Анализ на устойчивость к антибиотикам у детей

Очень жаль, что медицинская тема на сайте не удостоена должного внимания. А это более актуально, чем экскурсии, путешествия, айфоны и косметика.
Пролистывая интересные мне страницы, наткнулась на тему таких лабораторных исследований, как Анализ на чувствительность к антибиотикам. Правильно он называется «Бактериологический посев на флору с определением антибиотикочувствительности». Это давно не новинка в мире медицины. Посевы выполняют уже давно. Меняется только спектр антибиотиков, которые используются в определении чувствительности микробов.

Для проведения анализа берется мазок стерильной ватной палочкой с больного места — ухо, нос, зев (а там куча всяких дополнительных локусов — миндалины, лакуны, задняя стенка глотки и пр.), глаз (левый и правый отдельно), слизистая всех органов, куда можно этой палочкой залезть, влагалище, уретра, цервикальный канал шейки матки, просто поверхность кожи, содержимое гнойного прыщика. «Сеют» и мочу, и грудное молоко, и слюну, и мокрОту, и сперму, и секрет простаты. Короче — для этого исследования годятся все места, где может поселиться микроб.

Раньше, да и сейчас, для посева использовали чашки Петри с желеобразной оранжево-розовой средой.

По ней и проводят той самой палочкой, которая контактировала с больным местом. И отправляется это все в специальный шкаф на 3-4 дня. За это время в чашке успевают прорасти разные бактерии, которые потом врач-лаборант рассматривает под микроскопом, определяет их название, считает их количество (А это очень важно, т. к. от количества каждого конкретного вида микроба будет зависеть лечение, назначаемое впоследствии доктором. Могут и вовсе не лечить, если микробов совсем мало). А потом 3-4 дня врачи подбирают, на какой антибиотик этот микроб реагирует. Поэтому за один день такой анализ никак не делается. В среднем это занимает неделю.

Современные лаборатории сейчас располагают удобными стерильными палочками, которыми берется мазок для посева. Их так же можно дать пациенту домой, чтобы мазок он взял у себя сам (ситуации ведь бывают разные). Выглядит этот инструмент следующим образом:

Результат самого анализа выглядит примерно вот так (я сотру название лаборатории и фамилию пациента). Мазок взят из воспалительного элемента с гнойным содержимым на лице :

Кроме основного набора антибиотиков, применяют еще расширенный спектр антибиотиков (до 10-12-ти в зависимости от того, какого микроба найдут в анализе). И ещё иногда делают чувствительность к бактериофагам. Бактериофаги- это такие убийцы микробов, которые действуют целенаправленно на конкретного врага и не убивают заодно все, что может организму пригодиться (многие боятся дисбактериозов именно по этой причине).

Есть особые правила для забора этого анализа. Если доктор назначил посев на флору и Вы решили сдавать в определенной лаборатории, лучше туда позвонить и узнать, нужна ли предварительная подготовка. Повторюсь, что каждый человек — индивидуален. Но есть все же универсальные правила: этот анализ сдается либо до начала приёма антибиотиков (а в этом кроется недостаток этого метода), либо через две недели после окончания курса лечения, чтобы проверить, насколько эффективно оно прошло. Недостаток в следующем: мамочка приходит сдавать анализ ребенку и говорит: «У нас ангина, и нам надо определить, кем она вызвана. Хотим сделать посев. До этого никаких антибиотиков не пили». Так вот в случае с реальной ангиной, если врач в карточку поставил такой диагноз, антибиотики прописываются уже с первого дня визита к врачу. И после этого уже нет смысла сдавать посев. Ну не будет же нормальная мать ждать результат анализа целую неделю, если это реально ангина? Нет, конечно. Чем раньше начнется лечение, тем быстрее выздоровеет ребенок. Как правило, врач назначает антибиотик широкого спектра действия, который убивает всё и вся на своем пути. Лечится ангина. Курочится желудочно-кишечный тракт (если не прописаны параллельно биотики), чувствительность неисследованного микроба к данному препарату снижается. Так что, уважаемые пациенты, будьте бдительны! Все только под контролем врача, но и самоконтроль выключать не стоит.
Если возникнут вопросы по теме отзыва, пишите в личку.
Благодарю за внимание.
И будьте здоровы!

источник

Если у лечащего врача возникнут подозрения о наличии бактериальной природы заболевания пациента, то он обязательно попросит сдать анализ на чувствительность к антибиотикам. Данная процедура помогает представителям медицины назначать правильные лекарственные препараты, поскольку микроорганизмы могут мутировать и развить к ним резистентность.

Это исследование представляет собой лабораторный метод определения лекарственного средства, оказывающего наибольшее воздействие на болезнетворные микроорганизмы, вызвавшие развитие данного конкретного заболевания.

Фармацевтический рынок предлагает огромный выбор лекарственных средств, как в плане эффективного воздействия, так и в плане стоимости. Поэтому, чтобы выбрать наиболее эффективное антибактериальное средство, назначают бактериологический посев.

В целях подбора правильной терапии врач рекомендует пациенту пройти обследование. Анализ на чувствительность к антибиотикам назначают для определения самого эффективного и уместного лекарства в данном случае. Наиболее часто это необходимо для лечения инфекций, передающихся половым путём. Также определение самого эффективного антибиотика является обязательным условием при терапии заболеваний у детей.

Помимо этого, определение чувствительности необходимо во избежание развития устойчивости микроорганизмов к антибиотикам. Если пациент перед этим уже принимал антибиотики, а теперь нужно провести повторный курс лечения, то препарат необходимо заменить на другой. Подобный образ действия позволяет применить меньшую дозировку лекарства и предотвратить мутацию возбудителя. В отделениях гнойной хирургии антибиотики заменяют раз в несколько месяцев.

Тест на чувствительность бактерий необходим при возникновении у пациента аллергических реакций на определенную группу препаратов.

Анализ мочи на чувствительность к антибиотикам также проводится очень часто.

На сегодняшний день существует несколько основных методов определения чувствительности микроорганизмов к антибиотику. Самым распространенным и простейшим является диско-диффузионный способ, или метод дисков.

Для определения чувствительности диско-диффузионным способом по поверхности застывшего агара в чашке Петри распределяют исследуемый материал (бактериальную суспензию). После этого туда помещают картонные диски, пропитанные определенными антибиотиками. Затем бакпосев закрывают и размещают в термостате при температуре 35-37°С на 12-18 часов. Диффузия антибиотика влечет за собой формирование зоны подавления роста бактерий вокруг бумажных дисков. По истечении указанного времени результат проверяют путём замера диаметра этой зоны.

Второй анализ на чувствительность к антибиотикам – это Е-тест. Он проводится аналогично предыдущему способу, только вместо картонных дисков применяют полоску Е-теста, которая содержит градиент степени пропитки антибиотиком от минимальной к максимальной. После двенадцатичасовой инкубации в термостате специалист достает чашку и оценивает эффективность каждого вида антибиотика, просматривая конкретное место соприкосновения зоны подавления роста бактерий и шкалу полоски. Такова будет самая минимальная концентрация лекарства, необходимого для лечения заболевания.

Преимуществом диффузионных методов является доступность для любой бактериологической лаборатории и простота тестирования. Однако стоимость Е-тестов высока, поэтому наиболее часто используют диско-диффузионный способ.

