Меню Рубрики

Анализ на туберкулез пцр или антитела

Полимеразная цепная реакция (далее ПЦР) — это высокоточный метод молекулярно-генетического исследования материла, который позволяет выявить у человека различные инфекционные заболевания и установить генотип возбудителя.

ПЦР для выявления различных заболеваний стала применяться в самом конце прошлого века. Первооткрывателем этого метода исследования является американский биохимик Кэри Муллис. Свое открытие он сделал в 1983 году. Но еще несколько лет понадобилось, чтобы доработать метод.

С помощью ПЦР-диагностики можно обнаружить фрагменты чужеродного ДНК в любой жидкой среде организма. На анализ могут быть взяты такие жидкости:

  • Кровь.
  • Слюна.
  • Мокрота.
  • Выделения из половых органов.
  • Смывная жидкость бронхов.
  • Желудочный сок.

Лечащий врач сам определяет, какую биологическую жидкость лучше взять на анализ при конкретном заболевании.

ПЦР-диагностика позволяет не только обнаружить микрофрагменты чужеродной ДНК, но и определить к какому конкретному виду она относится. То есть с помощью ПЦР можно не только точно установить возбудителя заболевания, но и выяснить к какому виду он принадлежит.

Процесс анализа ПЦР — очень сложный. Он состоит из нескольких этапов:

  1. Сначала нужно обнаружить фрагменты вредоносной ДНК в предоставленном образце.
  2. Копирование фрагмента ДНК. Маленького участка ДНК для анализа недостаточно, поэтому его копируют. Нуклеиновая кислота может копироваться в пробирке с помощью фермента полимеразы (вне живого организма). В пробирке образуется множество клонов, то есть происходит цепная реакция. Весь процесс происходит в три этапа под воздействием различных температур.
  3. Когда генетического материала становится достаточно для исследования, тогда возбудитель определяется обычными методами.

Метод ПЦР очень точен и может выявить наличие любого возбудителя по небольшому фрагменту ДНК или РНК.

ПЦР-анализ на туберкулез является самым информативным методом диагностирования этого заболевания. Относительно туберкулеза этот метод позволяет не только установить наличие микобактерий в организме, но и определить к какому виду они принадлежат.

Результат ПЦР диагностики может быть простой и расширенный. В простом результате указывается только наличие/отсутствие микобактерии. Расширенный результат дает представление о дополнительных параметрах протекания заболевания. Правильно понять, что написано в результате анализа ПЦР может только фтизиатр.

ПЦР-диагностика туберкулеза не проводится всем без исключения. Это объясняется дороговизной реактивов и недоступностью проведения исследования в некоторых отдалённых районах (в таких местах пользуются другими методами диагностики).

Показаниями для проведения ПЦР-исследования являются:

  • Длительный контакт с больным туберкулезом.
  • Беременность. ПЦР крови на туберкулез является самым быстрым и безопасным методом для беременной женщины.
  • Экстренная ситуация. Например, необходимость срочного оперативного вмешательства, при котором нужно точно установить наличие/отсутствие туберкулеза в организме.
  • Аллергическая реакция на туберкулиновые пробы.
  • ВИЧ-инфекция.
  • Невозможность диагностирования заболевания другими способами, при наличии явных признаков туберкулеза.
  • Неоднозначные симптомы, которые не позволяют создать четкую клиническую картину заболевания (болезни верхних дыхательных путей, сопровождающиеся большим количеством мокроты, кровохарканьем и пр.).

Метод ПЦР, при всей своей сложности и дороговизне, проводится и расшифровывается в течение нескольких часов. Что делает этот метод золотым стандартом при диагностике туберкулезной инфекции.

Забор материала — это первый этап при выполнении ПЦР-исследования. Для того, чтобы выполнить качественный анализ, нужно соблюдать определенные правила по сбору материла:

  • Для ПЦР мокроты на туберкулез нужно тщательно провести туалет полости рта. Делать это нужно вечером и утром перед анализом. Все это время не есть. Вечером выпить муколитическое средство для лучшего отхождения мокроты.
  • Перед сдачей крови на ПЦР нужно не употреблять пищу в течение 8 часов. Лучше всего производить забор крови утором натощак. Курить перед забором крови также нельзя. Кровь берется из вены на локтевом сгибе руки в стерильную пробирку. В эту же емкость добавляется антикоагулянт, чтобы кровь оставалась жидкой. Смешивать антикоагулянт с кровью нужно очень аккуратно, не делая резких движений. Если кровь была взята не в лабораторных условиях, то она должна быть предоставлена лаборанту до истечения пятичасового срока. Иначе результат может быть не точным.
  • Моча собирается в стерильную емкость утром, до приема пищи. Перед сбором мочи необходим тщательный туалет промежности.
  • Остальные виды жидкостей (смывы с бронхов, спинномозговая жидкость) может собрать только специалист в условиях стационара.
  • Перед забором жидкостей на ПЦР-исследование запрещено принимать некоторые препараты (например, прием некоторых антибиотиков нужно прекратить за две недели до забора материала).
  • Требования к лаборатории, в которой проводится забор анализов на ПЦР очень строгие. Лаборатория должна быть стерильна, чтобы не произошло перекрестное загрязнение материала. В этом случае результаты могут быть ложноположительными.

ПЦР-тест на туберкулез — высокоточный информативный анализ. И требования к его проведению крайне строгие. Чтобы анализ получился, нужно соблюдать регламент.

Для работы в ПЦР-лаборатории приглашаются специально обученные врачи: бактериологи, вирусологи, микробиологи. Все они прошли дополнительное обучение для работы на сложном оборудовании.

Лаборатория должна иметь лицензию на выполнение работ связанных с бактериологически-опасными вирусами и бактериями.

В самой лаборатории должны быть выделены такие рабочие зоны:

  • Зона приемки и сортировки проб.
  • Зона подготовки проб. В этом помещении выделяются нуклеиновые кислоты из образцов материала.
  • Зона проведения реакционных проб.
  • Зона для учета результатов и расшифровки анализов.

Все помещения располагают последовательно. Допуск в эти зоны разрешен только работающим там сотрудникам, которые при входе соблюдают правила личной защиты от бактерий и вирусов.

Лучше, если есть возможность расположить лабораторию в отдельно стоящем здании с собственной системой вентиляции.

В лаборатории соблюдаются стерильные условия работы, чтобы избежать перекрестного загрязнения проб. Даже если один фрагмент чужеродной ДНК попадет в исследуемый материал, ПЦР его размножит, и анализ получится ложноположительным.

В каждой зоне лаборатории имеется свой набор оборудования и посуды для проведения исследований. Также имеются свои холодильники, которые не могут быть использованы в других целях, кроме хранения материала конкретной зоны исследований.

Использованные расходные материалы и остатки биологического материала уничтожаются специальными способами, в соответствии с инструкциями.

ПЦР-тест на туберкулез имеет множество плюсов, которые делают этот метод диагностики все более востребованным:

  • Срок проведения. Несмотря на сложность проведения анализа, он готовится намного быстрее других лабораторных методов диагностики туберкулеза (около пяти часов). Это свойство анализа ПЦР становится особенно важным, когда анализ необходимо провести экстренно.
  • Анализ ПЦР абсолютно безопасен и может проводиться беременным женщинам и детям.
  • ПЦР-исследование можно сделать, когда по каким-то причинам нельзя выполнить другие методы диагностики.
  • С помощью ПЦР-диагностики можно провести исследование любой биологической жидкости на выбор. В некоторых случаях это имеет большое значение.
  • Позволяет обнаружить возбудителя на любой фазе заболевания. Даже после проведенного лечения, сохранившиеся остатки ДНК мертвых микобактерий будут обнаружены.
  • Высочайшая чувствительность этого метода позволяет обнаруживать в биологическом материале даже единичные фрагменты ДНК микроорганизмов.
  • Метод ПЦР позволяет не только обнаружить присутствие заболевания, но и может определить генотип возбудителя, отличив его от похожих микроорганизмов.
  • ПЦР-исследование очень эффективно при рецидивирующем течении заболевания.
  • Благодаря высочайшей чувствительности, анализ ПЦР может распознать микобактерии в организме человека, когда он только недавно инфицировался туберкулезом, задолго до появления клинических симптомов.

