Меню Рубрики

Анализ на антинуклеарные антитела скрининг

Антинуклеарные антитела — это патологические компоненты иммунной системы, ведущие к возникновению аутоиммунных заболеваний соединительной ткани, таких как системная красная волчанка, синдром и болезнь Шегрена, системная склеродермия.

Антинуклеарные антитела представляют из себя белки-иммуноглобулины, вырабатываемые защитными клетками человеческого тела (лимфоцитами). Из-за сбоя в работе иммунной системы ядра собственных клеток распознаются ею как чужеродные и вредные, что приводит к ошибочной выработке антител к разным компонентам клеточных ядер.

Всего выявлено более 190 компонентов ядра, к которым может вырабатываться патологический иммунный ответ, однако диагностическое значение имеют около 20 из них. К наиболее важным относят антитела к одно- и двуспиральной ДНК, гистонам, нуклеосомам и рибосомальному P-протеину.

Ядро содержится практически в любой клетке человеческого тела, за исключением некоторых кровяных. Оно находится внутри клетки и защищено собственной оболочкой, цитозолем и внешней клеточной мембраной. Антитела находятся во внеклеточной среде и чаще всего не могут напрямую контактировать с ядром, повреждая его. Однако при любом нарушении целостности клеточных оболочек антинуклеарные антитела, если они имеются в организме, способны связываться с компонентами ядра, образуя нерастворимые комплексы. Именно они и являются причиной возникновения разнообразных аутоиммунных заболеваний соединительной ткани.

В норме собственные клетки организма даже в разрушенном состоянии иммунного ответа не вызывают. Однако сбои в работе иммунной системы наблюдаются постоянно даже у здоровых лиц, и при неблагоприятном стечении обстоятельств иммунитет может сформироваться на любой из компонентов клетки. В организме предусмотрена своеобразная система «отбраковки» патологических антител, в большинстве случаев она срабатывает, антитела уничтожаются, не вызывая болезнь.

Однако в некоторых случаях антинуклеарные антитела возникают в больших количествах и оказываются вовремя не распознаны организмом как патологические. Чаще всего это бывает при обширных солнечных ожогах, когда миллионы клеток кожи оказываются повреждены ультрафиолетом. Ядра погибших клеток оказываются непосредственно во внутренней межклеточной среде организма, где их встречают иммунные клетки — лимфоциты и макрофаги.

ДНК из ядер, гистоновые белки и другие белковые и нуклеиновые компоненты могут быть настолько повреждены ультрафиолетовым излучением, что в некоторых случаях изменяются до неузнаваемости. Именно это и провоцирует иммунные клетки вырабатывать против них антитела, как против чужеродных веществ.

Нормальным значением является полное отсутствие антинуклеарных антител. При скрининговом ИФА-исследовании отрицательный ответ чаще всего записывается с указанием титра (разведения), пример: «Отрицательно, Причины повышения ANA

Положительный результат анализа может свидетельствовать о наличии одного или нескольких следующих заболеваний:

  • системная красная волчанка,
  • лекарственная волчанка,
  • синдром или болезнь Шегрена,
  • системная склеродермия,
  • синдром Шарпа.

Слабоположительный результат может быть вызван как наличием вышеперечисленных заболеваний, так и заболеваниями, не связанными с системой иммунитета. Перечислим основные болезни, которые могут его вызвать:

  • ревматоидный артрит, в том числе ювенильный (детский),
  • первичная легочная гипертензия,
  • идиопатический легочной фиброз,
  • синдром Рейно (дигитальный васкулит),
  • болезнь Крона,
  • узелковый периартериит,
  • гепатиты различной природы,
  • злокачественные новообразования (опухоли),
  • некоторые инфекционные болезни (туберкулез, шистосомоз, малярия).

Слабоположительный результат анализа иногда выявляется у здоровых лиц, чаще у женщин в возрасте старше 60 лет.

Исследование показано при симптомах, не исключающих аутоиммунную патологию соединительной ткани:

  • длительно сохраняющаяся повышенная температура тела;
  • беспричинное снижение массы тела;
  • уменьшение регионарных лимфатических узлов;
  • болезненность и скованность в суставах, когда не установлена иная причина патологии;
  • боли в мышцах;
  • кожная сыпь, особенно на лице в виде «красной бабочки» (нос и щеки рядом с крыльями носа);
  • перикардит и плеврит неясной причины;
  • изменения в общем и биохимическом анализе крови, когда исключены другие виды патологии.

Также анализ назначается при имеющемся аутоиммунном заболевании для контроля за эффективностью лекарственной терапии.

Анализ сдается утром натощак либо в другое время, однако не ранее 5-6 часов после последнего приема пищи. Также желательно не принимать никакие лекарственные средства до взятия крови на исследование.

Существует несколько вариантов проведения анализа, отличающихся по своей точности и возможности количественной оценки концентрации антител.

Скрининговое ИФА-исследование (иммуноферментный анализ) позволяет выявить наличие суммарных антинуклеарных антител и их титра. К плюсам метода относится его относительная дешевизна и возможность выяснить, необходимы ли расширенные исследования. При отрицательном результате анализа дальнейшие исследования чаще не показаны.

Непрямая флуоресцентная микроскопия — это метод, основанный на окрашивании антител специальными веществами, дающими под ультрафиолетовым светом зеленое свечение. Тип и характер свечения позволяет врачу лабораторной диагностики определить, с какими компонентами клетки связались антитела, а также примерно узнать их количество.

Иммуноблот-исследование позволяет определить наличие каждого типа антинуклеарных антител по отдельности. Чаще всего этот анализ назначается после положительного результата другого исследования для уточнения диагноза.

Ложноположительный результат анализа может быть вызван приемом некоторых групп лекарственных препаратов:

  • антидепрессанты;
  • антиаритмики (бисопролол, биосотал);
  • противосудорожные препараты (карбамазепин, фенитоин);
  • препараты для лечения атеросклероза (ловастатин, аторвастатин);
  • средства для понижения артериального давления.

Для лечения аутоиммунных заболеваний соединительной ткани применяются следующие группы препаратов:

  • кортикостероиды (позволяют уменьшить иммунный ответ организма и снизить концентрацию патологических антител);
  • антифиброзные препараты (уменьшаю явления склерозирования соединительной ткани);
  • иммуносупрессивные средства;
  • ангиопротекторы (препараты, защищающие сосуды);
  • нестероидные противовоспалительные средства.

Стоит заметить, что диагностика данной группы заболеваний сложна и требует ряда дополнительных исследований, кроме выявления антинуклеарных антител и их вида. Диагноз чаще всего не может быть установлен после однократного исследования крови.

источник

Синонимы: АНА, антинуклеарные антитела, антинуклеарный фактор, АНФ, антиядерные антитела, antinuclear antibodies, ANAs, Fluorescent Antinuclear Antibody, Antinuclear factor, ANF

Научный редактор: М. Меркушева, ПСПбГМУ им. акад. Павлова, лечебное дело.

Аутоиммунные заболевания, когда иммунная система атакует собственные ткани организма, считаются одними из самых опасных. Большинство аутоиммунных патологий относятся к хроническим и могут вызывать серьезные нарушения в работе внутренних органов и систем.

Одним из наиболее распространенных тестов, применяемых в диагностике аутоиммунных состояний, является обследование на антинуклеарные антитела (АНА), который проводится тремя способами:

  • методом иммуноферментного анализа ИФА (определяется общий уровень ANA),
  • методом реакции непрямой иммунофлуоресценции РНИФ (выявляется до 15 разновидностей ANA)
  • методом иммуноблоттинга.

Антинуклеарные (антиядерные) антитела представляют собой группу аутоантител, которые, вступая в реакцию с ядрами собственных клеток организма, разрушают их. Поэтому анализ на АНА считается достаточно чувствительным маркером в диагностике именно аутоиммунных нарушений, большая часть из которых сопровождается поражением соединительной ткани. Однако некоторые из видов антинуклеарных антител обнаруживаются и при заболеваниях не иммунной этиологии: воспалительных, инфекционных, злокачественных и пр.