Как именно осуществляются анализ — посев на чувствительность к антибиотикам?

Данные методы основываются на применении последовательных двойных разведений антибактериального препарата от максимальной до минимальной концентрации. При этом различную концентрацию антибиотика распределяют по жидкой питательной среде (бульону) или агару. После этого бактериальную суспензию помещают на поверхность агара в чашке или в бульон с антибиотиками. По истечении двенадцатичасовой инкубации в термостате при температуре 35-37°С, специалисты анализируют полученные результаты.

Помутнение бульона (рост бактерий) или поверхности агара говорят о том, что данной концентрации антибиотика недостаточно для подавления жизнеспособности микроорганизмов. Увеличение концентрации антибиотика влечет за собой ухудшение роста бактерий. После серии последовательных разведений антибиотика, первая наименьшая концентрация, где не наблюдается рост бактерий, считается минимальной подавляющей концентрацией (МПК), то есть достаточной для лечения.

На основании полученных данных (значения МПК или диаметра зоны подавления роста) бактерии разделяют на чувствительные, с промежуточной резистентностью и резистентные. Для разделения данных категорий резистентности (или чувствительности) применяют пограничные концентрации антибиотика.

Эти величины не являются постоянными и пересматриваются в зависимости от изменений чувствительности бактерий. Пересмотром критериев и их разработкой занимаются микробиологи и химиотерапевты, которые входят в специальные комитеты.

Всего существует два метода интерпретации полученных результатов анализа чувствительности: клинический и микробиологический. Последний основывается на тестировании значений распределения концентрации антибиотика, подавляющего жизнедеятельность микроорганизмов. Клинический метод интерпретации основывается на оценивании эффективного действия антибактериальной терапии.

Как сдавать анализ на чувствительность к антибиотикам?

Что же означает это интересное понятие?

Клинически к чувствительным относят микроорганизмы, если во время лечения стандартной дозировкой антибиотика инфекции, вызванной данными бактериями, наблюдается хорошее терапевтическое действие.

Если достоверная клиническая информация отсутствует, то разделение на категории резистентности основывается на совокупности результатов, полученных in vitro, а также на концентрации антибиотика в сыворотке крови.

Какие из них являются резистентными?

Микроорганизмы относят к устойчивым, когда во время лечения заболеваний, вызванного данными бактериями, от терапии не наблюдается никакого положительного эффекта, даже при применении максимальной дозировки антибиотика. Данные бактерии обладают механизмом резистентности.

Сдать анализ мочи на чувствительность к антибиотикам довольно просто.

Когда говорят о промежуточной резистентности бактерий, то подразумевают случай, когда заболевание, вызванное этими штаммами, имеет различный терапевтический исход. Терапия может оказаться успешной при применении повышенной дозировки антибиотика, или если инфекция локализуется в месте, где накапливается самая высокая концентрация антибактериального препарата.

Иногда резистентные микроорганизмы и штаммы с промежуточной устойчивостью объединяются в одну категорию устойчивых бактерий.

В определенных ситуациях при недостатке результатов тестирования чувствительности распространенными способами, применяют определение минимальной бактерицидной концентрации.

Расшифровка анализа мочи на чувствительность к антибиотикам интересует многих.

Говоря о минимальной бактерицидной концентрации (МБК), имеют в виду наименьшую концентрацию антибиотика, вызывающую при исследовании in vitro уничтожение 99,9% бактерий от изначального показателя на протяжении определенного временного промежутка.

Показатель МБК применяют во время лечения антибиотиками, способными оказывать бактериостатическое действие, или если у особой категории пациентов отсутствует эффект от антибактериальной терапии. К частным случаям применения МБК относят остеомиелит, бактериальный эндокардит или генерализованные инфекции у больных с ослабленным иммунитетом.

Тестирование бактерий на чувствительность к антибиотику проводят с применением следующих биологических жидкостей:

Помимо этого, для того чтобы узнать местную чувствительность, проводят забор материала из уретры, верхних дыхательных путей или цервикального канала.

В заключении хотелось бы сказать, что в нынешнее время не существует способов, которые с абсолютной достоверностью позволили бы предсказать потенциальный клинический эффект антибиотиков при терапии заболеваний, вызванных проникновением в организм болезнетворных микроорганизмов. Однако результаты определения чувствительности, могут стать отличным ориентиром врача для подбора и корректировки антибактериального лечения.

Мы рассмотрели то, как проводится анализ на чувствительность к антибиотикам.

источник

Анализ на чувствительность к антибиотикам является обязательным при возникновении у врача подозрений, что заболевание пациента имеет бактериальную природу. Это связано с тем, что медики пытаются контролировать назначение данных препаратов, чтобы не стимулировать мутации и не вызывать резистентность у микроорганизмов.

Анализ на чувствительность к антибиотикам – это лабораторный способ выявления препарата, который будет оказывать наибольшее действие на патогенную флору в данном конкретном случае болезни.

На данный момент антибактериальная терапия применяется достаточно широко там, где она нужна, а также в тех случаях, когда это совсем не обязательно, для перестраховки от возможных осложнений. Например, после кесарева сечения, лапароскопических операций, удаления конкрементов из почек или мочеточников и т. д.

Фармацевтическая промышленность может предложить широкий выбор препаратов как в плане цены, так и в плане действенности. Для того чтобы не «тыкать пальцем в небо» и назначить эффективный антибиотик, нужно провести посевы на чувствительность.

Перед тем как врач подберет терапию, пациенту необходимо сдать некоторые анализы. Посев на чувствительность к антибиотикам назначается, если необходимо определить лекарство, которое в данном случае будет наиболее уместно. Чаще всего это исследование назначается для лечения заболеваний, передающихся половым путем, или ЗППП. Для детей же необходимость в определении антибиотика – это обязательное условие.

Кроме того, определение чувствительности нужно, чтобы избежать устойчивости бактерий к лечению. Если пациента недавно лечили антибиотиками, и теперь вновь необходим повторный курс, то требуется замена препарата. Это позволит использовать меньшие дозы лекарства и не вызывать мутации у возбудителя. В гнойных хирургических отделениях антибиотики меняют каждые два-три месяца.

Данный анализ необходим еще в том случае, если на основную группу антибиотиков у больного возникает аллергическая реакция.

Анализ мочи на чувствительность к антибиотикам, и не только ее, можно провести несколькими способами. Первый из них – это метод дисков. Проводят его следующим образом. В чашку Петри заливают агар, а когда он застынет, специальным инструментом наносят исследуемый материал. Затем по поверхности агара раскладывают бумажные диски, пропитанные антибиотиками. После чашку закрывают и ставят в термостат. Постепенно диск погружается в желатин, а антибиотик диффундирует в окружающее пространство. Вокруг бумаги образуется зона «подавления роста». Чашки проводят в термостате двенадцать часов, затем их вынимают и измеряют диаметр вышеуказанной зоны.

Второй способ – это метод Е-теста. Он похож на предыдущий, но вместо бумажных дисков используют полоску, которая на своем протяжении в разной степени пропитана антибиотиком. После двенадцати часов экспозиции в термостате чашку Петри достают и смотрят, в каком месте зона подавления роста соприкасается с полоской бумаги. Это будет наименьшая концентрация препарата, которая необходима для лечения заболевания.

Достоинством этих тестов является быстрота и простота их проведения.