Казалось бы, метод ПЦР-диагностики содержит в себе только плюсы, но это не так.

Минусы этого метода исследования тоже существенны. При выборе метода исследования туберкулеза это также стоит учитывать:

  • Это дорогостоящий метод исследования. Для проведения ПЦР-диагностики нужна специально-оборудованная лаборатория. Оборудование для таких исследований стоит очень дорого, и не во всякой лаборатории оно имеется. В крайнем случае, можно обратиться в платную лабораторию.
  • Сразу же после проведенного лечения метод ПЦР применять не рекомендуется. В крови пациента некоторое время сохраняется небольшое количество живых и мертвых микобактерий. Если провести анализ в этот период, он покажет ложноположительный результат.
  • При мутациях микобактерий, анализ будет недостоверным, так как нормальная ДНК не сможет синтезироваться.
  • Для ПЦР-исследования имеет значение правильный выбор биологической жидкости на анализ.
  • Сверхчувствительность. Это тот случай, когда достоинство метода становится его недостатком. Если при проведении анализа в биологический материал каким-то образом попадет даже единичный фрагмент чужеродного ДНК, то ПЦР его размножит, и будет получен ложный результат.

ПЦР-лаборатория имеется только в крупных противотуберкулезных диспансерах и диагностических центрах.

Объясняется это высокой стоимостью оборудования и высокими требованиями к содержанию лаборатории (реактивы, обработка).

Медицинские чиновники не сильно переживают из-за отсутствия ПЦР-лаборатории в каком-то конкретном населенном пункте, поскольку анализы на туберкулёз можно провести другими методами (культивирование микобактерий, микроскопическое исследование).

Если в населённом пункте нет бесплатной ПЦР-лаборатории, пациент по желанию может обратиться в платное учреждение.

В последнее время ПЦР-диагностика занимает все более прочные позиции в диагностике туберкулеза и других заболеваний, отодвигая на задний план другие методы диагностики.

источник

Ольга, Вы большая молодец, что у вас дошли руки почитать эти приказы. Вот сижу сейчас и думаю, чтобы нас никто не обломал сейчас фразой, типа все это является лишь дополнительными методами диагностики ТБ. Вот, к примеру в 109 приказе от 2003 года, есть такая хрень:
«В качестве методов, альтернативных классическому культуральному исследованию, возможно использование автоматизированных и полуавтоматизированных систем ускоренной культуральной диагностики, основанной на использовании жидких питательных сред и различных способах индикации роста микобактерий.

С целью быстрой идентификации микобактерий туберкулезного комплекса в качестве дополнительных допускается использование методов, основанных на амплификации фрагментов генома микобактерий (полимеразная цепная реакция — ПЦР), других молекулярно-биологических методов. ПЦР-анализ может быть применен для исследования материала от больного (мокроты, промывных вод бронхов, мочи и спинномозговой жидкости), а также культур микроорганизмов.»

Наталья, вот. Держите. Это я только 2 пункта разжевывала.

А теперь подробнее.
5.6. В течение 6 дней с момента постановки пробы Манту (внимание. У ребенка отказ от манту) направляются на консультацию в противотуберкулезный диспансер (зачем? Если они не делали манту!) по месту жительства следующие категории детей:

— с впервые выявленной положительной реакцией (папула 5 мм и более), не связанной с предыдущей иммунизацией против туберкулеза;

— с длительно сохраняющейся (4 года) реакцией (с инфильтратом 12 мм и более);

— с нарастанием чувствительности к туберкулину у туберкулиноположительных детей — увеличение инфильтрата на 6 мм и более;

— увеличение менее чем на 6 мм, но с образованием инфильтрата размером 12 мм и более;

— с гиперреакцией на туберкулин — инфильтрат 17 мм и более;

— при везикуло-некротической реакции и лимфангите.

5.7. Дети, направленные на консультацию в противотуберкулезный диспансер (почему они направлены описано в пункте 5.6), родители или законные представители которых не представили в течение 1 месяца с момента постановки пробы Манту (опять 25! Манту то не ставили) заключение фтизиатра об отсутствии заболевания туберкулезом, не допускаются в детские организации.

Дети, туберкулинодиагностика которым не проводилась (это походу те 5%, которые не отказались, но у них медицинские противопоказания для постановки манту) допускаются в детскую организацию при наличии заключения врача-фтизиатра об отсутствии заболевания.
Т.е. отказ от медвмешательства — от пробы манту, отказ от противотуберкулезной помощи и есть основание не ходить по фтизиатрам и доказывать кому-то что он не верблюд.

Елена, Внимание! Человеческая просьба не писать вопросы в ЛС к автору темы. Все необходимые образцы отказов, а также советы и пути ведения диалогов имеются в теме и группе.

Постановление Главного государственного санитарного врача РФ от 22 октября 2013 г. № 60 “Об утверждении санитарно-эпидемиологических правил СП 3.1.2.3114-13 “Профилактика туберкулеза”
(НЕ ВСТУПИЛО В СИЛУ!)
Зарегистрировано в Минюсте РФ 6 мая 2014 г.
Регистрационный № 32182

Текст обращения в ГенПрокуратуру по несоответствию с другими законами:
http://www.1796kotok.com/forum/viewtopic.php?f=26..

Наиболее интересующие нас пункты: V и VI
V. Организация раннего выявления туберкулеза у детей

5.1. В целях раннего выявления туберкулеза у детей туберкулинодиагностика проводится вакцинированным против туберкулеза детям с 12-месячного возраста и до достижения возраста 18 лет. Внутрикожную аллергическую пробу с туберкулином (далее — проба Манту) ставят 1 раз в год, независимо от результата предыдущих проб.

Ежегодный охват пробой Манту детей до 14 лет включительно должен составлять не менее 95%. В обязательном порядке обследуются дети из социально неблагополучных семей и проживающие на территории Российской Федерации дети иностранных граждан, прибывшие из неблагополучных по туберкулезу стран.

5.2. Проба Манту проводится 2 раза в год:

— детям, не вакцинированным против туберкулеза по медицинским противопоказаниям, а также не привитым против туберкулеза по причине отказа родителей от иммунизации ребенка, до получения ребенком прививки против туберкулеза;

— детям, больным хроническими неспецифическими заболеваниями органов дыхания, желудочно-кишечного тракта, сахарным диабетом;

— детям, получающим кортикостероидную, лучевую и цитостатическую терапию;

5.3. Постановка пробы Манту осуществляется средними медицинскими работниками детских, подростковых, амбулаторно-поликлинических и оздоровительных организаций, прошедших обучение в противотуберкулезных медицинских организациях и имеющих справку- допуск.

Средние медицинские работники детских, подростковых, амбулаторно-поликлинических и оздоровительных организаций проходят обучение в противотуберкулезных медицинских организациях не реже 1 раза в 2 года.

5.4. Не допускается проведение пробы Манту на дому, а также в детских и подростковых организациях в период карантина по инфекционным заболеваниям. Постановка проб Манту проводится до профилактических прививок.

5.5. Интервал между профилактической прививкой, биологической диагностической пробой и пробой Манту должен быть не менее одного месяца. В день постановки туберкулиновых проб проводится медицинский осмотр детей.

5.6. В течение 6 дней с момента постановки пробы Манту направляются на консультацию в противотуберкулезный диспансер по месту жительства следующие категории детей:

— с впервые выявленной положительной реакцией (папула 5 мм и более), не связанной с предыдущей иммунизацией против туберкулеза;

— с длительно сохраняющейся (4 года) реакцией (с инфильтратом 12 мм и более);

— с нарастанием чувствительности к туберкулину у туберкулиноположительных детей — увеличение инфильтрата на 6 мм и более;

— увеличение менее чем на 6 мм, но с образованием инфильтрата размером 12 мм и более;

— с гиперреакцией на туберкулин — инфильтрат 17 мм и более;

— при везикуло-некротической реакции и лимфангите.