Наиболее специфичны антинуклеарные антитела к следующим заболеваниям:

  • системная красная волчанка (СКВ) – заболевание кожи и соединительной ткани;
  • дерматомиозит – поражение кожи, мышц, скелетной ткани и т.д.;
  • узелковый периартериит – воспаление артериальной сосудистой стенки;
  • склеродермия – уплотнение и затвердение соединительной ткани;
  • ревматоидный артрит – поражение соединительной ткани суставов;
  • болезнь Шегрена – поражение ткани с железистыми проявлениями (снижение секрета слезных и слюнных желез).

Антинуклеарные антитела могут обнаруживаться более чем у 1/3 больных хроническим рецидивирующим гепатитом. Также уровень АНА может возрастать в случае:

  • инфекционного мононуклеоза (вирусное заболевание, сопровождается массовым поражением внутренних органов);
  • лейкоза (злокачественное заболевание крови) в острой и хронической форме;
  • гемолитической анемии (малокровие в результате разрушения эритроцитов);
  • болезни Вальденстрема (поражение костного мозга);
  • цирроза печени (хроническое заболевание, связанное с изменением структуры печеночной ткани);
  • малярии;
  • лепры (инфекционное поражение кожи);
  • хронической почечной недостаточности;
  • тромбоцитопении (снижение выработки тромбоцитов);
  • лимфопролиферативных патологий (опухоли лимфатической системы);
  • миастении (патологическая утомляемость мышц);
  • тимомы (опухоль из вилочковой железы).

Одновременно с определением антинуклеарных антител в процессе иммуноферментного анализа оценивается концентрация иммуноглобулинов: IgA, IgM, IgG. Обнаружение этих компонентов в крови может свидетельствовать о высокой вероятности развития ревматических заболеваний и коллагенозов.

В случае, когда связь между концентрацией антител и симптоматикой у больного не обнаруживается, само присутствие антиядерных антител в крови является диагностическим критерием и может повлиять на выбор лечения. Сохранение высокого уровня антинуклеарных антител при продолжительном курсе терапии свидетельствует о неблагоприятном прогнозе заболевания. Снижение значений АНА на фоне проводимого лечения может указывать на ремиссию (чаще) или приближающийся летальный исход (реже).

Также антинуклеарные антитела могут быть обнаружены у здоровых людей до 65 лет (3-5% случаев), после 65 (до 37%).

Исследовать антинуклеарный фактор целесообразно в следующих случаях:

  • Диагностика аутоиммунных и некоторых других системных заболеваний без ярко выраженной симптоматики;
  • Комплексная диагностика системной красной волчанки, ее формы и стадии, а также выбор тактики лечения и составление прогноза;
  • Диагностика лекарственной волчанки;
  • Профилактическое обследование пациентов с диагнозом красная волчанка;
  • Наличие специфических симптомов: продолжительная лихорадка без установленной причины, боли и ломота в суставах, мышцах, кожные высыпания, повышенная утомляемость и т.д.;
  • Наличие симптомов системных заболеваний: поражение кожи или внутренних органов (почки, сердце), артрит, эпилептические припадки и судороги, лихорадка, беспричинное повышение температуры и т.д.;
  • Назначение лекарственной терапии дизопирамидом, гидралазином, пропафеноном, прокаинамидом, ингибиторами АПФ, бета-блокаторами, пропилтиоурацилом, хлорпромазином, литием, карбамазепином, фенитоином, изониазидом, миноциклином, гидрохлортиазидом, статинами, поскольку есть риск развития лекарственной красной волчанки.

Помимо врача общей практики, направляют на анализ такие узкие специалисты, как

В норме антинуклеарные антител в плазме отсутствуют или определяются в небольшом количестве. Результат зависит от способа выполнения теста:

1. Тест делался методом ИФА

  • менее 0,9 пунктов – отрицательно (норма);
  • от 0,9 до 1,1 пунктов – сомнительно (рекомендуется сделать повторный тест через 7-14 дней);
  • более 1,1 пункта – положительно.

2. Для количественного анализа РНИФ нормой считается титр менее 1:160.
3. Иммуноблоттинг – норма «не обнаружено» (общее заключение / напротив каждого вида антител).

  • нарушение правил подготовки пациентом или алгоритма венепункции медработником;
  • прием лекарственных препаратов (карбамазепин, метилдопа, пеницилламин, токаинид, нифедилин и др.);
  • наличие у пациента уремии (отравление продуктами белкового обмена) может дать ложноотрицательный результат.

Обнаружение антинуклеарных антител может указывать на следующие заболевания:

  • системная красная волчанка;
  • панкреатит (воспаление поджелудочной железы) аутоиммунной природы;
  • сахарный диабет I типа;
  • аутоиммунные поражения щитовидной железы;
  • злокачественные поражения внутренних органов;
  • дерматомиозит;
  • аутоиммунный гепатит;
  • заболевания соединительной ткани;
  • болезнь Шегрена;
  • миастения;
  • склеродермия;
  • ревматоидный артрит;
  • диффузный интерстициальный фиброз (поражение легочной ткани в хронической форме);
  • синдром Рейно (ишемия мелких концевых артерий) и т.д.

Повышение титра АНА при количественном иммуноферментном анализе (РНИФ) говорит о:

  • Системной красной волчанке в активной стадии – титр повышен до 98%;
  • Болезни Крона (гранулематозное поражение пищеварительного тракта) – около 15%;
  • язвенном колите (воспаление слизистой толстой кишки) – от 50 до 80%;
  • склеродермии;
  • болезни Шегрена;
  • Болезни Рейно – до 20%;
  • синдроме Шарпа (смешанное заболевание соединительной ткани);
  • лекарственной волчанке.

Важно! При расшифровке анализа важно понимать, что отрицательный результат не исключает наличия аутоиммунных нарушений у пациентов с характерной симптоматикой. Положительный результат без клинической картины аутоиммунного процесса необходимо интерпретировать с учетом данных других лабораторных анализов.

Биоматериал для проведения ИФА на антинуклеарный фактор – сыворотка венозной крови.

  • Венепункция выполняется в утреннее время и натощак (с момента последнего приема пищи должно пройти минимум 8 часов). Пить чистую негазированную воду можно;
  • Непосредственно перед забором крови (за 2-3 часа) не рекомендуется курить и пользоваться никотинозаменителями (пластырь, спрей, жевательная резинка);
  • Накануне и в день процедуры нельзя употреблять алкогольные и энергетические напитки, волноваться и заниматься тяжелой физической работой;
  • За 15 дней до теста по согласованию с лечащим врачом отменяется прием лекарственных препаратов (антибиотики, противовирусные, гормоны и др.);
  • Для получения достоверного результата анализ желательно повторить через 2 недели.

Ответ ИФА можно ожидать в течение 1 суток после венепункции, а в экстренных ситуациях, когда обследование проводится по «cito» – около 3 часов.

  • Информация с сайтов лаборатории Инвитро и Хеликс;
  • Данные Национальной медицинской библиотеки США PubMed.

Другие анализы ревматологического скрининга

Важно! Все материалы носят справочный характер и ни в коей мере не являются альтернативой очной консультации специалиста.

Этот сайт использует cookie-файлы для идентификации посетителей сайта: Google analytics, Yandex metrika, Google Adsense. Если для вас это неприемлемо, пожалуйста, откройте эту страницу в анонимном режиме.

источник

Антитела к ядерным антигенам (ANA) – это гетерогенная группа аутоантител, направленных против компонентов собственных ядер. Они являются маркером аутоиммунных заболеваний и определяются для их диагностики, оценки активности и контроля за их лечением.

В рамках исследования определяются антитела классов IgG , IgA , IgM .

Антиядерные антитела, антинуклеарные антитела, антинуклеарный фактор, АНФ.

