Являются рецепторами базофилов;
• Отвечают на паразитарную инвазию.

Антитела класса D являются рецепторами В- лимфоцитов, в связи с чем продолжительность их существования определяется продолжительностью жизни иммунной клетки. В свободной, циркулирующей форме не существуют.

Анализ на антитела играет огромное, а в некоторых случаях даже решающее значение в постановке диагноза заболевания, так как он отражает протекающие в гуморальном звене иммунитета процессы.

Определение количества и подкласса антител позволяет судить о длительности и природе заболевания, а в некоторых случаях возможно определение конкретного возбудителя, вызвавшего болезнь, поэтому широко применяется в специализированных учреждениях при постановке таких диагнозов, как вирусный гепатит, ВИЧ и других.

В норме антитела можно обнаружить в кровотоке, на слизистых и, особенно, в лимфоидных органах, где в основном и происходит активация иммунного ответа. Это обусловлено постоянным контактом организма со внешней средой, состоящей из чужеродных агентов.

Для определения антител проводится ряд тестов, оценивающих количественные и качественные характеристики гуморального компонента иммунной системы. Также рекомендуется оценивать изменение их уровня в динамике.

Норма антител в сыворотке крови составляет:

• У мужчин: IgM (0,55-1,41 г/л); IgG (6,64-14,0 г/л); IgA (1,03-4,04 г/л);
• У женщин: IgM (0,37-1,95 г/л); IgG (5,87-16,3 г/л); IgA (0,54-3,43 г/л).

Степень повышения антител может быть выражена в разной степени. Для правильной интерпретации результата на антитела важно оценивать изменение их уровня в динамике.

Если не произошло активации В-лимфоцита из-за отсутствия контакта с подходящим ему чужеродным антигеном, то последующей его трансформации в плазматическую клетку, являющуюся фабрикой про производству иммуноглобулинов, не происходит, и такие клетки ждут своего часа. Если же В-лимфоцит проконтактировал с чужеродным агентом, то большую роль играет место встречи и тип чужеродного агента, вызвавшего иммунную реакцию.

Возможно три варианта развития событий:

• В-лимфоциты в фолликулах селезенки после встречи с белковым антигеном и Т-хелпером активируются с последующим активным делением и дифференцировкой на длительно живущие плазматические клетки, синтезирующие Ig G, IgA и IgE;
• Краевые В-лимфоциты в селезенке после контакта с антигенами, являющимися общими чужеродными структурами для большинства инородных агентов, активируются с последующим активным делением и дифференцировкой на короткоживущие плазматические клетки, синтезирующие IgM;
• В-лимфоциты слизистых оболочек или брюшной полости после контакта с чужеродными агентами также активируются с последующим активным делением и дифференцировкой на короткоживущие плазматические клетки, синтезирующие IgM.

Таким образом, после проведения анализа крови на антитела и определения спектра и уровня антител, можно судить о происходящих в организме процессах.

Повышены антитела могут быть также при заболеваниях, сопровождающихся нарушениями в системе иммунитета. К ним относятся парапротеинемии, проявляющиеся наличием антител с функциональными и структурными дефектами при миеломной и ряде других болезней.

Анализ крови на антитела может существенно помочь в диагностике заболеваний, что имеет большое значение для выяснения природы заболевания и выбора наиболее верной тактики лечения. Также определение антител позволяет оценивать состояние искусственного активного иммунитета, полученного путем вакцинации и, таким образом, контролировать уровень заболеваемости и потребность в вакцинации.

Однако, к сожалению, антитела, призванные защищать организм человека, могут в результате различных нарушений атаковать нормальные ткани организма.

Основные причины этого явления:

• Высокая степень антигенной схожести чужеродных агентов с собственными тканями организма может приводить к тому, что вновь образованные антитела атакуют не только инородные структуры, но и свои собственные;
• Некоторые ткани организма, такие как хрусталик глаза и сперматозоиды в здоровом организме напрямую не омываются кровью, что защищает их от ошибочного распознавания организмом как чужеродных;
• В процессе созревания лейкоциты проходят несколько этапов отбора в лимфоидных органах, что позволяет выбраковывать дефектные клетки. Сбой этого сложного процесса приводит к образованию дефектных антител.