5.7. Дети, направленные на консультацию в противотуберкулезный диспансер, родители или законные представители которых не представили в течение 1 месяца с момента постановки пробы Манту заключение фтизиатра об отсутствии заболевания туберкулезом, не допускаются в детские организации.

Читайте также:  Где сдается анализ на антитела

Дети, туберкулинодиагностика которым не проводилась, допускаются в детскую организацию при наличии заключения врача-фтизиатра об отсутс

источник

Самыми опасными для самого больного и окружающих являются инфекционные заболевания, протекающие в скрытой форме. Отсутствие явных симптомов не позволяет начать своевременное лечение. При этом болезнь прогрессирует, а больной является заразным для окружающих. Из таких заболеваний самым распространенным является туберкулез. По статистике около трети людей даже в высокоразвитых странах инфицированы. Поэтому так важно проводить своевременную диагностику этого заболевания. Наряду с общеизвестными пробами Манту, диаскинтестом и флюорографией для выявления туберкулеза применяется клинический анализ крови.

Туберкулез – это очень заразное инфекционное заболевание. Передается оно воздушно-капельным путем и вызывается палочкой Коха. Эти микобактерии очень устойчивы, они сохраняются во внешней среде несколько месяцев, а при попадании в организм человека начинают постепенно размножаться. Чаще всего туберкулез локализуется в легких, но может поражать другие органы.

Опасность этой болезни в ее хроническом течении, причем на начальном этапе, часто ничем не проявляет себя. Эта инфекция очень заразна, больной может не подозревать, что инфицирован, но для окружающих он будет опасен. А лечить туберкулез очень сложно, так как бактерии устойчивы к внешним воздействиям.

Вылечить туберкулез легче всего в том случае, когда он диагностирован на начальном этапе. Поэтому так важно вовремя выявить эту болезнь. Во всем мире обязательно проводят профилактические обследования на туберкулез.

Обычно диагностика у детей проводится с помощью туберкулиновой пробы – реакции Манту или диаскинтеста. Но не всегда эти исследования достоверны. Они не проводятся при обострении хронических заболеваний, при аллергических реакциях или кожных болезнях, а также при эпилепсии. После 14 лет и для взрослых основным методом выявления туберкулеза является флюорография грудной клетки. Если при этом обследовании выявлены какие-то отклонения или есть подозрение на инфицирование, врач назначает более тщательную диагностику.

Это делается для того, чтобы вовремя начать лечение при выявлении инфекции, а также исключить риск заражения других людей, так как туберкулез очень заразен. Сдавать кровь рекомендуется при любом подозрении на эту болезнь, а также вместо проведения реакции Манту в том случае, когда к ней имеются противопоказания. Исследуется кровь также для контроля эффективности лечения при туберкулезе.

Анализ крови на туберкулез не требует специальной подготовки, не имеет противопоказаний. Результат можно получить уже на следующий день. Этот метод диагностики позволяет точнее всего выявить наличие инфекции в организме. Чаще всего проводят его при положительной реакции на туберкулиновую пробу. Но сдавать кровь на туберкулез требуется также после контакта с инфицированным человеком или при подозрении на внелегочный туберкулез.

После того, как ребенку сделали прививку БЦЖ, проводить Манту или диаскинтест нецелесообразно, так как они покажут ложноположительные результаты. При этом для диагностики рекомендуется делать анализы крови.

Рекомендуется сдать кровь на выявление палочки Коха также в том случае, когда появляются симптомы этого заболевания:

  • кашель, не прекращающийся дольше 3 недель;
  • постоянная субфебрильная температура;
  • сильная слабость и снижение работоспособности;
  • беспричинная потеря веса;
  • повышенная потливость, особенно по ночам;
  • черты лица заостряются;
  • больной бледен, но на щеках неестественный румянец;
  • увеличиваются лимфоузлы.

Когда пациент обращается к врачу с такими жалобами, его направляют к фтизиатру. Это врач, занимающийся лечением туберкулеза. Он назначает больному комплексное обследование, которое обязательно включает анализы крови.

Для диагностики туберкулеза существует несколько видов анализов. Название каждого из них отражает суть исследования, но многим людям это ничего не говорит. Поэтому лучше выяснить у врача, с какой целью назначается тот или иной анализ и что он позволяет узнать. В зависимости от риска инфицирования, общего состояния здоровья больного и его возраста назначается один из анализов:

  • общий или биохимический;
  • квантифероновый тест;
  • иммуноферментный или ИФА;
  • ПЦР или полимеразная цепная реакция.

Все эти анализы разные, они могут выявить инфицирование на начальном этапе, скрытую форму туберкулеза, его активную стадию. Они применяются также при лечении уже диагностированной болезни. Но, какой анализ сделать в каждом конкретном случае, может решить только врач. Иногда требуется провести комплексную диагностику, только несколько методов совместно позволяют точно определить наличие инфекции и место ее локализации.

Такое исследование проводится регулярно при туберкулезе легких и других органов. Общий анализ крови не может выявить наличие палочки Коха в организме, но он позволяет оценить состояние здоровья пациента. Такое исследование необходимо для того, чтобы отслеживать, как организм сопротивляется инфекции, эффективно ли проводимое лечение.

Оценивая общий анализ крови больного, врач прежде всего обращает внимание на количество лейкоцитов, лимфоцитов и скорость оседания эритроцитов. Уровень лейкоцитов обычно при туберкулезе повышается, а количество лимфоцитов уменьшается. При активной форме болезни в крови также будет повышенный уровень нейтрофилов. Но наиболее информативным является показатель СОЭ. В норме он не бывает выше 20-30 единиц. А при туберкулезе скорость оседания эритроцитов возрастает до 50 единиц и выше.

Кроме того, иногда врачи при подозрении на туберкулез назначают биохимический анализ крови. Он информативен для выявления острой формы заболевания. При этом будут повышены показатели белка, мочевины, холестерина и лизоцима. Такой анализ также применяется для выявления особых форм туберкулеза, например, при поражении печени. В крови при этом выявляется повышение количества билирубина, а также ферментов АЛАТ и АСАТ.

Особенность этого анализа в том, что он позволяет определить наличие в крови антител к микобактериям туберкулеза. Несмотря на то, что эта диагностика точно показывает, инфицирован больной или нет, она не позволяет узнать, какой орган поражен инфекцией. Кроме того, с помощью квантиферонового теста нельзя определить, находится болезнь в активной фазе или скрытой. Иногда у больного с уже пролеченным туберкулезом такой тест показывает положительный результат.

Когда необходимо сделать анализ крови на туберкулез вместо Манту, назначают чаще всего именно квантифероновый тест. Он не дает ложных результатов после прививки БЦЖ, так как эта вакцина не вызывает появление этих специфических интерферонов.

Особенность квантиферонового анализа в том, что выявляются в крови особые интерфероны, которые вырабатываются только при наличии в организме микобактерий туберкулеза. Называется этот анализ тестом, так как является альтернативой диаскинтесту, но проводится не под кожей больного, а в пробирке. Суть его в том, что к исследуемой плазме крови добавляют антигены. Потом оценивается реакция иммунной системы организма, проявляющаяся в выработке интерферонов.

Иммуноферментный анализ более точен. Это тоже исследование крови на антитела к туберкулезу. Но, кроме этого, с его помощью оценивается качество и количество различных элементов крови. Называют его еще серологическим исследованием крови. При этом определяется наличие определенных иммуноглобулинов, которые вырабатываются иммунной системой при инфицировании.

Но этот анализ может быть неточен, он не всегда позволяет выявить микобактерии туберкулеза. На начальном этапе болезни иммуноглобулины еще не вырабатываются, поэтому в крови не определяются. Не используют ИФА вместо реакции Манту после прививки БЦЖ, так как он тоже может показать ложный результат. Кроме того, недостоверным он будет при иммунодефиците.

Поэтому для диагностики его используют редко, чаще всего имунноферментный анализ применяется для оценки эффективности лечения туберкулеза. Часто назначают его при наличии положительной реакции на пробу Манту.