Анализ на флору и чувствительность к антибиотикам можно провести и другим способом. Этот метод основан на последовательном уменьшении концентрации антибиотика (от максимальной до минимальной) с целью определить, в какой из пробирок прекратится сдерживание роста бактерий.

Сначала подготавливают растворы препарата. Затем их вносят в жидкую среду с бактериями (бульон или агар). Все пробирки на ночь (то есть 12 часов) помещаются в термостат при температуре 37 градусов, а утром проводят анализ получившихся результатов. Если содержимое пробирки или чашки Петри мутное, это свидетельствует о росте бактерий и, следовательно, неэффективности антибиотика в данной концентрации. Первая пробирка, в которой визуально не будет определяться рост колоний микроорганизмов, будет считаться достаточной концентрацией для лечения.

Это разведение препарата принято называть минимальной подавляющей концентрацией (МПК). Она измеряется в миллиграммах на литр или микрограммах на миллилитр.

Анализ на чувствительность к антибиотикам нужно уметь не только правильно сделать, но и грамотно расшифровать. Основываясь на получаемых результатах, все микроорганизмы делят на чувствительные, умеренно резистентные и резистентные. Для того чтобы различать их между собой, используются условные пограничные концентрации препаратов.

Эти значения не являются постоянными и могут изменяться в зависимости от приспосабливаемости микроорганизмов. Разработкой и пересмотром этих критериев поручено заниматься химиотерапевтам и микробиологам. Одной из официальных структур такого рода является Национальный комитет по клиническим лабораторным стандартам США. Разработанные ими стандарты признаны во всем мире для использования в оценке активности антибиотиков, в том числе для рандоминизированных многоцентровых исследований.

Различают два подхода к оценке результатов анализа на чувствительность к антибиотикам: клинический и микробиологический. Микробиологическая оценка ориентируется на распределение эффективных концентраций антибиотика, а клиническая — на качество антибактериальной терапии.

Анализ — определение чувствительности антибиотикам — назначается с целью выявить чувствительные и устойчивые микроорганизмы.

Чувствительными называются возбудители, которые поддаются лечению антибиотиками в средней терапевтической концентрации. Если достоверная информация о категории чувствительности микроорганизма отсутствует, то учитываются данные, полученные в условиях лаборатории. Они совмещаются со знаниями о фармакокинетике используемого препарата, и после синтеза данной информации делается вывод о восприимчивости бактерий к лекарству.

К резистентным, то есть устойчивым, микроорганизмам относятся те бактерии, которые продолжают вызывать заболевания даже при использовании максимальных концентраций лекарственных веществ.

Промежуточную резистентность устанавливают в том случае, если заболевание в процессе лечения может иметь несколько исходов. Выздоровление пациента возможно в случае использования высоких доз антибиотиков либо в случае прицельного накапливания лекарства в месте инфекции.

Анализ на микрофлору и чувствительность к антибиотикам определяет такой показатель, как минимальная бактерицидная концентрация, или МБК. Это самая низкая концентрация препарата, которая в лабораторных условиях вызывает элиминацию практически всех микроорганизмов в течение двенадцати часов.

Знание этого показателя врачи используют, когда назначают терапию не бактерицидными, а бактериостатическими лекарственными средствами. Или в случаях, когда стандартная антибактериальная терапия оказывается неэффективной. Чаще всего этот анализ заказывают для больных с бактериальным эндокардитом, остеомиелитом, а также при оппортунистических инфекциях.

Анализ на чувствительность к антибиотикам может проводиться с использованием биологических жидкостей:

Кроме того, для определения местной чувствительности производят забор мазков из уретры, цервикального канала и верхних дыхательных путей.

Бак. анализ на чувствительность к антибиотикам не требует от пациентов существенной подготовки, но некоторые ограничения все-таки есть.

Для исследования используется средняя порция утренней мочи, которая собирается в стерильную посуду. Перед этим пациент обязательно должен осуществить туалет наружных половых органов и рук.
Грудное молоко собирается перед кормлением ребенка. Первая порция сливается, а затем в стерильный контейнер сцеживается несколько миллилитров с каждой груди.
Перед сдачей мазка из носоглотки стоит воздержаться от приема пищи в течение пяти-шести часов.
В случае взятия мазка из половых путей, рекомендуют воздерживаться от половых контактов в течение пары дней.

На сегодняшний день не существует клинических или лабораторных методов, которые бы со стопроцентной вероятностью могли предсказать эффект от антибактериальной терапии. Но в то же время определение чувствительности бактерий к лекарственным веществам может быть ориентиром для врачей в вопросах выбора и коррекции лечения.

источник

Бактериологический посев – это анализ, выявляющий в том числе чувствительность патогенного микроорганизма к антибактериальным лекарственным средствам. С помощью этого метода исследования биологического материала специалисты определяют тип возбудителя инфекции, его концентрацию и патогенность, что помогает врачу назначить адекватное, эффективное для конкретного клинического случая специфическое лечение.

Посев на чувствительность, называемый еще бакпосевом на микрофлору – это вид исследования, применяемый при диагностике венерологических, гинекологических, урологических, дерматологических и других инфекционных заболеваний. После забора биологического материала производится его посев в различные питательные среды. Спустя некоторое время «разросшиеся» на нем в результате искусственного культивирования микроорганизмы тестируют на чувствительность к разным типам антибиотиков или противомикробных препаратов.

Исследование, называемое антибиотикограммой, демонстрирует, от препаратов какой фармакологической группы быстрее всего погибнет возбудитель инфекции. Кроме того, анализ определяет концентрацию патогенных микроорганизмов (выражается в КОЕ/мл, называемых колониеобразующими единицами), их резистентность (устойчивость) по отношению к медикаментозным средствам и внешним факторам. Для проведения исследования могут забираться следующие биоматериалы:

кровь;
урина;
желчь;
кал;
сперма;
спинномозговая жидкость;
слизь из уретры;
слизь из цервикального канала;
слизь из зева;
слизь из носоглотки;
мокрота;
содержимое кисты;
содержимое очага воспаления;
раневое отделяемое;
грудное молоко;
секрет простаты.

Выращивание колоний патогенных микроорганизмов на исследуемых материалах проводят в чашках Петри, либо сначала в жидкой среде, а затем на скошенном агаре в термостате на протяжении суток. После штаммы полученной культуры переносят на предметное стекло, окрашивают и изучают морфологические свойства микроорганизма под микроскопом. Внимание обращают на размер и форму клеток и их тинкториальные свойства (отношение к окрашиванию).

Бакпосев на микрофлору широко применяется в медицинской практике при диагностике инфекционно-воспалительных заболеваний (в гинекологии, урологии, венерологии, отоларингологии, хирургии и других областях), и при риске развития сепсиса (системной реакции на развивающееся воспаление). Анализ на чувствительность к антибиотикам позволяет выявить и вывести возбудителей следующих заболеваний:

бактериальный вагинит;
инфекционные ЗППП (заболевания, передающиеся половым путем);
хламидиоз;
гонорея;
трихомониаз;
цистит;
кишечная инфекция;
пневмония;
туберкулез;
ангина и мн. др.