Antinuclear Antibody, ANA, Fluorescent Antinuclear Antibody, FANA, Antinuclear factor, ANF.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Антитела к ядерным антигенам (ANA) – это гетерогенная группа аутоантител, направленных против компонентов собственных ядер. Они выявляются в крови пациентов с разнообразными аутоиммунными заболеваниями, такими как системные заболевания соединительной ткани, аутоиммунный панкреатит и первичный билиарный цирроз, а также с некоторыми злокачественными новообразованиями. Исследование ANA используется в качестве скрининга аутоиммунных заболеваний у пациента с клиническими признаками аутоиммунного процесса (длительная лихорадка неясного генеза, суставной синдром, кожные высыпания, слабость и др.). Такие пациенты при положительном результате анализа нуждаются в дальнейшем лабораторном обследовании, включающем более специфичные для каждого аутоиммунного заболевания тесты (например, анти-Scl-70 при подозрении на системную склеродермию, антитела к митохондриям при подозрении на первичный билиарный цирроз). Следует отметить, что отрицательный результат исследования ANA не исключает наличия аутоиммунного заболевания.

Читайте также:  Ттг антитела к тпо анализ

ANA наиболее характерны для пациентов с системной красной волчанкой (СКВ). Они обнаруживаются у 98 % больных ею, что позволяет считать это исследование основным тестом для диагностики СКВ. Высокая чувствительность ANA в отношении СКВ означает, что повторные отрицательные результаты делают диагноз «СКВ» сомнительным. При этом отсутствие ANA полностью не исключает заболевания. У небольшой части больных ANA отсутствуют на момент появления симптомов СКВ, но возникают в течение первого года болезни. У 2 % больных антитела к ядерным антигенам не выявляются никогда. При отрицательном результате анализа у пациента с симптомами СКВ целесообразно провести более специфичные для СКВ лабораторные тесты, в первую очередь на антитела к двухцепочечной ДНК (анти-dsDNA). Выявление анти-dsDNA у пациента с клиническими признаками СКВ трактуется в пользу диагноза «СКВ» даже при отсутствии ANA.

СКВ возникает в результате комплекса иммунологических нарушений, развивающихся в течение длительного времени. Степень дисбаланса иммунной системы с течением болезни постепенно нарастает, что находит свое отражение в увеличении спектра аутоантител. Первый этап аутоиммунного процесса характеризуется наличием генетических особенностей иммунного ответа (например, определенных аллелей главного комплекса гистосовместимости, HLA) при отсутствии отклонений лабораторных исследований. На втором этапе в крови удается выявить аутоантитела, при этом клинических признаков СКВ нет. Антитела к ядерным антигенам, а также анти-Ro-, анти-La-, антифосфолипидные антитела наиболее часто выявляются на этом этапе. Обнаружение ANA ассоциировано с 40-кратным увеличением риска СКВ. Период между появлением ANA и развитием клинических симптомов бывает разным и составляет в среднем 3,3 года. Пациенты с положительным результатом анализа на ANA относятся к группе риска по развитию СКВ и нуждаются в периодическом наблюдении у ревматолога и в лабораторном обследовании. Третий этап аутоиммунного процесса характеризуется появлением симптомов болезни, при этом в крови удается обнаружить наиболее широкий спектр аутоантител, включая анти-Sm-антитела, антитела к двухцепочечной ДНК и рибонуклеопротеину. Таким образом, для получения полной информации о степени иммунологических нарушений при СКВ тест на ANA необходимо дополнять анализом на другие аутоантитела.

Течение СКВ варьируется от стойкой ремиссии до фульминантного люпус-нефрита. Чтобы дать прогноз заболевания, оценить его активность и эффективность лечения, используют различные клинические и лабораторные критерии. Так как ни один из тестов не позволяет однозначно предсказать обострение или поражение внутренних органов, мониторинг СКВ – это всегда комплексная оценка, включающая исследование ANA, а также других аутоантител и некоторых общеклинических показателей. На практике врач самостоятельно определяет набор тестов, наиболее точно отражающих, как изменяется течение заболевания у каждого пациента.

Особый клинический синдром представляет лекарственная волчанка. Она развивается на фоне приема некоторых лекарственных препаратов (чаще всего прокаинамида, гидралазина, некоторых ингибиторов АПФ и бета-блокаторов, изониазида, миноциклина, сульфасалазина, гидрохлортиазида и др.) и характеризуется симптомами, напоминающими СКВ. В крови большинства пациентов с лекарственной волчанкой также удается выявить ANA. При симптомах аутоиммунного процесса у пациента, принимающего эти препараты, рекомендуется анализ на ANA, чтобы исключить лекарственную волчанку. Особенность лекарственной волчанки заключается в исчезновении иммунологических нарушений и симптомов болезни после полной отмены препарата – в это время рекомендуется контрольное исследование ANA, и отрицательный результат подтверждает диагноз «лекарственная волчанка».

ANA выявляются у 3-5 % здоровых людей (в группе пациентов старше 65 лет эта цифра может достигать 10-37 %). Положительный результат у пациента без симптомов аутоиммунного процесса необходимо интерпретировать с учетом дополнительных анамнестических, клинических и лабораторных данных.

Для чего используется исследование?

  • Для скрининга аутоиммунных заболеваний, таких как системные заболевания соединительной ткани, аутоиммунный гепатит, первичный билиарный цирроз и др.
  • Для диагностики системной красной волчанки, оценки ее активности, составления прогноза и контроля за ее лечением.
  • Для диагностики лекарственной волчанки.

Когда назначается исследование?

При симптомах аутоиммунного процесса: длительной лихорадке неясного генеза, болях в суставах, кожной сыпи, немотивированной утомляемости и др.

При симптомах системной красной волчанки (лихорадка, поражения кожи), артралгий/артрита, пневмонита, перикардита, эпилепсии, поражения почек.

Каждые 6 месяцев или чаще при обследовании пациента с диагнозом «СКВ».

При назначении прокаинамида, дизопирамида, пропафенона, гидралазина и других лекарственных препаратов, ассоциированных с развитием лекарственной волчанки.

Референсные значения: отрицательно.

Причины положительного результата:

  • системная красная волчанка;
  • аутоиммунный панкреатит;
  • аутоиммунные заболевания щитовидной железы;
  • злокачественные новообразования печени и легких;
  • полимиозит/дерматомиозит;
  • аутоиммунный гепатит;
  • смешанное заболевание соединительной ткани;
  • миастения;
  • диффузный интерстициальный фиброз;
  • синдром Рейно;
  • ревматоидный артрит;
  • системная склеродермия;
  • синдром Шегрена;
  • прием таких лекарств, как прокаинамид, дизопирамид, пропафенон, некоторые ингибиторы АПФ, бета-блокаторы, гидралазин, пропилтиоурацил, хлорпромазин, литий, карбамазепин, фенитоин, изониазид, миноциклин, гидрохлортиазид, ловастатин, симвастатин.

Причины отрицательного результата:

Что может влиять на результат?

  • Уремия может приводить к ложноотрицательному результату.
  • Многие лекарственные препараты ассоциированы с развитием лекарственной волчанки и появлением ANA в крови.
  • Отрицательный результат у пациента с признаками аутоиммунного процесса не исключает наличия аутоиммунного заболевания.
  • ANA выявляются у 3-5 % здоровых людей (10-37 % в возрасте старше 65 лет).
  • Положительный результат у пациента без симптомов аутоиммунного процесса необходимо интерпретировать с учетом дополнительных анамнестических, клинических и лабораторных данных (риск СКВ у таких пациентов увеличен в 40 раз).
  • Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ)
  • Лейкоцитарная формула
  • Общий анализ мочи с микроскопией осадка
  • Креатинин в сыворотке
  • Альбумин в сыворотке
  • С3 компонент комплемента
  • Аланинаминотрансфераза (АЛТ)
  • Аспартатаминотрансфераза (АСТ)
  • Билирубин общий
  • Скрининг болезней соединительной ткани
  • Антитела к экстрагируемому ядерному антигену (ENA-скрин)
  • Антинуклеарные антитела, IgG (анти-Sm, RNP/Sm, SS-A, SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, dsDNA, CENT-B, Jo-1, к гистонам, к нуклеосомам, Ribo P, AMA-M2), иммуноблот
  • Антитела к двухцепочечной ДНК (анти-dsDNA), скрининг
  • Диагностика системной красной волчанки
  • Антифосфолипидные антитела IgG
  • Антифосфолипидные антитела IgM
  • Диагностика антифосфолипидного синдрома (АФС)

Кто назначает исследование?