ПЦР, или полимеразная цепная реакция, – это сейчас самый точный метод диагностики туберкулеза. Поэтому его часто назначают при наличии спорных результатов диагностики или при подозрении на инфицирование. С помощью ПЦР можно со 100% уверенностью определить болезнь.

Это довольно сложное обследование, основанное на оценке различных фрагментов ДНК в крови. Он позволяет обнаружить даже малое количество бактерий в крови. Кроме того, исследуя методом ПЦР другие жидкости организма, например, мокроту, мочу, внутрисуставную жидкость, можно точно определить место локализации болезни.

Полимеразная цепная реакция проводится по сыворотке крови. Обычно анализ проходит в несколько этапов. Сначала исследуют плазму под микроскопом, пытаясь выявить палочку Коха. Потом с помощью разных реактивов и изменения температуры получают генетический материал. Исследуя ДНК, можно определить, присутствует ли бактерия в организме и в каких количествах.

Благодаря высокой точности и безопасности этого исследования его проводят в любом возрасте. Именно ПЦР чаще всего назначается при невозможности проведения реакции Манту или при подозрении на туберкулез у взрослых людей. Этот анализ позволяет быстро диагностировать заболевание. С его помощью можно определить место локализации инфекции, а также вовремя выявить наличие рецидивов болезни. Метод полимеразной цепной реакции позволяет оценить эффективность проводимого лечения.

Выявление туберкулеза по анализу крови имеет много преимуществ перед другими методами обследования. Прежде всего, он самый точный и достоверный. Вероятность ложных результатов и необходимость в повторном обследовании при такой диагностике очень низкая.

Но такие анализы сейчас делаются только платно, так как они не входят в перечень обязательных. Поэтому не всем они доступны. Например, кватифероновый тест в Москве можно сделать за 2000-3500 рублей. Поэтому чаще всего детям для профилактики инфицирования проводят тест Манту, а взрослым – флюорографию.

Расшифровка анализов крови должна проводиться врачом. Обязательно нужно при этом учитывать другие результаты диагностики, возраст больного, наличие хронических заболеваний и общее состояние его здоровья. Несмотря на это, подобные методы диагностики туберкулеза менее субъективны, чем реакция Манту и диаскинтест.

Анализы крови на туберкулез являются самым достоверным и точным методом диагностики этого заболевания. Особенно информативны они для выявления латентной инфекции, при которой больной является бактерионосителем и может представлять опасность для окружающих. Подобная диагностика не имеет противопоказаний и не вызывает никаких негативных реакций организма. Но обязательно они назначаются только при подозрении на туберкулез или при положительных результатах распространенных тестов: Манту или флюорографии.

источник

Антитела к возбудителю туберкулеза (M. tuberculosis) – это специфические иммуноглобулины, вырабатываемые иммунной системой в ответ на инфицирование возбудителем туберкулеза.

Суммарные антитела к Mycobacterium tuberculosis, иммуноглобулины класса G и M к возбудителю туберкулеза (микобактерии).

Anti-mycobacterium tuberculosis IgA, IgG, IgM, M. tuberculosis antibodies, IgA, IgG, IgM, MBT antibodies, total.

Иммуноферментный анализ (ИФА).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Туберкулез – это инфекционное заболевание, возбудителями которого являются аэробные микобактерии (M. tuberculosis, M. bovis, M. africanus, M. microti), распространенные в почве, воде и у животных. Mycobacterium tuberculosis – это вид микобактерий, который вызывает туберкулез у человека в 92 % случаев.

M. tuberculosis передается воздушно-капельным путем от больных туберкулезом в активной форме. У 90 % людей после первичного инфицирования микобактерии оседают в нижних отделах легких и не приводят к развитию заболевания, так как вырабатывается иммунный ответ, не допускающий увеличения количества бактерий. Однако в случае сильного ослабления иммунной системы туберкулезные палочки начинают активно размножаться и туберкулез переходит из латентной формы в активную. Возможно поражение легких, костей, суставов, мочеполовых органов, лимфатической системы, кожи, глаз и нервной системы.

Микроскопическое исследование посева мокроты по-прежнему считается «золотым стандартом» в диагностике туберкулеза. Однако данный метод имеет как свои достоинства (высокая специфичность), так и недостатки (низкая чувствительность, т. к. необходима определенная концентрация бактерий в образце). Эффективность метода ниже в отношении специфических категорий лиц (ВИЧ-инфицированных, людей старше 60 лет и детей, у которых к тому же существуют сложности со сбором мокроты). Кроме того, данное исследование занимает продолжительное время, т. к. для роста бактерий требуется 6-8 недель. Наряду с бактериологическим методом широко распространено рентгенологическое исследование. Оба метода применимы только к легочным формам туберкулеза. С другой стороны, при помощи метода туберкулиновой пробы практически невозможно дифференцировать латентную и активную формы туберкулеза.

Дифференциальная скрининговая диагностика активного туберкулеза возможна при помощи определения специфических антител к М. tuberculosis методом иммуноферментного анализа.

На активной стадии туберкулеза начинается интенсивная выработка IgG и IgM антител к специфическим антигенам, которые могут быть выявлены в сыворотке крови уже через месяц с начала активизации микобактерий. Среди антител при туберкулезе у взрослых обычно преобладают IgG, реже подавляющее количество антител представлено IgA. Антитела IgM у взрослых встречаются достаточно редко и более характерны для начальных стадий заболевания. У детей высокие титры специфических IgA и IgM отмечаются гораздо чаще, причем высокий уровень IgM иногда может сохраняться даже при большом стаже заболевания и относительно низких уровнях IgG и IgA-антител. В целом картина антительного ответа на туберкулез очень индивидуальна, сложна и зависит от большого числа факторов. Данный тест позволяет выявлять суммарный пул специфичных к антигенам микобактерий антител, что дает возможность охватить максимально большой спектр вариантов гуморального ответа на туберкулез. Высокая специфичность теста достигается использованием специфических для M. tuberculosis антигенов, что исключает ложноположительные результаты у вакцинированных и инфицированных другими микобактериями лиц. Чувствительность данной тест-системы составляет от 61 % (туберкулез лимфатических узлов) до 100 % (туберкулезный экссудативный плеврит) в зависимости от локализации инфекции; специфичность – 95 %.

Для чего используется исследование?

  • Для выявления активного туберкулеза, в особенности внелегочных форм.
  • Для мониторинга эффективности лечения туберкулеза.
  • Для выявления инфицированных лиц.
  • Для подтверждения диагноза (наряду с использованием дополнительных диагностических исследований).

Когда назначается исследование?

  • Когда известно, что пациент имел длительный контакт с больными туберкулезом или что его работа связана с постоянным контактом с людьми из групп риска (бездомными, инъекционными наркопотребителями, лицами, находившимися в местах лишения свободы).
  • При соответствующих симптомах: слабости, быстрой утомляемости, субфебрильной температуре тела, ночной потливости, персистирующем кашле в течение 2-3 недель, боли в грудной клетке (легочном туберкулезе), хронических болях в спине, суставах, брюшной области с невыясненной этиологией.
  • При длительном безрезультатном лечении хронического простатита, цистита, пиелонефритов и при воспалении эндометрия (туберкулезе мочеполовых органов).
  • При анемии, лейкоцитозе.
  • Отсутствие активной формы заболевания.
  • Активная форма туберкулеза различной локализации.
  • Антитела, оставшиеся после перенесенного заболевания.
  • Тубинфицированность – присутствие микобактерий в организме (если нет клинических проявлений заболевания).

Что может влиять на результат?

Читайте также:  Где дешевле сдать анализ на антитела

Эффективное лечение туберкулеза сопровождается резким увеличением количества антител, уровень которых приходит в норму по истечении некоторого времени.

