Меню Рубрики

Методы проведения анализа на антитела

Методика проведения выявления антител: исследование сыворотки на наличие антител с применением желатина.

Оборудование и реактивы:

· тест-эритроциты для скрининга антител

· раствор натрия хлорида 0,9%

· термостат лабораторный на +48°С или водяная баня на +48°С

· пробирки вместимостью 5-10 мл

Порядок проведения исследования:

1. В штатив устанавливают тонкостенные пробирки высотой около 10 см, которые нумеруют. Число и нумерация пробирок должны соответствовать числу и нумерации образцов эритроцитов, с которыми исследуется сыворотка.

2. В пробирки в соответствии с их нумерацией вводят по одной капле (0,05 мл) эритроцитов, приготовленных в качестве стандартов.

3. Во все пробирки прибавляют по две капли (0,1 мл) 10% раствора желатина, подогретого до разжижения. Раствор желатина необходимо тщательно просмотреть перед применением. При помутнении или появлении хлопьев, а также при потере свойств застудневать при температуре +4-8°С, желатин не пригоден.

4. После этого во все пробирки вводят по 1-2 капли (0,1 мл) испытуемой сыворотки, пробирки встряхивают для перемешивания их содержимого и помещают в водяную баню при температуре +46-48°С на 15 минут или в суховоздушный термостат на 45 минут.

5. В пробирки, по извлечении их из водяной бани или термостата, наливают 5-8 мл раствора NaCl 0,9%. Содержимое пробирок перемешивают путем одно-двукратного перевертывания их и наблюдают результат в виде наличия или отсутствия агглютинации эритроцитов.

Трактовка результата:

Содержимое пробирок просматривают в проходящем свете.

Содержимое пробирок, в которых при просмотре невооруженным глазом агглютинация не видна, необходимо микроскопировать.

Для этого каплю содержимого помещают на предметное стекло и просматривают под малым увеличением.

Наличие агглютинации в пробирках с образцами резус-положительных эритроцитов и отсутствие с резус-отрицательными и собственными эритроцитами указывает на содержание в испытуемой сыворотке анти- D антител.

Отсутствие агглютинации со всеми образцами эритроцитов указывает на то, что антитела не выявлены.

Если антитела к антигенам эритроцитов выявлены, а специфичность их подтверждается в лаборатории, имеющей панель типированных эритроцитов, в антиглобулиновом тесте, то, зная их специфичность, можно обеспечить совместимость при переливании крови специальным выбором донора. Если у больного выявлены антитела, но определить их специфичность невозможно, совместимость переливаний крови можно обеспечить индивидуальным подбором донора.

При обнаружении антител к антигенам эритроцитов выписывают ответ, который переносится в историю болезни.

Результаты исследования заносятся в регистрационный журнал с обязательным указанием серии, сроков вскрытия и сроков годности используемых реагентов.

Бланк ответа остается у больного, хранится в течение всей жизни и предъявляется при госпитализации.

Современным подходом к выполнению всего спектра иммуногематологических исследований является Гелевая технология. Метод основан на агглютинации эритроцитов в полиакриламидном геле, помещенном в микропробирки пластиковых диагностических карт. Гель может быть нейтральным, либо содержащим специфические моноклональные антитела или антиглобулиновый реагент.

Исследуемые эритроциты или стандартные эритроциты и исследуемая сыворотка (плазма) помещаются в соответствующие микропробирки, где происходит реакция агглютинации, затем диагностические карточки центрифугируются для разделения результатов реакции. При этом неагглютинированные эритроциты свободно проходят между частицами геля и образуют осадок на дне микропробирки, в то время как агглютинированные располагаются на поверхности или в толще геля. Расположение агглютинатов в геле определяется силой агглютинации и положительный результат может быть оценен от 1+ до 4+. Размер частиц геля, специальный подбор моноклональных или поликлональных антител позволяет достичь наилучших результатов чувствительности и специфичности. А его прозрачность делает считывание результатов более надежными и позволяет интерпретировать самые сложные диагностические случаи.

Виды исследований, которые можно выполнить с помощью гелевой технологии:

· определение групп крови (прямая и двойная реакция)

· широкое типирование антигенов эритроцитов всех известных систем

· скрининг и идентификация аллоантиэритроцитарных антител

· диагностика аутосенсибилизации к антигенам эритроцитов

· индивидуальный подбор гемокомпонентов для переливания и пробы на совместимость

· диагностика посттрансфузионных осложнений и гемолитической болезни новорожденных.

Гелевый тест является простым, воспроизводимым, быстрым и очень чувствительным методом, позволяющим сразу выявлять слабые варианты антигенов. Тест оценивается только макроскопически. После короткого обучения персонала, необходимого для правильного выполнения теста, сводятся к минимуму затраты рабочего времени и ошибки, встречающиеся при использовании традиционных методик. Гелевый тест позволяет стандартизировать лабораторные методики, дать объективную оценку результатов реакции гемагглютинации. Стабильность результатов теста позволяет перепроверять полученные данные, что необходимо для контроля. Результаты тестов могут быть фотокопированы для сохранения их в архиве или для обучения в сложнодиагностируемых случаях. Для теста используется небольшое количество сыворотки или эритроцитов, что чрезвычайно важно для педиатрических клиник.

Использование гелевой системы позволяет снизить риск заражения персонала при работе с потенциально инфицированными образцами. Гелевый тест может быть использован для проведения проб на совместимость по антигенам эритроцитов перед переливанием крови. Для этого используются непрямой антиглобулиновый тест и одностадийный ферментный метод. Гелевый тест выполняется и оценивается по вышеприведенным правилам. Отсутствие этапов отмывание эритроцитов при выполнении непрямого антиглобулинового теста позволяет более эффективно использовать рабочее время, а также благодаря стабильности результатов теста контролировать все полученные данные.

5. Правила взятия крови у пациента и оформления документации.

Для иммуногематологических исследований кровь берется из вены в сухую чистую пробирку, на которой предварительно стеклографом (маркером) надписывается фамилия и инициалы пациента.

Количество зависит от объема исследований, но не менее 3-4 мл.

Сроки хранения крови перед исследованием: не более 72 часов при температуре +4-+8ºС.

С образцом крови в лабораторию передается направление, оформленное следующим образом:

Направление

Поперечные профили набережных и береговой полосы: На городских территориях берегоукрепление проектируют с учетом технических и экономических требований, но особое значение придают эстетическим.

Общие условия выбора системы дренажа: Система дренажа выбирается в зависимости от характера защищаемого.

источник

Иммунная система человека способна не только самостоятельно бороться с различными заболеваниями, но и запоминать патогенные микроорганизмы и «вредоносные агенты», с которыми ей пришлось столкнуться. В результате этого в сыворотке крови появляются специфические белки, которые на профессиональном языке называются антителами.

Одним из самых информативных обследований является анализ крови на антитела, позволяющий определить, с какими заболеваниями раньше сталкивался человек и чем он болеет сейчас. Кроме того, обследование помогает выявить общий уровень иммунной системы и сбои в ее функционировании.

Антитела – это иммуноглобулины или глобулины, которые вырабатываются иммунной системой с целью выявления и уничтожения вредоносных и патогенных микроорганизмов. Но их продуцирование не всегда направлено на защиту от различных типов возбудителей. При разных патологиях и аутоиммунных заболеваниях они могут атаковать здоровые ткани организма. Анализ крови на антитела помогает выявить, с чем именно столкнулся пациент.

Формирование специфических белков в крови человека начинается только в следующих случаях:

  • организм подвергается атаке вредоносных агентов, ведущих к дальнейшему инфицированию;
  • при вакцинации (введение в организм искусственно ослабленных бактерий).

Развитие памяти иммунитета – важнейший для человека процесс, при котором глобулины запоминают антигены с прикрепленными к ним антителами. Если они попадут в организм повторно, иммунная система сможет обезвредить их. Медики предупреждают о том, что присутствие антител в сыворотке крови – важнейший показатель состояния иммунной системы. Любые отклонения от референсных значений указывают на развитие патологии.

На протяжении жизни человеческий организм сталкивается с различными возбудителями заболевания, химическими компонентами (средства бытовой химии, лекарства), продуктами переработки собственных клеток. В качестве ответной реакции организм начинает вырабатывать собственные иммуноглобулины. Антитела формируются из лимфоцитов и выступают как стимулятор иммунной системы.

В международной медицине различают 5 типов антител, каждый из которых реагирует только на определенные антигены:

  • IgM . Иммуноглобулин этого типа вырабатывается, если в организм попала инфекция. Его основная задача – стимуляция иммунной системы и оказание сопротивления болезни;
  • IgG . Их выработка начинается через несколько суток после начала болезни. Антитела IgG формируют устойчивый к инфекциям иммунитет, также от них зависит эффект от вакцинации. Клетки этой фракции отличаются крошечными размерами, поэтому они могут проникать сквозь плацентарный барьер, формируя первичный иммунитет плода;
  • IgA . Отвечают за безопасность ЖКТ (желудочно-кишечного тракта), органов мочевыделительной системы и дыхательных путей. Такие тела обнаруживают и «фиксируют» между собой патогенные организмы, мешая им прикрепиться к стенкам слизистой оболочки;
  • IgE . Отвечают за защиту от грибков, паразитов и аллергенов. Антитела IgE обитают в бронхах, кишечном тракте и желудке. Также от них зависит формирование вторичного иммунитета. В свободной форме их практически невозможно найти в плазме крови;
  • IgD . Эта фракция до сих пор изучена лишь частично. Последние исследования показали, что агенты IgD отвечают за местный иммунитет и обычно начинают вырабатываться при обострении хронических инфекций. Их количество составляет менее 1% от всех антител, присутствующих в сыворотке крови.

Специалисты утверждают, что вне зависимости от типа все антигены могут присутствовать как в плазме крови, так и фиксироваться к инфицированным клеткам. Обнаружив тип антигена, специфические белки прикрепляются к ним. После этого иммунной системе поступает сигнал о присутствии чужеродных объектов, которые необходимо уничтожить.

В международной медицине антитела также различаются с учетом того, как именно они взаимодействуют с антигенами:

  • антиинфекционные и антипаразитарные. Прикрепляются к телу микроорганизма, приводя к его гибели;
  • антитоксические. Антитела этого типа нейтрализуют токсины, продуцируемые инородными телами, но сами по себе они неспособны уничтожать патогенные микроорганизмы;
  • аутоантитела. Приводят к развитию аутоиммунных заболеваний, поскольку атакуют здоровые клетки организма;
  • аллореактивные. Конфликтуют с антигенами тканей и клетками других организмов того же биологического типа. Анализ на эту фракцию всегда проводится, если человеку назначена трансплантация почек, печени или костного мозга;
  • антиидиотипические. Вырабатываются для нейтрализации собственных антител (только при их избытке).

Врачи часто назначают пациентам проведение анализа на антитела. Такое исследование помогает выявить, что стало причиной повышения или снижения уровня глобулинов. После расшифровки результатов врач сможет понять, что значит и с чем связано отклонение от нормы.

Также анализ часто назначается для отслеживания динамики развития некоторых патологий. Исследование необходимо, если у медика есть подозрение на дефицит иммуноглобулинов, что становится причиной ослабления иммунитета и увеличивает вероятность развития разных заболеваний.

Чаще всего анализ на антитела назначается при подозрении на следующие заболевания:

  • гепатит C;
  • заболевания щитовидной железы аутоиммунного происхождения. Определяется по количеству антител к тиреопероксидазе (ТПО);
  • вирус иммунодефицита человека. Для постановки достоверного диагноза пациенту придется сдать кровь на исследование не менее 3 раз;
  • ветрянка;
  • краснуха;
  • корь;
  • воспаление щитовидной железы, хронический тиреоидит. При этих заболеваниях сильно повышается продуцирование антител к тиреоглобулину;
  • паразитарные заболевания, вызванные глистами, аскаридами, круглыми и колючеголовыми червями;
  • дифтерия, столбняк;
  • полиомиелит;
  • герпес, вирус Эпштейна-Барра (ВЭП);
  • коклюш;
  • заболевания инфекционного происхождения, вызванные хламидиями.