Ревматолог, дерматовенеролог, нефролог, педиатр, врач общей практики.

  • Arbuckle MR, McClain MT, Rubertone MV, Scofield RH, Dennis GJ, James JA, Harley JB. Development of autoantibodies before the clinical onset of systemic lupus erythematosus. N Engl J Med. 2003 Oct 16;349(16):1526-33.
  • Bizzaro N, Tozzoli R, Shoenfeld Y. Are we at a stage to predict autoimmune rheumatic diseases? Arthritis Rheum. 2007 Jun;56(6):1736-44.
  • Guidelines for referral and management of systemic lupus erythematosus in adults. American College of Rheumatology Ad Hoc Committee on Systemic Lupus Erythematosus Guidelines. Arthritis Rheum. 1999 Sep;42(9):1785-96.
  • Fauci et al. Harrison’s Principles of Internal Medicine/A. Fauci, D. Kasper, D. Longo, E. Braunwald, S. Hauser, J. L. Jameson, J. Loscalzo; 17 ed. – The McGraw-Hill Companies, 2008.

источник

Тест ANA-Screen ELISA (IgG) предназначен для полуколичественного определения in vitro IgG-аутоиммунных антител человека к десяти различным антигенам: dsDNA, гистонам, рибосомальным Р-белкам, nRNP, Sm, SS-A, SS-B, Scl-70, Jo-1 и центромерам в сыворотке и плазме крови.

Один из распространенных скрининзовых тестов, используемых в диагности­ке системных поражений соединительной ткани.

Это качественное определение аутоантител класса IgG к экстрагируемым ядер­ным антигенам (гетерогенной группе белков и нуклеиновых кислот клеточного яд­ра). Обнаружение этих антител с большой вероятностью говорит об активной крас­ной волчанке (чувствительность 98%), они могут наблюдаться и при других систем­ных ревматических заболеваниях.

Определение антител к нуклеарным атигенам имеет большое значение для диагностики коллагенозов. При узелковом периартериите титр может увеличиваться до 1:100, при дерматомиозите – 1:500, при системной красной волчанке – 1:1000 и выше. При СКВ тест на выявление антинуклеарного фактора обладает высокой степенью чувствительности (89%), но умеренной специфичностью (78%) по сравнению с тестом на определение антител к нативной ДНК (чувствительность 38%), специфичность 98%). Корреляции между высотой титра и клиническим состоянием больного нет, однако выявление антител к нуклеарным антигенам служит диагностическим критерием и имеет важное патогенетическое значение. Антитела к нуклеарным антигенам высокоспецифичны для системной красной волчанки. Сохранение высокого уровня антител в течение длительного времени является неблагоприятным признаком. Снижение уровня предвещает ремиссию или (иногда) летальный исход.

При склеродермии частота выявления антител к нуклеарным антигенам составляет 60-80%, однако титр их ниже, чем СКВ. Между уровнем антинуклеарного фактора в крови и степенью тяжести заболевания не существует взаимосвязи. При ревматоидном артрите часто выделяют СКВ-подобные формы течения, поэтому довольно часто выявляются атитела к нуклеарным атигенам. При дерматомиозите атитела к ядерным атигенам в крови встречаются в 20-60% случаев (титр 1:500), при узелковом периартериите — в 17% (1:100), при болезни Шегрена — в 56% в сочетании с артритом и в 88% случаев – при комбинации с синдромом Гужеро-Шегрена. При дискоидной красной волчанке антинуклеарный фактор выявляется у 50% больных.

Кроме ревматических заболеваний, антитела к ядерным антигенам в крови обнаруживаются при хроническом активном гепатите (30-50% наблюдений).

Аутоантитела к нуклеарным антигенам могут выявляться в крови при инфекционном мононуклеозе, острых и хронических лейкозах, приобретенной гемолитической анемии, болезни Вальденстрема, циррозе печени, биллиарном циррозе печени, гепатитах, малярии, лепре, хронической почечной недостаточности, тромбоцитопениях, лимфопролиферативных заболеваниях, миастении и тимомах.

Почти в 10% случаев антинуклеарный фактор обнаруживается у здоровых людей, однако титр у них не превышает 1:50.

Диагностика и дифференциальная диагности­ка системных поражений соединительной ткани (прежде всего, системной красной волчанки).

Присутствие антинуклеарных антител в низких титрах может быть неспецифическим признаком патологии соединительной ткани, их можно обнаружить также у 1 % здоровых людей (у пожилых людей старше 80 лет они наблюдаются чаще). Исследование на антинуклеарные антитела используют в числе первых диагностических шагов при подозрении на системное аутоиммунное заболевание. Комплексное определение антиядерных антител и анти-ДНК антител существенно увеличивает специфичность обследования больных системной крас­ной волчанкой.

источник

Антинуклеарные антитела (ANA, АНА) – специфические иммуноглобулины, связывающиеся с компонентами клеточных ядер собственного организма. Определяются в плазме при ревматических болезнях, первичном билиарном циррозе, злокачественных опухолях, инфекциях. Исследование применяется для диагностики и дифференциации аутоиммунных заболеваний в рамках скрининга и при характерных клинических признаках. Забор крови производится из вены. Анализ выполняется тремя способами: иммуноферментным методом (определяется общий уровень ANA), методом иммуноблоттинга и реакции непрямой иммунофлуоресценции (выявляется до 15 разновидностей ANA). В норме результат отрицательный. Срок проведения теста при ИФА – 1 день, при иммуноблоттинге, РНИФ – 8 дней.

Антинуклеарные антитела (ANA, АНА) – специфические иммуноглобулины, связывающиеся с компонентами клеточных ядер собственного организма. Определяются в плазме при ревматических болезнях, первичном билиарном циррозе, злокачественных опухолях, инфекциях. Исследование применяется для диагностики и дифференциации аутоиммунных заболеваний в рамках скрининга и при характерных клинических признаках. Забор крови производится из вены. Анализ выполняется тремя способами: иммуноферментным методом (определяется общий уровень ANA), методом иммуноблоттинга и реакции непрямой иммунофлуоресценции (выявляется до 15 разновидностей ANA). В норме результат отрицательный. Срок проведения теста при ИФА – 1 день, при иммуноблоттинге, РНИФ – 8 дней.

В норме погибшие клетки организма фагоцитируются макрофагами. При аутоиммунном заболевании происходит не только утилизация клеточных компонентов (ядрышек, гистонов, оболочек ядер), но и передача информации о них в рамках иммунного ответа. B-лимфоциты запускают выработку антител к ядерным антигенам. Образующиеся иммунные комплексы закрепляются на базальных мембранах сосудов и органов, активируется система комплемента, развивается местное воспаление. Исследование ANA с помощью иммуноферментного анализа обладает невысокой специфичностью, но экономично по времени и трудовым затратам. Иммуноблоттинг и метод РНИФ дают высокоспецифичную информацию, но их распространение ограничивается трудоемкостью и высокой стоимостью процедуры.

Тест на антинуклеарные антитела назначается при аутоиммунных патологиях. Показания к суммарному определению IgG, IgM, IgA с помощью ИФА:

  • Скрининг коллагенозов. Тест используется для обследования людей из групп риска, при неспецифических и слабовыраженных симптомах: быстрой утомляемости, лихорадке, головных болях. Положительный результат является основанием для выполнения более точных и трудоемких диагностических процедур.
  • Диагностика СКВ. Анализ назначается пациентам с характерными клиническими проявлениями: мышечной и суставной болью, кожными высыпаниями, одышкой, нарушениями сердечного ритма, отеками.
  • Мониторинг СКВ. Определение АТ периодически выполняется для уточнения активности патологии, составления прогноза, оценки эффективности лечения.
  • Диагностика лекарственной волчанки. Тест проводится больным, которые принимают препараты, способные спровоцировать лекарственный волчаночный синдром.