Положительные антитела, как правило, говорят о том, что пациент ранее встречался с чужеродным агентом, но это не всегда является результатом полноценного инфекционного процесса. Это стало возможным благодаря широкому введению вакцинации. Так, в качестве вакцины возможно применение живых, но ослабленнных организмов, или мертвых частиц, представленных продуктами их жизнедеятельности. Для борьбы с инфекциями, тяжесть которых зависит от выработки токсина, нашли применение вакцинации анатоксинами – токсинами, потерявшими свои опасные свойства в результате химической или физической обработки.

Тем не менее, положительные антитела с высокой уверенностью позволяют подтвердить или, напротив, исключить предполагаемого возбудителя заболевания.

Если результат на антитела положительный, это также можно использовать для контроля напряженности иммунитета с определением показаний к вакцинации или ревакцинации, проведение которых позволяет смягчать тяжесть заболеваний и предотвращать эпидемические вспышки.

Также положительные антитела могут определяться после переливания иммунной плазмы крови или прямого введения в кровоток уже готовых взятых у человека или животных иммуноглобулинов, что иначе называется искусственной пассивной профилактикой. Ее целью является предотвращение развития инфекционного процесса и заключается в быстром образовании иммунных комплексов с последующим развитием реакций, обусловленных биологическим эффектом антител.

Отрицательный результат на антитела может наблюдаться в следующих ситуациях:

• ошибка в определении предполагаемого возбудителя, что говорит об отсутствии его роли в возникновении болезни;
• слишком раннее проведение диагностического теста;
• низкая чувствительность теста или его брак, что оправдывает возможность повторного проведения в ряде случаев диагностического теста.

Тем не менее, отрицательный результат на антитела не является абсолютным доказательством отсутствия заболевания. Примером может служить вирус иммунодефицита человека, антитела к которому определяются со значительной задержкой. Поэтому проведение полноценного физического и лабораторного обследования, а также оценка наличия антител являются частью единого комплекса мероприятий.

Антиспермальные антитела взаимодействуют с антигенами на поверхности сперматозоидов. Впервые они были определены в крови мужчин, страдающих бесплодием, и описаны Rumke и Wilson в 1954 г. Эти антитела определяются у каждого пятого мужчины с бесплодием и представлены, как правило, IgG, реже IgA и IgM. Антиспермальные антитела в норме также можно обнаружить у мужчин без нарушений репродуктивной функции в 1-10% и у 5% бесплодных женщин.

Аутоиммунные антитела не возникают в норме благодаря гематотестикулярному барьеру, изолирующему клетки, принимающие участие в сперматогенезе. В основе этого барьера находятся клетки Сертоли и их отростки. В семявыносящих путях защита от образования антител осуществляется способностью сперматозоидов освобождаться от антигенов и антител на внешней оболочке, а также специальными иммуносупрессирующими факторами, находящимися в семенной жидкости.

При сбое защитных механизмов, травмах мошонки и воспалительных заболеваниях репродуктивной системы повышается вероятность образования антиспермальных антител.

Образование антиспермальных антител возможно и у женщин. В норме этого обычно не наблюдается, однако принято считать, что сопутствующие заболевания репродуктивной системы повышают риск развития этого явления.

На современном этапе не существует однозначного мнения о влиянии антиспермальных антител на репродуктивные свойства сперматозоидов, хотя и считается, что они несколько снижают их подвижность и выживаемость.

В норме антитела к тиреопероксидазе (ТПО) не наблюдаются и, по факту, являются проявлением аутоиммунных процессов, направленных против щитовидной железы. У человека этот фермент отвечает за образование радикалов йода, необходимых для формирования Т3 и Т4, поэтому антитела к ТПО часто снижают синтез этих гормонов.

Антитела к тиреопероксидазе характерны для:

• тиреоидита Хашимото;
• диффузного токсического зоба;
• послеродового тиреоидита;
• аутоиммунного тиреоидита;
• гипертиреоза или гипотиреоза у новорожденных.

Показанием к определению антител к тпо является также подозрение на повреждение щитовидной железы аутоиммунной природы, что может проявляться:

• увеличением щитовидной железы без изменения ее функции;
• изменением функции щитовидной железы.

Антитела к ТПО могут приводить к нарушению регулирования синтеза гормонов, что клинически будет проявляться картиной гипотиреоза или гипертиреоза.