Также исследование на иммуноглобулины определенного класса может быть назначено при следующих заболеваниях:

  • ревматоидный артрит;
  • рак;
  • цирроз печени;
  • заражение крови;
  • отит, воспаление легких, менингит хронической формы;
  • дисфункция иммунной системы;
  • ВИЧ-инфекции.

Исследование незаменимо и при выявлении причин бесплодия. При сложностях с зачатием ребенка обычно назначается анализ на антитела к ХГЧ и на антиспермальные антитела. Во время беременности всегда назначается анализ на антитела к резус-фактору. Также беременным женщинам нужно сдавать кровь на групповые антитела.

Один из наиболее распространенных анализов этого типа – изучение крови на присутствие антител к тиреоглобулину. Повышение выработки подобных антител указывает на патологии щитовидной железы и помогает определить присутствие воспалительного процесса. Несомненным преимуществом этого исследования является то, что оно дает возможность выявить заболевание на начальном этапе и свести к минимуму риск нежелательных осложнений.

Если пациенту назначен анализ на антитела, врач обязательно должен рассказать, зачем проводится исследование и как к нему подготовиться. Состав сыворотки крови человека постоянно меняется. На него влияет образ жизни, особенности питания, психическое состояние.

Пациентам необходимо запомнить следующие правила:

  • забор крови осуществляется утром натощак (только в условиях стационара). Кушать перед анализом запрещено;
  • за 3 суток до анализа нужно отказаться от потребления жирной и жареной пищи, солений и копченостей, концентрированных соков. Категорически запрещено употреблять спиртные напитки и курить. По возможности в подготовительный период рекомендуется отказаться от потребления лекарственных средств;
  • если анализ назначен для определения наличия венерического заболевания, гепатита или паразитных заболеваний, за 2 дня до сдачи биоматериала рекомендуется перейти на молочную диету.

Кровь нельзя сдавать, если за несколько дней до предполагаемого анализа пациент перенес эмоциональное потрясение или стресс. Также существует повышенная вероятность ложного результата, если накануне проводилось ультразвуковое исследование, МРТ или делалась флюорография.

Наиболее современным и эффективным методом выявления антител в сыворотке крови считается иммунофлюоресцентный анализ. При помощи такого лабораторного исследования можно определить тип и титр (активность) иммуноглобулинов, а также выявить, насколько сильно развилась патология. Исследование включает в себя следующие этапы:

  • лаборант забирает у пациента биологический материал;
  • несколько капель полученной крови капают на специальную планшетку с лунками, в которых содержатся очищенные антигены предполагаемого возбудителя;
  • далее лаборант добавляет в лунки специальный реагент;
  • с учетом окрашивания медик делает выводы о результате анализа.

Само исследование может быть 2 типов:

  • качественное. Назначается для подтверждения присутствия или отсутствия искомого антигена;
  • количественное. Этот тип анализа считается более сложным и показывает концентрацию антител в изучаемой сыворотке. При помощи него можно оценить, насколько быстро развивается инфекция.

Вне зависимости от типа анализа расшифровка результатов занимает от 1 до 3 суток.

Анализ проводится с целью определения присутствия и числа глобулинов различных типов. Если количество антител повышено, это означает присутствие определенного заболевания. Для выявления общей клинической картины и назначения подходящей схемы лечения пациенту назначают дальнейшую диагностику. Норма иммуноглобулинов в крови отличается в зависимости от пола и возраста.

IgA IgM IgG
Дети 0,15-2,5 0,8-1,6 7,2-13,4
Женщины 0,53-3,44 0,38-1,96 5,88-16,2
Мужчины 1,02 0,55-1,43 6,63-14,01

Антитела этого типа находятся на слизистых оболочках (желудок, ротовая полость). Они присутствуют в секрете, выделяемом бронхами, и молоке кормящей женщины. Их повышенная концентрация может свидетельствовать о суставных патологиях, гнойных инфекционных процессах, заболеваниях желудочно-кишечного тракта и хронических недугах гипатобилиарной системы.

Если количество и активность антител IgA сильно снижены, это может быть признаком заболеваний кровеносной системы и кожных патологий. Также уровень антител к тканевой трансглютаминазе может быть сильно снижен у пациентов, которые длительное время принимали иммунодепрессанты или цитостатики.

Глобулины IgM отличаются повышенной активностью, именно они первыми начинают атаковать вредоносные микроорганизмы и бактерии, проникшие в организм. Их концентрация в крови начинает увеличиваться в первые недели развития инфекционного заболевания:

  • повышение антител класса M может наблюдаться при внутриутробных инфекциях, паразитарных заболеваниях, патологиях органов дыхания и желудочно-кишечного тракта;
  • снижение антител. Часто обнаруживается у людей, перенесших тяжелые кожные ожоги. Также их нехватка может указывать на лимфому.

Продуцирование глобулинов класса G увеличивается при бактериальных инфекциях и аллергии. Повышенный уровень антител IgG может быть признаком красной волчанки, вируса иммунодефицита человека, туберкулеза, суставных заболеваний. Снижение иммунных белков наблюдается при мышечной дистрофии генетической природы, аллергии и опухолевых процессах лимфатической системы.

Определение уровня антител в крови имеет важнейшее значение при диагностировании различных заболеваний. Также исследование незаменимо во время вынашивания ребенка, поскольку оно помогает выявить различные патологии у плода. Но необходимо учитывать, что результат исследования зависит от того, насколько правильно была проведена подготовка. Именно поэтому перед сдачей крови пациенту необходимо строго соблюдать все врачебные рекомендации.

источник

Анализ крови на антитела – виды (ИФА, РИА, иммуноблоттинг, серологические методики), норма, расшифровка результатов. Где можно сдать? Цена исследования.

Сайт предоставляет справочную информацию исключительно для ознакомления. Диагностику и лечение заболеваний нужно проходить под наблюдением специалиста. У всех препаратов имеются противопоказания. Консультация специалиста обязательна!

Анализ крови на антитела означает совокупное название целого ряда лабораторных методов диагностики, предназначенных для определения различных веществ и микроорганизмов в крови по наличию антител к этим выявляемым биологическим структурам.

Чтобы понимать значение термина «анализ крови на антитела», нужно знать, что такое антитела, против чего и кого они бывают, и как используются в лабораторных методах.

Итак, антитела представляют собой белки, которые вырабатываются клетками иммунной системы (В-лимфоцитами) против каких-либо микробов, попавших в организм, либо против биохимических молекул. Вырабатываемые иммунными клетками антитела предназначены для уничтожения тех микроорганизмов или биохимических соединений, против которых они были синтезированы. Иными словами, когда иммунные клетки синтезируют достаточное количество антител, последние появляются в системном кровотоке и начинают планомерное уничтожение микробов или биологических молекул, попавших в организм человека и вызывающих различные заболевания.

Иммунные клетки вырабатывают исключительно специфичные антитела, которые работают и уничтожают только строго определенный вид микробов или биомолекул, ранее распознанные иммунной системной, как чужеродные. Схематично это происходит следующим образом: в организм попадает какой-либо патогенный микроорганизм или биологическая молекула. На это соединение или микроб «садится» клетка иммунной системы, которая как бы «считывает» его характеристики (имеющиеся на поверхности белки-рецепторы), то есть «знакомится». Далее иммунная клетка-посредник путем сложного каскада биохимических реакций передает «считанную информацию» лимфоцитам. Получившие «информацию» лимфоциты активируются – они как бы приняли «задачу». И после активации лимфоциты начинают синтезировать антитела, которые содержат рецепторы, позволяющие им «узнавать» и прицепляться к поверхности только тех микробов или молекул, «характеристики» которых были переданы клетками-посредниками. В результате получаются строго специфические антитела, эффективно уничтожающие исключительно «узнанные» патогенные микробы и биомолекулы.

Такие специфические антитела нарабатываются в организме всегда при попадании в него какого-либо патогенного микроорганизма – бактерии, вируса, простейшего, гельминта и т.д. Также антитела могут синтезироваться для уничтожения биологических молекул, которые иммунная система признала «чужеродными». Например, при попадании в организм крови другой группы иммунная система распознает ее эритроциты, как «чужие», передает сигнал лимфоцитам, которые нарабатывают антитела, в свою очередь, уничтожающие чужеродные эритроциты. Из-за этого развивается реакция «хозяин против трансплантата».

Но всегда иммунная система вырабатывает антитела, действующие строго против конкретного микроба или биомолекулы, а не против всех, кто «похож» на них. Благодаря подобной специфичности и избирательности не происходит уничтожения антителами нужных клеток и биомолекул, а подвергаются нападению только признанные иммунной системой «чужими» и опасными.

Антитела на языке биохимии называются иммуноглобулинами, и обозначаются английской аббревиатурой Ig. В настоящее время выделяют пять классов иммуноглобулинов, которые может синтезировать В-лимфоцит, – это иммуноглобулины А (IgA), иммуноглобулины G (IgG), иммуноглобулины М (IgM), иммуноглобулины Е (IgE) и иммуноглобулины D (IgD). Каждый класс иммуноглобулинов обладает вышеописанной специфичностью в отношении уничтожаемых им микробов или биомолекул. Но каждый класс иммуноглобулинов имеет и, так сказать, свой «фронт», на котором они действуют.

Так, иммуноглобулины А, главным образом, расположены на слизистых оболочках, и обеспечивают уничтожение патогенных микробов во рту, носу, носоглотке, мочеиспускательном канале, влагалище. Иммуноглобулины М нарабатываются первыми при попадании микроба в кровоток, и потому считаются ответственными за острый воспалительный процесс. Иммуноглобулины G, напротив, нарабатываются медленнее, но зато долго циркулируют в крови и обеспечивают уничтожение всех остатков микробов, попавших в организм. Именно иммуноглобулины G ответственны за хронический инфекционно-воспалительный процесс, который они поддерживают вялотекущим, уничтожая патогенные микробы настолько, что они не могут привести к смертельному исходу, но недостаточно для их полного удаления из организма. Иммуноглобулины Е обеспечивают постоянное протекание аллергических реакций, так как вырабатываются в ответ на различные антигены, присутствующие в окружающей среде. А иммуноглобулины D выполняют разные функции.

Таким образом, обобщая вышесказанное, можно коротко резюмировать, что антитела в крови могут быть различных классов, и что каждое антитело строго специфично к какому-либо патогенному микробу либо к биомолекуле.

Когда лабораторными методами определяют наличие в крови антител, то обязательно указывают, к какой биомолекуле или к какому микробу ищут антитела. Определение антител к какому-либо микробу позволяет понять, заражен человек этим микроорганизмом или нет, так как если заражение отсутствует, то и антител в крови не будет. Но если заражение имеется, то в крови у человека будут циркулировать антитела, нарабатываемые иммунной системой для уничтожения микроорганизма.

Кроме того, определение антител в крови используют для того, чтобы понять, болел ли в прошлом человек какой-либо инфекцией. Такое применение анализа на антитела возможно благодаря тому, что даже после полного выздоровления в крови у человека остается небольшое количество антител (клеток памяти), уничтоживших патогенный микроб. Эти антитела циркулируют в крови «на всякий случай», чтобы при повторном попадании в организм такого же, уже знакомого микроба сразу его уничтожить и даже не дать болезни начаться. Собственно, именно такие клетки памяти и обеспечивают то, что называется иммунитетом к инфекции, а именно – то, что человек, перенесший болезнь, больше ей не заражается.

Анализ крови на антитела проводят с целью обнаружения антител к тому или иному конкретному микроорганизму или биомолекуле. Причем для обнаружения каждого конкретного вида антител делают отдельный анализ. Например, иммунная система организма против вируса гепатита В вырабатывает несколько разных антител – антитела против оболочки, антитела против ДНК вируса и т.д. Соответственно, для обнаружения антител против оболочки вируса гепатита В выполняют один анализ, а для выявления антител против ДНК вируса – другой анализ, и т.д. Таким образом, совершенно справедливым является простое правило: один вид антител – один анализ. Это правило всегда нужно учитывать при планировании обследования, когда нужно обнаружить антитела в крови к каким-либо патогенным микроорганизмам или биомолекулам.