  • Этот тест особенно важен, когда при отрицательном результате рентгенологического исследования, микроскопии и методе ПЦР есть симптомы неясного происхождения, схожие с проявлениями туберкулеза внелегочных форм.
  • Положительный результат – недостаточное основание для постановки диагноза «активный туберкулез», так как данный анализ должен сопровождаться другими диагностическими тестами (микроскопией бактериальных культур, ПЦР) в соответствии с клинической картиной и предполагаемыми очагами локализации инфекции для более углубленного обследования.
  • На ранней стадии инфекции тест может дать отрицательный результат из-за того, что еще не выработалось достаточное количество антител. В таких случаях при симптомах инфекции рекомендуется повторить исследование через 2-7 недель или провести другие виды тестирования.
  • Тест нечувствителен к БЦЖ-вакцинации, так как в нем задействованы антигены, специфичные для M. Tuberculosis и нехарактерные для M. Bovis.
  • Возможность ложноположительных результатов данного анализа исключена в связи с отсутствием взаимовлияния с другими видами микобактерий.
  • Тест рассчитан на выявление только активной формы туберкулеза вне зависимости от его локализации.
  • Данное исследование подходит для пациентов с иммунодефицитами различного происхождения (ВИЧ, онкологией), так как тест-система позволяет обнаружить иммуноглобулины всех трех классов (G, M, A).

Кто назначает исследование?

Фтизиатр, инфекционист, терапевт, врач общей практики.

источник

Новый метод диагностики строится на исследовании крови на антитела к туберкулезу. Определение присутствия антител, установка их количества и класса позволяет врачам поставить точный диагноз, вовремя приступить к лечению. Ценность метода признана педиатрами.

Антитела к возбудителю опасной патологии, ставшей популярной в современном мире, туберкулезу – это специфические иммуноглобулины. Уже по названию можно догадаться, какая система отвечает за их производство, – иммунная система. Исследование наличия антител называется иммуноферментным анализом. Часто в учебниках можно встретить аббревиатуру – ИФА. Для исследований на антитела берут анализ крови из вены.

При переходе tuberculosis в активную стадию протекания начинается образование антител к антигенам:

Антитела начинают формироваться в крови практически сразу с начала активного поведения в крови микобактерий. ИФА дает точные данные об этиологии недуга, определяет стадию, на которой он находится.

Анализ на антитела нельзя сравнивать с обычным исследованием, это сложная диагностическая процедура, требующая специальной подготовки, как пациента, так и врача. Проверяется уровень и скорость процесса связывания иммунных клеток с антигенами возбудителей tuberculosis. Проводится все исследование с помощью фермента. Процедура позволяет получить комплекс разнородной информации о состоянии здоровья пациента, качеству его иммунитета.

Анализ крови берут у пациента, когда он не принимал пищи определенный промежуток времени, желательно 12 часов, но минимальное количество – 1 час. Поэтому назначают анализы на утро. Причем нельзя пациенту есть не только еду, запрещен прием лекарственных препаратов, жидкости. Любое проникновение в кровь меняет картину патологии и может дать ложные результаты. Лекарственный курс останавливают за неделю до исследования. Непосредственная технология ИФА схожа с биохимическим анализом.

Источником инфекции являются люди, пораженные туберкулезом. Микобактерии содержатся в мокроте. Она выходит из организма при кашле, чихании, сплевывании. Первое поражение развивается и завершается появлением признаков tuberculosis у 10% инфицированных. В остальных 90% иммунная защита начинает работать ярко, активно и препятствует патологии. Инфекция в этот период проходит в латентной (скрытой) форме, микобактерии не размножаются.

Антитела к Mycobacterium tuberculosis выявляются различными способами лабораторных исследований и позволяют своевременно начать лечение. Видов микобактерий более 70, из них 5 вызывают опасную патологию. Их объединяют в туберкулезный комплекс:

  • человеческий тип;
  • бычий;
  • африканский;
  • мышиный;
  • вакцинный штамм.

Человеческий тип вызывает основное количество форм и видов туберкулеза. По разным источникам цифра варьируется от 85 до 92%. Бычий становится причиной от 5 до 15% случаев. Африканский вид вызывает большинство случаев на Южноафриканском континенте, примерно 90%. Мышиный диагностируется крайне редко. Вакцинный штамм помогает проводить профилактику. Чаще всего болезнь поражает разные органы и системы человеческого организма:

Остальные проценты распределяются среди таких систем:

Внелегочные виды чаще обнаруживаются у больных ВИЧ инфекцией.

Микроскопическое исследование, проводимое на мокроте, считается стандартным. Метод имеет преимущества, основное – высокая специфичность, и недостатки. Главный минус – низкая чувствительность, чтобы не ошибиться, в посеве должно быть особое количество бактерий, высокая концентрация. Эффективность меняется от категории обследуемых. Самые низкие показатели дают:

  • возраст пациентов старше 60 лет;
  • дети;
  • ВИЧ – инфицированные.

Исследование мокроты занимает большой промежуток времени, который часто не хочется терять. Бактерии растут в посеве мокроты до 8 недель. За это время можно завершить терапевтический комплекс не осложненного вида патологии с известным возбудителем. Кроме микроскопического используют еще два вида диагностики:

Оба вида применяются для выявления легочных поражений.

Дифференциальная скрининговая методика позволяет определить наличие антител к микобактериям tuberculosis. Высокие результаты достигаются тем, что для анализа берут специфические антигены. Получить ложный результат при данном исследовании невозможно. Чувствительность тестового анализа:

  • лимфоузлы – 61%;
  • экссудативный вид плеврита – до100%.

Цель и задачи анализа на антитела к микобактериям туберкулеза:

  1. Проверка эффективности и правильности проводимого лечения.
  2. Выявление присутствия инфекции.
  3. Подтверждение предварительно поставленного диагноза.

Когда ИФА станет единственно правильным выбором метода диагностики:

  1. Длительный (постоянный) контакт с инфицированными.
  2. Профессиональная деятельность среди больных туберкулезом.
  3. Общение с людьми из группы риска. Длительное неэффективное лечение патологий хронических видов (простатит, цистит, пиелонефрит).
  4. Анемия.
  5. Лейкоцитоз.

Симптоматика патологии подскажет необходимость обращения за консультацией к врачу:

  • слабость и быстрая усталость не от нагрузок;
  • температура на уровне субфебрильной;
  • повышенное выделение пота в ночное время;
  • кашель, продолжающийся более 2-3 недель;
  • болевые ощущения в области грудины;
  • рези в спине;
  • боли в суставах и брюшине.

Обследование на содержание антител к туберкулезу заключается в определении суммарного количества определенных классов образований Lg:

Метод исследования входит в комплекс диагностических мероприятий, способных на ранних ступенях инфицирования обнаружить возбудителя tuberculosis – микобактерии.

В результате получают два итога:

Положительный ответ делится на определенные группы:

  • локализация активной формы патологии;
  • суммарные антитела после перенесенного заболевания;
  • тубинфицированность.

Результат показывает, что лечение идет эффективно, когда количество антител сильно увеличено, выше нормы.

Тест помогает врачу определиться в своем диагнозе, когда ни рентген, ни микроскопия не дали точного ответа, ПЦР показал неясность патологии, а симптомы схожи с туберкулезом легких.

Дети боятся сдавать анализ крови из пальца, большинство из них плачет и впадает в истерику. Кровь из вены – это еще более сложный процесс исследования. Поэтому врачи назначают ИФА детям только в определенных случаях. Что является показанием к проверке:

  • подозрение на развитие легочного tuberculosis;
  • при сомнениях в диагнозе поражения легких;
  • требуется срочно найти источник инфекции;
  • при проявлении симптомов рецидивных явлений.

Метод помогает провести полный контроль над течением патологии и эффективностью выбранного лечебного комплекса противотуберкулезных мероприятий.

Реакция антигена с антителом дает точную цифру количества иммуноглобулина, позволяет выявить, какой иммунитет у малыша. Диагностика обрабатывается с помощью обычных математических вычислений. Какие инфекции находят в организме ребенка:

  • ВИЧ;
  • вирусный гепатит;
  • хламидийные инфекции;
  • герпетические патологии;
  • микобактерии;
  • туберкулез.

Стадии болезни имеют разный класс антител, поэтому специалист устанавливает период развития болезни.