Определение чувствительности к антибиотикам при беременности проводится как минимум дважды – сразу после постановки на учет и на 36 неделе. Делается мазок из влагалища и со слизистой оболочки зева и носоглотки. Биоматериал исследуют, определяют наличие урологических и мочеполовых инфекций и золотистого стафилококка – возбудитель, провоцирующий гнойный мастит, послеродовой сепсис и др. инфекции в период после родоразрешения. При наличии показаний (заболевания почек, повышенный уровень лейкоцитов в моче и др.) могут назначаться:

посев мочи;
мазок из шейки матки;
соскоб влагалищного эпителия;
бактериальный посев из цервикального канала.

В зависимости от типа биоматериала и показаний к проведению анализа по результатам исследования выделяют следующие виды патогенных возбудителей бактериальных инфекций:

Слизь из носоглотки и зева: золотистый стафилококк, гемолитический стрептококк, менингококк, листерия, коринебактерия дифтерии, гемофильная палочка, синегнойные пневмококки.
Гнойное отделяемое, содержимое ран, биопунктат: синегнойная палочка, псевдомонада.
Урогенитальная слизь: бактериальная флора, возбудители мочеполовых инфекций (микоплазма, гарднерелла, уреаплазма, трихомонада, грибы, гонококк, листерия).
Каловые массы: тифопаратифозная бактериальная группа, кишечная группа (иерсинии, сальмонеллы, шигеллы), анаэробные возбудители пищевых инфекций, условно-патогенные возбудители кишечных инфекций.
Кровь исследуют на стерильность.
Остальные биожидкости – на обсемененность (бактериальную флору).

По статистике, около 80% ошибок в лабораторных исследованиях вызваны ошибками при сборе и транспортировке материалов для обследования. Как правило, забор осуществляет медицинский персонал, но некоторые биоматериалы больной собирает сам. Поэтому при подготовке к сдаче анализа необходимо соблюдать следующие общие правила:

Во время забора биоматериала требуется исключить попадание в него антисептических или дезинфицирующих соединений, обсеменения бактериями и иными организмами. Для этого инструментарий и посуда для сбора должны быть стерильными.
На результаты посева на антибиотики влияет прием пациентом антибактериальных и иных медикаментозных препаратов. О терапии необходимо сообщить назначившему анализ врачу, применение лекарств необходимо приостановить за срок не менее 10 суток до назначенной даты анализа.
Материалы для обследования должны быть доставлены в лабораторию в специальных герметичных контейнерах в максимально короткие сроки. Во время транспортировки собранные биологические жидкости должны быть защищены от воздействия света, температур, механического воздействия.

Бактериологический посев на чувствительность к антибиотикам проводится на разных видах биоматериала. В зависимости от их типа необходимо соблюдать следующие предписания специалистов при заборе проб:

Сбор мочи производят по утрам, натощак, после предварительно проведенных гигиенических процедур. Необходимый объем урины составляет от 10 до 15 мл. Забор производят в специальную стерильную посуду, материал должен быть доставлен в лабораторию не позднее чем через два часа.
Мазок на чувствительность к антибиотикам из носоглотки или зева проводят по утрам, до приема пищи и воды и до проведения гигиенических процедур (чистки зубов и полоскания рта).
Сбор кала производится утром, стерильной лопаткой в стерильную посуду, необходимый объем биоматериала – до 30 мг. Недопустимо попадание мочи, использование клизмы или слабительных препаратов, замораживание. Срок доставки в лабораторию не должен превышать 3-5 часов.
Проба мокроты доставляется в место проведения исследования на протяжении часа после забора, который проводят натощак, после предварительной чистки зубов и полоскания рта.
Пробу грудного молока берут после проведения гигиенических процедур и обработки кожи вокруг соска спиртом. Перед забором материала в объеме 5 мл (в стерильную посуду) сцеживают от 15 мл жидкости. Время доставки в лабораторию не должно превышать 2 часов.
Мазок со слизистых влагалища и другие виды забора материала на мочеполовые инфекции. Анализ проводят не ранее чем через 2 недели после окончания менструации (точную дату определит врач на основе данных о месячном цикле). Последнее мочеиспускание должно быть проведено за два часа до взятия пробы у женщин и за 5-6 – у мужчин.
Объем забранной для посева крови у детей составляет 5 мл, у взрослых – 15 мл.

Посев на флору и чувствительность к антибиотикам проводится в течение некоторого продолжительного времени (по сравнению с готовностью результатов других анализов). Выделение штаммов проводится не одинаково, потому что разные биологические среды человеческого организма требуют индивидуальных подходов. Примерные сроки результатов анализов для разных типов биоматериала:

Кал: от 5 дней до недели.
Урогенитальные материалы: 4-10 дней.
Кровь: 10-14 дней (первые предварительные данные готовы через 3-4 дня).
Слизь из зева или носоглотки: от 5 до 7 дней.
Посев на флору: 5-10 дней.

Бактериологический посев на чувствительность к антибиотику дает представление о качественной и количественной оценке исследуемого образца. Качественная оценка (наличие возбудителя) классифицируется по следующим четырем степеням роста:

Первая. При этой степени рост на твердой среде отсутствует, на жидкой регистрируется небольшой рост.
Вторая. Небольшой рост на твердой среде (до 10 колоний).
Третья. Значительный рост на твердой среде (10-100 колоний).
Четвертая. Больше 100 колоний.

При обнаружении в результате исследования условно-патогенной микрофлоры (непатогенных грамотрицательных бактерий) первые две степени относят к норме, при третьей или четвертой степени говорят о присутствии в организме микробов-возбудителей инфекции, размножение которых стало причиной возникновения и развития заболевания. При наличии в материале патогенной микрофлоры все четыре степени свидетельствуют о наличии болезни. Например, сапрофитная микрофлора в бакпосеве мочи свидетельствует об инфекции мочеполовой системы.

Количественная оценка проводится в колониеобразующих единицах (КОЕ), обозначающих объединение (сообщество) клеток бактерий, образовавших колонию. Она помогает установить степень обсемененности и проконтролировать достаточность назначенных для лечения дозировок лекарственных средств (адекватность проведенных медикаментозных назначений). Принято следующее условное соотношение КОЕ и миллилитров:

1 колония – это 103 КОЕ/мл.
1-5 колоний – это 104 КОЕ/мл.
5-15 колоний – это 105 КОЕ/мл.
более 15 колоний – это 106 КОЕ/мл

Тест на чувствительность к антибиотикам, проводимый одновременно с посевом на определение возбудителя инфекции, называют антибиотикограммой. Выделив патогенный микроорганизм, его пересаживают в благоприятную для роста среду, где исследуется резистентность (чувствительность) конкретного штамма к активным компонентам антибактериальных препаратов. Чувствительные к антибиотику патогенные клетки не растут в зоне его действия, устойчивые показывают рост колоний.

Распространенным методом проведения антибиотикограммы является метод диффузии смоченных в антибактериальном препарате бумажных полосок в чашке Петри с исследуемой средой. Их выкладывают по поверхности, отступая на два сантиметра от края чашки и от друг друга. После 5-7 часов при комнатной температуре чашу помещают в термостат на срок от 3 до 5 дней. По результатам исследования рост колоний оценивается следующим образом:

Кольцо вокруг полоски диаметром от 2,5 см говорит о повышенной чувствительности микрофлоры к препарату;
2,5-1,5 см – стандартная чувствительность (средняя клиническая эффективность).
до 1,5 см – слабая реакция, лечение с высокой вероятностью не будет эффективным.
Отсутствие задержки роста колонии – полная устойчивость к медикаментозному средству.