Определение антинуклеарных антител методами иммуноблоттинга и РНИФ используется более узконаправленно. Показания:

  • Дифференциация аутоиммунных заболеваний. Исследование назначается для выявления СКВ, синдрома Шарпа, синдрома Шегрена, склеродермии, полимиозита, дерматомиозита, ревматоидного артрита, первичного билиарного цирроза, первичного склерозирующего холангита. Основанием служат высокие показатели АТ к ядерным антигенам (ИФА), к экстрагируемому ядерному антигену, к ДНК, к нуклеосомам в сочетании с характерной клинической картиной.
  • Мониторинг ревматических болезней. Тест выполняется для выявления обострений, оценки течения и эффективности терапии артритов, остеоартроза, васкулитов, диффузных заболеваний соединительной ткани.

Уровень АНА определяется в венозной крови. Ее забор выполняется утром, специальной подготовки не требуется, но стоит придерживаться общих правил:

  1. Выдержать период голода 4-6 часов. Пить воду разрешено без ограничений.
  2. Ограничить употребление жирной пищи накануне вечером, в течение дня отказаться от приема алкогольных напитков, выполнения интенсивных физических нагрузок. Избегать влияния стрессовых факторов.
  3. За 7-10 дней сообщить врачу об используемых лекарствах. Их действие будет учтено при интерпретации результата.
  4. Физиотерапевтические процедуры, инструментальные обследования выполнять после сдачи крови.
  5. За 30 минут воздержаться от курения, умеренных физических нагрузок.
Читайте также:  Ветрянка анализ на антитела lgg

Кровь забирается из локтевой вены, доставляется в лабораторию в герметичной пробирке. Предварительно из первичного биоматериала выделяют сыворотку. При определении общего количества антинуклеарных антител выполняется иммуноферментный анализ, при исследовании их разновидностей – иммуноблоттинг, реакция непрямой иммунофлуоресценции. В первом случае результат подготавливается за 1 день, во втором – за 8 дней.

В норме АНА в плазме отсутствуют или определяются в небольшом количестве, не влияя на функционирование тканей. Отрицательный результат выражается по-разному в зависимости от способа выполнения теста:

  • ИФА – 0-1,0 Ед, «отрицательно».
  • Иммуноблоттинг – «не обнаружено» (общее заключение / напротив каждого вида АТ).
  • РНИФ – титр менее 1:160.

На итоговый показатель не влияют физиологические факторы. Нормальный результат не исключает заболевание, но снижает вероятность патологии.

Интерпретация повышенного показателя теста зависит от метода исследования. При определении уровня суммарных ANA причиной увеличения их концентрации являются:

  • Аутоиммунные заболевания. Положительный результат выявляет СКВ, ревматоидный артрит, синдром Шегрена, склеродермию, сахарный диабет 1 типа, полимиозит, дерматомиозит, миастению, поражение щитовидной железы, печени.
  • Инфекции. Повышение значения определяется у людей с туберкулезом, вирусным гепатитом, подострым бактериальным эндокардитом, ВИЧ-инфекцией.
  • Онкопатологии. Образование АНА наиболее характерно для рака легких и печени.
  • Прием лекарственных препаратов. Показатель теста растет при использовании ингибиторов АПФ, бета-блокаторов, гидралазина, пропилтиоурацила, хлорпромазина, лития, карбамазепина, фенитоина, изониазида, миноциклина, гидрохлортиазида, ловастатина, симвастатина.

При анализе с определением вида антинуклеарных антител интерпретируется повышение отдельных показателей. При иммуноблоттинге выполняется разделение видов АТ. При РНИФ преобладающие АТ выявляются по характеру свечения. Причинами отклонения результатов от нормы могут быть СКВ, синдром Шарпа, синдром Шегрена, склеродермия, ревматоидный артрит, неонатальный волчаночноподобный синдром, полимиозит, изолированный синдром Рейно, волчаночный нефрит, CREST-синдром, полимиозит, дерматомиозит, лекарственная волчанка, билиарный цирроз.

Анализ на антинуклеарные антитела широко распространен в клинической практике как инструмент для скрининга, дифференциальной диагностики и мониторинга аутоиммунных патологий. Способы выявления АНА адаптируют исследование под разные задачи. За интерпретацией результата и назначением лечения нужно обратиться к врачу – ревматологу, дерматовенерологу, нефрологу.

источник

  • Диагностика патологии соединительной ткани 4405 руб. Болезни соединительной ткани (коллагенозы) — группа разнообразных заболеваний, общим проявлением которых является диффузное воспалительное и дегенеративное поражение соединительной ткани в различных органах и системах (суставы, кожные покровы, мышцы, кровеносные . Заказать

Не менее 3 часов после последнего приема пищи. Можно пить воду без газа.

Антинуклеарные антитела (АНА) — гетерогенная группа аутоантител, реагирующих с различными компонентами ядра. У пациентов с положительными результатами определения АНА рекомендуется проведение подтверждающих тестов — определение специфических АНА к отдельным ядерным и цитоплазматическим антигенам (dsDNA, Sm, SS-A/Ro, SS-B/La, Scl-70, РНП).

Определение АНА важно для оценки мониторинга течения ювенильного хронического артрита в сочетании с ювеитом и вторичного феномена Рейно, ассоциированного с системными ревматическими заболеваниями.

Референсные значения (вариант нормы):

Параметр Референсные значения Единицы измерения
Антитела к ядерным антигенам, скрининг (ANA screen)
  • 1.2 — обнаружено
индекс позитивности
Повышение значений
  • Системная красная волчанка
  • Лекарственная волчанка
  • Смешанное заболевание соединительной ткани
  • Синдром Шегрена
  • Склеродермия
  • CREST-синдром
  • Полимиозит, дерматомиозит
  • Ревматоидный артрит

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом ФЗ № 323 «Об основах защиты здоровья граждан в Российской Федерации», должны производиться врачом соответствующей специализации.

» [«serv_cost»]=> string(3) «850» [«cito_price»]=> NULL [«parent»]=> string(2) «24» [10]=> string(1) «1» [«limit»]=> NULL [«bmats»]=> array(1) array(3) string(1) «N» [«own_bmat»]=> string(2) «12» [«name»]=> string(31) «Кровь (сыворотка)» > > [«within»]=> array(1) array(5) string(49) «diagnostika-patologii-sojedinitelnoj-tkani_300025» [«name»]=> string(81) «Диагностика патологии соединительной ткани» [«serv_cost»]=> string(4) «4405» [«opisanie»]=> string(1507) «

Болезни соединительной ткани (коллагенозы) — группа разнообразных заболеваний, общим проявлением которых является диффузное воспалительное и дегенеративное поражение соединительной ткани в различных органах и системах (суставы, кожные покровы, мышцы, кровеносные сосуды и др.). К этим заболеваниям относятся ревматоидный артрит, системная красная волчанка, склеродермия, дерматомиозит, узелковый периартериит. Женщины болеют коллагенозами примерно в 4 раза чаще, чем мужчины.

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом ФЗ № 323 «Об основах защиты здоровья граждан в Российской Федерации», должны производиться врачом соответствующей специализации.

» [«catalog_code»]=> string(6) «300025» > > >

Биоматериал и доступные способы взятия:
Тип В офисе
Кровь (сыворотка)
Подготовка к исследованию:

Не менее 3 часов после последнего приема пищи. Можно пить воду без газа.

Антинуклеарные антитела (АНА) — гетерогенная группа аутоантител, реагирующих с различными компонентами ядра. У пациентов с положительными результатами определения АНА рекомендуется проведение подтверждающих тестов — определение специфических АНА к отдельным ядерным и цитоплазматическим антигенам (dsDNA, Sm, SS-A/Ro, SS-B/La, Scl-70, РНП).

Определение АНА важно для оценки мониторинга течения ювенильного хронического артрита в сочетании с ювеитом и вторичного феномена Рейно, ассоциированного с системными ревматическими заболеваниями.