Проба Манту – не единственный метод исследования, который позволит выявить инфекцию. Есть еще и другие возможности. Это специальный анализ крови. Методик анализа три:

  1. Общий. Его проводят не только при подозрении на туберкулез. Любая патология, проникая в организм, приводит к изменениям крови. Можно считать общий анализ отправной точкой исследований. Недуг обнаружен, дальше требуется уточнение его особенностей. Метод дополняет исследования, а не является альтернативой.
  2. Иммуноферментный (ИФА). Исследование направлено на выявления наличия антител к бактериям, которые провоцируют tuberculosis. В основном, выясняется присутствие в крови иммуноглобулины. Преимущества методики в высокой чувствительности ко всем элементам крови и точности результата. Часто врачи назначают ИФА, когда Манту показывает положительный результат.
  3. Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Исследование выявляет наличие не антител, а возбудителей. Устанавливается количество микобактерий.

Специальный анализ содержания крови делают вместо Манту, потому что он более удобный, быстрый и дающий оптимально точные результаты.

Диагностика крови – надежный способ выявления присутствия в кровеносных сосудах микобактерий. Метод ИФА быстрый, позволяющий сократить период времени для выявления причин недуга. Особенно для детского возраста время очень важно. Чем раньше ребенок получит нужное лечение, тем легче и быстрее проходит выздоровление.

источник

В этой статье мы поговорим о том, какие анализы сдать на туберкулез, чтобы исключить или подтвердить это заболевание. Мы расскажем о том, можно ли определить туберкулез по анализу крови, какие виды исследований существуют, какой из них самый точный, какие анализы на туберкулез используются у детей и взрослых. Также мы расскажем об изменениях в общих, обычных анализах, которые могут вызвать подозрение на инфекцию, и при которых необходима более тщательная диагностика.

Рекомендуем также ознакомиться с нашими статьями близкой тематики:

Туберкулинодиагностике, пробе Манту и диаскин-тесту будут посвящены отдельные статьи.

Основная задача диагностики туберкулеза – выявление его возбудителя. В направлении могут указываться разные аббревиатуры:

  • BK (БК) – бациллы Коха;
  • МБТ – микобактерии туберкулеза;
  • КУМ – кислотоустойчивые микобактерии;
  • КУБ – кислотоустойчивые бактерии.

Эти аббревиатуры обозначают одно и то же: биологический материал (например, мокрота) должен быть проанализирован для обнаружения самих возбудителей заболевания.

Основное исследование для выявления открытых форм инфекции – анализ мокроты на БК (КУМ, КУБ). Чтобы правильно сдать его, нужно знать несколько правил:

  • Сбор мокроты проводится либо в одноразовые пластиковые контейнеры, либо в стеклянные банки с плотно закручивающейся крышкой (такие емкости после дезинфекции могут использоваться неоднократно). Посуда для сбора мокроты имеет широкое горлышко.
  • Мокрота собирается в отдельном помещении поликлиники или больницы, как можно дальше от других людей. Во время ее отхождения у больного очень велик риск заражения окружающих.
  • Для исследования необходимо как минимум 3 образца. Первый из них берут сразу при обращении, для второго выдают пробирку для суточного сбора мокроты; третий берут на второй день, когда пациент вновь приходит к врачу.
  • В стационаре за первый день берут 2 образца мокроты с интервалом 2 часа; после этого пациенту выдают посуду, чтобы он собрал утреннюю мокроту.
  • Перед откашливанием мокроты необходимо сделать несколько глубоких вдохов.
  • Сбор мокроты проводится в присутствии медсестры.
  • Исследование мокроты необходимо не только для диагностики туберкулеза, но и для определения лекарственной устойчивости возбудителя.

После фиксации и окраски мокроты лаборант просматривает ее под микроскопом и подсчитывает количество обнаруженных микобактерий. Если как минимум в 300 полях зрения обнаружено 3 и меньше кислотоустойчивых микобактерий, то заболевание считают неподтвержденным, а в бланке анализов пишут «МБТ (БК, КУМ и т. д.) не обнаружены».

  • Если в 300 полях зрения найдено от 4 до 9 микроорганизмов, результат считают недостаточно позитивным, то есть сомнительным, и записывают его как отношение обнаруженных микробов к количеству просмотренных полей зрения (например, 5/300), при этом общую реакцию оценивают как 1+.
  • Если лаборант просмотрел 100 полей зрения и видит, что всего насчитывается как минимум 10 возбудителей, он ставит результат 1+.
  • Если в каждом поле зрения находится до 10 бактерий, то можно просмотреть только 50 полей и поставить 2+.
  • Наконец, если микобактерий очень много, в каждом поле зрения их больше 10, то просматривают как минимум 20 полей и ставят 3+. Это самая заразная форма болезни.

Дополнительные характеристики мокроты при туберкулезной инфекции (неспецифичные, могут наблюдаться и при других заболеваниях):

  • консистенция вязкая;
  • цвет чаще белый, могут быть «рисовые вкрапления», а также прожилки крови;
  • количество за сутки составляет 100 – 300 мл.

Могут применяться такие биологические материалы:

Такой метод может использоваться при отсутствии хорошо отделяемой мокроты. Лаборант надевает медицинскую маску, защитные очки и закрытую медицинскую одежду. Пациент открывает рот, его язык вытягивается вперед пинцетом. Одновременно к задней поверхности ротоглотки, ближе к гортани, вводится стерильный тампон. При раздражении стенки дыхательных путей возникает рефлекторный кашель, во время которого и собирают материал.

  • Промывная жидкость из бронхов

Метод более точен, чем анализ мокроты. Однако его нельзя использовать при дыхательной или сердечной недостаточности, у людей с астмой, а также с большой осторожностью применять у пожилых. Дыхательные пути анестезируются с помощью спрея с обезболивающим веществом. Используя специальный шприц, в гортань пациенту вводят 20 мл теплого стерильного физраствора. Такой прием усиливает бронхиальную секрецию и способствует отхождению мокроты. Пациент откашливается, и полученную жидкость направляют в лабораторию. При посеве промывных вод частота выявления возбудителей инфекции увеличивается на 20%.

  • Промывная жидкость из желудка

Обследование применяется у детей, которые не умеют откашливаться, а также у взрослых при малом количестве мокроты. Пациент натощак выпивает стакан кипяченой воды. Затем в его желудок вводят зонд (тонкую трубку) и шприцом отсасывают содержимое. Метод довольно информативен не только при туберкулезной инфекции легких, но и при поражении других органов.

Спинномозговая жидкость исследуется при подозрении на туберкулезный менингит (воспаление мозговых оболочек). Этот анализ необходимо провести в первые же дни заболевания. Врач делает прокол стерильной иглой в области позвоночника и собирает вытекающую жидкость. Одновременно специалист отмечает скорость вытекания: если ликвор течет струей, это говорит об опасном повышении внутричерепного давления. Спинномозговую жидкость собирают в две пробирки. Одну оставляют в холодильнике, и через 12 – 24 часа в ней становится видна паутинообразная пленка, образованная микобактериями. Материал из другой пробирки исследуют в лаборатории.

При неясном диагнозе для выявления микобактерий используется бронхоскопия. Это осмотр внутренней поверхности бронхов с помощью оптоволоконного прибора. Во время исследования врач берет кусочек ткани из стенки бронха (биопсию). Также в бронхи заливают небольшое количество физраствора, а затем отсасывают полученную жидкость. Это исследование проводят при подозрении на туберкулез и отсутствии в трех анализах мокроты КУМ – кислотоустойчивых микобактерий.

  • Анализ плевральной жидкости

При туберкулезной инфекции нередко в полости вокруг легких накапливается жидкость, которая может содержать микобактерии. При любом плевральном выпоте необходимо определение причины такого состояния. Чем больше будет получено жидкости, тем больше вероятность выявления в ней микобактерий.

Читайте также:  Где можно сделать анализ на антитела

Эти исследования выполняются в стационаре специально обученным персоналом. Их суть – в получении образцов тканей с помощью особой иглы. Биопсия легких может быть выполнена и во время операции на этом органе.