Уменьшение антител к тиреопероксидазе позволяет судить об успешности лечения.

Анализ на антитела к ТПО при получении результатов, вызывающих сомнение, рекомендуется проводить в сочетании с другими анализами повышающими точность проводимого исследования. К ним относят определение:

• антител к рецептору ТТГ (анти-pTTГ);
• антител к тиреоглобулину (антиТГ);
• кальцитонина в сыворотке крови;
• тиреоглобулина;
• тиреотропного гормона (ТТГ);
• тироксина свободного (Т4 свободный);
• тироксина общего (Т4);
• трийодтиронина общего (Т3);
• трийодтиронина свободного (Т3 свободный).

Определение антител к тпо у матери во время беременности позволяет предположить развитие гипертиреоза у ребенка как в течение внутриутробного развития, так и после рождения.

Показанием к определению антител к тпо могут быть такие патологические явления, как выкидыш, преэклампсия, преждевременные роды и неудачные попытки искусственного оплодотворения.

Также рекомендуется определение антител к тиреопероксидазе у новорожденного при их наличии у матери во время беременности или послеродового тиреоидита. Выявление отклонений позволяет предотвратить их прогрессирование путем своевременного начала лечения.

Определение антител к гепатитам С, В, D, А, Е играет большое значение в выявлении и дифференциальной диагностике этих, большей частью, небезобидных заболеваний. Так, из всех этих заболеваний только гепатит А протекает в большинстве случаев безвредно, в то время как остальные вирусные гепатиты могут приводить к тяжелым, необратимым последствиям.

Как правило, основным проявлением этих заболеваний является повышение печеночных ферментов и выраженная интоксикация. Однако понять, какой именно из вирусов поразил печень, может позволить только анализ на антитела к гепатитам С, В, D, А или Е.

Антитела к вирусу гепатита А класса Ig M определяются одновременно с манифестацией болезни, после чего их титр нарастает на протяжении месяца, снижаясь до нормальных значений в течение 10-12 месяцев.

При гепатите В диагностическое значение имеет определение антител к HBs-антигену. Их наличие может быть обусловлено как перенесенным инфекционным заболеванием, так и эффективной вакцинацией.

Анти-HBs-антитела появляются на 4-12-й неделе после инфицирования и образуют комплексы с HBsAg, в связи чем они могут не определяться, что называется «серологическим пробелом», продолжительностью от недели до месяца. Титры антител достигают максимума к 6-12 месяцам, и сохраняют высокий уровень 5 лет и больше. Иногда антитела могут определяться в течение всей жизни. Также имеет диагностическое значение анализ на антитела HBsAg, anti-HBc IgM, anti-HBc, HBeAg и anti-HBe.

Гепатит В в 90% случаев заканчивается выздоровлением, однако в 10% случаев его течение приобретает хронический, прогрессирующий характер поражения печени, что заканчивается чаще всего циррозом.

В ряде случаев к вирусу гепатита В присоединяется вирус гепатита D, не способный существовать самостоятельно. В этом случае определяется anti-HD IgM.

Антитела к гепатиту С у большинства инфицированных определяются спустя 1-3 месяца после заражения, но также возможно их отсутствие больше года. Антитела могут не определяться в 5% случаев.

Антитела к гепатиту С классов IgM и IgG возникают в начале болезни и образуются к нуклеокапсиду. При длительном, латентном течении или повторной активации заболевания отмечается появление IgG в крови.

Антитела G класса в течение 8-10 лет после манифестации болезни определяются в высоких титрах, после чего их концентрация постепенно снижается. Тем не менее, анализ на антитела к гепатиту С остается положительным до конца жизни.

В отличие от гепатита В, гепатит С более предрасположен к хроническому течению, что наблюдается в 90% случаев заболевания. Исходы те же, что и при гепатите В.

Проведение анализа на антитела к вирусу гепатита Е особенно важно для диагностики заболевания во втором периоде беременности, так как оно в 40% случаев заканчивается смертью матери, и почти всегда – плода.

Вирус иммунодефицита человека является одной из самых болезненных проблем современного общества. В настоящее время, распространение ВИЧ носит характер пандемии, число случаев смерти от СПИДа превысило 20 млн. человек, а число инфицированных ВИЧ – 50 млн.