источник

Сегодня все большую популярность приобретает анализ на чувствительность к антибиотикам. Микрофлора человека довольно разнообразна, представлена большим количеством микроорганизмов, в различных биотопах.

Фармацевтические компании разработали большое количество антибактериальных средств, антибиотиков, которые позволяют поддерживать нормальное соотношение и численность микробных популяций. С началом эры антибиотиков удалось вылечить многие заболевания, которые раньше считались смертельными. Но микроорганизмы также стремятся к выживанию, постепенно адаптируются к действию антибактериальных препаратов. Со временем многие из них обрели устойчивость по отношению ко многим лекарственным средствам, закрепили ее в генотипе и стали передавать из поколения к поколению. Таким образом, новые микроорганизмы, уже изначально не чувствительны к определенным препаратам, и их назначение может быть неэффективно. Фармацевты разрабатывают все новые и новые средства, добавляя в них новые активные компоненты, меняя основную формулу. Но постепенно к ним также вырабатывается устойчивость.

Причина повышенной устойчивости микрофлоры ко многим препаратам, и даже их аналогам зачастую кроется в неправильном и бесконтрольном приеме антибиотиков. Врачи назначают антибиотики и их комбинации при различных бактериальных заболеваниях. При этом не проводится предварительная оценка того, насколько эффективными они окажутся, не подбирается оптимальная дозировка, что очень важно как для лечения, так и для предотвращения механизмов развития дальнейшей устойчивости. Многие ошибочно назначают антибактериальную терапию даже при вирусных заболеваниях, что неэффективно, поскольку антибиотик не действует против вирусов.

Терапия зачастую назначается без предварительной проверки чувствительности, подбор действующего средства и требуемой его дозировки по отношению к каждому конкретному заболеванию и биотопу не производится. Поскольку антибиотики назначаются «в слепую», часто наблюдаются случаи, когда они не проявляют никакой активности по отношению к тем микроорганизмам, которые вызвали заболевание и численность которых нужно снизить. Вместо этого они оказывают воздействие на других представителей микрофлоры, в результате чего развивается дисбактериоз, который является также довольно опасной патологией и может привести к серьезным последствиям. Особенно опасны случаи, когда антибиотик уничтожает нормальную микрофлору, которая призвана защищать организм и поддерживать его нормальное функционирование. Также бывают случаи, когда назначается слишком большая или слишком маленькая дозировка препарата.

Пациенты также безответственно относятся к лечению. Зачастую лечение прекращают после того, как симптомы заболевания перестали беспокоить. При этом полный курс до конца многие предпочитают не заканчивать. Это является одним из факторов, которые способствуют развитию устойчивости у бактерий. Полный курс рассчитан на то, чтобы полностью патогенную микрофлору. Если курс не закончен, она убита не полностью. Те микроорганизмы, которые выжили, подвергаются мутациям, вырабатывают механизмы, которые обеспечивают им защиту от данного средства, и передают ее следующим поколениям. Опасность состоит в том, что устойчивость вырабатывается не только по отношению к данному конкретному препарату, но и ко всей группе препаратов.

Поэтому на сегодня одним из наиболее эффективных средств рациональной терапии и профилактики устойчивости, является предварительное определение чувствительности к назначаемому средству и подбор его оптимальной дозировки.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9]

В норме такой анализ должен проводить во всех случаях, когда требуется антибактериальная терапия. Исходя из основных законов антибиотикотерапии, любой антибиотик может быть назначен только после того, как проведена предварительная оценка чувствительности микрофлоры к данному средству, в лабораторных условиях определена оптимальная концентрация действующего вещества. На практике, в силу различных причин и обстоятельств, такое исследование перед началом лечения не проводится, и врач вынужден подбирать лекарственное средство «наугад».

Сегодня проверка чувствительности проводится только в тех случаях, когда у врача возникают большие сомнения в отношении того, будет ли назначенное средство эффективно, в случаях длительного отсутствия эффекта от препарата, а также при повторном использовании одного и того же средства в ограниченный промежуток времени. Часто чувствительность определяют при лечении заболеваний, передающихся половым путем. Многие специалисты обращаются к анализу в случае возникновения побочных эффектов, аллергических реакций, и когда нужно заменить один препарат на другой.

Также часто к анализу обращаются для подбора лекарственных средств при антибактериальной терапии в восстановительный период после операций, лапароскопических вмешательств, удаления органов. В отдлениях хирургии, гнойной хирургии такое исследование просто необходимо, поскольку здесь достаточно быстро развивается устойчивость.кроме того, развиваются сверхустойчивые «внутрибольничные»Многие платные клиники подходят к назначению лекарственных препаратов со всей ответственностью – только после проверки чувствительности. Во многих случаях бюджет государственных учреждений просто не позволяет проводить подобные исследования для каждого пациента, которому требуется антибактериальная терапия.

[10], [11], [12], [13], [14], [15]

Подготовка к исследованию не требует никаких специальных мер. Она такая же, как и при проведении любых анализов. За несколько дней до исследования нужно воздержаться от приема алкоголя. Утром, в день забора материала, в большинстве случаев кушать и пить нельзя. Но все зависит от типа анализа. Материал для исследования может быть различным, в зависимости от заболевания.

При заболеваниях горла, дыхательных путей, берут мазок из горла, носа. В венерологии, гинекологии, урологии, берут на анализ мазки из половых органов, кровь. При заболеваниях почек, часто требуется моча. При заболеваниях ЖКТ, некоторых инфекционных заболеваниях, исследуют испражнения, рвотные массы. Иногда может исследоваться грудное молоко, выделения из носа, глазной секрет, слюна, мокрота. При тяжелых патологиях и подозрении на инфекционный процесс, исследуется даже спинномозговая жидкость. Спектр достаточно широк.

Особенности забора материала определяются его биологической принадлежностью. Так, моча, кал, собирается утром в чистую емкость или в специальный контейнер для биологического материала. Забор грудного молока осуществляют до кормления. На исследование берется средняя порция. Мазок забирается при помощи специального тампона, которым проводят по слизистым, затем опускают в пробирку с подготовленной средой. Кровь забирается в пробирку, из пальца или вены. При заборе мазки из уретры или влагалища, рекомендуется в течение нескольких дней воздержаться от половых контактов.

При заборе биологического материала на исследование необходимо в первую очередь обеспечить правильность забора и стерильность. Но это в большинстве случаев является заботой медицинского персонала, пациенту по этому поводу беспокоиться не стоит. Чаще всего к подобным исследованиям обращаются гинекологи и урологи, на втором месте – отоларингологи при лечении заболеваний носоглотки и глотки, верхних дыхательных путей.

[16], [17], [18], [19], [20]

Собранный биологический материал в стерильных условиях доставляется в лабораторию, где и проводятся дальнейшие исследования. В первую очередь производится его первичный посев на универсальные питательные среды. Также берется часть материала для микроскопического исследования. Готовится мазок для микроскопии, проводится исследование, с помощью которого можно определить примерную картину, предполагать какие микроорганизмы присутствуют в образце. Это дает возможность подобать наиболее оптимальные среды для дальнейшего исследования и идентификации микроорганизмов. Также на микроскопии могут быть заметны признаки, указывающие на воспаление, онкологический процесс.