Референсные значения (вариант нормы):

Параметр Референсные значения Единицы измерения
Антитела к ядерным антигенам, скрининг (ANA screen)
  • 1.2 — обнаружено
индекс позитивности
Повышение значений
  • Системная красная волчанка
  • Лекарственная волчанка
  • Смешанное заболевание соединительной ткани
  • Синдром Шегрена
  • Склеродермия
  • CREST-синдром
  • Полимиозит, дерматомиозит
  • Ревматоидный артрит

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом ФЗ № 323 «Об основах защиты здоровья граждан в Российской Федерации», должны производиться врачом соответствующей специализации.

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Copyright ФБУН Центральный НИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 1998 — 2019

Центральный офис: 111123, Россия, Москва, ул. Новогиреевская, д.3а, метро «Шоссе Энтузиастов», «Перово»
+7 (495) 788-000-1, info@cmd-online.ru

! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

источник

Номенклатура МЗРФ (Приказ №804н): A12.06.010.003 «Определение содержания антител к антигенам ядра клетки и ДНК (ANA-скрининг)»

Биоматериал: Сыворотка крови

Срок выполнения (в лаборатории): 2 р.д. *

Антинуклеарные антитела — это группа аутоантител, реагирующих с нуклеиновыми кислотами и связанными с ними белками, компонентами ядра клеток органов и тканей. Особенностью этих аутоантител является их способность повреждать клетки соединительной ткани. Поэтому определение антинуклеарного фактора — это тест на системные заболевания соединительной ткани. Одним из наиболее распространенных системных заболеваний соединительной ткани является системная красная волчанка (СКВ). Поэтому основная цель исследования ANA — исключить СКВ, поскольку при этом заболевании ANA появляются в сыворотке 95% больных в течение 3 месяцев после его начала.

  • Диагностика ревматических заболеваний
  • Хронический активный гепатит
  • Инфекционный мононуклеоз, острый и хронический лейкоз, приобретенная гемолитическая анемия, болезнь Вальденстрема, цирроз печени, билиарный цирроз печени, гепатиты, малярия, лепра, хрониеская почечная недостаточность, тромбоцитопении, лимфопролиферативные заболевания, миастения и тимомы

Взятие крови проводится натощак или не ранее, чем через 4 часа после последнего приема пищи.

У здоровых людей титр антител к нуклеарным антигенам в сыворотке крови ниже 1 : 50.

Определение антител к нуклеарным антигенам имеет большое значение для диагностики ревматических заболеваний. При узелковом периартериите титр (при использовании скрининговых методов) может увеличиваться до 1 : 100, при дерматомиозите — 1 : 500, при системной красной волчанке — 1 : 1000 и выше. При СКВ тест на выявление антинуклеарного фактора обладает высокой степенью чувствительности (89%), но умеренной специфичностью (78%) по сравнению с тестом на определение антител к нативной ДНК (чувствительность 38%, специфичность 98%). Корреляции между высотой титра и клиническим состоянием больного нет, однако выявление антител к нуклеарным антигенам служит диагностическим критерием и имеет важное патогенетическое значение. Антитела к нуклеарным антигенам высокоспецифичны для СКВ. Сохранение высокого уровня антител в течение длительного времени является неблагоприятным признаком. Снижение уровня предвещает ремиссию или (иногда) летальный исход.

При склеродермии частота выявления антител к нуклеарным антигенам составляет 60-80%, однако титр их ниже, чем при СКВ. Между уровнем антинуклеарного фактора в крови и степенью тяжести заболевания не существует взаимосвязи. При ревматоидном артрите часто выделяют СКВ-подобные формы течения, поэтому довольно часто выявляются антитела к нуклеарным антигенам. При дерматомиозите антитела к ядерным антигенам в крови встречаются в 20-60% случаев (титр до 1 : 500), при узелковом периартериите — в 17% (1 : 100), при болезни Шегрена — в 56% в сочетании с артритом и 88% случаев при комбинации с синдромом Гужеро-Шегрена. При дискоидной красной волчанке антинуклеарный фактор выявляется у 50% больных.

Кроме ревматических заболеваний, антитела к ядерным антигенам в крови обнаруживают при хроническом активном гепатите (в 30-50% наблюдений). Титр иногда достигает 1 : 1000. Аутоантитела к нуклеарным антигенам могут выявляться в крови при инфекционном мононуклеозе, острых и хронических лейкозах, приобретенной гемолитической анемии, болезни Вальденстрема, циррозе печени, билиарном циррозе печени, гепатитах, малярии, лепре, хрониеской почечной недостаточности, тромбоцитопениях, лимфопролиферативных заболеваниях, миастении и тимомах.

Почти в 10% случаев антинуклеарный фактор обнаруживается у здоровых людей, однако титр у них не превышает 1 : 50.

Целый ряд лекарственных препаратов может приводить к ложноположительному повышению уровня ANA: аминосалицилаты, карбомазепин, хлопромазин, изониазид, альдомет, метилдопа, прокаинамид, иодиды, оральные контрацептивы, тетрациклины, тиазидные диуретики, сульфаниламиды и др.

Ложноповышенные титры антител к нуклеарным антигенам могут быть получены у пациентов, получающих B-адреноблокаторы, карбамазепин, метилдопа, нифедипин, гидралазин, нитрофурантоин, пеницилламин, вследствие способности этих препаратов вызывать интерференцию при проведении исследования.

Адреса медицинских центров, в которых можно заказать исследование, уточняйте по телефону 8-800-100-363-0
Все медицинские центры СИТИЛАБ в г. Москва >>

Код Наименование Цена Заказ
11-10-001 Общий анализ крови (CBC/Diff — 5 фракций лейкоцитов) от 1 р.д. 370.00 р.
11-10-003 СОЭ по Вестергрен от 1 р.д. 230.00 р.
22-20-100 С-реактивный белок (высокочувствительный) от 1 р.д. 520.00 р.
22-20-102 Ревматоидный фактор от 1 р.д. 520.00 р.
24-20-003 Мочевая кислота от 1 р.д. 280.00 р.

* На сайте указан максимально возможный срок выполнения исследования. Он отражает время выполнения исследования в лаборатории и не включает время на доставку биоматериала до лаборатории.
Приведенная информация носит справочный характер и не является публичной офертой. Для получения актуальной информации обратитесь в медицинский центр Исполнителя или call-центр.

источник

Иммунная система человека – уникальный слаженный механизм, способный реагировать на любые внешние внедрения патогенных факторов, тем самым защищая организм от целого ряда заболеваний. Но как известно, из каждого правила есть исключения, и в данном случае они выглядят как реагирование иммунитета на собственные клетки, что получило название аутоиммунные болезни.

При данных патологиях идет выработка антител, атакующих здоровые клетки, поражая или уничтожая их. В результате происходит нарушение функционирования отдельных тканевых структур и даже органов. Такие патологии из-за своей распространенности и вовлеченности в процесс нескольких органов или систем получили название системных заболеваний.

При появлении современных методов лабораторной диагностики, одним из которых является АНФ анализ крови на поиск антинуклеарного фактора, позволяющий выявить антинуклеарные (антиядерные) антитела и определить причину патологии. Данный показатель является одним из маркеров системных заболеваний соединительной ткани (СЗСТ), принятым как «золотой стандарт» данного вида исследований.

Как уже описывалось выше, патогенез данных патологий берет свое начало со сбоев функционала иммунной системы, и выработке защитных антител к определенным компонентам собственных клеток. Такие клетки за особенность своего происхождения имеют второе название – аутоантитела. В процессе иммунного сбоя они вступают в контакт с белковыми соединениями ядра, нуклеиновыми кислотами и антигенами цитоплазмы, что приводит к появлению симптомов воспалительных заболеваний, таких как:

  • структурные изменения тканей и органов;
  • выраженное необоснованное утомление;
  • болевые ощущения в мышцах и суставах;
  • поражение кожных покровов;
  • снижение веса тела и другие.