Наличие антител в крови к различным микробам и биомолекулам определяют целым рядом различных лабораторных методик. В настоящее время наиболее распространенными методами выявления различных антител в крови являются следующие методы:

  • Иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA);
  • Радиоиммунный анализ (РИА);
  • Иммуноблоттинг;
  • Серологические методики (реакция гемагглютинации, реакция непрямой гемагглютинации, реакция торможения гемагглютинации и т.д.).

Рассмотрим методы определения наличия антител в крови подробнее.

Метод иммуноферментного анализа (ИФА) позволяет определить наличие различных антител в крови. В настоящее время подавляющее большинство анализов крови на антитела выполняются именно методом ИФА, который относительно прост в использовании, недорог и очень точен.

Читайте также:  Можно есть при анализе на антитела

Метод иммуноферментного анализа состоит из двух частей – иммунной и ферментной, которые позволяют с точностью «вылавливать» строго определенные микробы или биомолекулы в крови, и потом определять их.

Иммунная часть методики заключается в следующем: в наборе для лабораторного анализа на дно лунок прикреплены антигены, которые способны связываться с искомыми строго определенными антителами. Когда в эти лунки вносится исследуемая кровь, то присутствующие в ней антитела связываются с антигенами на дне лунок, образуя прочный комплекс. Если же в крови выявляемые антитела отсутствуют, то в лунках не образуются прочные комплексы, и результат анализа будет отрицательным. После внесения исследуемой крови в лунки ее оставляют на некоторое время, достаточное для образования комплекса антиген-антитело, после чего выливают. Далее лунку несколько раз промывают от остатков крови специальными растворами, которые не могут разъединить образовавшихся комплексов антиген-антитело, прочно прикрепленных к дну лунок.

Далее проводится ферментная часть анализа: в промытые лунки вносится специальный фермент, как правило, пероксидаза хрена, которая прочно связывается с комплексами антиген-антитело. Затем в лунки добавляют перекись водорода, которую разлагает пероксидаза хрена с образованием окрашенного вещества. Соответственно, чем больше будет комплексов антиген-антитело, тем большее количество пероксидазы окажется в лунках. А значит, тем большее количество окрашенного вещества получится в результате разложения перекиси водорода, и тем интенсивнее будет окраска раствора в лунке. Далее на специальном приборе измеряется степень интенсивности окраски полученного в лунках вещества, и по формулам вычисляется сначала концентрация пероксидазы. После этого, на основании концентрации пероксидазы, рассчитывается концентрация комплексов антиген-антитело, и, соответственно, количество, выявляемых антител в крови.

Как видно, метод ИФА не сложный, но надежный, простой, информативный и высокоточный. Более того, методом ИФА можно определить концентрацию практически любых антител в крови – достаточно просто «приклеить» к лункам вещество, с которым эти детектируемые антитела будут связываться. Именно из-за этих качеств метод ИФА и получил широчайшее распространение в настоящее время для выявления различных антител в крови человека.

Данный метод реже используется для выявления различных антител ввиду его дороговизны, отсутствия необходимого оборудования в лабораториях и сложности производства реактивов для его проведения. По своей сути РИА основан на тех же принципах, что и ИФА, только в качестве веществ, по которым производится определение концентрации искомых антител, применяются меченые изотопы, дающие излучение, а не пероксидаза хрена. Естественно, изготовление меченых изотопов и их фиксация на антигенах, прикрепленных к дну лунок, гораздо сложнее и дороже производства пероксидазы хрена. В остальном РИА состоит из тех же двух этапов, что и ИФА – на первом, иммунном этапе искомые антитела из крови связываются с прикрепленными на дне лунок антигенами. А на втором, радиоэтапе, меченые изотопы связываются с комплексами антиген-антитело, причем их количество пропорционально концентрации искомых антител. Далее специальные приборы улавливают количество посылаемых изотопами импульсов, которые затем пересчитываются в концентрации определяемых антител.

Данный метод представляет собой сочетание ИФА или РИА с электрофорезом. Иммуноблоттинг – очень точный метод выявления антител к различным микроорганизмам или биомолекулам, и именно поэтому в настоящее время его активно используют.

Иммуноблоттинг заключается в том, что сначала антигены различных микробов разделяют методом электрофореза в геле, после чего эти разные фракции антигенов наносят на специальную бумагу или нитроцеллюлозную мембрану. А далее уже на этих полосках бумаги или мембраны, на которых закреплены известные антигены, проводят обычный ИФА или РИА для выявления наличия в крови антител к тем микробам, антигены которых зафиксированы на бумаге или мембране.

Серологические методы обнаружения антител в крови человека к различным микроорганизмам-возбудителям инфекционных заболеваний являются наиболее старыми способами «анализов на антитела». Но из-за своей «старости» эти методы не потеряли актуальности, довольно высокой точности и по-прежнему широко применяются для скорейшего выявления антител к некоторым опасным вирусам, бактериям и простейшим. А ряд заболеваний по наличию антител к микробу-возбудителю в крови можно диагностировать и вовсе только серологическими методами.

К серологическим методикам относят реакцию нейтрализации (РН), реакцию торможения гемагглютинации (РТГА), реакцию непрямой гемагглютинации (РНГА, РПГА), реакцию торможения гемадсорбции (РТГАд), реакцию связывания комплемента (РСК), реакцию иммунофлуоресценции (РИФ). Все серологические методики основаны на взаимодействии искомых (определяемых) антител, присутствующих в крови человека, с антигеном. При этом в качестве антигена подбирается именно такое вещество, на которое должны среагировать антитела, которые пытаются выявить. На практике имеются готовые наборы антигенов различных микробов, которые и соединяют с исследуемой кровью, и если в последней имеются антитела к взятому антигену, то результат анализа положителен – то есть в крови человека присутствуют антитела к микробу, который был выбран для анализа.

В ходе серологических реакций удается также установить и концентрацию выявляемых антител в крови. Только эта концентрация выражается не в миллиграммах на миллилитр или в иных привычных величинах, а в титрах. Рассмотрим подробнее, что это значит, и как проводятся серологические реакции.

Конечно, каждая разновидность серологической реакции имеет собственные правила проведения, но мы постараемся описать в общем виде, как их делают, так как в принципиальных моментах они однотипны. Так, любая серологическая реакция основана на том, что в лунку или пробирку вносят исследуемую сыворотку крови с предполагаемыми в ней антителами. Затем в эту же сыворотку вносят определенное количество антигенов микроба, к которому в крови предположительно есть антитела.

Далее сыворотку исследуемой крови разводят в 10 раз, наливают в другую пробирку или лунку и добавляют к ней антигены. Затем сыворотку крови разводят снова в 10 раз, получая уже разведение 1:100, помещают в отдельную лунку или пробирку и добавляют антиген. Так делают несколько разведений, например, 1:1, 1:100, 1:1000, 1:10000 и т.д. Не обязательно всегда делают разведения, кратные 10 – часто используют разведения в два раза, и в таком случае получаются пробирки с разведениями сыворотки 1:1, 1:2, 1:4, 1:8 и т.д. Такие разведения и называются титрами.

В пробирки со всеми разведениями вносят антигены микробов, антитела к которым пытаются выявить. Затем пробирки или лунки инкубируют (оставляют в теплом месте или при комнатной температуре на некоторое время, причем для каждого антигена свой промежуток времени инкубации), чтобы антигены смогли связаться с антителами, если таковые, конечно, присутствуют в крови. После завершения инкубации в пробирки со всеми разведениями вносят чистые эритроциты кур, баранов и т.д. Далее смотрят, в какой пробирке произошло разрушение этих эритроцитов. Ведь если сформировался комплекс антиген-антитело, то он обладает определенными свойствами, среди которых разрушение специально подготовленных чистых эритроцитов. Если в какой-то пробирке видно разрушение эритроцитов, то смотрят, какое разведение сыворотки в ней. И это значит, что в крови человека присутствуют искомые антитела в титре, например, 1:8.

Анализ крови на антитела любым методом (ИФА, РИА, иммуноблоттинг, серологические методы), в принципе, выполняется в течение нескольких часов, максимум суток. Но на практике лаборатории не выдают результатов через несколько часов после сдачи крови, что обусловлено особенностями работы медицинских учреждений.

Так, во-первых, любая лаборатория, даже частная, ждет некоего часа Х, когда у нее считается завершенным набор проб на сегодняшний день. Например, такой час Х – это 12-00. Значит, даже если человек сдаст кровь в 8-00 утра, до 12-00 часов она будет просто храниться в холодильнике, пока не завершится период сбора проб. Далее, в 12-00 часов сотрудник лаборатории пустит пробы крови в работу, которая и займет несколько часов. Таким образом, результат будет только вечером, а возможно и утром, если методика выполнения анализа длинная.

Во-вторых, из-за небольшого количества запросов многие лаборатории ряд анализов проводят не каждый день, а только раз в неделю или раз в месяц. В этом случае имеется назначенный день Х, в который все собранные за неделю или месяц пробы пускают в работу. До наступления такого дня проба крови будет просто храниться замороженной. Если лаборатория действует по такому принципу, то результат анализа на антитела может быть выдан через 1 – 4 недели, в зависимости от частоты выполнения данной методики в конкретном учреждении.

В крови могут определять концентрации различных типов антител, а именно – IgG, IgM, IgA, IgE. Причем зачастую определяют концентрацию каждого типа антител отдельно, так как они имеют разное диагностическое значение. Но в некоторых случаях, когда это информативно с точки зрения диагностики, определяют концентрацию сразу всех типов антител, то есть, IgG + IgM + IgA. Ситуации, когда определяют концентрации сразу нескольких типов антител в крови, называются анализом на суммарные антитела.

Такие анализы на суммарные антитела могут выполняться для диагностики различных инфекций, например, гепатита С, сифилиса и т.д.

Аббревиатура igg – это неправильная запись IgG, что означает иммуноглобулины типа Джи. Эти иммуноглобулины относятся к антителам, которые вырабатываются иммунной системой для уничтожения различных патогенных микробов, попавших в организм. Таким образом, очевидно, что антитела igg – это антитела типа IgG, которые могут присутствовать в крови и определяться лабораторными методами анализа.

Однако просто анализа на антитела IgG не существует, так как иммунная система вырабатывает антитела этого типа против разных микробов. Причем против каждого микроба вырабатывается собственная разновидность IgG, и все они разные. То есть антитела IgG против вируса кори – одни, против вируса краснухи – вторые, против вируса гриппа – третьи, против стафилококка – четвертые, и т.д. Соответственно, можно выполнить анализы на определение IgG в крови против вируса кори, против вируса краснухи, против микобактерии туберкулеза, и т.д. А значит, нужно сначала выяснить, антитела против какого именно микроба нужно искать в крови, и только после этого выполнять анализ на антитела типа IgG к этому микроорганизму.

Вирусы являются патогенными микроорганизмами, при проникновении которых в организм иммунная система начинает вырабатывать антитела для их уничтожения. Но против каждого вируса иммунная система вырабатывает собственные, уникальные, подходящие только к этому виду микроба антитела. Соответственно, можно выявить наличие в крови антител к какому-либо конкретному вирусу, но нельзя определить антитела к вирусам вообще. Поэтому, прежде чем сдавать анализ крови на вирусы, следует точно выяснить, антитела к каким именно вирусным микроорганизмам человек желает отыскать.

Результат анализа крови на антитела, проведенный любым методом, всегда бывает двух видов – положительный или отрицательный. Положительный результат означает, что в крови человека обнаружены искомые антитела к какому-либо микробу или биомолекуле. Это свидетельствует о том, что человек был в прошлом или является в настоящий момент инфицированным каким-либо микробом (инфекционным заболеванием). Отрицательный результат означает, что в крови человека отсутствуют искомые антитела, и он не был заражен инфекционным заболеванием, гельминтами и т.д.

Кроме того, при положительном результате анализа на антитела практически всегда указывается их концентрация. Если определение проводилось методом ИФА, РИА или иммуноблоттинга, то концентрация антител указывается в МЕ/мл. Но если для анализа крови на антитела применялись серологические методики, то в таком случае концентрация антител указывается в титрах, например, 1:64 и т.д.