В течение нескольких дней в чашке Петри вырастают колонии микроорганизмов. Затем берут несколько колоний, пересеивают их на селективные питательные среды, которые дают возможность определить примерную группу микроорганизмов. Инкубируют в течение нескольких суток в условиях термостата, затем приступают к идентификации (определению вида микроорганизмов). Идентификацию проводят при помощи специальных биохимических и генетических тестов, определителей. Дополнительно могут проводиться иммунологические следования.

После того, как основной возбудитель выделен, проводя т оценку его чувствительности к антибиотикам. Для этого существует несколько методов. Чаще всего пользуются методом серийных разведений, или диско-диффузионным методом. Методики подробно прописаны в микробиологических справочниках, методических указаниях и стандартах лабораторий.

Суть диско-диффузионного метода состоит в том, что производится засев микроорганизмов, которые были идентифицированы на питательную среду, сверху накладываются специальные диски, пропитанные антибиотиками. В течение нескольких суток посев инкубируют в термостате, затем измеряют результаты. Оценивают степень задержки роста бактерий каждым антибиотиком. Если бактерия чувствительна к антибиотику, вокруг диска образуется «зона лизиса», в котором бактерии не размножаются. Их рост замедленный, или вовсе отсутствует. По диаметру зоны задержки роста определяют степень чувствительности микроорганизма к антибиотику и формулируют дальнейшие рекомендации.

Метод серийных разведений является наиболее точным. Для этого микроорганизмы высеивают на жидкие питательные среды, добавляют антибиотик, разбавленный по системе десятичных разведений. После этого пробирки ставят на несколько суток в термостат для инкубирования. Чувствительность к антибиотикам определяют по степени роста бактерий в питательном бульоне с добавлением антибиотиком. Регистрируют минимальную концентрацию, при которой еще происходит рост микроорганизмов. Это и есть минимальная дозировка препарата (необходим пересчет из микробиологических единиц на действующее вещество).

Это стандартные микробиологические методики, лежащие в основе любого исследования. Они подразумевают ручное выполнение всех манипуляций. Сегодня многие лаборатории оснащены специальным оборудованием, которое выполняет все эти процедуры в автоматическом режиме. Специалисту, работающему с таким оборудованием, необходимо только умение работать с оборудованием, соблюдение правил безопасности и стерильности.

Необходимо учитывать, что показатели чувствительности в условиях лаборатории и в условиях живого организма резко отличаются. Поэтому человеку назначается большая дозировка, чем определилась в ходе исследования. Это связано с тем, что в организме нет столь оптимальных условий для роста бактерий. В лаборатории создаются «идеальные условия». Часть препарата может быть нейтрализовано действием слюны, желудочного сока. Часть нейтрализуется в крови антителами и антитоксинами, которые вырабатываются иммунной системой.

Для начала производят забор биологического материала. Для этого нужно собрать среднюю порцию утренней мочи и доставить ее в лабораторию. Важно соблюдать стерильность и за несколько дней до анализа не принимать антибиотиков, иначе можно получить ложноотрицательный результат. После этого производится стандартный посев, суть которого состоит в выделении чистой культуры возбудителя и подборе антибиотика, который будет оказывать на него оптимальное бактерицидное воздействие. Определяется необходимая концентрация антибиотика.

Анализ мочи чаще всего назначают при подозрении на инфекционно-воспалительный процесс в мочеполовой системе, при иммунодефицитах и нарушении обмена веществ. В норме моча является стерильной жидкостью. Продолжительность такого исследования составляет 1-10 суток и определяется скоростью роста микроорганизма.

Исследование подразумевает выделение микроорганизма, который является возбудителем в чистую культуру. Иногда таких микроорганизмов может быть несколько (микст-инфекция). Некоторые микроорганизмы способны формировать биопленки, которые являются своеобразными «микробными сообществами». Выживаемость биопленок намного выше, чем одиночных микроорганизмов, или ассоциаций. Кроме того, не все антибиотики способны оказывать воздействие на биопленку, и проникать внутрь нее.

Для определения возбудителя, его выделения в чистую культуру, производится посев. В ходе исследования производится несколько посевов, в различные питательные среды. Затем выделяется чистая культура, определяется е биологическая принадлежность, и определяется чувствительность к антибактериальным препаратам. Производится подбор оптимальной концентрации.

Для исследования может использоваться любой биологический материал, в зависимости от заболевания, локализации инфекционного процесса. Продолжительность определяется скоростью роста микроорганизмов.

[21], [22], [23], [24], [25], [26]

Кал исследуют при различных желудочных и кишечных заболеваниях, при подозрении на инфекционный процесс, бактериальной интоксикации, пищевых отравлениях. Целью исследования является выделение возбудителя и подбор к нему оптимальных антибактериальных препаратов, которые будут оказывать высокую активность. Важность этого типа исследования состоит в том, что можно подобрать препарат, который будет оказывать воздействие только на возбудителя заболевания, и не будет воздействовать на представителей нормальной микрофлоры.

Первым и весьма значимым этапом является сбор кала. Его нужно собрать в специальный стерильный контейнер, в утренние часы. Хранить следует не более 1-2 часов. Женщинам при наличии менструальных выделений, следует отложить анализ до окончания, поскольку точность результатов изменится. Материал доставляется на исследование в лабораторию. Анализ проводится с применением стандартной микробиологической техники посева и выделения чистой культуры. Дополнительно проводится антибиотикограмма. По заключению производится разработка рекомендаций, определяется дальнейшая схема исследования.

[27], [28], [29], [30]

Материалом для исследования служит кал, взятый непосредственно после акта дефекации. Нормальная микрофлора ЖКТ состоит из представителей нормальной флоры и нескольких представителей патогенной флоры. Их видовой состав, количество и соотношение строго обозначены и держатся в пределах допустимой нормы. Если такое соотношение нарушается, развивается дисбактериоз. Он может проявляться по-разному. Могут развиваться инфекционные заболевания, если резко увеличивается количество патогенной микрофлоры. Если количество какого-либо микроорганизма резко снижается, свободное место занимают другие представители, которые не свойственны ЖКТ, или же патогенные. Часто свободное место занимает грибок, тогда развиваются различные грибковые поражения, кандидозы.

Для того чтобы определить количественный и качественный состав микрофлоры кишечника, проводят анализ кала на дисбактериоз. Условно всех представителей, обитающих в кишечнике, разделяют на три группы: патогенные, условно-патогенные и непатогенные. Соответственно, анализ состоит из трех частей. Каждая группа микроорганизмов имеет свои потребности в источнике питания, энергии. Для каждой группы нужны отдельные питательные среды и селективные добавки.

Сначала проводят микроскопию и первичный посев. Затем после посева отбирают наиболее крупные колонии, по морфологическим признакам похожие на представителей каждой группы. Производят пересев на селективные среды. После того, как микроорганизмы выросли, производят их идентификацию и сразу же проводят тест на чувствительность к антибиотиком. Применяются стандартные микробиологические методы.

Исследование группы патогенных микроорганизмов, кроме стандартных исследований, подразумевает определение бактерий тифа, паратифа и дизентерии. Также определяется, является ли человек носителем этих микроорганизмов. Комплексное исследование на дисбактериоз включает также исследование представителей группы бифидобактерий и лактобактерий. Исследование занимает порядка недели и зависит от скорости роста микроорганизмов.