Антинуклеарные антитела (АНА) могут образовываться при довольно обширном спектре аутоиммунных патологий, но наибольшая вероятность их появления при системной красной волчанке (СКВ).

Справка! По статистике, более чем у 90% пациентов, страдающих СЗСТ, определяется патологическая выработка подобных антител. На текущий момент изучено около 200 их видов, которые получили обобщенное название – антинуклеарный фактор. В основном они представлены иммуноглобулинами класса G, но иногда встречаются М или А.

Читайте также:  Токсоплазмоз антитела igg количественный анализ

Прежде чем углубляться в особенности проведения исследования на АНФ, стоит отметить, что методика была изобретена и начала применяться довольно давно – в 60-х годах прошлого века. Но широкое распространение в диагностической практике получила лишь в начале 80-х годов XX века после усовершенствования. В качестве субстрата еще в 1961 году ученый Beck применял клетки лабораторных животных, и только в 1982 году Tan воспользовался перевиваемой клеточной линией человека HEp-2 для поиска АНФ.

Хотя основная цель использования данного теста – это установление диагноза красная волчанка, все же он считается универсальной методикой и для других коллагенозов (СЗСТ). К последним относятся:

Одной из наиболее удобных, и поэтому чаще всего используемых методик для определения в крови пациентов антинуклеарного фактора, считается непрямая иммунофлюорестенция. Исследование проводится при нанесении сыворотки крови на клетки перевиваемой эпителиоидной линии аденокарциномы гортани человека НЕр-2 (содержащих определенный ряд ядерных антигенов) с применением меченого коньюгата (соединения) с антителами.

Этот выбор сделан неслучайно – клетки НЕр-2 – очень удобный субстрат для изучения биоматериала. Они имеют довольно крупные ядра, и при высадке на лабораторных стеклах растут однослойно. В качестве субстрата можно использовать и другие клеточные линии человека, но удачная морфология и культивирование однозначно делает именно НЕр-2 – незаменимым материалом.

В ходе диагностики при инкубации сыворотки обследуемого с клеточным субстратом, при наличии АНА происходит их соединение с соответствующими нуклеарными антигенами. Места связки АНФ с НЕр-2 определяются при использовании меченого флюоресцеином (красителем) коньюгата. Для выполнения оценки результатов произошедших реакций применяется люминесцентный микроскоп, позволяющий дифференцировать характер и степень получившихся связок.

Справка! HEp-2 человека, в отличие от тканевых криосрезов животных, имеют более высокую скорость деления клеток, что дает возможность обнаружить антитела к антигенам, которые экспрессируются лишь при делении. Также в субстрате человека отсутствует клеточный матрикс, снижающий качество визуализации изучаемого свечения.

При расшифровке материалов всегда необходимо брать во внимание, что в спектр АНА входит довольно большая группа аутоантител к нуклеопротеидам, рибонуклеопротеидам, гистонам, ДНК и другим структурным единицам ядра. Из этого следует, что функционал теста направлен на выявление антител к составляющим ядра и цитоплазмы, которые изначально были определены при СКВ.

Позже диагностические возможности исследования были расширены, что обусловлено определением подобных антител при других СЗСТ. В скрининговых методиках для обнаружения суммарных АНА, как правило, применяется определенный набор антигенов, принятых за основные маркеры аутоиммунных ЗСТ.

К ним относятся антитела класса IgG:

  • SS-A (Ro) – ядерные рибонуклеопротеины;
  • SS-B (La) – ядерные белки;
  • Scl-70 – белок-фермент (топоизомераза-1);
  • нативная двухцепочная ДНК;
  • RNP/Sm – комплекс антигенов;
  • Jo-1 – фермент РНК – синтетаза;
  • CENP-B (центромера)
  • Hep-2 клетки;
  • митохондрии (PDC).

АНА практически безвредны для организма – они не способны проникать в живые ткани. Но в отдельных случаях могут соединяться в комплексы антиген-антитело, что в результате приводит к структурным разрушениям тканей. Одним из таких примеров является поражение паренхимы почек при СКВ. Так как при СЗСТ в процесс вовлечено несколько органов, то выявление АНА не является первостепенно важным для диагностики, а считается лишь подтверждением определенной симптоматики.

После проведения всех необходимых процедур – взятия биоматериала и его лабораторной подготовке к исследованию, проводится оценка и интерпретация результатов. Сюда входит определение титра (концентрации) антител и типа свечения. Значимым параметром для диагностики является показатель концентрации свыше 1:160. К примеру, при обострении ревматизма он может превышать отметку 1:640, тогда как в ремиссионном периоде наблюдается понижение до 1:160–1:320.

Тип свечения показывает мишени АНА, что является особо важным клиническим моментом, направляющим последующие действия врача в назначении диагностических мероприятий. По характеру свечения ядер при использовании НЕр-2 определится свыше 20 вариантов ядерного окрашивания, в зависимости от видов присутствующих антител в биоматериале. К основным из них относятся следующие типы свечения.

  • Периферическое. Свечение свидетельствует о наличии анти-ДНК-антител, что подтверждает СКВ. Основным видом антигенов для периферического типа являются гистоновые белки и ДНК.
  • Диффузное (гомогенное). Такое свечение наблюдается при СКВ, сопровождающейся поражением структуры почек и похожих ЗСТ, нефрите, склеродермии, а также лекарственно-индуцированной СКВ. Антигены при данном типе представлены дсДНК, гистонатами и нуклеосомами.
  • Ядрышковое (нуклеарное). Данный тип характерен для системной формы склеродермии, и определяется при присутствии у пациентов антител – PHК полимераза 1, PM/Scl, NOR, U3RNP.
  • Цитоплазматическое. Подобный тип подсвечивания указывает на наличие АНА к тРНК–синтетазам, а именно Jo-1, и наблюдается при полимиозите.
  • Гранулярное. Определяется при синдроме Шегрена, инфекционном мононуклеозе, смешанном ЗСТ (Sharp-синдром, MCTD) и лекарственном волчаночном синдроме. Преимущественно присутствующие антигены для этого типа – SS-A, SS-B, Sm, U1-RNP, и PCNA.
  • Крупногранулярное. Характерно для смешанных ЗСТ и, по мнению многих ученых, связано с наличием антигена RNP.
  • Мелкогранулярное. Определяется присутствие антител, образующихся против рибонуклеиновых белков – АSSP (АЦЦП), SS-A, SS-B и других. Такие антитела характерны для СКВ, также ее специфических кожных формах, ревматоидном артрите, склеродермии, полимиозите, синдроме Шегрена.
  • Центромерное. Данный тип в основном отмечается при склеродермии. Хотя в одном образце крови, особенно у обследуемых с диффузными ЗСТ, в отделенной плазме могут определяться антитела к различным ядерным компонентам.
  • Точечные вкрапления в ядре. Этот тип преимущественно выявляется при болезнях печени аутоиммунного характера. При нем могут сочетаться несколько флюоресцентных типов, к примеру, ядрышковый и мелкогранулярный, что обусловлено антителами к Scl-70.

На достоверность полученных в ходе исследования данных могут повлиять всего несколько факторов, способных показать и ложноположительный и ложноотрицательный результат. Так, неправдоподобные ответы со сдвигом вверх наблюдаются у пожилых пациентов в возрасте от 60 лет (по статистике в 10–37% случаях) и при приеме медпрепаратов, вызывающих лекарственную волчанку (некоторые антибиотики, контрацептивы, сульфаниламиды, тиазидные диуретики).

Отмечено, что у 5–55% особ женского пола, имеющих грудные имплантаты, повышается уровень концентрации АНА. К ошибочной диагностике со сдвигом вниз может привести употребление глюкокортикоидных препаратов – Преднизолона, Метипреда или Дексаметазона.

источник

Антитела к ядерным антигенам, или ANA, представляет собой гетерогенную группу аутоантител, которые направлены против элементов собственных ядер. Выявляются они маркером заболеваний аутоиммунного типа и определяются для установки диагноза, оценки активности патологии и контроля терапии.