Обнаружение микобактерий – основной метод диагностики заболевания. Анализы для выявления туберкулеза делятся на 3 группы:

  1. Микробиологические: бактериоскопические (окраска по Циль-Нильсену и окрашивание флюорохромами (светящимися красителями)) и культуральные (посев материала на плотную или жидкую питательную среду).
  2. Биологические (заражение материалом от больного морских свинок).
  3. Молекулярно-генетические (полимеразная цепная реакция – ПЦР; лигазная цепная реакция – ЛЦР).

В лаборатории мокрота или другой материал подвергается микроскопии. Лаборанты готовят мазок, который окрашивается особыми красителями, и изучают его под микроскопом. При большом количестве микробактерий они хорошо заметны.

Повышает точность диагностики культуральный метод – посев материала на питательную среду. Даже небольшое количество бактерий, попав в благоприятные условия, начинают размножаться, образуя скопления – колонии. Затем полученные образцы изучают под микроскопом и другими способами. Точный анализ на туберкулез – культуральное исследование, то есть посев на питательную среду. Длительность такого обследования достигает 2,5 месяца. Если за это время колонии микобактерий на питательной среде не образовались, значит, в материале возбудителя не было. Самый точный анализ – биологический, то есть заражение лабораторных морских свинок.

Экспресс-анализ на туберкулез, причем один из самых точных – метод ПЦР (полимеразной цепной реакции). Его суть – обнаружение в мокроте генетических фрагментов, специфичных для возбудителей туберкулеза. Такое исследование занимает не более 6 часов и позволяет обнаружить возбудителя даже при его незначительном количестве. Однако ПЦР остается лишь дополнительным методом диагностики. Ее результаты учитываются одновременно с другими данными, оценкой эффективности лечения и так далее. Только на данные ПЦР для выявления инфекции ориентироваться нельзя.

Положительная ПЦР при отрицательном культуральном исследовании отмечается у 50% людей, контактировавших с бактериями в быту (общественный транспорт и так далее) и у 80% людей, у которых туберкулез протекал скрыто, без рентгенологических изменений в легких, и не был диагностирован. Так могут выявляться пациенты из группы риска, имеющие субклиническую форму заболевания. При неблагоприятных условиях у таких лиц микобактерии могут активизироваться и вызвать активное заболевание.

Серологическое тестирование крови на туберкулез не дает точной диагностической информации, поэтому на практике имеет небольшое значение, хотя специалисты постоянно ищут способы, позволяющие быстро диагностировать это заболевание (особенно внелегочные формы).

Анализ крови на антитела к возбудителю туберкулеза основан на выявлении иммунных белков к этому микроорганизму. Существует 2 основных метода обнаружения иммуноглобулинов против кислотоустойчивых микобактерий:

  • туберкулинодиагностика (реакция Манту) сохранила значение только у детей и подростков; у взрослых она не позволяет отличить состояние инфицированности и заболевания;
  • анализ на туберкулез вместо Манту – ИФА, или иммуноферментный; основан на выявлении антител в биологическом материале; используется только для скрининга (быстрого массового обследования) и отбора пациентов для более детального обследования.

Общий анализ крови туберкулез не покажет. Однако при этом заболевании могут выявляться некоторые отклонения, которые могут навести на мысль о заболевании:

  • незначительное снижение количества эритроцитов и гемоглобина может быть признаком кишечного или легочного кровотечения, а также фиброзно-кавернозной формы болезни;
  • увеличение количества палочкоядерных нейтрофилов (сдвиг формулы влево, доходит до 20% палочкоядерных форм), плюс отсутствие эозинофилов и снижение числа лимфоцитов и моноцитов;
  • повышение СОЭ до 40 – 80 мм/ч.

Анализ мочи обычно не меняется. В биохимическом анализе крови при легочном туберкулезе можно выявить:

  • снижение уровня общего белка и альбумина;
  • снижение уровня натрия в сыворотке крови;
  • повышение уровня АЛТ, АСТ;
  • незначительное повышение в крови уровня кальция.

Это наиболее современный анализ на туберкулез. Его также называют T-SPOT. Суть теста:

  • при наличии в организме микобактерий на них реагирует иммунная система;
  • эта реакция заключается в выделении некоторыми Т-лимфоцитами гамма-интерферона;
  • суть теста – в определении числа таких активированных лимфоцитов.

Спот-анализ позволяет выявить бактерии даже в очень небольшом количестве. Его используют для выявления латентных, скрытых форм болезни, а также для диагностики патологии у людей с угнетенным иммунитетом (например, на фоне СПИДа). Тест высокоспецифичен, ложноположительные результаты практически не наблюдаются. Это означает, что положительный результат практически в 100% говорит о наличии туберкулеза.

Чувствительность же, то есть способность выявить инфекцию, у СПОТ-анализа достигает 96%, даже при внелегочных формах болезни. Для сравнения, чувствительность реакции Манту составляет менее 70%. Т-СПОТ выпускается в Великобритании.

QuantiFERON-TB Gold in-Tube test – еще один современный метод выявления туберкулеза по крови. Как и Т-СПОТ, его используют при высоком риске заражения (например, проживание в семье больного) в сочетании с отрицательной пробой Манту. Производится такая тест-система в Австралии.

Существуют тесты для одновременного быстрого выявления туберкулеза и устойчивости его возбудителя к рифампицину и рифампицину + изониазиду. Ими пользуются в крупных противотуберкулезных центрах. Это INNO-LiPA Rif, TB kit и GenoType MTBDRplus. Однако они не могут использоваться для подтверждения диагноза болезни.

Ниже мы приведем таблицу, где укажем стоимость наиболее популярных исследований в сетевых лабораториях.

Анализ Лаборатория Цена, руб.
ПЦР (мокрота) Инвитро 715
Хеликс 390
Т-СПОТ Инвитро 7950
Хеликс 8500
ИФА (определение иммуноглобулинов) Инвитро 1610
Хеликс 975
Анализ мазка под микроскопом Гемотест 380

источник

Полимеразная цепная реакция (далее ПЦР) — это высокоточный метод молекулярно-генетического исследования материла, который позволяет выявить у человека различные инфекционные заболевания и установить генотип возбудителя.

ПЦР для выявления различных заболеваний стала применяться в самом конце прошлого века. Первооткрывателем этого метода исследования является американский биохимик Кэри Муллис. Свое открытие он сделал в 1983 году. Но еще несколько лет понадобилось, чтобы доработать метод.

С помощью ПЦР-диагностики можно обнаружить фрагменты чужеродного ДНК в любой жидкой среде организма. На анализ могут быть взяты такие жидкости:

  • Кровь.
  • Слюна.
  • Мокрота.
  • Выделения из половых органов.
  • Смывная жидкость бронхов.
  • Желудочный сок.

Лечащий врач сам определяет, какую биологическую жидкость лучше взять на анализ при конкретном заболевании.

ПЦР-диагностика позволяет не только обнаружить микрофрагменты чужеродной ДНК, но и определить к какому конкретному виду она относится. То есть с помощью ПЦР можно не только точно установить возбудителя заболевания, но и выяснить к какому виду он принадлежит.

Процесс анализа ПЦР — очень сложный. Он состоит из нескольких этапов:

  1. Сначала нужно обнаружить фрагменты вредоносной ДНК в предоставленном образце.
  2. Копирование фрагмента ДНК. Маленького участка ДНК для анализа недостаточно, поэтому его копируют. Нуклеиновая кислота может копироваться в пробирке с помощью фермента полимеразы (вне живого организма). В пробирке образуется множество клонов, то есть происходит цепная реакция. Весь процесс происходит в три этапа под воздействием различных температур.
  3. Когда генетического материала становится достаточно для исследования, тогда возбудитель определяется обычными методами.

Метод ПЦР очень точен и может выявить наличие любого возбудителя по небольшому фрагменту ДНК или РНК.

ПЦР-анализ на туберкулез является самым информативным методом диагностирования этого заболевания. Относительно туберкулеза этот метод позволяет не только установить наличие микобактерий в организме, но и определить к какому виду они принадлежат.