[31], [32], [33], [34], [35], [36], [37], [38], [39]

При кишечной инфекции для лечения часто применяют бактериофаги вместо антибиотиков. Бактериофаги представляют собой вирусы бактерий, которые восприимчивы только к ним. Они находят бактерию, с которой комплементарны, проникают в нее и постепенно разрушают бактериальную клетку. В результате инфекционный процесс прекращается. Но не все бактерии чувствительны к бактериофагам. Для того чтобы проверить, будет ли проявлять данный бактериофаг активность по отношению к представителям микрофлоры, нужно провести анализ.

Материалом исследования служит кал. Анализ следует доставить в лабораторию в течение часа, иначе его проведение будет невозможным. Необходимо проводить анализ в нескольких повторностях. Изначальная методика сходна с таковой при определении чувствительности к антибиотикам. Сначала проводится предварительная микроскопия образца, затем – первичный посев на универсальные питательные среды. Затем на селективных питательных средах производят выделение чистой культуры.

Основная работа ведется с чистой культурой. Их обрабатывают различными видами бактериофагов. Если колония растворяется (лизируется), это указывает на высокую активность бактериофага. Если же лизис происходит частичный – бактериофаг функционирует умеренно. При отсутствии лизиса можно говорить об устойчивости к бактериофагу.

Приеимущество фаговой терапии состоит в том, что бактериофаги не оказывают воздействие на организм человека, не вызывают побочного эффекта. Они прикрепляются к определенным видам бактерий и лизируют их. Недостатком является то, что они очень специфичны и оказывают избирательное действие, и не всегда могут прикрепиться к бактериям.

[40], [41], [42], [43], [44], [45], [46], [47], [48]

Анализ представляет собой исследование отделяемого нижних дыхательных путей. Целью является определение вида микроорганизмов, которые выступают в качестве возбудителя заболевания. Также проводится антибиотикограмма. При этом определяют чувствительность возбудителя к антибиотикам, подбирают оптимальную концентрацию. Применяется при заболеваниях дыхательных путей.

Исследование мокроты и другого содержимого легких и бронхов необходимо для выбора схемы терапии, для дифференциации различных диагнозов. Применяется для того, чтобы подтвердить или опровергнуть наличие туберкулеза.

Для начала необходимо получить биологический материал. Он может быть получен при кашле, путем отхаркивания, или путем забора из трахеи при бронхоскопии. Существуют специальные аэрозоли, которые способствуют отхаркиванию. Перед взятием мокроты рот следует прополоскать водой, что позволит снизить степень бактериальной контаминации ротовой полости. Сначала рекомендуется сделать 3 глубоких вдоха, произвести продуктивный кашель. Мокрота также может быть взята методом аспирации из трахеи. При этом в трахею вводится специальный катетер. При бронхоскопии вводится в полость бронхов бронхоскоп. При этом слизистая смазывается анестетиком.

Затем материал поставляют в лабораторию на исследование. Производят посев по стандартной схеме, микроскопия. Затем выделяют чистую культуру, и дальнейшие манипуляции проводят с ней. Ставится антибиотикограмма, которая дает возможность выявить спектр бактериальной чувствительности и подобрать оптимальную дозировку.

При подозрении на туберкулез исследуются утреннюю мокроту в течение трех дней. При исследовании на туберкулез результат будет готов через 3-4 недели. Поскольку микобактерии туберкулеза, которые являются возбудителем заболевания, растут очень медленно.

В норме должны быть обнаружены представители нормальной микрофлоры дыхательных путей. Также необходимо учитывать, что при сниженном иммунитете показатели нормальной микрофлоры могут отличаться.

Представляет собой бактериологическое исследование эякулята спермы с дальнейшим подбором чувствительных антибиотиков и их концентраций. Чаще всего проводится при лечении бесплодия, и других заболеваний мужской половой системы. В том случае, если заболевание сопровождается инфекционным процессом. Основной причиной мужского бесплодия является в большинстве случаев именно инфекция. Обычно изначально проводят спермограмму. По результатам устанавливают оплодотворяющую способность спермы. Если в этом анализе обнаружено большое количество лейкоцитов, можно говорить о воспалительном процессе. При этом обычно сразу же назначают микробиологический анализ, поскольку воспаление почти всегда сопровождается инфекцией. Уже на основании полученных результатов подбирают соответствующую терапию. Исследование обычно назначает андролог.

Также поводом для проведения анализа служит простатит, венерические заболевания. Назначают и в том случае, если у партнерши обнаружено венерическое заболевание.

В основе правильного анализа лежит, прежде всего, правильный забор биологического материала. Забирают материал в специальные сосуды с широким горлом. Температура хранения должна соответствовать температуре тела человека. В таком случае материал может храниться не более часа. В замороженном виде может храниться не более суток. Во время приема антибиотиков посев сдавать нецелесообразно, это меняет клиническую картину. Обычно посев сдают до того, как начат курс антибиотикотерапии. Либо прием лекарств прекратить за 2-3 дня до анализа.

Затем производят его посев на питательную среду. Инкубируют в термостате в течение 1-2 суток. После выделяют чистую культуру, затем проводят идентификацию, определяют чувствительность, а также тип и скорость роста каждой колонии. Чувствительность к антибиотикам определяется в случае выявления патогенных микроорганизмов. В среднем анализ делается 5-7 дней.

[49], [50], [51], [52], [53], [54], [55], [56], [57]

Существует множество тестов, при помощи которых можно определить иммунологическую чувствительность к различным веществам или патогенам. Раньше основным методом было проведение анализов, основанных на реакции агглютинации антител и антигенов. Сегодня эти анализы применяются все меньше, поскольку их чувствительность намного ниже, чем многие современные методики, например глютеновые тесты. Чаще всего в практике прибегают к слюнному тесту на глютен и анализу кала.

Тест на чувствительность к глютену применяется для диагностики различных расстройств кишечника. Основан на реакции иммунной системы. Если в кал добавить глютен, реакция происходит, либо отсутствует. Это расценивается как ложноположительный или ложноотрицательный результат. Положительный указывает на предрасположенность к колитам, высокую вероятность его развития. Также подтверждает целиакию.

Также можно проводить анализ на глютен с использованием слюны в качестве биологического материала. Можно измерять количество антител к глиадину. Положительный результат указывает на чувствительность к глютену. Это может указывать на высокую вероятность диабета. Если в обоих тестах результат положительный, можно подтвердить иабет или целиакию.

[58], [59], [60]

Анализ проводят при лечении инфекционных и воспалительных заболеваний урогенитального тракта, при подозрении на хламидиоз. Материалом для исследования служит соскоб из слизистой влагалища – у женщин, мазок из уретры – у мужчин. Забор производится в процедурном кабинете с использованием одноразового оборудования. Важно соблюдать стерильность. Перед забором материала следует воздержаться от интимной близости в течение 1-2 дней до начала исследования. Если у женщины менструация, забор материала производится спустя 3 дня после ее полного окончания.

Материал доставляют в лабораторию. Полный анализ включает предварительную микроскопию мазка. Это дает возможность визуально определить микрофлору по морфологическим признакам, правильно подобрать питательные среды. Содержание слизи, гноя, частичек эпителия, может прямо или косвенно указывать на развитие воспалительного процесса или злокачественное перерождение клеток.