Расшифровка каждого анализа на антитела зависит от того, какой вид антител выявлялся в крови (IgG, IgM, IgA), а также от того, к какому именно микробу или биомолекуле эти антитела. Например, если в крови обнаруживаются антитела типов IgG и IgM к какому-либо патогенному микроорганизму, то это свидетельствует о том, что человек в настоящее время болеет инфекционным заболеванием, вызываемым этим микробом. Обнаружение же в крови антител к микробу типа IgG свидетельствует о хроническом течении инфекции или о том, что человек в прошлом ее перенес и выздоровел.

Часто для определения того, насколько давно человек был инфицирован каким-либо микробом, оценивают не просто концентрацию антител типа IgG в крови, но и их авидность. Авидность антител определяет то, насколько давно они циркулируют в крови человека. Соответственно, чем выше авидность, тем больше давность перенесенного инфекционного заболевания. Например, если авидность антител к краснухе составляет менее 40 %, то человек перенес это заболевание недавно, в ближайшие три месяца. А если авидность антител к краснухе более 60 %, то инфекция была перенесена более полугода назад.

Норма анализа на антитела зависит от того, какой именно вид антител «искали» у конкретного человека. Например, если проводился анализ на антитела к вирусу краснухи у женщины, планирующей беременность, то наличие таких антител в крови, то есть положительный результат анализа, считается хорошим. Ведь если у женщины есть антитела, значит, она уже «сталкивалась» с вирусом краснухи (переболела или была привита), организм выработал иммунитет, и в настоящее время он сохранился. А значит, такой женщине не грозит заражение краснухой во время предстоящей беременности, и у нее нет риска того, что ребенок родится глухим из-за краснухи у матери.

Если же в крови человека обнаруживаются антитела к ДНК, то это плохой результат анализа, так как он свидетельствует о тяжелом аутоиммунном заболевании, когда иммунная система по ошибке считает свои органы и ткани чужими, и планомерно уничтожает их.

Чтобы записаться на прием к врачу или диагностику, Вам достаточно позвонить по единому номеру телефона
+7 495 488-20-52 в Москве

+7 812 416-38-96 в Санкт-Петербурге

Оператор Вас выслушает и перенаправит звонок в нужную клинику, либо примет заказ на запись к необходимому Вам специалисту.

Анализы крови на различные антитела можно сдать в частных или государственных лабораториях, которые выполняют необходимый тест. Так как анализ на каждый вид антител выполняется при помощи специального набора, то следует сначала точно определиться, какие именно антитела нужно обнаружить, и только после этого выяснить, какие лаборатории могут это сделать.

В зависимости от того, какие именно антитела будут определяться в крови, цена анализа может быть различной. Наиболее простые и дешевые анализы стоят около 100 рублей (например, на титр антител при беременности), а дорогие – до 3000 рублей. Конкретную стоимость анализа на антитела к определенному микроорганизму или биомолекуле нужно узнавать непосредственно в лабораториях, выполняющих такие исследования.

Симптомы полиомиелита. Лабораторная и дифференциальная диагностика полиомиелита. Антитела к вирусу – видео

Автор: Наседкина А.К. Специалист по проведению исследований медико-биологических проблем.

источник

Титр антител — это максимальное разведение кровяной сыворотки, содержащее в своем составе специфические антитела. При изучении иммунного статуса делается одно разведение сыворотки, соответственно, прилагаемой к тест-системе (1:50, 1:100), после чего при необходимости рекомендуется ее титрование посредством последовательных двукратных разведений.

Установлено, что при наличии в анализе титров антител до обратного значения 1:600-1:800 существует прямо пропорциональная связь между показателем оптической плотности и значением титра антител данной сыворотки. Выше данной обратной величины подобная зависимость нарушается и при последующем двукратном титровании (1:1600, 1:3200, 1:6400 и т.д.) возникает ошибка, которая тем больше, чем больше разведение.

Рассмотрим подробнее, что это — титр антител.

Человеческий организм на протяжении всей жизни «знакомится» с разными возбудителями болезней, химическими веществами, продуктами распада клеток. В ответ на это он продуцирует собственные иммуноглобулины, которые еще называют антителами крови – это специфические белковые соединения, которые формируются из лимфоцитов и выступают в качестве стимуляторов иммунной защиты.

Многим интересно, что значит титры антител. В иммунологических исследованиях выделяется несколько видов антител, действующих строго на конкретные антигены. Их определяют при помощи метода титрования и в их число входят:

  1. IgM – первоначальный иммуноглобулин, который начинает продуцироваться при попадании инфекции в организм. Его роль заключается в стимуляции иммунитета на первичную борьбу с патологическим процессом. Наличие IgG в крови наблюдается через 3-5 суток после начала болезни. Эти антитела формируют устойчивый иммунитет к определенным инфекциям, отвечают за результативность вакцинации.
  2. IgA – защищают пищеварительный тракт, дыхательные пути и мочевыделительную систему от вредоносных микробов. Они связывают патогенные объекты, не давая им закрепиться на слизистых покровах.
  3. IgE – активизируются в целях защиты организма от грибков, паразитов и аллергенов, и локализуются, главным образом, в бронхах, желудке и кишечнике. Данные антитела принимают участие в процессах формирования вторичного иммунитета. В плазме крови в свободном виде их практически нет.
  4. IgD – фракция, которая до сих пор недостаточно изучена. Считается, что эти агенты отвечают за местный иммунитет, начинают продуцироваться при обострении миеломной болезни или хронических инфекций. В сыворотке составляют меньше 1% фракции всех существующих иммуноглобулинов.

Все антитела могут свободно присутствовать в плазме крови либо прикрепляться к поверхностям инфицированных клеток. Узнав антиген, специфические белки начинают соединяться с ним с помощью хвоста. Он служит особым сигналом для иммунных клеток, отвечающих за процессы нейтрализации чужеродных объектов.

С учетом того, как взаимодействуют с антигенами белки, их также подразделяют на несколько типов:

  1. Антиинфекционные – связываются с телом болезнетворных микроорганизмов, уничтожая их.
  2. Антитоксические – не оказывают влияния на жизнедеятельность чужеродных тел, однако обезвреживают токсины, вырабатываемые ими.
  3. Аутоантитела – вещества, которые запускают механизм возникновения аутоиммунных нарушений посредством атаки здоровых клеток организма.
  4. Аллореактивные – это иммуноглобулины, выступающие против антигенов клеток и тканей иных организмов одного и того же биологического вида. Исследование на определение антител этой фракции проводится посредством титрования при трансплантации различных органов.
  5. Изоантитела – белковые соединения, которые продуцируются против агентов клеток иных биологических видов.
  6. Антиидиотипические – соединения, которые предназначены для нейтрализации переизбытка собственных антител.

Как проводится анализ на титры антител? Это очень распространенное исследование.

Современным методом лабораторной диагностики различных заболеваний считается анализ крови ИФА (иммунофлюоресцентный анализ). Этот тест на антитела позволяет определить титр (функциональность) иммуноглобулинов, их разновидность и установить, на каком этапе развития находится конкретный патологический процесс.

Методика определения титра антител состоит из нескольких стадий: сначала лаборант получает у человека сыворотку крови. Полученный образец помещается на специализированную пластиковую планшетку с наличием лунок, в которых присутствуют очищенные антигены искомых возбудителей или белка (в случаях если необходимо определить антиген). В лунки добавляется специальное окрашивающее вещество, которое при возникновении положительной ферментной реакции меняет цвет иммунных комплексов. По плотности окрашивания делается вывод о результатах проведенного анализа крови на титр антител.

Для проведения данного тестирования исследователям необходимо от одного до трех дней. Сам анализ бывает двух видов: качественный и количественный. В первом случае указывается, что в сыворотке крови будет найден или, наоборот, отсутствовать искомый антиген. Тест количественного типа проводится в соответствии с более сложной цепной реакцией и позволяет сделать вывод о концентрации антител, установить их разновидность, оценить с какой скоростью развивается патологический инфекционный процесс.

Полный перечень показаний к проведению ИФА охватить невозможно, однако наиболее распространенными целями осуществления данного анализа является диагностика острых и хронических форм таких инфекционных патологий:

  • IgG к ВИЧ;
  • IgM и IgG к гепатитам вирусного происхождения А, B, C, E;
  • IgM и IgG к цитомегаловирусу;
  • IgM и IgG к герпесу;
  • IgM и IgG к вирусу Эпштейна-Барр;
  • IgG к паразитарным болезням;
  • IgM и IgG к токсоплазмозу;
  • IgM и IgG — титры антител к кори, краснухе, сальмонеллезу, клещевому энцефалиту, дизентерии и прочим заболеваниям;
  • IgM и IgG к инфекциям, которые передаются через половые пути;
  • IgG к хеликобактерной инфекции;
  • в целях общей оценки показателей иммунитета и маркеров аутоиммунных заболеваний;
  • определение онкологических маркеров (фактор некроза опухоли, простатспецифический антиген, раково-эмбриональный антиген и другие);
  • определение уровня гормонов крови (прогестерон, пролактин, тестостерон, тиреотропный гормон и другие).

В норме титров антител в анализе быть не должно. Результатом качественного типа исследования является однозначное заключение: искомое вещество либо не обнаружено, либо найдено в образце крови. Если же речь идет о количественном типе анализа, то концентрация может быть выражена числовым значением либо количеством знаков «+».

Анализируемыми показателями при этом считаются:

  1. IgM – присутствие данного класса иммуноглобулинов свидетельствует об остром течении инфекционного процесса в организме. Их отсутствие может свидетельствовать об отсутствии возбудителя либо о переходе патологического процесса в хроническую стадию.
  2. IgA при отрицательном результате тестирования на IgM в большинстве случаев свидетельствует о скрыто протекающей либо хронической инфекции.
  3. Совместное присутствие IgM и IgA — два положительных результата свидетельствуют о разгаре острой фазы имеющейся патологии.
  4. IgG — хронизация заболевания либо выздоровление и формирование иммунитета к конкретному инфекционному агенту.

Многих пациентов интересует вопрос – что значит результат отрицательный? Титры антител отсутствуют? Результат, который отмечен знаком «—», считается отрицательным и означает, что иммунитета к определенному инфекционному возбудителю в организме пациента не обнаружено.

Еще одним важным количественным показателем является индекс авидности антител, который выражается в процентах. Он указывает на то, какой промежуток времени прошел от начала развития инфекционного процесса. Чем такой индекс выше, тем длиннее данный период.

Бесспорными преимуществами данной методики исследования считаются ее специфичность и высокая чувствительность. Чувствительность означает возможность распознать искомый элемент, даже если его содержание в образце невысокое. Специфичность подразумевает безошибочность диагностирования: если результаты положительные, значит, обнаружены именно те антитела или антигены, которые предполагались.

Высокая степень технологичности осуществления иммуноферментного анализа методом титрования минимизирует воздействие человеческого фактора, что существенно уменьшает вероятность ошибки. Основная масса используемых в современных клиниках реактивов и тест-систем для ИФА производятся в промышленных условиях, что гарантирует достоверный результат.

Основным недостатком данной диагностической методики является то, что для ее проведения необходимо знать, что именно нужно найти. Анализ подразумевает, что врач заранее предполагает, каким патологическим агентом вызвано то или иное заболевание.

Еще один недостаток данного исследования заключается в том, что ИФА на титры антител – это довольно дорогой метод анализа крови, что часто не по карману многим пациентам. А это означает, что к назначению такой диагностики врач должен подходить с умом.

Читайте также:  Может ли анализ на антитела быть ошибочным

источник

Ифа анализ: что это такое, расшифровка иммуноферментного анализа крови на паразитов, сифилис, вич, туберкулез. норма в таблице, результаты

Иммуноферментный анализ ИФА является одним из самых эффективных и современных способов, позволяющих выявить болезни инфекционного плана, нарушения, связанные с иммунными и гормональными сбоями, а также онкологические процессы. Во время проведения анализа в крови можно обнаружить антитела, вырабатывающиеся при наличии в организме инфекции. Учитывая этот нюанс, обнаружить болезнь можно даже на самом раннем этапе её развития.

В основе результатов ИФА анализа лежит получение химических реакций на ферменты, служащие особенными опознавательными знаками для распознания антител. Следовательно, во время иммунохимических реакций антитела начинают взаимодействовать с некоторыми антигенами. Всё это даёт основания утверждать, что ложные результаты при сдаче крови на ИФА минимальны.