Результат ПЦР диагностики может быть простой и расширенный. В простом результате указывается только наличие/отсутствие микобактерии. Расширенный результат дает представление о дополнительных параметрах протекания заболевания. Правильно понять, что написано в результате анализа ПЦР может только фтизиатр.

ПЦР-диагностика туберкулеза не проводится всем без исключения. Это объясняется дороговизной реактивов и недоступностью проведения исследования в некоторых отдалённых районах (в таких местах пользуются другими методами диагностики).

Показаниями для проведения ПЦР-исследования являются:

  • Длительный контакт с больным туберкулезом.
  • Беременность. ПЦР крови на туберкулез является самым быстрым и безопасным методом для беременной женщины.
  • Экстренная ситуация. Например, необходимость срочного оперативного вмешательства, при котором нужно точно установить наличие/отсутствие туберкулеза в организме.
  • Аллергическая реакция на туберкулиновые пробы.
  • ВИЧ-инфекция.
  • Невозможность диагностирования заболевания другими способами, при наличии явных признаков туберкулеза.
  • Неоднозначные симптомы, которые не позволяют создать четкую клиническую картину заболевания (болезни верхних дыхательных путей, сопровождающиеся большим количеством мокроты, кровохарканьем и пр.).

Метод ПЦР, при всей своей сложности и дороговизне, проводится и расшифровывается в течение нескольких часов. Что делает этот метод золотым стандартом при диагностике туберкулезной инфекции.

Забор материала — это первый этап при выполнении ПЦР-исследования. Для того, чтобы выполнить качественный анализ, нужно соблюдать определенные правила по сбору материла:

  • Для ПЦР мокроты на туберкулез нужно тщательно провести туалет полости рта. Делать это нужно вечером и утром перед анализом. Все это время не есть. Вечером выпить муколитическое средство для лучшего отхождения мокроты.
  • Перед сдачей крови на ПЦР нужно не употреблять пищу в течение 8 часов. Лучше всего производить забор крови утором натощак. Курить перед забором крови также нельзя. Кровь берется из вены на локтевом сгибе руки в стерильную пробирку. В эту же емкость добавляется антикоагулянт, чтобы кровь оставалась жидкой. Смешивать антикоагулянт с кровью нужно очень аккуратно, не делая резких движений. Если кровь была взята не в лабораторных условиях, то она должна быть предоставлена лаборанту до истечения пятичасового срока. Иначе результат может быть не точным.
  • Моча собирается в стерильную емкость утром, до приема пищи. Перед сбором мочи необходим тщательный туалет промежности.
  • Остальные виды жидкостей (смывы с бронхов, спинномозговая жидкость) может собрать только специалист в условиях стационара.
  • Перед забором жидкостей на ПЦР-исследование запрещено принимать некоторые препараты (например, прием некоторых антибиотиков нужно прекратить за две недели до забора материала).
  • Требования к лаборатории, в которой проводится забор анализов на ПЦР очень строгие. Лаборатория должна быть стерильна, чтобы не произошло перекрестное загрязнение материала. В этом случае результаты могут быть ложноположительными.

ПЦР-тест на туберкулез — высокоточный информативный анализ. И требования к его проведению крайне строгие. Чтобы анализ получился, нужно соблюдать регламент.

Для работы в ПЦР-лаборатории приглашаются специально обученные врачи: бактериологи, вирусологи, микробиологи. Все они прошли дополнительное обучение для работы на сложном оборудовании.

Лаборатория должна иметь лицензию на выполнение работ связанных с бактериологически-опасными вирусами и бактериями.

В самой лаборатории должны быть выделены такие рабочие зоны:

  • Зона приемки и сортировки проб.
  • Зона подготовки проб. В этом помещении выделяются нуклеиновые кислоты из образцов материала.
  • Зона проведения реакционных проб.
  • Зона для учета результатов и расшифровки анализов.

Все помещения располагают последовательно. Допуск в эти зоны разрешен только работающим там сотрудникам, которые при входе соблюдают правила личной защиты от бактерий и вирусов.

Лучше, если есть возможность расположить лабораторию в отдельно стоящем здании с собственной системой вентиляции.

В лаборатории соблюдаются стерильные условия работы, чтобы избежать перекрестного загрязнения проб. Даже если один фрагмент чужеродной ДНК попадет в исследуемый материал, ПЦР его размножит, и анализ получится ложноположительным.

В каждой зоне лаборатории имеется свой набор оборудования и посуды для проведения исследований. Также имеются свои холодильники, которые не могут быть использованы в других целях, кроме хранения материала конкретной зоны исследований.

Использованные расходные материалы и остатки биологического материала уничтожаются специальными способами, в соответствии с инструкциями.

ПЦР-тест на туберкулез имеет множество плюсов, которые делают этот метод диагностики все более востребованным:

  • Срок проведения. Несмотря на сложность проведения анализа, он готовится намного быстрее других лабораторных методов диагностики туберкулеза (около пяти часов). Это свойство анализа ПЦР становится особенно важным, когда анализ необходимо провести экстренно.
  • Анализ ПЦР абсолютно безопасен и может проводиться беременным женщинам и детям.
  • ПЦР-исследование можно сделать, когда по каким-то причинам нельзя выполнить другие методы диагностики.
  • С помощью ПЦР-диагностики можно провести исследование любой биологической жидкости на выбор. В некоторых случаях это имеет большое значение.
  • Позволяет обнаружить возбудителя на любой фазе заболевания. Даже после проведенного лечения, сохранившиеся остатки ДНК мертвых микобактерий будут обнаружены.
  • Высочайшая чувствительность этого метода позволяет обнаруживать в биологическом материале даже единичные фрагменты ДНК микроорганизмов.
  • Метод ПЦР позволяет не только обнаружить присутствие заболевания, но и может определить генотип возбудителя, отличив его от похожих микроорганизмов.
  • ПЦР-исследование очень эффективно при рецидивирующем течении заболевания.
  • Благодаря высочайшей чувствительности, анализ ПЦР может распознать микобактерии в организме человека, когда он только недавно инфицировался туберкулезом, задолго до появления клинических симптомов.

Казалось бы, метод ПЦР-диагностики содержит в себе только плюсы, но это не так.

Минусы этого метода исследования тоже существенны. При выборе метода исследования туберкулеза это также стоит учитывать:

  • Это дорогостоящий метод исследования. Для проведения ПЦР-диагностики нужна специально-оборудованная лаборатория. Оборудование для таких исследований стоит очень дорого, и не во всякой лаборатории оно имеется. В крайнем случае, можно обратиться в платную лабораторию.
  • Сразу же после проведенного лечения метод ПЦР применять не рекомендуется. В крови пациента некоторое время сохраняется небольшое количество живых и мертвых микобактерий. Если провести анализ в этот период, он покажет ложноположительный результат.
  • При мутациях микобактерий, анализ будет недостоверным, так как нормальная ДНК не сможет синтезироваться.
  • Для ПЦР-исследования имеет значение правильный выбор биологической жидкости на анализ.
  • Сверхчувствительность. Это тот случай, когда достоинство метода становится его недостатком. Если при проведении анализа в биологический материал каким-то образом попадет даже единичный фрагмент чужеродного ДНК, то ПЦР его размножит, и будет получен ложный результат.

ПЦР-лаборатория имеется только в крупных противотуберкулезных диспансерах и диагностических центрах.

Объясняется это высокой стоимостью оборудования и высокими требованиями к содержанию лаборатории (реактивы, обработка).

Медицинские чиновники не сильно переживают из-за отсутствия ПЦР-лаборатории в каком-то конкретном населенном пункте, поскольку анализы на туберкулёз можно провести другими методами (культивирование микобактерий, микроскопическое исследование).

Если в населённом пункте нет бесплатной ПЦР-лаборатории, пациент по желанию может обратиться в платное учреждение.

В последнее время ПЦР-диагностика занимает все более прочные позиции в диагностике туберкулеза и других заболеваний, отодвигая на задний план другие методы диагностики.

источник