Затем производят первичный посев. Культуру инкубируют в течение нескольких дней в условиях термостата, производят идентификацию по культуральным признакам. Затем производят пересев на селективные питательные среды, предназначенные для культивирования хламидий. Полученные колонии идентифицируют с использованием биохимических тестов. После определяют чувствительность к антибиотикам стандартными методами. Подбирают наиболее чувствительный антибиотик, его концентрацию. Для культивирования хламидий нужны специальные среды, разработанные именно для этого типа микроорганизмов, которые содержат все необходимые вещества и факторы роста.

Также можно проводить исследование биологическим методом. Для этого заражают возбудителем крыс. В некоторых лабораториях используется вместо крыс специально выращенная культура тканей. Это связано с тем, что хламидии являются внутриклеточными паразитами, и для их культивирования нужны специальные условия. Затем определяют микроорганизмы методом ПЦР. Для определения чувствительности производят пересадку на селективную питательную среду для хламидий, через несколько суток производят учет результатов. О резистентности или чувствительности судят по подавлению инфекционного процесса в клетках.

[61], [62], [63], [64], [65], [66], [67], [68], [69]

В среднем анализ делается в течение 5-7 дней. Некоторые анализы делаются и дольше. Например, при диагностике туберкулеза результатов приходится ждать от 3 недель до месяца. Все зависит от скорости роста микроорганизмов. Часто сотрудникам лаборатории приходится сталкиваться со случаями, когда, пациенты просят сделать анализ быстрее. И даже предлагают «доплату» за срочность. Однако здесь нужно понимать, что от действий лаборанта в данном случае ничего не зависит. А зависит только от того, насколько быстро растет микроорганизм. Каждый вид имеет свою, строго определенную скорость роста.

Показателей абсолютной универсальной нормы для всех анализов не существует. Во-первых, для каждого биотопа эти показатели могут отличаться. Во-вторых, они индивидуальны для каждого микроорганизма. То есть показатели нормы одного и того же микроорганизма, скажем, для горла и кишечника отличается. Так, если в горле преобладает стафилококк как представитель нормальной микрофлоры, то в кишечнике преобладает кишечная палочка, бифидо- и лактобактерии. Также могут существенно отличаться показатели для одного и того же микроорганизма в разных биотопах. Например, кандиды в норме могут содержаться в определенном количестве в урогенительной микрофлоре. В ротовой же полости в норме они не содержатся. Попадание кандид в ротовую полость может указывать на их искусственный занос их из естественной среды обитания.

Моча, кровь, спинномозговая жидкость – это биологические среды, которые в норме должны быть стерильными, то есть не должны содержать никакой микрофлоры. Попадание в эти жидкости микрофлоры указывает на сильный воспалительный, инфекционный процесс, а также указывает на риск развития бактериемии и сепсиса.

В целом, есть примерная классификация. Единицей измерения в микробиологии служит КОЭ/мл, то есть количество колониеобразующих единиц в 1 миллилитре биологической жидкости. Степень обсеменения определяется числом КОЭ и варьирует в широком диапазоне от 10 1 до 10 9 . Соответственно, 10 1 – минимальное количество микроорганизмов, 10 9 – тяжелая степень инфицирования. При этом показателями нормы считается диапазон до 10 3 , все показатели свыше этого числа указывают на патологическое размножение бактерий.

Что касается чувствительности к антибиотикам, все микроорганизмы подразделяют на устойчивые, умеренно чувствительные, чувствительные. Часто этот результат выражают в виде качественной характеристики с указанием МИГ – минимальной ингибирующей дозы антибиотика, которая еще угнетает рост микроорганизма. Для каждого человека, как и для каждого микроорганизма, эти показатели строго индивидуальны.

[70], [71], [72], [73], [74], [75], [76], [77]

При проведении бактериологических исследований, тем более с определением чувствительности к антибиотикам, одного аппарата будет недостаточно. Необходимо полное, комплексное оснащение бактериологической лаборатории. Необходимо тщательно спланировать и подобрать оборудование, которое будет соответствовать каждому этапу исследований. На этапе забора биологического материала необходимы стерильные инструменты, боксы, биксы, контейнеры, камеры для хранения и транспортировочное оборудование для доставки материала в лабораторию.

В лаборатории в первую очередь понадобится качественный микроскоп для микроскопии мазков. Сегодня существует большое количество микроскопов, которые обладают самыми различными свойствами – от традиционного светового до фазово-контрастного и атомно-силового микроскопа. Современное оборудование позволяет сканировать изображение в трехмерном пространстве и рассматривать на большом увеличении с высокой точностью.

На этапе посева и инкубации микроорганизмов могут потребоваться автоклавы, сухожаровые шкафы, эксикаторы, паровые бани, центрифуга. Обязательно необходим термостат, в котором происходит основная инкубация биологического материала.

На этапе идентификации микроорганизмов и проведения антибиотикограммы, могут потребоваться микроманипуляторы, масс-спектрометры, спектрофотометры, колориметры для различных подсчетов и оценки биохимических свойств культур.

Кроме этого, современные лаборатории могут быть оборудованы высокотехнологичной аппаратурой, которая выполняет все перечисленные основные этапы исследования, вплоть до подсчетов результатов в автоматическом режиме. К числу таких приборов относят, к примеру, комплексное устройство бактериологической лаборатории на базе времяпролетного масс-спектрометра. Эта линия приборов дает возможность разделить всю территорию лаборатории на три зоны. Первая зона – грязная, в которой производится прием анализов, регистрация. Вторая зона – рабочая, в которой собственно и производят основные микробиологические исследования. И третья зона – стерилизационная и автоклавная, где производится подготовка и утилизация рабочего материала.

Модели дают возможность производить инкубирование при широком диапазоне температур и условий. Содержится встроенный анализатор крови и других биологических образцов, который выдает результаты с высокой точностью и достоверностью. В комплектацию включены электронные весы, бидистилляторы, центрифуги, автоклавы и стерилизационные шкафы, автоматическая средоварка, водяная баня со встроенной мешалкой, рН-метры, термометры и микроскопы.

Также применяют микробиологический анализатор, в который закладываются исследуемые образцы, питательные среды, наборы тестов для определения чувствительности. Аппарат выполняет необходимые исследования и выдает готовое заключение.

Расшифровку анализа может сделать только врач. Но зачастую пациенты, получив результат на руки, впадают в панику, заметив большое количество непонятных обозначений и цифр. Для того чтобы не теряться, целесообразно иметь хотя бы общее представление о том, как расшифровать анализ на чувствительность к антибиотикам. Обычно в результатах первым пунктом указывают название микроорганизма, который является возбудителем заболевания. Название приводится на латинском языке. Также здесь может быть указан представитель нормальной микрофлоры, который преобладает в организме, поэтому паниковать не стоит. Вторым пунктом указывается степень обсеменения, то есть количество микроорганизма. Обычно это число колеблется в пределах от 10 1 до 10 9 . Третьим пунктом указывается форма патогенности, и четвертым – названия антибактериальных препаратов, к которым этот микроорганизм чувствителен. Рядом указывается минимальная ингибирующая концентрация, при которой происходит подавление роста микроорганизма.

[78], [79], [80], [81], [82], [83], [84]

источник