Основными путями передачи вируса являются половой (во время незащищенного полового акта) и парентеральный (характерен для внутривенных инъекций инфицированными шприцами или иглами). Однако, на сегодняшний день огромной проблемой стало распространение вируса при таких обыденных действиях, как лечение зубов у стоматолога, процедурах маникюра, педикюра и пирсинга. Также в особой зоне риска находятся врачи, в особенности – хирурги, анестезиологи и акушеры-гинекологи.

Особенностью ВИЧ-инфекции является отсутствие специфических клинических симптомов, в результате чего манифестация носит характер простуды или мононуклеозоподобного синдрома. Поэтому решающее значение в постановке диагноза имеет определение антител к вирусу иммунодефицита.

Для диагностики ВИЧ применяются скрининговый и подтверждающий тесты. Потребность в таком разделении методов диагностики обусловлено большей стоимостью и потребностью в наличии специализированного оборудования для проведения подтверждающего теста, что затруднило бы массовое проведение анализа на антитела к вирусу иммунодефицита.

1. Проведение скринингового теста;
2. При положительном результате первого, проводится второй скрининговый тест;
3. При положительном втором скрининговом анализе показано проведение подтверждающего теста;
4. Положительный подтверждающий тест позволяет поставить диагноз ВИЧ инфекции.

Как правило, в качестве скрининга используется метод ИФА.

В качестве подтверждающего теста во всем мире признан метод иммунного блоттинга.

Проведение ПЦР, даже при выявлении антигенов возбудителя, не является основанием для постановки диагноза вируса иммунодефицита человека.

Согласно требованиям ВОЗ, анализ на иммунный блот принято считать положительным при обнаружении антител ко всем, или к двум из трех гликопротеинам ВИЧ (gp160, gp 120, gp 41). Таким образом, при наличии антител только к одному гликопротеину, результат считают сомнительным и показано проведение повторного исследования с использованием тест-системы другого производителя или серии. При получении очередного сомнительного результата рекомендовано проведение наблюдения в течение последующих 6 месяцев, с повторным проведением анализа через 90 дней.

Однако определение антител ранее определенного момента не имеет смысла в связи с особенностями функционирования иммунной системы. Эффективность анализа крови на антитела в большей степени зависит от того, в какой раз человек встречается с чужеродным агентом. Так, если человек встречается с возбудителем болезни повторно, гуморальный ответ не только развивается быстрее, но обладает большей эффективностью, что обусловлено большей степенью соответствия эпитопов антигенам.

Для первой встречи с чужеродным агентом наблюдается преимущественное повышение антител класса М, достигающее пика и, соответственно, наибольшей эффективности через 5-10 дней. Антитела G класса появляются еще позже.

Для повторной встречи с чужеродным агентом характерно более быстрое формирование иммунного ответа в течение 1-3 дней, которое характеризуется более эффективным приростом количества антител. Антитела G класса играют основную роль в развитии иммунной защиты. Кроме того, при определенной стимуляции, возникает дифференцировка плазматических клеток с производством антител класса А или Е.

Таким образом, брать анализ крови на антитела ранее, чем через 5 дней после инфицирования в большом количестве случаев не имеет смысла, что обусловлено слишком коротким сроком для активации иммунного ответа, хотя при повторной встрече с возбудителем, анализ определит положительные антитела уже на 1-2 сутки после инфицирования. Однако, в связи с тем, что у большинства заболеваний инкубационный период длится более суток, точно определить идеальный момент для определения антител практически невозможно, из-за чего рекомендуется оценка их уровня в начале и конце заболевания.

Методом, позволяющим определить количественные характеристики антител каждого типа в организме, является электрофорез. Его действие основано на разнице в поведении белков на после их помещения в электрическое поле. Этот метод позволяет определить, повышены антитела или нет, но не дает возможности выяснить, против какого чужеродного агента они образованы и, таким образом, показывает лишь общую картину.

Серологические реакции позволяют определить отсутствие или наличие антител, обладающих специфичностью в отношении искомого антигена в биологических жидкостях.

1. Агглютинации;
2. Преципитации;
3. Нейтрализации;
4. С участием комплемента;
5. С мечеными антителами или антигенами.

Агглютинацией называют связывание антигенов, связанных с крупными нерастворимыми частицами, такими как бактерии или эритроциты, при взаимодействии с антителами.