Исследование позволяет определить количество иммунных клеток, их свойства, а также наличие необходимых антител

Положительным результат считается тогда, когда обнаруживается окрашивание раствора. Окрас сигнализирует о том, что антигены взаимодействуют с антителом. В случае когда ничего подобного не происходит, результат является отрицательным.

Топовая статья: ПЦР-анализ: что это и каковы его особенности

Учитывая, что в основе методики лежит способ получения иммунного ответа от человеческого организма, такой метод является непрямым методом диагностики.

Плюсы иммуноферментного анализа крови:

  • Наличие разных модификаций анализа.
  • Высокая точность и технологичность.
  • Вероятность получения ошибочного анализа сводится практически к нулю.
  • Применяется для диагностики заболеваний не только у взрослых, но и у детей.
  • Универсальность. Забор анализа позволяет подтвердить наличие заболевания или наоборот опровергнуть опасения.

Как уже говорилось выше, при помощи анализа можно выявить целый ряд нарушений, характерных для наличия того или другого недуга. Поэтому многие специалисты назначают большинству пациентов именно ИФА.

На сегодняшний день анализ крови с помощью вышеописанной методики даёт возможность обнаружить наличие многих инфекций, приведенных в таблице:

Название заболевания Описание
Вирусные гепатиты Это распространённые и опасные недуги печени, которые обычно вызваны вирусами.
На сегодняшний день существует пять видов вирусов, которые могут привести к гепатиту. Их обозначают такими латинскими буквами: A, B, C, D, E.
Сифилис Это венерическое заболевание, которое очень легко выявить методом ИФА.
Очень важно обнаружить этот недуг как можно быстрее, чтобы он не сказался негативно на общем состоянии здоровья.
Цитомегаловирусная инфекция Цитомегаловирус является возбудителем заболевания.
Болезнь может передаваться от матери к ребёнку (внутри утробы), воздушно-капельным способом или при половом контакте с носителем. Поэтому обычно анализ крови на ИФА назначают всем будущим мамам.
ВИЧ Вирус иммунодефицита – это то заболевание, которое прогрессирует очень медленно, но, несмотря на это, является крайне опасным.
Причина заключается в том, что вирус постепенно атакует клетки иммунитета, в результате чего организм становится уязвимым к любым, даже к самым незначительным микробам и бактериям.
Хламидии Благодаря иммуноферментному анализу можно не только подтвердить наличие инфекции, но и определить очень точно гормоны, антитела, антигены и многое другое, что позволяет качественно и эффективно провести лечение.
Кроме этого, анализ даёт возможность максимально точно понять, когда произошло заражение и какие негативные последствия были вызваны в организме при наличии хламидий.
Герпес Герпес может передаваться и воздушно-капельным путём, и во время незащищённого полового акта. Этот недуг опасен тем, что негативно сказывается на работе многих систем организма.
Определить вирус можно качественным и количественным способами. Если используется первый метод, тогда удаётся выявить наличие антител, тип вируса, а также возможность существования предшествующих рецидивов. Что касается количественного, то он даёт возможность определить тип антител или, проще говоря, состояние иммунитета против вируса.

Принимая во внимание тот факт, что выявление заболевания возможно даже на раннем этапе, недуг можно начать лечить сразу же, следовательно, появляется возможность забыть о нём достаточно быстро.

Иммуноферментный анализ крови сдаётся из вены, а не из пальца, как думают некоторые. Дабы данные были верны, следует выполнить ряд несложных правил.

Проба крови для исследования берется из локтевой вены

  • За пару дней до сдачи анализа не поднимать тяжестей и не выполнять тяжёлую физическую работу.
  • За сутки не употреблять алкоголь и не курить (нельзя даже находиться в накуренном помещении).
  • Соблюдать максимальное спокойствие.
  • Сдавать анализы можно не раньше, чем через 10 дней после того, как употреблялись какие-либо лекарственные средства.

Некоторые таблетки могут влиять на результат анализа, поэтому если отменить приём невозможно, об этом следует сказать доктору.

Топовая статья: Какой врач лечит половые инфекции

Некоторые специалисты рекомендуют также за пару дней до анализа сесть на лёгкую диету. Речь идёт о воздержании от копчёной, жареной и солёной пищи. Если кровь сдаётся, чтобы выявить наличие гепатита, то нельзя употреблять также цитрусовые в виде фруктов и в виде сока.

Специалисты рекомендуют за пару дней до анализа сесть на лёгкую диету

В случае когда необходимо выявить нарушение гормонального фона, на общий анализ может повлиять месячный цикл женщин. В этом случае доктор сам назначает дату, когда сдача анализа будет наиболее оптимальной.

Ниже будет представлена таблица, в которой указаны изменения нормального уровня лютеинизирующего полового гормона, исходя из дня менструального цикла.

Кол-во днейУровень гормона
1-12 день 12-14 мЕд/л
12-14 день 24-150 мЕд/л
С 15 дня до начала нового цикла 2-17 мЕд/л

Топовая статья: Что можно выявить используя мазок у женщин?

Анализ даёт возможность выявить разные виды антител в организме, которые показывают себя на каждом этапе развития болезни. Когда недуг только дал о себе знать, активно вырабатываются антитела класса IgM. Если их удалось обнаружить, значит, возникло какое-то заболевание.

После выработки IgM начинается производство IgG свидетельствующее о том, что человек либо является носителем инфекции, либо он недавно переболел чем-то инфекционным. Обычно выявить IgG можно после 3-4 недель, отсчитывая от начала развития IgM, но некоторые антитела могут находиться в организме годами.

Есть ещё такой класс антител, как IgA, который свидетельствует о наличии в организме хронической инфекции. При его обнаружении начинается незамедлительное лечение, а после этого ещё раз сдаётся анализ крови ИФА, дабы убедиться, что лечение принесло свои плоды.

Немного иначе ситуация обстоит с детьми в возрасте до полутора лет, в организме которых на первых этапах жизни для обеспечения надёжной защиты от вирусов в большом числе присутствуют антитела IgG. Поэтому при проверке малышей основное внимание уделяют классу IgM.

Ниже представлена таблица, в которой указаны комбинации наличия или отсутствия инфекции.

IgMIgGIgAРасшифровка показателей
Иммунитет к инфекции отсутствует
+ Имеется поствацинальный (специфическая невосприимчивость к инфекционному заболеванию, появляющаяся в результате вакцинации) или постинфекционный иммунитет
+ -/+ -/+ Острая инфекция
+ + + Обострение хронической инфекции
+/- +/- Наличие хронической инфекции

Делая выводы, можно сказать, что когда в организме обнаруживаются антитела определённого вида, тогда в таблице рядом со значением стоит знак «+».

Иногда после получения анализа доктор может назначить проведение ещё одного с целью выявление количественного содержания вещества в организме.

Расшифровкой иммуноферментного анализа крови должен заниматься только специалист, который сопоставит полученные результаты с имеющимися симптомами и назначит грамотное лечение.

ИФА на сифилис является одним из самых эффективных методов, применяемых для диагностирования венерического заболевания, вызванного бледными трепонемами.

Анализ позволяет определить связь антигена с антителом и осуществляется с помощью ферментов. Этот высокоточный способ выявляет инфекцию в 90% случаев.

Тест-система, используемая в иммуноферментной диагностике, предназначена для обнаружения как сифилиса, так и других заболеваний, вызванных патогенными микроорганизмами.

Анализ методом ИФА на сифилис назначается через 3-4 недели после предполагаемого инфицирования.

Часто его применяют для того, чтобы подтвердить диагноз после получения положительного результата способом, основанном на реакции Вассермана. Иммуноферментный анализ проводят, если:

  • у пациента обнаружены высыпания в области половых органов;
  • имелись случаи незащищенных сексуальных контактов;
  • женщина беременна;
  • мужчина желает стать донором семенной жидкости;
  • ребенок родился у матери, страдающей сифилисом;
  • у пациента повышена температура по неизвестной причине;
  • планируется госпитализация или оперативное вмешательство;
  • проводится медосмотр работникам детских учреждений, общепита.

Для того чтобы достоверность иммуноферментного анализа была максимальной, пациенты должны быть осведомлены о правилах подготовки, при несоблюдении которых результат может оказаться ложноположительным. В целях минимизирования погрешности нужно:

  1. Сдавать кровь на голодный желудок.
  2. За двое-трое суток воздержаться от употребления спиртосодержащих напитков, еды с повышенным содержанием жиров.
  3. Ограничить физические нагрузки за несколько дней до забора крови.
  4. За три часа до сдачи биоматериала отказаться от курения.
  5. Сообщить врачу о лекарственных средствах, используемых в настоящее время, а также об имеющихся заболеваниях и прививках, сделанных недавно.

О том, сколько может делаться анализ, лучше спросить работников лаборатории. Срок проведения связан не только с ее загруженностью, но и с наличием специального оборудования.

В медицинских центрах обнаружение спирохет с применением метода иммуноферментной реакции осуществляется непрямым и прямым способом. В планшет с округлыми углублениями лаборант помещает сыворотку, выделенную из крови, забранной у пациента утром. После внесения хромогенных красящих веществ с помощью применения таблиц с цветовыми схемами, прилагаемыми в наборе для ИФА, осуществляется расшифровка теста. Таким способом работник лаборатории определяет уровни иммуноглобулинов, их число. Для того чтобы оценить исход реакции, применяется также спектрофотометр, который позволяет определить плотность биоматериала и сравнить его с контрольным образцом.

С помощью ИФА возможно выявить антитело, принадлежащее разным классам (А, G, M). При повышении уровня М-иммуноглобулинов врачи определяют время, когда произошло инфицирование бледными спирохетами.

Обычно этот период не превышает 90 дней. Если у пациента увеличен титр класса А, это значит, что инфицирование произошло в течение последних 30 суток.

G-иммуноглобулины позволяют выявить острый процесс, пролеченное заболевание.

Суммарный анализ, обозначаемый в медицинских центрах как “сифилис igg ИФА”, назначается людям, ранее не обследованным на это венерическое заболевание. Метод позволяет обнаружить его при появлении первых симптомов и в первоначальной стадии инфицирования.

Получив на руки расшифровку, пациент не всегда может правильно истолковать ее значение. Только врач способен определить результаты и поставить точный диагноз. В лабораторном бланке могут быть указаны следующие данные:

  • IgA+ IgM- IgG- – заражение произошло недавно;
  • IgA+ IgM+ IgG- – патогенный возбудитель попал в организм менее 30 дней назад;
  • IgA+ IgM+ IgG+ – инфицирование состоялось более месяца;
  • IgA- IgM- IgG+ – венерическое заболевание пролечено.

В некоторых случаях, если результат теста положительный, врач может назначить проведение дополнительных анализов другими методами.

Способ выявления инфекционного заболевания, вызванного бледными трепонемами, считается высокочувствительным. Прозводители ИФА-тестов дают гарантию качества и подтверждение его на опытах, в ходе которых сравнивались результаты других специфических диагностик. Точность составляет 98%.

Сколько времени лечится сифилис и цена терапии

Ложноположительный результат возможен в следующих случаях:

  1. Беременность. В этот период существует вероятность получения искаженных результатов, поскольку генетические материалы отца и сам плод могут быть расценены как чужеродный агент.
  2. Хроническое заболевание. Сомнительный результат возможен, если у пациента имеется запущенная форма туберкулеза, аутоиммунные процессы, патологии печени.
  3. Недавно сделанные прививки. Вакцина оказывает влияние на синтез иммуноглобулинов.
  4. Травма. У пациента с недавними повреждениями развиваются воспалительные процессы, которые могут спровоцировать получение ложноположительного анализа.
  5. Пожилой возраст. У таких людей нередко наблюдается сразу несколько хронических патологий, оказывающих сильное влияние на иммунную систему.
  6. Новорожденные. До полутора лет у маленьких детей серодиагностика по ИФА-методу может показать положительные результаты, если женщины были инфицированы трепонемами в период беременности. В крови малыша в течение года и более циркулируют иммуноглобулины матери.