В рамках исследования обнаруживаются антитела таких классов, как IgM, IgA, IgG.

ANA, или антитела к ядерным антигенам, входят в гетерогенную группу аутоантител, которые направлены против элементов собственных ядер. Определяются они в крови пациентов с теми или иными аутоиммунными болезнями, например, системными патологиями соединительной ткани, первичный билиарным циррозом, аутоиммунным панкреатитом и рядом новообразований злокачественного характера. Анализ на антитела к ядерному антигену вирусов ANA применяется в виде скрининга аутоиммунных патологий у больных с клиническими симптомами аутоиммунного процесса (неясная по происхождению длительная лихорадка, высыпания на коже, слабость, суставной синдром и т. д.).

Такие пациенты нуждаются при положительном результате исследования в лабораторном исследовании в дальнейшем, включающем более специфичные тесты для каждой аутоиммунной болезни (к примеру, анти-Scl-70, если подозревается склеродермия системного типа, антитела к митохондриям при возможном билиарном первичном циррозе). Необходимо сказать, что отрицательный результат анализа не исключает присутствия аутоиммунной болезни.

Антитела к ядерным антигенам определяются у здоровых людей (3-5 %), если же пациенты старше 65 лет, такой показатель достигает значения от 10 до 37 %. У пациента без признаков аутоиммунного процесса нужно интерпретировать положительный результат на основании дополнительных лабораторных, клинических и анамнестических сведений.

Исследование на антитела к ядерным антигенам используется с определенной целью:

  • В качестве скрининга аутоиммунных патологий, например, системных болезней соединительной ткани, первичного билиарного цирроза, аутоиммунного гепатита и т. д.
  • Для диагностики лекарственной волчанки.
  • Для диагностики красной системной волчанки, составления прогноза, оценки активности болезни и контроля ее лечения.

Назначается исследование при следующих признаках аутоиммунного процесса:

  • продолжительной лихорадке неопределенного происхождения, суставных болях, сыпи на коже, необоснованной утомляемости;
  • при признаках красной системной волчанки (кожные поражения, лихорадка), артрита/артралгий, поражения почек, эпилепсии, перикардита, пневмонита;
  • каждые полгода или чаще во время обследования человека с диагнозом СКВ;
  • если назначаются «Гидралазин», «Пропафенон», «Дизопирамид», «Прокаинамид» и другие лекарственные средства, ассоциированные с процессом развития лекарственной волчанки.

Очень часто выявляют антитела к ядерному антигену вируса Эпштейна-Барр.

Анализируемый биологический материал: кровь пациента. Специальной подготовки к анализу не требуется, однако нужно выяснить, не пьет ли пациент какие-либо лекарственные средства, которые могут исказить результаты анализа. В их числе: «Пенницилламин», «Токаинид», «Нитрофурантоин», «Метилдопа», «Нифедипин», «Ловастатин», «Карбамазепин», «Гидралазин», β–адреноблокирующие вещества.

Если употребление таких препаратов зафиксировано, нужно отметить это в бланке исследования.

В числе самых современных методов анализа антинуклеарных антител выделяется способ иммуноферментного анализа или ИФА. Антиядерные тела при нем обнаруживаются с применением конкретных ядерных антигенов, которые фиксируются на разных твердых носителях.

Анализ антинуклеарных антител способом непрямой иммунофлюоресценции на клеточных средствах является более информативным по сравнению с тестом ИФА на антинуклеарные антитела. Его результат способен как подтвердить присутствие антиядерных антител, так и определить конечный титр антител, помимо прочего, описать особенности свечения диагностированных антител, связанные напрямую с видом тех ядерных антигенов, против которых направлены последние.

Референсные значения анализа на антитела к ядерным антигенам ANA: отрицательные. Положительный результат может быть по следующим причинам:

  • аутоиммунный панкреатит;
  • красная системная волчанка;
  • злокачественные новообразования легких и печени;
  • аутоиммунные болезни щитовидной железы;
  • дерматомиозит/полимиозит;
  • смешанная патология соединительной ткани;
  • аутоиммунный гепатит;
  • миастения;
  • синдром Рейно;
  • интерстициальный диффузный фиброз;
  • синдром Шегрена;
  • системная склеродермия;
  • ревматоидный артрит;
  • употребление таких препаратов, как «Пропафенон», «Дизопирамид», «Прокаинамид», некоторые ингибиторы АПФ, «Гидралазин», бета-блокаторы, «Хлорпромазин», «Пропилтиоурацил», «Симвастатин», «Ловастатин», «Гидрохлортиазид», «Миноциклин», «Изониазид», «Фенитоин», «Карбамазепин», «Литий».

Причины отрицательного результата анализа: норма или нарушения при взятии биологического материала.

Вирус Эпштейна-Барр, входящий в тип 4 группу герпеса, способен вызвать заболевание инфекционным мононуклеозом. А методом диагностики его наличия являются антитела к ядерному антигену данного вируса IgG (количественный метод, анти-EBNA IgG).

Определяет антитела класса IgG, которые являются показателем инфекции, перенесенной пациентом. Основные показания к применению: диагностика болезней ассоциированных с вирусом Эпштейн-Барр (онкологические патологии, хронические инфекции).

Антитела к ядерному антигену вируса Эпштейна-Барр IgG класса чаще всего определяются в крови в период от трех до двенадцати месяцев после инфицирования (примерно через 4-6 месяцев), то есть на поздних стадиях после контакта с инфекцией и долгое время (до нескольких лет) они могут обнаруживаться после болезни. Концентрация антител возрастает во время выздоровления. Если отсутствуют антитела к такому антигену при определении антител к капсидному белку (анти-VCA IgM) вируса Эпштейн-Барр, скорее всего, это свидетельствует о текущей инфекции.

Кровь после венепункции берут в пустую пробирку для получения сыворотки. Участок венепункции придавливают скатанной в шарик ватой, пока не остановится кровотечение. Если в месте венепункции образовалась гематома, то назначаются согревающие компрессы.

Отрицательный результат – от 0 до 16 0Ед/мл. Сомнительный – от 16 до 22. Положительный – свыше 22 0Ед/мл.

При отклонении от нормальных значений, положительный результат означает:

  • инфицирование вирусом Эпштейн-Барр (обнаружение антител в поздние сроки);
  • перерастание в хроническую форму болезни или этап реактивации заболевания.

Отрицательный результат говорит о следующем:

  • ранний период инфицирования (сниженный титр антител);
  • нет инфицирования вирусом Эпштейн-Барр.

Показания к исследованию: диагностика гепатита В, перенесенного ранее или наблюдение за характером течения патологии.

Метод исследования: хемилюминисцентный метод.

Значение референтное: негативный.

Происходит выработка антител к ядерному антигену гепатита В. На основании этого выделяются: anti-HBs поверхностные антитела (к HBsAg антигенам, которые формируют оболочку вируса); anti-HBc ядерные антитела (к HBc антигену, который находится в ядерном белке вируса).

Не всегда антитела в крови свидетельствуют о наличии гепатита В либо о болезни, вылеченной раньше. Продуцирование их также может быть следствием сделанной вакцины. Помимо прочего, определение маркеров может быть обусловлено:

  • нарушениями деятельности системы иммунитета (включая прогрессирование аутоиммунных болезней);
  • опухолями злокачественного характера;
  • прочими инфекционными патологиями.

Такие результаты носят название ложноположительных, поскольку присутствие антител развитием гепатита В не сопровождается.

К ложноотрицательному результату может приводить и уремия. Многие лекарственные средства ассоциированы с процессом развития в организме лекарственной волчанки, а также появлением в крови ANA.

У пациента с симптомами аутоиммунного процесса отрицательный результат не исключает присутствия аутоиммунной болезни.

ANA определяется у здоровых людей (от 3 до 5 %) и у пожилых после 65 лет (от 10 до 37 %).

Если у пациента положительный результат без признаков аутоиммунного процесса, его нужно интерпретировать, учитывая дополнительные лабораторные, клинические и анамнестические сведения (у таких людей вероятность СКВ повышена в 40 раз).

источник