Агглютинация бывает следующих видов:

• прямая агглютинация (позволяет выявить антитела в сыворотке больного и проводится путем смешивания взвеси убитых микробов с кровью, что приводит к появлению хлопьевидного осадка);
• непрямая гемагглютинация (позволяет выявить антитела в изучаемом материале и проводится путем смешивания эритроцитов, на которых находятся фиксированные антигены, что приводит к появлению фестончатого осадка);
• реакция торможения гемагглютинации (в результате связывания антител с рецепторами вирусов, обладающих гемаглютинирующей способностью, склеивания эритроцитов животных, не происходит);
• реакция коагглютинации (антигены возбудителя определяются добавлением специально обработанных диагностической сывороткой стафилококков).

При реакции преципитации наблюдается выпадение в осадок комплексов антиген-антитело, где антигены должны быть растворимыми (не связанными с крупными, нерастворимыми частицами). После образования комплексов антиген-антитело выпадает осадок, называемый преципитатом. Положительным считается результат на антитела, при котором можно увидеть кольцо преципитата.

Реакцией нейтрализации называется блокирование повреждающего действия микробов или их токсинов после взаимодействия с иммунной сывороткой, что обусловлено их связыванием с антителами с образованием комплексов антиген-антитело.

Комплементом называют сложную систему врожденного гуморального ответа, которая после активации получает способность к опсонизации, облегчению фагоцитоза и цитолизу чужеродных агентов. При проведении реакции с участием комплемента используется его способность к взаимодействию с иммунными комплексами. Поэтому сначала смешивается интересуемая сыворотки с известными антигенами. Затем, если образовались комплексы антиген-антитело, белки комплемента исчерпываются. Если же образования комплексов не произошло, то система комплемента остается способной к активации. Для того, чтобы это выяснить, добавляются эритроциты и антиэритроцитарные антитела, которые связываются с образованием иммунных комплексов, после чего наблюдается гемолиз эритроцитов, обусловленный действием комплемента, или наблюдается хлопьевидный осадок, если активации не произошло.

Реакция с мечеными антителами или антигенами, или реакция иммунофлюоресценции основана на обработке изучаемого материала сывороткой, содержащей антигены или антитела, помеченные флюорохромами, что в случае образования иммунных комплексов дает возможность наблюдать свечение при освещении ультрафиолетовой лампой при изучении через микроскоп.

При применении не флюорохромов, а ферментов (пероксидазы или щелочной фосфатазы), метод называют иммуноферментным анализом. Результат оценивается по изменению окраски.

Радиоиммунологический метод позволяет определить наличие антител или антигенов, помеченных радионуклидами и их количество после взаимодействия с изучаемым материалом (антигенами или антителами в сыворотке пациента).

Одна клетка В-лимфоцитов способна производить антитела, комплементарные исключительно к одному антигену. Это было использовано для получения моноклональных антител, которые по праву можно считать одним из самых важных технических достижений в области иммунологии, с колоссальными перспективами для клинической медицины и научных исследований. Для того, чтобы получить моноклональные антитела, В-клетки от животного, иммунизированного антигеном, которые имеют короткий срок жизни, скрещивают с клетками миеломы (опухоли плазматических клеток), которые могут быть размножены бесконечное количество раз при обеспечении необходимых условий. Клетки, полученные путем такого слияния, называют гибридомами. Из популяции полученных гибридом можно выбрать и клонировать непрерывно растущие клетки, которые секретируют нужные антитела, которые называют моноклональными.

Огромное количество вариантов синтезируемых антител позволяет подобрать практически любые моноклональные антитела против практически любого антигена. Однако на пути широкого применения этого метода имелись определенные препятствия. Так как вещества, синтезируемые в чужом организме, чужеродны и вызывают иммунный ответ, повторное введение тех же препаратов не вызывало преследуемого эффекта. Впоследствии эта проблема была решена сохранением вариабельных областей, отвечающих за их соответствие антигенам, с заменой константных участков на человеческие.

Совсем недавно моноклональные антитела были синтезированы с использованием технологии рекомбинантной ДНК, кодирующей антитела человека. Это позволило выбирать антитела, имеющих желаемые Fab-фрагменты.

Моноклональные антитела широко применяются в качестве терапевтических и диагностических средств в борьбе со многими заболеваниями людей.

источник