В зависимости от лаборатории цены на специфические тесты методом ИФА варьируются в пределах от 6,1$ до 11,4$. В некоторых диагностических центрах за процедуру взятия крови на анализ берется 2,5$.

Во многих государственных медицинских учреждениях ИФА можно сдать бесплатно. При большой загруженности лабораторий и необходимости получения быстрого результата тест на сифилис лучше сдать в частных лабораториях.

ИФА на выявление сифилиса можно сдать в Инвитро. Стоимость услуг составляет 14$, включая забор крови в процедурном кабинете. Срок выполнения — 7 дней.

Центр CMD также предоставляет услуги по определению венерического заболевания. Стоимость анализа составляет 9,2$. Срок выполнения — до 3 дней. При необходимости лаборанты учреждения могут провести взятие крови на дому.

Пройти исследование на сифилис можно в медицинской лаборатории Гемотест. Цена анализа на сифилис РПГ (реакция пассивной гемагглютинации) составляет 10,3$. Срок выполнения — 1 сутки.

Сифилис в горле: причины, симптомы, методы лечения

Все диагностические центры гарантируют полную анонимность.

Сифилитический тест, основанный на иммуноферментной реакции, позволяет с высокой точностью выявить венерическое заболевание, вызванное трепонемами. Анализ назначается, если неспецифический способ выявления инфекции, показывает отрицательный результат при наличии симптомов у пациента или контактах с зараженными лицами.

Лечение проводится только при наличии положительных результатов, полученных несколькими методами.

Иммуноферментный анализ крови – это лабораторное иммунологическое исследование крови, при котором происходят качественные и количественные измерения антител (антигенов), а также гормонов. Этот метод предоставляет до 90% точности при установлении диагноза заболевания.

Медицинские лаборатории используют несколько вариантов его проведения, что влияет на срок готовности результатов. Но в среднем выдача результатов исследования происходит в период 1-10 дней после сдачи крови.

При данном виде анализа крови устанавливаются антитела разных видов – это иммуноглобулины класса M, A, G (JgM, JgA, JgG). Их накопление происходит в различные временные промежутки.

Первыми начинают проявляться иммуноглобулины класса М (пятый день после начала болезни). Такие иммуноглобулины задерживаются в организме пять-шесть недель, после чего начинают исчезать из крови организма.

Именно в данный период времени выявляются антитела класса М.

Вторыми проявляются иммуноглобулины класса G (через три-четыре недели). Они задерживаются в организме несколько месяцев или лет. Во время проведения иммуноферментного анализа крови и расшифровки его результата можно обнаружить возрастание антител класса G. Это свидетельствует о наличии инфекции или реинфекции.

Антитела класса А проявляются в крови на протяжении двух-четырех недель. Но всего лишь 20% из них присутствуют в сыворотке крови. Остальные же входят в состав секрета слизистых оболочек.

Иммуноглобулины класса А начинают исчезать в промежутке времени от двух недель до двух месяцев. Данный процесс является свидетельством уничтожения инфекции в организме.

Если после выздоровления человека проводился повторный иммуноферментный анализ крови и расшифровка результата показала наличие антител класса А – это свидетельство хронической инфекции.

Расшифровка результатов анализа может принимать такие значения:

  • JgM (-), JgG (-), JgA (-) – отсутствие иммунитета к инфекции;
  • JgM (-), JgG (+), JgA (-) – наличие поствакционного или постинфекционного иммунитета;
  • JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) – наличие острой инфекции;
  • JgM (+), JgG (+), JgA (+) – наличие обострения хронической инфекции;
  • JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) – наличие хронической инфекции;
  • JgM (-) – выздоровление.

В расшифровке (+) является положительным результатом, а (–) – отрицательным результатом.

Помимо уточнения классов антител в расшифровке встречаются количественные их показатели. Но обширное их объяснение может предоставить только лечащий врач.

Иммуноферментный анализ сыворотки крови основан на взаимодействии антигена с антителом, причем один из них содержит в своей структуре фермент. При взаимодействии двух компонентов содержимое пробирки должно менять свой цвет. Результаты сравниваются со стандартной цветовой шкалой, и далее устанавливается антиген, который присутствует в материале. Другими словами принцип иммуноферментного анализа сыворотки крови можно объяснить так:

  1. подготавливаются наборы антигенов (например, возбудители инфекционных заболеваний, аллергены или гормоны);
  2. пациент сдает кровь на анализ, из которой в лаборатории выделяется сыворотка;
  3. материал для исследования добавляется в лунки готовых наборов, после чего возникает реакция антиген-антитело;
  4. оставшаяся сыворотка крови убирается, а обнаруженные антитела распознаются при помощи индикаторов.

Иммуноферментный анализ сыворотки крови считается достоверным. Но в тех случаях, когда произошло неправильное взятие крови для анализа, или была нарушена техника проведения исследования, или же имеются у человека скрытые системные заболевания, результаты иммуноферментного анализа сыворотки крови могут оказаться ложными.

Иммуноферментный анализ сыворотки крови исследует практически все гормоны щитовидной железы, онкомаркеры и различные виды инфекций.

К гормонам щитовидной железы относятся тиреоглобулин (ТГ), тироксин (Т4), трийодтиронин (Т3), свободный тироксин (Т4), свободный трийодтиронин (Т3).

Иммуноферментный анализ крови в норме считается, если присущи такие допустимые нормы гормонов щитовидной железы:

  • тиреоглобулин (ТГ) – допустимые границы 70 МЕ/мл;
  • тироксин (Т4) – 64-146 нмоль/л (50-113 нг/мл);
  • трийодтиронин (Т3) – 1,8-2,8 нмоль/л (0,8-2,0 нг/мл);
  • свободный тироксин (Т4) – 11-25 пмоль/л (10-27 пг/мл);
  • свободный трийодтиронин (Т3) – 4,49-9,3 пмоль/л (2,5-5,8 пг/мл).

В случае исследования половых гормонов иммуноферментный анализ крови в нормедля женщин считается, если в организме выделяется лютеинизирующий гормон (ЛГ) в таких пределах:

  • фолликулярная фаза цикла (с первого дня месячных до двенадцатого-четырнадцатого) – 2-14 мЕд/л;
  • овуляционная фаза цикла (с двенадцатого дня по четырнадцатый день) – 24-150 мЕд/л;
  • лютеиновая фаза цикла (с пятнадцатого-шестнадцатого дня и до начала следующих месячных) – 2-17 мЕд/л.

В норме для мужчин принимается, если половой гормон вырабатывается в пределах 0,5-10 мЕд/л.

При исследовании хронического гонадотропина (ХГ) референсные значения зависят от пола человека.

  • У взрослых мужчин и небеременных женщин нормой считается уровень ХГ ниже 5мЕд/мл.
  • У беременных женщин результат зависит от срока беременности и может колебаться в пределах 25-49000 мЕд/мл.

Иммуноферментный анализ крови исследует множество онкологических показателей. К ним можно отнести наличие пролактина, эстрадиола, прогестерона, тестостерона, стероид связывающего глобулина (ССГ) и других маркеров. Но интерпретация результата анализа и норм этих показателей должна проводиться только лечащим врачом.

Кроме того, данный метод диагностирует инфекционные (например, краснуха, корь, туберкулез, герпес, сифилис, гепатит, псевдотуберкулез) и аутоиммунные заболевания разного вида, а также устанавливает иммунный статус человека. Но все показатели и полученные результаты должны расшифровываться квалифицированным специалистом.

Анализ крови расшифровка ИФА: таблица норм у взрослых, нормальные показатели, исследование сыворотки у детей

Иммуноферментный анализ крови является распространенным методом выявления различных патологий. Результат анализа крови, расшифровка ИФА которого была интерпретирована врачом лабораторной диагностики, является достоверным в большинстве случаев.

ИФА — современный диагностический метод, который применяется для диагностики инфекций, гормональных и иммунных нарушений, онкологических заболеваний в лабораторных условиях. Метод позволяет выявить антитела к инфекции уже на ранних сроках заболевания.

Данный метод относится к непрямым диагностическим методам, так как он выявляет иммунный ответ организма. Среди преимуществ ИФА в сравнении с другими методами диагностики можно выделить высокий уровень технологичности, что уменьшает вероятность ошибок.

Метод является высокочувствительным и применяется для диагностики заболеваний как у детей, так и у взрослых. Существует обширное количество различных модификаций ИФА.

Метод ИФА основывается на специфичности иммунохимических реакций, а также физико-химических закономерностях реакций комплексов антиген-антитело. Реакции производятся с участием специфических ферментов, которые являются метками для определения антител. В результате иммунохимической реакции строго определенные антитела связываются с соответствующими антигенами.

Исследование крови методом иммуноферментного анализа почти исключает возможность получения ложноположительного результата. О положительном или отрицательном результате специалисты лабораторной диагностики судят исходя из того, произошло ли окрашивание раствора в ходе ферментативной индикации комплекса антиген-антитело.

Если раствор окрасился, то произошло взаимодействие антигена с антителом, результат ИФА положителен.

Исследование методом иммуноферментного анализа позволяет:

  • выявить ряд инфекционных заболеваний;
  • диагностировать аутоиммунные заболевания;
  • выявить наличие онкологии;
  • определить гормональные нарушения;
  • произвести иные исследования.

Анализ крови методом ИФА позволяет определить наличие следующих инфекций:

  • вирусные гепатиты;
  • ВИЧ;
  • цитомегаловирус;
  • вирус Эпштейн-Барра;
  • герпетические инфекции;
  • краснуха;
  • боррелиоз;
  • паразитарные инфекции;
  • ЗППП;
  • иные инфекции.

Метод применяется для выявления антигенов возбудителей ряда инфекций, а также для выявления антител различных классов. Большую популярность метод ИФА получил для выявления сифилиса, ВИЧ, вирусных гепатитов.

Определять наличие и уровень антител в сыворотке крови с целью первичной диагностики ИППП не рекомендуется.

В данном случае наличие антител в крови может быть лишь признаком того, что организм пациента контактировал с возбудителем инфекции в прошлом.

Диагностика различных аутоиммунных заболеваний методом ИФА производится посредством исследования:

  • антинуклеарных тел;
  • антител к двухспиральной ДНК;
  • антител к растворимым нуклеарным антигенам (ENA скрин);
  • антикардиолипиновых антител;
  • IgG к цитрулиновому пептиду;
  • ревматоидного фактора;
  • С-реактивного белка;
  • аутоантител к цитоплазматическим антигенам нейтрофилов (ANCA скрин).

Специфические иммунные комплексы характерны для определенных аутоиммунных заболеваний. Например, антитела двуспиральной ДНК являются характерными для такого заболевания, как системная красная волчанка.

Определение онкологических заболеваний производится при иммуноферментном исследовании сыворотки крови на специфические онкомаркеры, такие как ПСА, СА-125.

ПСА свидетельствует о наличии аденомы простаты и рака простаты. СА-125 — это онкомаркер злокачественной опухоли яичника. Значение повышается и при раковых опухолях матки, молочных желез, эндометрия.

Чтобы обеспечить максимальную точность результатов, нужно следовать определенным правилам подготовки к исследованию. Анализ для лабораторной диагностики методом ИФА, как правило, сдается утром из локтевой вены. Сдавать кровь необходимо строго натощак. Кроме этого простого предписания, следует выполнять следующие рекомендации по подготовке:

  • за 24 часа до исследования необходимо исключить прием алкоголя и курение;
  • избегать тяжелых физических нагрузок;
  • пребывать в спокойном состоянии;
  • избегать нервного напряжения;
  • сдавать кровь на ИФА не ранее, чем через 10 дней после отмены лекарств;
  • предупредить врача о приеме необходимых лекарств.

Кроме того, за несколько дней до сдачи анализа рекомендуется придерживаться диеты. При этом из рациона исключить жирные продукты, жареную пищу. Перед анализом на вирусные гепатиты из рациона исключить не только жирное и жареное, но и цитрусовые, а также оранжевые овощи.

Следует отметить, что на результаты определенного спектра гормональных исследований влияет такой фактор, как фаза менструального цикла.

Необходимость сдавать анализ в ту или иную фазу менструального цикла следует заранее обговорить с лечащим врачом. В противном случае можно получить неожиданные показатели.

Так, например, нормальный уровень лютеинизирующего полового гормона у женщин варьируется в зависимости от дня цикла:

  • 1-12 день — 2-14 мЕд/л;
  • 12-14 день — 24-150 мЕд/л;
  • с 15 дня до начала нового цикла — 2-17 мЕд/л.
Читайте также:  На антитела анализ сдается натощак или

Анализ позволяет установить наличие в организме антител различных классов. Существуют антитела 3 классов:

Выработка этих антител происходит на различных стадиях заболевания. Самыми первыми после заражения в организме начинают вырабатываться антитела IgM. Их наличие является показателем болезни в любом случае. В организме здорового человека этот класс антител отсутствует.

Эти иммуноглобулины присутствуют в сыворотке крови около 5-6 недель.

Иммуноглобулины класса G, присутствующие в крови, говорят о том, что человек либо уже перенес заболевание, либо является носителем инфекции.

Эти антитела начинают вырабатываться после антител класса М, при большинстве заболеваний на 3-4 неделю после заражения. Их присутствие в организме возможно в течение нескольких лет.

А при некоторых болезнях (например, сифилисе) IgG присутствуют в крови пожизненно.

Если в организме присутствуют IgA, необходимо как можно интенсивнее бороться с инфекцией. Антитела этого класса появляются лишь в случае хронического инфекционного заболевания. Исчезновение IgA говорит об уничтожении инфекции.

Если анализ ИФА производится в детском возрасте до 1,5 лет, должна учитываться следующая особенность: кровь ребенка содержит IgG матери к различным инфекциям. Это совсем не означает, что ребенок болен.

В таком случае это скорее норма. Наличие IgM является свидетельством внутриутробной инфекции либо инфекции, приобретенной уже после рождения. IgM матери не могут проникнуть в организм ребенка через плаценту.

В таблице представлены возможные комбинации наличия или отсутствия в организме антител 3 классов и их интерпретации.

IgM IgG IgA Расшифровка — — — Иммунитет к инфекции отсутствует — + — Имеется поствакцинальный или постинфекционный иммунитет + -/+ -/+ Острая инфекция + + + Обострение хронической инфекции — +/- +/- Наличие хронической инфекции

При расшифровке анализов (+) свидетельствует о положительном результате, а (-) говорит об обратном, то есть об отрицательном. Результат, показывающий наличие или отсутствие какого-либо вещества в организме, называется качественным. Он может быть дополнен количественным. Количественный результат отображает количественное содержание различных веществ в организме.

Стоит отметить, что тест-системы имеют собственные, определенные изготовителем, референтные значения, которые характеризуют показатели. Превышения референтных значений, как правило, означают наличие тех или иных патологий в организме исследуемого.

После получения результатов ИФА расшифровку полученных значений должен производить лечащий врач. Только он сможет произвести правильную оценку полученных результатов и определить стадию заболевания.

Инфекция, вызванная вирусом иммунодефицита человека, – серьезный диагноз. Ошибки при диагностике могут привести к плачевным последствиям. Анализ ИФА на ВИЧ – наиболее доступный метод исследования, но не во всех случаях он информативен.

ИФА – иммуноферментный анализ. Задача метода ИФА – выявление антител к вирусу иммунодефицита в биологическом материале.

С помощью метода можно отследить присутствие в жидкости не самих вирусов, но только антител, вырабатывающихся в ответ на их присутствие. Иммуноферментный анализ широко используется при диагностике ЗППП.

Он помогает выявить ВИЧ и другие инфекции, передающиеся половым путем.

Существует несколько видов ИФА: прямой вариант, косвенный вариант, метод «сэндвича». В любом случае методика основана на определении наличия антител, которые служат индикатором проникновения чужеродного агента. Чтобы выявить эти «метки», биологический компонент обрабатывают ферментами.

Иммуноферментный анализ определяет антитела с точностью 96 – 98%, погрешность незначительна. Она составляет 2 – 4%.

ИФА анализ на ВИЧ – это первый этап диагностики. Антигенами вируса иммунодефицита являются протеины p24, p15, p17, p31 и гликопротеины gp 41, gp55, gp66, gp120, gp160.

Чтобы обнаружить вирусный белок, берут порцию крови из вены. Образец, направленный на исследование крови ИФА, обрабатывают иммуноферментными реагентами. Из крови выделяют сыворотку. Если в ходе исследования обнаруживаются антитела к ВИЧ, значит, в крови уже присутствует вирус.

Кровь сдают строго натощак. За 2 дня до анализа не рекомендуется есть жирную пищу и употреблять алкоголь. Следует за 14 дней прекратить прием противовирусных препаратов.

  • сравнительно небольшая стоимость;
  • высокая стабильность реагентов;
  • высокая чувствительность;
  • короткий срок проведения;
  • минимальное влияние человеческого фактора.

Современные тест-системы для ИФА производят по мировым стандартам. Это повышает точность метода.

Иммуноферментный анализ не всегда дает достоверные результаты. После попадания вируса в кровь начинается латентная (скрытая) стадия развития. Период, пока вирусы не начали размножаться, и антитела еще не сформированы, называется «время серонегативного окна».

Делать ИФА на этом этапе бессмысленно. Если заражение произошло, результат будет ложноотрицательным. Как быстро вирус себя обнаружит, зависит от того, какое количество опасных клеток попало в организм.

При незащищенном половом акте или переливании зараженной крови этот срок будет минимальным.

Для высокой достоверности ИФА на ВИЧ исследование проводят трижды. Сроки сдачи ИФА на вирус иммунодефицита человека:

  • через 6 недель после вероятного контакта,
  • через 3 месяца,
  • спустя полгода.

ИФА 4 поколения на ВИЧ – метод, наиболее информативный на ранних сроках заражения. Его можно проводить уже через 1 месяц после предполагаемого инфицирования.

Тест на ВИЧ 4 поколения является дорогостоящим по сравнению с аналогом 3-го поколения. Поэтому в государственных медучреждениях он используется как дополнительный метод диагностики. Бесплатно проводится тест 3.

Если по его итогам однозначного ответа дать нельзя, пациента направляют на ИФА 4 поколения.

Важно! Сразу после инфицирования человек становится заразным. Он опасен для окружающих, даже когда еще не знает о своем диагнозе!

Если при ИФА выявлены антитела к антигенам ВИЧ, необходимо проводить дополнительные исследования. К таким относится полимеразная цепная реакция (ПЦР). Достоверность этого метода – 80%. С помощью ПЦР исследуют кровь, сперму и влагалищные выделения.

Биологическую жидкость расщепляют в медицинском реакторе, затем подвергают обработке ферментами. В итоге получают данные о том, какова концентрация клеток ВИЧ в жидкой среде.

Из-за большой погрешности (20%) при положительном результате дополнительно проводят иммунный блоттинг.

Следующий этап диагностики – тест Комбо (или иммунный блоттинг). Это высокочувствительное исследование (98% достоверности), которое проводят, если через 6 месяцев результаты ИФА неоднозначны.

Время расшифровки составляет от 24 до 48 часов. Если необходимо получить информацию срочно (требуется хирургическое вмешательство), расшифровку проводят за 2 часа. В провинциальных медицинских пунктах не всегда есть необходимые реагенты. Пробу берут по месту обращения, затем ее передают в областной центр. При таких обстоятельствах итог можно узнать через 1- 2 недели.

Результат иммуноферментного анализа может быть либо положительным, либо отрицательным; других вариантов нет.

Даже если при первичном и повторных ИФА итог был положительным, пациента нельзя признать ВИЧ-инфицированным. Возможна погрешность. Причины ложноположительного результата:

  • хронические заболевания;
  • длительные инфекционные заболевания;
  • беременность.

Поэтому результат анализа должен быть уточнен дополнительными исследованиями.

Если при проведении иммуноблоттинга на ВИЧ результат положительный (реактивный), человек считается ВИЧ-инфицированным, а отрицательный тест значит, что он здоров.

Проводится еще тест на вирусную нагрузку. Этот показатель при ВИЧ характеризуется количеством вирусных частиц в единице крови (анализ определяет РНК-частицы вируса). Нормой считается количество от 5000 до 15000 клеток вируса в единице крови.

Если цифра находится в этих пределах, либо меньше, вирус неактивен. Даже в случае дальнейшего подтверждения позитивного ВИЧ-статуса человек не заметит перемен в состоянии здоровья долгое время (10 – 15 лет). Если нагрузка менее 20000 клеток, это близко к норме. Когда число вирусных клеток увеличивается, следует незамедлительно начинать противовирусную терапию.

Отрицательный иммуноферментный анализ 3-го и 4-го поколения показывает с высокой достоверностью (98%), что человек здоров. Для подтверждения положительного ВИЧ-статуса проведения ИФА недостаточно.

Если при первом и повторных тестах в крови обнаружены антигены ВИЧ, человек получает направление на иммуноблоттинг. Когда в ходе исследований выясняется, что человек имеет ВИЧ-позитивный статус, ему следует обратиться к врачу. Он определит вирусную нагрузку и назначит терапию.

Клетки вируса со временем адаптируются к назначенным препаратам. Чтобы контролировать эффективность лечения, тест ИФА периодически повторяют.

Иногда иммуноблоттинг показывает ложноотрицательный результат. Крайне редко вирус иммунодефицита 6 месяцев (и более) не проявляет себя. Это возможно, если в кровь попало незначительное количество клеток вируса. В 0,5% от общего числа случаев диагностировать заражение удается лишь через год. В 99,5% в течение полугода после инфицирования при проведении ИФА получится достоверный результат.

Даже при проведении высокоточных исследований остается вероятность ошибки, составляющая 2%. Не следует забывать о человеческом факторе. Чтобы исключить вероятность ошибки, тест можно провести в 2-х разных учреждениях.

Когда назначают анализ сдавать анализ ИФА на сифилис. Методы лабораторной диагностики. Результаты анализа — как определить норму и отклонения. Стоимость иммуноферментного анализа.

Как правило, постоянно при обращении в поликлинику, доктора назначают сдавать разные анализы. Это позволяет им определить инфекции и заболевания, которыми страдает человек. ИФА или так называемый иммуноферментный анализ, это прекрасный способ оценить иммунную систему организма, и выявить по наличию антител инфицирование и стадию болезни.

Учитывая, что большое количество паразитов проникают в человеческий организм, сдавать анализы и проверять свой его желательно каждому человеку, чтобы в один прекрасный день не получить положительный результат на инфекцию.

Анализ позволяет выявлять вещества и паразитов, которые чужды человеческому организму – антигенны, и выявление иммуноглобинов. Это не только позволяет определить заболевание, но диагностировать стадию. Результаты анализа ИФА выдаются как количественно, так и качественно.

Итак, кому назначают сдавать данный анализ и что такое иммуноферментный анализ? Доктора выписывают этот анализ, если у человека проявляются следующие заболевания:

  • Сыпь на теле – аллергические реакции.
  • Вирусы – герпес, цитомегалавирус.
  • Болезни, передаваемые половым путем – сифилис, трихомонада.
  • Патология, связанная с онкологическим заболеванием.
  • Нейросифилис.

Кроме перечисленных заболеваний, анализ назначается для определения уровня гормона в крови. По результатам проводится оценка качества терапии. Что такое сифилис знает наверно каждый человек, но не представляет его масштабы, и сколько человек инфицированных ходят рядом с нами.

В настоящее время сифилис – это самое распространенное заболевание. Это трепонома, которая поражает организм человека. И в результате затрагиваются все внутренние органы заболевшего.

Проникновение паразитов в организм, вызывает инфицирование человека. Этим венерическим заболеванием можно заразиться не только половым путем, но и бытовым методом, стоит это помнить, и соблюдать простые правила профилактики.

Это очень опасная инфекция, и частенько бывает, что она может долгое время себя не проявлять. Поэтому человек может быть носителем и распространителем большое время, не зная, что он болен.

Медицина не стоит на месте, современные анализы, стали существенно отличаться от старых методов исследования организма. Хотя они прекрасно выполняли свою роль, но порой приходилось ждать результаты неделями и месяцами. Это естественно не было благоприятно для инфицированного человека. Что такое ожидание результата, прошел на себе больной человек.

Классические анализы – выявления сифилиса методом Вассермана, методом Кана стали сдавать свои позиции и на смену пришли такие тесты как ИФА.

Это самый современный метод обнаружения инфицирования у человека. Результат расшифровывается с помощью компьютера. Это позволяет более точно определять положительный результат или отрицательный анализ.

Во время проведения расшифровки производится поиск антител к конкретным заболеваниям. И в результате проведения анализа, можно было выявить заражение, когда результат был положительным. Используя ИФА для выявления сифилиса подразумевается трёхклассное применение иммуноглобулинов:

  • G, M, A – для диагностики имеют самое важное значение.
  • Они вырабатываются в инфицированном человека строго в определенной последовательности.
  • Быстро определяют стадию инфицирования.

Если говорит об анализе ИФА на сифилис, то в этом случае сложно сказать, что есть норма или отклонение. Результат, как правило бывают или отрицательный, или положительный. Кроме этого существуют титры, определяющие количество антител в крови.

Существует много тонкостей при расшифровке анализа, если он показал положительный результат, анализ все равно придется пересдавать несколько раз, чтобы исключить метод ложноположительной реакции.

Как уж писалось тонкостей при расшифровке анализа очень много, и определить результат сможет только лечащий врач. Приведём примеры в таблице, какие могут быть показаны результаты на иммуноферментный анализ:

— IgA — IgM — IgG Расшифровка
+ Инфицирование на раннем сроке.
+ + Инфицирование меньше месяца.
+ + + Заражение сифилисом больше месяца.
+ Сифилис успешно пролечен.

Не стоит отчаиваться, если анализ показал положительный результат. Как правило, проводят дополнительные анализы и тесты, различными способами, для более точного установления диагноза.

Как правило, стоимость данного анализа напрямую зависит от самого анализа и выявление конкретной инфкекции. Определение маркеров на инфицирование различных видов стоит от 200 до 350 рублей. И проводится такой анализ в течение двух суток.

ИФА наиболее популярный и современный метод диагностирования организма. Метод показал свою эффективность в выявлении инфицирования, и определения точного срока заражения.

Учитывая ценовую политику можно сказать, что анализ доступен каждому человеку с любым бюджетом. Он позволяет лечащему врачу получить полную картину инфицирования человека. Он показал себя в деле и не разочаровал докторов. В то же время получив анализ, лечащий врач мог реагировать оперативно, назначая своевременно лечение.

Высокоточные методы анализа — неотъемлемая часть современной медицины и, в частности, диагностики. Доступные в наше время методы диагностики дают возможность своевременно выявить не только сам факт наличия, но и количество паразитов в организме пациента.

Сейчас, как правило, пациентам предлагается пройти всего один тест — иммуноферментный анализ.

Иммуноферментный анализ — узкоспециализированный вид анализа, который проводится в условиях лаборатории. Анализ основан на реакции организма, обычно называемой «антиген-антитело».

Метод анализа, основанный на данном показателе, даёт точность в 99%. Это самый точный из известных сейчас методов. В практике почти не было случаев, когда такой анализ выдавал ложные результаты.

Этот метод позволяет выявить:

  • значительное количество инфекционных болезней, вызываемых паразитами;
  • наличие разных видов онкомаркеров;
  • в репродуктивной медицине — наличие белков, гормонов и пептидов, необходимых для оценки фертильности пациента;

Достоверность результатов теста зависит от нескольких факторов:

  • конкретная разновидность паразита;
  • количество паразитов в организме;
  • скорость их размножения.

Иммуноферментный анализ широко используется в диагностике самых разных заболеваний. Главная его ценность в том, что он позволяет с высокой точностью выявлять болезни, протекающие бессимптомно.

Как известно, такие болезни нередко бывает проблематично обнаружить на ранней стадии и, соответственно, вовремя начать лечить.

Какие заболевания диагностируют при помощи иммуноферментного анализа:

  • онкологические заболевания;
  • инфекции, передающиеся половым путём (ВИЧ, хламидиоз, сифилис, уреаплазмоз, герпес и другие заболевания);
  • туберкулёз, корь, токсоплазмоз, гепатиты и так далее;
  • гормоны щитовидной железы;
  • половые гормоны;
  • различные аутоиммунные расстройства;
  • аллергические реакции и непереносимость отдельных продуктов питания.

Данная процедура помогает выявить:

  • заражение организма бактериями и вирусами;
  • белковую основу;
  • глистные инвазии;
  • инородные тела.

Собственно, процедура ИФА складывается из двух частей:

  1. иммунный ответ;
  2. ферментативная реакция.

Суть принципа «антиген-антитело» заключается в том, что возбудитель заболевания или инородное тело, то есть антиген, поступает в организм постепенно вместе с источником заражения. Этот процесс вызывает так называемый иммунный ответ, предназначенный для защиты организма от инородных элементов.

Проявления такой защиты зависят от самого антигена и от симптомов вызванной им болезни. Данная схема и получила название «антиген-антитело».

Для большей достоверности диагностики вся процедура иммуноферментного анализа проводится только в лабораториях и медицинских центрах. С пробой крови взаимодействуют различные антигены и антитела.

С целью выявления как вида, так и количества паразитов в организме пациента применяется иммуноглобулин классов «А» и «Е», который реагирует на паразитарные инвазии.

Такой анализ должен выявить:

Иммунная реакция показывает биологические связи в молекулах клеток микробов, на наличие которых и проводится анализ. Иммунная реакция как таковая — это только один из компонентов комплексной программы ИФА, второй же компонент — это ферментная реакция.

Узнавание антигена происходит в процессе контакта клетки иммунной системы (иммуноцита) с чужеродной клеткой. Индивидуальные особенности антигенов служат для иммунной системы средством распознавания «свой-чужой».

Фактически, антитело:

  • Это просто молекула, расположенная на поверхности иммуноцита.
  • Эта молекула и используется для распознания чужеродных клеток.

Передача полученной информации об антигене происходит на клеточном уровне. Связь разрушается, если клетка иммунная, если же нет — организм запускает естественную защитную реакцию.

  • Современной науке известны 5 классов антител, иначе называемых иммуноглобулинами или белковыми структурами.
  • Для обозначения антител используются латинские буквы: A, D, E, G и M.
  • В результатах анализов эти обозначения выглядят так:

В первую очередь необходимо подготовить специальные планшеты из полистирола, которые содержат 96 лунок. Перед анализом стенки каждой ячейки обрабатывают адсорбирующим антигеном.

В обработанные ячейки капают сыворотку крови. Гомологичные антитела и антигены реагируют друг с другом, образуя прочные связи. Не прикрепившиеся тельца вымываются. Затем в лунки добавляются антитела иммуноглобулинов вместе с помеченными особым образом ферментными элементами.

Реагенты помечаются для облегчения идентификации антител в анализируемой сыворотке. Хромогенный элемент, который ускоряет реакцию и подкрашивает лунки, добавляется после промывания. Интенсивность окраски по сравнению с изучаемым ферментом показывает примерное процентное содержание антигена в пробе крови.

Затем лаборант использует оптическую жидкость, чтобы:

  • замерить концентрацию антител в лунках;
  • сравнить полученный результат с контрольной пробой, то есть эталоном;
  • подсчитать концентрацию антител при помощи специальной шкалы.

Для анализа на глистные инвазии используется особый вариант системы тестирования, со своим набором показателей нормы и отклонений от неё.

Забор сыворотки крови для иммуноферментного анализа проводится только в условиях лаборатории. Берут кровь из вены, удаляют оттуда элементы, способные повлиять на процесс анализа и точность его результатов. Сдают анализ утром на голодный желудок.

Качество и количество антител говорит о присутствии чужеродных элементов в организме пациента, в том числе болезнетворных микроорганизмов. Эти же признаки указывают на то, что в организме начался воспалительный процесс.

Пример расшифровки результатов ИФА:

Стадия заболевания IgA IgM IgG
Первичная (2 недели с момента инфицирования) +
Первичная (2,5-3 недели с момента инфицирования) + +
Первичная (3-4 недели с момента инфицирования) + + +
Обострение хронической фазы (2 недели с начала обострения) + +
Хроническая +/- +
Прошедшая (инфекция излечена) +
Выздоровление Титр снизился в 2-4 раза после успешного лечения Титр снизился в 4-8 раза спустя 1-1,5 месяца после успешного лечения
Результат отрицательный

Сам по себе количественный анализ, проведённый данным методом, ещё не даёт возможность точно диагностировать болезнь, назначить курс лечения и определить дозировку препаратов.

У всех методик тестирования, даже самых передовых и высокоточных, к сожалению, кроме преимуществ, есть и свои недостатки.

Преимущества иммуноферментного анализа:

  • Специализация метода диагностики;
  • Повышенная чувствительность этого метода;
  • Применение новейших технологий.

Чувствительность метода диагностики — это высокая вероятность обнаружить искомое, даже если его концентрация в исследуемом материале крайне мала.

Специфичность методики означает:

  • высокую степень достоверности, то есть отсутствие риска получить ложный результат. Если результат положительный, то пациенту гарантировано, что обнаружен именно тот вид паразитов, от которого он страдает;
  • влияние на результат «человеческого фактора», то есть возможных ошибок лаборанта, сведено к нулю, что также способствует повышению точности.

Возможные недостатки данного метода анализа:

  1. Он предполагает определение природы болезни, то есть интуитивно «угадать» правильный диагноз в данном случае невозможно;
  2. Высокая стоимость анализа.

В процедуре ИФА напрямую используется способность антител находить антиген, образуя связи с метками. Данный способ анализа считают промышленным, время ожидания результата составляет не более часа.

Особая метка-субстрат проявляется после ферментации. Уровень антител соответствует доле антигенов в исследуемом биоматериале.

Существует также дуоденальный (иначе — непрямой) метод исследования на паразитарные инвазии, который широко применяется, несмотря на высокую точность ИФА.

Дуоденальный (непрямой) иммуноферментный анализ проводится в 2 этапа:

  1. Сначала сопоставляют помеченные антитела с искомыми антигенами;
  2. Применяют помеченные антитела к непомеченным, обнаруженным на предыдущей стадии.
  1. Таким образом достигается двойной контроль антигенов и антител, увеличивающий достоверность анализа.
  2. При непрямом ИФА в лаборатории антиген фиксируют на поверхности лунки, он образует связи с немеченной частью антител.
  3. Достоинства дуоденального метода:
  • Двойной контроль изучаемого биоматериала, что значительно повышает точность;
  • Повышенная точность и специфичность самого метода анализа.

Однако, данный способ занимает много времени и предполагает некоторое количество дополнительных действий. Тем не менее, точность исследования настолько высока, что она оправдывает этот недостаток. По этой причине большинство врачей рекомендуют именно дуоденальный метод анализа.

При наличии всего необходимого инструментария и расходных материалов можно будет получить результат уже через 2 дня после сдачи. Если в лаборатории есть услуга экспресс-анализа, то обработать пробу могут всего за 3-5 часов.

Где можно сдать ИФА:

  • в государственной поликлинике;
  • в частных клиниках.

Расценки на иммуноферментный анализ напрямую зависят от уровня цен в конкретной клинике, в среднем его цена составляет не менее 4000 рублей.

Сведения, полученные в результате этого исследования, могут стать полезным вкладом в медицинскую науку, однако, пациенту следует помнить, что, поскольку стоимость иммуноферментного анализа так высока, разумнее будет доверить эту процедуру надёжной проверенной временем клинике.

К сожалению, государственные медицинские учреждения не всегда бывают оборудованы по последнему слову науки. Необходимых приспособлений для качественного забора биоматериала и его обработки в районной поликлинике может и не быть.

Итак, чем полезен для пациента иммуноферментный анализ крови:

  • позволяет обнаружить глистную инвазию ещё на ранней стадии;
  • как следствие этого, позволяет своевременно начать лечение;
  • устойчивость методов даёт возможность проводить анализ с равной точностью у детей и у взрослых.

Иммуноферментный анализ демонстрирует не только качественный, но и количественный фактор, то есть не только указывает на сам факт наличия гельминтов в организме пациента, но и даёт возможность оценить их число.

источник